NO772170L

NO772170L - Nye cefalosporinderivater.

Info

Publication number: NO772170L
Application number: NO772170A
Authority: NO
Inventors: Mitsuo Numata; Isao Minamida; Susumu Tsushima
Original assignee: Takeda Chemical Industries Ltd
Priority date: 1976-09-08
Filing date: 1977-06-20
Publication date: 1978-03-09
Also published as: HU182053B; DK161081C; GB1587941A; CH634578A5; BE856045A; DK159783B; PT66735B; DK621189D0; AT352277B; NL7707129A; DE2727753C2; DK159783C; DE2760448C2; FR2408612A1; AU508551B2; JPS6011713B2; DK161081B; DE2760271C2; DE2727753A1; GR63635B

Description

Oppfinnelsen angår nye antimikrobielle forbindelser egnet for ibehandling av sykdommer hos dyr inklusive fjørkre og mennesker, særlig for bekjempelse eller behandling av infeksjonssykdommer forårsaket av gram-positive og gram-negative bakterier hos disse dyr.

Mer konkret omhandler oppfinnelsen 2-( syn)-hydroksyimino-aeetamid-derivater med formel

hvor Y betegner hydrogen, hydroksyl, acyloksy, karbamoyloksy, kvaternært ammonium eller nitrogenholdig heterocyklisk thio, farmasøytisk brukbare salter og estere av disse forbindelser, og oppfinnelsen angår også fremgangsmåter for fremstilling av disse forbindelser.

For tiden foreligger det på markedet flere typer halv-syntetiske céfalosporiner som har et bredt antibakterielt spektrum, og disse har vært brukt klinisk for behandling av forskjellige infeksjonssykdommer. Det rapporteres imidlertid at disse forbindelser ikke er aktive i praksis mot alle de patogene bakterier som man støter på i kliniske situasjoner. Det angis f.eks. at visse stammer av Escherichia coli, visse Citrobacter-bakterier, en større del av de indol-positive patogene bakterier av slekten Proteus*slekten Enterobacter, slekten Serratia og slekten Pseudomonas er cefalosporin^resistente

(Warren E Wick, "Cephalospørins and Penicillins", Chemistry and Biology, kap* 11, utgitt av E .H. Flynn, Academic Press, 1972)»Letingen etter nye cefalosporiner som kan anvendes klinisk på disse patogener fortsetter derfor.

Under disse forhold har de foreliggende oppfinnere fortsatt å fremskaffe et stort antall nye cefalosporinderivater og undersøke deres farmasøytiske egenskaper. Søkerne har således lykkes i å syntetisere de ovenstående cefalosporinderivater (I), deres salter og estere, og har funnet at forbindelsene er virk-somme mot et stort antall bakterier inklusive gram-positive og gram-negative bakterier.

De særlig gunstige trekk,ved dén antimikrobielle aktivitet for de aktuelle forbindelser er følgende: En foretrukket . gruppe forbindelser oppviser ikke bare en praktisk tilstrekkelig virkning mot gram-positive bakterier inklusive Staphylococcus aureus, men har også virkning mot et bredt spektrum av gram-negative bakterier inklusive Escherichia coli, Klebsiella pneumoriiae, Proteus culgaris, .Proteus mirabilis, Proteus morganii, Proteus rettgeri, Citrobacter freundii, Enterobacter cloacae og Serratia marcescens. Disse bedrede egenskaper

kommer til uttrykk ved deres aktivitet mot mutanter av nevnte bakterier som har (3-lactamase (cefalosporinase).

Under henvisning til formel I betegner T hydrogen, hydroksyl, acyloksy, karbamoyloksy, kvåternær ammonium eller, nitrogenholdig heterocyklisk thio*

Acyloksygruppen er fortrinnsvis en gruppe med formel -OT hvor T f.eks. kan være en alifatisk eller aromatisk karbonylgruppe med 2 til 10 C-atomer som acetyl, propionyl, benzoyl etc., eller reaktive acylgrupper som de som er nevnt i

. tysk utlegningsskrift (OLS) 2607064 og 2619243. Slike reaktive acylgrupper omfatter blant annet 3-oxob^yryl» mandé^l, 3-karboksy-propionyl, 2-karboksybenzoyl, 2-(N-karbetoksykarbamoyl)-benzoyl, 2-(N-karbetoksysulfamoyl)benzoyl og 2-karboksy-3-(eller 6)-nitro-benzoyl. Selv om disse reaktive acylgrupper ikke bidrar så mye

til antimikrobe-aktiviteten som acetylgruppen, er de sterkt reaktive overfor vann, aminet som svarer til kvaternært ammonium eller nitrogenholdig heterocyklisk thiol som nevnt senere.

Det kvaternære ammonium kan være substituert eller usubstituert;pyridinium med generell formel:

(hvor Z betegner hydrogen, alkyl med 1-4 C-atomer (f«eks. metyl), karbamoyl, karboksyl, sulfo eller alkoksy med 1-4 C-atomer (f.eks» metoksy)), som omfatter pyridinium, pyridinium substituert med karbamoyl (f.eks. 3-^rDam°ylpyr:*:dinium, 4-karbamoylpyridinium etc), pyridinium substituert med sulfo (f.eks. 4-sulfopyridinium etc), alkylert pyridinium (f.eks. 3-rost<y>iyrS-dinium»4^metyl-pyridinium), karboksypyridinium (f. eks. 3""karb0*csypyridinium, 4-karboksypyridinium etc.). Den kvaternære ammoniumgruppen kan være chinølinium, picolinium, lutidinium etc. En foretrukket klasse av kvaternær ammoniumgruppe er pyridinium som kan være substituert med karbamoyl i 4-stillingP& pyridin-ringen. Når forbindelsen ifølge oppfinnelsen inneholder en kva^ernær ammoniumgruppe, kan den innta en betainstruktur, f.eks.

hvor Z har den, tidligere angitte betydning.

Den nitrogenholdige heterocykliske thiogruppe representert ved Y kan være en gruppe med formel: -S-Het

hvor Het betegner en 5- eller 6-leddet heterocyklisk gruppe som

inneholder 1-4 nitrogenatomer og eventuelt ytterligere et oksygen-. eller svovelatom og nevnte heterocykliske gruppe eventuelt har en eller to substituenter. Som slike heterocykliske grupper kan hevnes 6-leddete heterocykliske grupper som inneholder bare ett nitrogenatom (f.eks. pyridyl, N-oxopyridyl), 6-léddete heterocykliske grupper som inneholder 2 nitrogenatomer (f.eks. pyrimidyl, pyridazinyl, N-oxopyridazinyl)* 5-leddete heterocykliske grupper som inneholder 2 nitrogenatomer (f.eks. pyrazolyl,

imidazdyl etc), 5-leddete heterocykliske grupper som inneholder et nitrogenatom og et svovelatom (f.eks. thiazolyl), 5-leddete heterocykliske grupper inneholdende 2 nitrogenatomer og et svovelatom (f.eks. 1,2,3-thiadiazolyl, 1,2,4-thiadiazcfyl, 1,3,4-thiadiazolyl, 1,2,5-thiadiazolyl), 5-leddete heterocykliske grupper som inneholder to nitrogenatomer og et oksygenatom (f.eks. 1,2,3-oxadiazolyl, 1,2,4-oxadiazolyl, 1,3,4-oxadiazo^i, 1,2,5-oxadiazolyl), 5-leddete heterocykliske grupper som inneholder tre nitrogenatomer (f. eks. 1,2,3-triazolyl, 1,2,4-triazolyl), og 5-leddete heterocykliske grupper som inneholder fire nitrogenatomer (f.eks. lH-tetrazolyl, 2H-tetrazolyl). Slike heterocykliske grupper

kan ha fortrinnsvis en eller to substituenter på den heterocykliske ringen. Substituentene kan f*eks« være alkyl med 1-4 C-atomer'(f.eks. metyl, etyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl etc)j haløgenalkyl med 1-4 C-atomer (f.eks. trifluormetyl);

alkoksy med 1-4 C-atomer (f.eks. metoksy, etoksy, propoksy, isoprop^©ksy, butoksy etc.); halogen (f.eks. klor, brom etc); hydroksyl;

mercapto; amino; karboksyl; karbamoyl; en rest med formel: -X-Z^

hvor X betegner alkylen med 1-4 G-atomer og Z3" betegner hydroksyl, mercapto, amino, mono-! eller di-alkylamino hvor alkylgruppen har 1-4 C-atomer (eksempelvis dimetylamino, monoetylamino etc), guanyl, karboksyl, sulfo, karbamoyl, alkoksykarbonyl hvor alkylgruppen har 1-4 C-atomer (f.eks. metoksykarbonyl, etoksykarbonyl), mono--eller di-alkylkarbamoyl hvor alkylgruppen har 1-4 C-atomer (f. eks5. N,N-dimetylkarbamoyl), alkoksy méd 1-4 C-atomer (f. eks. metoksy, etoksy, n-propoksy), alkylthio hvor alkylgruppen har 1-4 C-atomer (f.eks. metylthio), alkylsulfonyl hvor alkylgruppen har 1-4 C-atomer (f.eks. metylsulfonyl) eller en alkylkarbonyl-gruppe hvor alkylgruppen har 1-4 C-atomer (f.eks. acetyl, n-propionyl); en rest med fcrmel: -S-Z p hvor Z P betegner ålkyl med 1-4 C-fcatomer^faller den ovennevnte rest X-Z*; eller en rest med formel: -NC74hvor gruppene Z^ og betegner alkyl med 1-4 C-atomer, den ovennevnte rest X-Z , alkoksykarbonyl hvor alkoksy-gruppen har 1-4 C-atomer (f.eks. metoksykarbonyl), alkylkarbonyl hvor alkylgruppen har 1-4 C-atomer (f*eks. acetyl), karbamoyl eller mono- eller di-alkylkarbamoyl hvor alkylgruppen har 1-4 C-atomer (f.eks. N,N-dimetylkarbamoyl), etc.

Substituenten med formel: -X-Z^ på den hetero cykliske gruppen (Het) vil^.derfor omfatte karboksymetyl, ka r ba-moylmetyl, mono- eller di-alkyKC^^Jkarbamoylmetyl (f .eks. N,N-dimetylkarbamoylmetyl), hydroksyalkyKC^^) (f .eks. hydroksymetyl, 2-hydroksyetyl), alkyKC^^J-karbonyloksy-alkyKC^^)

(f.eks. acetoksymetyl, 2-acetoksyetyl), alkoksy(C1-^)karbonyl-metyl (f.eks. metoksykarbonylmetyl), metylthiometyl, metyl-sulfonylmetyl, aminoetyl, mono- eller di-alkylfC^^-amino-aikyl(C-^) (f.eks. N,N-dimetylaminométyl, N-metylaminoetyl, K,N-dimetylaminoetyl), guanylmetyl, guanyletyl etc. Substituenten med formel: -S-2 på den heterocykliske gruppen (Het) omfatter metylthio, 2-hydroksyetylthio, 2-acetoksyetylthio, karboksymetyl-thio, alkoksy(C^_^)karbonylmetylthio (f.eks. metoksykarbonyl-metylthio)jkarbamoylmetylthio, N,N-dimetylkarbamoylthio, acetyl-metylthio, 2-sulfoetylthio etc. _3

Substituenten med formel -N^ . på den heterocykliske gruppen (Het) omfatter mono- eller di-alkylTc^^Jamino (f.eks. metylamino), sulfø-alkyl-(C^_^)amino (f.eks. 2-sulfoetylamino), hydroksyalkyKG-^^)amino (f .eks. 2-hydroksyetylamino), mono- eller di-alkyl(C^^)amino-alkyl(C^_^)amino (f.eks. 2-dimetylaminoetyl-amino),;alkyl(C^_^)karbonylamino (f.eks. acetylamino), 2-dimetyl-aminoacetylamino, alkoksyfC^^Jkarbonylamino (f.eks. metoksy-karbonylamino) etc.

En viktig klasse nitrogenholdige heterocykliske thibgrupper som representeres av I omfatter formlene:

hvor R<*>betegner hydrogen eller en rest med formel: -(CH2)nP (hvor n er et tall fra 1 til 3 og P betegner hydrogen, hydroksyl, alkoksy(C^_^), alkyltC^^Jthio, en rest med formel: -COOR^ (hvor R^ betegner hydrogen eller alkyl-(C^^)), en rest med formel: -CON^Rg (hvor gruppene R-<*>og R^ betegner hydrogen eller alkyl(Gj_^)? eller en rest med formel: -N^^c (hvor gruppene R^ og R^ har ovennevnte betydning)) og hver av gruppene R og R-' betegner hydrogen, amino, karbamoyl, en rest med formel: -NHCOOR<?>(hvor R? betegner alkyKC-j^)),

en rest med formel: -S-(CH2)nQ(hvor n er et. tall fra 1 til 3 og Q betegner karboksyl, hydroksyl, hydrogen eller sulfo) eller en rest med formel: -(CH2)nP (hvor symbolene n og P har den tidligere angitte betydning).

En viktig klasse for substituenten T er hydrogen, åcetoksy, karbamoyloksy eller ovennevnte viktige klasse av nitrogenholdige heterocykliske thiogrupper.

De mest foretrukne betydninger for substituenten T er: acetoksy, karbamoyloksy, 3-substituert-l,2,4-~thiadiazøl-5-ylthio, 2-substituert-l,3*4-oxadi&zol-5-ylthio» 1-substituert-imidazol-2-ylthio, l-substituert-lH-teirazol-5-ylthio, 2-substituert-l, 3»4T"thiadiazol-5-ylthio, 3,4-disubstituert-l,2,4-triazol-5-ylthio eller 4-substituert-thiazol-2-ylthio, hvor substituenten er metyl, karboksymetyl, hydroksymetyl, hydroksyetyl, karbamoylmetyl, 2-N,N-dimetylaminoetyl, metoksymetyl eller etoksykarbonyl-metyl, hvor de to substituentene i 3»4-disubstituert-l,2,4-triazol-5-ylthi©er like eller forskjellige. For bakteriebekjempelse kan forbindelsen (I) benyttes som et fritt zwitter-ion eller i andre former som farmasøytiske salter, eksempelvis salter av ugiftige kationer som natrium, kalium etc; salter av basiske aminosyrer som arginin, ørnithin, lysin, histidin etc; salter av poly-hydroksyalkylaminer som N-metylgl^tcamin, dietanolamin, trietanol-amin, trishydroksymetylaminometan etc; salter av uorganiske syrer som saltsyre, svovelsyre, salpetersyre, fosforsyre etc; og salter av organiske syrer (f.eks. oxalsyre, fumarsyré, vinsyre etc). Forbindelsen I eller de nevnte salter kan også brukes som bio-logisk aktive esterderivater av 4-karboksyl-funksjonenhvilke esterderivater vil gi høyere blodopptak og øket virketid. Som en egnet ester for dette formålet hevnes alkoksy(C^_^)metyl-ester, alkoksy(C^_^)etylester, alkyl(C^^)thiometylester, alkyl-(C-^^Jkarbonyloksymet yles ter eller alkoksy(G^_^)karbonyloksy-alkyl(C^_^)ester (f.eks. alkoksy(C^_^)karbonyloksymetyl etc). Mer spesielt omfatter esterne metoksyetylester, etoksymetylester, isopropoksymetylester, a-metoksyetylester, a-etoksyetylester, etylthiometylester, isopropylthiometylester, pivaloyloksymetylester, a-acetoksybutylester og l-(etoksykarbonyloksy)etylester etc

Forbindelsene i henhold til oppfinnelsen kan innta et par tautomere former ved nedenstående tautomeriseringsreak-s jon:

hvor Y har den tidligere angitte betydningj.

Eksistensen av donne type forbindelser har vært studert av mange forskere og litteraturen refererer til thiazolin-formen i flere tilfelle (G.J. Kruger og G. Gafnér, Acta Cryst. B 27, 326 (I97I); og J.M. Vandenbelt og L. Doub, J. Am. Chem. Soc. 66, I633 (1944)) og thiazol-formen i andre tilfelle

(L.M. Werbel, Chem. & Ind. (I966) 1634).

Basert på forskjellige målinger antar man imidlertid at forbindelsene i henhold til oppfinnelsen overveiende inntar thiazolin-formen*idet denne spesielle form stabiliseres ved hjelp av hydrogen-binding som det fremgår av nedenstående formel

(hvor symbolet cef har den angitte betydning). Som det gjelder for enhver likevektsreaksjon av denne typen, vil imidlertid likevekten forskyves i den ene eller andre retning som svar på

de forskjellige betingelser hvorunder forbindelsene befinner seg, slik som oppløshingsmidlets pH og polaritet, temperatur, substituentenes art og andre størrelser. Derfor kan forbindelsene i henhold tii.oppfinnelsen gjengis ved enhver av disse alternative systemer eller tilsvarende nomenklatur. I foreliggende beskrivelse og tilhørende krav betegnes imidlertid forbindelsene gjennom deres thiazolin-form. Oppfinnelsen skal imidlertid dekke alle de nevnte tautomere.

Forbindelser i henhSLd til oppfinnelsen er aktive mot gram-positive bakterier og gram-negative bakterier som tidligere nevnt. De kan gis sikkert i likhet med kjente cefalosporiner i form av pulvere eller som oppløsninger, suspensjoner, salver eller andre doseringsformer i forbindelse med fysiologisk anvendelige bærestoffer, blandemidler og.lignende på kjent måte. Disse blandemedia omfatter f.eks. vann, fysiologisk saltvann

for injeksjon eller oppløsning, stivelse eller lactose for pulvere. Blant disse fortynningsmidler foretrekkes fysiologisk saltvann*

F.eks. kan de aktuelle forbindelser brukes som sikre legemidler for behandling eller forebyggelse av infeksjonssykdommer forårsaket av bakterier som gir pustula-sykdommer, infeksjoner i luftveiene, galleinfeksjoner, innvollsinfeksjoner, urinveisinfeksjoner, og gyneko-obstetriske infeksjoner. Pasientene kan være mennesker eller andre varmblodige dyr som rotte, mus, hund, hest etc.

For behandling av ovenstående sykdommer, f.eks. urinveisinfeksjoner, kan de følgende eksempelvise forbindelser blant andre sluttforbindelser i henhold til oppfinnelsen, fortrinnsvis gis intramuskulært eller intravenøst i dagsdose på

1 til 20 mg pr. kg kroppsvekt for voksne mennesker, oppdelt i

tre eller fire doser pr. dag: Na-7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamidoJ-3-metyl-3-cefem-4-karboksylat ( syn-isomer);

Natrium-7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acet-amido) -3-acetoksymetyl-3-cefem-4-karboksylat (svri-isomer);

Natrium-7-(2-(2-imino-4-thia zolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamidoJ-3-karbamoyloksymetyl-3-cefem-4-karboksylat ( syn-isomer);

Natrium-7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acet-amido3-3-(l-metyltetrazol-5-yl)thiometyl-3-cefem-4-karboksylat ( syn-isomer); 7-(2-(2-Mno-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamido)-3-Cl-(2-N,N-dimetylaminoetyl)tetrazol-5-yl) thiometyl-3-cefem-4-karboksylsyre ( syn-isomer)J Natrium-7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-h<y>droksyimino-ac et-amido)-3-£l-(3-N,N-dimetylaminopropyl)tetrazol-5-yl)thiometyl-3-cefem-4-karboksylat ( syn-isomer), Natrium-7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acet-amido) -3-(l-karbamoylmetyltetrazol-5-yl)thiometyl-3-cefem-4-karboksylat ( syn-isomer); Natrium-7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acet-amido) -3-(l-(2-hydroksyetyl)tetråzol-5-yi) thiometyl-3-cefem-4-karboksylat ( syn-isomer);

Natrium-7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acet-amido^ -3-(1,3» 4-thiadiazol-2-yl)thiometyl-3-cefem-4-karboksylat ( syn-isomer); Natrium-7-(2-(2-fhiino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamido]-3-(2-metyl-l,3,4-thiadiazol-5-yl)thiometyl-3-cefem-4-karboksylat ( syn-isomer);

7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamido J-3-(2 - (2 -N, N-dimetylaminoetyl) -1,3,4-thiadia zol-5-yl) thiometyl-3— cefem-4-karboksylsyre ( syn-isomer);

Natrium-7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acet-amido) -3-(2-hydroksymetyl-l,3,4-thiadiazol-5-yl)-thiometyl-3- cefem-4-karboksylat ( syn-isomer);

Natrium-7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acet-amido) -3-(2-N,N-dimetylkarbamoylmetyl-l,3,4-thiadiazol-5-yl)-thiometyl-3-c©^em-4-karboksylat ( syn-isomer);

Natriiim-7-^ 2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acet-amido) -3-(2-(2-hydroksyetylthio-l,3,4-thiadiazol-5-yl3thiometyl-3-cefem-4-karboksylat ( syn-isomer); Dinatrium-7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acet-amidoj-3-(2-karboksymetyl-l,3,4-thiadiazol-5-<y>l)-thiometyl-3-cefem-4-karboksylat ( syn-isomer);

7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamido)-3-(3-metyl-l, 2,4-"thiadiazol-5-yl) -thiometyl-3-cef em-4-karboksylsyre ( åyn-isomer);

Natrium-7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamido)-3-t^»2 »3-'triazol-4-yl)thiometyl-3-cefem-4-karboksylat ( syn-isomer); Natrium-7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamido)-3-(4-metyl-l,2,4-triazol-3-yl)thiometyl-3-cef em-4-karboksylat

(syn-isomer);

Natrium-7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamido)-3-(3»4-dimetyl-l,2,4-triazol-5-yl)thiometyl-3-cefem-4-karboksyIat ( syn-isomer);

Natrium-7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)r2-hydroksyimino-acetamido)-3- (3-hydroksymetyl-4-mety1-1,2,4-tria zol-5-yl)thiometyl-3-cefem-4- karboksylat ( syn-isomer);

Natrium-7-^2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksylAno-«cetamido^r3-(2-métyl-l,3,4-oxadiazol-5-yl)thiometyl-3-cefem-4-karboksylat, ( åyn-isomer); Di-natrium-7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acet-amido) -3-(4-karboksymetylthiazol-2-yl)thiometyl-3-cef em-4-karboksylat ( syn-isomer): Natrium-7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamido) - 3-(2-metoksymetyl-l,3,4-thiadiazol-5-yl)-thiometyl-3-cefem-4-karboksylat ( syn-isomer); Natrium-7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamido)-3-(2-(2-hydroksyetyl)-1,3,4-thiadiazol-5-yl)thiometyl-3-cefem-4-karboksylat ( syn-isomer);

Natrium-7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamido)-3-(2-etoksykarbonylmetyl-l,3,4-thiadiazol-5-yl)thiometyl-3-cefem-

4-karbok3ylat ( syn-isomer)...

