DE3212900A1 - Cephelosporinverbindungen - Google Patents

Description

-S-

Cephalosporinverbindungen

yamanouchi Pharmaceutical Co., Ltd»
Tokyo (Japan)

Diese Erfindung bezieht sich auf neue Cephalosporinverbindungen und ihre pharmazeutisch zulässigen SaIZe₅, die ausgezeichnete antibakteriell Aktivitäten auf grampositive und gramnegative Bakterien aufweisen.

In der GB-PS 2 027 691 sind Cephalosporin-Antibiotika der allgemeinen Formel

H H

beschrieben und es ist darin angegeben, daß diese Antibiotika go gen gramnegative Bakterien hoch wirksam sind«, Durch die BE-PS Ρ,γβ 4 33 sind Amiriothia',^r.olylcephalof?porinderivate der allgemeinen Formel

,S.

CH_n-S-I

bekannt geworden, für die angegeben wird, daß sie gegen grampositive und gramnegative Bakterien wirksam sind«.

Weiterhin sind durch die BE-PSS 853 545, 865 632, 866 038,

878 637 etc. Antibiotika bekannt, die eine öC-Thiazolyl-#£·- oximino-acetamidogruppe als Substituenten der 7ß-Position von Cephalosporinderivaten besitzen.

Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist es, Cephelosporinverbin-» düngen zur Verfügung zu stellen, die vorteilhafte Aktivitäten gegen pathogene Mikroorganismen haben durch Einführen eines spezifischen neuen Substituenten in der 3-Position von Cephalosporinverbindungen und einer neuen Gruppierung oder der spezifischen bekannten Gruppierung, die in den vorstehend genannten Patentschriften für die 7ß-Position beschrieben worden sind.

Die vorliegende Erfindung betrifft neue Cephelosporinverbindungen der allgemeinen Formel I

COOH

I A Λ

worin R eine Gruppierung der Formel - C - R ist, (worin R

k²

ein Wasserstoffatom oder eine niedere Alkylgruppe mit 1-3 Kohlenstoffatomen darstellt und R² ein Wasserstoffatom, eine niedere Alkylgruppe mit 1-3 Kohlenstoffatomen, eine Phenylgruppe, die durch eine Amino- oder Hydroxygruppe substituiert sein kann, eine Cyanogruppe, eine Carboxygruppe oder eine Carboxymethylgruppe bedeutet; R und R können zusammen mit dem Kohlenstoffatom, an das sie gebunden sind, eine Cycloalkylidengruppe mit 4-6 Kohlenstoffatomen bilden) oder eine Gruppierung der Formel -CH₂-R darstellt, (worin R⁵ ein Wasserstoffatom, eine Halogenmethylgruppe, eine Carbamoylgruppe, eine Carboxymethylgruppe, eine 4-Carboxy-3-hydroxyisothiazol-5-yl-thiomethylgruppe oder eine 2-Carboxyphenylthiomethylgruppe bedeutet); R¹ stellt eine Gruppe der Formel

• · · ο W

'J 11 ζ y υ υ

dar, (worin R_& eine Carboxy gruppe, eine Cyano gEupp©· ®ö©r eine Carbamoylgruppe» die durch eine niedere Alkylgruppe mit 1-3 Kohlenstoffatomen substituiert sein kann, "bedeutet, Rv stellt eine Hydroxygruppe oder eine Aminogruppe dar) oder eine Gruppierung der Formel _ς _ (worin R_Q und R

die schon genannte Bedeutung halsen) und die Wellenlinie /v eine Anti-Form- oder Syn-Porm-Bindung darstellt, sowie ihre Sal:se*

Der Ausdruck "eine niedere Gruppe mit 1-3 Kohleastoffatomen" bei der Definition der Gruppen in den allgemeinen Formeln bedeutet in der Beschreibung eine geradkettig oder verzweigtkettige Kohlenstoffkette mit 1-3 Kohlenstoffatomen« So umfaßt zum Beispiel die niedere Alkylgruppe mit 1-3 Kohlenstoffatomen praktisch eine Methy1gruppe, eine Äthylgruppe, eine Propylgruppe und eine Isopropylgruppe und die Cycloalkylidengruppe mit 4-6 Kohlenstoffatomen beinhaltet eine Cyclobutylidengruppe„ eine Cyclopentylldengruppe und eine Cyclohexylidengruppe®

Die Erfindung umfaßt auch die pharmazeutisch zulässigen Salse der Verbindungen der allgemeinen Formel I und als solche Salze, Salze mit anorganischen Basen, zum Beispiel ein Alkalimetall wie Natrium, Kalium etc., und ein Erdalkalimetall wie Calcium,, Magnesium etc.; Ammoniumsalze; Salae mit organischen Basen oder basischen Aminosäuren wie Trimethylamine Triäthylamin, Cyclohexylamin, Dicyclohexylamin, Diäthanolamin, Arginin ₉ Lysin etc„; Salze mit Mineralsäuren wie Chlorwasserstoffsäure, Schwefelsäure, Phosphorsäure, und Salze mit organischen Säuren .wie Essigsäure,

Milchsäure, Weinsäure, Fumarsäure, Maleinsäure, Methansulfonsäure, Äthansulfonsäure etc.

Die Verbindungen dieser Erfindung der Formel I weisen ein Iminoäther-Typ-Oxim und eine 2-Aminothiazolgruppe in dem 7ß-Substituenten auf und daher existieren geometrische Isomere and Tautomere in diesen Verbindungen. Die Erfindung umfaßt alle diese Syn-Form- und die Anti-Form geometrischen Isomerem und die gemeinschaftlichen Tautomeren.

Die Verbindungen der vorstehend genannten allgemeinen Formel I, die durch die Erfindung zur Verfügung gestellt werden, und ihre Salze sind neue Verbindungen und sie besitzen eine Ausbildung der chemischen Struktur in dem Punkt, daß sie eine (substituierte Isothiazol-5-yl)thiomethylgruppe oder eine substituierte Iminoalkylidendithiethan-2-ylgruppe in der 3-Position des Oephalosporinskeletts aufweisen. Sie besitzen ausgezeichnete antibakterielle Aktivitäten gegen grampositive Bakterien und gegen gramnegative Bakterien, insbesondere i?seudomonas aeroginosa, und sind als antibakterielle Mittel verwendbar·.

Die antibakteriellen Aktivitäten der Verbindungen diesor Erfindung werden in der nachfolgenden Tabelle I wiedergegeben.

Die Verbindungen dieser Erfindung können nach verschiedenen Verfahren hergestellt werden, Typische Verfahren hierfür werden nachstehend gezeigt.

Verfahren 1: N Schutzgrupp

(!) Amidierung

Abspaltung der ■-Schutzgruppe

C-COOH H₂N-

^-s^ K

-N-^^-CH₂S-4^_s^N

COOH (Ia)

3212SÜ0

U Θ ©

	2	Beispiel Nr.	10	14	l>g/ml)	3ekannte ^ Verbindung*
	40,2	4	40,2			έθ,2
- 10	tO, 2	~0,2	40,2		17	0,78
	*0,2	40,2	£0,2	0,39	έθ 2	0,39
	1,56	0;78	1,56	0,78	_.	12,5
Tm bo Π P) T Mininium-Wac}ioturas-Irihibitiona-Koi)Berjtratiori	£0,2	0,39	#0,2	40,2	0^78	0,78
Organismus	0,78	0,39	0,39	3,13	3,13	3,13
KeIb. pneumoni ae ATCC 10031	0,78	3,13	0,78	3,13	1~Q ο 2	12,5
SaI. cholerae- suis 1348	12,5	3,13	12,5	6,25	1,56	100
Sh. sonnei II 37148	50		6^25	(*): (6R,7R)-7-((Z)-2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-(2-carboxy- prop-2-oximino)acetamido)-3-(1-methy1tetrazol-5-yl- thiomethyl)ceph-3-em-4-carbonsäure (gemäß GB-PS 2,027,691).
Ps. aeruginosa HD 5142	12,5
E. coil Ebara
Ent. aerogenes NY-2
Ps. aeruginosa 99
Ac. Calcoaceticus IAM 12087

In den vorstehenden Umsetzungsgleichungen bedeutet R die Gruppe R mit einer geschützten Carboxygruppe und R bedeutet ein Wasserutoffatom oder nine Schutzgruppe für eine Carboxygruppe.

Unter den Verbindungen dieser Erfindung können die Verbindungen HiLt der allgemeinen Formel Ia hergestellt werden durch Umsetzen der Alkoxyiminothiazolessigsäurederivate mit der allgemeinen Formel II oder deren reaktivem Derivat an der Carboxygruppe mit dem 7-Amino-3-isoth.iazolätliiomethylcephalosporinderivat der allgemeinen Formel III und dann durch Abspalten der Schutzgruppe der Aminogruppe und/oder Carboxygruppe.

Praktische Beispiele der Schutzgruppe für die Carboxygruppe sind

eine Trimethylsilylgruppe, eine Benzhydrylgruppe, eine ß-Methylsulf onyläthylgruppe, eine Phenacylgruppe, eine p~Methoxybenzylgruppe, eine· tert.-Butylgruppe, eine p-Nltrobenzylgruppe etc., die leicht tinter milden Bedingungen abgespalten werden lcönnen.

Die vorstellende Umsetzung wird gewöhnlich in einem-Lösungsmittel unter Kühlung oder bei Raumtemperatur durchgeführt. Es bestellen keine besonderen Beschränkungen bezüglich des Lösungsmittels, wenn das Lösungsmittel an der Umsetzung n.icht teilnimmt. Orp;rmische Lösungsmittel, wie üioxan, Tetrahydrofuran, Äther, Aceton, Methyläthylketon, Chloroform, Methylenchlorid, Ät/hylenchlorid, Methanol, Äthanol, Acetonitril, Äthylacetat, Äthylformiat, Dimethylformamid, Dimethylsulfoxid etc., werden gewöhnlich verwendet. Diese Lösungsmittel können einzeln oder im Gemisch verwendet werden.

Die Verbindungen der Formel II werden zu der Umsetzung im Zustand der freien Carbonsäure oder als das reaktive Derivat der Carbonsäure gebracht. Geeignete reaktive Derivate sind gemischte Säureanhydride, Säurehalide, aktive Ester, aktive Amide, Säureanhydride, Säureazide etc. Wenn die Verbindungen der Formel II im Zustand der freien Carbonsäure verwendet werden, wird ein Kondensationsmittel, wie z.B. N^'-Dicyclohexylcarbodiimid, N,W-Diäthylcarbodiimid etc., verwendet.

Ferner wird es je nach der Art des Reaktionsderivates der verwendeten Carbonsäure manchmal vorgezogen, um die Umsetzung gleichmäßig durchzuführen, die Reaktion in Gegenwart einer Base vorzunehmen. Beispiele für Basen, die in diesem Falle verwendet werden, sind anorganische Basen wie Natciumhydrogencarboηat, Kaliumhydrogencarbonat, Natriumcarbonat, Kaliumcarbonat etc., und_ organische Basen wie Trimethylamin, Triäthylamin, Dimethylanilin, Pyridin etc.

Die Entfernung der Schutzgruppe der Ca.rboxygruppe aus dem so erhaltenen Produkt kann leicht durch Inkontaktbringen des Produktes mit einer Säure.im Falle einer Benzhydrylgruppe, einer

p-Methoxybenzylgruppe etc. durchgeführt werden oder mit Wasser im Falle einer ifrimethylsilylgruppe.

Für die Schutzgruppe der Aminogruppe, die im Laufe der Herstellung der Verbindungen dieser Erfindung mit der Formel Ia verwendet wird, wird gewöhnlich eine Schutzgruppe verwendet, die auf dem Gebiet der Peptidchemie Verwendung findet* praktisch sind dies zum Beispiel Acylgruppen wie eine Formylgruppe, eine Acetylgruppe, eine Propionylgruppe, eine tert.-Butoxycarbonylgruppe, eine Methoxyacetylgruppe, eine Methoxypropionylgruppe, eine Benzyloxycarbonylgruppe, eine p-Nitrobenzyloxycarbonylgruppe etc. und Aralkylgruppen wie eine Benzylgruppe, eine Benz™ hydrylgruppe, eine TrityIgruppe etc.

Woiterhin kann die Entfernung der Schutzgruppe für die Aminogruppe leicht durch Hydrolyse mit einer Säure durchgeführt werden, wenn als vorstehende Aralkylgruppe solche wie eine Tritylgruppe oder verschiedene Arten von Acylgruppen als die Schutzgruppe verwendet werden. Als Säure wird in einem solchen Falle Ameisensäure, Trifluoressigsäure, Chlorwasserstoffsäure und dgl. bevorzugt eingesetzt.

Zusätzlich wird darauf hingewiesen, daß die Entfernung der Schutzgruppe für die Carboxygruppe und die Entfernung der Schutzgruppe für die Amino gruppe gleichzeitig durchgeführt werden kann«, Verfahren 2:

CONH -⁸^ ^R

Umlagerung
Base

N n-

JCZJ

ft A4

O β 4

- 13 -

Ιτη Umsetzungsschema bedeutet R eine Aminogruppe oder eine geschützte Aminogruppe.

Die Verbindungen dieser Erfindung der allgemeinen Formel T"b können durch Behandlung der Verbindung der allgemeinen Formel Ia, die eine substituierte inothiazol-'i-yl-thioTn^thylgruppf· in d r 3-Position des Oephalosporinskelcttee aufweiten, mit einer.· IU.w.· zwecks Umlagerung in die gewünschte Verbindung hergestellt werden.

?»s Als für diese Reaktion geeignete Basen werden schwach basische Materialien verwendet wie z.B. Natriumhydrogencarbonat, Kaliumhydrogencarbonat, Natriumcarbonat, Triäthylamin etc.

Diese Reaktion, wird gewöhnlich in einem Lösungsmittel bei Zimmertemperatur oder unter Kühlung durchgeführt. Es bestehen keine ■besonderen Beschränkungen bezüglich des Lösungsmittels, wenn das Lösungsmittel an der Umsetzung nicht teilnimmt, jedoch werden. Wasser oder mit Wasser mischbare Lösungsmittel, wie Methanol, - Aceton, Tetrahydrofuran, Dimethylsulfoxid, Dimethylformamid • •'.tr. _f in geeigneter Weise, allein oder als ihr Gemisch, verwendet.

Das Salz der Verbindungen dieser Erfindung der allgemeinen For- ⁰^ mel I können durch Durchführen des vorstehend schon beschriebenen Verfahrens 1 oder Verfahrens 2 hergestellt werden, indem zuvor das Salz des Ausgangsmaterials eingesetzt wird, oder es kann hergestellt werden durch Anwendung einer herkömmlichen salzbildenden Reaktion, wie diese auf diesem Gebiet üblich ist, auf die freie Verbindung, die durch eines der vorstehenden Verfahren 1 oder 2 hergestellt worden ist.

Beispielsweise kann das Alkalimetallsalζ der Verbindungen durch Zugabe einer n-ButanoTlönurig i?inf>s Alkali -''-nthyi Η^καηππ (.pm ;-,h der freien Verbindung, hergestellt durch' Verfahren 1 oder 2, und dann durch Zugabe eines organischen Lösungsmittels mit oirior abweichenden Löslichkeit, wie Äther, Äthylacetat etc., hergestellt werden; das Salz der Verbindungen mit einer organischen

,rf c» ö G O O B ώ

Base oder einer basischen Aminosäure kann durch. Zugabe einer äquivalenten oder leicht überschüssigen Menge einer organischen Base oder einer basischen Aminosäure zu der freien Verbindung hergestellt werden. Geeignete Verbindungen sind z.B. Dicyclohexylarnin, Triäthylaruin, Cyclohexylarain, Diäthanolarnin, Arginin, Lysin etc., um diese Reaktion durchzuführen; und das Ammoniumsalz der Verbindungen kann hergestellt werden durch Zugabe von wässerigem Ammoniak zu der freien Verbindungο

Das Isolieren und das Reinigen der Verbindungen dieser Erfindung der Formel I und deren Salze kann nach üblichen Methoden, wie Extraktion mit einem organischen Lösungsmittel, Kristallisation, Abtrennung und .Reinigung durch Säulenchromatographie, erfolgen«,

Die antibakterielle Arzneimittelzubereitung, die eine Verbindung dieser Rrfiridunf»; dnr allgemeinen Formel I oder deren Salz enthält, wird nach herkömmlichen Methoden unter Verwendung von ii IVLL ch ι «τι phnrmu:;outiui:hen Trägern, Bindemitteln, Verdünnungsmitteln und sonstigen Hilfsstoffen hergestellt» Das antibakterielle Arzneimittel kann oral in Form von Tabletten, Pillen, Kapseln, Granülen etc. oder parenteral mittels Injektionen, wie intravenösen Injektionen, intramuskulären Injektionen etc« oder als Suppositorien etc., verabreicht werden. Die Dosierungen.werden in geeigneter Weise unter Berücksichtigung des Grades der Erkrankung, des Alters, Geschlechtes etc. eines Patienten bestimmt., Gewöhnlich werden 250-3000 mg pro Tag für einen Erwachsenen verwendet, wobei das antibakterielle Arzneimittel zwei bis viermal täglich verabreicht wird.

