FI78082B - Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt aktiva 6(r)-/2-(8-acyloxi-2,6-dimetylpolyhydronaftyl-1)- etyl/-4(r)-hydroxi-3,4,5,6-tetrahydro-2h-pyranoner och 7-/8-acyloxi- 2,6-dimetylpolyhydronaftyl-1/-3(r),5(r)-dihydroxiheptansyror. - Google Patents

Description

1 78082

Menetelmä terapeuttisesti aktiivisten 6(R)-£2-(8-asyyliok-si-2,6-dimetyylipolyhydronaftyyli-l)-etyyliJ-4(R)-hydroksi- 3,4,5,6-tetrahydro-2H-pyranonien ja 7-£S-asyylioksi-2,6-dimetyylipolyhydronaftyyli-l7-3(R),5(R)-dihydroksiheptaani-5 happojen valmistamiseksi Tämä keksintö koskee menetelmää uusien 6(R)-£2-(8'-asyylioksi-2 6 ' -dimetyylipolyhydronaftyyli-1') -etyylij-4(R)-hydroksi-3,4,5,6-tetrahydro-2H-pyran-2-onien ja näiden 10 pyranonien hydroksihappomuodon, hydroksihappojen farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen ja hydroksihappojen alempi-alkyyli- ja 2,3-dihydroksipropyyliesterien valmistamiseksi.

Keksinnön mukaisella menetelmällä valmistetaan lähemmin määritelynä yhdisteitä, joilla on kaava I 15

HO

O Jr J

20 " Λ S x

R-C-0 f H

I xJL zJ

25 jossa R on haarautumaton tai haarautunut C^.g-alkyyli paitsi (S)-2-butyyli, syklopropyyli, adamantyyli, C^.g-alkenyy-li, CF3~substituoitu propyyli, p-fluorifenyyli tai bentsyy-li; ja katkoviivat X ja Z tarkoittavat mahdollisia kaksois-30 sidoksia, jotka milloin niitä esiintyy ovat joko kohdissa X ja Z tai pelkästään kohdassa X; sekä kaavan 78082 2 H0

COOH

k^°H

0 I II

" R-c-c r

VVX χΛ. z-J

10 mukaisia vapaita hydroksihappoja, jotka on saatu avaamalla kaavan I mukaisen yhdisteen laktonirengas.

On tunnettua, että tietyt mevalonaattijohdannaiset ehkäisevät kolesterolin biosynteesiä (F.M. Singer et ai.,

Proc.Soc.Exper.Biol.Med., 102, 370 (1959) ja F.H. Hulcher, 15 Arch.Biochem.Biophys., 146, 422 (1971)). Näiden yhdisteiden aktiivisuus ei kuitenkaan aina ole osoittautunut käytännön tarkoituksiin tyydyttäväksi.

Äskettäin Endo et ai. (US-patentit 4 049 495, 4 137 322 ja 3 983 140) ovat ilmoittaneet keksineensä fermentointi-20 menetelmällä tuotettuja, kolesterolin biosynteesiä sangen aktiivisesti ehkäiseviä yhdisteitä. Näiden luonnontuotteisiin kuuluvien yhdisteiden aktiivisin jäsen, jota nimitetään kompaktiiniksi (kaava lila taulukossa I, R'=H), on Brown’in et ai. (J. Chem. Soc. Perkin I, 1165 (1976)) mu-25 kaan rakenteeltaan kompleksinen mevalonolaktoni.

Aivan viime aikoina Monaghan et ai. (US-patentti 4 231 933) ovat ilmoittaneet keksineensä inhibiittorin (kaava Illd taulukossa I, R'=CH3) jota nimitetään MK-803:ksi ja joka eristettiin täysin erilaisesta fermentoinnista.

30 Albers-Schonberg et ai. (USSN 154 157, jätetty 1980-05-28) ovat ilmoittaneet eristäneensä yhdisteen dihydro-MK-803 (kaava lila taulukossa I, R'=CH3) samasta fermentointi-liemestä kuin MK-803 ja todenneensa sen yhtä aktiiviseksi kuin MK-803. Patchett et ai. (USSN 118 050, jätetty 35 1980-02-04) ilmoittavat valmistaneensa katalyttisesti hydraamalla MK-803:sta erilaisia MK-803:n dihydro- ja 3 78082 tetrahydrojohdannaisia (kaavat III, . taulukossa I, O t C J 3. 6 R'=CH3).

JP-hakemusjulkaisussa 55009-024 on kuvattu kompak-tiinin tetrahydroanalogi (kaava Illg, R'-=H).

5 Aivan viime aikoina Gullo et ai. (US-patenttihake- mus sarja-no. 207 508, jätetty 1980-11-17) ovat eristäneet kompaktiinin fermentointiliemestä kompaktiinin dihydro-analogin (kaava III^, R=H).

10 Taulukko I

Keksinnön mukaisella menetelmällä valmistettujen yhdisteiden ja menetelmässä käytettävien lähtöaineiden sekä edellä mainittujen tunnettujen mevalonaattijohdannaisten stereokemialliset rakenteet

H° ^ ' COOH

k/°H

S **

o / S

20 " „ R-C-0 I H

" f H j^H J H CHj

Cx,lvY ζΛ JL

' R|V ^ K' 25 :a-e 1 o L .0 30 N/ : oi i k HO f

CH | H >xv>« i H L'H

3 CH3 CH3 Ai/\^ CH3 35 zj R- R·

TTT IV

IIIa-e a-e R' = H tai CH3 4 78082

Hydronaftyylisarjojen stereokemia

Sarja_Kaksoissidokset_Rakenne_

5 a X ja Z T I

r, .-00 ,,C0 » a * ,. O0

rrS

e ei ole

Keksinnön mukainen menetelmä on kuvattu reaktio-20 kaaviossa A

Reaktiokaavio A

CH-, CH, 25 I I 0

CH? bH I

J J L o

® © r (5) tai @ .7T

1 a, b, e ^ Iva, b, e ^ Ξ -> a t b,e i 30 0 /

Wa-> Wb,e HS H f0H

R’

V

a-e 35 5 78082

Reaktiokaavio A (jatkoa)

f*3 pS

5 CH3 — <p — pi - -- o 0 CH-s CH- ’ 3 3

10 R-CO-O

' H UH

R' ' ^a,b,e 15 ^ (5) ® ^--> 1¾, b, e

V

Määritelmät: 20 X, Y, Z, R ja R1 merkitsevät taulukossa I sarjoille a-e määriteltyä.

Reaktiot: 1) LiOH, kuumennus, hapon lisäys ja laktonisointi.

2) Tert.-butyylidimetyylikloorisilaani ja imidatsoli 25 dimetyyliformamidissa, huoneen lämpötila, inertti suojakaasu.

3) Käsittely RCOCltllä ja 4-dimetyyliaminopyridiinil-lä pyridiiniliuoksessa, edullisesti inerttikaasussa.

4) Käsittely RCOOHtlla ja N,N'-disykloheksyylikarbo-di-imidillä ja 4-pyrrolidinopyridiinillä dikloorimetaanis- 30 sa, edullisesti inerttikaasussa.

5) Kolme ekvivalenttia tetrabutyyliammoniumfluori-dia ja 4 ekvivalenttia etikkahappoa yhtä esterin ekvivalenttia kohti THF:ssä, edullisesti inerttikaasussa.

6) Alkalin vesiliuos, sitten varovainen laimean 35 hapon lisäys happameen reaktioon.

7) Katso III^ e:n synteesin reaktiokaavion yhteydessä esitettyä "Reaktiot ja reagenssit".

6 78082

Keksinnön mukaisessa menetelmässä lähtöaineina käytettäviä kaavojen III ja III-, (R'=CH,) mukaisia yhdistei-tä saadaan fermentoimalla kantaa Aspergillus terreus, ATCC no. 20542, jolle Merck et Co., Inc. (Rahway, New Jersey) 5 viljelmäkokoelmassa on annettu nimitys MF-484 5.

Yhdisteiden IIIa (R^CH^) ja hydrojohdannaisten III^_eo^-metyylibutyryyliryhmä voidaan poistaa, jolloin saadaan 6(R)-/2-(8-hydroksi-2,6-dimetyylipolyhydronaftyy-li-1)etyyli7~4(R)-hydroksi-3,4,5,6-tetrahydro-2H-pyran-2-10 onien ryhmään kuuluvia yhdisteitä, joilla itsellään on hypokolesteroleemista vaikutusta ja jotka ovat erityisen käyttökelpoisia välituotteita valmistettaessa uusia este-reitä, joiden vaikutus tässä suhteessa on vieläkin voimakkaampi .

15 Näitä uusia alkoholeja valmistetaan kuumentamalla estereitä IIIa b e (R'^CHj) alkalimetallihydroksidin kanssa, kuten litiumhydroksidin, kaliumhydroksidin tai natrium-hydroksidin kanssa proottisessa liuottimessa, kuten vedessä tai alkoholissa. Edullisesti käytetään litiumhydroksidia 20 vedessä, ja reaktio suoritetaan kuumentamalla palautusjäähdyttäen 50-72 tuntia tai korotetussa paineessa korkeammassa lämpötilassa (120-180°C) lyhyemmän ajan (8-24 tuntia).

Pyranonirengas avautuu helposti, mutta sivuketjun asyyliryhmään ei voida helposti vaikuttaa. Kuumennusta on 25 jatkettava kauan ja/tai on käytettävä korotettua painetta.

On myös edullista käyttää inerttiä suojakaasua. On erittäin yllättävää, että molekyylit, joissa on niin monta herkkää funktiokeskusta, voivat kestää niitä erittäin rankkoja olosuhteita, jotka ovat tarpeen vahvasti estyneen <£-metyy-30 libutyryyliesterin poistamiseksi. On erittäin odottamatonta, että reaktiossa saadaan hyviä saantoja.

Tuotteet eristetään tekemällä reaktioseos happameksi ja uuttamalla orgaanisella liuottimena, jolloin saadaan yhdisteiden lva,b,e tr ihydroksihappoja. Trihydroksihapot voi-35 daan jälleen laktonisoida kuumentamalla hapon liuosta so- 7 78082 pivassa orgaanisessa liuottimessa, kuten tolueenissa tai bentseenissä, laitteistossa, jossa muodostunut vesi voidaan jatkuvasti erottaa.

