JPH02247191A - 抗レトロウイルス剤としてのプリンおよびピリミジン非環状ヌクレオシドの環状モノホスフエート類 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、新規のプリンおよびピリミジン非環状ヌクレ
オシド類（Ａｃｙｃｌｏｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｓ）の環
状モノホスフェートに係るものである。

これらの化合物は抗ウィルス剤であり、単純庖疹ウィル
スおよびサイトメガロウィルス等のヘルペスウィルスの
クラスに対して有効である。

単純庖疹ウィルス（ＨＳ　Ｖ）は皮膚又は粘膜上に透明
液で満たされているか又は僅かに突起した炎症性の基部
を有する小水庖の単純性又は多発性群が表われることが
特徴である再発性ウィルス感染症をおこす。Ｈ３Ｖは２
種類の菌株、Ｈ３Ｖ−１およびＨ３Ｖ−２，を有してい
る。Ｉ−Ｉ　Ｓ　Ｖ−１は通常ヘルペス性陰唇炎及びヘ
ルペス性角膜炎を惹起し、Ｈ８Ｖは普通には性殖器の病
変をおこし、主として病変部との直接接触、最も多くの
場合性交により伝播される。恐らくは、ウィルスが皮膚
又は神経節中に潜伏して残っており、再発性ヘルペス発
疹は日光に暴露し過ぎ、発熱性疾患、肉体的又は情緒的
ストレス、又はある種の食品又は薬剤により促進される
ことがある。この誘因のメカニズムは多くの場合知られ
ていない。

サイトメガロウィルスは、ヘルペスウィルス群の中の下
位区分（サブグループ）ウィルスである。サイトメガロ
ウィルス感染症はすべての年令層で起こり、何ら予後の
懸念のない不顕性感染から、発熱、肝炎、肺炎で示され
る疾患もあり、死産又は分娩前後の死まで各種の症状が
ある。

当該技術においては、抗ウィルス剤としである種のプリ
ンおよびピリミジン非環状ヌクレオシドを使用すること
が知られている。米国特許第４，６７０，４２４号は、
プリンおよびピリミジン非環状ヌクレオシドの環状ピロ
ホスフェートおよびビスモノホスフェートを開示してい
る。ヨーロッパ特許出願筒８２４０１５７１．３号は環
状モノホスフェートグアニン誘導体およびその抗ウィル
ス剤としての使用法を開示している。環状モノホスフェ
ートグアニン誘導体およびそれらの抗ウィルス剤として
の使用法が米国特許第４．５７９，８４９号においても
開示されている。しかしながら、これまで抗ウィルス剤
としてグアニン以外の非環状ヌクレオシドの環状モノホ
スフェート誘導体を使用することは知られていない。

本発明は、プリンおよびピリミジン非環状ヌクレオシド
の新規環状モノホスフェート、その製造法、この新規化
合物を活性成分として含む医薬品製剤、及びこの新規化
合物又はその医薬品製剤でウィルス感染症を治療する方
法に係るものである。

本発明は下記式の新規抗ウィルス化合物に係るものであ
る。

Ｂ−ＣＨ２−Ｘ−Ｚ 式中、 Ｂはピリミジン、置換ピリミジン、プリン又は置換プリ
ンであり、プリン又はピリミジン上の置換基はアミノ、
ヒドロキシル、ハロゲン、チオまたはアルキルチオール
から選ばれ、アルキルチオールのアルキル部分は１乃至
６個の炭素原子を有しており、プリン又は置換プリンは
グアニンでなく、 Ｘは酸素、硫黄又はメチレンであり、 Ｚは であり、 Ｒは水素又は医薬品として許容し得るカチオンである。

プリン類、置換プリン類、ピリミジン類及び置換ピリミ
ジン熱は核酸の通常の複素環塩基として定義されており
、アデニン、シトシン、チミンおよびウラシルをふくむ
が、これらに限るものではない。

上記で定義されているように、Ｂで表わされているプリ
ン類およびピリミジン類は、プリ１ンおよびピリミジン
上の種々の置換位でＣＨ，−Ｘ−Ｚ　に結合できるが、
プリンの好適な置換位は９−位であり、ピリミジンの好
適な置換位は１−位である。

