CN103958526A

CN103958526A - 嘧啶二胺类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用

Info

Publication number: CN103958526A
Application number: CN201380004071.2A
Authority: CN
Inventors: 杨方龙; 董庆; 范江; 王春飞; 王阳; 瞿键; 韩吉慧
Original assignee: Jiangsu Hengrui Medicine Co Ltd; Shanghai Hengrui Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Jiangsu Hengrui Medicine Co Ltd; Shanghai Hengrui Pharmaceutical Co Ltd; Shanghai Shengdi Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2012-06-20
Filing date: 2013-06-06
Publication date: 2014-07-30
Anticipated expiration: 2033-06-06
Also published as: CN103958526B; TW201400490A; WO2013189241A1

Abstract

一种通式(I)所示的嘧啶二胺类衍生物及其可药用的盐、含有其的药物组合物、其制备方法及其在医药上的应用。该化合物及其可药用的盐或包含其的药物组合物可用于制备Syk蛋白激酶抑制剂。

Description

嘧啶二胺类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用技术领域

本发明涉及一种新的嘧啶二胺类衍生物及其可药用的盐或含有其的药物组合物、及其制备方法。本发明进一步涉及所述嘧啶二胺衍生物及其可药用的盐或含有其的药物组合物在制备治疗剂，特别是 Syk抑制剂中的用途。背景技术

Syk最初从猪脾 cDNA克隆出来，其编码蛋白是一种非受体型酪氨酸激酶，故被称为脾酪氨酸激酶 (Spleen tyrosine kinase, Syk)。分子量约 72kDa 的 Syk 与 Zap70(C-chain-associated protein kinase of 70kDa)同属于 ZAP70/Syk酪氨酸激酶家族。 Syk主要表达于血液细胞中，另外还表达于血管内皮细胞、成纤维细胞、呼吸道上皮细胞、肝细胞和破骨细胞等。

Syk 蛋白含有一个相对保守的蛋白酪氨酸激酶区和两个串联的 SH2 (Src homology 2)结构域。 SH2主要介导胞质内多种信号蛋白的相互连接，形成蛋白质异聚体复合物，从而调节信号转导途径中的信号传递。连接 SH2结构域和激酶结构域的氨基酸区域 (interdomain B)含有许多酪氨酸残基，当这些酪氨酸残基被磷酸化后，能够充当多种蛋白的锚定位点，而这些蛋白可能是 Syk的作用底物。在一些典型的免疫受体包括 B细胞受体 (B-cell receptors, BCRs), FcRs (Fc Receptors, FcRs)和活化的自然杀伤细胞受体 (activating natural killer receptors)所引发的信号传导过程中， Syk主要通过 SH2结构域与受体上磷酸化的免疫受体酪氨酸活化基序 (immunoreceptor tyrosine -based activation motif, ITAM)相结合，弓 I发下游信号级联，发挥重要作用如影响 B细胞早期发育和活化，肥大细胞脱颗粒，中性粒细胞和巨噬细胞的吞噬功能，血小板活化。这些细胞功能异常无不与自身免疫性疾病和过敏性疾病相关。

FcRs (FcsRI, FcyRI, FcyRIIA, FcyRIIIA)是免疫细胞上常见的、功能活跃的受体之一。其中 FcyR和 FcsR分别能识别免疫球蛋白 IgG和 IgE的 Fc段。而 Syk是 FcyR和 FcsR信号传递中重要信号分子。巨噬细胞和中性粒细胞通过 FcRs被激活， ITAMs被上游的 Fc受体相关 Src家族激酶 (如 Lyn和 Lck)二磷酸化。 FcRs的活化导致 Syk通过自身 SH2(N)结构域与 Fc受体 γ链的 ΙΤΑΜ结合并被激活。随后活化的 Syk磷酸化许多下游底物如 Vav， LAT和 SLP-76。信号复合体的形成还引发许多下游信号通路的活化如 PLC亚型介导的钙动员和 PKC活化。这也激活了多种 MAPKs如 JNK和 ERK，从而导致脂类介质和细胞因子的产生。在破骨细胞中，免疫受体和 RANKL-RANK相互作用刺激 ITAM磷酸化，进而招募 Syk家族激酶，激活 ΡΙ γ和钙信号，这对 NFATcl的诱导至关重要。同时， NFATcl的诱导也依赖于 RANKL激活 c-Fos和 TRAF6。通过诱导免疫受体或其配体， RANKL亦可能促使 ITAM信号的有效传导。在 Β细胞中，经 Β细胞受体激活 Syk后，多种下游信号分子如 SLP-65被磷酸化，为一些重要蛋白质如 ΡΙ γ, Vav, Cbl和 Btk提供锚定位点，进而形成信号复合体，激活下游信号通路。

Syk作为免疫受体的关键介质在炎性细胞如 B细胞、肥大细胞、巨噬细胞中表达，这些免疫细胞上的受体与过敏性和抗体介导的自身免疫性疾病密切相关。因此将 Syk作为干预治疗靶点，为一些常规方法来说难治的疾病，包括风湿性关节炎、哮喘、过敏性鼻炎、淋巴瘤、白血病、恶性上皮肿瘤、肿瘤转移等提供新的治疗方法。

目前公开了一系列的 Syk 抑制剂的专利申请，其中包括 WO03063794、 US20040198750、 WO2006078846或 WO2011014795等。

至今一些制药公司仍在研究抑 Syk蛋白激酶的新化合物，以期待找到更安全有效的新型药物化合物，并通过单一用药或与其他药物联用来治疗癌症疾病。本发明设计具有通式（I )所示的结构的化合物，并发现具有此类结构的化合物表现出优异的效果和作用，尤其是作为 Syk蛋白激酶抑制剂在医药上的应用。发明内容

本发明的目的在于提供一种通式（ I )所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、及其混合物形式和其可药用的盐，以及代谢产物和代谢前体

( I )

其巾：

E选自 S、 0或 C;

Z为 C(R⁵R⁶);

A环， B环为芳基或杂芳基；

R¹选自氢原子、卤素、羟基、氰基、硝基、烷基、烷氧基、烯基、块基、环烷基、 -C(0)NR⁷R⁸、 -OR⁹、 -C(0)OR⁹、芳基或杂芳基；

R²、 R³ 或 R⁴各自独立地选自氢原子、卤素、氰基、硝基、羟基、烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、 -NR⁷R⁸、 -C(0)NR⁷R⁸ -NHS(0)_mR⁹ -OS(0)_mR⁹ -S(0)_mR⁹ -NHC(0)R⁹ -OR⁹、 -C(0)R⁹ -OC(0)R⁹或 -C(0)OR⁹，其中所述的烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基各自独立地任选进一步被一个或多个选自羟基、卤素、烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、 -NR⁷R⁸、 -C(0) NR⁷R -S(0)_mR⁹ -C(0)R⁹ -OC(0)R⁹或 -C(0)OR⁹的取代基所取代；

或者， R²和 R³形成环烷基或杂环基，其中所述的杂环基内含有一个或多个选 g N、 O或 S(0)_m的杂原子，并且所述杂环基任选进一步被一个或多个选自烷基、卤素、氰基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、 -NR⁷R⁸、 -C(0)NR⁷R⁸ -NHS(0)_mR⁹ -S(0)_mR⁹ -NHC(0)R⁹ -OR⁹、 -C(0)R⁹ -OC(0)R⁹或 -C(0)OR⁹的取代基所取代；

R⁵或 R⁶各自独立地选自氢原子、卤素、烷基、环烷基、羟基、烷氧基、芳基或杂芳基，其中所述的烷基、环烷基、芳基或杂芳基各自独立地任选进一步被一个或多个选自羟基、卤素、烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、 -NR⁷R⁸、 -C(0)NR⁷R⁸、 -NHS(0)_mR⁹、 -S(0)_mR⁹、 -NHC(0)R⁹、 -OR⁹、 -C(0)R⁹、 -OC(0)R⁹ 或 -C(0)OR⁹的取代基所取代；

或者， R⁵和 R⁶与其相连接的 C原子一起形成一个环烷基或杂环基，所述的环烷基或杂环基各自独立地任选进一步被一个或多个选自羟基、卤素、烷基、烷氧基、环烷基或杂环基的取代基所取代；

R⁷或 R⁸各自独立地选自氢原子、烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基，所述的氢原子、烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基各自独立地任选进一步被一个或多个选自羟基、卤素、烷基、烷氧基、环烷基或杂环基的取代基所取代；或者， R⁷和 R⁸与其相连接的 N原子一起形成一个 3〜8元杂环基，其中所述 3〜

8元杂环基内含有一个或多个 N、 0或 S(0)_m杂原子，并且所述 3〜8元杂环基任选进一步被一个或多个选自烷基、卤素、羟基、氨基、氰基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基的取代基所取代；

R⁹选自氢原子、烷基、氨基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基，所述的烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基各自独立地任选进一步被一个或多个选自烷基、卤素、羟基、氨基、氰基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基的取代基所取代；和

m为 0、 1或 2。

在本发明的一个实施方案中，所述的通式（I )所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、及其混合物形式、及其可药用的盐，其中 E为氧原子。

在本发明的一个实施方案中，所述的通式（I )所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、及其混合物形式、及其可药用的盐，其中环 B为芳基。

在本发明的一个实施方案中，所述的通式（I )所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、及其混合物形式、及其可药用的盐，其中环 B为苯基。

在本发明的又一个实施方案中，所述的通式（ I )所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、及其混合物形式、及其可药用的盐，其中环 R⁵、 R⁶为烷基。

在本发明的又一个实施方案中，所述的通式（ I )所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、及其混合物形式、及其可药用的盐，其中 R⁵或 R⁶各自独立地选自卤素或烷基。

在本发明的又一个实施方案中，所述的通式（ I )所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、及其混合物形式、及其可药用的盐，其中 R⁵或 R⁶各自独立为甲基。

在本发明的又一个实施方案中，所述的通式（ I )所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、及其混合物形式、及其可药用的盐， R⁵和 R⁶—起形成环烷基。

在本发明的又一个实施方案中，所述的通式（ I )所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、及其混合物形式、及其可药用的盐， R⁵和 R⁶—起形成环丙基。

在本发明的又一个实施方案中，所述的通式（ I )所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、及其混合物形式、及其可药用的盐，其中 R¹为卤素。

在本发明的又一个实施方案中，所述的通式（ I )所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、及其混合物形式、及其可药用的盐，其中 R²、 R³ 或 R⁴各自独立地选自氢原子、卤素、羟基、烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、 -NR⁷R⁸、 -C(0)NR⁷R⁸, -NHS(0)_mR⁹ -S(0)_mR⁹ -NHC(0)R⁹ -OR⁹、 -C(0)R⁹ -OC(0)R⁹或 -C(0)OR⁹，其中所述的烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基各自独立地任选进一步被一个或多个选自羟基、卤素、烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、 -NR⁷R⁸、 -C(0) NR⁷R⁸, -S(0)_mR⁹ -C(0)R⁹ -OC(0)R⁹或 -C(0)OR⁹的取代基所取代；

R⁷或 R⁸各自独立地选自氢原子或烷基；

m为 0、 1或 2。

在本发明的又一个实施方案中，所述的通式（ I )所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、及其混合物形式、及其可药用的盐，为通式 (Π) 所示的化合物或其互变异构体、内消旋体和外消旋体、对映异构体、非对映异构及其混合物形式、及其可药用的盐：

其中： Y为 N或 C原子； E、 Z、环8、 Ri〜R⁴的定义如通式（I) 中所定义。在本发明的又一个实施方案中，所述的通式（ I )所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、及其混合物形式、及其可药用的盐，为通式 (ΠΙ) 所示的化合物或其互变异构体、内消旋体和外消旋体、对映异构体、非对映盐：

其中： E、 Z、环。

在本发明的又一个实施方案中，所 I )所示的化合物或其互变异构

工

体、内消旋体、外消旋体、及其混合物形式、及其可药用的盐，为通式 (IV) 所示的化合物或其互变异构体、内消旋体和外消旋体、

工 z -π

对映异构体、非对映工工工。。、、

〇 0 〇 O_—

其中： E、 Z、环8、 Ri〜R⁴的定义如通式（I) 中所定义<

本发明的典型化合物包括，但不限于：

实施例编号化合物结构与命名

1

7-(5-氟 -2-(3,4,5-三甲氧基苯基氨基)嘧啶 -4-基氨基 )-3,3-二甲基 -2,3-二氢吡啶并 [3,2 ][1,4]氧氮杂环庚 -4(5/ί)-酮

2

7-(5-氟 -2-(3-氟 -4-吗啉 -苯基氨基)嘧啶 -4-基氨基 )-3，3-二甲基 -2,3-二氢吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚 -4(5H 酮

3

物形式、及其可药用的盐。

本发明还涉及一种通式 (I-A)所示的化合物，可作为合成通式（I) 化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、及其混合物形式的中间体：

(I-A )

其中： E选自 S、 0或 C;

Z为 C(R⁵R⁶);

环 A为芳基或杂芳基；

R¹选自氢原子、卤素、羟基、氰基、硝基、烷基、烷氧基、烯基、块基、环烷烷烷基基基、、、 ---CCC(((000)))NNNRRR⁷⁷⁷RRR⁸⁸⁸、、、 ---OOORRR⁹⁹⁹、、、 ---CCC(((000)))OOORRR⁹⁹⁹ 芳芳芳基基基或或或杂杂杂芳芳芳基基基；；；

