CN118240887B - 一种利用含铵离子溶液产油脂的方法 - Google Patents
一种利用含铵离子溶液产油脂的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN118240887B CN118240887B CN202410634225.6A CN202410634225A CN118240887B CN 118240887 B CN118240887 B CN 118240887B CN 202410634225 A CN202410634225 A CN 202410634225A CN 118240887 B CN118240887 B CN 118240887B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- ammonium ion
- containing solution
- ammonium
- grease
- mango
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 title claims abstract description 99
- 239000004519 grease Substances 0.000 title claims abstract description 38
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims abstract description 26
- DTOSIQBPPRVQHS-PDBXOOCHSA-N alpha-linolenic acid Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCCCCC(O)=O DTOSIQBPPRVQHS-PDBXOOCHSA-N 0.000 claims abstract description 74
- 241000195493 Cryptophyta Species 0.000 claims abstract description 38
- 235000020661 alpha-linolenic acid Nutrition 0.000 claims abstract description 37
- 229960004488 linolenic acid Drugs 0.000 claims abstract description 37
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 26
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 26
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims abstract description 17
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 7
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims abstract description 5
- 239000010779 crude oil Substances 0.000 claims abstract description 4
- 238000000227 grinding Methods 0.000 claims abstract description 4
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims abstract description 4
- 238000005286 illumination Methods 0.000 claims description 29
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 28
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 20
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 claims description 20
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 claims description 20
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 14
- RUTXIHLAWFEWGM-UHFFFAOYSA-H iron(3+) sulfate Chemical compound [Fe+3].[Fe+3].[O-]S([O-])(=O)=O.[O-]S([O-])(=O)=O.[O-]S([O-])(=O)=O RUTXIHLAWFEWGM-UHFFFAOYSA-H 0.000 claims description 14