用語「医薬品として許容し得るカチオン」とは、生物学
的有効性と、このカチオンの遊離化合物が生物学的に又
はその他でも、望ましくない物性を有していないこと等
の性状を有するカチオンを滴、味する。これらのカチオ
ンの例としては、ナトリウム、カリウム、リチウム、カ
ルシウム、マグネシウム、アンモニウムのイオン類及び
当該技術で知られているその他の許容し得るカチオン等
がある。

本発明の好適な化合物は、Ｂがシ１〜シン、Ｘが酸素、
２がジオキソホスホリナン環であり、ＲがすＩ−リウム
であるものである。この化合物は、次式によって表わさ
れる： 本発明の代表的化合物は、以下のものを含むニ ア １−　［　（１．３−ジヒドロキシ−２−プロポキシ）
メチル］シトシン環状モノホスフェート、 ９−　［　（１．３−ジヒドロキシ−２−プロポキシ）
メチル］アデニン環状モノホスフェート、 １−　［　（１，、３−ジヒドロキシ−２−プロポキシ
）メチル］チミン環状モノホスフェート、 １−　［　（１．３−ジヒドロキシ−２−プロポキシ）
メチル］ウラシル環状モノホスフェート、 １−　［　（２．３−ジヒドロキシ−１−プロポキシ）
メチル］シトシン環状モノホスフェート、 ９−　［　（２．３−ジヒドロキシ−１−プロポキシ）
メチルコアデーニン環状モノホスフェート、 １−　［　（２．３−ジヒドロキシ−１−プロポキシ）
メチル］チミン環状モノホスフェート、 １−　［　（２．３−ジヒドロキシ−１−プロポキシ）
メチル］ウラシル環状モノホスフェート、 １−　［　（１．３−ジヒドロキシ−１−プロポキシ）
メチル］ー５ーフルオロウラシル環状モノホスフェート
、 １−［（２．３−ジヒドロキシ−１−プロポキシ）メチ
ル］ー５ーフルオロウラシル環状モノホスフェート、 ９−［　（１．３−ジヒドロキシ−２−プロポキシ）メ
チル］ー２．６ージアミツプリン環状モノホスフェート
、 ９−［（２．３−ジヒドロキシ−１−プロポキシ）メチ
ル］ー２ーアミノー６ーメチルマーキヤプトプリン環状
モノホスフェート。

本発明の最も好適な化合物はナトリウム］［（１．３−
ジヒドロキシ−２−プロポキシ）メチル］シトシン環状
モノホスフェ−１−であり、これはまたナトリウム１−
［　（２ヒドロキシ−１，３，２−ジオキソホスボリナ
ン−５−イル）−オキシメチル］シトシンＰ−オキシド
と称することもできる。

本発明の非環状ヌクレオシド環状モノホスフェートは適
当に置換及び保護されているか又は保護されていないプ
リン又はピリミジン非環状ヌクレオシドを過剰のオキシ
塩化リンまたはピロホスホリルクロリド等のリン酸化剤
と、トリエチルホスフェートの様な不活性溶媒中で、必
要であれば反応物を溶解させるための５ｎＣＱ、の様な
錯化剤の存在下で、反応させて製造される。この反応の
望ましい生成物である環状モノホスフェートは、ビス−
モノホスフェートの様な副生物から、例えばアニオン交
換樹脂カラムからの勾配溶離によって分離精製される。

本発明化合物の製造における出発原料として使用される
ハロプリン類（ｈａｌｏｐｕｒｉｎｅｓ）は文献で公知
である。ハロプリン非環状ヌクレオシド類は１９８３年
３月１６日に公開されたヨーロッパ特許出願第８２４０
１５７１．３号、公開第００７４３０６号；ケー、ケー
、オギルビーおよびエム、エフ、ギレン（Ｋ、Ｋ。

Ｏｇ］１ｖｉｅ　＆　Ｍ、　Ｆ　、　Ｇ１１ｌｅｎ）、
テトラヘドロン　レタース　（Ｔ　ｅｔｒａｈｅｄｒｏ
ｎ　Ｔ−ｅｔｔｅｒｓ）、２１巻、３２７−３３０頁（
１９８０年）；およびエッチ、ジェー、シェーファーお
よび共同者（Ｈ，Ｊ　、　５ｈａｅｆｆｅｒ　ｅｔ　ａ
ｌ、）ネイチュア（Ｎａｔｕｒｅ）、２７２巻、５８：
３−５８５頁（１９７８年）等に公開されている方法に
よって製造される。適当なハロプリン非環状ヌクレオシ
ドは環状モノホスフェートを合成するのに直接使用する
ことができる。