Toinen synteesitie yhdisteiden IVb e saamiseksi kä-5 sittää edellä kuvatun IIIa:n hydrolyysin yhdisteeksi IVa ja IVa:n hydrauksen olosuhteissa, jotka kuvataan jäljempänä yhdisteiden IIIb e valmistuksen yhteydessä, jolloin saadaan reaktio-olosuhteista riippuen IVb tai IVe.

Välituotteina käytetyt 8'Ä-hydroksiyhdisteet IVa b^e 10 (R^CHg), jotka Willard on kuvannut (US-patenttihakemus-sarja no. 118 049), valmistetaan erilaisista 8'-estereis-tä, joita ovat kuvanneet Monaghan et ai., (IIIa, R^CH^), Albers-Schonberg et ai., (III^, R^CH-j) ja Patchett et ai. (IIIbe, R^CHj), kuumentamalla niitä pitkiä aikoja litium-15 hydroksidiliuoksen kanssa. Pyranonirengas avautuu helposti, mutta sivuketjuna olevaa asyyliryhmää ei saada helposti poistetuksi. On käytettävä pitkää kuumennusaikaa ja/tai painetta. On myös edullista käyttää inerttiä suojakaasua.

81-hydroksiyhdisteet eristetään tekemällä reaktio-20 seos happameksi ja uuttamalla orgaanisella liuottimena, jolloin saadaan hydroksihappoja, joiden pyranonirengas on vielä auki. Nämä hydroksihapot laktonisoidaan jälleen kuumentamalla hapon liuosta sopivassa orgaanisessa liuottimessa, kuten bentseenissä tai tolueenissa, laitteistossa, 25 jossa muodostunut vesi voidaan jatkuvasti poistaa.

Laktonimuodossa nämä alkoholit ovat kaavan IV, K ~ o. / D t e mukaisia yhdisteitä (taulukko I).

Keksinnön mukaisessa menetelmässä alkoholin IV= K ~ pyranonirenkaan 4-hydroksyyliryhmä suojataan ensin tert.-30 butyylidimetyylisilyyliryhmällä saattamalla se reagoimaan tert.-butyylidimetyylikloorisilaanin kanssa inerttikaasus-sa huoneen lämpötilassa happoa sitovan aineen läsnäollessa, kuten imidatsolin läsnäollessa, jolloin saadaan suojatut alkoholit Tämän jälkeen polyhydronaftyylirenkaassa 35 oleva 8-hydroksyyli asyloidaan joko käsittelemällä yhdis- 8 78082 teitä Va b e haluttua asyyliryhmää vastaavalla happoklo-ridilla pyridiinissä käyttäen katalysaattorina 4-dimetyyli-aminopyridiiniä tai käsittelemällä 8'-polyhydronaftolia haluttua asyyliryhmää vastaavalla vapaalla hapolla ja kar-5 bodi-imidillä, kuten N,N'-disykloheksyylikarbodi-imidillä dikloorimetaanissa käyttäen katalysaattorina 4-pyrroli-dinopyridiiniä. Näissä reaktioissa saadaan suojatut esterit VIa ^ e. Pyranonirenkaan 4-hydroksyyliryhmän silyyli-suojaryhmä poistetaan sitten käyttäen 3 ekvivalenttia tet-10 rabutyyliammoniumfloridia ja 4 ekvivalenttia etikkahappoa yhtä esterien VIa b e ekvivalenttia kohti, jolloin saadaan halutut yhdisteet Ia b e. Tässä viimeksi mainitussa reaktiossa reagenssien suhteet ovat kriittiset saannon ja tuotteiden puhtauden kannalta.

15 Yhdisteet Ia ^ voidaan hydrolysoida emäksellä (ku ten NaOH:lla) yhdisteiden IIa^b^e suolojen (kuten natrium-suolojen) saamiseksi. Käytettäessä muita farmaseuttisesti hyväksyttäviä emäksiä saadaan vastaavien kationien suoloja. Lisäämällä suoloihin varovasti happoa saadaan vastaavat 20 hydroksihapot IIa b e, jotka happamessa pH:ssa muuttuvat yhdisteiksi Iafbfe*

Keksinnön mukaisesti valmistettavia farmaseuttisesti hyväksyttäviä suoloja ovat esimerkiksi seuraavien kationien kanssa muodostetut suolat: natrium, kalium, alumi-25 nium, kalsium, litium, magnesium, sinkki ja tetrametyyli-ammonium, sekä seuraavien amiinien kanssa muodostetut suolat: ammoniakki, etyleenidiamiini, N-metyyliglukamiini, lysiini, arginiini, ornitiini, koliini, N,N'-dibentsyyli-etyleenidiamiini, klooriprokaiini, dietanoliamiini, pro-30 kaiini, N-bentsyylifenetyyliamiini, 1-p-klooribentsyyli- 2-pyrrolidin-l'-yylimetyylibentsimidatsoli, dietyyliamii-ni, piperatsiini ja tris(hydroksimetyyli)aminometaani.

Keksinnön mukaisella menetelmällä valmistetut uudet kaavan I mukaiset yhdisteet ovat in vivo kolesterolisyn- I: 9 78082 teesin inhibiittoreita. Näiden yhdisteiden absoluuttinen konfiguraatio määritettiin Röntgensäde-diffraktion perusteella. Taulukkoon I on koottu nämä rakennekaavat sekä yhdisteiden stereokemiallinen rakenne. Yhdisteistä sekä eri 5 polyhydronaftaleenisarjojen yhdisteistä käytetään koko hakemuksessa samoja viitenumerolta. Kaikilla keksinnön mukaisesti valmistetuilla estereillä on 7 tai 8 ki- raliteettikeskusta. Näiden asymmetriakeskusten absoluuttinen konfiguraatio on kuvattu taulukossa I. Esterin Ia 10 (R'=CH3) konfiguraatio on Cahn'in, Ingold'in, Prelog'n absoluuttisia konfiguraatioita koskevan määritelmän mukaisesti seuraava 4(R), 6(R), IMS), 2' (S), 6*(R)» 8' (S) ja 8'a(R) (R.S. Cahn. C. Ingold ja V. Prelog, Angew. Chem.

Int. Ed., 5, 385 (1966)).

15

HO

20 0 I

r S

^ C\0 R g H

Itfa J Ia (R'=CH3) 25 R' v v

Kuten kaavoissa Ia e on osoitettu, kaikilla näillä yhdisteillä on ryhmien avaruudellinen orientoituminen kus-30 sakin kiraliteettihiiliatomissa sama, joten ne kuuluvat samaan stereokemialliseen sarjaan. R-S nimitys ei mahdollisesti ole identtinen esterin Ia (R^CHg) vastaavan nimityksen kanssa johtuen tämän nimityksen määrittämisessä käytetyistä sarjasäännöistä. Estereissä Ie, joissa on 35 ylimääräinen kiraalihiili, jota ei esiinny esterissä Ia, 10 780 8 2 vetyatomi on kohdassa 4a' tason alapuolella ( Oi -asennossa) , kuten taulukossa I on kuvattu, jolloin rengasliittymä on trans.

Keksinnön mukaisella menetelmällä valmistetut 8'- 5 asyylioksiyhdisteet ovat käyttökelpoisia antihyperkoles- teroleemisia aineita, joita voidaan käyttää ihmisen verisuonien kovettumistaudin, rasvaverisyyden ja muiden Sen tapaisten tautien käsittelyyn. Yhdisteitä voidaan antaa oraalisesti tai parenteraalisesti kapseleina, tablettei-10 na, injektiovalmisteina ym. Yleensä niitä annetaan edullisimmin oraalisesti. Annokset voivat vaihdella riippuen potilaan iästä, taudin vakavuudesta, potilaan kehonpainosta ja muista olosuhteista. Päivittäinen annos aikuisilla on noin 2-2000 mg (edullisesti 10-100 mg), joka 15 annetaan 3-4 osa-annoksena. Tarvittaessa voidaan käyt tää myös suurempia annoksia.

Näillä yhdisteillä on myös käyttökelpoista sie-nienvastaista aktiviteettia. Niitä voidaan käyttää esimerkiksi sienikantoja Penicillum sp., Aspergillus niger, 20 Cladosporium sp., Covhliobolus miylabeanus ja Heminthos-proium cynodnotis vastaan. Tähän käyttötarkoitukseen ne sekoitetaan sopivien formulointlaineiden, jauheiden emul-gointiaineiden tai liuottimien kanssa, kuten vesipitoisen etanolin kanssa, ja suihkutetaan tai pölytetään suo-25 jeltaville kasveille.

Keksinnön mukaisesti valmistettujen kaavan I mukaisten yhdisteiden HMB-CoA-reduktaasi inhiboivaa tehoa ilmaisevat IC^-arvot määritettiin käyttäen kunkin in-hibiittoriyhdisteen viittä pitoisuutta HMG-CoA-reduktaa-30 sikokeessa, joka oli jonkin verran modifoituna julkai sussa Alberts, A. W. et ai., Proc. Natl. Acad. Sei. USA, 77 (1980), 3957-3961 kuvattu koe. Modifioidussa kokeessa entsyymiä inkuboitiin viisi minuuttia inhibiittorin 14 -i ja NADPH:n kanssa ennen reaktiota L C/-HMG-CoA:n kans-35 sa (1,25 ^iM, 5,9 jaCi/umol) . IC^-arvot laskettiin pro- 11 78082 sentuaalista inhibiitioista käyttäen HP-85 - tietokoneen "curve"-ohjelmaa. Seuraavassa taulukossa on esitetty IC^Q-arvo luonnon mevalonaattijohdannaisille ja vastaaville keksinnön mukaisesti valmistetuille yhdisteille, 5 joissa χ-metyylibuturyyliryhmä on kor^ttuo6-dimetyylibu-tyryyliryhmällä. Kuten koetulokset osoittavat on keksinnön mukaisesti valmistettujen yhdisteiden teho tässä kokeessa jopa yli kaksinkertainen ko. luonnossa esiintyviin yhdisteisiin nähden.