- 229910000360 iron(III) sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 14
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 14
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 claims description 14
- -1 ammonium ions Chemical class 0.000 claims description 12
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 claims description 11
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 claims description 8
- PAWQVTBBRAZDMG-UHFFFAOYSA-N 2-(3-bromo-2-fluorophenyl)acetic acid Chemical compound OC(=O)CC1=CC=CC(Br)=C1F PAWQVTBBRAZDMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N Ammonium bicarbonate Chemical compound [NH4+].OC([O-])=O ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000001099 ammonium carbonate Substances 0.000 claims description 3
- 235000012501 ammonium carbonate Nutrition 0.000 claims description 3
- 241000586743 Micractinium Species 0.000 abstract description 19
- 239000003921 oil Substances 0.000 abstract description 6
- 244000005700 microbiome Species 0.000 abstract description 4
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 abstract description 3
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 abstract description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 93
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 16
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 13
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 13
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 7
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 7
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000002351 wastewater Substances 0.000 description 4
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000004626 essential fatty acids Nutrition 0.000 description 3
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 3
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 3
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 3
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 2
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 241000195628 Chlorophyta Species 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 238000007664 blowing Methods 0.000 description 1
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000005065 mining Methods 0.000 description 1
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 1
- 230000029553 photosynthesis Effects 0.000 description 1
- 238000010672 photosynthesis Methods 0.000 description 1
- 230000000243 photosynthetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 238000004064 recycling Methods 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 235000021122 unsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000004670 unsaturated fatty acids Chemical class 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
- C12P7/6409—Fatty acids
- C12P7/6427—Polyunsaturated fatty acids [PUFA], i.e. having two or more double bonds in their backbone
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/89—Algae ; Processes using algae
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明公开了一种利用含铵离子溶液产油脂的方法，属于微生物发酵技术领域。本发明的目的是为了促进含铵离子溶液的资源化利用，挖掘产含α‑亚麻酸油脂的微生物。具体方法：调整含铵离子溶液pH并灭菌；接种微芒藻Micractinium sp.HDL02发酵；发酵液经离心、干燥、研磨与有机溶剂抽提即得到含有α‑亚麻酸的粗油。本发明获得的油脂产量达到309~534 mg/L，其中α‑亚麻酸达到170~292 mg/L，显著高于常规培养基的产量。
Description
技术领域
本发明属于微生物发酵技术领域，具体涉及一种微芒藻利用含铵离子溶液产油脂的方法。
背景技术
α-亚麻酸是一种含有三个顺式双键的不饱和脂肪酸，与机体免疫力调节、內源神经修复相关。α-亚麻酸是一种必需脂肪酸，不能通过人体内代谢过程产生，需要通过饮食获得。一些微藻类在生长过程中产生含α-亚麻酸的油脂，可用来提升人类食品或动物饲料中的营养水平，但微藻培养成本较高，限制了利用微藻生产含α-亚麻酸油脂的应用。利用废水培养微藻，可大大降低微藻培养过程中的水源和氮源成本。但含有高浓度铵的废水对微藻光合系统有毒性，通常需要将铵浓度稀释到2 mM以下才能用来培养微藻。因此有必要挖掘含较高浓度铵离子溶液的使用场景，以回收其中氮元素，促进含铵废水的资源化应用。本发明针对含铵废水的利用问题，提供一种微芒藻利用含铵离子溶液产含α-亚麻酸油脂的方法。目前尚无微芒藻属微生物利用含较高浓度铵离子溶液产含α-亚麻酸油脂的报道。
本发明中，微芒藻HDL02的拉丁名为Micractinium sp. HDL02，保藏于黑龙江大学微生物重点实验室，本发明中微芒藻HDL02的来源为：大庆地区微藻多样性分析及藻种资源挖掘 [D]. 黑龙江大学, 2016。
发明内容
为了促进含铵离子溶液的资源化利用，挖掘产含α-亚麻酸油脂的微生物。本发明提供一种微芒藻利用含铵离子溶液产含α-亚麻酸油脂的方法。
本发明的微芒藻利用含铵离子溶液产含α-亚麻酸油脂的方法，按照以下步骤进行：
步骤一、将由氯化铵、硝酸铵或碳酸铵提供铵离子的、铵离子浓度为10~80 mM的含铵离子溶液pH调整为6.5~8.5，121℃灭菌15 min，按照接种量0.1~0.3 g/L将微芒藻Micractinium sp. HDL02接种至上述灭菌溶液中，在光照强度3000 lux、光照周期12h /12h（光/暗）、温度23~28℃、摇床转速120rpm的条件下发酵6~8 d，得到发酵液。
步骤二、将步骤一得到的发酵液离心获得微芒藻藻泥，将藻泥干燥后研磨，以有机溶剂抽提即得到含有α-亚麻酸的粗油。
本发明步骤一中含铵离子溶液还包括以下组分：重量份数比0.02~0.06份硫酸镁、0.02~0.08份氯化钙、0.04~0.1份硫酸铁、0.1~0.3份磷酸氢二钠、0.5~1份微量元素溶液、8~15份葡萄糖和800~900份水。
有益效果：
1. 本发明中的微芒藻属（Micractinium sp.）藻株HDL02可通过光能自养和化能异养两种方式生长。可在利用CO2进行光合作用的同时，利用含铵离子溶液中的氮、磷等营养元素。利用本发明的方法，微藻在合成高附加值产物的同时可实现含铵离子溶液中氮元素的高效利用。
2. 本发明提供的方法操作简单，所用试剂价格低廉。本发明中微芒藻属（Micractinium sp.）藻株HDL02在含铵离子溶液中培养时，油脂产量为309~534 mg/L，其中α-亚麻酸产量达到170~292 mg/L，显著高于常规培养基的产量。
