DE69810373T2

DE69810373T2 - Pyrrolidin Derivate, Anti-ulcus und Antibakterielle Arzneimittel

Info

Publication number: DE69810373T2
Application number: DE69810373T
Authority: DE
Inventors: Chikao Nishino; Tomohiro Uetake
Original assignee: Shiseido Co Ltd
Current assignee: Shiseido Co Ltd
Priority date: 1997-04-04
Filing date: 1998-04-06
Publication date: 2003-10-30
Anticipated expiration: 2018-04-07
Also published as: AU728542B2; DE69810373D1; AU6063398A; US5925667A; ATE230391T1; CA2234134A1; JPH10279556A; EP0869118A1; JP4113602B2; EP0869118B1; KR19980081254A; US6043243A

Description

GEBIET DER ERFINDUNG

Die vorliegende Erfindung betrifft ein Pyrrolidinderivat und insbesondere ein Pyrrolidinderivat mit einer antibakteriellen Wirksamkeit gegen Heliobacter pylori oder einem Anti-Ulcus-Effekt.

HINTERGRUND DER ERINDUNG

Bezüglich einer Ursache für Geschwüre beim Menschen sind viele Theorien vorgeschlagen worden. Insbesondere wurde erläutert, dass Stress, Einnahme von nicht-steroiden Antiphlogistika zur Heilung von rheumatischen Erkrankungen und dergleichen eng mit der Ulcusbildung verbunden sind, hauptsächlich aufgrund relativ übermäßiger Magen- oder Zwölffingerdarm-Säuresekretion. Folglich ist es wichtig, die Säuresekretion zu unterdrücken, um die Ulcusbildung zu vermeiden und sie zu heilen.
Auf der anderen Seite wurde erwogen, dass Heliobacter pylori, ein stabförmiges Bakterium, das normalerweise im Magen vorkommt, aufgrund seiner starken Ureasewirksamkeit Ammoniak produziert, wodurch es Geschwüre hervorruft. Da es ständig im Schleim und der Schleimhaut lebt, wird es die Hauptursache für das wiederholte Auftreten von Geschwüren. Folglich wurde erwogen, dass das wiederholte Auftreten von Geschwüren vermieden werden kann, wenn dieses Bakterium sterilisiert wird.
Obwohl verschiedene Arten von Medikamenten zur Heilung von Geschwüren konventionell entwickelt wurden, war nur von wenigen Medikamenten bekannt, dass sie einen Effekt zur Verhinderung der Entstehung von Stressgeschwüren oder eine antibakterielle Wirksamkeit gegen Heliobacter pylori haben.
Im Stand der Technik können Beispiele von pyrrolidinalkylsubstituierten Benzamiden gefunden werden. Chem Abs (1994) 120(11) offenbart, dass solche Verbindungen erhöhte Lipophilitäten aufweisen, wenn die am Pyrrolidin-Stickstoffatom vorhandene Alkylgruppe gegen eine Fluoralkylgruppe ausgetauscht wird. Chem Abs (1995) 122(5) und Chem Abs (1970) 72(1) heben die Anti-Ulcusaktivität von Sulpirid hervor. JP-A-56095156 (Patent Abstracts of Japan) sieht Anti- Ulcusverbindungen Sulpirid und Derivate davon vor. JP-A-54073780 (Patent Abstracts of Japan) und Chem Abs (1976) 85(23) sehen weitere Pyrrolidinylalkylsubstituierte Benzamide vor. EP 736526 sieht ein Pyrazolidinderivat als Radikalfänger, Hirninfarkt- und Hirnödem unterdrückendes Mittel vor. EP 735031 sieht die Verbindung N-Acetylpiperazin vor, die ein antibakterielles und ein Antiulcus- Medikament darstellt.

OFFENBARUNG DER ERFINDUNG

Die vorliegende Erfindung wurde im Hinblick auf die im oben genannten Stand der Technik vorhandenen Probleme ausgeführt und ihr Ziel ist es, eine Verbindung zur Verfügung zu stellen, die ausgezeichnet in der Vermeidung des Entstehens von Geschwüren ist, und ein antibakterielles Medikament gegen Heliobacter pylori und ein Anti-Ulcusmedikament zur Verfügung zu stellen, das eine solche Verbindung als Hauptkomponente beinhaltet.
Als Ergebnis der von den Erfindern zu diesem Zweck durchgeführten gewissenhaften Studien wurde gefunden, dass ein spezielles Pyrrolidinderivat gegen verschiedene Arten von Geschwüren aufgrund seiner antibakteriellen Eigenschaften gegen Heliobacter pylori oder seiner Säuresekretionshemmung als Hauptwirkungsmechanismus wirksam ist. So ist die vorliegende Erfindung zustande gekommen.
Und zwar wird ein Pyrrolidinderivat oder ein Salz davon gemäß der vorliegenden Erfindung durch die folgende Formel 1 ausgedrückt: Formel I
worin
R&sub1; eine gerade oder verzweigte Alkenylgruppe ist, welche mindestens eine Doppelbindung und 2 bis 22 Kohlenstoffatome besitzt;
R&sub2; eine Niedrigalkoxygruppe, abgeleitet von einer wie unten definierten R&sub3;-Gruppe, oder ein Halogenatom ist;
R&sub3; eine gerade oder verzweigte Alkylgruppe mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen ist;
X -O- oder -S- ist;
m eine ganze Zahl von 1 bis 3 ist; und
n eine ganze Zahl von 0 bis 2 ist.
Ein Anti-Ulcusmedikament gemäß der vorliegenden Erfindung umfasst als wirksamen Bestandteil das Pyrrolidinderivat oder das pharmakologisch zulässige Salz davon, zusammen mit einem pharmazeutisch zulässigen Träger und/oder Hilfsmittel.
Ein antibakterielles Medikament gegen Heliobacter pylori gemäß der vorliegenden Erfindung umfasst als wirksamen Bestandteil das Pyrrolidinderivat oder das pharmakologisch zulässige Salz davon, zusammen mit einem pharmazeutisch zulässigen Träger und/oder Hilfsmittel.
Die vorliegende Erfindung umfasst die Verwendung eines Pyrrolidonderivats der Formel I oder des pharmakologisch zulässigen Salzes davon in der Herstellung eines Medikaments zur Verwendung bei der Behandlung von Magengeschwüren in Menschen oder Säugetieren.
Die vorliegende Erfindung umfasst die Verwendung eines Pyrrolidinderivats der Formel I oder des pharmakologisch zulässigen Salzes davon in der Herstellung eines Medikaments zur Verwendung bei der Hemmung der Säuresekretion im Magen von Menschen oder Säugetieren.
Die vorliegende Erfindung umfasst die Verwendung eines Pyrrolidinderivats der Formel I oder des pharmakologisch zulässigen Salzes davon in der Herstellung eines Medikaments zur Verwendung bei der Hemmung des Wachstums von Heliobacter pylori im Magen von Menschen oder Säugetieren.
Ein Verfahren zur Verhinderung von Magengeschwüren bei Menschen oder Säugetieren gemäß der vorliegenden Erfindung umfasst das Verabreichen einer wirkungsvollen Menge des Pyrrolidinderivats oder des pharmakologisch zulässigen Salzes davon an einen Wirt.

KURZE BESCHREIBUNG DER ZEICHNUNGEN

Fig. 1 zeigt ein Beispiel eines Schrittes zur Herstellung des Pyrrolidinderivats gemäß der vorliegenden Erfindung und
Fig. 2 und 3 zeigen Beispiele von Schritten zur Herstellung von Materialverbindungen für das Pyrrolidinderivat gemäß der vorliegenden Erfindung.

