DE69330131T2

DE69330131T2 - 2-aminoalkyl-5-aminoalkylamino substituierte isochinoindazole-6 (2h)-on mit antitumorwirkung

Info

Publication number: DE69330131T2
Application number: DE69330131T
Authority: DE
Inventors: Paul Krapcho; Ernesto Menta; Ambrogio Oliva; Silvano Spinelli
Original assignee: Novuspharma SpA; University of Vermont
Current assignee: Novuspharma SpA; University of Vermont
Priority date: 1992-09-08
Filing date: 1993-09-08
Publication date: 2001-08-30
Anticipated expiration: 2013-09-09
Also published as: JP3497168B2; ATE200491T1; JPH08503933A; CN1051549C; ES2155452T3; CZ288366B6; EP0662076B1; FI951023A0; EP0662076A1; CZ59895A3; WO1994006795A1; CN1101046A; FI109538B; HUT70145A; SG52494A1; FI951023A; PT662076E; DE69330131D1; GR3036175T3; HU9500676D0

Description

Hintergrund der Erfindung

Gebiet der Erfindung

Diese Erfindung betrifft Azaanthrapyrazole, nämliche 2-Aminoalkyl-5-aminoalkylsubstituierte Isochino[8,7,6-cd]indazol-6-(2H)-one und 2-Aminoalkyl-5-aminoalkylaminosubstituierte Isochino[5,6,7-cd]indazol-6-(2H)-one. Es wurde gezeigt, daß diese Verbindungen Antitumor-Aktivität aufweisen.

Hintergrund

Es wurde über bestimmte 1,4-Bis[(aminoalkyl)amino]anthrazen-9,10-dione berichtet, die in klinischen Versuchen Antitumor-Aktivität zeigen. Von besonderem Interesse waren Ametantron, 1,4-Bis{[2-(2-hydroxyethylamino)ethyl]amino}anthracen-9,.10-dion, und Mitoxantron, 5,8-Dihydroxy-1,4-bis {[2-(2-hydroxyethylamino)ethyl]amino}anthracen-9, 10- dion. [Zee-Cheng et al., 3. Med. Chem. 21, 291-4 (1978); Cheng et al., < < Progress in Medicinal Chemistry> > , Ellis, G. P. und West, G. B., Herausgeber; Elsevier: Amsterdam, 1983, Band 20, Seite 83 und dort zitierte Referenzen]. Mitoxantron ist ein onkolytisches Breitsprektrum-Mittel, dessen Aktivität der des Anthracyclin-Antibiotikums Doxonibicin ähnlich ist. Klinische Versuche haben gezeigt, daß Mitoxantron eine besonders viel versprechende Aktivität bei der Behandlung von fortgeschrittenem Brustkrebs, akuter Leukämie und Lymphomen aufweist [Legha, Drugs of Today, 20, 629 (1984)]. Obwohl Tierstudien eine verminderte Kardiotoxizität im Vergleich zu Doxorubicin gezeigt haben, wurde einige klinische Kardiotoxizität auch mit Mitoxantron beobachtet, hauptsächlich bei zuvor mit Doxorubicin behandelten Patienten (R. Stuart Harris et al., Lancet, 219, (1984) und dort zitierte Referenzen). Es wurde berichtet, daß Ametantron bei Tieren etwa 10-fach weniger potent und weniger kardiotoxisch ist als Mitoxantron. Da eine verzögerte Toxizität nur bei Mitoxantron nach Gabe der zwei Wirkstoffe durch den i.p.-Weg bei Ratten ohne Tumore bei äqui-effektiven Tumor-Dosierungen beobachtet wird, wird vorgeschlagen, daß das Vorhandensein der 5,8-Dihydroxy-Substitution in Mitoxantron bei den verzögerten Todesfällen eine Rolle spielen könnte [Corbett et al., Cancer Chemother. Pharmacol., 6, 161, (1981)].
Zusätzlich zeigen sowohl Mitoxantron als auch Ametantron eine deutliche myelodepressive Toxizität, und beide Verbindungen zeigen eine Kreuzresistenz gegen Zell- Histotypen, die eine Resistenz gegen Doxorubicin entwickeln, welche durch Überexpression von Glycoprotein P vermittelt wird. Eine solche Resistenz, die Mehrfach-Wirkstoff-Resistenz genannt wird, betrifft eine Anzahl von Antitumor-Antibiotika, unter denen Amacrin und Podophyllotoxin-Derivate sind, und diese Resistenz ist eine der Hauptgründe für Therapieversagen bei der Behandlung von soliden Tumoren mit diesen Antibiotika.
Bei einem Versuch zur Überwindung der obigen Nachteile wurden einige Chromophormodifizierte Anthracendione hergestellt. Beispielsweise offenbart die EP-Patentanmeldung 103 381 2-Aminoalkyl-5-aminoalkylamino-substituierte Anthra[1,9-cd]pyrazol-6(2H)-one (Anthrapyrazole), von denen behauptet wird, daß sie Antitumor-Aktivität aufweisen. Über die Antitumor-Aktivität dieser Verbindungen in einer Anzahl von präklinischen Modellen wurde von H. D. Hollis Showalter et al., [J. Med. chem., 30, 121-131, (1987)] berichtet Anthrapyrazole sind jedoch nicht frei von toxischen Nebenwirkungen, wobei schwere Leukopenie (W. H. O.-Grad 3 und 4) und Neutropenie (W. H. O.-Grad 4) in den klinischen Versuchen der Phase I und Phase II mit Anthrapyrazol CI-941 dosislimitierend sind [LE. Smith et al., J. Clin. Oncol. 9, 2141-2147, (1991)]. Darüber hinaus ist eine ausgeprägte Nephrotoxizität mit der CI-941-Behandlung bei Ratten verbunden [D. Campling und M. E. C. Robbins, Nephrotoxicity, Peter H. Dekker Bach Herausgeber, Seiten 345 bis 352, (1991), New York; siehe Chemical Abstract 116 : 294n, (1992)], und diese Autoren weisen darauf hin, daß Nierenschäden bei der Anthrapyrazol-Therapie ein klinisches Problem darstellen können.
Daher ist die Suche nach neueren aktiven Analoga immer noch sehr wünschenswert.
Wir haben nun entdeckt, daß die Einführung eines Stickstoff-Atoms in die Position 9 oder die Position-8 der oben erwähnten Anthra[1,9-cd]pyrazol-6(2H)-one 2-Aminoalkyl-5- aminoalkylamino-substituierte Isochino[8,7,6-cd]indazol-6-(2H)-one und 2-Aminoalkyl-5- aminoalkylamino-substituierte Isochino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-one liefert, die ausgeprägte Antitumor-Aktivität zeigen.

Kurze Zusammenfassung der Erfindung

Die erfindungsgemäßen Verbindungen haben die Formel (I):
wobei R Wasserstoff oder Hydroxy ist;
eine von X und Y ein Kohlenstoffatom ist und der andere ein Stickstoffatom ist, unter der Voraussetzung, daß, falls Y Stickstoff ist, R Wasserstoff ist;
A und B gleich oder verschieden sind und ausgewählt werden aus der Gruppe aus C&sub1;-C&sub1;&sub0; Alkyl oder [Phenylalkyl]; C&sub2;-C&sub1;&sub0; Alkyl mit einem oder zwei Substituenten, ausgewählt aus der aus OR&sub1; und NR&sub2;R&sub3; bestehenden Gruppe; C&sub2;-C&sub1;&sub0; Alkyl, das durch ein oder zwei Sauerstoffatome oder durch eine NR&sub4;-Gruppe unterbrochen ist, und wobei dieses C&sub2;-C&sub1;&sub0; Alkyl gegebenenfalls durch eine oder zwei Hydroxy(OH)- oder NR&sub2;R&sub3;-Gruppen substituiert ist;
R&sub1; ausgewählt wird aus der aus Wasserstoff, C&sub1;-C&sub6; Alkyl, Phenyl, [Phenylalkyl], -S(O&sub2;)R&sub5;, C&sub2;-C&sub6; Alkyl, gegebenenfalls durch NR&sub2;R&sub3; substituiert, bestehenden Gruppe;
R&sub2; und R&sub3; gleich oder verschieden sein können und ausgewählt werden aus der aus Wasserstoff, C&sub1;-C&sub1;&sub0; Alkyl, [Phenylalkyl], Phenyl, C&sub2;-C&sub1;&sub0; Alkyl, substituiert mit einer oder zwei Hydroxy(OH)-Gruppen, bestehenden Gruppe, oder R&sub2; und R&sub3; gemeinsam mit dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, einen Ethyleniminring oder einen 5- oder 6-gliedrigen aromatischen oder nicht-aromatischen heterocyclischen Ring bilden, der gegebenenfalls ein anderes Heteroatom wie Schwefel, Sauerstoff oder Stickstoff enthält;
R&sub4; ausgewählt wird aus der aus Wasserstoff, C&sub1;-C&sub1;&sub0; Alkyl, C&sub2;-C&sub1;&sub0; Hydroxyalkyl, C&sub2;-C&sub1;&sub0; Alkyl, substituiert durch NR&sub2;R&sub3;, [Phenylalkyl], Phenyl bestehenden Gruppe;
R&sub5; ausgewählt wird aus der aus C&sub1;-C&sub1;&sub0; Alkyl, [Phenylalkyl] bestehenden Gruppe, als freie Basen unde deren Salze mit pharmazeutisch verträglichen Säuren.
Die vorliegende Erfindung betrifft auch die tautomeren Formen, die einzelnen Enantiomere und Diastereoisomere der Verbindungen der Formel (I) genauso wie deren Gemische.
Die vorliegende Erfindung betrifft auch die nicht-toxischen Salze der Verbindungen der Formel (I) mit für die pharmazeutische und veterinärmedizinische Verwendung verträglichen Säuren wie diejenigen, die durch Zugabe von anorganischen Säuren wie Salzsäure, Bromwasserstoffsäure, Schwefelsäure, Phosphorsäure, Pyrophosphorsäure und/oder organischen Säuren wie Essigsäure, Propionsäure, Zitronensäure, Benzoesäure, Milchsäure, Maleinsäure, Fumarsäure, Bernsteinsäure, Weinsäure, Glutaminsäure, Aspataginsäure, Glukonsäure, Ascorbinsäure und ähnliches erhalten werden.

