JPH10501526A

JPH10501526A - 多薬物耐性に対する作用物質としてのカルバゾール誘導体

Info

Publication number: JPH10501526A
Application number: JP8500244A
Authority: JP
Inventors: レゲナス，ウルス; カラバッティ，ジョルジオ; バッケル，オスカル
Original assignee: チバ−ガイギーアクチェンゲゼルシャフト
Priority date: 1994-06-01
Filing date: 1995-05-19
Publication date: 1998-02-10
Also published as: EP0763040A1; US5827846A; WO1995032974A1; AU2565795A

Abstract

(57)【要約】次式 I （式中、R₁は、ホルミル基、非置換もしくはアリール基で置換された炭素原子29個までの脂肪族炭化水素基、またはアリール基であり、R₂は、水素原子、C₁-C₅アルキル基、ベンゾイル基、低級アルカノイル基または遊離もしくは保護されたアミノ基を有するα- アミノアシル基であり、R₃は、水素原子、ヒドロキシ基、低級アルコキシ基またはオキソ基であり、またはR₁はメトキシカルボニルメチル基であり、R₂はベンゾイル基であり、そしてR₃は水素原子である。）で表される公知または新規のスタウロスポリン誘導体の、抗腫瘍剤たとえばビンブラスチンまたはアドリアマイシンに対する多薬物耐性を避けるかまたは除くための利用が記載されている。

Description

【発明の詳細な説明】多薬物耐性に対する作用物質としてのカルバゾール誘導体本発明は、抗腫瘍剤に対する多薬物耐性を避けるかまたは除去するために公知または新規スタウロスポリン誘導体（インドロ- カルバゾール誘導体）を使用すること、生成物としての新規誘導体、新規スタウロスポリン誘導体の調製方法、および新規誘導体を含む医薬組成物に関する。スタウロスポリンは、本発明の誘導体の基礎を形成するものであり、ストレプトミセススタウロスポレウス（Streptomyces staurosporeus）AWAYA,TAKAHASH I and OMURA，sp．nov．AM2282の培養物から早くも1977年には単離された(エス．オームラ(S.Omura)ら、J．Antibiot．30，275 - 281(1977))参照)。これまでは、絶対的ではなく相対的なスタウロスポリンの配置のみが知られていた。絶対配置は、最近になってからエヌ．フナト(N．Funato)らにより、Tetrahedron Let ters 35:8，1251-1254(1994)で公開され、これはスタウロスポリンの相対的配置を示す文献に予め使用された構造の鏡像体に相当する。したがって、Tetrahedro n Letters 刊行物は、文字通り“これまでに通常使用されてきたスタウロスポリンについての立体化学表記は訂正されるべきである”と勧告している。これまで絶対的配置が知られていなかったとはいえ、用語“スタウロスポリン誘導体”により明らかに確立されていた。本明細書においては、新しい式を使用する。これまで知られてきたスタウロスポリンおよびほとんどのスタウロスポリン誘導体は、プロテインキナーゼC における強力な阻害作用を示す。プロテインキナーゼC は、リン脂質およびカルシウムに依存するものであり、これはいくつかの形で細胞内に生じ、様々な基本的方法たとえば信号伝達、増殖および分化ならびにホルモンおよび神経伝達物質の分泌に関与する。この酵素の活性化は、レセプター仲介による細胞膜のリン脂質の加水分解または特定の腫瘍形成促進活性剤との直接の相互反応のいずれかによりもたらされる。レセプター仲介による信号伝達に対する細胞の感受性は、プロテインキナーゼC (信号伝達物質としての)の活性を変性することにより著しく影響されうる。プロテインキナーゼC の活性に影響を与えうる化合物は、腫瘍阻害剤、抗 - 炎症剤、免疫調節剤および抗菌性有効成分として使用されることができ、これはアテローム性動脈硬化症および冠血管系および中枢神経系の疾患に対する作用物質として興味あるものである。プロテインキナーゼC における阻害作用は、スタウロスポリンのラクタム窒素原子が水素原子の代わりに他の置換基を有する場合、すなわち以後に示す式I における置換基R₁が水素原子以外である場合、ほぼ20倍- 100 倍以上弱くなる。特に、以下の式I において基R₂も同時に水素原子以外である場合、プロテインキナーゼC における阻害作用は、すべての実際的目的に対し失われる。以下に示す式 I における置換基R₁が水素原子以外である場合、抗腫瘍活性もまた著しく低下する。これが、多くの研究が最近この分野で行われそしてR₁が水素原子である非常に多くの誘導体が調製されているのに、文献にはR₁が水素原子以外であるスタウロスポリン誘導体のごくわずかだけが記載されているという理由であろう。すなわち、R₁がベンジル基であり、R₂がベンゾイル基であり、R₃が水素原子である以下の式I に相当する化合物は、主に陰性の対照物としてだけ言及されてきた。古くからある細胞静止剤に対する耐性の出現は、癌の化学療法において重要な問題である。耐性は多くの場合有効成分の細胞内濃度における減少を伴う。この減少はしばしば膜結合した170 キロダルトンの糖たんぱく質(Pgp) の出現に関係する。このたんぱく質は広い特異性を有するポンプとして作用し、頻繁に使用される抗腫瘍剤たとえばビンカアルカロイド(Vinca alkaloids)、アントラサイクリン、ポドフィロトキシンおよびアクチノマイシンD を細胞外へ運び出すことができる。驚くべきことに、ここにおいて以下に示す式I のスタウロスポリン誘導体、なかでも耐性ヒトKB-8511 細胞の例により示されうるように、抗腫瘍剤たとえば細胞静止剤の作用に対して多薬物耐性細胞を完全に再- 感受性化することができることがわかった。これは、前記のように、すべての誘導体がプロテインキナーゼ C において阻害作用を非常に弱められるかまたは阻害作用を全く示さず、そして抗腫瘍活性もまた著しく減少していても達成される。また驚くべきことに、高度の感受性化である。この点において、式I のスタウロスポリン誘導体はR₁が水素原子である同様の誘導体と大体等しい。通常の細胞静止剤と著しい抗腫瘍活性およびプロテインキナーゼC における阻害作用を有するスタウロスポリン誘導体との組合せと比べて、通常の細胞静止剤と以下に示す式I で表されるスタウロスポリン誘導体との組合せはプロテインキナーゼC 阻害作用に関係する副作用が生じないかまたは非常に弱い形でのみ起きる点で有利である。プロテインキナーゼC 阻害スタウロスポリン誘導体をたとえば犬に投与すると、その結果、嘔吐といってもよい程のむかつきが起きる。後者は有効成分もまた吐き出され、有効的に摂取された有効成分の投与量が予定しそして投与された量と異なる結果になるので、特に経口投与による抗腫瘍剤にとって不利であることは理解されるであろう。本発明は、次式 I （式中、 R₁は、ホルミル基、非置換もしくはアリールで置換された炭素原子29個までの脂肪族炭化水素基、またはアリール基であり、 R₂は、水素原子、C₁-C₅アルキル基、ベンゾイル基、低級アルカノイル基または遊離もしくは保護されたアミノ基を有するα- アミノアシル基であり、 R₃は、水素原子、ヒドロキシ基、低級アルコキシ基またはオキソ基であり、または R₁はメトキシカルボニルメチル基であり、 R₂はベンゾイル基であり、 R₃は水素原子である）で表されるスタウロスポリン誘導体および少なくとも一つの塩形成基を有する式I で表される化合物の作用物質上許容されうる塩を、抗腫瘍剤に対する多薬物耐性を避けるかまたは除去するために使用することに関する。特記しないかぎり、この開示において、“低級”と記した有機基は、炭素原子７個以下、好ましくは４個以下を含む。炭素原子29個までの非置換脂肪族炭化水素基R₁は、炭素原子29個まで特に18個までの非環式炭化水素基であり、飽和または不飽和である。不飽和基は、一つ以上の、特に結合したおよび／または単離した、多重結合（二重および／または三重結合）のものである。非置換された脂肪族炭化水素基は、特に直線または枝分かれした低級アルキル、低級アルケニル、低級アルカジエニルまたは低級アルキニル基である。低級アルキル基は、たとえば、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、イソブチル、sec-ブチルまたはtert- ブチル基、または n-ペンチル、イソペンチル、n-ヘキシル、イソヘキシルまたはn-ヘプチル基である；低級アルケニル基は、たとえばアリル、プロペニル、イソプロペニル、2-もしくは3-メタリルまたは2-もしくは3-ブテニル基である；低級アルカジエニル基は、たとえば1-ペンタ−2,4-ジエニル基である；低級アルキニル基は、たとえばプロパルギルまたは2-ブチニル基である。相当する不飽和基において、二重結合は特に遊離基に対してα- 位より高い位置にある。アリール基で置換された脂肪族炭化水素基R₁は、脂肪族炭化水素基特に最大7 個まで、好ましくは最大4 個までの炭化水素基、たとえばメチル、エチルおよびビニル基で、以下に定義するアリール基一つ以上を有するようなものである。アリール基は特にフェニル基であるが、ナフチルたとえば1-または2-ナフチル基、ビフェニリルたとえば特に4-ビフェニリル基または、ならびにアンスリル、フルオレニルまたはアズレニル基でよく、または一つ以上の飽和環を有するその芳香族類似物である。好ましいアリール- 低級アルキル基およびアリール- 低級アルケニル基は、たとえば末端フェニル基を含むフェニル- 低級アルキルまたはフェニル- 低級アルケニル基、たとえばベンジル、フェネチル、1-、2-または3-フェニルプロピル、ジフェニルメチル（ベンズヒドリル）、トリチルおよびシンナミル基であり、ならびに1-または2-ナフチルメチル基である。非環式基たとえば低級アルキル基を有するアリール基の中では、特に異なった位置にメチル基を有する特にo- 、m-およびp-トリルおよびキシリル基が言及される。 C₁-C₅アルキル基R₂は、たとえば、エチル、n-プロピル、n-ブチルまたは好ましくはメチル基である。低級アルカノイル基R₂は、たとえばアセチル基である。遊離アミノ基を有するα- アミノアシル基としてのR₂は、α- アミノ酸、特に天然産生のL 形α- アミノ酸たとえばグリシン、フェニルグリシン、アラニン、フェニルアラニン、プロリン、ロイシン、セリン、バリン、チロシン、アルギニン、ヒスチジンまたはアスパラギンから誘導されるアシル基である。保護されたアミノ基を有するα- アミノアシル基としてのR₂において、アミノ基は、アミノ- 保護基、特に以下に記載のものの一つたとえば低級アルコキシカルボニルまたはベンジルオキシカルボニルの一つにより保護されている。低級アルコキシ基R₃は好ましくはメトキシ基である。それらの性質にしたがって、本発明の化合物は、これらが塩形成基を含む場合には、塩の形、特に作用物質上許容されうるすなわち生理学的に寛容されうる塩でもよい。単離または精製の目的で、作用物質上不適当な塩を使用することもできる。作用物質上許容されうる塩だけが治療に使用され、これらが好ましい。