TW201915000A - 稠合雜芳基衍生物、其製備方法及其在醫藥上的應用 - Google Patents

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Abstract

本發明涉及稠合雜芳基衍生物、其製備方法及其在醫藥上的應用。具體而言，本發明涉及一種通式(I)所示的新的稠合雜芳基衍生物、其製備方法及含有該衍生物的醫藥組成物以及其作為治療劑，特別是作為TLR7激動劑的用途，其中通式(I)的各取代基與說明書中的定義相同。

Description

稠合雜芳基衍生物、其製備方法及其在醫藥上的應用
本發明屬於醫藥領域，涉及一種通式(I)所示的新的稠合雜芳基衍生物、其製備方法及含有該衍生物的醫藥組成物以及其作為治療劑，特別是作為TLR7激動劑的用途。
類Toll受體(toll-like receptors；TLRs)是參與先天免疫的一類重要蛋白質分子。TLRs是單體跨膜的非催化性受體，通常在崗哨細胞如巨噬細胞和樹突狀細胞中表達，可以識別由微生物產生的結構保守的分子。一旦這些微生物突破如皮膚或腸道黏膜的物理屏障，就會被TLRs識別，繼而激活免疫細胞應答(Mahla,R S.等人，Front Immunol.4：248(2013))。免疫系統之所以具有廣泛識別病原微生物的能力，某種程度上是由於Toll樣免疫受體的廣泛存在。
在哺乳動物中至少有10種不同的TLRs。一些此類受體的配體和相應的信號級聯放大已經被鑒定出。TLR7是TLRs(TLRs 3、7、8和9)亞組的成員，侷限於專門檢測非己核酸的細胞的內涵體隔室。TLR7在藉由識別ssRNA抗 病毒防禦方面起關鍵作用(Diebold S.S.等，Science,2004：303,1529-1531；和Lund J.M.等，PNAS,2004：101,5598-5603)。TLR7在人身上具有有限的表達分佈，並主要藉由B細胞和類漿細胞樹突細胞(pDC)表達，而較低程度地藉由單核細胞表達。類漿細胞DCs是淋巴衍生的樹突細胞的唯一群體(0.2-0.8%的外周血單核細胞(PBMCs))，它是響應病毒感染而分泌高水平干擾素-α(IFNα)和干擾素-β(IFNβ)的最初的I型干擾素生成細胞(Liu Y-J,Annu.Rev.Immunol.,2005：23,275-306)。
很多疾病、障礙與TLRs的異常有關，比如黑色素瘤、非小細胞肺癌、肝細胞癌、基底細胞癌(basalcellcarcinoma)、腎細胞癌、骨髓瘤、變應性鼻炎、哮喘、慢性阻塞性肺炎(COPD)、潰瘍性結腸炎、肝纖維化，HBV、黃病毒科(Flaviviridae)病毒、HCV、HPV、RSV、SARS、HIV或流行性感冒的病毒感染等。因此運用TLRs的激動劑治療相關疾病是很有前景的。
由於TLR7和TLR8高度同源，因此TLR7配體，在大多數情況下也是TLR8配體。TLR8刺激主要誘導產生細胞因子如腫瘤壞死因子α(TNF-α)和趨化因子。干擾素α是治療慢性乙型肝炎或丙型肝炎的主要藥物之一，而TNF-α是一種促炎細胞因子，過多分泌可能導致嚴重的副作用。所以對TLR7和TLR8的選擇性對於開發TLR7激動劑用於治療病毒感染性疾病至關重要。
目前已有相關的TLR7激動劑專利申請，如 WO2005025583、WO2007093901、WO2008011406、WO2009091032、WO2010077613、WO2010133882、WO2011031965、WO2012080730。但是仍有必要繼續研發安全的和治療上更有效的TLR7激動劑。
本發明針對上述技術問題，提供一種起效濃度更低，選擇性更好，激活效果更明顯的藥物化合物，同時，其對CYP和hERG沒有抑制作用或抑制作用弱，是更安全和更有效的TLR7激動劑。
本發明的目的在於提供一種通式(I)所示的化合物： 或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中：G1為CR3或N；L1選自-O-、-S-、-NR4-、-C(O)-、-S(O)m-、-N(R4)C(O)-、-C(O)N(R4)-、-N(R4)S(O)2-、-S(O)2N(R4)-和共價鍵；X1為伸烷基，其中該伸烷基視需要被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基和雜環基中的一個或多個取代基所取代；R1選自氫原子、烷基、鹵烷基、烯基、炔基、環烷基、 雜環基、芳基和雜芳基，其中該烷基、烯基、炔基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基各自獨立地視需要被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基中的一個或多個取代基所取代；R2選自氫原子、烷基、烷氧基、鹵素、鹵烷基、鹵烷氧基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、-C(O)R5、-C(O)OR5、-S(O)mR5、-NR6R7和-C(O)NR6R7，其中該烷基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基各自獨立地視需要被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、雜環基烷基、芳基、雜芳基、-C(O)R5、-C(O)OR5、-S(O)mR5、-NR6R7、-C(O)NR6R7和-X2-NR6R7中的一個或多個取代基所取代；R3選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基；R4選自氫原子、烷基、鹵烷基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基；R5選自氫原子、烷基、鹵烷基、胺基、羥基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基；R6和R7相同或不同，且各自獨立地選自氫原子、烷基、鹵烷基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基，其中該烷基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基各自獨立地視需要被 選自烷基、烷氧基、鹵素、胺基、氰基、硝基、羥基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基中的一個或多個取代基所取代；或者，該R6和R7與相連接的氮原子一起形成雜環基，其中該雜環基除含有1個氮原子之外，還視需要含有1至2個相同或不同選自N、O和S的雜原子，並且該雜環基視需要被選自烷基、烷氧基、側氧基、鹵素、胺基、氰基、硝基、羥基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基中的一個或多個取代基所取代；X2為伸烷基，其中該伸烷基視需要被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基和雜環基中的一個或多個取代基所取代；且m為0、1或2。
在本發明一個較佳的實施方案中，所述的通式(I)所示的化合物，其為通式(II)所示的化合物： 或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中：G1、L1、X1、R1和R2如通式(I)中所定義。
在本發明一個較佳的實施方案中，所述的通式(I)所示 的化合物，其為通式(IIAa)所示的化合物： 或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中：G1、L1、X1、R1和R2如通式(I)中所定義。
在本發明一個較佳的實施方案中，該通式(I)所示的化合物，其中該R2選自芳基、雜芳基、雜環基和-NR6R7，其中該芳基、雜芳基和雜環基各自獨立地視需要被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、雜環基烷基和-X2-NR6R7中的一個或多個取代基所取代；X2、R6和R7如通式(I)中所定義。
在本發明一個較佳的實施方案中，該通式(I)所示的化合物，其中該R2選自苯基、吡啶基、吡咯烷基和-NR6R7，其中該苯基、吡啶基和吡咯烷基各自獨立地視需要被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、雜環基烷基和-X2-NR6R7中的一個或多個取代基所取代，該雜環基烷基較佳吡咯烷基伸甲基；X2、R6和R7如通式(I)中所定義。
在本發明一個較佳的實施方案中，該通式(I)所示的化 合物，其為通式(III)或通式(IV)所示的化合物： 或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中：環A為苯基或吡啶基；R8相同或不同，且各自獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基和雜環基烷基；R6和R7與相連接的氮原子一起形成雜環基，其中該雜環基除含有1個氮原子之外，還視需要含有1至2個相同或不同選自N、O和S的雜原子，並且該雜環基視需要被選自烷基、烷氧基、側氧基、鹵素、胺基、氰基、硝基、羥基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基中的一個或多個取代基所取代；s為0、1、2或3；且G1、L1、X1、X2、R1和R5如通式(I)中所定義。
在本發明一個較佳的實施方案中，所述的通式(I)所示的化合物，其中該X1為伸烷基。
在本發明一個較佳的實施方案中，該通式(I)所示的化合物，其中該G1為N。
在本發明一個較佳的實施方案中，該通式(I)所示的化合物，其為通式(V)或通式(VI)所示的化合物： 或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中：環A為苯基或吡啶基；n為1到9的整數；L1、X2、R1、R6和R7如通式(III)中所定義。
在本發明一個較佳的實施方案中，該通式(I)所示的化合物，其為通式(VII)所示的化合物： 或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中：L1、X2、R1、R6和R7如通式(III)中所定義。
在本發明一個較佳的實施方案中，該通式(I)所示的化合物，其中該L1為-O-。
在本發明一個較佳的實施方案中，該通式(I)所示的化合物，其中該R1為烷基。
本發明的典型化合物包括但不限於： 或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非 對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽。
