MXPA01003008A - Uso de peptido similar a glucagon 1 (glp-1) o analogos en el tratamiento de la crisis fulminante - Google Patents

Abstract

La presente invención proporciona un método para reducir la mortalidad y morbilidad asociadas con ataques fulminantes, en donde se administra el péptido similar a glucagon-1 (GLP-1), un análogo de GLP-1 o un derivado de GLP-1, a una dosis efectiva para normalizar la glucosa sanguínea.

Description

USO DE PEPTIDO SIMILAR A GLUCAGON 1 (GLP-1) O ANÁLOGOS EN EL TRATAMIENTO DE LA CRISIS FULMINANTE CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a métodos y composiciones para reducir la mortalidad y morbilidad después de una crisis fulminante, controlando la hiperglucemia . Los métodos y composiciones son particularmente útiles para diabéticos no dependientes de insulina, aquellos que están en nuevo riesgo de crisis fulminante o quienes padecen un ataque en curso o recurrente. La hiperglucemia preexistente se sana y se previene el nuevo surgimiento de hiperglicemia . ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN La morbilidad y mortalidad por enfermedades cardiovasculares es más alta en pacientes con diabetes manifiesta o con una tolerancia a la glucosa alterada en comparación con pacientes que no padecen estos trastornos. Los diabéticos dan cuenta del 24% del número total de pacientes internados de las unidades de cuidado coronario por sospecha de infarto miocárdico, mientras que estos constituyen sólo el 5% de la población general (Fuller, 1993) . La mortalidad de pacientes diabéticos en hospital que padecen infarto al miocardio es el doble que la de pacientes no diabéticos (Ha sten, 1994, Malmberg y Rydén, 1988) . Los diabéticos experimentan más morbilidad y Ref: 127683 mueren con más frecuencia en la fase de recuperación posaguda, en comparación con los otros periodos; gran parte se debe a un reinfarto fatal y a insuficiencia cardiaca congestiva (Stone, 1989, Karlson, 1993, Barbash, 1993) . La diferencia de mortalidad y morbilidad entre los diabéticos y no diabéticos después de una crisis fulminante persiste, a pesar de la reducción en la incidencia de morbilidad y mortalidad después de un infarto miocárdico agudo (Granger, 1993, Grines, 1993) . Se sabe que el riesgo de una crisis fulminante es marcadamente más elevado en pacientes • con diabetes. Así pues, el riesgo de una crisis fulminante en pacientes masculinos con diabetes (mellitus) no insulinodependiente (DMNID) fue aproximadamente tres veces más alto y en mujeres DMNID cinco veces más alto que en los correspondientes sujetos no diabéticos (Lehto, 1966) . En otro estudio en Finlandia, hombres con diabetes en la línea basal tuvieron un riesgo seis veces mayor de muerte por crisis fulminante, mientras que el riesgo relativo de hombres que desarrollaron diabetes durante el seguimiento fue de 1.7. En mujeres, los riesgos relativos respectivos fueron de 8.2 y 3.7 (Tuomilehto, 1996). Además, otro estudio ha demostrado que también la hiperglucemia leve y no reconocida era un factor de riesgo para una crisis fulminante aguda y que la mortalidad acumulativa se elevaba en pacientes con un valor elevado de glucosa sanguínea, independientemente de su HbA_, valores que reflejan un control glucémico de largo plazo (Gray, 1987) . El efecto deteriorante de la hiperglucemia sobre el resultado de la crisis fulminante, también ha sido demostrado en otros estudios (Cazzato, 1991, Kiers, 1992, deFalco, 1993, Moulin, 1997, Weir, 1997) . La intensidad de las respuestas de la hormona de estrés durante la crisis fulminante contribuye significativamente al desarrollo de hiperglucemia (O'Neill, 1992), pero es probable que la hiperglucemia per se afecte de manera adversa el metabolismo cerebral isquémico, principalmente por acidosis prolongada (Levine, 1988, Wass and Lanier, 1996) . Estudios en animales respaldan con fuerza la idea de que la hiperglucemia agrava significativamente el daño cerebral durante una crisis fulminante, debido a una reducción del flujo sanguíneo cerebral regional, al marcado edema y a la compresión del tallo cerebral, a un incremento en el tamaño del infarto, a un incremento de los niveles de ca2+ sistólico, a una acumulación de lactato, a una interrupción de la barrera hematoencefálica y a un incremento de la hemorragia (Duckrow, 1985, 1987, de Courten-Myers, 1988, Silvka, 1991, Araki, 1992, Wagner, 1992, Dietrich, 1993, Broderick, 1995) . Se necesitan medidas paliativas para normalizar la glucosa sanguínea y controlar las cascadas metabólicas que exacerban los daños por crisis fulminante en diabéticos. Estos se puede lograr ajustando la infusión de insulina y glucosa y la estrecha regulación posaguda de la glucosa sanguínea mediante un tratamiento subcutáneo de insulina de dosis múltiples. Este último régimen, cuando se utiliza en el tratamiento de pacientes diabéticos durante un infarto miocárdico agudo, disminuye la mortalidad durante el año posterior al infarto miocárdico en un 30%, en comparación con un grupo control de diabéticos que no recibió el tratamiento con insulina a menos que se considerara necesario (Malmberg, 1995) . Sin embargo, la infusión de insulina crea un potencial de hipoglucemia, la cual se define como un valor de glucosa sanguínea por debajo de 0.3 mM. La hipoglucemia incrementa el riesgo de infarto miocárdico, arritmia ventricular y es una consecuencia peligrosa de la infusión de insulina. Se desarrolló un algoritmo para la infusión de insulina para diabéticos con crisis fulminante, para prevenir la hipoglucemia (Hendra, 1992) . Sin embargo, el 21% de los pacientes desarrolló hipoglucemia bajo este algoritmo. En otro estudio del control de glucosa después de un infarto miocárdico, el 18% de los pacientes desarrolló hipoglucemia cuando fue sometido a infusión con insulina y glucosa (Malmberg, 1994) .

- - La infusión de insulina también requiere una supervisión frecuente de los niveles de glucosa sanguínea, para que se pueda detectar el surgimiento de la hipoglucemia y sea remediado tan pronto como sea posible. En pacientes que recibieron infusión de insulina en el estudio citado (Malmberg, 1994), la glucosa sanguínea se midió cuando menos cada 2 horas y la velocidad de infusión se ajustó de conformidad con ello. Así pues, la seguridad y eficacia de la terapia de infusión de insulina-glucosa, depende del fácil y rápido acceso a los datos de la glucosa sanguínea. Una necesidad tan intensa de supervisar la glucosa sanguínea, pone una pesada carga de trabajo sobre los profesionales de la salud e incrementa . la inconveniencia y el costo del tratamiento. Como resultado, las unidades de terapia intensiva a menudo no disponen de recursos para optimizar los niveles de glucosa sanguínea en diabéticos, como se podrían obtener por la administración intravenosa de insulina. Considerando los riesgos y cargas de trabajo inherentes a la infusión de insulina, se necesita de un enfoque alternativo para manejar la glucosa sanguínea durante una crisis fulminante aguda. La hormona incretina, que es el péptido similar a glucagon 1, abreviada como GLP-1, es procesada a partir de proglucagon en el intestino e intensifica la liberación de insulina inducida por los nutrientes (Krcymann, 1987) .

- - Se conocen varias formas truncadas de GLP-1 que estimulan la secreción de insulina (acción insulinotrópica) y la formación de cAMP (véase, e.g., Mojsov, 1992). Se ha establecido una relación entre varios experimentos de laboratorio in vi tro y las respuestas insulinotrópicas de mamíferos, especialmente seres humanos, a la administración exógena de GLP-1, GLP-l(7-36) amida y GLP-l(7-37) ácido (véase, e.g., Nauck, 1993 a y b, Gutniak, 1992 y Thorens, 1993). La GLP-1 (7-36) amida ejerce un pronunciado efecto antidiabetogénico en diabéticos insulinodependientes, al estimular la sensibilidad a la insulina e intensificando la liberación de insulina producida por la glucosa a concentraciones fisiológicas (Gutniak, 1992) . Cuando se administra a diabéticos no insulinodependientes, la GLP-1(7-36) amida estimula la liberación de insulina, disminuye la secreción de glucagon, inhibe el vaciamiento gástrico e incrementa la utilización de la glucosa (Nauck, 1993 a y b, Gutniak, 1992) . El uso de moléculas de tipo GLP-1 para la terapia prolongada de la diabetes, ha sido obstruido debido a que la vida media sérica de tales péptidos es muy corta. Por ejemplo, el GLP-l(7-37) tiene una vida media sérica de sólo 3 a 5 minutos. La GLP-l(7-36) amida tiene una vida media de aproximadamente 50 minutos cuando se administra por vía subcutánea. Así pues, estas moléculas de GLP deben - - ser administradas en forma de una infusión continua para lograr un efecto controlado (Gutniak, 1994) . BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La presente invención proporciona métodos y composiciones para reducir la mortalidad y morbilidad después de una crisis fulminante. El método incluye la administración de un compuesto del grupo que consiste de GLP-1, análogos de GLP-1, derivados de GLP-1 y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, a una dosis efectiva para normalizar la glucosa sanguínea, a un paciente que lo necesite. La presente invención proporciona los beneficios de la reducción de mortalidad y morbilidad en diabéticos después de una crisis fulminante, por ejemplo, efectuando un tamaño de infarto más pequeño. Los tratamientos de la presente invención en pacientes no insulinodependientes en comparación con el tratamiento combinado con infusiones de insulina y glucosa, evita el inconveniente y la costosa frecuente supervisión de la glucosa sanguínea, así como la interpretación de los resultados de la glucosa sanguínea y el ajuste de la velocidad de dosis de la insulina. Los tratamientos también evitan el siempre presente riesgo de hipoglucemia que acompaña a la infusión de insulina. En la presente invención, algunas GLP-1 tienen vidas medias cortas y la consecuente necesidad de la administración continua no es - - una desventaja debido a que el paciente típicamente está en cama, en una unidad de terapia intensiva, en donde los fluidos se administran continuamente por vía parenteral. Este tratamiento incluye a todos los pacientes con hiperglucemia, independientemente de si fueron diagnosticados o no como diabéticos. BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS La FIG. 1 es una gráfica que muestra el efecto de la infusión continua de GLP-l(7-36) amida sobre la concentración promedio de la glucosa sanguínea (mM) , (—___—) en cinco pacientes DMNID durante la noche. La gráfica también ilustra el efecto de la infusión de insulina continua sobre la concentración promedio de la glucosa sanguínea ( o ) en los mismos cinco pacientes DMNID, pero en una noche diferente. La FIG. 2 es una gráfica que muestra el efecto de la infusión de GLP-l(7-36) amida sobre la concentración promedio de la glucosa sanguínea (mM) (—__—) en cinco pacientes DMNID cuando fueron sometidos a infusión durante el día, durante 3 horas partiendo en el inicio de cada una de las tres comidas. La gráfica también ilustra el efecto de la inyección subcutánea de insulina sobre la concentración promedio de la glucosa sanguínea ( o ) en los mismos cinco pacientes DMNID, pero no en un diferente día, y con una inyección poco antes de cada comida. DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN Los métodos y composiciones, en particular medicamentos (composiciones o formulaciones farmacéuticas) que utilizan el péptido similar a glucagon 1, análogos o derivados del mismo, son efectivos para reducir la mortalidad y morbilidad después de una crisis fulminante en pacientes diabéticos, en particular en diabéticos no insulinodependientes. Los análogos y derivados de la GLP-1 que son útiles para la práctica de la presente invención, son aquellos que tienen una vida media mayor en comparación con la GLP-1 y la capacidad de afectar la mortalidad y morbilidad cuando se administran a un sujeto. Crisis fulminante La crisis fulminante o apoplejía o accidente cerebrovascular (ACV) es una enfermedad cerebrovascular caracterizada por el surgimiento abrupto de un déficit neurológico no convulsivo y focal. La crisis fulminante causa aproximadamente 200,000 muertes en los Estados Unidos cada año, así como discapacidad neurológica. En países occidentales, la isquemia-infarto causan ataque fulminante en aproximadamente 85-90% de los casos, mientras que las hemorragias intracraneales se encuentran en el resto del grupo de pacientes. La isquemia cerebral es provocada por una reducción del flujo sanguíneo que dura varios segundos.

