JP7536030B2 - 増殖分化因子１５併用療法 - Google Patents

Description

関連出願の相互参照
本願は、参照によりその全体が参照により本明細書に組み込まれる、２０１９年３月８日出願の米国仮特許出願第６２／８１５，８６６号明細書の利益を主張する。

配列表
本願は、電子フォーマットの配列表と共に出願されている。配列表は、２０２０年３月２日に作成された、サイズが１６６ｋｂであるＡ－２２９８－ＷＯ－ＰＣＴ＿ＳｅｑＬｉｓｔ．ｔｘｔという名称のファイルとして提供される。電子フォーマットの配列表における情報は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。

本開示は、ＧＤＦ１５融合タンパク質等のＧＤＦ１５分子、その組成物、並びに併用療法におけるその使用等のそうしたタンパク質を作製及び使用するための方法に関する。

マクロファージ阻害性サイトカイン１（ＭＩＣ１）とも称される増殖分化因子１５（ＧＤＦ１５）（Ｂｏｏｔｃｏｖ ＭＲ，１９９７，Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ９４：１１５１４－９）、胎盤骨形成因子（ＰＬＡＢ）（Ｈｒｏｍａｓ Ｒ １９９７，Ｂｉｏｃｈｉｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ．１３５４：４０－４）、胎盤トランスフォーミング成長因子β（ＰＴＧＦＢ）（Ｌａｗｔｏｎ ＬＮ １９９７，Ｇｅｎｅ．２０３：１７－２６）、前立腺由来因子（ＰＤＦ）（Ｐａｒａｌｋａｒ ＶＭ １９９８，Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ．２７３：１３７６０－７）及び非ステロイド性抗炎症薬活性化遺伝子（ＮＡＧ－１）（Ｂａｅｋ ＳＪ ２００１，Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ．２７６：３３３８４－９２）は、約２５ｋＤａのホモ二量体として血漿中を循環する分泌タンパク質である。ＧＤＦ１５は、ＧＤＮＦファミリー受容体α様（ＧＦＲＡＬ）に高親和性で結合する。ＧＤＦ１５誘導性細胞シグナル伝達は、ＧＦＲＡＬと共受容体ＲＥＴとの相互作用を必要とすると考えられている。

ＧＤＦ１５は、複数の生物活性と関連している。ＧＤＦ１５の増加は、体重低減と相関関係にあることが示されており、ＧＤＦ１５の投与は、食物摂取量及び体重を低減させることが示されている。

グルコース依存性インスリン分泌促進性ポリペプチド（ＧＩＰ、以前は胃機能抑制性ポリペプチドと呼ばれた）及びグルカゴン様ポリペプチド１（ＧＬＰ－１）は、公知のインスリン分泌促進因子（「インクレチン」）である。ＧＩＰは、一本鎖の４２個のアミノ酸から成るペプチドであり、ヒトＧＩＰは、１５３個のアミノ酸から成る前駆体であるｐｒｏＧＩＰのプロセッシングに由来する。ＧＩＰ分泌は、食物摂取により誘導され、脂肪細胞における脂肪貯蔵の促進並びに膵島β細胞の機能及びグルコース依存性のインスリン分泌の促進を含む、多数の生理学的作用を及ぼす。インタクトなＧＩＰは、ＤＰＰＩＶによって不活性形態へ迅速に分解される。ＧＩＰに対する受容体であるＧＩＰ受容体（ＧＩＰＲ）は、Ｇタンパク質共役型受容体（ＧＰＣＲ）のセクレチン－グルカゴンファミリーのメンバーである。ヒトＧＩＰＲは、４６６個のアミノ酸を有する。

グルカゴン様ペプチド１（ＧＬＰ－１）は、プログルカゴン遺伝子に由来する３１個のアミノ酸から成るペプチドである。ＧＬＰ－１は、小腸Ｌ細胞によって分泌され、食物摂取に応答して放出され、膵臓β細胞からのインスリン分泌を誘導する。インクレチン作用に加えて、ＧＬＰ－１は更に、グルカゴンの分泌を低減させ、胃内容排出を遅延させ、カロリー摂取量を低減させる。ＧＬＰ－１は、クラスＢのＧタンパク質共役型受容体に属するＧＬＰ－１受容体（ＧＬＰ－１Ｒ）の活性化によってその作用を発揮する。ＧＬＰ－１の機能は、ＤＰＰ－ＩＶ酵素による迅速な分解によって制限される。エキセナチド、リラグルチド、デュラグルチド等の持続性のＧＬＰ－１Ｒアゴニストが開発されており、２型糖尿病を有する患者の血糖コントロールを改善するために、臨床的に使用されている。更に、ＧＬＰ－１Ｒアゴニストは、患者における体重低減並びに血圧及び血漿コレステロール値の低減も促進することができる。

Ｂｏｏｔｃｏｖ ＭＲ，１９９７，Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ９４：１１５１４－９ Ｈｒｏｍａｓ Ｒ １９９７，Ｂｉｏｃｈｉｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ．１３５４：４０－４ Ｌａｗｔｏｎ ＬＮ １９９７，Ｇｅｎｅ．２０３：１７－２６ Ｐａｒａｌｋａｒ ＶＭ １９９８，Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ．２７３：１３７６０－７ Ｂａｅｋ ＳＪ ２００１，Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ．２７６：３３３８４－９２