10

Taulukko

Yhdisteiden HMG-CoA-reduktaasia inhiboiva teho_

Yhdiste HO IC (nM) Suhteellinen --teho 15 L-154,803-00G07 ?. 1,9 20 3

L-644,128-OOUOl Q

/a \ 0,89 2,1 25 ' f 30 L-154,855-OOL03 -A 7 “ 35 CH3 CH 3 i2 78082

Taulukko (jatkoa)

Yhdiste IC™ (nM) Suhteellinen - —52— lito 5 L-648,239-OOHOl ° | I 1,4 1,4

Il k/° 11 xl» 15

• "W

L-154,856-00VO 2 il Id 4,7 y 20 * g CH3 JL iACH3 CH|V n/n/ 25 L-647,318-00E01 O I ' 3,1 1,5 “ ;X\ / 35 13 78082

Keksinnön mukaisessa menetelmässä lähtöaineina käytettävien yhdisteiden valmistusta ja itse menetelmää kuvataan seuraavassa yksityiskohtaisesti esimerkkien avulla.

Yhdisteiden II ja III, (R'=CH_) valmistus _a_o_3_ 5 A. Fermentointi MF-4845:n lyofilisoitua viljelmää sisältävä putki avattiin aseptisesti ja sen sisältö suspendoitiin tulpat- tomaan 250 ml:an erlenmeyriin (ymppipullo), joka sisälsi noin 10 ml seuraavaa viljelyväliainetta: 10 Viljelyväliaine

Maissinliuotusliemi 5 g

Tomaattitahna 40 g

Kaurajauho 10 g

Glukoosi 10 g 15

Hivenaineliuos 10 g

Tislattu vesi 1000 ml pH säädetty NaOHslla 6,8:ksi Hivenaineliuos

FeSO..7H O 1000 mg

Of) H Z

MnSO..4H_0 1000 mg 4 2

CuC12.2H20 25 mg

CaCl2.2H20 100 mg H3BC>3 56 mg 'n«4>6MO7°24-4H20 19 ”g

ZnSO..7H_0 200 mg 4 2

Tislattu deionoitu vesi 1000 ml

Ymppäyksen jälkeen pulloa sisältöineen inkuboitiin ravistimessa (220 rpm, 5 cm rata) 24 tuntia 28°C:ssa.

30 10 ml :11a ymppiseoksen ensimmäisen vaiheen fermentoinnis- sa saatua kasvulientä ympättiin sitten tulpattomassa 2 litran erlenmeyerissä oleva 500 ml viljelyväliainetta.

Myös sitä ravisteltiin 28°C:ssa 24 tuntia.

760 litran ruostumattomasta teräksestä valmistet-35 tuun fermentointiastiaan vietiin 485 litraa viljelyväli-ainetta, jolla oli seuraava koostumus: 14 78082

Kereloosi 4,5 % (paino/til.)

Peptonoitu maito 2,5 % "

Hiiva-autolysaatti 0,25 % "

Polyglykoli P2000 0,25 % " 5 pH säädettiin 7,0:ksi. Viljelyväliaine steriloitiin kuumentamalla 15 minuuttia 121°C:ssa. Toisen vaiheen ymp-piviljelmää lisättiin 1 litra ja seosta inkuboitiin 28°C:ssa sekoittaen kierrosnopeudella 85 rpm ja johtaen ilmaa 3 0,14 m /min 12 tunnin ajan ja sitten kierrosnopeudella 3 10 130 rpm ja johtaen ilmaa 0,28 m /min 84 tunnin ajan.

B. Eristäminen 1♦ Uutto

Kaksi 379 litran erää edellä saatua viljelylientä yhdistettiin, tehtiin happameksi pH 4,l:een lisäämällä 15 sekoittaen 800 ml väkevää kloorivetyhappoa ja uutettiin lisäämällä 284 litraa etyyliasetaattia ja sekoittamalla edelleen 2 tuntia.

Lisättiin noin 11 kg piimaasuodatusapuainetta ja koko liete pumpattiin 35 cm:n suodatinpuristimen lävitse.

20 Suodatinkakun lisäuuttamiseen käytettiin vielä 284 1 etyyliasetaattia, jolloin pumppaussuuntaa suodatinpuristimen lävitse muutettiin neljä kertaa. Pesuneste poistettiin täysin puristimesta ja yhdistettiin ensimmäisen suodoksen kanssa. Kaksifaasinen suodos sai erottua ja vesikerros 25 poistettiin. Etyyliasetaattikerros pestiin 38 litralla deionoitua vettä, faasit saivat erottua ja etyyliasetaat-tifaasi konsentroitiin noin 38 litraksi.

2. Laktonisointi

Edellä saatuun uutteeseen lisättiin vielä kolmesta 30 378 litran fermentointierästä saadut etyyliasetaattiuut- teet ja etyyliasetaattia tyhjötislattiin, kunnes liuoksen tilavuus oli noin 114 1. Lisättiin noin 190 1 tolueenia, ja liuos konsentroitiin tyhjössä 121 litraksi; tämä vaihe toistettiin, ja sitten lisättiin tolueenia tilavuuden 35 saamiseksi 284 litraksi. Liuos kuumennettiin kiehuvaksi normaalipaineessa ja sitä keitettiin palautusjäähdyttäen 106°C:ssa 2 tuntia.

15 78082

Saatu liuos konsentroitiin tyhjössä pienempään tilavuuteen ja lopuksi suuressa kiertohaihduttimessa tyhjössä öljymäiseksi jäännökseksi.

3. Kromatografointi silikageelillä 5 Edellä saadusta uutteesta poistettiin muut liuotti met lisäämällä 7,6 1 metyleenikloridia ja haihduttamalla jälleen öljymäiseksi jäännökseksi.

öljymäinen jäännös liuotettiin 19 litraan etyvli-asetaatti-metyleenikloridiseosta (30/70, tilav./tilav.) 10 ja liuokseen lietettiin 2,8 kg silikageeliä.

Liete täytettiin tasaisena kerroksena silikageeliko-lonniin (30,5 x 127 cm),joka oli pakattu käyttäen samaa liuotinseosta.

Eluonti suoritettiin etyyliasetaatti-metyleenklo-15 ridiseoksella (40/60, tilav./tilav.) nopeudella 800 ml/min. Esifraktiota koottiin 37,9 1 ja sitten koottiin 15,1 litran fraktioita.

Fraktiot 6-10 konsentroitiin öljymäiseksi jäännökseksi, joka liuotettiin kuumaan etyyliasetaattia, liuos-20 ta käsiteltiin värinpoistohiilellä, hiili suodatettiin kuumana, suodos jäähdytettiin. Erottuneet yhdisteen III (R^CH^) kiteet suodatettiin ja emäliuos konsentroitiin öljyksi, joka edelleen kromatografoitiin. Puhtaan III - _ d yhdisteen (R^CH^) sp. 170-171°C.

25 4. Uudelleenkromatografointi silikageelillä 2270 litran fermentointiliemierästä vastaavalla tavalla saadun emäliuoksen haihdutusjäännös yhdistettiin edellä saadun haihdutusjäännöksen kanssa liuottamalla metyleenikloridiin. Puolet tästä liuoksesta kromatogra-30 foitiin edelleen silikageelillä. Pienestä liuosmäärästä määritettiin kiinteiden aineiden kokonaispitoisuudeksi 325 g. Liuosta käsiteltiin 40 g:lla värinpoistohiiltä, hiili suodatettiin ja suodatuskakku pestiin metyleeni-kloridilla. Suodos ja pesuliemet konsentroitiin tyhjössä.

35 Saatu öljymäinen jäännös liuotettiin 800 ml:aan etyyli- asetaattimetyleenikloridiseosta (30/70, tilav./tilav.) ja 16 7808 2 liuokseen lietettiin 225 g silikageeliä. Liete täytettiin saman liuotinseoksen kanssa pakatun silikageelikerroksen päälle 14 x 36 cm:n kolonniin. Eluointi suoritettiin etyy-liasetaatti-metyleenikloridiseoksella (46/60, tilav./tilav.). 5 3 litran esifraktio pantiin syrjään, ja sitten koottiin 800 ml:n fraktioita.

5. Kromatografointi käänteisfaasipakkauksella Edellä saadun kromatografoinnin fraktiosta 12 konsentroitiin 40 ml öljymäiseksi jäännökseksi (500 mg) ja 10 öljy liuotettiin 5 ml:aan asetonitriiliä. Asetonitriili-liuos vietiin ruostumattomasta teräksestä valmistettuun kromatografiakolonniin (183 cm pitkä, ulkoläpimitta 1,6 cm), joka oli täytetty preparatiivisella käänteisfaasi-nestekromatografiatäytteellä "Bondapak C18/PorasilB" (Waters 15 Associates, Inc., Milford, Mass. 01757). Kolonni eluoitiin seoksella, joka sisälsi tilavuus-%:eina 55 % asetonitriiliä ja 45 % 0,05-m ammoniumfosfaattia (pH 3). Taitekertoi-men perusteella todettiin eluoidun nesteen välillä 1360-1700 ml sisältävän haluttua tuotetta,ja nämä fraktiot yh-20 distettiin. Orgaaninen liuotin poistettiin tyhjössä ja jäljelle jäänyt vesiliuos uutettiin etyyliasetaatilla. Etyyliasetaatti haihdutettiin tyhjössä ja jäännöksenä saatu 120 mg yhdistettä kiteytettiin väkevästä asetonitriililiuoksesta, jolloin saatiin kiteistä yhdistettä III^ (R'=CH.j), sp.

25 129-131°C.

Yhdisteiden III, valmistus _b, e_ Lähtöaineet III^ ja mc (R^CH^) valmistettiin seu-raavan reaktiokaavion mukaisesti preparatiivisilla menetelmillä.

30 Yhdisteen IIIe valmistus suoritetaan edullisesti pel kistämällä yhdiste III^, jolloin lähtöaineena käytetyn yhdisteen perhydronaftaleenirenkaan trans-fuusio säilyy, eikä isomeerien erottamista tarvitse suorittaa.

li 78082 17

r*;V

ch2-ch-ch-c^ ! ch3-ch2-ch-c>0 r h f ti) v 1ηΓ >v^k^CH3 -M*-> X*Spv^CH3 R* p - III, XIIb (2)

HO

_? H3?fC

R· ' H

m/ (3) 1I[Ie a 78082 18

Reaktiot ja reaqenssit 1. Hydraus suoritetaan noin 20-75°C:ssa paineessa noin normaalipaineesta noin 4 atm paineeseen tris(trife-nyylifosfiini)kloorirodiumin läsnäollessa aromaattisessa 5 liuottimessa, kuten benseenissä, tolueenissa tai ksyleenis-sä, edullisesti tolueenissa. Edullisesti hydraus suoritetaan noin 40°C:ssa noin 2-7 atm paineessa tolueenissa.