Si la falta de flujo dura más de unos cuantos minutos, evoluciona un infarto al tejido cerebral. La causa más común de isquemia e infarto cerebral son la aterosclerosis con tromboembolia y la embolia cardiogénica. La crisis fulminante isquémica está caracterizada clínicamente por su modo de surgimiento y su subsecuente curso. La presentación característica es un cuadro agudo de hemiparesis en un individuo en el grupo de edad aterosclerótica. Sin embargo, cualquier síntoma de disfunción cerebral puede ocurrir. Los signos y síntomas de la enfermedad del sistema carótido a menudo afectan la distribución de la arteria cerebral media y el paciente puede exhibir una hemiparesis contralateral, déficit hemisensorial y he ianopsia. Cuando está involucrado el hemisferio dominante, normalmente existe algún grado de afasia. La circulación anterior (carótida) o posterior (vertebrobasilar) también puede estar involucrada, lo cual da como resultado síntomas clínicos más o menos específicos . La hiperglucemia está definida como una concentración de glucosa plasmática de aproximadamente 200 mg/dl (11.1 mmol/L) o mayor, o un nivel de glucosa plasmática en ayunas de 125 mg/dl (7.0 mmol/L o mayor) . Un aspecto de la presente invención es prevenir la hiperglucemia o reducirla hasta valores normales.

Compuestos Los análogos, derivados, variantes, precursores y homólogos de GLP-1 son adecuados para la práctica de la presente invención en tanto que el fragmento activo que efectúa la reducción de mortalidad o morbilidad después de la crisis fulminante, esté incluido. "GLP-1" significa GLP-l(7-37). Por costumbre en la técnica, al extremo amino-terminal de la GLP-l(7-37) se la asignado el número 7 y al extremo carboxilo-terminal el número 37. La secuencia de aminoácidos de la GLP-1 (7-37) es conocida en la técnica, pero se presenta a continuación para conveniencia del lector.