従って、ＧＤＦ１５分子をＧＬＰ－１Ｒアゴニスト（例えば、ＧＬＰ－１類似体）及び／又はＧＩＰＲアンタゴニスト（例えば、ＧＩＰＲ抗体）等の１種以上の他の治療薬と一緒に含む併用療法が必要とされている。本開示は、この必要を満たし、関連する利点を提供する。

本明細書では、ＧＤＦ１５分子及び別の治療薬を投与することを含む状態を治療する方法を含む、ＧＤＦ１５分子を含む併用療法が提供される。一実施形態では、他の治療薬は、ＧＩＰＲ抗原結合タンパク質等のＧＩＰＲアンタゴニストである。一実施形態では、ＧＩＰＲ抗原結合タンパク質は、抗体である。別の実施形態では、他の治療薬は、デュラグルチド等のＧＬＰ－１Ｒアゴニストである。

更に本明細書では、ＧＤＦ１５分子及びＧＩＰＲアンタゴニストを投与する工程を含む、対象における代謝状態を治療する方法であって、ここでＧＤＦ１５分子及びＧＩＰＲアンタゴニストを投与する工程が、ＧＤＦ１５分子単独又はＧＩＰＲアンタゴニスト単独の投与と比較して相乗効果を有する方法が提供される。

本開示は更に、ＧＤＦ１５分子及びデュラグルチドを投与する工程を含む、対象における代謝状態を治療する方法であって、ここでＧＤＦ１５分子及びデュラグルチドを投与する工程が、ＧＤＦ１５分子単独又はデュラグルチド単独の投与と比較して相乗効果を有する方法を提供する。

一実施形態では、併用療法は、ＧＤＦ１５分子を本明細書及び表６に記載の対応するＦｃ分子と一緒に投与する工程を含む。

一実施形態では、ＧＤＦ１５分子及び他の治療薬は、同時に投与される。別の実施形態では、ＧＤＦ１５分子及び他の治療薬は、連続的に投与される。

更に本明細書では、ＧＤＦ１５分子及びＧＩＰＲアンタゴニストを含む医薬組成物等のＧＤＦ１５分子及び他の治療薬を含む医薬組成物であって、ここでその組成物の投与が、ＧＤＦ１５分子単独又はＧＩＰＲアンタゴニスト単独の投与と比較して相乗効果を有する医薬組成物が提供される。幾つかの実施形態では、ＧＩＰＲアンタゴニストは、抗体である。幾つかの実施形態では、相乗効果は、体重を低減させることにある。本組成物のＧＩＰＲアンタゴニストは、ＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２、ＣＤＲＬ３、ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３を含み得るが、ここでＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２、ＣＤＲＬ３、ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３は、それぞれ配列番号６５～６７及び７７～７９；配列番号６８～７０及び８０～８２；配列番号７１～７３及び８３～８５；又は配列番号７４～７６及び８６～８８のアミノ酸配列を含む。幾つかの実施形態では、本組成物のＧＩＰＲアンタゴニストは、それぞれ配列番号８９及び９０；９１及び９２；９３及び９４；又は９５及び９６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域及び重鎖可変領域を含む。幾つかの実施形態では、本組成物のＧＩＰＲアンタゴニストは、それぞれ配列番号９７及び９８；９９及び１００；１０１及び１０２；１０３及び１０４又は１０５及び１０６のアミノ酸配列を含む軽鎖及び重鎖を含む。幾つかの実施形態では、本組成物のＧＤＦ１５分子は、Ｆｃ領域に連結されたＧＤＦ１５領域を含む融合タンパク質である。幾つかの実施形態では、ＧＤＦ１５領域は、リンカーを介してＦｃ領域に連結されている。幾つかの実施形態では、ＧＤＦ１５領域は、配列番号６のアミノ酸配列及び少なくとも１つの変異を含む。幾つかの実施形態では、変異の少なくとも１つは、５位のアスパラギン酸塩の変異である。幾つかの実施形態では、５位のアスパラギン酸塩は、グルタミン酸塩に変異する。幾つかの実施形態では、ＧＤＦ１５領域は、３位のアスパラギンの変異を更に含む。幾つかの実施形態では、３位のアスパラギンは、グルタミンに変異する。幾つかの実施形態では、ＦＣ領域に連結されたＧＤＦ分子のリンカーは、（Ｇ４Ｓ）ｎ又は（Ｇ４Ｑ）ｎリンカー（式中、ｎは、０より大きい（例えば、ｎは１又は２である））である。Ｆｃ領域は、電荷対変異若しくは短縮ヒンジ領域、又はその両方を含み得る。幾つかの実施形態では、Ｆｃ領域は、表３から選択される。更に他の実施形態では、本組成物は、例えば、本明細書及び表６に記載したように、ＧＤＦ１５分子に対応するＦｃ分子を更に含む。

