Verfahren zur Herstellung kristallisierter Inselhormonpräparate In
der Patentschrift 947 333 ist ein Verfahren zur Herstellung von kristallisierten
Inselhormonpräparaten mit stark protrahierter Wirkung beschrieben, dass darin besteht,
daß man Inselhormonkris.talle bei etwa neutraler Reaktion mit Lösungen von solchen
Verbindungen der Acridün- und Chinolinre:ihe verrührt, deren. Basen mit einem zwischen
6,5 und 9 liegenden p11-Wert entweder unlöslich oder nur kolloid löslich sind.Process for making crystallized islet hormone preparations In
of patent 947 333 is a process for the preparation of crystallized
Islet hormone preparations with a strongly protracted effect described that they consist of
that island hormone crises occur in an approximately neutral reaction with solutions of such
Compounds of the Acridün- and Quinolinre: ihe stirred up, their. Bases with an between
6.5 and 9, the p11 values are either insoluble or only colloidally soluble.
Es wurde nun gefunden,, daß man zu ähnlich protrahiert wirkenden Produkten,
kommt, wenn man statt der dort beschriebenen Acridin- bzw. Chinolinderivate basische
Eiweißkörper oder deren Abbauprodukte verwendet, wie beispielsweise Globin, Histone,
Protamine und ihre Abbauprodukte.It has now been found that products with a similar protracted effect
comes when, instead of the acridine or quinoline derivatives described there, basic ones
Protein bodies or their breakdown products used, such as globin, histones,
Protamines and their breakdown products.
Die Umsetzung erfolgt unter denselben Bedingungen wie in dem obengenannten
Verfahrnen.. Die Eiweißkörper werden ebenso, vollständig wie die Acridin- und Chinodinbasen
von, den Inselhormonkri@stallen aufgenommen.The reaction is carried out under the same conditions as in the above
Verfahrnen .. The protein bodies are also complete, as are the acridine and quinodine bases
taken from the island hormone cri @ stalls.
Nach den Verfahren der schweizerischem. Patentschriften, 255 252,,
216 822, der USA.-Patentschrift 2 179 384 und der deutschen Patentschrift
712 791 werden die krietallis.ierten Umsetzungsprodukte von Insulin, mit hasischen
Eiweißkörpern in. der Weise hergestellt, daß man die, Kri,stallisation unter ganz
bestimmten Bedingungen, die peinlich genau
eingehalten, werden müssen,
durchführt. Es, ist dabei nicht ohne weiteres möglich; immer gleichmäßige Krista.Ile
zu erhalten, wie sie für Präparate mit einer ganz bestimmten. protrahierten Wirkung
notwendig sind.According to the procedures of the Swiss. Patent specifications, 255 252, 216 822, the USA.-Patent 2 179 384 and the German patent 712 791, the krietallis.ierten reaction products of insulin, with Hasischen protein bodies carries out certain conditions that must be meticulously met. It is not possible without further ado; Always obtain uniform crystals, as is the case for specimens with a very specific one. protracted effect are necessary.
Im Gegensatz dazu gelingt es nach. dem Verfahren., fertige Hormonkristalle,
die man beispielsweist im Gang der Insulinhers.üellung erhält, direkt für die Herstellung
der neuen. Produkte zu benutzen, wobei keine Veränderung der Kristallform und Kristallgröße
erfolgt. Dadurch ergibt sich eine ganz wesentliche Vereinfachung und eine größere
Sicherheit in der Herstellung der gewünschten Endprodukte.In contrast, it succeeds. the procedure., finished hormone crystals,
which are obtained, for example, in the course of insulin production, directly for production
the new. Use products with no change in crystal shape and size
he follows. This results in a very substantial simplification and a greater one
Reliability in the manufacture of the desired end products.
