CZ283564B6

CZ283564B6 - 3-Aryl-2-isoxazolin-5-hydroxamové kyseliny a farmaceutické prostředky na jejich bázi

Info

Publication number: CZ283564B6
Application number: CZ961510A
Authority: CZ
Inventors: Edward F. Kleinman
Original assignee: Pfizer Inc.
Priority date: 1993-11-26
Filing date: 1994-10-26
Publication date: 1998-05-13
Also published as: EP0730588A1; FI945557A0; DE69404044T2; AU687452B2; PL314605A1; NZ274244A; HUT76784A; CO4180606A1; JP2802547B2; EG20693A; KR960705795A; GR3024133T3; IL111670A; WO1995014681A1; JPH09500147A; FI945557A; DE69404044D1; DK0730588T3; EP0730588B1; HU9601412D0

Abstract

3-Aryl-2-isoxazolin-5-hydroxamové kyseliny obecného vzorce I, kde jednotlivé symboly mají specifický význam. Tyto sloučeniny jako selektivní inhibitory fosfodisterasy typu IV (PDE.sub.IV.n.) a jako léčiva pro léčení AIDS, asthma, arthritis, bronchitis, chronické obstruktivní choroby plic, psoriasis, alergické rhinitis, dermatitis a jiných inflamatorních chorob. farmaceutické prostředky na jejich bázi. ŕ

Description

Oblast techniky

Vynález se týká řady sloučenin 3-aryl-2-isoxazolin-5-hydroxamové kyseliny, které jsou selektivními inhibitory fosfodiesterázy typu IV (PDEtv) a jako takové jsou užitečné při léčbě AIDS, astma, artritis, bronchitis, chronické obstruktivní choroby plic, psoriasis. alergické rhinitis, dermatitis a jiných inflamatomích chorob.

Vynález se týká také farmaceuticky vhodných solí těchto sloučenin, způsobu používání těchto sloučenin při inhibici PDE_]V a při léčbě inflamatomích chorob. AIDS, astma, artritis, bronchitis, chronické obstruktivní choroby plic, psoriasis, alergické rhinitis a dermatitis, u savců, zejména lidí a farmaceutických prostředků, které se hodí k tomuto účelu.

Jako neomezující příklady inflamatomích chorob, které lze léčit podle vynálezu, je možno uvést chronickou obstruktivní chorobu plic, šok, atopickou dermatitis, bronchitis, rheumatoidní artritis a osteoartritis.

Dosavadní stav techniky

Od té doby, co se zjistilo, že cyklická AMP je intracelulámím sekundárním mediátorem (E. W. Sutherland and T. W. Rall. Pharmacol Rev., 1960, 12, 265), se stala inhibice fosfodiesteras cílem pro modulaci a v důsledku toho pro terapeutickou intervenci u řady chorobných procesů. V pozdější době byly zjištěny určité třídy PDE (J. A. Beavo a D. H. Reifsnyder, TiPS, 1990, 11, 150) ajejich selektivní inhibice vedla ke zlepšené chemoterapii (C. D. Nicholson, R. A. Challiss a M. Shahid, TiPS, 1991, 12, 19). Zejména se zjistilo, že inhibice PDE typu IV může vést k inhibici uvolňování inflamatomího mediátoru (M. W. Verghese et al., J. Mol. Cell Cardiol., 1989, 12 (suppl. II) S 61) a relaxaci hladkého svalu dýchacích cest (T. J. Torphy, Directions for New Anti-Astma Drugs, ed. S. R. 0’Donnell a C. G. A. Persson, 1988, 37, Birkhauser-Verlag). Sloučeniny, které inhibují PDE typu IV, ale které mají špatnou účinnost proti jiným typům PDE, budou tedy inhibovat uvolňování inflamatomích mediátorů a vyvolávat relaxaci hladkého svalstva dýchacích cest bez toho, že by měly kardiovaskulární účinky nebo účinky proti krevním destičkám.

Určité pyrimidonové sloučeniny užitečné jako antidepresiva jsou popsány v Saccomano et al., v evropské patentové přihlášce EP 247 725 A2 publikované 2. prosince 1987. Stejné pyrimidonové sloučeniny účinné proti astma a některým kožním chorobám jsou popsány v mezinárodní patentové přihlášce PCT/US90/02162, publikované 30. května 1991 pod číslem WO 91/07178.

Podstata vynálezu

Předmětem vynálezu jsou 3-aryl-2-isoxazolin-5-hydroxamové kyseliny obecného vzorce I

(I), kde m představuje číslo 0, 1, 2 nebo 3; n představuje číslo 0, 1, 2 nebo 3;

Y^l a Y² představuje nezávisle vždy atom vodíku, alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, fenylalkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylové části, jejíž fenylová část je popřípadě substituována, fenoxyalkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylové části, jejíž fenylová část je popřípadě substituována, cykloalkylskupinu se 3 až 7 atomy uhlíku, difluormethylskupinu, trifluormethylskupinu, fluor, chlor, brom, jod nebo skupinu obecného vzorce -OR¹ nebo -OR², kde případný substituent fenylové části fenylalkylskupiny a/nebo fenoxyalkylskupiny je zvolen ze souboru zahrnujícího alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, halogen a trifluormethylskupinu;

R¹ představuje alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, fenylalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, fluormethylskupinu, difluormethylskupinu, trifluormethylskupinu nebo skupinu vzorce -(CHijq-chinolin, kde q představuje číslo 1, 2 nebo 3;

R² představuje alkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, cykloalkylskupinu se 3 až 7 atomy uhlíku, alkoxyalkylskupinu se 3 až 7 atomy uhlíku v alkoxylové části a 2 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, fenoxylalkylskupinu se 2 až 6 atomy uhlíku v alkylové části jejíž fenylová část je popřípadě substituována, fenylalkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylové části jejíž fenylová část je popřípadě substituována, bicykloalkylskupinu se 6 až 9 atomy uhlíku nebo popřípadě substituovanou indanylskupinu; kde případný substituent fenylové části fenylalkylskupiny a/nebo fenoxyalkylskupinu a/nebo indanylskupiny je zvolen ze souboru zahrnujícího alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, halogen a trifluormethylskupinu;

R³ představuje atom vodíku, alkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, fluoralkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku a 1 až 3 atomy fluoru, monohydroxyalkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku nebo alkoxyalkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylové a 1 až 3 atomy uhlíku v alkoxylové části;

R⁴ představuje atom vodíku, alkylskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku, fluoralkylskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku a 1 až 3 atomy fluoru, monohydroxyalkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, fenylskupinu, alkoxyalkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylové a 1 až 3 atomy uhlíku v alkoxylové části, aminoalkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, skupinu vzorce

-2CZ 283564 B6

-CCHg^-N/^X¹H kde X¹ představuje alkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku a n je celé číslo 1 až 3, N-alkylaminoalkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylaminové a 1 až 3 atomy uhlíku v alkylové části, cykloalkylskupinu se 3 až 7 atomy uhlíku nebo N,N-dialkylaminoalkylskupinu s celkem 2 až 6 atomy uhlíku v dialkylaminové části a 1 až 3 atomy uhlíku v alkylové části;

R³ představuje atom vodíku nebo alkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku; nebo

R³ a R⁴ dohromady s atomy uhlíku, k nimž jsou vázány, tvoří karboxyklický kruh se 4 až 7 atomy uhlíku;

a racemické, racemicko-diastereomerické směsi a optické isomery sloučenin obecného vzorce I a jejich farmaceuticky vhodné soli.

Přednost se dává sloučeninám obecného vzorce I, kde Y¹ představuje skupinu vzorce -OR¹ a je vázán v poloze 4 fenylového kruhu; Y² představuje skupinu vzorce -OR² a je vázán v poloze 3 fenylového kruhu a m, n, R¹, R², R³, R⁴ a R⁵ mají význam uvedený u obecného vzorce I nebo jejich farmaceuticky vhodným solím.

Větší přednost se dává sloučeninám obecného vzorce I, kde Y¹ představuje skupinu vzorce -OR¹a je vázán v poloze 4 fenylového kruhu; Y² představuje skupinu vzorce -OR² a je vázán v poloze 3 fenylového kruhu, kde R¹ představuje alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, fenylalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části nebo -(CH₂)_q-chinolinskupinu; m představuje číslo 0; n představuje číslo 0 a R², R³, R⁴ a R⁵ mají význam uvedený u obecného vzorce I; a jejich farmaceuticky vhodným solím.

Větší přednost se dále dává sloučeninám obecného vzorce I, kde Y¹ představuje skupinu vzorce -OR¹ a je vázán v poloze 4 fenylového kruhu; Y² představuje skupinu vzorce -OR² a je vázán v poloze 3 fenylového kruhu, kde R¹ představuje alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, fenylalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části nebo -(CH^jq-chinolinskupinu; R² představuje fenylalkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylové části, cykloalkylskupinu se 3 až 7 atomy uhlíku nebo alkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku; m představuje číslo 0; n představuje číslo 0 a R³, R⁴ a R⁵ mají význam uvedený u obecného vzorce I; a jejich farmaceuticky vhodným solím.

Větší přednost se dále dává ještě sloučeninám obecného vzorce I, kde Y¹ představuje skupinu vzorce -OR¹ a je vázán v poloze 4 fenylového kruhu; Y² představuje skupinu vzorce -OR² a je vázán v poloze 3 fenylového kruhu, kde R¹ představuje alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, fenylalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části nebo -(CI-Ljq-chinolinskupinu; R²představuje 5-fenylpentylskupinu, benzylskupinu, cyklopentylskupinu nebo methylskupinu; m představuje číslo 0; n představuje číslo 0 a R³, R⁴ a R⁵ mají význam uvedený u obecného vzorce I; a jejich farmaceuticky vhodným solím.

Zvláštní přednost se dává sloučeninám obecného vzorce I, kde Y¹ představuje skupinu vzorce -OR¹ a je vázán v poloze 4 fenylového kruhu; Y² představuje skupinu vzorce -OR a je vázán v poloze 3 fenylového kruhu, kde R¹ představuje alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, fenylalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, fenylalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části nebo -(CIDq-chinolinskupinu; R² představuje 5-fenylpentylskupinu, benzylskupinu, cyklopentylskupinu nebo methylskupinu; m představuje číslo 0; n představuje číslo 0; R³ představuje atom

-3 CZ 283564 B6 vodíku; R⁴ a R’ mají význam uvedený u obecného vzorce I; a jejich farmaceuticky vhodným solím.