更に本明細書では、ＧＤＦ１５分子及びデュラグルチドを含む医薬組成物であって、ここでその組成物の投与が、ＧＤＦ１５分子単独又はデュラグルチド単独の投与と比較して相乗効果を有する医薬組成物が提供される。ＧＤＦ１５分子及びデュラグルチドを含む医薬組成物であって、ここで本組成物の投与が、ＧＤＦ１５分子単独又はデュラグルチド単独の投与と比較して相乗効果を有する医薬組成物。幾つかの実施形態では、相乗効果は、体重を低減させることにある。幾つかの実施形態では、本組成物のＧＤＦ１５分子は、Ｆｃ領域に連結されたＧＤＦ１５領域を含む融合タンパク質である。幾つかの実施形態では、ＧＤＦ１５領域は、リンカーを介してＦｃ領域に連結されている。幾つかの実施形態では、ＧＤＦ１５領域は、配列番号６のアミノ酸配列及び少なくとも１つの変異を含む。幾つかの実施形態では、変異の少なくとも１つは、５位のアスパラギン酸塩の変異である。幾つかの実施形態では、５位のアスパラギン酸塩は、グルタミン酸塩に変異する。幾つかの実施形態では、ＧＤＦ１５領域は、３位のアスパラギンの変異を更に含む。幾つかの実施形態では、３位のアスパラギンは、グルタミンに変異する。幾つかの実施形態では、ＦＣ領域に連結されたＧＤＦ分子のリンカーは、（Ｇ４Ｓ）ｎ又は（Ｇ４Ｑ）ｎリンカー（式中、ｎは、０より大きい（例えば、ｎは１又は２である））である。Ｆｃ領域は、電荷対変異若しくは短縮ヒンジ領域、又はその両方を含み得る。幾つかの実施形態では、Ｆｃ領域は、表３から選択される。更に他の実施形態では、本組成物は、例えば、本明細書及び表６に記載したように、ＧＤＦ１５分子に対応するＦｃ分子を更に含む。

ビヒクルが週１回（Ａ群）；デュラグルチドが週２回（Ｂ群）；ＧＩＰＲ抗体２．６３．１が週１回及びビヒクルが週１回であって、後者はデュラグルチドの投与日と交互に（Ｃ群）；ＦｃΔ１０（－）－（Ｇ４Ｓ）４－ＧＤＦ１５（配列番号３９）（そのヘテロ二量体化パートナーであるＦｃΔ１０（＋，Ｋ）（配列番号３２）と一緒に週１回）及び週１回ビヒクルであって、後者はデュラグルチドの投与日と交互に（Ｄ群）；ＦｃΔ１０（－）－（Ｇ４Ｓ）４－ＧＤＦ１５）（ヘテロ二量体化パートナーであるＦｃΔ１０（＋，Ｋ））と一緒に週１回及びデュラグルチドが週２回（Ｅ群）；ＦｃΔ１０（－）－（Ｇ４Ｓ）４－ＧＤＦ１５（そのヘテロ二量体化パートナーであるＦｃΔ１０（＋，Ｋ）と一緒に）週１回及びＧＩＰＲ抗体２．６３．１が週１回（Ｆ群）投与されたマウスにおける体重（ｇ）変化を示す図である。 Ａ～Ｆ群におけるマウスの体重変化率（％）を示す図である。 治療開始２週間後のＡ～Ｆ群におけるマウスの体重変化率（％）を示す図である。 治療開始５週間後のＡ～Ｆ群におけるマウスの体重変化率（％）を示す図である。 治療の２週間後のＡ～Ｆ群におけるマウスの経口糖耐能試験（ＯＧＴＴ）からの血糖値を示す図である。 治療２週間後のＡ～Ｆ群におけるマウスのＯＧＴＴからの糖耐能ＡＵＣ試験結果を示す図である。 治療５週間後のＡ～Ｆ群におけるマウスの腹腔内糖耐能試験（ＩＰＧＴＴ）からの血糖値を示す図である。 治療開始５週間後のＡ～Ｆ群におけるマウスのＩＰＧＴＴからの糖耐能ＡＵＣ試験結果を示す図である。 Ａ～Ｆ群におけるマウスの治療２週間後及び５週間後に測定した空腹時血糖値を示す図である。 Ａ～Ｆ群におけるマウスの治療２週間後及び５週間後に測定した血清インスリン値を示す図である。 Ａ～Ｆ群におけるマウスの治療２週間後及び５週間後に測定した血清トリグリセリド値を示す図である。 Ａ～Ｆ群におけるマウスの治療２週間後及び５週間後に測定した血清総コレステロール値を示す図である。 Ａ～Ｆ群におけるマウスの治療１週間中の連続３日間に測定した１日食物摂取量を示す図である。

本明細書では、ＧＤＦ１５分子及び別の治療薬若しくは分子を含む併用療法が提供される。一実施形態では、他の作用物質若しくは分子は、体重、食物摂取量を低減させる、及び／又は肥満症及び／又は関連状態を治療する分子である。更に本明細書において提供されるのは、分子を作製する方法及び分子を使用する方法である。

幾つかの実施形態では、ＧＤＦ１５分子は、ＧＤＦ１５－Ｆｃ融合タンパク質である。融合タンパク質は、Ｆｃ領域に連結されたＧＤＦ１５領域を含み得る。幾つかの実施形態では、ＧＤＦ１５領域は、リンカーを介してＦｃに連結されている。幾つかの実施形態では、ＧＤＦ１５領域は、野生型ＧＤＦ１５を含む。ヒトＧＤＦ１５及びマウスＧＤＦ１５はどちらも、シグナルペプチド及びプロドメインを有する。全長ヒトＧＤＦ１５のヌクレオチド配列は、下記である：