望ましい環置換を有するピリミジン非 環状ヌクレオシド類は１９８２年２月２４日に公開され
たヨーロッパ特許出願第 ８１１０６４−６０．９号、公開第００４６３０７号；
エッチ、エム、アブラムズおよび共同者（Ｈ，Ｍ、　Ａ
ｂｒａｍｓ　ｅｔ　ａｌ、）、複素環化字詰（Ｊ　、　
Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌ、ｉｃ　Ｃｈｅｍ、）、１８巻、
９４７９５１頁（１９８１年）およびケー、ケーオギル
ビーおよびエム、エフ、ギレン、テトラヘドロン　レタ
ーズ、２１巻、３２７３３０頁（１９８０年）等に公開
されている文献の方法によって合成される。ピリミジン
非環状ヌクレオシド類は、ここに公開された方法により
リン酸化され、環化されて環状モノホスフェートを生成
する。

ウィルス感染症の治療に本発明化合物を使用することと
関連して、これらを単独で或は医薬品として許容できる
担体と組み合わせて投与することができ、そしてこのよ
うな投与は１回投薬量でも、多数回しこ分けた投薬量で
も実施できる。より特別には、本発明の化合物は有効単
位投薬製剤の形で投怪される。

ここで用いている用語「有効単位投薬」または「有効単
位投薬量」とは、インビボのウィルスに対して予め定め
られた十分に有効な抗ウイルス薬量を意味する。医薬品
として許容できる担体は医薬品を投与する目的のために
有用な物質であり、固体、液体または気体物質であるこ
とができ、その他には不活性で、医薬品的に許容でき、
活性物質と相溶性のものである。

これらの医薬品組成物は、非経口的、経口的に投与でき
、生薬またはペッサリーとして使用され、軟膏剤、クリ
ーム剤、エアゾル剤、粉剤として局所適用され、または
眼または算用点滴剤として投与される等、製剤が身体内
部または外部ウィルス感染の治療に用いられるかによっ
て、各種の方法で投与できる。

感染症に対して、本組成物は哺乳動物体重ｋｇ当り約０
．１乃至５００　ｍ　ｇ、好適には１．０乃至２５０ｍ
ｇの投薬基準量で経口または非経口で投与され、ヒトに
おいては単位投薬形式で用いられ、単位投薬量当り１乃
至１．０００ｍｇの量で１日１回乃至４回投与される。

経口投与のための微粉末または顆粒品は稀釈剤、分散剤
及び／又は界面活性剤を含有でき、水中又はシロップ状
の一回服用量の形、乾燥状態又は水溶液又は非水溶液又
は懸濁剤を含むことのできる懸濁液状のカプセル又はカ
セットの形、バインダー及び湿潤剤を含むことのできる
錠剤の形、或は水又はシロップ状の懸濁剤の形で提供さ
れる。希望するか又は必要の場合には、着香剤、保存剤
、懸濁化剤、粘稠化剤又は乳化剤を含ませることができ
る。錠剤及び顆粒剤が好適であり、これらはコーティン
グされていてもよい。

非経口投与又は眼感染症用の様に消削としての投与のた
めには、この化合物は約０．１乃至１０％、より好適に
は０．１乃至７％、最適には０．２％ｗ　／　ｖ　１ｌ
ｌｓ度で溶液又は懸濁液として提供される。この溶液は
抗酸化剤、緩衝剤等を含むことができる。

別の方法では、眼の感染症に対して、又は他の外部組織
、例えば口及び皮膚の感染症に対しては、この組成物は
好適には患者の身体の被感染部位に局所軟膏剤又はクリ
ーム剤として適用される。この化合物は、例えば水溶性
軟膏基剤で製剤された軟膏剤の形で、又は乃至７％、最
適には１％ｗ／ｖ濃度で提供される。