Detaillierte Beschreibung der Erfindung

In Verbindungen (I) bedeutet der Begriff "Phenyl" Phenylringe, die gegebenenfalls einen oder zwei Substituenten enthalten können wie (C&sub1;-C&sub4;)Alkylgruppen, CF&sub3;, Halogenatome, Nitro, Amino, Acetylamino, Formylamino, Dimethylamino, Diethylamino, Hydroxy, Methoxy und Ethoxygruppen.
Bevorzugte Beispiele für (C&sub1;-C&sub1;&sub0;)Alkylgruppen sind Methyl, Ethyl, n-Propyl, sec-Propyl, n-Butyl, sec-Butyl, tert.-Butyl, n-Pentyl, n-Hexyl.
Bevorzugte Beispiele für [Phenylalkyl] sind Benzyl und 4-Methoxybenzyl. Wenn in Verbindungen der Formel (I) A oder B ein (C&sub2;-C&sub1;&sub0;)Alkyl ist, das durch ein oder zwei Sauerstoffatome oder eine NR&sub4;-Gruppe unterbrochen ist und gegebenenfalls durch ein oder zwei Hydroxy oder NR&sub2;R&sub3;-Gruppen substituiert ist, sind bevorzugt mindestens zwei Kohlenstoffatome zwischen diesen Sauerstoffatomen und/oder den NR&sub4;- und NR&sub2;R&sub3;-Gruppen angeordnet.
Wenn bei den Verbindungen der Formel (I) der NR&sub2;R&sub3;-Substituenten ein 5- oder 6- gliedriger aromatischer oder nicht-aromatischer heterocyclischer Ring ist, der ein anderes Heteroatom enthalten kann wie Schwefel, Sauerstoff und Stickstoff, sind bevorzugte Beispiele für diese heterocyclischen Ringe 1-Imidazolyl, 1-Pyrrolyl, 1-Tetrahydropyrrolyl, 1-Pyrazolyl, 4- Morpholinyl, 1-Piperidinyl, 1-Piperazinyl, 1-(4-Methyl)-piperazinyl und 1-(4-Benzyl)- piperazinyl.
Bevorzugte erfindungsgemäße Verbindungen sind diejenigen der Formel (I), bei denen R H ist und X und Y wie oben definiert sind.
Die bevorzugtesten Verbindungen sind diejenigen der Formel (I), bei denen R H ist, X und Y wie oben definiert sind und A und B unabhängig ausgewählt werden aus der Gruppe, die besteht aus:
- Rest der Formel -(CH&sub2;)p-NH&sub2;, wobei p die ganze Zahl 2 oder 3 ist;
- Rest der Formel -(CH&sub2;)p NR&sub2;R&sub3;, wobei p wie oben definiert ist und R&sub2; und R&sub3; Methyl sind;
- Rest der Formel -(CH&sub2;)p-NR&sub2;R&sub3;, wobei p wie oben definiert ist und R&sub2; Wasserstoff ist und R&sub3; Methyl ist;
- Rest der Formel -(CH&sub2;)p-OH, wobei p wie oben definiert ist;
- Rest der Formel -(CH&sub2;)p NH-(CH&sub2;)q-OH, wobei p und q unabhängig eine ganze Zahl sind, die ausgewählt wird aus der aus 2 und 3 bestehenden Gruppe.
Spezifische Beispiele für die bevorzugten Verbindungen dieser Erfindung sind in Tabelle 1 angegeben und haben die folgenden chemischen Namen:
(1) 2-[2[(2-Hydroxyethyl)amino]ethyl]-5-[[2-[(2-hydroxyethyl)amino]ethyl]amino]isochino- [8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on;
(2) 2-[2-[(2-Hydroxyethyl)amino]ethyl]-5-[(3-aminopropyl)amino]isochino[8,7,6-cd]indazol- 6(2H)-on;
(3) 2-[2-[(2-Hydroxyethyl)amino]ethyl]-5-[(2-aminoethyl)amino]isochino[8,7,6-cd]indazol- 6(2H)-on;
(4) 2-[2-[(2-Hydroxyethyl)amino]ethyl]-5-[[2-(methylamino)ethyl]amino]isochino[8,7,6- cd]indazol-6(2H)-on;
(5) 2-[2-[(2-Hydroxyethyl)amino]ethyl]-5-[[2-(dimethylamino)ethyl]amino]isochino[8,7,6- cd]indazol-6(2H)-on;
(6) 2-[2-[(2-Hydroxyethyl)amino]ethyl]-5-[[2-[(2-hydroxyethyl)amino]ethyl]amino]- isochino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-on;
(7) 2-[2-[(2-Hydroxyethyl)amino]ethyl]-5-[(3-aminopropyl)amino]isochino[5,6,7-cd]indazol- 6(2H)-on;
(8) 2-[2-[(2-Hydroxyethyl)amino]ethyl]-5-[(2-aminoethyl)amino]isochino[5,6,7-cd]indazol- 6(2H)-on;
(9) 2-[2-[(2-Hydroxyethyl)amino]ethyl]-5-[[2-(methylamino)ethyl]amino]isochino[5,6- cd]indazol-6(2H)-on;
(10) 2-[2-[(2-Hydroxyethyl)amino]ethyl]-5-[[2-(dimethylamino)ethyl]amino]isochino[5,6,7- cd]indazol-6(2H)-on;
(11) 5-[[2-[(2-Hydroxyethyl)amino]ethyl]amino]-2-[2-(dimethylamino)ethyl]isochino[8,7,6- cd]indazol-6(2H)-on;
(12) 5-[(3-Aminopropyl)amino]-2-[2-(dimethylamino)ethyl]isochino[8,7,6-cd] indazol-6(2H)-on;
(13) 5-[(2-Aminoethyl)amino]-[2-[2-(dimethylamino)ethyl]isochino[8,7,6-cd]- indazol-6(2H)-on;
(14) 5-[[2-(Methylamino)ethyl]amino]-2-[2-(dimethylamino)ethyl]isochino[8,7,6-cd]indazol- 6(2H)-on;
(15) 5-[[2-(Dimethylamino)ethyl]amino]-2-[2-(dimethylamino)ethyl]isochino[8,7,6-cd]indazol- 6(2H)-on;
(16) 5-[[2-[(2-Hydroxyethyl)amino]ethyl]amino]-2-[2-(dimethylamino)ethyl]isochino[5,6,7- cd]indazol-6(2H)-on;
(17) 5-[(3-Aminopropyl)amino]-2-[2-(dimethylamino)ethyl]isochino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-on;
(18) 5-[(2-Aminoethyl)amino]-[2-(dimethylamino)ethyl]isochino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-on;
(19) 5-[[2-(Methylamino)ethyl]amino]-2-[2-(dimethylamino)ethyl]isochino[5,6,7-cd]indazol- 6(2H)-on;
(20) 5-[[2-(Dimethylamino)ethyl]amino]-2-[2-(dimethylamino)ethyl]isochino[5,6,7-cd]indazol- 6(2H)-on;
(21) 2-[2-Aminoethyl]-5-[[2-[(2-hydroxyethyl)amino]ethyl]amino]isochino[8,7,6-cd]indazol- 6(2H)-on;
(22) 2-[2-Aminoethyl]-5-[(3-aminopropyl)amino]isochino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on;
(23) 2-[2-Aminoethyl]-5-[(2-aminoethyl)amino]isochino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on;
(24) 2-[2-Aminoethyl]-5-[[2-(methylamino)ethyl]amino]isochino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on;
(25) 2-[2-Aminoethyl]-5-[[2-(dimethylamino)ethyl]amino]isochino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on;
(26) 2-[3-Aminopropyl]-5-[[2-[(2-hydroxyethyl)amino]ethyl]amino]isochino[8,7,6-cd]indazol- 6(2H)-on;
(27) 2-[3-Aminopropyl]-5-[(3-aminopropyl)amino]isochino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on;
(28) 2-[3-Aminopropyl]-5-[(2-aminoethyl)amino]isochino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on;
(29) 2-[3-Aminopropyl]-5-[[2-(methylamino)ethyl]amino]isochino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on;
(30) 2-[3-Aminopropyl]-5-[[2-(dimethylamino)ethyl]amino]isochino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on;
(31) 5-[[2-[(2-Hydroxyethyl)amino]ethyl]amino]-2-[3-aminopropyl]isochino[5,6,7-cd]indazol- 6(2H)-on;
(32) 5-[[2-[(2-Hydroxyethyl)amino]ethyl]amino]-2-[2-aminoethyl]isochino[5,6,7-cd]indazol- 6(2H)-on;
(33) 2-[(2-Methylamino)ethyl]-5-[[2-[(2-hydroxyethyl)amino]ethyl]amino]isochino[8,7,6- cd] indazol-6(2H)-on;
(34) 2-[(2-Methylamino)ethyl]-5-[(3-aminopropyl)amino]isochino[8,7,6-cd]-indazol-6(2H)-on;
(35) 2-[(2-Methylamino)ethyl]-5-[(2-aminoethyl)amino]isochino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on;
(36) 2-[(2-Methylamino)ethyl]-5-[[2-(methylamino)ethyl]amino]isochino[8,7,6-cd]indazol- 6(2H)-on;
(37) 2-[(2-Methylamino)]ethyl]-5-[[2-(dimethylamino)ethyl]amino]isochino[8,7,6-cd]indazol- 6(2H)-on;
(38) 2-[(2-Methylamino)ethyl]-5-[[2-[(2-hydroxyethyl)amino]ethyl]amino]isochino[5,6,7- cd]indazol-6(2H)-on;
(39) 2-[(2-Methylamino)ethyl]-5-[(3-aminopropyl)amino]isochino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-on;
(40) 2-[(2-Methylamino)ethyl]-5-[(2-aminoethyl)amino]isochino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-on;
(41) 2-[(2-Methylamino)ethyl]-5-[[2-(methylamino)ethyl]amino]isochino[5,6,7-cd]indazol- 6(2H)-on;
(42) 2-[(2-Methylamino)ethyl]-5-[[2(dimethylamino)ethyl]amino]isochino[5,6,7-cd]indazol- 6(2H)-on;
(43) 2-Methyl-5-[[2-(dimethylamino)ethyl]amino]isochino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on;
(44) 2-Methyl-5-[[2-(dimethylamino)ethyl]amino]isochino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-on. Tabelle 1 Tabelle (Fortsetzung)
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können durch den in Schema 1 dargestellten Prozeß hergestellt werden, der die Reaktion (Reaktion a) einer Verbindung der Formel (III)
(IIIa) X = N, Y = C
(IIIb) X = C, Y = N
wobei Z OTs (wobei OTs die p-Toluolsulfonyloxy-Gruppe ist) oder Cl ist, und W F oder Cl ist, unter der Voraussetzung, daß Z und W nicht gleichzeitig Cl sein können, mit einem Alkylhydrazin der Formel (IV) beinhaltet:
H&sub2; N-NH-B' (IV)
wobei B' die Bedeutungen von B wie in Formel (I) definiert aufweist, oder B' eine Gruppe ist, die durch Entfernung von Schutzgruppen für die in B' gegebenenfalls vorhandenen primären oder sekundären Amine in B umgewandelt werden kann, zur Herstellung einer Verbindung der Formel (II)
(IIa) X = N, Y = C
(IIb) X = C, Y = N
die dann (Reaktion b) mit einer Verbindung der Formel (V) behandelt wird,
H&sub2;N-A' (V)
wobei A' dieselben Bedeutungen hat wie das in Formel (I) definierte A, oder A' eine Gruppe ist, die durch Entfernung von Schutzgruppen für die gegebenenfalls in A' vorhandenen primären oder sekundären Amine in A umgewandelt werden kann, zur Herstellung der Verbindungen der Formel (I')
Wenn A' und/oder B' von A und/oder B verschieden sind, werden Verbindungen der Formel (I') durch Entfernung der Schutzgruppen für die gegebenenfalls in A' vorhandenen primären und/oder sekundären Amine in Verbindungen der Formel (I) umgewandelt.
Wenn je nach Wunsch das in Schema 1 abgebildete Verfahren durch Umsetzung von Verbindungen der Formel (IIIa) durchgeführt wird, dann können die Verbindungen gemäß der Erfindung der Formel (Ia) erhalten werden, wobei X ein Stickstoffatom darstellt und Y ein Kohlenstoffatom darstellt. Alternativ können je nach Wunsch durch Umsetzung von Verbindungen der Formel (IIIb) die Verbindungen der Formel (Ib) erhalten werden.
Schutzgruppen für die primären und/oder sekundären Amine, die gegebenenfalls in A' und/oder B' vorhanden sind, welche zur Herstellung von Verbindungen der Formel (I) vorteilhafterweise verwendet werden können, werden dargestellt durch (C&sub1;-C&sub3;)Acylderivate (bevorzugt Acetylderivate), (C&sub1;-C&sub4;)Alkoxycarbonyl-Derivate (bevorzugte tert-Butoxycarbonyl- Derivate) und durch (C&sub7;-C&sub1;&sub0;)Aralkyloxycarbonyl-Derivate (bevorzugt Benzyloxycarbonyl- Derivate).
In einer bevorzugten Ausführungsform dieser Erfindung werden Verbindungen der Formel (I) hergestellt durch Reaktion einer Verbindung der Formel (III'):
mit einem Hydrazin der Formel (IV) zur Herstellung einer Verbindung der Formel (II'):
Verbindungen der Formel (II') werden dann mit einer Verbindung der Formel (V) zur Herstellung einer Verbindung der Formel (I') umgesetzt, wobei dieser Schritt gefolgt wird von Entfernung der Schutzgruppen für die gegebenenfalls in A' und/oder B' vorhandenen primären und sekundären Amine, zur Herstellung einer Verbindung der Formel (I).
In einer anderen bevorzugten Ausführungsform dieser Erfindung werden Verbindungen der Formel (I), wobei X C ist und Y N ist, bevorzugt durch Reaktion einer Verbindung der Formel (III") hergestellt:
mit einem Hydrazin der Formel (IV) zur Herstellung einer Verbindung der Formel (II"):
Verbindungen der Formel (II") werden dann mit einer Verbindung der Formel (V) zur Herstellung einer Verbindung der Formel (I') umgesetzt, wobei dieser Schritt gefolgt wird von Entfernung der Schutzgruppen für die primären und sekundären Amine, die gegebenenfalls in A' und/oder B' vorhanden sind, zur Herstellung einer Verbindung der Formel (I), wobei X C ist und Y N ist.
Die Reaktion der Verbindung (III) mit den Hydrazinen (IV) kann durchgeführt werden durch Erhitzen der Verbindungen (III) mit einer stöchiometrischen Menge der Hydrazine (IV) oder einem Überschuß der Hydrazine (IV). Die Reaktion wird üblicherweise in einem inerten Lösungsmittel wie Methylenchlorid, Chloroform, 1,1,1-Trichlorethan, Dimethoxyethan, Tetrahydrofuran, Dimethylsulfoxid, Dimethylformamid, Pyridin, Picolin und Mischungen davon durchgeführt, oder je nach Wunsch unter Verwendung der Verbindung (IV) selbst als Lösungsmittel, gegebenenfalls in Gegenwart einer anorganischen Base wie einem Alkali- oder Erdalkali-Carbonat oder Hydrogen-Carbonat oder einer organischen Base wie Trialkylamin bei einer Temperatur von 0ºC bis zur Rückfluß-Temperatur des Lösungsmittels.
Bevorzugt wird die Reaktion in einem Lösungsmittel wie Pyridin, Tetrahydrofuran, Dimethylsulfoxid oder N,N,N',N'-Tetramethylethylendiamin unter Verwendung von 2 bis 10 Äquivalenten der Verbindung (IV) für 1 Äquivalent der Verbindung (III) und bei einer Temperatur im Bereich von 5ºC bis 50ºC durchgeführt.
Wenn in einer besonderen Ausführungsform dieser Erfindung eine Verbindung der Formel (III') mit einem Hydrazin der Formel (IV) umgesetzt wird, wird die Reaktion bevorzugt mit einem molaren Verhältnis zwischen den Verbindung (III) und (IV) von 1 : 1,05 bis 1 : 1,25 und unter Verwendung von Tetrahydrofuran als Lösungsmittel bei einer Temperatur im Bereich von Raumtemperatur bis 50ºC durchgeführt.
Die Reaktion der Verbindungen der Formel (II) mit den Verbindungen der Formel (V) kann durch Erhitzen von Verbindung (II) mit einer stöchiometrischen Menge Amin (V) oder einem Überschuß des Amins (V) durchgeführt werden. Die Reaktion wird üblicherweise in einem inerten Lösungsmittel wie Methylenchlorid, Chloroform, 1,1,1-Trichlorethan, Dimethoxyethan, Tetrahydrofuran, Dimethylsulfoxid, Dimethylformamid, Pyridin, Picolin und Gemischen davon durchgeführt, oder, falls gewünscht, unter Verwendung von Verbindung (V) selbst als Lösungsmittel, gegebenenfalls in Gegenwart einer anorganischen Base wie einem Alkali- oder Erdalkali-Carbonat oder -Hydrogencarbonat oder einer organischen Base wie einem Trialkylamin bei einer Temperatur von 0ºC bis zur Rückfluß-Temperatur des Lösungsmittels.
Bevorzugt wird die Reaktion in einem Lösungsmittel wie Pyridin, Chloroform oder Dimethylsulfoxid unter Verwendung von 2 bis 10 Äquivalenten der Verbindung (V) für 1 Äquivalent der Formel (II), und bei einer Temperatur im Bereich von Raumtemperatur bis 100ºC durchgeführt.
Wenn in den Verbindungen der Formel (I') A' und/oder B' von A und/oder B verschieden sind, wird die Entfernung der Schutzgruppen für die primären und/oder sekundären Aminofunktionen unter Beachtung der den Fachleuten gut bekannten Verfahren durchgeführt. Nützliche Anleitungen können in Green, T. W., Wuis, P. G. M., "Protective Groups in Organic Synthesis", zweite Auflage, John Wiley & Sons, 1991 gefunden werden.
Beispielsweise kann die Entfernung der N-(tert.-Butoxycarbonyl)-Schutzgruppe durch Behandlung einer Verbindung der Formel (I') mit einem Überschuß wasserfreier Salzsäure in einem Lösungsmittel wie einem (C&sub1;-C&sub4;)Alkanol, Dichlormethan, Chloroform oder Gemischen davon bei einer Temperatur von 0ºC bis zur Rückfluß-Temperatur des Lösungsmittels und während einer Zeit im Bereich von einigen Minuten bis wenigen Stunden durchgeführt werden. Bevorzugt wird die Reaktion in Ethanol oder Chloroform unter Verwendung von 10 bis 20 molaren Äquivalenten wasserfreier Salzsäure bei einer Temperatur von 20ºC bis 50ºC durchgeführt und ist im allgemeinen nach 4 Stunden beendet.
Die Verbindungen der Formel (IV) sind bekannt, oder sie können entsprechend bekannten Verfahren hergestellt werden, siehe beispielsweise J. Med. Chem., 7, 493, (1964) und J. Het. Chem., 26, 85, (1989).
Die Verbindungen der Formel (V) sind bekannt und kommerziell erhältlich, oder sie können entsprechend bekannten Verfahren hergestellt werden. Beispielsweise ist die Herstellung einiger N-(tert.-Butoxycarbonyl)alkandiamine, die für die Herstellung einiger erfindungsgemäßer Verbindungen nützlich sind, in Synth. Comm., 20, 2559, (1990) oder in J. Med. Chem., 33, 97, (1990) beschrieben.
Die Verbindungen der Formel (III), wobei Z = OTs [Verbindungen (III')] können durch ein Mehrstufen-Verfahren hergestellt werden, das in Schema 2 dargestellt ist und die folgenden Reaktionen beinhaltet.
(c) Die Friedel-und-Crafts-Acylierung von 1,4-Difluorbenzol mit Pyridin-3,4- dicarbonsäureanhydriden (VI), wobei R&sub6; Wasserstoff oder eine geeignete Schutzgruppe der Hydroxyfunktion ist, wie Methoxy oder Benzyloxy, in Gegenwart von AlCl&sub3; (110ºC, 22 Stunden), was zu den regioisomeren Ketosäuren (VIIa) und (VIIb) führt;
(d) Reaktion der Ketosäuren (VIIa) und (VIIb) mit Natriummethoxid in Methanol (8,5 Stunden, Rückfluß), was zu den regioisomeren Methoxy-substituierten Ketosäuren (VIIIa) und (VIIIb) führt; Verbindungen (VIIIa) und (VIIIb), wobei R&sub6; Wasserstoff ist, können als solche im folgenden Schritt eingesetzt werden; wenn R&sub6; von Wasserstoff verschieden ist, wird die Verbindung (VIIIa) durch Kristallisation gereinigt, und als reines Regioisomer umgesetzt;
(e) Reduktion von Verbindungen (VIIIa) (R&sub6; von Wasserstoff verschieden) mit Zn/Cu- Paar in 75%iger wäßriger Ameisensäure (15', Raumtemperatur, dann 80ºC, 2 Stunden), was zu (IX) führt; wenn R&sub6; Wasserstoff ist, können die Säuren (TXa) und (IXb) durch Chromatographie getrennt werden, was zu den reinen isolierten Regioisomeren (IXa) und (IXb) führt;
(f) Cyclisierung der geeigneten Säure (IX) durch Erhitzen einer Suspension der Verbindung in Polyphosphorsäure bei 110 bis 120ºC während 2 Stunden, was zu Benzo[g]isochiriolin (X) führt;
(g) Oxidation der Verbindung (X) zum entsprechenden Dion (XI) mit Cerammoniumnitriat in einem Gemisch von Acetonitril und Wasser (60ºC, 2 Stunden);
(h) Entfernung der Methoxygruppe des Dions (XI) durch Aluminiumchlorid in Methylenchlorid (Raumtemperatur für 3 Stunden, dann Rückfluß-Temperatur 1,5 Stunden), was zu Verbindungen (XII) führt, welche einem Gemisch von 9-Fluoro-6-hydroxy- und 9-Chloro-6- hydroxy-5,10-dionen (XII) entsprechen, aufgrund von teilweiser Substitution des austretenden Fluorids durch AlCl&sub3;; und
(i) End-Funktionalisierung der freien Hydroxygruppe von (XII) mit Hilfe von Toluolsulfonylchlorid in Pyridin bei Raumtemperatur, was zu gewünschten Verbindungen (III) führt, wobei Z gleich OTs [Verbindungen (III)]; wenn R&sub6; eine Schutzgruppe der Hydroxyfunktion ist, kann sie entsprechend den den Fachleuten gut bekannten Methoden entfernt werden, was zur Verbindung (III) führt, wobei R OH ist.
In einer bevorzugten Ausführungsform dieser Erfindung wird die Herstellung der Zwischenprodukte (XI) durch ein Mehrstufen-Verfahren durchgeführt, das in Schema 3 abgebildet ist und die folgenden Reaktionen beinhaltet:
- Cyclisierung der Mischung der regioisomeren Ketosäuren (VIIa) und (VIIb) mit 20% Oleum bei 130 bis 140ºC zur Herstellung der 6,9-Difluorobenzo[g]isochinoline (XIII);
- Reaktion von (XIII) mit einem Äquivalent Natriummethylat in einem Lösungsmittel wie Methanol zur Herstellung einer Mischung der Zwischenprodukte (XI), die in die einzelnen reinen Verbindungen (XIa) und (XIb) durch Umkristallisieren aus einem Lösungsmittel und/oder Säulenchromatographie aufgetrennt werden. Die reinen Zwischenprodukte (XIa) und (XIb) werden dann entsprechend Gleichung (h) und (i) von Schema 2 und dann entsprechend Schema 1 verarbeitet und ergeben jeweils Verbindung (Ia) und (Ib).
Im bevorzugten erfindungsgemäßen Verfahren, das die Verbindungen der Formel (I) liefert, wobei X = C und Y = N, werden die 9-Chloro-6-fluorobenzo[g]isochinolin-5,10-dione der Formel (III") hergestellt durch das in Schema 4 abgebildete Mehrstufen-Verfahren, das die folgenden Reaktionen beinhaltet:
- Lithiierung von 1-Chloro-4-fluorobenzol mit einem Alkyllithium-Reagens wie sec- Butyllithium in THF bei - 75ºC, zur Herstellung von 1-Lithio-5-chloro-2-fluorobenzol (XIV);
- Acylierung des entsprechend dem obigen Schritt in situ hergestellten 1-Lithio-5-chloro- 2-fluorobenzols (XIV) mit Pyridin-3,4-dicarbonsäureanhydriden (VI) zur Herstellung des Gemisches von Ketosäuren (XVa) und (XVb), die in den einzelnen Reihen in Verbindungen durch Umkristallisation aus einem Lösungsmittel oder durch Sublimation aufgetrennt werden können;
- Reduktion der reinen Ketosäure (XVa) mit Zn/Cu-Paar oder Zn-Pulver in 75%iger wäßriger Ameisensäure (15 Minuten bei Raumtemperatur, dann 80ºC, 2 Stunden), was zu (XVI) führt; und
- oxidative Cyclisierung von (XVI) mit rauchender Schwefelsäure (20 bis 30% 503, 10 Minuten, 130ºC) zur Herstellung der 9-Chloro-6-fluorobenzo[g]isochinolin-5,10-dione der Formel (III").
Die Zwischenprodukte (III") werden dann entsprechend Schema 1 zur Herstellung der Verbindungen der Formel (I) bearbeitet, wobei X = C und Y = N.