全長ヒトＧＤＦ１５（３０８個のアミノ酸）のアミノ酸配列は、下記である：

そのシグナル配列を含まないヒトＧＤＦ１５のヌクレオチド配列は、下記である：

その２９アミノ酸シグナル配列（２７９個のアミノ酸）を含まないヒトＧＤＦ１５のアミノ酸配列は、下記である：

そのシグナルペプチド若しくはプロドメインを含まないヒトＧＤＦ１５のヌクレオチド配列は、下記である：

そのシグナルペプチド若しくはプロドメイン（１１２個のアミノ酸のＧＤＦ１５の活性ドメイン）を含まないヒトＧＤＦ１５のアミノ酸配列は、下記である：

全長マウスＧＤＦ１５のヌクレオチド配列は、下記である：

全長マウスＧＤＦ１５（３０３個のアミノ酸）のアミノ酸配列は、下記である：

そのシグナル配列を含まないマウスＧＤＦ１５のヌクレオチド配列は、下記である：

その３２アミノ酸のシグナル配列（２７１個のアミノ酸）を含まないマウスＧＤＦ１５のアミノ酸配列は、下記である：

そのシグナル配列若しくはプロドメインを含まないマウスＧＤＦ１５のヌクレオチド配列は、下記である：

そのシグナルペプチド若しくはプロドメイン（１１５個のアミノ酸の活性ドメイン）を含まないマウスＧＤＦ１５のアミノ酸配列は、下記である：

幾つかの実施形態では、ＧＤＦ１５分子は、例えば、そのシグナルペプチド若しくはプロドメインを含まないＧＤＦ１５であるＧＤＦ１５の活性ドメインを含むＧＤＦ１５領域を含む。幾つかの実施形態では、ＧＤＦ１５領域は、配列番号６又は１２のアミノ酸配列を含む。幾つかの実施形態では、ＧＤＦ１５領域は、ＧＤＦ１５の活性ドメインにおける少なくとも１つの変異等の１つ以上の変異を有するＧＤＦ１５配列を含む。特定の実施形態では、１つ又は複数の変異は、ＧＤＦ１５の活性を低減又は消失させない。幾つかの実施形態では、ＧＤＦ１５領域は、ヒトＧＤＦ１５の活性ドメイン内に変異を含む。一実施形態では、変異は、最初の３個のアミノ酸が除去されているヒトＧＤＦ１５の活性ドメインである「ＧＤＦ１５（Δ３）」（即ち、配列番号１３）等の活性ドメインの最初の３個のアミノ酸の欠失である。

幾つかの実施形態では、ＧＤＦ１５領域は、ヒトＧＤＦ１５の活性ドメイン（配列番号６）の３位のアスパラギン（Ｎ３）の変異を含む。Ｎ３変異は、配列番号６の３位のアスパラギン残基の変異、又はＧＤＦ１５アミノ酸配列における配列番号６の３位のアスパラギンに相当するアスパラギン残基の変異を指すことができる。幾つかの実施形態では、３位のアスパラギンは、グルタミン（Ｎ３Ｑ）又はアスパラギン酸塩（Ｎ３Ｄ）に変異する。従って、幾つかの実施形態では、ＧＤＦ１５分子は、配列番号１４のアミノ酸配列を有するＧＤＦ１５（Ｎ３Ｑ）のＧＤＦ１５領域を含む。他の実施形態では、ＧＤＦ１５分子は、配列番号１５のアミノ酸配列を有するＧＤＦ１５（Ｎ３Ｄ）のＧＤＦ１５領域を含む。幾つかの実施形態では、ＧＤＦ１５領域は、ヒトＧＤＦ１５の活性ドメイン（配列番号６）の５位のアスパラギン酸塩（Ｄ５）の変異を含む。Ｄ５変異は、配列番号６の５位のアスパラギン酸塩残基の変異、又はＧＤＦ１５アミノ酸配列における配列番号６の５位のアスパラギン酸塩に相当するアスパラギン酸塩残基の変異を指すことができる。一実施形態では、５位のアスパラギン酸塩は、グルタミン酸塩（Ｄ５Ｅ）に変異する。従って、幾つかの実施形態では、ＧＤＦ１５分子は、配列番号１６のアミノ酸配列を有するＧＤＦ１５のＧＤＦ１５領域（Ｄ５Ｅ）を含む。

更に他の実施形態では、ＧＤＦ１５領域は、Δ３変異及びＤ５変異の組み合わせ、例えば、ＧＤＦ１５（Δ３／Ｄ５Ｅ）（配列番号１７）又はＮ３変異及びＤ５変異の組み合わせ、例えば、ＧＤＦ１５（Ｎ３Ｄ／Ｄ５Ｅ）若しくはＧＤＦ１５（Ｎ３Ｑ／Ｄ５Ｅ）等の変異の組み合わせを含む。ＧＤＦ１５領域は、配列番号１８のアミノ酸配列を含む。

表１は、ＧＤＦ１５分子に使用できるＧＤＦ１５領域の例を提供する。

幾つかの実施形態では、ＧＤＦ１５分子は、Ｆｃに直接融合している。他の実施形態では、Ｆｃは、リンカーを介してＧＤＦ１５分子に融合している。幾つかの実施形態では、リンカーは、Ｇ４Ｓ（配列番号１９）リンカーである。他の実施形態では、リンカーは、Ｇ４Ｑ（配列番号２４）リンカーである。リンカーは、（Ｇ４Ｓ）ｎリンカー又は（Ｇ４Ｑ）ｎリンカー（式中、ｎは、０より大きい）であり得る。幾つかの実施形態では、ｎは、１又は２である。幾つかの実施形態では、融合タンパク質は、Ｇ４Ａ（配列番号１０７）リンカーであるリンカー、例えば（Ｇ４Ａ）ｎリンカー（式中、ｎは、０より大きい）を有する。幾つかの実施形態では、ｎは、１又は２である。幾つかの実施形態では、ｎは、２より大きく、３、４、５、６、７又は８等である。幾つかの実施形態では、リンカーは、表２に示すように、配列番号１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５又は１０７のアミノ酸配列を含む。