3. 本发明所用微芒藻为绿藻类，可直接以藻粉形式加入食品或饲料，也可富集α-亚麻酸后作为必需脂肪酸成分添加至营养补充剂或膳食中。本发明的制备方法对必需脂肪酸相关的食品及饲料生产具有积极促进作用。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的实施方式进行说明。需要理解的是以下实施例只是起到说明的目的，并非对本发明的范围进行限制。
下述实施例中所使用的试剂、材料，若无特殊说明，均可从商业途径得到。
下述实施例中所使用的实验方法，若无特殊说明，均为常规实验方法。
实施例1：
本实施方式微芒藻利用含铵离子溶液产油脂的方法按照以下步骤进行：
步骤一、将由氯化铵提供铵离子的、铵离子浓度为20 mM的含铵离子溶液pH调整为7.0，121℃灭菌15 min，按照接种量0.1 g/L将微芒藻Micractinium sp. HDL02接种至上述灭菌溶液中，在光照强度3000 lux、光照周期12h /12h（光/暗）、温度24℃、摇床转速120rpm的条件下发酵7 d，得到发酵液。
步骤二、将步骤一得到的发酵液离心获得微芒藻藻泥，将藻泥干燥后研磨，以氯仿/甲醇（v:v=2:1）抽提三次，静置后取下层有机相，用氮吹仪干燥有机溶剂即得到含有α-亚麻酸的粗油。
本发明步骤一中含铵离子溶液还包括以下组分：重量份数比0.02份硫酸镁、0.05份氯化钙、0.04份硫酸铁、0.1份磷酸氢二钠、1份微量元素溶液、9份葡萄糖和800份水。
本实施例每升含铵离子溶液可获得油脂334 mg，其中α-亚麻酸208 mg。
实施例2：
本实施方式微芒藻利用含铵离子溶液产油脂的方法按照以下步骤进行：
步骤一、将由氯化铵提供铵离子的、铵离子浓度为50 mM的含铵离子溶液pH调整为7.5，121℃灭菌15 min，按照接种量0.2 g/L将微芒藻Micractinium sp. HDL02接种至上述灭菌溶液中，在光照强度3000 lux、光照周期12h /12h（光/暗）、温度25℃、摇床转速120rpm的条件下发酵8 d，得到发酵液。
步骤二与实施例1相同。
本发明步骤一中含铵离子溶液还包括以下组分：重量份数比0.06份硫酸镁、0.08份氯化钙、0.1份硫酸铁、0.3份磷酸氢二钠、0.5份微量元素溶液、13份葡萄糖和800份水。
本实施例每升含铵离子溶液可获得油脂534 mg，其中α-亚麻酸292 mg。
实施例3：
本实施方式微芒藻利用含铵离子溶液产油脂的方法按照以下步骤进行：
步骤一、将由硝酸铵提供铵离子的、铵离子浓度为50 mM的含铵离子溶液pH调整为6.8，121℃灭菌15 min，按照接种量0.3 g/L将微芒藻Micractinium sp. HDL02接种至上述灭菌溶液中，在光照强度3000 lux、光照周期12h /12h（光/暗）、温度27℃、摇床转速120rpm的条件下发酵6 d，得到发酵液。
步骤二与实施例1相同。
本发明步骤一中含铵离子溶液还包括以下组分：重量份数比0.05份硫酸镁、0.02份氯化钙、0.08份硫酸铁、0.2份磷酸氢二钠、0.8份微量元素溶液、15份葡萄糖和900份水。
本实施例每升含铵离子溶液可获得油脂404 mg，其中α-亚麻酸241 mg。
实施例4：
本实施方式微芒藻利用含铵离子溶液产油脂的方法按照以下步骤进行：
步骤一、将由硝酸铵提供铵离子的、铵离子浓度为80 mM的含铵离子溶液pH调整为7.0，121℃灭菌15 min，按照接种量0.2 g/L将微芒藻Micractinium sp. HDL02接种至上述灭菌溶液中，在光照强度3000 lux、光照周期12h /12h（光/暗）、温度25℃、摇床转速120rpm的条件下发酵8 d，得到发酵液。
步骤二与实施例1相同。
本发明步骤一中含铵离子溶液还包括以下组分：重量份数比0.06份硫酸镁、0.05份氯化钙、0.08份硫酸铁、0.1份磷酸氢二钠、0.5份微量元素溶液、10份葡萄糖和800份水。
本实施例每升含铵离子溶液可获得油脂360 mg，其中α-亚麻酸187 mg。
实施例5：
本实施方式微芒藻利用含铵离子溶液产油脂的方法按照以下步骤进行：
步骤一、将由氯化铵提供铵离子的、铵离子浓度为10 mM的含铵离子溶液pH调整为8.5，121℃灭菌15 min，按照接种量0.3 g/L将微芒藻Micractinium sp. HDL02接种至上述灭菌溶液中，在光照强度3000 lux、光照周期12h /12h（光/暗）、温度28℃、摇床转速120rpm的条件下发酵6 d，得到发酵液。
步骤二与实施例1相同。
本发明步骤一中含铵离子溶液还包括以下组分：重量份数比0.02份硫酸镁、0.05份氯化钙、0.05份硫酸铁、0.1份磷酸氢二钠、0.5份微量元素溶液、8份葡萄糖和900份水。
本实施例每升含铵离子溶液可获得油脂309 mg，其中α-亚麻酸170 mg。
实施例6：
本实施方式微芒藻利用含铵离子溶液产油脂的方法按照以下步骤进行：
步骤一、将由硝酸铵提供铵离子的、铵离子浓度为60 mM的含铵离子溶液pH调整为6.5，121℃灭菌15 min，按照接种量0.2 g/L将微芒藻Micractinium sp. HDL02接种至上述灭菌溶液中，在光照强度3000 lux、光照周期12h /12h（光/暗）、温度23℃、摇床转速120rpm的条件下发酵7 d，得到发酵液。
步骤二与实施例1相同。