Vor allem ist zu beriicksichtigen, daß z. B: beim Verfahren. nach
der schweizerischen Patentschrift 255 252 die Umsetzung zwischen Insulin und Proteinveirbi.ndung
stets über die Insulinlösu.ng erfolgt. Selbst das. Beispiel 5 der genannten PatentschTIft
weist darauf hin, daß »das Präparat im Verlaufe von 15 bis 20 Minuten kristallin
wird«. In allen anderen. Beispielen ist nach deutlicher, daß zunächst Lösungen der
Ausgangskristalle hergestellt werden: und die Verfahrensprodukte schließlich wieder
kristallin anfallen. Die Insulnnkristafle, die als Ausgangsstoffe dies vorliegenden
Verfahrens dienen sind: großtechnisch zugänglich und können daher in gleichmäßiger,
jederzeit reproduzierbarer Größe eingesetzt werden. An dem Zn-Gehadt der eingesetzten
Insulinkristalle wird durch das vorliegende Verfahren nichts geändert. Das Überraschende
dies vorliegenden Verfahrens gegenüber bekannten Verfahren ist darin zu erblicken,
daß die fertigen Insulinkrista.l!le lediglich durch das Verrühren bei etwa neutraler
Reaktion mit Lösungen basischer Eiweißkörper oder ihrer Abhauprodukte ohne Formänderung,
d. h. also unter Beibehaltung der von Anfang an ausgesuchten Kristallgröße, in stark
protrahiert wirkende Insulinpräparäte übergeführt werden können. Bei dem gesamten.
Vorgang bleiben die Insudinkri.stalle in Gestalt und, Größe erhalten" sie nehmen
lediglich die basischen. Eiweißkörper chemisch auf. Dies war nicht zu erwarten..
Beispi:e1 8 mg Protaminsulfat werden. in Wasser gelöst, mit Natronlauge auf pH 2
gestellt und auf 40 ccm aufgefüllt. In diese Lösung werden. 8o mg kristallisiertes
Inselhormon eingetragen, und es wird; unter Nachstellen. des pH-Wertes mit nlio
Natronlauge 24 Stunden verrührt. Nach dieser Zeit ist, in. der Mutterlauge kein.
Protein mehr nachzuweisen. Die Kristalle werden ausgeschleudert, mit Wasser gew#aschen
und getrocknet. Man. erhält ein. Produkt, das in wUriger Suspension gespritzt eine
stark protrahierte Wirkung aufweist.Above all, it must be taken into account that e.g. B: in the process. after
the Swiss patent specification 255 252 the implementation between insulin and protein conversion
always takes place via the insulin solution. Even that. Example 5 of the patent cited
indicates that »the preparation crystalline in the course of 15 to 20 minutes
will". In everyone else. Examples is clearer that first solutions of the
Starting crystals are produced: and finally the process products again
occur in crystalline form. The insulin crystals that are present as starting materials
Process are: accessible on a large scale and can therefore be used in more uniform,
reproducible size can be used at any time. On the Zn housing of the used
Insulin crystals are not changed by the present process. The surprising
This present process compared to known processes can be seen in the fact that
that the finished insulin crystals can only be obtained by stirring at approximately neutral
Reaction with solutions of basic protein bodies or their waste products without changing their shape,
d. H. So while maintaining the crystal size selected from the beginning, in strong
protracted insulin preparations can be transferred. With the whole.
During the process, the Insudinkri.stalle remain in shape and "preserve size" they take
only the basic ones. Proteins chemically on. This was not to be expected.
For example: e1 8 mg protamine sulfate will be. dissolved in water, with sodium hydroxide solution to pH 2
placed and filled to 40 cc. Be in this solution. 8o mg crystallized
Island hormone entered and it becomes; under readjustment. the pH value with nlio
Sodium hydroxide solution stirred for 24 hours. After this time there is no in the mother liquor.
More protein to detect. The crystals are spun out and washed with water
and dried. Man. receives a. Product that is injected into an aqueous suspension
has a strongly protracted effect.