Thr-Phe-Thr-Ser-Asp"-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu?0- Glu-GJy-Gln-Ala-Ala^-Lys-GJu-Phe-Ile-Ala'0- Trp-Leu-Val-Lys-Gl '-Arg-Gly^-COOH Un "análogo de GLP-1" se define como una molécula que tiene una modificación que incluye una o más sustituciones, deleciones, inversiones o adiciones de aminoácidos cuando se compara con la GLP-1. Los análogos de GLP-1 conocidos en la técnica, incluyen, por ejemplo, GLP-K7-34) y GLP-1 (7-35) , GLP-1 (7-36) , Val8-GLP-1 (7-37) , Gln9-GLP-1 (7-37) , D-Gln9-GLP-1 (7-37) , Thrld-Lys18-GLP-1 (7-37) y Lys18-GLP-1 (7-37) . Los análogos de GLP-1 preferidos con GLP-l(7-34) y GLP-l(7-35), los cuales se describen en la Patente Norteamericana US 5,118,666 y también el GLP-1 (7-36) . Estos compuestos son las formas biológicamente procesadas de GLP-1 que tienen propiedades insulinotrópicas . Otros análogos de la GLP-1 se describen en la Patente Norteamericana US 5,545,618. Un "derivado de GLP-1" se define como una molécula que tiene una secuencia de aminoácidos de GLP-1 ó de un análogo de GLP-1, pero que adicionalmente tiene cuando menos una modificación química de uno o más de sus grupos laterales de aminoácido, átomos a-carbono, grupo amino-terminal o grupo carboxilo-terminal. La modificación química incluye agregar entidades químicas, crear nuevos enlaces y remover entidades químicas. Las modificaciones en los grupos laterales de aminoácidos incluyen la acilación de los grupos e-aminode la lisina, N-alquilación de la arginina, histidina o lisina, alquilación del ácido glutámico o del ácido aspártico y la desaminación de la glutamina o asparagina. Las modificaciones del extremo amino-terminal incluyen modificaciones de desaminación, N-alquilo inferior, N-dialquilo inferior y N-acilo. Las modificaciones del grupo carboxilo-terminal incluyen la amida, alquilamida inferior, dialquilamida inferior y alquiléster inferior. Un grupo alquilo inferior es un grupo alquilo de 1 a 4 átomos de carbono. Además, uno o más grupos laterales, o grupos terminales, se pueden - - proteger mediante grupos protectores conocidos para los técnicos en la química de las proteínas. El carbono a del aminoácido puede ser monometilado o dimetilado. En la presente invención, un grupo preferido de análogos de GLP-1 y derivados para utilizarse en la presente invención, está compuesto por las diversas moléculas de GLP-1 reivindicadas en la Patente Norteamericana No. US 5,545,618. Los análogos efectivos de los péptidos GLP-1 activos, 7-34, 7-35, 7-36 y 7-37 tienen sustituciones de aminoácidos en las posiciones 7-10 y/o están truncados en el extremo C-terminal y/o contienen varias otras sustituciones de aminoácidos en el péptido básico. Los análogos que tienen sustituciones D-aminoácido en las posiciones 7 y 8 y/o están N-alquilados o N-acilados en la posición 7, son particularmente resistentes a la degradación in vivo. Los análogos que muestran mejores propiedades estimuladoras de insulina tienen la secuencia nativa de GLP-1, 7-34, 7-35, 7-36 ó 7-37, o la amida C-terminal de las mismas, en las que se realizó cuando menos una modificación que se selecciona del grupo que consiste de: (a) sustitución de un aminoácido neutro, arginina, o una forma D de lisina, por lisina en la posición 26 y/ó 34 y/o un aminoácido neutro, lisina, o una forma D de la arginina por arginina en la posición 36; (b) una sustitución de un aminoácido resistente a la oxidación por triptofano en la posición 31; (c) una sustitución de conformidad con cuando menos una de las siguientes: Y por V en la posición 16, K por S en la posición lí D por E en la posición 21, S por G en la posición 22, R por Q en la posición 23, R por A en la posición 24, Q por K en la posición 26, (utilizando los códigos de una sola letra para los aminoácidos) (d) una sustitución que comprende cuando menos una de las siguientes: un aminoácido neutro pequeño alternativo por A en la posición 8; un aminoácido ácido o neutro alternativo por E en la posición 9; un aminoácido neutro alternativo por G en la posición 10; y un aminoácido ácido alternativo por D en la posición 15; y (e) una sustitución de un aminoácido neutro alternativo o la forma D o N-acilada o alquilada de la histidina, por histidina en la posición 7. Con respecto a las modificaciones de los incisos (a) , (b) , (d) y (e) , los aminoácidos sustituidos pueden estar en la forma D. Los aminoácidos sustituidos en la posición 7, también pueden ser la forma N-acilada o N-alquilada. Los péptidos que muestran una mayor resistencia a la degradación en el plasma, en comparación con GLP-1 (7-37) son adecuados para la práctica de la presente invención. En estos análogos, cualquiera de las formas truncadas anteriormente mencionadas de GLP-l(7-34) o GLP-1 (7-37) o sus formas amidadas C-terminal, se modifica por (a) una sustitución de un aminoácido D-neutro o D-ácido por H en la posición H, o (b) una sustitución de un D-aminoácido por A en la posición 8, o (c) ambos, o (d) una sustitución de una forma N-acilada o N-alquilada de cualquier aminoácido natural, por H en la posición 7. Así pues, los análogos que son resistentes a la degradación incluyen (N-acil (1-6C)AA) 7GLP-1 (7-37) y (N-alquil (1-6C AA) 7GLP-1 (7-37) , en donde cuando AA es un residuo lisilo, uno o ambos nitrógenos pueden estar alquilados o acilados, AA simboliza cualquier aminoácido consistente con la retención de actividad estimuladora de insulina. Para las sustituciones de D-aminoácidos de las posiciones 7 y 8, el residuo D de cualquier aminoácido ácido o neutro se puede usar en la posición 7 y de cualquier aminoácido en la posición 8, nuevamente consistentes con la actividad estimuladora de insulina. Cualquiera o ambas posiciones 7 y 8 pueden estar sustituidas con un D-aminoácido; el D-aminoácido en la posición 7 también puede estar acilado o alquilado. Estas formas modificadas son aplicables no sólo a la GLP-l(7-37), sino que también a los análogos truncados más cortos. Así pues, entre los análogos preferidos están aquellos en donde la forma (7-34), (7-35) o (7-37) de la GLP-1 ha sido modificada sólo para la sustitución de un aminoácido neutro, arginina, o una forma D de lisina, por lisina en la posición 26 y/ó 34 y/o un aminoácido neutro, lisina, o una forma D de arginina, por arginina en la posición 36. Son particularmente preferidos aquellos en donde el aminoácido sustituido por lisina en las posiciones 26 y 34 se selecciona del grupo que consiste de K+, G, S, A, L, I, Q, R, R+ y M, y por arginina en la posición 36, se selecciona del grupo que consiste de K, K+, G, S, A, L, I, Q, M y R+ (en donde t indica una forma D) . También son preferidos los análogos en donde la única modificación es la sustitución de un aminoácido resistente a la oxidación por triptofano en la posición 31. Las sustituciones particularmente favoritas se seleccionan del grupo que consiste de F, V, L, I, A y Y. Son particularmente preferidos aquellos análogos en donde se han hecho sustituciones combinadas de S por G en la posición 22; R de las posiciones 23 y 24 por Q y A respectivamente, y Q por K en la posición 26; o sustituciones de Y por V en la posición 16 y K por S en la posición 18; o estas sustituciones más D por E en la posición 21. Entre estos análogos, son particularmente preferidos aquellos en donde el pequeño aminoácido neutro sustituido por alanina en la posición 8 se selecciona del grupo que consiste de S, S+, GC, C+, Sar, A+, beta-ala y Aib; y/o el aminoácido ácido o neutro sustituido por ácido glutámico en la posición 9, se selecciona del grupo que consiste de E+, D, D+, Cya, T, T+, N, N+, Q, Q+, Cit, MSO y acetil-K y/o el aminoácido neutro alternativo sustituido por glicina en la posición 10, se selecciona del grupo que consiste de S, S+, Y, Y+, T, T+, N, N+, Q, Q+, Cit, MSO, acetil-K, F y F+; y/o en donde D es sustituido por E en la posición 15. También se prefieren aquellos análogos en donde solamente la posición 7 ha sido alterada. Las sustituciones preferidas son aquellas en donde el - - aminoácido que sustituye a la histidina en la posición 7 se selecciona del grupo que consiste de H+, Y, Y+, F, F+, R, R+, Orn, Orn+, M, M+, N-formil-H, N-formil-H+, N-acetil-H, N-acetil-H+, N-isopropil-H, N-isopropil-H+, N-acetil-K, N-acetil-K+, P y P+. También se prefieren aquellas modalidades con una combinación de sólo dos de las clases de formas modificadas anteriormente referidas, además de las siguientes modalidades específicas (análogos) : (Y)7-GLP-1 (7-37) ; (N-acetil-H) 7-GLP-l (7-37) ; (N-isopropil-H) 7-GLP-l (7-37) ; (A+)8-GLP-l(7-37) ; (D)9-GLP-1 (7-37) ; (D+)9-GLP-l (7-37) ; (F+)10-GLP-l(7-37); (S) 22 (R) 23 (R) 24 (Q) 26-GLP-l (7-37) ; (s)8(Q)9(Y)16(K)18(D)21-GLP-l(7-37) . Las formas preferidas de análogos con una mejor estabilidad, también han sido sometidas sólo a una o cuando mucho a dos modificaciones de aminoácidos. Las sustituciones preferidas para la histidina en la posición 7, incluyen las formas D de aminoácidos - - ácidos o neutros de las formas D de histidinas. Se prefieren P+, D+, E+, N+, Q+, L+, V+, I+ y H+. La histidina en la posición 7, o un reemplazo (D ó L) , también puede estar N-alquilada (1-6C) o N-acilada (1-6C) . Los grupos alquilo son residuos hidrocarbilo de cadena lineal o ramificada (incluyendo cíclicos) con el número indicado de átomos de carbono. Los grupos acilo son de la fórmula RCO-, en donde R es un grupo alquilo. Los grupos alquilo preferidos son t-propilo, a-propilo y etilo; los grupos acilo preferidos son acetilo y propionilo. Los residuos preferidos que pueden ser alquilados o acilados incluyen P, D, E, N, Q, V, L, I, K y H, ya sea en la forma D ó en la forma L. Las sustituciones preferidas para la alanina en la posición 8, son formas D de P, V, L, I y A; también se prefieren las formas D de D, E, N, Q, K, T, S y H. Algunos análogos específicos muestran tanto una mejor actividad estimuladora de liberación de insulina, como una mejor estabilidad. Un grupo preferido de análogos y derivados de GLP-1 para utilizarse en la presente invención, está compuesto de moléculas de la fórmula: - X-Glu-G!y10- Thr-Phe-T_x-Scr-_v_f,3-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu20- Y-Gly^Gln-Ala-Ala^-Lys-Z-Phe-Ue-Ala30- Trp-Lcu-VaJ-Lys-Giy35-Arg-R2 y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, en donde: Ri se selecciona del grupo que consiste de L-histidina, D-histidina, desaminohistidina, 2-aminohistidina, ß-hidroxihistidina, homohistidina, alfa-gluorometilhistidina y alfa-metilhistidina; X se selecciona del grupo que consiste de Ala, Gly, Val, Thr, lie y alfa-metil-Ala; Y se selecciona del grupo que consiste de Glu, Gln, Ala, Thr, Ser y Gly; Z se selecciona del grupo que consiste de Glu, Gln, Ala, Thr, Ser y Gly; y R2 se selecciona del grupo que consiste de NH2 y Gly-OH; a condición de que el compuesto tenga un punto isoeléctrico en el rango de aproximadamente 6.0 a aproximadamente 9.0 y además a condición de que cuando Ri sea His, X sea Ala, Y sea Glu y Z sea Glu, R2 debe ser NH . Se han descrito numerosos análogos y derivados de GLP-1 que tienen un punto isoeléctrico en el rango de aproximadamente 6.0 a aproximadamente 9.0 e incluyen, por ejemplo: GLP-1(7-36)NH2 Gly,-GLP-1(7-36)NH2 Gln9-G P-l(7-37) D-Gln!>-G P-](7-37) acetyl-Lys'-G P-l(7-37) T_r9-GLP-1(7.37) D-Hir^-GUM^?) -GUM(7-37) D-Asn»-GLP-I(7-37) Ser22-Arg^-Ai^'-Gln8-GLP-1(7-37) Thr"- ys"-GIJM(7-37) Lys"-GL_M(7-37) Argv-GU>-\(7-37) Otro grupo preferido de compuestos activos para utilizarse en la presente invención, se describe en la Publicación Internacional WO 91/11457 (relacionada con la Patente Norteamericana US 5,545,618) e incluye GLP-l(7-34), GLP-l(7-35), GLP-K7-36) o GLP-1 (7-37) o la forma amida de los mismos, y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, que han sufrido cuando menos una modificación incluyendo aquellas que se muestran a continuación: (a) sustitución de un residuo glicina, serina, cisteína, treonina, asparagina, glutamina, tirosina, alanina, valina, isoleucina, leucina, metionina, fenilalanina, arginina o D-lisina, por lisina en la posición 26 y/o en la posición 34; o la sustitución de un - - residuo glicina, serina, cisteína, treonina, asparagina, glutamina, tirosina, alanina, valina, isoleucina, leucina, metionina, fenilalanina, lisina o D-arginina, por arginina en la posición 36; (b) la sustitución de un aminoácido resistente a la oxidación por triptofano en la posición 31; (c) la sustitución de cuando menos uno de los siguientes: tirosina por valina en la posición 16; lisina por serina en la posición 18; ácido aspártico por ácido glutámico en la posición 21; serina por glicina en la posición 22; arginina por glutamina en la posición 23; arginina por alanina en la posición 24 y glutamina por lisina en la posición 26; y (d) la sustitución de cuando menos uno de los siguientes: glicina, serina o cisteína por alanina en la posición 8; ácido aspártico, glicina, serina, cisteína, treonina, asparagina, glutamina, tirosina, alanina, valina, isoleucina, leucina, metionina o fenilalanina por ácido glutámico en la posición 9; serina, cisteína, treonina, asparagina, glutamina, tirosina, alanina, valina, isoleucina, leucina, metionina o fenilalanina por glicina en la posición 10; y ácido glutámico por ácido aspártico en la posición 15; y (e) la sustitución de glicina, serina, cisteína, treonina, asparagina, glutamina, tirosina, alanina, valina, isoleucina, leucina, metionina o fenilalanina, o la forma D- o N-acilada o alquilada de histidina, por histidina en la posición 7; en donde, en las sustituciones de los incisos (a) , (b) , (d) y (e) , los aminoácidos sustituidos pueden opcionalmente estar en la forma D y los aminoácidos sustituidos en la posición 7 opcionalmente pueden estar en la forma N-acilada o N-alquilada. Debido a que la enzima dipeptidil-peptidasa IV (DPP IV) puede ser responsable de la rápida inactivación in vivo observada de la GLP-1 administrada (Mentlein et ai., 1993) , la administración de análogos y derivados de la GLP-1 que están protegidos de la actividad de la DPP IV es preferida, y es más preferida la administración de Gly8-GLP-1(7-36)NH2, Val8-GLP-1 (7-37 ) OH, a-metil-Ala8-GLP-l (7-36)NH2 y Gly8-Gln21-GLP-1 (7-37) OH, Gly8-GLP-1 (7-37) OH o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos. El uso en la presente invención de una molécula de conformidad con la Patente Norteamericana US 5,188,666 ('666) también es preferido. Tal molécula incluye un péptido que tiene una de las siguientes secuencias de aminoácidos : NH H¡s7-Ala-GIu-Gly,°- Thr-Phe-Thr-Scr-Asp^-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu20- GIu-Gly-G_n-Ala-AlaM-Lys-GJu-Phe-Ue-AlaM- Tip-Leu-Val-X en donde X puede ser Lys y Lys-Gly; o un derivado de dicho péptido, y en donde el péptido puede ser una sal de adición acida farmacéuticamente aceptable de dicho péptido; una sal carboxilato farmacéuticamente aceptable de dicho péptido; un alquiléster inferior farmacéuticamente