RU2149642C1 - Method of preparing polysaccharides from plant raw material with immunostimulating effect - Google Patents

Method of preparing polysaccharides from plant raw material with immunostimulating effect Download PDF

Info

Publication number
RU2149642C1
RU2149642C1 RU99117565A RU99117565A RU2149642C1 RU 2149642 C1 RU2149642 C1 RU 2149642C1 RU 99117565 A RU99117565 A RU 99117565A RU 99117565 A RU99117565 A RU 99117565A RU 2149642 C1 RU2149642 C1 RU 2149642C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
solution
polysaccharides
raw material
raw materials
plant raw
Prior art date
Application number
RU99117565A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Р.Г. Оводова
О.А. Бушнева
В.В. Головченко
С.В. Попов
Ю.С. Оводов
Original Assignee
Институт физиологии Коми научного центра Уральского отделения РАН
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Институт физиологии Коми научного центра Уральского отделения РАН filed Critical Институт физиологии Коми научного центра Уральского отделения РАН
Priority to RU99117565A priority Critical patent/RU2149642C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2149642C1 publication Critical patent/RU2149642C1/en

Links

Images

Landscapes

  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)

Abstract

FIELD: medicine, chemical-pharmaceutical industry. SUBSTANCE: invention relates to method of preparing pectin polysaccharides from plant raw material. Plant raw material is treated with formalin aqueous solution, kept in acidified water at pH 3.8-4.2 and 45-52 C to remove calcium and magnesium bridges followed by extraction of pectin polysaccharides with ammonium oxalate aqueous solution. Then extract is evaporated, treated with 96% ethyl alcohol and lyophilized. Fresh-water flower plants, for example, any species of duckweed genus (Lemna spp.) or preliminary milled fresh above ground part of higher plants containing pectin polysaccharides, for example, common campion Oberna behen (L.) Ikonn (Silene vulgaris, Moench Garke) are used as plant raw material. EFFECT: high yield and purification degree of product. 5 cl, 2 tbl, 4 ex

Description

Изобретение относится к медицине, а именно к химико-фармацевтической промышленности, и касается способа получения пектиновых полисахаридов. The invention relates to medicine, namely to the pharmaceutical industry, and relates to a method for producing pectin polysaccharides.

Наиболее близким к заявляемому является способ получения суммы полисахаридов, обладающей противовоспалительной активностью [RU патент 2063236, мки А 61 К 35/76], заключающийся в экстракции травы и шрота василька синего после выделения суммы флавоноидов исчерпывающей экстракцией 80%-ным водным ацетоном при соотношении сырье : экстрагент 1:1-6, горячей водой при соотношении сырье : экстрагент 1: 15-20 соответственно в течение 40 - 50 мин с последующим упариванием, осаждением 96%-ным этиловым спиртом, фильтрованием и сушкой при температуре 70 - 75oC в сушильном шкафу.Closest to the claimed is a method of obtaining the amount of polysaccharides with anti-inflammatory activity [RU patent 2063236, MKA A 61 K 35/76], which consists in the extraction of grass and meal cornflower blue after the allocation of the sum of flavonoids by exhaustive extraction with 80% aqueous acetone in the ratio of raw materials : extractant 1: 1-6, hot water at a ratio of raw materials: extractant 1: 15-20, respectively, for 40-50 minutes, followed by evaporation, precipitation with 96% ethyl alcohol, filtration and drying at a temperature of 70 - 75 o C in drying w kafu.

Этот способ не позволяет выделить пектиновые полисахариды из растений. Кроме того, недостатком этого способа является необходимость предварительной обработки сырья раствором ацетона, усложняющей исполнение способа и увеличивающей время его проведения, а также использование высокотемпературного высушивания полисахарида, что приводит к снижению качества целевого продукта. This method does not allow to isolate pectin polysaccharides from plants. In addition, the disadvantage of this method is the need for preliminary processing of raw materials with an acetone solution, complicating the execution of the method and increasing the time of its implementation, as well as the use of high-temperature drying of the polysaccharide, which leads to a decrease in the quality of the target product.