したがって、遊離酸基たとえば遊離スルホ、ホスホリルまたはカルボキシ基を有する式I の化合物は、塩形成塩基成分とともに、塩の形好ましくは生理学的に寛容される塩の形でもよい。特に金属またはアンモニウム塩たとえばアルカリ金属およびアルカリ土類金属塩たとえばナトリウム、カリウム、マグネシウムもしくはカルシウム塩、またはアンモニアもしくは好適な有機アミンとのアンモニウム塩、特に第三モノアミンおよび複素環式塩基たとえばトリエチルアミン、トリ-（2-ヒドロキシエチル）- アミン、N-エチルピペリジンまたはN,N'- ジメチルピペラジンとのアンモニウム塩が考慮される。塩基性の本発明化合物は、また付加塩特に無機および有機酸との酸付加塩の形でもよいが、また第四塩の形でもよい。したがって、たとえば、塩基性基たとえばアミノ基を置換基として有する式I の化合物は、通常使用される酸との酸付加塩を形成してもよい。好適な酸は、たとえばハロゲン化水素酸、たとえば塩酸および臭化水素酸、硫酸、リン酸、硝酸または過塩素酸および脂肪族、脂環式、芳香族または複素環式カルボン酸もしくはスルホン酸たとえば蟻酸、酢酸、プロピオン酸、琥珀酸、グリコール酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、フマル酸、マレイン酸、ヒドロキシマレンイ酸、オキザル酸、ピルビン酸、フェニル酢酸、安息香酸、p-アミノ安息香酸、アントラニル酸、p-ヒドロキシ安息香酸、サリチル酸、p-アミノサリチル酸、エンボン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ヒドロキシエタンスルホン酸、エチレンジスルホン酸、ハロベンゼンスルホン酸、トルエン- スルホン酸、ナフタレンスルホン酸またはスルファニル酸、またメチオニン、トリプトファン、リシンもしくはアルギニン、またはアスコルビン酸である。式I で表されるスタウロスポリン誘導体は、ヒトKB-8511 細胞の場合において本明細書の実施例の項で示すように、抗- 腫瘍剤たとえば細胞静止剤の作用に対し多薬物耐性細胞を十分に再感受性化することができる。このような抗- 腫瘍剤は、たとえばドクソルビシン、ダウノルビシン、ビンクリスチン、エトポサイド、タクソール、ミトマイシンC 、アクチノマイシンD 、ミトザントロンおよび特にビンブラスチンおよびアドリアマイシンである。式I で表されるスタウロスポリン誘導体および少なくとも一つ塩形成基を有するこのような誘導体の作用物質上許容されうる塩はしたがって腫瘍疾患の治療のためにこれらの抗- 腫瘍剤の一つと組み合わせて使用されうる。前記したように、プロテインキナーゼC における式I の阻害作用はもはや存在しないかまたはR₁が水素原子である類似化合物と比べても非常に弱い。プロテインキナーゼC 阻害作用を測定するために、ブタ大脳プロテインキナーゼC を使用し、これはティ．ウチダおよびシー．アール．フィルバーン（T.Uchida and C.R .Filburn）、J.Biol．Chem．259,12311-4(1984)にしたがって精製される。式I で表される化合物のプロテインキナーゼC の阻害作用は、ディ．ファブロ(D.Fab bro)ら、Arch．Biochem．Biophys．239，102-111(1985)の方法に従って予め測定された。前記の方法で使用されたブタ大脳プロテインキナーゼC はプロテインキナーゼC の異なったタイプ（イソタイプ）の混合物である。この理由のために、今日では、純粋な組換えイソタイプがブタ大脳プロテインキナーゼC の代わりにほとんど使用される。組換えPKC イソタイプは、以下のようにクローン化し、発現しそして精製される：バキュロウィルスおよびそのクローニングの助けを借りた様々なたんぱく質の調製およびSf9 昆虫細胞からの単離は、エム．ディ．サマーズ(M.D.Summers)およびジィ．イー．スミス(G.E.Smith)“バキュロウィルスおよび昆虫細胞培養手段のための手作業方法(A manual method for baculovirus vectors and insect cell culture procedure) ”、Texas Agricul．Exptl．Station Bull.(1987)，1555に記載されているように行われる。Sf9 細胞におけるPKC-α(ウシ)、PKC-β1(ヒト)、PKC-β2(ヒト)およびPKC-γ(ヒト／ウシハイブリッド)の発現のための組換えウィルスの構築および単離が、ステイブルら(Stable et al.)、［エス．ステイブル(S.Stable)、エム．リアナゲ(M.Liyanage)およびディ．フリス(D.Frith)、“Expression of pro tein kinase C isozymes in insect cells and isolation of recombinant prot eins”,Meth．Neurosc．(1933)］に記載のように行われる。Sf9 細胞におけるPK C イソタイプの調製はステイブルらにより特定されたように行われ、そして酵素の精製はマックグリンらにより公開された方法により行われる［イー．マックグリン(E.McGlynn)、ジェイリベタンツ(J.Liebetanz)、エス．ロイテナー(S.Reu tener)、ジェイ．ウッド(J.Wood)、エヌ．ビィ．リドン(N.B.Lydon)、エッチ．ホフスター(H．Hofstetter)、エム．バネック(M.Vanek)、ティ．メイヤー(T.Mey er)およびディ．ファブロ(D.Fabbro)、“Expression and partial characteriza tion of rat protein kinase C- δand protein kinase C- ζ in insect cells using recombinant baculovirus”、J.Cell．Biochem．49.239-250(1992)]。組換えPKC-δ(ラット)、PKC-ε(ラット)、PKC- ζ iラット）およびPKC- η(マウス)の生成およびその発現ならびに精製について、リアナゲ(Liyanage)らにより記載された手法[“Protein kionase C group B menbers PKC- δ,-ε,-ζおよび PKC-λ：Comparision of properties of recombinant proteins in vitro and i n vivo”，Biochem．J．283,781-787(1992)]およびマックグリンらの手法(前記参照)は、以下のようであるが、さらにPKC-ηの発現についてトランスファーベクターpAc360を使用することを付け加える[ブィ．ルクノウおよびエム．デイ．サマーズ(V.Luckow and M.D.Summers)“Trends in the development of bacul ovirus expression”,Biotechnology 6,47-55(1988)]。前記方法で得られる組換えPKC イソタイプの活性の測定は、脂質およびカルシウム(補因子)の不存在下に行われる。硫酸プロタミンは補因子の不存在下にホスホリル化されるが、これに対し基質として使用される。酵素の活性は硫酸プロタミンに対し³²Pからγ- [³²P]-ATPへのトランスファーを反映する。硫酸プロタミンは、各々4 個のC 末端アルギニン残基を含むポリペプチドであるの混合物である。ホスフェート組込みの測定は、以下の条件下に行われる：反応混合物100 μ l は、最終濃度20ミリモルTRIS-HClpH 7.4、10ミリモルMg[NO₃]₂、0.5 mg/ml 硫酸プロタミン、10μモル ATP(0.1μCiγ-[³²P]-ATP;10 Ci/mol；アマーシャム社 (Amersham)、英国のリトルカルフォント(Little Chalfont United Kingdom)、様々な阻害基質濃度および酵素0.5-2.5U(単位；1 単位は、前述のγ-[³²P]-ATPから³²ヒストンHI[シグマ社(Sigma),V-S型]へ1 分間にP 1 ナノモルがトランスファーする酵素の量/ たんぱく質1mg である)を含む。反応は、酵素を添加しそして32℃まで移すことにより開始する。反応時間は20分間である。その後、反応は、P81 クロマトグラフ紙(英国、メイドストーンのワットマン社(Whatman，Maids tone，United Kingdom))へ50μl アリコートを滴下することにより停止される。非結合γ-[³²P]-ATPおよびヌクレオチドフラグメントをジェイ．ジェイ．ウィット(J.J.Witt)およびアール．ロスコスキー(R.Roskoski)、“Rapid protein kina se assay using Phospho-cellulose-paper absorption”,Anal.Biochem．66,253 -258(1975)に記載のように洗浄手段により除去後、基質のホスホリル化をシンチレーション測定により調べる。本明細書において、式I で表される化合物は、これらがR₁が水素原子である類似化合物に見られるIC₅₀値より約20-1000 倍大きい濃度IC₅₀になるまでプロテインキナーゼC(PKC)の様々なイソタイプを一般には阻害しない。 R₁が炭素原子29個までを有し低級アルキル基以外の非置換脂肪族炭化水素基、または炭素原子29個までを有しアリール基により置換された脂肪族炭化水素基、またはアリール基であり、そして他の置換基は前記定義のものである式I で表される化合物、および少なくとも一つの塩形成基を有する式I で表される化合物の作用物質上許容されうる塩の前記使用が特に好ましい。 R₁が低級アルキル基たとえば特にメチル基またはベンジル基であり、R₂が水素原子、ベンゾイル基またはグリシル、フェニルグリシル、アラニル、フェニルアラニル、プロピル、ロイシル、セリル、バリル、チロシル、アルギニル、ヒスチジル、およびアスパラギルであり、R₃は水素原子またはオキソ基であるか、またはR₁はメトキシカルボニルメチル基であり、R₂はベンゾイル基であり、R₃は水素原子である式I で表される化合物、および少なくとも一つの塩形成基を有する式 I で表される化合物の作用物質上許容されうる塩を抗- 腫瘍剤に対する多薬物耐性を避けるかまたは除去することに使用することが特に好ましい。特に好ましくは、実施例に記載の式I で表される化合物および少なくとも一つの塩形成基を有するこのような化合物の作用物質上許容されうる塩の前記使用である。本発明はまた先行技術に属さない式I で表される化合物自体、すなわち式中R₁ が炭素原子6-29個の非置換脂肪族炭化水素基、アリール基で置換された炭素原子 29個までの脂肪族炭化水素基であってベンジル基以外の基、またはアリール基であり、R₂が水素原子、C₁-C₅ アルキル基、ベンゾイル基、低級アルカノイル基またはグリシル、フェニルグリシル、アラニル、フェニルアラニル、プロピル、ロイシル、セリル、バリル、チロシル、アルギニル、ヒスチジルおよびアスパラギルから選択されるα- アミノアシル基であり、そしてR₃は水素原子、ヒドロキシ基、低級アルコキシ基またはオキソ基である式I で表される化合物、および少なくとも一つの塩形成基を有する式I で表されるこのような化合物の塩に関する。