aceptable de dicho péptido; o una amida farmacéuticamente aceptable de dicho péptido, que se selecciona del grupo que consiste de amida, alquilamida inferior y dialquilamida inferior. La invención de la Patente ?666 se refiere a un fragmento peptídico que es insulinotrópico y es derivado de una secuencia de aminoácidos de origen natural. Estos fragmentos son adecuados para la práctica de la presente invención. La presente invención comprende un compuesto que se selecciona del grupo que consiste de: (A) un péptido que comprende la secuencia: Hís-Ala-Glu-G]y-T__r-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tt-Leu-Glu-Gly- Gln-Ala-Ala- ys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-X en donde X se selecciona del grupo que consiste de: (a) Lys, (b) Lys-Gly, (c) Lys-Gly-Arg; y (B) un derivado del péptido; en donde el compuesto está sustancialmente libre de contaminantes naturales y tiene una actividad insulinotrópica que excede - - la actividad insulinotrópica de la GLP-l(l-36) o GLP-1(1-37) . La presente invención también incluye un compuesto que se selecciona del grupo que consiste de: (A) un péptido que comprende la secuencia: H -_Ua-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Stf-Tyr-Leu-Glu-Gly- GIn-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-lle-Ala-Tjp- eu-Val-X en donde X se selecciona del grupo que consiste de: (a) Lys, (b) Lys-Gly, (c) Lys-Gly-Arg; y (B) un derivado del péptido; en donde el compuesto está sustancialmente libre de contaminantes naturales y tiene una actividad insulinotrópica a una concentración de cuando menos 10"10 molar. Son de particular interés los péptidos de la siguiente fórmula: (1) HzN-X-CO-R1 en donde R1 es un grupo OH, OM, ó -NR2R3; M es un catión farmacéuticamente aceptable o un grupo alquilo inferior ramificado o no ramificado; Rz y R3 son iguales o diferentes y se seleccionan del grupo que consiste de hidrógeno y un grupo alquilo inferior ramificado o no ramificado; X es un péptido que comprende la secuencia: Hís-Ala-Glu-Gly-Tlir-Phe-Tlir-Ser-As^ GIn-_üa-Ala-Lys-Glu-P__e-p_-Ak-Tfp-Leu-Val- ys-G!y-AiB NH2 es el grupo amino del extremo amino-terminal de X; y CO es el grupo carbonilo del extremo carboxilo-terminal de X; (2) las sales de adición acida de los mismos; y (3) los derivados protegidos o parcialmente protegidos de los mismos; en donde el compuesto tiene una actividad insulinotrópica que excede la actividad insulinotrópica de la GLP-K1-36) o GLP-l(l-37). Otro grupo preferido de moléculas .para utilizarse en la presente invención, consiste de compuestos reivindicados en la Patente Norteamericana US 5,512,549, que tienen la fórmula general: R'-Ala-Gtu-Gly10- Thr-Phe-T_r-Scr-Asp,5-Val-Ser-Ser-Tyr- cuM- Glu-Gly-Gln-AJa-AlaM-X_La-GIu-Phe-Ile-AÍaw- T?p- eu-Val-Lys-Gly35-Arg-R3 I Ra y sales farmacéuticamente aceptables de las mismas, en donde R1 puede ser 4-imidazopropionilo, 4-imidazoacetilo ó 4-imidazo-a, a-dimetilacetilo; R2 puede ser acilo no ramificado de 6 a 10 átomos de carbono, o - - estar ausente; R3 puede ser Gly-OH ó NH2; y Xaa es Lys ó Arg. Los compuestos más preferidos para utilizarse en la presente invención, son aquellos en donde Xaa es Arg y R2 es un acilo de 6 a 10 átomos de carbono no ramificado. Los compuestos altamente preferidos para utilizarse en la presente invención, son aquellos en donde Xaa es Arg, R2 es acilo de 6 a 10 átomos de carbono no ramificado y R3 es Gly-OH. Los compuestos más altamente preferidos para utilizarse en la presente invención, son aquellos en donde Xaa es Arg, R2 es un acilo de 6 a 10 átomos de carbono no ramificado, R3 es Gly-OH y R1 es g-imidazolpropionilo. . El compuesto más preferido para utilizarse en la presente invención, es aquel en donde Xaa es Arg, R2 es acilo no ramificado de 8 átomos de carbono, R3 es Gly-OH y R1 es 4-imidazopropionilo. En la presente invención, es altamente preferido el uso de una molécula reivindicada en la Patente Norteamericana US 5,120,712. Tal molécula incluye un péptido que tiene la secuencia de aminoácidos: NHrHis -AIa-G ?-Gly10- Thr-Phe-Thr-Ser-Asp,3-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu20- Ghi-Gíy-Gln-Ala-AIa^-Lys-Glu-Phe-IIe-Ala*0- T?p-Leu-V?d .Lys-G_y,5-Arg-Gly3'-OH y un derivado de dicho péptido, en donde el péptido puede ser: una sal de adición acida farmacéuticamente aceptable del péptido; una sal carboxilato farmacéuticamente aceptable del péptido; un alquiléster inferior farmacéuticamente aceptable del péptido; o una amida farmacéuticamente aceptable del péptido, en donde la amida puede ser una amida, alquilamida inferior o dialquilamida inferior. El uso de GLP-l(7-36) amida o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma en la presente invención, es altamente preferido. La secuencia de aminoácidos de la GLP-1 (7-36) amida es: NH2-His1-AIa-Glu-Gly,0- Thr-Phe-Thr-Ser-Asp,s-V_I-Ser-Ser-Tyr-Leu20- Glu-Gly-Gln-Ala-Ala^-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala30- Trp-Leu-Val-Lys-GI '-Arg-NHj Es muy altamente preferido el uso de Val8-GLP-1(7-37) OH o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma, en la presente invención. La secuencia de aminoácidos de la Val8-GLP-1 (7-37) OH es: NH His7-Ala-G?-Gly,°- Thr-Phe-Tbr-Ser-Asp^-Val-Ser-Ser-Tr-Leu20- Glu-Gly-Gto-Ala-AIa^-Lys-Glu-Pbe-IIe-Ala3*- Trp-Leu-VaI- ys-Gly3-Aí^-Gly37-OH Preparación de los Compuestos Los métodos para preparar los compuestos activos utilizados en la presente invención, principalmente GLP-1, un análogo de GLP-1 ó un derivado de GLP-1, o cualquier compuesto relacionado incluyendo un fragmento activo efectivo en la reducción de la mortalidad o morbilidad después de un ataque fulminante cuando se administra periféricamente, son bien conocidos y se describen en las Patentes Norteamericanas Nos. 5,118,666; 5,120,712 y 5,523,549. La porción aminoácido del compuesto activo utilizado en la presente invención o un precursor de la misma, se prepara de la siguiente manera: 1) mediante química sintética en fase sólida; 2) mediante una purificación de moléculas GLP de fuentes naturales; 3) mediante tecnología de ADN recombinante; ó 4) mediante una combinación de estos métodos. La síntesis química en fase sólida de polipéptidos es bien conocida en la técnica y se puede encontrar en texto generales de este campo, tales como - - Dugas y Penney (1981); Merrifield (1962); Stewart y Young (1969, 1984) . Por ejemplo, la porción aminoácido se puede sintetizar mediante la metodología de fase sólida utilizando un sintetizador de péptidos 430A (PE-Applied Biosystems, Inc., 850 Lincoln Center Drive, Foster City, CA 94404) y los ciclos de síntesis suministrados por PE-Applied Biosystems. Los BOC-aminoácidos y otros reactivos están disponibles en el comercio en PE-Applied Biosystems y también en otras empresas distribuidoras de productos químicos. La química BOC secuencial utilizando protocolos de doble acoplamiento, se aplican a las resinas iniciales p-metil benzhidrilamina para la producción de . las carboxamidas C-terminales . Para la producción de ácidos C-terminales, se utiliza la correspondiente resina PAM. Se acoplan Asn, Gln y Arg utilizando los esteres de hidroxibenzotriazol formados previamente. Se pueden utilizar los siguientes grupos protectores de cadena lateral : Arg, tosilo Asp, ciciohexilo Glu, ciciohexilo Ser, bencilo Thr, bencilo Tyr, 4-bromo-carbobenzoxi - - La desprotección de BOC se puede llevar a cabo con ácido trifluoroacético en cloruro de metileno. Después de concluir la síntesis, los péptidos pueden ser desprotegidos y desprendidos de la resina con fluoruro de hidrógeno (HF) anhidro conteniendo 10% de metacresol. El rompimiento de los grupos protectores de la cadena lateral y del péptido de la resina, se lleva a cabo a una temperatura de -5 a 5°C, de preferencia en un baño de hielo durante 60 minutos. Después de la remoción del HF, el péptido/resina se lava con éter y el péptido se somete a una extracción con ácido acético glacial y se liofiliza. Se pueden emplear las técnicas conocidas para los técnicos en la materia en tecnología de . ADN recombinante, para preparar el compuesto activo utilizado en la presente invención. De hecho, los métodos de ADN recombinantes pueden ser preferibles debido a su alto rendimiento. Las etapas básicas en la producción recombinante son: a) aislar una secuencia de ADN natural que codifica para una molécula GLP-1 de la presente invención o construir un ADN sintético o semisintético que codifica para la secuencia de una molécula GLP-1, b) colocar la secuencia codificadora en un vector de expresión, de una manera adecuada para expresar las proteínas ya sea solas o en forma de proteínas de - - fusión, c) transformar una célula huésped procariótica o eucariótica apropiada, con el vector de expresión, d) cultivar la célula huésped transformada en condiciones que permitan la expresión de una molécula GLP-i, y e) recuperar y purificar la molécula GLP-1 producida de manera recombinante. Tal como se estableció anteriormente, las secuencias codificadoras pueden ser completamente sintéticas o pueden ser el resultado de modificaciones al ADN codificadora de glucagon nativo que es más largo. Una secuencia de ADN que codifica para el preproglucagon se presenta en Lund et al . (1982) y se puede utilizar como materia prima en la producción, por vía semisintética, de los compuestos de la presente invención, mediante la alteración de la secuencia nativa para lograr los resultados deseados. Se pueden construir genes sintéticos, cuya transcripción y traducción in vi tro o in vivo da como resultado la producción de una molécula GLP-1, mediante técnicas conocidas en este campo. Debido a la degeneración natural del código genético, un técnico en la materia reconocerá que se puede construir un número definido y determinado de secuencias de ADN, todas las cuales - - codifican para moléculas GLP-1 de la presente invención. La metodología de la construcción de genes sintéticos es conocida en la técnica (Brown et al . , 1979). La secuencia de ADN se diseña a partir de la secuencia de aminoácidos deseada utilizando el código genético, lo cual es sabido por los técnicos en el campo de la biología. Una vez diseñada, la secuencia misma puede ser generada utilizando un aparato de síntesis de ADN convencional, tal como los sintetizadores de ADN Modelo 380A ó 380B (PE-Applied Biosystems, Inc., 850 Lincoln Center Drive, Foster City, CA 94404) . Para expresar la porción de aminoácidos de un compuesto utilizado en la presente invención, se inserta una secuencia de ADN sintético en cualquiera de numerosos vectores de expresión de ADN recombinante apropiados, mediante el uso de endonucleasas de restricción apropiadas (Maniatis et al . , 1989). Los sitios de rompimiento por endonucleasas de restricción son manipulados por ingeniería para que queden en cualquier extremo del ADN codificador de la molécula GLP-1 para facilitar su aislamiento y para su integración, amplificación y expresión en vectores conocidos en la técnica. Las endonucleasas particularmente empleadas estarán dictadas por el patrón de rompimiento de las endonucleasas de restricción del vector de expresión progenitor empleado. Los sitios de restricción de seleccionan para orientar apropiadamente la ' secuencia codificadora con secuencias de control, logrando de esta manera una lectura del marco apropiada y una adecuada expresión de la proteína de interés. La secuencia codificadora debe estar posicionada en el marco de lectura apropiado con el promotor y el sitio de unión a ribosomas del vector de expresión, ambos de los cuales son funcionales en la célula huésped en la que se va a expresar la proteína. Para lograr una eficiente transcripción del gen sintético, éste se debe asociar de manera operable con una región promotora-operadora. Por lo tanto, la región promotora-operadora del gen sintético se coloca en la misma orientación secuencial con respecto al codón de inicio ATG del gen sintético. Se conocen una variedad de vectores de expresión útiles para la transformación de células procarióticas e eucarióticas (Promega Catalogue, 1992, Stratagene Catalogue, 1992) . Así mismo, la Patente Norteamericana US 4,710,473 describe vectores de transformación de plásmido de ADN circular útiles para la expresión de genes exógenos en E. coli a altas concentraciones. Estos plásmidos son útiles como vectores de transformación en procedimientos de ADN recombinante y (a) le confieren al plásmido la capacidad de replicación autónoma en una célula huésped; (b) confieren una replicación plasmídica autónoma en relación con la temperatura a la cual se mantienen los cultivos de la célula huésped; (c) estabilizan la conservación del plásmido en las poblaciones de las células huésped; (d) síntesis directa de un producto proteico, indicativa de la conservación del plásmido en una población de células huésped; (e) proporcionar sitios de reconocimiento de endonucleasas de restricción en serie, únicos para el plásmido; y (f) terminar la transcripción del ARNm. Estos plásmidos de ADN circular son útiles como vectores en procedimientos de ADN recombinante para asegurar altos niveles de expresión de genes exógenos. Habiendo construido un vector de expresión para la porción de aminoácidos de un compuesto utilizado en la presente invención, el siguiente paso es colocar el vector en una célula adecuada y construir de esta manera una célula huésped recombinante útil para la expresión del polipéptido. Las técnicas para transformar células con vectores de ADN recombinante son conocidas y se pueden encontrar en referencias generales tales como Maniatis, et al . , supra . Las células huésped se pueden construir a - - partir de células eucarióticos o procarióticas. Las células huésped procarióticas por lo general producen la proteína en mayores cantidades y son más fáciles de cultivar. Las proteínas expresadas en altos niveles en sistemas de expresión bacterianos, característicamente se agregan en forma de granulos o cuerpos de inclusión, los cuales contienen altas cantidades de la proteína sobreexpresada. Tales agregados de proteína típicamente deben ser recuperados, solubilizados, desnaturalizados y reconformados, utilizando técnicas conocidas en este campo (Kreuger et al . , 1990; Patente Norteamericana US4, 923, 967) . Preparación de Análogos y Derivados de GLP-1 Se pueden realizar alteraciones a un precursor de GLP-1 ó a una secuencia de aminoácidos de GLP-1 para producir un análogo de GLP-1 ó un derivado de GLP-1 ó un fragmento de los mismos, por métodos conocidos: modificación química, modificación enzimática o una combinación de modificaciones química y enzimática. Las técnicas clásicas de solución en fases y métodos semisintéticos también se pueden utilizar para preparar las moléculas GLP-1 utilizadas en la presente invención. Los métodos para preparar las moléculas GLP-1 de la presente invención son conocidos para los técnicos en la química de péptidos.