2. Hydraus suoritetaan noin 20-25°C:ssa normaalipaineessa platinaoksidin läsnäollessa etyyliasetaatissa.

10 3. Hydraus suoritetaan 20-25°C:ssa normaalipaineessa 10-%:isen Pd/C-katalysaattorin läsnäollessa etyyliasetaatissa.

6 p( -Cl- (8 1 β -2- (S) -metyylibutyryylioksi-21 fi ,6'd- dimetyli-11 ,2',3',4',6',7',8',8' a-oktahydronaf tyyli-15 1)etyylj7~4 β-hydroksi-3,4,5,6-tetrahydro-2H-pyran- 2-oni, IIIb (R1=CH^)

Yhdisteen IIIa (R^CHj) (50 mg, 0,1236 mmoolia) ja tris(trifenyylifosfiini)kloorirodiumin (114,35 mg, 0,1236 mmoolia) seosta 10 ml:ssa kuivaa tolueenia hydrattiin huo-20 neen lämpötilassa 6 vrk, jona aikana vetyä sitoutui kaikkiaan 14,6 ml. Seos haihdutettiin kuiviin tyhjössä. Punaiselle jäännökselle suoritettiin preparatiivinen ohutker-roskromatografointi hopeanitraatti-impregnoiduilla sili-kageelilevyillä, jotka kehitettiin kaksi kertaa 10-%:sessa 25 etyyliasetaatti-eetteriseoksessa. Yhdistettä UIj-, (R^CH^) saatiin 22,3 mg.

Massaspektri (M/e) 406 (m+) 304 (m-102) 286 (m-102-18) 30 NMR (CDCI3, 300 MHz) £4,37 (m, 1H) , 4,60 (m, 1H) , 5,34 (t:n d, J=2,5 Hz, 1H), 5,41 (m, 1H).

19 78082 6 o< -D.- (8* β -2(S)-metyylibutyryvlioksi-2'0t ,6'β-dimetvvli-1',2',3',4',4^^,5^61,7',8',8' a-deka-hydronaftyyli-1)etyyli7-4 β -hydroksi-3,4,5,6-tetra-hydro-2H-pyran-2-oni/ IIIC (R^CHj) 5 Yhdisteen IIIa (R1 =011^) liuosta 10 inl:ssa etyyliase taattia hydrattiin platinaoksidikatalysaattorin (yhtä suuri painomäärä) läsnäollessa 1 atm paineessa. Tunnissa sitoutui täsmälleen 2 mooliekvivalenttia vetyä. Katalysaattori poistettiin suodattamalla, ja suodos haihdutettiin 10 kuiviin, jolloin saatiin öljy. Cis- ja trans-isomeerit erotettiin toisistaan ohutkerroskromatografialla silikageeli-levyillä (etyyliasetaatti-eetteriseos 1:9, vyöhykkeet havaittiin suihkuttamalla vettä). Trans-isomeeri IIIe (R'=CH3) saatiin polaarisempana täplänä kuin cis-isomee-15 ri. Sitä saatiin 60 mg.

Massaspektri (M/e) 408 (m+) 323 (m-85) 306 (m-102) NMR (CDCI3, 300 MHz) 20 £4,36 (leveä singletti, 1H) , 4,59 (m, 1H), 5,19 (t:n d, J=2,5 Hz, 1H).

Keksinnön mukaista menetelmää havainnollistetaan seuraavien esimerkkien avulla.

25 Yhdisteiden IVa^ ^ c valmistus 6(R)-£2~(81 -(S)-hydroksi-2'(S),6'(R)-dimetyyli-r,2',6',7l,8'a(R) -heksahydronaftyyli-11 (S) ) -etyylj7~4(R)-hydroksi-3,4,5,6-tetrahydro-2H-pyran-2-oni, IVa (R'=CH3) 30 MK-803:n (IHa, R'=CH3) (8,0 g, 19,78 mmoolia) ja

LiOH.H20:n (8,31 g, 197,8 mmoolia9 seosta 600 ml:ssa vettä sekoitettiin palautusjäähdytyslämpötilassa typpikehässä 56 tuntia. Reaktioseos jäähdytettiin 0°C:seen, ja siihen lisättiin sekoittaen 20 ml väkevää kloorivetyhappoa. Seos 35 uutettiin eetterillä (3 x 250 ml) ja yhdistetyt eetteri-uutteet pestiin peräkkäin vedellä (3 x 200 ml) ja kylläs- 20 7 8 0 8 2 tetyllä suolaliuoksella (200 ml). Liuos kuivattiin MgSO^sllä, suodatettiin ja haihdutettiin tyhjössä, jolloin saatiin öljymäinen jäännös. Se liuotettiin 200 ml saan to-lueenia, ja yhdisteen laktonisoimiseksi liuosta kuumennet-5 tiin palautusjäähdyttäen tyypikehässä 2 tuntia samalla jatkuvasti erottaen muodostunutta vettä. Tolueeni haihdutettiin, jäännöstä trituroitiin heksaanissa, jolloin saatiin 5,15 g (81 %) otsikon yhdistettä IVa (R^C^) valkeana kiinteänä aineena, jota ei tarvinnut enempää puhdistaa.

10 Analyysinäyte valmistettiin kiteyttämällä osa yh disteestä butyylikloridista, jolloin saatiin valkeita ki-deryhmiä, sp. 128-131°C (tyhjö); NMR (CDCI3) ^ 0,87 (d, 3, J=7 Hz, CH3), 1,16 (d, 3, J=7 Hz, CH3), 2,64 (m,2, pyraanin C3H:t), 4,27 (brm, 1, naftaleenin CgH), 4,37 (m,l, pyraanin 15 C^H), 4,71 (m,l, pyraanin CgH), 5,56 (m,l, naftaleenin C5H), 5,79 (dd, 1, J=6,10 Hz, naftaleenin C3H), 6,03 (d,l, J=10 Hz, naftaleenin C4H); IR (CHCI3) 3400 (OH), 1725 (C=0), 1240, 1120, 1080 cm-1.

Analyysi laskettu kaavasta C^c^gC^.0,lC^HgCls 20 C 70,67 H 8,84

Saatu: C 70,77 H 8,75

Vaihtoehtoinen menetelmä 6(R)-Cl-(81(S)-hydroksi-2'(S),6'(R)-dimetyyli-1* , 21,6', 7', 81,8' a (R) -heksahydronaftyyli-1'(S)etyyli7~4~(R)-hydroksi-25 3,4,5,6-tetrahydro-2H-pyran-2-onin valmistamiseksi IVa (R,=CH3) MK-803:n (IIIa, R'=CH3) (188 mg, 0,46 mmoolia) sus pensiota 5 mlsssa (5 mmoolia) 1-n LiOH-vesiliuosta ravisteltiin 12 tuntia 135°C:ssa 30 mlsn ruostumattomasta te-30 räksestä valmistetussa paineastiassa. Jäähdytetty reaktio-seos tehtiin happameksi 1-m H3P04:llä ja uutettiin etyyliasetaatilla. Etyyliasetaattiliuos kuivattiin (MgS04), suodatettiin ja haihdutettiin. Jäännös luotettiin 20 ml saan tolueenia, ja liuosta kuumennettiin palautusjäähdyttäen 35 4 tuntia käyttäen Dean-Stark-laitetta, jolloin tuote lak- tonisoitui. Haihduttamalla tolueeni saatiin otsikon yhdiste.

21 78082

Alkoholien IVa (R'=H) ja IVb, IVr/ IV>, ja IVC (R'=H tai CH3) valmistus

Noudattamalla olennaisesti jompaakumpaa edellä kuvatuista menetelmistä käyttäen siinä IIIa:n (R^CH^) si-5 jasta ekvivalenttista määrää esteriä IIIb tai IHe (R1 =(3^), saadaan vastaavat alkoholit IV^ ja IVe (R'.

Esimerkki 1 6 (R) -C~ (8 ' (S)-2", 2"-dimetyylipropanoyylioksi 2’(S),6'(R)-dimetyyli-1,,2',6',7,,8,,8,a(R)-heksa-10 hydronaftyyli-1'(S))etyyli7“4(R)-hydroksi-3,4,5,6- tetrahydro-2H-pyran-2-oni Vaihe A: 6 (R) -Cl- (81 (S) -hydorksi-2 ' (S) -6 ' (R) -dimetyyli-1' , 2 ' , 6',7',8',8'a(R)-heksahydronatyyli-1'(S)etyyli7~4(R)-15 (dimetyyli-tert-butyylisilyylioksi)-3,4,5,6-tetra- hydro-2H-pyran-2-oni, Va (R'

Alkoholin IVa (R'=CH3) (18,3 g, 57,1 mmoolia), tert- butyylidimetyylikloorisilaanin (21,5 g, 142,8 mmoolia) ja imidatsolin (19,4 g, 285,6 mmoolia) seosta 200 ml:ssa N,N-20 dimetyyliformamidia sekoitettiin 20°C:ssa typpikehässä 18 tuntia. Reaktioseos laimennettiin 1500 ml:11a eetteriä ja pestiin peräkkäin vedellä, 2-%:sella HCl-vesiliuoksella, vedellä ja kyllästetyllä natriumbikarbonaattiliuoksella. Eetteriliuos kuivattiin MgSO^rllä, suodatettiin ja haihdu-25 tettiin 1 litraksi. Liuokseen lisättiin 600 ml heksaania ja liuos haihdutettiin höyryhauteella 600 mlrksi. Tuote kiteytyi huoneen lämpötilassa, se eristettiin ja ilmakuivattiin, jolloin saatiin 13,7 g valkeata pumpulimaista ainetta. Emä-liuokset haihdutettiin 250 ml:ksi, liuosta seisotettiin 30 0°C:ssa yön yli, jolloin saatiin toinen erä kiteitä. Kokonaissaanto oli 17,13 g (69 %) otsikon yhdistettä valkeana pumpulimaisena aineena, sp. 142-144°C (tyhjö); NMR (CDCI3) £0,10 (s, 6, (CH3)2Si), 0,90 (S, 9, (CH3)3CS1), 1,19 (d, 3, J=7 Hz, CH3), 2,58 (d, 2, J=4 Hz, pyraanin C3H:t), 4,3 (m, 35 2, pyraanin C4H ja naftaleenin CgH), 4,70 (m, 1, pyraanin C6H), 5,57 (m, 1, naftaleenin C5H)), 5,58 (dd, 1, J=6, 22 78082 10 Hz, naftaleenin C3H), 6,03 (d, 1, J=10 Hz, naftaleenin C4H) .

Analyysi laskettu kaavalle C25H42°4Si: C 69,08, H 9,74 5 Saatu: C 69,46, H 9,83

Vaihe B: 6(R)-Z2-(8'(S)-2",2"-dimetyylipropanoyylioksi-2'(S)-61(R)-dimetyyli-1',2',6',7',8',8'a(R)-heksahydro-naftyyli-1'(S)-etyyl£7“4(R)-(dimetyyli-tert-butyyli-10 silyylioksi)-3,4,5,6-tetrahydro-2H-pyran-2-oni, via (r'=ch3)

Vaiheessa A saadun alkoholin Va (R'=CH3) (6,0 g, 13,8 romoolia) ja 4-dimetyyliaminopyridiinin (200 mg) liuos 50 ml:ssa pyridiiniä jäähdytettiin typpikehässä 0°C:seen.

15 Liuosta sekoitettiin ja siihen lisättiin 6,8 ml (6,65 g, 55,2 mmoolia) pivaloyylikloridia 15 minuutin kuluessa. Reaktioseosta sekoitettiin 0°C:ssa tunnin ajan ja sitten 20°C:ssa 4 vrk. Reaktioseos laimennettiin 750 ml:11a eetteriä ja pestiin 2-%:isella HCl-vesiliuoksella, kunnes pe-20 suneste oli hapanta, ja sitten kyllästetyllä NaHC03-liuok-sella. Liuos kuivattiin MgS04:llä, suodatettiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin 7,81 g otsikon yhdistettä vaalean oranssinvärisenä öljynä: NMR (CDC13) &0,09 (s, 6, (CH3)2Si), 0,88 (s, 9, (CH3)3CSi), 1,28 (s, 9, (CH3)3CC02-), 2,57 25 (d, 2, J=4 Hz, pyraanin C3H:t), 4,32 (m, 1, pyraanin C4H), 4,63 (m, 1, pyraanin CgH), 5,34 (m, 1, naftaleenin CgH), 5,54 (m, 1, naftaleenin C5H), 5,78 (dd, 1, J=6, 10 Hz, naftaleenin C3H), 6,03 (d, 1, J=10 Hz, naftaleenin C4H). Olennaisesti samalla menetelmällä kuin esimerkissä 30 1, vaiheessa B käyttämällä siinä käytetyn pivaloyyliklori- din sijasta ekvimolaarista määrää taulukossa II esitettyjä kaavan R-C0C1 mukaisia happoklorideja saatiin seuraavat taulukossa II esitetyt yhdisteet VIa (R'=CH3).

li 23 78082

o Taulukko II

" - /* R-C-0 NMR(CDCl3,,i ) s;^''C02~ 7,10(t,2,J=8Hz, p-Fph-) L IJ 8,03 (dd,2, J = 5,8Hz,p-FPh-) 5

F

CH3C02~ 2,02(s,3,CH3C02-) 0 „„ Il 1,19 (d,J=7Hz,^-CH- esteri) 10 CHX X \ 3 3 X o- l,21(d,J=7Hz,o<.-CH3 esteri)

3 Total 3H

(CH3)2CHCH2C02- 0,83(d,6,J=6Hz,(CH3)2CH-) (CH3)2CHC02- 1,13(d,6,J=6Hz(CH3)2CH) ^ CH3(CH2)3C02- 0,95(t,3,J=7Hz,CH3-(CH2)3) C02_ 1,60-2,08 (m,15, adamantyyli) 20

Vaihe C: 6(R)- [2-(8' (S)-2 ", 2"-dimetyylipropanoyylioksi-25 2' (S) ,6' (R) -dimetyyli-11 ,2' ,6' ,7' ,8',8'a (R)-heksa-

hydronaftyyli-1'(S)etyyli-1'(S))etyyli/-4(R)-hydroksi-3,4,5,6-tetrahydro-2H-pyran-2-oni, I

cl (R1=CH,) + —

Bu.N F.3H 0:n (10,0 g, 31,7 mmoolia) ja etikkahapon 30 4 2 (2,4 ml, 2,5 g, 42,3 moolia) liuokseen 50 mlrssa tetrahydro-furaania lisättiin vaiheessa B valmistetun silyylieetterin VI (R'=CH,) (7,81 g, 13,8 mmoolia) liuos 50 ml:ssa tetra- hydrofuraania. Seosta sekoitettiin 20°C:ssa typpikehässä yli tuntia. Reaktioseos laimennettiin 700 ml :11a eetteriä ja 35 pestiin peräkkäin 2-%:sella HCl-vesiliuoksella, vedellä ja 24 78082 kyllästetyllä NaHCO^-vesiliuoksella. Orgaaninen liuos kuivattiin (MgSO^) ja suodatettiin. Haihduttamalla liuotin saatiin 6,45 g lähes valkeata kiinteätä ainetta. Se kiteytettiin 100 ml:sta butyylikloridia ja eristetyt ki-5 teet kuivattiin 35°C:ssa/0,01 mm paineessa 4 tuntia, jolloin saatiin 4,0 g (72 %) otsikon yhdistettä lähes valkeina neulasina, sp. 167,5-170,5°C (tyhjö); NMR (CDCl^) S 0,88 (d, 3, J-7 Hz, CH3) , 1,08 (d,3, J=7 Hz), CH3) , 1,19 (s,9, (CH3) 3C) , 2,67 (d,2, J=4 Hz, pyraanin C3H:tj , 4,39 10 (m,l, pyraanin C4H), 4,65 (m,l, pyraanin CgH), 5,36 (m,l, naftaleenin CgH), 5,55 (m,l, naftaleenin CgH), 5,80 (dd,l, J=6,10 Hz, naftaleenin CjH), 6,04 (d,l, J=10 Hz, naftaleenin C^H); HPLC (4,6 mm x 25 cm "Partisil 10 PAC", 10-%:nen isopropanoli/heksaani, 4 ml/min) retentioaika 4,4 min.

15 Analyysi laskettu kaavalle <-24H36^5: C 71,25, H 8,97 Saatu: C 71,40, H 8,93

Olennaisesti samalla menetelmällä kuin esimerkissä 1 vaiheessa B käytetty, mutta korvaamalla siinä käytetty 20 2,2-dimetyylipropanoyylroksisilyylieetteri (yhdiste VI , ä R'=CH3) ekvivalenttisella määrällä muuta taulukossa II esitettyä esteriä VIa (R'=CH3) saatiin seuraavat taulukossa III esitetyt esterit I (R'=CH,).

a j 25

Taulukko III

RC02- Kaava Sp. (°C) 30 C24H36°5 139'148 CH3 H™2' C26“3Xro5 U3(5-U0,5 (tyhjö) 35 25 7 8 0 8 2

Taulukko III (jatkoa) RCO,- Kaava Sp.(°C) (CH3)2CHCH2C02- C24H36°5 126'128 5 (CH3)2CHC02- C23H24°5 144-147 ch3c°2~ C21H30O5.O.lC4H9 154-156 (tyhjö) 10 C30H42°5-°-05C6H12 155'158 15

Esimerkki 2 6(R)-/2-(81(S)-fenyyliasetoksi-2’(S), 6 ’(R)-dimetyy- li-1 -heksahydronaf tyyli-1' (S) - 20 etyyli/-4-(R)-hydroksi-3,4,5,6-tetrahydro-2H-pyran- 2-oni

Vaihe A: 6 (R) ~/_2- (8 ' (S) -fenyyliasetoksi-2' (S) ,6 ' (R) -dimetyy- li-1',2',6',7',8',8'a(R)-heksahydronaftyyli-1'(S)- 2 5 etyyli7-4(R)-dimetyyli-tert-butyylisilyylioksi-3,4, 5,6-tetrahydro-2H-pyran-2-oni, VI (R'=CH_)

d J

Esimerkin 1 vaiheesta A saadun alkoholin V (R'=CH0) a 3 (434 mg, 1,0 mmoolia), fenyylietikkahapon (204 mg, 1,5 mmoo-lia) ja n,N'-disykloheksyylikarbodi-imidin (309 mg, 1,5 30 mmoolia) liuosta 10 ml:ssa dikloorimetaania käsiteltiin 4-pyrrolidinopyridiinillä (22 mg, 0,15 mmoolia) sekoitet-taen typpikehässä 20°C:ssa. 3 vrk:n kuluttua liuotin haihdutettiin tyhjössä, jäännös suspendoitiin 25 ml:aan eetteriä ja suspensio suodatettiin. Haihduttamalla suodos saa-35 tiin viskoosinen öljy, joka kromatografoitiin 3 x 15 cm kolonnissa silikageelillä (0,062-0,035 mm). Eluoimalla 26 7 8 0 8 2 (paineilma) eetteri/heksaaniseoksella (1:1, tilav./ti-lav.) saatiin 460 mg (83 %) otsikon yhdistettä viskoosi-sena öljynä; NMR (CDCl^) S 0,10 (s, 6, (CHg)2Si), 0,90 (s, 9, (CH-j) 3CSi) , 3,58 (s, 2, PhCH2~) , 5,34 (m,l, nafta- 5 leenin CgH), 7,30 (s,5, Ph).