Задачей предлагаемого изобретения является разработка нового эффективного способа выделения пектиновых полисахаридов, обладающих иммуностимулирующим действием, который позволяет получить целевой продукт высокого качества из высших растений. The objective of the invention is to develop a new effective method for the isolation of pectin polysaccharides with immunostimulating action, which allows to obtain the target product of high quality from higher plants.

Технический результат состоит в получении сумм пектиновых полисахаридов с выходом целевого продукта 4 - 5% от массы растительного сырья пресноводного растения, например ряски, и с выходом 3 - 4% - для надземной части высшего растения, например, смолевки обыкновенной. The technical result consists in obtaining amounts of pectin polysaccharides with a yield of the target product of 4 - 5% of the mass of plant raw materials of a freshwater plant, such as duckweed, and with a yield of 3 - 4% for the aerial parts of a higher plant, for example, common tar.

Технический результат достигается тем, что сырье обрабатывают водным раствором формалина для фиксации пигмента, затем сырье выдерживают в подкисленной воде для удаления кальциевых и магниевых мостиков, после чего экстрагируют пектиновые полисахариды водным раствором оксалата аммония, в качестве сырья используют свежесобранные пресноводные цветковые растения, например, ряску, или предварительно измельченную свежую надземную часть высших растений, содержащих пектиновые полисахариды, например, смолевки обыкновенной. The technical result is achieved by the fact that the raw material is treated with an aqueous solution of formalin to fix the pigment, then the raw material is kept in acidified water to remove calcium and magnesium bridges, then the pectin polysaccharides are extracted with an aqueous solution of ammonium oxalate, as a raw material, freshly picked freshwater flowering plants, for example, duckweed, are used , or pre-crushed fresh aerial parts of higher plants containing pectin polysaccharides, for example, common tar.

Существенные признаки изобретения:
Способ получения из растительного сырья суммы пектиновых полисахаридов, обладающих иммуностимулирующим действием, в частности, стимулирующих фагоцитоз, включающий обработку сырья в водном растворе формалина для фиксации пигмента, выдерживание в подкисленной воде при соответствующих pH и температуре для удаления кальциевых и магниевых мостиков с последующей экстракцией полисахаридов водным раствором оксалата аммония, обработкой экстракта известными способами и лиофильной сушкой целевого продукта, при этом в качестве сырья используют свежесобранные пресноводные цветковые растения, например ряску, или предварительно измельченную свежую надземную часть высших растений, содержащих пектиновые полисахариды, например, смолевки обыкновенной.The essential features of the invention:
A method of obtaining from plant raw materials amounts of pectin polysaccharides having an immunostimulating effect, in particular, stimulating phagocytosis, including treating the raw material in an aqueous solution of formalin to fix the pigment, keeping it in acidified water at appropriate pH and temperature to remove calcium and magnesium bridges, followed by extraction of the polysaccharides with aqueous a solution of ammonium oxalate, processing the extract by known methods and freeze drying of the target product, while using as raw materials t freshly freshwater flowering plants, such as duckweed, or pre-chopped fresh aerial part of higher plants containing pectic polysaccharides, e.g., campion.