Jetzt wird die Erfindung mehr ins Einzelgehende durch die folgenden Beiiipielo beschrieben. Da einige Ausgangsmaterialien, die ■unter die allgemeinen Formeln II und III fallen und für die Herstellung dnr Verbindungen dieser Erfindung dienen, neue Verbindungen sind, werden die Herstellungsverfahren und ihre Eigenschaften als Referenzbeispiele beschrieben,,

- 15 Referenzbeispiel 1

OOH

In einem 20 ml Dreihalskolben wurden 2,5 g (0,0092 Mol) 3-Acetoxymethyl-7-amino-A -cephem-4-carbonsäure, 1,52 g Natriumiodid und 12,5 ml Acetonitril eingefüllt und gekühlt, bis die Innentemperatur 18° 0 erreicht wurde. Dann wurden 5 ml Trifluormetaansulfonsäure tropfenweise zu dem Gemisch bei der gleichen, vorstehend angegebenen Temperatur in etwa 7 Minuten zugegeben. Es wurde in 17 Minuten die Reaktion bei 12-18° C durchgeführt. Dann wurde das Reaktionsgemisch in 50 ml Eiswasser dispergiert. Die Dispersion wurde 20 Minuten unter Eiskühlung durchgerührt. Dann wurden die gebildeten Kristalle durch Filtration abgetrennt. Die so erhaltenen Kristalle wurden mit 32,5 ml EJ !-.wasser un-l dnnnoh mit 25 ml Aceton gewaschen. Die Kristalle wurden Ln einem Exsikkator über Phosphorpentoxid getrocknet. Es wurden 2,09 g (Ausbeute: 67%) 7-Amino-3-Dodmethyl-^"^l-cephera-4-carbonsäure mit einem Schmelzpunkt von 177° C erhalten.

Referenzbeispiel 2

COOH

In 60 ml Wasser wurden 3,4 g (0,01 Mol) 7-Amino-3-D?dmethyl-A--cephem-4-carbonsä.ure suspendiert, danach wurden 0,84 g (0,01 Mol) Natriumhydrogencarbonat in der Suspension aufgelöst. Zu der Suspension wurden 2,67 g (0,011 Mol) ^Carboxy-S-hydroxy-S-merkapto-

isothiazol-trinatriumsalz hinzugefügt und das Gemisch 3 Stunden bei Raumtemperatur umgesetzt. Nach beendeter Reaktion wurde das pH des ^Reaktions'gemisches auf 1,6 mit 11,4 ml 2n Chlorwasserstoff säure unter TCi«kühlung eingestellt. Nach Durchrühren des Reaktionsgeraisches während 10 Minuten unter Eiskühlung wurden die dadurch gebildeten Niederschläge durch Filtration abgetrennt. Die Niederschläge wurden mit 10 ml kaltem Wasser gewaschen und getrocknet. Es wurden 2,9 g (Ausbeute: 74»5%) 7-Amino-3-f(4-carboxy-3-hydroxyisothiazol-5-yl)thiomethylj- Δ -cephem-4™carbonsäure erhalten. Etwa beim Schmelzpunkt bei etwa 170° C begann das Produkt sich zu verfärben und es wurde schwarz-braun bei einer Temperatur oberhalb 200° C.

Kernmagnetisches ResonanzSpektrum (^{in D}2° ⁺ . J(ppm): 3,58 (2H, q, CH₂ in 2-Position)

3,98 (2H, q, -CH₃-S-)

5,04 (IH, d, CH in 6-Position)

5,41 (IH, d, CH in 7-Position)

Infrarotabsorptionsspektrum:

_
^{n :} 1770 (Lactam)

Referenzbeispiel 3

COOH

COOK

Zu 40 ml einer wässerigen Lösung, enthaltend 0,7 g (0,0039 Mol) 3-Amino-4-cyano-5-mercaptoisothiazolnatriumsalz5₁ wurden 1,2 g (0,0035 Mol) 7-Amino-3-;jodmethyl-A -cephem-4-carbonsäure und 0,29 g (0,0035 Mol) Natriumhydrogencarbonat hinzugefügt. Das Gemisch wurde 3 Stunden bei Raumtemperatur durchgerührt. Unlösliche

- 17 -

Anteile wurden aTofiltriert unter Verwendung von Perlite als Fil terhilfsmittel. Das pH des Filtrates wurde auf 2 mit 2 η Chlorwasserstoff säure unter Eiskühlung oinger-tellt. Das Gemisch wur.i 10 Minuten unter Eiokühlung durchpei.'ührl.. Dir dadurch p;t:bi.ldo I.p Niederschläge wurden durch Filtration abgetrennt, mit 10 ml Wic ser gewaschen. Es wurde unter vermindertem Druck getrocknet« Es wurden 0,75 g rohes 7-Amino-3-£(3-ami.no-4-cyanoisothiazol-5-yl)thiomethyl[ -Δ -cephem-4-carbonsäure erhalten. Die Eigenschaften des .gereinigten Produktes waren -die folgenden

InfrarotaDsorpfionsspektrum:

cm'¹: 2280, 1765, 1610 "max

K-e3mmagnetisches Resonanz Spektrum (in D₂O-NaHCO₃): J(ppm): 3,60 '(2H, q)
4,18 (2H, q)
5,08 (IH, d)
5,42 (IH, d).

Beispiel 1

COOH

( φ : eine Phenylgruppe)

Zu 45 ml Dioxan wurden 3,0 g (0,00677 Mol) (Z)-oC-Methoxyimino- cL -(2-tritylaminothia2iol-4-yl)essigsäure, 9H mg (0,00677 ΜοΊ ) I-Hydroxybenztriazol und 1,42 g (0,00688 Mol) Dicyclohexylcarbodiimid hinzugefügt. Man ließ eine Stunde -bei Raumtemperatur reagieren. Nach "beendeter Reaktion wurde ausgefallener Dicycloharnstoff abfiltriert. Es wurde eine Dioxanlösung des aktiven Esters erhalten. Andererseits wurden 1,7 g (0,00437 Mol) 7-Amino-3-^(4-carboxy-3-hydroxyisothi,azol-5-yl)thiomethyl]-A^-cephem-

«« β« «»β »β» β» 0 Z, I Z. ϋ U U

_{β β} μ (αοβοα ο ο β β β «-J» (van· * » » β ο β

© © ο β ο β

4-carbonsäure, erhalten nach Referenzbeispiel 2, in 22 ml Wasser suspendiert, dann wurde 1,0g Natriumhydrogencarbonat langsam dazugegeben und aufgelöst. Zu der so erhaltenen braun-durchsichtigen Lösung wurde tropfenweise die zuvor hergestellte Dioxanlöcung des aktiven Esters hinzugegeben und die Reaktion in 4 Stunden bei Baumtemperatur durchgeführt. Nach beendeter Reaktion wurde der ausgefallene aktive Ester aus dem Reaktionsgemisch durch Filtration abgetrennt. (Die abgetrennte Menge betrug 1,37 g). Andererseits wurde das Filtrat unter vermindertem Druck destilliert, urn das Dioxan zu entfernen. Dann wurde eine wässerige Lösung von Natriumhydrogencarbonat zu der so erhaltenen wässerigen Lösung hinzugefügt, um das pH auf 7,5-8 einzustellen. Die wässerige Lösung wurde zweimal je mit 10 ml Äthylacetat gewaschen und 1n Chlorwasserstoffsäure zu der so erhaltenen wässerigen Schicht hinzugefügt, um das pH auf 1,5-2 (13 ml) einzustellen. Zu der sauren wässerigen Lösung wurden 100 ml Methyläthylketon und danach 50 ml Methyläthy!keton hinzugefügt, um eine Extraktion durchzuführen. Daο nicht umgesetzte Ausgangsmaterial, welches während der Extraktion ausfiel, wurde durch Filtration entfernt. Die Methyläthylketon-Lösung wurde mit 30 ml und danach mit 20 ml gesättigter wässeriger Natriumchloridlösung gewaschen. Es wurde über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck abdestilliert. Es wurden 4,4 g caramelartiges Material erhalten. Das caramelartige Material wurde einer Silikagelsäulenchromatographie unterworfen, eluiert wurde mit einem Gemisch aus Chloroform, Isopropylalkohol und Ameisensäure (90:10:2 im Volumenverhältnis), Die Fraktionen, die das gewünschte Frodukt enthielten, wurden gesammelt, das Lösungsmittel wurde abdestilliert und der Rückstand durch Zugabe von Äther gepulvert. Es wurden 1,5 g (Ausbeute: 28,5%) (Z)-3- [(4-carboxy-3-hydroxyisothiazol-5-yl)thiomethyl]-7-£^i;i--(methoxyJmino)-^-(2-tritylaminothiazol-4-yl)acetairiido*}-Z\· -erphem-4-carbonsäure erhalten.

Infrarotabsorptionsspektrum·: .
^{V οπΓ1 : 178}°

3212300

Kernmagnetisches Resonanzspektrum. (in d_g-DMSO): /(ppm): 3,62 (2H, q, CH₂ in 2-Position) 3/78 (3H, s, OCH₃ ) 4,14 (2H, q, -CH₃S-) 5,12 (IH, d, CH in 6-Position) 5,56-5,76 (IH, q, CH in 7-Position) 6,67 (IH, Thiazol , CH in 5-Position)

7.24-7,28 (15H, 3 Φ - ) 8,7^ (IH, S, -NH-; 9,48 (IH, d, -CONH- ).

Ui)

cooh

'Nach dem Abkühlen von 4 ml Trifluoressigsäure mit Eiswasser auf eine Temperatur unter 5⁰C wurden 407 mg der vorstehend genannten Verbindung .zugefügt. Die Temperatur stieg auf 6,5° C während der Zugabe an. Dann wurden 4 ml Wasser hinzugegeben und die Reaktion für eine Stunde bei einer Temperatur unter 10 C durchgeführt« Danach wurden Trifluoressigsäure und Wasser unter vermindertem Druck abdestilliert und das dabei gebildete feste Material in 10 ml Äthanol aufgelöst. Dann wurde Äthanol weitgehend abdeotilliert.und ein öliges Produkt erhalten, welches durch Zugabe von Äther gepulvert wurde. Es wurden 300 mg (Z)-T-[^-(2-Aminothiazol-4-yl-)-o6-(methoxyimino)acetamidoJ-3-j(4-carboxy-3-hy"droxyiso- -Zi -cephem-4-carbonsäure erhaltene

Infrarotabsorptionsspektrum:

KBr -1 ^pmax ^{cm : 1770} (Lactam)

. .. .. οι ua.uu

a ο β * ο · © s» β © φ ■

_ν «tau ο φ β ο οο <α

ο ο ο « »ο»» β ο ©

0 0 Λ,ΟΟΟΦΟ

Kernmagnetisches Resonanzspektral (ⁱⁿ d₆-DMSO): £(ppm): 3,64 (2H, q, CH₂ in 2-position) 3,84 (3H, s, OCH₃ )
4,18 (2H₉ q, -CH₃S- )
5,16 (IH, d, CH in 6-Position) 5,72 (IH, S,

9-,58-(1H, d, -NHCO- )

Beispiel 2
Ci)

O-COilH

\ _CHs

coo-t-Bu

CHj

OU COOH

x;cootB

Zu 10 ml Dioxan wurden 864 mg (0,0015 Mol) Butoxycarl)onyl-1-mefhylätnoxyiniino)-A^-(2-tritylaminothiazol-4-yl)essigsäure, 204 mg (0,0015 Mol) 1-Hydroxybenztriazpl uad 317 mg (0,0015 Mol) Dicyclohexylcarbodiimid hinzugefügt und eine Stunde bei Raumtemperatur umgesetzt'. Wach beendeter Umsetzung wurde der ausgefallene Dicyclohexylharnstoff .durch Filtration abgetrennt. Es wurde eine Dioxanlösung eines aktiven Esters erhalten. Andererseits wurden 389 mg (0,001..MoI) 7-Amino-3-1(4-carboxy-3-hydroxyisothiazolr5-yl)thiomethylJ-A -cephem-4-carbon- «äure in 4 ml Dimethylsulfoxid suspendiert und 390 Ml Triäthylamin dazugegobe-n und aufgelöst. 2u der so gebildeten Lösung wurde' tropfenweise die in der vorstehenden Stufe erhaltene Dioxanlösung des aktiven Esters bei Raumtemperatur, hinzugefügt» Die Reaktion wurde in 4 Stunden bei. Raumtemperatur durchgeführt«, Das Dioxan wurde unter vermindertem Druck abdestilliert. 20 ml Wasser und 2 ml gesättigte wässerige Natriumhydrogencarbpnatlösung wurden zu dem Reaktionsgemisch hinzugefügt. Das Gemisch wurde zweimal

mit je 20 ml Äthylacetat gewaschen und nach Einstellen des pH in der wässerigen Schicht auf 1-1,5 mit 2n Chlorwasserstoffsäure wurden die ausgefällten Produkte mit 20 ml Methylethylketon extrahiert. Die Methyläthylketonlösung wurde zweimal mit je 10 ml gesättigter wässeriger Natriumchloridlösung gewaschen und über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet„ Dann wurde das Lösungsmittel unter vermindertem Druck abdestilliert und ein fester Rückstand erhalten. Der feste Rückstand wurde einer Silikagelsäulenchromatographie mit einem Gemisch aus Chloroform,, Isopropylalkohol und Ameisensäure (90:10:2 im Volumenverhältnis) unterworfen. Die Fraktionen, die das gewünschte Produkt enthielten, wurden gesammelt. Das Lösungsmittel wurde unter vermindertem Druck abdestilliert und der Rückstand gepulvert durch Zugabe eines Gemisches aus Äther und Petroläther (1:1 im Volumenverhältnis). Es wurden 148 mg (Z)-3-f(4-Carboxy-3-hydroxyisothiazol- 5-yl)thiomethyl]-7-[d> -(2-tritylaminothiazol-4-yl)-cC -(1-tert.-butoxycarbonyl-i-methyl-äthoxyiminojacetamidoj-A -cephem-4-carbonsäure erhalten.

Infrarotabsorptionsspektrum:

^max^cm~^{1: 1780}·' ¹⁷¹O
Kernmagnet!sehes ResonanzSpektrum (in dg- <i(ppm): 1,88 (6H, s, -CH₃)

3,64 (2H, q, CH₃ in 2-Position) 4,16 (2H, q, -CH₂S- )
5,15 (IH, d, CH in 6-Position) 5,68 (IH, q, CH in 7-Position)

6,66 (IH, s,

8,72 (IH, s, -NH- )
9,26 (IH, d, -NHCO- )

ο φ ν ο t, ν ν α σ<7 ©

_{β β w} t, t» ω » i* ο ο β

-22 -

HOOC

η,ν-VÄ

α· coon

C -COOH I

Ein Gemisch aus 6 ml Trifluoressigsäure und O„5 ml Anisol wurde mit Eiswasser gekühlt und 555 mg der vorstehend erhaltenen Verbindung wurden zu dem G-emisch hinzugefügt«, Mach Durchführen der Reaktion für eine Stunde bei 15-20° C wurde 4 ml Wasser hinzugegeben und die Umsetzung weiter für eine Stunde bei 15-20° C fortgesetzt. Nach beendeter Umsetzung wurde Trifluoressigsäure _s ■ Wasser und AninoJ unlor¹ vermindertem Druck abäestilll iert. Äthanol wurde ¹AU dom Rückstand gegeben und das Wasser durch azeotrope Destillation, mit einem Teil Äthanol entfernt. Zu der so erhalte= rien Äthanollösung wurden 10 ml Äther hinzugefügt. Es wurden 360 mg (Z)-7-£^oi:'-(2-Aminothiazol-4-yl)-^-(1-carboxy-1-methyläthoxyimino)acetamidoJ-3-[(4-carboxy-3-hydroxyisothiazol-5-yl)thiomethyij-4 -cephem-4-carbonsäure als Pulver erhalten»

Infrarotabsorptionsspektrum;
cm"¹: 1775, 1665

Kernmagnetisches Resonanzspektrum ( in dg-DMSO) tf(ppm): 1,46 (6H, s, CH₃ )

3,69 (2H, q, CHg in 2-position)

4,19 (2H₁ q, -CHgS- )

5,21 (IH, d, CH in 6-Position )

5,86 (IH₉ q, CH in 7-_losition )

6,77 (IH, s,

9_;43 (IH, d, -NHCO- )

Beispiel 5
(i)

CONH

^VO -C-CQCH-Ba_000n
CH,

Zu 10 ml Dioxan wurden 1,14 g (0,002 Mol) ( Z)-^-(I-tert.-Butoxycarbonyl-1-methyläthoxyimino)-^-(2-tritylaminothiazol-4-yl)-essigsäure, 0,27 g (0,002 Mol) 1-Hydroxybenztriazol und 0,41 g (0,002 Mol) Dicyclohexylcarbodiimid hinzugegeben. Das Gemisch wurde eine Stunde bei Raumtemperatur durchgerührte Das Reaktionsgemisch wurde filtriert, um Dicyelohexylharnstoff zu entfernen. Das Filtrat wurde tropfenweise zu einem Gemisch aus 0,75 g (0,002 Mol) 7-Amino-3-j(3-amino-4-cyanoisothiazol-5~yl)thiomethylJ-Δ -cephem-4-carbonsäure, erhalten nach Referenzbeispiel 3, 0,24 g (0,0028 Mol) Natriumhydrogencarbonat trad 10 ml Waspcr gegeben. Nach weiterer Zugabo von 10 ml Dioxan und 10 in L Melliyläthylketon zu der Lösung wurde das Gemisch über Nacht bei Raumtemperatur durchgerührt. Das Reactionsgemisch wurde unter vermindertem Druck auf etwa 20 ml eingeengt und nach Zugabe von 50 ml Wasser wurden unlösliche Anteile abfiltriert. Über das Filtrat wurde eine 100 ml Schicht Äthylacetat angeordnet, dann wurde nach Rühren unter Eiskühlung das pH auf 2 mit 2n Chlorwasserstoffsäure eingestellt. Die Äthylacetatschicht wurde abgetrennt und dreimal mit je 100 ml gesättigter wässeriger Natriumchloridlösung gewaschen und über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck eingeengt. Es wurden 0,8 g pulvriges rohes 3-£(3-Amino-4-cyanoisothiazol-5-yl)thiome.thyi] -I- {äi-(1-tert.-butoxycarboTiyl-1-methyläthoxyimino)-<3i-(?-tri.tylaminothia/,ol-4-yl)acetamido!-A ^;-cephem-/!-carbon:;;iurf⁵ r-rnal ten.