BEISPIELE

In der Verbindung der vorliegenden Erfindung repräsentiert die sich an R&sub1; befindende Alkylengruppe eine gerade oder verzweigte Alkenylgruppe, die zumindest eine Doppelbindung und 2 bis 20 Kohlenstoffatome aufweist. Da die Doppelbindung zwei Arten der Konfiguration aufweist, nämlich cis und trans, kann jede Doppelbindung in der Alkenylgruppe beide Konfigurationen aufweisen. Unter ihnen ist es bevorzugt eine verzweigte Alkenylgruppe und besonders bevorzugte Beispiele von Alkenylgruppen sind die Prenyl-, Geranyl-, Neryl- und Farnesylgruppe.
In der Verbindung gemäß der vorliegenden Erfindung repräsentiert R&sub2; eine Niedrigalkoxygruppe oder ein Halogenatom. Eine solche Niedrigalkoxygruppe repräsentiert die, die aus einer Niedrigalkylgruppe des unten genannten R&sub3; abgeleitet ist. Ein bevorzugtes Beispiel einer Niedrigalkoxygruppe ist die Methoxygruppe. Beispiele von Halogenatomen beinhalten Fluor, Chlor, Brom und Iod. Ein bevorzugtes Beispiel für ein Halogen ist Fluor.
Die sich bei R&sub3; befindliche Niedrigalkylgruppe ist eine gerade oder verzweigte Alkylgruppe mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen. Beispiele dafür umfassen die Methyl-, Ethyl-, n-Propyl-, n-Butyl-, Isopropyl-, Isobutyl-, 1-Methylpropyl-, tert-Butyl-, n-Pentyl-, 1-Ethylpropyl-, Isoamyl- und die n-Hexylgruppe. Ein bevorzugtes Beispiel für R&sub3; ist die Ethylgruppe.
In der Verbindung der vorliegenden Erfindung repräsentiert X eine durch -O- oder -S- ausgedrückte Gruppe. Ein bevorzugtes Beispiel von X ist -O-.
In der Formel 1 ist es bevorzugt, dass n 0 ist.
Alternativ ist es in der Formel 1 bevorzugt, dass n 1 oder 2 ist. Des weiteren ist es bevorzugt, dass m 1 ist, wenn n 1 oder 2 ist.
In der Formel I ist es bevorzugt, dass X -O- ist.
Eine bevorzugte Verbindung der vorliegenden Erfindung kann durch die folgende Formel 3 ausgedrückt werden: Formel 3
worin R&sub1; und R&sub3; dieselben wie die in der oben genannten Formel 1 sind.
In Formel 3 ist es bevorzugt, dass der Kohlenstoff der Amidgruppe an die 3-Position des Pyridinrings bindet.
In der Verbindung der vorliegenden Erfindung ist es bevorzugt, dass R&sub1; eine Prenyl-, Geranyl-, Neryl- oder Farnesylgruppe ist.
In der Verbindung der vorliegenden Erfindung ist es bevorzugt, dass R&sub3; eine Ethylgruppe ist. Im folgenden sollte, während das allgemeine Verfahren zur Herstellung der Verbindung der vorliegenden Erfindung erläutert wird, diese nicht darauf beschränkt werden.
Die Verbindung (I) der vorliegenden Erfindung, ausgedrückt durch die Formel 1, kann durch die in Fig. 1 gezeigte Reaktionsformel A hergestellt werden.
In der Reaktionsformel A kann das Pyrrolidinderivat (I) der vorliegenden Erfindung aus einer Carbonsäure (II) und einem Amin (III) durch Verwendung einer bekannten Amidbindungsbildenden Reaktion wie zum Beispiel das Misch-Anhydridverfahren, das Säurechloridverfahren, das DCC- Verfahren, das CDI-Verfahren, oder das Azidverfahren erhalten werden. Hier sind in der Reaktionsformel A R&sub1;, R&sub2;, R&sub3; X, Y, m und n wie die in der oben genannten Formel 1 definiert.
Im Misch-Anhydridverfahren wird die Carbonsäure (II) durch Verwendung eines Aktivierungsmittels wie zum Beispiel Diphenylphosphinchlorid, Ethylchlorformiat, Isobutylchlorformiat oder Pivaloylchlorid in ihr entsprechendes Anhydrid überführt und dann mit dem Amin (III) reagieren gelassen. Als Zusatzstoff kann zum Beispiel eine organische Base wie zum Beispiel Triethylamin, Pyridin oder N-Methylmorpholin verwendet werden. Als Lösungsmittel kann beispielsweise ein halogenierter Kohlenwasserstoff wie zum Beispiel Dichlormethan oder Chloroform; ein aromatischer Kohlenwasserstoff wie zum Beispiel Benzol, Toluol oder Xylol; ein Ether wie zum Beispiel Tetrahydrofuran oder Dioxan; oder ein Amid wie zum Beispiel Dimethylformamid oder Dimethylacetamid verwendet werden.
Während die Reaktionstemperatur und die Reaktionszeit entsprechend der verwendeten Materialkomponenten verändert werden können, wird die Reaktion normalerweise bei einer Temperatur innerhalb des Bereichs von -15ºC bis zur Rückflusskochtemperatur des Lösungsmittels durchgeführt.
Beim Säurechloridverfahren wird beispielsweise Phosphorpentachlorid, Phosphortrichlorid oder Thionylchlorid als Aktivierungsmittel verwendet, um die Carbonsäure (II) in das entsprechende Säurechlorid zu überführen, und dann wird letzteres mit dem Amin (III) reagieren gelassen. Als Zusatzstoff kann beispielsweise eine organische Base wie zum Beispiel Triethylamin, Pyridin oder N- Methylmorpholin verwendet werden. Als Lösungsmittel kann zum Beispiel ein halogenierter Kohlenwasserstoff wie zum Beispiel Dichlormethan oder Chloroform; ein aromatischer Kohlenwasserstoff wie zum Beispiel Benzol, Toluol oder Xylol; oder ein Amid wie zum Beispiel Dimethylformamid oder Dimethylacetamid verwendet werden. Während die Reaktionstemperatur und die Reaktionszeit entsprechend der verwendeten Materialkomponenten verändert werden können, wird die Reaktion normalerweise bei einer Temperatur innerhalb des Bereichs von 0ºC bis zur Rückflusskochtemperatur des Lösungsmittels durchgeführt.
Beim DCC-Verfahren kann als Kondensationsmittel beispielsweise Dicyclohexylcarbodiimid (DCC) oder 1-Ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)-carbodiimidhydrochlorid (WSCI) verwendet werden. Als Lösungsmittel kann zum Beispiel ein halogenierter Kohlenwasserstoff wie zum Beispiel Dichlormethan oder Chloroform; ein aromatischer Kohlenwasserstoff wie zum Beispiel Benzol, Toluol oder Xylol; ein Ether wie zum Beispiel Tetrahydrofuran oder Dioxan; oder ein Amid wie zum Beispiel Dimethylformamid oder Dimethylacetamid verwendet werden. Falls notwendig kann diese Reaktion durchgeführt werden, während 1-Hydroxybenzotriazol (HOBt) oder N-Hydroxysuccinimid (HOSu) zugegeben wird. Während die Reaktionstemperatur und die Reaktionszeit entsprechend der verwendeten Materialkomponenten verändert werden können, wird die Reaktion normalerweise bei einer Temperatur innerhalb des Bereichs von 0ºC bis zur Rückflusskochtemperatur des Lösungsmittels durchgeführt.