Способ опробован на примере высшего растения - смолевки обыкновенной, надземную часть которой предварительно измельчают до 15-20 мм, и пресноводного высшего растения - ряски. Сырье предварительно обрабатывают 0,4 - 0,5% водным раствором формалина в соотношении сырье : раствор 1:8-11 в течение 12-14 ч для фиксации пигмента при температуре 18 - 25oC. Перед экстракцией сырье выдерживают в подкисленной соляной кислотой воде (pH 3,8 - 4,2; соотношение сырье : раствор 1:7-10) при 45 - 52oC в течение 3-4 ч для удаления кальциевых и магниевых мостиков. Экстракцию пектиновых полисахаридов проводят водным 0,5 - 0,7% раствором оксалата аммония в соотношении 1:8-12 при 65 - 70oC 3-8 ч. Далее экстракт концентрируют, осаждают 96%-ным этанолом в соотношении экстракт: спирт 1:3-4, фильтруют, диализуют и лиофильно высушивают.The method has been tested on the example of a higher plant - common tar, the aerial part of which is previously crushed to 15-20 mm, and a freshwater higher plant - duckweed. The raw materials are pre-treated with a 0.4 - 0.5% aqueous formalin solution in the ratio of raw materials: solution 1: 8-11 for 12-14 hours to fix the pigment at a temperature of 18 - 25 o C. Before extraction, the raw materials are kept in acidified with hydrochloric acid water (pH 3.8 - 4.2; ratio of raw materials: solution 1: 7-10) at 45 - 52 o C for 3-4 hours to remove calcium and magnesium bridges. The extraction of pectin polysaccharides is carried out with an aqueous 0.5 - 0.7% solution of ammonium oxalate in a ratio of 1: 8-12 at 65 - 70 o C for 3-8 hours. Next, the extract is concentrated, precipitated with 96% ethanol in the ratio of extract: alcohol 1 : 3-4, filtered, dialyzed and freeze-dried.

Пример 1. 2,4 кг свежесобранной надземной части смолевки обыкновенной, измельченной до 15-20 мм, заливают 0,5%-ным водным раствором формалина (24 л) и оставляют при комнатной температуре в течение 14 часов. Потемневший раствор сливают, сырье промывают водой до бесцветной окраски, отжимают и заливают водой, подкисленной соляной кислотой (pH 4,0; 18 л). Смесь выдерживают при температуре 50oC в течение 3 ч. Далее раствор сливают, сырье промывают водой и заливают 0,7%-ным водным раствором оксалата аммония (30 л). Экстракцию полисахарида проводят при температуре 68-70oC в течение 6 ч при регулярном перемешивании. Экстракт концентрируют до 1,5 л упариванием в вакууме при температуре 40 - 45oC. Полисахарид осаждают из экстракта 4-кратным объемом 96%-ного этанола, отделяют центрифугированием, растворяют в воде и диализуют против дистиллированной воды. Очищенный раствор полисахарида высушивают лиофильно. Выход продукта 2,7% (табл. 1).Example 1. 2.4 kg of freshly collected aerial parts of the common resin, ground to 15-20 mm, are poured with a 0.5% aqueous formalin solution (24 L) and left at room temperature for 14 hours. The darkened solution is drained, the raw materials are washed with water until colorless, squeezed and poured with water, acidified with hydrochloric acid (pH 4.0; 18 L). The mixture was kept at a temperature of 50 o C for 3 hours. Then the solution was drained, the feed was washed with water and poured with a 0.7% aqueous solution of ammonium oxalate (30 L). The polysaccharide extraction is carried out at a temperature of 68-70 o C for 6 hours with regular stirring. The extract is concentrated to 1.5 L by evaporation in vacuo at a temperature of 40 - 45 o C. The polysaccharide is precipitated from the extract with a 4-fold volume of 96% ethanol, separated by centrifugation, dissolved in water and dialysed against distilled water. The purified polysaccharide solution is freeze-dried. The yield of 2.7% (table. 1).

Пример 2. 2,4 кг свежесобранной надземной части смолевки обыкновенной заливают 24 л 0,5%-ного раствора формалина. Далее обработку осуществляют, как описано в примере 1. Сырье заливают подкисленной водой (pH 4,0; 18 л). Полисахарид последовательно экстрагируют 0,7%-ным раствором оксалата аммония (24 л), затем 1%-ным раствором (24 л) при тех же условиях. Объединив экстракт, его концентрируют в вакууме до 2 л. Выход продукта 3%. Example 2. 2.4 kg of freshly collected aerial parts of the common resin are poured into 24 l of a 0.5% formalin solution. Further, the processing is carried out as described in example 1. The raw material is poured with acidified water (pH 4.0; 18 l). The polysaccharide is sequentially extracted with a 0.7% solution of ammonium oxalate (24 L), then a 1% solution (24 L) under the same conditions. Combining the extract, it is concentrated in vacuo to 2 liters. Product yield 3%.

