RU2742752C1 - Medicinal preparation in form of sol for treating a disease and/or condition characterized by violation of skin integrity, and a method for preparing it - Google Patents

Medicinal preparation in form of sol for treating a disease and/or condition characterized by violation of skin integrity, and a method for preparing it Download PDF

Info

Publication number
RU2742752C1
RU2742752C1 RU2019126559A RU2019126559A RU2742752C1 RU 2742752 C1 RU2742752 C1 RU 2742752C1 RU 2019126559 A RU2019126559 A RU 2019126559A RU 2019126559 A RU2019126559 A RU 2019126559A RU 2742752 C1 RU2742752 C1 RU 2742752C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
titanium dioxide
sodium
sol
skin
group
Prior art date
Application number
RU2019126559A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Александр Валентинович Виноградов
Владимир Валентинович Виноградов
Анна Фабиовна Фахардо
Василий Валентинович Виноградов
Original Assignee
федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Национальный исследовательский университет ИТМО" (Университет ИТМО)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Национальный исследовательский университет ИТМО" (Университет ИТМО) filed Critical федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Национальный исследовательский университет ИТМО" (Университет ИТМО)
Priority to RU2019126559A priority Critical patent/RU2742752C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2742752C1 publication Critical patent/RU2742752C1/en

Links

Images

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/19Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing inorganic ingredients
    • A61K8/29Titanium; Compounds thereof
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10Dispersions; Emulsions
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

FIELD: pharmaceuticals.
SUBSTANCE: group of inventions refers to medicinal preparations for therapy of diseases and/or conditions characterized by violation of skin integument, including in case of burn injury, and discloses a medicinal preparation in the form of a sol for treating a skin burn caused by a thermal or chemical exposure, as well as a method for production thereof.
EFFECT: preparation is characterized by that it contains titanium dioxide, anionic surfactant and viscosity increasing additive; preparation of titanium dioxide is characterized by manifestation of antibacterial effect, as well as immunostimulating properties, as well as increased rate of wound burns healing on skin and recovery of skin integrity.
7 cl, 5 dwg, 10 tbl

Description

Изобретение относится к фармацевтике, а именно к лекарственным препаратам для терапии заболеваний и/или состояний, характеризующихся нарушением целостности кожного покрова, в том числе при ожоговом поражении.The invention relates to pharmaceuticals, namely to drugs for the treatment of diseases and / or conditions characterized by a violation of the integrity of the skin, including burn injury.

Современный опыт мировой и отечественной медицины позволяет использовать высокоэффективные подходы к лечению неогнестрельных, непроникающих, неосложненных ран с первичным бактериальным загрязнением [1, 2, 3], тем не менее, каждый день возникают новые вызовы, связанные не только с ростом количества различных травм кожи [4], но и с проблемой восстановления первоначальной структуры кожи с целью достижения лучших косметических результатов [5], поскольку при раневом процессе воспалительная реакция на фазе альтерации характеризуется повреждением клеток и межклеточного вещества, вызванным освобождением значительного количества медиаторов воспаления, обеспечивающих увеличение сосудистой проницаемости [6]. Кроме того, при существующих темпах адаптации микробов к антибиотикам и антисептикам [7, 8], существенно возрастает роль средств обеспечивающих активацию неспецифического, врожденного иммунитета [9]. Последний в коже обеспечивается антиген предоставляющей функцией и другими видами межклеточных коопераций тканевых базофилов, дендритных клеток, макрофагов, и лимфоцитов, опосредованных наличием на их мембранах, прежде всего Toll-подобных рецепторов [10]. Toll-подобные рецепторы (TLR) являются одними из ключевых рецепторов врожденной иммунной системы млекопитающих. Рецепторы данного семейства способны распознавать специфические высококонсервативные молекулярные участки (паттерны) в структуре патогенов, инициируя развитие реакций как врожденного, так и приобретенного иммунного ответа, приводя в конечном итоге к элиминации возбудителя из организма. При этом каждый отдельный тип TLR способен связывать широкий спектр молекул микробного происхождения, различных по химическим свойствам и структуре.The modern experience of world and domestic medicine makes it possible to use highly effective approaches to the treatment of non-fire, non-penetrating, uncomplicated wounds with primary bacterial contamination [1, 2, 3]; nevertheless, every day new challenges arise that are associated not only with an increase in the number of various skin injuries [ 4], but also with the problem of restoring the original structure of the skin in order to achieve better cosmetic results [5], since in the wound process, the inflammatory response in the alteration phase is characterized by damage to cells and intercellular substance caused by the release of a significant amount of inflammatory mediators, providing an increase in vascular permeability [6 ]. In addition, at the existing rates of adaptation of microbes to antibiotics and antiseptics [7, 8], the role of agents providing the activation of nonspecific, innate immunity increases significantly [9]. The latter in the skin is provided with an antigen-providing function and other types of intercellular cooperation of tissue basophils, dendritic cells, macrophages, and lymphocytes, mediated by the presence of Toll-like receptors on their membranes [10]. Toll-like receptors (TLR) are one of the key receptors of the innate immune system in mammals. Receptors of this family are able to recognize specific highly conserved molecular regions (patterns) in the structure of pathogens, initiating the development of reactions of both innate and acquired immune responses, ultimately leading to the elimination of the pathogen from the body. Moreover, each separate type of TLR is able to bind a wide range of microbial molecules with different chemical properties and structure.

Инфицирование раневой поверхности различными бактериями-оппортунистами инициирует работу различных TLR за счет соответствующих молекул в составе поверхностных структур бактериальной клетки. Известно, что липотейхоевая кислота, пептидогликан и другие компоненты грамположительных бактерий активируют TLR2. В свою очередь, липополисахарид (ЛПС) грамотрицательных бактерий связывается с TLR4. Помимо этих соединений флагеллин жгутиков бактерий активирует TLR5, неметилированные участки CpG ДНК - TLR9, различные триациллипопептиды - TLR1. Таким образом, многочисленные молекулы микробного происхождения инициируют целый каскад ответных реакций со стороны макроорганизма, в результате чего активируется антимикробный иммунитет в коже, слизистых оболочках респираторного и желудочно-кишечного тракта.Infection of the wound surface with various opportunistic bacteria initiates the work of various TLRs due to the corresponding molecules in the surface structures of the bacterial cell. Lipoteichoic acid, peptidoglycan and other components of gram-positive bacteria are known to activate TLR2. In turn, the lipopolysaccharide (LPS) of gram-negative bacteria binds to TLR4. In addition to these compounds, flagellin of bacterial flagella activates TLR5, unmethylated regions of CpG DNA, TLR9, and various triacillipopeptides, TLR1. Thus, numerous molecules of microbial origin initiate a whole cascade of responses from the macroorganism, as a result of which antimicrobial immunity is activated in the skin, mucous membranes of the respiratory and gastrointestinal tract.

Управление иммунным ответом путем использования различных наноструктур является перспективным подходом к лечению болезней человека. Особый интерес представляет разработка новых лекарственных препаратов, воздействующих на систему PAMP (Pathogen Associated Molecular Patterns) и DAMP (Danger Associated Molecular Patterns), в частности - Toll-подобных рецепторов [11]. Направленная модуляция этих рецепторов с помощью фармакологических препаратов является относительно новым направлением в лечении аллергии, аутоиммунной патологии и воспалительных процессов [12].Managing the immune response by using various nanostructures is a promising approach to the treatment of human diseases. Of particular interest is the development of new drugs that affect the PAMP (Pathogen Associated Molecular Patterns) and DAMP (Danger Associated Molecular Patterns) systems, in particular, Toll-like receptors [11]. Targeted modulation of these receptors using pharmacological drugs is a relatively new direction in the treatment of allergies, autoimmune pathology, and inflammatory processes [12].

Следует отметить, что недостаточная активация не даст нужного терапевтического эффекта, при этом гиперактивация TLR при действии эндогенных лигандов может привести к развитию чрезмерного воспалительного ответа, сопровождающегося повреждением тканей и запуском механизма иммунопатогенеза [13].It should be noted that insufficient activation will not give the desired therapeutic effect, while TLR hyperactivation under the action of endogenous ligands can lead to the development of an excessive inflammatory response, accompanied by tissue damage and triggering the mechanism of immunopathogenesis [13].

TLR лиганды представляют собой группу РАМР, которые активируют иммунную систему путем связывания с TLR рецептором, распознающим патогенные агенты, на таких клетках как моноциты/макрофаги, дендритные клетки и нейтрофилы. Даже если наночастицы не являются непосредственно токсичными для иммунных клеток, они изменяют нормальную реакцию защиты путем связывания с лигандами и последующим подавлением активации TLR-рецепторов [14].TLR ligands are a group of PAMPs that activate the immune system by binding to a TLR receptor that recognizes pathogenic agents on cells such as monocytes / macrophages, dendritic cells, and neutrophils. Even if nanoparticles are not directly toxic to immune cells, they alter the normal defense response by binding to ligands and subsequent suppression of TLR activation [14].

Известен опыт использования наночастиц золота в качестве носителей для доставки пептидных лекарств, которые нацеливаются на Toll-подобные рецепторы или блокируют пути внутриклеточной передачи сигналов чрезмерных воспалительных реакций, в частности TLR4 [15]. Однако синтетические высокопористые липопротеиноподобные наночастицы золота связывались с LPS, чем провоцировали значительное уменьшение активации NFκB [16].There is a known experience of using gold nanoparticles as carriers for the delivery of peptide drugs that target Toll-like receptors or block the pathways of intracellular signaling of excessive inflammatory responses, in particular TLR4 [15]. However, synthetic highly porous lipoprotein-like gold nanoparticles bound to LPS, thereby provoking a significant decrease in NFκB activation [16].

Эксперименты, направленные на изучение иммуномодулирующего эффекта наночастиц диоксида церия в присутствии липополисахаридов (LPS) также показали отсутствие значительного эффекта [17].Experiments aimed at studying the immunomodulatory effect of cerium dioxide nanoparticles in the presence of lipopolysaccharides (LPS) also showed no significant effect [17].

Подобные эксперименты с наночастицами оксида железа продемонстрировали влияние частиц на индуцированную TLR-лигандами выработку цитокинов. При этом уровни цитокинов, индуцированных LPS, сильно зависели как от концентрации LPS, так от концентрации и размера самих частиц [18].Similar experiments with iron oxide nanoparticles demonstrated the effect of particles on TLR ligand-induced cytokine production. The levels of cytokines induced by LPS strongly depended on both the LPS concentration and the concentration and size of the particles themselves [18].