幾つかの実施形態では、ＧＤＦ１５分子は、Ｆｃ領域を含む。Ｆｃ領域は、抗体の重鎖のＦｃドメインを含み得る、又は抗体の重鎖のＦｃドメインに由来し得る。幾つかの実施形態では、Ｆｃ領域は、電荷対変異、グリコシル化部位における変異又は非天然型アミノ酸の包含等の変異を有するＦｃドメインを含み得る。Ｆｃ領域は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３又はＩｇＧ４のヒトＩｇＧ定常ドメインに由来し得る。幾つかの実施形態では、Ｆｃ領域は、ＩｇＡ重鎖、ＩｇＤ重鎖、ＩｇＥ重鎖及びＩｇＭ重鎖の定常ドメインを含む。

幾つかの実施形態では、Ｆｃ領域は、電荷対の変異を有するＦｃドメインを含む。電荷を持つＦｃ領域を生じさせる変異を導入することにより、ＧＤＦ１５分子は、反対電荷を有する対応するＦｃ分子と二量体化することができる。例えば、アスパラギン酸塩からリジンへの変異（Ｅ３５６Ｋ、３５６は、ＥＵナンバリングによる位置であり、表３～５に示した位置に相当する）及びグルタミン酸塩からリジンへの変異（Ｄ３９９Ｋ、３９９は、ＥＵナンバリングによる位置であり、表３～５に示した位置に相当する）は、任意選択的にリンカーを介してＧＤＦ１５領域に連結されたＦｃ領域に導入することができ、ＧＤＦ１５分子に対する正電荷を持つＦｃ領域を生じさせる。リジンからアスパラギン酸塩への変異（Ｋ３９２Ｄ、Ｋ４０９Ｄ；３９２及び４０９は、ＥＵナンバリングによる位置であり、表３～５に示した位置に相当する）は、別の分子のＦｃドメインに導入することがで、負電荷を持つＦｃ分子を生じさせる。負電荷を持つＦｃ分子におけるアスパラギン酸塩残基は、静電気力によりＧＤＦ１５分子の正電荷を持つＦｃ領域のリジン残基と結合し、ＧＤＦ１５分子のＦｃ領域とＦｃ分子との間のＦｃヘテロ二量体の形成を促進する一方、ＧＤＦ１５分子のＦｃ領域間又はＦｃ分子間のＦｃホモ二量体の形成を低減又は防止することができる。

幾つかの実施形態では、１つ又は複数のリジンからアスパラギン酸塩への変異（Ｋ３９２Ｄ、Ｋ４０９Ｄ）は、任意選択的にリンカーを介してＧＤＦ１５領域に連結されたＦｃ領域に導入され、アスパラギン酸塩からリジンへの変異（Ｅ３５６Ｋ）及びグルタミン酸塩からリジンへの変異（Ｄ３９９Ｋ）は別の分子のＦｃドメインに導入される。ＧＤＦ１５分子のＦｃ領域内のアスパラギン酸塩残基は、静電気力によりＦｃ分子のリジン残基と結合し、ＧＤＦ１５分子のＦｃ領域とＦｃ分子との間のＦｃヘテロ二量体の形成を促進し、ＧＤＦ１５分子のＦｃ領域間又はＦｃ分子間のＦｃホモ二量体の形成を低減又は防止することができる。

幾つかの実施形態では、ＧＤＦ１５分子は、変異ヒンジ領域を有するＦｃドメインを含むＦｃ領域を含む。幾つかの実施形態では、Ｆｃドメインは、ヒンジ内に欠失を含む。幾つかの実施形態では、ヒンジから１０個のアミノ酸が欠失している（例えば、ＦｃΔ１０）。他の実施形態では、ヒンジから１６個のアミノ酸が欠失している（例えば、ＦｃΔ１６）。幾つかの実施形態では、Ｆｃドメインは、ＦＣドメインが正電荷を持つ、又は負電荷を持つように、ヒンジ欠失（例えば、ＦｃΔ１０又はＦｃΔ１６）及び電荷対の変異を含む。例えば、Ｆｃドメインは、ＦｃΔ１０（－）等のヒンジにおける１０個のアミノ酸欠失並びにリジンからアスパラギン酸塩への変異（Ｋ３９２Ｄ、Ｋ４０９Ｄ）を含み得る。別の実施形態では、Ｆｃドメインは、ＦｃΔ１０（＋）等のヒンジにおける１０個のアミノ酸欠失並びにアスパラギン酸塩からリジンへの変異（Ｅ３５６Ｋ）及びグルタミン酸塩からリジンへの変異（Ｄ３９９Ｋ）を含み得る。別の実施形態では、Ｆｃドメインは、ＦｃΔ１６（－）等のヒンジにおける１６個のアミノ酸欠失及びリジンからアスパラギン酸塩への変異（Ｋ３９２Ｄ、Ｋ４０９Ｄ）を含み得る。別の実施形態では、Ｆｃドメインは、ＦｃΔ１６（＋）等のヒンジにおける１６個のアミノ酸欠失並びにアスパラギン酸塩からリジンへの変異（Ｅ３５６Ｋ）及びグルタミン酸塩からリジンへの変異（Ｄ３９９Ｋ）を含み得る。