- - Además, la adición de un grupo acilo al grupo epsilon-amino de Lys34 se puede llevar a cabo utilizando cualquiera de una variedad de métodos conocidos en la técnica (Bioconj ugate Chem. 1990, Hashimoto et al . , 1989). Por ejemplo, se puede agregar un éster de N-hidroxisuccinimida de ácido octanoico al grupo lisil-epsilon amino utilizando 50% de acetonitrilo en solución reguladora de borato. El péptido se puede acilar antes o después de que se agrega el grupo imidazólico. Además, si el péptido se prepara de manera recombinante, es posible la acilación antes del rompimiento enzimático. Así mismo, la lisina en el derivado GLP-1 se puede acilar de la manera enseñada en la Publicación Internacional WO 96/29342. La existencia y preparación de una multitud de análogos protegidos, no protegidos y parcialmente protegidos, naturales y no naturales, y derivados de la GLP-1 (7-36) amida y moléculas GLP-l(7-37), se han descrito en la literatura científica (Patentes Norteamericanas Nos. 5,120,712; 5,545,618 y 5,118,666; Orskot et al . , 1989; WO 91/11457) . Opcionalmente, los residuos amino-terminal y carboxilo-terminal de derivados de GLP-1 se pueden proteger u opcionalmente sólo se protege uno de los extremo terminales. Las reacciones para la formación y remoción de tales grupo protectores se describen en trabajos conocidos para los técnicos en la materia, incluyendo por ejemplo, Protective Groups in Organic Chemistry 1973, Green, 1981 y Schróder y Lübke, 1965. Algunos representantes de grupos amino-protectores incluyen, por ejemplo, grupos formilo, acetilo, isopropilo, butoxicarbonilo, fluorenilmetoxicarbonilo, carbobenciloxi y similares. Algunos grupos representativos de grupos carboxilo-protectores incluyen, por ejemplo, benciléster, metiléster, etiléster, t-butiléster, p-nitrofeniléster y similares. Los derivados carboxilo-terminal, alquiléster inferior, GLP-1 utilizados en la presente invención, se preparan haciendo reaccionar el alcanol (de 1 a 4 átomos de carbono) deseado con el polipéptido deseado, en presencia de un ácido catalítico tal como ácido clorhídrico. Las condiciones apropiadas para tales formaciones de alquiléster, incluyen una temperatura de reacción de aproximadamente 50°C y un tiempo de reacción de aproximadamente 1 a aproximadamente 3 horas . De manera similar, los derivados alquiléster de los residuos Asp y/o Glu, también se pueden formar. La preparación de un derivado carboxamida de un compuesto utilizado en la presente invención, se obtiene, por ejemplo, de la manera descrita en Stewart et al . (1984) . Una sal farmacéuticamente aceptable de GLP-1 ó de un análogo de GLP-1 ó de un derivado de GLP-1, se puede utilizar también en la presente invención. Los ácidos comúnmente empleados para formar sales de adición acida, son ácidos inorgánicos tales como ácido clorhídrico, bromhídrico, yodhídrico, sulfúrico, fosfórico y similares, y ácidos orgánicos tales como ácido p-toluensulfónico, metansulfónico, oxálico, p-bromofenilsulfónico, carbónico, succínico, cítrico, benzoico, acético y similares. Ejemplos de tales sales incluyen las sales sulfato, pirosulfato, bisulfato, sulfito, bisulfito, fosfato, fosfato ácido, fosfato diácido, metafosfato, pirofosfato, cloruro, bromuro, yoduro, acetato, propionato, decanoato, caprilato, acrilato, formiato, isobutirato, caproato, heptanoato, propionato, oxalato, malonato, succinato, suberato, sebacato, fumarato, maleato, butin-1, 4-dioato, hexin-1, 6-dioato, benzoato, clorobenzoato, metilbenzoato, dinitrobenzoato, hidroxibenzoato, metoxibenzoato, ftalato, sulfonato, xilensulfonato, fenilacetato, fenilpropionato, fenilbutirato, citratdo, lactato, gamma-hidroxibutirato, glicolato, tartrato, metansulfonato, propansulfonato, naftalen-1-sulfonato, naftalen-2-sulfonato, mandelato y similares. Las sales de adición acida preferidas son aquellas formadas con ácidos minerales tales como ácido clorhídrico y ácido bromhídrico. Las sales de adición básica incluyen aquellas derivadas de bases inorgánicas, tales como hidróxidos de amonio o de metales alcalinos o alcalinotérreos, carbonatos, bicarbonatos y similares. Tales bases útiles en la preparación de las sales de la presente invención, incluyen el hidróxido de sodio, hidróxido de potasio, hidróxido de amonio, carbonato de potasio y similares. Las formas en sal son particularmente preferidas. La GLP-1, análogo de GLP-1 ó derivado de GLP-1 utilizada en la presente invención, se puede formular con uno o más excipientes antes de utilizarse en la presente invención. Por ejemplo, el compuesto activo utilizado en la presente invención se puede complejar con un catión metálico divalente, por métodos conocidos. Tales cationes metálicos incluyen, por ejemplo, Zn++, Mn++, Fe++, Co++, Cd++, Ni++ y similares. Composiciones de la Presente Invención Opcionalmente, el compuesto activo utilizado en la presente invención se puede combinar con una solución reguladora farmacéuticamente aceptable y el pH se puede ajustar para proporcionar una estabilidad aceptable y un pH aceptable para la administración parenteral. Opcionalmente, se pueden agregar uno o más agentes antimicrobianos farmacéuticamente aceptables. Se prefieren el metacresol y el fenol como agentes antimicrobianos farmacéuticamente aceptables. Se pueden agregar una o más sales farmacéuticamente aceptables para ajustar la fuerza iónica o la tonicidad. Se pueden agregar uno o más excipientes para ajustar adicionalmente la isotonicidad de la formulación. La glicerina es un ejemplo de un excipiente para ajustar la isotonicidad. Los receptores de GLP-1 y la cascada de transducción de señal iniciada por la unión del ligando al receptor de GLP-1, se describen en la Publicación Internacional WO 96/25487; Thorens et al . , 1993; y Widmann et al . , 1994. El receptor de GLP-1 es una proteína de membrana con siete dominios transmembranales, acoplados a las proteínas G heterotriméricas que vinculan la activación del receptor al unirse el ligando, a la producción de mensajes secundarios intracelulares, especialmente monofosfato de adenosina cíclico (cAMP) . El cAMP, a su vez, activa una proteíncinasa específica, denominada proteíncinasa dependiente de cAMP (proteíncinasa A, PKA) . Esta enzima fosforila un número de elementos de respuesta clave presentes en la región promotora de ciertos genes. En células ß pancreáticas y otras células neuroendocrinas, la fosforilación de algunas proteínas específicas de la ruta secretoria regulada, estimula la secreción de péptidos mediante una estimulación de la exocitosis de granulos secretorios . Se conocen varios compuestos que estimulan la secreción del GLP-1 endógeno. Por ejemplo, la exposición de células STC-1 a ciertos secretágogos, tales como el activador de la adenilato ciclasa, forscolina, o el agente estimulador de proteína cinasa C, 12-0-tetradecanoilfobol-13-acetato (TPA) , causa un incremento significativo en la liberación de GLP-1 (Abella et al . , 1994). La línea de células STC-1 se origina de un tumor intestinal en ratones transgénicos portadores de oncogenes promotores de insulina y se sabe que las células STC-1 contienen transcripciones de ARNm de proglucagon, a partir del cual se genera el GLP-1. Otros compuestos, tales como la somatostatina, polipéptido inhibidor gástrico, péptido insulinotrópico dependiente de glucosa, bombesina, péptido relacionado con el gen de la calcitonina, péptido liberador de gastrina, agonistas colinérgicos, el agonista ß-adrenérgico isoproterenol y el agonista colinérgico muscarínico betanecol, de manera similar, también causan la liberación de GLP-1 endógeno (Plarsancie et al . , 1994, Orskov et al . , 1986, Brubaker, 1991, Bucho, et al . , 1987). Administración de las Composiciones La administración puede ser por cualquier ruta que el médico sepa que es efectiva, excepto que la administración parenteral directamente en el sistema nervioso central no es una ruta enseñada ni reivindicada en esta invención. Se prefiere la administración periférica - - parenteral. La administración parenteral comúnmente se entiende en la literatura médica como la inyección de una forma farmacéutica en el cuerpo, mediante una jeringa estéril o algún otro dispositivo mecánico tal como una bomba de infusión. Para los propósitos de la presente invención, las vías parenterales periféricas incluyen la vía intravenosa, intramuscular, subcutánea e intraperitoneal de administración. Las vías de administración intravenosa, intramuscular y subcutánea de los compuestos utilizados en la presente invención, son las más preferidas. Las vías de administración intravenosa y subcutánea de los compuestos utilizados en la presente invención, todavía son más altamente preferidas. Para la administración parenteral, un compuesto activo utilizado en la presente invención de preferencia se combina con agua destilada, a un pH apropiado. Ciertos compuestos utilizados en la presente invención para efectuar la reducción de la mortalidad y morbilidad, también pueden ser susceptibles de administrarse por vía oral, rectal, nasal u otras rutas respiratorias, las cuales no son rutas parenterales. De las rutas no parenterales, la ruta respiratoria baja se prefiere para la administración de los péptidos utilizados en la presente invención. Varias formulaciones de compuestos peptídicos para administración en el tracto respiratorio inferior, se describen en las Patentes Norteamericanas Nos. 5,284,656 y 5,364,838. La Publicación Internacional WO 96/19197 describe formulaciones en aerosol de varios péptidos adecuados para incrementar la absorción en el tracto respiratorio inferior de los compuestos utilizados en la presente invención. La vía oral de administración se prefiere para los compuestos utilizados en la presente invención. Se pueden emplear métodos farmacéuticos adicionales para controlar la duración de la acción. Las preparaciones de liberación controlada se pueden preparar mediante el uso de polímeros para complejar o absorber al compuesto activo utilizado en la presente invención.. La duración extendida se puede obtener seleccionado macromoléculas apropiadas, por ejemplo poliésteres, poliaminoácidos, polivinilpirrolidona, acetato de etilenvinilo, metilcelulosa, carboximetilcelulosa o sulfato de protamina, y seleccionando la concentración de las macromoléculas, así como los métodos .de incorporación, con el fin de prolongar la liberación del fármaco. Otro posible método para extender la duración de la acción mediante preparaciones de liberación controlada, es incorporar un compuesto activo utilizado en la presente invención en partículas de un material polimérico tal como poliésteres, poliaminoácidos, hidrogeles, poli (ácido láctico) o copolímeros de etileno y acetato de vinilo. Alternativamente, en vez de incorporar un compuesto en estas partículas poliméricas, es posible atrapar un compuesto de la presente invención en microcápsulas preparadas, por ejemplo, mediante técnicas de coaservación o mediante polimerización interfacial, por ejemplo, microcápsulas de hidroximetilcelulosa o microcápsulas de gelatina, respectivamente, o en sistemas de suministro de fármacos coloidales, por ejemplo liposomas, microesferas de albúmina, microemulsiones, nanopartículas y nanocápsulas, o en macroemulsiones. Estas técnicas son conocidas para los técnicos en la materia y se describen, e.g., en Remington r s Pharmaceutical Sciences, 1980. Dosis La dosis de GLP-1, análogo de GLP-1 ó derivados de GLP-1 ó fragmentos activos efectivos en un sujeto particular para reducir la mortalidad y morbilidad causada por un ataque fulminante, dependerá de un número de factores, entre los cuales se incluyen el sexo del sujeto, el peso y la edad, la gravedad del ataque, el subtipo de ataque, la vía de administración y la biodisponibilidad, la persistencia del compuesto administrado en el cuerpo, la formulación y la potencia. Cuando la administración es intermitente, la dosis por administración también deberá tomar en cuenta el intervalo entre las dosis y la biodisponibilidad del compuesto administrado. Cuando la administración es continua, un rango de dosis adecuado está entre 0.25 y 6 pmol/kg/min, de preferencia entre 0.5 a aproximadamente 1.2 pmol/kg/min. Está dentro los conocimientos de un médico ordinario, titular la dosis y el tiempo de administración de las composiciones que contienen GLP-1, análogos de GLP-1 ó derivados de GLP-1 ó fragmentos de los mismos, para lograr el resultado clínico deseado, la reducción de la mortalidad y morbilidad después de un ataque fulminante mediante el control de la glucosa. En una modalidad, la reducción de la concentración plasmática de glucosa por debajo de aproximadamente 7 mmol/L es una meta después de un ataque fulminante. El término "farmacéuticamente aceptable" tal como se utiliza en la presente, significa adecuado para ser administrado a un ser humano; es decir, que no contiene elementos tóxicos, contaminantes indeseables o similares y que no interfiere con la actividad de los compuestos activos en la formulación. Se han descrito numerosos análogos de GLP-1 y derivados que tienen un punto isoeléctrico en el rango de 4.8 a 7.5, e incluyen por ejemplo: GLP-1 (7-36) NH2 Gly8-GLP-1 (7-36)NH2 Gln9-GLP-l(7-37) Diagnóstico del Ataque Fulminante Un diagnóstico de "ataque fulminante" es uno que involucra el juicio médico. El tratamiento que es el objeto de la presente invención, generalmente se administra a una persona durante la fase aguda del ataque fulminante. Un paciente que necesite de los compuestos utilizados en la presente invención, es alguien que se encuentra en la fase aguda de un ataque fulminante y que es incapaz de realizar una autorregulación de la glucosa sanguínea. Un paciente es incapaz de realizar una autorregulación si ese paciente: (1) previamente fue diagnosticado con diabetes mellitus insulinodependiente (DMID) o diabetes mellitus no insulinodependiente (DMNID) , de conformidad con las definiciones del Grupo Nacional de Datos sobre Diabetes (Diabetes, 1979); (2) que tiene una concentración sanguínea de glucosa mayor de 11 mmol/litro, incluso sin un previo diagnóstico de diabetes; o (3) que tiene una tolerancia anormal a la glucosa. La dosis de GLP-1, análogo de GLP-1 ó derivado de GLP-1 efectivo para normalizar el nivel de glucosa sanguíneo de un paciente, dependerá de un número de factores, entre los cuales se incluyen, sin limitaciones, el sexo, del paciente, la edad y peso, la gravedad de la incapacidad para regular la glucosa sanguínea, las causas - - subyacentes de la incapacidad de regular la glucosa sanguínea, si se administra simultáneamente glucosa o alguna otra fuente de carbohidrato, la vía de administración y la biodisponibilidad, la persistencia en el cuerpo, la formulación y la potencia. Cuando la administración es continua, un rango de dosis adecuado está entre 0.25 y 6 pmol/kg de peso corporal/min, de preferencia de aproximadamente 0.5 a aproximadamente 1.2 pmol/kg/minuto. Cuando la administración es intermitente, la dosis por administración deberá tomar en cuenta el intervalo entre las dosis, la biodisponibilidad del GLP-1, análogo de GLP-1 ó derivado de GLP-1 y la concentración necesaria para tener el efecto de normalizar la glucosa sanguínea. Está dentro de los conocimientos de un médico ordinario, titular la dosis y la frecuencia de administración del GLP-1 y análogo de GLP-1 ó derivado de GLP-1, para lograr el resultado clínico deseado. EJEMPLOS La presente invención se entenderá con mayor facilidad con referencia a ejemplos específicos, los cuales se proporcionan para ilustrar modalidades de la presente invención.