本发明步骤一中含铵离子溶液还包括以下组分：重量份数比0.02份硫酸镁、0.05份氯化钙、0.08份硫酸铁、0.3份磷酸氢二钠、1份微量元素溶液、10份葡萄糖和900份水。
本实施例每升含铵离子溶液可获得油脂398 mg，其中α-亚麻酸230 mg。
由实施例1~实施例6可知，本发明微芒藻Micractinium sp. HDL02利用含铵离子溶液发酵，可产含α-亚麻酸的油脂，且油脂产量、α-亚麻酸含量较高。每升含铵离子溶液可获得油脂309~534 mg，其中α-亚麻酸170~292 mg。
实施例7：
本实施方式微芒藻利用含铵离子溶液产油脂的方法按照以下步骤进行：
步骤一、将由硝酸铵提供铵离子的、铵离子浓度为60 mM的含铵离子溶液pH调整为7.0，121℃灭菌15 min，按照接种量0.3 g/L将微芒藻Micractinium sp. HDL02接种至上述灭菌溶液中，在光照强度3000 lux、光照周期12h /12h（光/暗）、温度25℃、摇床转速120rpm的条件下发酵8d，得到发酵液。
步骤二与实施例1相同。
本发明步骤一中含铵离子溶液还包括以下组分：重量份数比0.05份硫酸镁、0.05份氯化钙、0.08份硫酸铁、0.3份磷酸氢二钠、1份微量元素溶液、8份葡萄糖和850份水。
本实施例每升含铵离子溶液可获得油脂498 mg，其中α-亚麻酸282 mg。
实施例8：
本实施方式微芒藻利用含铵离子溶液产油脂的方法按照以下步骤进行：
步骤一、将由碳酸铵提供铵离子的、铵离子浓度为60 mM的含铵离子溶液pH调整为8，121℃灭菌15 min，按照接种量0.2 g/L将微芒藻Micractinium sp. HDL02接种至上述灭菌溶液中，在光照强度3000 lux、光照周期12h /12h（光/暗）、温度26℃、摇床转速120rpm的条件下发酵7d，得到发酵液。
步骤二与实施例1相同。
本发明步骤一中含铵离子溶液还包括以下组分：重量份数比0.05份硫酸镁、0.05份氯化钙、0.08份硫酸铁、0.2份磷酸氢二钠、0.8份微量元素溶液、12份葡萄糖和800份水。
本实施例每升含铵离子溶液可获得油脂461 mg，其中α-亚麻酸232 mg。
实施例9：
本实施方式微芒藻利用含铵离子溶液产油脂的方法按照以下步骤进行：
步骤一、将由氯化铵提供铵离子的、铵离子浓度为30 mM的含铵离子溶液pH调整为7，121℃灭菌15 min，按照接种量0.3 g/L将微芒藻Micractinium sp. HDL02接种至上述灭菌溶液中，在光照强度3000 lux、光照周期12h /12h（光/暗）、温度25℃、摇床转速120rpm的条件下发酵7d，得到发酵液。
步骤二与实施例1相同。
本发明步骤一中含铵离子溶液还包括以下组分：重量份数比0.05份硫酸镁、0.05份氯化钙、0.08份硫酸铁、0.1份磷酸氢二钠、1份微量元素溶液、15份葡萄糖和800份水。
本实施例每升含铵离子溶液可获得油脂386 mg，其中α-亚麻酸228 mg。
实施例10：
本实施方式微芒藻利用含铵离子溶液产油脂的方法按照以下步骤进行：
步骤一、将由硝酸铵提供铵离子的、铵离子浓度为30 mM的含铵离子溶液pH调整为6.8，121℃灭菌15 min，按照接种量0.2 g/L将微芒藻Micractinium sp. HDL02接种至上述灭菌溶液中，在光照强度3000 lux、光照周期12h /12h（光/暗）、温度25℃、摇床转速120rpm的条件下发酵8d，得到发酵液。
步骤二与实施例1相同。
本发明步骤一中含铵离子溶液还包括以下组分：重量份数比0.05份硫酸镁、0.05份氯化钙、0.08份硫酸铁、0.1份磷酸氢二钠、1份微量元素溶液、10份葡萄糖和800份水。
本实施例每升含铵离子溶液可获得油脂357 mg，其中α-亚麻酸194 mg。
实施例11：
本实施方式微芒藻利用含铵离子溶液产油脂的方法按照以下步骤进行：
步骤一、将由氯化铵提供铵离子的、铵离子浓度为70 mM的含铵离子溶液pH调整为7.0，121℃灭菌15 min，按照接种量0.2 g/L将微芒藻Micractinium sp. HDL02接种至上述灭菌溶液中，在光照强度3000 lux、光照周期12h /12h（光/暗）、温度25℃、摇床转速120rpm的条件下发酵7d，得到发酵液。
步骤二与实施例1相同。
本发明步骤一中含铵离子溶液还包括以下组分：重量份数比0.05份硫酸镁、0.05份氯化钙、0.08份硫酸铁、0.1份磷酸氢二钠、1份微量元素溶液、10份葡萄糖和800份水。
本实施例每升含铵离子溶液可获得油脂359 mg，其中α-亚麻酸188 mg。
实施例12：
本实施方式微芒藻利用含铵离子溶液产油脂的方法按照以下步骤进行：
步骤一、将由氯化铵提供铵离子的、铵离子浓度为60 mM的含铵离子溶液pH调整为7，121℃灭菌15 min，按照接种量0.2 g/L将微芒藻Micractinium sp. HDL02接种至上述灭菌溶液中，在光照强度3000 lux、光照周期12h /12h（光/暗）、温度25℃、摇床转速120rpm的条件下发酵6d，得到发酵液。
步骤二与实施例1相同。
本发明步骤一中含铵离子溶液还包括以下组分：重量份数比0.05份硫酸镁、0.05份氯化钙、0.08份硫酸铁、0.1份磷酸氢二钠、1份微量元素溶液、10份葡萄糖和800份水。