Увеличение объема раствора оксалата аммония не приводит к значительному увеличению выхода целевого продукта, поэтому достаточно одной обработки сырья экстрагентом при соответствующих соотношениях. An increase in the volume of a solution of ammonium oxalate does not lead to a significant increase in the yield of the target product; therefore, one treatment of the raw material with an extractant at appropriate ratios is sufficient.

Пример 3. 3,4 кг свежесобранной ряски заливают 22 л 0,5%-ного раствора формалина. Далее обработку осуществляют, как описано в примере 1. Сырье заливают подкисленной водой (pH 4,0; 15 л). Полисахарид экстрагируют 0,5%-ным раствором оксалата аммония (40 л). Экстракт концентрируют в вакууме до 2 л. Выход продукта 4%. Example 3. 3.4 kg of freshly collected duckweed is poured into 22 liters of a 0.5% formalin solution. Further, the processing is carried out as described in example 1. The raw material is poured with acidified water (pH 4.0; 15 l). The polysaccharide is extracted with a 0.5% solution of ammonium oxalate (40 L). The extract is concentrated in vacuo to 2 l. Product yield 4%.

Пример 4. 3,4 кг свежесобранной ряски заливают 22 л 0,5%-ного раствора формалина. Далее обработку осуществляют, как описано в примере 1. Сырье заливают подкисленной водой (pH 4,0; 15 л). Полисахарид экстрагируют 0,7%-ным водным раствором оксалата аммония (40 л). Экстракт концентрируют в вакууме до 2 л. Выход продукта 5% (табл. 1). Example 4. 3.4 kg of freshly collected duckweed is poured into 22 liters of a 0.5% formalin solution. Further, the processing is carried out as described in example 1. The raw material is poured with acidified water (pH 4.0; 15 l). The polysaccharide is extracted with a 0.7% aqueous solution of ammonium oxalate (40 L). The extract is concentrated in vacuo to 2 l. The yield of 5% (table. 1).

Характеристика целевых продуктов приведена в табл. 1. The characteristics of the target products are given in table. 1.

Изучение влияния на фагоцитоз полисахаридов из травы смолевки обыкновенной и ряски, выделение которых описано в предлагаемом способе, показало, что изучаемые вещества в концентрациях 1-15 мкг/мл увеличивают фагоцитарную активность нейтрофилов периферической крови человека, а также макрофагов брюшной полости крыс (табл. 2). Пектиновые полисахариды смолевки стимулируют также переваривающую способность фагоцитов, оцененную по активности внеклеточной миелопероксидазы. Определение полулетальной дозы ЛД50 при однократном внутрибрюшинном введении мышам показало, что выделенные целевые продукты являются практически нетоксичными соединениями.The study of the effect on the phagocytosis of polysaccharides from grass of common tar and duckweed, the isolation of which is described in the proposed method, showed that the studied substances in concentrations of 1-15 μg / ml increase the phagocytic activity of neutrophils in human peripheral blood, as well as macrophages of the rat abdominal cavity (Table 2 ) The tar pectin polysaccharides also stimulate the digestion ability of phagocytes, evaluated by the activity of extracellular myeloperoxidase. The determination of a semi-lethal dose of LD 50 with a single intraperitoneal administration to mice showed that the isolated target products are practically non-toxic compounds.

В табл. 2 представлены результаты стимуляции фагоцитоза пектиновыми полисахаридами из травы смолевки обыкновенной и ряски. In the table. 2 shows the results of phagocytosis stimulation by pectin polysaccharides from grass of common and duckweed.

Таким образом, предлагаемое изобретение позволяет выделить из растений рода ряски и смолевки обыкновенной пектиновые полисахариды, обладающие иммуностимулирующим действием, с достаточно высокой степенью очистки целевых продуктов. Способ может быть использован для любых высших растений, содержащих пектиновые полисахариды. Thus, the present invention allows to isolate pectin polysaccharides possessing an immunostimulating effect with a sufficiently high degree of purification of the target products from plants of the duckweed and common tar plants. The method can be used for any higher plants containing pectin polysaccharides.