本發明的另一方面涉及一種通式(IA)所示的化合物， 或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中：G1為CR3或N；W為胺基保護基，選自第三丁氧羰基、乙醯基、苄基、烯丙基和對甲氧苄基，較佳為對甲氧苄基；Ra為胺基保護基或氫原子，該胺基保護基選自第三丁氧羰基、乙醯基、苄基、烯丙基和對甲氧苄基，較佳為對甲氧苄基；L1選自-O-、-S-、-NR4-、-C(O)-、-S(O)m-、-N(R4)C(O)-、-C(O)N(R4)-、-N(R4)S(O)2-、-S(O)2N(R4)-和共價鍵；X1為伸烷基，其中該伸烷基視需要被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基和雜環基中的一個或多個取代基所取代；R1選自氫原子、烷基、鹵烷基、烯基、炔基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基，其中該烷基、烯基、炔基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基各自獨立地視需要被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝 基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基中的一個或多個取代基所取代；R2選自氫原子、烷基、烷氧基、鹵素、鹵烷基、鹵烷氧基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、-C(O)R5、-C(O)OR5、-S(O)mR5、-NR6R7和-C(O)NR6R7，其中該烷基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基各自獨立地視需要被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、雜環基烷基、芳基、雜芳基、-C(O)R5、-C(O)OR5、-S(O)mR5、-NR6R7、-C(O)NR6R7和-X2-NR6R7中的一個或多個取代基所取代；R3選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基；R4選自氫原子、烷基、鹵烷基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基；R5選自氫原子、烷基、鹵烷基、胺基、羥基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基；R6和R7相同或不同，且各自獨立地選自氫原子、烷基、鹵烷基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基，其中該烷基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基各自獨立地視需要被選自烷基、烷氧基、鹵素、胺基、氰基、硝基、羥基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基中的一個或多個取代基所取代； 或者，該R6和R7與相連接的氮原子一起形成雜環基，其中該雜環基除含有1個氮原子之外，還視需要含有1至2個相同或不同選自N、O和S的雜原子，並且該雜環基視需要被選自烷基、烷氧基、側氧基、鹵素、胺基、氰基、硝基、羥基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基中的一個或多個取代基所取代；X2為伸烷基，其中該伸烷基視需要被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基和雜環基中的一個或多個取代基所取代；且m為0、1或2。
通式(IA)所示的化合物包括，但不限於：
本發明的另一方面涉及一種通式(IIA)所示的化合物， 或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中：W為胺基保護基，選自第三丁氧羰基、乙醯基、苄基、烯丙基和對甲氧苄基，較佳為對甲氧苄基；Ra為胺基保護基或氫原子，該胺基保護基選自第三丁氧羰基、乙醯基、苄基、烯丙基和對甲氧苄基，較佳為對甲氧苄基；G1、L1、X1、R1和R2如通式(IA)中所定義。
本發明的另一方面涉及一種通式(IIB)所示的化合物， 或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中：W為胺基保護基，選自第三丁氧羰基、乙醯基、苄基、烯丙基和對甲氧苄基，較佳為對甲氧苄基；Ra為胺基保護基或氫原子，該胺基保護基選自第三丁氧羰基、乙醯基、苄基、烯丙基和對甲氧苄基，較佳為對甲氧苄基；G1、L1、X1、R1和R2如通式(IA)中所定義。
通式(IIB)所示的化合物包括，但不限於：
本發明的另一方面涉及一種製備通式(I)所示的化合物的方法，該方法包括：
通式(IA)的化合物脫去保護基得到通式(I)的化合物；其中：W為胺基保護基，選自第三丁氧羰基、乙醯基、苄基、烯丙基和對甲氧苄基，較佳為對甲氧苄基；Ra為胺基保護基或氫原子，該胺基保護基選自第三丁氧羰基、乙醯基、苄基、烯丙基和對甲氧苄基，較佳為對甲氧苄基；G1、L1、X1、R1和R2如通式(I)中所定義。
本發明的另一方面涉及一種製備通式(IIA)所示的化合物的方法，該方法包括：
通式(IIB)的化合物在鹼性條件下，發生消除反應得到通式(IIA)的化合物；其中：W為胺基保護基，選自第三丁氧羰基、乙醯基、苄基、烯丙基和對甲氧苄基，較佳為對甲氧苄基；Ra為胺基保護基或氫原子，該胺基保護基選自第三丁 氧羰基、乙醯基、苄基、烯丙基和對甲氧苄基，較佳為對甲氧苄基；G1、L1、X1、R1和R2如通式(IIA)中所定義。
本發明的另一方面涉及一種製備通式(II)所示的化合物的方法，該方法包括：
通式(IIA)的化合物在酸性條件下脫去保護基得到通式(II)的化合物；其中：W為胺基保護基，選自第三丁氧羰基、乙醯基、苄基、烯丙基和對甲氧苄基，較佳為對甲氧苄基；Ra為胺基保護基或氫原子，該胺基保護基選自第三丁氧羰基、乙醯基、苄基、烯丙基和對甲氧苄基，較佳為對甲氧苄基；G1、L1、X1、R1和R2如通式(II)中所定義。
本發明的另一方面涉及一種醫藥組成物，該醫藥組成物含有治療有效量的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，以及一種或多種藥學上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。
本發明進一步涉及通式(I)所示化合物或其互變異構 體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其可藥用的鹽或包含其的醫藥組成物在製備用於激動TLR7的藥物中的用途。
本發明進一步涉及通式(I)所示化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其可藥用的鹽或包含其的醫藥組成物在製備用於治療由病毒引起的感染的藥物中的用途。
本發明進一步涉及通式(I)所示化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其可藥用的鹽或包含其的醫藥組成物在製備用於治療或預防腫瘤的藥物中的用途。
本發明進一步涉及一種激動TLR7的方法，其包括將通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其可藥用鹽或包含其的醫藥組成物與TLR7接觸的步驟。
本發明進一步涉及一種治療由病毒引起的感染的方法，該方法包括給予所需患者治療有效量的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其可藥用鹽或包含其的醫藥組成物。
本發明進一步涉及一種治療或預防腫瘤的方法，其包括給予所需患者治療有效量的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其可藥用鹽或包含其的醫藥 組成物。
本發明進一步涉及一種通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其可藥用鹽或包含其的藥物，其用作藥物。
本發明進一步涉及一種通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其可藥用鹽或包含其的藥物，其用於激動TLR7。
本發明進一步涉及一種通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其可藥用鹽或包含其的藥物，其用於治療或預防由病毒引起的感染。
本發明中所述的病毒選自：登革熱病毒、黃熱病毒、西尼羅病毒、日本腦炎病毒、蜱傳腦炎病毒、昆津病毒、墨累山谷腦炎病毒、聖路易腦炎病毒、鄂木斯克出血熱病毒、牛病毒性腹瀉病毒、濟卡病毒、HIV、HBV、HCV、HPV、RSV、SARS和流感病毒。
本發明進一步涉及一種通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其可藥用鹽或包含其的藥物，其用於治療或預防腫瘤。
本發明中所述的腫瘤選自：黑色素瘤、非小細胞肺癌、肝細胞癌、基底細胞癌、腎細胞癌和骨髓瘤。
含活性成分的醫藥組成物可以是適用於口服的形式，例如片劑、糖錠劑、錠劑、水或油混懸液、可分散粉末或顆粒、乳液、硬或軟膠囊，或糖漿劑或酏劑。可按照本領域任何已知製備藥用組合物的方法製備口服組合物，此類組合物可含有一種或多種選自以下的成分：甜味劑、矯味劑、著色劑和防腐劑，以提供悅目和可口的藥用製劑。片劑含有活性成分和用於混合的適宜製備片劑的無毒的可藥用的賦形劑。這些賦形劑可以是惰性賦形劑，造粒劑、崩解劑，黏合劑，和潤滑劑。這些片劑可以不包衣或可藉由掩蓋藥物的味道或在胃腸道中延遲崩解和吸收，因而在較長時間內提供緩釋作用的已知技術將其包衣。
也可用其中活性成分與惰性固體稀釋劑或其中活性成分與水溶性載體或油溶媒混合的軟明膠膠囊提供口服製劑。
水懸浮液含有活性物質和用於混合的適宜製備水懸浮液的賦形劑。此類賦形劑是懸浮劑，分散劑或濕潤劑。水混懸液也可以含有一種或多種防腐劑、一種或多種著色劑、一種或多種矯味劑和一種或多種甜味劑。
油混懸液可藉由使活性成分懸浮於植物油，或礦物油配製而成。油懸浮液可含有增稠劑。可加入上述的甜味劑和矯味劑，以提供可口的製劑。可藉由加入抗氧化劑保存這些組合物。
本發明的醫藥組成物也可以是水包油乳劑的形式。油相可以是植物油，或礦物油或其混合物。適宜的乳化劑可 以是天然產生的磷脂，乳劑也可以含有甜味劑、矯味劑、防腐劑和抗氧劑。此類製劑也可含有緩和劑、防腐劑、著色劑和抗氧劑。
本發明的醫藥組成物可以是無菌注射水溶液形式。可以使用的可接受的溶媒或溶劑有水、林格氏液和等滲氯化鈉溶液。無菌注射製劑可以是其中活性成分溶於油相的無菌注射水包油微乳可藉由局部大量注射，將注射液或微乳注入患者的血流中。或者，最好按可保持本發明化合物恒定循環濃度的方式給予溶液和微乳。為保持這種恒定濃度，可使用連續靜脈內遞藥裝置。這種裝置的實例是Deltec CADD-PLUS.TM.5400型靜脈注射泵。
醫藥組成物可以是用於肌內和皮下給藥的無菌注射水或油混懸液的形式。可按已知技術，用上述那些適宜的分散劑或濕潤劑和懸浮劑配製該混懸液。無菌注射製劑也可以是在腸胃外可接受的無毒稀釋劑或溶劑中製備的無菌注射溶液或混懸液。此外，可方便地用無菌固定油作為溶劑或懸浮介質。
可按用於直腸給藥的栓劑形式給予本發明化合物。可藉由將藥物與在普通溫度下為固體但在直腸中為液體，因而在直腸中會溶化而釋放藥物的適宜的無刺激性賦形劑混合來製備這些醫藥組成物。此類物質包括可可脂、甘油明膠、氫化植物油、各種分子量的聚乙二醇和聚乙二醇的脂肪酸酯的混合物。
如本領域技術人員所熟知的，藥物的給藥劑量依賴於 多種因素，包括但並非限定於以下因素：所用具體化合物的活性、患者的年齡、患者的體重、患者的健康狀況、患者的行為、患者的飲食、給藥時間、給藥方式、排泄的速率、藥物的組合等；另外，最佳的治療方式如治療的模式、通式化合物(I)的日用量或可藥用的鹽的種類可以根據傳統的治療方案來驗證。
發明的詳細說明
除非有相反陳述，在說明書和權利要求書中使用的術語具有下述含義。
術語“烷基”指飽和脂肪族烴基團，其為包含1至20個碳原子的直鏈或支鏈基團，較佳含有1至12個碳原子的烷基，更佳含有1至6個碳原子的烷基。非限制性實例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第三丁基、第二丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基、正庚基、2-甲基己基、3-甲基己基、4-甲基己基、5-甲基己基、2,3-二甲基戊基、2,4-二甲基戊基、2,2-二甲基戊基、3,3-二甲基戊基、2-乙基戊基、3-乙基戊基、正辛基、2,3-二甲基己基、2,4-二甲基己基、2,5-二甲基己基、2,2-二甲基己基、3,3-二甲基己基、4,4-二甲基己基、2-乙基己基、3-乙基己基、4-乙基己基、2-甲基-2- 乙基戊基、2-甲基-3-乙基戊基、正壬基、2-甲基-2-乙基己基、2-甲基-3-乙基己基、2,2-二乙基戊基、正癸基、3,3-二乙基己基、2,2-二乙基己基，及其各種支鏈異構體等。更佳的是含有1至6個碳原子的低級烷基，非限制性實施例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第三丁基、第二丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基等。烷基可以是取代的或非取代的，當被取代時，取代基可以在任何可使用的連接點上被取代，該取代基較佳為一個或多個以下基團，其獨立地選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基胺基、鹵素、巰基、羥基、硝基、氰基、環烷基、雜環烷基、芳基、雜芳基、環烷氧基、雜環烷氧基、環烷硫基、雜環烷硫基、側氧基、羧基或羧酸酯基。