Biologische Aktivität der erfindungsgemäßen Verbindungen

Die Beurteilung der biologischen Aktivität für die erfindungsgemäßen Verbindungen wurde in vitro und in vivo entsprechend den vom US-National Cancer Institute entwickelten Methoden durchgeführt.
Die Beurteilung der cytotoxischen in vitro-Aktivität der erfindungsgemäßen Verbindungen wurde unter Verwendung einer Human-Colon-Adenokarcinom-Zell-Linie (Lovo) durchgeführt, die aus einem metastatischem Knötchen isoliert worden war, und mit einer Sublinie, die Mehrfach-Wirkstoff-Resistenz zeigte. Die Sublinie ist gegen eine Anzahl von Antitumor-Mitteln resistent, unter denen Doxorubicin, VP-16 und Vincristin sind. Diese Sublinie (Lovo/DX genannt) zeigt reduzierte Akkumulation von Doxorubicin und Überexpression eines Proteins (Grandi, M., Geroni, C., Guiliani, F. C., British J. Cancer, (1986), 54, 515). Die Verbindungen wurden entsprechend dem MTT-Assay im Vergleich mit Mitoxantron und Doxorubicin getestet (Mosman, T. "Rapid Colorimetric assay for cellular growth and survival: application to proliferation and cytotoxicity assay", J. Immunol Methods, (1983), 65, 55 bis 63; Green, L. M., "Rapid colorimetric assay for cell viability; application to the quantitation of cytotoxic and growth inhibitory lymphokines", J. Immunol. Methods, (1984), 70, 257 bis 268). Tabelle 2
Im allgemeinen waren repräsentative erfindungsgemäße Verbindungen in der Lovo-Zell-Linie cytotoxischer als Doxorubicin und genauso cytotoxisch wie Mitoxantron. Als Mitoxantron in der Lovo/DX-Zell-Linie getestet wurde, wurde ein sehr hoher Resistenz-Index RI (definiert als Verhältnis der IC&sub5;&sub0; für die resistente Zell-Linie zur IC&sub5;&sub0; für die empfindliche Zell-Linie) wie 22,5, was zeigt, daß diese Sublinie eine erworbene Resistenz gegen Mitoxantron und Ametantron aufweist. Andererseits zeigen einige erfindungsgemäße Verbindungen beim Test in derselben resistenten Sublinie keine Kreuzresistenz mit Mitoxantron und Amentantron, wie in Tabelle 2 angegeben. Die in vitro-Beurteilung von repräsentativen Verbindungen der Erfindung legt nahe, daß repräsentative Verbindungen der Erfindung nützlich sein können, um den Mehrfach- Wirkstoff-Resistenz-vermittelten Mechanismus der Tumorresistenz zu überwinden.
Studien der biologischen Aktivität in vivo von repräsentativen Verbindungen der Erfindung wurden unter Verwendung von P388 und L1210 Nager-Leukämie-Modellen durchgeführt. P388 Nager-Leukämie-Zellen wurden CD2F1-Mäusen intraperitoneal (ip) oder intravenös (iv) injiziert. Die Behandlung wurde etwa 24 Stunden nach der Tumortransplantation begonnen, und Dosierungen des Wirkstoffs wurden ip (P388 ip/ip) oder iv (P388 iv/iv) entsprechend zuvor etablierten Protokollen gegeben, üblicherweise in 3-tägigen (P388 iv/iv) oder 4-tägigen (P388 ip/ip) Intervallen. Die Studien wurden während eines 60-tägigen Zeitraums durchgeführt und das Todesdatum für jedes Tier wurde aufgezeichnet. % T/C wurde unter Verwendung der mittleren Überlebenszeit (MST) für jede Gruppe entsprechend der Formel
% T/C = [(MST behandelt) / (MST Kontrolle)] · 100
bestimmt.
Repräsentative erfindungsgemäße Verbindungen waren dazu in der Lage, die Überlebenszeit der behandelten Tiere signifikant stärker als Mitoxantron zu erhöhen, was zu höheren T/C-%-Werten bei gut tolerierten Dosierungen führte. Darüber hinaus zeigten die obigen repräsentativen Verbindungen der Erfindung Antileukämie-Aktivität über einen breiten Bereich von gut tolerierten Dosierungen und waren insbesondere aktiv bei Dosierungen, die niedriger waren als die maximale tolerierte Dosis, was einen Hinweis auf einen günstigeren therapeutischen Index im Vergleich zu Mitoxantron gibt.
Die Antitumor-Aktivität der erfindungsgemäßen repräsentativen Verbindungen wurde auch im L1210 Nager-Leukämie-Modell beurteilt.
L1210 Leukämie-Zellen wurden CDF1-Mäusen intraperitoneal (ip) oder intravenös (iv) gegeben, und die Behandlung wurde ungefähr 24 Stunden nach der Tumortransplantation begonnen. Dosierungen der Wirkstoffe wurden ip (L1210 ip/ip) oder iv (L1210 iv/iv) entsprechend zuvor etablierten Protokollen gegeben, üblicherweise in 3-tägigen (L1210 iv/iv) oder 4-tägigen (L1210 (ip/ip) Intervallen. Die Studien wurden während eines Zeitraums von 60 Tagen durchgeführt und das Todesdatum für jedes Tier aufgezeichnet. % T/C wurde unter Verwendung der mittleren Überlebenszeit (MST) für jede Gruppe entsprechend der Formel:
% T/C = [(MST behandelt) / (MST Kontrolle)] · 100
bestimmt.
Auch in diesem weiteren Leukämie-Modell zeigten reprätentative erfindungsgemäße Verbindungen eine Aktivität, die der des klinisch verwendeten Antitumor-Wirkstoffs Mitoxantron überlegen war. Da repräsentative Verbindungen der Erfindung gute Ergebnisse bei in vivo-Modellen von Nager P388 und L1210-Leukämien zeigen, die zur Vorhersage der Antitumor-Aktivität in Menschen verwendet werden, wird erwartet, daß die hier offenbarten Verbindungen wirksam sind gegen Human-Leukämien und solide Tumore, die gegen Behandlung mit Antitumor-Antibiotika empfindlich sind.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können daher als aktive Bestandteile von therapeutischen Zusammensetzungen zur Induktion von Regression und/oder Linderung von Krebs bei Säugern verwendet werden, wenn sie in Mengen im Bereich von etwa 1 mg bis etwa 0,4 g pro Kilogramm Körpergewicht verwendet werden. Eine bevorzugte Dosierung wäre von etwa 1 mg bis etwa 50 mg pro Kilogramm Körpergewicht pro Tag. Eine Einheitsdosierung kann so verwendet werden, daß einer Person von etwa 70 kg Körpergewicht etwa 70 mg bis etwa 3,5 g der aktiven Verbindung in einer 24 stündigen Periode gegeben werden. Die Dosierung kann so eingestellt werden, daß sie mit anderen Behandlungsschemata kompatibel ist, so wie Bestrahlungstherapie.
Die pharmazeutische Zusammensetzung kann in Form von Tabletten, Kapseln, Gelkapseln, Suppositorien, lyophilisierten Pulvern und Lösungen zur intravenösen Gabe vorliegen. Die Erfindung wird durch die folgenden Beispiele illustriert.

Synthese von erfindungsgemäßen Verbindungen

Herstellungsbeispiel 1

Pyridin-3,4-dicarbonsäureanhydrid

Eine Mischung von Pyridin-3,4-dicarbonsäure (15,0 g) und Acetanhydrid (30 ml) wird während 2 Stunden unter Rückfluß erhitzt. Das überschüssige Acetanhydrid wird durch Destillation entfernt, und das Anhydrid wird isoliert und durch Sublimation (123ºC bei 400 Pa (3 mm Hg)) gereinigt und ergibt Pyridin-3,4-dicarbonsäureanhydrid als weißen Feststoff (10,1 g).
Smp: 74-76ºC
¹H-NMR (CDCl&sub3;): 7,94 (d, 1H); 9,24 (d, 1H); 9,39 (s, 1H).

Herstellungsbeispiel 2

4-(2,5-Difluorobenzoyl)nicotinsäure und 3-(2,5-Difluorobenzoyl)isonicotinsäure

Ein Gemisch von Pyridin-3,4-dicarbonsäureanhydrid (5,0 g) und Aluminiumchlorid (17,5 g) in 1,4-Difluorbenzol (65 ml) wird in einem Ölbad bei 110ºC während 22 Stunden erhitzt. Das überschüssige 1,4-Difluorbenzol wird durch Destillation entfernt. Der Rückstand wird in einem Eisbad gekühlt und mit Eiswasser (75 ml) und konzentrierter Salzsäure (6,3 ml) gequencht. Der ausgefallene Feststoff wird abfiltriert und getrocknet und ergibt ein etwa 4/1 Gemisch von 4 (2,5-Difluorobenzoyl)nicotinsäure und 3-(2,5-Difluorobenzoyl)isonicotinsäure jeweils als weißes Puvler (7,7 g), das aus Acetonitril und Wasser umkristallisiert werden kann.
Smp.: 214-217ºC
¹H-NMR (DMSO-d&sub6;): 7,4 (m); 7,5 (m); 7,90 (m); 8,80 (d); 8,90 (d); 9,15 (s).
Umkristallisation dieses Materials (15,97 g) aus absolutem Ethanol (360 ml) ergibt praktisch reine 3-(2,5-Difluorobenzoyl)isonicotinsäure (1,146 g).

Herstellungsbeispiel 3

4-(2-Methoxy-5-fluorobenzoyl)nicotinsäure und 3-(2-Methoxy-5 - fluorobenzoyl)isonicotinsäure

Das Gemisch aus 4-(2,5-Difluorobenzoyl)nicotinsäure und 3-(2,5- Difluorobenzoyl)isonicotinsäure aus Herstellungsbeispiel 2 (14,1 g) wird zu einer Lösung von Natriummethylat gegeben, hergestellt durch portionsweise Zugabe von Natrium (6,8 g) zu trockenem Methanol (140 ml). Die Reaktionsmischung wird bei der Rückfluß-Temperatur während 8,5 Stunden und bei Raumtemperatur über Nacht umgesetzt. Die Reaktionsmischung wird auf etwa ein Drittel ihres Volumens konzentriert, Wasser (100 ml) wird zugegeben, und das verbleibende Methanol wird durch Destillation entfernt. Konzentrierte HCl (25 ml) wird unter Kühlen auf 10ºC langsam zum Rückstand gegeben, und der erhaltene Niederschlag wird durch Absaugen isoliert und mit 0,1 N HCl gewaschen, und ergibt ein etwa 4 : 1-Gemisch von 4-(2- Methoxy-5-fluorobenzoyl)nicotinsäure und 3-(2-Methoxy-5-fluorobenzoyl)isonicotinsäure (11,31 g).
Smp.: > 230ºC
¹H-NMR (DMSO-d&sub6;): 3,40 (s); 3,45 (s); 7,15 (m); 7,37 (d); 7,42-7,63 (m); 7,26 (d); 8,60 (s); 8,83 (d); 9,07 (s); 13,55 (br.s).

Herstellungsbeispiel 4

4-(2-Methoxy-5-fluorobenzyl)nicotinsäure (und 3-(2-Methoxy-5 - fluorobenzyl)isonicotinsäure)

Zink-Kupfer-Paar (L. F. Fieser und M. Fieser, Reagents for Organic Synthesis, Band 1, Seite 1292) (1,5 g) wird zu einer gerührten Suspension des Gemisches aus 4-(2-Methoxy-5- fluorobenzoyl)nicotinsäure und 3-(2-Methoxy-5-fluorobenzoyl)isonicotinsäure aus Herstellungsbeispiel 3 (1,222 g) in Ameisensäure (15 ml) und Wasser (5 ml) gegeben. Nach 15 Minuten bei Raumtemperatur wird die Reaktionsmischung während 2 Stunden in einem Ölbad auf 80ºC erhitzt. Nach Kühlen auf Raumtemperatur wird die Reaktionsmischung durch einen Sinterglasfilter filtriert, und die Feststoffe werden gründlich mit 75%-iger wäßriger Ameisensäure (10 ml) und dann mit Ethylacetat (10 ml) gewaschen. Die kombinierten Filtrate werden dann auf etwa 5 ml konzentriert, mit 0,5 N HCl (15 ml) behandelt und mit Ethylacetat (3 · 20 ml) extrahiert; schließlich werden sie mit Natriumchlorid gesättigt und weiter mit. Ethylacetat/1,2-Dimethoxyethan 3/1 (2 · 20 ml) extrahiert. Die kombinierten organischen Phasen werden über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und das Lösungsmittel unter reduziertem Druck entfernt, wobei ein gelber Rückstand erhalten wird. Durch Durchführung einer Kieselgel-Säulenchromatographie (Eluens: Ethylacetat/Methanol/Essigsäure von 96/4/0 bis 90/10/1 v/v/v) wird 4-(2-Methoxy-5-fluorobenzyl)nicotinsäure (0,805 g) als gelblich-weißer Feststoff erhalten.
Smp.: > 220ºC
¹H-NMR (DMSO-d&sub6;): 3,70 (s, 3H); 4,33 (s, 2H); 6,91-7,12 (m, 3H); 7,21 (d, 1H); 8,61 (d, 1H); 8,97 (s, 1H). Aus der obigen Säulenchromatographie kann ebenfalls einige 3-(2- Methoxy-5-fluorobenzyl)isonicotinsäure isoliert werden.

Herstellungsbeispiel 5

9-Fluoro-10-hydroxy-6-methoxybenzo[g]isochinolin

Ein Gemisch von 4-(2-Methoxy-5-fluorobenzyl)nicotinsäure (0,63 g) und Polyphosphorsäure (15 g) wird während 2 Stunden unter Rühren auf 110 bis 120ºC erhitzt. Die Heizung wird entfernt und Wasser (50 ml) wird zur Reaktionsmischung gegeben, während sie noch warm ist (60ºC). Die Mischung wird auf 0ºC gekühlt, mit 20% Natriumhydroxid neutralisiert und während 1,5 Stunden bei Raumtemperatur gerührt; schließlich wird sie mit 4% Methanol in Chloroform (4 · 75 ml) extrahiert. Die kombinierten organischen Phasen werden mit Kochsalzlösung gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und die Lösungsmittel unter reduziertem Druck entfernt, wobei 9-Fluoro-10-hydroxy-6- methoxybenzo[g]isochinolin (0,40 g) als purpurroter Feststoff erhalten wird.
Smp.: > 210ºC (aus Ethanol).
¹H-NMR (DMSO-d&sub6;): 3,87 (s, 3H); 6,70-6,83 (m, 2H); 6,92-7,00 (m, 1H); 7,30 (d, 1H); 7,50 (d, 1H); 8,75 (s, 1H); 12,30 (br.s, 1H).
UV (Ethanol): Lambda max. (nm) (E1%) (cm): 539 (204); 398 (513); 378 (452); 266 (1232).
IR (KBr): 729, 1245, 1499, 1528, 1620, 1644 und 2838 cm&supmin;¹.

Herstellungsbeispiel 6

9-Fluoro-6-methoxybenzo[g]isochinolin-5,10-dion

Eine Lösung von Cerammoniumnitrat (CAN; 13,70 g) in Wasser (50 ml) wird während 20 Minuten zu einer gerührten Suspension von 9-Fluoro-10-hydroxy-6- methoxybenzo[g]isochinolin (1,22 g) in Acetonitril (150 ml) gegeben. Am Ende der Zugabe wird die erhaltene Suspension während 2 Stunden auf 60ºC erhitzt, wobei eine klare, dunkle Lösung erhalten wird, die auf Raumtemperatur gekühlt und mit Wasser (100ml) verdünnt wird. Im Anschluß an die Entfernung von Acetonitril durch Destillation bei reduziertem Druck wird die wäßrige Phase mit Natriumchlorid gesättigt und mit Methylenchlorid (3 · 150 ml) extrahiert. Die kombinierten organischen Lösungen werden über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet, und das Lösungsmittel wird bei reduziertem Druck entfernt. Der erhaltene Rückstand wird durch Kieselgel-Säulenchromatographie (Eluens: Methylenchlorid/Ethylacetat von 85/1 5 bis 75/25 v/v) gereinigt und ergibt 9-Fluoro-6-methoxybenzo[g]isochinolin-5,10-dion als braungelben Feststoff (0,48 g).
Smp.: > 220ºC
¹H-NMR (CDCl&sub3;): 4,05 (s, 3H); 7,38 (dd, J = 3,39, 9,39 Hz, 1H); 7,55 (dd, J = 10,37, 9,39 Hz, 1H), 8,00 (dd, J = 5,09, 0,78 Hz, 1H); 9,07 (d, J = 5,09 Hz, 1H); 9,45 (d, J = 0,78 Hz, 1H).