Zvláštní přednost se dává také sloučeninám obecného vzorce I, kde Y¹ představuje skupinu vzorce -OR¹ a je vázán v poloze 4 fenylového kruhu; Y² představuje skupinu vzorce -OR a je vázán v poloze 3 fenylového kruhu, kde R¹ představuje alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, fenylalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části nebo -(CH^jq-chinolinskupinu; R²představuje 5-fenylpentylskupinu, benzylskupinu, cyklopentylskupinu nebo methylskupinu; m představuje číslo 0; n představuje číslo 0; R³ představuje atom vodíku; R⁴ představuje atom vodíku nebo alkylskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku a R^? má význam uvedený u obecného vzorce I; a jejich farmaceuticky vhodným solím.

Konkrétněji se zvláštní přednost dává sloučeninám obecného vzorce I, kde Y¹ představuje skupinu vzorce -OR¹ a je vázán v poloze 4 fenylového kruhu; Y² představuje skupinu vzorce -OR² a je vázán v poloze 3 fenylového kruhu, kde R¹ představuje alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, fenylalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části nebo -(CIDq-chinolinskupinu; R² představuje 5-fenylpentylskupinu, benzylskupinu, cyklopentylskupinu nebo methylskupinu; m představuje číslo 0; n představuje číslo 0; R³ představuje atom vodíku; R⁴ představuje atom vodíku nebo alkylskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku a R⁵ představuje atom vodíku nebo alkylskupinu s laž 3 atomy uhlíku a jejich farmaceuticky vhodným solím; sloučeninám obecného vzorce I, kde Y¹ představuje skupinu vzorce -OR¹ a je vázán v poloze 4 fenylového kruhu; Y² představuje skupinu vzorce -OR² a je vázán v poloze 3 fenylového kruhu, kde R¹ představuje metylskupinu; R² představuje cyklopentylskupinu; m představuje číslo 0; n představuje číslo 0; R³ představuje atom vodíku; R⁴ představuje atom vodíku a R⁵ představuje atom vodíku, a jejich farmaceuticky vhodným solím; a levotočivým (s negativní rotací) isomerům obecného vzorce I, kde Y¹představuje skupinu vzorce -OR¹ a je vázán v poloze 4 fenylového kruhu; Y představuje skupinu vzorce -OR² a je vázán v poloze 3 fenylového kruhu, kde R¹ představuje mety lskupinu; R² představuje cyklopentylskupinu; m představuje číslo 0; n představuje číslo 0; R³ představuje atom vodíku; R⁴ představuje atom vodíku a R⁵ představuje atom vodíku, a jejich farmaceuticky vhodným solím.

Konkrétněji se zvláštní přednost dále dává sloučeninám obecného vzorce I, kde Y¹ představuje skupinu vzorce -OR¹ a je vázán v poloze 4 fenylového kruhu; Y představuje skupinu vzorce -OR² a je vázán v poloze 3 fenylového kruhu, kde R¹ představuje methylskupinu; R² představuje cyklopentylskupinu; m představuje číslo 0; n představuje číslo 0; R^J představuje atom vodíku; R⁴představuje methylskupinu a R⁵ představuje atom vodíku, a jejich farmaceuticky vhodným solím; a levotočivým (s negativní rotací) isomerům sloučenin obecného vzorce I, kde Y¹ představuje skupinu vzorce -OR¹ a je vázán v poloze 4 fenylového kruhu; Y představuje skupinu vzorce -OR² a je vázán v poloze 3 fenylového kruhu, kde R¹ představuje methylskupinu; R² představuje cyklopentylskupinu; m představuje číslo 0; n představuje číslo 0; R³ představuje atom vodíku; R⁴představuje methylskupinu a R⁵ představuje atom vodíku; a jejich farmaceuticky vhodným solím.

Výraz „alkyl“ zahrnuje zbytky s řetězcem přímým i rozvětveným. Aromatické části popřípadě substituovaných fenylalkylskupin, aromatické části popřípadě substituovaných fenoxyalkylskupin a popřípadě substituované indanylskupiny mohou být substituovány jedním nebo více substituenty.

Následuje podrobnější popis vynálezu.

Do rozsahu sloučenin podle vynálezu spadají racemické a racemicko-diastereomerické směsi a optické isomery sloučenin obecného vzorce I, jakož i jejich farmaceuticky vhodné soli.

Sloučeniny podle vynálezu obecného vzorce I, definovaného výše, je obecně možno snadno připravovat podle následujícího reakčního postupu.

-4CZ 283564 B6

K alkoholickému roztoku methoxidu sodného se přidá alkoholický roztok hydrochloridu hydroxylaminu a sloučenina obecného vzorce

kde Y¹, Y², R³, R⁴, man mají význam uvedený u obecného vzorce I a X představuje alkylskupinu. Reakční směs se míchá po dobu asi 12 až asi 24, přednostně 16 hodin, při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se zpracuje postupy dobře známými odborníkům v tomto oboru.

Intermediální esterovou sloučeninu obecného vzorce

co₂x kde Y¹, Y², R³, R⁴, m a n mají význam uvedený u obecného vzorce I a X představuje alkylskupinu, je možno syntetizovat následujícím postupem: Ke směsi N-chlorsukcinimidu a pyridinu v inertním rozpouštědle, jako methylenchloridu, se přidá oxim obecného vzorce

-5 CZ 283564 B6

kde Y¹ a Y² mají význam uvedený u obecného vzorce I. Směs se asi 2 až asi 5, přednostně 2 hodiny, míchá a přidá se k ní sloučenina obecného vzorce

kde R³ a R⁴ mají význam uvedený u obecného vzorce I a X představuje alkylskupinu. Ke vzniklé směsi se následně přidá triethylamin. Reakční směs se míchá další asi 2 hodiny při teplotě místnosti a zpracuje postupy dobře známými odborníkům v tomto oboru.

Způsoby, jichž lze použít pro přípravu sloučenin podle vynálezu, ilustrují shora popsané syntetické postupy, jakož i dále uvedené příklady.

Odborníkům v tomto oboru je na základě tohoto popisu zřejmé, že některé sloučeniny podle vynálezu mohou tvořit farmaceuticky vhodné adiční soli s kyselinami. Jako neomezující příklady farmaceuticky vhodných solí sloučenin podle vynálezu je možno uvést soli s kyselinou chlorovodíkovou, kyselinou bromovodíkovou, kyselinou dusičnou, kyselinou sírovou, kyselinou fosforečnou, kyselinou methansulfonovou, kyselinou p-toluensulfonovou, kyselinou octovou, kyselinou glukonovou, kyselinou vinnou, kyselinou maleinovou a kyselinou jantarovou. V případě sloučenin obecného vzorce I, které obsahují další bazický dusík, mohou samozřejmě vznikat adiční soli se dvěma ekvivalenty kyseliny (například dihydrochloridy), stejně tak jako obvyklé adiční soli s jedním ekvivalentem kyseliny. Některé ze sloučenin podle vynálezu mohou také tvořit farmaceuticky vhodné soli s kationty. Jako neomezující příklady takových solí je možno uvést soli se sodíkem, draslíkem, vápníkem, hořčíkem, amoniem, N,N’-dibenzylethylendiaminem, N-methylglukaminem (megluminem), ethanolaminem a diethanolaminem.

Výchozí látky a reakční činidla potřebná pro syntézu sloučenin pole vynálezu jsou snadno dostupné buď obchodně, nebo metodami popsanými v literatuře nebo metodami ilustrovanými v následujících preparát i vních postupech.

Schopnost sloučenin podle vynálezu nebo jejich farmaceuticky vhodných solí inhibovat fosfodiesterázu IV (PDE_iv), a tedy jejich účinnost při léčbě inflamatomích chorob, je možno demonstrovat pomocí následujících zkoušek in vitro.

-6CZ 283564 B6

Biologické zkoušky

PDEiv z lidských plic až 40 g plicní tkáně člověka se umístí do 50 ml pufru Tris/fenylmethylsulfonylfluorid (PMSF)/sacharosa o pH 7,4 a homogenizuje za použití zařízení Tekmar Tissumizer® (Tekmar Co., 7143 Kemper Road, Cincinnati, Ohio 45249) po dobu 30 sekund při nejvyšší rychlosti. Homogenát se odstřeďuje 70 minut při 48 000 x g při teplotě 4 °C. Supematant se 2 x přefiltruje přes filtr s průměry pórů 0,22 pm a nanese na sloupec Mono-Q FPLC (Pharmacia LKB Biotechnology. 800, Centennial Avenue, Piscataway, New Jersey 08854), který je předem ekvilibrován v pufru Tris/PMSF o pH 7,4. Pro nanášení vzorku na sloupec se používá průtoku 1 ml/min a následující promývání a eluce se provádí průtokovou rychlostí 2 ml/min. Vzorek se eluuje ze sloupce za použití vzestupného stupňovitého gradientu chloridu sodného v pufru Tris/PMFS o pH 7,4. Sbírají se frakce o objemu 8 ml. Frakce se zkoušejí na specifickou aktivitu PDE_IV, což se provádí hydrolýzou [³H]cAMP, přičemž se využívá schopnosti známého inhibitoru PDEiv (například rolipramu) inhibovat tuto hydrolýzu. Vhodné frakce se spojí, zředí ethylenglykolem (2 ml ethylenglykolu/5 ml enzymatického přípravku) a zředěný roztok se skladuje až do použití při teplotě -20 °C.