Claims (5)

1. Способ получения полисахаридов из растительного сырья путем экстракции, упаривания, отличающийся тем, что исходное сырье предварительно обрабатывают водным раствором формалина, выдерживают в подкисленной воде при рН 3,8 - 4,2 и 45 - 52oС, экстракцию пектиновых полисахаридов осуществляют водным раствором оксалата аммония, экстракт упаривают, полисахариды осаждают 96%-ным этиловым спиртом, сушку целевого продукта ведут лиофильно, при этом в качестве сырья используют свежесобранное пресноводное цветковое растение, например любой вид рода ряски Lemna spp., или предварительно измельченную свежую надземную часть высших растений, содержащих пектиновые полисахариды, например смолевки обыкновенной Oberna behen(L) Ikonn (Silene vulgaris (Moench) Garke).1. The method of obtaining polysaccharides from plant materials by extraction, evaporation, characterized in that the feedstock is pre-treated with an aqueous solution of formalin, kept in acidified water at pH 3.8 - 4.2 and 45 - 52 o C, the extraction of pectin polysaccharides is carried out with water ammonium oxalate solution, the extract is evaporated, polysaccharides are precipitated with 96% ethanol, the target product is dried lyophilically, and freshly picked fresh-flowered flowering plants, for example, any species of cassock, are used as raw materials ki Lemna spp., or pre-ground fresh aerial parts of higher plants containing pectin polysaccharides, for example, ordinary Oberna behen (L) Ikonn (Silene vulgaris (Moench) Garke). 2. Способ по п.1, отличающийся тем, что сырье обрабатывают 0,4 - 0,6%-ным раствором формалина при соотношении сырье : раствор 1: (8 - 11) в течение 12 - 14 ч при 18 - 25oС.2. The method according to claim 1, characterized in that the raw materials are treated with a 0.4 - 0.6% formalin solution with a ratio of raw materials: solution 1: (8 - 11) for 12 to 14 hours at 18 - 25 o C . 3. Способ по п.1, отличающийся тем, что обработку растительного сырья в подкисленной воде ведут при периодическом перемешивании, при этом сырье : раствор берут при соотношении 1: (7 - 9), процесс проводят в течение 3 - 4 ч. 3. The method according to claim 1, characterized in that the processing of plant materials in acidified water is carried out with periodic stirring, while the raw materials: the solution is taken at a ratio of 1: (7 - 9), the process is carried out for 3 to 4 hours 4. Способ по п.3, отличающийся тем, что подкисленную воду получают путем добавления соляной кислоты. 4. The method according to claim 3, characterized in that acidified water is obtained by adding hydrochloric acid. 5. Способ по п.1, отличающийся тем, что экстракцию полисахаридов осуществляют 0,5 - 1%-ным раствором оксалата аммония при соотношении сырье : раствор 1 : (8 - 12) соответственно при 65 - 70oС в течение 3 - 8 ч.5. The method according to claim 1, characterized in that the extraction of polysaccharides is carried out with a 0.5 - 1% solution of ammonium oxalate at a ratio of raw materials: solution 1: (8 - 12), respectively, at 65 - 70 o C for 3 - 8 h
RU99117565A 1999-08-09 1999-08-09 Method of preparing polysaccharides from plant raw material with immunostimulating effect RU2149642C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU99117565A RU2149642C1 (en) 1999-08-09 1999-08-09 Method of preparing polysaccharides from plant raw material with immunostimulating effect

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU99117565A RU2149642C1 (en) 1999-08-09 1999-08-09 Method of preparing polysaccharides from plant raw material with immunostimulating effect

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2149642C1 true RU2149642C1 (en) 2000-05-27

Family

ID=20223810

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU99117565A RU2149642C1 (en) 1999-08-09 1999-08-09 Method of preparing polysaccharides from plant raw material with immunostimulating effect

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2149642C1 (en)