好ましくは、式中R₁が炭素原子6-29個の非置換脂肪族炭化水素基、アリール基で置換された炭素原子29個までの脂肪族炭化水素基であってベンジル基以外の基、またはアリール基であり、R₂がグリシル、フェニルグリシル、アラニル、フェニルアラニル、プロピル、ロイシル、セリル、バリル、チロシル、アルギニル、ヒスチジルおよびアスパラギルから選択されるα- アミノアシル基であり、そしてR₃は水素原子またはオキソ基である式I で表される化合物、および少なくとも一つの塩形成基を有する式I で表されるこのような化合物の塩である。特に好ましくは、式中R₁がベンジル基であり、R₂が遊離または保護されたアミノアシル基、特にグリシル、フェニルグリシル、アラニル、フェニルアラニル、プロピル、ロイシル、セリル、バリル、チロシル、アルギニル、ヒスチジルおよびアスパラギルから選択されるα- アミノアシル基であり、そしてR₃はヒドロキシ基、低級アルコキシ基、オキソ基または好ましくは水素原子である式I で表される化合物、および少なくとも一つの塩形成基を有する式I で表されるこのような化合物の塩である。最も好ましくは、先行技術を越えた新規の実施例に記載の式I で表される化合物、および少なくとも一つの塩形成基を有する式I で表されるこのような化合物の塩である。式 Iの化合物および少なくとも一つの塩形成基を有するこのような化合物の塩は、それ自体公知の方法で調製される。本発明の方法は以下a)又はb)の方法を含んでなる： a) 式II （式中、置換基は前記定義のものであり、式IIの化合物に存在する官能基はいずれも、必要ならば保護された形である）で表される化合物、または少なくとも一つの塩形成基を有するこのような化合物の塩を、式 R₁ Y （III）（式中、R₁は前記定義のものであり、ここに存在する官能基はいずれも必要ならば保護された形であり、そしてY は脱離基またはその一方の端が基R₁における水素原子に代わるものである別の単結合である）で表される化合物、または少なくとも一つの塩形成基を有するこれらの化合物の塩と反応させ、次いでいずれの保護基も除去するか、または b) 式IV （式中、置換基は前記定義のものであり、ここに存在する官能基はいずれも必要ならば保護された形である）で表される化合物、または少なくとも一つ塩形成基を有するこのような化合物の塩を、式 R₂ ^a X （V）（式中、R₂ ^aはR₂の前記定義のものであるが但し水素原子を除くものであり、基R₂ ^a に存在する官能基はいずれも必要ならば保護された形であり、X は脱離基または別の単結合であり、その一方の端部が基R₂ ^aにおける水素原子と代わるものである）で表される化合物または少なくとも一つの塩形成基を有するこれらの化合物の塩と反応させ、次いでいずれの保護基をも除去し、そして所望により、得られた式 Iで表される化合物を式 Iで表される異なった化合物へ変転し、および／または遊離形で得られる式 Iの化合物をその塩へ変換し、および／または塩の形で得られる式 Iの化合物をその遊離形または異なった塩へ変換する。前記方法の変形を実施する方法を、以下に詳細に説明する：一般的注意：式 Iの最終生成物は、式 Iの別の最終生成物の調製のための出発材料において保護基としても使用されることができる置換基を含んでもよい。このテキストの範囲において、特に内容から逸脱しない限り、用語“保護基”は、特に好ましい式 Iの最終生成物の構成部分ではない容易に脱離可能な基のみを意味する。方法a)：式IIおよびIII の化合物に存在しうる遊離官能基は、好ましくは容易に脱離可能な保護基により保護されたものであり、これは特に遊離アミノまたはカルボキシ基である。また遊離ヒドロキシ基を保護することが有利であるかもしれない。所望の反応に関与すると思われる官能基は、もちろん保護されない。保護基およびこれらの導入および除去方法は、たとえば以下に記載されている：“有機化学における保護基(Protective Groups in Organic Chemistry)”，プレナムプレス社(Plenum Press)、ロンドン、ニューヨーク、1973 および“有機化学の方法(Methoden der organischen Chemie)”ホーベン- ウェイル(Houben -Weyl)、4版、Vol.15/1 、ゲオルグ- ティーメフェアラーク(Georg-Thieme-Ve rlag)、シュトゥットガルト(Stuttgart)、1974ならびにテオドラダブリュ．グリーネ(Theodora W．Greene)、“有機合成における保護基(Protective Groups i n Organic Synthesis)”ジョンウィリーアンドサンズ社(John Wiley & Sons) 、ニューヨーク 1981。これらが簡単に、すなわちたとえば加溶媒分解、還元、光分解によりまたは生理学的条件下に不所望な二次反応を起こすことなく除去されうることが保護基の特徴である。保護されたアミノ基は、たとえば容易に分解可能なアシルアミノ、アリールメチルアミノ、エーテル化メルカプトアミノ、2-アシル- 低級アルケ-1- エン- イル- アミノ、シリル- アミノまたはスタニルアミノ基の形またはアジド基の形である。相当するアシルアミノ基において、アシル基はたとえば炭素原子18個までを有する有機カルボン酸のアシル基、特に非置換または置換たとえばハロ- またはアリール置換されたアルカンカルボン酸または非置換もしくは置換たとえばハロ- 、低級アルコキシ- またはニトロ- 置換された安息香酸、またはカルボン酸半エステルのアシル基である。このようなアシル基は、たとえば低級アルカノイル、たとえばホルミル、アセチルもしくはプロピオニル基、ハロ- 低級アルカノイル、たとえば2-ハロアセチル、特に2-クロロ- 、2-ブロモ- 、2-ヨード- 、2,2,2, - トリフルオロ- もしくは2,2,2-トリクロロ- アセチル、非置換または置換たとえばハロ- 、低級アルコキシ- もしくはニトロ- 置換されたベンゾイル、たとえばベンゾイル、4-クロロベンゾイル、4-メトキシベンゾイルもしくは4-ニトロベンゾイル、または低級アルキル基の1-位が枝分かれしたまたは1-もしくは2-位が好適に置換された低級アルコキシカルボニル、特にtert- 低級アルコキシカルボニルたとえばtert- ブトキシカルボニル基、好ましくはフェニル基である一つまたは二つのアリール基を有し、非置換またはたとえば低級アルキル、特にtert- 低級アルキルたとえばtert- ブチル、低級アルコキシたとえばメトキシ基、ヒドロキシ基、ハロゲンたとえば塩素原子、および／またはニトロ基により置換されたアリールメトキシカルボニル基、たとえば非置換または置換されたベンジルオキシカルボニル、たとえば4-ニトロベンジルオキシカルボニル、または置換されたジフェニルメトキシカルボニルたとえばベンズヒドロキシカルボニルまたはジ -（4-メトキシフェニル）- メトキシカルボニル基、アロイルメトキシカルボニル基（式中、アロイル基は好ましくは非置換またはたとえばハロゲン原子たとえば臭素で置換されたベンゾイル基である）、たとえばフェニルアシルオキシカルボニル、2-ハロ- 低級アルコキシカルボニル、たとえば2,2,2-トリクロロエトキシカルボニル、2-ブロモエトキシカルボニルまたは2-ヨード- エトキシカルボニルまたは2-(トリ置換シリル)- エトキシカルボニルであって各置換基は独立して非置換またはたとえば低級アルキル、低級アルコキシ、アリール、ハロゲンまたはニトロ基により置換されたもの、たとえば相当する非置換または置換された、低級アルキル、フェニル- 低級アルキル、シクロアルキルまたはフェニルたとえば2-トリ- 低級アルキルシリルエトキシカルボニル、たとえば2-トリメチルシリルエトキシカルボニルまたは2-(ジ- n- ブチル- メチル- シリル)- エトキシカルボニル、または2-トリアリールシリルエトキシカルボニルたとえば2-トリフェニルシリルエトキシカルボニル基である。アミノ保護基として好適な他のアシル基は、また有機リン酸基、ホスホン酸もしくはホスフィン酸、たとえばジ- 低級アルキルホスホリル、たとえばジメチルホスホリル、ジエチルホスホリル、ジ-n- プロピルホスホリル、ジイソプロピルホスホリル、ジシクロアルキルホスホリル、ジシクロヘキシルホスホリル、非置換または置換されたジフェニルホスホリル、たとえばジフェニルホスホリル、非置換または置換されたたとえばニトロ- 置換された、ジ(フェニル- 低級アルキル)- ホスホリル、たとえばジベンジルホスホリルまたはジ-（4-ニトロベンジル）- ホスホリル、非置換または置換されたフェニルオキシ- フェニル- ホスホリルたとえばフェニルオキシフェニル- ホスホリル、ジ- 低級アルキルホスフィニル、たとえばジエチルホスフィニル、または非置換または置換されたジフェニルホスフィニル、たとえばジフェニルホスフィニルである。モノ- 、ジ- または特にトリ- アリールメチルアミノ基であるアリールメチルアミノ基において、アリール基は特に非置換または置換されたフェニル基である。このような基は、たとえばベンジル、ジフェニルメチル- およびとくにトリチル- アミノ基である。このような基で保護されたアミノ基におけるエーテル化メルカプト基は、特にアリールチオ- またはアリール- 低級アルキルチオであってその際アリールは特に非置換またはたとえば低級アルキル、たとえばメチルまたはtert- ブチル基、低級アルコキシ、たとえばメトキシ基、ハロゲンたとえばクロロにより、および／またはニトロ基により置換されたフェニルである。相当するアミノ保護基は、たとえば4-ニトロフェニルチオ基である。アミノ保護基として使用されうる2-アシル- 低級アルケ-1-エン-1- イル基において、アシル基は、たとえば低級アルカンカルボン酸、非置換またはたとえば低級アルキル、たとえばメチルまたはtert- ブチル基、低級アルコキシ、たとえばメトキシ基、ハロゲンたとえばクロロにより、および／またはニトロ基により置換された安息香酸の相当する基、または特にカルボン酸半エステル、たとえばカルボン酸低級アルキル半エステルである。相当する保護基は特に- 低級アルカノイル- プロプ- 1-エン- 2-イル基たとえば1-アセチル- プロプ- 1-エン−2-イル基または1-低級アルコキシカルボニル- プロプ- 1-エン−2-イル基たとえば1- エトキシカルボニル- プロプ- 1-エン- 2-イル基である。好ましいアミノ保護基は、カルボン酸半エステルのアシル基、特にtert- ブトキシカルボニル、たとえば非置換または前記のように置換されたベンジルオキシカルボニル、たとえば4-ニトロ- ベンジルオキシカルボニル、またはジフェニルメトキシカルボニル、または2-ハロ- 低級アルコキシカルボニル、たとえば2,2, 2-トリクロロエトキシカルボニル、ならびにトリチルまたはホルミル基である。カルボキシ基は通常エステル形で保護されており、たとえばエステル基は穏やかな条件下で容易に分解されうる。この方法で保護されたカルボキシ基は、エステル化基特に1 位が枝分かれしたまたは1-または2-位が好適に置換された低級アルキル基を含む。