幾つかの実施形態では、ヒンジ欠失及び電荷対の変異を含むＦｃ分子は、そうしたＧＤＦ１５分子とヘテロ二量体化する。例えば、Ｆｃ分子は、ヒンジ欠失並びヒンジ欠失及びにＧＤＦ１５分子のＦｃ領域の電荷対の変異を相補する電荷対の変異を有し得る。例えば、Ｆｃ分子は、任意選択的にＣ末端リジン（例えば、ＦｃΔ１０（－、Ｋ））を含み得る、ＦｃΔ１０（－）等のヒンジにおける１０個のアミノ酸欠失並びにリジンからアスパラギン酸塩への変異（Ｋ３９２Ｄ、Ｋ４０９Ｄ）を有するＦｃドメインを含み得る。このＦｃ分子は、ＦｃΔ１０（＋）を含むＧＤＦ１５分子とヘテロ二量体化することができる。別の実施形態では、Ｆｃ分子は、任意選択的にＣ末端リジン（例えば、ＦｃΔ１０（＋、Ｋ））を含み得る、ＦｃΔ１０（＋）等のヒンジにおける１０個のアミノ酸欠失並びにアスパラギン酸塩からリジンへの変異（Ｅ３５６Ｋ）及びグルタミン酸塩からリジンへの変異（Ｄ３９９Ｋ）を含み得る。このＦｃ分子は、ＦｃΔ１０（－）を含むＧＤＦ１５分子とヘテロ二量体化することができる。別の実施形態では、Ｆｃ分子は、任意選択的にＣ末端リジン（例えば、ＦｃΔ１６（－、Ｋ））を含み得る、ＦｃΔ１６（－）等のヒンジにおける１６個のアミノ酸欠失並びにリジンからアスパラギン酸塩への変異（Ｋ３９２Ｄ、Ｋ４０９Ｄ）を含み得る。ＦｃΔ１６（＋）を含むＧＤＦ１５分子とヘテロ二量体化できるＦｃ分子。別の実施形態では、Ｆｃ分子は、任意選択的にＣ末端リジン（例えば、ＦｃΔ１６（－、Ｋ））を含み得る、ＦｃΔ１６（＋）等のヒンジにおける１６個のアミノ酸欠失並びにアスパラギン酸塩からリジンへの変異（Ｅ３５６Ｋ）及びグルタミン酸塩からリジンへの変異（Ｄ３９９Ｋ）を含み得る。Ｆｃ分子は、ＦｃΔ１６（－）を含むＧＤＦ１５分子とヘテロ二量体化することができる。

幾つかの実施形態では、Ｆｃ領域又はＦｃ分子は、Ｌ２３４Ａ変異及び／又はＬ２３５Ａ変異を有するＦｃドメインを含むが、ここで２３４及び２３５は、ＥＵナンバリングを用いた位置であり、表３～５に示した位置に相当する。Ｆｃドメインは、Ｌ２３４Ａ変異、Ｌ２３５Ａ変異、電荷対の変異、ヒンジ欠失又はこれらの任意の組み合わせを含み得る。幾つかの実施形態では、Ｆｃドメインは、Ｌ２３４Ａ変異及びＬ２３５Ａ変異の両方を含む。幾つかの実施形態では、Ｆｃドメインは、ヒンジ欠失、Ｌ２３４Ａ変異、Ｌ２３５Ａ変異及び電荷対の変異、例えばＦｃΔ１０（＋、Ｌ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａ）、ＦｃΔ１０（－、Ｌ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａ）、ＦｃΔ１６（＋、Ｌ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａ）又はＦｃΔ１６（－、Ｌ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａ）を含む。幾つかの実施形態では、Ｆｃドメインは、任意選択的なＣ末端リジン、例えば、ＦｃΔ１０（＋、Ｋ、Ｌ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａ）、ＦｃΔ１０（－、Ｋ、Ｌ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａ）、ＦｃΔ１６（＋、Ｋ、Ｌ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａ）又はＦｃΔ１６（－、Ｋ、Ｌ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａ）を含む。

幾つかの実施形態では、Ｆｃ領域又はＦｃ分子は、「システインクランプ」を有するＦｃドメインを含む。システインクランプ変異は、変異により特定の位置でシステインをＦｃドメインに導入することを含むので、やはり変異により特定の位置で導入されたシステインを有する別のＦｃドメインとインキュベートすると、２つのＦｃドメイン間で（例えば、「システインクランプ」変異を有するＦｃΔ１６（＋）ドメインと「システインクランプ」変異を有するＦｃΔ１６（－）ドメインとの間で）ジスルフィド結合（システインクランプ）が形成され得る。システインは、ＦｃドメインのＣＨ３ドメインに導入することができる。幾つかの実施形態では、Ｆｃドメインは、１つ以上のそうしたシステインクランプ変異を含み得る。一実施形態では、システインクランプは、セリンからシステインへの変異（Ｓ３５４Ｃ、ここで３５４は、ＥＵナンバリングによる位置であり、表３～５に示した位置に相当する）を第１のＦｃドメインに、チロシンからシステインへの変異（Ｙ３４９Ｃ、ここで３４９は、ＥＵナンバリングによる位置であり、表３～５に示した位置に相当する）を第２のＦｃドメインに導入することにより生じる。一実施形態では、ＧＤＦ１５分子は、システインクランプ、負電荷対の変異及び１６アミノ酸ヒンジ欠失を有するＦｃドメイン（例えば、ＧＤＦ１５－ＦｃΔ１６（－、ＣＣ））を含むＦｃ領域並びにシステインクランプ、正電荷対の変異及び１６個のアミノ酸ヒンジ欠失、更に任意選択のＣ末端リジンを含むＦｃドメイン（例えば、ＦｃΔ１６（＋、Ｋ、ＣＣ））を含むＦｃ分子を含む。システインクランプは、ＧＤＦ－Ｆｃ分子のＦｃ分子とのヘテロ二量体化を増強することができる。