RRR⁵⁵⁵或或或 RRR⁶⁶⁶各各各自自自独独独立立立地地地选选选自自自氢氢氢原原原子子子、、、卤卤卤素素素、、、烷烷烷基基基、、、环环环烷烷烷基基基、、、羟羟羟基基基、、、烷烷烷氧氧氧基基基、、、芳芳芳基基基或或或杂杂杂芳芳芳基基基，，，其其其中中中所所所述述述的的的烷烷烷基基基、、、环环环烷烷烷基基基、、、芳芳芳基基基或或或杂杂杂芳芳芳基基基各各各自自自独独独立立立地地地任任任选选选进进进一一一步步步被被被一一一个个个或或或多多多个个个选选选自自自羟羟羟基基基、、、卤卤卤素素素、、、烷烷烷基基基、、、环环环烷烷烷基基基、、、杂杂杂环环环基基基、、、芳芳芳基基基、、、杂杂杂芳芳芳基基基、、、 ---NNNRRR⁷⁷⁷RRR⁸⁸⁸、、、 ---CCC(((000)))NNNRRR⁷⁷⁷RRR⁸⁸⁸、、、 ---NNNHHHSSS(((000)))_mmmRRR⁹⁹⁹、、、 ---SSS(((000)))_mmmRRR⁹⁹⁹、、、 ---NNNHHHCCC(((000)))RRR⁹⁹⁹、、、 ---OOORRR⁹⁹⁹、、、 ---CCC(((000)))RRR⁹⁹⁹、、、 ---OOOCCC(((000)))RRR⁹⁹⁹ 或或或 ---CCC(((000)))OOORRR⁹⁹⁹的的的取取取代代代基基基所所所取取取代代代；；；

或或或者者者，，， RRR⁵⁵⁵和和和 RRR⁶⁶⁶与与与其其其相相相连连连接接接的的的 CCC原原原子子子一一一起起起形形形成成成一一一个个个环环环烷烷烷基基基或或或杂杂杂环环环基基基，，，所所所述述述的的的环环环烷烷烷基基基或或或杂杂杂环环环基基基各各各自自自独独独立立立地地地任任任选选选进进进一一一步步步被被被一一一个个个或或或多多多个个个选选选自自自羟羟羟基基基、、、卤卤卤素素素、、、烷烷烷基基基、、、烷烷烷氧氧氧基基基、、、环环环烷烷烷基基基或或或杂杂杂环环环基基基的的的取取取代代代基基基所所所取取取代代代；；；和和和

XXX为为为离离离去去去基基基团团团，，，优优优选选选为为为卤卤卤素素素。。。

在在在本本本发发发明明明的的的又又又一一一个个个实实实施施施方方方案案案中中中，，，所所所述述述通通通式式式（（（ III---AAA )))所所所示示示的的的化化化合合合物物物及及及其其其可可可药药药用用用的的的盐盐盐为为为通通通式式式 (((ΙΙΙΠΠΠ---ΑΑΑ)))及及及 (((IIIVVV---AAA)))所所所示示示的的的化化化合合合物物物及及及其其其可可可药药药用用用的的的盐盐盐：：：

(((III NNN---AAA))) (((IIIVVV---AAA)))

其其其中中中：：： ΕEΕ、、、 ΖZΖ、、、 XXX、、、 RRR¹¹¹的的的定定定义义义如如如通通通式式式（（（ΙIΙ---ΑAΑ )))中中中所所所述述述。。。

本本本发发发明明明进进进一一一步步步涉涉涉及及及一一一种种种制制制备备备所所所述述述的的的通通通式式式（（（III )))所所所示示示的的的化化化合合合物物物或或或其其其互互互变变变异异异构构构体体体、、、内内内消消消旋旋旋体体体、、、外外外消消消旋旋旋体体体、、、对对对映映映异异异构构构体体体、、、非非非对对对映映映异异异构构构体体体、、、及及及其其其混混混合合合物物物形形形式式式、、、及及及其其其可可可药药药用用用的的的盐盐盐的的的

通通式式 ((II--AA))化化合合物物和和通通式式 ((II--BB))化化合合物物在在溶溶剂剂中中，，酸酸性性条条件件下下加加热热进进行行反反应应，，得得到到通通式式（（II ))化化合合物物；；

其其中中：： XX为为离离去去基基团团，，优优选选为为卤卤素素；；其其中中 EE、、 ZZ、、环环、、环环^^ 11^^〜〜11 ⁴⁴的的定定义义如如通通式式（（II ))中中所所述述。。

在在本本发发明明的的另另一一个个方方面面，，提提供供一一种种药药物物组组合合物物，，所所述述药药物物组组合合物物含含有有治治疗疗有有效效量量的的所所述述的的通通式式（（II ))所所示示的的化化合合物物或或其其互互变变异异构构体体、、内内消消旋旋体体、、外外消消旋旋体体、、对对映映异异构构体体、、非非对对映映异异构构体体、、及及其其混混合合物物形形式式、、及及其其可可药药用用的的盐盐及及药药学学上上可可接接受受的的载载体体。。

在在本本发发明明的的另另一一个个方方面面，，还还涉涉及及通通式式（（II ))所所示示的的化化合合物物或或其其互互变变异异构构体体、、内内消消旋旋体体、、外外消消旋旋体体、、对对映映异异构构体体、、非非对对映映异异构构体体、、及及其其混混合合物物形形式式、、及及其其可可药药用用的的盐盐，，或或包包含含其其的的药药物物组组合合物物在在制制备备蛋蛋白白激激酶酶抑抑制制剂剂，，优优选选为为 SSyykk抑抑制制剂剂中中的的用用途途。。

在在本本发发明明的的另另一一个个方方面面，，还还涉涉及及一一种种调调节节蛋蛋白白激激酶酶催催化化活活性性的的方方法法，，其其中中包包括将所述的蛋白激酶与通式（I )所示的化合物或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、及其混合物形式、及其可药用的盐，或其药学上可接受的盐，或包含其的药物组合物接触的步骤。优选的，所述蛋白激酶选自受体酪氨酸激酶、非受体酪氨酸激酶或丝氨酸-苏氨酸激酶。

在本发明的另一个方面，还涉及通式（I )所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、及其混合物形式、及其可药用的盐，或包含其的药物组合物，其作为蛋白激酶抑制剂，优选为 Syk蛋白激酶抑制剂。

在本发明的另一个方面，还涉及通式（I )所示的化合物或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、及其混合物形式、及其可药用的盐，或包含其的药物组合物在制备治疗与蛋白激酶有关的疾病的药物中的用途。优选的，所述的与蛋白激酶有关的疾病为 Syk蛋白激酶有关的疾病，其选自恶性淋巴瘤、自身免疫性疾病、结疤、过敏性疾病、与组织破坏有关的疾病和与组织发炎有关的疾病。所述的自身免疫性疾病选自同种异体移植排斥、桥本甲状腺炎、自免疫溶血性贫血、自免疫恶性贫血的萎縮性胃炎、自免疫脑脊髓炎、自免疫睾丸炎、古德帕斯丘病、自免疫血小板减少症、交叉神经眼炎、肌肉衰弱症、格雷夫斯疾病、初级胆汁硬化、慢性侵略性肝炎、膜血管小球病和牵涉身体组织自免疫紊乱的自免疫疾病。所述牵涉身体组织自免疫紊乱的自免疫性疾病优选为全身红斑狼疮、风湿性关节炎、舍格伦综合症、赖特尔综合症、多肌炎-皮肌炎、身体组织硬化、多动脉炎、多样三角化、大类天疤疮和银屑病。所述的结疤选自硬皮病、增加纤维化、瘢瘤、手术后疤痕、肺纤维化、血管痉挛、偏头痛、再灌流伤害和后心肌梗塞。所述的与组织破坏有关的疾病选自慢性阻塞性肺病、心脏支气管炎和后心肌梗塞。所述的与组织发炎有关选自风湿性关节炎、过敏疾病、痉挛性结肠和炎性结肠疾病。

在本发明的另一个方面，还涉及一种治疗或预防哺乳动物与蛋白激酶有关的疾病的方法，包括对该哺乳动物施用治疗有效剂量的本发明的通式（I )所示的化合物或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、及其混合物形式、及其可药用的盐，或包含其的药物组合物。所述的与蛋白激酶有关的疾病优选为与 Syk蛋白激酶有关的疾病，其选自恶性淋巴瘤、自身免疫性疾病、结疤、过敏性疾病、与组织破坏有关的疾病和与组织发炎有关的疾病。所述的自身免疫性疾病优选为全身红斑狼疮、风湿性关节炎、舍格伦综合症、赖特尔综合症、多肌炎- 皮肌炎、身体组织硬化、多动脉炎、多样三角化、大类天疤疮和银屑病。所述的过敏性疾病优选为结膜炎、鼻炎、哮喘、特应性皮肤炎和食物过敏。所述的结疤选自硬皮病、增加纤维化、瘢瘤、手术后疤痕、肺纤维化、血管痉挛、偏头痛、再灌流伤害和后心肌梗塞。所述的与组织破坏有关的疾病选自慢性阻塞性肺病、心脏支气管炎和后心肌梗塞。所述的与组织发炎有关选自过敏疾病、痉挛性结肠和炎性结肠疾病。优选的，所述的哺乳动物是人。

本发明的另一方面涉及通式（I )所示的化合物或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、及其混合物形式、及其可药用的盐，或包含其的药物组合物，其作为治疗与蛋白激酶有关的疾病的药物。其中所述的与蛋白激酶有关的疾病优选为与 Syk蛋白激酶有关的疾病，其选自恶性淋巴瘤、自身免疫性疾病、结疤、过敏性疾病、与组织破坏有关的疾病和与组织发炎有关的疾病。所述的自身免疫性疾病优选为全身红斑狼疮、风湿性关节炎、舍格伦综合症、赖特尔综合症、多肌炎-皮肌炎、身体组织硬化、多动脉炎、多样三角化、大类天疤疮和银屑病。所述的过敏性疾病优选为结膜炎、鼻炎、哮喘、特应性皮肤炎和食物过敏。所述的结疤选自硬皮病、增加纤维化、瘢瘤、手术后疤痕、肺纤维化、血管痉挛、偏头痛、再灌流伤害和后心肌梗塞。所述的与组织破坏有关的疾病选自慢性阻塞性肺病、心脏支气管炎和后心肌梗塞。所述的与组织发炎有关选自过敏疾病、痉挛性结肠和炎性结肠疾病。

本发明的另一方面涉及一种抑制 Fc受体信号转导级联方法，其包含将具有 γ 同型二聚体的 Fc受体细胞，与有效抑制其信号转导级联的量的如通式（ I )所示的化合物或其互变异构体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、及其混合物形式、及其可药用的盐，或包含其的药物组合物接触的步骤。所述的 Fc受体选自 Fc a RI Fc y RI Fc γ R III禾口 Fc ε RI。

本发明涉及鉴别蛋白激酶催化活性的化合物，使表达该蛋白激酶的细胞与本发明化合物或盐接触，然后检测对细胞的效果。

本发明还涉及鉴别蛋白激酶催化活性的化合物，使人工重组合成激酶蛋白与本发明化合物或盐接触，然后用 Elisa方法检测对激酶活性的影响。

含活性成分的药物组合物可以是适用于口服的形式，例如片剂、糖锭剂、锭剂、水或油混悬液、可分散粉末或颗粒、乳液、硬或软胶囊，或糖浆剂或酏剂。可按照本领域任何已知制备药用组合物的方法制备口服组合物，此类组合物可含有一种或多种选自以下的成分：甜味剂、矫味剂、着色剂和防腐剂，以提供悦目和可口的药用制剂。片剂含有活性成分和用于混合的适宜制备片剂的无毒的可药用的赋形剂。这些赋形剂可以是惰性赋形剂，如碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；造粒剂和崩解剂，例如微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠、玉米淀粉或藻酸；粘合剂，例如淀粉、明胶、聚乙烯吡咯烷酮或阿拉伯胶；和润滑剂，例如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石粉。这些片剂可以不包衣或可通过掩盖药物的味道或在胃肠道中延迟崩解和吸收，因而在较长时间内提供缓释作用的已知技术将其包衣。例如，可使用水溶性味道掩蔽物质，例如羟丙基甲基纤维素或羟丙基纤维素，或延长时间物质例如乙基纤维素、醋酸丁酸纤维素。

也可用其中活性成分与惰性固体稀释剂例如碳酸钙、磷酸钙或高岭土混合的硬明胶胶囊，或其中活性成分与水溶性载体例如聚乙二醇或油溶媒例如花生油、液体石蜡或橄榄油混合的软明胶胶囊提供口服制剂。

水悬浮液含有活性物质和用于混合的适宜制备水悬浮液的赋形剂。此类赋形剂是悬浮剂，例如羧基甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮和阿拉伯胶；分散剂或湿润剂可以是天然产生的磷脂例如卵磷脂，或烯化氧与脂肪酸的縮合产物例如聚氧乙烯硬脂酸酯，或环氧乙烷与长链脂肪醇的縮合产物，例如十七碳亚乙基氧基鲸蜡醇 (heptadecaethyleneoxy cetanol), 或环氧乙烷与由脂肪酸和己糖醇衍生的部分酯的縮合产物，例如聚环氧乙烷山梨醇单油酸酯，或环氧乙烷与由脂肪酸和己糖醇酐衍生的偏酯的縮合产物，例如聚环氧乙烷脱水山梨醇单油酸酯。水混悬液也可以含有一种或多种防腐剂例如尼泊金乙酯或尼泊金正丙酯、一种或多种着色剂、一种或多种矫味剂和一种或多种甜味剂，例如蔗糖、糖精或阿司帕坦。

油混悬液可通过使活性成分悬浮于植物油如花生油、橄榄油、芝麻油或椰子油，或矿物油例如液体石蜡中配制而成。油悬浮液可含有增稠剂，例如蜂蜡、硬石蜡或鲸蜡醇。可加入上述的甜味剂和矫味剂，以提供可口的制剂。可通过加入抗氧化剂例如丁羟茴醚或 (X-生育酚保存这些组合物。

通过加入水可使适用于制备水混悬液的可分散粉末和颗粒提供活性成分和用于混合的分散剂或湿润剂、悬浮剂或一种或多种防腐剂。适宜的分散剂或湿润剂和悬浮剂可说明上述的例子。也可加入其他赋形剂例如甜味剂、矫味剂和着色剂。通过加入抗氧化剂例如抗坏血酸保存这些组合物。