本实施例每升含铵离子溶液可获得油脂368 mg，其中α-亚麻酸208 mg。
由实施例7~实施例12可知，本发明微芒藻Micractinium sp. HDL02利用含铵离子溶液发酵，可产含α-亚麻酸的油脂，且油脂产量、α-亚麻酸含量较高。每升含铵离子溶液可获得油脂357~498 mg，其中α-亚麻酸194~282 mg。
比较例1：
本比较例与实施例1不同的是，步骤一中含铵离子溶液pH为5.2。其他步骤和参数和实施例1相同。
比较例2：
本比较例与实施例1不同的是，以微藻培养常用培养基BG-11替代含铵离子溶液，发酵时间为18天。其他步骤和参数和实施例1相同。
比较例3：
本比较例与实施例1不同的是，步骤一中无灭菌环节，其他步骤和参数和实施例1相同。
比较例4：
本比较例与实施例1不同的是，步骤一中不设置光照和摇床转速。其他步骤和参数和实施例1相同。
比较例5：
本比较例与实施例1不同的是，步骤一中温度设置为18℃。其他步骤和参数和实施例1相同。
表1 实施例1与比较例的油脂及α-亚麻酸产量对比
| 组别 | 油脂产量（mg/L） | α-亚麻酸产量（mg/L） |
| 实施例1 | 334 | 208 |
| 比较例1 | 72 | 41 |
| 比较例2 | 61 | 30 |
| 比较例3 | 93 | 50 |
| 比较例4 | 169 | 77 |
| 比较例5 | 126 | 91 |
显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。
Claims (4)
1. 一种利用含铵离子溶液产油脂的方法，其特征在于微芒藻属微生物利用含铵离子溶液产含α-亚麻酸油脂的方法，所述含铵离子溶液的铵离子浓度为10~80 mM，所述铵离子由氯化铵、硝酸铵或碳酸铵提供，包括以下步骤：
步骤一、调整含铵离子溶液pH为6.5~8.5，121℃灭菌15 min，将微芒藻Micractiniumsp. HDL02接种至含铵离子溶液中发酵6~8 d，得到发酵液；
步骤二、将步骤一得到的发酵液离心获得微芒藻藻泥，将藻泥干燥、研磨、有机溶剂抽提即得到含有α-亚麻酸的粗油。
2.根据权利要求1所述的利用含铵离子溶液产油脂的方法，其特征在于，所述步骤一中的含铵离子溶液，还包括以下组分：重量份数比0.02~0.06份硫酸镁、0.02~0.08份氯化钙、0.04~0.1份硫酸铁、0.1~0.3份磷酸氢二钠、0.5~1份微量元素溶液和800~900份水。
3.根据权利要求1所述的利用含铵离子溶液产油脂的方法，其特征在于步骤一中微芒藻的接种量为0.1~0.3 g/L。
4.根据权利要求1所述的利用含铵离子溶液产油脂的方法，其特征在于步骤一中微芒藻的发酵条件为光照强度3000 lux，光照周期12h光/12h暗，温度23~28℃，摇床转速120rpm。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202410634225.6A CN118240887B (zh) | 2024-05-22 | 2024-05-22 | 一种利用含铵离子溶液产油脂的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202410634225.6A CN118240887B (zh) | 2024-05-22 | 2024-05-22 | 一种利用含铵离子溶液产油脂的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN118240887A CN118240887A (zh) | 2024-06-25 |
| CN118240887B true CN118240887B (zh) | 2024-08-13 |
Family
ID=91551190
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202410634225.6A Active CN118240887B (zh) | 2024-05-22 | 2024-05-22 | 一种利用含铵离子溶液产油脂的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN118240887B (zh) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102021208A (zh) * | 2010-11-16 | 2011-04-20 | 华东理工大学 | 一种快速积累微藻胞内油脂的方法 |
| CN116396988A (zh) * | 2023-05-22 | 2023-07-07 | 黑龙江大学 | 一种微芒藻属微生物产多不饱和脂肪酸的方法 |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106367198A (zh) * | 2009-04-14 | 2017-02-01 | 泰拉瑞亚控股公司 | 微生物油提取和分离方法 |
| CN108660079B (zh) * | 2017-03-31 | 2021-11-23 | 财团法人食品工业发展研究所 | 微芒藻属(micractinium sp.)及其用途 |