エステル化形における好ましいカルボキシ基は、とりわけtert- 低級アルコキシカルボニルたとえばtert- ブトキシカルボニル、非置換または低級アルキル基たとえばtert- 低級アルキルたとえばte rt- ブチル基、低級アルコキシたとえばメトキシ基、ヒドロキシ基、ハロゲンたとえば塩素により、および／またはニトロ基によりモノ- もしくはポリ- 置換された一つまたは二つのアリール基を有するアリールメトキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル基、または非置換または前記のように置換されたジフェニルメトキシカルボニル基たとえばジフェニルメトキシカルボニルまたはジ-（4- メトキシフェニル）- メトキシカルボニル基、1-低級アルコキシ- 低級アルコキシカルボニルたとえばメトキシメトキシカルボニル、1-メトキシエトキシカルボニルまたは1-エトキシメトキシカルボニル、1-低級アルキル- チオ- 低級アルコキシカルボニル基たとえば1-メチルチオメトキシカルボニルまたは1-エチルチオエトキシカルボニル、アロイルメトキシカルボニルであり、その際アロイル基は非置換またはたとえばハロゲンたとえば臭素により置換された基、たとえばフェナシルオキシカルボニル基、2-ハロ- 低級アルコキシカルボニル基たとえば2,2,2- トリクロロエトキシカルボニル、2-ブロモエトキシカルボニルまたは2-ヨードエトキシカルボニル、または2-(トリ置換シリル)エトキシカルボニル基であって、各置換基は独立して非置換またはたとえば低級アルキル、低級アルコキシ、アリール、ハロゲンおよび／またはニトロ基により置換された脂肪族、芳香脂肪族、脂環式または芳香族炭化水素基、たとえば相当する非置換またはたとえば低級アルキル、フェニル- 低級アルキル、シクロアルキルまたはフェニル、たとえば2- トリ- 低級アルキルシリルエトキシカルボニル、2- トリメチルシリルエトキシカルボニルまたは2-(ジ-n- ブチル- メチル- シリル)- エトキシカルボニル、または2-トリアリールシリルエトキシカルボニル、たとえば2-トリフェニルシリルエトキシカルボニルである。ここで記載する有機シリルおよびスタニル基は、好ましくは珪素またはスズ原子の置換基として低級アルキル基、特にメチル基を有する。相当するシリルおよびスタニル基は、特に、トリ- 低級アルキルシリル、とくにトリメチルシリル基、またはジメチル- tert- ブチル- シリル基、または相当する置換されたスタニル基、たとえばトリ- n-ブチル- スタニル基である。好ましい保護カルキシ基は、tert- 低級アルコキシカルボニル、たとえばtert - ブトキシ- カルボニル、および特に非置換またはたとえば前記基で置換されたベンゾイルオキシカルボニル基、たとえば4-ニトロベンジルオキシカルボニルまたはジフェニルメトキシカルボニル基、特に2-(トリメチルシリル)エトキシカルボニル基である。ヒドロキシ保護基は、たとえばアシル基たとえば非置換または置換されたたとえばハロ- 置換、低級アルカノイル、たとえば2,2-ジクロロアセチル基またはカルボン酸半水和物のアシル基特にtert--ブトキシカルボニル基、非置換または置換されたベンジルオキシカルボニル基、たとえば4-ニトロベンジルオキシカルボニル基、またはジフェニルメトキシカルボニル、または2-ハロ- 低級アルコキシカルボニル、たとえば2,2,2-トリクロロエトキシカルボニル、またトリチルもしくはホルミル、または有機シリルまたはスタニル基、または容易に除去されうるエーテル化基、たとえばtert- 低級アルキル、たとえばtert- ブチル、2-オキサ - または2-チア- 脂肪族もしくは脂環式炭化水素基、特に1-低級アルコキシ- 低級アルキルまたは1-低級アルキルチオ- 低級アルキル基、たとえばメトキシメチル基または1- メトキシ- エチル、1-エトキシ- エチル、メチルチオメチル、1-メチルチオエチルもしくは1-エチルチオエチル基、または５または６個の環構成原子を有する2- オキサ- または2-チア- シクロアルキル基、たとえばテトラヒドロフリルもしくは2-テトラヒドロピラニル基または相当するチア類似物、また非置換または置換された1-フェニル- 低級アルキル基たとえば非置換または置換されたベンジルまたはジフェニルメチル基であり、その際フェニル基の好適な置換基はたとえばハロゲン原子、たとえば塩素、低級アルコキシたとえばメトキシおよび／またはニトロ基である。式 Iの所望の最終産物の構成ではない保護基たとえばカルボキシ- 、アミノ- 、ヒドロキシ- 、またはカルバモイル- 保護基の除去は、それ自体公知の方法、たとえば溶媒和、特に加水分解、アルコール分解または酸分解により、または還元特に水素添加または化学還元により、好適な段階に分けてまたは同時に行われ、これはまた酵素的方法たとえばトリフルオロ酢酸または蟻酸で処理するアシドリシスまたは亜鉛および酢酸でもしくは水素およびパラジウム担持炭触媒のような水素添加触媒で処理する還元を使用してもよい。保護された官能基が幾つかある場合、保護基は好ましくはこのような基が同時に除去されうるように二つ以上を選択する。保護されたアミノ基は、それ自体公知の方法で遊離し、そして保護基の性質にしたがって、様々な方法で、好ましくは溶媒和または還元により行われる。2-ハロ- 低級アルコキシカルボニルアミノ基（その際、2-ブロモ- 低級アルコキシカルボニルアミノ基を2-ヨード- 低級アルコキシカルボニルアミノ基へ変換後都合良く）、アロイルメトキシカルボニルアミノ基または4-ニトロベンジルオキシカルボニルアミノ基を、たとえば好適なカルボン酸たとえば水性酢酸の存在下に好適な化学還元剤たとえば亜鉛で処理することにより分解されうる。アロイルメトキシカルボニルアミノはまた、親核剤好ましくは塩形成試薬たとえばナトリウムチオフェノレートで処理することにより分解され、そして4-ニトロベンジルオキシカルボニルアミノ基はまたアルカリ金属ジチオナイトたとえばナトリウムジチオナイトで処理することにより分解される。非置換または置換されたジフェニルメトキシカルボニルアミノ、tert- 低級アルコキシカルボニルアミノまたは2-トリ- 置換シリルエトキシカルボニルアミノ基は、好適な酸たとえば蟻酸またはトリフルオロ酢酸で、または酢酸エチルもしくはジオキサンにおいて塩酸で処理することにより分解される；非置換または置換されたベンジルオキシカルボニルアミノ基はたとえば好適な水素添加触媒たとえばパラジウム触媒の存在下に水素で処理することにより水素添加の方法で分解される；非置換または置換されたトリアリールメチルアミノまたはホルミルアミノ基は、たとえば酸たとえば鉱酸たとえば塩酸または有機酸たとえば蟻酸、酢酸もしくはトリフルオロ酢酸を用い、水の適当の存在下に、処理することにより分解される；そして有機シリル基で保護されたアミノ基は、たとえば加水分解またはアルコール分解により遊離される。2-ハロアセチル、たとえば2-クロロアセチルで保護されたアミノ基は、塩基の存在下にチオウレアで処理するか、またはチオウレアのチオレート塩たとえばアルカリ金属チオレートで処理し、次いでアルコリシスまたは加水分解のような溶媒和により遊離化され、最終の縮合生成物が得られる。2-置換シリルエトキシカルボニルにより保護されたアミノ基は、フルオライド陰イオンを得る臭化水素酸の塩で処理することにより遊離アミノ基へ変換されうる。 tert- 低級アルコキシカルボニル、2-位が有機シリル基によりまたは1-位が低級アルコキシもしくは低級アルキルチオ基により置換された低級アルコキシカルボニル基、または非置換または置換されたジフェニルメトキシカルボニル基は、たとえば好適な酸たとえば蟻酸またはトリフルオロ酢酸で処理することにより、好適には親核性化合物たとえばフェノールまたはアニソールを添加して、遊離カルボキシ基へ変換されうる。非置換または置換されたベンジルオキシカルボニル基は、たとえば金属水素添加触媒たとえばパラジウム触媒の存在下に水素で処理することにより、水素添加の手法により遊離することができる。さらに、好適には置換されたベンジルオキシカルボニル、たとえば4-ニトロベンジルオキシカルボニルを、たとえばアルカリ金属ジチオナイトたとえばナトリウムジチオナイト、または還元金属たとえば亜鉛、または還元金属塩たとえばクロム (II)塩たとえば塩化クロム(II)を用いて、通常は金属と一緒に発生期水素を生成しうる水素生成剤たとえば酸特に好適なカルボン酸たとえば非置換または置換たとえばヒドロキシ基で置換された低級アルカンカルボン酸たとえば酢酸、蟻酸、グリコール酸、ジフェニルグリコール酸、乳酸、マンデリン酸、4-クロロマンデリン酸または酒石酸の存在下に、またはアルコールもしくはチオールの存在下に、好ましくは水を添加して、化学的還元することにより遊離カルボキシ基へ変換することができる。前記のような還元金属または金属塩で処理することにより、 2-ハロ- 低級アルコキシカルボニル（その際、2-ブロモ- 低級アルコキシカルボニル基を相当する2-ヨード- 低級アルコキシカルボニル基へ変換後に好適である）またはアロイルメトキシカルボニル基は遊離カルボキシ基へ変換することもできる。アロイルメトキシカルボニル基は、また親核性の好ましくは塩形成性試薬たとえばナトリウムチオフェノレートまたはナトリウムヨージドで処理することにより分解することもできる。置換された2-シリルエトキシカルボニルはまた、たとえばフルオリド陰イオンを得るフッ化水素酸の塩、たとえばマトリックスまたはカリウムフルオリドを用いて、巨大環状ポリエーテル(“クラウンエーテル”)の存在下に、または有機第四塩基のフルオリド、たとえばテトラ- 低級アルキルアンモニウムフルオリドまたはトリ- 低級アルキル- アリールアンモニウムフルオリドたとえばテトラエチルアンモニウムフルオリドまたはテトラブチルアンモニウムフルオリドの存在下に、中性の極性溶媒、たとえばジメチルスルホキシドまたはN,N - ジメチルアセトアミドの存在下に処理することにより遊離カルボキシ基へ変換することもできる。適当なアシル基、有機シリル基または非置換または置換された1-フェニル- 低級アルキル基により保護されるヒドロキシ基は、相当する保護されたアミノ基のように遊離形にされる。非置換または置換された1-フェニル- 低級アルキル基たとえばベンジル基により保護されたヒドロキシ基は、たとえばパラジウム担持炭触媒の存在下に接触水素添加により遊離形となることが好ましい。2,2-ジクロロアセチルにより保護されたヒドロキシ基は、たとえば塩基性加水分解により遊離形となり、またはtert- 低級アルキル基によりまたは2-オキサ- または2-チア- 脂肪族または- 脂環式炭化水素基によりエーテル化されたヒドロキシ基はアシドリシスたとえば鉱酸または強カルボン酸たとえばトリフルオロ酢酸で処理されることにより遊離形となる。有機シリル基たとえばトリメチルシリル基によりエーテル化されるヒドロキシ基はまた、フルオリド陰イオンを得るフッ化水素酸の塩たとえばテトラブチルアンモニウムフルオリドで遊離化されうる。 Y が基R₁において非- 芳香族炭素原子と結合する脱離基の場合、Y は特に反応性エステル化ヒドロキシ基、すなわち強無機酸たとえばハロゲン化水素酸(たとえば、塩化水素酸、臭化水素酸またはヨウ化水素酸)により、酸素含有鉱酸たとえばリン酸および特に硫酸、または強有機酸たとえば脂肪または芳香族スルホン酸(メタン- およびエタン- またはベンゼン- 、p-トルエン、p-ニトロベンゼンおよびp-クロロベンゼン- スルホン酸)によりエステル化されるものの一つである。 Y が基R₁において芳香族炭素原子と結合する脱離基の場合、Y は特にジアゾニウム基である。 