以下の実施例に本発明化合物の製造法を具体的に説明す
るが、これに限定するものではない。すべての温度は℃
で示される。

実施例１ １−［（２−ヒドロキシ−１，３，２−ジオキソホスボ
リナン−５−イル）−オキシメチル］シトシンＰ−オキ
シド 分子篩で乾燥したアセトニトリル（１５０ｍＡ）中の１
−［（１，３−ジヒドロキシ２−プロポキシ）メチル］
シトシン（２００ｍｇ、０．９３ｍ　ｍｏｌ）撹拌懸濁
液に四塩化錫（ＳｎＣＱ４．０．１５ｍＱ、１．２９ｍ
ｍｏｌ）を加えたそして室温１時間で徐々に溶解が起っ
た。この撹拌溶液に、ピロホスホリルクロリド（Ｑ−，
４ｍ（１，２，７ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（６０ｍ
　Ｑ）　　に溶解させた溶液を滴下して加えた（滴下時
間９０分）。さらに２時間撹拌した後で、この混合物を
炭酸水素ナトリウム飽和水溶液でｐＨ６，４になるよう
に中和し、この混合物を一夜冷蔵庫中に保存した。固体
をＦ’別し、ｐ液を減圧蒸発乾固した。この残渣（１，
３ｇ）を水（４ｍｕ）中に溶解し、ｐ、　Ｈを　０．３
５に調整してからダーフ（Ｄａｒｃｏ）　（２０−４０
メツシユ）活性炭カラム（１２ｇ）にかけた。カラムを
水で展開し、洗浄水中に硝酸銀（Ａ　ｇ　Ｎ　Ｏａ　）
試験で塩素イオン（ｃｐ−）が検出されなくなるまで洗
浄しく〜３Ｑ）、次に５０％エタノール水溶液中５％水
酸化アンモニウム（ＮＨ，ＯＨ’）で処理した。標記化
合物を含む留分をプールし、蒸発乾固して粗製品１９０
ｍｇをアンモニウム（ＮＨ４＋）塩として得た。この物
質を水に溶解し、ダウエックス（Ｄ　ｏνｅｘ）ＩＸ８
［蟻酸イオン（ＨＣＯＯ−）型コカラム（２００〜４０
０メツシユ、１０ｍ１ｌｌ）にかけた。カラムを初めに
水で展開し、次に水から２Ｎ蟻酸（ＨＣＯＯＨ）に直線
的勾配で変えた。目的生成物を含む留分をプールして、
水から数回蒸発乾固してから凍結乾燥して、標記化合物
３２ｍｇを白色粉末として得た。これはＨＴＪ　Ｌ　Ｃ
分析で単一のピークを示した。

ＮＭＲ分析：　２ＨＮＭＲ（ＴＳＰからＤ２０δ）：　
３．８７（ｍ、０−ＣＨ（ＣＨ２０、）　、４−１７　
４　、４９　（ｍ　、ＣＨ２０Ｐ）。

５．３６　（Ｓ、Ｎ−ＣＨ，、−０）、６．０９（ｄ、
Ｊ＝８．０　Ｈｚ、Ｈ５）、　　７．６６（ｄ、Ｊ＝８
．０Ｈｚ、Ｈ６）。

元素分析：　ＣｅＨｓ２Ｎ３０ｃＰ・１．２　　Ｈ２０
理論値：　Ｃ３２，１６、Ｈ４，８６、Ｎ　１４．０６
゜実測値：　Ｃ３１，９７、Ｈ４，５５、Ｎ　１３．８
１゜実施例　２ ヒ１へのサイトメガロウィルスに対するす１〜リウム１
．−［（２−ヒドロキシ−１，３，２−ジオキソホスボ
リナン−５−イル）−オキシメチル］−シトシンＰ−オ
キシドの活性ヒトのサイトメガロウィルスに対する活性
をヒトサイトメガロウィルス（ＨＣＭＶ）検定法を使用
して測定する。２種類の組織培養検定法が使用できる、
即ち、細胞保護（Ｃｅ］ｌＰ　ｒｏｔｅｃｔｉｏｎ）法
及びプラーク減少（Ｐ　１ａｑｕｅＲｅｄｕｃｔｉｏｎ
　）法である。両検定法とも、ＭＲＣ−５細胞（ヒト胎
児節）及びアイゼンハルト（Ｅ　１ｓｅｎｈａｒｔ）ヒ
トサイトメガロウィルスを使用する。以下、細胞保護及
びプラーク減少検定法を説明する。

細胞保護検定法 試験される化合物の８〜２倍稀釈液を調製する。稀釈液
を調製した後で、各稀釈液の０．５ｍｌ１をＭＲＣ−５
の３個の傾瀉した培地の各々に加える。２個の培地は試
験化合物の抗ウィルス活性を測定するのに使われ、１個
の培地は毒性測定に用いられる。次にそれぞれの培地を
３７°Ｃ１５％ｃｏ２（炭酸ガス培養法）インキュベー
ターで１時間培養する。