- Ejemplo 1: Efectos de la Infusión Subcutánea de GLP-1(7-30) sobre la Glucosa Sanguínea en Personas con DMNID Se administró GLP-l(7-36) amida por infusión subcutánea a una dosis de 1.2 pmol/kg/h durante 10 horas en la noche, a 5 pacientes que padecían de diabetes mellitus no insulinodependiente (DMNID) . Como control, se administró insulina como infusión continua en los mismos 5 pacientes, pero en un día diferente al de la infusión del GLP-l(7-36) amida. La velocidad de infusión de insulina se ajustó cada 2 horas para lograr un control óptimo y evitar la hipoglucemia. Como se demuestra en los datos de la Tabla 1 y en la Figura 1, la infusión subcutánea de GLP-1(7-36) amida normalizó casi por completo la glucosa sanguínea sin inducir hipoglucemia en ninguno de los pacientes. El control metabólico con GLP-1 (7-36) amida fue mejor que el logrado con insulina y la concentración sanguínea glucosa promedio fue más baja para el tratamiento con GLP-1 (7-36) amida que para el control, en una cantidad estadísticamente significativa a las 23:00, 0:00 y 1:00.

Tabla 1: Concentración sanguínea de glucosa promedio en 5 pacientes con DMNID, administrada por infusión continua durante 10 horas por la noche con GLP-K7-36) amida. En un estudio control con los mismos pacientes, en un dia diferente, se administró insulina mediante una infusión continua.

Ejemplo 2: Efectos de la Infusión Subcutánea de GLP-1(7-36) Durante las Comidas sobre la Concentración Sanguínea de Glucosa en Personas con DMNID Durante el día, se administró por infusión GLP-1 (7-36) amida a 5 pacientes con DMNID durante 3 horas durante el desayuno, almuerzo y cena. Los tiempos de infusión fueron de 7:30-10:30 (desayuno), 10:30-1:30 (almuerzo) y 4:30-7:30 (cena), tal como se indica en la Figura 2. En un experimento de control, en los mismos 5 pacientes con DMNID, realizado en un día diferente, se inyectó insulina por vía subcutánea justo antes de iniciar las comidas, tal como se indica en la Figura 2. Mientras que el GLP-1 se administró por infusión, las excursiones de glucosa posprandial observadas con la inyección de insulina se eliminaron y se mantuvieron los niveles sanguíneos de glucosa normales. Inmediatamente después de terminar cada infusión con GLP-l(7-36) amida, la concentración sanguínea de glucosa se incrementó significativamente. No se observaron efectos secundarios indeseables a la GLP-l(7-36) amida. Estos datos indican que la infusión con GLP-l(7-36) amida controla de manera más efectiva los niveles posprandiales de glucosa que la inyección de insulina y que el control es efectivo en tanto que se continúe la infusión de GLP-K7-36) amida.

Tabla 2 : Concentración sanguínea de glucosa promedio en 5 pacientes con DMNID a quienes se les administró por infusión GLP-l(7-36) amida durante 3 horas, comenzando al inicio de cada comida. En un estudio control con los mismos pacientes, en un dia diferente, se administró insulina por inyección subcutánea justo antes de cada comida. Las comidas comenzaron a las 7:30, 10:30 y 16:30. horas .