Y が基R₁においてその一つが水素原子に代わった追加の単結合である場合、R₁ Y は、たとえばアルケン、特に二重結合がさらに2-メチルプロペンにおけるように、構造的特殊性によりまたは特にアクリロニトリルのように置換により活性化されたものである。また、Y の定義にはその一端が基R₁における炭素原子と直接結合しないが置換基、たとえば酸素(たとえばヒドロキシ基において)またはニトロ基(アミノ基において)(該基の水素原子と代わる)として生じる異原子と結合する単結合である。この種の特に好ましい試薬は、α- エポキシド(オキシラン)またはα- イミン(アジリジン)基を含み、それぞれ2-ヒドロキシアルキル基または 2-アミノアルキル基を有する基R⁰の有利な供給源として働く。 R₁がホルミル基である場合、試薬R₁Y は反応性カルボン酸誘導体である。ここでY は、たとえば反応性エステル化ヒドロキシ基、たとえば特にハロゲン原子である。このような式IIIで表される反応性カルボン酸誘導体は、特に反応性活性化エステルまたは反応性無水物であり、または反応性環化アミドであり、アシル化剤として使用される式R₁- OHで表されるカルボン酸の活性化を式IIで表される化合物の存在下にその場で行うことができるようにもなる。酸の活性化エステルは、エステル化基たとえばビニルエステルタイプたとえばビニルエステル(たとえば、相当するエステルを酢酸ビニルでトランスエステル化することにより得られうる；活性化ビニルエステル法)、カルバモイルビニルエステル(たとえば、相当する酸をイソキサゾリウム剤で処理することにより得られうる；1,2-オキサゾリウムまたはウッドワード法)、または1- 低級アルコキシビニルエステル(たとえば、相当する酸を低級アルコキシアセチレンで処理することにより得られうる；エトキシアセチレン法)、またはアミジノ型のエステルたとえばN,N'- ジ置換アミジノエステル(たとえば、相当する酸を好適なN,N'- ジ置換カルボジイミドたとえばN,N'- ジシクロヘキシルカルボジイミドで処理することにより得られうる；カルボジイミド法)、またはN,N - ジ置換アミジノエステル(たとえば、相当する酸をN,N - ジ置換シアナミドで処理することにより得られうる；シアナミド法)、好適なアリールエステル、特に電子吸引性置換基で好適に置換されたフェニルエステル(たとえば、相当する酸を好適に置換されたフェノールたとえば4-ニトロフェノール、4-メチルスルホニルフェノール、2,4,5-トリクロロフェノール、2,3,4,5,6-ペンタクロロフェノールまたは4-フェニルジアゾフェノールで、縮合剤たとえばN,N'- ジシクロヘキシルカルボジイミドの存在下に処理することにより得られうる；活性化アリールエステル法)、シアノメチルエステル(たとえば、相当する酸を塩基の存在下にクロロアセトニトリルで処理することにより得られうる；シアノメチルエステル化方法 )、チオエステル、特に非置換または置換たとえばニトロ- 置換された、フェニルチオエステル(たとえば、相当する酸を非置換または置換たとえばニトロ- 置換された、チオフェノール、とりわけ無水物またはカルボジイミド法により処理することにより得られうる；活性化チオールエステル法)、アミノまたはアミドエステル(たとえば、相当する酸をN- ヒドロキシアミノまたはN-ヒドロキシアミド化合物たとえばN-ヒドロキシスクシンイミド、N-ヒドロキシピペリジン、N-ヒドロキシフタルイミドまたは1-ヒドロキシベンゾチアゾールを用いて、たとえば無水物またはカルボジイミド法により処理することにより得られうる；活性化N-ヒドロキシエステル法)、またはシリルエステル(たとえば、相当する酸をシリル化剤たとえばヘキサメチルジシラザンで処理することにより得られ、これはアミノ基ではなくヒドロキシ基と容易に反応する)のエステル化基の連結する結合炭素原子において不飽和であるエステルである。酸の無水物はこれらの酸の対称的な、または好ましくは混合無水物であり、たとえば無機酸、たとえば酸ハライド、特に酸クロリド(たとえば、相当する酸を塩化チオニル、五塩化リンまたは塩化オキザリルで処理することにより得られうる；酸クロリド法)との無水物、アジド(たとえば、相当するヒドラジドを経た相当する酸エステルからそして亜硝酸で処理することにより得られうる；アジド法 )、カルボン酸半誘導体たとえば相当するエステル、たとえばカルボン酸低級アルキル半エステルの無水物(たとえば、相当する酸をハロゲン化蟻酸のたとえばクロロ蟻酸の低級アルキルエステルでまたは1-低級アルコキシカルボニル- 2-低級アルコキシ- 1,2-ジヒドロキノリンたとえば1-低級アルコキシカルボニル-2- エトキシ- 1,2-ジヒドロキノリンで処理することにより得られうる；混合O-アルキルカルボン酸無水物方法)の、またはジハロゲン化特にジ塩素化リン酸(たとえば、相当する酸をオキシ塩化リンで処理することにより得られうる；オキシ塩化リン法)との無水物、または有機酸との無水物たとえば有機カルボン酸との混合無水物(たとえば、相当する酸を非置換または置換された低級アルカン- またはフェニル- アルカンカルボン酸ハライド、たとえばフェニル酢酸クロリド、ピバロイル酸クロリドまたはトリフルオロ酢酸クロリドで処理することにより得られうる；混合カルボン酸無水物法)または有機スルホン酸(たとえば、相当する酸の塩たとえばアルカリ金属塩を好適な有機スルホン酸ハライドたとえば低級アルカン- またはアリール- 、たとえばメタン- またはp-トルエン- スルホン酸クロリドで処理することにより得られる；混合スルホン酸無水物法)および対称無水物(たとえば、相当する酸をカルボジイミドまたは1-ジエチルアミノプロピンの存在下に縮合することにより得られうる；対称無水物法)である。好適な環状アミドは、特に芳香族性の5 員ジアザ環を有するアミド、たとえばイミダゾール類、たとえばイミダゾール(たとえば、相当する酸をN,N'- カルボニルジイミダゾールで処理することにより得られうる；イミダゾリド法)またはピラゾールたとえば3,5-ジメチルピラゾール(たとえば、酸ヒドラジドを介してアセチルアセトンで処理することにより得られうる；ピラゾリド法)を有するアミドである。言及したように、アシル化剤として使用される酸の誘導体を、その場で形成することもできる。すなわち、たとえばN,N'- ジ置換アミジノエステルは、式IIで表される出発物質およびアシル化剤として使用される酸の混合物を、好適なN,N - ジ置換カルボジイミドたとえばN,N'- ジシクロヘキシルカルボジイミドの存在下に反応させることによりその場で形成することもできる。また、アシル化されるべき式IIで表される出発物質の存在下にアシル化剤として使用される酸のアミノまたはアミドエステルを、N,N'- ジ置換カルボジイミドたとえばN,N'- ジシクロヘキシルカルボジイミド、およびN -ヒドロキシアミンまたはN - ヒドロキシアミド、たとえばN - ヒドロキシスクシンイミド、N-ヒドロキシ- ノルボルナン - 2,3-ジカルボキシイミドまたはN-ヒドロキシベンゾトリアゾールの存在下に相当する酸およびアミノ出発物質の混合物を反応させることにより、形成することができ、その際、好適な塩基たとえば4-ジメチルアミノピリジンまたはテトラメチルグアニジンが存在するのが好ましい。アシル基(ホルミル基)以外の基R₁を導入するために、方法 a）は、好適な溶媒たとえばジメチルホルムアミドまたはテトラヒドロフラン中の式IIで表される出発物質を、テトラヒドロフランまたは水素化ナトリウム中の好適な塩基たとえばナトリウムビス(トリメチルシリル)アミドと、好ましくは-20 ℃から +70℃、特に0 ℃から室温までの温度で最初に反応させ、次いで好適な溶媒たとえばテトラヒドロフラン中式III で表される化合物を添加することにより行われる。アシル基(ホルミル基)R₁を導入するために、方法 a）は、好適な溶媒たとえば塩化メチレン中の式IIで表される出発物質を、好適な塩基たとえばトリエチルアミンの存在下に、式III で表される反応性酸誘導体(相当する酸からその場で形成されうる)と、たとえば還流下に0 ℃から+150℃までの温度で反応させることにより行われる。これに代わり、式IIで表される出発物質は、最初に好適な溶媒たとえば無水テトラヒドロフラン中で好適な塩基たとえばナトリウムビス(トリメチルシリル)アミドと0 ℃から室温までの温度で反応させ、次いで式III で表される反応性酸誘導体を添加することができる。方法b）：式IVおよびV の反応物において保護される官能基およびこの目的で使用される保護基は、方法 a）で記載のものに相当する。望ましい反応に関与するとおもわれる官能基たとえば基-NH-CH₃は、もちろん保護されない。保護基の導入および除去もまた、方法a)で記載されている方法と同じようにして行われる。非- 芳香族基R₂の場合、式 Vで表される化合物における脱離基X は式III で表される化合物における反応活性化ヒドロキシ基Y に相当し、そして式 Vで表される試薬は式III の試薬と同じである。芳香族基R₂の場合、脱離基X はたとえばジアゾニウム基である。アシル基以外の基R₂ ^aを導入するために、方法b)は、好ましくは好適な溶媒ジメチルホルムアミドまたはハロゲン化炭化水素たとえばクロロホルム中、好適な塩基たとえばN,N - ジイソプロピルエチルアミンの存在下に、好適な温度たとえば室温または約＋150 ℃までの高めた温度で、式IVで表される出発物質を反応させることにより行われるのが好ましく、特にX がその一端が基R₂ ^aにおける水素原子に代わる追加の単結合である場合たとえば式 Vで表される化合物がオキシランまたはアクリロニトリルである場合に、密閉容器たとえばボンベ中加圧下に高温で反応させることが好ましい。方法 a）または b）により得られる式I で表される化合物を式I で表される異なった化合物へ変換するために、たとえばエステル基を加水分解してカルボキシ基とするかまたはカルボニル基を還元することができる。前記加水分解は、たとえばそれ自体公知の方法で、低級アルカノールたとえばエタノールの2-N 希水酸化ナトリウム溶液中、室温にて行われる。アミドまたはラクタム基の一部を形成するカルボニル基を含む、カルボニル基の還元に対しては、考慮される還元剤は、たとえば複合金属水素化物たとえばアルカリ金属アルミニウム水素化物および特にアルカリ金属ホウ水素化物たとえばリチウムアルミニウム水素化物、カリウムホウ水素化物、リチウムホウ水素化物および特にナトリウムホウ水素化物、および一つ以上の水素原子がアルコキシ基またはシアノ基により置換された誘導体たとえばメトキシナトリウムホウ水素化物、トリ-（tert- ブトキシ）リチウムホウ水素化物またはジ-（2-メトキシエトキシ）- ジナトリウムリチウム水素化物またはナトリウムシアノホウ水素化物ならびにジボランである。式II-Vで表される化合物における塩形成基およびその塩は、式I で表される化合物について前記したものである。所望により行われる塩形成、またはこれらの塩からの基本形の遊離は、一般にそれ自体公知の通常の方法で行われる。すなわち、カルボキシ基を有する化合物は、相当する塩基特にアルカリ反応を与える化合物たとえばヒドロキシド、炭酸塩または重炭酸塩で処理することにより、塩基とともに相当する塩特にアルカリ金属塩へ変換される。塩は、たとえば無機酸たとえば特にヒドロハロゲン化酸で酸性化することにより遊離カルボキシ化合物へ変換されうる。