På grunnlag av deres antibakterielle egenskaper kan forbindelsene ifølge oppfinnelsen brukes som anti-infeksjons-midler eller desinfeksjonsmidler for fjerning av bakterier som

de nevnte eller de nedenfor nevnte bakterier fra kirurgiske instrumenter eller hospital-værelser.

For eksempel anbringes kirurgiske instrumenter

2 dager i én vandig oppløsning som inneholder 1000 jig/ml forbindelse i henhold til oppfinnelsen.

Når det gjelder antibakteriell virkning, har forbindelsen I og dens salt høyere antibakteriell virkning enn esteren av forbindelsen I* Imidlertid vil esteren hydrolyseres f.eks. i pasientens levende vev og esteren omdannes til forbindelsen I eller et salt av denne.

Forbindelsen I i henhold til oppfinnelsen, deres farmasøytiske estere eller salter fremstilles i henhold til forøvrig kjente fremgangsmåter.

Forbindelsen I eller dens farmasøytisk salt eller ester fremstilles ved å omsette en forbindelse med formel:

hvor W betegner,klor eller brom og Y har den tidligere angitte betydning, et salt eller ester av denne, med thiourea.

Saltet av forbindelsen II kan være et syreaddi-sjonssalt (f.eks. saltsyre-»svovelsyre-, salpetersyre-salter

etc.), danhét med den basiske gruppen i forbindelsen II, og base-addisjonssalter (f.eks. natriumsalter, kaliumsalter, pyri-dinsalter, trietylaminsalter etc.) på forbindelsens syregnippe.

Est#© a^cforbindelsen II svarer til ovennevnte estre av forbindelsen I.

Mengden thiourea i forhold til forbindelsen II eller dens salt eller ester er 1,0 til 5»0 mol pr. mol forbindelse II eller dens salt eller ester. Reaksjonen gjennom-føres normalt ved å blande forbindelsen II eller dens salt eller

ester med thiourea ved 0 til 80°C. Reaksjonen utføres med fordel i et oppløsningsmiddel. Oppløsningsmidlet er fortrinnsvis inert.

Man bruker med fordel et polart aprotisk oppløsningsmiddel som dimetylformamid, dimetylacetamid, dimetylsulfoksyd, acetonitril,

hexametylfosføramid etc* eller en blanding av disse. Reaksjonstiden varierer med utgangsstoffet, reaksjonstemperaturen, opp-løsningsmidlet og andre reaksjonsfprhold. Imidlertid fullføres reaksjonen i løpet av 0,5 timer til 3 dager.

Forbindelsene i henhold til oppfinnelsen kan fremstilles på en annen måte, nemlig ved nukleofil substitusjon. Når T i formel I betegner hydroksyl, kvaternært ammonium eller nitrogenholdig heterocyklisk thio1, kan den søkte forbindelsen også fremstilles ved omsetning av en forbindelse med formel:

hvor M betegner acyloksy, eller et salt eller ester av denne, med vann, et amin svarende til den kvaternære ammoniumgruppe eller et nitrogenholdig heterocyklisk thiol.

Typen av salter og estre av forbindelsen III er som for forbindelsen II.

Acyloksygruppen M kan f.eks. være acetyloksy, 3-oxobutyryloksy, 3-karD°ksypropionyloksy» 2-karboksybenzoyl-oksy, mandelyioksy, 2-(N-karbøetoksykarbamoyl)-benzoyloksy,

2-(N-karboetoksysulfamoyl)benzoyloksy, 2-karboksy-3 (eller 6)-nitrobenzoyloksy eller lignende. Denne omformingsreaksjon er, når den ses bare i sammenheng med cefem-ringens 3-stilling som skal omdannes, en nukleofil substitusjonsreaksjon av 3-acyloksygruppen og er som sådan identisk med de nukleofile substitusjons-reaksjoner som beskrives i en rekke tidligere patenter og publi-kasjoner (f.eks. E.H. Flynn (utgivere) "Cephalosporins and Penicillins", kap. 4, del 5, 151, 1972, Academic Press; japansk patent 17936/1964, 26972/1964 og H283/1968). Derfor kan denne reaksjon utføres på en av de kjente måter eller en lignende måte.

Når det gjelder omsetningen mellom forbindelsen (III), dens salt eller ester og vann, foregår reaksjonen som en kjent hydrolyse* Hydrolysereaksjonen utføres vanligvis ved -20 til 50°C. Reaksjonen går raskere i nærvær.av en uorganisk base (f.eks. natriumhydroksyd, kaliumhydroksyd etc). Reaksjonen fullføres i løpet av 48 timer.

Når det gjelder reaksjonen mellom aminet og forbindelsen (III) eller dens salt, svarer aminet til det kvaternære ammonium. Det amiji som skal benyttes til reaksjonen omfatter derfor en pyridinforbindelse med formel:

hvor Z har samme betydning som tidligere angitt. Mengden av amin er 1,0 til 10 mol pr. mol forbindelse (III) eller dens salt. Omsetningen skjer ved 0 til 100°C. Den foretas med fordel i organisk eller uorganisk oppløsningsmiddel. Oppløsningsmidlet kan være vann, deuteriumoksyd, dimetylformamid, dimetylacetamid, dioxan, aceton» metanol, etanol, dimetylsulfoksyd, acetonitril, tetrahydrofuran etc. eller blandinger av disse. Reaksjonen fullføres i løpet av 48 timer.

Når det gjelder reaksjonen mellom nitrogenholdig heterocyklisk thiol og forbindelsen (III) eller dens salt, er den nitrogenholdige heterocykliske thiol en thiolforbindelse som svarer til den ovenfor definerte nitrogenholdige heterocykliske thiogruppe.. Den nitrogenholdige heterocykliske thiol omfatter således forbindelser med formel:

HS-Het

hvor Het har den tidligere angitte betydning. Den nitrogenholdige heterocykliske thiol kan brukes som fri thiol, men fortrinnsvis i form av et salt som f.eks. alkalimetaUsaltet, eksempelvis natrium- eller kaliumsaltét. Mengden nitrogenholdig heterocyklisk thiol i forhold til forbindelsen (III) eller dens salt er 1,0 til 5»0 mol pr. mol forbindelse (III) eller dens salt.

Reaksjonen utføres med fordel i oppløsningsmiddel som kan være vann, deuteriumoksyd eller et organisk oppløsningsmiddel som er lett blandbart med vann og ikke reagerer med utgangsstoffene, f.eks. dimetylformamid, dimetylacetamid, dioxan, aceton, alkohol, acetonitril, dimetylsulfoksyd, tetrahydrofuran etc.'Selv om reaksjonstemperaturen og -tiden avhenger av utgangsstoffet og oppløsningsmidlet blant; andre faktorer, utføres reaksjonen generelt ved en temperatur på 0 til 100°C i løpet av noen få minutter og opptil flere dager. Reaksjonen utføres i nærheten av nøytralitet, dvs. mellom pH 2 og pH 8 og fortrinnsvis i området pH 5 til 8. Reaksjonen kan eventuelt gjennomføres enklere ved å tilsette et kvaternært ammoniumsalt med overflateaktive egenskaper som f.eks. trimetylbenzylammoniumbromid, trietylbenzyl-ammoniumbromid eller trietylbenzylammoniumhydroksyd. Gunstige resultater oppnås videre når reaksjonen utføres under inert gass som f.eks. nitrogen for å hindre atmosfærisk oksydasjon.

Forbindelsene ifølge oppfinnelsen kan også fremstilles på andre kjente måter, f.eks. ved acylering.

Således kan en forbindelse med formel:

hvor Y, har samme betydning som ovenfor, et salt eller en ester av denne, omsettes med et acyleringsmiddel dannet av en syn-isomer karboksylsyre med formel:

8 q hvor R betegner hydrogen eller en beskyttelsesgruppeg R-7

betegner hydrogen eller en beskyttelsesgruppe. Salt- eller ester-typen av forbindelsen (IV) er den samme som for forbindel-

sen (II). Beskyttelsesgruppen R Qer en lett avspaltbar beskyt-telsesgruppé som er vel kjent fra peptidkjemien. Således omfatter beskyttelsesgruppen R<®>formyl, alkyltC^^)karbonyl (f.eks. acetyl, propionyl etc), substituert alkyl(C^_^)karbonyl (f.eks. kloracetyl etc), alkoksyte^^)karbonyl (eksempelvis t-butoksykarbonyl etc), alkoksy(C^^)alkyl-(C2.-^)karbonyl (f.eks. metoksyacetyl, metoksypropionyl etc), substituert alkoksy(C^^)karbo-nyl (f.eks. trikloretoksykarbonyl etc), aralkyl(Cy-1Q)oksykarbo-nyl (f.eks. benayloksykarbonyl etc.), eller substituert aralkyl-(<C>y_^Q)oksykarbonyl (f.eks. p-nitrobenzyloksykarbonyl etc) eller et proton.

Beskyttelsesgruppen R^ er en lett avspaltbar be^ skyttelsesgruppe som er vel kjent blant kjemikere og som kan

fjernes under milde forhold. Beskyttelsesgruppen kan f.eks. være én acylgruppe som formyl, acetyl, kloracetyl, trifluoracetyl, metoksyacetyl, fenoksyacetyl, benzoyl, benzoylformyl, p-nitro-benzoyl, etoksykarbonyl, 8,6,8-trikloretpksykarbonyl, B,B,B-tri-brometoksykarbonyl, p-nitrofenoksykarbonyl, eller substituert alkyl som tetrahydrothiof uranyl, metoksy, metoksytetrahydro-pyranyl etc., tetrahydropyranyl og 2-metoksyetoksymetyl eller en silylgruppe som trimetylsilyl, dimetyl-t-butylsilyl etc.

I denne fremgangsmåten benyttes forbindelsen (V) enten som fri forbindelse (V) eller som et salt eller i form av ,et reaktivt derivat, som acyleringsmiddel for acylering av amino-gruppen i 7-stilling på forbindelsen (IV) eller et salt eller en ester av denne. Den frie syren (V), et alkali- eller jordalkali-metallsalt av den frie syren (V) (f.eks. kaliumTnatrium-, eller

kalsiumsaltet), et organisk aminsalt av den frie syren (V) (f.

eks. trlmetylamin- eller pyridinsalt) eller et reaktivt derivat av denne (som: f.eks. et tilsvarende syrehalogenid (f.eks. syre-klorid eller syrebromid), syreanhydrid, blandet syreanhydrid, aktivt amid, aktiv ester eller lignende) gjennomgår nevnte reaksjon. Eksempler på nevnte aktive ester kan være p-nitrofenyl-ester, 2,4-dinitrofenylester, pentaklorfenylester, N-hydroksy-succinimidester og N-hydroksyftalimidester. Eksempler på nevnte blandede syreanhydrid kan være med en karbonsyremonoester (f.eks. karbonsyremonometylester eller karbonsyremonoisobutyl-ester) og et blandet syreanhydrid med en lavere alkansyre med

1-5 C-atomer som kan være substituert med halogen (f.eks. piva-linsyre eller trikloreddiks<y>re). Når karboksylsyren (V) brukes som fri syre eller i form av salt, benyttes et egnet kondensa-sjohsmiddel. Eksempler på kondensasjonsmidler er N,N'-di-substituert karbodiimid, f.eks. N.^-dicyklohexyl-karbodiimid;

azolider semi N.N^karbonylimidazol og N^NVthionyldiimidazol;

dehydratiseringsmidler som N-etoksykarbonyi-2-etoksy-l,2-di-hydrochinolin, fosforoksyklorid og alkoksyacetylen; 2-halogen-pyridiniumsalter (f.eks. 2-klorpyridiniummetyljodid, 2-fluor-pyridiniummetyljodid) bg lignende. Når et slikt kondensasjons-middel brukes, antar man at reaksjonen forløper via det reaktive derivat av karboksylsyren (V) koplet med kondensasjonsmidlet.

Denne reaksjon mellom forbindelsen (IV), eller et salt eller ester av denne, og acyleringsmidlet, forløper glatt på forøvrig kjent måte. F.eks. kan reaksjonen gjennomføres analogt med beskrivelsen i tysk utlegningsskrift nr. P 246147$• Omsetningen skjer vanligvis i et inert oppløsningsmiddel som f.eks. halogenerte hydrokarboner av typen kloroform, metylenklorid, etc; etere som tetrahydrofuran, dioxan etc; dimetylformamid;dimetylacetamid; aceton; vann og blandinger av disse. Mengden av acyleringsmiddel ligger normalt i området 1 til 5

og fortrinnsvis 1 til 2 molekvivalenter basert på forbinc&sen (IV) eller et salt eller ester. Omsetningen foretas generelt i området

-50 til +4Q°CV Reaksjonstiden er mellom 1 og 10 timer, fortrinnsvis 1 til 3 timer. Etter acyleringsreaksjonen kan beskyttelsesgruppene på R^ og/eller R^ fjernes, om Ønsket. Avspalt-ning av beskyttelsesgruppene R^ og/eller R^ kan skje på forøvrig

kjent måte (se f.eks. japansk utlegningsskrift 52O83/1975 og Pure and Applied Chemistry, £T 335(19^3)) eller en lignende fremgangsmåte*

For eksempel kan t-butoksykarbonyl i form av symbolet R^ fjernes ved behandling med en vandig syreoppløsning (f.eks. saltsyre, svovelsyre etc), og monokloracetyl betegnet ved^R kan fjernes ved behandling med thiourea. Formyl eller trifluoracetyl som R^ kan fjernes ved behandling med kaliumhydrogenkarbonat i vandig metanol og tetrahydropyranyl som R^ kan fjernes ved behandling med fortynnet saltsyre. Fjerning av beskyttelsesgruppene utføres på forøvrig kjent'måte*

Når sluttproduktet (I) fås som fri syre, kan forbindelsen omdannes til et farmasøytisk salt på forøvrig kjent måte»

Når sluttproduktet ifølge oppfinnelsen fremstilles . som et sålt, kan dette omdannes til fri form eller et annet salt på forøvrig kjent måté.

Når sluttproduktet fås som fri karboksylsyre eller et salt av denne i 4-stilling, kan forbindelsen forestres til en ester på kjent måte, idet estertypen er beskrevet detaljert tidligere» Mer spesielt fremstilles esteren ved at man omsetter en forbindelse (I) eller et salt eller reaktivt derivat av denne, med en forbindelse:

hvor R^ betegner en esterrest eller et reaktivt derivat av denne.

Typen salt av forbindelse (I) er som beskrevet for forbindelsen (II) og typen reaktivt derivat av forbindelsen (I) er som beskrevet for forbindelsen (V). Reaktive derivater av forbindelsen (VI) omfatter forbindelser med formel: Hal-R^' (VI<»>) hvor Hal betegner halogen og R^ betegner alkoksytC^^Jmetyl, alkoksytC^,^)-etyl, alkyl(C^^)thiometyl, alkyl(C^_^)karbonyloksymetyl eller alkoksy(C-j^)karbonyloksyalkyl(C^_^). Disse grupper er eksempli-fisert detaljert tidligere i forbindelse med forbindelsen (I).

Symbolet Hal betegner klor, fluor, brom eller

jod, fortrinnsvis jod eller brom.

Forbindelsen med formel (VI') kan f.eks. være metoksymetylklorid, metylthiometylklorid, klormetylacetat, brom-metylacétat, brommetylpivalat, jodmetylpivalat, jodmetyletoksy-karbonat etc.

Når utgangsforbindelsen (I) brukes i fri karboksyl-syreform i 4-stilling, er det gunstig å utføre reaksjonen i nærvær av en base* Basen kan f.eks. være en uorganisk base som

natriumhydrogenkarbonat, kaliumhydrogenkarbonat, litiumkarbonat, natriumkarbonat, kaliumkarbonat etc, og en organisk base som dicyklohexylamin, morf©lin, N-etylanilin, N,N-dietylanilin, N-metylmorfolin, pyridin, trietylamin etc.

Reaksjonen kan utføres i et oppløsningsmiddel som acetonitril, N,N-dimetylformamid, N,N-dimetylacetamid, diklormetan, kloroform, dimétylsulfoksyd, dietyleter, tetrahydrofurari, aceton, metyletylketon, flytende svovelsyreanhydrid. Blant disse foretrekkes dimetylformamid, aceton, acetonitril og flytende svovelsyreanhydrid.

Den anvendte basemengde er vanligvis en ekvivalent i forhold til utgangsforbindelsen (I) eller dens salt. Reaksjonst^emperaturen er fortrinnsvis -20°C til 20°C. Når flytende svovelsyreanhydrid brukes som oppløsnings-middel, er reaksjonstemperaturen med fordel i området -20°C

til -10°C.

Reaksjonstiden varierer med utgangsstoffene, reaksjonstemperatur, oppløsningsmidlets type etc, men er vanligvis i området 10 minutter til 120 timer.

Etter gjennomføring av en av de nevnte reaksjoner som danner forbindelser i henhold til foreliggende oppfinnelse, opparbeides eller isoleres denne fra reaksjonsblandingen på forøvrig kjent måte. Forbindelsen kan videre renses på kjent måte.. Slike fremgangsmåter er f.eks. ekstraksjon, konsentrering, pH-justering, krystallisering, omkrystallisering, kromatografering etc. Forbindelsen (I), dens salt eller, ester, har en hydroksylgruppe i syn-konfigurasjon til acetamidgruppen (dvs. -C0NH-) i 7-stilling. I enkelte tilfelle følges dannelsen av forbindelsen (I) av dannelse av en anti-isomer med formel: ,

hvor Y har samme betydning som ovenfor, dens salt eller ester, selv om man bare bruker den tilsvarende syn-isomere som utgangs-stof f. Men ved fremgangsmåten som består i omsetning mellom (!) forbindelsen (III) eller et salt av denne og (2) vann, amin eller nitrogenholdig heterocyklisk thio, eller ved fremgangsmåten som består i omsetning mellom (1) forbindelsen (II), et

salt eller ester av denne og (2) thiourea, og når utgangsstoffene (II) , (III) eller deres salt eller ester, er en vesentlig ren syn-isomer, vil produksjonen av anti-isomer (I<T>) ikke overstige 10 % av utbyttet av forbindelsen (I).

Når man bruker syn-isomere utgangsstoffer (II), (III) eller (V) i kombinasjon méd den tilsvarende anti-isomere forbindelsen, vil naturligvis reaksjonsblandingen inneholde forbindelsene (I) og (I') (dvs. både syn- og anti-isomere i blanding). Dette gjelder naturligvis også når et salt eller ester av forbindelsen (II), (III) eller (V) bruks som utgangsstoff. Den aktuelle syn-isomer (I), dens sålt eller ester, kan lett opparbeides på kjent måte som ved kromatografering, fraksjonert kry-stallisasjon etc. Forbindelsen (II) eller dens salt eller ester fremstilles i henhold til følgende skjema som beskrevet i japansk utlegningsskrift nr. 95293/1975, IIO93/I975 og 56487/1976 eller japansk patent nr. 1274/1976 eller andre fremgangsmåter som er analoge med disse.

(hvor symbolene W og Y har den tidligere angitte betydning). Først omsettes brom eller klor representert ved W2 med dikéten, f.eks. med formel (VII), hvor mengden brom

eller klor er ekvimolar til diketen. Forbindelsen (VIII) blir derpå omsatt med forbindelsen (IX) eller et salt eller ester

av denné på forøvrig kjent måte for fremstilling av forbindelsen (X) eller.et salt eller,ester av denne. Forbindelsen (IX) eller dens salt eller ester kan fremstilles på kjent måte f.eks. som beskrevet i japansk utlegningsskrift nr. H782/1976, tysk utlegningsskrift nr. P 26O7064 og P 2619243 eller analoge fremgangsmåter. Forbindelsen (IX) eller dens salt eller ester kan dannes ved å omdanne substituenten i 3-stimng©n 7-& cyl-amino-3-acetdksymetyl-3-cefem-4-karboksylsyre eller 7-aeylamino-3-hydroksymetyl-3-cefem-4-karboksylsyre eller et salt eller ester av denne, til en ønsket -GHgY-gruppe og derpå fjerne 7-acyl-gruppen, eller alternativt ved å underkaste en 7-amino-3-akti-vert acyloksymetyl-3-cefem-4~karboksylsyre (hvor den aktiverte acyloksygruppen er tidligere beskrevet) eller et salt av denne, direkte en nukleofil substitusjonsreaksjon med vann, et amin svarende til en kvaternær ammoniumgruppe eller en nitrogenholdig heterocyklisk thiol.

Derpå omsettes forbindelsen (X), dens ;^salt eller ester, med etnnitroseringsmiddel som danner forbindelsen (II) eller dens salt eller ester. Når forbindelsen (X) er 1 salt-form og en basisk gruppe finnes i substituenten Y (f.eks. når Y betegner l-(2-N,N-dimetylaminoetyl)-lH-tetrazol-5-ylthio),

kan forbindelsen (X) omsettes som et syrésalt på nevnte basiske funksjon, f.eks. som saltet av en mineralsyre (saltsyre, svovelsyre eller fosforsyre) eller saltet av en organisk syre (f.eks. oxalsyre eller p-toluensulfonsyre). Når en sterkt sur gruppe finnes på substituenten Y på forbindelsen' (X) (f.eks* når Y

betegner 2-(2-.3ulfoetylamino)-l , 3»4-ithiadiazoi-5-ylthio), kan forbindelsen (X) omsettes som et uorganisk eller organisk salt på nevnte syref unksjon, f.eks* saltet av et alkalimetall- eller jordalkalimetall (f.eks. litium, natrium eller kalium) eller

et organisk basesalt (f*eks. trietylaminsalt).

Som nevnte nitroseringsmiddel kan man normalt bruke salpetersyrling, salpetersyrlingestere som metylnitrit, etylnitrit, amylnitrit etc. og nitrosylklorid. Salpetersyrling kan brukes i den form den dannes ved omsetning av et alkalimetall-nitrit med en syre, f.eks. saltsyre eller eddiksyre.

Nitroseringsreaksjonen, dvs. omsetningen mellom forbindelsen (X) eller et sa]fc eller ester av denne, og nitro-seringsmidlet, gjennomføres med fordel i et oppløsningsmiddel. Man kan bruke ethvert inerte oppløsningsmiddel» Vanligvis brukes dioxan, acetonitril, tetrahydrofuran, vann, eddiksyre eller en egnet blanding av disse.

Reaksjonen påskyndes ved nærvær av syre. Med fordel er syren saltsyre eller eddiksyre. Syremengden er et mol pr. mol forbindelse (I). Normalt gjennomføres nitroseringen ved romtemperatur (25-35°C) eller under avkjøling eller svak oppvarming* Reaksjonen kan utføres i temperaturområdet -2Q°C til 50°C.

Ved denne nitroseringsreaksjon kan hydroksim-forbindelsen (II) med syn-kohfigurasjon i forhold til acylamid-gruppen fremstilles i høyt utbytte. Under visse betingelser får man en stereoisomer med anti-konfigurasjon som vist ved formel (II<*>) i mindre mengde, sammen med nevnte forbindelse (II), men

i mange tilfelle er produksjonen av stereoisomer (II') ikke over 10 % av mengden av forbindelsen (II).

(hvor de anvendte symboler har de angitte betydninger).

Dette er et særlig gunstig trekk ved oppfinnelsen som er.rettet mot fremstilling av forbindelsen (I) i syn-konfigu rasjon i likhet med forbindelsen (II). Den fremstilte forbindelsen (II) kan isoleres og renses ved kjente fremgangsmåter som solvent-ekstraksjon, pH-utfelling, fase-overføring, krystallisering, omkrystallisering, krømatografering etc.

'.■ Den nitrogenholdige heterocykliske thiol (f.eks. ovennevnte forbindelse med formel: HS-Het hvor Het har samme betydning som tidligere angitt) kan dannes 1) ved kjente fremgangsmåter som f.eks. beskrevet i kap. 5 i "Heterocyclic Chemistry"

(A.R. Katritzky og J.M. Lagowsky, John Willey and Sons, I96O), kap. 1 i "Heterocyclic Compounds^ bind 8 (R.C. Elderfield, John Willey and Sons, 1967), "Advances in Heterocyclic Chemistry", bind 9 (A.R. Katritzky og A.J. Boulton, Academic Press, I968,

s. I65-2O9 og Dai Yuki Kagaku (Muni© Kotake (utgiver), Asakura

Shoten, bind 15 eller analoge fremgangsmåter eller 2) véd å la alle nitrogenholdige heterocykliske thioler, enten de er kjent eller fremstilt i henhold til en av de ovenstående metoder 1), gjennomgå forøvrig kjente kjemiske modifikasjonsreaksijoner med hensyn til en eller flere funksjonelle grupper andre enn thiol-gruppen.

Forbindelsen (V) eller dens salt fremstilles som forøvrig kjent. Forbindelsen (V) eller dens salt fremstilles således ved å av-estre en syn*isomerforbindelse med formel:

fit QT hvor R betegner hydrogen eller en beskyttelsesgruppe, R-7 betegner hydrogen eller en beskyttelsesgruppe og A er en esterrest, eller et salt av denne. Estergruppen A kan f.eks. være alkyl-(Cj_^) (f.eks. metyl, etyl, n-propyl, i-propyl, t-butyl, etc), alkyl{C^_^)substituert med fenyl (f.eks. benzhydryl etc).

Avestringen gjennomføres på forøvrig kjent måte som ved hydrolyse, hydrogenolyse, syrespaltning etc Avestringen gjennomføres fortrinnsvis slik at forbindelsen (XI) eller dens salt føres i kontakt med en blanding av trifluoreddiksyre og anisol.. Mengden trifluoreddiksyre og anisol er i overskudd i forhold til mengden (XI) eller dens sålt. Reaksjonen utføres ved -20 til 30°C og reaksjonen avsluttes vanligvis i løpet av fem timer. Om ønsket kan forbindelsen (XI) brukes i kombinasjon med den tilsvarende anti-isomer eller dens salt. Etter reaksjonen kan den ønskede forbindelsen (V) eller dens salt isoleres eller renses på forøvrig kjent måte f.eks. ved konsentrering»krystallisering, kromatografering etc. Imidlertid kan reaksjonsblandingen som inneholder forbindelsen (V) eller dens, salt gjennomgå neste reaksjon uten rensing eller isolering. Nevnte reaktive derivater av forbindelsen. (V) fremstilles på forøvrig kjent måte fra forbindelsen (V) eller dens salt. Forbindelsen (XI) eller dens salt dannes på forøvrig •kjent måte som det fremgår av de senere eksempler. Oppfinnelsen illustreres detaljert ved hjelp av eksempler, men eksemplene skal bare illustrere oppfinnelsen og Ikke danne begrensninger for denne, idet mange variasjoner kan tenkes uten å gå utenfor oppfinnelsens idé og ramme.

Prosentangivelsene er på vektbasis hvor intet annet er angitt. NMR-spektrene er målt i en Varian Model XL-100A

(100 MHz) eller T-60 (60 MHz) med tetrametylsilansom indre eller ytre referanse og alle Æ-verdier er i ppm. Symbolet a står for singlet, d for dublett, dd for dobbelt dublett, t triplett,

£kvartett , m multiplett og J_ en koplingskonstant.

Eksperiment

Tabellen nedenfor angir de minimale inhiberings-konsentrasjoner (MIC) for enkelte typiske forbindelser (I) i henhold til oppfinnelsen fremstilt i arbeidsekåemplene, overfor forskjellige bakterier, sammenlignet med MIC-tall for enkelte cefalosporiner som er markedsført og klinisk anvendt (f.eks.

The New England. Journal of Medicine 294, 24 .(1976) og Journal of Pharmaceutlcal Science 64 189Q (1975)), nemlig: "Cephalothin" (natrium 7-(2-thienylacetamido)-3-acetoksymetyl-3-c ef em-4-ka rboksyla t);

"Cephaloridine" C7-(2-thlenylacetamido)-3-(1-pyridyl)-metyl-3-cefém-4-karboksylsyrebetain3; og

"Cefazolin" fnatrium 7*(lH-tetrazol-lryl)acetamido-3-(2-metyl-l,3,4-thiadiazol-5-yl)thiometyl-3-cefem-4-karboksylatJ..

Den terapeutiske virkning for enkelte representative forbindelser (I) i henhold til oppfinnelsen og "cephaloridine" på infiserte mus fremgår også av tabellen»

(a) Minimal Inhiberingskonsentrasjon (Tabell 1 og 2)

Metode: Agar-seriefortynning

Medium: TSA Inokulumstørrelse: 10^/ml

(b) Terapeutiske virkninger på infiserte mus (tabell 3 og tabell 4)

Forsøksdyr: Hannmus, ICR/SLC

Det ble brukt en gruppe på fem dyr pr. forsøksforbindelSe.

Infeksjonsvei: Intraperitonealt

Infeksjonsbakterier: Escherichia coli 0-111 Observasjonsperiode: 7 dager

Administrasjonsvei: Forsøksforbindelsen (1 mg, 10 mg,

100 mg eller 200 mg) ble oppløst I sterilt såltvann (100 ml) og 0,2 ml av oppløsningen ble gitt subkutant som en enkeltdose umiddelbart etter infeksjon. Dobbelte fortynninger av hver opp-løsning ble gitt til fem grupper på hver fem mus.

Eksempel 1

FremstiIling av 7-(4-brom-2-hydroksyimiho-3-oxobutyrylamino)-3- metyl- 3- cefem- 4- karboksylsyre ( syn- isomer).

Mens en oppløsning av 3,7 g 7-(4-brom-3-oxobutyryl-amino)-3-metyl-3-cefem-4-karboksylsyre i 37 ffil eddiksyre ble om-rørt under isavkjøling,tildryppet man en oppløsning av 0,953 g natriumnitrit i 4 ni vann i løpet av en time.

Derpå ble blandingen omrørt videre ved romtempera tur i 3 timer. Reaksjonsblandingen ble ristet med 100 ml mettet vandig natriumklorid og 200 ml etylacetat og det organiske sjiktet vasket med mettet natriumkloridoppløsning, tørket og konsentrert. Til inndampningsresten satte man etyleter og blandingen ble om-røirt. Det dannede pulver ble filtrert fra. Man fikk 1,34 g av den søkte forbindelse.

IR(KBr, cm"<1>): I77O, 1695,1660

NMR(100 MHz, dg-DMSO, 6): 2,02(s, 3-CH3), 3,46(ABq, J=19 Hz, 2-CH_), 4»59(s, BrCHg-), 5,08(d, J=5Hz, 6-H), 5,69(dd, J=5 & 8 Ha, 7-H), 9»22(d, J=8 Hz, CONH), 13,07(s,«=N0H)

Elementæranalyse:

Beregnet for ci2H12BrN3°6S

c 35,48, H2,98, n 10,34

Funnet

C 34,91*H 3,25, N 10,14

Eksempel 2

Na-7-( 2-( 2-imånp-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamido )-3- metyl- 3- cefem- 4- karboksylat ( syn- isomer).

I 1,2 ml dimetylacetamid oppløste man 0,122 g 7-(4-brom-2-hydroksyimino-3-oxobutyrylamino)-3-nietyl-3-cefem-4- karboksylsyre^(syn-isomer) samt 0,03 g thiourea og blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 1,5 timer. Reaksjonsblandingen ble omrørt med 10 ml etyleter og den overflytende væske ble kastet etter dekantering, hvorpå man tilsatte 10 ml etyleter. Man gjentok dette'to ganger. Den dannede felling ble filtrert fra og oppløst i 10 ml 5 $ natriumkarbonat. Oppløsningen ble kolonnekromatografert på polystyrenharplks ("Amberlite XAD-2V Rohm & Haas Co.) og dextrangel ("Sephadex LH-20" fra Pharmacia) i angitt rekkefølge og eluert med vann. Fraksjonene som inneholdt det ønskede, produkt ble slått sammen og frysetørket. Man fikk på denne måten 0,09 g av den søkte forbindelse.

IR(KBr, cm~^): I76O, I59O

NMR (100 MHz, dg-DMSO + D20, 6):

l,93(s. 3-CH^), 3,25(ABq, J=l8 Hz, 2-CH_), 4,96(d, J=5 Hz,

6-H), 5,57(d, J=5 Hz, 7-H), 6i71(s, thiazolin 5-H)

Elementæranalyse:

Beregnet for C^H^N^O^SgNa^gO

C 33,99, H 3,95, N15,24

Funnet

C 34,24, H 4,15, N 15,13

Eksempel 3

Fremstilling av 7-(4-klqr-2-hydroksyimino-3-oxobutyrylamin^ 3~- cetoksymtet yl- 3- eefem- 4- karboks ylsyre ( syn- isomer)

Mens en blanding av 22,4 g (57,4 mM) 7-(4-klor-3-oxobutyrylamlno)-3-acetoksymetyl-3-cefem-4-.karboksyisyre og .200 ml eddiksyre ble omrørt under isavkjøling, tildryppet man en •oppløsning av 5,5 g (79,7 mM) natriumnitrit i 20 ml vann i løpet av 15 minutter. Isbadet ble tatt bort og etter at blandingen hadde nådd romtemperatur, ble den rørt i 3,5 timer. Til reak-sjonsblandlngen satte man 600 ml mettet vandig natriumklorid og oppløsningen ble ekstrahert med 4 x 250 ml porsjoner etylacetat. Ekstraktene ble slått sammen, vasket med vann, tørket og konsentrert under nedsatt trykk. Dette ga 14,31 g krystaller.

IR(KBr, cm""1): I79<O>

NMR(100 MHz, dg-DMSO, <5):

2,05(s, CH«C0), 3,43 & 3,66(ABq, J=l8Hs, 2-CH2), 4,7<0><&>

5,02(ABq,J»13 Hz, 3-CH2), 4,80(s, CICHg), 5,15(d, J»5 Hz,

6-H), 5,79(dd, J- 5 & 8 Hz, 7-H), 9,28(d, J»8 Hz, CONH), 13,17(s, =N-0H)..

Elementæranalyse:

Beregnet for ci4Hi/ClN^0gS»H20

. C 38,41, H 3,68, K 9,60 Funnet

C 38,53,, H 3,31, N 9,32

Eksempel 4

Fremstilling av 7-(2-(2-imino-4-thia2olin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamidoj-3-acetoksymetyl-3-cefem-4-karboksylsyre-hydroklorid ( syn- isomer)

I 50 ml dimetylacetamid oppløste man 10,4 g (24,9 ^) 7-(4-kl6r-2-hydroksyimino-3-oxobutyrylamino)-3-acetoksymetyl-3- cefem-4-karboksylsyre (syn-isomer) samt 1,89 g thiourea, og oppløsningen ble omrørt ved romtemperatur i 3»5 timer. Oppløs-ningsmldlet ble avdestillert under nedsatt trykk og residuet om-rørt med etyleter. Den overflytende væske ble dekantert fra. Etylacetat ble satt til dekantéringsresten og den overflytende væsken ble kastet igjen. Denne oppløsning åv residuet i etyleter og etylacetat ble gjentatt fire ganger. Det dannede pulver i

ble filtrert fra og tørket. Man fikk den søkte forbindelse med

følgende data:

IR(KBr, cm"1): I78I

NMR (100 MHz, dg-DMSO, 6): '

2,04(s, CH^CO),3,45 & 3,68(ABq, J=l8Hg, 2-CH2), 4,72 & 5,02(ABq, J=13 Hz, 3-CH2>, 5>19(d,<J=>5 Hz, 6-H), 5»79(dd,

J=5+& 8 Hz, 7-H),_ 6,88(s, thiazolin 5-H), 8,8(br. s,

H2N« & thiazolin NH), 9,64(d, J=8 Hz, CONH), 12,4Kbr, s, »N-0H)

Eksempel

Fremstilling av natrium-7-[2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamido)-3-acetoksymetyl-3-cefem-4-karboksylat ( syn- isomer)

I 1 ml dimetylacetamid oppløste man 0,209 S 7-(4-klor-2-hydroksyimino-3-oxobutyrylamino)-3-ac etoksymetyl-3-cefem-4-karboksylsyre (syn-isomer) samt 0,038 g thiourea og den blandede oppløsning ble omrørt ved romtemperatur i 2,5 timer. Reaksjonsblandingen ble tilsatt 10 ml etylacetat og man fikk et gummiaktig produkt som skilte seg ut." Den overflytende væsken ble kastet og residuet blandet med 10 etyleter. Det dannede pulver ble frafiltrert, umiddelbart oppløst i 0,084 g natrium- ,. hydrogenkarbonat i 10 ml vann og kromatografert på dextrangel-kolonne (Sephadex LH-20, Pharmacia), og eluert med vann. Fraksjonene som inneholdt det ønskede produktet ble slått sammen og frysetørket. Man fikk på denne måten 0,098 g av den søkte forbindelsen.

IR (KBr, cm"<1>): I765

NMR (100 MHz, dg-DMSO,<5):

2,02(s, CH^CO), 3,21 & 3,51(ABq, J=l8Hz, 2-CH2), 4,82 &

5»04(ABq, J=13Hz* 3-CH2), 5,04(d, J»5Hz, 6-H),, 5,66(dd, J=5 & 8Hz, 7-H), 6,64(3, thiazolin 5-H), 7,11(br. s, HN= & thiazolin NH), 9,35(d, J=8Hz, CONH), 12,0(br. =N-0H)

NMR(100 MHz, D20, é)<:>

2,14(s, CH3CO), 3,39<&>3,71(ABq, J=»18H2, 2~CHg), 4,74<&>

4.94(ABq, J=13Hz, 3-C<H>2), 5,25(d, J=5Hz, 6-H), 5,86(d, J=5Hz, 7-H), 6,99(3, thiazolin 5-H)

Elementæranalyse:

Beregnet for C1^H1^N^S2Na»2H20

C 36,07, H 3,63, N 14,02

Funnet

C 35,78, H 3.57, N 14,13

Eksempel 6

Fremstilling av natrium-7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hy&roksyimino-acetamidoj -3--acetoksymetyi-3-cefem-4-karboksylat ( syn- isomer)

I en oppløsning av 0,2 natriumhydrogenkarbonat i 4 ml vann oppløste man 0,619 g 7-{2-{2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamido) -3-acetoksymetyl-3-cefem-4-karboksylsyre-hydroklorid. Oppløsningen ble kolonnekromatografert på dextrangel (Sephadex LH-20, Pharmaeia), og eluert med vann. Fraksjonene som inneholdt det ønskede stoffet ble slått sammeng frysetørket. Man fikk 0,42 g produkt. Ifølge IR-og NMR-spéktra stemte forbindelsen godt overens med produktet f ra. eksempel 5-Eksempel 7

Fremstilling av 7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydrbksyimino acetamido1- 3- acetok3ymetyl- 3- cefem- 4- karboksylsyre ( syn- isomer)

Til en blanding av 0,309 g 7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamidoJ -3-acetoksymetyl-3-cefem-4-karboksylsyre-hydroklorid (syn-isomer) og 1 ml eddiksyre satte man tilstrekkelig IN saltsyre til helt å oppløse førstnevnte forbindelse. Oppløsningen ble kolonnekromatografert på polystyrenharpiks (Amberlite XAD-2, Rohm & Haas Go.), og eluert med vann og 20 fo etanol i denne rekkefølgen. Fraksjonene som inne- .

holdt det ønskede stoffet ble slått sammen, konsentrert og fryse-tørket. Man fikk på denne måten den søkte forbindelse*

IR(KBr, cm"1): I77O

NMR (100 MHz, dg-DMSO, &):

2,04(s, CH^CO), 3,38 & 3,62(ABq, J=l8 Hz, 2-CH_), 4,72 &

5,00(ABq, J=13 Hz, 3>CH_), 5,13(d, J=5 Hz, 6-H), *>5,78(dd, J=5& 8 Hz, 7-H), 6,67(3, thiazolin 5-H), 7,04(br. s, HN«= & thiazolin NH), 9,37(d,<J=>8Hz, CONH),

Elementæranalyse:

Beregnet for C^H^N^O^Sg *1,5H20

C 38,46, H 3,87, N 14,95

Funnet

C 38,59, H 3,81, N 14,93

Eksempel 8

Fremstilling av 7-(4-brom-2~hydroksyimino-3-©xobutyrylamino)-3- acetoksvmetyl- 3- cefem- 4- karboksylsyre ( syn- isomer)

Mens en blanding a<y>4,5 g 7-(4-brom-3-oxobutyryl-amino)-3-acetoksymetyl-3-cefem-4-karboksylsyre og 10 ml eddiksyre ble omrørt under isavkjøling, tilsatte man 0,76 g natriumnitrit. Isbadet ble tatt bort og blandingen omrørt ved romtemperatur i

en time. Eddiksyren ble avdestillert under nedsatt trykk og 200 ml etylacetat og 100 ml vann tilsatt. Inndampningsresten.

Blandingen ble innstilt på pH 2 med tilstrekkelig fosforsyre

og rystet kraftig. Det organiske sjiktet ble vasket med vann, tørket og inndampet til tørrhet. Residuet ble omrørt med litt etylacetat og det dannede pulver ble filtrert fra. Man fikk 2,0 g produkt.

IR(KBr, cm"<1>): I79O, 1710, 1655, I55O

NMR (100 MHz, dg-DMSO, 6):

2,05(s, CH^CO), 3,44 & 3,67UBq, J=l8Hz, 2-CH2), 4,59(s, BrCH2-j , 4,70 & 5,<0>2(ABq, J-l^Hz, 3-CH2), 5,14(d, J-4,5 Hz,

6-H), 5,79(dd, J=4,5 & 8,0 Hz, 7-H), 9,28(d, J°8 Hz, CONH),

13,10(si =N-0H).

Elementæranalyse:

Beregnet for C-^H-^BrN^OgS

C 36.22 H 3,04- N 8..82

Funnet

C37,36, H3,14, N 8,82

Eksempel 9

Fremstilling av natrium-7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamido) -3-aceto^symetyl~3-ce:fem-4-karboksylat ( syn- isomer)

I 1 ml dimetylacetamid oppløste man 0,232. g 7-(4-brom-2-hydroksyimiho-3-oxobutyrylamino)-3"ace'toksymetyl-3-cefem-4-karbqksylsyre (syn-ispmer) samt 0,038 g thiourea og den blandede oppløsning ble omrørt ved. romtemperatur i 2,5 time. Reaksjonsblandingen ble tilsatt 10 ml etylacetat, og det skilte seg ut et gummiaktig produkt. Den overflytende væsken ble dekantert fra og residuet blandet med 10 ml etyleter. Det dannede pulver ble filtrert fra og umiddelbart oppløst i 0,084 g natriumhydrogenkarbonat i 10 ml vann. Oppløsningen ble kolonnekromatografert på dextrangel (Sephadex LH-20, Pharmacia), og eluert med vann. Fraksjonene med ønsket stoff ble slått sammen og frysetørket og.man fikk 0,112 g.søkt forbindelse.

Med hensyn til IR- og NMR-spektra stemte produktet godt overens med produktet.fra eksempel 5»

Eksempel 10

Fremstilling av 7-(4-kl°r-2-hydroksyimino-3-oxobutyrylamino)-3-( mandelyloksymetyl)- 3- cefem- 4- karboksylsyre (- syn- isomer)

Mens en oppløsning av 0,47 g (1 mM) 7-(4-klor-3-oxobutyrylamino)-3-(mandelyloksymetyl)-3-cefem-4-karboksylsyre

i 2 ml-eddiksyre. ble omrørt under isavkjøling, ble en oppløsning

av 0,1 g (1,5 mM) natriumnitrit i 0,2 ml vann tilsatt dråpevis

i løpet av en time. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i en time. Eddiksyren ble avdestillert under nedsatt trykk og 50 ml etylacetat og ^ 0 ml vann tilsatt. Blandingen ble rystet

kraftig og det organiske sjiktet Vasket med mettet vandig natriumklorid og tørket. Oppløsningsmidlet ble avdampet og etter tilsetning av 30 mi eter og 30 ml petroleter. ble beholderveggen gnidd med glass-stav. Man fikk på denne måten 0,29 g utfelt stoff.'

•IR(KBr, cm"<1>):

1780, 1741, 17l5(sh.), I675(sh.), I640(sh.)", 1540

NMR(100 MHz, dg-DMSO, 6): 3,24(br, s, 2-CH2), 4,77 & 5,0f(ABq, J-I3HZ, 3-CH2), 5,04(d, J=5Hz, 6-H), 5,l8(s, -CH-), 5,79(dd, J=5 & 8Hz, 7-H), 7,3-7,5(m, C6H5-), 9,2é(d, J=8Hz, -CONH*),, 13,10(s, =N-OH).

Eksempel 11

Fremstilling av 7-[2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamidoj-3-(mandelyloksymetyl)-3-cefem-4-karboksylsyre-hydr©-klorid ^( syn- isomer)

I 2 ml dimetylacetamid oppløste man 0,24 g (0*5nM) 7-(4-klor-2-hydroksyimino-3-oxobutyrylamino)-3-(mandelyloksy-metyl)-3-cefem-4-karboksylsyre (syn-isomer) samt 0,042 g (0,55 mM) thiourea og den blandede oppløsning ble omrørt ved romtemperatur i 2 timer. - Oppløsningsmidlet ble avdestillert under redusert trykk og 60 ml etylacetat tilsatt fulgt av røring. Den dannede felling ble filtrert fra, vasket med eter og tørket* Man fikk 0,26 g stoff...

IR(KBr,cm"<1>):

1776, 1741, 1672, I63I, 1536

NMR (100 MHz, dg-DMSO, 6): ."■"'=•'■

3,26(br. s, 2-GH2), 4,78 & 5,<0>8(ABq, J=13Hz, 3-C<H>2),<,>5,08(d, J=5Hz, 6-H), 5,l8(s, -CH-), 5,78(dd,J=5&8Hz, 7-H), 6,86(s, thiazolin 5-H), 7,3-7,5(m, CgH^-), 9,6l(d,J=8Hz,CONH).

Eksempel 12

Fremstilling av natrium-7-(2-(2-4nino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamidéj-3^(l-metyl-lH-tetrazol-5-yl)-tMometyl-3-cef em-4- karboksylat ( syn- isomer) \ t.- •

I 20. ml fosfatbuffer (0,2 M, pH 6,4) oppløste man 0,883 g 7-C2"^2"imino-4-'thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acet-amidoj-3-acetoksymetyl-3-cefem-4-karboksylsyre-hydroklorid samt 0,232 g l-metyl-lH-tetrazol-5i-thiol og .0,336 g natriumhydrogen- . karbonat, og den blandede oppløsning ble omrørt ved 70°C i tre timer. Reaksjonsblandingen ble kolonnekromatografert på polystyrenharpiks (Amberlite XAD-2, Rohm & Haas Co.) og eluert med vann. Reaksjoner som inneholdt det ønskede stoff ble slått sammen og frysetørket. Man fikk 0,217 g søkt forbindelse*

IR(KBr, cm"1): 1763 .

NMR (100 MHz , dg-DMSO, é):

3,41 & 3,66(AB<q,><J=>l8Hz,2-CH2), 3,93(s, tetrazol-CH^),

4,28 & 4,46(ABq, J=13Hz, 3-CH2)r5,04(d, J=5Hz, 6-H),

5,77(dd, J=5 & 8Hz, 7-H), 6,64(s, thiazolin 5-H), 7,12(br. s, HN* & thiazolin NH), 9,38(d, J=8Hz, CONH), ll,84(br. s,

=NQH).

NMR (100 MHz, D20, 6)<:>

3,47 & 3,82(ABq,J=18Hz, 2-CH2), 4,05(s, tetrazol-CH^),

4,08 & 4,34(ABq, J=13Hz, 3-CH2), 5,22(d, J=5Hz, 6-H),

5,80(d, J=5Hz, 7-H), 6,98(s, thiazolin 5-H).

Elementæranalyse:

Beregnet for C^H^NgO^S^Na^HgO

c 33.52» H 3,00, N 23,45

Funnet

C 33.40, H3,47, N21,66

Eksempel 13

Fremstilling av natrium-7-f2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamido)-3-(l,2,3-triazol-5-yl)thiometyl-3- cefem- 4- karboksylat ( syn- isomer)

I 20 ml fosfatbuffer (0,2 M, pH 6,4) oppløste man 0,883 g 7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acet-amidoj -3-acetoksymetyl-3-cef em-4-karboksylsyrei-hydroklorid (syn-isomer) samt 0,202 g l,2,3-triazol-5-thiol og 0,336 g natriumhydrogenkarbonat, og den blandede oppløsning ble omrørt ved forhøyet temperatur på 70°G i 1,5 time. Reaksjonsblandingen ble utsatt for kolonriékromatografering på polystyrenharpiks (Amberlite XAD-2, Rohm & Haas Co.) pg eluert med vann.

Fraksjonene som inneholdt det ønskede stoff ble slått sammen og frysetørket, og dette ga 0,128 g søkt forbindelse .

IR(KBr, cm"1): 1765

NMR (100 MHz, dg-DMSO, é):

3.39<&>3,58(ABq, J»l8Hz, 2-CH2), 3,95<&>4,30(ABq, J=13Hz, 3-CH2), 5,02(d, J=5Hz, 6-H), 6,66(s, thiazolin 5-H),

7,19(br. s, HN= & thiazolin NH), 7,66(triazol 4-H)

Elementæranalyse:

Beregnet forC^<H>-^<gO>^<S>^<Na>^<l>^HgO

C 33,90, H 3,03, N21,08

Funnet

C 33,91, H 3,68, N 19,27

Eksempel 14- v Fremstilling av natrium-7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-a c etamidoj-3-(3-metyl-l,2,4-thiadIa zol-5-yl)-thiometyl- 3- cefem- 4- karboksylat ( syn- isomer)

I 20 ml fosfatpuffer (0,2 M, pH 6,4) ble det opp-løst 0,663 g 7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2rhydroksyimino-acetamido) -3-acetoksymetyl-3-cef em-4-karboksylsyre-hydroklorid (syn-isomer) samt 0,198 g 3-metyl-l,2,4*",thiadiazol-5-thiol og 0,252 g natriumhydrogenkarbpnat og blandingen ble omrørt ved J0°C i 3»5timer. Reaksjonsblandingen ble kolonnekromatografert på polystyrenharpiks (AMberlite XAD-2, Rohm & Haas. Co.), eluert med vann og 20 $ etanol i denne rekkefølgen.1 Fraksjonene som

inneholdt det ønskede stoffet ble slått sammen og frysetørket og ga 0,142 g stoff.

IR(KBr, ein"<1>): I767

NMR (100 MHz, dg-DMSO, 6) :

2,52(s, thiadiazol-CHg), 3,35 & 3,64(ABq, J=l8Hz, 2-CHg), 4,44 & 4,58(ABq, J=13H2, 3-CH2), 5,05(d, J=5Hz, 6-H), 5,66(dd, J=5 & 8 Hz, 7-H), 6,64(s, thiazolin 5-H), 7,ll(br. s, HN= &

thiazolin NH), 9,46(d, J=8Hz, CONH)

Elementæranalyse:

Beregnet for C^H^NyO^S^Na «3^0

C 32,59, H3,42, N16,63

Funnet

C 32,59, H 3,29, N 16,08

Eksempel 15 Fremstilling av natrium-7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamidoj-3-(4-metyl-l,2,4-triazol-3-yl)thio-me tyl- 3- cefem- 4- karboksylat ( syn- isomer)

I 20 ml fosfatpuffer (0,2 M, pH 6,4) oppløste man 0,883 g 7^(2-(2*imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acet-. amidoJ-3-acetoksymetyl-3-cefem-4-karboksylsyre-hydrøklorid (syn-isomer) samt 0,23 g 4-mety1-1,2,4-triazol-3-thiol og 0,336 g natriumhydrogenkarbonat og den blandede oppløsning ble omrørt ved forhøyet temperatur på 70°C i 3,5 timer. Reaksjonsblandingen ble kolonnekromatografert på polystyrenharpiks (Amberlite XAD-2, Rohm & Haas C<Q>.) og eluert med vann. Fraksjoner, inneholdende ønsket stoff ble slått sammen og frysetørket og ga 0,37! g stoff.

IR(KBr, cm"*1) : . I77O

NMR (100 MHz, dg-DMSO, &) :

3»59(s, triazol-CH^), 3,38 & 3,62(ABq, J=18Hs, 2-CH_),

4,18 & 4,30(ABq, J=13Hz, 3-CH2), 4,99(d, J=5Hz, 6-H), 5,64(dd, J=5 8Hz, 7-H), 6,64(3, thiazolin 5-H), 7,12 (br. s, HN= & thiazolin NH), 8,48(3, trlazol 5-H),

9,43(d, J«8Hz, CONH), 12,0(br,=N0H).

Elementæranalyse:

Beregnet for C^H^NgO^S^Na«2,5^0

C 34,10, H3,58, N19,88

Funnet

c 34,11, H 3,72, n 19,54

Eksempel 16 Fremstilling av natrium-7-^2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydrøksyimino-acetamidoJ-3-(2-metyl-l,3,4-thiadiazol-5-yl) thiometyI- 3- cefem- 4- ka rboksiylat ( syn- isomer)

I 10 ml vann oppløste man 0,53 g (°»93 nMf 7-[2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamido)-3-(mandelyloksymetyl)-3-cefem-4-karboksylsyre-hydroklorid (syn-isomer) samt 0,2 g ,;(1,5 mM) 2-metyl-l,3,4-thiazol-5-thiol og 0,28 g (3,4 mM) natriumhydrogenkarbonat, og den blandede opp-løsning ble omrørt ved 60°C i 50 minutter. Reaksjonsblandingen ble kolonnekromatografert på polystyrenharpiks (Amberlite XAD-2, Rohm & Haas Co.) og eluert med vann og 10 $ etanol i angitt rekkefølge. Fraksjonene inneholdende Ønsket stoff ble slått sammen, konsentrert og frysetørket. De dannede pulvere ble opp-løst i 2 ml vann og oppløsningen kromatografert på dextrangel- kolonne (Sephadex LH-20, Pharmacia), med vann som elueririgs-middel. Fraksjoner inneholdende ønsket stoff ble slått sammen og frysetørket, og ga 0,19 S søkt forbindelse.

IR(KBr, cm"<*1>): 1767, 1666, l600, 1542.

NMR (100 MHz, dg-DMSO; 6):

2,68(s, thiadiazol-CH^), 3,36,& 3,63 (ABq, J=l8Hz, 2-CH2), 4,35 & 4,56(ABq, J=13Hz, 3-0H2), 5,04(d, J=5Hz, 6-H), 5,66(dd, J«5& 8Hz, 7-H), 6r64(s, thiazolin 5-H),

7,10(br. s, HN= & thiazolin NH), 9,35(d, J«8Hz, CONH), 11,92(br. s, =N0H)

NMR (100 MHz, D20, 6): 2,73(s, thiadiazol-CH^), 3,43 & 3,8l(ABq, J=l8Hz, 2-CH2), 4,<0>3 Sc 4,49(ABq, J=13Hz, 3-CH2), 5,22(d, J«=5Hz, 6-H),

5»83(d, J=5Hz, 7-H), 6,99(s, thiazolin 5-H)

Elementæranalyse:

Beregnet for C^H^N^O^S^Na^HgO

G 33,62, H 3,17 N 17,15

Funnet

C33,88, H 3,20 N16,86

Eksempel 17 Fremstilling av 7-(2-(2-imino-4-thiazolih-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamido)-3-(4-karbamoylpyridiniummetyl)-3-cefem-4-karboksylat ( syn- isomer)

En blanding av 0,883 g 7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamido) -3-acetoksymetyl-3-cefem-4-karboksylsyre-hydroklorid (syn-isomer), 0,492 g isonikotinamid,

2 g kaliumjodid, 0,168 g natriumhydrogenkarbonat. og 0,2 M fosfatpuffer (pH 6,4) ble omrørt ved 70<G>C i 3,5 timer. Reaksjonsblandingen ble kolonnekromatografert på polystyrenharpiks

(Amberlite XAD-2, Rohm & Haas Co.) og deretter på dextrangel (Sephadex LH-2P, Pharmacia) i denne rekkefølgen^ og eluert med vann. Fraksjonene som inneholdt ønsket stoff ble slått sammen og frysetørket og ga 0,041 g søkt forbindelse.

IR(KBr, cm"1): 1773

NMR(100 MHz, dg-DMSO, 6):

3,10 & 3,57(AFq, J=18Hs, 2-CH2), 5,08(d, J=5Hz, 6-H),

5,<2>3<&>5*75(ABq,J»14Hz, 3-CH2), 5,69(dd, J-5 & 8 Hz, 7-H), 6,62(s, thiazolin 5-H), 7,05(br. s, HEN & thiazolin NH), 8,17 & 8,74(hver br. s, CONHg), 8,45 & 9,55(ABq, J=6Hz, pyridinring-protoner), 9,32(d, J=8Hz, CONH)

Elementæranalyse:

Beregnet for C^H^N^OgSg-PgO

C 39,65» H 4,38, N 17,<0>4

Funnet

C39,28, H3,91, N 16,97

Eksempel 18

Fremstilling av natrium-7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamldq) -3-hydroksymetyl-3-cefem-4-karboksylat (3 yn- isomer)

I 5 ml vann oppløste man 0,57 g 7-[2-{2-imino-4-thia zolin-4-yl)-2-hydroksyiminoracetamido)-3-(mandelyloksymetyl)-3-cefem-4-karboksylsyre-hydroklorid (syn-isomer) samt 0,17 g

natriumhydrogenkarbonat og tilsatte under isavkjøling og røring 0,55 ffli 2N natriumhydroksyd. Blandingen ble omrørt ved denne

temperatur i 3 timer og ved romtemperatur I 1 time. Reaksjonsblandingen ble kolonnekromatografert på polystyrenharpiks

(Amberlite XAD-2, Rohm & Haas Co.) og eluert med vann. Fraksjonene med Ønsket stoff ble slått sammen og frysetørket og ga 0,19 g søkt forbindelse.

IR(KBr, cm"<1>): 1766, l662(sh>), I6O4, I53O

NMR(100 MHz,. D20, 6):

3,4<6>& 3,72(ABq, J=l8Hz, 2-CH2), 4»31(*» 3-CHg), 5,25(d, J«5Hz, 6-H), 5,84(d, J»5Hz, 7-H), 7,Ql(s, thiazolin 5-H).

Elementæranalyse:

Beregnet for C^^N^OgSgNa^HgO

C 34,14, H 3,53, N 15,31

Funnet

C 34,23, H 3,52, N 15,17

Eksempel 19 Fremstilling av 7-(4-kl°r-2-nydroksyimino-3-oxobutyrylamino)-3- (1-metyl-lH-t etrazol-5-yl)thiometyl-3-cefem-4-karboksylsyre ( syn- isomer) ..

Mens en blanding av 22,3 S 7-(4-klor-3-°XODUtyryl-amino)-3-(l-metyl-lH-tetrazøl-5-yl)thiometyl-3-cefem-4-karboksylsyre og 200 ml eddiksyre ble omrørt under isavkjøling, ble en oppløsning av 3»§S natriumnitrit i 20 ml vann tilsatt dråpevis i løpet av 15 minutter. Kjølebadet ble fjernet og blandingen om-røirt ved romtemperatur i 3 timer. Reaksjonsblandingen ble fortynnet med 600 ml mettet vandig natriumklorid og ekstrahert med 4 x 250 ml etylacetat. Ekstraktene ble slått sammen, vasket med

vann, tørket og konsentrert til tørrhet under medsatt trykk.

Residuet ble omrørt med 200 ml etyleter og det dannede pulver filtrert fra. Man fikk på denne måten 19,0 g søkt forbindelse.

IR(KBr, cm"1): I785

NMR (100 MHz, dg-DMSO, 6):

3,57 & 3»79(ABq, J=l8Hz, 2-CH2), 3,94(s, tetrazol-CH^),

4,20 & 4,37(ABq,J«13Hz, 3-CH2), 4,73<s, C1CH2),

5,13(d, J=5Hz, 6-H), 5,78(dd,J=5 & 8Hz, 7-H),

9,28(d, J=8Hz, CONH)

Eksempel 20 Fremstilling av natrium-7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamido) -3- (l-metyl-lH-tetrazol-5-yl) -thIo-> metyl- 3- cefem- 4- karboksylat ( syn- isomer)

I 1 ml dimetylacetamid oppløste man 0,238 g 7- (4-klor-2-hydroksyimino-3-,oxol:)Utyrylamino) -3- (1-metyl-lH-tetrazol-5-yl)thiometyl-3-cefem-4-karboksylsyre (syn-isomer) samt 0,038 g thiourea, og den blandede oppløsning ble omrørt ved romtemperatur i 2,5timer. Reaksjonsblandingen ble tilsatt 10 ml etylacetat og det skilte seg ut et gummiaktig stoff. Den overflytende væsken ble dekantert fra og residuet tilsatt 10 ml etyleter. Det dannede pulver ble filtrert fra, umiddelbart oppløst i 0,084 g natriumhydrogenkarbonat i 10 ml vann og kromatografert på dextrangelkolonrie (Sephadex LH-20, Pharmacia) med vann som elueringsmiddel. Fraksjonene som inneholdt ønsket stoff ble slått sammen og frysetørket. Man fikk på denne måten 0,112 g av den søkte forbindelsen.

Med hensyn på IR- og NMR-spektra stemte produktet godt overens med produktet fra eksempel 12.

Eksempel 21 Fremstilling av 7-(4-br©m-2-hydrøksyimino-3-oxobu^ 3-(l-metyl-lH-tetrazol-5-yl)thiometyl-3-eefem-4-karboksylsyre ( syn- isomer)

Mens en blanding av 3»43 S 7-(4-Drom-3"OXODUtyryl-amino)-3-(l-metyl-lH-tetrazol-5-yl)-thiometyl-3-cefem-4-karboksylsyre og 24 ml eddiksyre ble omrørt under isavkjøling, tildryppet . man en oppløsning av 0,532 g natriumnitrit i 2,5 ml vann. Blandingen ble omrørt i 10 minutter og videre i en time ved romtemperatur, hvorpå isbadet ble fjernet og blandingen ble rystet kraftig med 60 ml mettet vandig natriumhydrogenkarbonat og 100 ml etylacetat» Det organiske sjiktet ble vasket med mettet, vandig natriumklorid, tørket og konsentrert under nedsatt trykk. Residuet ble rystet med 100 ml etyleter og det dannede pulver filtrert fra. Man fikk på denne måten 2,763 g av den søkte forbindelsen.

IR(KBr, cm"1): I78O

NMR(100 MHz, dg-DMSb, 6) :

3»57 & 3»79(ABq, J=l8Hz,2-CH2), 3,96(s, tetrazol-CH^),

4,23 & 4,39(ABq, J-14HZ, 3-CH2), 4,79(s. BrCH2-), 5,12(d,

J=5Hz, 6-H), 5,76(dd, J«5 & 8Hz, 7-H), 9,27(d, J=8Hz, CONH)

Eksempel' 22

Fremstilling av 7-(^2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamido)-3-(-*-me'tyl--H-tetrazol-5-yl)-thiometyl-3-cefem- 4- karboksylsyre- hydrobromid ( syn- isomer)

I 4 ml dimetylacetamid oppløste man 1,04 g 7-(4-brom-2-hydroksyimino-3-oxobutyry!amino)-3-(1-metyl-lH-tetrazol-5*yl)thimetyl-3-cefem-4-karboksylsyre (syn-isomer)

samt 0,152 g thiourea og blandingen ble omrørt ved romtemperatur I 90 minutter. Man tilsatte til reaksjonsblandingen 50 ml. etyleter og etter røring ble den overflytende væsken dekantert fra. Til residuet satte man etyleter og man gjentok fremgangs-

måten» Prosessen ble gjentatt fem ganger og den dannede felling filtrert fra og tørket. Man fikk 1,058 g søkt forbindelse.

IR(KBr, cm"<1>): I78I

NMR(100 MHz, dg-DMSO, 6):

3,58 &,3,80(ABq, J»l8Hz, 2-CH2), 3,95(s, tetrazol -CH^), 4,23<&>4,40(ABq, J=14Hz, 3-CHg), 5,15(d, J»5Hz, 6-H),

5,75(dd, J=5 & 8Hz, 7-H), 6,83(3, thiazolin 5-H), 9,58(d, J=8Hz, CONH), 12,20(bred s, =N-0H)

Eksempel 23

Fremstilling av natrium-7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamido)-3-(l-metyl-lH-tetrazol-5-yl)-thiometyl- 3- cefem- 4- karboksylat ( 3yn- isomer)

I en oppløsning av 0»l68 g natriumhydrogenkarbonat

i 4 ml vann oppløste man 0,578 g 7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2- hydroksyimino-acetamid) -3-( l-metyl-lH-tetrazol-5-yl) thiometyl-3- cefem-4-karboksylsyre-hydrobromid. Oppløsningen ble kolonnekromatografert på dextrangel (Sephadex LH-20, Pharmacia), og eluert med vann. Fraksjonene inneholdende ønsket stoff ble slått sammen og frysetørket. Man fikk på denne måten 0,267 g av den søkte forbindelsen.

Med hensyn på IR-©g NMR-spektra stemte produktet godt overens med produktet fra eksempel 12.

Eksempel 24 Fremstilling,av 7-(2-(2-åaino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamido)-3-nitrogen-holdig heterocyklisk thiometyl-3-cefem-4- karboksylsyre(I)-hydrokloridT -betain- eller -natrium-salt-( syn- isomer)

Man valgte en av de følgende fremgangsmåter 1 til 4 for fremstilling av forbindelsene som er oppført i tabell 5» De fysikalske egenskaper for disse forbindelser er vist i tabellen.

Fremgangsmåte 1

I 40 ml fosfatpuffer (0,1 M, pH 6,4) oppløste man 0»956 g (2 mM) 7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-a c etamido)-3-a cetoksymetyl-3-cefem-4-karboksylsyre-hydroklorid (syn-isomer) samt 2,2 mM nitrogenholdig heterocyklisk thiol og 0,504 g (6 mM) natriumhydrogenkarbonat, og oppløsningen ble om- rørt ved forhøyet temperatur på 60-65°C i 7 til 8 timer. Reaksjonsblandingen ble konsentrert under nedsatt trykk til ca. 20 ml og etter innstilling på pH 6,5 med 10 # natriumhydrogenkarbonat eller 10 $ fosforsyre om nødvendig, ble konsentratet kolonnekromatografert på polystyrenharpiks (Amberlite XAD-2, Rohm & Haas Go.) og eluert med vann, 5 # etanol og 10 # etanol i angitt rekkefølge. Fraksjoner som inneholdt Ønsket stoff ble

slått sammen og alkohol ble avdestillert under nedsatt trykk. Deretter ble residuet frysetørket og ga den søkte forbindelsen,

dvs. 7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamidoj-3- nItrogenholdig heterocyklisk thiometyl-3-cefem-4-karboksylsyre, -hydroklorid-, -betain- eller -natrium- (syn-isomer).

Fremgangsmåte 2

I 20 ml vann oppløste man 1,14 g (2 mM) 7-^2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamido) -3-(mandelyl-oksymetyl)-3-cefem-4-kårboksylsyre-hydroklorid (syn-isomer) samt 2,2 mM nitrogenholdig heterocyklisk thiol og 0,52 g (6,2 mM) natriumhydrogenkarbonat, og den blandede oppløsning ble omrørt ved forhøyet temperatur på 60°C i 50 minutter. Etter innstilling på pH 6,5 med 10 % natriumkarbonat eller 10 # fosforsyre, ble ovenstående oppløsning kolonnekromatografert på polystyrenharpiks (Amberlite XAD-2, Rohm & Haas Co.) og eluert med vann, 5 % etanol og 10 #-etanol i angitt rekkefølge. Fraksjoner inneholdende

ønsket stoff ble slått sammen og alkoholen avdestillert under

nedsatt trykk. Residuet ble frysetørket. Man fikk på denne

måten den søkte forbindelsen, nemlig 7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamidoJ-3-nitrogenholdig heterocyklisk thiometyl-3-cef em-4-karboksylsyre-» -hydrdklorid-, -betain- eller

-natrium- (syn-isomer).

Fremgangsmåte 3

(1) I 40 ml vann oppløste man 10,7 g (30 mM) 7-aceto-acetamido-3-acetoksymetyl-3-cefem-4-karboksylsyre samt 5»°4 g

(60 mM) natriumhydrogenkarbonat og 30 mM nitrogenholdig heterocyklisk thiol. Etter innstilling på pH 7,0 med 10 % natriumhydroksyd, ble ovenstående oppløsning omrørt ved forhøyet temperatur på 60-65°C i 4 timer. Etter avkjøling tilsatte man 2,31 g (33 mM) hydroksylamin-hydroklorid. Deretter ble pH innstilt på.

3,6 med tilstrekkelig IN saltsyre- Oppløsningen ble hensatt ved romtemperatur over natten. De dannede krystaller ble filtrert fra, vasket med aceton og tørket.. Når den aktuelle forbindelsen var vannoppløselig og ikke ble utfelt, ble reaksjonsblandingen innstilt på pH 3»3©g konsentrert under nedsatt trykk til 50 ml. Til inndampingsresten satte man 1500 ml etanol og blandingen ble omrørt under isavkjøling i 4 timer. Krystallene ble filtrert fra, vasket med etanol og tørket. Man fikk på denne måten 7-amino-3-nItrogenholdig heteroeyklisk thiometyl-3-cefem-4-karboksylsyre. (2) Mens en oppløsning av 1,03 g (3-3 diketen i 5 ml metylenklorid ble avkjølt til -30°C, tildryppet man 15 g av en oppløsning av 1 mol (vektbasis) klor i karbontetraklorid (15 mM) eller en oppløsning av 2,24 g (14 mM) brom i 5 ml metylenklorid. Separat ble 7-amino-;}-nitrogenholdig heterocyklisk thiometyl-3-cefem-4-karboksylsyre (10 mM) og 2,02 g (20 mM) trietylamin opp-løst i 20 ml metylenklorid og avkjølt til -20°C. Derpå ble denne reaksjonsblandingen hurtig, men dråpevis tilsatt den nå avkjølte oppløsning. I mange tilfelle ble det utviklet varme slik at blandingen holdt ca. 0°C. Væsketemperaturen ble øket gradvis til romtemperatur og blandingen omrørt ved denne temperatur i 15 minutter. Man tilsatte"I50 ml etylacetat samt 100 ml 10 # fosforsyre og blandingen ble rystet kraftig. Det organiske sjiktet ble skilt fra, vasket med vann, tørket og konsentrert. Residuet ble oppløst i eter. Man fikk krystaller av 7-(4r-klor(når klor ble anvendt) eller brom-(når brom ble anvendt)-3-pxobutyrylamino)-3- nitrogenholdig heterocyklisk thiometyl-3-cefem-4-karboksylsyre. (3) Mens en blanding av 7 mM 7~(4-kl°r- eller brom-3-oxobutyrylamino)-3-nitrogenholdig heterocyklisk thiometyl-3-cefem-4- karboksylsyre og 24 ml eddiksyre ble omrørt under isavkjøling, tildryppet man en oppløsning av 0,532 g (7,7 mM) natriumnitrit i 2,5 ml vann. Blandingen ble omrørt i 10 minutter og derpå ble isbadet fjernet og blandingen omrørt ved romtemperatur i en time. Til reaksjonsblandingen satte man 60 ml mettet vandig natriumklorid og 100 ml etylacetat og blandingen ble rystet kraftig. Det organiske sjiktet ble tørket og konsentrert. Residuet ble.i opptatt i etyleter og det dannede pulver filtrert fra og tørket. Man fikk på denne måten 7-(4-kl°r- eller brom-2-hydroksyimino-3-oxobutyrylamino)-3-nitrogenholdig heterocyklisk thiometyl-3-

cefem-4-karboksylsyre (syn-isomer).

(4)_ I 4 ml dimetylacetamid oppløste man 2 mM J-{ 4.- kloT-eller brom-2-hydroksyimino-3-oxobutyrylamino)-3-nitrogenholdig heterocyklisk thiometyl-3-cefem»4-karboksylsyre (syn-isomer) samt 0,152 g (2 mM) thiourea, og den blandede oppløsning ble om-rørt ved romtemperatur i 9/0 minutter. Man.tilsatte .50 ml etyleter og etter røring ble den overflytende væsken dekantert fra. Derpå ble etyleter tilsatt og blandingen behandlet på samme måten. Man gjentok dette fem ganger og de resulterende krystaller ble filtrert fra. Pulveret ble oppløst i 20 ml vann og etter innstilling på pH 6,5, ble oppløsningen fylt på polystyrenharpiks (Amberlite XAD-2, Rohm & Haas Co.) og eluert med vann samt 10 % etanol i angitt rekkefølge. Fraksjonene inneholdende ønsket produkt ble oppsamlet, konsentrert og frysetørket. Man fikk det angitte 7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydrpksyimino-acetamido)-3-nitrogenholdig heterocyklisk thiometyl-3-cefem-4-karboksylsyre-betain eller- -natrium-^ syn-isomer)

Fremgangsmåte 4 . , '

(1) I 300 ml- vann oppløste man 31,4 g (0,1 mol) 7-amino-3- (3-oxobutyryloksy)metyl-3-cefem-4-karboksylsyre, 18,5 g (0,22 mol) natriumhydrogenkarbonat og 0,1 mol nitrogenholdig heterocyklisk thiol og etter innstilling på pH 5,5, ble den blandede oppløsning oppvarmet ved 60°C i en time. Etter avkjøling ble reaksjonsblandingen vasket en gang med diklormetan ogVannsjiktet innstilt på pH 3,3 og omrørt under isavkjøling i en, time. Fel lingen ble filtrert fra, vasket med vann, metanol og aceton i denne rekkefølge og tørket. Man fikk 7-amino-3-nitrogenholdig heterocyklisk &hiometyl-3-cef em-4-karboksylsyre. Idet den søkte forbindelsen er vannoppløselig og ikke ble utfelt, ble reaksjonsblandingen innstilt på pH 3,3 og konsentrert under nedsatt trykk . til ca. 50 ml. Til residuet satte man 1500: ml etanol og blandingen ble omrørt under isavkjøling i 4 timer. De dannede krystaller ble filtrert fra, vasket med etanol og tørket. Man fikk på denne måten 7-amino-3-nitrogenholdig heterocyklisk thiometyl-3-cefem-4- karboksylsyre. (2) Med 7—amino-3-nitrogenholdig heterocyklisk thiometyl-3-cefem-4-karboksylsyre fremstilt ovenfor fulgte man frem- gangsmåteprosess 3-(2)>(3)°S (4), for fremstilling av det ønskede 7-( 2- (2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamido)-3-nitrogenholdig hetérocyklisk thiometyl-3-cefem-4-karboksylsyre--betåin- eller -natrium-(syn-isomer).

Eksempel 25 Fremstilling av 7-(4-brom-2-hydroksyimino-3-^ karbamoyloksymetyl- 3- cefem- 4- karboksylsyre ( syn- isomer)

Mens en oppløsning av 0,15 g 7-(4-brom-3-oxbbutylryl-amino)-3-karbamoy!oksymetyl-3-cefem-4-karboksylsyre i 2 ml eddiksyre ble omrørt ved romtemperatur, tildryppet man 0,03 S natriumnitrit i løpet av fem minutter. Blandingen ble rørt videre i 20 minutter og derpå inndampet til tørrhet under nedsatt trykk. Det dannede glåssåktige faste stoff ble oppløst og påsatt en Merck-silicågelplate nr. 57^5 og eluert med etylacetat/eddlksyre/ vann (8:1:1). Fargereaksjonen med 0,5 # kopperkloridoppløsning gå en enkelt gul flekk med Rf = 0,327. Produktet ble derfor antatt å være det søkte og brukt til neste reaksjon.

Eksempel 26 Fremstilling av natrium-7-(2-( 2-imino-4rtn*az°l:i-n*,4-yl)-2-hydroksy-iminp-acetamidp) -3-k^bi^oyloksymetyl-3-cefem-4-karboksylåt ( syn- isomer)

I 1 ml dimetylacetamid oppløste man det rå 7-(4-brom-2-hydroksyimino-3-oxpbutyrylamino)-3-karbamoyloksymetyl-3-cefem-4-karboksylsyre (syn-isomer) samt 0,03 g thiourea. Den blandede oppløsning ble rørt ved romtemperatur i en time. Reaksjonsblandingen ble omrørt med 50 ml etyleter og den overflytende væske dekantert fra pg kastet. Til bunnvæsken satte man 50 ml etyleter og blandingen ble behandlet som ovenfor. De dannede krystaller ble filtrert fra og oppløst i 5 ml 5 prosentlg vandig natriumhydrogenkarbonat. Oppløsningen ble kolonnekromatografert på polystyrenharpiks (Amberlite XAD-2, Rohm & Haas Co.), og eluert med vann. Fraksjonene som inneholdt det ønskede stoff ble slått sammen dg frysetørket. Man fikk på denne måten 0,0636av den søkte forbindelse.

IR(KBr , cm<**1>):

3400, I76O, 1710, 1610, I53O, I4OO, I36O, I33O (karbamoyl-C-N)

NMR(100 MHz, dg-DMSO,

4,72 & 4,86(ABq, J=12Hz, 3-£H2), 4,98(d, J«5Hz, 6-H), 5,63(dd,

J=5 & 9Hz, 7-H), 6,44(br. s, CONHg), 6,72(s, thiazolin 5-H), 7,l(br., NH= & thiazolin -NH-).

Eksempel 2? Fremstilling av pivaloyloksymetyl-7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamido) -3-(l-metyl-lH-tetrazol-5-yl)-thiometyl- 3- cefem- 4-- karboksylat ( syn- isomer)

10,9 S natrium-7T(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamidø) -3-(l-metyi-lH-tetrazol-5-yl)-thiometyl-3-cefem-4-karboksylat (syn-isomer) ble oppløst i 60 ml dimetylformamid og 4,9 g jodmetylpivalat oppløst i 5 ml dimetylformamid ble dråpevis tilsatt under isavkjøling og røring, i løpet av 10 minuttet» Blandingen ble rørt videre i 10 minutter og 700 ml etylacetat tilsatt. Blandingen ble vasket med vann (3 x 150 ml) og tørket på magnesiumsulfat.

Den tørkede oppløsning ble konsentrert under nedsatt trykk og 400 ml dietyleter ble tilsatt hvilket ga.utfelling. Fellingen ble filtrert fra og tørket under nedsatt trykk til det ovenfor identifiserte produkt. Utbytte 7,802 g

IR(KBr, cm"<1>): 1786

NMR (100 MHz r- i dg-DMS0, 6): l,19(s, (CH^C), 3,62 & 3,82(ABq, J=l8Hz, 2-GHg), 3,94(3, tetrazol-CH3), 4,18 & 4,45(ABq, J-I4HZ, 3-CH2), 5,l6(d,

J=5Hz, 6-H), 5,78 8t 5,93(ABq, J=6Hz, OCHgO-pivaloyl).

nær 5,8(m, 7-H), 6,67(3, thiazolin 5-H), 7,10(bred s, NH-C-(=NH)-), 9,42(d, J=8Hz, CONH), ll,32(bred s, =N0H)

Elementæranalyse:<C>21<H>25<N>9°7<S>3<,0>,5H2°

Beregnet: C 40,64, H 4,22, N 20,31

Funnet: C 40,72, H 4,20, N 19,46

Eksempel 28

Fremstilling av pivaoyloksymetyl-7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamidoj ^3-(2-metyl-l,3,4-thiadiazol-5-yl)thiometyl- 3- cefem- 4- karboksylat ( syn- isomer)

0,143 g natrium-7-C2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamido) -3-(2-metyl-l,3,4-thiadiazol-5-yl)thiometyl-3-cefem-4-karboksylat (syn-isomer) ble oppløst i 1 ml di-metylf ormamid , oppløsningen avkjølte med is og omrørt. Man til-

satte dråpevis 0,071 g jodmetylpivalat oppløst i 1 ml dimetylformamid. Blandingen ble omrørt i 10 minutter og man tilsatte derpå 5 ml vann og 50 ml etylacetat. Blandingen ble rystet kraftig. Det organiske sjiktet ble skilt fra, vasket med vann (3 x 10 ml) og tørket over magnesiumsulfat. Den tørre oppløs-ning ble konsentrert under nedsatt trykk for å f j.erne oppløs-ningsmidlet. 10 ml dietyleter ble tilsatt for å gi en felling. Fellingen ble filtrert fra og tørket til det ovenfor identifiserte produkt. Utbytte 0,07 g»

IR(KBr, cm"<1>):. I782

NMR(100MHz, i dg-DMSO, $: l,19(s,(CH3)oG), 2,70(s, thiadiazol-2-CH^), 3,61 & 3,83(ABq, J=l8Hz, 2-CH2), 4,17 & 4,57(ABq, J=14Hz, 3-CH2), 5»19(d, J=5Hz, 6-H), 5,80 & 5,95(ABq, J=6Hz, OCHgO-pivaloyl) nær 5,8(m, 7-H), 6,69(3, thiazolin 5-H), 9,94(d, J=8Hz, CONH), ll,41(br. s,

«N-OH).

Elementæranalyse:

<C>22<H>25<N>7°7<S>4<,H>2°

Beregnet: C 40.92, H 4,21, N 15,18

Funnet: C 41,20, H 4,25-, N 15,20

Eksempel 29 Fremstilling av pivaloyioksymetyl-7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamidoy-3-karbamoyloksymetyl-3-cefem-4-karboksylat ( syn- isomer)

0,5 g natrium-7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamido)-3-karbamoyloksymetyl-3-cefem-4-karboksylat (syn-isomer) ble oppløst i 3 æl dimetylformamid tfl. en oppløs-ning. 0,242 g jodmetylpivalat i 2ml dimetylformamid ble tilsatt litt etter litt til denne oppløsning under isavkjøling og røring. Man fortsatte å røre i 10 minutter og-tilsatte derpå 5 ml vann og 60 ml etylacetat. Den dannede blandingen ble rystet kraftig.

Det organiske sjiktet ble skilt fra, vasket med vann (3 x 10 ml) og tørket over natriumsulfat. Den tørre oppløsning bie konsentrert under nedsatt trykk for å fjerne oppløsningsmidlet og 10 ml dietyleter ble tilsatt for å gi en felling. Fellingen ble filtrert fra og tørket og ga produktet som ovenfor.

Utbytte 0,327 g.

IR(KBr, cm""1) : 1795

NMR (100 MHar, i dg-DMSO, 6):

1,18 (s, (CH^C), 3,46 & 3.66(ABq,J«l8Hz, 2-CHg), 4,58 & 4»85(ABq, J-13HZ, 3-GH2), 5,19(d, J=5Hz, 6-H), 5,82(dd, J=5& 8Hz, 7-H), 5,79 & 5,92(ABq, J-6Hz, OCH20-pivaloyl, 6,54(br.3, OCONHg), 6,66(3, thiazolin 5-H), 7,04(br. s, NH-C(=NH)-), 9,40(d, J-8Hz, CONH), ll,29(br. 3, =N0H)

Elementæranalyse:

Beregnet: C 42,47, H 4,46, N 14,8$

Funnet: C 42,79, H 4,60, N 14,47

Eksempel 30

Fremstilling av l-(etoksykarbonyloksy)etyl-7-(2-(2-imino-4-'thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamido)-3-kårbampyloksymetyl-3-cefem- 4- karboksylat ( syn- isomer) .1,0 natrIum-7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamido]-3-karbamoyloksymetyl-3-cefem-4-karboksylat (syn-isomer) ble oppløst i 6 ml dimetylformamid til en opp-løsning. 1,37 g l-(etoksykarbonyIoksy)etyljodid ble tilsatt og blandingen omrørt i 5 dager. Til denne satte man I50 ml vann og 200 ml etylacetat, fulgt av kraftig røring. Det organiske sjiktet ble skilt fra, vasket med vann (2 x 100 ml) og tørket på magnesiumsulfat. Den tørkede oppløsning ble konsentrert under nedsatt trykk og 100 ml petroleter tilsatt til fellingen. Pulveret ble filtrert fra og ga 0,07 g produkt.

IR(KBr, cm"<1>): I79O

NMR(100MHz, i dg-DMSO, é):

l,l4(t, J=7Hz, -CH2CH3), l,51(d, J»5Hz, 0CH(CH.3)0),

3,46 & 3,68(ABq, J=l8Hz, 2-CH2), 4,l8(q, J=7Hz, -CHgCHj ,

4,60 & 4,85,(ABq, J=13Hz, 3-C<H>2),5,10(d, J=5Hia, 6-H), 5,86(dd, J=5 & 8Hz„ 7-h), 6,55(br*s, OCONHg), 6,66(s,thiazolin 5-H), 6,74(q, J=7Hz, -CHtCH^)-), 7,04(br. s, NH-(C=NH)-), 9,38(d, J=8Hz, CONH), ll,28(br. s, =N0H)

Eksempel 31 Fremstilling av 7-(2- (2-kloracet<y>limino-4-thiazolIn-4-yl)-2-acetoksyimino-aeetamido) -3«-acetoksymetyl-3-cef em-4-karboksylsyre ( syn- isomer)

I 70 ml metylenklorid suspenderte man?2,14 g 2-acetøksyimino-2- (2-kloracetylimino-4-thiazolin-4-yl) eddiksyre (syn-isomer), fulgt av 1,70 g N,N-dimetylanilin. Mens blandingen ble omrørt ved romtemperatur tilsatte man 1,47 g fosforpeirtaklorid i små porsjoner. Blandingen ble rørt i en time. Metylenkloridet ble avdestillert under nedsatt trykk og 21 ml N,N-dimetylacetamid tilsatt. Etter tilsetning av 0,847 g N,N-dimetylanilin ble 1,90 g 7-aminocefalospøransyre tilsatt. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i en time. Etter tilsetning av eter, fikk man et sirupaktig produkt som skilte seg ut. Eteren ble dékantert fra og dekanteringsresten oppløst i vann og etylacetat. Etylacetatsjiktet ble vasket med mettet vandig natriumklorid og ekstrahert med 1 prosentig vandig natriumhydrogenkarbonat. Det vandige alkalisjikt. ble innstilt på pH 2 med fosforsyre og ekstrahert med etylacetat. Etylacetatsjiktet ble vasket med vandig natrium-kloridoppløsning og tørket over magnesiumsulfat. OpplØsnings-midlet ble avdestillert under nedsatt trykk og etter tilsetning av eter, ble beholderveggen gnidd med glass-stav og det ble utfelt et pulver. Pulveret ble filtrert fra og tørket og ga 1,7-70 g 7-(2-(2-kloracetylimino-4-thiazolin-4-yl)-2-acetoksyimino-acet-amido} -3-acetoksymetyi-3-cefem-4-karboksylsyre (syn-isomer).

IR(cm"<1>, KBr): 1784

NMR(100 MHz, dg-DMSO, 6) :

2,06(s, CHgOCOCH^), 2,22(s,"N-0C0CH.J, 3,49 & 3,71(ABq, J=l8Hz, 2-CH2), 4,39(s, C1CH2), 4,72 & 5,03(ABq, J»13Hz, 3-CH2),

5,23(d, J=5Hz, 6-H), 5,89(dd, j=5& 8Hz, 7-H), ?,76(s, thiazolin 5-H), 9,93(d, J=8H^, CONH), 12,96(br. s, thiazolin 3-H)

Eksempel 32. Fremstilling av 7-(2*(2-am^dinothioacetylimino-4-thiazolin-4-yl) -2-acetoksyimino-acetamido) -3-acetoksymetyl-3-cefem-4-karboksylsyre- hydroklorid ( syn- isomer)

14 ml N,N-dimetylacetamid oppløste man 1,120 g

7- (2- (2-kloracetylimino-4-''thiazolin-4-yl) -2-acetoksyimino-aeetamido) -3-acetoksymetyl-3-cefem-4-karboksylsyre (syn-isomer)

og tilsatte under røring ved romtemperatur 0,152 g thiourea.

Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 3,5 time og det ble derpå tilsatt eter, hvorpå det skilte seg ut et©ljeaktig produkt. Eteren ble dekantert fra og etter tilsetning av etylacetat ble pulver, utfelt ved å gni mot beholderveggen. Pulveret ble filtrert fra, vasket med etylacetat og tørket. Man fikk 1,395 g søkt forbindelse»inneholdende en liten mengde etylacetat og N, N-dime ty la c e tamld.

IR(KBr, cm-<1>): 1779 *•'

NMR(100 MHz, dg-DMSO, 5):

2,06 (s, CHgOCOCH^h 2,22(s, «N-OCOCH^), 3,49<&>3,73(ABq, J»l8Hz, 2-CH2), 4,41(s, SCH2C0), 4,72 & 5,03(ABq, J=13Hz, 3- CH2), 5»23(d, J=5Hz, 6-H), 5,88(dd, Jj5 & 8Hz, 7-H), 7,76(s, thiazolin 5-H), 9,37(br. s, H2N-C=NH-HC1), 9,94(d, J=8Hz, CONH), 13,00(br. s, thiazolin 3-H).

Eksempel 33

Fremstilling av natrium-7-(2-(2-iminq-4-thiazolin hydroksyimino- acetamido)- 3- acetoksymetyl- 3- cefem- 4- karboksylat

Til en blanding av 10 ml vann og 10 ml tetrahydrofuran satte man 0,350 g 7-(2-(2-amidinothioacetylimino-4-thiazolin-4-yl)-2-acetoksyimino-aeetamido)-3-acetoksymetyl-3-cefem-4-karbksylsyre-hydroklorid (syn-isomer) og derpå 139 mg natriumhydrogenkarbonat. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i.

25 timer og derpå ved 40°C i 6 timer under røring. Tetrahydrofuranet ble fjernet under nedsatt trykk og residuet kolonnekromatografert på polystyrenharpiks (Amberlite XAD-2, Rohm & Haas Co.) og eluert med vann. Fraksjonene inneholdende Ønsket stoff ble slått sammen og frysetørket. Man fikk på denne måten 0,116 g søkt forbindelse. Ved IR, NMRg elementæranalyse stemte produktet fullstendig overens med forbindelsen fra eksempel 5-

Eksempel 34 Fremstilling av natrium-7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino- acetamido) - 3- acetOksymetyl- 3- cefem- 4- karboksylat ( syn- isomer)

I en blanding av 10 ml tetrahydrofuran og 10 ml vann oppløste man 0,300 g 7- (2-(2-kloracetylimino-4-thiazolin- 4-yl)-2-acetoksyimino-aeetamido)-3-acetoksymetyl-3-cefem-4-karboksylsyre, og 0,136 g natriumhydrogenkarbonat samt 0,053 S thiourea. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 2445 timer og ved 40°C i 6,5 timer under røring. Tetrahydrofuranet ble avdestillert under nedsatt trykk og residuet kolonnekromatografert på polystyrenharpiks (Amberlite XAD-2, Rohm & Haas Co.)

og eluert med vann. Fraksjonene som inneholdt det ønskede stoffet ble slått sammen og frysetørket. Man fikk på denne måten 0,09 g søkt forbindelse som med hensyn på IR, NMR, elementæranalyse og tynnsjiktskromatogram stemte fullstendig overens med forbindelsen fra eksempel 5»

Eksempel 35

Fremstilling av natrium-7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamidoj-3-acetoksymetyl-3-cefem-4-karboksylat ( syn- isomer)

I 20 ml vann suspenderte man 0,525 g 7-(2-(2-amidino-thioacetylimino-4-thiazolin-4-yl)-2-acetoks<y>imino-aeetamido) -3-acetoksymetyl-3-cefem-4-karboksylsyre-hydroklorid .(syn-isomer) fulgt av 0,252 g natriumhydrogenkarbonat. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 15 timer* Reaksjonsblandingen ble påsatt en kolonne av polystyrenharpiks (Amberlite XAD-2, Rohm & Haas Co.) og fraksjonene som inneholdt det ønskede stoffet ble slått sammen og frysetørket.

Man fikk på denne måten &J121 g natrium-7-[2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamido)-3-acetoksymetyl-3-cefem-4-karboksylat (syn-isomer).

Forbindelsen stemte fullstendig overens med forbindelsen fra eksempel 5 med hensyn,på IR, NMR, elementæranalyse og TSK. : Eksempel 36 Fremstilling av 7-(2-(2-kloracetylimino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimiho-acetamido)-3-acetoksymetyl-3-cefem-4-karboksylsyre ( syn- isomer) -■'

I en blanding av 10 ml tetrahydrofuran og 10 ml vann oppløste man 0,350 g 7-(2-(2-kloracetylimino-4-thiazolin-4-yl)-2-acetoksyimino-aeetamido)-3-acetoksymetyl-3-cefem-4-karboksylsyre (syn-isomer) og derpå 0,105 g natriumhydrogen karbonat. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 13,5 timer og ved 40°C i 20,5 timer og til slutt ved 50°C i. 10 timer. Tetrahydrof uranet ble avdestillert under nedsatt trykk og residuet vasket med etylacetat. Det vandige alkalisjiktet ble innstilt på pH 2 og ekstrahert med etylacetat. Etylacetatsjiktet ble vasket med mettet natriumklorid og tørket. Oppløsningsmidlet ble avdestillert under nedsatt trykk og man fikk en pulverrest som etter tilsetning av eter ble filtrertdog tørket. Man fikk 0,114 g av den søkte forbindelsen.

IR(KBr, cm"1): I78O

NMR(100 MHz, dg-DMSO, 6):

2,05(s, CH^), 3,43 & 3,66(ABq, J«18Hz, 2-CHg), 4»38(s, C1CH2), 4,70&5,02(ABq, J«13Hz,. 3-CH2)', 5,17(d, J=5Hz, 6-H), 5,85(dd, J=5 & 8Hz, 7-H)A 7,37(3, thiazolin 5-H)/ 9,48(d, J=8Hz, CONH), ll,58(br. s, -NfcOH), 12,7(br., thiazolin 3-H).

Referanseeksempel 1

Fremstilling av 7-(4-brom-3-oxobutyrylamino)-3-metyl-3-cefem-4-karboksylsyre

En oppløsning av 2,2 g diketen i 5-ml metylenklorid ble avkjølt til -40°C og 4,4 g brom tilsatt dråpevis. Separat ble 4,28 g 7-aminodesacetoksycefalosporansyre og 8,0 g n-dibutylamln oppløst i 120 ml metylenklorid og avkjølt. Blån- , dingen ble tilsatt dråpevis til denne blandede oppløsning. Man oppvarmet til.romtemperatur i løpet av 30 minutter og blandingen ble Omrørt i ytterligere 30 minutter ved denne,temperatur. Opp-løsningsmidlet ble avdestillert under nedsatt trykk og residuet rystet grundig med 200 ml etylacetat og 40 m\ 40 prosentig fosforsyre. Det organiske sjiktet ble vasket med vann, tørket og inndampet til tørrhet under nedsatt trykk, tilsatt etyleter og omrørt. Den dannede felling ble filtrert fra og tørket til

3»7g av den søkte forbindelse.

Referanseeksempel 2 Fremstilling av 7-(4-brom-3-oxobutyrylamino)-3-(måndelyloksy-metyl)- 3- cefem- 4- karboksylsyre

En oppløsning av 1,34 g (0,013 mol.) diketen i 10 ml metylenklorid ble avkjølt til -30°C og en oppløsning av 3,14 g

(0,014 møl) brom i 10 ml metylenklorid tilsatt dråpevis. Separat ble 3,6 g (0,01 mol) 7-åmino-3-(mandelyl©ksymetyl)-3-cefem-4-karboksylsyre og 2,8 ml (0,02 mol) trietylamin oppløst i 50 ml metylenklorid og avkjølt til -20°C. Denne reaksjonsblandingen ble dråpevis tilsatt til den blandede oppløsning i løpet av 10 minutter pg kjøleapparatet tatt bort. Etter oppvarming til romtemperatur ble den omrørt i 30 minutter. MetylenHoridet ble avdestillert under nedsatt trykk og residuet rystet grundig med 30 ml 10 prosentig fosforsyre, 100 ml vann, 20 ml tetrahydrofuran og 25O ml etylacetat. Det organiske sjiktet ble vasket med vann, tørket og destillert under nedsatt trykk for å fjerne oppløsnings-middel, man tilsatte 200 ml eter og gned mot beholderveggen med

glassrstav for utfelling av 4,5 g pulver.

IR(KBr, cm'1):3370,1782,1736,1672,1648,1539

NMR(100 MHz, dg-DMSO, £):

3,24(br. s, 2-CH2), 3,63(3, CHgCO), 4,89(3, BrCHg-),

4,77 & 5,05(ABq, J=14Hz, 3-CHg), 5,04(d, J=5Hz, 6-H),

5,17(s, -CH-), 5,08(dd, J=5 & 8Hz, 7-H), 7,3-7,5(m»C6H5-), 9,02(d, J=8Hz, CONH)

Referanseeksempel 3 Fremstilling av 7-(4-klGr-3-°xobutyrylamino)-3-(l-metyl-lH-tetrazol-5-vl) thipmetyl- 3- cefem- 4- karboksylsyre

Mens en oppløsning av 166,5 g (1,98 mol) diketen i 83O ml metylenklorid ble omrørt under avkjøling ved en innér temperatur på -25 til -30°C, ble 140 (1,97 mol) klorgass inn-ført i løpet av 100 minutter. Derpå ble oppløsningen omrørt videre i 30 minutter ved samme témperatur. Separat oppløste man-500 g (1,52 mol) 7-amino-3-(i-metyl-lH-tetrazol-5-yl)thiometyl-3-cefem-4-karboksylsyre og 394 g (3,05 mol) dibutylamin i 3 liter metylenklorid, avkjølte til -10 til -20°C. Reaksjonsblandingen ble satt dråpevis til denne blandede oppløsning i løpet av 30 minutter og derpå ble blandingen omrørt ved denne temperatur i 40 minutter. Reaksjonsblandingen ble satt til én blanding av

6 liter etylacetat og 6 liter 10 prosentig fosforsyre. Etter

kraftig røring ble det organiske sjiktet vasket méd vann, tørket og konsentrert til tørrhet under nedsatt trykk* Residuet ble

oppløst ved tilsetning av eter og man fikk 644 g pulver av den søkte forbindelsen.

IR(KBr, cm""<1>): I783, I732, I679

NMR(lt)0MHz, dg-DMSO, 6) :

3,57 & 3,79(ABq, J-18Hz, 2-CH2), 3,56(3, COCHgCO),

3,91(s, tetrazol-CH^), 4,20&4,37(ABq, J=13Hz, 3-CH2), 4,52(s, C1CH2), 5,07(d, J-5Hz, 6-H), 5,67(dd, J=5 & 8Hz, 7-H), 9,05(d,J=»8Hz, -CONH-)

Referanseeksemel 4

Fremstilling av 7*(4-brom-3-°x°butyrylamino)-3^(l-metyl-tetrazol- 5- yl) thiometyl- 3- cefem- karboksylsyre

En oppløsning av 1,03 g (0,01 mol) diketen i 5 ml metylenklorid ble avkjølt til -30°C og en oppløsning av 2,24 g (0,01 mol) brom i 5 ml metylenklorid tilsatt dråpevis. Separat ble 3,29 g (0,Oi mol) 7-amino-3-(l-metyl-lH-tetrazol-5-yl)thiometyl-3-cefem-4-karboksylsyre og 2,02 g trietylamin oppløst i 20 ml metylenklorid og avkjølt til -20°C. Ovenstående reaksjonsblanding ble hurtig tilsatt dråpevis til den blandede oppløsning, hvorpå væsketemperaturen nådde opp i 0°C. Væsketemperaturen ble gradvis øket til romtemperatur og blandingen omrørt i 15 minutter..

Den ble satt til en blanding av 150 ml etylacetat og 100 ml 10 prosentig fosforsyre, fulgt av kraftig røring. Det organiske sjiktet ble vasket med vann, tørket og konsentrert under nedsatt trykk. Residuet ble tatt opp i eter. Man fikk 4,1 g pulver av, den søkte forbindelsen.

IR(KBr, cm'1): I78O, 1725, I674

NMR(100 MHz, dg-DMSO, 6) :

3,59 & 3,81(ABq, J=l8Hz, 2-CH2), 3,63(s, COCHgCO),

3,93(s, tetrazol-CH^), 4,21 & 4.38(ABq, J-13H», 3-CH2),

4,38(s, BrCH2), 5,07(d, J=5Hz, 6-H), 5,67(dd, J=5 & 8Hz, 7-H), 9,06(d, J=8Hz, CONH)

Referanseeksempel 5

Fremstilling av 7-(4-brom-3-oxobutyrylamino)-3~karbamoyloksymetyl-3-ce fem- 4- karboksyisyre

En oppløsning av 0,101 g diketen i 2 ml metylen-

klorid ble avkjølt til -30°C og en oppløsning av 0,208 g brom i 1,3 ml karbontetraklorid tilsatt dråpevis. Separat ble 0,303 g 7-amino-3-karbamoyloksymetyl-3-cefem-4-karboksylsyre og 0,303 g trietylamin oppløst i 4 ml metylenklorid og avkjølt. Denne reaksjonsblandingen ble dråpevis tilsatt den blandede oppløsning og etter fjerning<*>av kjøleapparatet for å la temperaturen øke til romtemperatur, ble blandingen omrørt i 30 minutter. Metylén-. kloridet ble avdestillert under nedsatt trykk og residuet rystet grundig med 20 ml 10 prosentig fosforsyre, 3° mi metyletylketon og 5 ml mettet vandig natriumkloridoppløsning. Det organiske sjiktet ble vasket med 5 ml mettet vandig natriumklorid og tørket. Oppløsningsmidlet ble fjernet under nedsatt trykk og etter tilsetning av 5 ml eter gned man mot beholderveggen for utfelling av forbindelsen, utbytte 0,148 g»

IR(KBr, cm"<1>): 3390, 3OOO, I78O, I74O, 1550, 1400, I33O

UV Xmaks.( e, i vaiin): 262 nm(0,89 x lO^)

NMR(10Q MHz, dg-DMSO, 6):

3,48 & 3,66(ABq, J=l8Hz, 2-CH2) ,, 3,64(3, COCHgCO), 4,40(s, BrCH2), 4,64&4,93(ABq, J=13Hz, 3-CH2),

5,ll(d, J=5Hz, 6-H), 5,68(dd, J-5 & 9Hz, 7-H),

6,5(br. s, 0C0NH2), 9,04(d, J=9Hz, CONH)

Elementæranalyse:

Beregnet for C^H^N^OySBr

c 35*79, H 3,23, N 9,61

Funnet: C 35,84, H 3,25, N 8,26

Referanseeksempel 6 Fremstilling av 7-(4-klor-3-oxobutyrylåmino)-3-(mandelyloksy-met yl)- 3- cefem- 4- karboksylsyre

En oppløsning av 0,26 g (3 mM) diketen i 3 ml metylenklorid ble avkjølt til -3Q°C og en oppløsning av 0,21 g (3 mM) klor i 3 il metylenklorid ble tilsatt dråpevis. Separat opp-løste man .1,09 g (3 mM) 7-amino-3-(mandelyloksymetyl)-3-cefem-4-karboksylsyre og 0,84 ml (6mM) trietylamin i 15 ml metylenklorid og avkjølte dette til -20°C. Reaksjonsblandingen ble dråpevis satt til denne blandede oppløsning og etter fjerning av kjøleapparatet slik at blandingens temperatur øket til romtemperatur^ ble den omrørt i 30 minutter» Metylenkloridet ble destillert av under redusert trykk og residuet rystet kraftig med 10 ml 10 prosentig fosforsyre, 30 ml vann, 10 ml tetrahydrofuran og 100 ml etylacetat. Det organiske sjiktet ble vasket med vann og tørket,. Oppløsningsmidlet ble fjernet under redusert trykk og etter tilsetning av 100 ml eter, gned man mot beholderveggen slik at man fikk 1,20 g pulver av den søkte forbindelsen.

IR(KBr, cm"*1): 1784, I74I, 1668, 1538

NMR(100 MHz, dg-DMSO, S):

3,25(br. s, 2-C<H>2), 3,58(s, COCHgCO), 4»56(s, C1CH2-),

4,78 & 5,0=(ABq, J=13Hz, 3-CH2), 5,06(d, J=5Hz, 6-H),

5,l8(s, -CH-), 5,68(dd, j-5 & 8Hz, 7-H), 7,3-7,5(111,

C6H5-), 9,02(d, J=8Hz, -C0NH-).

Referanseeksempel 7

Fremstilling av l- metoksymetyl- lH- tetraz61- 5- thiol

En blanding av 3,2 g natrlumazld, 6 ml etanol og l6 ml vann ble oppvarmet under tilbakeløp og røring og en opp-løsning av 5»2 g metoksymetyl-isothiocyanat i 2 ml etanol tilsatt dråpevis. Blandingen ble kokt ved tilbakeløp i 45 minutter. Derpå ble etanolen avdampet under nedsatt trykk og residuet innstilt surt med IN saltsyre og ekstrahert med etylacetat. Ekstraktet ble tørket og konsentrert til tørrhet og den krystallinske

resten omrørt med n-hexan og filtrert* Krystallene ble omkrystallisert fra toluen* Man fikk på denne måten 1,4 g av den

søkte forbindelsen, smeltepunkt 80-82°C.

IR(KBr,<c>m"<*1>): I5O3, I36O, 1080

NMR (66 MHz , dg-DMS0, 6):

3,36(3,CH3), 5,48(s, CH2)

Elementæranalyse:

Beregnet for C^HgN^OS

c24,66, H 4»14 N 38,35

Funnet

C24,71, H 4,06 N 37,24

Referansee ksempel 8

På samme måten som i referanseeksempel 7 ble natriumazid omsatt med de tilsvarende isothiocyanatestre for fremstilling av de følgende l-substituerte-lH-tetrazol-5-thiol-forbindelser.

$1) l-(2-N,N-dimetylamInoetyl)-lH-tetrazol-5-thiol, smeltepunkt 217-219°C (omkrystallisert fra vandig etanol),

NMR(60MHz, D20 + NaHCO^,6):

3,03(s, N(CH3)2), 3,58(t, CH2), 4,70(t, CH2)

(2) l-metylthiometyl-lH-tetrazol-5-thiol

IR(KBr, em"*1): 1495, 1351

NMR(60 MHz, dg-DMSO, 6):

2,25(s, SCH^), 5,35(s, CH2), 10,l(br. s, tetrazOl-NH)

Referanseeksempel 9

Fremstilling av l- N, N- dimetylkarbamoylmetyl- lH- tetrazol- 5- thiol

(1) En blanding av 6,84 g glycin-N,N-dimetylamid,

9,38 ml trietylamin og 150 ml metylenklorid ble omrørt og

5»09 g karbohdisulfid samt 9,51 g metyljodid tilsatt i angitt rekkefølge.

Blandingen ble omrørt i en time ved romtemperatur.

Reaksjonsblandingen ble rystet kraftig med 200 ml 5 prosentig vandig fosforsyre og det organiske sjiktet vasket med vann, tørket og konsentrert under nedsatt trykk. Dén krystallinske rest ble omrørt med n-hexan, filtrert fra og tørket. Man fikk 12,2 g metyl-2-(K,N-dimetylkarbamoylmétyl)-dithiokarbamat.

IR(KBr, cm"1): 1626, I543

NMR(60 MHz, dg-DMSO, <S): 2,62(s, CH^S), 3,02(s, N(CH3)2), 4,42(d, J»4Hz, CHg), 8,30(br, s, NR) .

(2) En blanding av 10 g metyl-2-(N,N-dimetylkarbamoyl-metyDdithiokarbamat, 3*7g natriumazid og 50 ml etanol ble om-rørt ved 80°C i 6,5 timer. Reaksjonsblandingen ble innstilt på pH 2,5 med 10 % saltsyre og konsentrert til tørrhet under nedsatt trykk. Residuet ble ekstrahert med 100 ml metanol. Metanolek-straktet ble behandlet med aktivkull, konsentrert til tørrhet og inndampningsresten omkrystallisert fra vann. Man fikk 6,7 g av den søkte forbindelsen, smeltepunkt 195-198°C (dekomp.)

NMR(60 MHz, dg-DMSO, 6):

2,87 & 3,07 (hver s,N(CH3)2), 5,21 (s, CHgCO)

Elementæranalyse:

Beregnet for C^H^N^S

C 32,07, H 4,85, N 37,41

Funnet:

c 32.11. H 4,90, N 37,74 Referanseeksempel 10 Fremsti lling av 1-( 2- karboksyetyl)- lH- tetrazol- 5- thlol (1) I 100 ml metylenklorid suspenderte man 10,6.g B-alanin-benzylester-p-toluensulfønat og etter røring 6,06 g trietylamin og 2,28 g karbondisulfid som ble tilsatt i angitt rekkefølge. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 40 minutter. Derpå tilsatte man 4,26 g metyljodid og blandingen ble om-iørt videre ved romtemperatur i 2 timer. Denne reaksjonsblanding ble vasket med vann, tørket og konsentrert til tørrhet under nedsatt trykk, hvorpå 8,3 g metyl-2-(2-benzyloksykarbonyletyl)dithio-karbamat ble dannet som et oljeaktig produkt.

IR (rent, cm"1): 3300, I73O

NMR (60 MHz, CDCl^, 5):

2,57(s, GHoS), 2,76(t, J=6Hz, CH2C0), 4»03(m, NHCHg),

5,17(s, Ph-CH2), 7.25(s. C6H5), 7,7(br. s, NH) (2) En blanding av 8,3 g metyl-2-(2-benzyloksykarbonyl-etyDdithiokarbamat, 1,95 S natriumazid, 10 ml etanol og 40 ml vann ble omrørt ved forhøyet temperatur på 80°C i en time. Etter avkjøling ble reaksjonsblandingen fortynnet med100 ml vann og rystet med etylacetat. Vannsjiktet ble separert, innstilt på pH 1 med 10 % saltsyre og ekstrahert med etylacetat. Ekstraktet ble vasket med vann, tørket og konsentrert til tørr-het under nedsatt trykk. Man fikk på denne måten 3»^4 g l-(2-benzyloksykarbonyletyl)-lH-tetrazol-5-thiol som en olje.

IR (rent, cm"1): I725

NMR (60 MHz, CDGl^, 6):

3,09(t, J=6Hz, CH2C0), 4,54(t, J»6Hz, tetrazol-CH2),

5,15(s, Ph-CH2), 7,33(s, C6H5-) (3) En blanding av 3»$4 g l-(2-benzyloksykarbonyletyl)-lH-tetrazol-5-thiol, JO ml tetrahydrofuran og 29 ml lN-natriumhydroksyd ble hensatt ved romtemperatur i 2 timer. Reaksjonsblandingen ble vasket med etylacetat og vannsjiktet innstilt på pH 1 med 10 $ saltsyre og ekstrahert med etylacetat. Ek*raktet ble vasket med vandig natriumklorid, tørket og inndampet til tørrhet. Man fikk 1,9 g pulver av den søkte forbindelse.

IR (Nujol, cm"<1>): 1708

NMR (60 MHz, dg-DMSO, A):

2,88(t, J=7Hz, CH2C0), 4,40(t, J=7Hz, tetrazol-CH2),

. 12,2 (br. s, NH & COgH) -

Referanseeksempel 11 Fremstilling av l-( karbamoylmetyl)- lH- tetrazol- 5- thi6l

De reaksjoner som er beskrevet 1 referanseeksempel 10 (1)-og (2) ble utført med glycinbenzylester-p-toluensulfonat

i stedet for 8-alahinbenzyiester-p-tpluensulfonat for fremstilling av l-benzyloksykarbohylmetyl-lH-tetra2ol-5-thiol, som derpå ble omsatt med alkoholisk ammoniakk til tittelforbindelsen.

Referanseeksempel 12

Fremstilling av 2- metoksymetyl- l, 3, 4- thiadiazol- 5- thiol

(il) En oppløsning av 4,9 g kaliumhydroksyd i JO ml

metanol ile omrørt under isavkjøling og 8,56 g metoksyacetyl-hydrazid samt 5»3ra| karbondisulfid tilsatt. Blandingen ble omrørt under avkjøling i 30 minutter og ved romtemperatur i 30 minutter. Metanolen ble fjernet under nedsatt trykk og inndampningsresten løsnet med etanol, hvoretter man fikk et krystallinsk pulver. Krystallene ble filtrert fra og tørket til 10,5 g kalium-3-(metoksyacetyl)dithiokarbazinat. (2) I 40 ml isavkjØlt konsentrert svovelsyre oppløste man 10,5 g kalium-3-(metoksyacetyl)dithiokarbazinat og oppløs-ningen ble omrørt under isavkjøling i 10 minutter. Den ble derpå helt over 150 g is og omrørt pg det skilte seg ut krystaller.

Krystallene ble filtrert fra, vasket med kaldt vann og tørket. Man fikk 4*8 g av den søkte forbindelsen.

NMR (60 MHz, CDClg, 6) :

3,46(s, CH^), 4,60(s, CH2), 12,33(br. s, thiådiazol-NH)

Elementæranalyse:

Beregnet for C^HgNgSg

C 29,61, H 3,73, N 17,27

Funnet:

C 29,43, H 3,98, N 17,34

Referanseeksempel 13

Fremstilling av 3- hydroksymetyl- 4- metyl- l, 2T4- triazol- 5- thiol

En blanding av 9 g glykolsyrehydrazid, 7,3 S metylisotMocyanat, 50 ml metanol og 50 ml etanol-ble oppvarmet under tilbakeløp i fem timer. Etter tilsetning av 2,3 g natriummetall, ble blandingen kokt videre ved tilbakeløp i 24 timer. Reaksjonsblandingen ble konsentrert under nedsatt trykk og residuet oppløst i I50 ml vann og innstilt på pH 2,5 med fosforsyre. De dannede krystaller ble filtrert fra og omkrystallisert fra etanol. Man fikk på denne måten 5,2 g av den søkte forbindelse, smeltepunkt 199-201°C.

NMR A(60 MHz, Dg-DMSO, 6):

3,54(s, CH«), 4,56(3, CHpO)

Elementæranalyse

Beregnet for G^H^N^O^S

C33,08, H4,86, N 28,94

Funnet:

C 32,99, H 4,90, N28,65

Refe ranseeksempel 14 Fremstilling av 3- karbamoyl- 4- metyl- l, 2, 4- triazol- 5- thiol I 100 ml etanol oppløste man 5»3g 4-metylthio-semikarbazid samt. 5,9 g etyloxaminat og 1,6 g natriummetall,

og oppløsningen oppvarmet under tilbakeløp i 48 timer. Etter avkjøling ble reaksjonsblandingen fortynnet med 100 ml vann og innstilt surt med fosforsyre. De dannede krystaller ble filtrert fra og omkrystallisert fra vann. Man fikk på denne måten 2,0 g av den søkte forbindelsen.

NMR (60 MHz, dg-DMSO, 6):

3,67(s, CB<*>3), 7,90 & 8A3(hvor s, C0NH2), - 3,30(s, SH), 12,5(s, triazol-NH)

Referanseeksempel 15

De funksjonelle grupper til de nitrogenholdige heteroc<y>kliske thioler fremstilt ovenfor under referanseeksemp-lene gjennomgikk kjemisk omdannelse som forøvrig kjent for fremstilling a<y>de følgende nitrogenholdige heterocykliske thioler. (1) l-karboksymetyl-lH-tetrazol-5-thiol 1-N,N-dimetylkarbamoylmetyl-lH-tetrazol-5-thiol ble hydrolysert med natriumhydroksydoppløsning.

Smeltepunkt 156-l60°C (dekomp.)

IR (KBr, cm"<1>): 1713

NMR (60 MHz, dg-DMSO, 6):

5,03(s, CH2C0), 12,09(br. s, NH & -CO0H)

(2) l-(2-hydroksyetyl)-lH-tetrazol-5-thiol 1- benzyloksykarbonylmetyl-lH-tetrazol-5-thiol ble redusert med litiumaluminiumhydrid-tetrahydrofurah.

Smeltepunkt 137-139°C.

NMR (60 MHz, dg-DMSO, 6):

3,8(m, CH20), 4,2(m, tetrazol-CH2-)

(3) 2-(2-N,N-dimetylaminoetyl)-l,3,4-thiadia2ol-5-thiol 2- (N,N-dimetylkarbamoylmetyl)-1,3»4-thiadiazol-5-thiol ble redusert med borhydrid-tetrahydrofuran.

NMR (60.MHz, D20, 6):

2,47(s, N(CH3)2), 3,0-3,3(A22-<k>urvem.CH2CH2).

Referanseeksempel 16 Fremstilling av ben2hydryl- 4- brom- 3- oxobutyrat

I 10,5 ml metylenklorid oppløste man 2,1 g diketen og ved en temperatur på ikke over ~30°C tilsatte man en oppløs-ning av 4)0 g brom i 12,5 ml metylenklorid, dråpevis til oppløs-ningen under røring. Derpå ble blandingen holdt ved 0°G i 10 minutter. Separat ble 3»68 g benzhydrol oppløst i 25 ml metylenklorid, fulgt av 2,02 g trietylamin. Under røring ved høyst -30°G ble den fremstilte bromacetoacetylbromid-oppløsnihg tilsatt dråpevis. Derpå ble blandingen omrørt ved 0°C i 40 minutter, og der etter vasket med vann» Etter tørkning på magnesiumsulfat ble oppløsningsmidlet avdestillert under nedsatt trykk og man fikk 6»99g benzhydryl-4-brom-3-oxobutyrat.

■j

IR (Gm"<x>, ren): 1743

NMR(60 MHz, CDCl^, 4):

3,68(s, COCH2<C>O), 3,87(3, BrCH2), 6,82(s, CH), 7,21(s,

arom. H)

Referanseeksempel 17

Fremstilling av ben2hydryl- 4- brom- 2- hydroksyimino- 3- oxobutyrat

I 30 ml eddiksyre oppløste man 6,94 g bénzhydryl-4-brom-3-oxobutyrat og under isavkjøling og røring tilsatte man dråpevis en oppløsning av 1,588 g natriumnitrit i 6 ml vann. Blandingen ble omrørt videre ved romtemperatur i 20 minutter og

etter tilsetning av 60 ml mettet vandig natriumkloridoppløsning, ble blandingen ekstrahert med etylacetat. Etylacetatsjiktet ble vasket med mettet vandig natriumklorid og tørket på magnesiumsulfat. Oppløsningsmidlet ble fjernet i vakuum og man fikk 7,56 g av den søkte forbindelsen.

IR (cm*1, ren): 1742

NMR (60 MHz, CDCly 6):

4,29(s,.BrCH2), 7,19(s, CH), 7,34(s, arom. H),

9,79(br.3, N=0H)

Referanseeksempel 18

Fremstilling av benzhydryl- 2- acetoksyimino- 4- brom-' 3- oxobutyrat Til 50 ml eddiksyreanhydrid satte man 26,2 g - benzhydryl-4-brom-2-hydroksyimino-3-oxobutyrat og blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 100 minutter. Overskuddet av eddiksyreanhydrid og eddiksyren som ble dannet ved reaksjonen ble avdestillert under nedsatt trykk. Man fikk 26,7 g av den søkte forbindelsen.

IR (cm<*1>, ren): I8O9, 1750

NMR (60 MHz, CDCl^, 6) : l,94(s, CH^), 4,44(S, BrCH2), 7»ll(s, CH), 7»3<>(s, arom. H)

Referanseeksempel 1°> Fremstilling av benzhydryl-2-acetoksyimino-.2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl) acetat

I 20 ml N,N-dimetylacetamid oppløste man 26,5 g benzh<y>dr<y>l-2-acetoks<y>imino-4-brom--3-oxobut<y>rat og under is-avkjøling og røring, 4»8l g thiourea. Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 3 timer og 15 minutter og derpå vasket grundig med 80 ml eter. Eteren ble kastet etter dekantering. Man gjentok dette Og blandingen ble helt opp i 100 ml vann,, hvorpå det utskilte seg krystaller. Etter løsning av krystallene ble disse filtrert fra og vasket med eter, litt etylacetat og eter i angitt rekke-følge. Man fikk 10,738 g krystaller.

IR (cm"1, Nujol): 1790, I746

NMR (100 MHs, dg-DMSO, 4):

1,92(3, CH^), 7,12 & 7,21 (hver s, CH & thiazolin 5-H), 7,42(m,arom.H)

Referanseeksempel 20

Fremstilling av benzhydryl-2-acetoksyimino-2-(2-kloracetylimino-4- thiazolin- 4- yl ) acetat

I 100 ml N,N-dimetylformamid suspenderte man 19,7 g benzhydryl-2-acetoksyimino-2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)acetat, fulgt av 6,02 g trietylamin. Under isavkjøling og"røring tilsatte man 4»98 ml kloracetylklorid dråpevis. Blandingen ble om-rørt videre ved denne temperatur i 10 minutter og ved romtemperatur i 20 minutter. Derpå tilsatte man dråpevis 1,50 ml kloracetylklorid og blandingen ble omrørt i 20 minutter. Reaksjonsblandingen ble helt opp i en oppløsning av. 4,4 g natriumhydrogenkarbonat og 200 ml vann o& ekstrahert med $ 00 ml etylacetat i tre omganger. Etylacetatsjiktene ble slått sammen, vasket to ganger med 100 ml 1 prosentig natriumhydrogenkarbonat og med^mettet vandig natriumklorid. Tørkning. med magnesiumsulfat og avfåpning med aktivkull ble utført samtidig og etter filtrering ble oppløsningsmidlet avdestillert. Til residuet satte man 20 ml etylacetat og blandingen ble hensatt. De dannede krystaller ble filtrert fra og tørket. Man fikk på denne måten 12,7 g_benzhydryl-2-acetoksyimino-2-(2-kloracetylimino-4-thiazolin—4-j.y.l) acetat (syn-isomer). Produktet inneholdt en liten mengde anti-isomer som ble fjernet på følgende måte.

I 50 mi tetrahydrofuran oppløste man 12,0 g av

de ovenstående rå krystaller og etter tilsetning av 100 ml etylacetat, ble blandingen filtrert. Filtratet ble destillert under nedsatt trykk for å fjerne oppløsningsmiddel og 20 ml

etylacetat ble tilsatt. De dannede krystaller ble filtrert fra og tørket. Man fikk 8,142 g benzhydryl-2-acetoksyimino-2-(2-kloracetylimino-4-thiazolin-4-yl)acetat (syn-isomer).

IR (cm<*1>, Nujol): I76O, 1747, 1550

NMR (100 MHz, dg-DMSO, 4): 1,93(3, CH3), 4,41(s, C1CH2), 7,l8(s, CH), 7,2-7,6(m, arom. H),

7,90(3, thiazolin 5-H), 12,90(br. s, NH)

Elementæranalyse:

Beregnet for C^H^CIN^S

C 55,90, H 3,84, N 8,90

Funnet: ...

C 56,19, H3,83, N 8,84

Referanseeksempel 21

I 16,5...ml anisol suspenderte man 6,10 g benzhydryl-2-acetoksyimiho-2-(2-klora cetylimino-4-thiazolin-4-yl)a cetat (syn-isomer) og under isavkjøling og røring ble 65,7 ml trifluoreddiksyre tilsatt dråpevis. Blandingen ble omrørt ved denne temperatur i 15 minutter og derpå ble trifluoreddiksyren avdestillert under nedsatt trykk. Til residuet satte man n-hexan og det skilte seg ut et oljeåktig produkt. Produktet ble vasket grundig med n-hexan og n-hexanet ble dekantert fra og kastet. Man gjentok fremgangsmåten. Til den oljeaktige resten satte man eter og et krystallinsk pulver ble utskilt. Etter tilsetning av litt eter ble de krystallinske pulvere filtrert fra, vasket med litt eter og tørket. Man fikk 3,125 g 2-acetoksyimino-2-(2-kloracetylimino-4-thiazolin-4-yl)-eddiksyre (syn-isomer).

IR (cm*<1>, Nu jul): 1792, 1694

NMR (100 MHz , dg-DMS0, é):

2,22(s, CH^), 4,4Ks, C1CH2), 7,90(s, thiazolin 5-H), 12,95(br. s, NH).

elementæranalyse:

Beregnet for C^HgClN^O^S

C 35,36, H 2,64. N 13,75

Funnet:

c 35.30, H 2,64, N 13,75

Claims

1. 2-( syn)-hydroksyimino-acetamid-forbindelse med formel:

hvor Y betegner hydrogen, hydroksyl, acyloksy, karbamoyloksy, kvaternært ammonium eller nitrogenholdig heterocyklisk thio, eller deres farmasøytiske salter eller estere.

2. Forbindelse som angitt i krav 1, karakterisert ved at Y er hydrogen, hydroksyl, acetoksy, karbamoyloksy, substituert eller usubstituert pyridinium eller substituert eller usubstituert 5- ©Her 6-leddet heterocyklisk thio som Inneholder 1-4 nitrogenatomer og eventuelt 1 oksygen-eller svovelatom. 3v Forbindelse som angitt i krav 2, karakte-ris, e r t v e d at pyridin-substituenten er karbamoyl, karboksyl, sulfo, alkyl eller alkoksy.

4. Forbindelse som angitt i krav 2, ka r akk t e-r i s e r t ved at nevnte 5- eller 6-leddete heterocykliske thio som representerer Y er en gruppe med formel: -S-Het hvor Het betegner substituert eller usubstituert pyridyl, N-oxopyridyl, pyrimidyl, pyridazinyl, N-oxopyridazinyl, pyrazolyl, imidazolyl, thiazolyl, 1,2,3-thiadiazolyl, 1,2,4-thiadiazolyl, 1,3,4-thiadiazolyl, 1,2,5-thiadiazolyl, 1,2,3-oxadiazolyl, 1,2,4-oxadiazolyl, l,3»4-oxadiazolyl, 1,2,5-oxadiazolyl, 1,2,3- triazolyl, 1,2,4-triazolyl, lH-tetrazolyl eller 2H-tetrazolyl.

5. Forbindelse som angitt i krav 4»karakterisert ved at substituenten i Het.-resten er alkyl, halogenalkyl, alkoksy, halogen, hydroksyl, mercapto, amino, karboksyl, karbamoyl, en rest med formel: -X-Z <1> hvor X betegner alkylen og Z1 betegner hydroksyl, mercapto, amino, mono- eller dialkylamino, guanyl, karboksyl, sulfo, karbamoyl, alkoksykarbo nyl, mono- eller di-alkylkarbamoyl, alkoksy, alkylthio, ålkyl-sulfonyl eller alkylkarbonyloksy, en rest med formel: -S-Z hf voormr eZl2: -b N <e> tC e^ gn er hvåolr kyZl -* eolg ler Z* rbesetteen gne-Xr -aZ 1lk, yell, lerr esten en re-Xst -Z m•e,d alkoksykarbonyl, alkylkarbonyl, karbamoyl eller mono- eller di-alkylkarbamoyl . f■*

6. Forbindelse som angitt i krav 2, karakterisert ved at nevnte 5- eller 6-leddete heterocykliske thio som representerer Y betegner

hvor R1 betegner hydrogen eller en rest med formel: -(CHg)n P (hvor n er et tall fra 1 til 3 og P betegner hydrogen, hydroksyl, alkoksy, alkylthio, sulfo, en rest med formel: -COOR^" (hvor R^ er hydrogen eller alkyl), en rest med formel: -CON^" ^ (hvor og R^ betegner hydrogen eller alkyl) eller en rest med formel:

(hvor R^ og R^ har samme betydning som ovenfor)] , og hver av gruppene R. og R-5 betegner hydrogen, amino, karbamoyl, en rést med formel: -NHCOOR*^ (hvor R^ betegner alkyl), en rest med formel:'-S-fCHg) Q (hvor n er et tall fra 1 til 3 og Q betegner karboksyl, hydroksyl, hydrogen eller sulfo) eller en rest med formel: -(CHg) P (hvor n og P har samme betydning som ovenfor).

7» En forbindelse som angitt i krav 2, ka r akk t e-r i sert ved ..at I betegner acetoksy, karbamoyloksy, l-substituert-lH-tétrazol-5-ylthio, 2-substituert-l, 3»4-thia diazol-5-ylthio, 3,4-disubstituert-l,2,4-tria2ol-5-ylthio eller 4-substituert-thiazol-2-ylthio, hvor substituenten er metyl, karboksymetyl, hydroksymetyl, hydroksyetyl, karbamoylmetyl eller 2-N,N-dimetylaminoetyl, og de to substituenter i 3»4 -disubstituert«-l,2,4-triazol-5-ylthio er like eller forskjellige.

8. Forbindelse som angitt i krav 2, karakte-riss r t ved at Y betegner acetoksy, karbamoyloksy, 3-substituert-l,2,4-thiadiazol-5-ylthio, 2-substituertf-l,3,4-oxadiazol-5-ylthio, l-substituert-imidazol-2-ylthio, 1-substituert-lH-tetrazol-5-ylthip, 2-substituert- l,3»4 -thiadiazol-5-ylthio, 3»4-disubstituert-l,2,4-triazol-5-ylthio eller 4-substituert-thiazol-2-ylthio, hvor substituenten er metyl, karboksymetyl, hydroksymetyl, hydroksyetyl, karbamoylmetyl, 2-N,N-di-metylaminoetyl, metoksymetyl, eller etbksykarbonylmetyl og de to substituenter på 3»4 -disubstituert-l,2,4-triazol-5-ylthio er like eller forskjellige.

9- Forbindelse som angitt i krav 2, karakterisert ved at esteren er en alkoksymetylester, en ålkoksyetylester, en alkylthiometylester, en alkylkarbonyl-oksymetylester eller en alkoksykarbonyloksyålkylester.

10. Forbindelse som angitt i krav 2, karakterisert ved at esteren er metoksyetylester, etoksymetylester, Isopropoksymetylester, a-metoksyetylester, a-etoksyetylester, etylthiometylester» ispropylthiometylester, pivaloyloksymetylester, a-acetok3ybutylester eller l-(etoksykarbonyl- oksy)etylester.

11# Forbindelse som angitt i krav 2, karakterisert ved at esteren er pivaloyloksymetylester eller l-(etoksykarbonyløksy)etylester og Y betegner karbamoyloksy eller en rest med formel:

12. Forbindelse som angitt i krav 2, nemlig 7-(2-(2-imino-4-thiassolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamido) -3-metyl-3-cefem-4-karboksylsyre ( syn-isomer) eller et farmasøytisk salt av denne. 13. Forbindelse som angitt i krav 2, nemlig 7-(2-(2-imino-4rthiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamido)-3-acetoksymetyl-3-cefem-4-karboksylsyre ( syn-isomer) eller ét farmasøytisk salt av denne. 14» Forbindelse som angitt i krav 2,nemlig 7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamido) -3-karbamoyloksymetyl-3-cefem-4-karboksylsyre ( syn-isomer) eller et farma-søytisk salt av denne. 15. _ . Forbindelse som angitt i krav 2, nemlig 7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamido) -3-( l-nietyl-tetrazol-5-yl)thiometyl-3-cefem-4-karboksylsyre ( syn-isomer) eller et farmasøytisk sålt av denne. 16. Forbindelse som angitt i krav 2, nemlig 7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamidoJ-3-(1-(2-N,N-dimetylaminoetyl)tetrazol-5-yl) thiometyl-3-cefem-4-karboksylsyre (syn-isomer) eller et farmasøytisk salt av denne. 17. Forbindelse som angitt i krav 2, nemlig 7~C 2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamido)-3-(1-(3-N,N-dimetylåminopropyl)tetrazol-5-yl) thiometyl-3-cefem-4-karboksylsyre ( syn-isomer) eller et farmasøytisk salt av denne. 18. Forbindelse som angitt i krav 2, nemlig 7-(2-(2-imino-4-thiåzolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetåmido)-3-(1-karba-moylmetyltetrazol-5-yl)thiometyl-3-cefem-4-karboksylsyre ( syn- isomer eller et farmasøytisk salt av denne. 19■• Forbindelse som angitt i krav 2, nemlig 7-(2-(2-iraino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamido)-3-[l-(2-hydroksyetyl)tetrazol-5-yl) thiometyl-3-cefem-4-karboksylsyre (syn-isomer) eller et farmasøytisk salt av denne. 20. Forbindelse som angitt i krav 2, nemlig 7-C2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamido)-3-(l,3,4-;fell ladiazol-2-yl)thiometyl-3-cefem-4-karboksylsyre ( syn-isomer) elier et farmasøytisk salt av denne. 21. Forbindelse som angitt i krav 2, nemlig 7-( 2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamido)-3-(2-metyl-l,3»4 -thiadiazol-5-yl)-thiometyl-3-cefem-4-karboksylsyre ( syn-isomer) eller et farmasøytisk salt av denne. 22. Forbindelse som angitt i krav 2, nemlig 7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamido3-3-(2-(2-N,N-dimetylaminoetyl)-1,3,4-thiadiazol-5-yl)thiometyl-3-cefem-4-karboksylsyre ( syn-isomer) eller et farmasøytisk salt av denne. 23. Forbindelse som angitt i krav 2, nemlig 7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamido)-3-(2-hydroksymetyl-l, 3>4-'bhiadiazol-5-yl) -thiometyl-3-cef cti-4- karboksylsyre (syn-isomer) eller et farmasøytisk salt av denne. 24» Forbindelse som angitt i krav 2, nemlig 7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamido)-3^ (2-N,N-dimetylkarbamoylmetyl-l,3,4-tniadiazol-5-yl)thiometyl-3- cefem-4-karboksylsyre ( syn-isomer) eller ét farmasøytisk salt av denne. 25. Forbindelse som angitt i krav 2, nemlig 7-(2-(2-imino-4thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamidoj-3-(2-(2-hydroksyetylthio-l,3,4-thiadiazol-5-yl)thiometyl-3-cef em-4- karboksylsyre ( syn-isomer) eller et farmasøytisk salt av denne. 26.. Forbindelse som angitt i krav 2, nemlig 7-(2-(2-imino-4-thiadiazolin-4-yl)2-hydroksyimino-acetamido)-3-(2-karboksymetyl-l,3.4-thiadiazol-5-yl)thiometyl-3-cefem-4-karboksylsyre ( syn-isomer) eller et farmasøytisk salt av denne. 27» Forbindelse som angitt i krav 2, nemlig 7-(2-(2-imino-4-thiazølin-4-yi)-2-hydroksyimino-acetamidoj -3-' (3-metyl-l,2,4-thiadia2ol-5-yl)thiometyl-3-cefem-4-karboksyl syre ( syn-isomer) eller et farmasøytisk salt av denne. 28. Forbindelse som angitt i krav 2, nemlig 7-(2-(2-imino-4-thIazplin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamido)-3-(l,213-triaz°l--4-yl)'thiometyl-3-.cefem-4-karboksylsyre ( syn-isomér) eller et farmasøytisk salt av denne. 29. Forbindelse som angitt i krav 2, nemlig 7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4~ yl)-2-hydroksyimino-acetamido)-3-(4-metyl-l,2,4-triazol-3-yl)thiometyl-3-cefem-4-karbols ylsyre ( syn-isomer) eller et farmasøytisk salt av denne. 30. Forbindelse som angitt i krav 2, nemlig 7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamido)-3-(3,4-dimetyl-l,2,4-triazol-5-yl)-thiometyl-3-cefem-4-karboksyl syre ( syn-isomer) eller et farmasøytisk salt av denne. 31* Forbindelse som angitt i krav 2, nemlig 7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-—yl)-2-hydroksyimino-acetamidoJ-3-(3-hydroksymetyl-4-metyl-l,2,4-triazol-5-yl)thIometyl-3-cef em-4-ka.rboksylsyre ( syn-isomer) eller et farmasøytisk salt av denne. 32. Forbindelse som angitt i krav 2, nemlig 7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamidoJ -3-(2-métyl-l,3,4- xadiazol-5-yl)thiometyl-3-cefem-4-karboksylsyre ( syn-isomer) eller et farmasøytisk salt av denne. 33* - Forbindelse som angitt i krav 2, nemlig 7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamidoJ-3-(4-karboksymetylthiazol-2-yl)thioraetyl-3-cefem-4-karboksylsyre ( syn-isomer) eller et farmasøytisk salt av denne. 34» Forbindelse som angitt i krav 2, nemlig 7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamidoJ-3-(2 -metoks <y> met <y>l -l, 314 -" thiadiazol-5-yl) thiometyl-3-cef em-4- karboksylsyre ( syn-isomer) eller et farmasøytisk salt av denne. 35» Forbindelse som angitt i krav 2, nemlig 7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamido)-3-^ 2-(2-hydroksyetyl)-1,3,4-thiadiazol-5-yl)thiometyl-3-cefem-4-karboksylsyre ( syn-isomer) eller et farmasøytisk salt av denne• 36. Forbindelse som angitt i krav 2, nemlig. 7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamido)-3- (2yetoksykarbonylmet yl-l,3>4 -' thiadiazol-5-yl)thiometyl-3-cefem- 4-karboksylsyre ( syn-isomer) eller et farmasøytisk salt av denne. 37. Forbindelse'som angitt i krav 2, nemlig pivaloyloksymetyl-7-(2-(2-imirio-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamido) -3-(l-metyl-lH-tetrazol-5-yl)thiometyl-3-cefem-4-karboksylat ( syn-isomer) eller et farmasøytisk salt av denne. 38é Forbindelse som angitt i krav 2, nemlig pivabyl-oksymetyl-7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acet- amido) -3-{2-metyl-l,3,4-thiadiazol-5-yl)thiometyl-3-cefem-4-karboksylat ( syn-isomer) eller et farmasøytisk salt av denne. 39» Forbindelse som angitt i krav 2, nemlig pivaloyl-oksymetyl-7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acet-amidoj-3-karbamoyloksymetyl-3-cefem-4-karboksylat ( syn-isomer) eller et farmasøytisk salt av denne. 4P. ;■ (Forbindelse isom angitt i krav 2, nemlig 1-(et© ksykarbonyloksy)etyl-7-(2-(2-imino-4-thiazolin-4-yl)-2-hydroksyimino-acetamido) -3-karbamoyloksymetyl-3-cefem-4-karboksylat ( syn-isomer) eller et farmasøytisk salt av denne. 41. Fremgangsmåte for fremstilling av 2-( syn)-hydroksyimino-acetamid-forbindelser med formel:

hvori betegner hydrogen, hydroksyl, acyloksy, karbamoyloksy, kvaternært ammonium eller nitrogenholdig heterocyklisk thio, eller deres farmasøytiske salter eller estirre, etter forøvrig kjente fremgangsmåter. 42. Fremgangsmåte for fremstilling av 2-( syn)-hydroksyimino-acetamid-forbindelser med formel:

hvor Y betegner hydrogen, hydroksyl, acyloksy, karbamoyloksy, kvaternært ammonium eller nitrogenholdig heterocyklisk thio, eller deres farmasøytiske salter eller estre, karakterisert ved at man (1) omsetter en syn-isomer-forbindelse med formel:

hvor ¥ betegner klor eller brom og Y har samme betydning som ovenfor, eller et salt eller ester av denne forbindelse» med thiourea, (2) omsetter en syn-isomer-forbindelse med formel:

hvor M betegner en acyloksygruppe, eller et salt eller ester av denne, med vann, et amin som svarer til kvaternært ammonium eller nitrogenholdig heterocyklisk thiol, eller et salt av denne, eller (3) omsetter en forbindelse med formel:

hvor Y har samme betydning som ovenfor, eller et salt eller ester av denne, med et acyleringsmiddel avledet av en syn-isomer karboksylsyre med formel:

8 q hvor R betegner hydrogen eller en beskyttelsesgruppe og R-7 betegner hydrogen eller en beskyttelsesgruppe» og om ønsket forestrér reaksjonsproduktet.

43» En syn-isomer-forbindelse med formel:

hvor W betegner klor eller brom og Y betegner hydrogen, hydroksyl, acyloksy, karbamoyloksy, kvaternært ammonium eller nitrogenholdig heterocyklisk thio, eller et salt eller ester av denne.44» Fremgangsmåte for fremstilling av en syn-isomer-forbindelse med formel:

hvor W betegner klor eller brom og Y betegner hydrogen, hydroksyl, acyloksy, karbamoyloksy, kvaternært ammonium eller nitrogenholdig heterocyklisk thio, eller et salt eller ester av denne, karakterisert ved at man omsetter en forbindelse med formel:

hvor gruppene W og Y har de tidligere angitte betydninger, eller et salt eller ester av denne, med et nitroserende middel.

45. Syn-isomer-forbindelse med formel:

hvor cR <8> betegner hydrogen eller en beskyttelsesgruppe og RQ-7 betegner hydrogen eller en beskyttelsesgruppe, eller^ et salt av denne.

46. Fremgangsmåte for fremstilling av en forbindelse med formel:

8 q hvor R betegner hydrogen eller en beskyttelsesgruppe og R- <7> betegner hydrogen eller, en beskyttelsesgruppe, eller et salt av denne, karakterisert ved at man gjennom-fører en av-estring av en syn-isomer-forbindelse med formel:

ftt Q» hvor R betegner hydrogen eller en beskyttelsesgruppe og R- <7> betegner hydrogen eller én beskyttelsesgruppe og A betegner en ester-rest, eller et salt av denne. 47. Et antimikrobielt preparat inneholdende en forbindelse i henhold til krav 1 som effektiv bestanddel.