Herstellungsbeispiel 7

6,9-Difluorobenzo[g]isochinolin-5,10-dion

Eine Lösung des Gemisches von 4-(2,5-Difluorobenzoyl)nicotinsäure und 3-(2,5- Difluorobenzoyl)isonicotinsäure aus Herstellungsbeispiel 2 (61,07 g) in 20% Oleum (100 ml) wird auf 140ºC erhitzt, während 20% Oleum in vier Portionen (jeweils 13,2 ml) in 20 Minuten- Intervallen zugegeben wird. Nach der vierten Zugabe wird die Mischung während 20 Minuten erhitzt, dann auf Raumtemperatur gekühlt und mit einer Mischung von Eis (1500 g), Wasser (1500 ml) und 35% NaOH (350 ml) gequencht. Die Mischung wird viermal mit Methylenchlorid (1 · 1000 ml gefolgt von 3 · 500 ml) extrahiert. Die kombinierten organischen Lösungen werden mit Wasser (2 · 1000 ml) gewaschen, getrocknet (Na&sub2;SO&sub4;) und das Lösungsmittel durch Rotationsverdampfen entfernt. Der erhaltene dunkelrote Feststoff (56,0 g) wird in siedendem THF (840 ml) gelöst, und entfärbende Aktivkohle (8,40 g) wird zugegeben. Nach 30 Minuten wird die Mischung heiß filtriert und das Filtrat auf 200 ml konzentriert. Der erhaltene Niederschlag wird durch Absaugen isoliert und ergibt 6,9- Difluorobenzo[g]isochinolin-5,10-dion (43,00 g).
Smp.: 201-203ºC
Konzentration der Mutterlauge auf 70 ml ergibt eine zweite Menge Produkt (3,35 g),
Smp.: 200-202ºC.

Herstellungsbeisuiel 8

9-Fluoro-6-methoxybenzo[g]isochinolin-5,10-dion und 6-Fluoro-9- methoxybenzo [g]isochinolin-5,10-dion

Eine Lösung von Natriummethylat wird in einer Stickstoffatmosphäre in einem Tropftrichter aus trockenem Methanol (97,6 ml) und portionsweise zugegebenem Natrium (0,024 g) hergestellt. Nach Verschwinden des gesamten Natrium wird die Lösung während 2 Stunden 35 Minuten zu einer gerührten Lösung von 6,9-Difluorobenzo[g]isochinolin-5,10-dion aus Herstellungsbeispiel 7 (19,615 g) in trockenem THF (883 ml) bei 20ºC getropft. Nach dem Ende der Zugabe wird die Lösung auf die Hälfte des Volumens durch Rotationsverdampfen konzentriert und dann während 30 Minuten auf 18ºC gekühlt. Der abgetrennte Feststoff wird durch Absaugen isoliert und mit THF (100 ml) gewaschen; dann wird er in Wasser (80 ml) unter Rühren über Nacht suspendiert und erneut filtriert, wobei Feststoff A (7,4 g) erhalten wird.
Die Mutter-THF-Lösung wird zur Trockne konzentriert. Der erhaltene Feststoff wird in Wasser (78 ml) unter Rühren während 1 Stunden suspendiert und filtriert und ergibt den FeststoffB (12,9 g).
Der Feststoff A (9,30 g) in Methylenchlorid (45 ml) wird unter Rückfluß während 30 Minuten erhitzt. Nach Abkühlen auf Raumtemperatur wird der Feststoff durch Absaugen isoliert, mit Methylenchlorid (5 · 3 ml) gewaschen und unter Vakuum bei 40ºC getrocknet, und ergibt 6- Methoxy-9-fluorobenzo[g]isochinolin-5,10-dion (8,65 g) als reine Verbindung.
Smp.: 248-250ºC
¹H-NMR (CDCl&sub3;): 4,05 (s, 3H); 7,40 (dd (J = 9,39, 3,91 Hz) 1H); 7,55 (dd, J = 10,37, 9,39 Hz, 1H); 8,00 (dd, J = 5,09, 0,78 Hz, 1H); 9,05 (d, J = 5,09 Hz, 1H); 9,48 (d, J = 0,78 Hz, 1H).
Der Feststoff B (14,0 g) wird in Methylenchlorid (140 ml) gelöst, und der unlösliche Anteil wird durch Filtration entfernt. Die Methylenchlorid-Lösung wird auf einem Kieselgel (630 g) Chromatographie-Säule aufgetragen, die bei Normaldruck mit Methylenchlorid eluiert wird. Wenn die gelben chromatographischen Banden gut getrennt erscheinen, wird die Säule mit Mischungen von Methylenchlorid/Ethylacetat von 10/1 bis 8/2 bis 1/1 eluiert, wobei ein 94/6- Gemisch (HPLC-Messung) von 9-Methoxy-6-fluorobenzo[g]isochinolin-5,10-dion und 6- Methoxy-9-fluorobenzo[g]isochinolin-5,10-dion (6,50 g) erhalten wird.
Smp.: 168-170ºC

Herstellungsbeispiel 9

a) 9-Fluoro-6-hydroxybenzo[g]isochinolin-5,10-dion und 9-Chloro-6- hydroxybenzo[g]isochinolin-5,10-dion (1/1-Gemisch: Reaktion in kleinem Maßstab)

Eine Mischung von 9-Fluoro-6-methoxybenzo[g]isochinolin-5,10-dion (0.072 g) und Aluminiumtrichlorid (0,112 g) in trockenem Methylenchlorid (40 ml) wird bei Raumtemperatur während 4 Stunden unter einer Stickstoffatmosphäre gerührt. Eine zusätzliche Portion Aluminiumchlorid (0,190 g) wird zugegeben, und die Mischung unter Rückfluß während 1,5 Stunden und bei Raumtemperatur über Nacht umgesetzt. Im Anschluß an die Zugabe von Kochsalzlösung (15 ml) wird die wäßrige Phase abgetrennt und mit Methylenchlorid (3 · 5 ml) extrahiert. Die kombinierten organischen Lösungen werden über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet, und das Lösungsmittel wird durch Destillation unter reduziertem Druck entfernt, wobei ein etwa 1 : 1-Gemisch (0,070 g) 9-Fluoro-6-hydroxybenzo[g]isochinolin-5,10-dion (langsamer gelber Fleck auf der Kieselgel-Dünnschicht-Chromatographie-Platte, Eluens Methylenchlorid/Ethylacetat 70/30) und 9-Chloro-6-hydroxybenzo[g]isochinolin-5, 10-dion (schnellerer gelber Fleck im obigen Chromatographie-System) erhalten wird, die ohne weitere Reinigung für den nächsten Schritt verwendet wird.
9-Fluoro-6-hydroxybenzo[g]isochinolin-5,10-dion hat das folgende ¹H-NMR-Spektrum (CDCl&sub3;): 7,38 (dd, 1H); 7,53 (dd, 1H); 8,09 (dd, 1H); 9,15 (d, 1H); 9,57 (d, 1H); 12,56 (s, 1H).
9-Fluoro-6-hydroxybenzo[g]isochinolin-5,10-dion hat das folgende ¹H-NMR-Spektrum (CDCl&sub3;): 7,91 (d, 1H); 7,75 (d, 1H); 8,07 (dd, 1H); 9,13 (d, 1H); 9,58 (d, 1H); 12,95 (s, 1H).

b) 9-Fluoro-6-hydroxybenzo[g]isochinolin-5,10-dion und 9-Chloro-6- hydroxybenzo[g]isochinolin-5,10-dion (9/1-Gemisch: Multigram-Herstellung):

Aluminiumchlorid (19,05 g) wird in einer Portion zu einer gerührten Lösung unter Rückfluß von 6-Methoxy-9-fluorobenzo[g]isochinolin-5,10-dion (7,20 g) in Methylenchlorid (432 ml) gegeben. Nach Erhitzen unter Rückfluß während 4 Stunden wird die Reaktionsmischung gekühlt und in Wasser gegossen (1300 ml). Methylenchlorid (200 ml) wird zugegeben, und nach Rühren während 10 Minuten wird die organische Phase abgetrennt. Die wäßrige Lösung wird mit NaCl gesättigt und weiter mit Methylenchlorid (3 · 400 ml) extrahiert. Die kombinierten organischen Lösungen werden mit gesättigter Kochsalzlösung (1000 ml) gewaschen, getrocknet und das Lösungsmittel durch Rotationsverdampfen entfernt. Der erhaltene braune Feststoff (6,5 g) wird aus Ethylacetat/n-Hexan 1/1 (65 ml) umkristallisiert und ergibt ein 9/1-Gemisch (¹H-NMR-Messung) von 9-Fluoro-6-hydroxybenzo[g]isochinolin-5,10- dion und 9-Chloro-6-hydroxybenzo[g]isochinolin-5,10-dion (6,00 g).
Smp.: teilweise Schmelzen bei 179 bis 181ºC; vollständiges Schmelzen bei 193 bis 195ºC.

Herstellungsbeispiel 10

a) 9-Fluoro-6-(p-toluolsulfonyloxy)benzo[g]isochinolin-5,10-dion und 9-Chloro-6-(ptoluolsulfonyloxy)benzo[g]isochinolin-5,10-dion (1/1-Gemisch; Herstellung in kleinem Maßstab)

Das 1 : 1-Gemisch von 9-Fluoro-6-hydroxybenzo[g]isochinolin-5,10-dion und 9-Chloro- 6-hydroxybenzo[g]isochinolin-5,10-dion aus Herstellungsbeispiel 9a (0,060 g) wird in trockenem Pyridin (2 ml) gelöst, und p-Toluolsulfonylchlorid (0,095 g) wird zugegeben. Nach Rühren bei Raumtemperatur während 1 Stunde wird Triethylamin (0,25 ml) zugegeben, und es wird während 1 Stunde weiter gerührt. Die Reaktionsmischung wird fast zur Trockne konzentriert und zwischen 1 N HCl (4 ml)-20% Ammoniumsulfat (6 ml) und Ethylacetat (10 ml) verteilt. Die wäßrige Phase wird abgetrennt, mit Ethylacetat (3 · 5 ml) extrahiert und verworfen. Die kombinierten organischen Lösungen werden über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und zur Trockne konzentriert und ergeben ein ca. 1 : 1-Gemisch (0,095 g) von 9- Fluoro-6-(p-toluolsulfonyloxy)benzo[g]isochinolin-5,10-dion und 9-Chloro-6-(ptoluolsulfonyloxy)benzo[g]isochinolin-5,10-dion, welches ohne weitere Reinigung für den nächsten Schritt verwendet wird.
Die reinen einzelnen Verbindungen können durch Kieselgel-Säulenchromatographie dieser Mischung (Eluens: Methylenchlorid/n-Hexan/Ethylacetat von 50/45/5 bis 50/40/10 v/v/v) erhalten werden, und sie haben die folgenden analytischen Daten:
9-Fluoro-6-(p-toluolsulfonyloxy)benzo[g]isochinolin-5,10-dion: Smp.: 173 bis 174ºC.
¹H-NMR (CDCl&sub3;): 2,45 (s, 3H), 7,35 (d, 2H); 7,50-7,57 (m, 2H); 7,82-7,94 (m, 3H); 9,08 (d, 1H); 9,48 (s, 1H).
9-Chloro-6-(p-toluolsulfonyloxy)benzo [g]isochinolin-5,10-dion:
Smp.: 180 bis 181ºC.
¹H-NMR (CDCl&sub3;): 2,45 (s, 3H); 7,35 (d, 2H); 7,47 (d, 1H); 7,78-7,91 (m, 4H), 9,07 (d, 1H); 9,48 (s, 1H).

b) 9-Fluoro-6-(p-toluolsulfonyloxy)benzo[g]isochinolin-5,10-dion und 9-Chloro-6-(ptoluolsulfonyloxy)benzo[g]isochinolin-5,10-dion (9/1-Gemisch; Multigram-Herstellung):

Triethylamin (8,20 ml) wird zu einer gerührten Suspension des 9/1-Gemisches von 9- Fluoro-6-(p-toluolsulfonyloxy)benzo[g]isochinolin-5,10-dion und 9-Chloro-6-(ptoluolsulfonyloxy)benzo[g]isochinolin-5,10-dion aus Herstellungsbeispiel 9b (5,53 g) und p- Toluolsulfonylchlorid (8,47 ml) in Methylenchlorid (166 ml) gegeben. Die erhaltene rötlichviolette Lösung wird bei Raumtemperatur während 1 Stunde unter einer Stickstoffatmosphäre gelassen und dann in Wasser gegossen (500 ml). Die organische Phase wird abgetrennt, und die wäßrige Lösung wird weiter mit Methylenchlorid (100 ml) extrahiert. Die kombinierten organischen Lösungen werden getrocknet (Na&sub2;SO&sub4;) und zur Trockne konzentriert. Der erhaltene Feststoff wird in n-Hexan (100 ml) während 1 Stunde suspendiert und filtriert und ergibt eine 9 : 1-Mischung (¹H-NMR-Messung) von 9-Fluoro-6-(p-toluolsulfonyloxy)benzo[g]isochinolin- 5,10-dion und 9-Chloro-6-(p-toluolsulfonyloxy)benzo[g]isochinolin-5,10-dion (8,85 g).
Smp.: 156-158ºC

Herstellungsbeispiel 11

3-(5-Chloro-2-fluorobenzoyl)isonicotinsäure und 4-(5-Chloro-2- fluorobenzoyl)nicotinsäure

Sek-Butyllithium (1,3 M in Cyclohexan; 6,0 ml) wird tropfenweise bei -75ºC durch eine Spritze zu einer gerührten Lösung von 1-Chloro-4-fluorobenzol (0,97 g) in THF (70 ml) gegeben, die in einer Stickstoffatmosphäre gehalten wird. Nach Rühren während weiterer 30 Minuten wird die gelbe Mischung tropfenweise durch eine ummantelte Kanäle bei -78ºC unter einer Stickstoffschicht in eine gerührte Mischung von Pyridin-3,4-dicarbonsäureanhydrid (1,00 g) in THF (100 ml) transferiert. Die blaßgelbe Lösung wird während 4 Stunden auf-20ºC aufgewärmt. Das THF wird unter reduziertem Druck entfernt. Der erhaltene gelbe Feststoff wird in Wasser (10 ml) gelöst, auf 0ºC gekühlt und mit verdünnter HCl in einem Eisbad abgesäuert, und der resultierende Niederschlag wird durch Filtration abgetrennt. Nach Erhitzen des weißen Feststoffs mit Aceton (30 ml) bleibt ein unlösliches Material zurück (0,095 g), das nach ¹H- NMR-Analyse ein 94/4-Gemisch von 3-(5-Chloro-2-fluorobenzoyl)isonicotinsäure und 4-(5 - Chloro-2-fluorobenzoyl)nicotinsäure ist.
Smp.: 289 bis 291ºC
Nach Zentrifugation wird die überstehende Flüssigkeit entfernt und im Rotationsverdampfer verdampft und ergibt Kristalle einer 94/6-Mischung (durch ¹H-NMR- Analyse) von 4-(5-Chloro-2-fluorobenzoyl)nicotinsäure und 3-(5-Chloro-2- fluorobenzoyl)nicotinsäure (0,947 g).
Smp.: 236 bis 237ºC
Sublimation dieser Mischung (0,025 g) bei 180 bis 205ºC/0,5 mmHg ergibt einen weißen Feststoff mit einem 98/2-Verhältnis von 4-(5-Chloro-2-fluorobenzoyl)nicotinsäure und 3-(5- Chloro-2-fluorobenzoyl)isonicotinsäure (20 mg).
4-(5-Chloro-2-fluorobenzoyl)nicotinsäure: ¹H-NMR (CDCl&sub3;/CD&sub3;OD 9/1): 6,96 (m, 1H); 7,21 (d, 1H); 7,45 (m, 1H); 7,86 (m, 1H); 8,76 (d, 1H); 9,18 (s, 1H).
3-(5-Chloro-2-fluorobenzoyl)isonicotinsäure: ¹H-NMR (DMSO-d&sub6;): 7,37 (m, 1H); 7,75 (m, 2H); 7,83 (d, 1H); 8,77 (s, 1H); 8,90 (d, 1H).