塩基反応を行う最終生成物たとえばアミンは、たとえば塩形成に適する酸たとえば前記のうちの一つで処理することにより酸との塩へ変換される；逆に、塩基反応を行う剤たとえば無機水酸化物、炭酸塩および重炭酸塩、または有機塩基およびイオン交換剤で処理することによりアミンの塩基性基本形が遊離する。塩たとえばピクレートを得られた化合物の精製のために使用して、遊離化合物を塩へ変換し、これらを分離しそして再び塩から遊離化合物を回収することもできる。遊離形およびその塩形の密接な関係の点で、本明細書中、遊離化合物についての言及は好適で都合のよい相当する塩(第四塩も含む)をも含むものと理解される。式IVに相当するがしかしR₁が水素原子である出発物質は、公知であるかまたはそれ自体公知の方法で調製されうる。式中、R₁およびR₃がそれぞれ水素原子である式IVに相当する出発物質すなわちスタウロスポリンは市販されており、そして菌株ストレプトミセススタウロスポレウス(Streptomyces staurosporeus)を発酵することにより得られうる。菌株は、 1982年11月11日に公開された日本国特許公告[公告]第57-53076号(エス．オームラ(S．Omura)ら、J.Antibiot．30,275-281(1977)参照)との関連で、日本の発酵調査研究所(Fermentaion Research Institute，Japan)に番号FERM P-3725で寄託した。式中R₃が水素原子以外の式IVに相当するスタウロスポリン誘導体は、たとえばアイ．タカハシ(I.Takahashi)ら、J.Pharmacol.Exp.Ther.255(3)(1990)1218 -1221および国際特許第 WO-A-8907-105-A号(出願人：協和発酵工業株式会社(KYO WA Hakko Kogyo KK)、優先権番号第 024571 号、1988 年4 月2 日)に記載されている。式中R₃がオキソ基である式IIで表される化合物は、たとえばR₃が水素原子である相当する式IIで表される化合物から、ピリジン中三酸化クロムで酸化することにより得られる。このようにして得られた7-オキソ化合物から、R₃がヒドロキシ基である相当する7-ヒドロキシ化合物は、ナトリウムホウ水素化物で還元することにより得られる。R₃がヒドロキシまたはオキソ基である式I で表される相当する化合物は、またR₃が水素原子である式I で表される化合物の合成において副産物として得られる。新規の式IIおよび式IVで表される出発物質は、公知スタウロスポリン誘導体から、前記の方法 a）および b）と類似の反応を好適に行うことにより得られる。特記しない限り、保護基を除去する方法も含む、前記のすべての方法は、それ自体公知の方法でたとえば好ましくは不活性溶媒および希釈剤の存在または不存在下に必要ならば、縮合剤または触媒の存在下に、下降または上昇した温度たとえば-70 ℃〜ほぼ+150℃まで、特にほぼ-20 ℃〜ほぼ+100℃まで、主として0 ℃ 〜ほぼ+70 ℃まで、好ましくはほぼ0 ℃〜ほぼ+50 ℃までの温度範囲、主として室温にて、好適な容器中、そして必要ならば不活性ガス雰囲気下たとえば窒素雰囲気下で行われる。これらの方法において、分子における置換基のすべてを考慮すると、必要ならば、たとえば容易に加水分解可能な基が存在する場合、特に穏やかな反応条件たとえば短い反応時間、低濃度の穏やかな酸性剤または塩基性剤の使用、化学量論的量の比率、好適な触媒、溶媒および温度および／または圧力条件の選択が使用される。本発明はまた、方法のいかなる段階でも中間体として得られる化合物を出発物として使用しそして残りの工程を実施し、または方法をいかなる段階でも中止し、または出発物質を反応条件下で形成し、または反応性誘導体または塩の形で使用することに関する。使用される出発物質は、本発明方法にしたがって特に価値あるものとして上記された化合物が得られるものが好ましい。本発明はまた、新規出発物質および／または中間体ならびにその調製方法に関する。使用される出発物質および選択される反応条件は特に好ましいものとして本出願中言及した化合物が得られるようなものが好ましい。本発明はまた、ヒトまたは動物の身体の治療、特に前記した疾患の場合の治療に、式I で表される化合物およびこれらの作用物質上許容されうる酸付加塩を、好ましくは作用物質組成物の形で使用することに関する。本発明はまた、治療が必要な温血動物において存在する多薬物耐性を除去しそして多薬物耐性の発生を避ける方法に関し、その際多薬物耐性を除去しそしてその発生を避ける式I で表される化合物またはその作用物質上許容されうる塩の有効投与量を温血動物へ経腸たとえば経口または腸管外投与たとえば腹腔内もしくは静脈内に投与することからなる。有効成分の投与量はとりわけ疾患の性質、治療される種およびその大きさ、守るべき生物の状態および投与経路による。たとえば、式I で表される化合物の日用量10mg-1000mg 、主に 50mg-500mg、好ましくは70mg-300mgたとえば150mg が、体重ほぼ70kgの温血動物へ、腸管内または腸管外でたとえば腹腔内投与されであろう。この日用量の合計を1 日当たり2 または3 回に分けてもよい。本発明はまた、有効成分の有効量、特に前記の疾患の一つを予防または治療するために有効な量を、局所、経腸たとえば経口もしくは直腸投与、または腸管外たとえば静脈もしくは腹腔内投与に適しそして無機もしくは有機および固体もしくは液体の作用物質上許容されうる担体とともに含むことからなる作用物質組成物に関する。経口投与に対しては、希釈剤たとえば乳糖、デキストロース、ショ糖、マンニトール、ソルビトール、セルロースおよび／またはグリセロール、および／または滑剤たとえばシリカ、タルク、ステアリン酸またはその塩、たとえばステアリン酸マグネシウムもしくはカルシウム、および／またはポリエチレングリコールと一緒に有効成分を含む特に錠剤またはゼラチンカプセルが使用される。錠剤はまた、結合剤たとえばマグネシウムアルミニウムシリケート、スターチ、たとえばコーン、コムギまたはライススターチ、ゼラチン、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウムおよび／またはポリビニルピロリドン、および所望により、崩壊剤たとえばスターチ、寒天、アルギン酸またはその塩、たとえばアルギン酸ナトリウムおよび／または起泡性混合物、または吸着剤、着色剤、香料および甘味剤を含んでもよい。これはまた、本発明の薬理学的に活性な化合物を腸管外投与可能な組成物または灌注用溶液の形で使用することができる。このような溶液は、好ましくは等張性の水溶液または懸濁液であり、たとえば有効成分だけまたは担体たとえばマンニトールとともに含む凍結乾燥組成物の場合、溶液または懸濁液を使用前に作ることができる。作用物質組成物は殺菌されるかおよび／または賦形剤たとえば保存剤、安定剤、湿潤剤および／または乳化剤、溶解剤、等張圧力を調節するための塩および／または緩衝剤を含んでもよい。問題となる作用物質組成物は、所望により、他の薬理学的に活性な物質たとえば抗生剤を含んでもよく、これはそれ自体公知の方法たとえば通常の混合、造粒、糖衣化、溶解または凍結乾燥方法により調製され、そしてこれは有効成分0.01%-90%、凍結乾燥組成物の場合ほぼ100%まで、特にほぼ0.1%- ほぼ50% 、最も特に1%- 30% までを含み、局所投与用の組成物に対しては有効成分1%未満が特に適する。以下の実施例は本発明を説明するものであり、いかなる制限をも加えるものではない。Rf値はシリカゲル薄層プレート(ドイツ国、ダルムシュタットのメルク社により作られた)において測定される。使用される溶出混合物における溶出物の相互の比は容量部(v/v)で与えられ、温度は摂氏度で与えられる。旋光度の場合、溶媒または溶媒混合物における物質の濃度c はパーセント(w/v)で与えられる。この明細書の範囲内で、以下の命名法が式I の化合物を特定するために使用される：式I におけるテトラヒドロピラン環の窒素原子N-R₂は、“N”として示される。たとえば、N-BOC - スタウロスポリンは、基R₂が BOCであるスタウロスポリン誘導体である。一方、窒素原子N-R₁は“6”で示され、これは式 Iで示される番号付けから明らかであろう。たとえば、6-メチル- スタウロスポリンは、基 R₁がメチル基であるスタウロスポリン誘導体である。略号： BOC : tert- ブトキシカルボニル DMF : ジメチルホルムアミド HPLC : 高圧液体クロマトグラフィー THF : テトラヒドロフラン実施例 1 : 0.7g(0.0012モル)のN-BOC-6-メチル- スタウロスポリンを酢酸エチル4 mlに溶かし、そして室温にて塩酸で飽和した酢酸エチル溶液4ml をこれへ添加する。3.5 時間後、懸濁液を酢酸エチルおよび炭酸水素ナトリウム溶液の間に分配し、有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥し、蒸発により濃縮する。酢酸エチル/エタノール(8:2)を用いてシリカゲル60におけるフラッシュクロマトグラフィーにかけると、6-メチル- スタウロスポリン、m.p.210-215℃、Rf = 0.28( 酢酸エチル：エタノール = 8:2)が得られる。出発物質は、以下のように得られる：工程1.1: テトラヒドロフラン中のナトリウムビス(トリメチルシリル)アミドの 1M溶液2.2ml を、室温で窒素雰囲気下に、乾燥ジメチルホルムアミド10ml中にN- BOC スタウロスポリン(ヨーロッパ特許公開（EP-A）第296110号の実施例36に記載)1.13g(0.002モル)が溶解した液へ添加し、1 時間撹拌する。次いでジメチルホルムアミド2ml 中にヨウ化メチル0.14ml(0.0022 モル)が溶解した液を滴下し、室温で2 時間攪拌を続ける。反応混合物を氷上へ注入し、酢酸エチルで抽出する。有機層を冷0.1N塩酸で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして蒸発濃縮する。残渣をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー(ドイツ、ダルムスタットのメルク社の60型)により分離する。溶出液として酢酸エチル/ 石油エーテル(1: 1)を使用する。相互に分離した二つの化合物が個々のフラクションから得られる。すなわち、N-BOC-6-メチル- 7-オキソ- スタウロスポリン、m.p.180-185 ℃、 Rf = 0.58(塩化メチレン：エタノール = 95:5)およびN-BOC-6-メチル- スタウロスポリン、m.p.225-228 ℃、Rf=0.4 5(塩化メチレン：エタノール=95:5)である。実施例 2: 実施例1 と同様であるが、N-BOC-6-メチル- 7-オキソ- スタウロスポリン(工程1.1 参照)175mg(0.0003 モル)から、12時間の反応時間の後に、6-メチル- 7-オキソ- スタウロスポリン；m.p．180-185℃、Rf=0.41(酢酸エチル：エタノール = 8:2)が得られる。実施例 3: N-ベンゾイル- スタウロスポリン4.4g(7.7ミリモル)を、無水テトラヒドロフラン200ml 中にホワイトオイルに80% 水素化ナトリウム分散液350mg(11 .5ミリモル)が懸濁している液へ添加する。混合物を室温で4 時間攪拌する。