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2003092645A3 (en) * 2002-04-30 2004-04-01 Soc Extraction Principes Actif Cosmetic composition comprising monosaccharides or polysaccharides____________________________________
RU2657819C1 (en) * 2017-01-27 2018-06-15 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук" (Томский НИМЦ) Means of immunomodulating activity
CN105829356B (en) * 2013-12-18 2019-01-11 杜邦营养生物科学有限公司 The extracting method of calcium sensitive pectin
US10342842B2 (en) 2013-11-21 2019-07-09 9541659 Canada Inc. Pharmaceutical compositions having antibacterial, antiviral, and other immunostimulatory activities
RU2694969C1 (en) * 2018-12-01 2019-07-18 федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого" (ФГАОУ ВО "СПбПУ") Method of producing pectin substances from lemna minor

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2003092645A3 (en) * 2002-04-30 2004-04-01 Soc Extraction Principes Actif Cosmetic composition comprising monosaccharides or polysaccharides____________________________________
US10342842B2 (en) 2013-11-21 2019-07-09 9541659 Canada Inc. Pharmaceutical compositions having antibacterial, antiviral, and other immunostimulatory activities
US10835565B2 (en) 2013-11-21 2020-11-17 9541659 Canada Inc. Pharmaceutical compositions having antibacterial, antiviral, and other immunostimulatory activities
CN105829356B (en) * 2013-12-18 2019-01-11 杜邦营养生物科学有限公司 The extracting method of calcium sensitive pectin
RU2657819C1 (en) * 2017-01-27 2018-06-15 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук" (Томский НИМЦ) Means of immunomodulating activity
RU2694969C1 (en) * 2018-12-01 2019-07-18 федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого" (ФГАОУ ВО "СПбПУ") Method of producing pectin substances from lemna minor

Similar Documents

Publication Publication Date Title
SU730277A3 (en) Method of preparing nitrogen-containing polysaccharides possessing antitumor activity
EA014643B1 (en) Method for production of plant materials enriched with glucosamine and plant extract enriched with glucosamine
DD247567A7 (en) METHOD FOR PRODUCING BIOLOGICALLY ACTIVE POLYSACCHARIIDE CONCENTRATES AND MEDICAMENTS CONTAINING THEM
US20050095332A1 (en) Extraction of phenolic antioxidants
EP0212595A2 (en) Calcium and magnesium complexes of phytohaemagglutinin-polyheteroglycanes, their manufacture and pharmaceutical preparations
RU2149642C1 (en) Method of preparing polysaccharides from plant raw material with immunostimulating effect
JP7085262B2 (en) Manufacturing method of tomatidine
CN112500448B (en) Method for extracting laxogenin from Liliaceae Allium plant
RU2322456C1 (en) Method for preparing pectin
CN113041278A (en) Method for extracting rape moss binding state polyphenol
US2871235A (en) Process for obtaining polysaccharide material from plants of the genus cecropia
US20030166608A1 (en) Polysaccharide products from durian: process for isolation and purification and their applications
EA013945B1 (en) A process for generating glucosamine from plant species
Tripodo et al. Enzymatic extraction of pectin from Opuntia ficus-indica Cladodes
RU2178708C2 (en) Method of insulin producing
US10500242B2 (en) Method of producing high-nepodin-containing rumex plant extract and high-nepodin-containing rumex plant extract
RU2032720C1 (en) Method of processing sea buck-thorn fruit with oil preparing
DE2609533B2 (en) Process for the extraction of active substances, in particular of heteroside esters of caffeic acid, as well as medicaments containing these compounds
RU2063236C1 (en) Method of preparing total polysaccharides showing antiinflammatory activity
RU2815032C1 (en) Method for complex processing of pine wood greenery
RU2000299C1 (en) Method of preparing enomelanin
RU2038090C1 (en) Method for producing a remedy possessing antimicrobial activity
JPS5936889B2 (en) Method for producing antitumor substances
SU1009470A1 (en) Method of producing arabinose
KR890000651B1 (en) Extraction method concentrated flavonoides from ginkgo leaf