Beim CDI-Verfahren kann als Aktivierungsmittel beispielsweise N,N'-Carbonyldiimidazol verwendet werden, um die Carbonsäure (II) in das entsprechende N-Acylderivat zu überführen, und dann wird das letztere mit dem Amin (III) reagieren gelassen. Als Zusatzstoff kann beispielsweise eine organische Base wie zum Beispiel Triethylamin, Pyridin oder N-Methylmorpholin oder eine anorganische Base wie zum Beispiel Natriumhydroxid oder Kaliumhydroxid verwendet werden. Als Lösungsmittel kann zum Beispiel ein halogenierter Kohlenwasserstoff wie zum Beispiel Dichlormethan oder Chloroform; ein aromatischer Kohlenwasserstoff wie zum Beispiel Benzol, Toluol oder Xylol; ein Ether wie zum Beispiel Tetrahydrofuran oder Dioxan; oder ein Amid wie zum Beispiel Dimethylformamid oder Dimethylacetamid verwendet werden. Während die Reaktionstemperatur und die Reaktionszeit entsprechend der verwendeten Materialkomponenten verändert werden können, wird die Reaktion normalerweise bei einer Temperatur innerhalb des Bereichs von 0ºC bis zur Rückflusskochtemperatur des Lösungsmittels durchgeführt.
Beim Azidverfahren wird als Aktivierungsmittel beispielsweise Diphenylphosphorylazid verwendet, um die Carbonsäure (II) in das entsprechende Azid zu überführen, und das letztere wird dann mit dem Amin (III) reagieren gelassen. Als Zusatzstoff kann beispielsweise eine organische Base wie zum Beispiel Triethylamin, Pyridin oder N-Methylmorpholin verwendet werden. Als Lösungsmittel kann zum Beispiel ein halogenierter Kohlenwasserstoff wie zum Beispiel Dichlormethan oder Chloroform; ein aromatischer Kohlenwasserstoff wie zum Beispiel Benzol, Toluol oder Xylol; ein Ether wie zum Beispiel Tetrahydrofuran oder Dioxan; oder ein Amid wie zum Beispiel Dimethylformamid oder Dimethylacetamid verwendet werden. Während die Reaktionstemperatur und die Reaktionszeit entsprechend der verwendeten Materialkomponenten verändert werden können, wird die Reaktion normalerweise bei einer Temperatur innerhalb des Bereichs von 0ºC bis zur Rückflusskochtemperatur des Lösungsmittels durchgeführt.
Speziell kann beispielsweise Diphenylphosphinchlorid oder Pivaloylchlorid als Aktivierungsmittel für das Misch-Anhydridverfahren verwendet werden, während Triethylamin als Zusatzstoff verwendet wird, um eine Reaktion in einem Lösungsmittel wie zum Beispiel Chloroform oder Dimethylformamid bei einer Temperatur innerhalb des Bereichs von -15ºC bis Raumtemperatur zu bewirken, wodurch das gewünschte Ziel erreicht wird.
Die in der Reaktionsformel A verwendete Materialverbindung (II) kann zum Beispiel durch die in Fig. 2 gezeigte Reaktionsformel B synthetisiert werden. In der Reaktionsformel B sind R&sub1;, R&sub2;, X, m und n wie die in der oben genannten Formel 1 definiert. Ra repräsentiert eine Carbonyl-Schutzgruppe, die eine Niedrigalkylgruppe wie zum Beispiel eine Methylgruppe, Ethylgruppe, oder tert-Butylgruppe, eine Phenacylgruppe, oder eine Trichlorethylgruppe sein kann, solange keine Probleme in der darauf folgenden Reaktion auftauchen. Z repräsentiert ein Halogenatom.
In der Reaktionsformel B wird ein Alkenylhalogenid (V) mit einer Verbindung (IV) in Gegenwart einer Base reagieren gelassen und dann hydrolysiert, um die Carbonsäure (II) zu synthetisieren.
Der erste Schritt dieser Reaktion kann in Gegenwart einer Base durchgeführt werden. Natriumamid, Triethylamin, Natriumhydrid, Natriumhydroxid, Kaliumcarbonat, Bariumoxid, Silberoxid oder dergleichen können dazu verwendet werden. Ebenso kann eine katalytische Menge an Kaliumjodid zugegeben werden. Als Lösungsmittel kann ein Alkohol wie zum Beispiel Methanol, Ethanol oder Butanol; eine aromatische Verbindung wie zum Beispiel Benzol, Toluol, Xylol oder Pyridin; ein Ether wie zum Beispiel Diethylether, Tetrahydrofuran oder Dioxan; ein Amid wie zum Beispiel Dimethylformamid oder Dimethylacetamid; oder ein Keton wie zum Beispiel Dimethylsulfoxid oder Aceton verwendet werden. Während die Reaktionstemperatur und die Reaktionszeit entsprechend der verwendeten Materialkomponenten verändert werden können, wird die Reaktion normalerweise bei einer Temperatur innerhalb des Bereichs von 0ºC bis zur Rückflusskochtemperatur des Lösungsmittels durchgeführt.
Speziell wird beispielsweise die Verbindung (IV) in Tetrahydrofuran oder N,N'-Dimethylformamid gelöst und, nachdem Natriumhydrid als Base zugegeben und darin verrührt wurde, wird das Alkenylhalogenid (V) zugegeben, um eine Reaktion bei einer Temperatur innerhalb des Bereichs von Raumtemperatur bis zur Rückflusskochtemperatur des Lösungsmittels zu bewirken, wodurch das gewünschte Ziel erreicht wird.
In der Reaktion des zweiten Schritts wird die Esterverbindung (VI) in Gegenwart einer Säure oder einer Base hydrolysiert, um die Carbonsäure (II) zu synthetisieren. Chlorwasserstoffsäure, Schwefelsäure, p-Toluonsulfonsäure oder dergleichen kann als Säure verwendet werden, während Natriumhydroxid, Kaliumhydroxid, Kalium-t-Butoxid oder dergleichen als Base verwendet werden kann. Als Lösungsmittel kann eine Carbonsäure wie zum Beispiel Ameisensäure oder Essigsäure; ein Alkohol wie zum Beispiel Methanol oder Ethanol; Wasser; oder ein daraus gemischtes Lösungsmittel verwendet werden. Während die Reaktionstemperatur und die Reaktionszeit entsprechend der verwendeten Materialkomponenten verändert werden können, wird die Reaktion normalerweise bei einer Temperatur innerhalb des Bereichs von 0ºC bis zur Rückflusskochtemperatur des Lösungsmittels durchgeführt.
Speziell wird beispielsweise die Esterverbindung (VI) in einem Alkohol wie zum Beispiel Methanol oder Ethanol gelöst und dann wird eine wässrige Natrium- oder Kaliumhydroxidlösung zugegeben, um eine Reaktion bei einer Temperatur innerhalb des Bereichs von Raumtemperatur bis zur Rückflusskochtemperatur des Lösungsmittels zu bewirken, wodurch das gewünschte Ziel erreicht wird.
Die in der Reaktionsformel B verwendete Materialverbindung (V) kann durch die in Fig. 3 gezeigte Reaktionsformel C synthetisiert werden.
In der Reaktionsformel C sind R&sub1; und Z wie in der oben genannten Reaktionsformel B definiert. In dieser Reaktion kann ein Alkenylhalogenid (V) durch Halogenierung des Alkohols (VII) erhalten werden.
Für diese Reaktion kann ein allgemein als Halogenierung von Hydroxylgruppen bekanntes Verfahren verwendet werden. Als Reagenz für die Halogenierung wird beispielsweise eine starke Säure wie zum Beispiel Chlorwasserstoffsäure oder Bromwasserstoffsäure; eine Phosphorverbindung wie zum Beispiel Phosphortribromid, Phosphortrichlorid oder Phosphorpentachlorid; Thionylchlorid; N- Halogensuccinimid und Dimethylsulfid; Triphenylphosphin und ein halogenierter Kohlenwasserstoff; oder Methansulfonylchlorid und Lithiumhalogenid verwendet werden, um die Reaktion zu bewirken. Als Lösungsmittel kann beispielsweise ein halogenierter Kohlenwasserstoff wie zum Beispiel Dichlormethan oder Chloroform; eine aromatische Verbindung wie zum Beispiel Benzol, Toluol, Xylol oder Pyridin; ein Ether wie zum Beispiel Diethylether, Tetrahydrofuran oder Dioxan; oder ein Amid wie zum Beispiel Dimethylformamid oder Dimethylacetamid verwendet werden. Während die Reaktionstemperatur und die Reaktionszeit entsprechend der verwendeten Materialkomponenten verändert werden können, wird die Reaktion normalerweise bei einer Temperatur innerhalb des Bereichs von 0ºC bis zur Rückflusskochtemperatur des Lösungsmittels durchgeführt.
Speziell wird beispielsweise Methansulfonylchlorid in Gegenwart von Lithiumchlorid und Triethylamin verwendet, um eine Reaktion in einem Lösungsmittel wie zum Beispiel Aceton bei einer Temperatur innerhalb des Bereichs von 0ºC bis Raumtemperatur zu bewirken, wodurch das gewünschte Ziel erreicht wird.
Unter den in den oben genannten Reaktionsformeln verwendeten Materialverbindungen sind diejenigen, für die kein Herstellungsverfahren beschrieben ist, kommerziell erhältlich oder durch die Verwendung eines bekannten Verfahrens einfach zu synthetisieren.
Außerdem beinhalten Beispiele von Salzen der Pyrrolidinderivate (I) der vorliegenden Erfindung mit einer Säure Salze mit anorganischen Säuren wie zum Beispiel Chlorwasserstoffsäure, Bromwasserstoffsäure, Schwefelsäure oder Phosphorsäure und Salze mit organischen Säuren wie zum Beispiel Essigsäure, Propionsäure, Zitronensäure, Milchsäure, Oxalsäure, Maleinsäure, Fumarsäure, Bernsteinsäure, Weinsäure oder Methansulfonsäure. Diese Salze können durch ein normales Verfahren einfach hergestellt werden.
Das Pyrrolidinderivat gemäß der vorliegenden Erfindung weist einen starken Effekt gegen Stressgeschwüre und eine ausgezeichnete Wirksamkeit zum Unterdrücken von Magensäuresekretion auf. Des weiteren weist es eine antibakterielle Wirksamkeit gegen Heliobacter pylori auf, der als eine mögliche Ursache für das wiederholte Auftreten von Geschwüren vermutet wird. Weiterhin weist es eine hohe Sicherheit auf. Demzufolge ist es als Medikament zur Heilung und zur Vermeidung von Geschwüren des Verdauungstraktes beim Menschen oder bei Säugetieren und insbesondere bei Magengeschwüren beim Menschen verwendbar. Konventionell ist eine solche Verbindung fast nicht bekannt, die sowohl eine Wirksamkeit zum Unterdrücken von Magensäuresekretion als auch antibakterielle Wirksamkeit gegen Heliobacter pylori aufweist. Demzufolge ist es angezeigt, dass die Verbindung der vorliegenden Erfindung nicht nur wirkungsvoll zur Verhinderung und der Heilung von Geschwüren ist, sondern auch zur Verhinderung deren erneuten Auftretens.
Wenn die Verbindung der vorliegenden Erfindung als Medikament zur Heilung und Verhinderung von Geschwüren des Verdauungstraktes verabreicht wird, kann sie oral als Tablette, Pulver, Körnchen, Kapsel, Sirup oder dergleichen, als auch parenteral als Zäpfchen, Injektion, äußerliches Medikament, Einflößung oder dergleichen verabreicht werden. Während die Menge der Verabreichung entsprechend dem Ausmaß der Symptome, personeller Unterschiede, Alter, Art des Ulcus oder dergleichen, außerhalb des unten erwähnten Bereichs liegen kann, sollte sie natürlich so angepasst werden, dass sie den individuellen Umständen in speziellen Fällen gerecht wird. Üblicherweise 0,01 bis 200 mg/kg oder, vorzugsweise, 0,05 bis 50 mg/kg oder, mehr vorzugsweise, 0,1 bis 10 mg/kg wird pro Tag an einen Erwachsenen in einer Einzeldosis oder in mehreren Dosen verabreicht.
Für die Zubereitung des Medikaments wird ein übliches Herstellungsverfahren mit einem üblichen Formulierungsträger verwendet. Falls notwendig können pharmakologisch und pharmazeutisch zulässige Zusätze zugegeben werden.
Und zwar wird, wenn eine orale feste Formulierung zubereitet wird, nachdem ein Arzneistoffträger und, falls notwendig, ein Bindemittel, ein Zersetzungsmittel, ein Glanzmittel, ein Färbemittel, ein Korrektiv und dergleichen zu dem Hauptmedikament zugegeben wurde, ein übliches Verfahren zur Bildung einer Tablette, Pille, Körnchen, Pulvers, Kapsel oder dergleichen verwendet.
Beispiele des Arzneistoffträgers beinhalten Laktose, Speisestärke, Saccharose, Glukose, Sorbitol, kristalline Cellulose und Siliziumdioxid. Beispiele des Bindemittels beinhalten Polyvinylalkohol, Polyvinylether, Ethylcellulose, Methylcellulose, Gummi arabicum, Tragantgummi, Gelatine, Schellack, Hydroxpropylcellulose, Hydroxypropylstärke und Polyvinylpyrrolidon. Beispiele des Zersetzungsmittels beinhalten Stärke, Agar, Gelatinepulver, kristalline Cellulose, Calciumcarbonat, Natriumhydrogencarbonat, Calciumcitrat, Dextrin und Pektin. Beispiele des Glanzmittels beinhalten Magnesiumstearat, Talg, Polyethylenglykol, Quarz, und gehärtetes Pflanzenöl. Als Färbemittel werden solche verwendet, deren Zugabe zu Arzneimitteln erlaubt ist. Beispiele von Korrektiva beinhalten Kakaopulver, Menthol, aromatische Säure, Minzöl, Borneol und Zimtpulver. Falls notwendig können Tablette und Körnchen mit einem Zucker-, Gelatineüberzug oder dergleichen beschichtet werden.
Wenn eine Injektion vorbereitet wird, werden, falls notwendig, dem Hauptarzneimittel ein pH- Einstellmittel, ein Puffer, ein Stabilisator, ein Lösungsvermittler und dergleichen zugegeben, und dann wird ein übliches Verfahren verwendet, um subkutane, intramuskuläre und intravenöse Injektionen Medikamente zu bilden.
Im folgenden wird die vorliegende Erfindung in weiteren Einzelheiten durch spezielle Beispiele erläutert. Die vorliegende Erfindung sollte jedoch nicht auf diese Beispiele beschränkt werden.
Zunächst werden Testverfahren zur Auswertung dieser Beispiele erläutert.

WIS: Zwangs- und Wassertauchstress-Induzierter Ulcushemmungs-Test

i) Bedeutung

Das Ausmaß der Hemmung der Stressulcusbildung wird getestet.

ii) Verfahren

Männliche Crj:SD oder Slc:SD-Ratten (6-7 Wochen alt) mussten über Nacht fasten, hatten aber freien Zugang zu Wasser. Jede Gruppe bestand aus 5 bis 8 dieser Ratten. Die Musterverbindung wurde in einer wässrigen Lösung von 0,3% Natriumcarboxymethylcellulose oder 0,05% Tween 80 gelöst oder suspendiert und dann oral verabreicht (100 mg/10 ml/kg). Einer Kontrollgruppe wurde das Vehikel verabreicht. 10 Minuten später wurden die Ratten in einen Stresskäfig gesetzt und bis zum Level des Xipfoid-Verfahrens in einem Wasserbad (21ºC) für 7 Stunden eingetaucht. Am Ende des Stresses wurden die Ratten durch Inhalation von Ether oder Kohlendioxid getötet. Dann wurde der Magen jeder Ratte entfernt, durch Injizieren von 10 ml 5%iger Formalinneutralpufferlösung aufgebläht und 30 Minuten oder länger in 1%ige Formalinneutralpufferlösung eingetaucht, um fixiert zu werden. Der Magen wurde entlang der größeren Krümmung eingeschnitten und dann wurde die Länge jeder Erosion im Drüsenabschnitt unter dem Seziermikroskop bestimmt. Die Summe der Länge der Erosionen pro Magen wurde als Ulcusindex (Ulcer Index - UI) definiert.

iii) Beurteilungsstandard

Der Effekt, der erhalten wurde, wenn 100 mg/kg der Musterverbindung verabreicht wurden, wurde als Ulcusbildungs-Hemmungsrate (%) wie folgt ausgedrückt:
Ulcusbildungs-Hemmungsrate (%) = (1 - (UI in der Probegruppe/UI in der Kontrollgruppe)) · 100

CAP: Säuresekretions-Hemmungstest in vitro

i) Bedeutung

Die Säuresekretionshemmungsaktivität auf einer Zellebene wird studiert. Sie kann auch dazu verwendet werden, den Mechanismus dieses Effekts zu studieren.

ii) Verfahren

ii-a) Herstellung von isolierter Magenfundus-Drüsensuspension

Zunächst wurde eine isolierte Magenfundus-Drüsenprobe hergestellt. Und zwar wurde ein japanisches weißes Kaninchen (2,5 bis 3 kg) bis zum Tod mit NembutalTM narkotisiert und dann wurde der Unterleib aufgeschnitten. Unmittelbar danach wurde der Magen entfernt und, nachdem sein pylorisches und kardiales Antrum entfernt war, entlang seiner größeren Wölbung in zwei dünne Schichten geschnitten. Der an der mucosalen Oberfläche haftende Mageninhalt wurde mit eisgekühltem PBS(-) ausgewaschen und dann vorsichtig darin gewaschen. Die Magenwand wurde mit ihrer mucosalen Oberfläche nach oben auf einem Korkbrett ausgebreitet und das Futter und der Schleim darauf wurden komplett mit steriler Gaze entfernt. Die Schleimhaut wurde mit einem Spatel davon separiert und dann in eisgekühltem PBS(-) gesammelt. Nachdem sie zweimal mit PBS(-) gewaschen wurde, wurde die Schleimhaut mit einer Schere in 2-3 mm² große Stücke zerkleinert. Diese Stücke wurden weiter zweimal mit einer Nährstofflösung gewaschen. Die Nährstofflösung beinhaltet 132,4 mM NaCl, 5,4 mM KCl, 5 mM Na&sub2;HPO&sub4;·12 H&sub2;O, 1 mM NaH&sub2;PO&sub4;·2 H&sub2;O, 1,2 mM MgSO&sub4;, 1 mM CaCl&sub2;, 25 mM HEPES, 2 mg/ml Glucose und 1 mg/ml BSA.
In 70 ml der 1 mg/ml Collagenase enthaltenden Nährstofflösung wurden zerkleinerte Schleimhautstücke dispergiert und intensiv in einem konischen Kolben mit einem Rührer bei 37ºC 40 bis 60 Minuten lang gerührt. Während dieser Zeit wurden 100% O&sub2; auf die Oberfläche der Nährstofflösung gesprüht, und der pH wurde entsprechend so gemessen, dass er sofort mit einer Base auf pH 7,4 eingestellt wurde, wenn der Wert darunter lag. Die Nährstofflösung wurde zu der Reaktionslösung gegeben, um die Gesamtmenge von ungefähr 200 ml zu erhalten. Nachdem sie durch ein Netz gefiltert wurde, wurde die Suspension aufgeteilt in 50 ml Zentrifugengläser gegeben, und für 15 Minuten stehen gelassen, so dass sich die Magenfundusdrüse absetzte. Der Überstand wurde wiederholt durch eine Saugflasche entfernt, in der Nährstofflösung dispergiert, und dann stehen gelassen, so dass die Magenfundusdrüse dreimal gewaschen wurde. Zu diesem Zeitpunkt wurde die Suspension ohne die Verwendung einer Pipette abwechselnd in zwei Zentrifugengläser gegeben, um eine Dispergierung zu bewirken. Die Anzahl der Zellen wurde unter dem Mikroskop gezählt und auf 1,6 · 10&sup6; Zellen/ml einstellt.

ii-b) [¹&sup4;C]-Aminopyrin-Aufnahmetest

Dann wurde der [¹&sup4;C]-Aminopyrin-Aufnahmetest durchgeführt. Nachdem ein Eppendorf-Röhrchen gewogen wurde, wurden 10 ul (Endkonzentration: 10&supmin;&sup5; M) Histamin, gelöst in der oben genannten Nährstofflösung, 10 ul (Endkonzentration: 10&supmin;&sup5; M) der Testverbindung, gelöst in DMSO, und 10 ul (Endkonzentration: 0,05 uCi/ml) [¹&sup4;C]-Aminopyrin, verdünnt mit der Nährstofflösung hineingegeben, und dann wurden dazu 970 ul der isolierten, oben hergestellten Magenfundusdrüsensuspension gegeben. Anschließend wurde die Mischung bei 37ºC 40 Minuten lang bei 125 Zyklen/Minute geschüttelt. Nachdem sie 30 Sekunden lang zentrifugiert wurde, wurden 200 ul ihres Überstands in einer Miniphiole gesammelt, während der Rest durch eine Saugflasche entfernt wurde. Das Drüsenkügelchen wurde komplett getrocknet, indem das Röhrchen mit geöffnetem Deckel für eine Nacht in einem Trockenofen bei 80ºC gehalten wurde, dann wurde der Deckel geschlossen und das Gewicht wurde bei Raumtemperatur bestimmt. Dann wurden 100 ul 1 N KOH dazu gegeben, und das Röhrchen wurde mit geschlossenem Deckel bei 60ºC 1 bis 2 Stunden lang behandelt, um das Kügelchen zu lösen. Dann wurde dessen Inhalt in eine Miniphiole überführt. In die den Überstand oder das Drüsenkügelchen enthaltende Miniphiole wurden 4 ml Atomliter gegeben, dann wurde die Radioaktivität durch einen Flüssigszintillationszähler gemessen. Hier wurde, nachdem die Radioaktivität des Drüsenkügelchens durch die Verwendung einer Probe, in der 20 mM NaSCH zugegeben wurde, korrigiert wurde, um den Wasserstoffionenkonzentrationsgradienten auszugleichen, das Integrationsverhältnis von speziell durch das Drüsenkügelchen eingeschlossene Aminopyrin berechnet. Dieses Experiment wurde doppelt ausgeführt.

ii-c) Berechnung der Akkumulierungsrate von Aminopyrin

Hier wird das Prinzip kurz erläutert. In der isolierten Magenfundusdrüse wird Säure in einem Raum zwischen ihrem sekretorischen Tubulus und der intraglandularen Kavität akkumuliert. Aminopyrin ist eine schwache Base (pKa = 5,0) und nichtionisch in einer neutralen Lösung, um frei durch die Zellmembran passieren zu können, wohingegen es in einer sauren Lösung ionisiert ist, und so die Zellmembran aufgrund seiner elektrischen Ladung nicht passieren kann. Daher wird Aminopyrin in einem geschlossenen sauren Raum innerhalb der isolierten Magenfundusdrüse akkumuliert.
Angesichts dieser Eigenschaften wird die Akkumulierungsrate (R) von Aminopyrin durch die folgende Gleichung berechnet:
R = ((korrigierte Radioaktivität des Niedrigschlags)/(Radioaktivität des Überstands)) x (200/(mg Trockengewicht des Drüsenkügelchens))

iii) Beurteilungsstandard

Der Effekt der Musterverbindung bei der Endkonzentration von 105 M wurde wie folgt durch die Säuresekretionshemmungsrate (%) ausgedrückt:
Säuresekretionshemmungsrate (%) = (1 - (R in der Probegruppe/R in der Kontrollgruppe)) · 100

AHP: Antibakterieller Aktivitätstest gegen Heliobacter pylori

i) Bedeutung

Die minimale Hemmungskonzentration (minimum inhibitory concentration - MIC) gegen Heliobacter pylori (Mikroaerophiles gram-negatives Bakterium, von dem angenommen wird, dass es tief in Pathogenese, Rezidiv und Rekrudeszenz von Geschwüren verwickelt ist, im folgenden als "HP" bezeichnet) wird gemessen, um Verbindungen herauszufinden, die antibakterielle Wirkung gegen Heliobacter pylori besitzen.

ii) Verfahren

MICs wurden durch die Agarverdünnungsmethode bestimmt. Die Vorratskultur (-80ºC) von HP NCTC 11637 wurde aufgetaut und auf Tripticase Soy-Agar, ergänzt mit 5% Schafblut bei 37ºC in einer Atmosphäre von 5% O&sub2;, 10% CO&sub2;, und 85% N&sub2; kultiviert. Gewachsene Kolonien wurden auf die selbe Platte transferiert und 3 Tage lang unter den selben Bedingungen vorkultiviert.
Eine Lösung von 1000 ug/ml der Musterverbindung mit nicht mehr als 25% DMSO wurde mit sterilem gereinigtem Wasser verdünnt, um verschiedene Arten von Konzentrationen zu erhalten. Ein Volumen von 100 ul jeder Verdünnung wurde sorgfältig mit 900 ul Brucella-Agar, ergänzt mit 5% Pferdeblut gemischt und in einer 24-Loch-Mikroplatte verfestigt, wodurch eine MIC- Messplatte erhalten wurde.
Eine entsprechende Menge der durch Vorkultivierung auf der Platte gewachsenen Kolonie wurde in Mueller Hinton Bouillon suspendiert, bis die Trübung mit den unbewehrten Augen erkennbar war, wodurch sich ein bakterielles Suspensionskonzentrat mit ungefähr 107 cfu/ml ergab. Dieses bakterielle Suspensionskonzentrat wurde 100-fach in der selben Bouillon verdünnt; dies resultierte in einer bakteriellen Suspension zur Inokulation mit ungefähr 10&sup5; cfu/ml der Bakterien.
10 ul des bakteriellen Suspension zur Inokulation (ungefähr 10³ cfu) wurden durch einen Dispenser auf eine MIC-Platte zur Inokulation getropft und 7 Tage lang unter den selben Bedingungen wie die der Vorkultur kultiviert. Danach wurde beurteilt, ob ein Bakterienwachstum stattgefunden hatte oder nicht.

ii) Beurteilungsstandard

Die minimale Konzentration der Musterverbindung, wenn keine sichtbaren Kolonien oder, falls überhaupt, 5 oder weniger Kolonien von HP vorlagen, wurde als Miß (ug/ml) definiert.

AT: Einzeldosis-Toxizitätssvortest

i) Verfahren

Es wurden männliche Slc:ICR Mäuse (5 Wochen alt) verwendet. Jede Gruppe bestand aus 3 bis 5 Mäusen und jede Maus musste 4 bis 5 Stunden von 9 Uhr an am Testtag fasten, hatte aber freien Zugang zu Wasser. Dann wurden ihnen 2000 mg/10 ml/kg des Musterverbindung, gelöst oder suspendiert in einer wässrigen Lösung von 0,5% Natriumcarboxymethylcellulose oral verabreicht. Einer Kontrollgruppe wurde nur das Vehikel verabreicht. Das Verhalten und die Symptome wurden jeweils nach 15 Minuten, 30 Minuten, 1 Stunde, 2 Stunden und 3 Stunden nach der Verabreichung und dann täglich bis eine Woche später beobachtet. Das Körpergewicht wurde vorher und nach dem Fasten als auch jeden Tag zur selben Zeit gemessen. Die toten Tiere wurden sofort einer Autopsie unterzogen und ihre Organe wurden mit den unbewehrten Augen untersucht. Außerdem wurden die lebenden Tiere mit Ether oder Kohlendioxid eine Woche nach der Verabreichung getötet und ihre Organe dann mit den unbewehrten Augen untersucht.

ii) Beurteilungsstandard

Die Toxizität bei einer Einzeldosis von 2000 mg/kg der Musterverbindung wurde als in 5 Klassen eingeteilt ausgedrückt.
5: Sterblichkeitsrate ist 0%; es wurde sowohl im Verhalten als auch den Organen überhaupt keine Toxizität gefunden.
4: Sterblichkeitsrate ist 0%; während in den Organen keine Toxizität gefunden wurde, wurde eine leichte Toxizität im Verhalten oder durch Körpergewichtszunahme beobachtet.
3: Während es ein totes Tier gab (obwohl nicht alle Tiere tot sind), wird keine Toxizität in den Organen gefunden.
2: Ungeachtet dessen, ob es ein totes Tier gibt oder nicht, wird Toxizität in den Organen gefunden.
1: Alle Tiere sind tot.

MTT: Zellschädigung und Schutzeffekttest

i) Bedeutung

Es wird bestätigt, dass es keine Toxizität auf Zellebene gibt. Diejenigen, die eine Toxizität auf Zellebene aufweisen sind als Anti-Ulcusmedikament ungeeignet. Ebenfalls kann bestätigt werden, dass die Effekte der Musterverbindung in anderen Zellebenentests nicht aus ihrer Toxizität resultieren.