臭化ベンジル1.4ml(11.5ml)を添加し、反応混合物を室温でさらに56時間攪拌する。加水分解のために、水40mlを添加する。反応混合物を塩化メチレンで希釈すると、有機層が分離し、0.1-N 塩酸で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、そして蒸発濃縮する。残渣をフラッシュクロマトグラフィー(酢酸エチル：石油エーテル = 1:1)を用いて精製する。N-ベンゾイル- 6-ベンジル- スタウロスポリンが黄色の泡状物として得られる；Rf =0.48(酢酸エチル：石油エーテル = 1: 1)。実施例 4: 塩化ベンゾイル20μl(0.18 ミリモル)を、塩化メチレン5ml 中に6-メチル- スタウロスポリン(実施例1 参照)75mg(0.15ミリモル)およびN,N - ジイソプロピルエチルアミン38μl（0.225ミリモル）へ室温にて添加し、反応混合物を室温で1 時間攪拌する。次いで、飽和炭酸水素ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして蒸発濃縮する。シリカゲル60において残渣をフラッシュクロマトグラフィー(塩化メチレン：エタノール = 98:2)にかけると、N-ベンゾイル- 6-メチル- スタウロスポリンが得られる；m.p．225-227℃、Rf=0.47(塩化メチレン：エタノール=95:5) 実施例 5:実施例1 と同様にすると、N-BOC-6-ベンジル- スタウロスポリン0.55g（0.84ミリモル）から6-ベンジル- スタウロスポリンが得られる：m.p.187-190 ℃、Rf=0.34(塩化メチレン：エタノール=95:5)。実施例 6:実施例3 と同様にすると、N-ベンゾイル- スタウロスポリンおよびブロモ酢酸メチルエステルからN-ベンゾイル-6- メトキシカルボニルメチル- スタ実施例 7: 本明細書に記載の方法と同様にして、N-[(L)-アラニル]-6-ベンジル- スタウロスポリンは、1-ヒドロキシベンゾトリアゾールおよびN-エチル- N'-(3 -ジアミノプロピル)- カルボジイミド塩酸塩(EDC)54.3mg(0.283ミリモル)の存在下に、6-ベンジル- スタウロスポリンをN-ベンジルオキシカルボニル- L-アラニンと反応させ、次いでH₂/Pd/C を用いた水素添加によりベンジルオキシカルボニル保護基を除去することにより得られる。実施例 8: 1-ヒドロキシベンゾトリアゾールおよびN-エチル- N'-(3-ジアミノプロピル)- カルボジイミド塩酸塩(EDC)の存在下に、無水N,N - ジメチルホルムアミド中で6-ベンジル- スタウロスポリンをN-BOC- L- アラニンと反応させることにより、N-[N-BOC-(L)-アラニル]-6-ベンジル- スタウロスポリン塩酸塩が得られる：m.p.262-264 ℃、Rf=0.79(塩化メチレン：メタノール=95:5)、Rf=0.50(酢酸エチル：ヘキサン = 4:1)。実施例 9: N-[N-BOC-(L)- アラニル]-6-ベンジル- スタウロスポリン(実施例8 参照)から、ジオキサン中で4-N 塩酸を用いてBOC 保護基を除去することにより、N-[(L)- アラニル]-6-ベンジル- スタウロスポリン塩酸塩が得られる：m.p.29 9-304 ℃(分解)、Rf=0.69(塩化メチレン：メタノール=4 :1)、Rf=0.42(塩化メチレン：メタノール=9 :1)。実施例10: ヒトKB-31(感受性)およびKB-8511(作用物質耐性、P-糖たんぱく質[Pgp]過剰発現)細胞を、リボヌクレオシドおよびデオキシリボヌクレオシドを添加しそして5%ウシ胎児血清、抗生剤ペニシリン50単位/ mlおよび抗生剤ストレプトマイシン50μg / mlの存在下に、MEM-α- 培地において5%二酸化炭素下にインキュベーションする。KB-8511 細胞を、抗腫瘍活性物質コルセミド(C olcemid)(デメコルシン)10ng/ml の存在下に貯蔵物として保存する。細胞増殖の阻止を測定するために、1500細胞のバッチ(コルセミドは添加しない)を、96凹部微量滴定プレートに播種し、そして前記の条件下で一晩インキュベーションする。試験物質(A：抗腫瘍活性物質ビンブラスチン、B：式I で表される化合物 N- ベンゾイル- 6-ベンジル- スタウロスポリン)を、1 日目に連続した希釈率で添加する。次いでプレートを前記条件下で4 日間インキュベーションする。この間に、対照細胞は数回の細胞分割を行う。インキュベーション後、細胞を3.3%(w/v )グルタルアルデヒド水溶液で固定し、水洗し、0.05%(w/v)メチレンブルー溶液で染色する。洗浄後、染料を3%(w/v)塩酸水溶液で溶出する。1 凹部あたりの光学濃度(OD)は細胞の数に直接比例するものであり、これは、光度計を用いて665n m で測定する。IC₅₀値は、式 [OD₆₆₅(試験)-OD₆₆₅(出発)]/[OD₆₆₅(対照)-OD₆₆₅(出発)]x 100 を用いて、コンピューターシステムの手法で計算する。 IC₅₀値は、インキュベーション期間の最後において1 凹部当たりの細胞の数が対照培養物における細胞の数のわずか50% になる有効成分の濃度として定義される。試験物質[濃度] KB 8511 細胞の増殖% A［2.34 ng/ml］ 101 A［4.69 ng/ml］ 101 A［9.38 ng/ml］ 98 A［18.8 ng/ml］ 98 A［37.5 ng/ml］ 98 A［75.0 ng/ml］ 90 A［150 ng/ml］ 66 A［300 ng/ml］ 14 B［1 マイクロモル］ 95 B［1 マイクロモル］+ A［2.34 ng/ml］ 0 B［1 マイクロモル］+ A［4.69 ng/ml］ 0 B［1 マイクロモル］+ A［9.38 ng/ml］ 0 B［1 マイクロモル］+ A［18.8 ng/ml］ 0 B［1 マイクロモル］+ A［37.5 ng/ml］ 0 B［1 マイクロモル］+ A［75.0 ng/ml］ 0 B［1 マイクロモル］+ A［150 ng/ml］ 0 B［1 マイクロモル］+ A［300 ng/ml］ 0 B［0.1 マイクロモル］ 92 B［0.1 マイクロモル］+ A［2.34 ng/ml 91 B［0.1 マイクロモル］+ A［4.69 ng/ml 81 B［0.1 マイクロモル］+ A［9.38 ng/ml 74 B［0.1 マイクロモル］+ A［18.8 ng/ml 66 B［0.1 マイクロモル］+ A［37.5 ng/ml 52 B［0.1 マイクロモル］+ A［75.0 ng/ml 28 B［0.1 マイクロモル］+ A［150 ng/ml 6 B［0.1 マイクロモル］+ A［300 ng/ml 0 試験物質 A : ビンブラスチン試験物質 B : N-ベンゾイル- 6-ベンジル- スタウロスポリン実施例11: ビンブラスチン(A)の代わりに抗腫瘍活性試験物質アドリアマイシン( C)を用いて、実施例10と同様に以下の結果が得られる：試験物質[濃度] KB 8511 細胞の増殖% C［1.56 ng/ml］ 99 C［3.13 ng/ml］ 100 C［6.25 ng/ml］ 97 C［12.5 ng/ml］ 101 C［25 ng/ml］ 99 C［50 ng/ml］ 97 C［100 ng/ml］ 96 C［200 ng/ml］ 93 B［1 マイクロモル］ 82 B［1 マイクロモル］+ A［1.56 ng/ml］ 90 B［1 マイクロモル］+ A［3.13 ng/ml］ 89 B［1 マイクロモル］+ A［6.25 ng/ml］ 82 B［1 マイクロモル］+ A［12.5 ng/ml］ 56 B［1 マイクロモル］+ A［25 ng/ml］ 14 B［1 マイクロモル］+ A［50 ng/ml］ 1 B［1 マイクロモル］+ A［100 ng/ml］ 4 B［1 マイクロモル］+ A［200 ng/ml］ 7 試験物質 C : アドリアマイシン試験物質 B : N-ベンゾイル- 6-ベンジル- スタウロスポリン実施例12: 作用物質感受性母細胞KB-31 およびKB-31 の多薬物耐性変種に対する試験物質 B(N- ベンゾイル- 6-ベンジル- スタウロスポリン)のインビボ抗腫瘍活性の測定を、連続継代培養した(三回の連続移植の最小)ヒト母細胞作用物質感受性KB-31 腫瘍またはヒトKB-8511 腫瘍のいずれかを有する雌Balb/cヌードマウス(デンマーク、コペンハーゲンのボムホールドガード(Bomholdgaard，Cop enhagen，Denmark))において実施する。KB-8511 腫瘍はPgb、mdr-1 遺伝子の産物を過剰発現する(エス．アキイマら(S.Akiyma et al．)、“複数の作用物質に耐性のヒトKB細胞列の単離および遺伝子的特性決定(Isolation and genetic cha racterization of human KB cell lines resistant to multiple drug)”、Soma tic Cell and Mol．Gen．11,117-126[1985])。ほぼ25mgの腫瘍断片を各動物(一群当たりn = 6)の左脇腹へ移植する。治療は、腫瘍が平均腫瘍容量150-200mm³になった時に開始する：試験物質B の25mg/kg p.o．を、腫瘍移植後7 日目にアドリアマイシン9.0 mg/kg i.v.を一回投与する4 時間前に一回の投与で一度に投与する。腫瘍増殖は、垂直面の径を測定することにより一週間に二回モニターする。腫瘍容量は、ティ．メイヤーら(T．Meyer el al.)によりInt.,J.Cancer 43,85 1-856(1989)に記載されているように測定され、そして相対的腫瘍サイズ(すなわち、処理の開始時点で腫瘍容量と比較した腫瘍容量における増加)として表される。最大腫瘍退行(% として表わされ、すなわち治療開始時点の容量と比較した腫瘍容量における低下)は、KB-8511 の場合、物質B(1 x 25mg/ kg p.o.)およびアドリアマイシン(1 x 9.0mg/kg i.v.)の混合物により達成され、これは6 日目に29% まで達成した。KB-31 の場合、腫瘍最大腫瘍退行は、アドリアマイシン(1 x 9.0mg/kg i.v.)単独で達成され、5 日目に24% まで達成した。処理群と対照群における平均腫瘍容量の商(%)、すなわち以下の表に示すT/C 値(%)から明らかなように、試験物質B は、アドリアマイシン感受性KB-31 腫瘍に対するアドリアマイシンの活性と同程度まで多薬物耐性KB-8511 腫瘍に対し感受性を示す。T/C 値(%)がより小くなると、与えられた投与量はより活性になる。実施例 13 : 有効成分、たとえば前記実施例に記載の式 Iで表される化合物の一つ20mgを各々有する錠剤を、以下の組成を有するように、通常の方法で調製する：調製：有効成分をコムギスターチの一部、ラクトースおよびコロイド状珪酸とともに混合し、混合物を篩に通過させる。さらに別の部分のコムギスターチを水浴において5 倍の容量の水を用いてペースト状とし、薄いプラスチック塊ができるまで粉末混合物をペーストとともにこねる。プラスチック塊をほぼ3mm メッシュサイズの篩にかけ、乾燥し、得られた乾燥顆粒をさらにもう一度篩に通過させる。