Sloučeniny se rozpustí v dimethylsulfoxidu na koncentraci lOmM a roztoky se zředí v poměru 1 : 25 vodou (400 μΜ koncentrace sloučeniny, 4% koncentrace dimethylsulfoxidu). Požadované koncentrace se nastaví následujícím sériovým ředěním ve 4% roztoku dimethylsulfoxidu. Výsledná koncentrace dimethylsulfoxidu ve zkumavce je 1%. Pokus se zopakuje za použití dále uvedených látek, které se v uvedeném pořadí přidají do skleněné zkumavky o rozměrech 12 x 75 mm (všechny uváděné koncentrace jsou výsledné koncentrace ve zkumavce):

i) 25 μΐ sloučeniny nebo dimethylsulfoxidu (1% v případě kontrolního a slepého pokusu) ii) 25 μΐ Tris pufru o pH 7,5 iii) [³H]cAMP (ΙμΜ) iv) 25 μΐ roztoku enzymu PDE_IV (v případě slepého pokusu se enzym předběžně inkubuje 5 minut ve vroucí vodě).

Obsah zkumavek se protřepe a potom se zkumavky umístí na 20 minut do vodní lázně o teplotě 37 °C, načež se reakce zastaví přenesením zkumavek do lázně s vroucí vodou na dobu 4 minut. Do každé zkumavky umístěné v ledové lázni se přidá promývací pufr (0,5 ml, 0,lM roztok 4—(2— hydroxyethyl)-l-piperazinethansulfonové kyseliny (HEPES)/0,lM roztok chloridu sodného, pH 8,5). Obsah každé zkumavky se nanese na sloupec Affi-gel 601 (Biorad Laboratories, P.O. Box 1229, 85A Marcus Drive, Melville, New York, 11 747) (boronátový afinitní gel, objem lože 1 ml), který byl předběžně ekvilibrován v promývacím pufru. [³H]cAMP se vymyje 2 x 6 ml promývacího pufru a potom se eluuje [³H]5’AMP pomocí 4 ml 0,25M kyseliny octové. Po vířivém promíchání se 1 ml eluátu přidá ke 3 ml scintilační kapaliny umístěné ve vhodné nádobě, směs se promíchá vířením a potom se spočítá [³H],

Procentická inhibice se vypočítá z následujícího vzorce:

inhibice (%) = průměr cpm (zkouš. slouč.) - průměr cpm (slepý pokus) průměr cpm (kontrol, pokus) - průměr cpm (slepý pokus) cpm = počet radioaktivních impulsů/min

Hodnota IC₅o je definována jako koncentrace sloučeniny, která inhibuje z 50 % specifickou hydrolýzu [³H]cAMP na [Ή]5ΆΜΡ.

Zkouška inhibice fosfodiesterázy (PDE_IV) z humánních eosinofilů

Purifikace eosinofilů z humánní periferní krve

Humánní periferní krev se shromáždí v kyselině ethylendiamintetraoctové, zředí pufrem PIPES (dextróza, chlorid sodný, chlorid draselný) v poměru 1:1a potom se vzniklou směsí převrství roztok Percoll (Pharmacia). Přibližně 30minutovou centrifugací při frekvenci otáčení 2000 min'¹a teplotě asi 4 °C se vytvoří gradient. Zbytek izolačního postupu se provádí při asi 4 °C. Vrstva neutrofilů/eosinofilů se oddělí z Percollova gradientu a červené krvinky se podrobí lysí. Zbývající buňky se promyjí PIPES (s 1 % fetálního telecího séra), inkubují s mikroperličkami anti-CD16 po dobu asi 1 hodiny a nechají projít magnetickým sloupcem pro odstranění neutrofilů. Eosinofily se shromáždí v eluátu a analyzují na životaschopnost barvením Trypanovou modří (Gibco) a čistotu barvením Diff-Quik® (Baxter Scientifíc). Za použití této metody je stanovená čistota eosinofilů rutinně nad 99 %.

Příprava eosinofilových membrán

Purifikované eosinofily se resuspendují v 750 μΐ pufru pro lysi fosfodiesterázou (20mM triethylamin, lmM ethylendiamin-tris acetát, 100 pg/ml bacitracinu, 2mM benzamidin, 50μΜ leupeptin, 50μΜ fenylmethylsulfonylfluorid, 10 pg/ml inhibitoru sojového trypsinu) a rychle zmrazí v kapalném dusíku. Potom se buňky nechají pomalu roztát a zpracují se ultrazvukem. Membrány se podrobí vířivému mechanickému zpracování (rozbití se potvrdí obarvením fragmentů Trypanovou modří). Rozbité buňky se odstřeďují asi 30 minut při frekvenci otáčení 3700 min’¹ a teplotě asi 4 °C, aby se izolovaly membrány. Cytosol se dekantuje a membrány se resuspendují na koncentraci 500 pg/ml pro použití jako zdroj fosfodiesterázy při hydrolytické zkoušce (získá se okénko v rozmezí od 3000 do 5000 impulsů).

Příprava zkoušených sloučenin

Sloučeniny se rozpustí v dimethylsulfoxidu (na koncentraci 10’²M) a zředí v poměru 1 : 25 vodou na výslednou koncentraci 4 x ÍO^M. Vzniklá suspenze se sériově ředí v poměru 1:10 4% dimethylsulfoxidem až na konečnou koncentraci dimethylsulfoxidu při zkoušce 1%.

Zkouška inhibice fosfodiesterázy

Do skleněné zkumavky o rozměrech 12 x 75 mm se přidá: 1) 25 μΐ pufru pro stanovení fosfodiesterázy (200mM Tris/40mM chlorid hořečnatý), 2) 25 μΐ zásobního roztoku CAMP o koncentraci 4 nmol/ml, 3) 25 μΐ zkoušené sloučeniny, 4) 25 μΐ zdroje fosfodiesterázy (membrány). Pro zajištění kontrolní hodnoty pozadí se membrány asi 10 minut vaří. Nevařené membrány slouží jako pozitivní kontrola. Směs se inkubuje 25 minut ve vodní lázni o teplotě asi 37 °C. Reakce se zastaví asi pětiminutovým povařením vzorku. Vzorek se nanese na sloupec Affi-Gel 601 (objem sloupce 1 ml), který byl předem ekvilibrován s 0,25M kyselinou octovou a poté s promývacím pufrem (0,1 mM HEPES/0,lmM chlorid sodný) (pH 8,5). cAMP se vymyje ze sloupce pomocí HEPES/NaCl, 5’-AMP se eluuje ve 4 ml 0,25M kyseliny octové. 1 ml eluátu se smíchá se 3 ml scintilační kapaliny a po dobu 1 minuty se počítají radioaktivní impulsy ([³H]).

Výpočet dat a jejich interpretace cpm pozitivní kontroly x 4 konverze substrátu = ----------------------------celková aktivita

-8CZ 283564 B6

Stupeň konverze musí být vyšší než 3 %, aby byl experiment platný.

Inhibice (%) = cpmeluátu -cpm pozadí cpm kontroly - cpm pozadí x 100 cpm = počet radioaktivních impulsů/min

Hodnoty IC₅₀ se získají lineární regresí křivky titru inhibice (její lineární části) a vyjadřují se v μΜ.

Výsledky dosažené při výše uvedených zkouškách u některých reprezentativních sloučenin podle vynálezu jsou uvedeny dále.

Sloučenina z příkladu č.	PDEiv z lidských plic; IC₅₀ (μΜ)	Zkouška inhibice PDEiv z humánních eosinofilů; IC₅₀ (μΜ)
1	není k dispozici	není k dispozici
2	0,0448
3	0,34
4	0,0332
5		1,37
6	0,290
7	0,220
8	1,49
9	4,92
10	0,19
11	1,61
12	74,9
13		1,95
14		3,14
15		48 % při 100μΜ
16		1,91
17		7,39
18		0,10
19	0,0103
20	0,0332
21		0,20
22		5,93

Pro podávání člověku za účelem inhibice PDE_IV a léčení inflamatomích chorob, AIDS, astma, artritis, bronchitis, chronické obstruktivní pulmonámí choroby, psoriasis, alergické rhinitis nebo dermatitis jsou obvykle vhodné orální dávky sloučenin obecného vzorce I a jejich farmaceuticky vhodných solí podle vynálezu (tyto sloučeniny jsou dále označovány názvem „účinné sloučeniny podle vynálezu“) ležící v rozmezí od 0,1 do 500 mg za den, vztaženo na průměrného dospělého pacienta o hmotnosti 70 kg. Pro typického dospělého pacienta se tedy hodí tablety a kapsle, z nichž každá obsahuje 0,1 až 50 mg účinné sloučeniny ve vhodném farmaceutickém vehikulu nebo nosiči. Pro dosažení požadovaného dávkování může být zapotřebí podávat více tablet nebo kapslí. Dávky v případě intravenosního podávání obvykle leží v rozmezí od 0,1 do 10 mg (jedna dávka). Pro intranasální nebo inhalační podávání přichází v úvahu farmaceutický prostředek obsahující účinnou sloučeninu v množství 1 až 10 g/litr. Skutečnou dávku, která se bude nejlépe hodit pro každého jednotlivého pacienta, stanoví v praxi ošetřující lékař. Tato dávka se bude měnit podle věku, hmotnosti a odpovědi léčeného pacienta. Výše uvedené dávky mají povahu příkladů vhodných pro průměrné případy, ale v jednotlivých konkrétních případech je

-9CZ 283564 B6 samozřejmě možno používat jak vyššího, tak nižšího dávkování. Do rozsahu vynálezu spadá použití sloučeniny podle vynálezu v libovolném dávkování.

Pro aplikaci člověku se účinné sloučeniny podle vynálezu mohou podávat samotné, ale obvykle se podávají ve směsi s farmaceutickým ředidlem nebo nosičem, který je zvolen s ohledem na zamýšlenou cestu podávání v souladu se standardní farmaceutickou praxi. Tak například, když se má použít orálního dávkování, jsou vhodnými farmaceutickými prostředky tablety, které jako excipienty obsahují škrob nebo laktosu, nebo kapsle či ovule, obsahující účinnou látku buď samotnou, nebo ve směsi s excipienty. Pro orální podávání se může použít také elixírů nebo suspenzí, které obsahují aromatizační látky nebo barvicí činidla. Sloučeniny obecného vzorce I se také mohou podávat ve formě parenterálních injekcí, například intravenosně, intramuskulámě nebo subkutánně. Pro parenterální podávání se nejlépe hodí farmaceutické prostředky v podobě sterilního vodného roztoku, který může také obsahovat jiné přísady, například dostatečné množství solí nebo glukosy pro isotonizaci roztoku. Pro topické podávání se nejlépe hodí roztoky, lotiony, masti, hojivé masti apod.