本发明的药物组合物也可以是水包油乳剂的形式。油相可以是植物油例如橄榄油或花生油，或矿物油例如液体石蜡或其混合物。适宜的乳化剂可以是天然产生的磷脂，例如大豆卵磷脂和由脂肪酸和己糖醇酐衍生的酯或偏酯例如山梨坦单油酸酯，和所述偏酯和环氧乙烷的縮合产物，例如聚环氧乙烷山梨醇单油酸酯。乳剂也可以含有甜味剂、矫味剂、防腐剂和抗氧剂。可用甜味剂例如甘油、丙二醇、山梨醇或蔗糖配制糖浆和酏剂。此类制剂也可含有缓和剂、防腐剂、着色剂和抗氧剂。

药物组合物可以是无菌注射水溶液形式。可在使用的可接受的溶媒和溶剂中有水、林格氏液和等渗氯化钠溶液。无菌注射制剂可以是其中活性成分溶于油相的无菌注射水包油微乳。例如将活性成分溶于大豆油和卵磷脂的混合物中。然后将油溶液加入水和甘油的混合物中处理形成微乳。可通过局部大量注射，将注射液或微乳注入患者的血流中。或者，最好按可保持本发明化合物恒定循环浓度的方式给予溶液和微乳。为保持这种恒定浓度，可使用连续静脉内递药装置。这种装置的实例是 Deltec CADD-PLUS. TM. 5400型静脉注射泵。

药物组合物可以是用于肌内和皮下给药的无菌注射水或油混悬液的形式。可按已知技术，用上述那些适宜的分散剂或湿润剂和悬浮剂配制该混悬液。无菌注射制剂也可以是在无毒肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中制备的无菌注射溶液或混悬液，例如 1，3-丁二醇中制备的溶液。此外，可方便地用无菌固定油作为溶剂或悬浮介质。为此目的，可使用包括合成甘油单或二酯在内的任何调和固定油。此外，脂肪酸例如油酸也可以制备注射剂。

可按用于直肠给药的栓剂形式给予本发明化合物。可通过将药物与在普通温度下为固体但在直肠中为液体，因而在直肠中会溶化而释放药物的适宜的无刺激性赋形剂混合来制备这些药物组合物。此类物质包括可可脂、甘油明胶、氢化植物油、各种分子量的聚乙二醇和聚乙二醇的脂肪酸酯的混合物。

本领域技术人员所熟知的，药物的给药剂量依赖于多种因素，包括但并非限定以下因素：所用特定化合物的活性、病人的年龄、病人的体重、病人的健康状况、病人的表现、病人的饮食、给药时间、给药方式、排泄的速率、药物的组合等；另外，最佳的治疗方式如治疗的模式、通式化合物 (I)的日用量或可药用的盐的种类可以根据传统的治疗方案来验证。发明的详细说明

除非有相反陈述，否则下列用在说明书和权利要求书中的术语具有下述含义。

"烷基 "指饱和的脂族烃基团，包括 1至 20个碳原子的直链和支链基团。优选含有 1至 10个碳原子的烷基，更优选含有 1至 6个碳原子的烷基。非限制性实施例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、 1，1-二甲基丙基、 1，2-二甲基丙基、 2，2-二甲基丙基、 1-乙基丙基、 2-甲基丁基、 3-甲基丁基、正己基、 1-乙基 -2-甲基丙基、 1，1，2-三甲基丙基、 1，1-二甲基丁基、 1，2- 二甲基丁基、 2，2-二甲基丁基、 1，3-二甲基丁基、 2-乙基丁基、 2-甲基戊基、 3-甲基戊基、 4-甲基戊基、 2，3-二甲基丁基、正庚基、 2-甲基己基、 3-甲基己基、 4-甲基己基、 5-甲基己基、 2，3-二甲基戊基、 2，4-二甲基戊基、 2，2-二甲基戊基、 3，3-二甲基戊基、 2-乙基戊基、 3-乙基戊基、正辛基、 2，3-二甲基己基、 2，4-二甲基己基、 2，5- 二甲基己基、 2，2-二甲基己基、 3，3-二甲基己基、 4，4-二甲基己基、 2-乙基己基、 3- 乙基己基、 4-乙基己基、 2-甲基 -2-乙基戊基、 2-甲基 -3-乙基戊基、正壬基、 2-甲基 -2-乙基己基、 2-甲基 -3-乙基己基、 2，2-二乙基戊基、正癸基、 3，3-二乙基己基、 2，2- 二乙基己基，及其各种支链异构体等。更优选的是含有 1至 6个碳原子的低级烷基，非限制性实施例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、 1，1-二甲基丙基、 1，2-二甲基丙基、 2，2-二甲基丙基、 1-乙基丙基、 2-甲基丁基、 3-甲基丁基、正己基、 1-乙基 -2-甲基丙基、 1，1，2-三甲基丙基、 1，1-二甲基丁基、 1，2-二甲基丁基、 2，2-二甲基丁基、 1，3-二甲基丁基、 2-乙基丁基、 2-甲基戊基、 3-甲基戊基、 4-甲基戊基、 2，3-二甲基丁基等。烷基可以是取代的或未取代的，当被取代时，取代基可以在任何可使用的连接点上被取代，优选为一个或多个以下基团，独立地选自烷基、烯基、块基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氧代、 -NR⁷R⁸、 -C(O) NR⁷R⁸、 -S(0)_mR⁹ -OR⁹、 -C(0)R⁹、 -OC(0)R⁹或 -C(0)OR⁹。

"烯基 "指由至少两个碳原子和至少一个碳-碳双键组成的如上述定义的烷基。例如乙烯基、 1-丙烯基、 2-丙烯基、 1-， 2-或 3-丁烯基等。烯基可以是取代的或未取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，独立地选自烷基、烷氧基、卤素、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、 -NR⁷R⁸、 -S(0)_mR⁹, -S(0)_m NR⁷R⁸、 -OR⁹、 -C(0)R⁹、 -OC(0)R⁹或 -C(0)OR⁹。

"块基"指至少两个碳原子和至少一个碳-碳三键组成的如上所定义的烷基。例如乙块基、 1-丙块基、 2-丙块基、 1-， 2-或 3-丁块基等。块基可以是取代的或未取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，独立地选自烷基、烷氧基、卤素、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、 -NR⁷R⁸、 -C(O) NR⁷R⁸、 -S(0)_mR⁹、 -OR⁹、 -C(0)R⁹、 -OC(0)R⁹或 -C(0)OR⁹。

"环烷基"指饱和或部分不饱和单环或多环环状烃取代基，其包括 3至 20个碳原子，优选包括 3至 12个碳原子，更优选环烷基环包含 3至 10个碳原子。单环环烷基的非限制性实施例包含环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环己二烯基、环庚基、环庚三烯基、环辛基等。多环环烷基包括螺环、稠环和桥环的环烷基。

"螺环烷基"指 5至 20元，单环之间共用一个碳原子 (称螺原子)的多环基团，这些可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的 π 电子系统。优选为 6至 14元，更优选为 7至 10元。根据环与环之间共用螺原子的数目将螺环烷基分为单螺环烷基、双螺环烷基基或多螺环烷基，优选为单螺环烷基和双螺环烷基。更优选为 4元 /4元、 4元 /5元、 4元 /6元、 5元 /5元或 5元 /6元单螺环烷基。螺环烷基的非限制性

"稠环烷基"指 5至 20元，系统中的每个环与体系中的其他环共享毗邻的一对碳原子的全碳多环基团，其中一个或多个环可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的 π电子系统。优选为 6至 14元，更优选为 7至 10元。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环稠环烷基，优选为双环或三环，

"桥环烷基"指 5至 20元，任意两个环共用两个不直接连接的碳原子的全碳多环基团，这些可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的 π 电子系统。优选为 6至 14元，更优选为 7至 10元。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环桥环烷基，优选为双环、三环或四环，更有选为双环或三环。桥环烷基的非限制

所述环烷基环可以稠合于芳基、杂芳基或杂环基环上，其中与母体结构连接在一起的环为环烷基，非限制性实施例包括茚满基、四氢萘基、苯并环庚烷基等。环烷基可以是任选取代的或未取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，独立地选自烷基、烯基、块基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、 ^素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氧代、 -NR⁷R⁸、 -C(0) NR⁷R⁸、 -S(0)_mR⁹、 -OR⁹、 -C(0)R⁹、 -OC(0)R⁹或 -C(0)OR⁹。

"杂环基"指饱和或部分不饱和单环或多环环状烃取代基，其包括 3至 20个环原子，其中一个或多个环原子选自氮、氧或 S(0)_m (其中 m是整数 0至 2)的杂原子，但不包括 -0-0-、 -0-S-或 -S-S-的环部分，其余环原子为碳。优选包括 3至 12个环原子，其中 1〜4个是杂原子，更优选环烷基环包含 3至 8个环原子。

单环杂环基的非限制性实施例包含吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、高

多环杂环基包括螺环、稠环和桥环的杂环基。 "螺杂环基"指 5至 20元，单环之间共用一个原子 (称螺原子)的多环杂环基团，其中一个或多个环原子选自氮、氧或 S(0)_m (其中 m是整数 0至 2)的杂原子，其余环原子为碳。这些可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的 π电子系统。优选为 6至 14元，更优选为 7至 10元。根据环与环之间共用螺原子的数目将螺环烷基分为单螺杂环基、双螺杂环基或多螺杂环基，优选为单螺环烷基和双螺环烷基。更优选为 4元 /4元、 4 元 /5元、 4元 /6元、 5元 /5元或 5元 /6元单螺环烷基。螺环烷基的非限制性实施例包含

"稠杂环基"指 5至 20元，系统中的每个环与体系中的其他环共享毗邻的一对原子的多环杂环基团，一个或多个环可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的 π电子系统，其中一个或多个环原子选自氮、氧或 S(0)_m (其中 m是整数 0至 2)的杂原子，其余环原子为碳。优选为 6至 14元，更优选为 7至 10元。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环稠杂环基，优选为双环或三环，更优选为 5元 /5元或 5元 /6元双环稠杂环基。稠杂环基的非限制性实施例包含

"桥杂环基"指 5至 14元，任意两个环共用两个不直接连接的原子的多环杂环基团，这些可以含有一个或多个双键，但没有一个环具有完全共轭的 π电子系统，其中一个或多个环原子选自氮、氧或 S(0)_m (其中 m是整数 0至 2)的杂原子，其余环原子为碳。优选为 6至 14元，更优选为 7至 10元。 7至 10元。根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环桥环烷基，优选为双环、三环或四环，更有选为双环或三环。桥环烷基的非限制性实施例包含：

所述杂环基环可以稠合于芳基、杂芳基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为杂环基，施例包含：

等。杂环基可以是任选取代的或未取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，独立地选自烷基、烯基、块基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环浣氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、 -NR⁷R⁸、 -C(0) NR⁷R⁸、 -S(0)_mR⁹、 -OR⁹、 -C(0)R⁹、 -OC(0)R⁹或 -C(0)OR⁹。

"芳基 "指 6至 14元具有共轭的 π电子体系的全碳单环或稠合多环 (也就是共享毗邻碳原子对的环)基团，优选为 6至 10元，例如苯基和萘基。所述芳基环可以稠合于杂芳基、杂环基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为芳基环，非限制性实施例包含：

芳基可以是取代的或未取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，独立地选自烷基、烯基、块基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、 ^素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、 -NR⁷R⁸、 -C(O) NR⁷R⁸、 -S(0)_mR⁹、 -OR⁹、 -C(0)R⁹、 -OC(0)R⁹ 或 -C(0)OR⁹。

"杂芳基"指包含 1至 4个杂原子， 5至 14个环原子的杂芳族体系，其中杂原子包括氧、硫和氮。优选为 5至 10元。杂芳基优选为是 5元或 6元，例如呋喃基、噻吩基、吡啶基、吡唑基、吡咯基、 N-烷基吡咯基、嘧啶基、吡嗪基、咪唑基、四唑基等。所述杂芳基环可以稠合于芳基、杂环基或环烷基环上，其中与母体结一起的环为杂芳基环，非限制性实施例包含：

杂芳基可以是任选取代的或未取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，独立地选自烷基、烯基、块基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、 -NR⁷R⁸、 -C(0) NR⁷R⁸、 -S(0)_mR⁹、 -OR⁹、 -C(0)R⁹、 -OC(0)R⁹或 -C(0)OR⁹。

"烷氧基" 指 -o- (浣基)和 -o- (未取代的环烷基)，其中烷基、环烷基的定义如上所述。非限制性实施例包含甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、环丙氧基、环丁氧基、环戊氧基、环己氧基等。烷氧基可以是任选取代的或未取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，独立地选自为烷基、烯基、块基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、 -NR⁷R⁸、 -C(O) NR⁷R⁸、 -S(0)_mR⁹、 -OR⁹、 -C(0)R⁹、 -OC(0)R⁹或 -C(0)OR⁹。

"羟基 "指 -OH基团。

"羟烷基" 指 HO-(烷基)和 HO-(未取代的环烷基)，其中烷基、环烷基的定义如上所述。

"卤素"指氟、氯、溴或碘。

"氰基 "指 -CN。

"硝基 "指 -N0₂。

"节基 "指 -CH₂-苯基。

"氨基 "指 -NH₂。

"任选 "或"任选地 "意味着随后所描述地事件或环境可以但不必发生，该说明包括该事件或环境发生或不发生地场合。例如， "任选被烷基取代的杂环基团"意味着烷基可以但不必须存在，该说明包括杂环基团被烷基取代的情形和杂环基团不被烷基取代的情形。