ii) Verfahren

Ein männliches japanisches weißes Kaninchen (2,5 bis 3 kg) wurde mit NembutalTM bis zum Tod narkotisiert und unmittelbar danach wurde sein Magen entfernt. Die größere Wölbung des Magens wurde eingeschnitten, um den Mageninhalt daraus zu entfernen. Nachdem die mucosale Oberfläche mit HBSS (Hank's Balanced Salt Solution) gewaschen worden war, wurde der Magen in eisgekühlter HBSS in ein Laboratorium überführt. Dann wurde, nachdem das pylorische Antrum entfernt worden war, die Magenkörperschleimhaut durch einen Spatel abgetrennt und dann in 2 bis 3 mm² große Stücke in BME (Basal Medium Eagle) zerkleinert. Danach wurden diese Stücke bei 120 bis 130 Zyklen/Minute 15 Minuten lang bei 37ºC in 60 ml BME mit 280 U/ml Dispase und 30 bis 50 U/ml Collagenase geschüttelt. Hierbei wurde die Konzentration an Collagenase für jede Gruppe im Hinblick auf den Zustand der Zellen entsprechend angesetzt. Die Stücke wurden zweimal mit EBSS (Earle's Balanced Salt Solution) mit 1 mM EDTA gewaschen und dann in MEM (Minimum Essential Medium) mit 1 mM EDTA bei 37ºC 5 Minuten lang geschüttelt. Anschließend wurden sie in der Dispase und Collagenase mit der gleichen Konzentration wie die oben genannte 15 Minuten lang geschüttelt, um den Überstand zu entfernen und dann weiter bei 37ºC 50 bis 60 Minuten bei 120 bis 130 Zyklen/Minute geschüttelt. Dann, nachdem sie zweimal mit HBSS gewaschen wurden, wurde Ham F12 mit 2% Ultrocer GTM verwendet, um eine Konzentration von 1 · 10&sup6; Zellen/ml zu erreichen. Die so gebildete Suspension wurde in jedes Loch einer 96er-Lochplatte mit 200 ul verteilt. Die Platte wurde in einer Atmosphäre, zusammengesetzt aus 5% CO&sub2; und 95% Luft bei 37ºC drei Tage lang inkubiert, um einen konfluenten Status zu erreichen und dann einer MTT-Untersuchung unterworfen.
Die Musterverbindung wurde in DMSO gelöst, um eine Konzentration von 10&supmin;² M zu erreichen, und dann mit HBSS mit 2% Ultrocer GTM verdünnt, um eine Endkonzentration von 10&supmin;&sup4; M zu erreichen. Jeder Gruppe, für die 8 Löcher verwendet wurden, wurden 10 ul MTT-Reagenz unmittelbar nachdem 100 ul des Mediums in jedem Loch mit dem gleichen Volumen der resultierenden Lösung der Musterverbindung ausgetauscht worden war, zugegeben. Nachdem sie in einer Atmosphäre, zusammengesetzt aus 5% CO&sub2; und 95% Luft bei 37ºC 4 Stunden lang inkubiert wurde, wurde die so gebildete Lösung zentrifugiert und dann ihr Überstand verworfen. Anschließend wurden zu dem Rückstand 100 ul 100%iges Ethanol gegeben, um MTT-Formazan zu lösen. Dann wurde die Extinktion (OD: 570 bis 630) durch einen Mikroplattenleser gemessen. Dieses Verfahren benutzt die Erscheinung, dass MTT nur durch Mitochondrien lebender Zellen zu MTT-Formazan umgewandelt wird, um die Farbe zu ändern.

iii) Bewertungsstandard

Die Zelischädigung oder der Zellschutzeffekt der Musterverbindung bei der Endkonzentration von 10&supmin;&sup4; M wurde als Zellschädigungsrate (%) wie folgt ausgedrückt:
Zellschädigungsrate (%) = (1 - (Extinktion in der Probegruppe/Extinktion in der Kontrollgruppe)) · 100
Dementsprechend ist ein kleiner Wert in der Zellschädigungsrate günstiger.
Basierend auf den vorgenannten Effekt- und Sicherheitstests wurden Beispielverbindungen der vorliegenden Erfindung getestet.

Verbindungsgruppe 3

Ein Pyrrolidinderivat dieser Verbindungsgruppe 3 entspricht der oben genannten Formel 3. Als Pyrrolidinderivate dieser Verbindungsgruppe 3 wurden die folgenden Verbindungen der Beispiele 1 bis 3 getestet. Beispiel 1: Beispiel 2: Beispiel 3: TABELLE 1
Wie aus Tabelle 1 klar wird, weist ein Pyrrolidinderivat dieser Verbindungsgruppe 3 einen hohen Anti-Ulcus- und Säuresekretionseffekt auf. Außerdem ist gezeigt worden, dass sie eine hohe Sicherheit aufweisen.
Im folgenden wird das Herstellungsverfahren der Beispiele der vorliegenden Erfindung erläutert.
Zuerst werden die Synthetisierungsverfahren für die Synthetisierung der für die Beispiele der vorliegenden Erfindung verwendeten Materialverbindungen als Referenzbeispiele 1 bis 5 gezeigt.

Referenzbeispiel 1

Synthese von 4-Geranyloxybenzoesäure

Zu einer Lösung von Methyl-4-hydroxybenzoat (7,61 g) in Aceton (80 ml) wurde Geranylbromid (10,9 g) und Kaliumcarbonat (13,8 g) gegeben, dann wurde die Mischung unter Erhitzen 6 Stunden am Rückfluss gekocht. Nach der Reaktion wurde der Reaktionsmischung Wasser (150 ml) zugegeben, und die Mischung wurde mit Chloroform extrahiert. Die organische Phase wurde über Natriumsulfatanhydrid getrocknet und dann unter Vakuum konzentriert. Der Rückstand wurde durch Silikagel-Säulenchromatographie (Hexan : Ethylacetat = 9 : 1) gereinigt, was 13,00 g Methyl-4- geranyloxybenzoat ergab.
Zu einer Lösung von Methyl-4-geranylbenzoat (13, 00 g) in Methanol (50 ml) wurde eine wässrige Lösung (10 ml) von Kaliumhydroxid (3,90 g) gegeben. Nachdem sie über Nacht bei Raumtemperatur gerührt wurde, wurde die Mischung unter Erhitzen 1 Stunde lang am Rückfluss gekocht. Nachdem sie mit konzentrierter Chlorwasserstoffsäure angesäuert wurde, wurde die Reaktionsmischung mit Chloroform extrahiert. Die organische Phase wurde über Natriumsulfatanhydrid getrocknet und dann das Lösungsmittel unter Vakuum abgezogen. Der resultierende Feststoff wurde aus einer aus Hexan/Ethylacetat gemischten Lösung umkristallisiert, was 9,77 g (71%) des gewünschten Produkts ergab.

Referenzbeispiel 2

Synthese von 3-Geranyloxy-4-methoxybenzoesäure

In einer mit dem Referenzbeispiel 1 identischen Art und Weise wurden aus Methyl-3-hydroxy-4- methoxybenzoat (8,4 0g) und Geranylbromid (10,36 g) 3,60 g (24%) 3-Geranyloxy-4- methoxybenzoesäure erhalten.

Referenzbeispiel 3

Synthese von 6-Phenyloxynikotinsäure

In einer mit dem Referenzbeispiel 1 identischen Art und Weise wurde aus 6-Hydroxynikotinsäure (6 g) und Prenylbromid (13,5 g) Prenyl-6-Prenyloxynikotinat erhalten.
In einer mit dem Referenzbeispiel 1 identischen Art und Weise wurde das resultierende Produkt hydrolysiert, woraus sich 3,59 g 6-Prenyloxynikotinsäure ergaben.

Referenzbeispiel 4

Synthese von 2-Prenyloxynikotinsäure

In einer mit dem Referenzbeispiel 1 identischen Art und Weise wurde aus 2-Hydroxynikotinsäure und Prenylbromid Prenyl-2-Prenylnikotinat erhalten.
In einer mit dem Referenzbeispiel 1 identischen Art und Weise wurde das resultierende Produkt hydrolysiert, woraus sich 2-Prenyloxynikotinsäure ergab.