ＧＤＦ１５分子に使用され得るＦｃ領域の例は、表３に示した。

Ｆｃ分子の例を表４に示したが、表中のＣ末端リジンは任意選択である。

Ｆｃ分子は、相補的Ｆｃドメインを含む分子と二量体化するために使用することができる。例えば、ＦｃΔ１０（＋、Ｋ）のＦｃ分子は、ＦｃΔ１０（－）等の１０個のアミノ酸ヒンジ欠失及び負電荷対の変異を含むＦｃ領域を含む分子（例えば、ＦｃΔ１０（－）のＦｃ領域を含むＧＤＦ１５分子）と二量体化することができる。ＦｃΔ１０（－、Ｋ）のＦｃ分子は、ＦｃΔ１０（＋）等の１０個のアミノ酸ヒンジ欠失及び負電荷対の変異を含むＦｃ領域を含む分子（例えば、ＦｃΔ１０（＋）のＦｃ領域を含むＧＤＦ１５分子）と二量体化することができる。

ＦｃΔ１０（＋、Ｋ、ＣＣ）のＦｃ分子は、ＦｃΔ１０（－、ＣＣ）等の１０個のアミノ酸ヒンジ欠失及び負電荷対の変異を含むＦｃ領域を含む分子（例えば、ＦｃΔ１０（－、ＣＣ）をのＦｃ領域含むＧＤＦ１５分子）と二量体化することができる。ＦｃΔ１６（＋、Ｋ、ＣＣ）のＦｃ分子は、ＦｃΔ１６（－、ＣＣ）等の１０個のアミノ酸ヒンジ欠失及び負電荷対の変異を含むＦｃ領域を含む分子（例えば、ＦｃΔ１６（－、ＣＣ）のＦｃ領域を含むＧＤＦ１５分子）と二量体化することができる。ＦｃΔ１６（＋、Ｋ）のＦｃ分子は、ＦｃΔ１６（－）等の１０個のアミノ酸ヒンジ欠失及び負電荷対の変異を含むＦｃ領域を含む分子（例えば、ＦｃΔ１６（＋）のＦｃ領域を含むＧＤＦ１５分子）と二量体化することができる。ＦｃΔ１０（＋、Ｋ、Ｌ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａ）のＦｃ分子は、ＦｃΔ１０（－、Ｌ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａ）等の１０個のアミノ酸ヒンジ欠失及び負電荷対の変異を含むＦｃ領域を含む分子（例えば、ＦｃΔ１０（－、Ｌ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａ）のＦｃ領域を含むＧＤＦ１５分子）と二量体化することができる。

ＧＤＦ１５－Ｆｃ融合タンパク質であるＧＤＦ１５分子の例は、表５に示した。

幾つかの実施形態では、融合タンパク質は、ＧＤＦ１５領域が２つのＦｃ領域に連結されているｓｃＦｃ－ＧＤＦ１５である。幾つかの実施形態では、融合タンパク質は、配列番号３８と少なくとも８５％、９０％、９５％又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。幾つかの実施形態では、融合タンパク質は、配列番号３８のアミノ酸配列を含む。パーセント配列同一性を計算する際は、配列間で最大のマッチを与える方法で比較されている配列が整列させられる。パーセント同一性を決定するのに使用できるコンピュータープログラムは、ＧＡＰを含むＧＣＧプログラムパッケージである（Ｄｅｖｅｒｅｕｘ ｅｔ ａｌ．，（１９８４），Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄ Ｒｅｓ．１２：３８７；Ｇｅｎｅｔｉｃｓ Ｃｏｍｐｕｔｅｒ Ｇｒｏｕｐ，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ，Ｍａｄｉｓｏｎ，Ｗｉｓ．）。パーセント配列同一性が決定されなければならない２つのポリペプチド又はポリヌクレオチドは、コンピューターアルゴリズムＧＡＰを使用して整列させることができる。配列は、そのそれぞれのアミノ酸又はヌクレオチドの最適なマッチングが得られるように整列される（アルゴリズムにより決定される「マッチドスパン（ｍａｔｃｈｅｄ ｓｐａｎ）」）。アルゴリズムと共に、ギャップ開始ペナルティ（平均ダイアゴナル（ｄｉａｇｏｎａｌ）の３倍として計算され、「平均ダイアゴナル」は、使用している比較マトリックスのダイアゴナルの平均であり；「ダイアゴナル」は、特定の比較マトリックスによりそれぞれの完全なアミノ酸マッチに割り当てられたスコア又は数字である）及びギャップ伸長ペナルティ（通常、ギャップ開始ペナルティの１／１０倍である）の他、ＰＡＭ２５０又はＢＬＯＳＵＭ６２等の比較マトリックスが使用される。所定の実施形態では、標準比較マトリックス（ＰＡＭ ２５０比較マトリックスについては、Ｄａｙｈｏｆｆ ｅｔ ａｌ．，（１９７８），Ａｔｌａｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｎｄ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ５：３４５－３５２を参照されたい；ＢＬＯＳＵＭ ６２比較マトリックスについては、Ｈｅｎｉｋｏｆｆ ｅｔ ａｌ．，（１９９２），Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９：１０９１５－１０９１９を参照されたい）もアルゴリズムによって使用される。ＧＡＰプログラムを用いたパーセント同一性の決定に使用できるパラメーターは、以下である：
アルゴリズム：Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ ｅｔ ａｌ．，１９７０，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４８：４４３－４５３；
比較マトリックス：Ｈｅｎｉｋｏｆｆ ｅｔ ａｌ．，１９９２、上記からのＢＬＯＳＵＭ ６２；
ギャップペナルティ：１２（しかしエンドギャップについてはペナルティなし）
ギャップ長ペナルティ：４
類似性の閾値：０
２つのアミノ酸配列を整列させるための所定のアライメントスキームでは、２つの配列の短い領域のみのマッチングが生じることがあり、この整列された小さな領域は、２つの全長配列間で顕著な関係がない場合でも、非常に高い配列同一性を有することがある。従って、選択したアライメント法（例えば、ＧＡＰプログラム）は、望ましい場合、標的ポリペプチドの少なくとも連続する５０アミノ酸にわたるアライメントが生じるように調整することができる。