Herstellungsbeispiel 12

4-(5-Chloro-2-fluorobenzyl)nicotinsäure

Zink-Kupfer-Paar (0,75 g) wird zu einer gerührten Mischung von 4-(5-Chloro-2- fluorobenzoyl)nicotinsäure und 3-(5-Chloro-2-fluorobenzoyl)isonicotinsäure aus Herstellungsbeispiel 11 (94/6 auf molarer Basis; 0,60 g) in 75% Ameisensäure gegeben. Die exotherme und aufschäumende Reaktionsmischung wird während 15 Minuten vor Erhitzen auf 80ºC während 2 Stunden gerührt. Nach Abkühlen auf 40ºC wird die Mischung durch einen Sinterglastrichter filtriert. Der Feststoff wird mit 75% Ameisensäure (1 · 5 ml) und Ethylacetat (2 · 5 ml) gewaschen. Die Mischung wird durch Rotationsverdampfen auf etwa 2 ml konzentriert. Das erhaltene orange Öl wird in 0,5 N HCl (3 ml) gelöst und mit Ethylacetat (3 · 10 ml) extrahiert, dann mit NaCl gesättigt und mit Ethylacetat/1,2-Dimethoxyethan (2 · 5 ml) extrahiert. Die kombinierten Extrakte werden mit Na&sub2;SO&sub4; getrocknet und die Lösungsmittel durch Rotationsverdampfen entfernt, wobei ein gelber Schaum erhalten wird. Der Schaum (0,541 g) wird in heißen Acetonitril (1 ml) umkristallisiert, und ergibt 4-(Chloro-2- fluorobenzyl)nicotinsäure (0,142 g).
Smp.: 174-176ºC
¹H-NMR (CDCl&sub3;/CD&sub3;OD 9/1): 4,43 (s, 2H); 6,79 (m, 1H); 6,86 (m, 1H); 6,95 (m, 1H); 7,11 (d, 1H); 8,55 (d, 1H); 9,12 (s, 1H).

Herstellungsbeispiel 13

9-Chloro-6-fluorobenzo[g]isochinolin-5,10-dion

Rauchende Schwefelsäure (30% SO&sub3;; 0,31 ml) wird zu 4-(5-Chloro-2- fluorobenzyl)nicotinsäure aus Herstellungsbeispiel 12 gegeben. Die dunkle Mischung wird schnell während 10 Minuten auf 130ºC in einem Kolben erhitzt, der mit einem baumwollgefüllten Trockenrohr versehen ist. Nach Abkühlen auf Raumtemperatur wird die Reaktionsmischung mit Eis (3 g) gequencht und mit Methylenchlorid (4 · 7 ml) extrahiert. Die kombinierten Extrakte werden mit Na&sub2;SO&sub4; getrocknet und das Lösungsmittel durch Rotationsverdampfen entfernt, und man erhält 9-Chloro-6-fluorobenzo[g]isochinolin-5,10-dion als gelben Feststoff (0,045 g; 82% Ausbeute).
Smp.: 204 bis 206ºC
¹H-NMR (CDCl&sub3;): 7,45 (m, 1H); 7,83 (m, 1H); 7,98 (d, 1H); 9,08 (d, 1H); 9,49 (s, 1H).

Beispiel 1

5-(p-Toluolsulfonyloxy)-2-methylisochino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on

Das 1 : 1-Gemisch von 9-Fluoro-6-(p-toluolsulfonyloxy)benzo[g]isochinolin-5,10-dion und 9-Chloro-6-(p-toluolsulfonyloxy)benzo[g]isochinolin-5,10-dion aus Herstellungsbeispiel 10a (0,041 g) wird in trockenem Pyridin (2 ml) gelöst, und eine frisch hergestellte 1M Lösung von N-Methylhydrazin in Pyridin (0,183 ml) wird zugegeben. Nach Rühren während 3 Stunden bei Raumtemperatur wird die Reaktionsmischung zur Trockne konzentriert und es wird mit Wasser (5 ml), gesättigter NaH&sub2;PO&sub4;-Lösung (5 ml) versetzt und einige Male mit Methylenchlorid (50 ml) extrahiert. Die kombinierten organischen Lösungen werden über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und das Lösungsmittel wird bei reduziertem Druck entfernt. Der erhaltene Rückstand wird durch Kieselgel-Säulenchromatographie (Eluens: Methylenchlorid/Ethylacetat 90/10 v/v (50 ml), dann 75/25 (50 ml), dann 60/40 (50 ml) und schließlich 40/60 (50 ml) gereinigt, wobei 2-Methyl-5-(p-toluolsulfonyloxy)isochino[8,7,6- cd]indazol-6(2H)-on erhalten wird.
¹H-NMR (CDCl&sub3;): 2.42 (s, 3H); 4.25 (s, 3H); 7.33 (d, 2H); 7.53 (d, 1H); 7.63 (d, 1H); 7.95 (d, 2H); 8.07 (d, 1H) 8.80 (d, 1H); 9.50 (s, 1H).

Beispiel 2

2-[2-Dimethylamino)ethyl)]-5-(p-toluolsulfonyloxy)isochino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on

In einer Stickstoffatmosphäre wird eine Lösung von 2-(Dimethylaminoethyl)hydrazin (J. Med. Chem. 7, 493, 1964) (1,86 g) in wasserfreiem THF (6,0 ml) während 30 Minuten zu der gerührten 9 : 1-Mischung von 9-Fluoro-6-(p-toluolsulfonyloxy)benzo[g]isochinolin-5,10-dion und 9-Chloro-6-(p-toluolsulfonyloxy)benzo[g]isochinolin-5,10-dion aus Herstellungsbeispiel 10b (2,4 g) in THF (24 ml) gegeben; die N,N-Diisopropylethylamin (1,10 ml) enthält. Eine leicht exotherme Reaktion folgt, und die Reaktionstemperatur steigt von 20ºC auf 25ºC. Nach 1 Stunde bei Raumtemperatur wird die Reaktionsmischung in Wasser (240 ml) gegossen, und die erhaltene Suspension wird während 30 Minuten gerührt. Der Feststoff wird durch Absaugen abgetrennt, mit Wasser gewaschen und bei 40ºC getrocknet und ergibt 2-[2- (Dimethylamino)ethyl)]-5-(p-toluolsulfonyloxy)isochino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on (1,44 g).
Smp.: 139 bis 141ºC
¹H-NMR (CDCl&sub3;): 2.35 (s, 6H); 2.45 (s, 3H); 2.95 (t, 2H); 4.65 (t, 2H); 7.35 (d, 2H); 7.52 (d, 18); 7.80 (d, 1H); 7.95 (d, 2H); 8.10 (d, 1H); 8.80 (d, 1H); 9.55 (s, 1H).

Beispiel 3

2-[2-(N-tert-Butoxycarbonylamino)ethyl]-5-(p-toluolsulfonyloxy)isochino [8,7,6- cd]indazol-6(2H)-on

(2-N-tert-Butoxycarbonylaminoethyl)hydrazin wird durch Reaktion von N-t- Butoxycarbonyl-2-chloroethylamin mit Hydrazin hergestellt, wobei ein Verfahren angewendet wird, das aus J. Med. Chem. 7, 493 (1964) angepaßt wurde. Unter einer Stickstoffatmosphäre wird eine Lösung von (2-N-tert-Butoxycarabonylaminoethyl)hydrazin (9,2 g) in wasserfreiem THF (10 ml) während 30 Minuten zu der gerührten 9 : 1-Mischung von 9-Fluoro-6-(ptoluolsulfonyloxy)benzo[g]isochinolin-5,10-dion und 9-Chloro-6-(ptoluolsulfonyloxy)benzo[g]isochinolin-5,10-dion aus Herstellungsbeispiel 10b (3,0 g) in THF (25 ml) gegeben, die N,N-Diisopropylethylamin (1,38 ml) enthält. Eine leicht exotherme Reaktion folgt, und die Reaktionstemperatur steigt von 21ºC auf 24ºC. Nach Rühren während 1 Stunde bei Raumtemperatur wird der erhaltene Niederschlag durch Absaugen isoliert, mit THF/n-Hexan 1/1 (15 ml) gewaschen und bei 40ºC unter Vakuum getrocknet, wobei 2-[2-(Ntert-Butoxycarbonylamino)ethyl]-5-(p-toluolsulfonyloxy)isochino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on (1,33 g) erhalten wird.
Smp.: 206 bis 208ºC
¹H-NMR (CDCl&sub3;): 1.4 (s, 9H); 2.45 (s, 3H); 3.75 (q, 2H); 4.70 (t, 2H); 4.92 (br, 1H); 7.35 (d, 2H); 7.50 (d, 1H); 7.75 (d, 1H); 7.95 (d, 2H); 8.09 (d, 1H); 8.78 (d, 1H); 9.50 (s, 1H).

Beispiel 4

2-[2-[(2-Hydroxyethyl)amino]ethyl]-5-(p-toluolsulfonyloxy)isochino[8,7,6-c]indazol- 6(2H)-on

Eine Lösung von 2-[(2-Hydroxyethylamino)ethyl]hydrazin (J. Het. Chem., 26, 85, (1989); 0,179 g) in absolutem Ethanol (0,5 ml) wird in eine gerührte Lösung des 9 : 1-Gemisches von 9-Fluoro-6-(p-toluolsulfonyloxy)benzo[g]isochinolin-5,10-dion und 9-Chloro-6-(ptoluolsulfonyloxy)benzo[g]isochinolin-5,10-dion aus Herstellungsbeispiel 10b (0,200 g) in THF (2,0 ml) getropft, die Triethylamin (0,073 ml) enthielt. Nach Rühren während 2 Stunden bei Raumtemperatur wird eine zusätzliche Menge 2-[(2-Hydroxyethylamino)ethyl]hydrazin (0,179 g) in absolutem Ethanol (0,5 ml) zugegeben, und nach zwei zusätzlichen Stunden wird die Reaktionsmischung auf das Volumen von etwa 1 ml konzentriert. Wasser (20 ml) wird zugegeben, und die Mischung wird bei Raumtemperatur über Nacht gerührt. Der Niederschlag wird durch Absaugen isoliert, unter Vakuum bei 40ºC getrocknet und schließlich in siedendem Ethylacetat aufgeschlämmt, wobei 2-[2-((2-Hydroxyethyl)amino)ethyl]-5-(ptoluolsulfonyloxy)isochino[8,7,6-c]indazol-6(2H)-on (0,060 g) erhalten wurde.
Smp.: 131 bis 133ºC
¹H-NMR (DMSO-d&sub6;/D&sub2;O) 2.45 (s, 3H); 2.62 (t, 2H); 3.13 (t, 2H); 3.40 (t, 2H); 4.65 (t, 2H); 7.25 (d, 1H); 7.40 (d, 2H); 7.75 (d, 2H); 7.95 (d, 1H); 8.15 (d, 1H); 8.80 (d, 1H); 9.40 (s, 1H).

Beispiel 5

Herstellung von 2-(Aminoalkyl)-5-(p-toluolsulfonyloxy)isochino[8,7,6-cd]indazol- 6(2H)-onen

Unter Verwendung des Verfahrens von Beispielen 1 bis 4 werden die folgenden Verbindungen durch Reaktion der Mischung von 9-Fluoro-6-(p- toluolsulfonyloxy)benzo[g]isochinolin-5,10-dion und 9-Chloro-6-(ptoluolsulfonyloxy)benzo[g]isochinolin-5,10-dion aus Herstellungsbeispiel 10 mit einem substituierten Hydrazin erhalten, das ausgewählt wird aus der Gruppe aus 2 (Diethylaminoethyl)hydrazin [J. Med. chem., 7, 493, (1964)], 3-Dimethylaminopropylhydrazin [J. Het. Chem., 23, 1491, (1986)], 2-Aminoethylhydrazin [J. Het. Chem., 23, 1491, (1986)], 2- (Methylaminoethyl)hydrazin, 2-Hydroxyethylhydrazin, 3-Aminopropylhydrazin [J. Het. Chem., 23, 1491, (1986)];
2-[2-(Diethylamino)ethyl]-5-(p-toluolsulfonyloxy)isochino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on;
2-[3-(Dimethylamino)propyl]-5-(p-toluolsulfonyloxy)isochino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on;
2-[2-(Amino)ethyl]-5-(p-toluolsulfonyloxy)isochino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on;
2-[2-(Methylamino)ethyl]-5-(p-toluolsulfonyloxy)isochino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on;
2-[3-(Amino)propyl]-5-(p-toluolsulfonyloxy)isochino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on.

Beispiel 6

5-Chloro-2-methylisochino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-on

Eine Lösung von Methylhydrazin (0,76 M; 0,021 g) in Pyridin (0,6 ml) wird tropfenweise während 2 Minuten zu einer gerührten Lösung von 9-Chloro-6-fluorobenzo[g]isochinolin-5,10- dion aus Herstellungsbeispiel 13 in Pyridin (0,5 ml) gegeben, die mit einem Eisbad gekühlt wurde. Nach 6 Minuten erscheint ein gelber Niederschlag in der dunklen Lösung. Nach 1,3 Stunden wird die Reaktionsmischung durch einen leichten Stickstoffstrom auf die Hälfte ihres Volumens reduziert und mit Eis (5 g) gequencht. Der blaßgelbe Niederschlag wird durch Absaugen isoliert und mit Eiswasser (2 · 1 ml) gewaschen und unter Vakuum getrocknet. Der gelbe Feststoff wird durch Kieselgel-Säulenchromatographie (Eluens: Chloroform/Methanol 96/4 v/v) gereinigt und ergibt 5-Chloro-2-methylisochino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-on (0,033 g; 71% Ausbeute) als gelben Feststoff.
Smp.: 244 bis 245ºC
¹H-NMR (CDCl&sub3;): 4,25 (s, 3H); 7,59 (dd, 2H); 7,92 (d, 1H); 8,84 (d, 1H); 9,55 (s, 1H).

Beispiel 7

Herstellung von 2-(Aminoalkyl)-5-chloroisochino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-onen

Unter Verwendung des Verfahrens von Beispiel 6 werden die folgenden Verbindungen durch Reaktion von 9-Chloro-6-fluorobenzo[g]isochinolin-5,10-dion aus Herstellungsbeispiel 13 mit einem substituierten Hydrazin erhalten, das ausgewählt wird aus der Gruppe aus (2-N-tert- Butoxycarbonylaminoethyl)hydrazin, 2-(Dimethylaminoethyl)hydrazin [J. Med. Chem., 7, 493, (1964)], 2-(Diethylaminoethyl)hydrazin [J. Med. Chem., 7, 493, (1964)], 2-[(2- Hydroxyethylamino)ethyl]hydrazin (J. Het. Chem., 26, 85, (1989)], 3- Dimethylaminopropylhydrazin [J. Het. Chem., 23, 1491 (1986)], 2-Aminoethylhydrazin [J. Het. Chem., 23, 1491, (1986)], 2-(Methylaminoethyl)hydrazin, 2-Hydroxyethylhydrazin, 3- Aminopropylhydrazin [J. Het. Chem., 23, 1491, (1986)]; 2-[2-(N-tert- Butoxycarbonylamino)ethyl)]-5-chloröisochino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-on;
Smp.: 226 bis 228ºC
¹H-NMR (CDCl&sub3; + CD&sub3;OD): 1.30 (s, 9H); 3.58 (t, 2H); 4.63 (t, 2H); 7.54 (d, 1H); 7.70 (d, 1H); 7.90 (dd, 1H); 8.70 (d, 1H); 9.40 (s, 1H).
2-[2-(Dimethylamino)ethyl]-5-chloroisochino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-on;
Smp.: 160 bis 161ºC
¹H-NMR (CDCl&sub3;): 2.32 (s, 6H); 2.95 (t, 2H); 4.65 (t, 2H); 7.60 (d, 1H); 7.69 (d, 1H); 8.00 (dd, 1H); 8.88 (d, 1H); 9.60 (s, 1H);
2-[2-(Diethylamino)ethyl]-5-chloroisochino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-on;
2-[2-(Diethylamino)ethyl]-5-chloroisochino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-on;
2-[2-[(2-Hydroxyethyl)amino]ethyl]-5-chloroisochino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-on;
Smp.: 148 bis 152,5ºC
¹H-NMR (CDCl&sub3; + CD&sub3;OD-): 2.75 (t, 2H); 3.43 (t, 2H); 3.60 (t, 2H); 4.63 (t, 2H) 7.55 (d, 1H); 7.75 (d, 1H); 7.98 (dd, 1H); 8.73 (d, 1H); 9.40 (s, 1H);
2-[3-(Dimethylaminopropyl]-5-chloroisochino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-on;
2-[2-(Amino)ethyl]-5-chloroisochino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-on;
2-[2-(Methylamino)ethyl]-5-chloroisochino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-on;
2-[2-(Hydroxy)ethyl]-5-chloroisochino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-on;
2-[3-Amino)propyl]-5-chloroisochino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-on.