コムギスターチの残りの部分、タルクおよびステアリン酸マグネシウムを添加し、混合物を圧縮して各々145mg の重量で破断ノッチを有する錠剤を形成する。実施例 14: 有効成分、たとえば前記実施例に記載の式 Iで表される化合物の一つ25mgを各々有するカプセルを、以下のように調製する：組成有効成分 25.0 mg ゲルシレ(gelucire)44/14 183.3 mg (ゲルシレ 44/14は、分子量ほぼ1500を有するグリセロールおよびポリエチレングリコールとの混合物である；フランス、F-69800 セイントプリーのガット- フォセイ(Gatte-fosse)により製造されている)調製：ゲルシレ 44/14の一部を50℃-100℃の温度で溶融する。有効成分を加熱した粉砕機中で混合しペーストを形成する。残りのゲルシレ 44/14もまた溶融し、ペーストへ添加する。混合物を溶液が得られるまで50℃で攪拌するこれをカプセルへ導入し、その間温めそして冷却する。このようにして得られたワックスは、有効成分の12% 重量を含む。ワックス様分散液はまた超音波処理により水中で処理され経口投与することのできる乳状液体を形成することもできる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩＣ０７Ｄ 209:00） (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＡＭ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＮ，ＣＺ，ＥＥ，ＦＩ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者バッケル，オスカルスイス国，ツェーハー−4059 バーゼル, ルーベンベルクシュトラーセ 60

Claims

【特許請求の範囲】１．次式 I （式中、 R₁は、ホルミル基、非置換もしくはアリール基で置換された炭素原子29個までの脂肪族炭化水素基、またはアリール基であり、 R₂は、水素原子、C₁-C₅アルキル基、ベンゾイル基、低級アルカノイル基または遊離もしくは保護されたアミノ基を有するα- アミノアシル基であり、 R₃は、水素原子、ヒドロキシ基、低級アルコキシ基またはオキソ基であり、または R₁はメトキシカルボニルメチル基であり、 R₂はベンゾイル基であり、そして R₃は水素原子である。）で表されるスタウロスポリン誘導体または少なくとも一つの塩形成基を有する式I で表される化合物の作用物質上許容されうる塩の、抗腫瘍剤に対する多薬物耐性を避けるかまたは除くための使用。２．次式 I （式中、 R₁は、ホルミル基、非置換もしくはアリール基で置換された炭素原子29個までの脂肪族炭化水素基、またはアリール基であり、 R₂は、水素原子、C₁-C₅アルキル基、ベンゾイル基、低級アルカノイル基または遊離もしくは保護されたアミノ基を有するα- アミノアシル基であり、 R₃は、水素原子、ヒドロキシ基、低級アルコキシ基またはオキソ基であり、または R₁はメトキシカルボニルメチル基であり、 R₂はベンゾイル基であり、そして R₃は水素原子である。）で表されるスタウロスポリン誘導体または少なくとも一つの塩形成基を有する式I で表される化合物の作用物質上許容されうる塩を、多薬物耐性を除くかまたはその出現を避ける有効投与量で投与することからなる、これらの治療が必要な温血動物において存在する多薬物耐性を除くかまたは多薬物耐性の出現を避ける方法。３．次式 I （式中、 R₁は、ホルミル基、非置換もしくはアリール基で置換された炭素原子29個までの脂肪族炭化水素基、またはアリール基であり、 R₂は、水素原子、C₁-C₅アルキル基、ベンゾイル基、低級アルカノイル基または遊離もしくは保護されたアミノ基を有するα- アミノアシル基であり、 R₃は、水素原子、ヒドロキシ基、低級アルコキシ基またはオキソ基であり、または R₁はメトキシカルボニルメチル基であり、 R₂はベンゾイル基であり、そして R₃は水素原子である。）で表されるスタウロスポリン誘導体および少なくとも一つの塩形成基を有する式I で表される化合物の作用物質上許容されうる塩の、抗腫瘍剤に対する多薬物耐性を避けるかまたは除くための作用物質の調製のための使用。４．R₁が低級アルキル基以外の炭素原子29個までの非置換脂肪族炭化水素基、アリール基で置換された炭素原子29個までの脂肪族炭化水素基、またはアリール基である請求項1-3 のいずれか1 の使用または方法。５．式中、 R₁は低級アルキル基またはベンジル基であり、 R₂は水素原子、ベンゾイル基またはグリシル、フェニルグリシル、アラニル、フェニルアラニル、プロリル、ロイシル、セリル、バリル、チロシル、アルギニル、ヒスチジルおよびアスパラギルから選択されるα- アミノアシル基であり、 R₃は水素原子またはオキソ基であり、または R₁はメトキシカルボニルメチル基であり、 R₂はベンゾイル基であり、そして R₃は水素原子である請求項1-3 のいずれか1 の使用または方法。６．次式 I （式中、 R₁は炭素原子6-29個までの非置換脂肪族炭化水素基、アリール基で置換された炭素原子29個までの脂肪族炭化水素基であってベンジル基以外の基、またはアリール基であり、 R₂は水素原子、C₁-C₅アルキル基、ベンゾイル基、低級アルカノイル基または遊離もしくは保護されたアミノ基を有するα- アミノアシル基であり、 R₃は水素原子、ヒドロキシ基、低級アルコキシ基またはオキソ基である）で表されるスタウロスポリン誘導体または少なくとも一つの塩形成基を有する式I で表されるそのような化合物の塩。７．式中、 R₂はグリシル、フェニルグリシル、アラニル、フェニルアラニル、プロリル、ロイシル、セリル、バリル、チロシル、アルギニル、ヒスチジルおよびアスパラギルから選択されるα- アミノアシル基であり、そして R₃は水素原子またはオキソ基である、請求項6 のスタウロスポリン誘導体または少なくとも一つの塩形成基を有する式 I で表される化合物の塩。８．次式 I （式中、 R₁はベンジル基であり、 R₂は遊離または保護されたアミノ基を有するα- アミノアシル基であり、 R₃は水素原子、ヒドロキシ基、低級アルコキシ基またはオキソ基である）で表されるスタウロスポリン誘導体または少なくとも一つの塩形成基を有する式I で表される化合物の塩。９．式中、 R₂はグリシル、フェニルグリシル、アラニル、フェニルアラニル、プロリル、ロイシル、セリル、バリル、チロシル、アルギニル、ヒスチジルおよびアスパラギルから選択されるα- アミノアシル基であり、そして R₃は水素原子である請求項8 の誘導体または少なくとも一つの塩形成基を有する式I で表される化合物の塩。 10．請求項8 のN[(L)-アラニル]-6-ベンジル- スタウロスポリン。 11．請求項8 のN - [N-BOC-(L)-アラニル]-6-ベンジル- スタウロスポリン。 12．ヒトまたは動物の身体の治療方法に使用するための請求項6-11のずいれか 1 の式I で表される化合物。 13．請求項6-11のずいれか1 の式I で表される化合物を作用物質担体とともに含んでなる医薬組成物。 14．次式 I （式中、 R₁は、炭素原子6-29個までの非置換脂肪族炭化水素基、アリール基で置換された炭素原子29個までの脂肪族炭化水素基であってベンジル基以外のもの、またはアリール基であり、 R₂は、水素原子、C₁-C₅アルキル基、ベンゾイル基、低級アルカノイル基または遊離もしくは保護されたアミノ基を有するα- アミノアシル基であり、 R₃は、水素原子、ヒドロキシ基、低級アルコキシ基またはオキソ基である）で表されるスタウロスポリン誘導体または少なくとも一つの塩形成基を有する式I で表されるそのような化合物の塩の調製方法であって、 a) 式II （式中、置換基は前記定義のものであり、式IIで表される化合物に存在する官能基はいずれも、必要ならば保護された形である）で表される化合物、または少なくとも一つの塩形成基を有するこのような化合物の塩を、式III R₁ Y （III）（式中、R₁は前記定義のものであり、ここに存在する官能基はいずれも必要ならば保護された形であり、そしてY は脱離基またはその一方の端が基R₁における水素原子に代わる別の単結合である）で表される化合物、または少なくとも一つの塩形成基を有するこのような化合物の塩と反応させ、そしていずれの保護基も除去するか、または b) 式IV （式中、置換基は前記定義のものであり、ここに存在する官能基はいずれも必要ならば保護された形である）で表される化合物、または少なくとも一つ塩形成基を有するこのような化合物の塩を、式Ｖ R₂ ^a X （V）（式中、R₂ ^aは水素原子を除くR₂の前記定義のものであり、基R₂ ^aに存在する官能基はいずれも必要ならば保護された形であり、X は脱離基またはその一方の端が基R₂ ^aにおける水素原子と代わるものである別の単結合である）で表される化合物または少なくとも一つの塩形成基を有するこれらの化合物の塩と反応させ、次いでいずれの保護基をも除去し、そして所望により、得られた式 Iで表される化合物を式 Iで表される異なった化合物へ変転し、および／または遊離形で得られる式 Iの化合物をその塩へ変転し、および／または塩の形で得られる式 Iの化合物をその遊離形または異なった塩へ変転することを含んでなる、前記調製方法。 15．次式 I （式中、 R₁はベンジル基であり、 R₂は水素原子、C₁-C₅アルキル基、ベンゾイル基、低級アルカノイル基または遊離もしくは保護されたアミノ基を有するα- アミノアシル基であり、 R₃は水素原子、ヒドロキシ基、低級アルコキシ基またはオキソ基である）で表されるスタウロスポリン誘導体または少なくとも一つの塩形成基を有する式 I で表されるそのような化合物の塩の調製方法。 a) 式II （式中、置換基は前記定義のものであり、式IIの化合物に存在する官能基はいずれも、必要ならば保護された形である。）で表される化合物、または少なくとも一つの塩形成基を有するこのような化合物の塩を、式III R₁ Y （III）（式中、R₁は前記定義のものであり、ここに存在する官能基はいずれも必要ならば保護された形であり、そしてY は脱離基またはその一方の端が基R₁における水素原子に代わるものである別の単結合である）で表される化合物、または少なくとも一つの塩形成基を有するこのような化合物の塩と反応させ、次いでいずれの保護基も除去するか、または b) 式IV （式中、置換基は前記定義のものであり、ここに存在する官能基はいずれも必要ならば保護された形である）で表される化合物、または少なくとも一つ塩形成基を有するこのような化合物の塩を、式Ｖ R₂ ^a X （V）（式中、R₂ ^aは水素原子を除くR₂の前記定義のものであり、基R₂ ^aに存在する官能基はいずれも必要ならば保護された形であり、X は脱離基またはその一方の端部が基R₁における水素原子に代わるものである別の単結合である）で表される化合物または少なくとも一つの塩形成基を有するこのような化合物の塩と反応させ、次いでいずれの保護基をも除去し、そして所望により、得られた式 Iで表される化合物を式 Iで表される異なった化合物へ変転し、および／または遊離形で得られる式 Iの化合物をその塩へ変転し、および／または塩の形で得られる式 Iの化合物をその遊離形または異なった塩へ変転することを含んでなる、前記調製方法。