32123ÜÜ

Q β St β O · O _ J 9 «·»©«·

- 24 -

•β ·β « W β OO 0

>«β« « 0 6> β © O

O β · β Q Q φ ο Ο«

« Φ · β β

• β 9

Infrarotabsorptionsspektrum:

Ίί?ί ciji"¹: · 2205, 1775, 1720, 1680

Γπειχ

_ _C0NH ^^K N

■♦,CHN^S^ ν CH,

^O-C-COO.j.^ COOCH < I

CHj

In 10 ml Methylenchlorid wurden 0,8 g der im Verfahren (i) erhaltenen Verbindung aufgelöst und nach Zugabe von 0,2 g DiphenyldiazoTiiethan wurde das Gemisch 3 Stunden bei Raumtemperatur durchgerührt. Da« Reaktionsgemisch wurde konzentriert und einer Si-I ika^tvl.aäul onchromatographie unterworfen. Eluiert wurde mit einem Gemisch aus Benzol und Äthylacetat (85:15 im Volumenverhältnis). Die Fraktionen, die das gewünschte Produkt enthielten, wurden gesammelt und eingeengt. Es wurden 200 mg (Z)-3-f(3-amino-4-cyanoisothiazol-5-yl)thiomethylj-7-fc-(tert.-butoxycarbonyl-1-methyläthoxyimino)-o£-(2-tritylaminothiazol»4-yl)acetamidoJ-Δ. -cephem-4-carbonsäurebenzhydr.ylester erhalten_E

Infrarotabsorptionsspektrum:

cm"¹: 2205, 1785, 1720, 1685

Kernmagnetisches Resonanzspektrum (in GDGIx-CD

/(ppm): 1,35 (9H, s), 1,60 (6H, s), 3,43 (2H, q),

4,95 (IH, d), 5,85 (IH, d), 6,70 (IH, s),

6j85 (IH, s).

» » A »AB »

— 25
(ill)

Jnrf~"^C0NH-rr^Ssi ^N°^N

H, N^ S^ μ CH, o^-Ns^L-CHiS-J \ I T
O-C-COOH. COOH

CH₁

Zu 200 mg der im Verfahren (ii) erhaltenen Verbindung wurden 1 ml Anisol und 1 ml Trifluores'sigsäure unter Eiskühlung zugefügt und" das Gemisch eine Stunde bei Raumtemperatur durchgerührt: Das Reaktionsgemisch wurde unter vermindertem Druck konzentriert. der erhaltene Rückstand mit Äther behandelt und das so erhaltene Pulver wurde durch Filtration abgetrennt und ge trockne; t. Das 30 erhaltene Pulver'wurde in 1,5 ml Trifluoressigsäure unter Eiskühlung aufgelöst und nach Ztigabe von 0,5· ml Wasser wurde das Gemisch für eine Stunde durchgerührt. Das Reaktionsgemisch wurde unter vermindertem Druck eingeengt und mit Äther behandelt, um ein Pulver zu bilden, welches durch Filtration abgetrennt, mit Äther gewaschen und unter vermindertem Druck getrocknet wurde. Es wurden 30 mg (Z)-3-£(3-Amino-4-cyanoisothiazol-5-yl)thiomethylj -7-[oC -(2-aminothiazol-4-yl)-ⁱC -(1-carboxy-i-methyläthoxyimino) acetamido}-A -cephem-4-carbonsäure erhalten.

Infraxotabsorptionaspektrum:

cm" : 2205, 1770, 1670, 1620

Kernmagnetisches Resbnanzspektrum (in dg-DMSO): i(ppm): 1,44 (6H, s), 4,25 (2H, d), 5,18 (IH, d) 5,82 (IH₁ q), 6,71 (IH, s), 9,33 (IH, d)

Beispiel 4 (1)

2— CONH

O-C-COO-t-Bu ^C00H

I CH₁

UOUU

CONH

Vi-CO(HBa. ^C00H I
CH₁

In 45 ml Dioxan wurden 3,87 g (0,0067 Mol) Butoxycarbonyl-1~methyläthoxyimino)~<!i -(2-tritylaminothiazol-4-yl)essigsäure suspendiert. Es wurden 914 mg (O,OO67 Mol) 1 -Hydroxybenztriaziol und 1,2 g DicyclohexylcarlDodiiinid hinzugefügt und eine Stunde bei Raumtemperatur umgesetzt. Nach beendeter Umsetzung wurde ausgefällter Dicyclohexylharnstoff abfiltriert. Es wurde eine Dioxanlösung eines aktiven Esters erhalten. Ferner wurde 1,7 g (0,00437 Mol) 7-Amino-3-£(4-carboxy-3-hydroxyisath.iazol-5-yl)thiomethylj-^₎^-cephein-"4-carbonsäure, erhalten nach Referenzbeispiel 2, in 17 ml Dimethylsulfoxid aufgelöst, dann wurden 1,5 ml Triäthylamin zu der Lösung unter Eiskühlung zugefügt» Nach tropfenweiser Zugabe der vorstehend erhaltenen Dioxanlösung des aktiven Esters zu der Lösung ließ man das Gemisch 3 Tage bei Raumtemperatur reagieren. Nach beendeter Umsetzung wurde Dioxan unter vermindertem Druck abdestilliert. Der Rückstand wurde in einem Gemisch aus 5 ml Wasser und 5 ml einer wässerigen Natriumhydrοgenearbonat-"Ib'öurif¹; aufgelöst. Die Lösung wurde zweimal mit 20 ml und 10 ml Äthylacetat gewaschen und nach Überschichtung von 50 ml Methyl™ äthylketon als obere Schicht über der wässerigen Schicht wurde das Gemisch mit ;'n Chlorwasserstoff säure angesäuert» Unlösliche Anteile wurden abfiltriert und die wässerige Schicht erneut mit 30 ml und 15 ml Methyläthy!keton extrahiert. Die organischen Schichten wurden gesammelt, gut mit gesättigter wässeriger Natriumchloridlösung gewaschen und über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet. Dann wurde Methyläthylketon unter vermindertem Druck abdestilliert. Es wurden 3,5 g caramelartiges Material erhalten. Das caramelartige Material wurde einer Silikagelsäu-

• a « e * «>

- 27 -

lenchromatographie unterworfen. Eluiert wurde mit einem Gemisch aus Chloroform, Methanol und Ameisensäure (9Os1O:2 im Volumenverhältnis). Die Fraktionen, die das gewünschte Produkt enthielten, wurden gesammelt und die lösungsmittel abdestilliert. Es wurden 640 mg (Z)-3-£4-(1-Carbamoyl-1-carboxymethyliden)-1,3-dithietan —2-yl~] -7- f °C - (1 -tert. -butoxycarbonyl-1 -methyläthoxyimino)-«?C-(2-tritylaminothiazol-4-yl)acetamidoJ-A cephem-4-carbonsäure erhalten.

Infrarotabsorptionsspektrum:

snT¹: 3360, 2970, 1780, 1720, 1665-1670, 1625, 1490, 1365, 1140

Kernmagnetisches Resonanzspektrum (in cL-DMSO):

cf(ppm): 1,38 (9H, s, tBu)

3,90 (2H, s, CH₂ in 2-Position)

5,12 (IH, d, CH in 6-Position)

5,68 (IH, q, OH in 7-Position)

5,70 (IH, s,

6,66 (IH, s,

7,24-7,28 (15H,

8,72 (IH, s,

9,26 (IH, d, -CONH- ) (ü)

'COOH

COOH -uun

CH₁

Nach Abkühlen von 5 ml Trifluoressigsäure auf 5° C wurden 640 mg der vorstehend erhaltenen Verbindung hinzugegeben und das Ge-

JZ IZUUU

» β W U W * W

- 28 -

misch 60 Minuten bei 15-17° 0 umgesetzt. Nach Zugabe von 2,5 ml Wasser unter ßiskühlung wurde 60 Minuten bei 10-15° C weiter umgesetzt. Nach beendeter Umsetzung wurden Trifluoressigsäure und Wasser unter vermindertem Druck abdestilliert und der Rückstand in 3 ml Äthanol aufgelöst. Dann wurde Äthanol teilweise unter vermindertem Druck abdestilliert und der Rückstand durch Zugabe von 20 ml Äther und anschließender Filtration als Pulver erhalten. Das so erhaltene Pulver wurde gut mit Äther gewaschen und getrocknet. Es wurden 308 mg (Z)-T-[J³C -(2-Aminothiazol-;4-yl)-0(-(1-carboxy-1-methyläthoxyimino)acetamidoJ-3-£4-(1-carbamoyl-1-carboxymethyliden)-1,3-dithietan—-"2-Vl)-Zl -cephem-4-carbonsäure erhalten.

Infrarotabsorptionsspektrum:

^mü^ cm"¹: 3400, 1770, 1620-1680, 1480, 1355, 1260,

(Tl el X

1180-1185, 1140.

Kernmagnetisches Resonanzspektrum (in dg-DMSO ): J(ppm): 1,46 (6H, s, -CH₃ )

3,94 (2H, CH₂ in 2-Position) 5,16 (IH, d, CH in 6-position ) 5,71 (IH, s, ^s°ä\^S>= )

5,88 (IH, q, CH in 7-Position) 6,62 (IH, s, X

9,42 (IH, d, -CONH- ) Beispiel 5

c— CONH

L.

COOH

In 1 ml Dxmethylsulfoxid wurden 247 mg (0,0003 Mol) der im

• Λ 11 «

Beispiel 1-(i) erhaltenen Verbindung aufgelöst. Dann wurden 3 ml Dioxan zu der Lösung-hinzugefügt. Danach wurde nach Zugabe von 117 pl Triäthylämin bei Raumtemperatur das Gemisch 3 Tage bei Raumtemperatur umgesetzt. Dioxan wurde unter vermindertem Druck aus dem Reakt'ionsgemisch abdestilliert und der erhaltene Rückstand mit 10 ml Wasser vermischt und darin unter Zugabe von 0,5 ml gesättigter wässeriger Natriumhydrogencarbonatlösung aufgelöst. Die erhaltene Lösung wurde nacheinander mit 20 ml und 10 ml Äthylacetet gewaschen. Über die wässerige Schicht wurde 20 ml Methyläthylketon angeordnet und nach Ansäuern des Gemisches mit 2n Chlorwasserstoffsäure wurde mit Methyläthylketon extrahiert. Die wässerige Schicht wurde mit 10 ml Methyläthylketon extrahiert. Die Methyläthylketonschichten wurden miteinander vereinigt und mit 10 ml-Wasser und danach mit 10 ml gesättigter Natriumchloridlösung gewaschen. Die .erhaltene organische Schicht wurde über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet. Dann wurde Methyläthylketon abdestilliert. Der so erhaltene Rückstand wurde einer Silikagelsäulenchromatographie unterworfen. Eluiert wurde mit einem Gemisch aus Chloroform, Isopropylalkohol und Ameisensäure (90:10:2 im Volumenverhältnis). Die Fraktionen, die das gewünschte Produkt enthielten, wurden gesammelt und konzentriert. Es wurden 36 mg (Z)-3-[4-(1~Carbamoyl-1-carboxymethyliden)-1,3-dithietan-2-yl]-7- £ou-methoxyimino-et -(2-tritylaminothiazol-4-yl)acetamidoJ-Zl ^⁵-cephem-4-carbonsäure erhalten.

Infrarotabsorptionsspektrum:

"¹: 3350, 2910, 1775, 1670, .1620, 1490, 1350-1380,

max

1260, 1020.

Kernmagne-ti sehes Resonanzspektrum (in cL-DMSO):

: 3,80 (3H, s, OCH₃)

3,84 (2H, s, CH₂ in 2-position) 5,12 (IH, d, CH in 6-Position)

5,71 (IH, s, -sJ><

5,66-5,78 (IH, q, CH in 7-positlon)

izauu

- 30 6,72 (IH, s,

7,28 (15K, S,

8,76 (IH, s, <p-z0m- .)

9,58 (IH, d, -NHCO- )

.COOH

H₁N^S' N 0'

\>CH, ^C00H

Nach dein Abkühlen von 3 ml Trifluoressigsäure mit Eiswasser wurde 35 mg der vorstehenden Verbindung dazugefügt. Nach Auflösen der Verbindung wurde 1,5 ml Wasser zu der Lösung dazugegeben und die Reaktion 60 Minuten bei 10-15° C durchgeführt. Nach, beendeter Umsetzung wurden Wasser und Trifluoressigsäure aus dem Reaktionsgemisch abdestilliert. Der Rückstand wurde in 3 ml Äthanol aufgelöst und Äthanol teilweise abdestilliert. Der Rückstand wurde durch Zugabe von 10 ml Äther in ein Pulver überführt. Nach dem Abfiltrieren wurde das Pulver mit Äther gewaschen. Es wurden 23,3 mg (z)-7-L^a^^#"(2-Äminothiazol-4-yl)-°C-methoxyimino-acet— amidoJ-3-[4-(1-carbamoyl-1-carboxymethyliden)-1,3-dithietan-2-yl)j-Zi -cephem-4-carbonsäure erhalten.

Infrarotabsorptionsspektrums

l> ^KBr cm"¹: 3300, 1870, 1770, 1660, 1620, 1480-1485,

1360-1380

Kernmagnetisches ResonanzSpektrum (in dg-DMSO): cf(ppm): 3,84 (3H, s, OCH₃ )

5,15 (IH, d, CH in 6-Positiön) 5,71 (IH, g, >qh^>=< )'

5,76 (IH, q, CH in 7-Position)

	(IH,	K S , ^ ö	β *> · * • · * B	3212900 *
	(IH,	d, -CONH-
6t65		Beispiel 6	XD )
9,52		)

OH C-C ONH^ HOOC

In 15,8 ml Dioxan wurden 1,23 g (Z)-fiC -(tert.-Butoxycarbonylmethoxyimino)-·*^-(2-tritylaminothiazol-4-yl)essigsäure aufgelöst. 305 mg 1-Hydroxybenztriazol wurden zu der Lösung hinzugefügt. Dann wurden 510 mg Dicyclohexylcarbodiimid zu dem Gemisch gegeben. Nach Rühren des Reaktionsgemisches für eine Stunde bei Raumtemperatur wurde dadurch ausgefällter Dicyclohexylharnstoffabfiltriert. Es wurde eine Dioxanlösung eines aktiven Esters erhalten. Andererseits wurden 580 mg 7-Amino-3-£(4-carboxy-3-hydroxyisothiazol-5-yl)thiomethylj - Δ -cephem-4-carbonsäure in 7,5 ml Wasser suspendiert und 252 mg Natriumhydrogencarbonat langsam zugegeben und darin aufgelöst. Zu der Lösung wurde die vorstehend schon beschriebene Dioxanlösung des aktiven Esters hinzugefügt und bei 10-15° C umgesetzt. Wach Zugabe von 9 ml Methyläthylketon zu dem Reakti ons gemisch wurde das Gemisch 5 Stunden bei Raumtemperatur durchgerührt. Die dadurch gebildeten Niederschläge wurden aus dem Reaktionsgemisch abfiltriert und das Piltrat unter vermindertem Druck eingeengt. Zu dem Rückstand wurden 40 ml ithylacetat, 20 ml Wasser und 3 ml einer
gesättigten wässerigen Natriumhydrogencarbonatlösung hinzugefügt. Anschließend wurde das Gemisch in eine wässerige Schicht und in eine organische Schicht getrennt. Das pH der so erhaltenen wässerigen Schicht wurde auf 1-2 mit 1n Chlorwasserstoffsäure eingestellt und das Produkt mit 40 ml Methyläthylketon extrahiert. Die Methyläthylketonlösung wurde mit 20 ml gesättigter wässeriger Natriumchloridlösung gewaschen und über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet. Dann wurde die Methylathylketonlö-

ι zauu

sung unter vermindertem Druck eingeengt. Der Rückstand wurde einer Silikagelsäulenchromatographie unterworfen. Eluiert wurde mit einem Gemisch aus Chloroform, Isopropylalkohol und Ameisensäure (90:10:0,2 im Volumenverhältnin) und die Fraktionen, die das Produkt enthielten, wurden gesammelt. Dann wurden die Lösungsmittel unter vermindertem Druck abdestilliert. Es wurden 170 mg (Z)-7-£^<3^-('tert.-Butoxycarbonylmethoxyimino)-^(-(2-tritylaminothiazol-4-yl)acetamidoJ-3-[(4-carboxy-3-hydroxyisothiazol- 5-yl)thiomethylj-Λ -cephem-4-carbonsäure erhalten.