DOCUMENTOS CITADOS Abello, Jr. et al., Endocrinol. 134 :2011-2017a (1994). Araki, N., et al., Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolis 12:469-476 (1992). Barbash, B.I., et al., J. Am. Coll. Cardiol. 22:707-713 (1993) . Bioconjugate Chem. "Chemical Modifications of Proteins: History and Applications", pp. 1-212 (1990) . Broderick, J.P., et al., Stroke 26:484-487 (1995). Brown, et al., (1979) Methods in Enzymology, Academic Press, N.Y., Vol. 69, pp. 109-151. Brubaker, P.L., Endocrinol. 128:3175-03182 (1991). Buchan, A.M.J., et al., Gastroenterol. 93:791-800 (1987).

Cazzato, G., et al., Italina Journal of Neurological Sciences 12:283-288 (1991). deCourten-Myers, G., et al., Stroke 19:623-630 (1988). deFalco, F.A., et al., Schweizer Archiv Für Neurologie und Psychatrie 144:233-239 (1993). National Diabetes Data Group, Diabetes 28:1039-1057 (1979). Dietrich, W.D., et al., Stroke 24:111-116 (1993). Duckrow, R.B., et al., Annals of Neurology 17:262-272 (1985) . Duckrow, R.B., et al., Stroke 18:52-58 (1987). Dugas, H. y Penney, C, Bioorganic Chemistry, Springer-Verlag, Nueva York (1981), pp. 54-92.

- - Fuller, J.H., Diabet. Metab. 19:96-99 (1993). Granger, C.B., et al., J. Am. Coll. Cardiol. 21 (4) : 920.925 (1993) . Gray, C.S., et al., Diabetic Medicine 4:237-240 (1987). Green, T.H., Protective Groups in Organic Synthesis, Wiley, Nueva York (1981) . Grines, C, et ai., N. Engl. J. Med. 328:673-679 (1993).

Gutniak, M., et al., Diabetes Care 17:1039-1044 (1994). Gutniak, M., et al., New England J. of Medicine 326(20) :1316-1322 (1992). Hamsten, A., et al., J. Int. Med. 736:1-3 (1994) 236 Suppl.

Hashimoto et ai., Pharmaceutical Res. 6(2):171-176 (1989).

Hendra, T.J., et al., Diabetes Res. Clin. Pract. 16:213-220 (1992) . Karlson, B.W., et al., Diabet. Med. 10 (5) :449-454 (1993).

Kiers, L., et al., Journal of Neurology, Neurosurgery, Psychiatry 55:263-270 (1992). Krcymann, B., et ai., Lancet 2:1300-1303 (1987). Kreuger, et al. (1990) in Protein Folding, Gierasch y King, eds. pp. 136-142. American Association for the Advancement of Science Publication ?o. 89-18S, Washington, D.C. Lehto, S., et ai., Stroke 27:63-8 (1966). Levine, S.R., Annais of Neurology 23 : 416-418 (1988). Lund, et al., Proc. Nati. Acad. Sci. EUA 79:345-349 (1982).

Malmberg, K. y Rydén, L., Eur. Heart J. 9:256-264 (1988).

Malmberg, K., et ai., J. Am. Coll ege Cardiology 26:57-65 (1995) . Malmberg, K.A., et al . , Diabetes Care 17:1007-1014 (1994). Maniatis et al . , Molecular Cloning: A Laboratory Manual , Cold Springs Harbor Laboratory Press, N.Y., Vol. 1-3 (1989) . Mentlein, R., et ai., Eur. J. Biochem. 214:829-835 (1993).

Merrifield, J.M., Chem. Soc. 85:2149 (1962). Mojsov, S., Int . J. Peptide Protein Research 40:333-343 (1992) . Moulin, T., et ai., European Neurology 38:10-27 (1997).

Nauck, M.A., et ai., Diabetologia 36:741-744. Nauck, M.A., et al . , J. Clin . Invest . 91:301-307 (1993). O'Neill, P.A., et al . , Stroke 22:842-847 (1992). Orskov, C, et al . , Endocrinol . 119:1467-1475 (1986). Orskov, C, et al . , J. Biol . Chem. 264 (22) : 12826-12829 (1989) . Plaisancie, P., et al . , Endocrinol . 135:2348-2403 (1994). Protective Groups in Organic Chemistry, Plenum Press, Londres y Nueva York (1973) . Remington ' s Pharmaceutical Sciences (1980) . Schróder and Lübke, The Peptides, Vol. 1, Academic Press, Londres y Nueva York (1965) . Silvka, A.P., Brain Research 562:66-70 (1991).

Stewart y Young, Solid Phase Peptide Synthesis, Freeman, San Francisco (1969), pp. 24-66. Stewart, J.M., et al . , Solid Phase Peptide Synthesis, Pierce Chemical Company Press (1984) . Stone, P., et al . , J. Am. Coll . Cardiol . 14:49-57 (1989).

The Promega Biological Research Products Ca tal ogue (1992) (Promega Corp., 2800 Woods Hollow Road, Madison, Wl 53711- 5399) . The Stra tagene Cloning Systems Catalogue (1992) (Stratagene Corp., 11011 North Torrey Pines Road, La Jolla, CA 92037).

Thorens, B., et ai., Diabetes 42:1219-1225 (1993). Tuomilehto, J., et al . , Stroke 27:210-215 (1996). Wagner, K.R., et ai., Journal of Cerebral Blood Flow. and Metabolism 12:213-22 (1992). Wass, C.T., and Lanier, W.L., Mayo Clini c Proceedings 71:801-812 (1996). Weir, C.J., et al . , BMJ 31 (7090) :1303-6 (1997). Widmann, C, et al . , Mol . Pharmacol . 45:1029-1035 (1994).