Beispiel 8

5-[[2-(Dimethylamino)ethyl]amino]-2-methylisochino[8,7,6-cd]inazol-6(2H)-on

Eine 1 M-Lösung von N,N-Dimethylethylendiamin in Pyridin (0,10 ml) wird zu einer gerührten Lösung von 2-Methyl-5-(p-toluolsulfonyloxy)isochino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on (0,02 g) in trockenem Pyridin (2 ml) gegeben. Nach Rühren bei Raumtemperatur während 1 Stunde wird die Reaktionsmischung während 13 Stunden auf 70ºC erhitzt, während zusätzliche Mengen N,N-Dimethylethylendiaminlösung (0,1; 0,05; 0,05 ml) jeweils während 2,4 und 11 Stunden zugegeben werden. Pyridin und überschüssiges N,N-Dimethylethylendiamin werden durch Destillation bei reduziertem Druck entfernt, und der erhalten Rückstand wird zwischen CH&sub2;Cl&sub2; (50 ml) und Kochsalzlösung (10 ml) verteilt, zu der gesättigte NaHCO&sub3;-Lösung (1 ml) gegeben wird. Die organische Lösung wird über wasserfreiem Na&sub2;SO&sub4; getrocknet und das Lösungsmittel durch Destillation entfernt. Der erhaltene orange Rückstand wird durch Kieselgel- Säulenchromatographie (Eluens: CHCl&sub3;/MeOH 95/5 (30 ml), gefolgt von CHCl&sub3;/MeOH/NH&sub4;OH 90/15/0,5 (50 ml) gereinigt, wobei 2-Methyl-5-[[2-(dimethylamino)ethyl]amino]isochino[8,7,6- cd)indazol-6(2H)-on (0,011 g) als rötlich-oranger Feststoff erhalten wird.
Smp.: 208 bis 215ºC (Zers.).
¹H-NMR (CDCl&sub3;): 2.40 (s, 3H); 2.75 (t, 2H); 3.57 (q, 2H); 4.25 (s, 3H); 6.97 (d, 1H); 7.63 (d, 1H); 8.30 (dd, 1H) 8.79 (d, 1H); 9.30 (br.t, 1H); 9.62 (d, 1H).

Beispiel 9

2-[2-(Dimethylamino)ethyl]-5-[[2-(dimethylamino)ethyl]amino]isochino[8,7,6- cd]indazol-6-(2H)-on

Eine Lösung von 2-[2-(Dimethylamino)ethyl]-5-(p-toluolsulfonyloxy)isochino[8,7,6- cd]indazol-6(2H)-on aus Beispiel 2 (0,463 g) und 2-(Dimethylamino)ethylamin (0,80 ml) in trockenem Pyridin (4,63 ml) wird während 1 Stunde, 30 Minuten unter einer Stickstoffschicht auf 80ºC erhitzt. Die Lösung wird dann zur Trockne konzentriert, und der erhaltene dunkle Rückstand wird zwischen Kochsalzlösung (30 ml) und Ethylacetat (4 · 25 ml) verteilt. Die kombinierten organischen Lösungen werden über Na&sub2;SO&sub4; getrocknet und auf etwa 3 ml konzentriert. Nach Zugabe von n-Hexan (12 ml) und Rühren während 1 Stunde wird der Niederschlag durch Absaugen isoliert und bei 40ºC unter Vakuum getrocknet, wobei 2-[2- (Dimethylamino)ethyl)]-5-[[2-(dimethylamino)ethyl]amino]isochino [8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on (0,23 g) erhalten wird.
Smp.: 150 bis 152ºC
¹H-NMR (CDCl&sub3;): 2.32 (s, 6H); 2.40 (s, 6H); 2.70 (t, 2H); 2.95 (t, 2H); 3.60 (q, 2H); 4.65 (t, 2H); 6.98 (d,1H); 7.70 (d, 1H); 8.30 (d, 1H); 8.80 (d, 1H); 9.30 (br, 1H); 9.65 (s, 1H).

Beispiel 10

2-[2-(N-tert-Butoxycarbonylamino)ethyl]-5-[[2-(N-tert- butoxycarbonylamino)ethyl]amino]isochino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on

Eine Suspension von 2-[2-(N-tert-Butoxycarbonylamino)ethyl]-5-(ptoluolsulfonyloxy)isochino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on aus Beispiel 3 (0,535 g) und N-(tert- Butoxycarbonyl)ethylendiamin (hergestellt entsprechend Synt. Comm., 20, 2559, (1990); 1,12 g) in trockenem Pyridin (5,35 ml) wird auf 80ºC erhitzt. Die erhaltene dunkle Lösung wird bei dieser Temperatur während 5 Stunden gehalten, dann wird sie zur Trockne konzentriert und zwischen Kochsalzlösung (30 ml) und Ethylacetat (2 · 25 ml) verteilt. Der in der biphasischen Mischung unlösliche orangerote Feststoff wird durch Absaugen abgetrennt und bei 40ºC unter Vakuum getrocknet (0,43 g).
Dieses Material (0,60 g) wird durch Säulenchromatographie (SiO&sub2;; Eluens Methylenchlorid/Methanol von 90/10 bis 70/30 v/v) gereinigt. Die das Produkt enthaltenen Fraktionen werden gesammelt und auf etwa 20 ml konzentriert, und 2-[2-(N-tert- Butoxycarbonylamino)ethyl]-5-[[2-(N-tert-butoxycarbonylamino]ethyl]amino]isochino[8,7,6- cd]indazol-6(2H)-on trennt sich als rot-orange Kristalle ab (0,45 g).
Smp.: 211 bis 213ºC
¹H-NMR (CDCl&sub3;/DMSO-d&sub6; 9/1): 1.3 (s, 9H); 1.4 (s, 9H); 3.32 (q, 2H); 3.58 (m, 4H); 4.58 (t, 2H); 6.20 (br, 1H); 6.40 (br, 18); 7.05 (d, 1H); 7.70 (d, 1H); 8.15 (d, 1H); 8.65 (d, 1H); 9.20 (br, 1H); 9.49 (s, 1H).

Beispiel 11

2-[2-(N-tert-Butoxycarbonylamino)ethyl]-5-[[(2- (dimethylamino)ethyl]amino]isochino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on

Eine Suspension von 2-[2-(N-tert-Butoxycarbonylamino)ethyl]-5-(ptoluolsulfonyloxy)isochino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on (0,056 g) und 2- (Dimethylamino)ethylamin (0,080 ml) in trockenem Pyridin (0,50 ml) wird auf 80ºC erhitzt. Die erhaltene dunkle Lösung wird bei dieser Temperatur während 1 Stunde gehalten und dann bei Raumtemperatur über Nacht stehengelassen. Der erhaltene dunkle Niederschlag wird durch Absaugen abgetrennt und durch Säulenchromatographie (SiO&sub2;; Eluens Ethylacetat und dann Methylenchlorid/Methanol 9/0,5 v/v) gereinigt und ergibt 2-[2-(N-tert- Butoxycarbonylamino)ethyl]-5-[[2-(dimethylamino)ethyl] amino] isochino [8,7,6-cd] indazol- 6(2H)-on (0,024 g) als rot-orangen Feststoff.
Smp.: 225 bis 227ºC (aus Methylenchlorid)
¹H-NMR (CDCl&sub3;): 1.43 (s, 9H); 2.40 (s, 6H); 2.7 (t, 2H); 3.55 (q, 2H); 3.78 (m, 2H); 4.65 (t, 2H); 5.23 (br.m, 1H); 6.87 (d, 1H) 7.62 (d, 1H); 8.28 (dd, 1H); 8.76 (d, 1H); 9.6 (s, 1H).

Beispiel 12

Isochino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on

Durch Befolgen der Verfahren aus den Beispielen 8 bis 11 werden die folgenden Verbindungen durch Reaktion von 2-[2-(Dimethylamino)ethyl]-5-(ptoluolsulfonyloxy)isochino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on aus Beispiel 2,2-[2-(N-tert- Butoxycarbonylamino)ethyl]-5-(p-toluolsulfonyloxy)isochino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on aus Beispiel 3 oder 2-[2-[(2-Hydroxyethyl)amino]ethyl]-5-(p-toluolsulfonyloxy)isochino[8,7,6- c]indazol-6(2H)-on aus Beispiel 4 mit dem geeignet ausgewählten Amin erhalten:
2-[2-[(2-Hydroxyethyl)amino]ethyl]-5-[[2-[(2-hydroxyethyl)amino]ethyl]isochino[8,7,6- cd]indazol-6(2H)-one:
¹H-NMR (CDCl&sub3;): 3.25 (m, 6H); 3.61 (t, 4H); 3.71 (m, 4H); 3.98 (q, 2H); 4.65 (t, 2H); 5.31 (br, 2H); 7.08 (d, 1H), 7.70 (d, 1H); 8.30 (d, 1H); 8.83 (d, 1H); 9.30 (br, 1H); 9.69 (s, 1H).
2-[2-[(2-Hydroxyethyl)amino]ethyl]-5-[[3-(amino)propyl]amino]isochino[8,7,6-cd]indazol- 6(2H)-on;
¹H-NMR (CDCl&sub3;): 2.05 (m, 2H); 3.18 (m, 4H); 3.58 (t, 2H); 3.65 (t, 2H); 3.78 (q, 2H); 4.62 (t, 2H); 5.20(br, 3H), 7.10 (d, 1H); 7.69 (d, 1H); 8.30 (d, 1H); 8.85 (d, 1H); 9.15 (br, 1H); 9.30 (t, 1H); 9.71 (s, 1H).
2-[2-[(2-Hydroxyethyl)amino]ethyl]-5-[[2-(amino)ethyl]amino]isochino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)- on;
¹H-NMR (CDCl&sub3;): 3.20 (m, 4H), 3.58 (t, 2H); 3.66 (t, 2H); 3,86 (q, 2H); 4.61 (t, 2H); 5.15 (br, 3H); 7.12 (d, 1H); 7.69 (d, 1H); 8.30 (d, 1H); 8.85 (d, 1H); 9.15 (br, 1H); 9.30 (t, 1H); 9.71 (s, 1H).
2-[2-[(2-Hydroxyethyl)amino]ethyl]-5-[[2-(methylamino)ethyl]amino]isochino[8,7,6-cd]indazol- 6(2H)-on;
¹H-NMR (CDCl&sub3;): 2.61 (s, 3H); 3.06 (t, 2H); 3.20 (t, 2H); 3.58 (t, 2H); 3.67 (t, 2H); 3.88 (q, 2H); 4.65 (t, 2H); 5.10 (t, 1H); 7.05 (d, 1H); 7.70 (d, 1H); 8.33 (d, 1H); 8.81 (d, 1H); 8.99 (br, 2H); 9.35 (t, 1H); 9.66 (s, 1H).
2-[2-[(2-Hydroxyethy)amino]ethyl]-5-[[2-(dimethylamino)ethyl]amino]isochino[8,7,6- cd]indazol-6(2H)-on;
¹H-NMR (CDCl&sub3;): 2.42 (s, 6H); 2.75 (t, 2H); 3.18 (t, 2H); 3.58 (q, 2H); 3.63 (t, 2H); 3.68 (t, 2H); 4.61 (t, 2H); 5.15 (t, 1H); 6.99 (d, 1H); 7.66 (d, 1H); 8.31 (d, 1H); 8.80 (d, 1H); 9.11 (br, 1H); 9.35 (t, 1H), 9.65 (s, 1H).
2-[2-[(2-Hydroxyethyl)amino]ethyl]-5-[[2-(N-tert- butoxycarbonylamino)ethyl]amino]isochino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on;
¹H-NMR (CDCl&sub3; + GD&sub3;OD): 1.40 (s, 9H); 3.31 (m, 4H); 3.52 (q, 2H); 3.63 (t, 2H); 3.85 (t, 2H); 4.71 (t, 2H); 7.03 (d, 1H); 7.70 (d, 1H); 8.21 (dd, 1H); 8.76 (d, 1H); 9.61 (s, 1H).
2-[2-(N-tert-Butoxycarbonylamino)ethyl)]-5-[[2-[(2-hydroxyethyl)amino]ethyl]isochino[8,7,6- cd]indazol-6(2H)-on
¹H-NMR (CDCl&sub3; + CD&sub3;OD): 1.45 (s, 9H); 3.18 (m, 4H); 3.73 (q, 2H); 3.80 (m, 4H); 4.67 (t, 2H); 7.00 (d, 1H); 7.68 (d, 1H); 8.25 (dd, 1H); 8.75 (d, 1H); 9.60 (s, 1H).
2-[2-(Dimethylamino)ethyl]-5-[[2-[(2-hydroxyethyl)amino]ethyl]amino]isochino[8,7,6- cd]indazol-6(2H)-on;
Smp.: 156 bis 157ºC
¹H-NMR (CDCl&sub3;): 2.30 (s, 6H); 2.91 (m, 4H); 3.08 (t, 2H); 3.60 (t, 2H); 3.75 (m, 2H); 4.60 (t, 2H); 6.90 (d, 1H); 7.60 (d, 1H); 8.25 (dd, 1H); 8.75 (d, 1H); 9.45 (br, 1H); 9.60 (s, 1H).
2-[2-(Dimethylamino)ethyl]-5-[[2-(amino)ethyl]amino]isochino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on;
¹H-NMR (CDCl&sub3; + CD&sub3;OD): 2.30 (s, 6H); 2.95 (t, 2H); 3.13 (t, 2H); 3.65 (t, 2H); 4.58 (t, 2H); 7.04 (d, 1H); 7.70 (d, 1H); 8.18 (dd, 1H); 8.66 (d, 1H); 9.51 (s, 1H).

Beispiel 13

5-[[2-(Dimethylamino)ethyl]amino]-2-methylisochino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-on

5-Chloro-2-methylisochino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-on aus Beispiel 6 (0,013 g) wird zu 2- (Dimethylamino)ethylamin (0,34 ml) gegeben. Die gelbe Mischung wird schnell erhitzt und während 1 Stunde unter Rückfluß erhitzt. Das überschüssige Diamin wird aus der orangen Lösung durch einen leichten Stickstoffstrom entfernt. Die erhaltene orange Mischung wird durch diese Kieselgel-Säulenchromatographie mit einer Gradientenelution (1% Methanol/Chloroform (25 ml), 2% Methanol/Chloroform (25 ml), 4% Methanol/Chloroform (25 ml), 8% Methanol/Chloroform (25 ml), 12% Methanol/Chloroform (25 ml), 16% Methanol/Chloroform (25 ml), 24% Methanol/Chloroform (50 ml)) gereinigt und ergibt 5-[[2-(Dimethylamino)ethyl]- amino]-2-methylisochino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-on (0,010 g) als rötlich-orangen Feststoff.
Smp.: 212 bis 216ºC
¹H-NMR (CDCl&sub3;): 2.36 (s, 6H); 2.69 (t, 2H); 3.54 (q, 2H); 4.21(s, 3H); 6.91 (d, 1H); 7.54 (d, 1H); 8.00 (d, 1H); 8.79 (d, 1H); 9.19 (br, 1H); 9.67 (s, 1H).

Beispiel 14

2-[2-(Dimethylamino)ethyl)]-5-[[2-(dimethylamino)ethyl]amino]isochino[5,6,7- cd]indazol-6(2H)-on

In einer Stickstoffatmosphäre wird N,N-Dimethylethylendiamin (1,79 ml) zu einer gerührten Lösung von 2-[2-(Dimethylamino)ethyl]-5-chloroisochino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-on (0,539 g) in Pyridin (6,80 ml) gegeben, und die resultierende Lösung wird während 12 Stunden auf 80ºC erhitzt. Das Pyridin und überschüssiges N,N-Dimethylethylendiamin werden durch Rotationsverdampfen entfernt, und der erhaltene Rückstand wird durch Kieselgel- Säulenchromatographie durch Elution zunächst mit Methylenchlorid, dann mit Methylenchlorid/Methanol 95/5 und schließlich mit Methylenchlorid/Methanol/konzentrierter Ammoniak von 95/5/0,5 bis 95/5/1 v/v/v gereinigt. Die das gewünschte gelbe Produkt enthaltenden Fraktionen werden vereinigt und die Lösungsmittel durch Rotationsverdampfen entfernt. Der erhaltene Rückstand (0,529 g) wird aus Diisopropylether kristallisiert und ergibt 2- [2-(Dimethylamino)ethyl)]-5-[[2-(dimethylamino)ethyl]amino]isochino [5,6,7-cd]indazol-6(2H)- on als gelbes Pulver (0,291 g).
Smp.: 110-111ºC
¹H-NMR (CDCl&sub3;): 2.31 (s, 6 H); 2.38 (s, 6H); 2.71 (t, 2H); 2.92 (t, 2H); 3.55 (q, 2H); 4.65 (t, 2H); 7.01 (d, 1H); 7.69 (d, 1H); 8.10 (dd, 1H); 8.83 (d, 1H); 9.30 (br.t., 1H); 9.71 (s, 1H).