術語“伸烷基”指飽和的直鏈或支鏈脂肪族烴基，其具有2個從母體烷的相同碳原子或兩個不同的碳原子上除去兩個氫原子所衍生的殘基，其為包含1至20個碳原子的直鏈或支鏈基團，較佳含有1至12個碳原子，更佳含有1至6個碳原子的伸烷基。伸烷基的非限制性實例包括但不限於伸甲基(-CH2-)、1,1-伸乙基(-CH(CH3)-)、1,2-伸乙基(-CH2CH2)-、1,1-伸丙基(-CH(CH2CH3)-)、1,2-伸丙基 (-CH2CH(CH3)-)、1,3-伸丙基(-CH2CH2CH2-)、1,4-伸丁基(-CH2CH2CH2CH2-)和1,5-伸丁基(-CH2CH2CH2CH2CH2-)等。伸烷基可以是取代的或非取代的，當被取代時，取代基可以在任何可使用的連接點上被取代，該取代基較佳獨立地視需要選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基胺基、鹵素、巰基、羥基、硝基、氰基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、環烷氧基、雜環烷氧基、環烷硫基、雜環烷硫基、側氧基、-C(O)R5、-C(O)OR5、-S(O)mR5、-NR6R7和-C(O)NR6R7中的一個或多個取代基所取代。
術語“烯基”指分子中含有碳碳雙鍵的烷基化合物，其中烷基的定義如上所述。烯基可以是取代的或非取代的，當被取代時，取代基較佳為一個或多個以下基團，其獨立地選自氫原子、烷基、烷氧基、鹵素、鹵烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、-C(O)R5、-C(O)OR5、-S(O)mR5、-NR6R7和-C(O)NR6R7中的一個或多個取代基所取代。
術語“炔基”指分子中含有碳碳三鍵的烷基化合物，其中烷基的定義如上所述。炔基可以是取代的或非取代的，當被取代時，取代基較佳為一個或多個以下基團，其獨立地選自氫原子、烷基、烷氧基、鹵素、鹵烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、-C(O)R5、-C(O)OR5、-S(O)mR5、-NR6R7和-C(O)NR6R7中的一個或多個取代基所取代。
術語“環烷基”指飽和或部分不飽和單環或多環環狀烴 取代基，環烷基環包含3至20個碳原子，較佳包含3至12個碳原子，更佳包含3至6個碳原子，最佳包含5至6個碳原子。單環環烷基的非限制性實例包括環丙基、環丁基、環戊基、環戊烯基、環己基、環己烯基、環己二烯基、環庚基、環庚三烯基、環辛基等；多環環烷基包括螺環、稠環和橋環的環烷基。
術語“螺環烷基”指5至20員的單環之間共用一個碳原子(稱螺原子)的多環基團，其可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛的π電子系統。較佳為6至14員，更佳為7至10員。根據環與環之間共用螺原子的數目將螺環烷基分為單螺環烷基、雙螺環烷基或多螺環烷基，較佳為單螺環烷基和雙螺環烷基。更佳為4員/4員、4員/5員、4員/6員、5員/5員或5員/6員單螺環烷基。螺環烷基的非限制性實例包括：
術語“稠環烷基”指5至20員，系統中的每個環與體系中的其他環共享毗鄰的一對碳原子的全碳多環基團，其中一個或多個環可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛的π電子系統。較佳為6至14員，更佳為7至10員。根據組成環的數目可以分為雙環、三環、四環或多環稠環烷基，較佳為雙環或三環，更佳為5員/5員或5員/6員雙環烷基。稠環烷基的非限制性實例包括：
術語“橋環烷基”指5至20員，任意兩個環共用兩個不直接連接的碳原子的全碳多環基團，其可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛的π電子系統。較佳為6至14員，更佳為7至10員。根據組成環的數目可以分為雙環、三環、四環或多環橋環烷基，較佳為雙環、三環或四環，更佳為雙環或三環。橋環烷基的非限制性實例包括：
該環烷基環可以稠合於芳基、雜芳基或雜環烷基環上，其中與母體結構連接在一起的環為環烷基，非限制性實例包括茚滿基、四氫萘基、苯并環庚烷基等；較佳為苯基并環戊基、四氫萘基。環烷基可以是視需要取代的或非取代的，當被取代時，取代基較佳為一個或多個以下基團，其獨立地選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基胺基、鹵素、巰基、羥基、硝基、氰基、環烷基、雜環烷基、芳基、雜芳基、環烷氧基、雜環烷氧基、環烷硫基、雜環烷硫基、側氧基、羧基或羧酸酯基。
術語“雜環基”指飽和或部分不飽和單環或多環環狀烴取代基，其包含3至20個環原子，其中一個或多個環原子 為選自氮、氧或S(O)m(其中m是整數0至2)的雜原子，但不包括-O-O-、-O-S-或-S-S-的環部分，其餘環原子為碳。較佳包含3至12個環原子，其中1至4個是雜原子；最佳包含3至8個環原子，其中1至3個是雜原子；最佳包含5至6個環原子，其中1至2或1至3個是雜原子。單環雜環基的非限制性實例包括吡咯烷基、咪唑烷基、四氫呋喃基、四氫吡喃基、四氫噻吩基、二氫咪唑基、二氫呋喃基、二氫吡唑基、二氫吡咯基、哌啶基、哌嗪基、嗎啉基、硫嗎啉基、高哌嗪基等，較佳為四氫吡喃基、哌啶基、吡咯烷基。多環雜環基包括螺環、稠環和橋環的雜環基。
術語“螺雜環基”指5至20員的單環之間共用一個原子(稱螺原子)的多環雜環基團，其中一個或多個環原子為選自氮、氧或S(O)m(其中m是整數0至2)的雜原子，其餘環原子為碳。其可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛的π電子系統。較佳為6至14員，更佳為7至10員。根據環與環之間共用螺原子的數目將螺雜環基分為單螺雜環基、雙螺雜環基或多螺雜環基，較佳為單螺雜環基和雙螺雜環基。更佳為4員/4員、4員/5員、4員/6員、5員/5員或5員/6員單螺雜環基。螺雜環基的非限制性實例包括：
術語“稠雜環基”指5至20員，系統中的每個環與體系 中的其他環共享毗鄰的一對原子的多環雜環基團，一個或多個環可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛的π電子系統，其中一個或多個環原子為選自氮、氧或S(O)m(其中m是整數0至2)的雜原子，其餘環原子為碳。較佳為6至14員，更佳為7至10員。根據組成環的數目可以分為雙環、三環、四環或多環稠雜環基，較佳為雙環或三環，更佳為5員/5員或5員/6員雙環稠雜環基。稠雜環基的非限制性實例包括：
術語“橋雜環基”指5至14員，任意兩個環共用兩個不直接連接的原子的多環雜環基團，其可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛的π電子系統，其中一個或多個環原子為選自氮、氧或S(O)m(其中m是整數0至2)的雜原子，其餘環原子為碳。較佳為6至14員，更佳為7至10員。根據組成環的數目可以分為雙環、三環、四環或多環橋雜環基，較佳為雙環、三環或四環，更佳為雙環或三環。橋雜環基的非限制性實例包括：
該雜環基環可以稠合於芳基、雜芳基或環院基環上，其中與母體結構連接在一起的環為雜環基，其非限制性實例包括： 和等。
雜環基可以是視需要取代的或非取代的，當被取代時，取代基較佳為一個或多個以下基團，其獨立地選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基胺基、鹵素、巰基、羥基、硝基、氰基、環烷基、雜環烷基、芳基、雜芳基、環烷氧基、雜環烷氧基、環烷硫基、雜環烷硫基、側氧基、羧基或羧酸酯基。
術語“芳基”指具有共軛的π電子體系的6至14員全碳單環或稠合多環(也就是共享毗鄰碳原子對的環)基團，較佳為6至10員，例如苯基和萘基。該芳基環可以稠合於雜芳基、雜環基或環烷基環上，其中與母體結構連接在一起的環為芳基環，其非限制性實例包括： 芳基可以是取代的或非取代的，當被取代時，取代基較佳為一個或多個以下基團，其獨立地選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基胺基、鹵素、巰基、羥基、硝基、氰基、環烷基、雜環烷基、芳基、雜芳基、環烷氧基、雜環烷氧基、環烷硫基、雜環烷硫基、羧基或羧酸酯基。
術語“雜芳基”指包含1至4個雜原子、5至14個環原子的雜芳族體系，其中雜原子選自氧、硫和氮。雜芳基較佳為5至10員，含1至3個雜原子；更佳為5員或6員，含1至2個雜原子；較佳例如咪唑基、呋喃基、噻吩基、噻唑基、吡唑基、噁唑基、吡咯基、四唑基、吡啶基、嘧啶基、噻二唑、吡嗪基等，較佳為咪唑基、吡唑基或嘧啶基、噻唑基；更佳為吡唑基。所述雜芳基環可以稠合於芳基、雜環基或環烷基環上，其中與母體結構連接在一起的環為雜芳基環，其非限制性實例包括：
雜芳基可以是視需要取代的或非取代的，當被取代時，取代基較佳為一個或多個以下基團，其獨立地選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基胺基、鹵素、巰 基、羥基、硝基、氰基、環烷基、雜環烷基、芳基、雜芳基、環烷氧基、雜環烷氧基、環烷硫基、雜環烷硫基、羧基或羧酸酯基。
術語“烷氧基”指-O-(烷基)和-O-(非取代的環烷基)，其中烷基和環烷基的定義如上所述。烷氧基的非限制性實例包括：甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、環丙氧基、環丁氧基、環戊氧基、環己氧基。烷氧基可以是視需要取代的或非取代的，當被取代時，取代基較佳為一個或多個以下基團，其獨立地選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基中的一個或多個取代基所取代。
術語“胺基保護基”是為了使分子其它部位進行反應時胺基保持不變，用易於脫去的基團對胺基進行保護。非限制性實施例包含第三丁氧羰基、乙醯基、苄基、烯丙基和對甲氧苄基等。這些基團可視需要地被選自鹵素、烷氧基或硝基中的1至3個取代基所取代。該胺基保護基較佳為對甲氧苄基。
術語“雜環基烷基”指被雜環基取代的烷基，其中烷基和雜環基如上所定義。
術語“鹵烷基”指烷基被一個或多個鹵素取代，其中烷基如上所定義。
術語“羥基”指-OH基團。
術語“羥烷基”指被羥基取代的烷基，其中烷基如上所定義。
術語“鹵素”指氟、氯、溴或碘。
術語“胺基”指-NH2。
術語“氰基”指-CN。
術語“硝基”指-NO2。
術語“側氧基”指=O。
“視需要”或“視需要地”意味著隨後所描述的事件或環境可以但不必發生，該說明包括該事件或環境發生或不發生地場合。例如，“視需要被烷基取代的雜環基團”意味著烷基可以但不必須存在，該說明包括雜環基團被烷基取代的情形和雜環基團不被烷基取代的情形。
“取代的”指基團中的一個或多個氫原子，較佳為最多5個，更佳為1至3個氫原子彼此獨立地被相應數目的取代基取代。不言而喻，取代基僅處在它們的可能的化學位置，本領域技術人員能夠在不付出過多努力的情況下確定(藉由實驗或理論)可能或不可能的取代。例如，具有游離氫的胺基或羥基與具有不飽和(如烯屬)鍵的碳原子結合時可能是不穩定的。
“醫藥組成物”表示含有一種或多種本文所述化合物或其生理學上/可藥用的鹽或前體藥物與其他化學組分的混合物，以及其他組分例如生理學/可藥用的載體和賦形劑。醫藥組成物的目的是促進對生物體的給藥，利於活性成分的吸收進而發揮生物活性。
“可藥用鹽”是指本發明化合物的鹽，這類鹽用於哺乳動物體內時具有安全性和有效性，且具有應有的生物活 性。
m和R5至R7如通式(I)化合物中所定義。
本發明化合物的合成方法
為了完成本發明的目的，本發明採用如下技術方案：
方案一
本發明通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽的製備方法，包括以下步驟：
通式(IA)的化合物在酸性條件下，脫去保護基得到通式(I)的化合物；其中：W為胺基保護基，選自第三丁氧羰基、乙醯基、苄基、烯丙基和對甲氧苄基，較佳為對甲氧苄基；Ra為胺基保護基或氫原子，該胺基保護基選自第三丁氧羰基、乙醯基、苄基、烯丙基和對甲氧苄基，較佳為對甲氧苄基；G1、L1、X1、R1和R2如通式(I)中所定義。
提供酸性的條件的試劑包括但不限於氯化氫、氯化氫的1,4-二噁烷溶液、氯化銨、三氟乙酸、甲酸、乙酸、鹽酸、硫酸、甲磺酸、硝酸、磷酸、對苯甲磺酸和TMSOTf。
上述反應較佳在溶劑中進行，所用溶劑包括但不限於：醋酸、甲醇、乙醇、正丁醇、甲苯、四氫呋喃、二氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、正己烷、二甲基亞碸、1,4-二噁烷、水、N,N-二甲基甲醯胺及其混合物。
方案二
本發明通式(II)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽的製備方法，包括以下步驟：