Patentes Norteamericanas Nos. 4,710,473; 4,923,967; 5,118,666; 5,188,666; 5,120,712; 5,284,656; 5,364,838; ,545,618; 5,512,549; 5,523,549. Patentes Extranjeras Nos. WO 91/11457; WO 96/29342; WO 96/25487; WO 96/19197. Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Listado de Secuencia <110> Eli Lilly and Company <120> USO DE GLP-1 Ó ANÁLOGOS EN EL TRATAMIENTO DE LA CRISIS FULMINANTE <130> X-11158 <140> PCT/US99/22026 <141> 1999-09-22 <150> US 60/101719 <151> 1998-09-24 <160> 35 <170> Patentln Ver. 3.0 <210> 1 <211> 31 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 1 His Ala Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly 1 5 10 15 Gln Ala Ala Lys Glu Phe lie Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg Gly 20 25 30 <210> 2 <211> 28 <212> PRT <213> Arti ficial <223> Construcción sintética <400> 2 - 2 - His Ala Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly 1 5 10 15 Gln Ala Ala Lys Glu Phe He Ala Trp Leu Val Lys 20 25 <210> 3 <211 > 29 <212> PRT <213> Artificial <223> Construcción sintética <400> 3 His Ala Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly 1 5 10 15 Gln Ala Ala Lys Glu Phe He Ala Trp Leu Val Lys Gly 20 25 <210> 4 <211> 30 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 4 His Ala Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly 1 5 10 15 Gln Ala Ala Lys Glu Phe He Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg 20 25 30 <210> 5 <211> 31 <212> PRT <213> Arti ficial - 3 - <223> Construcción sintética <400> 5 His Val Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly 1 5 10 15 Gln Ala Ala Lys Glu Phe He Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg Gly 20 25 30 <210> 6 <211> 31 <212> PRT <213> Artificial <223> Construcción sintética <400> 6 His Ala Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly 1 5 10 15 Gln Ala Ala Lys Glu Phe He Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg Gly 20 25 30 <210> 7 <211> 31 <212> PRT <213> Artificial <223> Construcción sintética <221> VARIANTE <222> (3) .. (3) <223> Xaa en la posición 3 es D-Gln <400> 7 - 4 - His Ala Xaa Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly 1 5 10 15 Gln Ala Ala Lys Glu Phe He Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg Gly 20 25 30 <210> 8 <211> 31 <212> PRT <213> Artificial <223> Construcción sintética <400> 8 His Ala Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Thr Ser Lys Tyr Leu Glu Gly 1 5 10 15 Gln Ala Ala Lys Glu Phe He Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg Gly 20 25 30 <210> 9 <211> 31 <212> PRT <213> Artificial <223> Construcción sintética <400> 9 His Ala Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Lys Tyr Leu Glu Gly 1 5 10 15 Gln Ala Ala Lys Glu Phe He Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg Gly 20 25 30 <210> 10 <211> 28 <212> PRT <213> Artificial - 5 - <223> Construcción sintética <221> VARIANTE <222> ( 20 ) . . (20 ) <223> Xaa en la posición 20 es D-Lys , Gly, Ser, Ala, Leu, lie, Gln, Arg, D-Arg y Met <221> VARIANTE <222> (28 ) . . (28) <223> Xaa en la posición 28 es D-Lys, Gly, Ser, Ala, Leu, lie, Gln, Arg, D-Arg y Met <400> 10 His Ala Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly 1 5 10 15 Gln Ala Ala Xaa Glu Phe He Ala Trp Leu Val Xaa 20 25 <210> 11 <211> 29 <212> PRT <213> Artificial <223> Construcción sintética <221> VARIANTE <222> (20 ) . . (20 ) <223> Xaa en la posición 20 es D-Lys, Gly, Ser, Ala, Leu, lie, Gln, Arg, D-Arg y Met <221> VARIANTE <222> (28) .. (28) <223> Xaa en la posición 28 es D-Lys, Gly, Ser, Ala, Leu, - 6 - lie, Gln, Arg, D-Arg y Met <400> 11 His Ala Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly 1 5 10 15 Gln Ala Ala Xaa Glu Phe He Ala Trp Leu Val Xaa Gly 20 25 <210> 12 <211> 31 <212> PRT <213> Artificial <223> Construcción sintética <221> VARIANTE <222> ( 20 ) . . (20 ) <223> Xaa en la posición 20 es D-Lys, Gly, Ser, Ala, Leu, lie, Gln, Arg, D-Arg y Met <221> VARIANTE <222> (28).. (28) <223> Xaa en la posición 28 es D-Lys, Gly, Ser, Ala, Leu, lie, Gln, Arg, D-Arg y Met <221> VARIANTE <222> (30) .. (30) <223> Xaa en la posición 30 es D-Lys, Gly, Ser, Ala, Leu, lie, Gln, Met y D-Arg <400> 12 - 7 - His Ala Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly 1 5 10 15 Gln Ala Ala Xaa Glu Phe He Ala Trp Leu Val Xaa Gly Xaa Gly 20 25 30 <210> 13 <211> 31 <212> PRT <213> Artificial <223> Construcción sintética <221> VARIANTE <222> (10) .. (10) <223> Xaa en la posición 10 es Tyr o Val <221> VARIANTE <222> (12) .. (12) <223> Xaa en la posición 12 es Lys o Ser <221> VARIANTE <222> (15) .. (15) <223> Xaa en la posición 15 es Asp o Glu <221> VARIANTE <222> (16) .. (16) <223> Xaa en la posición 16 es Ser o Gly <221> VARIANTE <222> (17) .. (17) <223> Xaa en la posición 17 es Arg o Gln <221> VARIANTE <222> (18) .. (18) <223> Xaa en la posición 18 es Arg o Ala <221> VARIANTE <222> (20) .. (20) <223> Xaa en la posición 20 es Gln o Lys <400> 13 His Ala Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Xaa Ser Xaa Tyr Leu Xaa Xaa 1 5 10 15 Xaa Xaa Ala Xaa Glu Phe He Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg Gly 20 25 30 <210> 14 <211> 31 <212> PRT <213> Artificial <223> Construcción sintética <400> 14 Tyr Ala Gl? Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly 1 5 10 15 Gln Ala Ala Lys Glu Phe He Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg Gly 20 25 30 <210> 15 <211 > 31 <212 > PRT <213> Artificial <223> Construcción sintética <221> VARIANTE <222> ( 1 ) . . ( 1 ) - 9 - <223> Xaa en la posición 1 es N-acetil-His <400> 15 Xaa Ala Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly 1 5 10 15 Gln Ala Ala Lys Glu Phe He Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg Gly 20 25 30 <210> 16 <211> 31 <212> PRT <213> Artificial <223> Construcción sintética <221> VARIANTE <222> (1) .. (1) <223> Xaa en la posición 1 es N-isopropil-His <400> 16 Xaa Ala Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly 1 5 10 15 Gln Ala Ala Lys Glu Phe He Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg Gly 20 25 30 <210> 17 <211> 31 <212> PRT <213> Artificial <223> Construcción sintética <221> VARIANTE <222> (2 ) . . (2 ) <223> Xaa en la posición 2 es D-Ala - 10 - <400> 17 His Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly 1 5 10 15 Gln Ala Ala Lys Glu Phe He Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg Gly 20 25 30 <210> 18 <211> 31 <212> PRT <213> Artificial <223> Construcción sintética <221 > VARIANTE <222> ( 3 ) . . ( 3 ) <223> Xaa en la posición 3 es D-Glu <400> 18 His Ala Xaa Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly 1 5 10 15 Gln Ala Ala Lys Glu Phe He Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg Gly 20 25 30 <210> 19 <211 > 31 <212> PRT <213> Artificial <223> Construcción sintética <400> 19 - 11 - His Ala Asp Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly 1 5 10 15 Gln Ala Ala Lys Glu Phe He Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg Gly 20 25 30 <210> 20 <211> 31 <212 > PRT <213> Artificial <223> Construcción sintética <221> VARIANTE <222> ( 3 ) . . ( 3 ) <223> Xaa en la posición 3 es D-Asp <400> 20 His Ala Xaa Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly 1 5 10 . 15 Gln Ala Ala Lys Glu Phe He Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg Gly 20 25 30 <210> 21 <211> 31 <212> PRT <213> Arti ficial <223> Construcción sintética <221> VARIANTE <222> ( 4 ) . . ( 4 ) <223> Xaa en la posición 4 es D-Phe <400> 21 12 - His Ala Glu Xaa Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly 1 5 10 15 Gln Ala Ala Lys Glu Phe He Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg Gly 20 25 30 <210> 22 <211 > 31 <212> PRT <213> Arti ficial <223> Construcción sintética <400> 22 His Ala Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Ser 1 5 10 15 Arg Arg Ala Gln Glu Phe He Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg Gly 20 25 30 <210> 23 <211> 31 <212> PRT <213> Arti ficial <223> Construcción sintética <400> 23 His Ser Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Gly 1 5 10 15 Gln Ala Ala Lys Glu Phe He Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg Gly 20 25 30 <210> 24 <211> 31 <212> PRT <213> Artificial - 13 - <223> Construcción sintética <221> VARIANTE <222> (1)..(1) <223> Xaa en la posición 1 es His, D-histidina, desamino-histidina, 2-aminohistidina, beta-hidroxihistidina, homohistidina, alfa-fluorometilhistidina y alíametilhistidina <221> VARIANTE <222> (2) .. (2) <223> Xaa en la posición 2 es Ala, Gly, Val, Thr, lie y alfa- etil-Ala <221> VARIANTE <222> (15) .. (15) <223> Xaa en la posición 15 es Glu, Gln, Ala, Thr, Ser y Gly <221> VARIANTE <222> (21) .. (21) <223> Xaa en la posición 21 es Glu, Gln, Ala, Thr, Ser y Gly <221> VARIANTE <222> (31) .. (31) <223> Xaa en la posición 31 es Glu-OH ó está ausente <400> 24 14 - Xaa Xaa Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Xaa Gly 1 5 10 15 Gln Ala Ala Lys Xaa Phe He Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg Xaa 20 25 30 <210> 25 <211> 30 <212> PRT <213> Artificial <223> Construcción sintética <400> 25 His Gly Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly 1 5 10 15 Gln Ala Ala Lys Glu Phe He Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg 20 25 30 <210> 26 <211> 31 <212> PRT <213> Artificial <223> Construcción sintética <221> VARIANTE <222> ( 3 ) . . ( 3 ) <223> Xaa en la posición 3 es acetil-Lys <400> 26 His Ala Xaa Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly 1 5 10 15 Gln Ala Ala Lys Glu Phe He Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg Gly 20 25 30 <210> 27 - 15 - <211> 31 <212> PRT <213> Artificial <223> Construcción sintética <400> 27 His Ala Thr Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly 1 5 10 15 Gln Ala Ala Lys Glu Phe He Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg Gly 20 25 30 <210> 28 <211> 31 <212> PRT <213> Arti ficial <223> Construcción sintética <221> VARIANTE <222> ( 3 ) . . ( 3 ) <223> Xaa en la posición 3 es D-Thr <400> 28 His Ala Xaa Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly 1 5 10 15 Gln Ala Ala Lys Glu Phe He Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg Gly 20 25 30 <210> 29 <211 > 31 <212> PRT <213> Arti ficial - 16 - <223> Construcción sintética <400> 29 His Ala Asn Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly 1 5 10 15 Gln Ala Ala Lys Glu Phe He Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg Gly 20 25 30 <210> 30 <211> 31 <212> PRT <213> Artificial <223> Construcción sintética <221> VARIANTE <222> (3) .. (3) <223> Xaa en la posición 3 es D-Asn <400> 30 His Ala Xaa Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly 1 5 10 15 Gln Ala Ala Lys Glu Phe He Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg Gly 20 25 30 <210> 31 <211> 31 <212> PRT <213> Artificial <223> Construcción sintética <400> 31 - 17 - His Ala Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly 1 5 10 15 Arg Ala Ala Lys Glu Phe He Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg Gly 20 25 30 <210> 32 <211> 31 <212> PRT <213> Arti ficial <223> Construcción sintética <400> 32 His Ala Gl? Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly 1 5 10 15 Gln Arg Ala Lys Glu Phe He Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg Gly 20 25 30 <210> 33 <211> 28 <212> PRT <213> Arti ficial <223> Construcción sintética <221> VARIANTE <222> ( 28 ) . . ( 28 ) <223> Xaa en la posición 28 es Lys y Lys-Gly <400> 33 His Ala Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly 1 5 10 15 Gln Ala Ala Lys Glu Phe He Ala Trp Leu Val Xaa 20 25 <210> 34 - 18 - <211> 28 <212> PRT <213> Artificial <223> Construcción sintética <221> VARIANTE <222> (28) .. (28) <223> Xaa en la posición 28 es Lys, Lys-Gly, Lys-Gly-Arg <400> 34 His Ala Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly 1 5 10 15 Gln Ala Ala Lys Glu Phe He Ala Trp Leu Val Xaa 20 25 <210> 35 <211 > 31 <212> PRT <213> Arti ficial <223> Construcción sintética <221> VARIANTE <222> ( 1 ) . . ( 1 ) <223> Xaa en la posición 1 es 4-imidazopropionilo, 4-imidazoacetilo, 4-imidazo-alfa ó alfa-dimetilacetilo <221> VARIANTE <222> (20).. (20) <223> Xaa en la posición 20 es Lys ó Arg <221> VARIANTE <222> (31) .. (31) - 19 - <223> Xaa en la posición 31 es Gly o está ausente <400> 35 Xaa Ala Glu Gly Thr Phe Thr Ser Asp Val Ser Ser Tyr Leu Glu Gly 1 5 10 15 Gln Ala Ala Xaa Glu Phe He Ala Trp Leu Val Lys Gly Arg Xaa 20 25 30

Claims (15)

1. -
2. REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecedente, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones: 1. El uso de un compuesto selecionado del grupo que consiste de GLP-1, análogos de GLP-1, derivados de GLP-1 y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, para la preparación de un medicamento para reducir la mortalidad y morbilidad después de un ataque fulminante, a una dosis efectiva para normalizar la glucosa la concentración sanguínea de la glucosa. 2. El uso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el compuesto se administración por vía intravenosa.
3. 3. El uso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el compuesto se administra por vía subcutánea.
4. 4. El uso de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque la administración es continua.
5. 5. El uso de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado porque la velocidad de administración del compuesto, está entre 0.25 y 6 pmol/kg/min.
6. 6. El uso de conformidad con la reivindicación 5, caracterizado porque la velocidad de administración del compuesto está entre 0.5 y 2.4 pmol/kg/min. - -
7. 7. El uso de conformidad con la reivindicación 5, caracterizado porque la velocidad de administración del compuesto está entre aproximadamente 0.5 y aproximadamente 1.2 pmol/kg/min.
8. 8. El uso de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque el compuesto es administrado por vía intermitente.
9. 9. El uso de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque el compuesto se administra por vía intravenosa y también se administra por alguna otra ruta parenteral .
10. 10. El uso de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque la otra ruta parenteral es la ruta subcutánea.
11. 11. El uso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el compuesto es GLP-l(7-36) amida, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.
12. 12. El uso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el compuesto es GLP-1 (7 a 37, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma
13. 13. El uso de conformidad con la reivindicación 1, caracterizado porque el compuesto es Val8-GLP-1 (7-37) , o una sal farmacéuticamente de la misma.
14. 14. El uso de un compuesto que ejerce una actividad insulinotrópica al interactuar con el mismo receptor o receptores, con los cuales el GLP-1, análogos de GLP-1 y derivados de GLP-1 interactúan al ejercer su actividad insulinotrópica, para la preparación de un medicamento para reducir la morbilidad y mortalidad después de un ataque fulminante.
15. 15. El uso de un compuesto que incrementa la sensibilidad de la insulina al interactúar con el mismo receptor o receptores con los cuales el GLP-1, análogos de GLP-1 y derivados de GLP-1 interactúan para incrementar la sensibilidad, para la preparación de un medicamento para reducir la morbilidad y mortalidad después de un ataque fulminante .