Beispiel 15

Isochino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-on

Unter Verwendung der Verfahren aus Beispiel 13 oder 14 werden die folgenden Verbindungen durch Reaktion von 2-[2-(N-tert-Butoxycarbonylamino)ethyl]-5- chloroisochino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-on, 2-[2-(Dimethylamino)ethyl]-5-chloroindazol[5,6,7- cd]indazol-6(2H)-on oder 2-[2-[(2-Hydroxyethyl)amino]ethyl]-5-chloroisochino[5,6,7- cd]indazol-6(2H)-on aus Beispiel 7 hergestellt:
¹H-NMR (CDCl&sub3;): 1.40 (s, 9H); 1.46 (s, 9H); 3.55 (q, 2H); 3.65 (q, 2H); 3.77 (q, 2H); 4.69 (t, 2H); 5.55 (br, 2H); 7.00 (d, 1H); 7.60 (d, 1H); 7.93 (dd, 1H); 8.70 (d, 1H); 9.10 (br.t., 1H); 9.38 (s, 1H).
2-[2-(N-tert-Butoxycarbonyl amino)ethyl]-5-[[2-(amino)ethyl]amino]isochino[5,6,7-cd]indazol- 6(2H)-on;
Smp.: 221-222ºC
¹H-NMR (CDCl&sub3;): 1.43 (s, 9H); 3.13 (t, 2H); 3.58 (q, 2H); 3.75 (q, 2H); 3.67 (t, 2H); 5.05 (br, 1H); 7.00 (d, 1H); 7.65 (d, 1H); 8.05 (dd, 1H); 8.60 (n, 1H); 9.30 (br., 1H); 9.75 (s, 1H).
2-[2-(N-tert-Butoxycarbonylamino)ethyl)]-S-[[2-[(2- hydroxyethylamino)ethyl]amino]isochino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-on;
¹H-NMR (CDCl&sub3; + CD&sub3;OD): 1.48 (s, 9H); 3.25 (m, 4H); 3.74 (q, 2H); 3.80 (m, 4H); 4. 68 (t, 2H); 7.01 (d, 1H); 7.72 (d, 1H); 8.09 (dd, 1H); 8.80 (d, 1H); 9.75 (s, 1H).
2-[2-(N-tert-Butoxycarbonylamino)ethyl)]-5-[[2-(dimethylamino)ethyl]amino]isochino[5,6,7- cd]indazol-6(2H)-on
¹H-NMR (CDCl&sub3;): 1.44 (s, 9H); 2.31 (s, 6H); 2.75 (t, 2H); 3.68 (q, 2H); 3.75 (q, 2H); 4.68 (t, 2H); 5.10 (br.m.,H); 7.03 (d, 1H); 7.70 (d, 1H); 8.15 (dd, 1H); 8.85 (d, 1H); 9.33 (br.t., 1H); 9.71 (s, 1H).
2-[2-(Dimethylamino)ethyl)-5-[[2-[(2-hydroxyethyl)amino]ethyl]amino]isochino[5,6,7- cd)indazol-6(2H)-on;
¹H-NMR (CDCl&sub3; + CD&sub3;OD): 2.40 (s, 6H); 2.95 (t, 2H); 3.23 (m, 4H); 3.82 (m, 4H); 4.70 (t, 2H); 7.05 (d, 1H); 7.70 (d, 1H); 8.13 (dd, 1H); 8.85 (d, 1H); 9.70 (s, 1H).
2-[2-(Dimethylamino)ethyl)-[[2-(amino)ethyl]amino]isochinol[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-on;
¹H-NMR (CDCl&sub3;): 2.39 (s, 6H); 2.95 (t, 2H); 3.15 (t, 2H); 3.68 (q, 2H); 4.68 (t, 2H); 7.00 (d, 1H); 7.65 (d, 1H); 8.12 (dd, 1H); 8.85 (d, 1H); 9.33 (br.t., 1H); 9.72 (s, 1H).
2-[2-[(2-Hydroxyethyl)amino]ethyl]-5-[[2-[(2-hydroxyethyl)amino]ethyl]amino]isochino[5,6,7- cd]indazol-6(2H)-on (Reaktion bei 52ºC in DMSO als Lösungsmittel durchgeführt);
Smp.: 148 bis 151ºC
¹H-NMR (D&sub2;O): 2.75 (m, 6H); 2.95 (m, 2H); 3.12 (m, 2H); 3.70 (m, 4H); 4.05 (m, 2H); 6.10 (d, 1H); 6.65 (d, 1H); 6.90 (d, 1H); 7.83 (s, 1H); 7.95 (d, 1H).
2-[2-[(2-Hydroxyethyl)amino]-5-[[2-(amino)ethyl]amino]isochino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-on;
¹H-NMR (CDCl&sub3; + CD&sub3;OD): 2.97 (t, 2H); 3.30 (m, 4H); 3.68 (t, 2H); 3.85 (t, 2H); 4.66 (t, 2H); 7.00 (d, 1H); 7.69 (d, 1H); 8.10 (dd, 1H); 8.83 (d, 1H); 9.76 (s, 1H).
2-[2-[(2-Hydroxyethyl)amino]ethyl]-5-[[3-(amino)propyl]amino]isochino[5,6,7-cd]indazol- 6(2H)-on;
¹H-NMR (CDCl&sub3; + CD&sub3;OD): 2.09 (m, 2H); 2.57 (t, 2H); 3.30 (m, 4H); 3.53 (t, 2H); 3.82 (t, 2H); 4.66 (t, 2H); 7.01 (d, 1H); 7.68 (d, 1H); 8.05 (dd, 1H); 8.80 (d, 1H); 9.68 (s, 1H).
2-[2-[(2-Hydroxyethyl)amino]ethyl]-5-[[2-(methylamino)ethyl]amino]isochino[5,6,7-cd]indazol- 6(2H)-on
¹H-NMR (CDCl&sub3; + CD&sub3;OD): 2.48 (s, 3H); 2.83 (t, 2H); 3.28 (m, 4H); 3.58 (t, 2H); 3.83 (t, 2H); 4.67 (t, 2H); 7.01 (d, 1H); 7.68 (d, 1H); 8.03 (dd, 1H); 8.80 (d, 1H); 9.67 (s, 1H).
2-[2-[(2-Hydroxyethyl)amino]ethyl]-5-[[2-(dimethylamino)ethyl]amino]isochino[5,6,7- cd]indazol-6(2H)-on
¹H-NMR (CDCl&sub3; + CD&sub3;OD): 2.31(s, 6H); 2.72 (t, 2H); 3.33 (m, 4H); 3.57 (t, 2H); 3.87 (t, 2H); 4.71 (t, 2H); 7.00 (d, 1H); 7.71 (d, 1H); 8.09 (dd, 1H); 8.81 (d, 1H); 9.70 (s, 1H).
2-[2-[(2-Hydroxyethyl)amino]ethyl]-5-[[2-(N-tert- butoxycarbonylamino)ethyl]amino]isochino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-on
¹H-NMR (CDCl&sub3; + CD&sub3;OD): 1.41 (s, 9H); 3.29 (m, 4H); 3.56 (t, 2H); 3.79 (t, 2H); 3.83 (t, 2H); 4.68 (t, 2H); 7.05 (d, 1H); 7.68 (d, 1H); 8.08 (dd, 1H); 8.80 (d, 1H); 9.68 (s, 1H).

Beispiel 16

Entfernung der t-Butoxycarbonyl-Schutzgruppe

Unter einer Stickstoffatmosphäre wird eine ethanolische Lösung von wasserfreiem HCl (5N; 0,40 ml) in eine gerührte Suspension von 2-[2-(N-tert-Butoxycarbonylamino)ethyl]-5-[[2- (N-tert-butoxycarbonylamino)ethyl]amino]isochino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on aus Beispiel 10 (0,104 g) in absolutem Ethanol (2,1 ml) getropft. Während der Zugabe von ethanolischer HCl wird anfängliches Auflösen des Ausgangsmaterials gefolgt von Ausfällung eines dunkelroten Feststoffs beobachtet. Dieser Feststoff wird dann in absolutem Ethanol erneut gelöst, und die Lösung wird während 2 Stunden, 30 Minuten auf 40ºC erhitzt. Während des Erhitzens wird die allmähliche Bildung eines rot-amaranth-farbenen Niederschlags beobachtet. Nach Abkühlen auf Raumtemperatur wird Diethylether (10 ml) zugegeben, und der Niederschlag wird durch Absaugen unter einer Stickstoffschicht isoliert und ergibt 2-[2-(Amino)ethyl]-5-[[2- (amino)ethyl]amino]isochino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on-Trihydrochlorid (0,070 g).
Smp.: 247 bis 250ºC
¹H-NMR (D&sub2;O): 3.40 (t, 2H); 3.70 (t, 2H); 3.95 (t, 2H); 4.87 (t, 2H); 7.05 (d, 1H); 7.78 (d, 1H); 8.04 (dd, 1H); 8.62 (d, 1H); 9.10 (s, 2H).
UV (H&sub2;O): λmax (E1%) = 230 nm (650 cm); 240 nm (555 cm); 370 nm (244 cm); 591 nm (342 cm).

Beispiel 17

Durch Befolgen des Verfahrens aus Beispiel 16 werden die folgenden Verbindungen als Trihydrochlorid-Salz ausgehend von den geeigneten N-tert-Butoxycarbonyl-Derivaten der Beispiele 11, 12, 14 oder 15 hergestellt:
2-[2-[(2-Hydroxyethyl)amino]ethyl]-5-[(2-(amino)ethyl]amino]isochino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)- on;
¹H-NMR (D&sub2;O): 3.07 (t, 2H); 3.39 (m, 4H); 3.69 (t, 2H); 3.88 (t, 2H); 4.83 (t, 2H); 7.05 (d, 1H); 7.70 (d, 1H); 8.33 (dd, 1H); 8.78 (d, 1H); 9.15 (s, 1H).
2-[2-(Amino)ethyl)]-5-[[2-[(2-hydroxyethyl)amino]ethyl]amino]isochino[8,7,6-cd]indazol- 6(2H)-on;
¹H-NMR (D&sub2;O): 3.28 (t, 2H); 3.31 (m, 4H); 3.85 (m, 4H); 4.90 (t, 2H); 7.03 (d, 1H); 7.70 (d, 1H); 8.35 (dd, 1H); 8.72 (d, 1H); 9.77 (s, 1H).
2-[2-(Amino)ethyl)]-5-[[2-(dimethylamino)ethyl]amino]isochino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on
Smp.: 224ºC (Zers.)
¹H-NMR (D&sub2;O): 3.00 (s, 6H); 3.60 (t, 2H); 3.70 (t, 2H); 4.07 (t, 2H); 4.93 (t, 2H); 7.20 (d, 1H); 7.95 (d, 1H); 8.43 (dd, 1H); 8.77 (d, 1H); 9.43 (s, 1H).
UV (HCl 0.1 N): λmax (E1%) = 236 nm (485 cm); 382 nm (205 cm); 507 nm (232 cm).
2-[2-(Amino)ethyl]-5-[[2-[(amino)ethyl]amino]isochino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-on
Smp.: > 260ºC
¹H-NMR (D&sub2;O): 3.42 (t, 2H); 3.75 (t, 2H); 4.00 (t, 2H); 5.05 (t, 2H); 7.32 (d, 1H); 8.09 (d, 1H); 8.62 (d, 1H); 8.87 (d, 1H); 9.55 (s, 1H)
UV (HCl 0.1 N): λmax (E1%) = 245 nm (622 cm); 275 nm (181 cm); 351 nm (258 cm); 472 nm (327 cm), 494 nm (353 cm).
2-[2-(Amino)ethyl)]-5-[[-[(2-hydroxyethyl)amino]ethyl]amino]isochino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)- on;
2-[2-(Amino)ethyl)]-5-[[2-(dimethylamino)ethyl]amino]isochino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)- on;

Beispiel 18

2-[2-(Dimethylamino)ethyl]-5-[[2-(amino)ethyl]amino]isochino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)- on-dimaleat

Eine Lösung von Maleinsäure (0,030 g) in absolutem Ethanol (0,4 ml) wird tropfenweise zu einer gerührten Lösung von 2-[2-(Dimethylamino)ethyl]-5-[[2- (amino)ethyl]amino]isochino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-6(2H)-on aus Beispiel 12 (0,030 g) in absolutem Ethanol (1,5 ml) gegeben, die bei 50ºC gehalten wurde. Nach Beendigung der Zugabe wird die Reaktionsmischung während 3 Minuten bei 50ºC gehalten und dann auf Raumtemperatur abgekühlt. Nach 1 Stunde wird das rot-amaranth-farbene kristalline Material, das sich abgetrennt hat, abfiltriert, mit Ethanol gewaschen und unter Vakuum bei 40ºC getrocknet und ergibt 2-[2- (Dimethylamino)ethyl]-5-[[2-(amino)ethyl]amino]isochino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on-dimaleat (0,029 g).
Smp.: 175 bis 175,5ºC
¹H-NMR (D&sub2;O): 3.00 (s, 6 H); 3.40 (t, 2H); 3.80 (t, 2H); 3.93 (t, 2H); 4.90 (t, 2H); 6.00 (s, 4H); 7.00 (d, 1H); 7.70 (d, 1H); 7.80 (d, 1H); 8.55 (d, 1H); 9.00 (s, 1H).
UV (HCl 0.1 N): λmax (E1%) = 236 nm (436 cm); 382 nm (169 cm); 507 nm (190 cm).

Beispiel 19

Durch Befolgen des Verfahrens aus Beispiel 18 werden die folgenden Maleat-Salze durch Versalzung der geeigneten Isochinoindazol-6(2H)-one mit Maleinsäure hergestellt:
2-[2-(Dimethylamino)ethyl)]-5-[[2-(dimethylamino)ethyl]amino]isochino[8,7,6- cd]indazol-6(2H)-on-dimaleat
Smp.: 189 bis 191ºC
¹H-NMR (DMSO-d&sub6;): 2.88 (s, 12H); 3.37 (t, 2H); 3.70 (t, 2H); 3.95 (q, 2H); 5.01 (t, 28); 6.00 (s, 4H); 7.38 (d, 1H); 8.20 (dd, 1H); 8.85 (d, 1H); 9.20 (br.t., 1H); 9.55 (s, 1H).
UV (H&sub2;O): λmax (E1%) = 368 nm (154 cm); 469 nm (206 cm); 490 nm (211 cm).
2-[2-(Dimethylamino)ethyl)]-5-[[2-(dimethylamino)ethyl]amino]isochino[5,6,7-cd]indazol- 6(2H)-on-dimaleat
Smp.: 142 bis 146ºC
¹H-NMR (D&sub2;O): 3.00 (s, 6H); 3.05 (s, 6H); 3.60 (t, 2H); 3.92 (t, 2H); 4.08 (t, 2H); S. 07 (t, 2H); 6.15 (s, 4H); 7.20 (d, 1H); 7.95 (d, 1H); 8.20 (d, 1H); 8.75 (d, 1H); 9.30 (s, 1H).
UV (H&sub2;O): λmax (E1%) = 292 nm (108 cm); 352 nm (133 cm); 476 nm (215).
2-[2-(Dimethylamino)ethyl]-5-[[2-[(2-hydroxyethyl)amino]ethyl]amino]isochino [8,7,6- cd] indazol-6(2H)-on-dimaleat
Smp.: 156-157ºC
¹H-NMR (D&sub2;O): 3.05 (s, 6H); 3.30 (m, 2H); 3.54 (t, 2H); 3.88 (m, 4H); 4.03 (t, 2H); 4.96 (t, 2H); 6.00 (s, 4H); 7.00 (d, 1H); 7.70 (d, 1H); 7.83 (dd, 1H); 8.57 (d, 1H); 9.05 (s, 1H)
UV (H&sub2;O) λmax (E1%) = 368 nm (1057 cm); 491 nm (210 cm).

Claims

1. Verbindung der Formel (I):

wobei R Wasserstoff oder Hydroxy ist;

einer von X und Y ein Kohlenstoffatom ist und der andere ein Stickstoffatom ist, unter der Voraussetzung, daß, falls Y Stickstoff ist, R Wasserstoff ist;

A und B gleich oder verschieden sind und ausgewählt werden aus der Gruppe aus C&sub1;C&sub1;&sub0; Alkyl oder Phenylalkyl; C&sub2;-C&sub1;&sub0; Alkyl mit einem oder zwei Substituenten, ausgewählt aus der aus OR&sub1; und NR&sub2;R&sub3; bestehenden Gruppe; C&sub2;-C&sub1;&sub0; Alkyl, das durch ein oder zwei Sauerstoffatome oder durch eine NR&sub4;-Gruppe unterbrochen ist, und wobei dieses C&sub2;-C&sub1;&sub0; Alkyl gegebenenfalls durch eine oder zwei Hydroxy(OH)- oder NR&sub2;R&sub3;-Gruppen substituiert ist;

R&sub1; ausgewählt wird aus der aus Wasserstoff, C&sub1;-C&sub6; Alkyl, Phenyl, Phenylalkyl, -S(O&sub2;)R&sub5;, C&sub2;-C&sub6; Alkyl, gegebenenfalls durch NR&sub2;R&sub3; substituiert, bestehenden Gruppe;

R&sub2; und R&sub3; gleich oder verschieden sein können und ausgewählt werden aus der aus Wasserstoff, C&sub1;-C&sub1;&sub0; Alkyl, Phenylalkyl, Phenyl, C&sub2;-C&sub1;&sub0; Alkyl, substituiert mit einer oder zwei Hydroxy(OH)-Gruppen, bestehenden Gruppe, oder R&sub2; und R&sub3; gemeinsam mit dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, einen Ethyleniminring oder einen 5- oder 6-gliedrigen aromatischen oder nicht-aromatischen heterocyclischen Ring bilden, der gegebenenfalls ein anderes Heteroatom wie Schwefel, Sauerstoff oder Stickstoff enthält;

R&sub4; ausgewählt wird aus der aus Wasserstoff, C&sub1;-C&sub1;&sub0; Alkyl, C&sub2;-C&sub1;&sub0; Hydroxyalkyl, C&sub2;- C&sub1;&sub0; Alkyl, substituiert durch NR&sub2;R&sub3;, Phenylalkyl, Phenyl bestehenden Gruppe;

R&sub5; ausgewählt wird aus der aus C&sub1;-C&sub1;&sub0; Alkyl, Phenylalkyl bestehenden Gruppe; wobei Phenyl Phenylringe bedeutet, die gegebenenfalls einen oder zwei Substituenten enthalten können, die ausgewählt werden aus C&sub1;-C&sub4; Alkylgruppen, CF&sub3;, Halogenatomen, Nitro-, Amino-, Acetylamino-, Formylamino-, Dimethylamino-, Diethylamino-, Hydroxy-, Methoxy- und Ethoxygruppen, und wobei Phenylalkyl bevorzugt Benzyl und 4-Methoxybenzyl ist, wobei die Verbindungen (I) als freie Basen oder Salze mit pharmazeutisch verträglichen Säuren vorliegen.