１時間後に、ヒトのサイトメガロウィルスの０．５ｍＱ
を試験化合物を含む抗ウイルス活性試験に用いる２個の
培地に加え、別に　０．５ｍＱ培地を毒性測定に用いる
１個の培地に加える。次にそれぞれの培地をインキュベ
ーターに戻し、３７℃１５％Ｃｏ２で培養する。

３７℃１５％ＣＯ□で５日間培養後、各培地を試験化合
物により与えられる抗ウィルス活性及び保護作用の程度
を測定するため観察する。

プラーク減少検定法 試験される化合物の８〜２倍稀釈液を調製する。稀釈液
を調製した後で、各稀釈液の０　、５　ｍ　Ｑ　＆　Ｍ
　ＲＣ−５の３個の傾瀉した培地の各々に加える。２個
の培地は試験化合物の抗ウィルス活性を測定するのに使
われ、１個の培地は毒性測定に用いられる。次にＭＲＣ
５培地を傾瀉し、各培地に〜６０プラーク形成単位（Ｐ
ＦＵ）を含むヒ１−のサイトメガ−２０〜 ロウィルス接種材料の０．１ｍＡを加えて感染させる。

各培地を欣に１時間３７℃１５％Ｃｏ２中で吸着処理す
る。１時間後に、ウィルスが培地から移され、重複培地
に試験化合物の稀釈液を再び加える。次に各培地を３７
℃１５％　ＣＯ２インキュベーターで培養する。接種６
日後、プラークを顕微鏡でカウントする。

上述の検定法を用いて、３種類の化合物のヒトのサイト
メガロウィルスに対する活性を測定した結果を以下の表
に示す。

細胞保護　プラーク減少 ２−アミノ−１，９−ジヒドロ ９−（（２−ヒドロキシ−１− （ヒドロキシメチル）エトキシ）メ チル）−６Ｈ−プリン−６−オン １．５６０ ０．７８ ナトリウム１−　［（２−ヒドロキ シ−１，３，２−ジオキソホスホ リチン−５−イル）−オキシメチ ル］シトシンＰ−オキシド ）２５　　　２５．００ ナトリウム９−　［（２−ヒドロキ シ−１，３，２−ジオキソホスホ リチン−５−イル）−オキシメチ ルコグアニンＰ−オキシド ０．７８０ ０．１９

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、式Ｂ−ＣＨ＿２−Ｘ−Ｚ［式中、Ｂは ピリミジン、置換ピリミジン、プリン又は置換プリンで
   あり、プリン又はピリミジン上の置換基はアミノ、ヒド
   ロキシル、ハロゲン、チオまたはアルキルチオールから
   選ばれ、アルキルチオールのアルキル部分は１乃至６個
   の炭素原子を有しており、さらにプリン又は置換プリン
   はグアニンでなく、Ｘは酸素、硫黄又はメチレンであり
   、Ｚは ▲数式、化学式、表等があります▼又は▲数式、化学式
   、表等があります▼ （式中、Ｒは水素又は医薬品として許容し 得るカチオンである）である］を有する化合物。 ２、プリン又は置換プリンがその９−位 で結合し、ピリミジン又は置換ピリミジンがその１−位
   で結合している請求項１記載の化合物。 ３、Ｂがアデニン、チミン、シトシン又 はウラシルであり、Ｘが酸素、硫黄又はメチレンであり
   、Ｚが ▲数式、化学式、表等があります▼又は▲数式、化学式
   、表等があります▼ （式中、Ｒは水素又は医薬品として許容し得るカチオン
   である）である請求項２記載の化合物。 ４、Ｂがシトシン、Ｘが酸素、Ｚが ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒが水素又は医薬品として許容し得るカチオン
   である）である請求項３記載の化合物。 ５、１−［（２−ヒドロキシ−１，３，２ −ジオキソホスホリナン−５−イル）−オキシメチル］
   シトシンＰ−オキシドである請求項１記載の化合物。 ６、請求項１の化合物の有効量と医薬品 として許容し得る担体を含む抗ウィルス医薬品組成物。 ７、請求項１の化合物の有効量を、ウィ ルス感染症の治療を必要とする哺乳動物に投与すること
   を含む哺乳動物におけるウィルス感染症の治療法。