第一步，通式(II-1)的化合物在還原劑存在下，在酸性條件下，反應得到通式(IIB)的化合物；第二步，通式(IIB)的化合物在鹼性條件下，發生消除反應得到通式(IIA)的化合物；第三步，通式(IIA)的化合物在酸性條件下，脫去保護基得到通式(II)的化合物；其中：W為胺基保護基，選自第三丁氧羰基、乙醯基、苄基、烯丙基和對甲氧苄基，較佳為對甲氧苄基； Ra為胺基保護基或氫原子，該胺基保護基選自第三丁氧羰基、乙醯基、苄基、烯丙基和對甲氧苄基，較佳為對甲氧苄基；Rb為烷基，較佳為乙基或甲基；G1、L1、X1、R1和R2如通式(II)中所定義。
提供鹼性條件的試劑包括有機鹼和無機鹼類，該有機鹼類包括但不限於三乙胺、吡啶、4-二甲胺基吡啶、N,N-二異丙基乙胺、1,8-二氮雜二環[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)、1,5-二氮雜雙環壬-5-烯(DBN)、正丁基鋰、二異丙基胺基鋰、雙三甲基矽基胺基鋰、醋酸鉀、第三丁醇鈉、第三丁醇鉀和正丁醇鈉，該無機鹼類包括但不限於氫化鈉、磷酸鉀、碳酸鈉、碳酸鉀、醋酸鉀、碳酸銫、氫氧化鈉、氫氧化鉀和氫氧化鋰。
提供酸性的條件的試劑包括但不限於氯化氫、氯化氫的1,4-二噁烷溶液、氯化銨、三氟乙酸、甲酸、乙酸、鹽酸、硫酸、甲磺酸、硝酸、磷酸、對苯甲磺酸和TMSOTf。
還原試劑包括但不限於：鐵粉、鋅粉、硫化鈉、硫代硫酸鈉、二硫化鈉、氯化亞錫、Pd/C/H2、Pt/C/H2、雷尼鎳/H2、氫化鋁鋰、硼氫化鈉、DIBAL-H、NaAlH(O-t-Bu)3、AlH3、NaCNBH3、Na(AcO)3BH和Li(Et)3BH。
上述反應較佳在溶劑中進行，所用溶劑包括但不限於：醋酸、甲醇、乙醇、正丁醇、甲苯、四氫呋喃、二氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、正己烷、二甲基亞碸、1,4-二噁烷、水、N,N-二甲基甲醯胺及其混合物。
方案三
本發明通式(IIAa)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽的製備方法，包括以下步驟：
第一步，通式(IIAa-1)的化合物在酸性條件下，加熱反應得到通式(IIAa-2)的化合物；第二步，通式(IIAa-2)的化合物在酸性條件下，脫去保護基得到通式(IIAa)的化合物；其中：W為胺基保護基，選自第三丁氧羰基、乙醯基、苄基、烯丙基和對甲氧苄基，較佳為對甲氧苄基；Ra為胺基保護基或氫原子，該胺基保護基選自第三丁氧羰基、乙醯基、苄基、烯丙基和對甲氧苄基，較佳為對甲氧苄基；Rb為烷基，較佳為乙基或甲基；G1、L1、X1、R1和R2如通式(IIAa)中所定義。
提供酸性的條件的試劑包括但不限於氯化氫、氯化氫的1,4-二噁烷溶液、氯化銨、三氟乙酸、甲酸、乙酸、濃鹽酸、硫酸、甲磺酸、硝酸、磷酸、對苯甲磺酸和TMSOTf。
上述反應較佳在溶劑中進行，所用溶劑包括但不限 於：醋酸、甲醇、乙醇、正丁醇、甲苯、四氫呋喃、二氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、正己烷、二甲基亞碸、1,4-二噁烷、水、N,N-二甲基甲醯胺及其混合物。
方案四
本發明通式(III)或通式(IV)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽的製備方法，包括以下步驟：
通式(IIIA)的化合物在酸性條件下，脫去保護基得到通式(III)的化合物；或通式(IVA)的化合物在酸性條件下，脫去保護基得到通式(IV)的化合物；其中：W為胺基保護基，選自第三丁氧羰基、乙醯基、苄基、烯丙基和對甲氧苄基，較佳為對甲氧苄基； Ra為胺基保護基或氫原子，該胺基保護基選自第三丁氧羰基、乙醯基、苄基、烯丙基和對甲氧苄基，較佳為對甲氧苄基；環A、G1、L1、X1、X2、R1、R6~R8和s如通式(III)中所定義。
提供酸性的條件的試劑包括但不限於氯化氫、氯化氫的1,4-二噁烷溶液、氯化銨、三氟乙酸、甲酸、乙酸、鹽酸、硫酸、甲磺酸、硝酸、磷酸、對苯甲磺酸、Me3SiCl和TMSOTf。
上述反應較佳在溶劑中進行，所用溶劑包括但不限於：醋酸、甲醇、乙醇、正丁醇、甲苯、四氫呋喃、二氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、正己烷、二甲基亞碸、1,4-二噁烷、水、N,N-二甲基甲醯胺及其混合物。
方案五
本發明通式(V)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽的製備方法，包括以下步驟：
第一步，通式(V-1)的化合物在還原劑存在下，在酸性條件下，反應得到通式(V-2)的化合物；第二步，通式(V-2)的化合物在鹼性條件下，發生消除反應得到通式(VA)的化合物；第三步，通式(VA)的化合物在酸性條件下，脫去保護基得到通式(V)的化合物；其中：W為胺基保護基，選自第三丁氧羰基、乙醯基、苄基、烯丙基和對甲氧苄基，較佳為對甲氧苄基；Ra為胺基保護基或氫原子，該胺基保護基選自第三丁氧羰基、乙醯基、苄基、烯丙基和對甲氧苄基，較佳為對甲氧苄基；Rb為烷基，較佳為乙基或甲基；環A、L1、X2、R1、R6和R7如通式(V)中所定義。
提供鹼性條件的試劑包括有機鹼和無機鹼類，該有機鹼類包括但不限於三乙胺、吡啶、4-二甲胺基吡啶、N,N- 二異丙基乙胺、1,8-二氮雜二環[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)、1,5-二氮雜雙環壬-5-烯(DBN)、正丁基鋰、二異丙基胺基鋰、雙三甲基矽基胺基鋰、醋酸鉀、第三丁醇鈉、第三丁醇鉀和正丁醇鈉，該無機鹼類包括但不限於氫化鈉、磷酸鉀、碳酸鈉、碳酸鉀、醋酸鉀、碳酸銫、氫氧化鈉、氫氧化鉀和氫氧化鋰。
提供酸性的條件的試劑包括但不限於氯化氫、氯化氫的1,4-二噁烷溶液、氯化銨、三氟乙酸、甲酸、乙酸、鹽酸、硫酸、甲磺酸、硝酸、磷酸、對苯甲磺酸和TMSOTf。
還原試劑包括但不限於：鐵粉、鋅粉、硫化鈉、硫代硫酸鈉、二硫化鈉、氯化亞錫、Pd/C/H2、Pt/C/H2、雷尼鎳/H2、氫化鋁鋰、硼氫化鈉、DIBAL-H、NaAlH(O-t-Bu)3、AlH3、NaCNBH3、Na(AcO)3BH和Li(Et)3BH。
上述反應較佳在溶劑中進行，所用溶劑包括但不限於：醋酸、甲醇、乙醇、正丁醇、甲苯、四氫呋喃、二氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、正己烷、二甲基亞碸、1,4-二噁烷、水、N,N-二甲基甲醯胺及其混合物。
方案六
本發明通式(VI)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽的製備方法，包括以下步驟：
第一步，通式(VI-1)的化合物在還原劑存在下，在酸性條件下，反應得到通式(V-2)的化合物；第二步，通式(VI-2)的化合物在鹼性條件下，發生消除反應得到通式(VIA)的化合物；第三步，通式(VIA)的化合物在酸性條件下，脫去保護基得到通式(VI)的化合物；其中：W為胺基保護基，選自第三丁氧羰基、乙醯基、苄基、烯丙基和對甲氧苄基，較佳為對甲氧苄基；Ra為胺基保護基或氫原子，該胺基保護基選自第三丁氧羰基、乙醯基、苄基、烯丙基和對甲氧苄基，較佳為對甲氧苄基；Rb為烷基，較佳為乙基或甲基；L1、R1、n、R6和R7如通式(VI)中所定義。
提供鹼性條件的試劑包括有機鹼和無機鹼類，該有機鹼類包括但不限於三乙胺、吡啶、4-二甲胺基吡啶、N,N-二異丙基乙胺、1,8-二氮雜二環[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)、 1,5-二氮雜雙環壬-5-烯(DBN)、正丁基鋰、二異丙基胺基鋰、雙三甲基矽基胺基鋰、醋酸鉀、第三丁醇鈉、第三丁醇鉀和正丁醇鈉，該無機鹼類包括但不限於氫化鈉、磷酸鉀、碳酸鈉、碳酸鉀、醋酸鉀、碳酸銫、氫氧化鈉、氫氧化鉀和氫氧化鋰。
提供酸性的條件的試劑包括但不限於氯化氫、氯化氫的1,4-二噁烷溶液、氯化銨、三氟乙酸、甲酸、乙酸、鹽酸、硫酸、甲磺酸、硝酸、磷酸、對苯甲磺酸和TMSOTf。
還原試劑包括但不限於：鐵粉、鋅粉、硫化鈉、硫代硫酸鈉、二硫化鈉、氯化亞錫、Pd/C/H2、Pt/C/H2、雷尼鎳/H2、氫化鋁鋰、硼氫化鈉、DIBAL-H、NaAlH(O-t-Bu)3、AlH3、NaCNBH3、Na(AcO)3BH和Li(Et)3BH。
上述反應較佳在溶劑中進行，所用溶劑包括但不限於：醋酸、甲醇、乙醇、正丁醇、甲苯、四氫呋喃、二氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、正己烷、二甲基亞碸、1,4-二噁烷、水、N,N-二甲基甲醯胺及其混合物。
方案七
本發明通式(VII)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其可藥用的鹽的製備方法，包括以下步驟：
第一步，通式(VII-1)的化合物在還原劑存在下，在酸性條件下，反應得到通式(VII-2)的化合物；第二步，通式(VII-2)的化合物在鹼性條件下，發生消除反應得到通式(VIIA)的化合物；第三步，通式(VIIA)的化合物在酸性條件下，脫去保護基得到通式(VII)的化合物；其中：W為胺基保護基，選自第三丁氧羰基、乙醯基、苄基、烯丙基和對甲氧苄基，較佳為對甲氧苄基；Ra為胺基保護基或氫原子，該胺基保護基選自第三丁氧羰基、乙醯基、苄基、烯丙基和對甲氧苄基，較佳為對甲氧苄基；Rb為烷基，較佳為乙基或甲基；L1、X2、R1、R6和R7如通式(VII)中所定義。
提供鹼性條件的試劑包括有機鹼和無機鹼類，該有機 鹼類包括但不限於三乙胺、吡啶、4-二甲胺基吡啶、N,N-二異丙基乙胺、1,8-二氮雜二環[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)、1,5-二氮雜雙環壬-5-烯(DBN)、正丁基鋰、二異丙基胺基鋰、雙三甲基矽基胺基鋰、醋酸鉀、第三丁醇鈉、第三丁醇鉀和正丁醇鈉，該無機鹼類包括但不限於氫化鈉、磷酸鉀、碳酸鈉、碳酸鉀、醋酸鉀、碳酸銫、氫氧化鈉、氫氧化鉀和氫氧化鋰。
提供酸性的條件的試劑包括但不限於氯化氫、氯化氫的1,4-二噁烷溶液、氯化銨、三氟乙酸、甲酸、乙酸、鹽酸、硫酸、甲磺酸、硝酸、磷酸、對苯甲磺酸和TMSOTf。
還原試劑包括但不限於：鐵粉、鋅粉、硫化鈉、硫代硫酸鈉、二硫化鈉、氯化亞錫、Pd/C/H2、Pt/C/H2、雷尼鎳/H2、氫化鋁鋰、硼氫化鈉、DIBAL-H、NaAlH(O-t-Bu)3、AlH3、NaCNBH3、Na(AcO)3BH和Li(Et)3BH。
上述反應較佳在溶劑中進行，所用溶劑包括但不限於：醋酸、甲醇、乙醇、正丁醇、甲苯、四氫呋喃、二氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、正己烷、二甲基亞碸、1,4-二噁烷、水、N,N-二甲基甲醯胺及其混合物。
實施例
化合物的結構是藉由核磁共振(NMR)或/和質譜(MS)來確定的。NMR位移(δ)以10-6(ppm)的單位給出。NMR的 測定是用Bruker AVANCE-400核磁儀，測定溶劑為氘代二甲基亞碸(DMSO-d 6 )、氘代氯仿(CDCl3)、氘代甲醇(CD3OD)，內標為四甲基矽烷(TMS)。
MS的測定用FINNIGAN LCQAd(ESI)質譜儀(生產商：Thermo，型號：Finnigan LCQ advantage MAX)。
高效液相色譜法(HPLC)分析使用Agilent HPLC 1200DAD、Agilent HPLC 1200VWD和Waters HPLC e2695-2489高壓液相色譜儀。
手性HPLC分析測定使用Agilent 1260 DAD高效液相色譜儀。
高效液相製備使用Waters 2767、Waters 2767-SQ Detecor2、Shimadzu LC-20AP和Gilson-281製備型色譜儀。
手性製備使用Shimadzu LC-20AP製備型色譜儀。
CombiFlash快速製備儀使用Combiflash Rf200(TELEDYNE ISCO)。
薄層層析矽膠板使用煙臺黃海HSGF254或青島GF254矽膠板，薄層色譜法(TLC)使用的矽膠板採用的規格是0.15mm~0.2mm，薄層層析分離純化產品採用的規格是0.4mm~0.5mm。
矽膠管柱色譜法一般使用煙臺黃海矽膠200~300目矽膠為載體。
激酶平均抑制率及IC50值的測定用NovoStar酶標儀(德國BMG公司)。
本發明的已知的起始原料可以採用或按照本領域已知的方法來合成，或可購買自ABCR GmbH & Co.KG，Acros Organics，Aldrich Chemical Company，韶遠化學科技(Accela ChemBio Inc)、達瑞化學品等公司。
實施例中無特殊說明，反應能夠均在氬氣氛或氮氣氛下進行。
氬氣氛或氮氣氛是指反應瓶連接一個約1L容積的氬氣或氮氣氣球。
氫氣氛是指反應瓶連接一個約1L容積的氫氣氣球。
加壓氫化反應使用Parr 3916EKX型氫化儀和清藍QL-500型氫氣發生器或HC2-SS型氫化儀。
氫化反應通常抽真空，充入氫氣，重複操作3次。
微波反應使用CEM Discover-S 908860型微波反應器。
實施例中無特殊說明，溶液是指水溶液。
實施例中無特殊說明，反應的溫度為室溫，為20℃~30℃。
實施例中的反應進程的監測採用薄層色譜法(TLC)，反應所使用的展開劑，純化化合物採用的管柱層析的沖提劑的體系和薄層色譜法的展開劑體系包括：A：二氯甲烷/甲醇體系，B：正己烷/乙酸乙酯體系，溶劑的體積比根據化合物的極性不同而進行調節，也可以加入少量的三乙胺和醋酸等鹼性或酸性試劑進行調節。
實施例1 4-胺基-2-丁氧基-8-(4-(吡咯烷-1-基甲基)苄基)吡啶并[3,2- d]嘧啶-6(5 H)-酮 1
第一步 2-丁氧基-6-氯- N, N-二(4-甲氧基苄基)-5-硝基嘧啶-4-胺 1b
將2-丁氧基-4,6-二氯-5-硝基嘧啶1a(4.62g，17.43mmol，採用公知的方法“Journal of Medicinal Chemistry,2012,55(23),10387-10404”製備而得)溶於50mL四氫呋喃溶劑中，加入三乙胺(2.64g，26.14mmol)和N,N-雙(4-甲氧基苄基)胺(4.49g，17.43mmol)，攪拌反應4小時。反 應液減壓濃縮，用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系B純化殘餘物，得到標題化合物1b(6.20g，產率：73.8%)。
MS m/z(ESI)：487.5[M+1]
第二步 2-(6-(二(4-甲氧基苄基)胺基)-2-丁氧基-5-硝基嘧啶-4-基)乙酸乙酯 1c
將乙酸乙酯(1.09g，12.32mmol)溶於40mL四氫呋喃中，冷卻至-70℃，滴加入1M雙(三甲基矽基)胺基鋰的四氫呋喃溶液(12.3mL，12.3mmol)，-70℃下攪拌反應0.5小時，加入化合物1b(4g，8.21mmol)，-70℃下攪拌反應5小時。反應液中加入50mL飽和氯化銨溶液，用乙酸乙酯萃取(300mL×1)，有機相用水洗滌(50mL×1)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系B純化所得殘餘物，得到標題化合物1c(2.1g，產率：47%)。
MS m/z(ESI)：539.5[M+1]
第三步 2-(6-(二(4-甲氧基苄基)胺基)-2-丁氧基-5-硝基嘧啶-4-基)-3-(4-(吡咯烷-1-基甲基)苯基)丙酸乙酯 1e
將化合物1c(355mg，0.65mmol)溶於5mL N,N-二甲基甲醯胺中，加入1-(4-(氯甲基)苄基)-吡咯烷鹽酸鹽1d(240mg，0.97mmol，採用專利申請“WO2002012224”公開的方法製備而得)和碳酸銫(1.06g，3.25mmol)，50℃下攪拌反應5小時。反應液冷卻至室溫，加入20mL飽和氯化 鈉溶液，用二氯甲烷萃取(100mL×1)，有機相用水洗滌(30mL×1)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系A純化所得殘餘物，得到標題化合物1e(270mg，產率：58%)。
MS m/z(ESI)：712.4[M+1]
第四步 2-丁氧基- N,N-二(4-甲氧基苄基)-5-硝基-6-(4-(吡咯烷-1-基甲基)苯乙基)嘧啶-4-胺 1f
將化合物1e(270mg，0.38mmol)和氫氧化鋰一水合物(159.5mg，3.8mmol)溶於10mL四氫呋喃和5mL水的混合溶劑中，70℃攪拌反應16小時。反應液冷卻至室溫，加入20mL飽和氯化鈉溶液，用二氯甲烷萃取(50mL×1)，有機相用飽和氯化鈉溶液洗滌(20mL×1)，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系A純化所得殘餘物，得到標題化合物1f(220mg，產率：90%)。
MS m/z(ESI)：640.6[M+1]
第五步 3-(6-(二(4-甲氧基苄基)胺基)-2-丁氧基-5-硝基嘧啶-4-基)-2-羥基-4-(4-(吡咯烷-1-基甲基)苯基)丁酸乙酯 1h
將化合物1f(220mg，0.34mmol)溶於5mL N,N-二甲基甲醯胺中，加入第三丁醇鉀(116mg，1.03mmol)，再加入50%乙醛酸乙酯的甲苯溶液1g(210mg，1.03mmol)，攪拌反應0.5小時。反應中加入20mL飽和氯化銨溶液， 用二氯甲烷萃取(50mL×1)，有機相用水洗滌(20mL×1)，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，得到粗品標題化合物1h(250mg)，產品不經純化直接用於下一步反應。
MS m/z(ESI)：742.7[M+1]
第六步 4-(二(4-甲氧基苄基)胺基)-2-丁氧基-7-羥基-8-(4-(吡咯烷-1-基甲基)苄基)-7,8-二氫吡啶并[3,2- d]嘧啶-6(5 H)-酮 1i
將粗品化合物1h(250mg，0.34mmol)溶於5mL醋酸中，加入鋅粉(219mg，3.4mmol)，攪拌反應0.5小時。反應液過濾，濾液減壓濃縮，用飽和碳酸鉀溶液調節所得殘餘物的pH為7後，用二氯甲烷萃取(50mL×1)，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，得到粗品標題化合物1i(220mg)，產品不經純化直接用於下一步反應。
MS m/z(ESI)：666.2[M+1]
第七步 4-(二(4-甲氧基苄基)胺基)-2-丁氧基-8-(4-(吡咯烷-1-基甲基)苄基)吡啶并[3,2- d]嘧啶-6(5 H)-酮 1j
將粗品化合物1i(220mg，0.34mmol)溶於5mL乙腈中，加入1,8-二氮雜二環[5.4.0]十一碳-7-烯(155mg，1.02mmol)，80℃攪拌反應0.5小時。反應液冷卻至室溫，減壓濃縮，用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系A純化所得殘餘物，得到標題化合物1j(100mg，產率：45%)。
MS m/z(ESI)：648.7[M+1]
第八步 4-胺基-2-丁氧基-8-(4-(吡咯烷-1-基甲基)苄基)吡啶并[3,2- d]嘧啶-6(5 H)-酮 1
將化合物1j(100mg，0.15mmol)溶於10mL三氟乙酸中，密閉加熱至100℃攪拌反應16小時。反應液冷卻至室溫，減壓濃縮，用高效液相色譜法(Waters-2767，沖提體系：10mmol/L碳酸氫銨，水，乙腈)純化所得殘餘物，得到標題化合物1(20mg，產率：32%)。
MS m/z(ESI)：408.5[M+1]
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 11.18(s,1H),7.40(s,2H),7.25(d,2H),7.20(d,2H),6.58(s,1H),4.21(t,2H),4.09(s,2H),3.51(s,2H),2.39(s,4H),1.66(s,6H),1.41-1.36(m,2H),0.91(t,3H)。
實施例2 4-胺基-2-丁氧基-8-(5-(吡咯烷-1-基)戊基)吡啶并[3,2- d]嘧啶-6(5 H)-酮 2
第一步 2-(6-(二(4-甲氧基苄基)胺基)-2-丁氧基-5-硝基嘧啶-4-基)-7-溴庚酸乙酯 2a
將化合物1c(2.10g，3.90mmol)和1,5-二溴戊烷(2.67g，11.70mmol)溶於30mL N,N-二甲基甲醯胺中，加入碳酸銫(3.80g，11.70mmol)，攪拌反應6小時。反應液中加入60mL飽和氯化銨溶液，用乙酸乙酯萃取(100mL×1)，有機相用水洗滌(50mL×1)，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系B純化所得殘餘物，得到標題化合物2a(1.16g，產率：43%)。
MS m/z(ESI)：687.5[M+1]
第二步 2-(6-(二(4-甲氧基苄基)胺基)-2-丁氧基-5-硝基嘧啶-4-基)-7-(吡咯烷-1-基)庚酸乙酯 2b
將化合物2a(1.16g，1.69mmol)、吡咯烷(360mg，5.06mmol)和三乙胺(511mg，5.06mmol)溶於15mL N,N-二甲基甲醯胺中，80℃攪拌反應1小時。反應液冷卻至室 溫，加入30mL飽和氯化銨溶液，用二氯甲烷萃取(100mL×1)，有機相用水洗滌(50mL×1)，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系A純化所得殘餘物，得到標題化合物2b(1.01g，產率：87%)。
MS m/z(ESI)：678.4[M+1]
第三步 2-丁氧基- N,N-二(4-甲氧基苄基)-5-硝基-6-(6-(吡咯烷-1-基)己基)嘧啶-4-胺 2c
將化合物2b(900mg，1.33mmol)和氫氧化鋰一水合物(167.3mg，3.98mmol)溶於20mL四氫呋喃和10mL水的混合溶劑中，70℃攪拌反應16小時。反應液冷卻至室溫，加入40mL飽和氯化鈉水溶液，用二氯甲烷萃取(100mL×1)，有機相用飽和氯化鈉溶液洗滌(30mL×1)，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系A純化所得殘餘物，得到標題化合物2c(700mg，產率：87%)。
MS m/z(ESI)：606.4[M+1]
第四步 ethyl 3-(6-(二(4-甲氧基苄基)胺基)-2-丁氧基-5-硝基嘧啶-4-基)-2-羥基-8-(吡咯烷-1-基)辛酸乙酯 2d
將化合物2c(220mg，0.36mmol)溶於5mL N,N-二甲基甲醯胺中，加入第三丁醇鉀(122mg，1.09mmol)，再加入50%乙醛酸乙酯的甲苯溶液1g(223mg，1.09mmol)， 攪拌反應0.5小時。反應液中加入20mL飽和氯化銨溶液，用二氯甲烷萃取(50mL×1)，有機相用水洗滌(20mL×1)，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，得到粗品標題化合物2d(250mg)，產品不經純化直接用於下一步反應。
MS m/z(ESI)：708.3[M+1]
第五步 4-(二(4-甲氧基苄基)胺基)-2-丁氧基-7-羥基-8-(5-(吡咯烷-1-基)戊基)-7,8-二氫吡啶并[3,2- d]嘧啶-6(5 H)-酮 2e
將粗品化合物2d(250mg，0.36mmol)溶於5mL醋酸中，加入鋅粉(234mg，3.6mmol)，反應0.5小時。反應液過濾，濾液減壓濃縮，用飽和碳酸鉀溶液調節所得殘餘物pH為7，用二氯甲烷萃取(50mL×1)，有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，得到粗品標題化合物2e(220mg)，產品不經純化直接用於下一步反應。
MS m/z(ESI)：632.3[M+1]
第六步 4-(二(4-甲氧基苄基)胺基)-2-丁氧基-8-(5-(吡咯烷-1-基)戊基)吡啶并[3,2- d]嘧啶-6(5 H)-酮 2f
將粗品化合物2e(220mg，0.36mmol)溶於5mL乙腈中，加入1,8-二氮雜二環[5.4.0]十一碳-7-烯(164mg，1.08mmol)，80℃攪拌反應0.5小時。反應液冷卻至室溫，減壓濃縮，用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系A純化所得殘餘物，得到標題化合物2f(100mg，產率：45%)。
MS m/z(ESI)：614.4[M+1]
第七步 4-胺基-2-丁氧基-8-(5-(吡咯烷-1-基)戊基)吡啶并[3,2- d]嘧啶-6(5 H)-酮 2
將化合物2f(100mg，0.16mmol)溶於10mL三氟乙酸中，密閉加熱至100℃攪拌反應16小時。反應液冷卻至室溫，減壓濃縮，用高效液相色譜法(Waters-2767，沖提體系：10mmol/L碳酸氫銨，水，乙腈)純化所得殘餘物，得到標題化合物2(30mg，產率：50%)。
MS m/z(ESI)：374.3[M+1]
1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ 6.76(s,1H),4.33(t,2H),2.88(t,2H),2.71(t,4H),2.63(t,2H),1.90-1.86(m,4H),1.82-1.74(m,4H),1.70-1.62(m,2H),1.55-1.45(m,4H),0.99(t,3H)。
實施例3 4-胺基-2-丁氧基-7-(5-(吡咯烷-1-基)戊基)吡啶并[3,2- d]嘧啶-6(5 H)-酮 3
第一步 7-(吡咯烷-1-基)庚酸甲酯 3b
將7-溴庚酸甲酯3a(1.12g，5mmol，採用公知的方法“Journal of Natural Products,79(1),244-247；2016”製備而得)、吡咯烷(710mg，10mmol)和三乙胺(1.01mg，10mmol)溶於15mL N,N-二甲基甲醯胺中，80℃攪拌反應1小時。反應液冷卻至室溫，加入30mL飽和氯化銨溶液，用二氯甲烷萃取(100mL×1)，有機相用水洗滌(50mL×1)，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系A純化所得殘餘物，得到標題化合物3b(920mg，產率：86%)。
第二步 2-丁氧基-6-氯- N 4 ,N 4-二(4-甲氧基苄基)嘧啶-4,5-二胺 3c
將化合物1b(4g，8.21mmol)溶於30mL乙醇、30mL四氫呋喃和15mL水的混合溶劑中，加入鋅粉(2.67g，41.07mmol)和氯化銨(2.18g，41.07mmol)，攪拌反應2 小時。反應液中加入100mL飽和氯化鈉溶液，用乙酸乙酯萃取(200mL×1)，有機相用水洗滌(60mL×1)，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系B純化所得殘餘物，得到標題化合物3c(2g，產率：53%)。
MS m/z(ESI)：457.5[M+1]
第三步 5-胺基-6-(二(4-甲氧基苄基)胺基)-2-丁氧基嘧啶-4-甲酸甲酯 3d
將化合物3c(1g，2.19mmol)、[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀(160mg，0.22mmol)和三乙胺(442mg，4.38mmol)溶於20mL甲醇和10mL N,N-二甲基甲醯胺的混合溶劑中，用氮氣置換空氣，再用一氧化碳置換氮氣後，密閉加熱至70℃攪拌反應7小時。反應液冷卻至室溫，減壓濃縮，用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系B純化所得殘餘物，得到標題化合物3d(1g，產率：95%)。
MS m/z(ESI)：481.2[M+1]
第四步 5-胺基-6-(二(4-甲氧基苄基)胺基)-2-丁氧基嘧啶-4-甲醛 3e
將化合物3d(760mg，1.58mmol)溶於10mL二氯甲烷中，冷卻至-70℃，加入1M二異丁基氫化鋁的正己烷溶液(5.54mL，5.54mmol)，在-70℃氮氣保護下攪拌反應3小時。反應液升溫至0℃，加入20mL飽和氯化銨溶液 淬滅反應，用二氯甲烷萃取(50mL×1)，有機相用水洗滌(30mL×1)，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系B純化所得殘餘物，得到標題化合物3e(200mg，產率：28%)。
MS m/z(ESI)：451.5[M+1]
第五步 2-((5-胺基-6-(二(4-甲氧基苄基)胺基)-2-丁氧基嘧啶-4-基)(羥基)甲基)-7-(吡咯烷-1-基)庚酸甲酯 3f
將化合物3b(142mg，0.67mmol)溶於5mL四氫呋喃中，冷卻至-70℃，加入2M二異丙胺基鋰的四氫呋喃/乙苯/庚烷溶液(0.45mL，0.9mmol)，在-70℃氮氣保護下攪拌反應0.5小時，加入化合物3e(200mg，0.45mmol)，將反應液溫度緩緩升至室溫，攪拌反應1小時。反應液用10mL飽和氯化銨溶液淬滅，用二氯甲烷萃取(50mL×1)，有機相用飽和氯化鈉溶液洗滌(20mL×1)後，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用CombiFlash快速製備儀以沖提劑體系A純化所得殘餘物，得到標題化合物3f(40mg，產率：14%)。
MS m/z(ESI)：664.4[M+1]
第六步 2-丁氧基-4-((4-甲氧基苄基)胺基)-7-(5-(吡咯烷-1-基)戊基)吡啶并[3,2- d]嘧啶-6(5 H)-酮 3g
將化合物3f(40mg，0.06mmol)溶於5mL1,4-二噁烷中，加入0.5mL濃鹽酸和0.5mL水，加熱至85℃攪拌 反應2小時。反應液冷卻至室溫，用飽和碳酸氫鈉溶液調節pH為7，減壓濃縮，得到粗品標題化合物3g(31mg)，產品不經純化直接用於下一步反應。
MS m/z(ESI)：494.3[M+1]
第七步 4-胺基-2-丁氧基-7-(5-(吡咯烷-1-基)戊基)吡啶并[3,2- d]嘧啶-6(5 H)-酮 3
將粗品化合物3g(31mg，0.06mmol)溶於5mL三氟乙酸中，密閉加熱至100℃攪拌反應16小時。反應液冷卻至室溫，減壓濃縮，用高效液相色譜法(Gilson-281，沖提體系：水，乙腈)純化所得殘餘物，得到標題化合物3(3mg，產率：13%)。
MS m/z(ESI)：374.3[M+1]
1H NMR(400MHz,CD3OD)δ 7.62(s,1H),4.52(s,2H),3.65(s,2H),3.20(t,2H),3.08(s,2H),2.75(s,2H),2.15(s,2H),2.03(s,2H),1.83-1.74(m,6H),1.54-1.49(m,4H),1.00(t,3H)。
測試例： 生物學評價
測試例1、本發明化合物對人源TLR7激動活性的測定
本發明化合物對HEK-BlueTM hTLR7穩轉株細胞表達的hTLR7激活作用採用如下實驗方法測定：
一、實驗材料及儀器
1. DMEM(Gibco，10564-029), 2. 胎牛血清(GIBCO,10099), 3. 台盼藍溶液(Sigma,T8154-100ML), 4. Flexstation 3多功能酶標儀(Molecμlar Devices), 5. HEK-BlueTM hTLR7細胞系(InvivoGen,hkb-hTLR7), 6. HEK-Blue檢測試劑(InvivoGen,hb-det3), 7. 磷酸鹽緩衝液(PBS)pH7.4(上海源培生物科技股份有限公司，B320)。
二、實驗步驟
配置HEK-Blue檢測培養基，取HEK-Blue檢測乾粉一袋，加入50ml去內毒素水溶解，再放入37℃培養箱，10分鐘後無菌過濾。化合物先配製成20mM的原液；再用純DMSO稀釋至最高濃度為6 x 106nM，經3倍梯度稀釋，共10個點。
用培養基先把上述配製好的化合物稀釋20倍，然後每孔加入20μl稀釋後的化合物。
取HEK-BlueTM hTLR7細胞，先去掉上清，再加入2至5ml預熱的PBS，放入培養箱1-2分鐘，輕輕吹打細胞，台盼藍染色計數。用HEK-Blue檢測培養基重新懸浮細胞調整濃度為2.2 x 105個細胞/ml，加180μl細胞至上述已加入20μl藥物的96孔細胞培養板中，37℃，培養6-16h。
酶標儀讀數，波長為620nm。可獲得相應的OD值，經Graphpad Prism計算得到藥物的EC50值。
本發明化合物對人源TLR7激活作用可藉由以上的試驗進行測定，測得的EC50值見表1。
結論：本發明化合物對人源TLR7具有較好的激活作用。
測試例2、本發明化合物對人源TLR8激動活性的測定
本發明化合物對HEK-BlueTM hTLR8穩轉株細胞表達的hTLR8激活作用採用如下實驗方法測定：
一、實驗材料及儀器
1. DMEM(Gibco，10564-029),2. 胎牛血清(GIBCO,10099),3. 台盼藍溶液(Sigma,T8154-100ML),4. Flexstation 3多功能酶標儀(Molecμlar Devices),5. HEK-BlueTM hTLR8細胞系(InvivoGen,hkb-hTLR8),6. HEK-Blue檢測試劑(InvivoGen,hb-det3),7. 磷酸鹽緩衝液(PBS)pH7.4(上海源培生物科技股份有限公司，B320)。
二、實驗步驟
配置HEK-Blue檢測培養基，取HEK-Blue檢測乾粉一袋，加入50ml去內毒素水溶解，再放入37℃培養箱，10分鐘後無菌過濾。化合物先配製成20mM的原液；再用純DMSO稀釋至最高濃度為6 x 106nM，然後3倍梯度稀釋，共10個點；用培養基先把化合物稀釋20倍，然後每孔加入20μl稀釋後的化合物。
取HEK-BlueTM hTLR8細胞，先去掉上清，加入2-5ml預熱的PBS，放入培養箱1-2分鐘，輕輕吹打細胞，台盼藍染色計數。用HEK-Blue檢測培養基重新懸浮細胞調整濃度為2.2 x 105個細胞/ml，加180μl細胞至上述已加入20μl藥物的96孔細胞培養板中，37℃，培養6-16h。
酶標儀讀數，波長為620nm。可獲得相應的OD值，經Graphpad Prism計算得到藥物的EC50值。
本發明化合物對人源TLR8激活作用可藉由以上的試驗進行測定，測得的EC50值見表2。
結論：本發明化合物對人源TLR8激活作用較弱，說明本發明化合物對TLR7具有選擇性。
測試例3、本發明中化合物刺激外周血單個核細胞(PBMC)分泌IFN-α能力的測定
本發明中化合物刺激PBMC分泌IFN-α能力採用如下實驗方法測定：
一、實驗材料及儀器
1. RPMI 1640(Invitrogen,11875),2. FBS(Gibco,10099-141),3. Ficoll-Paque PREMIUM(GE,17-5442-02),4. 台盼藍溶液(Sigma,T8154-100ML),5. SepMateTM-50(Stemcell,15460),6. Bright-LineTM血細胞計數儀(Sigma,Z359629-1EA),7. 96孔平底板(Corning,3599),8. 96孔v底板(Corning,3894),9. 人源IFN-α試劑盒(cisbio,6FHIFPEB),10. PHERAStar多功能酶標儀(BMG，PHERAStar)。
二、實驗步驟
化合物用純DMSO稀釋，最高濃度為5mM，4倍梯度稀釋，共9個點。然後取4μl化合物，加入到196μl含10%FBS的RMPI 1640培養基中，混勻。每孔取50μl至新的96孔細胞培養板。
所有試劑平衡到室溫，取250ml培養瓶，將60ml血液和PBS+2% FBS加入其中，輕輕吹打混勻稀釋。取50ml PBMC分離管SepMateTM-50，加入15ml淋巴細胞分離液Ficoll-Paque PREMIUM，然後加入30ml稀釋後血液。1200g離心10分鐘，室溫。取上清，然後300g，離心8分鐘。用含10%FBS的RMPI 1640培養基重新懸浮並計數，調整 PBMC數量至3.33×106個細胞/ml，取150μl至已加入化合物的細胞培養板中，37℃，5.0% CO2的培養箱中培養24h。
將細胞培養板放入離心機中，1200rpm，室溫離心10分鐘。每孔取出150μl上清。先平衡人源IFN-α試劑盒中的試劑至常溫，在避光條件下根據試劑盒說明書配製抗-IFN-α-Eu3+-穴狀結合物(Cryptate conjugate)和抗-IFN-α-d2-結合物，兩者均以1：40的比例與結合緩衝液(conjugate Buffer)混勻。然後每孔加入16μl的離心取得的上清液。再每孔加入2μl剛配好的抗-IFN-α-Eu3+-穴狀結合物和抗-IFN-α-d2-結合物，震盪混勻，室溫避光孵育3h。
在PHERAStar上用HTRF模式讀數。我們將刺激產生最低檢測限至少3倍以上細胞因子水平的最低藥物濃度，定義為該化合物在該細胞因子刺激實驗上的MEC(最小有效濃度Minimal Effective Concentration)值。
本發明化合物刺激PBMC分泌IFN-α的能力藉由以上的試驗進行測定，測得的MEC值見表3。
結論：從刺激PBMC分泌IFN-α的活性的數據上看，本發明化合物能夠較好的引起IFN-α釋放。
測試例4、本發明化合物對人肝微粒體CYP3A4咪達唑侖代謝位點的酶活性的抑制作用
本發明化合物對人肝微粒體CYP3A4咪達唑侖代謝位點的酶活性採用如下實驗方法測定：
一、實驗材料及儀器
1. 磷酸緩衝液(PBS),2. NADPH(Sigma N-1630),3. 人肝微粒體(Corning Gentest),4. ABI QTrap 4000液質兩用儀(AB Sciex),5. Inertsil C8-3管柱，4.6×50mm,5μm(美國迪馬公司)，6. CYP探針受質(15μM的咪達唑侖，SIGMA UC429)和陽性對照抑制劑(酮康唑，SIGMA K1003)。
二、實驗步驟
配置100mM的PBS緩衝液，用該緩衝液配製2.5mg/ml的微粒體溶液和5mM的NADPH溶液，用PBS梯度稀釋5X濃度的化合物工作液(150、50、15、5、1.5、0.15、0.015、0μM)。用PBS梯度稀釋5X濃度的酮康唑工作液(150、50、15、5、1.5、0.15、0.015、0μM)。用PBS稀釋至15μM濃度的咪達唑侖工作液。
分別取2.5mg/ml的微粒體溶液、15μM的咪達唑侖工作液、MgCl2溶液和化合物工作液(150、50、15、5、1.5、0.15、0.015、0μM，每個濃度設置不同的反應體系)各20μl，混合均勻。陽性對照組用相同濃度的酮康唑代替化合物。同時將5mM的NADPH溶液一起在37℃預孵育5分鐘。5分鐘之後取20μl NADPH加入到各孔中，啟動反應，孵育30分鐘。所有孵育樣品設雙樣本。30分鐘後向所有樣本中 加入250μl含內標的乙腈，混勻，800rpm搖10分鐘，然後3700rpm離心10分鐘。取80μl的上清液，轉移至LC-MS/MS分析。
數值經Graphpad Prism計算得到藥物對CYP3A4咪達唑侖代謝位點的IC50值見表4。
結論：本發明化合物對人肝微粒體CYP3A4的咪達唑侖代謝位點沒有抑制作用，表現出更好的安全性，提示不會發生基於CYP3A4代謝咪達唑侖代謝位點的代謝性藥物相互作用。
測試例5、本發明化合物對人肝微粒體CYP2D6酶活性的抑制作用
本發明化合物對人肝微粒體CYP2D6酶活性採用如下實驗方法測定：
一、實驗材料及儀器
1. 磷酸緩衝液(PBS),2. NADPH(Sigma N-1630),3. 人肝微粒體(Corning Gentest),4. ABI QTrap 4000液質兩用儀(AB Sciex), 5. Inertsil C8-3管柱，4.6×50mm,5μm(美國迪馬公司)，6. CYP探針受質(20μM的右美沙芬，SIGMA Q0750)和陽性對照抑制劑(奎尼丁，SIGMA D9684)。
二、實驗步驟
配置100mM的PBS緩衝液，用該緩衝液配製2.5mg/ml的微粒體溶液和5mM的NADPH溶液，用PBS梯度稀釋5X濃度的化合物工作液(150、50、15、5、1.5、0.15、0.015、0μM)。用PBS梯度稀釋5X濃度的奎尼丁工作液(150、50、15、5、1.5、0.15、0.015、0μM)。用PBS稀釋至20μM濃度的右美沙芬工作液。
分別取2.5mg/ml的微粒體溶液、20μM的右美沙芬工作液、MgCl2溶液和化合物工作液(150、50、15、5、1.5、0.15、0.015、0μM，每個濃度設置不同的反應體系)各20μl，混合均勻。陽性對照組用相同濃度的奎尼丁代替化合物。同時將5mM的NADPH溶液一起在37℃預孵育5分鐘，5分鐘之後取20μl NADPH加入到各孔中，啟動反應，孵育30分鐘。所有孵育樣品設雙樣本。30分鐘後向所有樣本中加入250μl含內標的乙腈，混勻，800rpm搖10分鐘。3700rpm離心10分鐘。取80μl的上清液，轉移至LC-MS/MS分析。
數值經Graphpad Prism計算得到藥物對CYP2D6代謝位點的IC50值見表5。
結論：本發明化合物對人肝微粒體CYP2D6的酶活性沒有抑制作用，表現出更好的安全性，提示不會發生基於CYP2D6發生代謝性藥物相互作用。
測試例6、本發明化合物對人肝微粒體CYP3A4睾酮代謝位點的酶活性的抑制作用
本發明化合物對人肝微粒體CYP3A4睾酮代謝位點的酶活性採用如下實驗方法測定：
一、實驗材料及儀器
1. 磷酸緩衝液(PBS),2. NADPH(Sigma N-1630),3. 人肝微粒體(Corning Gentest),4. ABI QTrap 4000液質兩用儀(AB Sciex),5. Inertsil C8-3管柱，4.6×50mm,5μm(美國迪馬公司)，6. CYP探針受質(睾酮/100μM，SIGMA K1003)和陽性對照抑制劑(酮康唑，Dr.Ehrenstorfer GmbH,C17322500)。
二、實驗步驟
配置100mM的PBS緩衝液，用該緩衝液配製2.5mg/ml的微粒體溶液和5mM的NADPH溶液，用PBS梯度稀釋 5X濃度的化合物工作液(150、50、15、5、1.5、0.15、0.015、0μM)。用PBS梯度稀釋5X濃度的酮康唑工作液(150、50、15、5、1.5、0.15、0.015、0μM)。用PBS稀釋至50μM濃度的右美沙芬工作液。
分別取2.5mg/ml的微粒體溶液、50μM的睾酮工作液、MgCl2溶液和化合物工作液(150、50、15、5、1.5、0.15、0.015、0μM，每個濃度設置不同的反應體系)各20μl，混合均勻。陽性對照組用相同濃度的酮康唑代替化合物。同時將5mM的NADPH溶液一起在37℃預孵育5分鐘。5分鐘之後取20μl NADPH加入到各孔中，啟動反應，孵育30分鐘。所有孵育樣品設雙樣本。30分鐘後向所有樣本中加入250μl含內標的乙腈，混勻，800rpm搖10分鐘。3700rpm離心10分鐘。取80μl的上清液，轉移至LC-MS/MS分析。
數值經Graphpad Prism計算得到藥物對CYP3A4睾酮代謝位點的IC50值見表6。
結論：本發明化合物對對人肝微粒體CYP3A4的睾酮代謝位點沒有抑制作用，表現出更好的安全性，提示不會發生基於CYP3A4的睾酮代謝位點的代謝性藥物相互作用。
測試例7、本發明化合物對hERG鉀電流的阻斷作用
1、實驗目的
應用全自動膜片鉗在轉染hERG鉀通道的穩定細胞株 上測試本發明化合物對hERG鉀電流的阻斷作用。
2、實驗方法
2.1 實驗材料與儀器
2.1.1 實驗材料：
2.1.2 實驗儀器：
2.2 全自動膜片鉗實驗步驟
HEK293-hERG穩定細胞株按照1：4的密度在MEM/EBSS培養基(10%FBS，400μg/ml G418,1% MEM非必需胺基酸溶液(100×)，1%丙酮酸鈉溶液)中進行傳代培養，培養48-72小時之內進行全自動膜片鉗實驗。實驗當天將細胞用0.25%胰酶消化後，離心收集細胞，用細胞外液(140mM NaCl，4mM KCl，1mM MgCl2，2mM CaCl2，5mMD一水葡萄糖，10mM Hepes,pH7.4,298mOsmol)重新懸浮細胞製成細胞懸液。將細胞懸液放置在Patchliner儀器的細胞庫上，Patchliner儀器利用負壓控制器將細胞加到芯片(NPC-16)上，負壓將單個細胞吸引在芯片的小孔上。當形成全細胞模式後，儀器將按照設定的hERG電流電壓程序得到hERG電流，然後儀器自動的由低濃度到高濃度，進行化合物灌流。藉由HEAK Patchmaster,HEAK EPC10膜片鉗放大器(Nanion)和Pathlinersoftware以及Pathcontrol HTsoftware提供的數據分析軟件，對化合物各濃度下的電流以及空白對照電流進行分析。
2.3 測試結果
本發明化合物對hERG鉀電流的阻斷作用藉由以上的試驗進行測定，測得的IC50值見表7。
結論：本發明化合物對hERG的抑制作用弱，由hERG通路引起的副作用可能性小。

Claims (26)

  1. 一種通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽， 其中：G 1為CR 3或N；L 1選自-O-、-S-、-NR 4-、-C(O)-、-S(O) m-、-N(R 4)C(O)-、-C(O)N(R 4)-、-N(R 4)S(O) 2-、-S(O) 2N(R 4)-和共價鍵；X 1為伸烷基，其中該伸烷基視需要被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基和雜環基中的一個或多個取代基所取代；R 1選自氫原子、烷基、鹵烷基、烯基、炔基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基，其中該烷基、烯基、炔基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基各自獨立地視需要被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基中的一個或多個取代基所取代；R 2選自氫原子、烷基、烷氧基、鹵素、鹵烷基、 鹵烷氧基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、-C(O)R 5、-C(O)OR 5、-S(O) mR 5、-NR 6R 7和-C(O)NR 6R 7，其中該烷基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基各自獨立地視需要被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、雜環基烷基、芳基、雜芳基、-C(O)R 5、-C(O)OR 5、-S(O) mR 5、-NR 6R 7、-C(O)NR 6R 7和-X 2-NR 6R 7中的一個或多個取代基所取代；R 3選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基；R 4選自氫原子、烷基、鹵烷基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基；R 5選自氫原子、烷基、鹵烷基、胺基、羥基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基；R 6和R 7相同或不同，且各自獨立地選自氫原子、烷基、鹵烷基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基，其中該烷基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基各自獨立地視需要被選自烷基、烷氧基、鹵素、胺基、氰基、硝基、羥基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基中的一個或多個取代基所取代；或者，該R 6和R 7與相連接的氮原子一起形成雜環基，其中該雜環基除含有1個氮原子之外，還視需要 含有1至2個相同或不同選自N、O和S的雜原子，並且該雜環基視需要被選自烷基、烷氧基、側氧基、鹵素、胺基、氰基、硝基、羥基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基中的一個或多個取代基所取代；X 2為伸烷基，其中該伸烷基視需要被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基和雜環基中的一個或多個取代基所取代；且m為0、1或2。
  2. 如申請專利範圍第1項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其為通式(II)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽， 物形式或其可藥用的鹽，其中：G 1、L 1、X 1、R 1和R 2如申請專利範圍第1項中所定義。
  3. 如申請專利範圍第1或2項中所述的通式(I)所示的化 合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中該R 2選自芳基、雜芳基、雜環基和-NR 6R 7，其中該芳基、雜芳基和雜環基各自獨立地視需要被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、雜環基烷基和-X 2-NR 6R 7中的一個或多個取代基所取代；X 2、R 6和R 7如申請專利範圍第1項中所定義。
  4. 如申請專利範圍第1至3項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中該R 2選自苯基、吡啶基、吡咯烷基和-NR 6R 7，其中該\苯基、吡啶基和吡咯烷基各自獨立地視需要被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、雜環基烷基和-X 2-NR 6R 7中的一個或多個取代基所取代；X 2、R 6和R 7如申請專利範圍第1項中所定義。
  5. 如申請專利範圍第1至4項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其為通式(III)或通式(IV)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽， 其中：環A為苯基或吡啶基；R 8相同或不同，且各自獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基和雜環基烷基；R 6和R 7與相連接的氮原子一起形成雜環基，其中該雜環基除含有1個氮原子之外，還視需要含有1至2個相同或不同選自N、O和S的雜原子，並且該雜環基視需要被選自烷基、烷氧基、側氧基、鹵素、胺基、氰基、硝基、羥基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基中的一個或多個取代基所取代；s為0、1、2或3；且G 1、L 1、X 1、X 2和R 1如申請專利範圍第1項中所定義。
  6. 如申請專利範圍第1至5項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中該X 1為伸烷基。
  7. 如申請專利範圍第1至6項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、 對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中該G 1為N。
  8. 如申請專利範圍第1至7項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其為通式(V)或通式(VI)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽， 其中：環A為苯基或吡啶基；n為1到9的整數；R 6和R 7與相連接的氮原子一起形成雜環基，其中該雜環基除含有1個氮原子之外，還視需要含有1至2個相同或不同選自N、O和S的雜原子，並且該雜環基視需要被選自烷基、烷氧基、側氧基、鹵素、胺基、氰基、硝基、羥基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基中的一個或多個取代基所取代；L 1、X 2和R 1如申請專利範圍第1項中所定義。
  9. 如申請專利範圍第1至8項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、 對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其為通式(VII)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽， 其中：R 6和R 7與相連接的氮原子一起形成雜環基，其中該雜環基除含有1個氮原子之外，還視需要含有1至2個相同或不同選自N、O和S的雜原子，並且該雜環基視需要被選自烷基、烷氧基、側氧基、鹵素、胺基、氰基、硝基、羥基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基中的一個或多個取代基所取代；L 1、X 2和R 1如申請專利範圍第1項中所定義。
  10. 如申請專利範圍第1至9項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中該L 1為-O-。
  11. 如申請專利範圍第1至10項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中該R 1為烷基。
  12. 如申請專利範圍第1至11項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其選自：
  13. 一種通式(IA)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽， 其中：G 1為CR 3或N；W為胺基保護基；R a為胺基保護基或氫原子；L 1選自-O-、-S-、-NR 4-、-C(O)-、-S(O) m-、-N(R 4)C(O)-、-C(O)N(R 4)-、-N(R 4)S(O) 2-、-S(O) 2N(R 4)-和共價鍵；X 1為伸烷基，其中該伸烷基視需要被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、 硝基、環烷基和雜環基中的一個或多個取代基所取代；R 1選自氫原子、烷基、鹵烷基、烯基、炔基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基，其中該烷基、烯基、炔基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基各自獨立地視需要被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基中的一個或多個取代基所取代；R 2選自氫原子、烷基、烷氧基、鹵素、鹵烷基、鹵烷氧基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、-C(O)R 5、-C(O)OR 5、-S(O) mR 5、-NR 6R 7和-C(O)NR 6R 7，其中該烷基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基各自獨立地視需要被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、雜環基烷基、芳基、雜芳基、-C(O)R 5、-C(O)OR 5、-S(O) mR 5、-NR 6R 7、-C(O)NR 6R 7和-X 2-NR 6R 7中的一個或多個取代基所取代；R 3選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基；R 4選自氫原子、烷基、鹵烷基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基；R 5選自氫原子、烷基、鹵烷基、胺基、羥基、環 烷基、雜環基、芳基和雜芳基；R 6和R 7相同或不同，且各自獨立地選自氫原子、烷基、鹵烷基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基，其中該烷基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基各自獨立地視需要被選自烷基、烷氧基、鹵素、胺基、氰基、硝基、羥基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基中的一個或多個取代基所取代；或者，該R 6和R 7與相連接的氮原子一起形成雜環基，其中該雜環基除含有1個氮原子之外，還視需要含有1至2個相同或不同選自N、O和S的雜原子，並且該雜環基視需要被選自烷基、烷氧基、側氧基、鹵素、胺基、氰基、硝基、羥基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基中的一個或多個取代基所取代；X 2為伸烷基，其中該伸烷基視需要被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基和雜環基中的一個或多個取代基所取代；且m為0、1或2。
  14. 如申請專利範圍第13項所述的通式(IA)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其選自：
  15. 一種通式(IIA)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽， 其中：W為胺基保護基；R a為胺基保護基或氫原子；G 1、L 1、X 1、R 1和R 2如申請專利範圍第13項中所定義。
  16. 一種通式(IIB)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽， 其中：W為胺基保護基；R a為胺基保護基或氫原子；G 1、L 1、X 1、R 1和R 2如申請專利範圍第13項中所定義。
  17. 如申請專利範圍第16項所述的通式(IIB)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其選自：
  18. 一種製備如申請專利範圍第1項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽的方法，該方法包括： 通式(IA)的化合物脫去保護基得到通式(I)的化合物； 其中：W為胺基保護基；R a為胺基保護基或氫原子；G 1、L 1、X 1、R 1和R 2如申請專利範圍第1項中所定義。
  19. 一種製備如申請專利範圍第15項所述的通式(IIA)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽的方法，該方法包括： 通式(IIB)的化合物在鹼性條件下，發生消除反應得到通式(IIA)的化合物；其中：W為胺基保護基；R a為胺基保護基或氫原子；G 1、L 1、X 1、R 1和R 2如申請專利範圍第15項中所定義。
  20. 一種製備如申請專利範圍第2項所述的通式(II)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽的方法，該方法包括： 通式(IIA)的化合物在酸性條件下脫去保護基得到通式(II)的化合物；其中：W為胺基保護基；R a為胺基保護基或氫原子；G 1、L 1、X 1、R 1和R 2如申請專利範圍第2項中所定義。
  21. 一種醫藥組成物，該醫藥組成物含有治療有效量的如申請專利範圍第1至12項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，以及一種或多種藥學上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。
  22. 一種申請專利範圍第1至12項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其可藥用的鹽或申請專利範圍第21項所述的醫藥組成物的用途，其用在製備用於激動TLR7的藥物。
  23. 一種申請專利範圍第1至12項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、 對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其可藥用的鹽或申請專利範圍第21項所述的醫藥組成物的用途，其用在製備用於治療由病毒引起的感染的藥物。
  24. 如申請專利範圍第23項所述的用途，其中病毒選自：登革熱病毒、黃熱病毒、西尼羅病毒、日本腦炎病毒、蜱傳腦炎病毒、昆津病毒、墨累山谷腦炎病毒、聖路易腦炎病毒、鄂木斯克出血熱病毒、牛病毒性腹瀉病毒、濟卡病毒、HIV、HBV、HCV、HPV、RSV、SARS和流感病毒。
  25. 一種申請專利範圍第1至12項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其可藥用的鹽或申請專利範圍第21項所述的醫藥組成物的用途，其用在製備用於治療或預防腫瘤的藥物。
  26. 如申請專利範圍第25項所述的用途，其中腫瘤選自：黑色素瘤、非小細胞肺癌、肝細胞癌、基底細胞癌、腎細胞癌和骨髓瘤。
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PE20120106A1 (es) * 2008-12-09 2012-02-20 Gilead Sciences Inc Moduladores de receptores tipo toll
EP2607365A1 (en) * 2009-02-11 2013-06-26 The Regents of The University of California Toll-like receptor modulators and treatment of diseases
MY169159A (en) * 2012-02-08 2019-02-19 Janssen R&D Ireland Piperidino-pyrimidine derivatives for the treatment of viral infections
KR102306860B1 (ko) * 2014-09-16 2021-09-30 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 톨-유사 수용체 조정제를 제조하는 방법
MA51081A (fr) * 2015-03-04 2020-10-14 Gilead Sciences Inc Composés modulateurs de récepteurs de type toll

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