Referenzbeispiel 5

Synthese von 6-Geranyloxynikotinsäure

In einer mit dem Referenzbeispiel 1 identischen Art und Weise wurde aus 6-Hydroxynikotinsäure und Geranylbromid Geranyl-6-geranylnikotinat erhalten.
In einer mit dem Referenzbeispiel 1 identischen Art und Weise wurde das resultierende Produkt hydrolysiert, woraus sich 3,59 g 6-Geranyloxynikotinsäure ergaben.

Allgemeines Synthetisierungsverfahren

1-Ethyl-2-(3-geranyloxy-4-methoxybenzoylaminomethyl)-pyrrolidin

3-Geranyloxy-4-methoxybenzoesäure (1,52 g) wurde in Chloroform (50 ml) und Triethylamin (1,4 ml) gelöst, dann wurde Diphenylphosphinchlorid (1,0 ml) unter Eiskühlung zugegeben. Nachdem sie 15 Minuten lang gerührt wurde, wurde die Mischung nach Zugabe von 2-Aminomethyl-1- ethylpyrrolidin (0,7 ml) 1,5 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt. Die Reaktionsmischung wurde mit einer gesättigten wässrigen Lösung von Natriumhydrogencarbonat und gesättigter Lauge nacheinander gewaschen, über Natriumsulfatanhydrid getrocknet und im Vakuum konzentriert. Der Rückstand wurde durch Silikagel-Säulenchromatographie (Chloroform : Methanol = 15 : 1) gereinigt, woraus sich 1,47 g (71%) des gewünschten Produkts ergaben.
¹H-NMR (CDCl3) δ: 7,45 (1H, d, J = 2,0 Hz), 6,88 (1H, d, J = 8,3 Hz), 6,66 (1H, bs), 5,53 (1H, t, J = 6,4 Hz), 5,09 (1H, t, J = 6,4 Hz), 4,67 (2H, d, J = 6,4 Hz), 3,091 (3H, s), 3,28-3,13 (1H, m), 2,95-2,81 (1H, m), 2,16-2,54 (1H, m), 2,33-2,22 (1H, m), 2,20-2,00 (4H, m), 1,98-1,86 (1H, m), 1,74 (3H, s), 1,71 (3H, s), 1,67 (3H, s), 1,12 (3H, t, J = 7,3 Hz).

Synthese 1

1-Ethyl-2-(2-prenyloxynikotinoylaminomethyl)-pyrrolidin

In einer mit dem allgemeinen Syntheseverfahren identischen Art und Weise wurde 2-Prenyloxynikotinsäure (1,00 g) einer Kondensationsreaktion mit 2-Aminomethyl-1-ethylpyrrolidin (0,63 g) unterworfen, woraus sich 1,41 g (92%) der gewünschten Verbindung ergaben.
¹H-NMR (CDCl3) δ: 9,92 (1H, s), 8,53-8,47 (1H, m), 7,55-7,48 (1H, m), 6,41-6,34 (1H, m) 5,35-5,29 (1H, m) 4,70-4,52 (2H, m), 3,78-3,71 (1H, m), 3,32-3,21 (2H, m), 2,99-2,91 (1H, m), 2,80-2,60 (1H, m), 2,33(2,41(1H, m), 2,27-2,21 (1H, m), 2,02-1,92 (1H, m), 1,89-1,63 (9H, m), 1,16 (3H, t, J = 7,3 Hz).

Synthese 2

1-Ethyl-2-(6-prenyloxynikotinoylaminomethyl)-pyrrolidin

In einer mit dem allgemeinen Syntheseverfahren identischen Art und Weise wurde 6-Prenyloxynikotinsäure (0,70 g) einer Kondensationsreaktion mit 2-Aminomethyl-1-ethylpyrrolidin (0,9 g) unterworfen, woraus sich 0,73 g (68%) des gewünschten Produktes ergaben.
¹H-NMR (CDCl3) δ: 8,09 (1H, d, J = 2,9 Hz), 7,58-7,50 (1H, m), 6,72 (1H, s), 6,54 (1H, d, J = 9,8 Hz), 5,35-5,28 (1H, m), 4,57 (2H, d, J = 7,3 Hz), 3,67-3,01 (1H, m), 3,29-3,19 (2H, m), 2,75-2,67 (1H, m), 2,33-2,20 (2H, m), 1,79 (6H, s), 1,76-1,67 (1H, m), 1,66-1,55 (1H, m), 1,13 (3H, t, J = 7,3 Hz).

Synthese 3

1-Ethyl-2-(6-geranyloxynikotinoylaminomethyl)-pyrrolidin

In einer mit dem allgemeinen Syntheseverfahren identischen Art und Weise wurde 6-Geranyloxynikotinsäure (0,75 g) einer Kondensationsreaktion mit 2-Aminomethyl-1-ethylpyrrolidin (0,36 g) unterworfen, woraus sich 0,95 g (90%) des gewünschten Produktes ergaben.
¹H-NMR (CDCl3) δ: 8,12 (1H, d, J = 2,4 Hz), 7,61-7,52 (1H, m), 6,87 (1H, s), 6,55 (1H, d, J = 9,3 Hz), 5,35-5,27 (1H, m), 5,10-5,01 (1H, m), 4,60 (2H, d, J = 6,8 Hz), 3,68-3,62 (1H, m), 3,32-3,26 (2H, m), 2,88-2,77 (2H, m), 2,35-2,20 (2H, m), 2,13-2,02 (4H, m), 1,98-1,81 (1H, m), 1,79-1,70 (6H, m), 1,66 (3H, s), 1,59 (3H, s), 1,15 (3H, t, J = 6,8 Hz).

Claims

1. Pyrrolidinderivat oder ein Salz hiervon, ausgedrückt durch folgende Formel 1:

Formel 1

worin

R&sub1; eine gerade oder verzweigte Alkenylgruppe ist, welche mindestens eine Doppelbindung und 2 bis 20 Kohlenstoffatome besitzt;

R&sub2; eine Niedrigalkoxygruppe, abgeleitet von einer wie unten definierten R&sub3;- Gruppe, oder ein Halogenatom ist;

R&sub3; eine gerade oder verzweigte Alkylgruppe mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen ist;

X -O- oder -S- ist;

m eine ganze Zahl von 1 bis 3 ist; und

n eine ganze Zahl von 0 bis 2.

2. Pyrrolidinderivat oder ein Salz hiervon nach Anspruch 1, ausgedrückt durch die folgende Formel 3:

Formel 3

worin R&sub1; und R&sub3; dieselben sind, wie in obig genannter Formel 1.

3. Pyrrolidinderivat oder ein Salz hiervon nach Anspruch 1, wobei n 0 ist.

4. Pyrrolidinderivat oder ein Salz hiervon nach Anspruch 1, wobei x -O- ist.

5. Pyrrolidinderivat oder ein Salz hiervon nach irgendeinem der Ansprüche 1-4, worin R&sub1; eine Prenyl-, Geranyl-, Neryl- oder Farnesylgruppe ist.

6. Pyrrolidinderivat oder ein Salz hiervon nach irgendeinem der Ansprüche 1-5, worin R&sub3; eine Ethylgruppe ist.

7. Verbindung nach irgendeinem der vorangehenden Ansprüche, zur therapeutischen Verwendung.

8. Pharmazeutische Zusammensetzung, umfassend eine Verbindung nach irgendeinem der Ansprüche 1-6, zusammen mit einem pharmazeutisch annehmbaren Träger und/oder Adjuvant.

9. Verwendung einer Verbindung nach irgendeinem der Ansprüche 1-6, für die Herstellung eines Arzneimittels zur Verwendung bei der Behandlung von Helicobacter pylori, Magengeschwüren oder anderen Geschwüren des Verdauungstraktes, oder Säuresekretion in den Magen.