"取代的"指基团中的一个或多个氢原子，优选为最多 5个，更优选为 1〜3个氢原子彼此独立地被相应数目的取代基取代。不言而喻，取代基仅处在它们的可能的化学位置，本领域技术人员能够在不付出过多努力的情况下确定 (通过实验或理论)可能或不可能的取代。例如，具有游离氢的氨基或羟基与具有不饱和 (如烯属) 键的碳原子结合时可能是不稳定的。

"药物组合物 "表示含有一种或多种本文所述化合物或其生理学 /可药用的盐或前体药物与其他化学组分的混合物，以及其他组分例如生理学 /可药用的载体和赋形剂。药物组合物的目的是促进对生物体的给药，利于活性成分的吸收进而发挥生物活性。

m和 R⁷〜R⁹的定义如通式（ I )化合物中所述。本发明化合物的合成方法

为了完成本发明的目的，本发明采用如下技术方案：

本发明通式（I )所述的化合物或其可药用的盐的制备方法，包括以下步骤:

(1-1) (I-2) (I-3)

(l-B) ( 将硝基取代的环 A丙酸酯 (1-1)化合物在溶液中，催化剂下还原为氨基取代的环 A 丙酸酯 (1-2)化合物，通式 (1-2)化合物在溶剂中，氢化钠下成环得到通式 (1-3) 化合物；通式 (1-3)化合物在溶剂中与卤素取代的嘧啶，加热下得到通式 (I-A)化合物，通式 (I-A)化合物和通式 (I-B)化合物在溶剂中，酸性条件下微波加热进行反应，得到通式 (I)化合物；

其中： X为离去基团，优选为卤素或磺酰氧基，更优选为卤素；其中 E、 Z、环、 B、 Ri〜R⁴的定义如通式（I) 中所定义。

(Π)所述的化合物或其可药用的盐的制备方法，包括以下步骤:

(II-A) (I-B) (II) 将硝基取代的芳基丙酸酯 (Π-1)化合物在溶液中，催化剂下还原为氨基取代的芳基丙酸酯 (Π-2)化合物，通式 (Π-2)化合物在溶剂中，氢化钠下成环得到通式 (Π-3) 化合物；通式 (Π-3)化合物在溶剂中与卤素取代的嘧啶，加热下得到通式 (Π-Α)化合物，通式 (Π-Α)化合物和通式 (I-B)化合物在溶剂中，酸性条件下微波加热进行反应，得到通式 (Π)化合物；

其中： X为离去基团，优选为卤素或磺酰氧基，更优选为卤素；其中 E、 Z、

Y，环 B， Ri〜R⁴的定义如通式（Π) 中所定义。

:

(Ι-Β)

将硝基取代的苯基丙酸酯 (ΠΙ-1)化合物在溶液中，催化剂下还原为氨基取代的苯基丙酸酯 (ΙΠ-2)化合物，通式 (ΠΙ-2)化合物在溶剂中，氢化钠下成环得到通式 (ΠΙ-3) 化合物；通式 (ΠΙ-3)化合物在溶剂中与卤素取代的嘧啶，加热下得到通式 (ΙΠ-Α)化合物，通式 (ΠΙ)化合物和通式 (I-B)化合物在溶剂中，酸性条件下微波加热进行反应，得到通式 (ΠΙ)化合物；

其中： X为离去基团，优选为卤素或磺酰氧基，更优选为卤素；其中 E、 Z、环^ Ri〜R⁴的定义如通式（III) 中所定义。

本发明通式 (IV)所述的化合物或其可药用的盐的制备方法，包括以下步骤：

(IV-A) (l-B) (IV) 将硝基取代的吡啶丙酸酯 (IV-1)化合物在溶液中，催化剂下还原为氨基取代的吡啶丙酸酯 (IV-2)化合物，通式 (IV-2)化合物在溶剂中，氢化钠下成环得到通式 (IV-3) 化合物；通式 (IV-3)化合物在溶剂中与卤素取代的嘧啶，加热下得到通式 (IV-A)化合物，通式 (IV-A)化合物和通式 (I-B)化合物在溶剂中，酸性条件下微波加热进行反应，得到通式 (IV)化合物；

其中： X为离去基团，优选为卤素或磺酰氧基，更优选为卤素；其中 E、 Z、环8、 Ri〜R⁴的定义如通式（IV) 中所定义。

上述的反应提供酸性条件包括有机酸和无机酸类，所述的无机酸类包括但不限于盐酸，硫酸，硝酸类强酸，优选为浓盐酸；

催化剂包括但不限于四-三苯基膦钯、三苯基膦、二氯化钯、醋酸钯、 1，1 '-双 (二苄基磷)二氯二戊铁钯、三 (二亚苄基丙酮)二钯、钯 /碳或兰尼镍。

所用溶剂包括但不限于：醋酸、甲醇、乙醇、乙腈、四氢呋喃、二氯甲烷、二甲基亚砜、 1，4-二氧六环、水、 N， N-二甲基乙酰胺或 N，N-二甲基甲酰胺，优选极性溶剂，更优选为乙醇；

所述微波加热的温度为 140-180°C，优选反应条件为 160°C。具体实施方式

以下结合实施例用于进一步描述本发明，但这些实施例并非限制着本发明的范围。

本发明实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照原料或商品制造厂商所建议的条件。未注明具体来源的试剂，为市场购买的常规试剂。

实施例化合物的结构是通过核磁共振 (NMR)或 /和质谱 (MS)来确定的。 NMR位移 (δ) 以 10—⁶ (ppm)的单位给出。 NMR的测定是用 Bruker AVANCE-400核磁仪，测定溶剂为氘代二甲基亚砜氘代氯仿 (CDC1₃)，氘代甲醇 (CD₃OD)，内标为四甲基硅烷 CTMS)。

MS的测定用 FINMGAN LCQAd (ESI)质谱仪 (生产商： Thermo, 型号： Finnigan

LCQ advantage MAX)。

HPLC的测定使用安捷伦 1200DAD高压液相色谱仪 (Sunfire C18 150x4.6mm色谱柱)和 Waters 2695-2996高压液相色谱仪 (Gimini C18 150x4.6mm色谱柱）。

激酶平均抑制率及 IC_5Q值的测定用 NovoStar酶标仪 (德国 BMG公司）。

薄层层析硅胶板使用烟台黄海 HSGF254或青岛 GF254硅胶板，薄层色谱法

(TLC)使用的硅胶板采用的规格是 0.15 mm〜0.2 mm, 薄层层析分离纯化产品采用的规格是 0.4 mm〜0.5 mm。

柱层析一般使用烟台黄海硅胶 200〜300目硅胶为载体。

本发明的已知的起始原料可以采用或按照本领域已知的方法来合成，或可购买自 ABCR GmbH & Co. KG, Acros Organics, Aldrich Chemical Company, 韶远化学科技 (Accela ChemBio Inc) 、达瑞化学品等公司。

实施例中无特殊说明，反应能够均在氩气氛或氮气氛下进行。

氩气氛或氮气氛是指反应瓶连接一个约 1L容积的氩气或氮气气球。

氢气氛是指反应瓶连接一个约 1L容积的氢气气球。

加压氢化反应使用 Parr 3916EKX 型氢化仪和清蓝 QL-500 型氢气发生器或

HC2-SS型氢化仪。

氢化反应通常抽真空，充入氢气，反复操作 3次。

微波反应使用 CEM Discover-S 908860型微波反应器。

实施例中无特殊说明，溶液是指水溶液。

实施例中无特殊说明，反应的温度为室温，为 20°C〜30°C。

实施例中的反应进程的监测采用薄层色谱法 (TLC)，反应所使用的展开剂的体系有： A: 二氯甲烷和甲醇体系， B: 正己烷和乙酸乙酯体系， C: 正己烷，乙酸乙酯和二氯甲烷， D:丙酮体系，溶剂的体积比根据化合物的极性不同而进行调节。

纯化化合物采用的柱层析的洗脱剂的体系和薄层色谱法的展开剂体系包括： A: 二氯甲烷和甲醇体系， B: 正己烷和乙酸乙酯体系， C: 正己烷，乙酸乙酯和二氯甲烷， D: 丙酮体系，溶剂的体积比根据化合物的极性不同而进行调节，也可以加入少量的三乙胺和醋酸等碱性或酸性试剂进行调节。实施例 1

7-(5-氟 -2-(3，4，5-三甲氧基苯基氨基)嘧啶 -4-基氨基 )-3，3-二甲基 -2,3-二氢吡啶并

[3，2-b][l，4]氧氮杂环庚 -4(5H 酮

第一步

3-羟基 -2，6-二硝基吡啶

将硝酸 (2.4 mL， 57.10 mmol)溶解于 5.6 mL醋酸酐中，冷却至 0°C，加入 3- 羟基 -2-硝基吡啶 la(2 g， 14.27 mmol), 升温至 20°C，搅拌反应 2小时。将反应液倒入冰水中，用乙酸乙酯萃取 (20 mLx3)，合并有机相，用饱和氯化钠溶液洗涤 (30 mL), 无水硫酸镁干燥，过滤，减压浓縮滤液，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系 A 纯化所得残余物，得到标题产物 3-羟基 -2,6-二硝基吡啶 lb(1.20 g，黄色固体)，产率： 46.0 %

MS m/z (ESI): 184.0 [M-l]

第二步

3-羟基 -2，2-二甲基丙酸甲酯

将 3-羟基 -2,2-二甲基丙酸 lc(10 g， 84.60 mmol)溶解于 50 mL甲醇中，加入 5 mL 浓硫酸，回流搅拌反应 5小时。减压浓縮反应液，加入 100 mL乙酸乙酯，依次用水 (20 mL)和饱和碳酸氢钠溶液 (20 mL)洗涤，再用水 (20 mL)洗涤，减压浓縮滤液，得到粗品标题产物 3-羟基 -2,2-二甲基丙酸甲酯 ld(5.50 g，无色油状物)，产物不经纯化直接进行下一步反应。

第三步

3-(2，6-二硝基吡啶 -3-基氧代 )-2，2-二甲基丙酸甲酯将 3-羟基 -2,6-二硝基吡啶 lb(300 mg， 1.62 mmol), 粗品 3-羟基 -2,2-二甲基丙酸甲酯 ld(222 mg， 1.80 mmol)和三苯基膦 (510 mg， 1.95 mmol)溶解于 10 mL二氧六环中，滴加入偶氮二甲酸二异丙酯 (0.4 mL， 1.95 mmol), 升温至 75 °C，搅拌反应 12小时。减压浓縮反应液，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系 B纯化所得残余物，得到标题产物 3-(2，6-二硝基吡啶 -3-基氧代 )-2，2-二甲基丙酸甲酯 le(480 mg，黄色固体)，产率： 100 %。 MS m/z (ESI): 317.1 [M+18]

第四步

3-(2，6-二氨基吡啶 -3-基氧代 )-2，2-二甲基丙酸甲酯将 3-(2，6-二硝基吡啶 -3-基氧代 )-2，2-二甲基丙酸甲酯 le(480 mg， 1.60 mmol) 溶于 10 mL甲醇中，加入钯 /碳 (200 mg， 10 %), 搅拌反应 4小时。过滤，减压浓縮滤液，得到粗品标题产物 3-(2，6-二氨基吡啶 -3-基氧代 )-2，2-二甲基丙酸甲酯 lf(300 mg, 褐色油状物)，产物不经纯化直接进行下一步反应。

MS m/z (ESI): 240.1 [M+l]

第五步

7-氨基 -3，3-二甲基 -2，3-二氢吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚 -4(5H 酮将粗品 3-(2，6-二氨基吡啶 -3-基氧代 )-2，2-二甲基丙酸甲酯 lf(300 mg， 1.25 mmol)溶于 5 mL二甲亚砜中，加入氢化钠 (60 mg， 1.50 mmol), 升温至 30°C，搅拌反应 12小时。加入 20 mL冰水，用乙酸乙酯萃取 (20 mLx3)，合并有机相，用水洗涤 (10 mL)，无水硫酸镁干燥，过滤，减压浓縮滤液，得到粗品标题产物 7-氨基 -3,3-二甲基 -2,3-二氢吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚 -4(5H 酮 lg(240 mg，黄色固体)，产物不经纯化直接进行下一步反应。

MS m/z (ESI): 208.2 [M+l]

第六步

7-(2-氯 -5-氟 -嘧啶 -4-基氨基 )-3，3-二甲基 -2，3-二氢吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚

-4(5H 酮

将粗品 7-氨基 -3,3-二甲基 -2,3-二氢吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚 -4(5H 酮 lg(240 mg， 1.16 mmol)和 2,6-二氯 -5-氟 -嘧啶 (212 mg， 1.27 mmol)溶解于 7 mL甲醇和水 (V/V = 1 : 1)混合溶剂中，升温至 70°C，搅拌反应 24小时。冷却至室温，过滤，用正己烷洗涤 (20 mLx3)，烘干，得到粗品标题产物 7-(2-氯 -5-氟 -嘧啶 -4-基氨基) -3,3-二甲基 -2,3-二氢吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚 -4C5H)-酮 lhClOO mg, 白色固体)，产物不经纯化直接进行下一步反应。

MS m/z (ESI): 338.1 [M+l]

第七步

7-(5-氟 -2-(3，4，5-三甲氧基苯基氨基)嘧啶 -4-基氨基 )-3，3-二甲基 -2，3-二氢吡啶并

[3，2-b][l，4]氧氮杂环庚 -4(5H 酮

将粗品 7-P-氯 -5-氟 -嘧啶 -4-基氨基 )-3，3-二甲基 -2,3-二氢吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚 -4(5H 酮 lh(100 mg， 0.30 mmol)和 3，4，5-三甲氧基苯胺 (110 mg， 0.60 mmol) 溶解于 1 mL乙醇中，加入 1滴浓盐酸， 160°C微波反应 1小时。加入 3 mL乙酸，减压浓縮反应液，加入 10 mL乙酸乙酯，过滤，减压浓縮滤液，用薄层色谱法以展开剂体系 A纯化所得残余物，得到标题产物 7-(5-氟 -2-(3，4，5-三甲氧基苯基氨基）嘧啶 -4-基氨基 )-3，3-二甲基 -2,3-二氢吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚 -4C5H)-酮 1(70 mg，灰色固体)，产率： 48.2 %。

MS m/z (ESI): 485.3 [M+l]

1H NMR (400 MHz, CDC1₃) δ 8.94 (s， 1H), 8.06 (s， 1H), 8.01 (s， 1H), 7.84 (d， 1H), 7.41 (s， 1H)， 7.31 (d, 1H), 6.82 (s, 2H), 3.98 (s, 2H), 3.84-3.82 (m， 9H)， 1.43 (s, 6H)。实施例 2

7 5-氟 -2- 3-氟 -4-吗啉 -苯基氨基)嘧啶 -4-基氨基 )-3，3-二甲基 -2，3-二氢吡啶并

3，2-b][l，4]氧氮杂环庚 -4(5H 酮

将 7-0氯 -5-氟 -嘧啶 -4-基氨基 )-3，3-二甲基 -2,3-二氢吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚 -4(5H 酮 lh(50 mg， 0.15 mmol)和 3-氟 -4-吗啉苯胺 2a(44 mg， 0.22 mmol)溶解于 1 mL乙醇中，加入 1滴浓盐酸， 160°C微波反应 1小时。加入 3 mL乙醇，过滤，用乙醇洗涤 (10 mLx2)，减压浓縮滤液，得到标题产物 7-(5-氟 -2-(3-氟 -4-吗啉 -苯基氨基)嘧啶 -4-基氨基 )-3，3-二甲基 -2,3-二氢吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚 -4(5H 酮 2(30 mg, 白色固体)，产率： 40 %。

MS m/z (ESI): 498.3 [M+l]

1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9.42 (s, 1H), 9.33 (s, 1H), 9.22 (s, 1H), 8.15 (1H, d), 7.65 (dd， 1H), 7.54-7.52 (d， 1H), 7.30 (d, 1H), 7.28 (dd， 1H), 6.91 (t， 1H), 4.05 (s, 2H), 3.73-3.70 (m， 4H)， 2.92 (m， 4H)， 1.20(s, 6H)。实施例 3

7-(5-氟 -2-(3，4，5-三甲氧基苯基氨基)嘧啶 -4-基氨基 )-2'H-螺环 [环丙基 -1，3'-吡啶并

-b][l，4]氧氮杂环庚] -4'(5'H 酮

第一步

1- (羟甲基)环丙基甲酸甲酯

将 1- (；甲氧基羰基)环丙基甲酸 3a(500 mg， 3.47 mmol, 采用公知的方法"专利 EP1577301"制备而得)溶解于 10 mL四氢呋喃中，加入三乙胺 (0.6 mL， 4.16 mmol), 冷却至 0°C，加入氯甲酸异丙酯 (521 mg， 3.82 mmol), 搅拌反应 1小时。加入硼氢化钠 (393 mg， 10.40 mmol)和 5 mL甲醇，搅拌反应 1小时。加入 15 mL水，滴加 1 M盐酸至反应液 pH为 5，用乙酸乙酯萃取 (20 mIX3)，合并有机相，用饱和氯化钠溶液洗涤 (30 mL)，无水硫酸镁干燥，过滤，减压浓縮滤液，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系 B纯化所得残余物，得到标题产物 1- (羟甲基)环丙基甲酸甲酯 3b(200 mg，无色油状物)，产率： 44.3 %。

第二步

1 -((2，6-二硝基吡啶 -3-基氧代)甲基)环丙基甲酸甲酯将 3-羟基 -2,6-二硝基吡啶 lbC300 mg， 1.62 mmol), 1- (；羟甲基)环丙基甲酸甲酯 3b(220 mg, 1.69 mmol)和三苯基膦 (503 mg， 1.92 mmol)溶解于 20 mL二氧六环中，滴加入偶氮二甲酸二异丙酯 388 mg， 1.92 mmol),升温至 75 °C，搅拌反应 12小时。减压浓縮反应液，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系 B纯化所得残余物，得到标题产物 1-((2，6-二硝基吡啶 -3-基氧代)甲基)环丙基甲酸甲酯 3c(200 mg，黄色油状物)，产率： 42.1 %。

第三步

1 -((2，6-二氨基吡啶 -3-基氧代)甲基)环丙基甲酸甲酯将 1-((2，6-二硝基吡啶 -3-基氧代）甲基)环丙基甲酸甲酯 3c(200 mg， 0.67 mmol) 溶于 10 mL甲醇中，加入钯 /碳 (lOO mg, 10 %), 搅拌反应 3小时。过滤，减压浓縮滤液，得到粗品标题产物 1-((2，6-二氨基吡啶 -3-基氧代)甲基)环丙基甲酸甲酯 3d(140 mg, 黄色油状物)，产物不经纯化直接进行下一步反应。

MS m/z (ESI): 238.1 [M+l]

第四步

7'-氨基 -2'H-螺环 [环丙基 -1，3'-吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚] -4'(5'H 酮将粗品 1-((2，6-二氨基吡啶 -3-基氧代)甲基)环丙基甲酸甲酯 3d(140 mg， 0.59 mmol)溶于 2 mL二甲亚砜中，加入氢化钠 (28 mg， 0.71 mmol), 升温至 75 °C，搅拌反应 3小时。加入 20 mL冰水，用乙酸乙酯萃取 (20 mIX3)，合并有机相，用水洗涤 (10 mL)，无水硫酸镁干燥，过滤，减压浓縮滤液，得到粗品标题产物 7'-氨基 -2'H-螺环 [环丙基 -1，3'-吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚] -4'(5'H 酮 3e(110 mg，黄色固体)，产物不经纯化直接进行下一步反应。

MS m/z (ESI): 206.1 [M+l]

第五步

7 2-氯 -5-氟嘧啶 -4-基氨基 )-2'H-螺环 [环丙基 -1，3'-吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚] -4'(5Ή 酮

将粗品 7-氨基 -2'H-螺环 [环丙基 -1，3'-吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚] -4'(5'H 酮 3e(110 mg， 0.54 mmol)和 2,6-二氯 -5-氟 -嘧啶 (98 mg， 0.59 mmol)溶解于 4 mL甲醇和水 (V/V = 1 : 1)混合溶剂中，升温至 75 °C，搅拌反应 12小时。冷却至室温，过滤，用正己烷洗涤 (20 mLx3),烘干，得到粗品标题产物 7-(2-氯 -5-氟嘧啶 -4-基氨基 )-2'H- 螺环 [环丙基 -1，3'-吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚] -4'C5'H 酮 3 50 mg，白色固体)，产物不经纯化直接进行下一步反应。

MS m/z (ESI): 336.0 [M+l]

第六步

[3，2-b][l，4]氧氮杂环庚] -4'(5Ή 酮

将粗品氯 -5-氟嘧啶 -4-基氨基 )-2'H-螺环 [环丙基 -1，3'-吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚] -4'(5'H 酮 3f(50 mg， 0.15 mmol)和 3，4，5-三甲氧基苯胺 (32 mg， 0.18 mmol) 溶解于 1 mL乙醇中，加入 1滴浓盐酸， 160°C微波反应 1小时。减压浓縮反应液，用薄层色谱法以展开剂体系 A纯化所得残余物，得到标题产物 7-(5-氟 -2-(3，4，5-三甲氧基苯基氨基)嘧啶 -4-基氨基 2'H-螺环 [环丙基 -1，3'-吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚] -4'(5'H 酮 3(30 mg，灰色固体)，产率： 42.3 %。

MS m/z (ESI): 481.2 [M-l]

1H NMR (400 MHz, CDC1₃) δ 8.21 (s, 1H)， 7.97 (s, 1H)， 7.90 (d， 1H)， 7.75 (s, 1H)，

7.29 (s, 2H)， 4.02 (s, 2H)， 3.85 (s, 3H), 3.83 (s, 6H)， 1.59-1.56 (m, 2H)， 1.05-1.00 (m,

2H)。实施例 4

5-(4-(3，3-二甲基 -4-羰基 -2，3，4，5-四氢吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚 -7-基氨基 )-5-氟嘧啶 -2-基氨基 )-2-甲基苯基磺酰胺

将 7-0氯 -5-氟 -嘧啶 -4-基氨基 )-3，3-二甲基 -2，3-二氢吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚 -4(5H 酮 lh(50 mg， 0.15 mmol)和 5-氨基 -2-甲基苯基磺酰胺 4a(41 mg， 0.22 mmol)溶解于 1 mL乙醇中，加入 1滴浓盐酸， 160°C微波反应 1小时。加入 3 mL 乙醇，过滤，用乙醇洗涤 (10 mLx2)，减压浓縮滤液，得到标题产物 5-(4- 3，3-二甲基 -4-羰基 -2，3，4，5-四氢吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚 -7-基氨基 )-5-氟嘧啶 -2-基氨基) -2-甲基苯基磺酰胺 4(35 mg，淡黄色固体)，产率： 47.9 %。

MS m/z (ESI): 488.2 [M+l]

1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9.51 (s, 1H), 9.40 (s, 1H), 9.09 (s, 1H), 8.13 (dd, 1H), 7.90 (dd, 1H)， 7.70(d, 1H)， 7.43 (d, 1H)， 7.43 (s, 1H)， 7.26 (s, 2H), 7.20 (d, 1H)， 4.04 (s, 2H), 2.50 (s, 3H), 1.20 (s, 6H)。实施例 5

7-(5-氟 -2-(3，4，5-三甲氧基苯基氨基)嘧啶 -4-基氨基 )-3，3-二甲基 -2，3-二氢苯并 [b][l，4]

₂_羟基 -5-硝基苯氨基甲酸叔丁酯

将 2-氨基 -4-硝基苯酚 5a(2 g， 13 mmol)和二碳酸二叔丁酯 (3.40 g， 15.60 mmol) 溶解于 30 mL乙醇中，加入胍盐酸盐 (186 mg， 1.98 mmol), 加热至 37°C，搅拌反应 12小时。减压浓縮反应液，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系 A纯化所得残余物，得到标题产物 2-羟基 -5-硝基苯氨基甲酸叔丁酯 5b(2.70 g，黄色固体)，产率： 81.8

%。

MS m/z (ESI): 253.1 [M-l]

第二步

3-(2- (叔丁氧基羰基氨基 )-4-硝基苯氧基) -2，2-二甲基丙酸甲酯将 2-羟基 -5-硝基苯氨基甲酸叔丁酯 5bC500 mg， 2 mmol), 3-羟基 -2,2-二甲基丙酸甲酯 ld(271 mg， 2.20 mmol)和三苯基膦 (630 mg， 2.40 mmol)溶解于 20 mL二氧六环中，滴加入偶氮二甲酸二异丙酯 (0.5 mL， 2.40 mmol), 升温至 70°C，搅拌反应 12小时。减压浓縮反应液，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系 B纯化所得残余物，得到标题产物 3-(2- (叔丁氧基羰基氨基 )-4-硝基苯氧基) -2,2-二甲基丙酸甲酯 5c(580 mg，黄色固体)，产率： 78.7 %。

MS m/z (ESI): 367.1 [M-l]

第三步

3-(2-氨基 -4-硝基苯氧基) -2，2-二甲基丙酸甲酯将 3-(2- (叔丁氧基羰基氨基 )-4-硝基苯氧基) -2,2-二甲基丙酸甲酯 5c(580 mg，

1.57 mmol)溶解于 20 mL二氯甲烷中，加入三氟乙酸 (1.2 mL， 15.70 mmol), 升温至 25 °C，搅拌反应 3小时。减压浓縮反应液，加入 20 mL乙酸乙酯，用饱和碳酸氢钠溶液 (20 mLx2)，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓縮滤液，得到粗品标题产物 3-(2-氨基 -4-硝基苯氧基) -2,2-二甲基丙酸甲酯 5d(421 mg，黄色固体)，产物不经纯化直接进行下一步反应。

MS m/z (ESI): 269.1 [M+l]

第四步

3，3-二甲基 -7-硝基 -2，3-二氢苯并 [b][l，4]氧氮杂环庚 -4(5H 酮将粗品 3-(2-氨基 -4-硝基苯氧基) -2,2-二甲基丙酸甲酯 5d(420 mg， 1.57 mmol) 溶于 10 mL二甲亚砜中，加入氢化钠 (75 mg， 1.88 mmol), 升温至 25 °C，搅拌反应 12小时。加入 20 mL冰水，过滤，用水洗涤 (20 mLx2)，烘干，得到粗品标题产物 3，3-二甲基 -7-硝基 -2,3-二氢苯并 [b][l，4]氧氮杂环庚 -4C5H)-酮 5eC370 mg，类白色固体)，产物不经纯化直接进行下一步反应。

MS m/z (ESI): 237.1 [M+l]

第五步

7-氨基 -3，3-二甲基 -2，3-二氢苯并 [b][l，4]氧氮杂环庚 -4(5H 酮将粗品 3，3-二甲基 -7-硝基 -2,3-二氢苯并 [b][l，4]氧氮杂环庚 -4(5H 酮 5φ70 mg， 1.57 mmol)溶于 30 mL甲醇和乙酸乙酯 (V/V = 1 : 1)混合溶剂中，加入钯 /碳 (180 mg， 10 %),搅拌反应 3小时。过滤，减压浓縮滤液，得到粗品标题产物 7-氨基 -3,3- 二甲基 -2,3-二氢苯并 [b][l，4]氧氮杂环庚 -4C5H)-酮 5fC370 mg，类白色固体)，产物不经纯化直接进行下一步反应。 MS m/z (ESI): 207.2 [M+l]

第六步

氯 -5-氟嘧啶 -4-基氨基 )-3，3-二甲基 -2，3-二氢苯并 [b][l，4]氧氮杂环庚 -4(5H 酮将粗品 7-氨基 -3,3-二甲基 -2,3-二氢苯并 [b][l，4]氧氮杂环庚 -4(5H 酮 5f(320 mg， 1.55 mmol)禾卩 2,6-二氯 -5-氟 -嘧啶 (285 mg， 17 mmol)溶解于 10 mL甲醇和水 (V/V = 1 : 1)混合溶剂中，升温至 75 V，搅拌反应 12小时。冷却至室温，过滤，用正己烷洗涤 (20 mLx3), 烘干滤饼，得到粗品标题产物 7-(2-氯 -5-氟嘧啶 -4-基氨基 )-3，3- 二甲基 -2,3-二氢苯并 [b][l，4]氧氮杂环庚 -4C5H)-酮 5gC320 mg，灰色固体)，产物不经纯化直接进行下一步反应。

MS m/z (ESI): 337.1 [M+l]

第七步

7-(5-氟 -2-(3，4，5-三甲氧基苯基氨基)嘧啶 -4-基氨基 )-3，3-二甲基 -2，3-二氢苯并 [b][l，4] 氧氮杂环庚 -4(5H 酮

将粗品 7-P-氯 -5-氟嘧啶 -4-基氨基 )-3，3-二甲基 -2,3-二氢苯并 [b][l，4]氧氮杂环庚 -4(5H 酮 5g(50 mg， 0.15 mmol)和 3，4，5-三甲氧基苯胺 (41 mg， 0.23 mmol)溶解于 1 mL乙醇中，加入 1滴浓盐酸， 160°C微波反应 1小时。减压浓縮反应液，用薄层色谱法以展开剂体系 A纯化所得残余物，得到标题产物 7-(5-氟 -2-(3，4，5-三甲氧基苯基氨基)嘧啶 -4-基氨基 )-3，3-二甲基 -2,3-二氢苯并 [b][l，4]氧氮杂环庚 -4(5H 酮 5(30 mg，白色固体)，产率： 41.4 %。

MS m/z (ESI): 484.3 [M+l]

1H NMR (400 MHz, CDC1₃) δ 8.20 (s， 1H), 7.99 (s， 1H), 7.77 (s， 1H), 7.20 (s， 1H), 7.05 (d, 1H)， 6.94 (d, 1H), 6.90 (s， 2H), 6.73 (s， 1H), 3.96 (s， 2H), 3.82 (s， 3H), 3.79(s, 6H)，实施例 6

N-(3-(4-(3，3-二甲基 -4-羰基 -2，3，4，5-四氢吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚 -7-基氨基) - 氟嘧啶 -2-基氨基 )-5-甲基苯基)环丙基甲酰胺

第一步

ΛΚ3-氨基 -5-甲基苯基)环丙基甲酰胺将 5-甲苯 -i，3-二氨基 6a(244 mg， 2 mmol,采用公知的方法"专利 CN1272308C" 制备而得)溶解于 10 mL二氯甲烷中，加入三乙胺 (0.3 mL， 2 mmol)降温至 0°C，加入 10 mL环丙基甲酰氯 (210 mg， 2 mmol)的二氯甲烷溶液，缓慢升至室温，搅拌反应 12小时。加入 10 mL水，分液，有机相用水洗涤 (10 mLx l)，无水硫酸镁干燥，减压浓縮滤液，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系 B纯化所得残余物，得到标题产物 ΛΚ3-氨基 -5-甲基苯基)环丙基甲酰胺 6b(160 mg，黄色固体)，产率： 42.0 %。

MS m/z (ESI): 191.2 [M+l]

第二步

N-(3-(4-(3，3-二甲基 -4-羰基 -2，3，4，5-四氢吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚 -7-基氨基 )-5- 氟嘧啶 -2-基氨基 )-5-甲基苯基)环丙基甲酰胺将 7-0氯 -5-氟 -嘧啶 -4-基氨基 )-3，3-二甲基 -2,3-二氢吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚 -4(5H 酮 lh(50 mg， 0.15 mmol)和 N-(3-氨基 -5-甲基苯基)环丙基甲酰胺 6b(42 mg， 0.22 mmol)溶解于 2 mL异丙醇中，加入 1滴三氟乙酸， 150°C微波反应 1小时。减压浓縮反应液，用薄层色谱法以展开剂体系 A纯化所得残余物，得到标题产物 N-(3-(4-(3，3-二甲基 -4-羰基 -2，3，4，5-四氢吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚 -7-基氨基) -5-氟嘧啶 -2-基氨基 )-5-甲基苯基)环丙基甲酰胺 6(50 mg，淡黄色固体)，产率： 68.5 %。

MS m/z (ESI): 492.3 [M+l]

1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.00 (s, 1H), 9.40 (s, 1H), 9.23 (s, 1H), 8.95 (d, 1H), 8.12 (dd， 1H), 7.78 (d， 1H), 7.59 (s， 1H), 7.37 (t， 1H), 7.19 (s， 1H), 7.03 (s， 1H), 4.01 (d， 2H), 2.19 (s， 3H), 1.86-1.69 (m， 1H), 1.32-1.08 (m， 6H)， 0.85-0.62 (m， 4H)。实施例 7

N-(3-(4-(3，3-二甲基 -4-羰基 -2，3，4，5-四氢吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚 -7-基氨基 )-5- 氟嘧啶 -2-基氨基 )-5-甲基苯基)乙酰胺

将 7-0氯 -5-氟 -嘧啶 -4-基氨基 )-3，3-二甲基 -2,3-二氢吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚 -4(5H)-酮 lh(50 mg，0.15 mmol)和 N-(3-氨基 -5-甲基苯基)乙酰胺 7a(42 mg, 0.22 mmol,采用公知的方法"文献 Tetrahedron Letters, 49(10), 1660-1664; 2008"制备而得) 溶解于 1 mL异丙醇中，加入 1滴三氟乙酸， 150°C微波反应 1小时。减压浓縮反应液，用薄层色谱法以展开剂体系 A纯化所得残余物，得到标题产物 N-(3-(4-(3，3- 二甲基 -4-羰基 -2，3，4，5-四氢吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚 -7-基氨基 )-5-氟嘧啶 -2-基氨基) -5-甲基苯基)乙酰胺 7(40 mg，淡黄色固体)，产率： 57.1 %。

MS m/z (ESI): 466.3 [M+l]

1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9.73 (s, 1H), 9.41 (s, 1H), 9.30-9.14 (m, 1H), 9.03 (s, 1H)， 8.14 (d， 1H), 7.78 (d， 1H), 7.57 (s， 1H), 7.36 (d， 1H), 7.22 (s， 1H), 7.01 (s， 1H)， 4.03 (s, 2H), 2.20 (s, 3H), 2.05-1.91 (m， 3H), 1.21 (d, 6H)。实施例 8

7-(5-氯 -2-(3，4，5-三甲氧基苯基氨基)嘧啶 -4-基氨基 )-3，3-二甲基 -2，3-二氢吡啶并

-b][l，4]氧氮杂环庚 -4(5H 酮

第一步

7-(2，5-二氯 -嘧啶 -4-基氨基 )-3，3-二甲基 -2,3-二氢吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚

-4(5H 酮

将粗品 7-氨基 -3,3-二甲基 -2,3-二氢吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚 -4(5H 酮 lg(100 mg， 0.48 mmol)和 2，5，6-三氯 -嘧啶 8a(106 mg， 0.58 mmol)溶解于 4 mL甲醇和水 (V/V = 1 : 1)混合溶剂中，升温至 70°C，搅拌反应 12小时。冷却至室温，过滤，用正己烷洗涤 (20 mLx3) , 再用正己烷和乙酸乙酯 (V/V = 2: 1)混合溶剂洗涤 (10 mLx3), 烘干滤饼，得到粗品标题产物 7-(2，5-二氯 -嘧啶 -4-基氨基 )-3，3-二甲基 -2,3- 二氢吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚 -4(5H 酮 8b(90 mg，白色固体)，产物不经纯化直接进行下一步反应。

MS m/z (ESI): 354.1 [M+l]

第二步

[3，2-b][l，4]氧氮杂环庚 -4(5H 酮

将粗品 7-(2，5-二氯 -嘧啶 -4-基氨基 )-3，3-二甲基 -2,3-二氢吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚 -4(5H 酮 8b(90 mg， 0.25 mmol)和 3，4，5-三甲氧基苯胺 (70 mg， 0.38 mmol) 溶解于 2 mL异丙醇中，加入 1滴三氟乙酸， 150°C微波反应 1小时。减压浓縮反应液，加入 5 mL乙酸乙酯，过滤，用乙酸乙酯洗涤 (10 mLx3)，减压浓縮滤液，得到标题产物 7-(5-氯 -2-C3，4，5-三甲氧基苯基氨基)嘧啶 -4-基氨基 )-3，3-二甲基 -2,3- 二氢吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚 -4(5H 酮 8(80 mg，白色固体产率： 62.9 %。 MS m/z (ESI): 501.3 [M+l]

1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9.75 (s, 1H), 9.34 (s, 1H), 8.22 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.37 (d， 1H), 7.02 (s, 2H), 4.04 (s, 2H), 3.70 (t， 9H)， 1.23-1.12 (m， 6H)。实施例 9

2-(3-(4-(3，3-二甲基 -4-羰基 -2，3，4，5-四氢吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚 -7-基氨基 -5-氟嘧啶 -2-基氨基 )-5-甲基苯氧基) 甲基乙酰胺

第三步

3-羟基 -5-甲基苯基氨基甲酸叔丁酯

将 3-羟基 -5-甲基苯胺 9a(1.23 g， 10 mmol)和二碳酸二叔丁酯 (2.38 g， 11 mmol) 溶解于 10 mL四氢呋喃中，升温至 60°C，搅拌反应 3小时，降温至 25 °C，搅拌反应 12小时。减压浓縮反应液，加入 30 mL乙酸乙酯，依次用硫酸氢钾 (5 mLx2)，水 (5 mLx l)，饱和食盐水洗涤 (5 mLx l)，无水硫酸镁干燥，过滤，减压浓縮滤液，得到粗品标题产物 3-羟基 -5-甲基苯基氨基甲酸叔丁酯 9b(2.60 g，紫色粘稠物)，产物不经纯化直接进行下一步反应。

MS m/z (ESI): 222.1 [M-l]

第二步

3-甲 ¾-5-(2-(甲氨基) -2-羰基乙氧基)苯基氨基甲酸叔丁酯

将粗品 3-羟基 -5-甲基苯基氨基甲酸叔丁酯 9b(1.30 g， 5 mmol), 2-溴甲基乙酰胺 C830 mg， 5.50 mmol), 碳酸钾 (1.38 g， 10 mmol)溶解于 20 mL丙酮中，回流搅拌反应 2小时，降温至 50°C，搅拌反应 12小时。过滤，减压浓縮滤液，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系 B纯化所得残余物，得到标题产物 3-甲基 -5-(2- (甲氨基) -2- 羰基乙氧基)苯基氨基甲酸叔丁酯 9c(1.10 g，红色固体)，产率： 74.8 %。

MS m/z (ESI): 223.2 [M+l]

第三步

2-(3-氨基 -5-甲基苯氧基) -N-甲基乙酰胺

将 3-甲基 -5-(2- (甲氨基) -2-羰基乙氧基)苯基氨基甲酸叔丁酯 9c(600 mg， 2 mmol)溶解于 5 mL二氯甲烷中，加入三氟乙酸 (2 mL， 3 mmol), 搅拌反应 2小时。减压浓縮反应液，加入 30 mL乙酸乙酯，饱和碳酸氢钠溶液洗涤 (10 mLx2)，无水硫酸镁干燥，过滤，减压浓縮滤液，得到粗品标题产物 2-(3-氨基 -5-甲基苯氧基) 甲基乙酰胺 9d(400 mg，红色固体)，产物不经纯化直接进行下一步反应。

MS m/z (ESI): 195.1 [M+l]

第四步

2-(3-(4-(3，3-二甲基 -4-羰基 -2，3，4，5-四氢吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚 -7-基氨基) -5-氟嘧啶 -2-基氨基 )-5-甲基苯氧基) 甲基乙酰胺将 7-0氯 -5-氟 -嘧啶 -4-基氨基 )-3，3-二甲基 -2,3-二氢吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚 -4(5H)-酮 lh(34 mg， 0.10 mmol)和粗品 2-(3-氨基 -5-甲基苯氧基) 甲基乙酰胺 9d(20 mg， 0.10 mmol)溶解于 1 mL异丙醇中，加入 1滴三氟乙酸， 150°C微波反应 1小时。减压浓縮反应液，用薄层色谱法以展开剂体系 A纯化所得残余物，得到标题产物 2-(3-(4-(3，3-二甲基-4-羰基-2，3，4，5-四氢吡啶并[3，2- [1，4]氧氮杂环庚 -7-基氨基 )-5-氟嘧啶 -2-基氨基 )-5-甲基苯氧基) 甲基乙酰胺 9(20 mg，淡黄色固体)，产率： 40.0 %。

MS m/z (ESI): 496.3 [M+l]

1H NMR (400 MHz, CDC1₃) δ 9.45(s， 1H), 9.36(s, 1H), 9.27(s, 1H), 8.18(d， 1H), 7.96(d 1H), 7.69(d, 1H), 7.42(d, 1H), 7.11(s, 2H), 6.37(s, 1H), 4.35(s, 2H), 4.03(s, 2H), 2.65(d, 3H), 2.20(s, 3H), 1.19(s, 6H)。实施例 10

dN- H4-(3，3-二甲基 -4-羰基 -2，3，4，5-四氢吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚 -7- 基氨基 )-5- -2-基氨基 )-5-甲基苯基) -2-羟基丙酰胺

第一步

3-氨基 -5-甲基苯基氨基甲酸叔丁酯

将 5-甲苯 -1,3-二氨基 6a(500 mg， 4.10 mmol)和三乙胺 (0.6 mL， 4.10 mmol)溶解于 15 mL甲醇中，降温至 0°C，加入 10 mL二碳酸二叔丁酯 (900 mg， 4.10 mmol) 的甲醇溶液，搅拌反应 2小时。减压浓縮反应液，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系 B 纯化所得残余物，得到标题产物 3-氨基 -5-甲基苯基氨基甲酸叔丁酯 10a(560 mg，黄色固体)，产率： 61.5 %。

MS m/z (ESI): 223.2 [M+l]

第二步

2-羟基丙酸（ -1-(3- (叔丁氧基羰基氨基 )-5-甲基苯基氨基 )-1-羰基丙烷 -2-基酯将 3-氨基 -5-甲基苯基氨基甲酸叔丁酯 10a(100 mg， 0.45 mmol), ( -2-羟基- 丙酸 (49 mg， 0.54 mmol), 双 (2-氧代 -3-恶唑烷基)次磷酰氯 (138 mg， 0.54 mmol)和三乙胺 (0.1 mL， 0.68 mmol)溶解于 5 mL二氯甲烷中，升温至 30°C，搅拌反应 12 小时。加入 15 mL二氯甲烷，用水洗涤 C10 mIX3)，无水硫酸镁干燥，过滤，减压浓縮滤液，得到粗品标题产物 2-羟基丙酸（ -1-(3- (叔丁氧基羰基氨基 )-5-甲基苯基氨基) -1-羰基丙烷 -2-基酯 10b(132 mg，白色固体)，产物不经纯化直接进行下一步反应。

MS m/z (ESI): 365.1 [M-l]

第三步

( -3-(2-羟基丙酰胺基 )-5-甲基苯基氨基甲酸叔丁酯

将粗品 2-羟基丙酸（ -1-(3- (叔丁氧基羰基氨基 )-5-甲基苯基氨基 )-1-羰基丙浣 -2-基酯 10bC165 mg， 0.45 mmol)溶解于 5 mL甲醇中，加入 0.5 M氢氧化钠溶液，搅拌反应 2小时。减压浓縮反应液，加入 10 mL水，用乙酸乙酯萃取 (20 mLx3)，合并有机相，无水硫酸镁干燥，过滤，减压浓縮滤液，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系 B纯化所得残余物，得到标题产物 ( -3-(2-羟基丙酰胺基 )-5-甲基苯基氨基甲酸叔丁酯 10cC90 mg，白色固体)，产率： 68.2 %。

MS m/z (ESI): 293.2 [M-l]

第四步

)-ΛΚ3-氨基 -5-甲基苯基) -2-羟基丙酰胺

将羟基丙酰胺基 )-5-甲基苯基氨基甲酸叔丁酯 10c(90 mg， 0.30 mmol) 溶解于 4 mL二氯甲烷中，加入三氟乙酸 (0.2 mL， 0.30 mmol), 搅拌反应 4小时。加入 10 mL二氯甲烷，再加入 10 mL饱和碳酸钠溶液，分液，水相用乙酸乙酯萃取 (20 mLx3)，合并有机相，无水硫酸镁干燥，过滤，减压浓縮滤液，得到粗品标题产物 ( - N-(3-氨基 -5-甲基苯基) -2-羟基丙酰胺 10d(50 mg，棕色油状物)，产率： 5 86.2 %。

MS m/z (ESI): 195.2 [M+l]

第五步

( -4-羰基 -2，3，4，5-四氢吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚 -7-基氨基) -5-氟嘧啶 -2-基氨基 )-5-甲基苯基) -2-羟基丙酰胺

10 将 7-(2-氯 -5-氟 -嘧啶 -4-基氨基 )-3，3-二甲基 -2,3-二氢吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚 -4(5H)-酮 lh(50 mg， 0.15 mmol)和 ( -N-(3-氨基 -5-甲基苯基) -2-羟基丙酰胺 10d(44 mg， 0.23 mmol)溶解于 2 mL异丙醇中，加入 1滴三氟乙酸， 180°C微波反应 1小时。减压浓縮反应液，用薄层色谱法以展开剂体系 A纯化所得残余物，得到标题产物 dN- H4-(3，3-二甲基 -4-羰基 -2，3，4，5-四氢吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环

15 庚 -7-基氨基 )-5-氟嘧啶 -2-基氨基 )-5-甲基苯基) -2-羟基丙酰胺 10(40 mg，淡黄色固体)，产率： 53.8 %。

MS m/z (ESI): 496.3 [M+l]

1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9.47 (s， 1H), 9.34 (s， 1H), 9.24 (s， 1H), 9.10 (s， 1H)， 8.15 (d, 1H), 7.80 (d， 1H), 7.67 (s， 1H), 7.37 (d， 1H), 7.25 (s， 1H), 7.09 (s， 1H), 5.69 (d， 20 1H), 4.03 (s， 2H), 2.22 (s， 3H), 2.11 (s， 1H), 1.37-1.28 (m， 3H), 1.20 (s， 6H)。实施例 11

N- H4-(3，3-二甲基 -4-羰基 -2，3，4，5-四氢吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚 -7-基氨基) -5- -2-基氨基 5-甲基苯基 2-羟基乙酰胺

厶 J

第一步

3-(2-羟基乙酰胺基 )-5-甲基苯基氨基甲酸叔丁酉将 3-氨基 -5-甲基苯基氨基甲酸叔丁酯 10a(100 mg, 0.45 mmol), 2-羟基 -乙酸 (34 mg, 0.45 mmol), 1-乙基 -3-(3-二甲胺丙基)碳二亚胺盐酸盐 (86 mg， 0.45 mmol) 禾口 1-羟基苯并三唑 (61 mg, 0.45 mmol)溶解于 5 mL四氢呋喃中，加入 Ν,Ν-二异丙基乙胺 (0.2 mL， 0.90 mmol), 升温至 30°C，搅拌反应 12小时。加入 15 mL水，水相用乙酸乙酯萃取 (20 mLx3)，合并有机相，无水硫酸镁干燥，过滤，减压浓縮滤液，用硅胶柱色谱法以洗脱剂体系 B纯化所得残余物，得到标题产物 3-(2-羟基乙酰胺基 )-5-甲基苯基氨基甲酸叔丁酯 lla(45 mg，白色固体)，产率： 35.7 %。

MS m/z (ESI): 279.1 [M-l]

第二步

N-(3-氨基 -5-甲基苯基) -2-羟基乙酰胺

将 3-(2-羟基乙酰胺基 )-5-甲基苯基氨基甲酸叔丁酯 lla(45 mg, 0.16 mmol)溶解于 2 mL二氯甲烷中，加入三氟乙酸 (0.1 mL， 1.6 mmol), 搅拌反应 4小时。加入 10 mL二氯甲烷，再加入 10 mL饱和碳酸钠溶液，分液，水相用乙酸乙酯萃取 (20 mLx3), 合并有机相，无水硫酸镁干燥，过滤，减压浓縮滤液，得到粗品标题产物 ΛΚ3-氨基 -5-甲基苯基) -2-羟基乙酰胺 llb(29 mg, 棕色油状物)，产率： 86.2 %。

MS m/z (ESI): 181.1 [M+l]

第三步

N- H4-(3，3-二甲基 -4-羰基 -2，3，4，5-四氢吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚 -7-基氨基) -5-氟嘧啶 -2-基氨基 5-甲基苯基 2-羟基乙酰胺将 7-0氯 -5-氟 -嘧啶 -4-基氨基 )-3，3-二甲基 -2,3-二氢吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚 -4(5H)-酮 lh(50 mg，0.15 mmol)和 N-(3-氨基 -5-甲基苯基) -2-羟基乙酰胺 llb(27 mg, 0.15 mmol)溶解于 2 mL异丙醇中，加入 1滴三氟乙酸， 180°C微波反应 1小时。减压浓縮反应液，用薄层色谱法以展开剂体系 A纯化所得残余物，得到标题产物 N-(3-(4-(3，3-二甲基 -4-羰基 -2，3，4，5-四氢吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚 -7-基氨基) -5-氟嘧啶 -2-基氨基 )-5-甲基苯基) -2-羟基乙酰胺 11(30 mg, 白色固体)，产率： 41.7 %。

MS m/z (ESI): 482.3 [M+l]

1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9.44 (s, 1H)， 9.37 (s, 1H)， 9.25 (s, 1H)， 9.08 (s, 1H)， 8.15 (d, 1H), 7.79 (d， 1H), 7.66 (s, 1H), 7.38 (d， 1H), 7.27 (s, 1H), 7.07 (s, 1H), 4.04 (s， 2H), 3.97 (d， 2H), 2.22 (s, 3H), 1.20 (s, 6H)。实施例 12

N-(3-(4-(3，3-二甲基 -4-羰基 -2，3，4，5-四氢吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚 -7-基氨基) - 氟嘧啶 -2-基氨基 )-5-甲基苯基)丙酰胺

第一步

N-(3-氨基 -5-甲基苯基)丙酰胺

将 5-甲苯 -1,3-二氨基 6a(122 mg， 1 mmol)和三乙胺 (202 mg， 2 mmol)溶解于

10 mL二氯甲烷中，降温至 0°C，加入 1 mL丙酰氯 (88 mg， 0.95 mmol)的二氯甲浣溶液，缓慢升至室温，搅拌反应 2小时。加入 20 mL水，分液，有机相用水洗漆 (lO mLx l), 无水硫酸镁干燥，减压浓縮滤液，用薄层色谱法以展开剂体系 A纯化所得残余物，得到标题产物 N-(3-氨基 -5-甲基苯基)丙酰胺 12a(80 mg，棕色油状物)，产率： 44.9 %。

MS m/z (ESI): 179.1 [M+l]

第二步

N-(3-(4-(3，3-二甲基 -4-羰基 -2，3，4，5-四氢吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚 -7-基氨基 )-5- 氟嘧啶 -2-基氨基 )-5-甲基苯基)丙酰胺

将 7-(2-氯 -5-氟 -嘧啶 -4-基氨基 )-3，3-二甲基 -2,3-二氢吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚 -4(5H)-酮 lh(50 mg， 0.15 mmol)和 N-(3-氨基 -5-甲基苯基)丙酰胺 12a(27 mg， 0.15 mmol)溶解于 1 mL异丙醇中，加入 1滴三氟乙酸， 180°C微波反应 1.5小时。减压浓縮反应液，用薄层色谱法以展开剂体系 A纯化所得残余物，得到标题产物 N-(3-(4-(3，3-二甲基 -4-羰基 -2，3，4，5-四氢吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚 -7-基氨基 )-5- 氟嘧啶 -2-基氨基 )-5-甲基苯基)丙酰胺 12(20 mg，白色固体)，产率： 27.8 %。

MS m/z (ESI): 480.3 [M+l]

1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9.66 (s, 1H)， 9.44 (s, 1H)， 9.22 (s, 1H)， 9.07 (s, 1H)， 8.14 (d， 1H), 7.80 (d， 1H), 7.60 (s， 1H), 7.35 (d， 1H), 7.20 (s， 1H), 7.04 (s， 1H), 4.03 (s， 2H), 2.37-2.24 (m， 2H), 2.21 (s， 3H), 1.19 (d, 6H)， 1.07 (t， 3H)。实施例 13

N-(3-(4-(3，3-二甲基 -4-羰基 -2，3，4，5-四氢吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚 -7-基氨基 )-5- -2-基氨基 )-5-甲基苯基)乙酰胺

将 7-(2，5-二氯 -嘧啶 -4-基氨基 )-3，3-二甲基 -2，3-二氢吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚 -4(5H 酮 8b(106 mg， 0.30 mmol)禾 B N-(3-氨基 -5-甲基苯基)乙酰胺 7a(58 mg， 0.33 mmol)溶解于 2 mL异丙醇中，加入 1滴三氟乙酸， 150°C微波反应 1小时。减压浓縮反应液，用薄层色谱法以展开剂体系 A 纯化所得残余物，得到标题产物 N-(3-(4-(3，3-二甲基 -4-羰基 -2，3，4，5-四氢吡啶并 [3，2-b][l，4]氧氮杂环庚 -7-基氨基 )-5- 氯嘧啶 -2-基氨基 )-5-甲基苯基)乙酰胺 13(60 mg，白色固体)，产率： 41.7%。

MS m/z (ESI): 482.3 [M+l]

1H NMR (400 MHz, DMSO- ) δ 9.76 (s, 2H), 9.44 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 8.08 (s, 1H)， 7.83-7.85 (d, 1H)， 7.56 (s, 1H)， 7.34-7.36(d, 1H)， 7.20 (s, 1H),7.03 (s, 1H)， 4.02(s, 2H), 2.20 (s， 3H), 2.01 (s， 3H), 1.13 (s, 6H)。测试例：

生物学评价

以下结合测试例进一步描述解释本发明，但这些测试例并非意味着限制本发明的范围。测试例 1、本发明化合物对 Syk激酶的活性抑制的测定

以下所述的体外激酶实验可测定受试化合物对 Syk激酶 (Invitrogen, PV3857) 的抑制活性。用 Invitrogen公司试剂盒 Z'-LYTE® Kinase Assay Kit- Tyrosine 2 Peptide (Invitrogen, PV3191 ) 对 Syk抑制剂进行体外活性检测。按试剂盒使用说明，配置相应浓度的酶缓冲液（50 mM HEPES PH7.5, 0.01% BRIJ-35, 10mM MgCl₂， 4 mM MnCl₂, 1 mM EGTA, 2 mMDTT), 酶 /底物肽段溶液， ATP溶液和完全磷酸化底物肽段，轻轻混合均匀；用蒸馏水配制 4 X浓度的待测化合物溶液，混合均匀。

将配置好的酶 /底物肽段溶液和完全磷酸化底物肽段 5 μ 加入 384孔板，然后在实验组中加入 2.5 ATP溶液及 2.5uL化合物溶液，在完全抑制对照组中加入 2.5uL酶缓冲液及 2.5 μL相应浓度 DMSO溶液，在无抑制对照组中加入 2.5 μL ATP溶液及 2.5 μL相应浓度 DMSO溶液，在完全磷酸化底物对照组中加入 2.5 μL 酶缓冲液及 2.5 μ 相应浓度 DMSO溶液；贴好封板贴在振荡器上振荡 30秒使各溶液混合均匀，室温孵育 1小时。

按使用说明将显影液按相应比例配制显影试剂，混合均匀后加入反应孔各 5 μL, 贴好封板贴在振荡器上振荡 30秒使各溶液混合均匀，室温孵育 1小时。每孔加入 5 终止液，混合均匀后，用 400 nm激发在 445 nm和 520 nm处读荧光。本发明化合物的生物化学活性通过以上的试验进行测定，测得的 IC₅。值见下表 1。

表 1 本发明化合物对 Syk激酶的活性抑制的 IC₅o

测试例 2: 本发明化合物对 SU-DHL-6细胞增殖抑制作用测定

以下所述的体外细胞实验可测定受试化合物对 SU-DHL-6 免疫性细胞增殖的抑制活性。

1、材料

(1) RPMI-1640： RPMI-1640培养基 (Hyclone , Cat# SH30809.01B , Lot#

NWC0381) ；

(2) FBS: 小牛血清（GIBCO, Lot# 8172881) ；

(3) P/S(Pen Strep): 链霉素 (GIBCO15140, Lot# 451034) ；

(5) PBS(Phosphate-buffered saline): 磷酸盐缓冲液， PH7.2, 常规配制。

2、方法

SU-DHL-6细胞（ATCC, 货号 CRL-2959™) 培养在 RPMI-1640培养基中（添加 10% FBS， 100 units/ml P/S), 用 PBS洗三遍重新悬浮于 RPMI-1640(添力口 2% FBS， 100 units/ml P/S)培养基中，密度为 2.5 X 10⁵细胞 /ml。于 96孔板中每孔加入 90 μ1。将药物配置成 20 mM的储存液，用 100% DMSO (二甲基亚砜）梯度稀释成 200 X浓度梯度，再用 RPMI-1640(添力口 2% FBS， 100 units/ml P/S)培养基稀释 20倍（以此保证各培养体系中 DMSO浓度均为 0.5%)。每孔加入 10 μΐ药物，轻轻振荡混匀，对照组和空白组只含 100 μΐ RPMI-1640(添力口 2% FBS， 100 units/ml P/S)，放置 37°C、 5% C0₂培养箱中培养， 72小时后由 ATPlite™试剂盒（PerkinElmer, Cat# 6016947) 检测。

本发明化合物的生物化学活性通过以上的试验进行测定，测得的 IC_5Q值见下表 2。

表 2 本发明化合物对 SU-DHL-6细胞的增殖活性抑制的 IC:

药代动力学评价测试例 3、本发明化合物的药代动力学测试

1、摘要

以大鼠为受试动物，应用 LC/MS/MS法测定了大鼠灌胃给予实施例 1化合物、实施例 5化合物、实施例 6化合物、实施例 7化合物、实施例 8化合物和实施例 12化合物后不同时刻血浆中的药物浓度。研究本发明的化合物在大鼠体内的药代动力学行为，评价其药动学特征。

2、试验方案

2.1 试验药品

实施例 1化合物、实施例 5化合物、实施例 6化合物、实施例 7化合物、实施例 8 化合物和实施例 12化合物。

2.2 试验动物

健康成年 SD大鼠 24只，雌雄各半，平均分成 6组，每组 4只，购自上海西普尔- 必凯实验动物有限公司，动物生产许可证号： SCXK (沪 )2008-0016。

2.3 药物配制

称取适量样品，加入 0.5% CMC-Na，超声制成 0.5 mg/ml混悬液。

2.4 给药

SD大鼠 24只，雌雄各半，平均分成 6组，禁食一夜后分别灌胃给药，剂量为 10.0 mg/kg, 给药体积 10 ml/kg。 3、操作

大鼠灌胃给药实施例 1化合物、实施例 5化合物、实施例 6化合物、实施例 7 化合物、实施例 8化合物和实施例 12化合物，于给药前及给药后 0.5， 1.0, 2.0， 3.0, 4.0, 6.0， 8.0， 11.0, 24.0 小时采血 0.1 ml, 置于肝素化试管中， 3500 rpm离心 5 min 分离血浆，于 20°C保存。给药后 2 小时进食。

用 LC/MS/MS法测定不同浓度的化合物灌胃给药后大鼠血浆中的待测化合物含量。方法的线性范围均为 1.00〜2000 ng/ml; 血浆样品经甲醇沉淀蛋白处理后进行分析。

4、药代动力学参数结果

本发明化合物的药代动力学参数如下:

结论：本发明化合物的药代吸收良好，具有明显的药代动力学优势。

Claims

权利要求书

1、一种通式（ I )所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构、及其混合物形式、及其可药用的盐：

( I )

其巾：

E选自 S、 0或 C;

Z为 C(R⁵R⁶);

环 A，环 B为芳基或杂芳基；

R¹选自氢原子、卤素、羟基、氰基、硝基、烷基、烷氧基、烯基、块基、环烷基、 -C(0)NR⁷R⁸、 -OR⁹、 -C(0)OR⁹、芳基或杂芳基；

R²、 R³ 或 R⁴各自独立地选自氢原子、卤素、氰基、硝基、羟基、烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、 -NR⁷R⁸、 -C(0)NR⁷R⁸、 -NHS(0)_mR⁹、 -OS(0)_mR⁹、 -S(0)_m NR⁷R⁸、 -NHC(0)R⁹、 -OR⁹、 -C(0)R⁹、 -OC(0)R⁹或 -C(0)OR⁹，其中所述的烷基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基各自独立地任选进一步被一个或多个选自羟基、卤素、烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、 -NR⁷R⁸、 -C(O) NR⁷R⁸、 -S(0)_mR⁹、 -C(0)R⁹、 -OC(0)R⁹或 -C(0)OR⁹的取代基所取代；

或者， R²和 R³形成环烷基或杂环基，其中所述的杂环基内含有一个或多个选 g N、 0或 S(0)_m的杂原子，并且所述杂环基任选进一步被一个或多个选自烷基、卤素、氰基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、 -NR⁷R⁸、 -C(0)NR⁷R⁸、 -NHS(0)_mR⁹、 -S(0)_mR⁹、 -NHC(0)R⁹、 -OR⁹、 -C(0)R⁹、 -OC(0)R⁹或 -C(0)OR⁹的取代基所取代；

R⁵或 R⁶各自独立地选自氢原子、卤素、烷基、环烷基、羟基、烷氧基、芳基或杂芳基，其中所述的烷基、环烷基、芳基或杂芳基各自独立地任选进一步被一个或多个选自羟基、卤素、烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、 -NR⁷R⁸、 -C(0)NR⁷R⁸、 -NHS(0)_mR⁹、 -S(0)_mR⁹、 -NHC(0)R⁹、 -OR⁹、 -C(0)R⁹、 -OC(0)R⁹ 或 -C(0)OR⁹的取代基所取代；

或者， R⁵和 R⁶与其相连接的 C原子一起形成一个环烷基或杂环基，所述的环烷基或杂环基各自独立地任选进一步被一个或多个选自羟基、卤素、烷基、烷氧基、环烷基或杂环基的取代基所取代；

R⁷或 R⁸各自独立地选自氢原子、烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基，所述的烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基各自独立地任选进一步被一个或多个选自羟基、 ^素、烷基、烷氧基、环烷基或杂环基的取代基所取代；或者， R⁷和 R⁸与其相连接的 N原子一起形成一个 3〜8元杂环基，其中所述 3〜8元杂环基内含有一个或多个 N、 0或 3(0)„₁杂原子，并且所述 3〜8元杂环基任选进一步被一个或多个选自烷基、卤素、羟基、氨基、氰基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基的取代基所取代；

R⁹选自氢原子、烷基、氨基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基，所述的烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基各自独立地任选进一步被一个或多个选自烷基、卤素、羟基、氨基、氰基、烷氧基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基的取代基所取代；和

m为 0、 1或 2。

2、根据权利要求 1所述的通式（I )所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、及其混合物形式、及其可药用的盐，其中 E为氧原子。 3、根据权利要求 1所述的通式（ I )所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、及其混合物形式、及其可药用的盐，其中环 B为芳基。

4、根据权利要求 1所述的通式（I )所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、及其混合物形式、及其可药用的盐，其中 R⁵或 R⁶各自独立地选自卤素或烷基。

5、根据权利要求 1所述的通式（I )所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、及其混合物形式、及其可药用的盐，其中 R⁵和 R⁶—起形成环烷基。

6、根据权利要求 1所述的通式（I )所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、及其混合物形式、及其可药用的盐，其中 R¹为卤素。

7、根据权利要求 1所述的通式（I )所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、及其混合物形式、及其可药用的盐，其中 R²、R³ 或 R⁴各自独立地选自氢原子、卤素、烷基、烷氧基、杂环基、 -S(0)_mNR⁷R⁸、 -NHC(0)R⁹或 -OR⁹，其中所述的烷基、烷氧基或杂环基各自独立地任选进一步被一个或多个选自羟基、卤素、烷基、环烷基、杂环基或 -C(O) NR⁷R⁸的取代基所取代； R⁷或 R⁸各自独立地选自氢原子或烷基；

R⁹选自氢原子、烷基、氨基、环烷基或杂环基，所述的烷基、环烷基或杂环基各自独立地任选进一步被一个或多个选自烷基、卤素、羟基或氨基的取代基所取代；和

m为 0、 1或 2。

8、根据权利要求 1〜7任意一项所述的通式（ I )所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、及其混合物形式、及其可药用的盐，其为通式 (II) 所示内消旋体和外消旋体、对映异构体、非对映异构及其混合物形式、及其可药用的盐：

(I I)

其中： Y为氮或碳原子； E、 Z、环^ Ι^〜Ι ⁴的定义如权利要求 1中所述。

9、根据权利要求 1〜8任意一项所述的通式（ I )所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、及其混合物形式、及其可药用的盐，其为通式 (III) 所示的化合物或其互变异构体、内消旋体和外消旋体、对映异构体、非对映异盐：

其中： E、 Z、环8、 Ri〜R⁴的定义如权利要求 1中所述。

10、根据权利要求 1〜8任意一项所述的通式（ I )所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、及其混合物形式、及其可药用的盐，其为通式 (IV) 所示的化合物或其互变异构体、内消旋体和外消旋体、对映异构体、非对映的盐：

(IV)

其中： E、 Z、环8、 Ri〜R⁴的定义如权利要求 1中所述。 11、根据权利要求 i~io任意一项所述的通式（ I )所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、及其混合物形式、及其可药

12、一种通式 (I-A)所示

(l-A )

E选自 S、 O或 C;

Z为 C(R⁵R⁶):

环 A为芳基或杂芳基; R¹选自氢原子、卤素、羟基、氰基、硝基、烷基、烷氧基、烯基、块基、环浣基、 -C(0)NR⁷R⁸、 -OR⁹、 -C(0)OR⁹、芳基或杂芳基；

R⁵或 R⁶各自独立地选自氢原子、卤素、烷基、环烷基、羟基、烷氧基、芳基或杂芳基，其中所述的烷基、环烷基、芳基或杂芳基各自独立地任选进一步被一个或多个选自羟基、卤素、烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、 -NR⁷R⁸、 -C(0)NR⁷R⁸、 -N -S(0)_mR⁹、 -NHC(0)R⁹、 -OR⁹、 -C(0)R⁹、 -OC(0)R⁹ 或 -C(0)OR⁹的取代基所取代；

或者， R⁵和 R⁶与其相连接的 C原子一起形成一个环烷基或杂环基，所述的环浣基或杂环基各自独立地任选进一步被一个或多个选自羟基、卤素、烷基、烷氧基、环烷基或杂环基的取代基所取代；和

X为离去基团，优选为卤素。

13、根据权利要求 12所述的通式（ I-A )所示的化合物及其可药用的盐，其为通式 (ΠΙ-Α)及 (IV-A) 所示的化合物及其可药用的盐：

(I N-A) (IV-A)

其中： E、 Z、 X、 R¹的定义如权利要求 12中所述。

14、一种制备根据权利要求 1所述的通式（ I )所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、及其混合物形式、及其可药用的

通式 (I-A)化合物和通式 (I-B)化合物在溶剂中，酸性条件下加热进行反应，得到通式（I )化合物；

其中： X为离去基团，优选为卤素；其中 E、 Z、环、环8、 1^〜1 ⁴的定义如权利要求 1中所述。

15、一种药物组合物，所述药物组合物含有治疗有效量的根据权利要求 1〜11 任意一项所述的通式（I )所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、及其混合物形式、及其可药用的盐及药学上可接受的载体。 16、根据权利要求 1〜11任意一项所述的通式（ I )所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、及其混合物形式、及其可药用的盐，或根据权利要求 15所述的药物组合物在制备蛋白激酶抑制剂，优选为 Syk蛋白激酶抑制剂中的用途。

17、根据权利要求 1〜11任意一项所述的通式（ I )所示的化合物或其互变异构体、内消旋体、外消旋体、对映异构体、非对映异构体、及其混合物形式、及其可药用的盐，或根据权利要求 15所述的药物组合物在制备治疗与蛋白激酶有关的疾病，优选为与 Syk蛋白激酶有关的疾病的药物中的用途。

18、根据权利要求 17所述的用途，其中所述的与 Syk蛋白激酶有关的疾病选自恶性淋巴瘤、自身免疫性疾病、结疤、过敏性疾病、与组织破坏有关的疾病和与组织发炎有关的疾病；

所述的自身免疫性疾病优选为全身红斑狼疮、风湿性关节炎、舍格伦综合症、赖特尔综合症、多肌炎-皮肌炎、身体组织硬化、多动脉炎、多样三角化、大类天疤疮和银屑病；

所述的过敏性疾病优选为结膜炎、鼻炎、哮喘、特应性皮肤炎和食物过敏。