Předmětem vynálezu jsou tedy také farmaceutické prostředky, jejichž podstata spočívá v tom, že obsahují sloučeniny obecného vzorce I nebo jejich farmaceuticky vhodné soli spolu s farmaceuticky vhodnými ředidly nebo nosiči.

Předmětem vynálezu jsou také farmaceutické prostředky pro inhibici PDE_IV nebo pro léčení inflamatomích chorob nebo léčení AIDS, astma, artritis, bronchitis, chronické obstruktivní choroby plic, psoriasis, alergické rhinitis a dermatitis u savců, zejména člověka, jejichž podstata spočívá vtom, že obsahují účinné množství sloučeniny obecného vzorce I nebo její farmaceuticky vhodné soli spolu s farmaceuticky vhodnými nosiči.

Předmětem vynálezu je dále také způsob inhibice PDE_[V u savců, kteří takovou inhibici potřebují, jehož podstata spočívá vtom, že se takovému savci podá množství sloučeniny obecného vzorce I nebo její farmaceuticky vhodné soli účinné pro inhibici PDEiv.

Předmětem vynálezu je dále také způsob léčby inflamatomích chorob u savců, jehož podstata spočívá v tom, že se těmto savcům podává sloučenina obecného vzorce I nebo její farmaceuticky vhodná sůl v antiinflamatomě účinném množství.

Dále je předmětem vynálezu také způsob léčby nebo prevence chorob zvolených ze souboru zahrnujícího astma, artritis, bronchitis, chronickou obstruktivní chorobu plic, psoriasis, alergickou rhinitis, dermatitis a šok u savců, kteří takovou léčbu vyžadují, jehož podstata spočívá vtom, že se savci podá účinné množství sloučeniny obecného vzorce I nebo její farmaceuticky vhodné soli.

Vynález je blíže objasněn v následujících příkladech provedení. Uvedené příklady mají výhradně ilustrativní charakter, ale rozsah vynálezu v žádném ohledu neomezují.

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

3-(3-CyklopentyIoxy-4-methoxy)fenyl-2-isoxazolin-5-hydroxamová kyselina

K. roztoku methoxidu sodného, připravenému z 97 mg (4,2 mmol) sodíku a 10 ml methanolu, se přidá roztok 146 mg (2,1 mmol) hydrochloridu hydroxylaminu ve 3 ml methanolu a poté 500 mg (1,5 mmol) sloučeniny z preparativního postupu 10. Reakční směs se míchá 16 hodin při teplotě místnosti a poté odpaří. Zbytek se rozpustí v 50 ml vody a roztok se promyje dvakrát etherem

-10CZ 283564 B6 (2 x 50 ml). Vodná vrstva se okyselí vodnou kyselinou chlorovodíkovou na pH 1 a vyloučená sraženina (231 mg) se odfiltruje a překrystaluje dvakrát ze směsi dichlormethanu a ethylacetátu. Získá se 52 mg sloučeniny uvedené v nadpisu o teplotě tání 167 až 168 °C.

'H NMR (DMSO-d₆): δ 1,54 - 1,92 (8H, m), 3,48 - 3,67 (2H, m), 3,78 (3H, s), 4,79 - 4,85 (1H, m), 4,95 (1H, t, J = 8), 6,99 (1H, d, J = 9), 7,17 (1H, d, J = 9), 7,23 (1H, s), 9,03 (1H, s).

Analýza pro Ci6H₂oN₂0₅:

vypočteno: C 59,99, H 6,29, N 8,74 nalezeno: C 59,82, H 6,05, N 8,65

Příklady 2 až 16

Následující sloučeniny, jejich struktura odpovídá dále uvedenému obecnému vzorci se vyrobí v podstatě způsobem pospaným v příkladu 1, přičemž se však uvedeného esteru použije místo esteru z preparativního postupu 10. V příkladu 5 se místo hydrochloridu hydroxylaminu použije hydrochloridu N-methylhydroxylaminu.

Př.	Y¹	Y²	R⁴	R⁵	Ester z prep.	t.t. (°C)	Data
2	-OMe	-O(CH₂)₅Ph	H	H	8	130-132	Anal. vyp. pro C. 66,32; H, 6,58; N, 7,03. Nalez': C, 66,23; H, 6,50; N, 6,94
3	-OMe	-OfC^Ph	Et	H	9	169-171	Anal. vyp. pro O: C, 66,82; H, 7,07; N, 6,49. Nalez :C, 67,13; H, 7,03; N, 6,15

-11CZ 283564 B6

Př.	Y¹	Y²	R⁴	R⁵	Ester z prep.	t.t. CC)	Data
4	-OMe	°O	Me	H	12	171-173	Anal. vyp. pro Ο.,Η-Ν-Ο^’ΛΗ-Ο 6,70; N, 8,15. Nalez: C, 59,78; H, 6.38; N, 8,27
5	-OMe	-o	H	Me	11	146-148	Anal. vyp. pro θ17^22^2θ5^: θ» 61,07; Η, 6,63; N, 8,38. Nalez :C, 60,87; H, 6,52; N, 8,45
6	-OMe	-OMe	H	H	22	180-182	Anal. vyp. pro ^C12^H14^N2°5^{: C>}54,13; H, 5,30; N, 10,52. Nalez:C, 54,03; H, 5.12; N, 10,60
7	-OMe	-OCH₂Ph	H	H	23	166-168	Anal. vyp.pro θ18*^1β^2θ5^:63,15; H, 5,30; H. 8,18. Nalez :C, 63,32; H, 5.37; H, 8,09
8	f*	H	H	H	24		¹H NMR (DMSOdg): 5 3,48-3,68 (2H, m), 4,95 (1H, t, 4=8), 5,43 (2H, s). 7,15 (2H, d,J=9), 7,59-7,69 (4H, m), 7,80 (1H, t, J=8), 8,01 (2H, t, J=7), 8,42 (1H, d, J=9), 9,04 (1H, s), 10,99 (1H, s). MS (m/e): 363 (M⁺)
9	-OCH₂Ph	H	H	H	25	190-192	¹H NMR (DMSOdg): d 3,44-3,63 (2H, m), 4,94 (1H, t, 4=8), 5,15 (2H, s), 7,08 (2H, d, J=8), 7,32-7,46 (5H, m), 7,62 (2H, d, 4=8), 9,03 (1H, s); MS (m/e): 313 (M⁺+1)

-12CZ 283564 B6

Př.	Y¹	Y®	R⁴	R⁵	Ester z prep.	t.t. (°C)	Data
10	H	-°O	H	H	13	151-153	Anal. vyp.pro ^C15^18^2θ4^:62,06; H, 6,25; N, 9,65. NáleziC, 62,00; H, 6,15; N, 9,36
11	-Ό	-OMe	H	H	14	136-138	Anal. vyp. pro ^C16^H20^N2®5^: C. 59,99; H, 6,29; N, 8,74. NalezjC, 59,66; H, 6,21; N. 8,69
12	H	H	H	H	17	166-168	Anal. vyp. pro ^C10^H10^N2®3^{: c}» 58,25; H. 4,89; N, 13,59. Nalez :C, 58,24; H. 4,49; N, 13,45
13	OMe	-°^Q	Pr	H	. 18	154-157	Anal. vyp. pro θι^ΝΑιΟ, 62,97; H, 7,23; N, 7,73. NaleziC, 62,61; H, 7,19; N, 7,54.
14	OMe	-°-Q	Bu	H	19	135-138	HRMS. vyp. pro ^C20^28^N2®5^:376,19982. nalez: 376,20104.
15	OMe	°O	Ph	H	20	180-182	Anal. vyp.pro θ22^24^2θ5' θ· 66,65; Η. 6,10; N. 7,07. Nalez :C, 66,32; H, 6,30; N. 7,12.
16		OHe			21	111-133	HRMS: vyp.pro θ19^Η24^2θ5^:360,1685; nalez: 360,1684.
		COŇHOH

-13CZ 283564 B6

Příklady 17 až 22

Sloučeniny dále uvedeného obecného vzorce se vyrobí v podstatě stejným postupem, jaký je 5 popsán v příkladu 1 za použití uvedeného esteru namísto esteru z preparativního postupu 10.

Příklad	Ester z prep. příkladu č.	R³	R⁴	m	t.t. ro	r LaJ 0	Anal.
17	28	H	H	0	137-140*	+77° MeOH	Vypeč -: C^H^NjO,: C, 59,99; H, 6,29; N, 8,74. Nalez :C, 59,98; H 6,62; N, 8,80.
18	29	H	H	0	138-140·	-82· MeOH	Vypoč. .· _c 59,99; _H 6,29; N. 8,74. Nalez: C, 59,66; H, 6,44; N, 8,61.

Příklad	Ester z prep.příkladu č.	R³	R⁴	m	t.t. rc)	r i” LaJ 0	Anal.
19	33	H	H	1	139-141*	racemic	Vypoč.: Ο^Η^Ν,,Ο,-’/.Η,Ο; C, 60,02; H, 6,64; N, 8,26.Nález.:C, 59,63; H, 6,48; N, 8,15.
20*	31	Me	H	0	184-186·	racemic	Vypoč.: C„H_aN₂0_s: C, 61,01; H, 6,58; N, 8,38. Nalez: C, 61,08; H, 6,88; N, 8.04.
21	39	H	Me	0	167-168·	+9*^bchci.	Vypoč.:' C, 60,25; H, 6,69; N, 8,27. Nalez: C, 60,43; H, 6,70; N, 8,23.
22	40	H	Me	0	153-155*	-14* ^bCHCtj	Vypoč. : Ο,,Η^^Ο,-ΆΗ,Ο: C, 59,41; H. 6,70; N, 8,15. Nalez: O, 59,64; H, 6,65; N, 8,03.

^a transisomer ^b Tyto sloučeniny představují oddělené enantiomery sloučeniny z příkladu 4. Enantiomemí čistota je 99 % (podle stanovení chirální HPLC za použití chirálního sloupce Chrom Těch; mobilní fáze: směs lOmM pufru na bázi octanu amonného o pH 4,1 a propanolu v poměru 98 : 2; 15 průtoková rychlost: 1 ml/min; detekce: 230 nm; teplota: teplota okolí; vstřikovací objem: 20 μΐ)

-14CZ 283564 B6

Preparativní postup 1

4-Methoxy-3-(5-fenylpentyloxy)benzaldehydoxim

Směs 25,0 g (0,164 mol) isovanilinu, 26,9 g (0,164 mol) 5-fenyI-l-pentanolu, 64,5 g (0,246 mol) trifenylfosfinu a 250 ml tetrahydrofuranu se po kapkách smísí s 42,8 g (0,246 mol) diethylazodikarboxylátu. Vzniklá směs se asi 6 hodin zahřívá na asi 90 °C a poté míchá přes noc při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odpaří a zbytek se zředí 500 ml ethylacetátu. Zředěná směs se promyje vodou (1 x 400 ml), IN roztokem hydroxidu sodného (2 x 400 ml) a roztokem chloridu sodného (1 x 400 ml), vysuší síranem hořečnatým a odpaří. Vzniklý hnědý olej (119 g) se přečistí mžikovou chromatografíí na 750 g silikagelu za použití směsi ethylacetátu a hexanu v poměru 3 : 7, jako elučního činidla. Získá se 29,8 g (61 %) oleje.

'H NMR (CDCh): δ 1,42 - 1,92 (6H, m), 2,61 (2H, t, J = 7), 3,91 (3H, s), 4,03 (2H, t, J = 7), 6,91 (1H, d, J = 8), 7,10 - 7,40 (m, 87H), 9,77 (s, 1H).

K. roztoku 29,8 g (0,100 mol) výše uvedeného aldehydu ve 300 ml 95% ethanolu se přidá 13,7 g (0,197 mol) hydrochloridu hydroxylaminu ve 100 ml vody a poté po malých dávkách (vývoj plynu) 16,6 g (0,197 mol) hydrogenuhličitanu sodného. Výsledná směs se míchá asi 4 hodiny při teplotě místnosti, načež se z ní odpařením odstraní ethanol. Zbytek se zředí 250 ml vody a extrahuje ethylacetátem (2 x 200 ml). Spojené extrakty se vysuší síranem hořečnatým a odpaří. Žlutý olejovitý zbytek se překrystaluje ze směsi hexanu a etheru. Získá se 15,0 g sloučeniny uvedené v nadpisu o teplotě tání 65 až 67 °C.

'H NMR (CDCb): δ 1,46 - 1,93 (6H, m), 2,62 (2H, t, J = 7), 3,88 (3H, s), 4,02 (2H, t, J = 7). 6,99 - 7,62 (m, 6H), 7,49 (1H, s), 8,04 (1H, s).

Jako druhá frakce se z filtrátu získá 2,00 g produktu o teplotě tání 67 až 69 °C. Filtrát se odpaří a zbytek se přečistí mžikovou chromatografíí za použití směsi ethylacetátu a hexanu v poměru 2 : 3, jako elučního činidla. Takto se získá dalších 4,18 g produktu o teplotě tání 64 až 66 °C.

Preparativní postupy 2 až 4

Následující sloučeniny dále uvedeného obecného vzorce se vyrobí v podstatě postupem popsaným v preparativním postupu 1 za použití uvedeného fenolu namísto isovanilinu a příslušného alkoholu namísto 5-fenyl-l-pentanolu. Sloučeniny získané ve formě oleje se přečistí mžikovou chromatografíí.

-15CZ 283564 B6

Prep. př.	Y¹	Y®	Fenol	Alkohol	t.t.fC)	¹H NMR (CDCIg) δ:
2	-OMe	”0	isovanillin	cyklopentanol	olej	1,50-2,02 (8H, m), 3,94 (3H, S), 4,62-4,80 (1H, m), 6,91 (1H, d, J=8), 6,97 (1H, dd, J=8 a 1), 7,17 (1H, d, J=1). 8,02 (1H, s), 8^16 (1H, s)
3	H		mhydroxybenzaldehyd·	cyldopentanol	olej	1,50-1,95 (8H, m), 4,704,78 (1H, m), 6,88 (1H. dd, J=3, 8), 7,05-7,28 (3H, m), 8,09 (1H, S), M3 0H,s)
4	-o	•OMe	vanillin	cyklopentanol	110-111	1,55-2,02 (8H, m), 3,88 (3H, s), 4,78-4,88 (1H. m), 6,86 (1H, d, J=8), 7,01 (1H, dd, J=2, 8), 7,21 (1H, d, J=2), 7,65 (1H, S), 8,07 (1H, S)

Preparativní postupy 5 až 6

Následující sloučeniny dále uvedeného obecného vzorce se vyrobí kondenzací uvedeného aldehydu s hydrochloridem hydroxylaminu v podstatě způsobem popsaným v preparativním postupu 1.

Prep. ρέ.	Y¹	Y®	Aldehyd’	t.t.CC)	’H NMR (DMSO-dg) «:
5	-OMe	-OH	isovanillin	146-148	3,77 (3H, S), 6,92 (2H, s), 7,08 (1H. s), 7,96 (1H, S), 9,16 (1H, S), 10,90 (1H.S)
6	-OH	H	p-hydroxybenzaldehyd	115-118	6,77 (2H, d, J=9), 7,40 (2H, d, J=9), 8,00 (1H, s), 9,74 (1H, s), 10,83 (1H, S)

-16CZ 283564 B6

Preparativní postup 7

Ethyl-2-methylenbutyrát

Směs 5,0 g (0,019 mol) triethyl-2-fosfonobutyrátu, 5,5 g (0,039 mol) uhličitanu draselného, 6,2 g (0,076 mol) 37% vodného roztoku formaldehydu a 15 ml vody se zahřívá po dobu asi 45 minut na asi 80 °C. Po ochlazení na teplotu místnosti se ke směsi přidá 75 ml etheru. Organická vrstva se oddělí, promyje roztokem chloridu sodného (1 x 20 ml) vysuší síranem hořečnatým a přefiltruje. Ether se opatrně oddestiluje, čímž se získá 2,1 g (87 %) sloučeniny uvedené v nadpisu ve formě čirého oleje, kterého se použije přímo, bez dalšího přečištění.

'H NMR (CDClj): δ 1,01 (3H, t, J = 7), 1,24 (3H, t, J = 7), 2,26 (2H, q, J = 7), 4,14 (2H, q, J = 7), 5,45 (1H, s), 6,06 (1H, s).

Preparativní postup 8

Ethylester 3-[4-methoxy-3-(5-fenylpentyloxy)]fenyl-2-isoxazolin-5-karboxylové kyseliny

Ke směsi 1,28 g (9,57 mmol) N-chlorsukcinimidu, 200 μΐ pyridinu a 200 ml dichlormethanu se přidá roztok 2,00 g (6,38 mmol) sloučeniny z preparativního postupu 1 v 15 ml dichlormethanu. Po asi 10 minutách je pozorována exotermická reakce, načež se směs míchá asi 2 hodiny při teplotě místnosti a přidá se k ní 644 mg (698 μΐ, 6,38 mmol) ethylakrylátu a poté 966 mg (1,33 ml, 9,57 mmol) triethylaminu. Po odeznění exotermické reakce se směs míchá asi 2 hodiny při teplotě místnosti, zředí 250 ml dichlormethanu a promyje IN vodnou kyselinou chlorovodíkovou, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vysuší síranem sodným a odpaří. Olejovitý zbytek se přečistí mžikovou chromatografíí na 100 g silikagelu za použití směsi ethylacetátu a hexanu v poměru 2 : 3, jako elučního činidla. Získá se 1,82 g (69 %) sloučeniny uvedené v nadpisu ve formě oleje.

*H NMR (CDCb): δ 1,29 (3H, t, J = 7), 1,40 - 1,91 (6H, m), 2,60 (2H, t, J = 7), 3,55 - 3,58 (2H, m), 3,95 (3H, s), 3,99 (2H, t, J = 7), 4,22 (2H, q, J = 7), 5,05 - 5,12 (1H, m), 6,79 (1H, d, J = 8), 6,95-7,31 (7H, m).

Preparativní postupy 9 až 21

Sloučeniny dále uvedeného obecného vzorce se připraví v podstatě způsobem popsaným v preparativním postupu 8 za použití uvedených oximů namísto oximu z preparativního postupu 1 a uvedených olefinů namísto ethylakrylátu.

-17CZ 283564 B6

Preppř.	Y’	Y²	R*	X	O»m	Olelin	t.t. ΓΟ	'H NMR (CDCy 8 nebo elementární analýza
9	-OMe	O(CH.J,-Ptl	a	a	sloučenina z prep.př.l	sloučenina z prep.př.7	olej .	0,9β (3H, t. J-7). 1,30 (3H, t. J-7), 1,48-2^3 \ (8H, m), 2,82 (2H, t, J-7), 3,18 (1H. d. J-17), 3,76 (1H. d. J-17). 3,88 (3K. SJ.A01 W q. J-7). 6,82 (1H. dl J-8), 7,01 (1H. dd. J-2, 8). 7,15-7,33 (6H, m)
10	-OMe	-°o	H	Et	sloučenina z prep.př.2	ethylakrylát	olej	1,27 (3H. t, J-7), 1,45-2,00 (8H. rn), 3^8 (2H, d, J-10).3,82(3Hs).$22(2H,q J-7), 4,72-4,80 (1H, m), 5,09 (1H. t, J-10), 8,78 (1H, d, J-8). 8£8 (1H. d. J-8). 7,32 (1H. *)

Prgj pr.	7»		R⁴	X	Oxim-	Otefin	t.t. fC)	'HMNRfpDCyí nebo elementární analýza
11	OMe		H	Me	sloučenina ž prep.př.2	methylakrylát	101-102	1,45-2,00 (8H, Πή. 3,58 (2H, d, J-10), 3,82 PH, s), 3,87 PH. s), 5,18 (1H, t, J-10), 8,82 (1H, d, J-8), 7,03 (1H, dd. J-2,8). 7,37 (1H. 4 J-2)
12	•OMe	-Ό	Me	Et	sloučenina z prep.př.2	ethylmethakrylát	77-79	1,25 (3H, t, J-7), 1,50-^00 (8H, m). 1,63 PH. S), 3,11 (1H, 4 J-17), 3,78 (1H, d, J-17), 3,91 PH. s), 4,18 pH, ς J-ή, 4,684,77 OH n& 6,75 (1H. 4 J-8), 6,92 (1H. dd. J-8,2), 7^7 (1H,d,J-2)
13	H	-’Ό	H	Me	sloučenina ' z prep.př.3'	methylakryl^t	olej	1,45-1,95 PH, m). 3,55-3^8 (2H. m). 3£5 pK, S), 4,654,74 (1H, m),5,09 (1H, t, J-9), 6^5 (1H, dd, J-2,8), 7,07 (1H, d. J-8), 7,12-7,22 (2H,m)
14	-Ό	OMe	H	Me	sloučenina z prep.př.4	methylakrylát	olej	1,45-1,95 (8H, m), 3^3,62 (2H, m), 3,79 PK S). 3,BS pK ή, 4,654,74 (1H. < 5,14 (1H, t, J-9), 6,83 (1H. 4 J-9), 7,00 (1H. dd, J-2,8). 7,34 (1H, d, J-2)
15	•OMe	•OH	H	Me	sloučenina z prep.př.5	methylakrylát	75-95	3,56-3,60 pH, m), 3,79 PK s), 3,90 (3H. S), 5,12 (1H, t, J-10), 5,68 (1H,»), 6,83 (1H. 4 J=9), 7,13 OH dd, J-2,9), 7,24 (1H, 4 J-2)‘
18	-OH	H	H	Me	sloučenina· z prep.př·-6	methyl. akrylát	149-153	3,61-3,65 (2H,m), 3,83 PH.S), 5,17 (1H,t, J-9), 5,80 OH bd s), 6,88 PH, 4 J-9), 7,58 PH4J-9)

-18CZ 283564 B6

3?	Y'	Y®	R⁴	X	Oxim	Otefln	t.t. ro	Ή NMR (COCy s nebo elementární analýza
17	H	H	H	Et	Beruaidehyde oxim	ethylakrylát	4041.	1,50 (3H.L J-7), 3^04^5 CHni). 4)28 ®H. q, 4-7), 5,15 (1H, t, J-9), 7,37-7,42 (3H, m), 7,64-7,70 (2H,m)
18	OMe	-°O	Pr	Et	sloučenina z prep.př. 2	sloučenina z prep.př.34	olej	0,94 (3H, t, J»8), 1,30 (», ζ J.8), 1 ^2-1,99 (12 H, m), 3,20 (1H, d, J-17), 178 (1H, d. J-17), 185 (3H, l), 4,184)32 (2H. ffl), 4,724,82 (1H. m), 182 (1H, d, J-8). 7,00 (1H. dd. J=2a 8), 7,34 (1H. d, J-2)
19	OMe	-°O	0u	Et	sloučenina z prep.př.2	sloučenina z prep.př.35	53-36	0,90 (3H, t, 4-8). 1,30 (3H. ζ J-8). 1,22-1,98 (14H, m), 120 (1H. d, J-17). 3,78 (1H, d, J-17). 188 (3H, S), 4^29 (2H, ffl). 4,754)85 (1H, m), 6)82 (1H, d. J-8). 7,01 (1H. dd. J-2a 8).7,34(1H.d,J-2)
20	OMe	-’Ό	Ph	a	sloučenina z prep.př. 2	sloučenina z prep.př.38	98-100	Vypoč.pro: CUyWj: C, 7139;H 8,85; N, 142 Nalez, 7¾¾ H. 181; N, 158
21	z. _	sloučenina z prep.př.2	methyl-1cyklopenta-. noát	olej	1,60-137 (14H, m). 3,79 (3H, x), 3^6 (3H, ή, 4,21 (1H, dd, J-3 a 7), 4,75480 (1H, m). 182 (1H, d, J-9), 7,05 (1H. dl J-2 a A, 7,34 (1H, J-2)

* NMR ukazuje nečistotu, která je nejpravděpodobnéji produktem získaným ehlorací aromatického kruhu.

Preparativní postup 22

Methylester 3-(3,4-dimethoxyfenyl)-2-isoxazolin-5-karboxylové kyseliny

K roztoku 1,5 g (6,00 mmol) sloučeniny z preparativního postupu 15 ve 25 ml dimethylformamidu se přidá 910 mg uhličitanu draselného (6,60 mmol) a 0,41 ml (940 mg, 6,6 mmol) methyljodidu. Vzniklá směs se zahřívá na 50 °C a průběh reakce se monitoruje chromatografíí na tenké vrstvě. Po první a druhé hodině se ke směsi přidá vždy 0,4 ml dalšího methyljodidu. Po asi dvouhodinovém dalším zahřívání se reakční směs ochladí a zředí 250 ml vody. Vodná směs se extrahuje ethylacetátem (3 x 100 ml), vysuší síranem hořečnatým a odpaří. Olejovitý zbytek se přečistí mžikovou chromatografíí za použití směsi ethylacetátu a hexanu v poměru 1 : 3, jako elučního činidla. Získá se 270 mg sloučeniny uvedené v nadpisu o teplotě tání 106 až 108 °C.

'HNMR (CDC1₃): δ 3,59 - 3,63 (2H, m), 3,79 (3H, s), 3,89 (3H, s), 5,15 (1H, t, J = 8), 6,83 (1H, d, J = 8), 7,03 (1H, dd, J = 2,8), 7,37 (1H, d, J = 8)

MS (m/e): 266 (M⁺+l).

Preparativní postupy 23 až 25

Následující sloučeniny dále uvedeného obecného vzorce se vyrobí v podstatě způsobem popsaným v preparativním postupu 22 za použití uvedeného fenolu namísto sloučeniny z preparativního postupu 15 a uvedeného alkylačního činidla namísto methyljodidu.

-19CZ 283564 B6

Prep pr.	Y¹	Y²	Fenol	Alkylaéní činidlo	t.t.fC)	Data
23	OMe	OBn	Přepil 5	PhCH₂Br	183-185	¹H NMR (CDCI-j): δ 3,54- 3,58 (2H.m). 3,79 (3H,s), 3,89 (3H,s), 5,10-5,26 (1H,m), 5,13 (2H,s), 6,86 (1H, d. J=9). 7,06 (1H. dd. 4=2.8), 7,32-7,40 (6H,m); MS (m/e): 342 (M⁺+1)
24		H	z prep. 16	·»	112-113	¹H NMR (CDCIg): δ 3,563,59 (2H, m), 3,78 (3H, S), 5,12 (1H, t, J=8). 5,34 (2H, S). 7,02 (2H, d, J=9), 7,547,82 (6H, m), 8,06 (1H, d, J=8), 8,17 (1H, d, J=8); MS (m/e): 363 (M⁺+1)
25	-OCHjPh	H	z prep. 16	PhCH₂Br	127-128	Analýza vypoč. pro: C₁₈H₁₇NO₄: C, 69,43; H, 5,50; N, 4,50. Nalez: C, 69,18; H, 5,31; N, 4,59

Preparativní postup 26 [3aR-(3aa, 6α, 7αβ]—Hexahydro-8,8—dimethyl—1—(1—oxo—2-propenyl)-3H—3a,6-methano2,l-benzisothiazol-2,2-dioxid o Sloučenina uvedená v nadpisu se vyrobí postupem podle Currana a Heffnera (Curran, D. P., Heffner, T. A., J. Org. Chem., 1990, 55, 4585) za použití (+)-L-2,10-kafrsultamu získaného od Fluka.

Do jednolitrové tríhrdlé baňky s kulatým dnem vybavené zpětným chladičem, přívodem plyn5 ného dusíku, gumovým šeptem a skleněnou zátkou se umístí 4,03 g (0,084 mol) 50% disperse natriumhydridu, 400 ml toluenu a 12,0 g (0,056 mol) (+)-10,2-kafrsultamu. Získaná směs se míchá 1 hodinu při teplotě místnosti, přidá se k ní 594 mg (0,006 mol) chloridu měďného a poté

-20CZ 283564 B6

9,10 ml (0,056 mol) akryloylchloridu a v míchání při teplotě místnosti se pokračuje přes noc. Poté se směs smísí s 15 ml vody, vodná směs se odpaří, zředí vodou (200 ml) a extrahuje ethylacetátem (3 x 200 ml). Spojené extrakty se vysuší síranem hořečnatým a odpaří. Pevný zbytek se přečistí mžikovou chromatografíí na 1 kg silikagelu za použití směsi ethylacetátu a hexanu v poměru 3 : 7, jako elučního činidla. Získaná bílá pevná látka se trituruje s etherem, čímž se získá 7,4 g sloučeniny uvedené v nadpisu o teplotě tání 179 až 182 °C.

Preparativní postup 27 [3aS-(3aa, 6a, 7ap]-Hexahydro-8,8-dimethyl-l-( l-oxo-2-propenyl)-3H-3a,6-methano-2,1benzisothiazol-2,2-dioxid

Sloučenina uvedená v nadpisu se vyrobí postupem popsaným v příkladu 26, ale za použití (-)D-2,10-kafrsultamu dostupného od Fluka, jako výchozí látky.

Preparativní postup 28 až 31

Sloučeniny dále uvedeného obecného vzorce se připraví v podstatě způsobem popsaným v preparativním postupu 8, ale za použití sloučeniny z preparativního postupu 2 namísto sloučeniny z preparativního postupu 1 a uvedeného olefinu namísto ethylakrylátu.

HeO

Prep. př.	R³	R⁴	Q	Otefin	t.t.fC)	r i ία 1 0 CHCI,	Data
28*	H	H		Prep. 26	pěna	+187	’H-NMR(CDCy;8 0,97 (3H, a), 1,19 (3H, S), 1,28-2^2 (15H, m), 3,41-3,95 (5H, m), 3,85 (3H, s), 4,744,82 (1H, m). 5,83 (1H. dd, J-8,10), 6,80 (1H, d, J-8), 7,02 (1H, dd, J=2,8), 7,33 (1H, d, J=2).

-21CZ 283564 B6

	R³	R«	Q	Otefin	t.t.rc)	r i” [a J 0 CHCI,	Data
29*	H	H	0	Prep.27	pěna	+46·	’l+NMR(CDCy: 6 0,94 (3H, a), 1,17 (3H, s). 1^5-2^1 (15H, m), 3^.93 (5H, m), 3,63 (3H, s), 4,73^81 (1H, m), 5,61 (1H, dd, J-8,10), 6^79 (IH, d, J«8), 7,01 (1H, dd, J-2,8), 7,32 (1H, d.J-2).
30	H	H	(CH^OH	CH₂=CH(CH₂)₂0H	89-91	racemická	An. vypoč. pro :C₁₇H_BNO₄: C, 66,86; H, 7,59; N, 4,59.Nalez.:C, 66,71; H, 7,77; N, 4,64.
31^b	H	Me	COjMe	ethylkrotonát	olej.	racemictó	’H-NMR(C0Cy: 1,40-2,05 (8H, m), 1,43 (3H, d, J—7), 3,69 (3H, a), 3^84 (3H, S), 4,01 (1H, d, J=7), 4,74-4^2 (IH, m), 4,95-5,06 (IH, m), 6,79 (1H. d, J-8). 7,05 (1H,dd, J-2,8), 7,31 (1H,d, J-2).

^améně polární díastereotner (R^ 0,61; 1:1 ether-toluen) j^trans stereochemie

Preparativní postup 32

3-(3-Cyklopentyloxy-4-methoxy)fenyl-2-isoxazolin-5-octová kyselina

K roztoku 1,85 g (6,06 mmol) sloučeniny z preparativního postupu 30 v 50 ml acetonu ochlazenému v ledové lázni na asi 0 °C se přikape 9,70 ml (12,1 mmol) 1,25M roztoku Jonesova reakčního činidla. Ledová lázeň se nechá roztát. Po asi 4 hodinách mícháni se přidá dalších 2,00 ml Jonesova reakčního činidla a v míchání se pokračuje přes noc. Přebytek reakčního činidla se rozloží přídavkem 10 ml isopropylalkoholu a vyloučená pevná látka se odfiltruje. Filtrát se zkoncentruje a zbytek se vyjme do 150 ml ethylacetátu. Ethylacetátová směs se promyje vodou (2 x 100 ml), vysuší síranem hořečnatým a odpaří. Žlutý olejovitý zbytek se překrystaluje ze směsi etheru a hexanu, čímž se získá 1,06 g sloučeniny uvedené v nadpisu o teplotě tání 123 až 126 °C.

’H NMR (CDClj): δ 1,55 - 2,06 (8H, m), 2,66 - 3,59 (4H, m), 3,87 (3H, s), 4,78 - 4,87 (IH, m), 5,02 - 5,15 (IH, m), 6,84 (IH, d, J = 8), 7,02 (IH, dd, J = 2,8), 7,37 (IH, d, J = 2).

Preparativní postup 33

Methylester 3-(3-cyklopentyloxy-4-methoxy)fenyl-2-isoxazolin-5-octové kyseliny

Roztok 530 mg sloučeniny z preparativního postupu 32 v 5 ml methanolu se nasytí plynným chlorovodíkem. Vzniklá směs se 3 hodiny míchá při teplotě místnosti, přičemž se pro její ochranu před atmosférickou vlhkostí použije rourka s chloridem vápenatým. Reakční směs se zkoncentruje a zbytek se vyjme do 50 ml ethylacetátu. Ethylacetátová směs se promyje nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (2 x 50 ml), vysuší síranem hořečnatým a odpaří na 530 mg oleje. Olejovitý zbytek se přečistí mžikovou chromatografií na 25 g silikagelu za použití směsi ethylacetátu a hexanu v poměru 2 : 3, jako elučního činidla.

-22CZ 283564 B6

Získaný olej se překrystaluje ze směsi hexanu a etheru, čímž se vyrobí 323 mg sloučeniny uvedené v nadpisu ve formě bílé pevné látky o teplotě tání 78 až 80 °C.

Analýza pro C18H23NO5:

vypočteno: C 64,85, H 6,95, N 4,20 nalezeno: C 64,49, H 7,08, N 4,13.

Preparativní postupy 34 až 36

Následující sloučeniny dále uvedeného obecného vzorce se vyrobí ve formě olejů v podstatě způsobem popsaným v preparativním postupu 7 za použití uvedeného esteru namísto triethylfosfonobutyrátu.

Prep. pr.	R⁴	Ester	'H-NMRÍCDCyiÓ
34	Pr	triethylfosfonopentanoát	0,90 (3H, t, J=7), 1,28 (3H, t, J=7), 1,40-1.53 (2H, m), 2,25 (2H, dt, J=1 a 7), 4,17 (2H, q, J=7), 5,48 (1H, q, 1 J=1), 6,11 (1H, t, I J=11) \|
\| 35	Bu	triethylfosfonohexanoát	0,90 (3H, t, J=7), 1,29 (3H, t, J=7), 1,26-1.48 (4H, m), 2,28 (2H, t, J=7), 4,19 (2H, q, J=7), 5,49 (1H, q, J=1). 6,11 (1H, t, J=1)
36	Ph	triethylfosfonofenylacetát	1,32 (3H, t, J=7), 4,28 (2H, q, J=7), 5,88 (1H, d, J=1), 6,34 (1H, d, J=1), 7,20-7,45 (5H, m)

Preparativní postupy 37 a 38

Méně polární diastereomer N-[(S)—a—methylbenzyl]—3—(3—cyklo—pentyloxy—4—methoxy)fenyl—

5—methyl—2—isoxazolin—5—karboxamidu (preparativní postup 37)

Polárnější diastereomer N-[(S)-a-methylbenzyl]-3-(3-cyklo-pentyloxy-^-methoxy)fenyl-5methyl-2-isoxazolin-5-karboxamidu (preparativní postup 38)

-23CZ 283564 B6

Roztok 5,00 g (14 mmol) sloučeniny z preparativního postupu 12 ve 100 ml absolutního ethanolu se smísí s 2,36 g (42 mmol) hydroxidu draselného. Vzniklá směs se míchá asi 4 hodiny při teplotě místnosti, přidá se k ní další ekvivalent hydroxidu draselného a v míchání se pokračuje asi 3 dny. Poté se směs zkoncentruje a zředí vodou. Vodná směs se okyselí IN vodným roztokem kyseliny chlorovodíkové a extrahuje ethylacetátem (2 x 100 ml). Spojené extrakty se vysuší síranem hořečnatým a odpaří. Zbytek se trituruje se směsí hexanu a etherů. Získá se 3,46 g 3-[3cyklopentyloxy-4-methoxy]fenyl-5-methyl-2-isoxazolin-5-karboxylové kyseliny o teplotě tání 153 až 154 °C.

Směs 3,00 g (94 mmol) výše uvedené sloučeniny, 100 ml benzenu a 2,46 ml (28,2 mmol) oxalylchloridu se 3 hodiny zahřívá ke zpětnému toku. Směs se zkoncentruje a zbytek se zředí 100 ml dichlormethanu. Dichlormethanová směs se smísí s 2,42 ml (18,8 mmol) S-(-)-amethylbenzylaminu. Výsledná směs se míchá asi 16 hodin při teplotě místnosti a zkoncentruje. Zbytek se zředí 200 ml ethylacetátu, zředěná směs se promyje IN vodnou kyselinou chlorovodíkovou (2 x 100 ml), nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (2 x 100 ml), vysuší síranem sodným a odpaří. Pevný zbytek (5,76 g) se přečistí mžikovou chromatografií na 600 g silikagelu za použití 15 až 20% etheru v toluenu, jako elučního činidla. Po 500 ml přední frakce se sbírají 35 ml frakce.

Frakce 59 až 68 se spojí a odpaří. Získá se 630 mg titulní sloučeniny z preparativního postupu 37 o teplotě tání 154 až 156 °C a Rf 0,20, 20% ether v toluenu.

Analýza pro C25H30N2O4:

vypočteno: C 71,06, H 7,16, N 6,63 nalezeno: C 71,13, H 7,42, N 6,76

Frakce 82 až lé4 se spojí a zkoncentrují na 720 mg bílé pevné látky, která se trituruje se směsí hexanu a etheru. Získá se 596 mg bílé pevné látky o teplotě tání 165 až 167 °C, která se překrystaluje ze směsi etheru a dichlormethanu, čímž se vyrobí 435 mg titulní sloučeniny z preparativního postupu 38 o teplotě tání 167 až 168 °C. Další 1,03 g titulní sloučeniny z preparativního postupu 38 o teplotě tání 166 až 167 °C se získá tak, že se spojené matečné louhy a frakce 69 až 81 odpaří a zbytek se překrystaluje ze směsi etheru a dichlormethanu.

Analýza pro C25H30N2O4:

vypočteno: C 71,06, H 7,16, N 6,63 nalezeno: C 70,89, H 7,40, N 6,77.

Preparativní postup 39

Methylester (+)-3-(3-Cyklopentyloxy-4-methoxy)fenyl-5-methyl-2-isoxazolin-5-karboxylové kyseliny

Do plamenem vysušené tříhrdlé baňky s kulatým dnem se pod atmosférou dusíku umístí suspenze 549 mg (3,56 mmol) 26% kaliumhydridu v minerálním oleji. Po dvojnásobném postupném promytí hexanem, čímž se odstraní minerální olej, se očištěný hydrid suspenduje ve 35 ml tetrahydrofuranu. K suspenzi se přikape roztok 750 mg (1,78 mmol) sloučeniny z preparativního postupu 37 ve 35 ml suchého tetrahydrofuranu. Po odeznění šumivé reakce se ke směsi přidá 161 μΐ (2,67 mmol) sirouhlíku. Výsledná směs se asi 16 hodin míchá při teplotě místnosti a poté rozloží přídavkem 6 ml vody. Tetrahydrofuran se odpaří a zbytek se zředí nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného. Zředěná směs se promyje ethylacetátem (2 x 100 ml). Vodná vrstva se okyselí 6N vodnou kyselinou chlorovodíkovou na

-24CZ 283564 B6 pH 3 a extrahuje ethylacetátem (2 x 100 ml), vysuší síranem horečnatým a odpaří na 217 mg oranžového oleje.

Roztok výše uvedeného oleje ve 20 ml methanolu se nasytí plynným chlorovodíkem a míchá asi 16 hodin při teplotě místnosti. Získaná směs se zkoncentruje, zředí 50 ml ethylacetátu, vysuší síranem hořečnatým a odpaří. Žlutý pevný zbytek se přečistí mžikovou chromatografii na 12 g silikagelu za použití 60% ethylacetátu v hexanu, jako elučního činidla. Získá se 131 mg sloučeniny uvedené v nadpisu, která má po trituraci se směsí hexanu a etheru teplotu tání 127 až 128 °C.

[a]²⁵ _D = +100° (c = 0,64, trichlormethan)

Analýza pro CisH₂₃NO5.0,25 H₂O

vypočteno:	C 63,99, H 7,01, N 4,15
nalezeno:	C 64,03, H 6,96, N 4,15

Preparativní postup 40 (-)-3-(3-Cyklopentyloxy—4-methoxy)fenyl-5-methyl-2-isoxazolin-5-karboxamid

Sloučenina uvedená v nadpisu o teplotě tání 124 až 125 °C se získá v podstatě způsobem popsaným v preparativním postupu 39 za použití sloučeniny z preparativního postupu 38 namísto sloučeniny z preparativního postupu 37.

[a]²⁵ _D = -101° (c - 0,64, trichlormethan)

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. 3-Aryl-2-isoxazolin-5-hydroxamové kyseliny obecného vzorce I kde m představuje číslo 0, 1, 2 nebo 3; n představuje číslo 0, 1, 2 nebo 3;

(I),

-25CZ 283564 B6

Y^l a Y² představuje nezávisle vždy atom vodíku, alkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku, fenylalkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku valkylové části, jejíž fenylová část je popřípadě substituována, fenoxyalkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylové části, jejíž fenylová část je popřípadě substituována, cykloalkylskupinu se 3 až 7 atomy uhlíku, difluormethylskupinu, trifluormethylskupinu, fluor, chlor, brom, jod nebo skupinu obecného vzorce -OR¹ nebo -OR², kde případný substituent fenylové části fenylalkylskupiny a/nebo fenoxyalkylskupiny je zvolen ze souboru zahrnujícího alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, halogen a trifluormethylskupinu;

R¹ představuje alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, fenylalkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, fluormethylskupinu, difluormethylskupinu, trifluormethylskupinu nebo skupinu vzorce -(CH;>)_q-chinolin, kde q představuje číslo 1, 2 nebo 3;

R² představuje alkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, cykloalkylskupinu se 3 až 7 atomy uhlíku, alkoxyalkylskupinu se 3 až 7 atomy uhlíku v alkoxylové části a 2 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, fenoxyalkylskupinu se 2 až 6 atomy uhlíku v alkylové části jejíž fenylová část je popřípadě substituována, fenylalkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylové části jejíž fenylová část je popřípadě substituována, bicykloalkylskupinu se 6 až 9 atomy uhlíku nebo popřípadě substituovanou indanylskupinu; kde případný substituent fenylové části fenylalkylskupiny a/nebo fenoxyalkylskupiny a/nebo indanylskupiny je zvolen ze souboru zahrnujícího alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, halogen a trifluormethylskupinu;

R³ představuje atom vodíku, alkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, fluoralkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku a 1 až 3 atomy fluoru, monohydroxyalkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku nebo alkoxyalkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylové a 1 až 3 atomy uhlíku v alkoxylové části;

R⁴ představuje atom vodíku, alkylskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku, fluoralkylskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku a 1 až 3 atomy fluoru, monohydroxyalkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, fenylskupinu, alkoxyalkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylové a 1 až 3 atomy uhlíku v alkoxylové části, aminoalkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, skupinu vzorce

0 -<0Η₅)„-ΝζΑχΐ

H kde X¹ představuje alkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku a n je celé číslo 1 až 3, N-alkylaminoalkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku v alkylaminové a 1 až 3 atomy uhlíku v alkylové části, cykloalkylskupinu se 3 až 7 atomy uhlíku nebo Ν,Ν-dialkylaminoalkylskupinu s celkem 2 až 6 atomy uhlíku v dialkylaminové části a 1 až 3 atomy uhlíku v alkylové části;

R⁵ představuje atom vodíku nebo alkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku; nebo

R³ a R⁴ dohromady s atomy uhlíku, k nimž jsou vázány, tvoří karbocyklický kruh se 4 až 7 atomy uhlíku;

a racemické, racemicko-diastereomerické směsi a optické isomery sloučenin obecného vzorce I a jejich farmaceuticky vhodné soli.

-26CZ 283564 B6
2. 3-Aryl-2-isoxazolin-5-hydroxamové kyseliny podle nároku 1 obecného vzorce I, kde Y¹představuje skupinu vzorce -OR¹ a je vázán v poloze 4 fenylového kruhu; Y² představuje skupinu vzorce -OR² a je vázán v poloze 3 fenylového kruhu a jejich farmaceuticky vhodné soli.
3. 3-Aryl-2-isoxazolin—5-hydroxamové kyseliny podle nároku 2 obecného vzorce I, kde R¹představuje alkylskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, feny laiky lskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části nebo skupinu vzorce -(CH₂)_q-chinolin, m je číslo 0 a n je číslo 0, jakož i jejich farmaceuticky vhodné soli.
4. 3-Aryl-2-isoxazolin-5-hydroxamové kyseliny podle nároku 3 obecného vzorce I, kde R²představuje fenylalkylskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylové části, cykloalkylskupinu se 3 až 7 atomy uhlíku nebo alkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, jakož i jejich farmaceuticky vhodné soli.
5. 3-Aryl-2-isoxazolin-5-hydroxamové kyseliny podle nároku 4 obecného vzorce I, kde R²představuje 5-fenylpentylskupinu, benzylskupinu, cyklopentylskupinu nebo methylskupinu, jakož i jejich farmaceuticky vhodné soli.
6. 3-Aryl-2-isoxazolin-5-hydroxamové kyseliny podle některého z nároků 1 až 5 obecného vzorce I kde obecné symboly mají význam uvedený v příslušném nároku 1 až 5 s vyloučením sloučenin, v nichž R³ a R⁴ dohromady s atomy uhlíku, k nimž jsou vázány, tvoří karboxyklický kruh se 4 až 7 atomy uhlíku, jakož i jejich farmaceuticky vhodné soli.
7. 3-Aryl-2-isoxazolin-5-hydroxamové kyseliny podle nároku 5 obecného vzorce I, kde R³představuje atom vodíku, jakož i jejich farmaceuticky vhodné soli.
8. 3-Aryl-2-isoxazolin-5-hydroxamové kyseliny podle nároku 7 obecného vzorce I, kde R⁴představuje atom vodíku nebo alkylskupinu s 1 až 5 atomy uhlíku, jakož i jejich farmaceuticky vhodné soli.
9. 3-Aryl-2-isoxazolin-5-hydroxamové kyseliny podle nároku 8 obecného vzorce I, kde R’ představuje atom vodíku nebo alkylskupinu s 1 až 3 atomy uhlíku, jakož i jejich farmaceuticky vhodné soli.
10. 3-Aryl-2-isoxazolin-5-hydroxamové kyselina podle nároku 9 obecného vzorce I, kde R¹představuje methylskupinu, R² představuje cyklopentylskupinu, R⁴ představuje atom vodíku a R’ představuje atom vodíku, jakož i její farmaceuticky vhodné soli.
11. 3-Aryl-2-isoxazolin-5-hydroxamová kyselina podle nároku 10 ve formě levotočivého enantiomeru, tj. enantiomeru s negativní rotací, jakož i její farmaceuticky vhodné soli.
12. 3-Aryl-2-isoxazolin-5-hydroxamová kyselina podle nároku 9 obecného vzorce I, kde R¹představuje methylskupinu, R² představuje cyklopentylskupinu, R⁴ představuje methylskupinu a R⁵ představuje atom vodíku, jakož i její farmaceuticky vhodné soli.
13. 3-Aryl-2-isoxazolin-5-hydroxamová kyselina podle nároku 12 ve formě levotočivého enantiomeru, tj. enantiomeru s negativní rotací, jakož i její farmaceuticky vhodné soli.
14. Farmaceutický prostředek pro léčení inflamatomích chorob, vyznačující se tím, že obsahuje účinné množství 3-aryl-2-isoxazolin-5-hydroxamové kyseliny podle nároku 1 nebo její farmaceuticky vhodné soli a farmaceuticky vhodné ředidlo nebo nosič.

-27CZ 283564 B6
15. Farmaceutický prostředek pro léčení inflamatomích chorob, vyznačující se tím, že obsahuje účinné množství 3-aryl-2-isoxazolin-5-hydroxamové kyseliny podle nároku 6 nebo její farmaceuticky vhodné soli a farmaceuticky vhodné ředidlo nebo nosič.
16. 3-Aryl-2-isoxazolin-5-hydroxamové kyseliny podle nároku 1 a jejich farmaceuticky vhodné soli jako léčiva pro inhibici fosfodiesterázy typu IV u savců.
17. 3-Aryl-2-isoxazolin-5-hydroxamové kyseliny podle nároku 6 a jejich farmaceuticky vhodné soli jako léčiva pro inhibici fosfodiesterázy typu IV u savců.
18. 3-Aryl-2-isoxazolin-5-hydroxamové kyseliny podle nároku 1 a jejich farmaceuticky vhodné soli jako léčiva pro léčení inflamatomích chorob.
19. 3-Aryl-2-isoxazolin-5-hydroxamové kyseliny podle nároku 6 a jejich farmaceuticky vhodné soli jako léčiva pro léčení inflamatomích chorob.
20. 3-Aryl-2-isoxazolin-5-hydroxamové kyseliny podle nároku 1 a jejich farmaceuticky vhodné soli jako léčiva pro léčení AIDS, astma, artritis, bronchitis, chronické obstruktivní choroby plic, psoriasis, alergické rhinitis, dermatitis nebo šoku u savců.
21. 3-Aryl-2-isoxazolin-5-hydroxamové kyseliny podle nároku 6 a jejich farmaceuticky vhodné soli jako léčiva pro léčení AIDS, astma, artritis, bronchitis, chronické obstruktivní choroby plic, psoriasis, alergické rhinitis, dermatitis nebo šoku u savců.