Inf rar otabsorptionsspelrtrum:

)) ^KBr cm"¹: 1780 max

Kernmagnetisches Resonanzspektrum (in dg-DMSO)

S(ppm): 1,42 (9H, s, -t-Bu ). 4,50 (2H, s, N^_{0611 c} )

²A¹"

5,13 (IH, d, -JX ) 5,69 (IH, , +T )

6^72 (IH, s,

C-CONH ^NO CH₂COOH

COOH

Nach Zugabe von 4 ml Trifluoressigsäure zu 170 mg der im Verfahren (i) erhaltenen Verbindung unter Eiskühlung wurde das Außenbad bei 18° C gehalten und das Gemisch eine Stunde durchgerührt. Dfinach wurde nach Zugabe von 2 ml Wasser zu dem Reaktionsgemisch unter Eiskühlung das Reaktionsgemisch noch weiter für eine Stunde durchgerührt und das Außenbad dabei bei 18° 0 gehalten. Das Gemisch wurde unter vermindertem Druck eingeengt. Der Rückstand wurde mit 10 ml Äthanol gemischt und das Gemisch erneut unter vermindertem Druck eingeengt. Zu dem Rückstand wurden 0,5 ml Äthanol hinzugefügt, wodurch ein klebriges Produkt gebildet wurde. Durch Zugabe von 30 ml Äther wurde ein Pulver erhalten. Es

β · β

- 33 -

wurden 100 mg (z)-7-|_°i--(2-Aminothiazol-4-yl)-^öC-(carboxymethoxyimino)acetamido]-3-{4-carboxy-3-hydroxyisothiazol-5-yl)thio- methylj-Δ -cephem-4-carbonsäure erhalten.

Infrarotabsorptionsspektrum:

L/^KBr cm"¹: 1760
*^ max

Kernmagnetisches Resonanzspektrum (in dg-DMSO) ^(ppm): 3,64 (2H, q, ^>Ch ) 4,16 (2H, q,

Il

4,57 (2H, S, N^__CH __fi_) 5,17 (IH₁ d,

5,78 (IH, q, "J^ ) _{6/76 (lH>}

Beispiel 7
(i)

OH

In 15 ml Dimethylformamid wurden 1,08 g (Z)-oG-(Cart>amoylmethoxyimino)-ot-(2-tritylaminothiazol-4-yl)essigsäure aufgelöst. Dann wurden 319 mg 1-Hydroxybenztriazol und danach 550 mg Dicyclohexylcarbodiimid hinzugegeben. Dieses Gemisch wurde bei Raumtemperatur eine Stunde durchgerührt. Aus dem Reaktionsgemisch wurde ausgefallener Dicyclohexylharnstoff abfiltriert, wodurch eine Dimethylformamidlösung eines aktiven Esters erhalten wurde.

Andererseits wurden 580 mg 7-Amino~3-F(4-carboxy-3-hydroxyisothiazol-5-yl)thiomethylJ - A -cephem-4-carbonsäure in 7,5 ml Wasser suspendiert und 252 mg Natriumhydfogencarbonat langsam dazugegeben und aufgelöst.

»ββΦ «as« β« « β © & ο * *

Zu der Lösung wurde die in der vorhergehenden Verfahrensstufe erhaltene DimethyIformamidlösung des aktiven Esters bei 10-15 C hinzugefügt und.das Gemisch 4 Stunden bei Raumtemperatur durchgerührt. Zu dem Reaktionsgemisch wurden 70 ml Wasser und 50 ml Ä'thylacetat hinzugegeben. Dann wurde das Gemisch in eine wässerige Schicht und in eine organische Schicht getrennt. Die wässerige Schicht wurde auf pH 1-2 mit 1n Chlorwasserstoffsäure eingestellt und mit 100 ml Methyläthylketon extrahiert. Die Methyläthylketonlösung wurde mit einer gesättigten wässerigen Natriumchloridlösung gewaschen, über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet und unter-vermindertem Druck eingeengt. Der Rückstand wurde einer Silikagelsäulenchromatographie unterworfen. Zuerst wurde mit Chloroform eluiert und danach mit einem Gemisch, bestehend aus Chloroform, Isopropylalkohol und Ameisensäure (90: 5:0,2 im Volumenverhältnis). Die Fraktionen, die das gewünschte Produkt enthielten, wurden gesammelt und die Lösungsmittel unter vermindertem Druck abdestilliert. Es wurden 70 mg (Z)-7- £*9C-(Carbamoylmethoxyimino)-<it-(2-tritylaminothiazol-4-yl)acetamidoJ-3-£(4-carboxy-3-hydroxyisothiazol-5-yl)thiomethyl7-/\^- cephem-4-carbonsäure erhalten.

Infrarotabsorptionsspektrumι

Kernmagnetisches Resonanzspektrums
<$(ppm): 4,38 (2H, s, Rv_0-0J₁ __Q_)

5,15 (IH, d,

5,72 (IH, q, 4-y

6,78 (IH, s,

Nach dem Auflösen von 70 mg der im vorstehenden Verfahren (i) erhaltenen Verbindung in 4 ml Trifluoressigsäure unter Eiskühlung wurden 2 ml Wasser zu der Lösung hinzugefügt und das Gemisch eine Stunde bei einer Außentemperatur von 18° G durchgerührt. Das Reaktionsgemisch wurde unter vermindertem Druck eingeengt. Der erhaltene Rückstand wurde mit 5 ml Äthanol vermischt und das Gemisch erneut unter vermindertem Druck eingeengt. Zu dem Rückstand wurden 0,2 ml Äthanol hinzugefügt, wodurch ein klebriger, Produkt gebildet wurde, welches durch Zugabe von 20 ml Äther in ein Pulver überführt wurde. Es wurden 40 mg (Z)-7- L,e£-(2-Aminothiazol-4-yl)-^-(carbamoylmethoxyimino)acetamidoj -3- (4-carboxy-3-hydroxyisothiazol-5-yl)thiomethyl| -Ä⁵-cephem-4-carbonsäure erhalten.

Infrarotabsorptionsspektrum:

Kernmagnetisches Resonanzspe-ktrum (in dg-DMSO) ^(ppm): 3,65 (2H, q,"^S^H )

4,16 (2H, q, ^ct^sj )

5,82 (IH, q,
6_;79 (IH, s,

• « « φ«« 0 «α

• · » 9 Φ «

- 36 -

Referenzbeispiel 4

NH₂ COOH

Zu 20 ml flüssigem Ammoniak wurden 1,2 g (0,006 Mol) 3-Amino-4-carboxy-5-äthylthioisothiazol gegeben, danach wurde 4-50 mg metallisches Natrium zu dem Gemisch bei einer Temperatur unterhalb -60° C hinzugefügt. Nach dem Abdestillieren des flüssigen Ammoniaks wurde das Rückstandsgemisch unter vermindertem Druck getrocknet. Dann wurde der Rückstand in 40 ml Wasser aufgelöst. Zu dieser wässerigen Lösung wurden 1,2g (0,0035 Mol) 7-Amino-3-jodmethyl-A -cephem-4-carbonsäure hinzugefügt und das Gemisch 3 Stunden bei Zimmertemperatur durchgerührt. Das Reaktionugemisch wurde unter Verwendung von Perlite als Filterhilfsmittel filtriert, um unlösliche Anteile abzutrennen. Das Filtrat wurde auf pH 2 mit 2n Chlorwasserstoffsäure unter Eiskühlung eingestellt.

Die so gebildeten Niederschläge wurden durch Filtrieren abgetrennt, mit Wasser gewaschen und unter vermindertem Druck getrocknet. Es wurden 1,4 g rohes 7-Amino-3-L(3-amino-4-carboxyisothiazol-5-yl)thiomethylJ-/l -cephem-4-carbonsäure erhalten. Die Eigenschaften des gereinigten Produktes waren die folgenden:

Infrarotabsorptionsspektrum:

om'¹: 1760, 1750, 1605

β 1> O Λ β »

- 37 -

Beispiel 8
(i)

O-C-COOtBu COOH H₈

Zu 15 ml Dioxan wurden 1,7 g (0,003 Mol) (Z)-fl£-(1-tert.-Butoxycarbonyl-1-methyläthoxyimino)- #-(2-tritylaminothiazol-4-yl)essigsaure, 0,4- g (0,003 Mol) 1-Bydroxybenztriazol und 0,62 g (0,003 Mol) Dicyclohexylcarbidiimid hinzugegeben. Dann wurde das Gemisch eine Stunde bei'Zimmertemperatur durchgerührt. Das Reaktionsgemisch wurde filtriert, um Dicyclohexy!harnstoff zu entfernen. Das Filtrat wurde tropfenweise zu einem Gemisch aus 1,16 g (0,003 Mol) 7-Amino-3-{(3-amino-4-carboxyisothiazol-5-yl)thiomethyl] -Δ -cephem-4-carbonsäure, erhalten gemäß Referenzbeispiel 4, 0,35 g (0,0042 Mol) Natriumhydrogencarbonat und 15 ml Wasser hinzugefügt. Nach Zugabe von 15 ml Dioxan zu dem Gemisch wurde dieses über Facht bei Raumtemperatur durchgerührt. Zu dem Reaktionsgemisch wurden 50 ml Wasser hinzugefügt und unlösliche Anteile abfiltriert. Das Eiltrat wurde mit einer Schicht von 100 ml Äthylacetat versehen und das pH des Gemisches wurde auf 2 mit 2n Chlorwasserstoffsäure unter Rühren und Eiskühlung eingestellt. Die Äthylacetatschicht wurde abgetrennt, dreimal mit je 100 ml Wasser gewaschen und über wasserfreiem Magnesiumsulfat ge trocknet und unter vermindertem Druck eingeengt. Es wurden 0,6 g rohes 3- l(3-Amino-4-carboxyisothiazol-5-yl)thiomethylJ-7-£^ai-(1-tert.-butoxycarbonyl-1-methyläthoxyimino)-öC-(2-tritylamino- thiazol-4-yl)acetamidq]-J\ -cephem-4-carbonsäure als Pulver erhalten.

Infrarotabsorptionsspektrum:
^{: 1775}' ¹⁷²⁰'

ι zauu

(ίΐ)

C - C O N H

i-C-COO-t-Bu CH₃

In 10 ml Methylenchlorid wurden 0,6 g der in der vorstehenden Stufe erhaltenen Verbindung aufgelöst. Zu der Lösung wurden 0,2 g Diphenyldiazomethan hinzugefügt und das Gemisch 5 Stunden bei Raumtemperatur durchgerührt. Bas Reaktionsgemisch wurde eingeengt und der Rückstand wurde einer Silikagelsäulenchromatographie unterworfen. Eluiert wurde mit einem Gemisch aus Benzol und Äthylacetat (9:1 im Volumenverhältnis). Die Fraktionen, die das gewünschte Produkt enthielten, wurden gesammelt und eingeengt. Es wurden 120 mg (Z)-3-F(3-Amino-'4-diphenylmethoxycarbonylisothiazol-5-yl)thiomethylj -7- £*G-(1-tert.-butoxycarbony1-1-methyläfhoxyimino)-oC-(2-tritylaminothiazol-ⁱ4~yl)acetamidoJ-/| -cephein-4-carbonsäurebenzhydrylester erhalten.

Infrarotabsorptionsspektrum:

1775, 1715, 1680

Kernmagnetlstihes Resonanzspektrum (in CDCl,-CD OD):

3 3

£(ppm): 1,35 (9H, s) 1,60 (6H, s) 3,35 (2H, q)

4,95 (IH, d) .5,85 (IH, d) 6,25 (IH, s)

6,75 (2H, s)
(iii)

c—	CONH-r-	^Sn HOOC
Il N	CHj o<^~:	tLJ-CHeS-
xo	-i-COOH	COOH
	CH3

.NH₈

H₂N

Nach Zugabe von 0,5 ml Anisol und 1 ml Trifluoressigsäure zu mg der im vorstehenden Verfahren erhaltenen Verbindung unter

Eiskühlung wurde das Gemisch. 2 Stunden bei Raumtemperatur durchgerührt. Das Reaktionsgemisch wurde mit Eis gekühlt und nach Zugabe von 0,4 ml· Wasser zu dem Reaktionsgemisch wurde das Gemisch 2 Stunden durchgerührt.

Das Reaktionsgemisch wurde unter vermindertem Druck eingeengt und mit Äther behandelt, wodurch ein Pulver erhalten wurde. Das Pulver wurde durch Filtration abgetrennt, mit Äther gewaschen und unter vermindertem Druck getrocknet. Es wurden 50 mg (Z)-3- £(3-Amino-4-carboxyisothiazol-5-yl)thiomethy\] -1-ff- -(2-aminothiazol-4-yl)-·^ -(1-carboxy-1-methyläthoxyimino)acetamidoJ-4 cephem-4-carbonsäure erhalten.

Infrarotabsorptionsspektrum:

^cm'^{1: 1770}' ¹⁶⁷°

Kernmagnetisches Resonanzspektrum (in dg-DMSO): J(ppm): 1,44 (6H, s) 5,18 (IH, d) 5,84 (IH, q) 6,72 (IH, s) 9,34 (IH, d)

Referenzbeispiel 5

NC_>=<SN. N
N(T SNa

H₈N

In 45 ml Eiswasser wurden 3,48 g (0,019 Mol) Dimercaptomethylenpropandinitrildinatriumsalz aufgelöst. Dann wurde tropfenweise 3 ml einer wässerigen 30%igen Wasserstoffperoxidlösung bei 0-8⁰C hinzugegeben. Danach wurde das'Gemisch 3 Stunden bei Raumtemperatur durchgerührt. Es wurden 6,46 g (0,019 Mol) 7-Anilno-'-)-jodmethyl-Δ -cephem-4-carbonsäure und 1,6 g Natriumhydrogencarbo- -nat hinzugefügt. Das erhaltene Gemisch wurde 3 Stunden bei Raumtemperatur durchgerührt.

β » Φ O

ο »Ο S

zyuu

- 40 -

Das Reaktionsgemisch wurde auf pH 2,5 mit 2n Chlorwasserstoffsäure unter Eiskühlung eingestellt. Die dadurch ausgefällten festen Anteile wurden durch Filtration abgetrennt, mit Wasser gewaschen und unter vermindertem Druck eingeengt. Es wurden 4»1 g rohes 7-Amino-3-[(3-hydroxy-4-cyanoisothiazol-5-yl)thiomethylJ-A cephem-4-carbonsäure erhalten.

Infrarotabsorptionsspektrum:

cm"¹: 2205, 1780, 1610

Kernmagnetiaches Resonanzspektrum (in D₃O + NaHCO₃) <J(ppm): 3,58 (2H, q) 4,14'(2H, q) 5,05 (IH, d) 5,42 (IH, d)

Beispiel 9
U)

¹HIvAs^ N_v

COOH

Zu 15 ml .Diojcan wurden 1,33 g (0,003 Mol) (Z)-eC-Methoxyimino-oC-(2-tritylaminothiazol-4-yl)essigsäure, 0,4 g (0,003 Mol) I-Hydroxybenztriazol und 0,62 g (0,003 Mol) Dicyclohexylcarbodiimid hinzugegeben. Das Gemisch wurde eine Stunde bei Raumtemperatur durchgerührt. Das Reaktionsgemisch wurde filtriert, um Dicyclohexylharnstoff zu entfernen. Das Piltrat wurde tropfenweise zu einem Gemisch aus 1,1g (0,003 Mol) 7-Amino-3-£(3-hydroxy-4-cyanoisothiazol-4-yl)thiomethylj -/P-cephem-4-carbonsäure, 0,35 g (0,0042 Mol) Natriumhydrogencarbonat und 15 ml Wasser hinzugefügt. Zu der Lösung wurde noch weiter 10 ml Dioxan hinzugegeben und das Gemisch 4 Stunden bei Raumtemperatur durchgerührt. Zu dem Reaktionsgemisch wurden 40 ml Wasser zugefügt und unlösliche Anteile abfiltriert. Das Piltrat wurde mit einer Schicht von 100 ml Äthylacetat versehen und das pH des Gemisches auf 2 mit 2η Chlorwasserstoffsäure unter Rühren und Eiskühlung eingestellt. Die gebildete Äthylacetatschicht wurde abgetrennt,

mit 100 ml Wasser gewaschen und über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet und dann unter vermindertem Druck eingeengt. Es wurden 1 »3 g 3- F(4-Cyano-3-hydroxyisothiazol-5-yl)thiomethyl]-7- fei me thoxy imino -CL -(2-tritylaminothiazol-4-yl)acetamidoJ-A -cephem-4-car"bonsäure erhalten.

Inf rarotabsorptionsspektrum:

^ max ^cm~^{l : 2205}· ¹⁷⁷⁵> ¹⁷²⁰> ¹⁶⁷° (ü)

In 30 ml Methylenchlorid wurden 1,3g der in der vorstehenden Verfahrensstufe (i) erhaltenen Verbindung aufgelöst. Es wurden 400 mg Diphenyldiazomethan unter Rühren dazugegeben und eine Stunde bei Raumtemperatur umgesetzt. Das Reaktionsgemisch wurde eingeengt und der Rückstand einer Silikagelsäulenchromatographie unterworfen. Eluiert wurde mit einem Gemisch aus Benzol und Äthylacetat (9:1 im Volumenverhältnis). Die Fraktionen, die das gewünschte Produkt enthielten, wurden gesammelt und eingeengt. Ec wurden 490 mg 3-£(4-Cyano-3-hydroxyisothiazol-5-yl)thiomethyl]-7-J"oi.-methoxyimino-ct -(2-tritylaminothiazol-4-yl)acetamidqJ-A ^J-cephem-4-carbonsäurebenzhydrylester erhalten.