Прототипом предлагаемого решения являются активно применяемые в настоящее время для лечения ожоговых ран препараты на основе серебра или его солей, например, Аргосульфан®, включающий в качестве активного вещества сульфатиазол серебра (ht1ps:https://www.rlsnet.ru/tn_index_id_357.htm). Данный препарат представляет собой крем для наружного применения и включает в качестве вспомогательных агентов цетостеариловый спирт; парафин жидкий; вазелин; глицерол; натрия лаурилсульфат; метилпарагидроксибензоат; пропилпарагидроксибензоат; калия дигидрофосфат; натрия гидрофосфат; вода для инъекций. Однако у Аргосульфана и аналогичных препаратов есть ряд недостатков, к которым можно отнести сложность подбора доз и длительности курса лечения, поскольку использование малых доз не окажет необходимый эффект, превышение дозы может привести к необратимому накоплению серебра в органах и тканях пациента.The prototype of the proposed solution is currently actively used for the treatment of burn wounds preparations based on silver or its salts, for example, Argosulfan®, which includes silver sulfathiazole as an active substance (ht1ps: //www.rlsnet.ru/tn_index_id_357.htm). This drug is a cream for external use and includes cetostearyl alcohol as auxiliary agents; liquid paraffin; petrolatum; glycerol; sodium lauryl sulfate; methyl parahydroxybenzoate; propyl parahydroxybenzoate; potassium dihydrogen phosphate; sodium hydrogen phosphate; water for injections. However, Argosulfan and similar drugs have a number of disadvantages, which include the complexity of the selection of doses and the duration of the course of treatment, since the use of small doses will not have the desired effect, exceeding the dose can lead to irreversible accumulation of silver in the patient's organs and tissues.

Прототипом предлагаемого способа является способ получения противовоспалительного ранозаживляющего средства, включающего наночастицы серебра [19]. Способ включает следующие стадии: в асептических условиях при нагревании смешивают 5 мас. % ПЭО-1500, 4 мас. % стабилизированного золя наночастиц серебра, 4 мас. % стабилизированного золя наночастиц железа, 0,70 мас. % хлорамфеникола, 3,0 мас. % метилурацила, охлаждают, доводят до 100 мас. % ПЭО-400 перемешивают с одновременной гомогенизацией. Однако данный способ является сложным в реализации, а получаемые им препараты не обладают должной эффективностью.The prototype of the proposed method is a method for producing an anti-inflammatory wound-healing agent, including silver nanoparticles [19]. The method includes the following stages: under aseptic conditions with heating mix 5 wt. % PEO-1500, 4 wt. % stabilized sol of silver nanoparticles, 4 wt. % stabilized sol of iron nanoparticles, 0.70 wt. % chloramphenicol, 3.0 wt. % methyluracil, cooled, adjusted to 100 wt. % PEO-400 is mixed with simultaneous homogenization. However, this method is difficult to implement, and the drugs obtained by it do not have the required efficiency.

Таким образом, задачей настоящего изобретения является разработка простого и эффективного способа получения лекарственного препарата в виде золя для лечения заболеваний и/или состояний, характеризующихся нарушением целостности кожного покрова, при использовании которого отсутствуют риски, наблюдаемые при приеме препаратов серебра, при соизмеряемой или превышающей таковой для прототипа эффективности лечения.Thus, the object of the present invention is to provide a simple and effective method for preparing a medicinal product in the form of a sol for the treatment of diseases and / or conditions characterized by a violation of the integrity of the skin, when using which there are no risks observed when taking silver preparations, when commensurate with or exceeding that for prototype treatment efficacy.

Еще одной задачей настоящего изобретения является создание лекарственного препарата в виде золя для лечения заболеваний и/или состояний, характеризующихся нарушением целостности кожного покрова, обладающего антибактериальным эффектом и стимулирующего развитие местного иммунитета.Another object of the present invention is to provide a medicament in the form of a sol for the treatment of diseases and / or conditions characterized by a violation of the integrity of the skin, having an antibacterial effect and stimulating the development of local immunity.

Предлагаемый в рамках настоящей заявки препарат диоксида титана характеризуется тем, что проявляет антибактериальный эффект за счет генерации активных форм кислорода (АФК) при фотоактивации ультрафиолетом. Кроме того предлагаемый препарат характеризуется иммуностимулирующей способностью за счет усиления активации TLR типов.The titanium dioxide preparation proposed in this application is characterized by the fact that it exhibits an antibacterial effect due to the generation of reactive oxygen species (ROS) during photoactivation with ultraviolet light. In addition, the proposed drug is characterized by immunostimulating ability due to increased activation of TLR types.

Поставленные задачи решаются за счет лекарственного препарата в виде золя, предназначенного для лечения заболеваний и/или состояний, характеризующихся нарушением целостности кожного покрова, обладающего антибактериальным эффектом и стимулирующего развитие местного иммунитета.The set tasks are solved due to the drug in the form of a sol, intended for the treatment of diseases and / or conditions characterized by a violation of the integrity of the skin, which has an antibacterial effect and stimulates the development of local immunity.

Технический результат - создание простого эффективного способа получения лекарственного препарата диоксида титана в виде золя, предназначенного для лечения заболеваний и/или состояний, характеризующихся нарушением целостности кожного покрова;The technical result is the creation of a simple effective method for producing a medicinal product of titanium dioxide in the form of a sol, intended for the treatment of diseases and / or conditions characterized by a violation of the integrity of the skin;

Технический результат - предлагаемый препарат диоксида титана характеризуется проявлением антибактериального эффекта, а также иммуностимулирующих свойств. Кроме того препарат характеризуется увеличенной скоростью заживления ожоговых ран на коже и восстановления целостности кожных покровов в сравнении с прототипом - противоожоговым препаратом на основе сульфатиазола серебра. Препарат проявляет улучшенные иммуностимулирующие свойства по сравнению с прототипом.The technical result is the proposed preparation of titanium dioxide is characterized by the manifestation of an antibacterial effect, as well as immunostimulating properties. In addition, the drug is characterized by an increased rate of healing of burn wounds on the skin and restoration of the integrity of the skin in comparison with the prototype - an anti-burn drug based on silver sulfathiazole. The drug exhibits improved immunostimulating properties compared to the prototype.

Технический результат достигается приготовлением препарата в виде золя способом, характеризующимся тем, что проводят гидролиз изопропоксида титана в присутствии кислоты при мольном соотношении концентраций [Ti]/[H+] - 2-3:1 сопровождающийся ультразвуковой кавитацией с частотой 24-42 кГц и нагреванием до 50-90°С, получая при этом золь диоксида титана, затем добавляют анионное ПАВ в мольном соотношении диоксида титана к ПАВ - 1500:1-1000:1, затем в золь вводят добавку, повышающую вязкость, в массовом соотношении диоксид титана: добавка - 100:1-1:1.The technical result is achieved by preparing the preparation in the form of a sol by a method characterized by the fact that hydrolysis of titanium isopropoxide in the presence of acid at a molar concentration ratio [Ti] / [H +] - 2-3: 1 accompanied by ultrasonic cavitation with a frequency of 24-42 kHz and heating to 50-90 ° C, while obtaining a titanium dioxide sol, then add an anionic surfactant in a molar ratio of titanium dioxide to surfactant - 1500: 1-1000: 1, then an additive that increases the viscosity is introduced into the sol, in a mass ratio titanium dioxide: additive - 100: 1-1: 1.

Технический результат достигается путем использования препарата в виде золей следующего состава, в мас. %:The technical result is achieved by using the drug in the form of sols of the following composition, in wt. %:

Активное веществоActive substance Диоксид титанаTitanium dioxide 95,000-99,90095,000-99,900 Вспомогательные вещества Excipients Анионное ПАВAnionic surfactant 0,01000-0,05000.01000-0.0500 Повышающая вязкость добавкаViscosity increasing additive до 100%up to 100%

Сущность поясняется фиг. 1-5, где на:The essence is illustrated in FIG. 1-5, where on:

Фиг. 1, 2 - фотографии эпидермиса в зоне регенерата, окрашенного гематоксилином и эозином.FIG. 1, 2 - photographs of the epidermis in the area of the regenerate stained with hematoxylin and eosin.

Фиг. 3 - фотографии сосудов гемомикроциркуляторного русла в зоне регенерата на уровне проекции дермы кожи.FIG. 3 - photographs of the vessels of the hemomicrocirculatory bed in the regenerate zone at the level of the projection of the skin dermis.

Фиг. 4 - фотографии сосудов гемомикроциркуляторного русла в зоне регенерата на границе с подлежащими тканями.FIG. 4 - photographs of the vessels of the hemomicrocirculatory bed in the regenerate zone at the border with the underlying tissues.

Фиг. 5 - фотографии тканевых базофилов соединительной ткани регенерата, окрашенной толлуидиновым синим.FIG. 5 - photographs of tissue basophils of the regenerate connective tissue, stained with toluidine blue.

Описание изобретения.Description of the invention.

Получение лекарственных препаратов гидрозоля диоксида титана.Obtaining medicinal preparations of titanium dioxide hydrosol.

Получение гидрозолей диоксида титана.Preparation of titanium dioxide hydrosols.

Лекарственные препараты согласно изобретению представляют собой модифицированные гидрозоли диоксида титана. Их получение происходит в несколько этапов.The medicinal preparations according to the invention are modified titanium dioxide hydrosols. Their receipt takes place in several stages.

Получение золя диоксида титанаObtaining a titanium dioxide sol

Наночастицы TiO2 синтезируются золь-гель методом гидролиза изопропоксида титана. Коллоидный золь формируется за счет гидролиза и полимеризующих реакций вещества-предшественника, которым обычно является неорганическая соль металла или органическое соединение с металлом, например, алкоголят.Полученный золь характеризуется высокой чистотой, контролируемым размером частиц и высокой степенью кристалличности. Учитывая, что протекание процесса гидролиза алкоксидов титана всегда сопровождается образованием кристаллического ядра (только кристаллическая фаза отвечает за наведение фотоактивной функции, определяющей управляемую бактерицидность), то задача по разработке эффективного способа получения лекарственного препарата заключалась также в развитии степени кристалличности дисперсной фазы. Наличие протонирующих ионов существенно развивает ионную силу раствора, значительно развивая скорость роста кристаллического ядра и нивелируя содержание «шубы» лигандов. Для этого в технологическом цикле используются различные кислоты с высокой константой диссоциации в водных растворах, определяющих рост кристалличности и стабилизации частиц дисперсной фазы в водных средах.TiO 2 nanoparticles are synthesized by the sol-gel method of hydrolysis of titanium isopropoxide. The colloidal sol is formed by hydrolysis and polymerizing reactions of a precursor, which is usually an inorganic metal salt or an organic compound with a metal, such as an alcoholate. The resulting sol is characterized by high purity, controlled particle size and high crystallinity. Taking into account that the course of the hydrolysis of titanium alkoxides is always accompanied by the formation of a crystalline core (only the crystalline phase is responsible for the induction of the photoactive function, which determines the controlled bactericidal activity), the task of developing an effective method for producing a drug was also in the development of the degree of crystallinity of the dispersed phase. The presence of protonating ions significantly develops the ionic strength of the solution, significantly increasing the growth rate of the crystal core and leveling the content of the "coat" of ligands. For this, various acids with a high dissociation constant in aqueous solutions are used in the technological cycle, which determine the growth of crystallinity and stabilization of the dispersed phase particles in aqueous media.

В способе могут быть использованы следующие кислоты: серная, азотная, хлороводородная и уксусная кислота. Исходные концентрации кислот составляют 0,5 М-15 М, исходная концентрация изопропоксида титана составляет 3 М.In the method, the following acids can be used: sulfuric, nitric, hydrochloric and acetic acids. The initial concentration of acids is 0.5 M-15 M, the initial concentration of titanium isopropoxide is 3 M.

Предпочтительным является вариант с использованием азотной кислоты. Выбор концентрационного параметра основывается на двух критериях, основной из которых - это формирование устойчивой коллоидной системы (стабильность гидрозоля) при минимальных дозах протонирующего агента. Подходящий диапазон молярных концентраций растворов Ti(C3H7O)4/HNO3 является диапазон 3/1-2, при этом наиболее подходящее соотношение составляет 2,6, которое обеспечивает высокие показатели удельной площади поверхности сухого остатка, позволяя гидрозолю на ожоговой ране обеспечивать более эффективные пенетрирующие и защитные свойства.The preferred variant is using nitric acid. The choice of the concentration parameter is based on two criteria, the main of which is the formation of a stable colloidal system (hydrosol stability) with minimal doses of the protonating agent. A suitable molar concentration range for Ti (C3H7O) 4 / HNO3 solutions is 3 / 1-2, with the most suitable ratio being 2.6, which provides high specific surface area solids, allowing the hydrosol on the burn wound to provide more effective penetration and protective properties.

Важным параметром, поддерживающим стабильность гидрозоля во времени, являются условия ультразвуковой кавитации (физическая пептизация), которая позволяет эффективно стабилизировать частицы дисперсной фазы, нейтрализуя действия активных компонентов (азотная кислота) и которая активно применяется как стадия во многих технологических производствах, в том числе фармацевтических. Для такой активации крайне важными остаются показатели мощности и частоты ультразвукового воздействия. Предпочтительными частотами ультразвуковой кавитации являются 24 кГц - 42 кГц. Наиболее предпочтительная частота составляет 24 кГц. Мощность ультразвуковой кавитации составляет 100-300 Вт/см2.An important parameter that maintains the stability of the hydrosol over time is the conditions of ultrasonic cavitation (physical peptization), which effectively stabilizes the particles of the dispersed phase, neutralizing the action of active components (nitric acid) and which is actively used as a stage in many technological industries, including pharmaceuticals. For such activation, indicators of power and frequency of ultrasonic exposure remain extremely important. The preferred frequencies for ultrasonic cavitation are 24 kHz - 42 kHz. The most preferred frequency is 24 kHz. Ultrasonic cavitation power is 100-300 W / cm2.

Для достижения стадии межмолекулярной дегидратации в водных растворах используют подогрев, предполагающий активацию механизмов деструкции «шубы» лигандов, параллельно со стадией химической пептизации и ультразвуковой кавитации. Предпочтительно нагревать систему в диапазоне 50-90°С. Наиболее эффективный вариант предполагает нагрев до 80°С.To achieve the stage of intermolecular dehydration in aqueous solutions, heating is used, which involves activation of the mechanisms of destruction of the "coat" of ligands, in parallel with the stage of chemical peptization and ultrasonic cavitation. It is preferable to heat the system in the range of 50-90 ° C. The most effective option involves heating to 80 ° C.

Выбор вспомогательных компонентов для обеспечения стабильности лекарственной формы.Selection of auxiliary components to ensure stability of the dosage form.

Известно, что анионные ПАВ обладают антимикробным действием, они влияют на проницаемость клеточных мембран, а также обладают ингибирующим действием на ферментативные системы микроорганизмов. АПАВ характеризуются тем, что в водной среде в результате электролитической диссоциации они образуют поверхностно активные анионы и адсорбционно неактивные катионы. Основные типы АПАВ, имеющие наибольшее практическое значение, включают карбоновые кислоты и их соли, алкилсульфаты, алкилсульфонаты и другие виды.It is known that anionic surfactants have antimicrobial action, they affect the permeability of cell membranes, and also have an inhibitory effect on the enzymatic systems of microorganisms. Anionic surfactants are characterized by the fact that in an aqueous medium, as a result of electrolytic dissociation, they form surface active anions and adsorptively inactive cations. The main types of anionic surfactants of the greatest practical importance include carboxylic acids and their salts, alkyl sulfates, alkyl sulfonates, and others.

Согласно изобретению анионные ПАВ в необходимых количествах добавляются к полученному на предыдущей стадии золю.According to the invention, anionic surfactants are added in the required amounts to the sol obtained in the previous stage.

Массовое соотношение компонентов реагентов диоксид титана: ПАВ составляет 1500:1-1000:1. Предпочтительное массовое соотношение составляет 1200:1.The mass ratio of the components of the reagents titanium dioxide: surfactant is 1500: 1-1000: 1. The preferred weight ratio is 1200: 1.

В качестве вспомогательных компонентов могут быть использованы следующие анионные ПАВ: додецилбензосульфонат натрия, додецилфосфат, кокоилизотионат натрия, мирет сульфат натрия, динатрий-лауретсульфосукцинат, додецилсульфат натрия, калий олеат, калий лаурат, натрий лауроил глутамат, сульфат аммония, лаурилсаркозинат натрия, диэтаноламин, триэтаноламин.The following anionic surfactants can be used as auxiliary components: sodium dodecylbenzenesulfonate, dodecyl phosphate, sodium cocoyl isothionate, sodium miret sulfate, sodium disodium laureth sulfosuccinate, sodium dodecyl sulfate, potassium oleate, potassium laurate, sodium lauroyl ammonium ethanolate, sodium lauroyl ammonium ethanolamine, sodium sulfate diarcamine, sodium sulfate

Оптимальными поверхностно-активными свойствами обладают первичный додецилсульфат и прямоцепочечный додецилбензолсульфонат. Эти вещества термически стабильны, малотоксичны, не раздражают кожу человека и подвергаются биологическому распаду. Они хорошо совмещаются с другими ПАВ.Primary dodecyl sulfate and straight-chain dodecyl benzene sulfonate have optimal surfactant properties. These substances are thermally stable, have low toxicity, do not irritate human skin and are biodegradable. They combine well with other surfactants.

Получение препаратов заданной вязкости.Obtaining preparations of a given viscosity.

Для придания лекарственной форме нужной консистенции (вязкости) могут использоваться следующие добавки: этиленгликоль, пропиленгликоль, диэтиленгликоль. Предпочтительным вариантом является этиленгликоль. В полученный на предыдущей стадии стабильный гидрозоль наночастиц диоксида титана, покрытых оболочкой натрий додецилсульфата, вводят добавку, увеличивающую вязкость, получая целевой продукт гидрозоль наночастиц диоксида титана, модифицированных ПАВ и добавкой, увеличивающей вязкость. Варьирование соотношения компонентов в реакционной смеси золь: добавка, увеличивающая вязкость происходит в массовом соотношении диоксид титана: добавка - 100:1-1:1. Предпочтительный диапазон соотношений составляет 99,9:1-95:1.The following additives can be used to give the dosage form the desired consistency (viscosity): ethylene glycol, propylene glycol, diethylene glycol. Ethylene glycol is the preferred option. An additive that increases the viscosity is introduced into the stable hydrosol of titanium dioxide nanoparticles coated with a shell of sodium dodecyl sulfate obtained at the previous stage, thus obtaining the target product hydrosol of nanoparticles of titanium dioxide modified with surfactants and an additive that increases the viscosity. Varying the ratio of components in the reaction mixture sol: viscosity-increasing additive occurs in the mass ratio of titanium dioxide: additive - 100: 1-1: 1. The preferred ratio range is 99.9: 1-95: 1.

На основании предлагаемого способа были изготовлены препараты в виде золей следующего состава, в мас. %:Based on the proposed method, preparations were made in the form of sols of the following composition, in wt. %:

Активное веществоActive substance Диоксид титанаTitanium dioxide 95,000-99,90095,000-99,900 Вспомогательные веществаExcipients Анионное ПАВAnionic surfactant 0,01000-0,05000.01000-0.0500 Повышающая вязкость добавкаViscosity increasing additive до 100%up to 100%

Наиболее предпочтительны препараты в виде золей следующего состава, в мас. %:The most preferred preparations are in the form of sols of the following composition, in wt. %:

Активное веществоActive substance Диоксид титанаTitanium dioxide 95,000-99,90095,000-99,900 Вспомогательные веществаExcipients Натрия додецилсульфатSodium dodecyl sulfate 0,01000-0,05000.01000-0.0500 ЭтиленгликольEthylene glycol до 100%up to 100%

Заболевание и/или состояние, характеризующееся нарушением целостности кожного покрова, в контексте настоящего изобретения может, не ограничиваясь конкретными примерами, являться ожоговым поражением кожи, вызванным термическим или химическим воздействием, приведшим к поражению до 30% кожного покрова.A disease and / or a condition characterized by a violation of the integrity of the skin, in the context of the present invention, may, without being limited to specific examples, be a burn injury to the skin caused by thermal or chemical exposure, leading to damage to up to 30% of the skin.

Настоящее изобретение подкреплено следующими примерами:The present invention is supported by the following examples:

Пример 1. Получение препарата в виде золя на основе диоксида титана.Example 1. Obtaining a preparation in the form of a sol based on titanium dioxide.

Для осуществления реакции используют 11,0 мл изопропоксида титана (IV) и 16,0 мл изопропанола. Происходит перемешивание в течение 30 минут исходных реагентов и получение раствора изопропоксида титана (IV) в изопропаноле. Далее готовится раствор азотной кислоты путем смешивания 100 мл деионизированной воды и 7 мл азотной кислоты. Следующим этапом происходит прикапывание раствора изопропоксида титана в изопропаноле к раствору азотной кислоты в течение 3 минут, полученную смесь подвергают ультразвуковому облучению мощностью 300 Вт/см3 и продолжают перемешивание в течение 180 минут без охлаждения, в результате чего температура реакционной смеси возрастает с 25оС до 75оС. Выход стабильного гидрозоля оксида титана составляет 99% из расчета на исходное вещество. Затем в гидрозоль диоксида титана TiO2 при постоянном перемешивании на магнитной мешалке добавляется навеска 0,0001 кг натрия додецилсульфата. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 часов. Контроль температуры осуществляется с помощью термометра. Далее в гидрозоль диоксида титана TiO2 с натрий додецилсульфатом при постоянном перемешивании на магнитной мешалке добавляется навеска 0,0013 кг этиленгликоля. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 часов. Далее происходит пептизация модифицированного гидрозоля диоксида титана в течение 2 суток до получения необходимого размера частиц.To carry out the reaction, 11.0 ml of titanium (IV) isopropoxide and 16.0 ml of isopropanol are used. The initial reagents are stirred for 30 minutes and a solution of titanium (IV) isopropoxide in isopropanol is obtained. Next, a nitric acid solution is prepared by mixing 100 ml of deionized water and 7 ml of nitric acid. The next step is the dropping of a solution of titanium isopropoxide in isopropanol to a solution of nitric acid for 3 minutes, the resulting mixture is subjected to ultrasonic irradiation with a power of 300 W / cm3 and stirring is continued for 180 minutes without cooling, as a result of which the temperature of the reaction mixture increases from 25 ° C to 75 ° C. The yield of stable titanium oxide hydrosol is 99% based on the starting material. Then, a weighed portion of 0.0001 kg of sodium dodecyl sulfate is added to the titanium dioxide TiO 2 hydrosol with constant stirring on a magnetic stirrer. The reaction mixture is stirred at room temperature for 2 hours. Temperature control is carried out using a thermometer. Next, a weighed portion of 0.0013 kg of ethylene glycol is added to the titanium dioxide TiO 2 hydrosol with sodium dodecyl sulfate with constant stirring on a magnetic stirrer. The reaction mixture is stirred at room temperature for 2 hours. Further, the modified titanium dioxide hydrosol is peptized for 2 days until the required particle size is obtained.

Данный пример не является ограничивающим, а лишь демонстрирует вариант реализации изобретенияThis example is not limiting, but only demonstrates an embodiment of the invention.

Пример конкретного состава гидрозоля, в мг, полученного заявляемым способом и выбранного для дальнейшего исследования:An example of a specific composition of a hydrosol, in mg, obtained by the claimed method and selected for further research:

Активное веществоActive substance Диоксид титанаTitanium dioxide 99,95999.959 Вспомогательные веществаExcipients Натрия додецилсульфатSodium dodecyl sulfate 0,0400.040 ЭтиленгликольEthylene glycol 0,0010.001 Общий объем золяSol total volume 100 мл.100 ml.

Пример 2. Изучение эффективности фармакологического действия препарата в виде золя на основе диоксида титана.Example 2. Study of the effectiveness of the pharmacological action of the preparation in the form of a sol based on titanium dioxide.

Эксперименты проводились на 40 крысах - самцах аутбредного стока Вистар, массой 200-220 г, №ветеринарного свидетельства 744816875. В каждой экспериментальной группе было 10 самцов. Содержание животных и эксперименты выполнены в соответствии с приказом Минздрава СССР №755 от 12.08.1977 г. и Европейской Конвенцией о защите позвоночных животных, используемых для экспериментов или в других научных целях (Страсбург, 18 марта 1986 г.). За трое суток до моделирования ожоговой травмы в области спины крысы проводили выбривание участков кожи машинкой для стрижки животных. Термические ожоги вызывали путем наложения 10 сек на кожу межлопаточной области спины волосяного покрова, нагретой до 200 Со медной монеты, площадью соприкосновения 380 см2. Через сутки на месте ожогов возникали раны в виде изъязвлений, заполненных некротическими массами, что соответствует III АБ степени ожога у человека. Все манипуляции выполнялись под временной анестезией золетилом. Наркозный эффект достигается через 6-7 минут после однократного внутрибрюшинного введения препарата, в дозе 30 мг/кг. Длительность хирургической стадии наркоза 2-3 часа [19].The experiments were carried out on 40 male rats of the outbred Wistar drain, weighing 200-220 g, veterinary certificate no. 744816875. Each experimental group consisted of 10 males. The keeping of animals and experiments were carried out in accordance with the order of the Ministry of Health of the USSR No. 755 of 08/12/1977 and the European Convention for the Protection of Vertebrate Animals Used for Experiments or Other Scientific Purposes (Strasbourg, March 18, 1986). Three days before the modeling of the burn injury in the back of the rat, skin areas were shaved with a clipper. Thermal burns were caused by applying 10 sec to the skin of the interscapular region of the back of the hairline heated to 200 C of a copper coin, the contact area of 380 cm2. A day later, at the site of burns, wounds appeared in the form of ulcerations filled with necrotic masses, which corresponds to III AB degree of burns in humans. All manipulations were performed under temporary anesthesia with zoletil. Anesthetic effect is achieved in 6-7 minutes after a single intraperitoneal injection of the drug, at a dose of 30 mg / kg. The duration of the surgical stage of anesthesia is 2-3 hours [19].

Животные были разделены на 4 группы: 1 - контрольная группа, включала в себя 10 самцов. Контрольной группе животных никакие препараты на поверхность ожога не наносили, то есть заживление ожоговых ран проходило самостоятельно, 2 - группа препарата сравнения, включала в себя 10 самцов, которым после моделирования патологии с лечебной целью на поверхность раны ежедневно наносился препарат сравнения Аргосульфан® (препарат на основе сульфатиазола серебра); 3 -экспериментальная группа №1, включала в себя 10 самцов, которым после моделирования патологии ежедневно с лечебной целью на поверхность раны ежедневно наносился представленный образец лекарственного средства, действующего на Толл-подобные рецепторы 4 и 6, в дозе 0,1 мл/100 г массы тела животного; 4 - экспериментальная группа №2, включала в себя 10 самцов, которым после моделирования патологии ежедневно с лечебной целью на поверхность раны ежедневно наносился представленный образец лекарственного средства, действующего на Толл-подобные рецепторы 4 и 6, в дозе 0,2 мл/100 г массы тела животного. Характер течения репаративного процесса оценивали визуально по деструктивным процессам в ране, проводили планиметрию (площадь раневого дефекта), макроскопически изучали выделенные участки кожи ожоговой поверхности и пограничной области раневого дефекта, еженедельно измерялась масса животного, а также температура кожи вокруг раны. Степень обсемененности определяли стандартными методами: микроскопирование окрашенных по Граму мазков; посев и культивирование на питательных средах (культуральные и фенотипические признаки). Количество колониеобразующих единиц (КОЕ) в 1 мл отделяемого ран устанавливали на 1, 3, 7 и 14-е сутки после моделирования подсчетом макроколоний, выросших на агаризованных и полуагаризованных питательных средах [1].The animals were divided into 4 groups: 1 - control group, included 10 males. The control group of animals did not apply any preparations to the surface of the burn, that is, the healing of burn wounds took place on their own, 2 - the comparison drug group, included 10 males, who, after modeling the pathology for therapeutic purposes, were daily applied the comparison drug Argosulfan® to the surface of the wound based on silver sulfathiazole); 3-experimental group No. 1, included 10 males, who, after modeling the pathology, daily with a therapeutic purpose on the surface of the wound, the presented sample of the drug acting on Toll-like receptors 4 and 6 was applied daily at a dose of 0.1 ml / 100 g body weight of the animal; 4 - experimental group No. 2, included 10 males, who, after modeling the pathology, daily with a therapeutic purpose on the surface of the wound was daily applied the presented sample of the drug acting on Toll-like receptors 4 and 6, at a dose of 0.2 ml / 100 g body weight of the animal. The nature of the course of the reparative process was assessed visually by destructive processes in the wound, planimetry was performed (the area of the wound defect), the selected areas of the skin of the burn surface and the border area of the wound defect were studied macroscopically, the weight of the animal was measured weekly, as well as the temperature of the skin around the wound. The degree of contamination was determined by standard methods: microscopy of Gram stained smears; sowing and cultivation on nutrient media (cultural and phenotypic characteristics). The number of colony-forming units (CFU) in 1 ml of wound discharge was established on the 1st, 3rd, 7th and 14th days after modeling by counting macrocolonies grown on agar and semi-agar nutrient media [1].

Для оценки изменения поведенческой активности животных проводили тест «открытое поле» на 15 и 21 сутки. Использовали стандартную модель поля для крыс - манеж 80×80 см, разделенный на 16 квадратов со стороной 20 см. На 15-е и 21-е сутки проводилось изучение состояния животного в тесте "Открытое поле". Через 21 суток после моделирования животные выводились из эксперимента передозировкой золетила, после чего производилось гистологическое исследование регенерата, иссеченной с участком краев раны. Кроме этого гистологическому исследованию подвергались: миокард левого желудочка, кора больших полушарий головного мозга и корковое вещество почек. В дальнейшем осуществлялась фиксация и гистологическое исследование микропрепаратов. На 1,7, 14 и 21 сутки эксперимента производилось фотографирование раны, с определением площади раневого дефекта. По литературным данным при исследовании влияния лекарственных средств для местного лечения ран на заживление термических ожогов П-Ш степени в эксперименте на крысах, наиболее показательными являются 2-3 неделя после формирования ожоговой поверхности, т.к. именно в эти сроки наблюдаются достоверные отличия в заживлении ожогового повреждения при влиянии используемых в клинической практике лекарственных средств. Сравнение эффективности средств спустя месяц после формирования ожога представляется неэффективным, т.к. именно в эти сроки происходит реэпителизация и наступает полное заживление у животных, не получавших какой-либо терапии [20]. Для исследования участка раны с регенератом были использованы следующие гистологические окраски: гематоксилин и эозин, трихромная окраска по Пикро Малори - для выявлений структур соединительной ткани, толлуидиновый синий - для выявления тканевых базофилов, а также метиленовый зеленый и пиронин (Окраска по Браше) для оценки процессов транскрипции в эпителиальном пласте. Все внутренние органы окрашивались гематоксилином и эозином, срезы головного мозга, так же окрашивались по Нислю.To assess changes in the behavioral activity of the animals, an "open field" test was performed on days 15 and 21. We used a standard field model for rats - a playpen 80 × 80 cm, divided into 16 squares with a side of 20 cm. On the 15th and 21st days, the state of the animal was studied in the "Open Field" test. In 21 days after the simulation, the animals were removed from the experiment by an overdose of zoletil, after which a histological examination of the regenerate excised with a section of the wound edges was performed. In addition, the following histological examination was carried out: the myocardium of the left ventricle, the cerebral cortex and the cortex of the kidneys. In the future, fixation and histological examination of microscope preparations were carried out. On the 1.7, 14 and 21 days of the experiment, the wound was photographed, with the determination of the area of the wound defect. According to literature data, when studying the effect of drugs for local treatment of wounds on the healing of thermal burns of II-III degree in an experiment on rats, the most indicative are 2-3 weeks after the formation of the burn surface, because It is during these periods that significant differences are observed in the healing of burn injury under the influence of drugs used in clinical practice. Comparison of the effectiveness of the funds a month after the formation of the burn seems ineffective, since it is during these periods that re-epithelialization occurs and complete healing occurs in animals that have not received any therapy [20]. To study the wound site with the regenerate, the following histological stains were used: hematoxylin and eosin, Trichromic stain according to Picro Malory - to identify the structures of connective tissue, toluidine blue - to identify tissue basophils, as well as methylene green and pyronine (stain according to Brachet) to assess the processes transcription in the epithelial layer. All internal organs were stained with hematoxylin and eosin, brain slices were also stained according to Nisl.

Методы, используемые при оценке специфической фармакологической активности препаратаMethods used in assessing the specific pharmacological activity of the drug

Гистологические микропрепараты оценивались визуально (цифровая камера Levenhuk С1400 NG, программа Levenhuk ToupView). Также на микропрепаратах регенерата лабораторных крыс при помощи ImageJ проводилось морфометрическое исследование ряда параметров.Histological slides were assessed visually (Levenhuk С1400 NG digital camera, Levenhuk ToupView software). Also, a morphometric study of a number of parameters was carried out on micropreparations of regenerated laboratory rats using ImageJ.

Толщину клеточного слоя эпидермиса (до рогового слоя) оценивали путем 3 измерений в 1 поле зрения при об. х40, проводимых перпендикулярно к базальной мембране. От каждого животного из группы исследовали по одному срезу.The thickness of the cell layer of the epidermis (up to the stratum corneum) was estimated by 3 measurements in 1 field of view at about. x40, held perpendicular to the basement membrane. One section was examined from each animal in the group.

Для определения средних геометрических размеров кератиноцита шиповатого слоя, исследовали по одному срезу от каждого животного из группы. Измерения производили при окуляре х40. В поле зрения измеряли площади кератиноцитов и их ядер, площадь цитоплазмы определялась как разность между площадью кератиноцита и площадью его ядра. Число измерений в группе составляло 100 и более. Ядерно-цитоплазматическое отношение рассчитывали по формуле (1):To determine the geometric mean dimensions of the keratinocyte of the spiny layer, one section was examined from each animal from the group. The measurements were made with a x40 eyepiece. The area of keratinocytes and their nuclei was measured in the field of view, the area of the cytoplasm was determined as the difference between the area of the keratinocyte and the area of its nucleus. The number of measurements in the group was 100 or more. The nuclear-cytoplasmic ratio was calculated using the formula (1):

Figure 00000001
Figure 00000001

где Sk - площадь клетки;where Sk is the area of the cell;

Sц - площадь цитоплазмы клетки;Sc is the area of the cell cytoplasm;

Sя - площадь ядра кератиноцита.Sя is the area of the keratinocyte nucleus.

Для определения площади ядрышка кератиноцита шиповатого слоя, исследовали по одному срезу от каждого животного из группы. Измерения производили при иммерсионном увеличении окуляр х90, на микропрепаратах, окрашенных по метиленовым зеленым - пиронином. Число измерений в группе составляло 100 и более. Оценивали удельную долю сосудов микроциркуляторного русла в соединительно-тканном рубце на уровне субэпидермального слоя дермы. Для этого от каждого животного из группы исследовали по одному срезу окрашенному гематоксилином и эозином. Измерения производили во всех полях зрения, где присутствовали сосуды, при окуляре х10. Проводили измерение суммарной площади сосудов микроциркуляторного русла субэпидермального слоя дермы, после этого измеряли общую площадь дермы в поле зрения. Расчет вели по формуле (2):To determine the area of the nucleolus of the spiny layer keratinocyte, we examined one section from each animal from the group. The measurements were carried out with an immersion magnification of the eyepiece x90, on micropreparations stained with methylene green - pyronine. The number of measurements in the group was 100 or more. The specific proportion of microvasculature vessels in the connective tissue scar at the level of the subepidermal dermis was evaluated. For this, one section stained with hematoxylin and eosin was examined from each animal from the group. Measurements were made in all fields of view, where vessels were present, with a x10 eyepiece. The total area of the vessels of the microvasculature of the subepidermal layer of the dermis was measured, after which the total area of the dermis in the field of view was measured. The calculation was carried out according to the formula (2):

Figure 00000002
Figure 00000002

где Р - удельная доля сосудов (%);where P is the specific proportion of vessels (%);

Sc - суммарная площадь сосудов в поле зрения;Sc is the total area of blood vessels in the field of view;

Sp - площадь соединительно-тканного рубца на уровне субэпидермального слоя дермы в поле зрения.Sp is the area of the connective tissue scar at the level of the subepidermal layer of the dermis in the field of view.

Определяли клеточную плотность дермы с распределением клеток по фактору формы. От каждого животного из группы исследовали по одному срезу. Измерения производили во всех полях зрения при окуляре х40 0). Измеряли общее количество клеток в субэпидермальном слое регенерата, после чего проводили разделение по фактору формы. Клетки с фактором формы от 0 до 0,6 считали клетками фибробластического ряда, а от 0,61 до 1,0 - мононуклеарного (клетки воспалительного инфильтрата).Determined the cellular density of the dermis with the distribution of cells by shape factor. One section was examined from each animal in the group. Measurements were made in all fields of view with an eyepiece x40 0). The total number of cells in the subepidermal layer of the regenerate was measured, followed by separation according to the shape factor. Cells with a form factor from 0 to 0.6 were considered fibroblastic cells, and from 0.61 to 1.0 - mononuclear (inflammatory infiltrate cells).

Оценивали удельную плотность и уровень дегрануляции тканевых базофилов. Для этого от каждого животного из группы исследовали по одному срезу, окрашенному толлуидиновым синим. Измерения производили во всех полях зрения, где располагалась плотная неоформленная соединительная ткань, замещающая дефект дермы кожи. В каждом поле зрения, отдельно подсчитывалось количество дегранулировавших, частично дегранулировавших и недегранулировавших тканевых базофилов, с последующим перерасчетом на единицу площади (S=1 мм2). Расчет вели по формуле (3):The specific gravity and the level of degranulation of tissue basophils were evaluated. For this, one section stained with toluidine blue was examined from each animal from the group. Measurements were made in all fields of view, where dense loose connective tissue was located, replacing the dermis defect of the skin. In each field of view, the number of degranulated, partially degranulated and non-degranulated tissue basophils was separately counted, with subsequent recalculation per unit area (S = 1 mm2). The calculation was carried out according to the formula (3):

Figure 00000003
Figure 00000003

где р - относительная плотность тканевых базофилов на единицу среза,where p is the relative density of tissue basophils per cut unit,

Nк - количество клеток в поле зрения в поле зрения, Sp - площадь соединительно-тканного рубца на уровне субэпидермального слоя дермы в поле зрения.Nc - the number of cells in the field of view in the field of view, Sp - the area of the connective tissue scar at the level of the subepidermal layer of the dermis in the field of view.

Математическая обработка результатов проводилась методами медико-биологической статистики с определением достоверности изменений при помощи t-критерия Стьюдента.Mathematical processing of the results was carried out by the methods of biomedical statistics with the determination of the reliability of changes using the Student's t-test.

Результаты экспериментаExperiment Results

При тестировании в «открытом поле» у животных контрольной группы через 15 суток после нанесения ожога наиболее характеристическим изменением можно считать снижение дефекации по сравнению с фоном на 50%, и повышение груминга в 1,5 раза по сравнению с фоном, что, по-видимому, объясняется стремлением животных поддерживать поврежденные ожогом кожные покровы в чистом состоянии. В тот же срок эксперимента, для животных группы сравнения и экспериментальных групп характерно повышение частоты груминга по сравнению с показателями, не получавших лечение, животных контрольной группы (на 20% для группы, получавшей препарат сравнения Аргосульфан®, на 25% для экспериментальной группы №1, получавшей представленный образец лекарственного средства, действующего на Толл-подобные рецепторы 4 и 6, в дозе 0,1 мл/100 г массы тела животного, на и 35%, для экспериментальной группы №2, получавшей, лекарственное средство, действующее на Толл-подобные рецепторы 4 и 6, в дозе 0,2 мл/100 г массы тела животного (табл. 1).When tested in the "open field" in animals of the control group 15 days after the application of the burn, the most characteristic changes can be considered a decrease in defecation compared to the background by 50%, and an increase in grooming by 1.5 times compared to the background, which, apparently , is explained by the desire of animals to keep the skin damaged by the burn in a clean state. In the same period of the experiment, the animals of the comparison group and the experimental groups were characterized by an increase in the frequency of grooming compared with the indicators that did not receive treatment, the animals of the control group (by 20% for the group receiving the comparison drug Argosulfan®, by 25% for the experimental group No. 1 , who received the presented sample of the drug acting on Toll-like receptors 4 and 6, at a dose of 0.1 ml / 100 g of animal body weight, by and 35%, for experimental group No. 2, which received a drug acting on Toll- similar receptors 4 and 6, at a dose of 0.2 ml / 100 g of animal body weight (Table 1).

Figure 00000004
Figure 00000004

Figure 00000005
Figure 00000005

На 21 сутки эксперимента у экспериментальных групп выявлено достоверное повышение различных видов поведенческой активности при сравнении с контрольной группой. Наиболее выраженным являлось достоверное повышение горизонтальной активности - в 4,2 раза для экспериментальной группы №2, получавшей, представленный образец лекарственного средства, действующего на Толл-подобные рецепторы 4 и 6, в дозе 0,2 мл/100 г массы тела животного, при сравнении с контрольной группой, представленной животными, не получавшими лечения после моделирования ожога. В 3,9 раза при сравнении с контрольной группой для экспериментальной группы №1, получавшей представленный образец лекарственного средства, действующего на Толл-подобные рецепторы 4 и 6, в дозе 0,1 мл/100 г массы тела животного. В 2,1 раза - для группы сравнения, получавшей в качестве лечения препарат Аргосульфан®.On the 21st day of the experiment, the experimental groups showed a significant increase in various types of behavioral activity when compared with the control group. The most pronounced was a significant increase in horizontal activity - 4.2 times for experimental group No. 2, which received the presented sample of a drug acting on Toll-like receptors 4 and 6, at a dose of 0.2 ml / 100 g of animal body weight, with comparison with a control group represented by animals that did not receive treatment after simulated burn. 3.9 times compared with the control group for the experimental group No. 1, which received the presented sample of the drug acting on Toll-like receptors 4 and 6, at a dose of 0.1 ml / 100 g of animal body weight. 2.1 times - for the comparison group that received Argosulfan® as a treatment.

Таким образом, по данным теста «открытое поле» можно сделать вывод о нормализации поведенческой активности животных экспериментальных групп и группы сравнения, по отношению к животным, не получавшим лечения - контрольной группе. Полученные данные свидетельствуют об улучшении общего клинического состояния животных на фоне применения изучаемых образцов лекарственного препарата, действующего на Толл-подобные рецепторы 4 и 6. В результате изучения динамики заживления раны и репаративно-регенеративных изменений на микропрепаратах во всех изучаемых группах самцов крыс выявлен комплекс изменений в эпидермисе раневого дефекта, характеризующийся прогредиентным восстановлением кожных покровов (таблица 2).Thus, according to the data of the "open field" test, it can be concluded that the behavioral activity of animals in the experimental groups and the comparison group is normalized in relation to the animals that did not receive treatment - the control group. The data obtained indicate an improvement in the general clinical state of animals against the background of the use of the studied samples of the drug acting on Toll-like receptors 4 and 6. As a result of studying the dynamics of wound healing and reparative-regenerative changes on micropreparations in all studied groups of male rats, a complex of changes in epidermis of the wound defect, characterized by progressive restoration of the skin (table 2).

Figure 00000006
Figure 00000006

Figure 00000007
Figure 00000007

При визуальной оценке микропрепаратов, исследуемых внутренних органов животных экспериментальных групп, получавших образец лекарственного средства действующего на Толл-подобные рецепторы 4 и 6, каких либо отклонений от морфологической картины микропрепаратов животных контрольной группы выявлено не было, что указывает на отсутствие общерезорбтивной токсичности. На микропрепаратах участка раны, окрашенных гематоксилином и эозином, обращает на себя внимание низкий уровень репаративных процессов в контрольной группе. Многослойный плоский эпителий в центре раневого деффекта, тонкий, толщина шиповатого слоя составляет около 3 слоев корнеоцитов. Клетки мелкие. Ядра компактные. Рельеф базальной мембраны сглажен (фиг. 1А). В группе сравнения толщина эпителиального пласта значительно возрастает, что достоверно подтверждается данными статистического исследования (Таблица 3) Базальная мембрана становится извилистой. Толщина шиповатого слоя возрастает.В кератиноцитах зернистого слоя отчетливо визуализируются гранулы. Клетки становятся крупными, ядра увеличиваются в размерах, приобретают округлую форму, во многих клетках визуализируется ядрышко. Выявленные изменения также характерны и для клеток базального слоя эпидермиса (фиг. 1).Visual assessment of the micropreparations of the studied internal organs of the animals of the experimental groups that received a sample of the drug acting on Toll-like receptors 4 and 6 did not reveal any deviations from the morphological picture of the micropreparations of the animals of the control group, which indicates the absence of general resorptive toxicity. On micropreparations of the wound site, stained with hematoxylin and eosin, the low level of reparative processes in the control group attracts attention. The stratified squamous epithelium in the center of the wound defect is thin, the thickness of the prickly layer is about 3 layers of corneocytes. The cells are small. The kernels are compact. The relief of the basement membrane is smoothed (Fig. 1A). In the comparison group, the thickness of the epithelial layer increases significantly, which is reliably confirmed by the data of a statistical study (Table 3) The basement membrane becomes tortuous. The thickness of the prickly layer increases; granules are clearly visualized in keratinocytes of the granular layer. The cells become large, the nuclei increase in size, acquire a rounded shape, and the nucleolus is visualized in many cells. The revealed changes are also characteristic for the cells of the basal layer of the epidermis (Fig. 1).

Figure 00000008
Figure 00000008

Figure 00000009
Figure 00000009

Для экспериментальных групп характерны еще более глубокие базальные разрастания новообразованного эпидермиса, характеризующиеся в экспериментальной группе №2, как врастанием в центр раневого дефекта волосяных фолликулов с краев раны (фиг. 1Г), так и их новообразованием (фиг 2Г).The experimental groups are characterized by even deeper basal outgrowths of the newly formed epidermis, which are characterized in the experimental group No. 2 as hair follicles growing into the center of the wound defect from the edges of the wound (Fig. 1D) and their neoplasm (Fig. 2D).

Для обеих экспериментальных групп также характерны признаки активации восстановительных процессов в диффероне кератиноцитов. Однако, выраженность морфологических критериев репаративных процессов в эпидермисе экспериментальных групп не превышает аналогичную в группе сравнения. Что подтверждается более высокими показателями ядерно-цитоплазматического отношения (0,54±0,03 в группе сравнения и 0,59±0,02 в экспериментальной группе №1, 0,56±0,03 в экспериментальной группе №2) (Таблица 4). Клетки шиповатого слоя группы сравнения характеризуются наивысшим уровнем дифференцировки, за ним идут корнеоциты экспериментальной группы №2, №1 и уже потом контрольной группы.For both experimental groups, signs of activation of recovery processes in the diferon of keratinocytes are also characteristic. However, the severity of morphological criteria of reparative processes in the epidermis of the experimental groups does not exceed that in the comparison group. This is confirmed by the higher indicators of nuclear-cytoplasmic ratio (0.54 ± 0.03 in the comparison group and 0.59 ± 0.02 in the experimental group No. 1, 0.56 ± 0.03 in the experimental group No. 2) (Table 4 ). The cells of the spinous layer of the comparison group are characterized by the highest level of differentiation, followed by the corneocytes of the experimental group No. 2, No. 1 and only then the control group.

Figure 00000010
Figure 00000010

Figure 00000011
Figure 00000011

Эта тенденция подтверждается и при статистическом исследовании микропрепаратов, окрашенных по Браше, на которых измеряли площадь ядрышка, которая служит показателем активности процессов внутриядерной транскрипции (Таблица 5): наибольшая площадь ядра в группе сравнения, затем в экспериментальной группе №2, №1,и, самая низкая, в контрольной группе.This tendency is also confirmed by the statistical study of micropreparations stained according to Brachet, on which the area of the nucleolus was measured, which serves as an indicator of the activity of the processes of intranuclear transcription (Table 5): the largest area of the nucleus in the comparison group, then in the experimental group No. 2, No. 1, and, the lowest in the control group.

Figure 00000012
Figure 00000012

Замещающий собой раневой дефект регенерат представляет собой плотную волокнистую неоформленную соединительную ткань, в которую проникают элементы гемомикроциркуляторного русла. Сосуды последнего более многочисленны в области дна раны, на уровне гиподермы, а также под эпителием в области поверхностного сплетения кожи. В этой области они, как правило, располагаются параллельно базальной мембране эпидермиса (фиг. 3). В контрольный группе эти сосуды характеризуются наличием морфологических признаков венозной гиперемии: расширенными просветами вен, заполненных эритроцитами в состоянии сладжа, а так же артериолами с пустым просветом (фиг. 3А). Для группы сравнения характерно значительное уменьшение количества субэпидермальных сосудов гемомикроциркуляторного русла. Однако в экспериментальных группах их количество возрастает, в большей степени в экспериментальной группе №2, при этом признаков венозной гиперемии не отмечается.The regenerate replacing the wound defect is a dense fibrous loose connective tissue into which the elements of the hemomicrocirculatory bed penetrate. The vessels of the latter are more numerous in the area of the bottom of the wound, at the level of the hypodermis, and also under the epithelium in the area of the superficial plexus of the skin. In this area, they are usually located parallel to the basement membrane of the epidermis (Fig. 3). In the control group, these vessels are characterized by the presence of morphological signs of venous hyperemia: dilated lumens of veins filled with erythrocytes in a sludge state, as well as arterioles with an empty lumen (Fig. 3A). The comparison group is characterized by a significant decrease in the number of subepidermal vessels of the hemomicrocirculatory bed. However, in the experimental groups their number increases, to a greater extent in the experimental group No. 2, while there are no signs of venous hyperemia.

Аналогичные изменения характерны и для сосудов в толще соединительной ткани регенерата. В контрольной группе они выглядят пережатыми соединительно-тканными волокнами, полнокровными, с пристеночной адгезией эритроцитов. В группе сравнения количество сосудов снижается. В экспериментальной группе их количество возрастает, однако ни спазма артериол, ни пристеночной адгезии эритроцитов, ни иных морфологических эквивалентов нарушенной гемомикроциркуляции отмечено не было. Визуальная оценка подтверждается данными статистического исследования (Таблица 6). Самая большая удельная доля сосудов гемомикроциркуляторного русла характерна для экспериментальной группы №2, за ней следуют экспериментальная группа №1, контрольная группа и группа сравнения.Similar changes are characteristic of the vessels in the thickness of the connective tissue of the regenerate. In the control group, they look like constricted connective tissue fibers, full-blooded, with parietal adhesion of erythrocytes. In the comparison group, the number of vessels decreases. In the experimental group, their number increased, however, neither spasm of arterioles, nor parietal adhesion of erythrocytes, nor other morphological equivalents of impaired hemomicrocirculation were observed. The visual assessment is confirmed by the data of the statistical study (Table 6). The largest specific proportion of blood vessels in the hemomicrocirculatory bed is characteristic of the experimental group No. 2, followed by the experimental group No. 1, the control group and the comparison group.

Figure 00000013
Figure 00000013

Следует отметить, что если в контрольной группе и группе сравнения ход сосудов в регенерате, как правило, тангенциальный - по направлению от гиподермы к базальной мембране эпидермиса, то в экспериментальных группах часто встречаются не только продольные, но и поперечные срезы сосудов, что указывает на более разветвленную сеть гемомикроциркуляции (фиг. 4).It should be noted that if in the control group and the comparison group the course of vessels in the regenerate is usually tangential - in the direction from the hypoderm to the basement membrane of the epidermis, then in the experimental groups not only longitudinal, but also transverse sections of the vessels are often found, which indicates more a branched network of hemomicrocirculation (Fig. 4).

Таким образом, комплекс морфологических перестроек, представленный на фигурах 5 для животных экспериментальных групп, включает в себя формирование более полноценного сосочкового слоя дермы в области раневого дефекта, более интенсивное восстановление придатков кожи и гемомикроциркуляторного русла, что в целом является морфологическим субстратом пластического эффекта образца лекарственного средства, действующего на Толл-подобные рецепторы 4 и 6, в дозе 0,1 мл/100 г и в большей степени в дозе 0,2 мл/100 г массы тела животного. Для дна раневого дефекта во всех изучаемых группах характерно наличие крупного сосудистого сплетения с расширенными сосудами венозного звена гемомикроциркуляторного русла (фиг. 5).Thus, the complex of morphological rearrangements presented in Figures 5 for animals of the experimental groups includes the formation of a more complete papillary layer of the dermis in the area of the wound defect, more intensive restoration of the skin appendages and the hemomicrocirculatory bed, which in general is the morphological substrate of the plastic effect of the drug sample. acting on Toll-like receptors 4 and 6, at a dose of 0.1 ml / 100 g and, to a greater extent, at a dose of 0.2 ml / 100 g of animal body weight. The bottom of the wound defect in all studied groups is characterized by the presence of a large vascular plexus with dilated vessels of the venous link of the hemomicrocirculatory bed (Fig. 5).

Во всех рассматриваемых группах в ответную реакцию активно вовлекается тучноклеточная популяция, клетки которой находятся в различном функциональном состоянии в зависимости от исследуемой группы. В контрольной группе это многочисленные клетки, расположенные перивазально, преимущественно в области дна раневого дефекта и в меньшей степени в области его стен. В основном это тканевые базофилы, находящиеся в состоянии полной и реже частичной дегрануляции, когда гранулы располагаются за пределами тучной клетки в окружающей соединительной ткани. В группе сравнения тканевые базофилы немногочисленны, уменьшены в размерах, характеризуются той же микротопографией, что и в контрольной группе (фиг. 5А, Б). Экспериментальная группа характеризуется не только восстановлением объемной плотности тканевых базофилов (Таблица 7), значительным снижением степени их дергрануляции, но и изменением их топики (фиг. 5Г) В экспериментальной группе №2 они располагаются в типичных областях, так и субэпидермально - в центре регенерата. Визуально это крупные клетки с большим количеством внутриклеточно расположенных метахроматично окрашивающихся гранул.In all the groups under consideration, the mast cell population is actively involved in the response, the cells of which are in a different functional state, depending on the group under study. In the control group, these are numerous cells located perivasally, mainly in the area of the bottom of the wound defect and, to a lesser extent, in the area of its walls. These are mainly tissue basophils, which are in a state of complete and less often partial degranulation, when the granules are located outside the mast cell in the surrounding connective tissue. In the comparison group, tissue basophils are few in number, reduced in size, characterized by the same microtopography as in the control group (Fig. 5A, B). The experimental group is characterized not only by the restoration of the bulk density of tissue basophils (Table 7), a significant decrease in the degree of their dergranulation, but also by a change in their topics (Fig. 5D) In the experimental group No. 2, they are located in typical areas, and subepidermally - in the center of the regenerate. Visually, these are large cells with a large number of intracellularly located metachromatically staining granules.

Figure 00000014
Figure 00000014

Figure 00000015
Figure 00000015

При исследовании обсемененности раневых поверхностей изучаемых групп обращает на себя внимание значительное снижение КОЕ, по сравнению с контрольной группой у животных, получавших препарат сравнения Аргосульфан® на 3-й сутки после эксперимента (Таблица 8). Показатели экспериментальных групп также были ниже показателей группы контроля. В дальнейшем наибольшее снижение КОЕ в 1 мл смыва с раневой поверхности отмечалось у животных, получавших представленный образец лекарственного средства, действующего на Толл-подобные рецепторы 4 и 6. Разница постепенно нарастала с увеличением времени после операции и достигала в экспериментальных группах к 14 суткам более чем 3х кратного снижения по сравнению с группой контроля, что было достоверно ниже показателей группы сравнения - животных, получавших препарат сравнения Аргосульфан®. Вышеописанные изменения могут характеризовать постепенное нарастание защитного эффекта лекарственного средства, действующего на Толл-подобные рецепторы. Исходя из представленной динамике степени обсемененности раневой поверхности, последняя, вероятно, базируется не на непосредственном бактерицидном действии, в ранние сроки после моделирования ожогового дефекта (на 3-й сутки эксперимента); а на постепенном росте собственных защитных свойств раневой поверхности, включающих в себя барьерные, бактерицидные и иммунные компоненты, что проявляется в более интенсивном снижении степени обсемененности раневой поверхности в экспериментальных группах, по сравнению с группой животных, получавших Аргосульфан®, на 7-е и 14-е сутки эксперимента.In the study of contamination of the wound surfaces of the studied groups, a significant decrease in CFU, in comparison with the control group, in animals receiving the comparison drug Argosulfan® on the 3rd day after the experiment, draws attention (Table 8). The performance of the experimental groups was also lower than the performance of the control group. Subsequently, the greatest decrease in CFU in 1 ml of washout from the wound surface was observed in animals receiving the presented sample of the drug acting on Toll-like receptors 4 and 6. The difference gradually increased with increasing time after surgery and reached more than 14 days in the experimental groups. 3-fold decrease in comparison with the control group, which was significantly lower than the indicators of the comparison group - animals receiving the comparison drug Argosulfan®. The changes described above can characterize a gradual increase in the protective effect of the drug acting on Toll-like receptors. Based on the presented dynamics of the degree of contamination of the wound surface, the latter is probably not based on a direct bactericidal effect, in the early stages after modeling the burn defect (on the 3rd day of the experiment); and on a gradual increase in the intrinsic protective properties of the wound surface, including barrier, bactericidal and immune components, which manifests itself in a more intensive decrease in the degree of contamination of the wound surface in the experimental groups, compared with the group of animals receiving Argosulfan®, on the 7th and 14th day of the experiment.

Figure 00000016
Figure 00000016

Figure 00000017
Figure 00000017

Таким образом, полученные нами данные не только отражают не только стадийность раневого процесса, т.е. клиническое течение местных изменений (воспаление, развитие некроза и его ограничение, рубцевание и эпителизация раны) (Таблица 9), но и указывает на сокращение сроков протекания вышеуказанных процессов.Thus, our data not only reflect not only the staging of the wound process, i.e. clinical course of local changes (inflammation, development of necrosis and its limitation, scarring and wound epithelialization) (Table 9), but also indicates a reduction in the duration of the above processes.

Figure 00000018
Figure 00000018

Это наблюдается в ранние сроки (7 суток после операции), в большей степени, у животных, получавших представленный образец лекарственного средства, действующего на Толл-подобные рецепторы 4 и 6, в дозе 0,2 мл/100 г массы тела животного (Таблица 10).This is observed early (7 days after surgery), to a greater extent, in animals that received the presented sample of the drug acting on Toll-like receptors 4 and 6, at a dose of 0.2 ml / 100 g of animal body weight (Table 10 ).

Figure 00000019
Figure 00000019

Figure 00000020
Figure 00000020

Выводы.Findings.

Результаты проведенных исследований предлагаемых препаратов позволяют сделать вывод о наличии у них антибактериальных и иммуностимулирующих свойств, превышающих таковые для препарата сравнения. Предлагаемые препараты великолепно проявили себя в лечении состояний, характеризующихся нарушением целостности кожного покрова, в том числе и при ожоговом поражении.The results of the studies of the proposed drugs allow us to conclude that they have antibacterial and immunostimulating properties that exceed those for the reference drug. The proposed drugs proved to be excellent in the treatment of conditions characterized by a violation of the integrity of the skin, including burn injuries.

Список литературы.List of references.

1. Краснолуцкая В.Н., Сесерова Д.В. Современные подходы к лечению гнойных ран // Центральный научный вестник. - 2017. - Т. 2. - №. 5.1. Krasnolutskaya V.N., Seserova D.V. Modern approaches to the treatment of purulent wounds // Central Scientific Bulletin. - 2017. - T. 2. - No. five.

2. Жукова О.В. и др. Патогенез и гистоморфологические особенности Рубцовых изменений кожи // Клиническая дерматология и венерология. - 2009. - №. 3. - С. 4-9.2. Zhukova OV et al. Pathogenesis and histomorphological features of cicatricial changes in the skin // Clinical Dermatology and Venereology. - 2009. - No. 3. - S. 4-9.

3. Prussin С., Metcalfe D.D. 4. IgE, mast cells, basophils, and eosinophils // Journal of Allergy and Clinical Immunology. - 2003. - Т. 111. - №. 2. - C. S486-S494.3. Prussin C., Metcalfe D.D. 4. IgE, mast cells, basophils, and eosinophils // Journal of Allergy and Clinical Immunology. - 2003. - T. 111. - No. 2. - C. S486-S494.

4. Мяделец О.Д. Основы цитологии, эмбриологии и общей гистологии // М.: Медицинская книга. - 2002. - 364 с.4. Myadel OD. Fundamentals of cytology, embryology and general histology // M .: Medical book. - 2002 .-- 364 p.

5. Назарова Е.О., Карпов С.М., Апагуни А.Э., Вышлова И.А. Современный взгляд на патогенетические механизмы травматической болезни при политравме (обзор литературы) // Вестник новых медицинских технологий. Электронное издание. - 2018. - Т. 12. - №1. - С. 126-130.5. Nazarova E.O., Karpov S.M., Apaguni A.E., Vyshlova I.A. Modern view of the pathogenetic mechanisms of traumatic disease in polytrauma (literature review) // Bulletin of new medical technologies. Electronic edition. - 2018. - T. 12. - No. 1. - S. 126-130.

6. Кириченко А.К. и др. Морфологический анализ заживления ожоговой раны при применении коллаген-хитозанового раневого покрытия // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2012. - Т. 154. - №. 11. - С. 652-656.6. Kirichenko A.K. et al. Morphological analysis of burn wound healing with the use of collagen-chitosan wound dressing // Bulletin of Experimental Biology and Medicine. - 2012. - T. 154. - No. 11. - S. 652-656.

7. Oehmichen М. et al. Mast cell reactivity at the margin of human skin wounds: an early cell marker of wound survival? // Forensic science international. - 2009. - T. 191. - №. 1-3. - C. 1-5.7. Oehmichen M. et al. Mast cell reactivity at the margin of human skin wounds: an early cell marker of wound survival? // Forensic science international. - 2009. - T. 191. - No. 1-3. - C. 1-5.

8. Tani H., Morris R.J., Kaur P. Enrichment for murine keratinocyte stem cells based on cell surface phenotype // Proceedings of the National Academy of Sciences. - 2000. - T. 97. - №. 20. - C. 10960-10965.8. Tani H., Morris R. J., Kaur P. Enrichment for murine keratinocyte stem cells based on cell surface phenotype // Proceedings of the National Academy of Sciences. - 2000. - T. 97. - No. 20. - C. 10960-10965.

9. Mempel M. et al. Toll-like receptor expression in human keratinocytes: nuclear factor kB controlled gene activation by Staphylococcus aureus is Toll-like receptor 2 but not Toll-like receptor 4 or platelet activating factor receptor dependent // Journal of Investigative Dermatology. - 2003. - T. 121. - №. 6. - C. 1389-1396.9. Mempel M. et al. Toll-like receptor expression in human keratinocytes: nuclear factor kB controlled gene activation by Staphylococcus aureus is Toll-like receptor 2 but not Toll-like receptor 4 or platelet activating factor receptor dependent // Journal of Investigative Dermatology. - 2003. - T. 121. - No. 6. - C. 1389-1396.

10. He C. et al. Angiogenesis mediated by toll-like receptor 4 in ischemic neural tissue // Arteriosclerosis, thrombosis, and vascular biology. - 2013. - T. 33. - №. 2. - C. 330-338.10. He C. et al. Angiogenesis mediated by toll-like receptor 4 in ischemic neural tissue // Arteriosclerosis, thrombosis, and vascular biology. - 2013. - T. 33. - No. 2. - C. 330-338.

11. Weiler S., Corti N. Antibiotikatherapie: Wirkung und Resistenz // Medizinische Klinik-Intensivmedizin und Notfallmedizin. - 2014. - T. 109. - №. 3. - C. 167-174.11. Weiler S., Corti N. Antibiotikatherapie: Wirkung und Resistenz // Medizinische Klinik-Intensivmedizin und Notfallmedizin. - 2014. - T. 109. - No. 3. - S. 167-174.

12. Kovalchuk L.V. et al. Role of Toll-like receptors in the pathogenesis of human infectious diseases // Kursk scientific-practical herald. Man and his health. - 2012. - Т. 2. - C. 147-153.12. Kovalchuk L.V. et al. Role of Toll-like receptors in the pathogenesis of human infectious diseases // Kursk scientific-practical herald. Man and his health. - 2012. - T. 2. - S. 147-153.

13. Заморина С.А., Раев M.Б. Toll-подобные рецепторы-подъем по тревоге // Бюллетень Оренбургского научного центра УрО РАН. - 2016. - №. 2.13. Zamorina S.A., Raev M.B. Toll-like receptors-raising on alarm // Bulletin of the Orenburg Scientific Center of the Ural Branch of the Russian Academy of Sciences. - 2016. - No. 2.

14. Yang Н. et al. Amino acid-dependent attenuation of toll-like receptor signaling by peptide-gold nanoparticle hybrids // Acs Nano. - 2015. - T. 9. - №. 7. - C. 6774-6784.14. Yang H. et al. Amino acid-dependent attenuation of toll-like receptor signaling by peptide-gold nanoparticle hybrids // Acs Nano. - 2015. - T. 9. - No. 7. - C. 6774-6784.

15. Sun Y. et al. Toll-like receptor 4 promotes angiogenesis in pancreatic cancer via PI3K/AKT signaling // Experimental cell research. - 2016. - T. 347. - №. 2. - C. 274-282.15. Sun Y. et al. Toll-like receptor 4 promotes angiogenesis in pancreatic cancer via PI3K / AKT signaling // Experimental cell research. - 2016. - T. 347. - No. 2. - S. 274-282.

16. Kovalchuk L.V. et al. Role of Toll-like receptors in the pathogenesis of human infectious diseases // Kursk scientific-practical herald. Man and his health. - 2012. - Т. 2. - C. 147-153.16. Kovalchuk L.V. et al. Role of Toll-like receptors in the pathogenesis of human infectious diseases // Kursk scientific-practical herald. Man and his health. - 2012. - T. 2. - S. 147-153.

17. Zhao M., Liu M. New Avenues for Nanoparticle-Related Therapies // Nanoscale research letters. - 2018. - T. 13. - №. 1. - C. 136.17. Zhao M., Liu M. New Avenues for Nanoparticle-Related Therapies // Nanoscale research letters. - 2018. - T. 13. - No. 1. - P. 136.

18. Hussain S. et al. Cerium dioxide nanoparticles do not modulate the lipopolysaccharide-induced inflammatory response in human monocytes // International journal of nanomedicine. - 2012. - T. 7. - C. 1387.18. Hussain S. et al. Cerium dioxide nanoparticles do not modulate the lipopolysaccharide-induced inflammatory response in human monocytes // International journal of nanomedicine. - 2012. - T. 7. - C. 1387.

19. RU 2424798, (Общество с ограниченной ответственностью "Научно-производственное объединение "Ликом"), 2011.07.2719. RU 2424798, (Limited Liability Company "Scientific and Production Association" Likom "), 2011.07.27

20. Привольнев В.В., Пасхалова Ю.С., Родин А.В. Местное лечение ран и раневой инфекции по результатам анонимного анкетирования хирургов России // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. - 2016. - Т. 18. - №2. - С. 152-158.20. Privolnev V.V., Paskhalova Yu.S., Rodin A.V. Local treatment of wounds and wound infection based on the results of an anonymous survey of Russian surgeons // Clinical Microbiology and Antimicrobial Chemotherapy. - 2016. - T. 18. - No. 2. - S. 152-158.

21. Островский Н.В. и др. Сравнительная оценка влияния лекарственных средств для местного лечения ран на заживление термических ожогов II-III степени в эксперименте //Фундаментальные исследования. - 2014. - Т. 3. - №. 6.21. Ostrovsky N.V. et al. Comparative assessment of the effect of drugs for local treatment of wounds on the healing of thermal burns of II-III degree in the experiment // Fundamental research. - 2014. - T. 3. - No. 6.

Claims (8)

1. Лекарственный препарат в виде золя для лечения ожогового поражения кожи, вызванного термическим или химическим воздействием, который включает следующий состав компонентов, мас. %:1. A medicinal preparation in the form of a sol for the treatment of burn injuries of the skin caused by thermal or chemical exposure, which includes the following composition of components, wt. %: Активное вещество: Active substance: Диоксид титана Titanium dioxide 99,95999.959 Вспомогательные вещества:Excipients: Натрия додецилсульфат в качестве анионного ПАВ Sodium dodecyl sulfate as anionic surfactant 0,0400.040 Этиленгликоль в качестве повышающей вязкость добавки Ethylene glycol as a viscosity increasing additive до 100%up to 100%
2. Способ получения лекарственного препарата в виде золя по п.1, характеризующийся тем, что проводят гидролиз изопропоксида титана в присутствии кислоты при мольном соотношении концентраций [Ti]/[H+] - 2-3 : 1, сопровождающийся ультразвуковой кавитацией с частотой 24 кГц и нагреванием до 50-90°С, затем добавляют анионное ПАВ в мольном соотношении диоксида титана к ПАВ - 1500:1 - 1000:1, затем в золь вводят добавку, повышающую вязкость, в мольном соотношении диоксид титана : добавка - 100:1 - 1:1.2. A method of obtaining a medicinal product in the form of a sol according to claim 1, characterized in that hydrolysis of titanium isopropoxide in the presence of acid at a molar concentration ratio [Ti] / [H +] - 2-3: 1, accompanied by ultrasonic cavitation at a frequency of 24 kHz and heating to 50-90 ° C, then add anionic surfactant in a molar ratio of titanium dioxide to surfactant - 1500: 1 - 1000: 1, then an additive that increases the viscosity is introduced into the sol in a molar ratio of titanium dioxide: additive - 100: 1 - 1: 1. 3. Способ по п.2, где кислота выбрана из группы серной, азотной, хлороводородной или уксусной кислот.3. A method according to claim 2, wherein the acid is selected from the group of sulfuric, nitric, hydrochloric or acetic acids. 4. Способ по п.2, где анионное ПАВ представляет собой додецилбензосульфонат натрия, додецилфосфат, кокоилизотионат натрия, мирет сульфат натрия, динатрий-лауретсульфосукцинат, додецилсульфат натрия, калий олеат, калий лаурат, натрий лауроил глутамат, сульфат аммония, лаурилсаркозинат натрия, диэтаноламин или триэтаноламин.4. The method according to claim 2, wherein the anionic surfactant is sodium dodecylbenzenesulfonate, dodecyl phosphate, sodium cocoylisothionate, sodium miret sulfate, disodium laureth sulfosuccinate, sodium dodecyl sulfate, potassium oleate, potassium laurate, sodium lauroyl ammonium ethanol, sodium diarcamine sulfate or sodium sulfate triethanolamine. 5. Способ по п.2, где мольное соотношение диоксида титана к ПАВ составляет 1200:1.5. The method according to claim 2, wherein the molar ratio of titanium dioxide to surfactant is 1200: 1. 6. Способ по п.2, где мольное соотношение диоксида титана к добавке, повышающей вязкость, составляет 99,9:1 - 95:1.6. The method of claim 2, wherein the molar ratio of titanium dioxide to viscosity-increasing additive is 99.9: 1 to 95: 1. 7. Способ по п.2, где добавка, повышающая вязкость, представляет собой этиленгликоль, пропиленгликоль или диэтиленгликоль.7. The method of claim 2, wherein the viscosity-increasing additive is ethylene glycol, propylene glycol, or diethylene glycol.
RU2019126559A 2019-08-22 2019-08-22 Medicinal preparation in form of sol for treating a disease and/or condition characterized by violation of skin integrity, and a method for preparing it RU2742752C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2019126559A RU2742752C1 (en) 2019-08-22 2019-08-22 Medicinal preparation in form of sol for treating a disease and/or condition characterized by violation of skin integrity, and a method for preparing it

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2019126559A RU2742752C1 (en) 2019-08-22 2019-08-22 Medicinal preparation in form of sol for treating a disease and/or condition characterized by violation of skin integrity, and a method for preparing it

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2742752C1 true RU2742752C1 (en) 2021-02-10

Family

ID=74554640

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2019126559A RU2742752C1 (en) 2019-08-22 2019-08-22 Medicinal preparation in form of sol for treating a disease and/or condition characterized by violation of skin integrity, and a method for preparing it

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2742752C1 (en)

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2212881C2 (en) * 1999-10-01 2003-09-27 Л'Ореаль Material containing organic filter uv-a and method for displacing maximum absorption wavelength
CN1627951A (en) * 2001-06-07 2005-06-15 美商·邱氏顾问股份有限公司 Compositions and method for prophylaxis and treatment of aphthous ulcers and herpes simplex lesions
RU2424798C1 (en) * 2009-11-10 2011-07-27 Общество с ограниченной ответственностью "Научно-производственное объединение "Ликом" Antiinflammatory wound-healing medication
RU2663907C1 (en) * 2017-05-04 2018-08-13 Ринат Маратович Урузбаев Method of accelerating healing of skin damage

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2212881C2 (en) * 1999-10-01 2003-09-27 Л'Ореаль Material containing organic filter uv-a and method for displacing maximum absorption wavelength
CN1627951A (en) * 2001-06-07 2005-06-15 美商·邱氏顾问股份有限公司 Compositions and method for prophylaxis and treatment of aphthous ulcers and herpes simplex lesions
RU2424798C1 (en) * 2009-11-10 2011-07-27 Общество с ограниченной ответственностью "Научно-производственное объединение "Ликом" Antiinflammatory wound-healing medication
RU2663907C1 (en) * 2017-05-04 2018-08-13 Ринат Маратович Урузбаев Method of accelerating healing of skin damage

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Weir A. et al. Titanium dioxide nanoparticles in food and personal care products / Environ. Sci. Technol. - 2012. Vol. 46, N 4. - P.2242-2250 doi: 10.1021/es204168d. *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Choudhary et al. Scar free healing of full thickness diabetic wounds: a unique combination of silver nanoparticles as antimicrobial agent, calcium alginate nanoparticles as hemostatic agent, fresh blood as nutrient/growth factor supplier and chitosan as base matrix
Chang et al. Liposomal dexamethasone–moxifloxacin nanoparticle combinations with collagen/gelatin/alginate hydrogel for corneal infection treatment and wound healing
Ghaffari et al. Nanotechnology in wound healing; semisolid dosage forms containing curcumin-ampicillin solid lipid nanoparticles, in-vitro, ex-vivo and in-vivo characteristics
Thakkar et al. Development and characterization of novel hydrogel containing antimicrobial drug for treatment of burns
Greenhalgh et al. In vivo studies of polyacrylate nanoparticle emulsions for topical and systemic applications
KR102390014B1 (en) Aqueous suspension comprising nanoparticles of a glucocorticosteroid compound
Masood et al. Pharmaco-technical evaluation of statistically formulated and optimized dual drug-loaded silica nanoparticles for improved antifungal efficacy and wound healing
Bao et al. Sprayed Pickering emulsion with high antibacterial activity for wound healing
Razavi et al. Silver sulfadiazine nanoethogel for burn healing: characterization and investigation of its in vivo effects
Campelo et al. Effects of the application of the amniotic membrane in the healing process of skin wounds in rats
BR112015019598B1 (en) METHODS TO IMPROVE THE APPEARANCE OF AND / OR SUBSTANTIALLY REDUCE THE FORMATION OF SCARS AND OTHER VISIBLE EFFECTS OF HEALED WOUNDS, KELOIDS AND HYPERTHROPHIC SCARS
Ozkan et al. The effect of bevacizumab and 5-Fluorouracil combination on epidural fibrosis in a rat laminectomy model.
da Silva et al. Gelatin-based membrane containing usnic acid-loaded liposomes: A new treatment strategy for corneal healing
Motsoene et al. Multifunctional lipid-based nanoparticles for wound healing and antibacterial applications: A review
Huang et al. Chitooligosaccharide-europium (III) functional micron complex with visualized inflammation monitoring, immunomodulation and pro-vascularization activities for effective wound healing of pressure ulcers injury
TW201834637A (en) Sustained-release composition, method for fabricating, and use thereof
CN104856978B (en) A kind of chitosan spraying film and preparation method thereof
RU2742752C1 (en) Medicinal preparation in form of sol for treating a disease and/or condition characterized by violation of skin integrity, and a method for preparing it
Jiang et al. Multifunctional fucoidan-loaded Zn-MOF-encapsulated microneedles for MRSA-infected wound healing
Curtolo et al. Silver nanoparticles formulations for healing traumatic injuries in oral mucosa of rats
Kumar et al. Polymeric microparticles-based formulation for the eradication of cutaneous candidiasis: development and characterization
JP7465610B2 (en) Use of Polypeptides in the Manufacture of Wound Care Medicaments - Patent application
Elshall et al. Boosting hair growth through follicular delivery of Melatonin through lecithin-enhanced Pickering emulsion stabilized by chitosan-dextran nanoparticles in testosterone induced androgenic alopecia rat model
Fedota et al. Local treatment of burn wounds in animals using a new nanocomponent ointment
Gupta et al. In vivo potential of polymeric N-acryloyl-glycine nanoparticles with anti-inflammatory activities for wound healing