Olennaisesti esimerkin 2 vaiheen A menetelmällä käyttämällä kuitenkin siinä käytetyn fenyylietikkahapon sijasta ekvimolaarista määrää taulukossa IV esitettyjä kaavan R-COOH mukaisia orgaanisia happoja valmistettiin 10 taulukossa IV esitetyt esterit VI (R'=CH^).

a j

Taulukko IV O

NMR(CDC1,,^ ) 15 -;--- C02” 0, 78-1, 02 (m, 4, syklopropaani ^*3 1, 04 (d,3, J=7Hz,CH«CHCF-)

ch3ch-ch2co2- J

20 ?H3 y°2~ 1 ,88(s,3,CH3C*C) \=/ 2,17(d,3,J=2Hz,CH3C=C) c/ 5,68 (brs,l,c=CH-) 25 3 ch2 1,8 0 (s,3,CH3C=C) CH3 4 86,4,92(s,2,CH2=C) 3Q _ 0 ,87(m,3,CH3(CH2)gC02-) CH3(CH2)8C02 1,25(m,14,CH3(CH2)7CH2C02-) li 27 78082

Vaihe B: 6(R)-[T- (81(S)-fenyyliasetoksi-2'(S),6’(R)-dimetyy- li-1',21,6',71,8',81 a(R)-heksahydronaftyyli-1'(S)) etyyli/-4(R)-hydroksi-3,4,5,6-tetrahydro-2H-pyran- 5 2-oni, I {R *=CH_) a o

Noudattamalla olennaisesti esimerkissä 1 vaiheessa C kuvattua menetelmää korvaamalla kuitenkin siinä käytetty propanoyylioksiyhdiste ekvimolaarisella määrällä esimerkissä 2 vaiheessa A valmistettua fenyyliasetoksiyhdis-10 tettä saatiin otsikon yhdiste, sp. 109-112°C.

Käyttämällä muita esimerkin 2, vaiheen A estereitä VI, (R'=CH0) ja noudattamalla esimerkin 2 vaiheen B mene-telmää valmistettiin taulukossa V esitetyt esterit I

cl (R-=CH3).

15

Taulukko V

RCC>2 Kaava; Sp. (°C) 20 £>- C02 C23H32°5 116-119 cf3 CH^CHCH.CO - C.,H.-F.Oc 110-113 3 2 2 24 33 3 5 25 CH3 C02-

Nrr.·/ C24H34°5 113-118 CH/ CH2 X\ co„- 30 CH3'' 2 C24H34°5 116-119 CH.(CH_)öC0o- C-qH.-O- (huoneenlämpö- 3282 29 46 5 tilassa puoli- kiinteä aine) * c°2~ 35 C*V X C24H36°5 126‘129 / CH^ 20 78082

Esimerkki 3 6(R)-/2-(8'(S)-2"-etyyli-2"-metyylibutyryylioksi-2'(S)-6’(R)-dimetyyli-1',2',6',7',8',8'a(R)-hek-sahydronaftyyli-1'(S))etyyli7-4(R)-hydroksi-3,4,5,6-5 tetrahydro-2-H-pyran-2-oni

Vaihe A: 6(R) -/2-(8'(S)-2"-etyyli-2"-metyylibutyryylioksi-2 ' (S) -6 ' (R) -dimetyyli-1' , 2' ,6 ' , 7 ',8 ',8 'a (R) -heksa-hydronaftyyli-1' (S)etyyli/4(R)-(dimetyyli-tert. -10 butyylisilyylioksi)-3,4,5,6-tetrahydro-2H-pyran-2- oni VI (R'=CH_) d j

Alkoholin V (R'=CH ) (2,17 mg, 5 mmoolia) ja 4-

d J

pyrrolidinopyridiinin (74 mg) magneettisekoittajalla sekoitettuun liuokseen 20 mlrssa pyridiiniä lisättiin 3,0 g 15 (20 mmoolia) 2-etyyli-2-metyylibutyryylikloridia. Reak- tioseosta sekoitettiin 100°C:ssa normaalipaineessa typpi-kehässä 9 tuntia. Reaktioseos laimennettiin 500 ml:11a eetteriä ja pestiin 1-n HCl:llä, kunnes pesuneste oli hapanta, ja sitten suolaliuoksella (3 x 50 ml). Liuos kui-20 vattiin (MgSC>4) , suodatettiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin 4,2 g ruskeata öljyä, öljy kromatografoitiin 6 x 15 cm kolonnissa silikageelillä (0,062-0,035 mm). Eluoimalla (paineilma) eetteri/heksaaniseoksella (1:1, tilav./tilav.) saatiin 2,6 g (95 %) otsikon yhdistettä 25 viskoosisena keltaisena öljynä; NMR (CDClg) .V 0,08 (s,6, (CH3)2 Si), 0,9 (s, 9, (CH3)3CSi), 2,57 (d,2, J=4 Hz, pyraanin CgH-.t), 4,30 (m,l, pyraanin C^H) , 4,63 (m,l, pyraanin CgH), 5,42 (m,l, naftaleenin CgH), 5,53 (m,l, naftaleenin C^H), 5,78 (dd, 1, J=6,10 Hz, naftaleenin 30 CgH), 6,03 (d, 1, J=10 Hz, naftaleenin C^H).

Noudattamalla olennaisesti esimerkin 3 vaiheessa A kuvattua menetelmää, mutta korvaamalla siinä käytetty 2-etyyli-2-metyylibutyryylikloridi ekvimolaarisella määrällä taulukossa VI esitettyä happokloridia R-COC1 val-35 niistettiin taulukossa VI esitetyt esterit VI& (R'=CH3).

li 29 78082

Taulukko VI

0 r-CO nmr(cdci3,/) 5 ^C-C02- 0,87(m,9,CH3CH2CH2(CH3CH2)2CCO2) ' ' C-C02- 0,78(t,9,J=7Hz,(CI^CH^ 3CCC>2) 1,48(g,6,J=7Hz,(CH3CH2)3CC02) 10 \>_fc-CO - l,28(s,6,<CH.)-CC0o) 2,20(s,3,CH3-C=CH2) 3,86(m,2,CH2=C) - i-co2- 1,12 (s,6, (ch3)2cco2) 15 1 0,83(t,3,(OI3CH2CC02)

Vaihe B: 6 (R) ~/2- (8 ' (S) -2"-etyyli-2"-metyylibutyryylioksi-2' (S)-6' (R)-dimetyyli-l',2',6',7',8',8'a-(R)-20 heksahydronaftyyli-1' (S) ) etyyli/4 (R) -hydroksi-3,4 , 5,6-tetrahydro-2H-pyran-2-oni

Noudattamalla olennaisesti esimerkin 1 vaiheessa C tai esimerkin 2 vaiheessa B kuvattua menetelmää, mutta käyttämällä lähtöaineena esimerkin 3 vaiheessa A valmis-25 tettua silyylieetteriä saatiin otsikon yhdiste, sp. 111- 113°C <c26h40o5>.

Vastaavalla tavalla valmistettiin taulukossa VII esitetyt kaavan Ι& mukaiset esterit käyttämällä lähtöaineina muita taulukossa VI esitettyjä estereitä VI& 30 (R'=CH3).

30 78082

Taulukko VII

RCC>2- Kaava Sp. (°C) 5 2^-C02- C28H44°5 81'83 ~>C-CO,- C27H42°5 129‘132 _ / 2 C26H38°5 75-78 10 I 1 Λ-€02- C25H38°5 135-138 15 Esimerkki 4; 6 (R) -%2-13 (S) (2"-etyyli-2"-metyylibutyryylioksi) -2' (S),6' (S)-dimetyyli-l',2',3',4',4'a(S),5',6',7' , 81, 8'a(S)-dekahydronaftyyli-11(SL?etyyliJ-4(R)hyd-roksi-3,4,5,6-tetrahydro-2H-pyran-2-oni, Ie (R'=CH3) 20 Vaihe A: 6 (R)-12- (8 ' (S)hydroksi-2 ' (S) ,6’ (S) dimetyyli-1'2 ' , 3',4',4a(S),5',6',7',8',8'a(S)-dekahydronaftyyli-1'(S)etyyli/-4(R)-hydroksi-3/4,5,6-tetrahydro-2H-pyran-2-oni IVe (R'=CH3) 25 Alkoholin IV (R'=CH ) (2,0 g 6,2 mmoolia) liuosta cl j etyyliasetaatissa (100 ml) hydrattiin platinoksidin (1 g) läsnäollessa 18 atm paineessa, kunnes 2 mooliekvivalenttia vetyä oli sitoutunut. Katalysaattori suodatettiin pois, suodos haihdutettiin ja saatu valkea kiinteä aine (1,9 g) 30 kromatografoitiin 6 x 20 cm kolonnissa silikageelillä (0,062-0,035 mm). Eluoimalla (paineilma asetoni/metyleeni-kloridiseoksella (3:7, tilav./tilav.) saatiin 1,0 g (50 %) otsikon yhdistettä värittömän kiinteänä aineena.

Kiteyttämällä osa yhdisteestä kloroformista, saatiin 35 analyysinäyte valkeana pumpulimaisena aineena, sp. 166-168°C.

31 78082

Vaihe B: 6 (R) -/2- (8 ' (S) -hydroksi-2 ' (S) , 6 ' (S) -dimetyyli-1',2',3',4',4'a(S),5’,6',7',8',8’a (S) -dekahydro-naftyyli-1'(S)-etyyli/-4(R)-(dimetyyli-tert.-butyy-5 lisilyylioksi)3,4,5,6-tetrahydro-2H-pyran-2-oni, ve (R'=CH3)

Alkoholin IVe (R'=CH3) (1,0 g 3,1 mmoolia), imidat- solin (1,05 g, 15,4 mmoolia) ja tert-butyylidimetyylikloo-riöilaanin (1,16 g, 7,7 mmoolia) liuosta 20 ml:ssa N,N-di-10 metyyliformamidia sekoitettiin 20°C:ssa typpikehässä 18 tuntia. Reaktioliuos laimennettiin 200 ml :11a eetteriä ja pestiin peräkkäin vedellä, 2-%:sella HCl-vesiliuoksella ja suolaliuoksella. Eetteri liuos kuivattiin (MgSO^) ja haihdutettiin, saatu valkea kiinteä aine (1,8 g) kromatogra-15 foitiin 6 x 20 cm kolonnissa silikageelillä (0,062-0,035 mm). Eluoimalla (paineilma) asetoni/metyleenikloridiseoksella (1:19, tilav./tilav.) saatiin 1,0 g (74 %) otsikon yhdistettä kiinteänä valkeana aineena, sp. 136-138°C.

Vaihe C: 20 6 (R)- 2/JS1 (S) (2"-etyyli-2,,-metyylibutyryylioksi) - 2’ (S),6’ (S)-dimetyyli-1’,2',3',4',4'a(S),5',6',7', 8 ’ , 8 ' a (S)-dekahydronaftyyli-1' (S)/»tyy’li -4 (R) (di-metyyli-tert.-butyylisilyylioksi)-3,4,5,6-tetrahydro-2H-pyran-2-oni VIe (R'=CH3) 25 Korvaamalla esimerkin 3 vaiheessa A käytetty alkoho li Va (R'=CH3) alkoholilla Ve (R'=CH3) ja noudattamalla vaiheessa A kuvattua menetelmää saatiin vastaava määrä otsikon yhdistettä VI (R'=CHO keltaisena öljynä. NMR (CDClO ö 0,08 (s,6, (CH3)2Si), 0,90 (s,9, (CH3)3)CSi), 1,13 (s,6, 30 (CH3)2C02), 2,63 (m,2, pyraanin C3H:t), 4,33 (m,l pyraanin C^H) , 4,60 (m,l, pyraanin CgH) , 5,23 (m,l, naftaleenin C8H)*

Vaihe D: 6(R)-£2-/H' (S) (2 ”-etyyli-2"-metyylibutyryylioksi)-35 2’(S),6(S)-dimetyyli-1',2',3',4',4'a(S),5',6',7',8', 78082 8'a(S)-dekahydronaftyyli-1'(S)7etyylij-4(R)-hyd- roksi-3,4,5,6-tetrahydro-2H-pyran-2-oni, I (R'=CH ) Θ «3 Käyttämällä esimerkin 1 vaiheen silyylieetterin sijasta ekvimolaarimäärää esimerkin vaiheessa C saatua si-5 lyylieetteriä CI (R'=CH~) ja noudattamalla esimerkin 1 vaiheessa C esitettyä menetelmää saatiin vastaava määrä otsikon yhdistettä kiinteänä aineena.

Analyysinäyte valmistettiin kiteyttämällä heksaa-nista, se saatiin valkeina neulasina, sp. 146-147°C.

10 Esimerkki 5 6(R)(S)-(2"-etyyli-2"-metyylibutyryyli- ok s i) - 2 ' (S) ,6' (R) -dimetyyli-12 3 467 ' , 88 ' a (S) - oktahydronaf tyyli-1' (Sj7ntyvlij-4 (R) -hydroksi-3,4 , 5.6- tetrahydro-2H-pyran-2-oni, 1^ (R'=CH3) 15 Vaihe A: 6(R)-Z2-(8'(S)-hydroksi-2'(S),6'(R)-dimetyyli-1', 2^3^4^6^7^8^8^(3) -oktahydronaf tyyli-1' (S) -etyyli/-4 (R) hydroksi-3,4,5,6-tetrahydro-2H-pyran- 2-oni, IVb (R'=CH3) 20 Noudattamalla olennaisesti lähtöaineen IV (R'=CH-,) cl j valmistusmenetelmää hydrolysoimalla MK-803 keittämällä sitä palautusjäähdyttäen LiOH.H^O^n -vesiliuoksessa 56 tuntia, mutta korvaamalla MK-803 ekvimolaarisella määrällä yhdistettä III^ (R'=CH3), saatiin vertailukelpoisella saan-25 nolla otsikon yhdiste IV^ (R'=CH3), sp. 136-139°C.

Noudattamalla esimerkin 4 vaiheissa B, C ja D kuvattua menetelmää, mutta käyttämällä vaiheessa B käytetyn yhdisteen IVe (R'=CH3) sijasta ekvimolaarista määrää tämän esimerkin vaiheessa A valmistettua yhdistettä IV^ 30 (R'=CH3) saatiin samankaltaisilla saannoilla kuin esi merkissä 4 seuraavat yhdisteet:

Vaihe B: 6(R)-/2-(8'(S)-hydroksi-21(S),6'(R)-dimetyyli-1',2',3',4',6',7',8,',8'a(S)-oktahydronaftyyli-1' (S)-35 etyyli7“4(R)-(dimetyyli-tert.-butyylisilyylioksi)- 3.4.5.6- tetrahydro-2H-pyran-2oni, V^ (R'=CH3), sp. 140-142°C.

I: 33 7808 2

Vaihe C: 6 (R) -f 2-/.’(8 ' (S) -(2,,-etyyli-2”-metyylibutyryylioksi) -2' (S),61 (R)-dimetyyli-1,,2,,3,,4,,6,,7,,8' ,8'a(S)-oktahydronaftyyli-11 (S)_7etyylj3 -4(R)-(dimetyyli-5 tert.-butyylisilyylioksi)-3,4,5,6-tetrahydro-2H- pyran-2-oni, VI ^ (R'=CH^), jossa 0 R-C-0 on -Λ— C02- 10

Vaihe D: 6 (R) -/2-β' (S) (2"-etyyli-2"-metyylibutyryylioksi) -2'(S),6'(R)-dimetyyli-1’,2’,3',4',6', 7 ’ 8 ', 8 ’ a (S) -oktahydronaftyyli-1' (S)J7etyyli^ -4 (R) hydroksi-3,4 , 15 5,6-tetrahydro-2H-pyran-2-oni, 1^ (R'=CH.j)

Sp. 129-131°C, jossa 0 R“C"0 On _ \ CO _ 20 —/ 2 Esimerkki 6 Vaihe 1; 6 (R) -Q- (8 (S) -hydroksi-2 (S) ,6 (R) -dimetyyli-l,2,6,7,8,8a(R)-heksahydronaftyyli-1(S)etyylf7-25 4(R)-hydroksi-3,4,5,6-tetrahydro-2H-pyran-2-onin valmistus

Mevinoliinin (50,2 g, 0,124 mol) ja LiOH.^Otn (52,0 g, 1,24 mol) seosta vedessä (3 1) keitettiin palautus jäähdyttäen ja sekoitettiin magneettisekoittajalla N^-30 kehässä 72 tuntia. Seos jäähdytettiin 0°C:seen (jää/ase-tonihaude) edelleen sekoittaen, ja siihen lisättiin 12-n HCl:ää (120 ml, 1,44 mol) sellaisella nopeudella, että lämpötila pysyi alle 3°C:n. Seos kyllästettiin kiinteällä NaCl:llä ja uutettiin eetterillä (4 x 500 ml). Yhdistetyt 35 eetteriuutteet pestiin suolaliuoksella (2 x 250 ml), kuivattiin MgSO^:llä ja haihdutettiin. Saatu oranssivärinen 34 7 8 0 8 2 öljy (31,7 g) liuotettiin tolueeniin (250 ml), ja liuosta keitettiin palautusjäähdyttäen N2-kehässä 4 tuntia, jolloin laktonin muodostumiseksi reaktioseoksesta poistetaan jatkuvasti vettä Dean-Stark-loukun kautta. Haihduttamalla to-5 lueeni saatiin öljymäinen jäännös, joka liuotettiin eetteriin (1,5 1). Tämä liuos pestiin kyllästetyllä NaHCO^-liuoksella (250 ml), vedellä (250 ml) ja suolaliuoksella (250 ml), kuivattiin ja haihdutettiin kuiviin. Haihdutus-jäännöstä trituroitiin heksaanissa (200 ml), jolloin saa-10 tiin otsikon yhdiste kermanvärisenä kiinteänä aineena (29,7 g, 75 %), jota ei synteesitarkoituksiin tarvinnut enempää puhdistaa. Analyysinäyte valmistettiin kiteyttämällä osa saadusta yhdisteestä n-butyylikloridista, jolloin saatiin värittömiä kiteitä, sp. 128-131°C.

15 Vaihe 2: 6(R)-/2-(8(S)-hydroksi-2(S),6(R)-dimetyyli-1,2,6,7,8,8a(R)-heksahydronaftyyli-1(S)etyyli7~4(R)-tert.-butyylidimetyylisilyylioksi-3,4,5,6-tetrahyd-ro-2H-pyran-2-onin valmistus 20 Edellä saadun alkoholin (18,3 g, 0,057 mol), tert.- butyylidimetyylisilyylikloridin (10,3 g, 0,068 mol) ja imidatsolin (9,3 g, 0,137 mol) liuosta DMF:ssä (200 ml) sekoitettiin magneettisekoittajalla huoneen lämpötilassa 18 tuntia. Reaktioseos laimennettiin eetterillä (1500 ml) 25 ja pestiin peräkkäin vedellä (200 ml), 2-%:isella HCl- vesiliuoksella (200 ml) ja vedellä (2 x 200 ml) ja kuivattiin MgS04:llä. Suodatettu eetteriliuos haihdutettiin 1 litraksi, laimennettiin 600 ml :11a heksaania, ja saatu liuos konsentroitiin 600 ml:ksi, jolloin siitä saostui 30 valkea kiinteä aine (13,7 g). Toinen erä kiteitä (3,4 g) saatiin haihduttamalla emäliuos 250 ml:ksi ja pitämällä sitä yön yli 0°C:ssa. Otsikon yhdistettä, sp. 142-144°C, saatiin yhteensä 17,1 g (69 %).

Vaihe 3: 3 5 6 (R) ~12~ (8 (S) -hydroksi-2 (S) ,6 (S) -dimetyyli- 1,2,3,4,4a(S),5,6,7,8,8a(S)-dekahydronaftyyli-1(S)-etyyli7~4 (R)-tert.-butyy1idimetyy1isilyy1ioksi- 3,4,5,6-tetrahydro-2H-pyran-2-onin valmistus 35 7 8 0 8 2

Edellä saadun silyylieetterin (5,0 g, 0,0115 mol) ja PtC^Jn (1/0 g) seosta etyyliasetaatissa (200 ml) hydrat-tiin Parr-hydrauslaitteessa yön yli. Katalysaattori suodatettiin, ja suodos haihdutettiin. Valkea kiinteä jään-5 nös kromatografoitiin 80 x 178 mm:n kolonnissa silikagee-lillä (230-400 mesh). Eluoimalla ilman painetta metylee-nikloridi/asetoniseoksella (98:2, vol/vol, 1,5 1) saatiin aluksi fraktio, joka hylättiin. Jatkettaessa eluointia samalla eluentilla (2 1) saatiin valkea, kiinteä otsikon 10 yhdiste (3,4 g, 67 %), sp. 146-147°C.

Vaihe 4: 6 (R)-ZJ-^iS) - (2,2-dimetyylibutyryylioksi) -2 (S) , 6(S)-dimetyyli-1,2,3,4,4a(S),5,6,7,8,8a(S)-deka-hydronaftyyli-1 (S)./etyy 11/-4 (R) -tert.-butyylidime-15 tyylisilyylioksi-3,4,5,6-tetrahydro-2H-pyran-2- onin valmistus

Edellä saadun alkoholin (0,11 g, 0,00025 mol) ja 4-pyrrolidinopyridiinin (0,0074 g, 0,00005 mol) liuokseen pyridiinissä (2 ml) lisättiin samalla sekoittaen magneet-20 tisekoittajalla 2,2-dimetyylibutyryylikloridia (0,067 g, 0,0005 mol). Liuosta kuumennettiin 100°C:ssa 3 tuntia N2~ kehässä, sitten lisättiin vielä 0,0335 g 2,2-dimetyyli-butyryylikloridia ja 0,0039 g 4-pyrrolidinopyridiiniä, ja kuumennusta jatkettiin vielä 3 tuntia. Reaktioseos jääh-25 dytettiin, laimennettiin eetterillä (50 ml), pestiin 3-n HCl:llä (2x5 ml) ja suolaliuoksella (2 x 10 ml). Eette-riliuos kuivattiin MgSO^:llä, suodatettiin ja haihdutettiin. Saatu keltainen öljy (0,136 g) kromatografoitiin 30 x 152 mm:n kolonissa silikageelillä (230-400 mesh).

30 Kolonni eluoitiin ilman painetta CH2Cl2:lla (300 ml) ja sitten CH2Cl2/asetoniseoksella (98:2, vol/vol, 100 ml), aluksi eluoitunut liuos hylättiin. Jatkettaessa eluointia CH2Cl2/asetoniseoksella (98:2, vol/vol, 50 ml) saatiin otsikon yhdiste vaaleankeltaisena öljynä (0,081 g, 60 %).

36 78082

Vaihe 5: 6 (R)-12-/3.(S) - (2,2-dimetyylibutyryylioksi) -2 (S) , 6(S)-dimetyyli-1,2,3,4,4a(S),5,6,7,8,83(5)-deka-hydronaftyyli-1 (S£7etyy]jZ7-4 (R) -hydroksi-3,4,5,6-5 tetrahydro-2H-pyran-2-onin valmistus

Edellä saatu silyylieetteri (0,5 g, 0,00093 mol) lisättiin THF-liuokseen (30 ml), joka sisälsi jääetikkaa (0,224 g, 0,00372 mol) ja tetrabutyyliammoniumfluorididi-hydraattia (0,88 g, 0,00279 mol). Liuosta sekoitettiin 10 magneettisekoittajalla ^-kehässä 48 tuntia. Reaktioliuos laimennettiin eetterillä (150 ml), pestiin vedellä (25 ml) ja suolaliuoksella (2 x 75 ml), kuivattiin MgSO^:llä, suodatettiin ja suodos haihdutettiin viskoosiseksi öljyksi (0,45 g), öljy kromatografoitiin 40 x 152 mm:n kolonnissa 15 silikageelillä (230-400 mesh). Kolonni eluoitiin CH^Cl^/-asetoniseoksella (85:15, vol/vol) ilman painetta ja 20 ml:n fraktiota koottiin. Fraktiot 21-37 yhdistettiin ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin kiinteä otsikon yhdiste (0,37 g, 94 %). Analyysinäyte valmistettiin 20 kiteyttämällä osa siitä eetteri/heksaani-seoksesta, jolloin saatiin värittömiä levyjä, sp. 159-160°C.

Esimerkki 7

Etyyli-3 (R) , 5 (R) -dihydrok s i-7-/1Γ( S) - (2,2-dimetyylibutyryylioksi) -2(S),6(S)-dimetyyli-1,2,3,4,4a(S), 25 5,6,7,8,8a (S) -dekahydronaftyyli-1 (S)_7heptanoaat- ti

Esimerkissä 6 valmistetun yhdisteen (yhdiste I) (3,0 g) suspensioon etanolissa (50 ml) lisättiin ^-kehässä natriummetoksidia (30 mg). Liuosta sekoitettiin huoneen 30 lämpötilassa 0,5 tuntia, sitten siihen lisättiin eetteriä (300 ml). Eetteriliuos pestiin vedellä (3 x 50 ml), kuivattiin MgSO^llä ja suodatettiin. Suodos haihdutettiin vakuumissa ja saatu öljy kromatografoitiin 60 x 152 mm:n kolonnissa silikageelillä (230-400 mesh). Eluoimalla me-35 tyleenikloridi/etanoliseoksella (94:4, vol/vol, 250 ml) ilman painetta saatiin kiinteä otsikon yhdiste.

li 37 7 8082

Esimerkki 8 2,3-dihydroksipropyyli-3(R),5(R)-dihydroksi-7-/JTtS) - (2,2-dimetyylibutyryylioksi) -2 (S) ,6 (S) -di-metyyli-1,2,3,4,4a(S),5,6,7,8,8a(S)-dekahydro-5 naf tyyli-1 (S)_7heptanoaatti

Yhdisteen II Na-suola valmistettiin lisäämällä esimerkissä 6 valmistetun yhdisteen I (0,22 g) liuokseen DMF:ssä (2 ml) 1-n NaOH-liuosta (0,55 ml). Liuosta sekoitettiin 15 minuuttia, sitten siihen lisättiin l-jodi-2,3-10 dihydroksipropaania (0,2 g), ja seosta sekoitettiin ja kuumennettiin 80°C:ssa (öljyhaude) 6 tuntia. Huoneen lämpötilaan jäähdytetty liuos kaadettiin eetteriin (100 ml). Eetteriliuos pestiin suolaliuoksella (2 x 25 ml), kuivattiin MgSO^llä ja suodatettiin. Suodos haihdutettiin va-15 kuumissa, saatu öljy kromatografoitiin 20 x 152 mm:n kolonnissa silikageelillä (230-400 mesh) . Eluoimalla aseto-ni/metyleenikloridiseoksella (60:40, vol/vol) ilman painetta saatiin otsikon yhdiste öljynä, joka jähmettyi sitä pidettäessä pakastimessa yön yli.

20

Claims (4)

38 7 8 0 8 2

1. Menetelmä terapeuttisesti aktiivisten 6(R)-£2-(8-asyylioksi-2,6-dimetyyli-polyhydronaftyyli-1)-etyyli7~ 5 4(R)-hydroksi-3,4,5,6-tetrahydro-2H-pyran-2-onien valmis tamiseksi, joilla on kaava I HO 10 ββ O β R-C-0 f

15 AfXi01! ,1 x JL 7 J jossa R on haarautumaton tai haarautunut C^_g-alkyyli paitsi 2-(S)-butyyli, syklopropyyli, adamantyyli, C^.g-alke- 20 nyyli, CF^-substituoitu propyyli, p-fluorifenyyli tai bentsyyli; ja katkoviivat X ja Z tarkoittavat mahdollisia kaksoissidoksia, jotka milloin niitä esiintyy, ovat joko kohdissa X ja Z tai pelkästään kohdassa X; ja vastaavien 7-£8-asyylioksi-2,6-dimetyylipolyhydronaftyyli-l7~3(R),5(R)— 25 dihydroksiheptaanihappojen valmistamiseksi, joilla on kaava II ho-|^cooh .OH

30. II o = R-c-o S 3 5 ^ ch3 39 78082 jossa R ja Z tarkoittavat samaa kuin kaavassa I, ja kaavan II mukaisten yhdisteiden alempialkyyliesterien tai 2,3- dihydroksipropyyliesterien valmistamiseksi, tunnettu siitä, että 5 1) kaavan III HO

3 III X zJ 15 mukaista 6 (R) -£2- (8- (2-metyylibutyryylioksi) -2,6-dimetyyli-polyhydronaftyyli-1)-etyyli7~4(R)-hydroksi-3,4,5,6-tetra-hydro-2H-pyran-2-onia kuumennetaan alkalimetallihydroksi-20 din kanssa proottisessa liuottimessa, reaktioseos tehdään happameksi ja tuote laktonisoidaan 6 (R) -R·- (8-hydroksi-2,6-dimetyylipolyhydronaftyyli-1)-etyyli7-4(R)-hydroksi-3,4,5, 6-tetrahydro-2H-pyran-2-oniksi, jolla on kaava IV 25 ΗΟβ^^γ·0 9 H° H U „ CHj ^ 35 40 78082 2. saatu kaavan IV mukainen yhdiste saatetaan reagoimaan tert.-butyylidimetyylikloorisilaanin kanssa iner-tissä suojakaasussa huoneen lämpötilassa happoa sitovan aineen läsnäollessa vastaavan suojatun yhdisteen valmistami- 5 seksi, jolla on kaava V CHo CH-j I | J CH3— C - ^i-O^p^p0 ch3 ch3 10 f ¥ H 15 ,.>Sn. 3. saatu kaavan V mukainen 4-tert.-butyylidimetyyli-silyylioksiyhdiste asyloidaan a) sekoittamalla sitä happokloridin RCOC1 kanssa py-20 ridiiniliuoksessa inertissä suojakaasussa asylointikataly- saattorin läsnäollessa, tai b) sekoittamalla sitä huoneen lämpötilassa hapon RCOOH ja Ν,Ν-disykloheksyylikarbodi-imidin kanssa liuoksessa asylointikatalysaattorin läsnäollessa, ja 25 4) saadusta yhdisteestä, jolla on kaava VI CH-, CHo I I „ CH3- C -Si-O^j^^-iP 30 <^3 CH3 J VI R-CO-O s'

35 J Clf 41 78082 poistetaan silyyliryhmä sekoittamalla silyyliyhdistettä huoneen lämpötilassa tetrahydrofuraanissa 3 ekvivalentin kanssa tetrabutyyliammoniumfluoridia ja 4 ekvivalentin kanssa etikkahappoa yhtä silyyliyhdisteen ekvivalenttia 5 kohti, ja haluttaessa hydrolysoidaan saatu kaavan I mukainen pyranonijohdannainen emäksellä vastaavaksi kaavan II mukaiseksi dihydroksiheptaanihapoksi tai sen suolaksi, ja haluttaessa muutetaan saatu kaavan II mukainen happo alempialkyyli- tai 2,3-dihydroksipropyyliesterikseen.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tun nettu siitä, että R on 1,1-dimetyylipropyyli.

3. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että kumpikaan symboleista X ja Z ei tarkoita kaksoissidosta. 78082 42