Infraratabsorptionsspektrum:

^^cm"¹: 2210, 1775, 1720, 1675 max

Kernmagnetisches Resonanzspektrum (in CDCl₃-CD₃OD): cKppm): 3,40 (2H, q) 4,00(3H, s) 4,95 (IH,d)

5,85 (IH, d) 6,65 (IH, s) 6,90 (IH, s)

(Ui)

^S°^CH3 COOH

Nach Zugabe von 1 ml Anisol und 2 ml Trifluoressigsäure zu 48o mg der in der vorstehenden Verfahrensstufe (ii) erhaltenen Verbindung unter Eiskühlung wurde das Gemisch eine Stunde durchgerührt. Nach weiterer Zugabe von 0,7 ml Wasser wurde das erhaltene Gemisch noch 1,5 Stunden durchgerührt. Das Reaktionsgemisch wurde unter vermindertem Druck eingeengt und mit Äther versetzt, um ein Pulver zu erhalten. Das Pulver wurde durch Filtration abgetrennt, mit Äther gewaschen und unter vermindertem,Druck getrocknet. Es wurden 210 mg (Z)-7- £o£-(2-Aminothiazol-4-yl)-ßt (methoxyimino)acetamidoJ-3-{(4-cyano-3-hydroxyisothiazol-5-yl)-thiomethylJ-A -cephem-4-carbonsäure erhalten.

Infrarotabsorptionsspektrum:

ϋ ^KBr cm"¹: 2210, 1775
max

Kernmagnetisch.es Resonanzspektrum (in dg-DMSO):

£ (ppm): 3,66 (2H, q) 3,84 (3H₉ s) 4,30 (2H, q)

5,14 (IH, d) 5_;74 (IH, q) 6_;72 (IH, s) 9,56 (IH₉ d)

N ,— C-CONH

\C00-t-Bu COOH

Zu 17,6 ml Dioxan wurden 1,75 g (0,003 Mol) (Z)-2-(1-tert.-But-

Φ Λ » *

43 -

oxyearbonylcyclobut-1-oxyimino)-2-(2-tritylaminothiazol~4~yl)-essigsäure, 405 mg (0,003 Mol) 1-Hydroxybenztriazol und 741 mg (0,0036 Mol) Dicyclohexylcarbodiimid hinzugegeben. Es wurde eine Stunde "bei Raumtemperatur umgesetzt. Nach beendeter Umsetzung wurde der ausgefallene Dicyclohexylharnstoff abfiltriert, um eine Dioxanlösung eines aktiven Esters zu erhalten» Andererseits wurden 1,2 g (0,00308 Mol) 7-Amino-3-£(4-carboxy-3-hydroxyisothiazol-5-yl)thiomethyl]-A -cephem-4-carbonsäure in 10 ml Wasser suspendiex'L und 518 mg Nalri umhydro^ericarbonaL langsam da^u^i'güben und darin aufgelöst. Zu der so erhaltenen braunen-transparenten lösung wurde tropfenweise die vorstehend erhaltene Dioxanlösung des aktiven Esters zugefügt und dann die Umsetzung über Nacht bei Zimmertemperatur durchgeführt. Das Reaktionsgemisch wurde unter vermindertem Druck abdestilliert, um Dioxan zu entfernen. Zu dem Rückstand wurden 10 ml Wasser und 5 ml gesättigte wässerige Natriumhydrogencarbonatlösung hinzugefügt. Das Gemisch wurde zweimal mit je 30 ml Äthylacetat gewaschen. Die so gebildete wässerige Schicht wurde mit 7 ml 2n Chlorwasserstoffsäure vermischt und zuerst mit 100 ml und danach mit 50 ml Methylethylketon extrahiert. Die nicht umgesetzten Ausgangsmaterialien wurden während dieser Behandlung ausgefällt ,und abfiltriert. Die Methyläthylketonlösung wurde mit 30 ml Wasser und 'danach mit 30 ml gesättigter Natriumchloridlösung gewaschen und über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet und das Lösungsmittel unter vermindertem Druck abdestilliert. Es wurde ein caramelartiges Material erhalten. Das caramelartige Material wurde einer Silikagelsäulenchromatographie unterworfen. Eluiert wurde mit einem Gemisch aus Chloroform, Isopropylalkohol und Ameisensäure (90:10:2). Die Fraktionen, die das gewünschte Produkt enthielten, wurden gesammelt. Die Lösungsmittel wurden abdestilliert und der Rückstand durch Zugabe von Äther in ein Pulver überführt. Es wurden 526 mg (Z)-3-[(4-Carboxy-3-hydroxyisothiazol-5-yl)thiomethylJ-7-£^-(1-tert.-butoxycarbonylcyclobut-i-yloxyimino)- oL -(2-tritylaminothiazol-4-yl)acetamidqJ-A -cephem-4-carbonsäure erhalten.

Infrarotabaorptionsspektrum:
^cm~^{1: 177}° (lactam)

ο m 9 ft β » «

_η w If 9 0 δ 9

·> V «ΙβΙ P (J C

W U O β β &

32129ÜÜ

Kernmagnetisches Resonanzspektrum (in dg-DMSO): J(ppm): 1,38 (9H, s,-t-Bu )

3,64 (2H, q, CH₃ in 2-position)

4.16 (2H, q, -CH₂-S- )

5.17 (IH, d, CH in 6-position) 5,72 (IH, q, CH in 7-Position)

6,66 (IH, s, Thiazol in 5-position) 7,24 (15 H, 3φ- ) 8,76 (IH, S, -NH- )

9,34 (IH, d, -CONH-)
(ü)

N-

Zu 10 ml Trifluoressigsäure wurden 520 mg der vorstehend erhaltenen Verbindung hinzugegeben. Es wurde eine Stunde bei 17-19 C umgesetzt. Nach beendeter Umsetzung wurde das Reaktionsgemisch auf etwa 10° 0 abgekühlt und 5,6 ml Wasser tropfenweise zu dem Reaktionsgemisch bei einer Temperatur unterhalb 17° C zugefügt. Danach wurde noch eine Stunde bei 15-19 C umgesetzt. Trifluoressigsäure und Wasser wurden aus dem Reaktionsgemisch unter vermindertem Druck abdestilliert. Der Rückstand wurde in 10 ml . Äthanol aufgelöst. Weiterhin wurde Äthanol teilweise abdestilliert und ein öliges Produkt erhalten. Durch Zugabe von Äther wurde ein Pulver erhalten. Es wurden 354 mg (Z)-7-£°i-(2-Aminotliiazol -A-yl)-⁰C-(I -curboxycyclobut- 1-yloxyimino)acetamidoJ-3- £(4-curbuxy- -i-hyd roxyj i3othiu.zol-5-yl)j-Λ ^J-cephem-4-carbonsäuru erhalten.

Infrarotabsorptionsspektrum:

^⁸¹On-¹: 1765
max

- 45 -

Kernmagnetisches Resonanzspektrum (in dg-DMSO) i(ppm): 1,89, 2.40 (6H, m, Cyclobutanring) 3,69 (2H, q, CH₂ in. 2-Position) 4,19 (2H, q, -CH₃S- )
5,23 (IH, d, CH in 6-Position) 5,87 (IK, q, CH in 7-Position) 6,77 (IH, s, Thiazol in 5-Position) 9_;52 (IH, d, -CONH-)

Beispiel 11;
(i)

N
Α

Zu 12 ml Dioxan wurden 1,14 g (0,002 Mol) (Z)-2-(1-tert.-Butoxycarbonylcyclo'but-1-yloxyimino)-2-(2-tritylaminothiazol-4-yl)essigsäure, 264 mg (0,002 Mol) 1-Hydroxybenztriazol und 482 mg (0,0023 Mol) Dicyclohexylearbodiimid hinzugefügt. Man ließ eine Stunde "bei Zimmertemperatur reagieren. Nach beendeter Umsetzung wurde ausgefällter Dicyclohexy!harnstoff abfiltriert. Es wurde eine Dioxanlösung eines aktiven Esters erhalten. Andererseits wurden 778 mg (0,002 Mol) 7-Amino-3-£(4-earboxy-3-hydroxyisothiazol-5-yl)thiomethyl]-A -cephem-4-carbonsäure in 8 ml Dimethylsulfoxid suspendiert und 836 jul Triäthylamin zugegeben und bei einer Temperatur unter 20° C aufgelöst. Zu der Lösung wurde tropfenweise die -vorstehend genannte Dioxanlösung des aktiven Esters hinzugefügt und danach die Reaktion 3 Tage bei Raumtemperatur durchgeführt .

Nach beendeter Umsetzung wurde Dioxan unter vermindertem Druck aus dem Reaktionsgemisch abdestilliert und der Rückstand in einem

ό'ΖΊΙΒΌΙ)

Gemisch aus 30 ml Wasser und 5 ml gesättigter wässeriger Natriumhydrogencarbonatlösung aufgelöst. Die Lösung wurde mit 50 ml Äthylacetat gewaschen. Dann wurde 50 ml Methyläthylketon als Schicht auf die so gebildete wässerige Schicht angeordnet. Das Gemisch wurde durch die Zugabe von 12 ml 2n Chlorwasserstoffsaure angesäuert. Unlösliche Anteile wurden abfiltriert und die organische Schicht gesammelt. Die wässerige Schicht wurde zuerst mit 30 ml und dann mit 15 ml Methyläthylketon extrahiert. Die organischen Schichten wurden vereinigt, mit 30 ml -Wasser und danach mit 30 ml gesättigter wässeriger Natriumchloridlösung gewaschen und. über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet. Dann wurde Methyläthylketon unter vermindertem Druck abdestilliert. 1_?54g caramelartiges Material wurde erhalten. Es wurde einer SiIikagelsäulenchromatographie unterworfen. Eluiert \· ,,rde mit· einem Gemisch aus Chloroform, Isopropylalkohol und Ameisensäure (90: 10:2 im Volumenverhältnis). Die Fraktionen, die das· gewünschte Produkt enthielten, wurden gesammelt. Die Lösungsmittel wurden . abdestilliert. Es wurden 464 mg (z)-3-£4~(1-Carbamoyl-1-carboxymethylen)-1,3-dithietan-2-ylJ -l-[oC-(1-tert.-butoxycarbonylcyclobut-1-yloxyimino)-2-(2-tritylamino)thiazol-4-yl)acetamido/-Δ -cephem-4-carbonsäure erhalten.

Infrarotabsorptionsspektrum:

ΰ ^KBr cm"¹: 3300-3350, 2950, 1770, 172O₉ 1670, 162O₉ ^ max

1485, 1360, 1135, 690.

Kernmagnetisches Resonanzspektrum (indg-DMSO): 1,39 (9H, s,-t-Bu )
1,80-2.40 (6H, 'tn, Cyclobutanring) 3,92 (2H, s, CH₂ in 2-Position) 5,16 (IH, d, CH in 6-Position) 5,70 (IH, s, -ca^c=<)
5,70-5,90 (IK, q , CH in 7-Position) 6_r67 (IH, s,

7,10-7,40 (15H, C^₃) 8,78 (IH, S, -NH- ) 9,3-9,5 (IH, d, -CONH-)

N-

C-CONH

COO!!

COOH

COOH

10 ml Trifluoressigsäure wurden durch Eiskühlung unter 10 C gebracht und 46O mg der vorstehend hergestellten Verbindung dazugegeben. Danach wurden 6,4 ml Wasser zu dem Gemisch bei. 17-19 C für 60 Minuten gegeben und dann unter Eiskühlung die Umsetzung 60 Minuten bei 17.-19° C durchgeführt. Nach beendeter Reaktion wurden Trifluoressigsäure und Wasser unter vermindertem Druck abdestilliert und zu dem so erhaltenen Rückstand 10 ml Äthanol gegeben. Äthanol wurde teilweise abdestilliert, wodurch ein öliges Produkt erhalten wurde. Dieses wurde durch Zugabe von 10 ml Äther und darauffolgend 10 ml η-Hexan in ein Pulver überführt. Es wurden 357 mg (Ζ)-7-£°ί -(2-Aminothiazol-4-yl)-Ä-1-carboxycyclobut-1-yloxyimino)acetamidoJ-3-|4-carbamoylcarboxymethylen)-1 ,3-dithietan-2-yl]-A -eephem-4-carbonsäure erhalten.

Infrarotabsorptionsspektrum:

cm

-¹

3300, 2940, 1760, 1580-1680, 1480, 1370, 1250, 1140

Kernmagnetisches Resonanzspektrum (in_td_g-DMSO): (i(ppm) : 1,92, 2,38 (6H, C yclobutarcing)

3,96 (2H, s

in 2-Position)

Ψ » » tf « w

5,18 (IH, d, CH in 6-Position)

5.73 (IH, s, -cii<;J>=o< )

5,91 (IH, q, CH in 7-Position)

6.74 (IH, s,

9,51 (IH, d, -CONH- )
Beispiel 12

N-

CHN

C-CONH

C00-t-Bu COOH

Es wurden 1,8 g (Z)-c( -(i-tert.-Butoxycarbonylcyclopent-i-yloxyimino-2-(2-tritylaminothiazol-4-yl)essigsäure, 18 ml Dioxan, 405 mg 1-Hydroxybenztriazol und 740 mg Dicyclohexylcarbodiimid, wie im Beispiel iO-(i) angegeben, umgesetzt und behandelt. Es wurde eine Dioxanlösung eines aktiven Esters erhalten. Andererseits wurde eine wässerige Lösung aus 1,2 g 7-Amino-3-£(4-carb» oxy-3-hydroxyisothiazol-5-yl)thiomethylJ -A -cephem-4-carbonf'äure, 10 ml Wasser und 518 mg Watriumhydrogencarbonat hergestellt. Dann wurde tropfenweise die vorstehend genannte Dioxanlösung des aktiven Esters zu der wässerigen lösung hinzugefügt. Das erhaltene Gemisch wurde wie im Beispiel iO-(i) angegeben, behandelt. Bs wurden 475 mg (Z)-3-£(4-Carboxy-3-hydroxyisothiazol-5-yl)thiomethylJ-7-L°k -(1 -tert.-butoxycarbonylcyclopent-iyloxyimino)-ßi -(2-tritylaminothiazol-4-yl)acetamidoJ-A -cephem-4-carbonsäure erhalten.

Infrarotabsorptionsspektrum:

jJ*~l cm : 3350, 3200, 2940, 1775, 1710, 1670, 1480-1520, 1440, 1365, 1245, 1150, 990, 750, 595.

Kernmagnetisch.es Resonanz Spektrum (in dg-DMSO)

£ (ppm): 1,34 (9H, β,-t-Bu)

2,64 (4H, m, Cyclopentanring)

2,95 (^4H> ^m» Cyclopentanring)

3,62 (2H, q, CH₃-In 2-Position)

.4,16 (2H, q, -CHgS- )

5,14 (IH, d, CH in 6-Position)

5,68 (IH, q, CH in 7-Position)

6,64 (IH, s, J~]T )

7,1-7.4 (15H, 3φ )
8,74 (IH, s_t -NH- )
9,23 (IH, d, -CONH- )

Durch Behandlung von 475 mg der vorstehenden Verbindung, wie im Beispiel 10-(ii) angegeben, wurden 310 mg (Z)-7-L°£ -(2-Aminothiazol-4-yl)-^-(1-carboxycyclopent-1-yloxyimino)acetamidoJ-3-[_(4-carboxy-3-hydroxyisothiazol-5-yl)thiomethylJ -Λ -cephem-4-carbonsäure hergestellt. Das Produkt wurde in einem Gemisch aus 5 ml Wasser und 78 mg Natriumhydrogencarbonat aufgelöst und unlösliche Anteile durch Fitration entfernt. Die Lösung wurde in eine Säule mit einem Ionen-Austauscherharz Diaion HP-20 gefüllt. Das Produkt wurde eluiert, zuerst mit Wasser und danach mit 20%igem Methanol. Die Fraktionen, die das gewünschte Produkt enthielten, wurden gesammelt, eingeengt und der Rest gefriergetrocknet. Es wurden 300 mg Tris-Natrium (Z)-7-Ct -(2-Aminothi azol-4-yl)-

NACHOKRElQHT

■Χλ -(1-carboxylatcyclopent-1-yloxyimino)aeetamidoJ-3- ((, «^C-carboxylat-3-hydroxyisothiazol-5-yl)thiomethylj -A -cephem-4-carboxylat erhalten.

Infrarotabsorptionsspektrum:

²^ max ^cm~^{1: 338}°-³⁴°0. 1755, 159O₉ 1520, 1380

Kernmagnetisches Resonanzspektrum (in D o) J(ppm): 1,70 (4H, _m, Cyclopentanring)

2,06 (4H, ro,

3,62 (2H, q, CH₃ in 2- Position)

5,18 (IH, d, CH in 6-Position)

5,76 (IH, d, CH in 7-Position)

⁶>^{95 (1H}· ^s· XX® >

Beispiel 13

Durch Anwendung des gleichen Verfahrens, wie im Beispiel 11-(i) angegeben, wurden unter Verwendung von (Z)-⁰C -(1-tert.-Butoxycarbonylcyclopent-1-yloxyimino)~2-(2-tritylaminothiazol-4-yl)-ensigsäure und 7-Amino-3- f(4-carboxy-3-hydroxyisothiazol-5-yl)-thiomethylj-Δ -cephem-4-carbonsäure die Verbindung (Z)-3-£4~ (1 -Carbamoyl -1 -carboxymethylen) -1 ,3-di thie tan-2-ylJ-7-£<^' - (1 tert.-butoxycarbonylcyclopent-1-yloxyimino)-2-(2-tritylamino~ thiazol-4-yliacetamidoj-^ ⁵-cephem-4-carbonsäure erhalten.

Kermagnetisch.es -Resonanzspektrum (in d_e-DMSO):

<f(ppm): 1,36 (9H, s, -t-Bu )

1,66,(1,96 ( je 4H, m, Cyclopentanring) 3,92 (2H, s, CH₂ in 2-Position) 5,15 (IH, d, CH in 6-Position)

5,7a (iH, s, ^vcüc£>_=c<; )

5_;7-5,8 (IH, q, CH in 7-Position) 6 66 (IH, s, f(~jr~ )

7,1-7,4 (15K₁ C<p₃ )
8,74 (IH, S, Cp₃CHN- )

9,2-9,36 (IH, d, -CONH-)
(U)

N π—ν,

Ji JJ N I Λ /^s\ ^COONa

^{2 Χ}Λ 0 T \fl/ ^CONH

Unter Anwendung des gleichen Verfahrens, wie im Beispiel 11-(ii) angegeben, wurde unter Verwendung von (Z)-'3-[4-(1-Carbamoyl-1-carboxymethyliden)-1 ^-dithietan-^-ylJ-Y-j)^ -(1-tert.-butoxycarbonylcyclopent-1 -yloxyimino)-2-(2-trity] aininothiazol-4-yl )-acetamidoj-Δ -cephem-4-carbonsäure, 206 mg (Z)-7-£pi -(2-Aminothiazol-4-yl)-o( -(1-carboxycyclopent-i-yloxyimino)acetamidoJ-3- £4-(1-car"bamoyl-1-carboxymethylen)-1 ,3-dithietan-2-ylJ-A ceph.em-4-carbonsäure erhalten. Das Produkt wurde durch, eine Säule, gefüllt mit Ionen-Austauscherharz Diaion HP-20, gegeben und dann gefriergetrocknet. Es wurde Tris-Natrium (Z)-7-L<*-(2--Amino- thiazol-4-yl)-A -(1-carboxylatcyclopent-i-yloxyimino)acetamidoj-3-[4-(1-carbamoyl-1-carboxylatmethylen)-1 ,3-dithietan-2-ylj-Δ cephem-4-carboxylat erhalten.

I L· sJ UU

Infrarοtab s orpti ons spektrum:

^£ ^cra~^i: 3350-34-00, 1750, 1620, 1520, 1380, 1350

Kernresonanzspektrum (in DpO)s
(5(ppm): 1,73, 2,06 ( je 4H, m, Cyclopentanring)

4,06 (2H, d, CH₂ in

5,28 (IH, d, CH in 6-Position)

5,69 (IH, s,

5,84 (IH, d, CH in 7-Position) 7,00 (IH, s,

Referenzbeispiel 6
(i) φ -CH-COO-t-Bu
Br

In ein verschließbares Rohr wurden etwa 40 ml Isobuten, 25 g ot -Bromphenylessigsäure, 1 ml konzentrierte Schwefelsäure und 10 ml trockener Äthyläther eingefüllt und das Rohr dicht geschlossen. Die Umsetzung wurde über Nacht in dem geschlossenen Rohr bei Raumtemperatur durchgeführt. Nach beendeter Reaktion wurde das Reaktionsgemisch in ein Gemisch aus 150 ml Eiswasser und 10g Natriumhydrogencarbonat gegossen und dann zuerst mit ;'00 ml und dann mit 100 ml Äther extrahiert. Die organischen Schichten wurden gesammelt, zweimal mit je 50 ml Wasser und einmal mit 50 ml gesättigter wässeriger Natriumchloridlösung gewaschen und über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet. Durch Abdestillipren des Äthers aus dem Reaktionsgemisch wurden 31»6 g des gewünschten Produktes erhalten.

Infrarotabsorptionsspektrum:

O ^KBr cm"¹: 2960, 1730, 1360, 1220, 1150, 113O₉ 740, 690.

" max

Kermagnetisches Resonanzspektrum (in CDCl^) £ (ppm): 1,40 (9H, s,-t-Bu )

- 53 5,25 (IH, s, -CH-)

7,1-7,7 (5H, ψ )
(ii) N j— C—ΟΟΟ0Ηφ₂

In 100 ml Methylendichlorid wurden 4,29 g 2-Hydroxyimino-2-(2-tritylaminothiazol-4-yl)essigsäure suspendiert und nach langsamer Zugabe von 3 g Diphenyldiazomethan wurde die Umsetzung in 4 Stunden bei Zimmertemperatur durchgeführt. Nach beendeter Umsetzung wurde Methylendichlorid abdestilliert und ein caramelartiges Material erhalten. Dieses wurde einer Hilikagelsäulenchromatographi^ unterworfen. Eluiert wurde mit einem Gemisch aus η-Hexan und Äthylacetat (3:1). Die Fraktionen, die das gewünschte Produkt enthielten, wurden gesammelt und eingeengt. Es wurden 5,3 g weiße Kristalle mit einem Schmelzpunkt bei 170-171° 0 erhalten* Infrarotabsorptionsspektrum:

ü ^KBr cm"¹: 3330, 3030, 2750, 1725, 1530, 1490, 1280,

^r max

1155, 99Oi 690

Kernmagnetisches Resonanzspektrum (in CDCl₃): : 6,25 (IH, ε.

7,11 (IH, s, -CH0₂ )
7,2-7,5 (25H, 50 )

⁽ⁱⁱⁱ⁾ J₁CDTT N

0-C-COO-tHBu

J*

In 20 ml Dimethylsulfoxid wurden 2,97 g (0,005 MoI) Benzhydryl-(Z)-2-hydroxyimino-2-(2-tritylaminothia:wOl-4-yl)acetat aufgelöst, Nach Zugabe von 0,6Sg (0,005 Mol) gepulvertem Kaliumcarbonat iur 1,56 g (0,0057 Mol) tert.-ßutyl-cC-brornphenylacetat wurde die Reaktion über Nacht bei Raumtemperatur durchgeführt. Nach beendeter Reaktion wurde das Reaktionngemisch in 200 ml Eiswasser dispergiert und dann zuerst mit 100 ml und dann mit 50 ml Äthylacetat extrahiert. Die organischen Schichten wurden gesammelt, zweimal mit je 30 ml Wasser und danach mit je 30 ml gesättigt· r

wässeriger !Natriumchloridlösung gewaschen und über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet. Das lösungsmittel wurde unter vermindertem Druck abdestilliert. Es wurde caramelartiges Material erhalten. Dieses wurde in 1 ml Äthylacetat aufgelöst und durch Zugabe von 100 ml η-Hexan, in Pulver überführt. Das Pulver wurde durch Filtration abgetrennt und getrocknet. Es wurden 3,04 g (Ausbeute: 77,4%) Benzhydryl (Z)-2-(d( -tert.-Butqxycarbonylbenzyl·· oxyimino)-2-(2-ti?itylaminothiaHol-4-yl)acetat erhalten.

Infrarotabsorptionsspektrumi
^ ^cm~¹

max

^{1740> 1730}' ^{1530> 1155}» ¹¹⁴⁰' ¹⁰²⁰' ⁷³⁵« ⁶⁹°

Kernmagnetisches Resonanzspektrum (in CDCl₃): S (ppm): 1,39 (9H, s,-t-Bu )
5,71 (IH, s -CH- )

6,83 (^1H. s» 7,08 (IH, s,

7,1-7,5 (25H₉

N-ir-1 J

C—COOH

Ii COO-t-Bu

N-OCH ^JL

'Au oira\^rn iieiriisch von 4 ml Methylendichlorid und 1 ml Anisol wurden 2, b1 g (0,0Op/5 Mol) Benzhydryl (Z)-2-(oC -tert.-But oxy car bony 1-benzyloxyimirio)-2-(2-tritylaminothiazol-4-yl)acetat hinzugegeben. Nach dem Abkühlen des Gemisches auf -30° C wurde 3 ml Trifluoreosigßäure tcopfenwej se zu dem Gemisch bei^ einer Temperatur unter -''O C im Verlauft von 5 Minuten dazugegeben. Danach wurde die Umsetzung eine Stunde bei -20° bis -15° C durchgeführt und danach Methylendichlorid and Trifluoressigs.äure bei niedriger. Temperatur unter vermindertem Dru.-k abdestilliert. Es wurde ein öliges Produkt erhalten. DIv-)se8 wurde einer Silikagelsäulenchromatographie

- 55

"unterworfen. Elui ert wurde mit einem ücmiscli aus Chloroform, Iso propylalkohol und Ameisensäure (90:10:2). Lie Fraktionen, die da. gewünschte Produkt enthielten, wurden gesammelt. Die Lösungsmittel wurden abdestilliert. Es wurden 1,15 g (Z)-(OC -tert.-3utoxycarbonylbenzyloxyimino)-2-(2-tritylaminothiazol-4-yl)essigsäure erhalten.

Infraeotabs&rptionsspektrum:

²⁹⁷⁰· ²⁹²°»

max ^{Cm : 2970}· ²⁹²°» 174O, 1590, 1570, 1440, 1360,

1190, 1150, 690.
Kernmägnetisches Resonanzspektrum (in dg-DMSO):

<T(ppm): 1,35 (9H, s, -t-Bu )
5,48 (IH, s, -J;h- )

⁶>^{86 (1H}' JU 7,28 (15H, 7,38 (5H,

3φ )

Ιφ

Beispiel 14

N-

C-CONH

N \

>s

CB

.^COO-t-Bu

COOH

Es wurde das gleiche Verfahren, wie im Beispiel 10-(i) angegeben, unter Verwenduig von. (Z)-(^ -tert.-Butoxycarbonylbenzyloxyimino)-2-(2-tritylaminothiazol-4-yl)essigsäure und 7-Amino-3-£(4-carboxy-3-hydroxyisothiazol-5-yl)thiomethyljf - Λ -oephem-4-carbünsäurt· durchgeführt, um das gewünschte Produkt zu erhalten.

Infrarotabsorptionsspektrum:
I).

ITFl γ* 1

-max ^cm~ ^{: 2960}' ¹⁷⁸⁰> ¹⁷20, 1680, 1520, 1490, 1150, 750

695

.. .. _o = ._>: ■ ..·..». 3L I ZiJUU,

_o ei « ο wo© » ββι "

- υυ -

HOOC OH

V—S

Kernmagnetisches ResonanzSpektrum (ⁱⁿ £(ppm): 1,35 (9H, s ,-t-Bu )
5,44 (IH, s, -CH- )

6,73, 6^76 ClH, sQedes),

7,25 (ISH, 5φ ) 7,38 (5H, φ )

Durch Anwendung des gleichen Verfahrens, wie im Beispiel 10™(ii) angegeben, jedoch unter Verwendung von (z)-3- f(4-Carboxy~'5-hydroxyjsothia2ol-5~yl)thiomethyll -7-£oi -(2-tritylaminothiazol-4-yl)-oi -(1 -teL'"t»-butoxycarbonylbenzyloxyimino)acetamido2|-/| cephem-4-carbonsäure wurde das gewünschte Produkt erhalten«

Infrarotabsorptionsspektrums

^cm~^1: 3000-3400, 1770, 1670, 1620_s 1350, 1240, 1250

Zernmagnetisches Resonanzspektrum (in dg J(ppm): 3,54 (2H, q, CH₂ in 2-Position)

4,18 (2H, q, -CH₂- )

5,14, 5,18 (IH, d(jedes),CH in 6-Position)

5,57 (IH, s, -CH- )

6,78, 6,83 (IH, swedes), JjT )

7,2-7,6 (SH, φ )

9,50, 9,60 (IH₈ d(jedes),-NHCO- )

Beispiel 15
(i)

N -τ— C-CONH- , ,

XTk Lj. i /S. /COOH

Durch Anwendung des gleichen Verfahrens, wie im Beispiel 5-(i) angegeben, jedoch unter Verwendung von (Z)-3-j[4-OaT.ⁱboxy-5-hydroxyiaothiazol-5-yl)thiomethylJ-7-fc£ -(2-tritylaminotiiiazol- 4--Jl)-oC -(1-t er t,-but oxyoarbonylbenzyloxyimino) acetamido]]-^ cephem-4-carbonaäure "wurde das gewünschte Produkt erhalten.

Infrarota^sorptionsspektrum:

³³⁵⁰' ²⁹⁶⁰' ¹⁷⁸⁰' ¹⁶⁷⁰> ¹^⁹O* 1365, 1250, 1150, 750, 690,

Kernmagnetisches Resonanzspektrum (in dg-DMSO):

i(ppm): 1,34 (9H, s,-t-Bu )

3,86 (2H_? CH₂ in2-Position) 5,10 (IH, d, CH in 6-Ppsition) 5,24 (IH, s, -ch<J>=c< )
5,73 (IH, CH in 7-Position)

6,74

7,1-7,5 (2OH,

8,82 (IH, s, -NH- )

9,44 (IH, d,d, -CONH- )

Z3UU

(ii)

N TT-C-

CONH₀

In 4 ml Ameisensäure wurden 100 mg des im Beispiel 15-(i) erhaltenen Produktes" aufgelöst und dann die Umsetzung über Nacht bei Zimmertemperatur durchgeführt. Dann wurde nach Zugabe von 4 ml Wasser die Umsetzung bei 50-55° C in 90 Minuten durchgeführt» Nach beendeter Umsetzung wurden Ameisensäure und Wasser unter vermindertem Druck abdesti.ll.iert und der Rückstand in 10 ml Λ Lhy"J alkohol auf^ulöst. Dann wurde Äthanol teilweise abdestilliert. Ec wurde sin öliges Produkt erhalten, welches durch Zugabe von 50 ml eines Gemisches aus Äther und n-Hexan (1:1) in Pulver überführt wurde. Es wurden 65 mg des gewünschten Produktes erhalten.
Infrarotabsorptionsspektrums

177S₉ 1670, 1625, 1190, 1135 715

Kernmagnetisches Resonanzspektrum (!n-d_Q-DMSO): £(ppm): 3,92 (2H, S, CH₂In 2-Position) 5,14, S,18 (IH₉ d(Dedes),CH in 6-Position) 5,58 (IH, s, -CH-)

5,75, 5,78 (IH, s( jedes), -CH<|>=< ) 5,86 (IH, q* CH in 7-Position) 6,82, 6,86 (IH, swedes),

7,3-7,6 (SH, φ)

Referenzbeispiel 7

γη ?^Γ CH₃ j

^H-CH-COO-t-Bu
CH₃

Durch Anwendung des gleichen Verfahrens wie im Referenzbeiopiel 6-(i) angegeben, jedoch unter Verwendung vontX-Bromisovalcriansäure, wurde das gewünschte Produkt erhalten.

Infrarotabsorptionsspektrum:

^{1: 297}°» ¹⁷³⁰» ¹³⁶⁵» ¹¹³⁵ Kernmagnetisches Resonanzspektrum (in cL-DMSO)

1,00 (3H, d, CH₃- ) 1,05 (3H, d, CH₃- ) 1,45 (9H, s,-t-Bu ) 1,6-2,5 (IH, m, -CH- ) 3,88 (IH, d, -CH- )

*,CHN ^S^ ν Η

\ I

0—C-COO-t-Bu I

CH_—CH*-CBL

Es wurde das gleiche Verfahren, wie im Roforon:',bn n;pi.e I G-(iii) angegeben, unter Verwendung von Äthyl(Z)-2-hydroxyimino-2-(2-tritylaminothiazol-4-yl)acetat«Hydrochlorid und tert.-Butyl-oC bromisovalerat benutzt, um das gewünschte Produkt zu erhalten. Schmelzpunkt: 109-110° C

Infrarotabsorptionsspektrum:

^max^cm"^{1: 3250}' ^{2960> 1730> 1330}' ¹²⁹⁰' ^{1180) 1020>} 695

Kernmagnetisches Resonanzspektrum (in CDCl₃): /(ppm): 0,99 (3H, t, CH₃- ) 1,32 (3H, d, CH₃- ) 1,45 (12H, s, -t-Bu,CH₃- ) 2,0-2,4 (IH, m_s -CH- )

yj £.

4,38 (2H, q, -CH₂- )
4jS6 ClH, d, -CH- )

⁶·^^{54 C1H}' ^s·

6j91 ClH, d, -NH- ) 7,1-7,5

ΠΓϊ

o-c·

CBL-CHr-ClL

In 343 ml Methanol wurden 6,13 g (0,01 MoI) des im Referenzbeispiel 7-(ii) hergestellten Produktes aufgelöst» Dann wurde eine Lösung von 3,17 g (0,0225 Mol) Kaliumcarbonat in 38 ml Wasser aufgelöst. Die Umsetzung wurde 4 Stunden unter Rückfluß durchgeführt. Nach beendeter Umsetzung wurde Methanol abdestilliert und die dadurch erhaltene wässerige Lösung mit 100 ml Wasser und 50 ml 2n Chlorwasserstoffsäure versetzt und zuerst mit 200 ml und danach mit 100 ml Äthylacetat extrahiert«, Die organischen Schichten wurden gesammelt, zweimal mit je 50 ml Wasser und dann mit ^r)0 ml gesättigter wiioseriger Natriumchloridlösung gewaschen und mit wasserfrei cm Magnoniumnulfat getrocknet» Äthylacetat wurde unter vermindertem Druck abdestilliert _f Es wurden 4»37 g des gewünschten Produktes erhalten«
Infrarotabsorptionsspektrums

l/*** cm"¹: 338O₈ 3230, 2960, 1735, 1695, 1530, 1155, max

1135, 1030, 690

Kernmagnetisches Resonanzspektrum (i.n dg -DMSO) Cppm): 0,92 (6H, d, CH₃- )
1,40 C9H, s,-t-Bu )
1^8-2,2 ClH, β, »CH- )

• · λ ν

4,17 (IH, d, -CH- ) 6,82 (IH, S,

7,1-7,3 ClSH, 3j>) 8,78 (IH, s, -NH- )

Beispiel 16

HOOC OH

N S

φ,CHN

COOH

CH-COO-t-Bu

CH_x-CH-CH₂

Es wurde nach dem gleichen Verfahren, wie im Beispiel iO-(i) beschrieben, jedoch unter Verwendung von (z)-2-(1-tert.-Butoxycarbonyl-2-methylpropoxyimino)-2-(2-tritylaminothiazol-4-yl)- essigsäure und 7-Amino-3-[(4-carboxy-3-hydroxyisothiazol-5-yl)-thiomethylj -Δ -cephem-4-carbonsäure gearbeitet. Es wurde das gewünschte Produkt erhalten.

Infrarotabsorptionsspektrum:

cm"¹: 3440-3480, 2950, 1775, 1710, 1670,

1480-1520, 1360, 1150, 690

Kernmagnetisches Resonanzspektrum (in d^-DMSO): (ppm): 0,94 (3H, d, CH₃- ) 1,40 (9H, s,t-Bu ) 3,64 (2H, q, -CH₂- ) 4,14 (2H, q, -CH₂- ) 5_T15 (IH, d, CH in 6-Position) 5,6-5,8 (lH,m,CH in 7-Position)

6,67, 6,70 (IH, s (jedes), 7,1-7,5 (15H, 3<f>)

O Δ IZ.OUU

8^76 (IH, a, -NH- )
9^40 (IH₅ m, -CONH- )

Cii)

N-

CH₃-CH-CH,

"Durch Anwendung des gleichen Verfahrens_s wie im Beispiel 1O-(ii)

angegeben, jedoch unter Verwendung von (Z)-3- [(4-Carboxy-3-hydroxyisothiazol-5-yl)thiomethyl3-7-jpi -(2-tritylaminothiazol-4- yl)-d -(1-tert.-batoxyca.rbonyl-2-methylpropoxyimino)acetamidoJ- /\ -cephem-4-carbonsäure wurde umgesetzt„ Es wurde das gewünschte Produkt erhalten,

Infrarotabsorptionsspektrums

\) Hl cm-1; 3300-3370, 2960_s 1770, 1690-1720, 1670, 162S 1020

Kernmagnetisches Resonanzspektrum (in d^-DMSÖ): (ppm): 0^95 (6H, d, CH₃- )

3j66 (2H, q, CH₂ in 2-Position) 4,19 (2H, q, -CH₂- ) 5,19 (IH₉ d, CH in 6-Position) 5_;68-5j9 (lH₅m₉CH in 7-Position) 6_;72₉ 6,76 (IH, sCjedes),

9,41, 9_p50 (IH, d(jedes)₉-CONH-

■9 4 a n * * « «j *

ft · 9 *.

Beispiel

C—CONH

O T

\ COOH ^

CH-COO-t-Bu

CH₃-CH-CH₅

Durch Anwendung des gleichen Verfahrens_>wie im Beispiel 5-(i) angegeben, jedoch unter Verwendung der gleichen Ausgangsverbindung, wie im Beispiel 16-(ii) beschrieben, wurde umgesetzt. Es wurde das gewünschte Produkt erhalten.

Infrarotabsorptionsspektrum:

^cm"^{1: 335}°» ²⁹⁶°» ⁱ⁷⁸°» ⁱ⁶⁷°» ⁱ⁴⁹°» ⁱ³⁶°

1150, 1020, 690

Kernmagnetisches Res.onanzspektrum (ⁱⁿ d₆-DMSO): /(ppm): 0,94 (6H, d, CH₃- )

1,40 (9H, s, -t-Bu) 1,9-2,2 (lH,m ,-CH- )

3,90 (2H, q, CH₂ in 2-Position)

4,18 (IH, d, -CH- )

5^14 (IH, d, CH in 6-Position)

5,73 (IH, s, -CH<!>C=C< )

5,6-5,86 (lH,m,CH in 7-Position) 6,72 (IH, s, A_a

7,1-7,5 (15H, 3j>) 8,76 (IH, s, -NH- ) 9,3-9,54 (IH, tn,-CONH- )

L· I L· O U U

.₄ O 1

- 64 (ii)

C-CONH

\ COOH CH-COOH

CH₅-CH-GH₅

Es wurde das gleiche Verfahren angewandt, wie im Beispiel 15-(ii) beschrieben, das heißt, die Entfernung der Schutzgruppe aus (Z)-3-£4-(Oarbairioylcarboxymethylen)--1 _!(3-dithietan-2~ylJ-7-^'-(2-tritylaminothiazol-4-yl)~Ä-(1-tert_e-butoxycarbonyl-2-methylpropoxyimino)acetamidoj-^ -cephem-4-.carbonsäure mit Ameisensäure durchgeführt»

Xnfraxotabsorptionsspektrum s ^ max ^Cm"^{1: 310}O-³⁴OO₅ 2960, 1770, 162O₉ 152O₉ 1380,

1230-1270, 1020

Kernmagnetisches Resonan'zspelcfcrum (ib dg-DMSO): /(ppm): 0,97 (6H, d, CH₃- ) ■

l_>9-2,3 (IH, m, -CH- )

3,93 (2H, q, CH₂ in 2-Position)

4,22, 4,28 (IH, d(jedes),-CH- )

SjIS (IH, d, CH in 6-Posiiion )

S 566 (IH, s, -C

5_?8-5y98 (IH, m_s CH in 7-Position )

6^73, 6^78 ( IH₉ süedes), AcX^

7^23 (IH, Sj-NH- ) 9_?38-9_t64 (IH,nu-CONH- )

Referenzbeispiel 8
(i) BrCH-COO-t-Bu CH₃

■ * »ο

- 65 -

Es wurde das gleiche Verfahren durchgeführt, wie im Referenzbeispiel 6-(i) beschrieben, jedoch unter Verwendung vonOf-Brompropionsäure. Es wurde das gewünschte Produkt erhalten.

^KBr cm"¹:

ITl 3-X

Infrarotabsorptionsspektrum:

2960, 1730, 1365, 1230, 1145, 840

Kernmagnetisches ResonanzSpektrum (in CDCl₃) 1,4 8 (9H, s,-t-Bu ) 1,77 (3H, d, CH₃- ) 4,28 (IH, q, -CH- )

_N t—Q c - COOf t

5! CH-COO-t-Bu CH_T

(ii)

^3CHN

Es wurde das gleiche Verfahren, wie im Referenzbeispiel 6-(iii) angegeben, jedoch unter Verwendung von Äthyl(z)-2-hydroxyimino-2-(2-tritylaminothiazol-4-yl)acetat»Hydrochlorid und tert.-Butyl- <<■ -brompropionat ausgeführt. Es wurde das gewünschte Produkt erhalten.
Schmelzpunkt 58-59° C

Infrarotabsorptionsspektrum:

max ^Cm"^1:

³³³°-³³⁸⁰> ²⁹⁷⁰» 1155, 1030, 970,

Kernmagnetisches Resonanzspektrum (ppm): 1,36 (3H, t, GH₃- )

1,25 (9H, s, -t-Bu)

1,57 (3H, d, CH₃- )

4,38 (2H, q, -CH₂- )

4,80 (IH, q, -CH- )

1525, 1270, 1180 CDCl₃):

O O ο

- 66 -

6,52 (IH, s,

6,88 (IH, s, -NH- ) 7_?1-7_?5 (ISH₅ s, J

(iii)

φ 3CHN

CH

Durch. Ausführen des gleichen Verfahrens, wie im Referenzbeispiel 7-(iü) beschrieten, jedoch unter Verwendung von Äthyl(z)-2=(1-tert_t,-butoxycarbonyl-äthoxyimino)-2-(2-tritylaminothiazol-4-yl)-acetat wurde umgesetzt» Es wurde das gewünschte Produkt erhalten«,
Schmelzpunkt: 166 "bis 167° C (Zersetzung)

Infrarotabsorptionsspektrumι

lJ ^KBr cm"¹: 3250, 2960, 1710, 153O₅ 124S₅ 1155, 1035 max

835, 690

Kernmagnetisches Resonanzspektrum Cⁱⁿ dg-DMSO): (ppm): 1,33 (3H, d_s CH₃- )

1,38 (9H_S s.-t-Bu ) 4_;52 (IH₅ q, -CH- )

6_s30 (IH₅ S₅ J

7^1-7^5 (15H₈ 3<p) 8_?76 (IH, s, -NH= )

- 67 -

Beispiel 18

C-CONH

KJ

S/

COOH

CH-COO-t-Bu CH₅.

Durch Anwendung des gleichen Verfahrens, wie im Beispiel 10-(i) beschrieben, jedoch unter Verwendung von (z)-2-(1-tert.-Butoxycarbonyl-äthoxyimino)-2-(2-tritylaminothiazol-4-yl)essigsäure und 7-Amino-3-]X4-carboxy-3-hydroxyisothiazol-5-yl)thiomethylj - Δ cephem-4-carbonsäure wurde gearbeitet. Es wurde das gewünschte Produkt erhalten.

Infrarotabsorptionsspektrum:

cm

2920, 1780, 1720, 1670, 1520, 1440, 1360,

1150, 750, 690

Kernmagnetisches Resonanzspektrum (in dg-DMSO): (ppm): 1,27 (3H, d, CH₃- ) 1,39 (9H, s, -t-Bu) 3,63 (2H, q, CH₂ in 2-Position) 4,18 (2H, q, -CH₂" ) 4_?49 ClH, q, -CH- ) 5,15 (IH, d, CH in 6-Bosition ) 5_;64-5_;80 (IH, m, GH in 7-Position)

6_;72 (IH, s, J

7,1-7,5 C15H, 3^ ) 8,80 (IH, s, -NH- )

9,38, 9,41 (IH, d (jedes) ,-CONH- )

OZ, ILOVU

Ν——_-—O p>niTO ^<^\ HOOC

CW

Es wurde wie im Beispiel iO-(ii) beschrieben.;, jedoch unter Verwendung von (Z)-3-f(4-Carboxy-3-hydroxyisothiazol-5-yl)thiomethylJ-7-£ei ~(2-tritylarainothiazol-4=-yl)-^ -(1-tert.-butoxycarbonyl-äthoxyimino)acetamidoj-id -cephem-4-=-carbonsäure umgesetzt und das gewünschte Produkt erhalten_o

Infrarotabsorptionsspektrums

αίΓ¹: 2900-3300, 1760, 1690-172O₅ 167O₅ 1620,

118S₅ 1130, 1030

Kernmagnetisches ResonanzSpektrum (in dg=DMSO)s : l_;40 (3H₅ d₉ CH₃-)

3_S69 (2H„ q, CH₂ in 2-Position )

4,20 (2H, q, -CH₂- )

4_;66 (IH₅ q, -CH- )

5,22 (IH₉ a, CH in 6-Position )

5,83, 5_;89 (IH, d (jedes\.&H in 7-Position )

6_S72₅ 6,80 (IH₅ s (jedes),

9,44, 9 p48 (IH₅ d (jedes) _P-CONH- )

- 69 Beispiel 19

N —C-CONH

4>,CHN^S^ ^
* 0

COOH

C-C00-t-Bu
ι

Zu 15 ml Dioxan wurden 1,7 g (0,003 Mol) (Z)-d-(1-tert.-Butoxycarbony1-1-methyläthoxyimino)-oC-(2-tritylaminothiazol-4-yl)essigsaure, 0,4 g (0,003 Mol) 1-Hydroxybenztriazol und 0_s62 g (0,003 Mol) Dicyclohexylcarbodiimid hinzugegeben. Das Gemisch wurde eine Stunde bei Zimmertemperatur durchgerührt. Das Reaktionsgemisch wurde filtriert, um ausgefallenen Dicyclohexylharnstoff zu entfernen. Das Filtrat wurde tropfenweise zu einem Gemisch aus 1,2 g (0,003 Mol) 7-Amino-3- f(3-hydroxy-4-cyanoisothiazol-5-yl)thiomethylJ-_i^ -cephem-4-carbonsäure, 1,0 p; (0,01? Mol) Natriumhydrogencnrbonat und 15 ml Wasuor gegeben. Dann wurde nach Zugabe von 15 ml Dioxan das erhaltene Gemisch über Nacht bei Raumtemperatur durchgerührt. Zu dem Reaktionsgemisch wurden 50 ml Wasser hinzugefügt und unlösliche Anteile abfiltriert. Über das Piltrat wurde eine Schicht von 100 ml Äthylacetat angeordnet und das pH derselben auf 2 mit 2n Chlorwasserstoffsäure unter Rühren und Eiskühlung eingestellt. Die gebildete Äthylacetatschicht wurde abgetrennt, dreimal mit je 100 ml Wasser gewaschen und über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck eingeengt. Es wurden 1,2 g Pulver aus roher 3- |(3-Hydroxy-4-cyanoisothiazol-5-yl) thiomethylj-7-£o£ -(1 -tert.-butoxycarbonyl-1-methyläthoxyimino)- <X— (2-tritylaminothiazol-4-yl)acetamidoj-Δ -cephein-4-carbonsäure erhalten.

^S^ NC

"TO- CH, Xf

N CH₃ °' "T * ^S'

αι COOCH*
χ:—<

-COQ-t-S 1
CH,

O L I Z.C5UU

In 20 ml Methylendichlorid wurden 1,2 g der im vorstehenden Verfahren erhaltenen Verbindung aufgelöst« Nach Zugabe von 0,2 g Diphenyldiazomethan wurde das Gemisch eine Stunde bei Raumtemperatur durchgerührt« Das Reaktionsgemisch wurde eingeengte Der Rückstand wurde einer Silikagelsäulenchromatographie unterworfen» !'!!inert wurde mit einem Gemisch aus Benzol und Äthylacetat (8:2)» Die Fraktionen, die das gewünschte Produkt enthielten,, wurden gesammelt und eingeengt» Ed wurden 310 mg (z)-3-£(3-Hydroxy~4-cyanoisothiazol-5-yl)thiomethyl]«7-(f£ (1-terto-butoxycarbonyl-i-

methyläthoxyimino)-^-(2-tritylaminothiazol~4-"yl)acetamidoJ-4³-cephem-4-carbonsäurebenzhydrylester erhalten„

Infrarotabsorptionsspektrum §
f) ^KBr cm"¹: 2210, 1775, 171O₅ 1675

111 eiX

Kernmagnetisches Resonanzspektrum (in

<f(ppm):. 1,38 (6H_S s) l_p58 (9H, s) 3_?47 (2H, q)

4^07 (2H₅ q) 5^55 (IH₉ d) 5^90 (IH, d) 6„70 (IH₅ s) 6_S85 (IH, s)

COM

Zu 310 mg der im vorstehenden Verfahren erhaltenen Verbindung wurden 0,5 ml Anisol und 1 ml Trifluoressigsäure unter Eiskühlung zugefügt. Dan Gemisch wurde 30 Minuten bei Raumtemperatur durchgerührt» Das Reaktionogemisch wurde mit Eis gekühlt und nach Zugabe von 0_s3 ml Wasser wurde das Gemisch weiter 2 stunden gerührt., Πγι:ϊ Reaktior]ngeini::oh wurde unter vermindertem D3-uck eingeengt nur] mit Äther behandelt, um ein Pulver zu erhalten« Das Pulver wurde durch "Filtration abgetrennt, mit Äther gewaschen und unter vermindertem Druck getrocknet» Es wurden 130 mg (z)-3-[(3-Hydroxy-4-cyanoisothiazol-5-yl)thiomethyl[ -7-£<* -(2-aminothiazol=4-yl)-ei -

» tr ΒΛ · ·

Ir C β · « β · - 71 -

(1 -carboxy-1 -methyläthoxyimlno )aoetamidoj -A -cephem-4-carbonsäure erhalten.

Infrarotabsorptionsepektrumί

»J^KBr cm"¹: 2210. 1770. 1670
^y max

Kernmagnetisches Resonanzspektrum (in dg-DMSO):

cT(ppm): 2,40 (6H. β) 3,56 (2H. q) .4,30 (2H. q) 5,18 (IH. d) 5,82 (IH, q) 6,70 (IH, s) 9,35 (IH, d)

Beispiel 20

Η,νΎ _n ch»

\>-C-COOH COOH I CH,

Durch Ausführen des gleichen Verfahrens, wie im Beispiel 19 beschrieben, wurde unter Verwendung von (Z)-O^-(1-tert.-Butoxy- carbony1-1-methyläthoxyimino)-et -(2-tritylaminothiazol-4-yl)essigsäure und 7-Amino-3-£(3-hydroxy-4-carbamoylisothiazol-5-yl)-thiomethylJ-/P-cephem-4-carbonsäure das gewünschte Produkt hergestellt.

Infrarotabsorptionsspektrum:

\) ^KBr cm"¹: 1770

max

Kernmagnetisches Resonanzspektrum (in d^ £ (ppm): 1,43 (6H, s) 3,65 (2H, q) 4,07 (2H, q) 5,18 (IH, d) 5,83 (IH, q) 7,72 (IH, s) 9,36 (IH, d)

η O O 0 ty o

„.»at» O O O

U O O Cs

Beispiel 2

Durch Ausführen des gleichen Verfahrens, wie im Beispiel 19 beschrieben, jedoch unter Verwendung von (Z)-ei-(1-terto-Butoxy= carbonyl-1-methyläthoxyimino)-od-(2-tritylaminothia2iol-4-yl)-(5i-:::lf;s.^:iure und 7-Araino-3-/(3-hydroxy-4~N_s,N-diinethylcarbanioylisothia:-;ol-^c;--,yl)thioitiothy]J - Λ '^;-cephoin--4-carbonsäure wurde das jf^e-Produkt erhalten_o

Infrarotabsorptionsspektrums

c-l: 1770

Ifernmagnetisches Resonanzspektrum (in dg=DMSO)s

(ppm): 1,43 (6H_S s) 2,87 (6H, s) 3_y60 (2H_S q)
4,12 (2H_S q) 5,17 (IH, d) 5^77 (IH₉ q)
6„68 (IH₅ s) 9_a32 (IH₅ d)

Beispiel 22

Es wurde das gleiche Vorfahren wie im Beispiel 19=(i) unter Verwendung von (Z)-oC-(2-Bromäthoxyimino)-ß6-(2-tritylaminothiazol-4-yl)essigsäure und 7-jtoino-3- f(3-hydroxy-4-carboxyisothiazol-5-yl)thiomethylJ-A '^;-cephem=4=carbonsäure durchgeführt und das

- 73 gewünschte Produkt erhalten.

Infrarotabsorptionsspektrum:

Kernmagnetisches Resonanzspektrum (in dg <5"(ppm): 3,5-3,7 (4K, m), 4,1-4,4 (4H, m) , 5,15 (IK, d), 5,72 (IH, q \ 6,77 (IH, s)_f 8,27 (15H, m)

^S0 CH₂CH₂Br

Durch Behandlung der vorstehend erhaltenen Verbindung gemäß dem Verfahren, welches im Beispiel 19-(iü) beschrieben ist, wurde das gewünschte Produkt erhalten.

Infrarotabsorptionsspektrum: ^{cnrl: 1770}' ¹⁶⁵°

Kernmagnetisches Resonanzspektrum (in dg-DMSO):

<5(ppm): 3,5-3,8 (4H, m) 4,0-4,5 (4H,. m) 5,17 (IH, d) 5,77 (IH, q) 6,76 (IH, s).

Beispiel 23

OH

-C ONH T

COOH

ÖL· I <LO U U

_ 74 -

In ein Gemisch aus 2 ml Wasser und 3 ml Dimethylformamid wurden 200 mg (z)--7~f£ =C2-Bromäthoxyimino)-^-(2-tritylaminothiazol-4-yl_)aoutnmLdüj~3-[(4~carboxy=3-'hydroxyisütliiazol=5-yl)thiomethyl]-Δ "■ⁱ-cephem=4-carbonsäure und dann 50 mg Natriumhydrogencarbonat dazugegeben und darin aufgelöst« Zu der Lösung wurde 120 mg 4=Caxboxy-3-hydroxy-5-mercaptoisothiazoltrikaliumsalz hinzugegeben₀ Es wurde 4 Stunden bei Raumtemperatur umgesetzte Nach beendeter Umsetzung wurden 50 ml Wasser und 50 ml Methyläthylketon zu dem Reaktionsgemisch zugefügt und das pPI des Gemisches auf 2 mit 2n Chlorwasserstoffsäure unter Rühren und Eiskühlung eingestellt„ Die gebildete organische Schicht wurde abgetrennt, mit gesättigter wässeriger Natriumchloridlösung gewaschen und über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck eingeengt_Φ Der so gebildete Rückstand wurde einer Silikagelsäulenchromatographie unterworfene Eluiert wurde mit einem Gemisch aus Chloroform, Methanol und Ameisensäure (80s20;2 im Volumenverhältnis)Q Die Fraktionen, die das gewünschte Produkt enthielten, wurden gesammelt und die Lösungsmittel abdestilliert j um 130 mg des gewünschten Produktes zu erhalten₀

Zu 130 mg Tritylverbindung, erhalten in dem vorstehenden Verfahren, wurden 2 ml TrIfluoressignäure und 1,5 ml Wasser züge= fügt und die Umsetzung .' Stunden bei 15-20° C durchgeführt» Das Reaktionsgemisch wurde unter vermindertem,Druck eingeengt und der Rückstand durch Zugabe von Äther in ein Pulver überführte Das Pulver wurde durch Filtration abgetrennt und mit Äthanol und Äther gewaschen und unter vermindertem Druck zur Trockne abdestil· liert. Es wurden 60 mg (Z)-7-{^-(2~Aminothiazol~4~yl)·=^ -[2-(4-

car"boxy-3-h.ydroxyisothiazol-5-yl)thioJäthoxyiinino-acetainidoj-!)-[(4-carboxy-3-hydroxyisothiazol-5-yl)tMomethyl]- carbonsäure erhalten.

Infrarotabsorptionsspektrum:

V^KBr cm"¹: 1765, 1650 max

Kernmagnetisches Resonanzspektrum (in dg cT(ppm): 3,37 (2H, t) 3,63 (2H, q) 4-4,5 (4H, m)

5,20 (IH, d) 5,82 (IH, q) 6,83 (IH, s) 9,64 (IH, d)

Beispiel 24 rpC

COONa

NaOOC

Durch Anwendung des gleichen Verfahrens, wie im Beispiel 23 angegeben, jedoch unter Verwendung von (z)-7-[oi-(2-Bromäthoxyimino)-o(.-(2-trityl-aininothiazol-4-yl)acetainidoj-3-[(4-cart)Oxy-3-hydroxyⁱ· isothiazol-5-yl)thiomethyl]-il⁵-cephem-4-carbonsäure und 2-Mercaptobenzoesäure wurde d.as gewünschte Produkt erhalten.

Infrarotabsorptionsspektrum:

^Si ^cm"^{1; 1755}' ¹⁶⁰°

Kernmagnetisches Resonanzspektrum (in dg-DMSO)

£(ppm): 3,35 (2H, t) 4,98 (IH, d) 5,76 (IH, d) 7,00 (IH, s) 7,1-8,0 (4H, m).

5 O O ° ®

_ 76 Beispiel 25

Durch. Anwendung des gleichen Verfahrens« wie im Beispiel 11=(i) beschrieben j wurde unter Anwendung von 510 mg der im Referenz= beispiel 8-(iii) erhaltenen Verbindung 5 ml Dioxan_P 124 mg 1-Hydroxybenzotriazol und 190 mg Dicyclohexylcarbodiimid eine Dioxanlösung eines aktiven Esters erhaltene Andererseits wurde die vorstehende Dioxanlösung des aktiven Esters tropfenweise zu

dem Gemisch (Lösung) aus 500 mg 7-Amino-3-/(4-carboxy=°3=hydroxyisothiazol-5-yl)thiomethylj - Δ -cephem-4-carbonsäure_s 3 ml Dimethylsulfoxid und 450 μΐ Triäthylamin tropfenweise zugefügte Es wurden 335 mg (Z)-3-£4-(1-Carbonyl=1-carboxymethylen)-1,3-dithietan-2-yl]-7-£^c^ -(terto-butoxycarbonylbenzyloxyimino )■=■©£- (2»tritylaminothiazol-4-yl)acetamidoJ»A ~cephem-4-=carbonsäure erhalten_o

Infrarotabsorptionsspektrum s

j ICBr

max ^{am S} 3300-3350, 2960, 1780, 1720.

162S, 1490, 1365, 1250, 695 Kernmagnetisches Resonanzspektrum (in dg~DMSO)s

1^37 ( 9H, s, -t-Bu )

3^90 ( 2H, s, CH₂ in 2-Position )

4_s50 ( IH, q, -CH- )

5,12 ( IH, d, CH in 6-Position )

5„55 ( IH, d,d, CH in 7-Position )

5_S72 ( IH, s, -CH.

6,72 ( IH, s, N-

7,10-7,40 (15H, C<j>₃ ) 8,78 ( IH, s, -NH- } 9,3-9,5 (IH, -CONH- )

:c=c

.COOH

^NCONH,

Durch Anwendung des gleichen Verfahrens, wie im Beispiel 15-(ü) angegeben, wurden unter Verwendung von 330 mg der vorstehend erhaltenen Verbindung (i) die Schutzgruppe der Verbindung mit Ameisensäure entfernt und 230 mg des gewünschten Produktes erhalten.

Infrarotabsorptionsspektrum:
KBr

cm

max

3260-3320, 1765, 1670, 1620, 1485, 1360-1390, 1250, 1190, 1030, 795

Kernmagnetisches Resonanzspektrum (in dg-DMSO) $ (ppm): 1,4 3 ( 3H, d, CH₃- )

3,94 ( 2H, s, CH₂ in 2-Position )

4,62 ( IH, q, -CH- )

5,17 ( IH, d, CH in 6-Position )

5,73 ( IH, s, -CH<|X )

5,8-6,0 ( IH, m, CH in 7-Position )

6,78 ( IH, s, N-

Q-.dfi.

( IW.

-CONH- )

Claims (1)

1. Patentansprüche:

   worin R eine Gruppierung der Formel -Q-R ist, (worin R

   ein Wasserstoffatom oder eine niedere Alkylgruppe mit 1-3

   ο
   Kohlenstoffatomen darstellt und R ein Wasserstoffatom, eine niedere Alkylgruppe mit 1-3 Kohlenctoffatomen, eine Phenylgruppe, die durch eine Amino- oder Hydroxygruppe substituiert sein kann, eine Cyanogruppe, eine Carboxygruppe oder eine

   1 2 Carboxymethylgruppe bedeutet; R und R können zusammen mit dem Kohlenstoffatom, an das eie gebunden sind, eine Cycloalkylidengruppe mit 4-6 Kohlenstoffatomen bilden) oder eine Gruppierung der Formel -CHp-R darstellt, (worin R ein Wasserstoffatom, eine Halogenmethylgruppe, eine Oarbamoylgruppe, eine Carboxymethylgruppe, eine 4-Carboxy-3-hydroxy~ isothiazol-5-yl-thiomethylgruppe oder eine 2-Carboxyphenylthiomethylgruppe bedeutet); R¹ stellt eine Gruppe der Formel

   dar, (worin R_a eine Carboxygruppe, eine Cyanogruppe oder eine Carbamoylgruppe, die durch eine niedere Alkylgruppe mit 1-3 Kohlenstoffatomen substituiert sein kann, bedeutet, R^ stellt eine Hydroxygruppe oder eine Aminogruppe dar) oder eine Gruppierung der Formel ^x^Sv >«^^R _Q (worin R_a und R^ die

   schon genannte Bedeutung haben) und die Wellenlinie -v^ eine Anti-Form- oder Syn-Form-Bindung darstellt, sowie ihre Salze.

   2. Cephalosporinverbindungen nach Anspruch 1 der allgemeinen Formel ■

   COOH

   worin R eine Gruppierung der Formel - Ö - R darstellt,

   R'

   0OH 2

   (worin R ein Wasserstoffatom oder eine Alkylgruppe mit 1-3 Kohlenstoffatomen bedeutet und R" ein Wasserstoffatom, eine niedere Alkylgruppe mit 1-3 Kohlenstoffatomen, eine Phenylgruppe, die durch eine Aminogruppe oder eine Hydroxygruppe substituiert sein kann, eine Cyano gruppe, eine Carboxylgruppe

   1 2 oder eine Carboxymethylgruppe darstellt; R und R können zusammen mit dem Kohlenstoffatom, an das sie gebunden sind, eine Cycloalkylidengruppe mit 4-6 Kohlenstoffatomen bilden) oder eine Gruppierung der Formel -CHp-R bedeutet, (worin R ein Wasserstoffatom, eine Halogenmethylgruppe, eine Carbamoylgruppe, eine Carboxymethylgruppe, eine 4-0arboxy-3-hydroxyisothiazol-5-yl-thiomethylgruppe oder eine 2-Carboxyphenylthiomethylgruppe darstellt); R_& bedeutet eine Carboxygruppe, cine Cyanogruppe oder eine Carbamoylgruppe, die durch eine niedere Alkylgruppe mit 1-3 Kohlenstoffatomen substituiert sein kann; R-^ stellt eine Hydroxygruppe oder eine Aminogruppe dar; und die Wellenlinie /ks bedeutet eine Anti-Form- oder Syn-Form-Bindung, sowie ihre Salze.

   3. Cephalosporinverbindungen nach Anspruch 1 der allgemeinen Formel

   cn >-< ^a cooH Uh

   OOOil worin R eine Gruppierung der Formel -C-R darstellt,

   -ι
   (worin R ein Wasserstoffatom oder eine niedere Alkylgruppe

   ρ
   mit 1-3 Kohlenstoffatomen und R ein Wasserstoffatom, eine niedere Alkylgruppe mit 1-3 Kohlenstoffatomen bedeutet, eine Phenylgruppe, die durch eine Aminogruppe oder eine Hydroxygruppe substituiert sein kann, eine Cyanogruppe, eine Carboxy-

   1 2

   gruppe oder eine Carboxymethylgruppe bedeutet; R und R können zusammen mit dem Kohlenstoffatom, an das sie gebunden sind, eine Cycloalkylidengruppe mit 4-6 Kohlenstoffatomen bilden) oder eine Gruppierung der Formel -CH₉-R ist, (worin R ein Wasserstoffatom, eine Halogenmethylgruppe, eine Carbamoylgruppe, eine Carboxymethylgruppe, eine 4-Carboxy-3-bydroxyisothiazol-5-yl-thiomethylgruppe oder eine 2-Carboxyphenylthiomethylgruppe darstellt); R bedeutet eine Carboxygruppe, eine Cyanogruppe oder eine Carbamoylgruppe, die durch eine niedere Alkylgruppe mit 1-3 Kohlenstoffatomen substituiert sein kann; R^ bedeutet eine Hydroxygruppe oder eine Aminogruppe; und die Wellenlinie ^y bedeutet eine Anti'-Form- oder Syn-Form-Bindung, und ihre Salze.

   4* 7-Jö^-(2-Aminothia2ol-4-yl)-o^-(1-carboxy-1-methyläthoxyimino)-acetamidoj -3-|j4-carboxy-3-hydroxyisothiazol-5-yl)thiomethyl ,/V^₁ -cephem-4-carbonsäure nach Anspruch 1 oder 2.

   5. 7-[o6-(2-Aminothiazol-4-yl)-oC-(1-carboxycyclobut-1-yloxyimino)aeetaniidoj -3- {(4-carboxy-3-Hydroxyisothiazol-5-yl)thiomethylj-ΖΛ -cephem-4-carbonsäure nach Anspruch 1 oder 2.

   6· 7-p<- -(2-Aminothiazol-4-yl)- o<l-(1-carboxycyclopent-1-yl-

   oxyimino) acetamido] -3-

   JA -cephem-4-carbonsäure nach Anspruch 1 oder 2.

   7. 7- jo<.-(2-Arninothiazol-4-yl)~CX₁-(C^. -carboxybenzyloxyimino)-acetamidoj -3- [(_4-carboxy-3-hydroxyisothiazol-5-yl)fhiomethyl| Δ -cephera-4-carbonsäure nach Anspruch 1 oder 2.

   8. Verfahren zur Herstellung einer Cephalosporinverbindung gemäß Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet,, daß eine Verbindung der Formel

   Schutzgruppe-HTJ'

   (J

   C - COOlI

   worin R das schon erläuterte R bedeutet, worin die Carboxylgruppe geschützt ist, oder eines ihrer reaktiven Derivate ir.t, mit einer Verbindung der Formel

   COORr

   umgesetzt wird, wobei S und R-, die gleiche Bedeutung wie im

   au ,-

   Anspruch 2 angegeben, besitzen, und wobei R eine Schutzgruppe der Oarboxygruppe darstellt, danach die Schutzgruppen des erhaltenen Reaktionsproduktes abspaltet und gegebenenfalls das erhaltene Produkt mit einer pharmazeutisch zulässigen Base oder Säure weiter umsetzt.

   0. Vorfahren zur Herstellung einer Cophiloaporinverbindung gemäß Anspruch 3, dadurch gekennzeichnet, daß eine Verbindung der Formel

   N j—C-CONH

   COOH

   φ · β · d β··

   worin R, R . R₁, und r\s die gleiche Bedeutung wie im An-

   6
   spruch 3 angegeben, haben und R eine Aminogruppe oder eine geschützte Aminogruppe bedeutet, in Gegenwart einer Base umgelagert wird und, wenn R eine goschüi-zte Amino-ruppe ist, am so erhaltenen Reaktionuprodukt dje Schutzgruppe abspaltet und gegebenenfalls das erhaltene Produkt mit einer pharmazeutisch zulässigen Base oder Säur·., umsetzt.

   10. Arzneimittelzubereitung, die eine Verbindung oder deren Salz gemäß einem der Ansprüche 1-3 sowie übliche pharmazeutische Yerdünnungs- und Bindemittel enthält.