2. Verbindung nach Anspruch 1, wobei der heterocyclische Ring ausgewählt wird aus der aus 1-Imidazolyl, 1-Pyrrolyl, 1-Tetrahydropyrrolyl, 1-Pyrazolyl, 4-Morpholinyl, 1- Piperidinyl, 1-Piperazinyl, 1-(4-Methyl)-piperazinyl und 1-(4-Benzyl)-piperazinyl bestehenden Gruppe.

3. Verbindung nach Anspruch 1, wobei Y Kohlenstoff ist und X Stickstoff ist.

4. Verbindung nach Anspruch 1, wobei Y Stickstoff ist und X Kohlenstoff ist.

5. Verbindung nach Anspruch 1, wobei R Wasserstoff ist.

6. Verbindung nach Anspruch 1, wobei R Wasserstoff ist und A und B unabhängig voneinander ausgewählt werden aus der Gruppe, die besteht aus: -(CH&sub2;)p-NH&sub2;, wobei p die ganze Zahl 2 oder 3 ist; -(CH&sub2;)p-NR&sub2;R&sub3;, wobei p wie oben definiert ist und R&sub2; und R&sub3; Methyl sind; -(CH&sub2;)p-NR&sub2;R&sub3;, wobei p wie oben definiert ist und R&sub2; Wasserstoff ist und R&sub3; Methyl ist; -(CH&sub2;)p-OH, wobei p wie oben definiert ist;- (CH&sub2;)p-NH-(CH&sub2;)q-OH, wobei p und q unabhängig voneinander eine ganze Zahl sind, die ausgewählt wird aus der aus 2 und 3 bestehenden Gruppe.

7. Verbindung nach Anspruch 1, ausgewählt aus der Gruppe, die besteht aus

2-[2[(2-Hydroxyethyl)amino]ethyl]-5-[[2-[(2-hydroxyethyl)amino]ethyl]amino]isochino-[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on;

2-[2-[(2-Hydroxyethyl)amino]ethyl]-5-[(3-aminopropyl)amino]isochino- [8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on;

2-[2-[(2-Hydroxyethyl)amino]ethyl]-5-[(2-aminoethyl)amino]isochino- [8,7,6-cd] indazol-6(2H)-on;

2-[2-[(2-Hydroxyethyl)amino]ethyl]-5-[[2-(methylamino)ethyl]amino]- isochino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on;

2-[2-[(2-Hydroxyethyl)amino]ethyl]-5-[[2-(dimethylamino)ethyl]amino]- isochino[8,7,6-cd] indazol-6(2H)-on;

2-[2-[(2-Hydroxyethyl)amino]ethyl]-5-[[2-[(2-hydroxyethyl)amino]ethyl]- amino]isochino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-on;

2-[2-[(2-Hydroxyethyl)amino]ethyl]-5-[(3-aminopropyl)amino]isochino- [5,6,7-cd]indazol-6(2H)-on;

2-[2-[(2-Hydroxyethyl)amino]ethyl]-5-[(2-aminoethyl)amino]isochino- [5,6,7-cd] indazol-6(2H)-on;

2-[2-[(2-Hydroxyethyl)amino]ethyl]-5-[[2-(methylamino)ethyl]amino]- isochino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-on;

2-[2-[(2-Hydroxyethyl)amino]ethyl]-5-[[2-(dimethylamino)ethyl]amino]- isochino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-on;

5-[[2-[(2-Hydroxyethyl)amino]ethyl]amino]-2-[2-(dimethylamino)ethyl]- isochino[8,7,6-cd] indazol-6(2H)-on;

5-[(3-Aminopropyl)amino]-2-[2-(dimethylamino)ethyl]isochino[8,7,6-cd]- indazol-6(2H)-on;

5-[(2-Aminoethyl)amino]-[2-[2-(dimethylamino)ethyl]isochino[8,7,6-cd]- indazol-6(2H)-on;

5-[[2-(Methylamino)ethyl]amino]-2-[2-(dimethylamino)ethyl]isochino- [8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on;

5-[[2-(Dimethylamino)ethyl]amino]-2-[2-(dimethylamino)ethyl]isochino- [8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on;

5-[[2-[(2-Hydroxyethylb)amino]ethyl]amino]-2-[2-(dimethylamino)ethyl]- isochino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-on;

5-[(3-Aminopropyl)amino]-2-[2-(dimethylamino)ethyl]isochino[5,6,7-cd]- indazol-6(2H)-on;

5-[(2-Aminoethyl)amino]-[2-(dimethylamino)ethyl]isochino[5,6,7-cd]- indazol-6(2H)-on;

5-[[2-(Methylamirio)ethyl]amino]-2-[2-(dimethylamino)ethyl]isochino- [5,6,7-cd]indazol-6(2H)-on;

5-[[2-(Dimethylamino)ethyl]amino]-2-[2-(dimethylamino)ethyl]isochino- [5,6,7-cd]indazol-6(2H)-on;

2-[2-Aminoethyl]-5-[[2-[(2-hydroxyethyl)amino]ethyl]amino]isochino- [8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on;

2-[2-Aminoethyl]-5-[(3-aminopropyl)amino]isochino[8,7,6-cd]indazol- 6(2H)-on;

2-[2-Aminoethyl]-5-[(2-aminoethyl)amino]isochino(8,7,6-cd]indazol- 6(2H)-on;

2-[2-Aminoethyl]5-[(2-(methylamino)ethyl]amino]isochino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on;

2-[2-Aminoethyl]-5-[[2-(dimethylamino)ethyl]amino]isochino[8,7,6-cd]in- dazol-6(2H)-on;

2-[3-Aminopropyl]-5-[[2-[(2-hydroxyethyl)amino]ethyl]amino]isochino- [8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on;

2-[3-Aminopropyl]-5-[(3-aminopropyl)amino]isochino[8,7,6-cd]indazol- 6(2H)-on;

2-[3-Aminopropyl]-5-[(2-aminoethyl)amino]isochino[8,7,6-cd]indazol- 6(2H)-on;

2-[3-Aminopropyl]-5-[[2-(methylamino)ethyl]amino]isochino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on;

2-[3-Aminopropyl]-5-[[2-(dimethylamino)ethyl]amino]isochino[8,7,6-cd]- indazol-6(2H)-on;

5-[[2-[(2-Hydroxyethyl)amino]ethyl]amino]-2-[3-aminopropyl]isochino- [5,6,7-cd]indazol-6(2H)-on;

5-[[2-[(2-Hydroxyethyl)amino]ethyl]amino]-2-[2-aminoethyl]isochino- [5,6,7-cd]indazol-6(2H)-on;

2-[(2-Methylamino)ethyl]-5-[[2-[(2-hydroxyethyl)amino]ethyl]amino]isochino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on;

2-[(2-Methylamino)ethyl]-5-[(3-aminopropyl)amino]isochino[8,7,6-cd]- indazol-6(2H)-on;

2-[(2-Methylamino)ethyl]-5-[(2-aminoethyl)amino]isochino[8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on;

2-[(2-Methylamino)ethyl]-5-[[2-(methylamino)ethyl]amino]isochino- [8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on;

2-[(2-Methylamino)]ethyl]-5-[[2-(dimethylamino)ethyl]amino]isochino- [8,7,6-cd]indazol-6(2H)-on;

2-[(2-Methylamino)ethyl]-5-[[2-[(2-hydroxyethyl)amino]ethyl]amino]isochino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-on;

2-[(2-Methylamino)ethyl]-5-[(3-aminopropyl)amino]isochino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-on;

2-[(2-Methylamino)ethyl]-5-[(2-aminoethyl)amino]isochino[5,6,7-cd]indazol-6(2H)-on;

2-[(2-Methylamino)ethyl]-5-[[2-(methylamino)ethyl]amino]isochino- [5,6,7-cd]indazol-6(2H)-on;

2-[(2-Methylamino)ethyl]-5-[[2(dimethylamino)ethyl]amino]isochino- [5,6,7-cd]indazol-6(2H)-on;

2-Methyl-5-[[2-(dimethylamino)ethyl]amino]isochino[8,7,6-cd]indazol- 6(2H)-on; und

2-Methyl-5-[[2-(dimethylamino)ethyl]amino]isochino[5,6,7-cd]indazol- 6(2H)-on, als freie Basen und Salze mit pharmazeutisch verträglichen Säuren.

8. Pharmazeutische Zusammensetzung, die geeignet ist für die Behandlung von Tumoren in einem Patienten, umfassend eine Verbindung nach Anspruch 1 und einen pharmazeutisch verträglichen Verdünner oder Excepienten.

9. Verwendung der Verbindung nach Anspruch 1 zur Herstellung eines Medikaments für die Behandlung von Tumoren.

10. Verfahren für die Herstellung einer Verbindung der Formel (I)

wobei R Wasserstoff oder Hydroxy ist;

A und B gleich oder verschieden sind und ausgewählt werden aus der Gruppe aus C&sub1;-C&sub1;&sub0; Alkyl oder Phenylalkyl;

C&sub2;-C&sub1;&sub0; Alkyl mit einem oder zwei Substituenten, ausgewählt aus der aus ORI und NR&sub2;R&sub3; bestehenden Gruppe; C&sub2;-C&sub1;&sub0; Alkyl, das durch ein oder zwei Sauerstoffatome oder durch eine NR&sub4;-Gruppe unterbrochen ist, und wobei dieses C&sub2;-C&sub1;&sub6; Alkyl gegebenenfalls durch eine oder zwei Hydroxy(OH)- oder NR&sub2;R&sub3;-Gruppen substituiert ist;

R&sub2; und R&sub3; gleich oder verschieden sein können und ausgewählt werden aus der aus Wasserstoff, C&sub1;-C&sub1;&sub0; Alkyl, Phenylalkyl, Phenyl, C&sub2;-C&sub1;&sub0; Alkyl, substituiert mit einer oder zwei Hydroxy(OH)-Gruppen, bestehenden Gruppe, oder R&sub2; und R&sub3; gemeinsam mit dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, einen Ethyleniminring oder einen 5- oder 6-gliedrigen aromatischen oder nicht- aromatischen heterocyclischen Ring bilden, der gegebenenfalls ein anderes Heteroatom wie Schwefel, Sauerstoff oder Stickstoff enthält;

R&sub4; ausgewählt wird aus der aus Wasserstoff, C&sub1;-C&sub1;&sub0; Alkyl, C&sub2;-C&sub1;&sub6; Hydroxyalkyl, C&sub2;-C&sub1;&sub0; Alkyl, substituiert durch NR&sub2;R&sub3;, Phenylalkyl, Phenyl bestehenden Gruppe;

R&sub5; ausgewählt wird aus der aus C&sub1;-C&sub1;&sub0; Alkyl, C&sub7;-C&sub1;&sub0; Aralkyl bestehenden Gruppe; wobei Phenyl Phenylringe bedeutet, die gegebenenfalls einen oder zwei Substituenten enthalten können, die ausgewählt werden aus C&sub1;-C&sub4; Alkylgruppen, CF&sub3;, Halogenatomen, Nitro-, Amino-, Acetylamino-, Formylamino-, Dimethylamino-, Diethylamino-, Hydroxy-, Methoxy- und Ethoxygruppen, und wobei Phenylalkyl bevorzugt Benzyl und 4-Methoxybenzyl ist,

wobei das Verfahren die Schritte umfaßt:

a) Umsetzung von Verbindungen der Formel (III)

wobei Z OTs (wobei OTs die p-Toluolsulfonyloxy-Gruppe ist) oder Cl ist, und W F oder Cl ist, unter der Voraussetzung, daß Z und W nicht gleichzeitig Cl sein können, mit einem Alkylhydrazin der Formel (IV):

NH&sub2;-NH-B' (IV)

wobei B' die Bedeutungen von B wie in Formel (I) definiert aufweist, oder B' eine Gruppe ist, die durch Entfernung von Schutzgruppen für die in B' gegebenenfalls vorhandenen primären oder sekundären Amine in B umgewandelt werden kann, zur Herstellung einer Verbindung der Formel (II)

b) die dann mit einer Verbindung der Formel (V) umgesetzt wird:

NH&sub2;-A' (V)

wobei A' dieselben Bedeutungen hat wie das in Formel (I) definierte A, oder A' eine Gruppe ist, die durch Entfernung von Schutzgruppen für die gegebenenfalls in A' vorhandenen primären oder sekundären Amine in A umgewandelt werden kann, zur Herstellung der Verbindungen der Formel (I')

und wobei A' und/oder B' von A und/oder B verschieden sind, Verbindungen der Formel (I') in Verbindungen der Formel (I) durch Entfernung der Schutzgruppen für die gegebenenfalls in A' vorhandenen primären und/oder sekundären Amine umgewandelt werden.

11. Verfahren zur Herstellung von Verbindungen der Formel (III')

wobei X, Y, R und W wie in Anspruch 10 definiert sind, wobei das Verfahren die folgenden Schritte umfaßt:

c) die Friedel-und-Crafts-Acylierung von 1,4-Difluorbenzol mit Pyridin- 3,4-dicarbonsäureanhydriden (VI), wobei R&sub6; Wasserstoff oder eine geeignete Schutzgruppe der Hydroxyfunktion ist, wie Methoxy oder Benzyloxy, in Gegenwart von AlCl&sub3;, was zu den regioisomeren Ketosäuren (VIIa) und (VIIb) führt;

d) Reaktion der Ketosäuren (VIIA) und (VIIb) mit Natriummethoxid in Methanol, was zu den regioisomeren Methoxy-substituierten Ketosäuren (VIIIa) und (VIIIb) führt, wobei die Verbindungen (VIIIa)

und (VIIIb), bei denen R&sub5; Wasserstoff ist, als solche im folgenden Schritt eingesetzt werden können; wenn R&sub6; von Wasserstoff

verschieden ist, die Verbindung (VIIIa) durch Kristallisation gereinigt und als reines Regioisomer umgesetzt wird;

e) Reduktion der Verbindung (VIIIa) (R&sub5; von Wasserstoff verschieden) mit Zn/Cu-Paar in Ameisensäure, was zu (IX) führt; wenn R&sub6; Wasserstoff ist, können die Säuren (IXa) und (IXb) durch Chromatographie getrennt werden, was zu den reinen isolierten Regioisomeren (IXa) und (IXb) führt;

f) Cyclisierung der geeigneten Säure (IX) durch Erhitzen einer Suspension der Verbindung in Polyphosphorsäure, was zu Benzo[g]isochinolin (X) führt;

g) Oxidation der Verbindung (X) zum entsprechenden Dion (XI) mit Cerammoniumnitriat in einem Gemisch von Acetonitril und Wasser;

h) Entfernung der Methoxygruppe des Dions (XI) durch Aluminiumchlorid in Methylenchlorid, was zu Verbindungen (XII) führt, welche einem Gemisch von 9-Fluoro-6-hydroxy- und 9-Chloro- 6-hydroxy-5,10-dionen (XII) entsprechen, aufgrund der partiellen Substitution des austretenden Fluorids mit Hilfe von AlCl&sub3; führt; und

i) abschließende Funktionalisierung der freien Hydroxygruppe von (XII) mit Hilfe von Toluolsulfonylchlorid im Pyridin zu den gewünschten Verbindungen (III') führt, wobei Z gleich OTs; wenn R&sub6; eine Schutzgruppe der Hydroxyfunktion ist, kann sie entsprechend den den Experten gut bekannten Methoden entfernt werden, was zur Verbindung (III) führt, wobei R OH ist, entsprechend dem folgenden Schema:

12. Verfahren zur Herstellung von Verbindungen der Formel (III")

wobei R wie oben definiert ist,

wobei dieses Verfahren die folgenden Schritte umfaßt:

a. Lithiierung von 1-Chloro-4-fluorbenzol mit einem Alkyllithium-Reagenz wie sec-Butyllithium in THF bei - 75ºC, wobei 1-Lithio-5-chloro-2- fluorobenzol (XIV) entsteht;

b. Acylierung von 1-Lithio-5-chloro-2-fluorobenzol (XIV), das in situ nach dem obigen Schritt hergestellt wurde, mit Pyridin-3,4- dicarbonsäureanhydriden (VI) zur Herstellung des Gemisches von Ketosäuren (XVa) und (XVb), die in die einzelnen reinen Verbindungen durch Umkristallisation aus einem Lösungsmittel oder durch Sublimation aufgetrennt werden können;

c. Reduktion der reinen Ketosäure (XVa) mit Zn/Cu-Paar oder Zn-Pulver in 75%iger wäßriger Ameisensäure (15' bei Raumtemperatur, dann 80ºC, 2 Stunden), was zu (XVI) führt; und

d. oxidative Cyclisierung von (XVI) mit rauchender Schwefelsäure (20-30 % SO&sub3;, 10', 130ºC) zur Herstellung der 9-Chloro-6-fluoro- benzo[g]isochinolin-5,10-dione der Formel (III"), entsprechend dem folgenden Schema: