NO312961B1

NO312961B1 - 3-alkoksyisoksazol-4-yl-substituerte 2- aminokarboksylsyreforbindelser

Info

Publication number: NO312961B1
Application number: NO19991561A
Authority: NO
Inventors: Benny Bang-Andersen; Klaus Peter Boegesoe; Povl Krogsgaard-Larsen; Sibylle Moltzen Lenz
Original assignee: Lundbeck & Co As H
Priority date: 1996-10-04
Filing date: 1999-03-30
Publication date: 2002-07-22
Also published as: EP0934286A1; NO991561D0; ATE230734T1; CA2268028A1; BG103348A; WO1998015542A1; US6200999B1; HUP0000084A3; EA199900358A1; DE69718338T2; SK42899A3; AR008880A1; AU4451797A; CA2268028C; DE69718338D1; IS5009A; KR20000048908A; PL332553A1; HUP0000084A2; ES2189978T3

Abstract

(3-Alkoksyisoksazol-4-yl) -substituerte 2-amino-karboks-ylsyrederivater og svovelanaloger derav med generell formel (I) eller (II) , hvor Rt er hydrogen, alkyl, alkenyl. alkynyl, cykloalk(en)yl, cykloalk(enyl-alk(en/yn)yl, eller valgfritt substituert fenyl-alk(en/yn)yl; A er en binding eller en hydrogen avstandsgruppe; B er en gruppe -CRa (NRuR,.) -COOR5 hvorRa-R,. er uavhengighydrogen eller alkyl, og Rs er definert som ^ eller pivalouyoksymetyl, eller B er en gruppe med formel (III) , hvor R, Rog Rer uav-hengig valgt fra hydrogen, en ikke-aromatisk hydrakarbon-gruppe, fenyl- og tienyl-alkyl, og en hetero alifatisk gruppe, eller Rog Rer knyttet sammen, og således danner en alkylen-, alkenylen- eller alkynylengruppe, eller Rog R, er knyttet sammen for å danne en alkylen-, alkenylen-eller alkynylengruppe,valgfritt substituert med hydroksy eller metyl, eller for å danne CH-0-CH; E er COOR, hvor Rs er definert som R, eller E er en tetrazolyl eller tri-azolyl; X er 0 eller S; og Y er 0 eller S; er eksitatoriske aminosyrer (EAA), spesielt AMPA og/eller NMDA reseptorligander, som er nyttige i behandlingen av cerebral iskemi, Huntingtons sykdom, epileptiske forstyrrelser, Par-kisons sykdom, Alzheimers sykdom,schizofreni, smerte, depresjon og angst.

Description

Oppfinnelsens felt

Foreliggende oppfinnelse vedrører en ny klasse av (3-alkok-syisoksazol-4-yl-substituerte 2-aminokarboksylsyrederivater eller svovelanaloger derav farmasøytiske sammensetninger inneholdende disse og anvendelsen av forbindelsene. Forbindelsene er eksitatoriske aminosyre-(EAA) -reseptorligander, spesielt AMPA- og/eller NMDA-reseptorligander som er nyttige i behandlingen av cerebral iskemi, Huntingtons sykdom, epi-leptiske forstyrrelser, Parkinsons sykdom, Alzheimers sykdom, schizofreni, smerter, depresjon og angst.

Bakgrunn for oppfinnelsen

Som et resultat av omfattende studier av eksitasjonsme-kanismer i sentralnervesystemet i løpet av de tre siste tiår, er det nå konsensus om at ( S)-glutamat (Glu) er ho-ved-EAA-nevrotransmitteren i CNS (Lodge, D. Excitatory Amino Acids in Health and Disease. J. Wiley & Sons: Chichester, 1988; Wheal, H.; Thomson, A, Excitatory Amino Acids and Synaptic Transmission. Academic Press, London, 1991; Meldrum, B.S., Excitatory Amino Acid Antagonists. Blackwell Sci.Publ.: Oxford, 1991; Krogsgaard-Larsen, P.; Hanssen, J.J. Excitatory Amino Acid Receptors: Design of Agonists and Antagonists. E. Horwood: Chichester, 1992) . Glu-operert neurotransmisjon medieres av et stort antall reseptorer, klassifisert i minst fire heterogene reseptor-familier kalt NMDA, AMPA, kainsyre og metobotropiske reseptorklasser (Mo-naghan, D.T. et al. Ann. Rev. Pharmacol. Toxicol., 1989, 29, 365-402; Watkins, J.C.; Krogsgaard-Larsen, P.; Honoré, T. Trends Pharmacol. Sei. 1990, 11, 25-33; Simon, R.P. Excitatory Amino Acids. Thieme Med. Publ. : New York, 1992) .

Det finnes svært sterkt bevismateriale som støtter det syn at overdreven eksitasjon mediert av EAA-reseptorer ("eksitotoksisitet" ) > er en faktor av vesentlig betydning i cerebral iskemi etter slag, hodeskader, asfyksi, subarachno-idalblødning, hjertestans og andre situasjoner (Lodge, D.

1988 supra; Meldrum, B.S., 1991 supra. Det har blitt vist i dyremodeller at skadene forårsaket av forskjellige iskemiske tilstander kan inhiberes ved administrasjon av Glu-antagonister. Således, selv om den relative viktigheten av de forskjellige klasser av EAA-reseptorer i fenomenene som ligger bak iskemiske skader er uklar, er det generell enig-het om at EAA-reseptorantagonister er potensielle terapeu-tiske midler ved disse tilstandene.

Akkumulerende bevismateriale avledet fra forskjellige gre-ner av neurokjemisk og farmakologisk forskning antyder at avsporede EAA-reseptormekanismer, som muligens inkluderer "eksitotoksisitet", spiller en rolle i Huntingtons sykdom (Young, A.B. et al., Science 1988, 241, 981-893), epileptiske forstyrrelser (Krogsgaard-Larsen, P.; Hanssen, J.J., 1992 supra), Parkinsons sykdom (Klockgether, T.; Turski, L. Trends Neurosci. 1989, 12, 285-286, og Alzheimers sykdom (Greenamyre, J.T. ; Maragos, W. F. Cereibrovasc. Brain. Metab. Rev. 1993, 5, 61-94; Francis, P.T. et al J". Neurochem. 1993, 60, 1589-1604).

Videre kan sentrale EAA-reseptorer være involvert i de un-derliggende synaptiske mekanismene ved schizofreni (Rey-nolds, G.P. Trends Pharmacol. Sei. 1992, 13, 116-121, smerte og angst (Drejer, J. i: Excitatory Amino Acid Receptors: Design of Agonists and Antagonists (Eds. Krogsgaard-Larsen, P.; Hanssen, J.J.) E. Horwood: Chichester 1992, s. 352-375) og depresjon (Trullas, R., Skolnick,P., Eur. J. Pharmacol.

1990, 185, 1-10 og Trullas et al., Eur. J. Pharmacol. 1991, 203, 379-385. Således synes redusert funksjon av EAA-reseptorer (EAA-hypoaktivitet) å spille en rolle i for eksempel schizofreni (Deutsch, S.I. et al. Clin. Neuropharma-col. 1989, 12, 1-13) og noen av de kliniske symptomene man ser i Alzheimers sykdom (Greenamyre, J.T. et al. Prog. Neuro- Psychopharmacol & Biol. Psychiat. 1988,12, 421-430). Det er mulig at "ejcsotoksisitet" såvel som EEA hypoaktivitet er involvert i de komplekse mekanismer forbundet med Alzhei-

mers sykdom (Greenamyre, J.T.; 1988 supra; Greenamyre, J.T.; Maragos, W.F., 1993, supra).

Følgelig er EAA-reseptorligander antatt å være nyttige i behandlingen av cerebral iskemi, Huntingtons sykdom, epi-leptiske forstyrrelser, Parkinsons sykdom, Alzheimers sykdom, angst, schizofreni, depresjon og smerte.

De fleste EAA-reseptoragonister som er testet til nå, viser mer eller mindre uttalt neurotoksisitet i modellsystemer, og følgelig kan kliniske anvendelser av slike forbindelser begrenses (Carlsson, M.; Carlsson, A, Trends. Neurosci. 1990,13, 272-276)(Willetts, J.; Balster, R.L.; Leander, J.D. Trends. Pharmacol. Sei. 1990,11, 423- 428).

Partielle EAA-agonister som utviser passende balanse mellom agonisme og antagonisme kan, på den annen side, ha vesentlig terapeutisk interesse, jfr. referansene over (Greenamyre, J.T; 1988 supra; Christensen, I.T. et al. Drug Des. Del. 1989, 5, 57-71; Francis, P.T. et al. J. Neuro- chem. 1993, 60, 1589-1604). Partielle agonister kan ved hjelp av sin EAA-antagonistprofil utvise nyttig neuro-proteksjon, og samtidig være tilstrekkelig agonistiske til å forhindre to-tal blokkering av neurotransmisjonen mediert av den spesi-elle EAA-reseptoren.

ATPA, t-tert-butylanalogen av AMPA (( RS)-2-amino-3-(3-hydroksy-5-metylisoksazol-4-yl)propionsyre), har blitt vist å være systemisk aktiv, mens den ikke har blitt rapportert å vise neurotoksiske effekter i dyr (Ornstein, P.L., et al. J. Med. Chem. 1993, 36, 2046-2048; Lauridsen, J. ; Honoré, T; Krogsgaard-Larsen, P., J. Med. Chem. 1985,28, 668-672).

Som AMPA selv, har en rekke mono-og bicykliske AMPA-analoger blitt funnet å vise selektive agonisteffekter på AMPA-reseptoren. (Hansen, J.J.; Krogsgaard-Larsen, P. Med. Res. Rev. , 1990,10, 55-94; Krogsgaard-Larsen, P.; Hanssen, J.J., 1992 supra). En av disse analogene, ( RS)- 2-amino-3-(3-hydroksy-5-fenylisoksazol-4-yl)propionsyre (APPA), hvor AMPAs metylgruppe har blitt erstattet med en fenylgruppe, viser en svak, men unik, partiell agonistpro-fil (Christensen, I.T. et al., 1989, supra).

ACPA (( RS)-2-amino-3-(3-karboksyoksy-5-metylisoksazol-4-yl)propionsyre) har blitt beskrevet som en potent AMPA-reseptoragonist (Madsen, U. og Wong, E., J. Med. Chem., 1992,35, 107-111).

Videre beskriver WO-A1 95012587 en klasse av (5-aryl-isoksazol-4-yl)- eller (5-arylisotiazol-4-yl)-substitu-erte 2-aminokarboksylsyreforbindelser som EAA-reseptor-ligander.

Som det kan ses av det ovenstående, er ikke-neurotoksiske, CNS-aktive EEA-reseptoriigander med god penetrering inn i CNS svært ønskelige for å behandle de forskjellige nevnte sykdommene, og følgelig er det et mål med foreliggende oppfinnelse å fremskaffe slike nye legemidler.

Oppsummering av oppfinnelsen

Det er nå blitt funnet at en ny klasse 3-alkoksy-isoksazol-4-yl)-substituerte 2-amino karboksylsyredrivater og svovelanaloger derav er AEE-reseptorligander, spesielt AMPA-og/eller NMDA-reseptorligander.

Følgelig vedrører foreliggende oppfinnelse en ny klasse forbindelser som har generell formel I eller II

> hvor Ri er hydrogen, Ci_6-alkyl, C2-6-alkenyl, eller fenyl-Ci-6-alkyl; A er en binding eller en avstands gruppe Ci-6-alkylen ; B er en gruppe -CRa (NRbRc)-COOR5 hvor Ra-Rc er hydrogen, eller B er en gruppe med formel III

hvor R2, R3 og R4 er hydrogen;

E er COOR6, hvor R6 er H, d-Ce-alkyl eller fenyl-Ci-C6-alkyl;

X er O; Y er 0; og

farmasøytisk akseptable salter derav.

I et annet aspekt vedrører oppfinnelsen en farmasøytisk sammensetning omfattende en ny forbindelse med formel I eller II sammen med et egnet farmasøytisk akseptabelt bærerstoff eller fortynningsmiddel.

I enda et aspekt vedrører oppfinnelsen anvendelse av en forbindelse med formel I eller II for å fremstille en far-masøytisk sammensetning for behandling av-cerebral iskemi, Huntingtons sykdom, epileptiske forstyrrelser, Parkinsons sykdom, Alzheimers sykdom, schizofreni, smerte, depresjon eller angst.

Det er blitt funnet at noen forbindelser ifølge oppfinnelsen er AMPA-re sept or ligander med affiniteter i mikromolare konsentrasjoner, og noen forbindelser er blitt funnet å binde til NMDA-reseptorer. Videre ble noen av forbindelsene ifølge oppfinnelsen funnet å være agonister, mens andre ble funnet å være antagonister. Forbindelsene ifølge oppfinnelsen er således nyttige i behandlingen av cerebral iskemi, Huntingtons sykdom, epileptiske forstyrrelser, Parkinsons sykdom, Alzheimers sykdom, schizofreni, smerte, depresjon og angst. Forbindelsene hvor R6 ikke er hydrogen er prodro-ger for de tilsvarende forbindelsene hvor R6 er hydrogen.

Detaljert beskrivelse av oppfinnelsen

Noen av forbindelsene med generell formel I eller II kan eksistere som optiske isomere derav, og slike optiske isomere er også omfattet av oppfinnelsen.

I de generelle formler I og II betyr uttrykket Ci_6-alkyl en rettkjedet eller forgrenet alkylgruppe som har fra 1 til 6 C-atomer, inklusive slike som metyl, etyl, 1-propyl, 2-propyl, 1-butyl, 2-butyl, 2-metyl-2-propyl osv. Tilsvarende betegner C2-6-alkenyl slike rettkjedede eller forgrenede grupper som har 2 til 6 C-atomer og Ci_6-alkylen betegner slike forgrenede eller rettkjedede divalente grupper.

Uttrykket binding (definert for A) betyr at B kan være bun-det direkte til 4-stillingen på isoksazolringen.

Halogen betyr fluor, klor, brom eller jod.

Noen av forbindelsene med generell formel I eller II kan være i form av farmasøytisk akseptable salter derav som og-så er omfattet av oppfinnelsen.

Saltene av forbindelsene med generell formel I eller II er salter dannet med ikke-toksiske organiske syrer, f .eks., ma-leinsyre, fumarsyre, benzosyre, askorbinsyre, oksalsyre, vinsyre, melkesyre og eplesyre, eller uorganiske syrer, f.eks. saltsyre, hydrobromsyre, svovelsyre, fosforsyre og salpetersyre, eller de kan være salter av uorganiske baser, slik som alkal>imetallsalter, f.eks. natriumsalter, kali-umsalter eller litiumsalter, alkalijordmetallsalter, f.eks. kalsium- eller magnesiumsalter, eller ammoniumsalter eller salter av organiske baser.

I formel I og II er A fortrinnsvis en binding eller C1-C3-alkylen, mest foretrukket metylen.

Mest foretrukket er B -CH (NH2) -COOH eller en gruppe med formel III hvor hver av R2, R3 og R4 er hydrogen.

Fortrinnsvis er E COOH. En annen undergruppe omfatter forbindelsene hvor E er COOR6, hvor R6 ikke er H.

Ri er fortrinnsvis Ci-6-alkyl eller C2.G-alkenyl. Spesielt egnede Ri-grupper er metyl, etyl, propyl og butyl.

I en foretrukket utførelsesform av oppfinnelsen er forbindelsen en forbindelse med formel I hvor A er en binding eller Ci-3-alkylen, B er -CH (NH2)-COOH eller en gruppe med formel III hvor hver av R3, R4 og R2 er hydrogen, X og Y er begge oksygen, og Rx er Ci-6-alkyl eller C2.6-alkenyl.

Spesielt egnede Rx-grupper er metyl, etyl, propyl og butyl.

Forbindelsene med formel I eller II fremstilles ved de føl-gende fremgangsmåtene. For enkelthets skyld er reaksjonene a)-e) og g)-h) vist bare for formel I. De samme fremgangsmåter kan anvendes når det gjelder formel II. a) for å erholde en forbindelse med formel I hvor B er en - CRa (NRbRc)-COOR5 hvor Ra - Rc og R5 er som tidligere definert, avbeskyttes en forbindelse med den generelle formel

IV

hvor Rlf A, X og Y er som tidligere definert, Ra' - Rc', E<1 >og R5' er som definert for henholdsvis Ra-Rc og E og R5, eller de er beskyttelsesgrupper, forutsatt at minst en av E<1>, R5<1> og Rc' er en beskyttelssgruppe; b) for å erholde en forbindelse med formel I hvor B er en - CRa(NRbRc)-COOR5-gruppe hvor Rb, Rc og R5 alle er hydrogen,

avbeskvttelse av en forbindelse med aenerel] formal v

hvor Ri, A, Y, X og E<1> er som tidligere definert; c) for å erholde er forbindelse med formel I hvor B er en gruppe med formel III, addisjons-eliminasjonsreaksjon av en forbindelse med generell formel VI med en forbindelse med generell formel VII: hvor formlene R1-R4, A, X, Y og E<1> er som tidligere definert ; f) for å erholde en forbindelse med formel I eller II, al-kylere en forblindelse som generell forbindelse X hvor A, X, Y og E<1> er som tidligere definert og B<1> er som B, unntatt at i definisjonene av Rb> Rc og R5 erstattes hydrogen av en beskyttelsesgruppe, med et alkyleringsmiddel Ri'Z, hvor Ri' er som Rlf bortsett fra at den ikke kan være hydrogen, for derved å oppnå en blanding av forbindelsene XI og XII:

hvor A, X, Y, E<1> og B<1> er som definert over, og deretter å separere og avbeskytte forbindelsene;

g) for å erholde en forbindelse med formel I hvor R6 er forskjellig fra hydrogen, esterifisering av en forbindelse

med formel XIII eller XIV:

hvor Ri, R2, R3, R4/ A, X, Y og Ra-Rc er som tidligere definert ; h) for å erholde en forbindelse med formel I hvor B er en - CRa (NRbRc) -COOR5-gruppe hvor Ra, Rb, Rc og R5 alle er hydrogen og E er COOH, spesielt en enantiomerisk ren forbindelse, ved å underkaste en forbindelse med formel XV en Schollkopf bis-lactim aminosyresyntese og deretter avbeskytte den oppnådde bislactim-eteren som har formel XVI

hvori formlene X, Y, R2 og Ri er som tidligere definert og A1 er som definert for A, bortsett fra at den ikke kan være en binding.

I fremgangsmåten er foretrukkede beskyttelsesgrupper som følger: For E=COOH: 4,5-dihydro-4,4-dimetyloksazol-2-yl, Ci-6-alkyl eller en benzylgruppe; for R5=hydrogen: Ci-6-alkyl og Rb=hydrogen: Ci-6alkylkarbonyl.

Ett-trinns-avbeskyttelsen i henhold til fremgangsmåte a) utføres ved å behandle forbindelsen med formel IV med en egnet vandig syre, passende en 0,5-12 N vandig løsning av HC1, en vandig løsning av 4 8% HBr, eller en mettet løsning av HBr i eddiksyre. Avbeskyttelsen kan også utføres i suksessive trinn /ved å bruke vandige syrer og vandige baser, passende suksessivt i en vandig syre såsom 0,5-12 N HC1, en vandig base såsom 1-8 N NaOH og en vandig syre såsom 0,5-12 N HC1, eller suksessivt i en vandig base såsom 1-8 N NaOH og en vandig syre såsom 0,5-12 N HC1.

Utgangsmaterialer til formel IV fremstilles passende fra 3-alkoksy-4-metylisoksazol-5-karboksylsyre (W095/12587, Al) ved fullstendig avbeskyttelse i en vandig syre i henhold til de ovenfor beskrevne avbeskyttelsesbetingelsene, even-tuelt esterifisering av 3-hydroksy-4-metylisoksazol-5-karboksylsyren og påfølgende alkylering med et passende ha-lid eller simpelthen ved alkylering. Dette følges av brominering av 4-metylisoksazolgruppen og påfølgende alkylering med en aminosyreprekursor, f.eks. dietylacetamidomalonat. Andre 4-alkylisoksazoler kan fremstilles ved kjedeforleng-else, f.eks. alkylering med cyanid eller dietylmalonat og etterfølgende transformasjon til det primære alkylhalidet eller aldehydet. Halidet kan behandles som skissert over. Aldehydet kan anvendes som utgangsmateriale for fremstilling av forbindelser med generell formel V.

I b) utføres ett-trinns-avbeskyttelsen ved behandling av en forbindelse med formel V med en egnet vandig syre eller vandig base, passende i 0,5-8 N vandig saltsyre. Avbeskyttelsen kan også utføres i suksessive trinn ved å anvende vandige syrer og vandige baser som nevnt over for fremgangsmåte a). Hydantoin-ringen kan også spaltes ved anvendelse av en vandig løsning av Ba(OH)2, vandig 10-70% svovelsyre eller ved anvendelse av enzymer såsom hydantoina-ser. Spaltingen av hydantoinringen kan utføres enten før eller etter avbeskyttelse av E-gruppen.Det kan bli nødven-dig å gjenintrodusere Rx-gruppen ved alkylering etter fullstendig avbeskyttelse av hydantoinintermediatet.

Hydantoinringene i forbindelsene med generell formel V dan-nes passende, i henhold til fremgangsmåtene beskrevet av Ware, E., Chem. Rev. 1950, 46, 403-470. Spaltingen av hydantoinringen utføres passende analogt med fremgangsmåtene beskrevet av Curry, K et al., J.Med.Chem. 1980, 23, 754-758, Hiroi, K. et al., Chejn. Pharm. Bull. 1968, 16, 444-447, eller eller Stark, G.R. et al., J. Biol . Chem. 1963, 238, 214-226. Utgangsmaterialet for fremstilling av forbindelser med formel V kan erholdes som skissert over for utgangsmaterialer til fremgangsmåte a) . Hvis A er en binding, kan aldehydet fremstilles fra brom-metylforbindelsen ved brominering og etterfølgende transformasjon til aldehydet.

Addisjons-eliminerings-reaksjonen i henhold til fremgangsmåte c) utføres passende i et protisk organisk løsemiddel såsom en alkohol, fortrinnsvis i nærvær av en egnet uorga-nisk base såsom vandig NaOH ved romtemperatur. Intermedia-tene med formel VII kan fremstilles ved fremgangsmåtene beskrevet av Cohen, S. et al., J'. Amer. Chem. Soc. 1966, 88, 1533-1536, EP-A2-0496561 eller Kinney, W.A. et al., J. Amer. Chem. 1992, 35, 4720-4726.

Intermediatet med generell formel VI oppnås enkelt ved en

Gabriel-syntese av primære aminer som beskrevet av Sheehan, J.C. et al., J. Am. Chem. Soc. , 1950, 72, 2786-88. Alkylhalid-utgangsmaterialene for denne syntesen erholdes passende som beskrevet med hensyn til utgangsmaterialene anvendt i fremgangsmåte a), se over.

Avbeskyttelsen utføres passende ved anvendelse av en vandig syre eller vandig base, fortrinnvis 0,5-8 N HC1 eller vandig 0,5-8N NaOH, enten ved romtemperatur eller ved forhøye-de temperaturer.

I fremgangsmåte f) oppnås avbeskyttelse av forbindelser med generell formel XI og XII som beskrevet i fremgangsmåtene a) eller ved å bruke en løsning av saltsyre i dietyleter eller en annen ikke-vandig avbeskyttelsesfremgangsmåte. Utgangsmateriale X oppnås som beskrevet med hensyn til ut-gangsmaterialetene i fremgangsmåte a) over.

I fremgangsmåte g) kan forestringen utføres i henhold til fremgangsmåter som er velkjente i faget, f.eks. behandling med en sur løsning av en alkohol. Utgangsmaterialene fremstilles i overensstemmelse med fremgangsmåtene a)-c) eller

h) .

Oppløsning av forbindelsene med generell formel I utføres

passende ved diastereomer saltdannelse under anvendelse av optisk aktive syrer eller baser, f.eks. 1-fenyletylamin. I noen tilfeller utføres oppløsningen passende ved dannelse av diastereomere forbindelser og påfølgende separasjon av diastereomerene ved flash-kromatografi eller krystallise-ring. Visse diastereomere kan beleilig fremstilles ved asymmetrisk syntese ved å anvende Schollkopfs bis-lactim aminosyresyntese, jfr. fremgangsmåte h) . I denne syntesen er startmaterialene alkylhalogenider erholdt som beskrevet over for startmaterialer for fremgangsmåte a). Beskyttel-sesgruppen for 5-karboksyisoksazolgruppe er fortrinnsvis en 2-oksazolingruppe fremstilt fra det tilsvarende 5-cyano-isoksazol (W095/12587,Al) ved konsensasjon med en aminoal-kohol.

Salter av forbindelsene ifølge oppfinnelsen fremstilles lett ved fremgangsmåter velkjent i faget, dvs. ved å reagere forbindelsen med enten den ekvivalente mengde av syre eller base i et vandig blandbart løsemiddel, såsom acetone eller etanol, med isolering av saltet ved konsentrering og avkjøling, eller ved å reagere med et overskudd av syren eller basen i et løemiddel som ikke er blandbart med vann, slik som etyleter eller kloroform, hvor det ønskede saltet separerer direkte. Disse saltene kan også fremstilles ved klassiske fremgangsmåter for dobbel oppløsning av passende salter.

Forbindelsene med generell formel I og de farmasøytisk akseptable syreaddisjonssaltene derav kan administreres på en hvilken som helst egnet måte, f.eks. oralt eller parente-ralt, og forbindelsene kan være tilstede i enhver egnet form for slik administrasjon, f.eks. i form av tabletter, kapsler, pulvere, siruper eller løsninger eller dispersjo-ner for injeksjon.

En effektiv daglig dose av en forbindelse med generell formel I eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav er fra 10 /xg/kg kroppsvekt til 50 mg/kg kroppsvekt.

Eksempler

I det følgende illustreres oppfinnelsen ytterligere ved eksempler.

Smeltepunktene ble bestemt på et Biichi SMP-20-apparat og er ukorrigerte. <L>H NMR- og <13>C NMR-spektra ble tatt opp på et Brucker 250 MHz spektrometer (250,13 MHz for <X>H NMR og 62,90 MHz for <13>C NMR) under anvendelse av TMS som intern-standard hvis ikke annet er nevnt.

Massespektra ble erholdt på et Quattro MS-MS-system fra VG Biotech, Fisons Instruments forbundet med et HP 1050 modu-lært HPLC-system. 20-50 /xl prøve (10 /xg/ml) oppløst en raa-triks av 1% edddiksyre i acetonitril/vann = 1:1 eller i en blanding av acetonitril/vann/vandig ammoniakk (25%) = 25:25:1 (zwitterioner) ble introdusert via den automatiske prøvetageren med en strømning på 3 0 /xl/min inn i elektro-spray-kilden. Spektra ble tatt opp ved standardbetingelser for å oppnå molekyl vekt inf ormas jon ( (M + H)<+>) eller ( (M - H)). Bakgrunnen ble trukket fra.

Analytisk HPLC ble utført på en 150 x 4,6 mm Lichrocart 250-4 (Merck) -kolonne eluert ved 35°C med 1 ml/min meta-nol/0,01 M ammoniumacetat, pH 8=3:2. Den anvendte instrumentering besto av en L6200 HPLC-pumpe, en L5025 kolonnetermostat og en L400A UV-VIS detektor (satt til 230 nm). Diastereomere renheter uttrykt som diastereomert overskudd (de) ble beregnet fra topparealene.

Chirale HPLC-analyser ble utført på en 150 x 4,6 mm Xumi-chiral OA- 5000;.- kol onne eluert ved omgivelsestemperatur med 1 ml/min av 5 mM CuS04 (aq) . Den anvendte instrumentering besto av en AS 2000 automatisk prøvetaker, en L6200 HPLC-pumpe, en T6300 kolonnetermostat, en L4250 UV-VTS-detektor (satt til 240 nm), og et D6000 datamaskin-grensesnitt, alt fra Merck-Hitachi. Enantiomere renheter uttrykt som enan-tiomert overskudd (ee) ble beregnet fra topparealene.

Eksempel 1

{ RS)-2-Amino-4-(5-karboksy)-3-metoksyisoksazol-4-yl) - propionsyrehydrat (forb. 1) 1) 3 - Hydroksy- 4 - metylisok. sa. zol - 5- karboksylsyre 3-Etoksy-4-metylisoksazol-5-karboksylsyre (15 g, 88 mmol) og 47% HBr (aq) (150 ml) ble kokt under tilbakeløp i 6 t. Blandingen ble avkjølt og den krystallinske tittelforbindelse ble samlet ved filtrering (8,7 g, 69%): smp. 257-259°C. Det sure filtratet ble tilsatt vann (100 ml) og ekstrahert med dietyleter (6 x 400 ml). De organiske ekstrakter ble vasket med saltløsning (100 ml), tørket (MgS04) og konsentrert in vacuo for å gi ubehandlet tittelforbindelse (3,0 g, 24%). Totalt utbytte 93%. En blanding av de to delene ble anvendt i det neste trinn. 2) Etyl- 3- hydroksy- 4 - metylisoksazol - 5- karboksylat 3-Hydroksy-4-metylisoksylat-5-karboksylsyre (6,0 g, 42 mmol) og en mettet løsning av HC1 i EtOH (110 ml) ble kokt under tilbakeløp i 4 t. Løsningen ble konsentrert in vacuo og residuet løst i EtOAc, tørket (MgS04) og inndampet in vacuo for å gi ubehandlet tittelforbindelse (7,2 g, 100%).

En liten prøve ble rekrystallisert (EtOAc/heptan) og ga fargeløse krystaller: smp 13 3-134°C. Råproduktet ble anvendt i neste trinn uten ytterligere rensing.

3) Etyl- 3- metoksy- 4- metylisoksazol- 5- karboksylat En blanding av etyl-3-hydroksy-4-metoksyisoksazol-5-karboksylat (1,0 g, >5,8 mmol), metyljodid (0,4 ml, 5,8 mmol) og K2C03 (1,6 g, 11,7 mmol) i DMF (40 ml) ble oppvarmet ved 40 °C i 1 t. Blandingen ble helt i en is/vann-blanding (100 ml) og ekstrahert med dietyleter (3 x 100 ml). De organiske ekstraktene ble vasket med vann (2 x 50 ml), saltløsning (50 ml), tørket (MgS04) og konsentrert in vacuo (0,8 g, 74%). Fremgangsmåten ble gjentatt for å erholde råprodukt ekvivalent med 17,5 mmol utgangsmateriale, som ble underkastet flash-kromatografi (kiselgel, eluent: diklormetan/- dietyleter = 9:1) og ga ubehandlet tittelforbindelse som en gul olje (1,4 g, 43%) som ble anvendt i det neste trinn uten ytterligere rensing.

4) Etyl- 4- ( brommetyl) - 3- metoksyisoksazol - 5- karboksylat Etyl-3-metoksy-4-metylisoksazol-5-karboksylat (1,3 g, 7,0 mmol), NBS (1,4 g,7,9 mmol), dibenzoylperoksid (katalytisk mengde) og tetraklormetan (40 ml) ble kokt under tilbakeløp 1 10 t. Blandingen ble avkjølt, filtrert og konsentrert in vacuo for å gi ubehandlet tittelforbindelse som en gul olje (1,8 g, 97%). Råproduktet ble anvendt i det neste trinnet uten ytterligere rensing. 5) Etyl- 2- acetamido- 2- ( etoksykarbonyl) - 3- [ 5- ( etoksykarbonyl) - 3- metoksyisoksazol- 4- yl) ] propionat En blanding av dietyl-acetamidomalonat (1,6 g, 7,4 mmol) og kalium-tert-butoksid (0,9 g, 8,0 mmol) i JV-metylpyrro-lidon (3 0 ml) ble omrørt ved romtemperatur i 3 0 min. Etyl-4-(brommetyl)-3-metoksyisoksazol-5-karboksylat (1,8 g, 6,8 mmol) i .N-metylpyrrolidon (10 ml) ble tilsatt (temp 22-2 8°C), og den resulterende blandingen ble omrørt ved rom-temperatur i 1,5 t. Reaksjonsblandingen ble helt i en is/vann-blanding (100 ml) og den vandige fasen ble ekstrahert med EtOAc (3 x 150 ml). De organiske ekstrakter ble vasket med en vandig løsning av kalium-tert-butoksid, vann (100 ml) og saltløsning (100 ml), tørket (MgS04) og konsentrert in vacuo. Flashkromatografi (kiselgel, eluent: EtOAc/heptan = 1:1) ga ubehandlet tittelforbindelse (1,8 g, 66%). En liten prøve ble omkrystallisert (EtOAc/heptan) for å gi fargeløse, krystaller: smp 78-80°C. Råproduktet ble anvendt i det neste trinn uten ytterligere rensing. 6) ( RS)- 2- Amino- 3-( 5- karboksy- 3- metoksyisoksazol- 4- yl)-propionsyrehydrat ( forb. 1)

En suspensjon av etyl-2-acetamido-2-(etoksykarbonyl)-4-[5-etoksykarbonyl)-3-metoksyisoksazol-4-yl]propionat (1,2 g, 3,0 mmol) i 0,5 M HC1 (100 ml) ble kokt under tilbakeløp i 48 t. Blandingen ble avkjølt, vasket med diklormetan (100 ml) og dietyleter (2 x 100 ml), filtrert og konsentrert in vacuo. Vann ble tilsatt (5 ml) og pH ble justert til ca. 3 ved tilsetning av NaOH (0,1 M og 1 M). Den vandige fasen ble redusert in vacuo (2 ml) og et presipitat samlet ved filtrering. Presipitatet ble omrørt i vann (2 ml) ved rom-temperatur i 24 t for å gi forbindelse 1 etter filtrering (70 mg, 10%): smp 222-225°C (dek). <X>H NMR (DMSO-dff) 8 2,88 (dd, 1 H) , 3,01 (dd, 1H), 3,85-3,96 (m, 1 H) , 3,90 (s, 3H) ; <13>C NMR (DMS0-d6) d 22. 70, 52,38,57,32, 103,25, 159,43, 165,85, 170,66 (2C) ; MS ( (M + H)<+> m/ z 231. Anal. (C8HioN206 0,25 H20) beregnet C 40,94, H 4,51, N 11,94; funnet C 41,01, H 4,37, N 11,91.

De følgende forbindelser ble fremstilt på lignende måte: ( RS)-2-Amino-3-(5-karboksy-3-etoksyisoksazol-4-yl)-pro-pionsyre (forb. 2) . Smp 23 8-240°C (dek) ; <X>H NMR (DMS0-d5) dl,34 (t, 3H), 2,90 (dd, 1H), 3,03 (dd, 1H), 3,96 (dd, 1H), 4,23 (q, 2H) ; <13>CNMR (DMSO-d6) 8 14,46, 22,41, 51,89, 65,63, 103,34, 159,22, 164,97, 169,75, 170,40; MS ((M + H)<+>) m/ z 245. Anal. (C9H12N206) beregnet C 44,27, H 4,95, N 11,47, funnet C 44,10, H 4,92, N 11,34.

( RS)-2-Amino-3-(5-karboksy-3-isopropoksyisoksazol-4-yl)-propionsyre (forb. 3) . Smp 242-243°C (dek) ; <1>H NMR (DMSO-dff) d 1,32 (dd, 6H), 2,88 (dd, 1H), 3,01 (dd, 1H), 3,96 (66, 1H),4,79 (h, 1H) , 4,79 (h, 1H) ; 13C NMR (DMSO-dff) 8 21,57, 21,77, 22,35, 51,83, 73,13, 103,56, 159,22, 164,91, 169,08, 170,36; MS ( (M + H)<+>) m/ z 259. Anal. (CioH14N206) beregnet C 46, 5L, H 5,46, N 10,85; funnet C 46,37, H 5,46, N 10,83.

( RS) -2-Amino-3- (5-karboksy-3-hydroksyisoksazol-4-yl) -pro-pionsyrehydrat (forb. 4) . Smp 175-177°C: <X>H NMR (DMSO-de) 3,00 (d, 2H) , 3,88 (t, 1H) ; 13C NMR (DMSO-de) 5 23,07, 52,07, 105,84, 159,41, 162,11, 169,89, 170,78; MS ( (M + H)<+>) m/ z 217. Anal. (C7H8N206 • 0,25 H20) beregnet, C 38,10, H 3,88, N 12,70; funnet C 37,72, H 3,98, N 12,52.

Eksempel 2

( RS) -2 - amino - 3 - (5 - karboksy -2,3- dihydro - 2 -me tyl - 3 - oksokso - isoksazol-4-yl)propionsyrehydrat (forb. 5)

Etyl- 2, 3- dihydro- 2, 4 - dimetyl - 3 - oksoksazol - 5- karboksylat

En blanding av etyl-3-hydroksy-4-metylisoksazol-5-karboksylat (2,0 g, 11,7 mmol) og K2C03 (4,0 g, 29 mmol) i etanol (50 ml) ble oppvarmet ved 4 0°C i totalt 26 t. Metyljodid (0,8 ml, 13 mmol) ble tilsatt etter 1 t og ytterligere tre ganger i løpet av de neste 25 t. Løsningen ble filtrert og redusert in vacuo (i henhold til <X>K NMR ble en l:l-blanding av tittelforbindelsen og etyl-3-metoksy-4-metylisoksazol-5-karboksylat oppnådd). Flashkromatografi (kiselgel, eluent: diklormetan/dietyleter = 9:1, så 1:1) ga etyl-3-metoksy-4-metylisoksazol-5-karboksylat som en gul olje (0,40, 18%) og tittelforbindelsen (0,45 g, 21%). En liten prøve av sist-nevnte ble omkrystallisert (EtOAc/-heptan) for å gi farge-løse krystaller: smp 64,65°C. Ubehandlet tittelforbindelse ble anvendt i et neste trinn uten ytterligere rensing.

( RS) - 2- Amino- 3- ( 5- karboksy- 2, 3- dihydroksy- 2- metyl- 3-oksoisoksazol - 4 - yl) propionsyrehydrat (Forb. 5) Tittelforbindelsen ble erholdt ved fremgangsmåter analoge med dem i trinnene 2) - 6) i eksempel 1 ved å bruke produk-tet fra 1) ovenfor (70 mg, fargeløse krystaller, 72%). Smp 211-212°C (dek); <X>H NMR (DMSO-d5) 5 23,10, 32,32, 51,79, 106,51, 158,59, 162,37, 166,64, 170,35; MS ((M+H)<+>) m/ s 231. Anal. (C8H10N2O6 • 0,25 H20) beregnet C 40,94, H 4,51, N 11,94; funnet C 40,93, H 4,55, N 11,71.

De følgende forbindelser ble fremstilt på tilsvarende måte: ( RS) -2-amino-3- (5-karboksy-2-etyl-2, 3-dihydro-3-okso-isoksazol-4-yl)propionsyre-monohydrat (forb. 6) .

<X>H NMR (D20, 1,4-dioksan d 3,70) 8 1,28 (t, 3H), 3,19 (d, 2H) , 4,01 (q, 2H) , 4,18 (t, 1H) ; <13>CNMR (D20, 1,4-dioksan 8 67,40) 5 12,87, 23,31, 53,27, 110,57, 159,88, 162,65, 166,67, 172,55; MS ( (M + H)<+>) m/ z 245. Anal. (C9H12N206 •

H20) beregnet C 41,22, H 5,38, N 10,68; funnet C 41,28, H 4,74, N 10,27.

Eksempel 3

(S)-2-Amino-3-(5-karboksy-3-etoksyisoksazol-4-yl)-propi-onsyre (forb. ( S)-2)

( R) -2-Amino-3- (5-karboksy-3-etoksyisoksazol-4-yl) -propi-onsyre (forb. ( R)- 2)

1) 5-( 4, 5- Dihydro- 4, 4- dimetyl- l, 3- oksazol- 2- yl)- 3- etoksy- 4-metylisoksazol

3-Etoksy-4-metylisoksazol-5-karbonitril (2,6 g, 17,1 mmol), 5,4 M NaOMe i MeOH (0,6 ml, 3,4 mmol) og EtOH (80 ml) ble omrørt ved romtemperatur i 30 min. Eddiksyre (2,2 ml,3 9,3 mmol) og 2-amino-2-metylpropan-l-ol (1,8 ml, 18,8 mmol) ble tilsatt, og den resulterende blandingen ble kokt under til-bakeløp i 20 t. Reaksjonsblandingen ble avkjølt, tilsatt vann (100 ml) og ekstrahert med EtOAc (3 x 100 ml) . De organiske ekstrakter ble vasket med 1 M NaOH (50 ml), salt-løsning, tørket (MgS04) og inndampet in vacuo. Residuet ble løst i EtOH (60 ml), en løsning av KOH (1,8 g, 32 mmol) i vann (12 ml) ble tilsatt, og blandingen ble omrørt ved rom-temperatur i 20 t. EtOH ble fjernet in vacuo, vann ble tilsatt (80 ml) og den vandige fasen ble ekstrahert med EtOAc (3 x 100 ml) . De organiske ekstrakter ble vasket med salt-løsning, tørket (MgS04) og inndampet in vacuo. Flashkromatografi (kiselcjel, eluent: EtOAc/-trietyl-amin = 75:25:1) ga ubehandlet tittelforbindelse som en gul olje (2,0 g, 52%) .

1) 4-( Brommetyl)- 5- ( 4, 5- dihydro- 4, 4- dimetyl- l, 3- oksazol- 2-rl) - 3- etoksyisoksazol

3-(4,5-Dihydro-4,4-dimetyl-l,3-oksazol-2-yl)-3-etoksy-4-tietylisoksazol (2,0 g, 8,9 mmol), NBS (1,75 g, 9,8 mmol) og :etraklormetan (150 ml) ble kokt under tilbakeløp i 5 t. ilandingen ble avkjølt, filtrert og konsentrert in vacuo. ^lash-kromatografi (kiselgel, eluent: toluen/EtOAc/trietyl-imin = 100:10:1) ga tittelforbindelsen som en gul olje (2,0 h 74%) .

V ( 2S, 5R) - 2, 5- Dihydro- 2- { [ 5- ( 4, 5- dihydro- 4, 4- dimetyl- l, 3-iksazol- 2- yl) - 3- etoksyisoksazol- 4- yl] metyl}- 5- isopropyl-3, 6- dimetoksypyrazin og ( 2R, 2R) - 2, 5- Dihydro- 2- { [ 5- ( 4, 5-iihydro- 4, 4- dimetyl- l, 3- oksazol- 2- yl) - 3- etoksyisoksazol- 4-/■ l ] me tyl }- 5- i sopropyl - 3, 6- dime t oksypyrazin

2n 1,6 M løsning av butyllitium i heksan (1,9 ml, 3,0 mmol) 3le tilsatt til en forhåndsavkjølt (-78°C) løsning av ( 2R) - (-)-2,5-dihydro-2-isopropyl-3,6-dimetoksypyrazin (0,5 ml, 1, 8 mmol) i vannfri tetrahydrofuran (8 ml). Omrøringen ble fortsatt ved -78°C i 10 min,4-(brommetyl)-5-(4,5-di-hydro-l,4-dimetyl-l,3-oksazol-2-yl)-3-etoksyisoksazol (0,85 g, 2,8 mmol) oppløst i tetrahydrofuran (5 ml) ble tilsatt, og len resulterende blanding ble omrørt ved -78°C i 4,5 t. Re-iks jonsblandingen fikk varme seg opp til rom-temperatur og Die konsentrert in vacuo. Residuet ble oppløst i etyleter (40 ml) og helt i en is/vann-blanding (40 ml). Fasene ble separert og den vandige fasen ekstrahert med dietyleter (2

■c 4 0 ml) . De organiske ekstraktene ble vasket med saltløs-ling, tørket (MgS04) og konsentrert in vacuo. Flashkromato-jrafi (kiselgel, eluent: heptan/EtOAc = 3:1) ga (25,5J?)--ittelforbindelsen som en gul olje (0,65 g, 57%): de = 99,2% (retensjonstid ca. 38 min). Ytterligere eluering ga ubehandlet ( 2R, 5R)-tittelforbindelse som en gul olje (38 Tig, 3%) .

i) ( 2R, 5S) - 2, 5,- Dihydro- 2- { [ 5- dihydro- 4, 4- dimetyl- l, 3-oksazol- 2- yl) - 3- etoksyisoksazol- 4- yl] metyl}- 5- isopropyl-3, 6- dimetyl- l, 3- oksazol- 2- yl) - 3- etoksyisoksazol- 4-

yl ] me tyl }- 5- i sopropyl - 3, 6- dime t oksypyrazin

Tittelforbindelsene ble oppnådd ved en fremgangsmåte som den beskrevet i trinn 3) og ved å bruke (25)-(+)-2,5-dihydro-2-isopropyl-3 , 6-dimetoksypyrazin som utgangsmateriale. Flash-kromatografi (kiselgel, eluent: heptan/EtOAc = 3:1) ga { 2R,55)-tittelforbindelsen som en gul olje (0,8 g, 54%): de >99,2% (retensjonstid ca. 38 min). Ytterligere eluering ga ubehandlet (2S,55)-tittelforbindelsen som en gul olje (60 mg, 4%).

5) ( S) - 2- Amino- 3- ( 5- karboksy- 3- etoksyisoksazol - 4- yl) pro-pionsyre ( forb. ( S)- 2)

En suspensjon av (25, SR)- 2,5-dihydro-2-{[5-(4,5-dihydro-4, 4-dimetyl-l,3-oksazol-2-yl)-3-etoksyisoksazol-4-yl]-metyl}-5-isopropyl-3,6-dimetoksypyrazin (0,6 g, 1,5 mmol) i 1 M trifluoreddiksyre (200 ml) ble kokt under tilbakeløp i 5 t. Reaksjonsblandingen ble konsentrert in vacuo (2 ml), residuet ble oppløst i vann (50 ml) og vasket med EtOAc (3x 50 ml) . Den vandige fasen ble filtrert, dampet inn in vacuo til tørrhet, og residuet ble behandlet med vann (10 ml). Fellingen som ble dannet, ble omrørt ved romtemperatur i 24 t, samlet ved filtrering og omkrystallisert (vann) for å gi forbindelse (5)-2 som farveløse krystaller (0,12 g, 33%): smp 259-261°C (dek); ee>99% (retensjonstid ca. 30 min) ; <X>H NMR (DMSO-de) 8 1,34 (t, 3H) , 2,90 (dd, 1H) , 3,03 (dd, 1H), 3,96 (dd, 1H) , 4,23 (q, 2H) ; MS ((M+H)+) m/ z 245. Anal.

(C9Hi2N2Oe) , beregnet C 44,27, H 4,95, N 11,47; funnet C 44,45, H 4,96, N 11,46.

6) ( R)- 2- Amino- 3-( 5- karboksy)- 3- etoksyisoksazol- 4- yl)-propionsyre ( forb. ( R)- 2)

En omrørt løsning av ( 2R,55)-2,5-dihydro-2-{ [5-(4,5-dihydro-4,4-dimetyl-l,3-oksazol-2-yl)-3-etoksyisoksazol-4-yl] metyl}-5-ispropyl-3,6-dimetoksypyrazin (0,6 g, 1,5 mmol) og MeOH (7 ml) ble tilsatt 0,25 M HC1 (74 ml, 7,4 mmol), og den resulterende blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 2 t. pH ble justert til ca. 7 ved tilsetning av vandig ammoniakk (0,5 M), og MeOH ble fjernet in vacuo. pH ble justert til 8-9 ved tilsetning av vandig ammoniakk (0,5 M), og den vandige fasen ble ekstrahert med EtOAc (4 x 50 ml). De organiske ekstrakter ble vasket med saltløsning, tørket (MgS04) og konsentrert in vacuo. Residuet ble slemmet i 1 MHC1 og blandingen kokt under tilbakeløp i 4,5 t. Reaksjonsblandingen ble konsentrert in vacuo (2 ml), residuet ble løst i vann (50 ml) og vasket med EtOAc (3 x 50 ml). Den vandige fasen ble filtrert, dampet inn in vacuo til tørrhet, og residuet ble behandlet med vann (10 ml). Utfel-lingen som ble dannet, ble omrørt ved romtemperatur i 2 t, samlet ved filtrering og omkrystallisert (vann), hvilket gav forbindelse ( R)- 2 som fargeløse krystaller (0,13 g, 36%): smp 258-260°C (dek); ee>99% (retensjonstid ca.50 min) ; 1H NMR (DMS0-de) 5 1,34 (t, 3H) , 2,90 (dd, 1H) , 3,03 (dd, 1H), 3,96 (dd,lH), 4,23 (q, 2H); MS ((M+H)<+>) m/ z 245. Anal. (C9Hi2N206) , beregnet C 44,27, H 4,95, N 11,47; funnet C 44,56, H 4,95, N 11,53.

Eksempel 4

( RS) -2-Amino-3-[3-etoksy-5-(1H-1,2,4-triazol-3-yl)-isoksazol-4-yl]propionsyrehydrat (forb. 7)

N- [ ( D ime tyl amino) metyl iden] - 3- etoksy- 4 - metylisoksazol - 5 - karboksamid

En løsning av 3-etoksy-4-metylisoksazol-5-karboksamid (3,5 g, 21 mmol) i N,W-dimetylformamid-dimetylacetat (15 ml) ble omrørt ved 120°C i 15 min. Etter å ha blitt avkjølt, ble tittelforbindelsen samlet som fargeløse krystaller (4,2 g, 91%) .

3- ( 3 - Etoksy- 4 - metylisoksazol - 5- yl) - lH- 1, 2, 4- triazol Til en løsning av hydrazinhydrat (0,6 ml, 12,4 mmol) i edddiksyre (15 ml) ble det tilsatt N- (dimetylamino) metyl-iden-3-etoksy-4-metylisoksazol-5-karboksamid (l,8g, 8,0 mmol). Reaksjonsblandingen ble omrørt ved 90°C i 15 min og fikk deretter stå ved romtemperatur for å krystallisere, hvilket gav ren tittelforbindelse (1,2 g, 77%): smp 194-196°C. Vann

ble tilsatt (4 0 ml) og den vandige fasen ble ekstrahert med EtOAc (3 x 3 0 ml). De organiske ekstrakter ble vasket med saltløsning, tørket (MgS04) og konsentrert in vacuo for å gi ubehandlet tittelforbindelse (0,3 g, 20%). De to delene ble kombinert.

3-( 3- Etoksy- 4- metylisoksazol- 5- yl)- 1- trityl- lH- l, 2,4-fcri-azol

3-(3-Etoksy-4-metylisoksazol-5-yl)-1H-1,2,4-triazol (1,1 g, 5,7 mmol), trietylamin (2,5 ml, 18 mmol) og DMF (20 ml) ble tilsatt tritylklorid (1,6 g, 5,7 mmol) i DMF (5 ml). Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 5 t og helt i en is/vann-blanding (2 00 ml). Den vandige fasen ble ekstrahert med dietyleter (3x 200 ml) og de organiske ekstrakter ble vasket med en vandig løsning av Na2C03 (10%) (200 ml) og saltløsning (2 00 ml) . Løsningen ble tørket (Na2S04) og konsentrert in vacuo for å gi ubehandlet tittelforbindelse (2,5 g). En liten prøve ble krystallisert (EtOAc) for å gi en enkelt isomer som fargeløse krystaller: smp 181-183°C. Råproduktet ble anvendt i det neste trinn uten ytterligere rensing.

3-( 4-( Brommetyl)- 3- etoksyisoksazol- 5- yl]- 1 - trityl- 1H- 1, 2, 4-triazol

En blanding av 3-(3-etoksy-4-metylisoksazol-5-yl)-1-trityl-1H-1,2,4-triazol (2,4 g, 5,5 mmol) og NBS (1,1 g, 6,2 mmol) i tetraklormetan (150 ml) ble kokt under tilbakeløp i 3 t. Reaksjonsblandingen ble avkjølt, filtrert og konsentrert in vacuo for å gi ubehandlet tittelforbindelse (2,8 g). Råproduktet ble anvendt i neste trinn uten ytterligere rensing.

Etyl - 2- Acetamido- 3 - [ 3- etoksy- 5- ( 1- trityl- 1H- 1, 2, 4- triazol-3- yl) isoksazol- 4- yl] - 2- ( etoksykarbonyl) propionat En blanding av dietyl-acetamidomalonat (1,3 g, 6,0 mmol) og kalium-tert-butoksid (0,73 g, 6,5 mmol) i N-metylpyrrolidon (3 0 ml) ble omrørt ved romtemperatur i 3 0 min. 3-[4-(brommetyl) -3-etoksyisoksazol-5-yl]-1-trityl-lH-l,2,4-triazol (2,8 g, 5,4 mmol) i iV-metylpyrrolidon (20 ml) ble tilsatt

(temp. 22-28°C), og den resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i 2 t. Reaksjonsblandingen ble helt i en is/vann-blanding (250 ml) og den vandige fasen ble ekstrahert med EtOAc (3x 250 ml). De organiske ekstrakter ble vasket med en vandig løsning av kalium-tert-butoksid og saltløsning, tørket (Na2S04) og konsentrert in vacuo. Flash-kromatografi (kiselgel, eluent: EtOAc/heptan/trietylamin = 50:50:2) ga tittelforbindelsen (2,2 g, 62%), smp 145-149°C.

( RS) - 2- Amino- 3- [ 3- etoksy- 5- ( 1H- 1, 2, 4- triazol- 3- yl) - isoksazol- 4- yl] propionsyrehydrat ( forb. 7)

En suspensjon av etyl-2-acetamido-3-[3-etoksy-5-(1-trityl-1, 2, 4-triazol]-3-yl)isoksazol-4-yl]-2-(etoksykarbonyl) - propionat (1,5 g, 2,3 mmol) i 1 M HC1 (150 ml) ble kokt under tilbakeløp i 24 t. Løsningen ble avkjølt, vasket med dietyleter (2 x 150 ml) og diklormetan (150 ml) , filtrert og konsentrert in vacuo. Vann ble tilsatt (5 ml) og pH ble justert til ca. 3,5 ved tilsetning av NaOH (0,1 M og 1 M) , hvilket gav forbindelse 7 ved filtrering (0,35 g, 56%); smp 225-227°C (dek); 1H NMR (DMS0-de) 5 14,52, 23,60, 53,30, 65,93, 104,25, 146,18, 150,87, 158,44, 169,47, 170,51; MS ( (M + H)<+>) m/ z 268. Anal. (Ci0H13N5 04 • 0, 25 H20) beregnet C 44,20, H 5,01, N 25,77; funnet C 44,42, H 5,29, N 25,52.

Eksempel 5

{ RS)-2-amino-3- [3-etoksy-5- (5-tetrazolyl)isoksazol-4-yl]propionsyre (forb. 8)

Fremstilt ved en fremgangsmåte analog med fremgangsmåten i eksempel 4 fra etyl-2-acetamido-3-[3-etoksy-5-(tetrazol-5-yl) isoksazol-4-yl] - 2- (etyoksykarbonyl) propionat.

Eksempel 6

{ RS) -2-Amino-3,- (3-benzyloksy-5-karboksyisoksazol-4-yl) - propionsyre (forb.9)

{ RS) -2-amino-3- (5-karboksy-3-hydroksyisoksazol-4-yl) -

propionsyre (3,5 g, 11,8 mmol) og en løsning av HC1 i etanol (50 ml) ble kokt under tilbakeløp i 2,5 t og dampet inn til tørrhet in vacuo, for å gi etyl ( RS)-2-amino-3-(5-etoksykarbonyl-3-hydroksyisoksazol-4-yl)propionat (4,15 g, 100%).

En blanding av di-tert-butyl-dikarbonat (3,1 g, 14 mmol), trietylamin (3,8 g, 37 mmol) og 1,4-dioksan (15 ml) ble satt til en løsning av etyl ( RS)-l-amino-3-(5-etoksykarbonyl-3-hydroksyisoksazol-4-yl)propionat (4,15 g, 11,7 mmol) i vann (1,4-dioksan (1:1) (50 ml), og den resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i 16 t. 1,4-Diok-sanen ble inndampet in vacuo, og den vandige fasen ble surgjort med fortynnet vandig HC1. Den vandige fasen ble ekstrahert med etylacetat og de organiske fasene vasket med vann, saltløsning, tørket (MgS04) og konsentrert in vacuo. Flash-kromatografi (Si02, eluent: hetan/etylacetat/eddiksyre (1:1, 4%) ga etyl ( RS)-2-tert-butoksykarbonyl-amino-3-(5-etoksykarbonyl-3-hydroksyisoksazol-4-yl)-propionat som en olje (4,1 g, 92%) .

En blanding av etyl( RS)-tert-butoksykarbonylamino-3-(5-etoksykarbonyl-3-hydroksyisoksazol-4-yl)propionat (3,2 g, 8,6 mmol), K2C03 (2,4, g, 17,2 mmol) i aceton (40 ml) ble oppvarmet til tilbakeløpstemperatur. Benzylbromid (2,2 g, 12,9 mmol) ble tilsatt, og blandingen ble kokt ved tilbake-løp i 1,5 t, konsentrert in vacuo og underkastet flash-kromatograf -i (Si02 eluent: heptan/etylacetat (2:1)) for å gi etyl ( RS)-2-tert-butoksykarbonyl) amino]-3-benzyloksy-5-(etoksykarbonyl)isoksazol-4-yl]propionat (1,64 g, 41%) og etyl ( RS)-2-[(tert-butoksykarbonyl)amino]-3-(2-benzyl-5-etoksykarbonyl -2,3 -dihydro- 3 - oksoisoksazol - 4 -yl) propionat (0,7 g, 18%).

En blanding av etyl ( RS) -2- [ (tert-butoksykarbonyl) amino] -3-[3-bensyloksy-J5- (etoksykarbonyl) isoksazol-4-yl]propionat (0,65 mg,1,4 mmol) og 1 M NaOH (50 ml) ble kokt under til-bakeløp i 16 t. Blandingen ble avkjølt (5°C) , surgjort med fortynnet vandig HC1 og konsentrert in vacuo. Residuet ble rekrystallisert fra vann for å gi ( RS)-2-amino-3- (3-benz-yloksy-5-karboksyisoksazol-4-yl)propionsyre (0,1 g, 23%), smp 209-211°C (dek); <X>H NMR (DMS0-de) 5 2,95 (dd, 1H) , 3,05 (dd, 1 H), 3,99 (t, 1H), 5,26 (s, 2H),7,31-7,52 (m, 5H); MS ((M+H)<+>) m/ z 3 07. Anal. beregnet C 54,89, H 4,62, N 9,15; funnet C 54,31, H 4,56, N 8,97.

De følgende forbindelser ble fremstilt på tilsvarende måte

( RS) - 2- Amino- 3- ( 3- propoksy- 5- karboksyisoksazol- 4- yl) - pro-pionsyre ( forb. 10)

Smp. 250-251°C (dek) <X>H NMR (D20, dioksan, IM NaOD) d 0,95 (t, 3H), 1,76 (se, 2H) , 2,78 (dd, 1H) , 2,90 (dd, 1H) , 3,42 (dd, 1H) , 4,17 (t, 2H) . <13>C NMR d 12,3, 24,4, 29,8, 58,3, 74,9, 111,5, 164,3, 166,6, 173,9, 184,8. MS ((M+H)<+>) m/ z 259. Anal. beregnet C 46,51, H 5,46, N 10,85; funnet C 46,43, H 5,41, N 10,54.

( RS) - 2- Amino- 3- ( 3 - butoksy- 5- karboksyisoksazol- 4 - yl) - propionsyre ( forb. 11)

Smp 238-240°C (dek). <X>H NMR (D20, dioksan, 1 M NaOD) d 0,95

(t, 3H), 1,43 (se, 2H) , 1,76 (qui), 2H) , 2,8 (dd, 1H) , 2/91 (dd, 1H) , 3,44 (dd, 1H) , 4,24 (t, 2H) . <13>C NMR NMR (D20, dioksan, IM NaOD) d 13,79, 19,30, 27,90, 31,03, 56,39, 71,27, 109,65, 162,39, 164,72, 172,02, 182,92. MS ((M+H)<+>)m/z 273. Anal. beregn. C 48,53, H 5,92, N 10,29; funnet C 48,80, H 5,99,N 10,34 .

( RS) - 2- Amino- 3- ( 3- allyloksy- 5- karboksyisoksazol- 4- yl) - propionsyre ( forb. 12)

Smp 239-240°C (dek). <X>H NMR (DMSO-de) d 2,93 (dd, 1H) , 3,99 (dd, 1H), 4,73 (d, 2H), 5,29 (dd, 1H), 6,05 (dq, 1H).

Videre fremstilles de følgende forbindelsene på tilsvarende måte: ( RS) - 2- Amino- 3- [ 3- trans- 2- but- en- oksy) - 5- karboksyisoksazol- 4- yl) - propionsyre

( RS) - 2- Amino- 3- [ 3 ( 3 - metyl- 2 - but- en- oksy) - 5- karboksyisoksazol - 4- yl) - propionsyre

Eksempel 7

( RS) - 2- Amino- 3- ( 2- benzyl- 5- karboksy- 2, 3- dihydro- 3- okso-i soksazol - 4- yl) pr opi onsyre- hydrokl ori d- monohydra t ( forb.

13)

En blanding av etyl ( RS)-2-[(tert-butoksykarbonyl)amino]-3-(2 -benzyl-5-etoksykarbonyl-2,3-dihydro-3 -oksoisoksazol- 4 - yl)propionat (0,9 g, 1,9 mmol) og 1 M HC1 ble kokt under tilbakeløp i 5 t. Blandingen ble dampet inn in vacuo til tørrhet (0,56 g, 80%) smp 146-148°C (dek); <X>H NMR (DMSO-dff) 5 3,08 (dd, 1H), 3,19 (dd, 1H), 4,17 (br s, 1H), 5,16 (2, 2H), 7,24-7,45 (m, 5H); MS ( (M + H)<+>) m/ z 307. Anal. beregn. C 46,60, H 4,76, N 7,77; funnet C 46,88, H 4,81, N 7, 96 .

Eksempel 8

Benzyl (RS)-2-Amino-3-(5-benzyloksykarbonyl-3-etoksyisoksazol -4-yl)propionat-hydroklorid (forb. 14)

En blanding av di-tert-butyl-dikarbonat (1,1 g, 4,9 mmol), NaC03 (1,1 g, 13 mmol) og 1,4-dioksan (3 ml) ble tilsatt til en løsning av ( RS)- 2-amino-3-(5-karboksy-3-etoksyisoksazol -4-yl)propionsyre (1,0 g, 4,1 mmol) i vann/l,4-dioksan (1:1) (10 ml), og den resulterende blanding ble om-rørt ved romtemperatur i 16 t. 1,4-dioksanet ble dampet inn in vacuo, og den vandige fasen ble surgjort med fortynnet vandig HC1. Den vandige fasen ble ekstrahert med etylacetat, og de organiske ekstraktene ble vasket med vann og saltløsning, tørket (MgS04) , konsentrert in vacuo og underkastet flash-kromatografi (Si02, eluent: etylacetat/etanol/eddiksyre >( 3:1, 4%)) for å gi ( RS)- 2[( tert-butoksykarbonyl) amino] -3- (5-karboksy-3-etoksyisoksazol-4-yl)propion-syre (1,4 g, 100%).

En blanding av ( RS)-2-[(tert-butoksykarbonyl)amino]-3-(5-karboksy-3-etoksyisoksazol-4-yl)propionsyre (1,4 g, 4,1 mmol), benzylbromid (1,4 g, 8,2 mmol) i benzen/tetrahydrofuran (4:1) ble tilsatt 1, 8-diazabicyklo-[5.4.0]-undek-7-en (1,3 g, 8,6 mmol) og den resulterende blanding ble kokt under tilbakeløp i 3 t. Blandingen ble filtrert og dampet inn in vacuo. Flash-kromatografi (Si02, eluent: etylacetat/heptan (1:3)) ga benzyl ( RS)-2-[ (tert-butoksy-karbonyl)amino]-3- (5-benzyloksykarbonyl-3-etoksyisoksazol-4-yl)propionat som en olje (1,9 g, 86%).

En blanding av benzyl ( RS) - 2-[(tert-butoksykarbonyl)-amino] -3- (5-benzyloksykarbonyl-3-etoksyisoksazol-4-yl)-propionat (1,9 g, 3,6 mmol) og en mettet løsning av HC1 i dietyleter (40 ml) ble kokt under tilbakeløp i 2 t. De dannede krystaller ble samlet ved filtrering, omrørt med etylacetat og samlet ved filtrering (0,53g, 32%) ; smp 142-144°C; <X>H NMR (DMSO-de) 5 1,32 (t, 3H), 3,17 (dd, 1H), 3,25 (dd, 1H), 4,17-4,32 (m, 3H),5,09 (dd, 2H),5,39 (s, 2H), 7,24-7,53 (m, 10H); MS ((M+H)<+>) m/ z 425. Anal. beregn., C 59,93, H 5,48, N 6,08; funnet: C 59,70, H 5,49, N 6,26.

Eksempel 9

Etyl ( RS) -2-Amino-3-(3-etoksy-5-etoksykarbonylisoksazol-4-yl)propionat-oksalat (forb. 15)

En blanding av ( RS) -2-amino-3-(5-karboksy-3-etoksyisoksazol-4-yl) propionsyre {2,0 g, 8,2 mmol) og en løsning av HC1 i etanol (35 ml) ble kokt under tilbakeløp i 3 t for å gi etyl- ( RS) -2-amino-3- (5-karboksy-3-etoksyisoksazol-4-yl)propionat. Etyl- ( RS) -2-amino-3- (5-karboksy-3-etoksy-isoksazol-4- yl)propionat (0,6 g) ble tilsatt en fortynnet løsning av NaOH, og vannfasen ble ekstrahert med etylacetat. De organiske fasene ble vasket med saltløsning, tørket (MgS04) , filtrert og inndampet til tørrhet in vacuo. Residuet ble løst i aceton >(6 ml) og tilsatt en løsning av oksalsyre (0,14 g, 1,6 mmol) i aceton (6 ml), og den dannede utfel-ling ble samlet ved filtrering (110 mg, 10%); smp 159-

161°C; <X>H NMR (DMS0-d5) 8 1,11 (t, 3H),1,32 (t, 3H) , 1,36 (t, 3H), 3,02 (dd, 1H), 3,11 (dd, 1H) , 3,98-4,16 (m,3H), 4,32 (q, 2H) , 4,37 (q, 2H) ; MS ((M+H)<+>) m/ z 301. Anal. beregnet C 46,15, H 5,69, N 7,18; funnet C 46,38, H 5,69, N 7,36

Eksempel 10

Butyl ( RS) -2-amino-3- (5-butoksykarbonyl-3-etoksyisoksazol-4-yl)propionat-oksalat (forb. 16)

Forbindelsen ble erholdt på en måte som tilsvarer den i eksempel 9 ved å bruke en løsning av HC1 i butanol, smp. 120-121°C; 1H NMR (DMSO-6"6) 5 0,84 (t, 3H) , 0,92(t, 3H) , 1,14-1,31 (m, 2H) , 1,31-1,51 (m, 4H), 1,37 (t, 3H) , 1,62-1,75 (m, 2H) , 3,01 (dd, 1H), 3,13 (dd, 1H), 3,98-4, 09 (m, 3H) , 4,16-4,36 (m, 4H) ; MS ((M+H)<+>) m/ z 357. Anal. beregn. C 51,11, H 6,79, N 6,26; funnet C 51,06, H 6,82, N 6,35.

Eksempel 11

[4- (2-Amino-3,4-dioksocyklobut-l-en-yl) aminometyl] -3-etoksyisoksazol-5-karboksylsyre (forb. 17)

Etyl- 3- etoksy- 4- me tyl isoksazol- 5- karboksyl at Acetylklorid (25 ml, 0,35 mol) ble tilsatt til EtOH (250 ml) ved 0°C og løsningen ble omrørt ved 0°C i 20 min. En løsning av 3-etoksy-4-metylisoksazol-5-karboksylsyre (W095/12587,Al) (18 g, 0,10 mol) i EtOH (20 ml) ble tilsatt og den resulterende blandingen ble kokt under tilbakeløp i 4 t. Blandingen ble avkjølt, tilsatt NaHC03 (200 ml) og ekstrahert med dietyleter (3 x 300 ml). De organiske ekstraktene ble tørket (MgS04) og konsentrert in vacuo for å gi ubehandlet tittelforbindelse (18 g, 86%) .

Etyl - 4 - brommetyl - 3- etoksyisoksazol - 5- karboksylat Etyl-3-etoksy-4-metylisoksazol-5-karboksylat (18 g, 91 mmol), NBS (17,5 g, 100 mmol), dibenzoylperoksid (1 g, 4,1 mmol) i tetraklormetan (500 ml) ble kokt under tilbakeløp i 16 t. Blandingen ble avkjølt, filtrert og konsentrert in vacuo for å gi den rå tittelforbindelsen (24,5 g, 97%).

Etyl - 3- etoksy- 4- f tal imi dome tyl i soksazol - 5- karboksyl a t

En løsning av etyl-4-brommetyl-3-etoksyisoksazol-5-karboksylat (5 g, 17,9 mmol) i DMF (85 ml) ble tilsatt til en suspensjon av kalium-ftalimid (3,6 g, 19,7 mmol) i DMF (125 ml) ved 90°C. Den resulterende blandingen ble omrørt ved 90°C i 40 min, deretter avkjølt og konsentrert in vacuo. Vann (250 ml) ble tilsatt, og den vandige fasen ble ekstrahert med dietyleter (2 x 200 ml). De organiske ekstrakter ble tørket (MgS04) og konsentrert in vacuo for å gi et råprodukt som ble omkrystallisert (EtOH) for å gi tittelforbindelsen (3,70 g, 60%); smp. 93-94°C. 4 - aminome tyl - 3- etoksyisoksazol -5- karboksylsyre - hydroklorid En løsning av etyl-3-etoksy-4-ftalimidometylisoksazol-5-karboksylat i 1 M NaOH ble kokt under tilbakeløp i 45 min. Blandingen ble avkjølt, tilsatt konsentrert HC1 og ekstrahert med dietyleter (3 x 400 ml). De organiske ekstrakter ble konsentrert in vacuo, tilsatt 1 M HC1 (600 ml) og kokt under tilbakeløp ilt. Etter avkjøling ble blandingen vasket med dietyleter (3 x 600 ml) og konsentrert in vacuo, hvilket gav et råprodukt som ble omkrystallisert (eddiksyre) for å gi tittelforbindelsen (1,5 g, 82%):smp 215-216°C (dek) .

( 4- ( 2- Amino- 3, 4- dioksocyklobut- 1 - en - 1 - yl) aminometyl] - 3-etoksyisoksazol- 5- karboksylsyre

Til en løsning av 4-aminometyl-3-etoksyisoksazol-5-karboksylsyre-hydroklorid (1,2 g, 5,4 mmol) og 3-amino-4-etoksy-cyklobut-3-en-l,2-dion (0,60 g, 5,9 mmol) i EtOH (3 00 ml) ble det tilsatt 1 M NaOH (12 ml). Den resulterende suspensjon ble omrørt ved romtemperatur i 16 t, deretter konsentrert in vacuo, tilsatt vann (100 ml) og vasket med EtOAc (2 x 100 ml). pH ble justert til ca. 3 ved tilsetning av en M HC1. Fellingen ble filtrert fra og rekrystalisert

(vann) for å gi tittelforbindelsen som et gult pulver (0,71 g, 47%): smp 236-238°C (dek). <X>H NMR (DMSO-d5) d 1,30 (t, 3H) , 4,22 (q, 2H) , 4,68 (bs, 2H) . <13>CNMR (DMSO-de) d 14,41, 35,27, 65,54, 107,16, 159,14, 163,54, 168,71, 169,15, 169,73, 183,20, 183,34. MS ((M+H)<+>) m/ z 282. Anal.

(CnHnNsOg, 2,25 H20) beregn. C 41,06, H 4,86, N 13,06; funnet C 41,16, H 4,46, N 12,96.

Farmakologi

Forbindelsene ifølge oppfinnelsen ble testet i overensstemmelse med de følgende vel anerkjente og pålitelige tester.

[<3>H]AMPA-binding

I denne testen bestemmes affiniteten av et legemiddel for AMPA-reseptorer ved å måle evnen til å erstatte [<3>H]AMPA fra AMPA-reseptorer.

Testen ble utført i overensstemmelse med en modifisert ver-sjon av fremgangsmåten til Honoré, T. og Nielsen, M., Neurosci. Lett. 1985, 54, 27-32. Testen ble utført i nærvær av KSCN. Dette betyr at bare [<3>H]AMPA-affinitets-bindings-stedene ble merket.

Membranpreparasjonene anvendt ble oppnådd i henhold til fremgangsmåten til Ransom, R.W. og Stec, J. Neurochem. 1988, 51, 830-836.

Kortikal stykke-modell

Kortikal stykke-modell er en test hvor skiver av rottehjer-ne undersøkes in vitro for å kvantifisere effekten av ligander på de forskjellige Glu-reseptorer og evaluere ligan-denes farmakologiske profil (dvs. agonist/antagonist-egenskaper). Testen ble utført som beskrevet av Harrison, N.L. og Simmonds, M.A.Br. J. Pharmacol. 1985, 84, 381-391 som modifisert ifølge Wheatley, P.L., Br. J. Pharmacol., 1986, 87, 159P.

Resultater

Forbindelsene ble funnet å være eksitatoriske aminosyre

(EAA.) reseptorligander. Noen av forbindelsene ble funnet å være agonister ved AMPA-reseptorene, og andre forbindelser ble funnet å være selektive AMPA- eller NMDA-reseptor-antagonister. Forbindelsene viste aktivitet i tiM-området.

Formuleringseksempler

De farmasøytiske formuleringene ifølge oppfinnelsen kan fremstilles ved konvensjonelle fremgangsmåter i faget.

For eksempel: Tabletter kan fremstilles ved å blande den aktive bestanddel med vanlige hjelpestoffer og/eller fortynningsmidler og deretter presse blandingen i en konven-sjonell tabletteringsmaskin. Eksempler på hjelpestoffer og fortynningsmidler omfatter: Maisstivelse, laktose, talkum, magnesiumstearat, gelatin, gummier og lignende. Hvilke som helst andre hjelpestoffer eller tilsetningsstoffer, som fargestoffer, aroma, konserveringsmidler osv. kan anvendes, forutsatt at de er kompatible med de aktive ingrediensene.

Løsningen for injeksjon kan fremstilles ved å løse den aktive ingrediens og eventuelle tilsetningssstoffer i en del av vesikkelet, fortrinnsvis sterilt vann, ved å justere løsningen til det ønskede volum, sterilisere løsningen og fylle den i egnede ampuller eller småflasker. Ethvert egnet tilsetningsstoff som konvensjonelt anvendes i faget, kan tilsettes, såsom toniseringsmidler, konserveringsmidler, antioksidanter osv.

Claims

1. Et (3-alkoksyisoksazol-4-yl)-substituert 2-amino-karboksylsyrederivat eller en svovelanalog derav med den generelle formel I eller II hvor Ri er hydrogen, Ci-6-alkyl, C2.6-alkenyl, eller fenyl-Ci-6-alkyl, A er en binding eller en avstandsgruppe Ci-6-alkylen, B er en gruppe -CRa (NRbRc) -COOR5 hvor Ra-Rc er hydrogen, og R5 er hydrogen, eller B er en gruppe med formel III hvor R2, R3 og R4 er hydrogen, E er COOR6, hvor R6 er H, Ci-C6-alkyl eller • fenyl-Ci-C6-alkyl; X er 0; Y er 0; og farmasøytisk akseptable salter derav.

2. Forbindelse ifølge krav 1, karakte.risert ved at den har formel I.

3. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at den har formel II.

4. Forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 1-3, karakterisert ved at E er en gruppe COOR6/ hvor R6 er Ci-6-alkyl eller f enyl-Cx-e-alkyl.

5. Forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 1-3, karakterisert ved atEer COOH.

6. Forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 1-5, karakterisert ved at B er en gruppe med formelen CRa (NRbRc) -COOR5.

7. Forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 1-5, karakterisert ved at B er en gruppe med formel III.

8. Forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 1-7, karakterisert ved at Ri er Ci-6-alkyl eller C2-6-alkenyl, fortrinnsvis metyl, etyl eller propyl.

9. Forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 1-8, karakterisert ved at A er en binding eller Ci-3-alkylen, fortrinnsvis metylen.

10. Forbindelse ifølge krav 2, karakterisert ved at A er en binding eller Ci-3-alkylen, B er -CH (NH2) -COOH eller en gruppe med formel III hvor hver av R3, R4 og R2 er hydrogen, X og Y er begge oksygen, og Rx er Ci-g-alkyl eller C2.6-alkenyl, fortrinnsvis metyl, etyl eller propyl.

11. Farmasøytisk sammensetning, karakterisert ved at den omfatter en forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 1-10, sammen med et farmasøytisk akseptabelt bærerstoff eller fortynningsmiddel.

12 . Anvendelse av en forbindelse ifølge hvilket som helst av kravene 1-10 for fremstilling av en farmasøytisk sammensetning for behandling av cerebral iskemi, Huntingtons sykdom, epileptiske forstyrrelser, Parkinsons sykdom, Alzheimers sykdom, schizofreni, smerte, depresjon eller angst.