| CN116064239A (zh) * | 2021-10-31 | 2023-05-05 | 中国石油化工股份有限公司 | 一株富含油脂的微芒藻及其培养应用 |
| CN115354054A (zh) * | 2022-09-30 | 2022-11-18 | 湘潭大学 | 一种共培养微藻提高α-亚麻酸油脂产率的方法 |
| CN115820755A (zh) * | 2022-11-24 | 2023-03-21 | 云南爱尔发生物技术股份有限公司 | 一种应用二氧化碳促进栅藻生产α-亚麻酸的方法 |
-
2024
- 2024-05-22 CN CN202410634225.6A patent/CN118240887B/zh active Active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102021208A (zh) * | 2010-11-16 | 2011-04-20 | 华东理工大学 | 一种快速积累微藻胞内油脂的方法 |
| CN116396988A (zh) * | 2023-05-22 | 2023-07-07 | 黑龙江大学 | 一种微芒藻属微生物产多不饱和脂肪酸的方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN118240887A (zh) | 2024-06-25 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Bhosale et al. | β-carotene production in sugarcane molasses by a Rhodotorula glutinis mutant | |
| CN102160642B (zh) | 一种北虫草稻谷食品的制备方法 | |
| KR102015829B1 (ko) | 온라인 산소 소비율과 전도율의 통합 제어를 기반으로 한 코엔자임 q10 발효 생산 공정 | |
| CN107418902A (zh) | 一种香菇发酵用补料培养基及香菇液体深层连续培养方法 | |
| CN103060244B (zh) | 一种海洋芽孢杆菌及利用该菌生产过氧化氢酶的方法 | |
| CN118240887B (zh) | 一种利用含铵离子溶液产油脂的方法 | |
| CN116396988B (zh) | 一种微芒藻属微生物产多不饱和脂肪酸的方法 | |
| JP4132253B2 (ja) | アンモニア耐性ｌ（＋）−乳酸産生能菌およびｌ（＋）−乳酸の生産方法 | |
| FI71766C (fi) | Framstaellning av etanol genom hoegeffektiv bakteriejaesning. | |
| US4731329A (en) | Ethanol production by high performance bacterial fermentation | |
| TW201816117A (zh) | 一種用於生產葡萄糖胺的培養基及其應用 | |
| CN112359074B (zh) | 一种利用乙酸刺激微藻异养产油的方法 | |
| CN114409826B (zh) | 一种从美洲大蠊药渣中提取甲壳素的方法 | |
| Martin et al. | Growth of the acid‐tolerant fungus Scytalidium acidophilum as a potential source of single‐cell protein | |
| CN108179112B (zh) | 蛋白核小球藻联合菌类产氢的方法 | |
| US4830964A (en) | Ethanol production by high performance bacterial fermentation | |
| AU2005254730B2 (en) | Fermentation process using faba beans as nitrogen source | |
| US4647534A (en) | Ethanol production by high performance bacterial fermentation | |
| KR100640548B1 (ko) | 폐백토를 이용한 비타민 ｂ2의 생산 방법 | |
| CN107814440A (zh) | 一种用于污水处理的菌藻复合剂及其制备方法 | |
| JP2009148212A (ja) | マンニトールの発酵製造方法及びその実施に用いる微生物 | |
| CN107937469B (zh) | 一种三孢布拉霉生产类胡萝卜素的发酵方法及应用 | |
| KR0169061B1 (ko) | 배양조건 최적화를 통한 자일리톨의 제조방법 | |
| CN106754838B (zh) | 一种提高黑曲霉产蛋白酶能力的方法 | |
| CN117229991A (zh) | 提高菌丝蛋白含量的菌丝体生产方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |