RU2729633C2

RU2729633C2 - Biologically active food additive for preventing inflammatory intestinal disease and functional intestinal disorders and a method for production thereof

Info

Publication number: RU2729633C2
Application number: RU2018124574A
Authority: RU
Inventors: Владимир Трофимович Ивашкин
Original assignee: Общество С Ограниченной Ответственностью "Валента - Интеллект"
Priority date: 2018-07-05
Filing date: 2018-07-05
Publication date: 2020-08-11
Also published as: RU2018124574A; RU2018124574A3

Abstract

FIELD: nutraceutical agent.

SUBSTANCE: group of inventions relates to a probiotic composition for preventing inflammatory bowel disease and functional intestinal disorders and to eliminate their symptoms, as well as to enhance overall nonspecific body resistance. Composition is presented in the form of capsule containing 0.04 to 0.1 g of dry bacterial mass containing probiotic Lactobacillus rhamnosus lactobacilli and probiotic bifidobacteria Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum and Bifidobacterium infantis, as well as nutriceutically acceptable auxiliary components, including microcrystalline cellulose and a nutraceutically acceptable stearic acid salt in amount of 0.002 to 0.004 g, selected from calcium stearate and magnesium stearate, wherein the content of each of the species of probiotic lactobacilli and bifidobacteria is not less than 1x10⁸ colony forming units (CFU) per 1 g of dry bacterial mass. Group of inventions also relates to a method of producing said composition.

EFFECT: group of inventions widens the range of probiotic compositions based on probiotic lacto- and bifidobacteria, intended for prevention of inflammatory intestinal disease and functional intestinal disorders, as well as obtaining a probiotic composition with a long storage life and preserving the vitality and useful properties of the probiotic microorganisms contained in the composition during the entire storage life of the composition.

8 cl, 1 tbl, 1 ex

Description

Область техники:Engineering area:

Настоящее изобретение относится к области нутрицевтики, более конкретно, к пробиотической композиции (биологически активной пищевой добавке) для профилактики воспалительного заболевания кишечника и функциональных кишечных расстройств и для устранения их симптомов, а также для укрепления общей неспецифической резистентности организма, таких как диарея, метеоризм, запоры, вздутие живота и др. Здесь и далее для целей настоящего изобретения термины «пробиотическая композиция» и «биологически активная пищевая добавка» используются в качестве синонимов.The present invention relates to the field of nutraceuticals, more specifically, to a probiotic composition (biologically active food supplement) for the prevention of inflammatory bowel disease and functional intestinal disorders and for the elimination of their symptoms, as well as for strengthening the general nonspecific resistance of the body, such as diarrhea, flatulence, constipation , bloating, etc. Hereinafter, for the purposes of the present invention, the terms "probiotic composition" and "biologically active food additive" are used synonymously.

Уровень техники:Vehicle tier:

Под термином «пробиотики» здесь и далее понимаются живые микроорганизмы, которые при введении их в организм человека или животного способствуют жизнедеятельности организма хозяина за счет улучшения баланса кишечной микрофлоры (Fuller R., 1989 [1]; см. список ссылок в конце настоящего описания). Термин «пробиотик» здесь и далее в рамках настоящей заявки относится к пробиотическому микроорганизму или к препарату таких микроорганизмов. При этом микроорганизм считается пробиотическим, если он сохраняет жизнеспособность в условиях, характерных для пищеварительного тракта (низкий рН в желудке, наличие кислот пищеварительной системы и т.п.), и при этом способен осуществлять метаболизм в кишечнике, технологически применим (подвергается обработке) и демонстрирует клинически подтвержденные и задокументированные оздоравливающие эффекты, и при этом безопасен для потребления человеком (Lee, Y-K, Salmien, S., 1995 [2]).The term "probiotics" hereinafter refers to living microorganisms that, when introduced into the human or animal organism, contribute to the vital activity of the host organism by improving the balance of the intestinal microflora (Fuller R., 1989 [1]; see the list of references at the end of this description) ... The term "probiotic" hereinafter in the framework of this application refers to a probiotic microorganism or to a preparation of such microorganisms. In this case, a microorganism is considered probiotic if it remains viable under conditions characteristic of the digestive tract (low pH in the stomach, the presence of acids in the digestive system, etc.), and at the same time is able to metabolize in the intestine, is technologically applicable (processed) and demonstrates clinically proven and documented healing effects, while being safe for human consumption (Lee, YK, Salmien, S., 1995 [2]).

Важнейшими для поддержания здоровья человека пробиотическими микроорганизмами являются бифидобактерии и лактобациллы. В литературе неоднократно было показано, что лактобациллы и бифидобактерии, колонизирующие кишечник новорожденного, при рождении стерильный, оказывают важное влияние на здоровье хозяина, играя важную роль в работе пищеварительной системы, в том числе, в усвоении минеральных веществ, в работе иммунной системы.The most important probiotic microorganisms for maintaining human health are bifidobacteria and lactobacilli. In the literature, it has been repeatedly shown that lactobacilli and bifidobacteria colonizing the intestines of a newborn, sterile at birth, have an important effect on the health of the host, playing an important role in the functioning of the digestive system, including in the absorption of minerals, in the functioning of the immune system.

Важнейшими для поддержания здоровья человека пробиотическими микроорганизмами являются бифидобактерии и лактобактерии. Во многих исследованиях многократно было показано положительное влияние бифидобактерий и лактобактерий на здоровье человека. В частности, показано, что пробиотические лакто- и бифидобактерии могут с большим успехом использоваться для коррекции микрофлоры желудочно-кишечного тракта, для воздействия на патогенные и условно-патогенные микроорганизмы кишечника и для профилактики затяжных форм желудочно-кишечных заболеваний.The most important probiotic microorganisms for maintaining human health are bifidobacteria and lactobacilli. Many studies have repeatedly shown the positive effect of bifidobacteria and lactobacilli on human health. In particular, it was shown that probiotic lacto- and bifidobacteria can be used with great success to correct the microflora of the gastrointestinal tract, to influence pathogenic and opportunistic intestinal microorganisms and to prevent protracted forms of gastrointestinal diseases.

Из уровня техники известны многочисленные препараты пробиотических бифидо- и лактобактерий, предназначенные для применения в различных специфических целях. См., например, патенты РФ RU 2462301 С2, 24.01.2018 [3]; RU 2464994 С2, 27.10.2012 [4]; RU 2636027 С2, 17.11.2017 [5]. При этом одной из важнейших областей применения пробиотических бифидо- и лактобактерий является профилактика воспалительного заболевания кишечника, а также восстановление нормального баланса кишечной микрофлоры и устранение симптомов кишечных расстройств. В связи с этим, важной является задача разработки оптимального состава питательной (нутрицевтической) композиции, которые позволил бы использовать полезные свойства нескольких разных видов пробиотических лактобактерий и бифидобактерий.Numerous preparations of probiotic bifidobacteria and lactobacilli are known from the prior art, intended for use in various specific purposes. See, for example, RF patents RU 2462301 C2, 01.24.2018 [3]; RU 2464994 C2, 27.10.2012 [4]; RU 2636027 C2, 17.11.2017 [5]. At the same time, one of the most important areas of application of probiotic bifidobacteria and lactobacilli is the prevention of inflammatory bowel disease, as well as restoration of the normal balance of intestinal microflora and elimination of symptoms of intestinal disorders. In this regard, an important task is to develop an optimal composition of a nutritive (nutraceutical) composition that would allow using the beneficial properties of several different types of probiotic lactobacilli and bifidobacteria.

Из опубликованной патентной заявки Индии IN 709/KOL/2015, 10.07.2015 [6] известна нутрицевтическая композиция для профилактики воспалительного заболевания кишечника, содержащая пробиотические лактобактерий Lactobacillus acidophilus, пробиотические бифидобактерии Bifidobacterium bifidum и стрептококк термофильный Streptococcus thermophilus. Массовое соотношение лактобактерий, бифидобактерий и стрептококка термофильного в композиции [6] составляет 1:2:1. Нутрицевтическая композиция [6] также может использоваться в комплексном лечении воспалительного заболевания кишечника. Композиция [6], предпочтительно, выполнена в форме таблетки, порошка для приема внутрь или порошка, добавляемого к продуктам питания (стерилизованному молоку, йогурту, творогу и т.д.).From published Indian patent application IN 709 / KOL / 2015, 10.07.2015 [6] known nutraceutical composition for the prevention of inflammatory bowel disease, containing probiotic lactobacillus Lactobacillus acidophilus, probiotic bifidobacterium Bifidobacterium bifidum and streptococcus thermophilic Streptococcus. The mass ratio of lactobacilli, bifidobacteria and thermophilic streptococcus in the composition [6] is 1: 2: 1. Nutraceutical composition [6] can also be used in the complex treatment of inflammatory bowel disease. Composition [6] is preferably made in the form of a tablet, a powder for oral administration or a powder added to food products (sterilized milk, yoghurt, cottage cheese, etc.).

Однако, несмотря на то, что композиция [6] может быть использована для профилактики воспалительной болезни кишечника, она не использует пробиотический потенциал пробиотических бифидобактерий, кроме Bifidobacterium bifidum, и лактобактерий, кроме Lactobacillus acidophilus.However, despite the fact that the composition [6] can be used for the prevention of inflammatory bowel disease, it does not use the probiotic potential of probiotic bifidobacteria, except for Bifidobacterium bifidum, and lactobacilli, except for Lactobacillus acidophilus.

Из документа WO 2009/048934 А2, 16.04.2009 [7] известна предлагаемая в качестве ближайшего аналога настоящего изобретения пробиотическая композиция (пищевая добавка), предназначенная для уменьшения выраженности симптомов функционального расстройства кишечника, содержащая пробиотические лактобактерий Lactobacillus acidophilus и пробиотические бифидобактерии Bifidobacterium animalis. (Здесь и далее под «функциональным расстройством кишечника» понимается нарушение пищеварительной функции, секреции соляной кислоты и моторики, развивающееся на фоне отсутствия органических изменений кишечника.)From document WO 2009/048934 A2, 16.04.2009 [7], a probiotic composition (food supplement) proposed as the closest analogue of the present invention is known, designed to reduce the severity of symptoms of functional bowel disorder, containing probiotic lactobacillus Lactobacillus acidophilus and probiotic bifidobacterium animal Bifidobacterium. (Hereinafter, "functional bowel disorder" refers to a violation of the digestive function, secretion of hydrochloric acid and motility, which develops against the background of the absence of organic changes in the intestine.)

Предпочтительно, пробиотические лактобактерий согласно изобретению [7] представляют собой Lactobacillus acidophilus NCFM, депонированные в /Американской коллекции типовых культур (номер депонирования РТА-4947), а пробиотические бифидобактерии представляют собой Bifidobacterium animalis subsp. lactis Bi-07, также депонированные в Американской коллекции типовых культур (номер депонирования РТА-4802). Композицию [7], предпочтительно, потребляют внутрь таким образом, чтобы обеспечить поступление в организм потребителя 1×10⁹ - 2×10¹¹ колониеобразующих единиц (КОЕ) пробиотических бактерий в сутки. Наиболее предпочтительно, композицию [7] потребляют внутрь таким образом, чтобы обеспечить поступление в организм потребителя 2×10¹¹ КОЕ пробиотических бактерий в сутки.Preferably, the probiotic lactobacilli according to the invention [7] are Lactobacillus acidophilus NCFM deposited in / American Type Culture Collection (deposit number PTA-4947), and the probiotic bifidobacteria are Bifidobacterium animalis subsp. lactis Bi-07, also deposited with the American Type Culture Collection (deposit number PTA-4802). Composition [7] is preferably consumed internally in such a way as to ensure that 1 × 10 ⁹ - 2 × 10 ¹¹ colony-forming units (CFU) of probiotic bacteria per day enter the consumer's body. Most preferably, the composition [7] is ingested in such a way as to ensure that the consumer receives 2 × 10 ¹¹ CFU of probiotic bacteria per day.

Несмотря на известность из уровня техники композиции [7], по-прежнему остается актуальной задача расширения арсенала пробиотических композиций (биологически активных пищевых добавок), предназначенных для профилактики воспалительного заболевания кишечника, а также для восстановления баланса кишечной микрофлоры, устранения симптомов кишечных расстройств (диареи, запора, метеоризма, вздутия живота и др.) и для укрепления общей неспецифической резистентности организма, оптимальным образом использующих пробиотический потенциал бифидобактерий и лактобактерий. При этом указанные пробиотические композиции (биологически активные пищевые добавки) должны изготавливаться достаточно простыми способами, обеспечивающими, в то же время, сохранение жизнеспособности и полезных свойств пробиотических бифидобактерий и лактобактерий как в процессе изготовления композиции, так и на протяжении всего срока хранения.Despite the fact that the composition [7] is known from the prior art, the task of expanding the arsenal of probiotic compositions (biologically active food additives) intended for the prevention of inflammatory bowel disease, as well as for restoring the balance of intestinal microflora, eliminating the symptoms of intestinal disorders (diarrhea, constipation, flatulence, bloating, etc.) and to strengthen the general nonspecific resistance of the body, optimally using the probiotic potential of bifidobacteria and lactobacilli. At the same time, these probiotic compositions (biologically active food additives) should be made in fairly simple ways, ensuring, at the same time, the preservation of the viability and useful properties of probiotic bifidobacteria and lactobacilli both during the preparation of the composition and throughout the entire shelf life.

Настоящее изобретение, решающее эту задачу, относится к пробиотической композиции (биологически активной пищевой добавке), предназначенной для восстановления баланса кишечной микрофлоры, для профилактики воспалительного заболевания кишечника и кишечных расстройств (диареи, запора, вздутия живота и др.) и для устранения их симптомов, а также для укрепления общей неспецифической резистентности организма, причем указанная композиция выполнена в форме капсулы, содержащей от 0,04 до 0,1 г сухой бактериальной массы, содержащей пробиотические лактобактерий Lactobacillus rhamnosus и пробиотические бифидобактерии Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum и Bifidobacterium infantis, а также нутрицевтически приемлемые вспомогательные компоненты, включая микрокристаллическую целлюлозу, лактозу и нутрицевтически приемлемую соль стеариновой кислоты, причем содержание каждого из видов пробиотических бифидобактерий составляет не менее 1х10⁸колониеобразующих единиц (КОЕ) на 1 грамм сухой бактериальной массы, более предпочтительно, не менее 1×10⁹ КОЕ. Содержание пробиотических лактобактерий Lactobacillus rhamnosus также составляет не менее 1×10⁸ КОЕ, более предпочтительно, не менее 1×10⁹ КОЕ на 1 грамм сухой бактериальной массы. Достигаемый технический результат - расширение арсенала пробиотических композиций (биологически активных пищевых добавок) для восстановления баланса кишечной микрофлоры, устранения симптомов кишечных расстройств и для укрепления иммунитета, а также для профилактики воспалительного заболевания кишечника.The present invention that solves this problem relates to a probiotic composition (biologically active food supplement) designed to restore the balance of intestinal microflora, for the prevention of inflammatory bowel disease and intestinal disorders (diarrhea, constipation, bloating, etc.) and for eliminating their symptoms, as well as to strengthen the general nonspecific resistance of the organism, and the specified composition is made in the form of a capsule containing from 0.04 to 0.1 g of dry bacterial mass containing probiotic lactobacilli Lactobacillus rhamnosus and probiotic bifidobacteria Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium a long and Bifis nutraceutically acceptable auxiliary components, including microcrystalline cellulose, lactose and a nutraceutically acceptable stearic acid salt, and the content of each of the types of probiotic bifidobacteria is at least 1x10 ⁸ colony forming units (CFU) per 1 gram of dry bacterium and the bulk, more preferably at least 1 × 10 ⁹ CFU. The content of probiotic lactobacilli Lactobacillus rhamnosus is also not less than 1 × 10 ⁸ CFU, more preferably not less than 1 × 10 ⁹ CFU per gram of dry bacterial mass. The achieved technical result is to expand the arsenal of probiotic compositions (biologically active food additives) to restore the balance of the intestinal microflora, eliminate the symptoms of intestinal disorders and to strengthen the immune system, as well as to prevent inflammatory bowel disease.

Предпочтительно, но без ограничения, в качестве нутрицевтически приемлемой соли стеариновой кислоты используют кальция стеарат или магния стеарат. В наиболее предпочтительном, но не ограничивающем воплощении пробиотическая композиция по изобретению содержит 0,0675 г сухой бактериальной массы, содержащей пробиотические бифидобактерии и лактобактерий, 0,0225 г лактозы, 0,1575 г микрокристаллической целлюлозы и 0,0025 г кальция стеарата.Preferably, but not limited to, calcium stearate or magnesium stearate is used as the nutraceutically acceptable stearic acid salt. In a most preferred, but non-limiting embodiment, the probiotic composition of the invention contains 0.0675 g dry bacterial mass containing probiotic bifidobacteria and lactobacilli, 0.0225 g lactose, 0.1575 g microcrystalline cellulose and 0.0025 g calcium stearate.

В качестве микрокристаллической целлюлозы, наиболее предпочтительно (без ограничения), используют Prosolv^® SMCC - силикатированную микрокристаллическую целлюлозу, получаемую путем сопроцессинга микрокристаллической целлюлозы (98%) и коллоидного диоксида кремния (2%), выпускаемую JRC Pharma Family (Prosolv^® SMCC: Silicified Microcrystalline Cellulose (The Original Silicified MCC). - «JRC Pharma Family», 13.07.2016 [8]). Благодаря равномерному распределению коллоидного диоксида кремния по поверхности частиц микрокристаллической целлюлозы, Prosolv^® SMCC по сравнению с традиционной микрокристаллической целлюлозой обладает в пять раз большей удельной поверхностью и уровнем шероховатости частиц, что обеспечивает существенно более высокую прессуемость, текучесть, смешиваемость и распадаемость Prosolv^® SMCC по сравнению с традиционной микрокристаллической целлюлозой, а также позволяет существенно повысить дисперсность активных веществ и стабильность порошковой смеси для инкапсулирования. Специалисту при этом понятно, что для осуществления настоящего изобретения может быть использованы и другие разновидности микрокристаллической целлюлозы фармакопейного качества.As microcrystalline cellulose, most preferably (without limitation) is used Prosolv ^® SMCC - silicified microcrystalline cellulose, obtained by soprotsessinga microcrystalline cellulose (98%), and colloidal silicon dioxide (2%), manufactured ^{JRC Pharma Family (Prosolv ® SMCC:} Silicified Microcrystalline Cellulose (The Original Silicified MCC). - "JRC Pharma Family", 13.07.2016 [8]). Due to the uniform distribution of colloidal silicon dioxide over the surface of microcrystalline cellulose particles, Prosolv ^® SMCC, in comparison with traditional microcrystalline cellulose, has five times the specific surface area and level of roughness of the particles, which provides significantly higher compressibility, fluidity, miscibility and disintegration of Prosolv ^® SMCC compared to with traditional microcrystalline cellulose, and also allows you to significantly increase the dispersion of active substances and the stability of the powder mixture for encapsulation. The person skilled in the art understands that other varieties of microcrystalline cellulose of pharmacopoeial quality can be used to carry out the present invention.

При этом видовой состав бактерий, входящих в состав пробиотической композиции по изобретению, подобран таким образом, чтобы способствовать профилактике болезней кишечника, включая синдром раздраженного кишечника, а также восстановлению баланса кишечной микрофлоры, устранению симптомов кишечных расстройств, таких как диарея, запор, вздутие живота и др., и укреплению общей неспецифической резистентности организма.At the same time, the species composition of bacteria that make up the probiotic composition according to the invention is selected in such a way as to help prevent intestinal diseases, including irritable bowel syndrome, as well as restore the balance of intestinal microflora, eliminate symptoms of intestinal disorders such as diarrhea, constipation, bloating and others, and strengthening the general nonspecific resistance of the organism.

В более предпочтительных вариантах осуществления изобретения композиция выполнена в виде твердой лекарственной формы. Наиболее предпочтительно (без ограничения), композиция выполнена в виде капсулы, например, в виде твердой желатиновой капсулы. Предпочтительно, одна капсула композиции содержит от 0,04 до 0,1 г сухой бактериальной массы, включающей вышеуказанные пробиотические лакто- и бифидобактерии, от 0,02 до 0,03 г лактозы, от 0,14 до 0,16 г микрокристаллической целлюлозы, включая модифицированную микрокристаллическую целлюлозу и от 0,002 до 0,003 г нутрицевтически приемлемого лубриканта - кальция стеарата или магния стеарата. Наиболее предпочтительно (без ограничения), одна капсула композиции содержит 0,067 г сухой бактериальной массы, содержащей пробиотические лакто- и бифидобактерии, 0,0225 г лактозы, 0,158 г модифицированной микрокристаллической целлюлозы, такой как Prosolv^® SMCC, и 0,0025 г кальция стеарата.In more preferred embodiments of the invention, the composition is in the form of a solid dosage form. Most preferably (without limitation), the composition is in the form of a capsule, for example, in the form of a hard gelatin capsule. Preferably, one capsule of the composition contains from 0.04 to 0.1 g of dry bacterial mass, including the above probiotic lacto- and bifidobacteria, from 0.02 to 0.03 g of lactose, from 0.14 to 0.16 g of microcrystalline cellulose, including modified microcrystalline cellulose and 0.002 to 0.003 g of a nutraceutically acceptable lubricant, calcium stearate or magnesium stearate. Most preferably (without limitation), one capsule formulation contains 0.067 g of dry bacterial mass containing probiotic lactobacilli and bifidobacteria, 0.0225 g lactose 0.158 g microcrystalline cellulose modified, such as Prosolv ^® SMCC, and 0.0025 g of calcium stearate.

Также изобретение относится к способу получения биологически активной добавки (пробиотической композиции), где указанный способ включает в себя раздельную подготовку каждой из культур Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium infantis и Lactobacillus rhamnosus, включающую высевание культур указанных пробиотических бифидобактерий и лактобацилл на питательные среды (предпочтительно, на жидкую среду МРС, разлитую по пробиркам, где жидкую среду МРС готовят согласно работе de Man J.D., Rogosa М., Sharpe М.Е., 1960 [9]), с последующим термостатированием указанных культур в течение 24-72 часов (предпочтительно, при температуре 37±0,5°С) и с последующими засеванием термостатированными культурами емкостей с жидким МРС агаром и инкубированием их в течение 48-60 часов при температуре 37±0,5°С, перенос указанных культур в ферментер с последующим выращиванием указанных культур в указанном ферментере, причем указанное выращивание осуществляется при температуре 37±0,5°С, рН 6,0-7,0 и при избыточном давлении в полости ферментера, составляющем 0,025±0,005 МПа, концентрирование указанных культур до заданного объема концентрата, добавление защитной среды, охлаждение концентратов, сублимационную сушку концентратов, где указанную сублимационную сушку осуществляют в течение 30-40 часов при температуре не выше -40°С и давлении не более 30-40 Па, объединение сухих бактериальных масс культур Lactobacillus rhamnonsus, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum и Bifidobacterium breve, смешивание с предварительно подготовленными компонентами смеси для наполнения капсул, включая нутрицевтически приемлемый наполнитель и нутрицевтически приемлемый лубрикант, при помощи любого используемого в фармацевтической промышленности смесителя до образования однородной смеси, с последующим заполнением капсул указанной смесью на любом используемом в фармацевтической промышленности устройстве для заполнения капсул и, по необходимости, обеспыливанием наполненных капсул и фасовкой обеспыленных готовых наполненных капсул в блистеры или в банки. Предпочтительно (без ограничения), капсулы фасуют в блистеры по 10 капсул, а в банки - по 30 капсул.The invention also relates to a method for producing a biologically active supplement (probiotic composition), wherein said method comprises separate preparation of each of the cultures of Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium infantis and Lactobacillus rhamnosus, comprising sowing the cultures of said probiotic bifidobacteria and lactic acid bacteria , on a liquid MRS medium, poured into test tubes, where a liquid MRS medium is prepared according to the work of de Man JD, Rogosa M., Sharpe M.E., 1960 [9]), followed by thermostating these cultures for 24-72 hours (preferably , at a temperature of 37 ± 0.5 ° C) and followed by inoculation with thermostated cultures of containers with liquid MRS agar and incubating them for 48-60 hours at a temperature of 37 ± 0.5 ° C, transfer of these cultures to a fermenter, followed by cultivation of these cultures in the specified fermenter, and the specified cultivation is carried out at a temperature of 37 ± 0.5 ° C, pH 6.0 -7.0 and at an excess pressure in the fermenter cavity of 0.025 ± 0.005 MPa, the concentration of these cultures to a given volume of concentrate, the addition of a protective medium, cooling of the concentrates, freeze drying of concentrates, where said freeze drying is carried out for 30-40 hours at a temperature not higher than -40 ° C and a pressure of not more than 30-40 Pa, combining dry bacterial masses of cultures of Lactobacillus rhamnonsus, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum and Bifidobacterium breve, mixing with pre-prepared components of the mixture for filling capsules, including a nutraceutically acceptable filler and nutraceutical , using any mixer used in the pharmaceutical industry until a homogeneous mixture is formed, followed by filling the capsules with the specified mixture on any capsule filling device used in the pharmaceutical industry and, if necessary, dedusting the filled capsules and filling about dust-free ready-filled capsules in blisters or jars. Preferably (but not limited to), the capsules are packaged in blisters of 10 capsules and in cans of 30 capsules.

Технический результат изобретения, относящегося к способу, заключается в обеспечении пробиотической композиции с сохранением жизнеспособности и полезных свойств пробиотических бифидобактерий и лактобацилл, входящих в состав композиции, при изготовлении композиции и на протяжении всего срока ее хранения. Срок хранения композиции составляет 24 месяца.The technical result of the invention related to the method is to provide a probiotic composition while maintaining the viability and useful properties of probiotic bifidobacteria and lactobacilli included in the composition during the preparation of the composition and throughout its storage period. The shelf life of the composition is 24 months.

Для целей настоящего изобретения «предварительная подготовка» вспомогательных компонентов смеси для наполнения капсул включает в себя помол указанных компонентов на мельнице и просеивание указанных компонентов через сито. Предпочтительно, для помола компонентов используют любую традиционно используемую в технологии твердых лекарственных форм мельницу, например, мельницу молотковую ММ-10. Также предпочтительно, для просеивания компонентов смеси используют сито с размером ячейки 1 мм. В различных вариантах осуществления изобретения смешивание компонентов может осуществляться на любом используемом в фармацевтической отрасли в технологии твердых лекарственных форм смесителе. Заполнение капсул (включающее, в свою очередь, стадии ориентирования капсул, наполнения капсул и закрытия капсул) осуществляют на любом используемом в фармацевтической отрасли в технологии твердых лекарственных форм устройстве для наполнения капсул. Фасовку капсул в банки или блистеры осуществляют при помощи любого счетно-фасовочного устройства, используемого в фармацевтической отрасли в технологии твердых лекарственных форм.For the purposes of the present invention, "preconditioning" the auxiliary components of the capsule-filling mixture comprises grinding said components in a mill and sifting said components through a sieve. Preferably, any mill traditionally used in the technology of solid dosage forms, for example, a hammer mill MM-10, is used to grind the components. It is also preferred that a 1 mm sieve is used to screen the components of the mixture. In various embodiments of the invention, mixing of the components can be performed on any mixer used in the pharmaceutical industry in solid dosage form technology. Filling of capsules (including, in turn, the steps of orienting the capsules, filling the capsules and closing the capsules) is carried out on any capsule filling device used in the pharmaceutical industry in solid dosage form technology. The filling of capsules into cans or blisters is carried out using any counting and filling device used in the pharmaceutical industry in the technology of solid dosage forms.

Термин «нутрицевтически приемлемый» для целей настоящей заявки означает, что данный компонент может в принципе использоваться при изготовлении нутрицевтических композиций, что он является безопасным для потребителя указанной пробиотической композиции и что он совместим с другими компонентами данной пробиотической композиции.The term “nutraceutically acceptable” for the purposes of this application means that a given component can in principle be used in the manufacture of nutraceutical compositions, that it is safe for the consumer of said probiotic composition, and that it is compatible with the other components of the probiotic composition.

Жизнеспособность пробиотических бактерий, входящих в состав композиции, а также сохранение полезных свойств композиции при ее хранении исследуют в условиях ускоренного старения. При этом для пробиотической композиции по изобретению показано в данном исследовании, что ее полезные свойства сохраняются по меньшей мере на протяжении 24 месяцев. Композицию согласно изобретению хранят в невскрытой заводской упаковке при температуре не выше 25°С, в защищенном от прямых солнечных лучей месте. Если заводская упаковка уже вскрыта, то композицию по изобретению хранят в плотно закрытом флаконе не более 24 месяцев.The viability of the probiotic bacteria that make up the composition, as well as the preservation of the beneficial properties of the composition during storage, are studied under conditions of accelerated aging. Moreover, for the probiotic composition according to the invention, it is shown in this study that its beneficial properties are retained for at least 24 months. The composition according to the invention is stored in an unopened original packaging at a temperature not exceeding 25 ° C, protected from direct sunlight. If the original packaging has already been opened, then the composition according to the invention is stored in a tightly closed bottle for no more than 24 months.

Предпочтительно, пробиотическую композицию (биологически активную добавку) по изобретению употребляют по 1 капсуле 2 раза в день на протяжении 10-21 дней, запивая ее небольшим количеством негорячей жидкости. При необходимости, прием пробиотической композиции по изобретению можно повторить через некоторое время (желательно, по согласованию с лечащим врачом - терапевтом или гастроэнтерологом). При употреблении внутрь капсулу запивают небольшим количеством негорячей жидкости.Preferably, the probiotic composition (dietary supplement) according to the invention is consumed 1 capsule 2 times a day for 10-21 days with a small amount of non-hot liquid. If necessary, the intake of the probiotic composition according to the invention can be repeated after some time (preferably, in consultation with the attending physician - therapist or gastroenterologist). When ingested, the capsule is washed down with a small amount of non-hot liquid.

Нижеприведенные примеры, описывающие частные воплощения композиции по изобретению, а также ее использование у пациентов с синдромом раздраженного кишечника, приводятся исключительно в целях иллюстрации настоящего изобретения и не могут быть использованы для ограничения объема притязаний.The examples below, describing particular embodiments of the composition according to the invention, as well as its use in patients with irritable bowel syndrome, are given solely for the purpose of illustrating the present invention and cannot be used to limit the scope of the claims.

Пример 1. Получение пробиотической композиции по изобретению.Example 1. Obtaining a probiotic composition according to the invention.

Исходные культуры пробиотических бифидобактерий Bifidobacterium bifidum, предпочтительно штаммы, выбранные из Bb-06, DSM20239, НА-132, Idcc 4201, JCM7003, KCTC3357, L22, LMG13195, S28a, BKM Ас-2773D, Bifidobacterium longum, предпочтительно штаммы, выбранные из В379М, ВВ46, ВВ536, Bl-05, DSM20219, НА-135, SD5219, BKM AC-2775D, и Bifidobacterium infantis, предпочтительно штаммы, выбранные из 35624, Bi-26, НА-116, SD5220, BKM Ac-2774D, а также пробиотических лактобактерий Lactobacillus rhamnosus, предпочтительно штаммы, выбранные из А119, CLR2, GR-1, GG, НА-111, HN001, LB21, Lcr35, Lr-32, R0011, BKM Ac-3170D, с чашек Петри пересевают на жидкую среду МРС [9], разлитую по пробиркам, и выращивают в течение 2 суток в термостате при 37°С. Далее культурами из пробирок засевают бутыль объемом 3000 мл, содержащую жидкую среду МРС; выращивание осуществляют при температуре 37°С в течение 48-60 часов, после чего жидкий посевной материал передают на стадию ферментации. Предпочтительно (без ограничения), ферментацию осуществляют в ферментере «Биор-250», предварительно простерилизованном в течение 90 минут при температуре 132±2°С. При этом питательную среду перед высеванием культур стерилизуют глухим паром при температуре 112-115°С. После захолаживания питательной среды в нее раздельно добавляют культуры бифидобактерий Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium infantis и лактобактерий Lactobacillus rhamnosus и затем помещают в ферментер для осуществления ферментации. Ферментацию осуществляют при температуре 37±0,5°С и избыточном давлении в полости ферментера, составляющем 0,025±0,005 МПа, при постоянном перемешивании и поддержании рН 6-7 (титрованием щелочным раствором). После окончания ферментации культуральные жидкости с каждого ферментера поочередно концентрируют на фильтрационной установке до заданного объема концентрата. По окончанию процесса концентрирования концентраты каждой из культур бифидобактерий Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium infantis и лактобактерий Lactobacillus rhamnosus сливают в реактор, в котором происходит добавление защитной среды.Stock cultures of probiotic bifidobacterium Bifidobacterium bifidum, preferably strains selected from Bb-06, DSM20239, HA-132, Idcc 4201, JCM7003, KCTC3357, L22, LMG13195, S28a, BKM Ac-2773D, Bifidobacter strains selected, preferably longobacter strains BB46, BB536, Bl-05, DSM20219, HA-135, SD5219, BKM AC-2775D, and Bifidobacterium infantis, preferably strains selected from 35624, Bi-26, HA-116, SD5220, BKM Ac-2774D, as well as probiotic lactobacillus Lactobacillus rhamnosus, preferably strains selected from A119, CLR2, GR-1, GG, HA-111, HN001, LB21, Lcr35, Lr-32, R0011, BKM Ac-3170D, are subcultured from Petri dishes onto liquid MRS medium [9 ], poured into test tubes, and grown for 2 days in a thermostat at 37 ° C. Next, cultures from test tubes are inoculated into a 3000 ml bottle containing liquid MPC medium; the cultivation is carried out at a temperature of 37 ° C for 48-60 hours, after which the liquid seed is transferred to the fermentation stage. Preferably (without limitation), fermentation is carried out in the Bior-250 fermenter, previously sterilized for 90 minutes at a temperature of 132 ± 2 ° C. In this case, the nutrient medium is sterilized with deaf steam at a temperature of 112-115 ° C before sowing the cultures. After cooling the nutrient medium, cultures of bifidobacterium Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium infantis and lactobacillus Lactobacillus rhamnosus are separately added to it and then placed in a fermenter for fermentation. Fermentation is carried out at a temperature of 37 ± 0.5 ° C and an overpressure in the fermenter cavity of 0.025 ± 0.005 MPa, with constant stirring and maintaining a pH of 6-7 (titration with an alkaline solution). After the end of fermentation, the culture liquids from each fermenter are alternately concentrated in a filtration unit to a predetermined volume of concentrate. At the end of the concentration process, the concentrates of each of the cultures of bifidobacterium Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium infantis and lactobacillus Lactobacillus rhamnosus are poured into a reactor in which a protective medium is added.

В качестве защитных сред применяются вещества, образующие с водой истинные и коллоидные растворы. Эти среды могут быть разделены на три группы: коллоидные среды животного, растительного и минерального происхождения; среды, содержащие растворимые вещества, такие как углеводы и продукты гидролиза белков - пептоны и аминокислоты и среды сложного состава, в которых коллоидные вещества сочетаются с растворимыми.Substances that form true and colloidal solutions with water are used as protective media. These media can be divided into three groups: colloidal media of animal, plant and mineral origin; media containing soluble substances, such as carbohydrates and protein hydrolysis products - peptones and amino acids; and media of complex composition, in which colloidal substances are combined with soluble ones.

Для подготовки защитной среды используют либо сахарозо-желатиновый агар (СЖА) (10% сахарозы, 1,5% желатина, 0,1% агар-агара в дистиллированной воде), либо натуральное снятое молоко, сепарированное три раза, или сухое молоко для бактериологических целей (Difco, США) в концентрации 10%, либо используют иные хорошо известнве защитные среды, такие как среда Стэмпа, содержащая 10% желатина и 0,25-0,5% аскорбиновой кислоты в гидролизате натурального обезжиренного молока или минимальная среда М9 с добавлением 1% тиомочевины, либо 10% сахарозы, 10% мальтозы, 10% лактозы, 1,5% желатина.To prepare a protective medium, either sucrose-gelatin agar (SLA) (10% sucrose, 1.5% gelatin, 0.1% agar-agar in distilled water), or natural skimmed milk, separated three times, or dried milk for bacteriological purposes (Difco, USA) at a concentration of 10%, or other well-known protective media are used, such as Stamp's medium containing 10% gelatin and 0.25-0.5% ascorbic acid in natural skim milk hydrolyzate or M9 minimal medium with the addition of 1% thiourea, or 10% sucrose, 10% maltose, 10% lactose, 1.5% gelatin.

Защитную среду разливают в стеклянные пробирки (12 мл) по 5 мл; 3 раза стерилизуют текучим паром и проверяют стерильность путем инкубации 3 суток при 37°С Защитные среды хранят при 5°С не более 1 месяца.The protective medium is poured into 5 ml glass test tubes (12 ml); Sterilize 3 times with flowing steam and check the sterility by incubation for 3 days at 37 ° C. Protective media are stored at 5 ° C for no more than 1 month.

Полученный объем технологической жидкости каждой из культур охлаждают до температуры 5°С и разливают в стерильные бутыли, которые затем передают на стадию сублимационной сушки. В процессе сублимационной сушки технологическую жидкость разливают в поддоны из нержавеющей стали с достижением толщины слоя технологической жидкости, содержащей каждую из культур Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium infantis и Lactobacillus rhamnosus, составляющей 10±1 мм. Затем поддоны с разлитой в них технологической жидкостью помещают в камеру установки для сублимационной сушки и осуществляют в течение 30-40 часов сублимационную сушку технологической жидкости при давлении не выше 30 Па, при этом температура на протяжении всего цикла сушки меняется согласно заложенной программе от -30°С до 30°С. Полученные сухие бактериальные массы, каждой из культур, включая бифидобактерии Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum и Bifidobacterium infantis, а также лактобактерий Lactobacillus rhamnosus, смешивают с микрокристаллической целлюлозой (предпочтительно, с силикатированной микрокристаллической целлюлозой, такой как Prosolv^® SMCC) для доведения содержания каждой из культур до не менее 1×10⁸ КОЕ на 1 грамм указанной массы. Определение количества жизнеспособных бактерий проводили в соответствии с ОФС. 1.7.1.0003.15 "Бифидосодержащие пробиотики".The resulting volume of the process liquid of each of the cultures is cooled to a temperature of 5 ° C and poured into sterile bottles, which are then transferred to the stage of freeze drying. In the process of freeze drying, the process fluid is poured into stainless steel trays to achieve the thickness of the process fluid layer containing each of the cultures of Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium infantis and Lactobacillus rhamnosus, equal to 10 ± 1 mm. Then the pallets with the process liquid poured into them are placed in the chamber of the freeze drying installation and freeze drying of the process liquid is carried out for 30-40 hours at a pressure not exceeding 30 Pa, while the temperature throughout the entire drying cycle changes according to the set program from -30 ° C to 30 ° C. The resulting dried bacterial mass, each of the cultures, including Bifidobacteria Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum and Bifidobacterium infantis, and lactobacilli Lactobacillus rhamnosus, mixed with microcrystalline cellulose (preferably from silicified microcrystalline cellulose, such as Prosolv ^® SMCC) to adjust the content of each of the cultures up to at least 1 × 10 ⁸ CFU per 1 gram of the specified mass. Determination of the number of viable bacteria was carried out in accordance with the General Pharmacopoeia Monograph. 1.7.1.0003.15 "Bifid Probiotics".

Полученные сухие смеси бифидобактерий суммарно от 0,06 до 0,08 г на капсулу с микрокристаллической целлюлозой от 0,09 до 0,17 г на капсулу смешивают друг с другом и перемешивают с навесками предварительно подготовленных (просеянных через сито и измельченных) вспомогательных компонентов, включая лактозу от 0,02 до 0,025 г на капсулу и стеарат кальция от 0,002 до 0,004 г на капсулу, тщательно перемешивают на протяжении по крайней мере 10-15 минут вплоть до образования однородной смеси для наполнения капсул, после чего указанной однородной смесью наполняют желатиновые капсулы по 250 мг. При этом процесс наполнения капсул включает в себя стадию ориентирования капсул, а также стадии открытия капсул, собственно наполнения капсул и закрытия капсул. Заполненные капсулы подвергают обеспыливанию в вытяжном шкафу, и фасуют в блистеры или во флаконы, по 10 штук или по 30 штук соответственно при помощи любого счетно-фасовочного устройства, используемого в технологии твердых препаративных форм.The obtained dry mixtures of bifidobacteria in total from 0.06 to 0.08 g per capsule with microcrystalline cellulose from 0.09 to 0.17 g per capsule are mixed with each other and mixed with weighed portions of previously prepared (sifted through a sieve and crushed) auxiliary components, including lactose from 0.02 to 0.025 g per capsule and calcium stearate from 0.002 to 0.004 g per capsule, mix thoroughly for at least 10-15 minutes until a homogeneous mixture is formed for filling the capsules, after which the said homogeneous mixture is filled into gelatin capsules 250 mg each. In this case, the process of filling capsules includes the stage of orientation of the capsules, as well as the stages of opening the capsules, actually filling the capsules and closing the capsules. The filled capsules are dedusted in a fume hood, and packed in blisters or vials, 10 pieces or 30 pieces, respectively, using any counting and filling device used in solid formulation technology.

Жизнеспособность пробиотических лактобактерий и бифидобактерий, входящих в состав пробиотической композиции, а также сохранность полезных свойств композиции при хранении исследуют в условиях ускоренного старения.The viability of probiotic lactobacilli and bifidobacteria included in the probiotic composition, as well as the safety of the beneficial properties of the composition during storage, are investigated under conditions of accelerated aging.

Метод «ускоренного старения» заключается в выдерживании испытуемой биологически активной добавки при температурах и влажности, превышающих температуру и влажность его хранения в процессе обращения. При повышенных температурах, как правило, ускоряются протекающие в лекарственных средствах физико-химические процессы, приводящие со временем к нежелательным изменениям качества. Таким образом, при повышенной температуре промежуток времени, в течение которого контролируемые показатели качества лекарственного средства сохраняются в допустимых пределах (экспериментальный срок годности), искусственно сокращается в сравнении со сроком годности при температуре хранения. Это позволяет значительно сократить время, необходимое для установления срока годности.The “accelerated aging” method consists in keeping the tested dietary supplement at temperatures and humidity higher than the temperature and humidity of its storage during circulation. At elevated temperatures, as a rule, physical and chemical processes occurring in medicines are accelerated, leading over time to undesirable changes in quality. Thus, at an elevated temperature, the period of time during which the controlled quality parameters of the medicinal product remain within acceptable limits (experimental shelf life) is artificially reduced in comparison with the shelf life at the storage temperature. This can significantly reduce the time required to establish an expiration date.

Срок годности (С) при температуре хранения (t_xp) связан с экспериментальным сроком годности (С_э) при повышенной температуре экспериментального хранения (t_э) следующей зависимостью:The shelf life (C) at storage temperature (t _xp ) is related to the experimental shelf life (C _e ) at an elevated experimental storage temperature (t _e ) by the following relationship:

С=K⋅Сэ,С = K⋅Сэ,

где коэффициент соответствия

.where the match factor

...

Температурный коэффициент скорости химической реакции (А) принят равным 2,5. Приведенная зависимость основана на правиле Вант-Гоффа о 2-4-кратном росте скоростей химических реакций при увеличении температуры на 10°С.The temperature coefficient of the rate of the chemical reaction (A) is taken equal to 2.5. The given dependence is based on the Van't Hoff rule about a 2-4-fold increase in the rates of chemical reactions with an increase in temperature by 10 ° C.

Значение коэффициента соответствия (K) в зависимости от выбранного температурного интервала (t_э-t_xp), равного 25°С, составляет 9,9. Срок экспериментального хранения при выбранном сроке годности 2 года составляет 74 суток. В качестве композиции сравнения выбрана композиция пробиотических бифидобактерий Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum и Bifidobacterium infantis и пробиотических лактобацилл Lactobacillus rhamnosus с лактозой.The value of the coefficient of conformity (K), depending on the selected temperature range (t _e -t _xp ), equal to 25 ° C, is 9.9. The experimental storage period for a selected shelf life of 2 years is 74 days. Composition of probiotic bifidobacteria Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum and Bifidobacterium infantis and probiotic lactobacilli Lactobacillus rhamnosus with lactose were selected as a comparison composition.

В результате исследования показано, что полезные свойства пробиотической композиции по изобретению сохраняются как при изготовлении композиции, так и на протяжении по меньшей мере 24 месяцев хранения композиции в невскрытой заводской упаковке при температуре не выше 25°С в защищенном от прямых солнечных лучей месте. В случае, если заводская упаковка уже вскрыта, пробиотическую композицию по изобретению хранят в плотно закрытом флаконе не более 24 месяцев.As a result of the study, it was shown that the beneficial properties of the probiotic composition according to the invention are preserved both during the preparation of the composition and during at least 24 months of storage of the composition in an unopened original packaging at a temperature not exceeding 25 ° C in a place protected from direct sunlight. If the original packaging has already been opened, the probiotic composition according to the invention is stored in a tightly closed bottle for no more than 24 months.

Таким образом, пробиотическая композиция в соответствии с настоящим изобретением обеспечивает расширение ассортимента пробиотических композиций на основе пробиотических бактерий, предназначенных для профилактики болезней кишечника, включая синдром раздраженного кишечника, а также для восстановления баланса кишечной микрофлоры, устранения симптомов кишечных расстройств (диареи, запора, вздутия живота и др.) и для укрепления общей неспецифической резистентности организма.Thus, the probiotic composition in accordance with the present invention provides an expansion of the range of probiotic compositions based on probiotic bacteria, intended for the prevention of intestinal diseases, including irritable bowel syndrome, as well as for restoring the balance of intestinal microflora, eliminating the symptoms of intestinal disorders (diarrhea, constipation, bloating and others) and to strengthen the general nonspecific resistance of the organism.

Изобретение может быть использовано в медицине, фармакологии, химико-фармацевтической, пищевой промышленностиThe invention can be used in medicine, pharmacology, chemical-pharmaceutical, food industry

Ссылки:Links:

1. Fuller R. Probiotics in man and animals. // "Journal of Applied Microbiology", 1989, 66: 365-378.1. Fuller R. Probiotics in man and animals. // Journal of Applied Microbiology 1989, 66: 365-378.

2. Lee, У-K, and Salmien, S. 1995. The coming age of probiotics. // "Trends in Food Science & Technology", 1995, 6: 241-245.2. Lee, U-K, and Salmien, S. 1995. The coming age of probiotics. // "Trends in Food Science & Technology", 1995, 6: 241-245.

3. RU 2462301 C2 «ПРОБИОТИЧЕСКИЙ БАКТЕРИАЛЬНЫЙ ШТАММ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ПИТАТЕЛЬНОЙ КОМПОЗИЦИИ, УЛУЧШАЮЩЕЙ ХАРАКТЕР СНА», патентообладатель: НЕСТЕК С.А. (СН), МПК: C12N 1/20, A61K 25/745, A61K 35/747, A23L 33/135, опубликовано: 24.01.2018.3. RU 2462301 C2 "PROBIOTIC BACTERIAL STRAIN FOR OBTAINING A NUTRITIONAL COMPOSITION IMPROVING THE CHARACTER OF SLEEP", patentee: NESTEK S.А. (CH), IPC: C12N 1/20, A61K 25/745, A61K 35/747, A23L 33/135, published: 01.24.2018.

4. RU 2464994 С2 «ПРОБИОТИКИ ДЛЯ СНИЖЕНИЯ РИСКА ОЖИРЕНИЯ», патентообладатель: НЕСТЕК С.А. (СН), МПК: A61K 35/74, А61Р 3/04, A23L 1/03, опубликовано: 27.10.2012.4. RU 2464994 C2 "PROBIOTICS FOR REDUCING THE RISK OF OBESITY", patent holder: NESTEK SA (CH), IPC: A61K 35/74, A61P 3/04, A23L 1/03, published: 10/27/2012.

5. RU 2636027 С2 «ПРОБИОТИЧЕСКИЕ ШТАММЫ ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ В ЛЕЧЕНИИ ИЛИ ПРОФИЛАКТИКЕ ОСТЕОПОРОЗА», патентообладатель: ПРОБИ АБ (SE), МПК: A61K 35/74, А61Р 19/10, C12N 1/20, C12R 1/225, C12R 1/25, опубликовано: 17.11.2017.5. RU 2636027 C2 "PROBIOTIC STRAINS FOR USE IN TREATMENT OR PREVENTION OF OSTEOPOROSIS", patentee: PROBI AB (SE), IPC: A61K 35/74, A61R 19/10, C12N 1/20, C12R 1/225, C12R 1 / 25, published: 17.11.2017.

6. IN 709/KOL/2015 «Anti-inflammatory and regenerative formulation to substantially heal inflammatory bowel disease», заявитель: Banerjee Ena Ray (IN), МПК: A23L 1/30, опубликовано: 10.07.2015.6. IN 709 / KOL / 2015 "Anti-inflammatory and regenerative formulation to substantially heal inflammatory bowel disease", applicant: Banerjee Ena Ray (IN), IPC: A23L 1/30, published: 10.07.2015.

7. WO 2009/048934 A2, «PROBIOTICS FOR USE IN RELIEVING SYMPTOMS ASSOCIATED WITH GASTROINTESTINAL DISORDERS*, заявитель: "DANISCO A/S" (DK), МПК: A61K 35/74, A61P 1/00, опубликовано: 16.04.2009.7. WO 2009/048934 A2, "PROBIOTICS FOR USE IN RELIEVING SYMPTOMS ASSOCIATED WITH GASTROINTESTINAL DISORDERS *, Applicant:" DANISCO A / S "(DK), IPC: A61K 35/74, A61P 1/00, published: 16.04.2009 ...

8. Prosolv^® SMCC: Silicified Microcrystalline Cellulose (The Original Silicified MCC). // "JRC Pharma Family", 13.07.2016. Доступно в сети Интернет; режим доступа (URL): https://www.jrspharma.com/pharma-wAssets/docs/brochures/PROSOLV-SMCC.pdf. ^{8. Prosolv ® SMCC: Silicified Microcrystalline Cellulose} (The Original Silicified MCC). // "JRC Pharma Family", 13.07.2016. Available on the Internet; Access Mode (URL): https://www.jrspharma.com/pharma-wAssets/docs/brochures/PROSOLV-SMCC.pdf.

9. De Man J.D., Rogosa, M., Sharpe, M.E. A Medium for the Cultivation of Lactobacilli. // "Journal of Applied Bacteriology", 1960; 23, pp. 130-135.9. De Man J.D., Rogosa, M., Sharpe, M.E. A Medium for the Cultivation of Lactobacilli. // "Journal of Applied Bacteriology", 1960; 23, pp. 130-135.

10. Синдром раздраженного кишечника: Глобальная перспектива. - Практические рекомендации Всемирной Гастроэнтерологической Организации. 2015 г. // Доступно посредством сети Интернет; режим доступа (URL): https://www.worldgastroenterology.org/UserFiles/file/guidelines/irritable-bowel-syndrome-russian-2015.pdf.10. Irritable Bowel Syndrome: A Global Perspective. - Practical recommendations of the World Gastroenterological Organization. 2015 // Available via the Internet; access mode (URL): https://www.worldgastroenterology.org/UserFiles/file/guidelines/irritable-bowel-syndrome-russian-2015.pdf.

11. Weaver M.E., Lowe N.K. A critical review of visual analogue scales in the measurements of clinical phenomena. // "Research in Nursing & Health", 1990, 13(4):227-36.11. Weaver M.E., Lowe N.K. A critical review of visual analogue scales in the measurements of clinical phenomena. // "Research in Nursing & Health" 1990, 13 (4): 227-36.

12. Lewis S.J., Heaton K.W. Stool form scale as a useful guide to intestinal transit time. // "Scandinavian Journal of Gastroenterology", 1997, 32 (9): 920-24.12. Lewis S.J., Heaton K.W. Stool form scale as a useful guide to intestinal transit time. // "Scandinavian Journal of Gastroenterology" 1997, 32 (9): 920-24.

13. Saad R., Chey W. Breath tests for gastrointestinal disease the real deal or just a lot of hot air? // "Gastroenterology", 2007; 133: 1763-1766.13. Saad R., Chey W. Breath tests for gastrointestinal disease the real deal or just a lot of hot air? // "Gastroenterology", 2007; 133: 1763-1766.

14. Ware J.E., Snow K.K., Kosinski M., Gadnek B. SF-36 Health survey. Manual and interpretation guide. - The Health Institute, New England Medical Center, Boston: Mass, 1993.14. Ware J. E., Snow K. K., Kosinski M., Gadnek B. SF-36 Health survey. Manual and interpretation guide. - The Health Institute, New England Medical Center, Boston: Mass, 1993.

Claims

1. Probiotic composition for the prevention of inflammatory bowel disease and functional intestinal disorders and to eliminate their symptoms, as well as to strengthen the general nonspecific resistance of the body, characterized in that said probiotic composition is made in the form of a capsule containing from 0.04 to 0.1 g dry bacterial mass containing probiotic lactobacillus Lactobacillus rhamnosus and probiotic bifidobacterium Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum and Bifidobacterium infantis, as well as nutraceutically acceptable auxiliary components, including 0.004 microcrystalline stearic acid salt and 0.004 g of stearic acid in the amount of 0.004 g microcrystalline cellulose magnesium stearate, and the content of each of the types of probiotic bifidobacteria is at least 1x10 ⁸ colony-forming units (CFU) per 1 gram of dry bacterial mass, and the content of probiotic lactobacilli Lactobacillus rhamnosu s also amounts to at least 1x10 ⁸ CFU per 1 gram of dry bacterial mass.

2. Probiotic composition according to claim 1, characterized in that the amount of dry bacterial mass per capsule is from 0.06 to 0.08 g.

3. Probiotic composition according to claim 1, characterized in that the microcrystalline cellulose is silicated microcrystalline cellulose.

4. Probiotic composition according to claim 3, characterized in that the amount of microcrystalline cellulose per capsule is from 0.09 to 0.17 g.

5. A method of manufacturing a probiotic composition according to any one of paragraphs. 1-4, including separate sowing of cultures of probiotic lactobacilli Lactobacillus rhamnosus and probiotic bifidobacteria Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum and Bifidobacterium infantis in a liquid MRS medium, followed by incubation of these cultures for 24-72 hours, preferably at 37-72 hours subsequent inoculation with thermostated cultures of a container with liquid MRS agar and incubation for 48-60 hours at a temperature of 37 ± 0.5 ° С, transfer of these cultures to a fermenter, followed by growing these cultures in a specified fermenter at a temperature of 37 ± 0.5 ° С, pH 6.0-7.0 and an overpressure in the fermenter cavity of 0.025 ± 0.005 MPa, concentration of these cultures to a given volume of concentrate, adding a protective medium, cooling concentrates, freeze drying of concentrates, combining dry bacterial masses of Lactobacillus rhamnosus, Bifidobacterium bifidum cultures , Bifidobacterium longum and Bifidobacterium in fantis, mixing with the pre-mixed ingredients of the capsule filling mixture, including a nutraceutically acceptable excipient and a nutraceutically acceptable lubricant, using any pharmaceutical mixer to form a homogeneous mixture, and then filling the capsules with said mixture on any capsule filling device used in the pharmaceutical industry.

6. The method according to claim 5, characterized in that the protective medium is sucrose-gelatin agar.

7. The method according to claim 5, characterized in that after adding the protective medium, the concentrates are cooled to 5 ° C.

8. The method according to claim 5, further comprising the steps of dedusting and filling the capsules.