幾つかの実施形態では、ＧＤＦ１５分子は、ＦｃΔ１０（－）－（Ｇ４Ｓ）４－ＧＤＦ１５、ＦｃΔ１０（＋）－（Ｇ４）－ＧＤＦ１５、ＦｃΔ１０（－）－ＧＤＦ１５（Δ３）、ＦｃΔ１０（－）－ＧＤＦ１５（Ｎ３Ｄ）、ＦｃΔ１０（－，ＣＣ）－ＧＤＦ１５（Δ３）、ＦｃΔ１０（－，ＣＣ）－ＧＤＦ１５（Ｎ３Ｄ）、ＦｃΔ１６（－，ＣＣ）－ＧＤＦ１５（Δ３／Ｄ５Ｅ）、ＦｃΔ１６（－，ＣＣ）－ＧＤＦ１５（Ｎ３Ｑ／Ｄ５Ｅ）、ＦｃΔ１６（－）－ＧＤＦ１５（Ｎ３Ｑ／Ｄ５Ｅ）、ＦｃΔ１６（－）－（Ｇ４Ｑ）４－ＧＤＦ１５、ＦｃΔ１６（－）－（Ｇ４Ｑ）４－ＧＤＦ１５（Ｎ３Ｑ）、ＦｃΔ１６（－）－（Ｇ４Ｑ）４－ＧＤＦ１５（Ｎ３Ｑ／Ｄ５Ｅ）、ＦｃΔ１６（－）－（Ｇ４Ｓ）２－ＧＤＦ１５（Ｎ３Ｑ）、ＦｃΔ１６（－）－（Ｇ４Ｓ）２－ＧＤＦ１５（Ｎ３Ｑ／Ｄ５Ｅ）、ＦｃΔ１６（－）－Ｇ４Ｓ－ＧＤＦ１５（Ｎ３Ｑ）、ＦｃΔ１６（－）－Ｇ４Ｓ－ＧＤＦ１５（Ｎ３Ｑ／Ｄ５Ｅ）、ＦｃΔ１６（－）－ＧＤＦ１５（Ｎ３Ｑ）、ＦｃΔ１０（－，Ｌ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａ）－（Ｇ４Ｑ）４－ＧＤＦ１５（Ｎ３Ｑ）又はＦｃΔ１０（－，Ｌ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａ）－（Ｇ４Ｑ）４－ＧＤＦ１５（Ｎ３Ｑ／Ｄ５Ｅ）である。

幾つかの実施形態では、ＧＤＦ１５分子は、配列番号３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６又は５７のアミノ酸配列を含む。幾つかの実施形態では、ＧＤＦ１５分子は、配列番号３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６又は５７と少なくとも８５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。幾つかの実施形態では、ＧＤＦ１５分子は、配列番号３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６又は５７と少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。幾つかの実施形態では、ＧＤＦ１５分子は、配列番号３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６又は５７と少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。幾つかの実施形態では、ＧＤＦ１５分子は、配列番号３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６又は５７と少なくとも９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。

幾つかの実施形態では、ＧＤＦ１５分子は、そのＦｃ領域及び／又はＧＤＦ１５領域と少なくとも８５％、９０％、９５％又は９９％の配列同一性を有するＦｃΔ１０（－）－（Ｇ４Ｓ）４－ＧＤＦ１５、ＦｃΔ１０（＋）－（Ｇ４）－ＧＤＦ１５、ＦｃΔ１０（－）－ＧＤＦ１５（Δ３）、ＦｃΔ１０（－）－ＧＤＦ１５（Ｎ３Ｄ）、ＦｃΔ１０（－，ＣＣ）－ＧＤＦ１５（Δ３）、ＦｃΔ１０（－，ＣＣ）－ＧＤＦ１５（Ｎ３Ｄ）、ＦｃΔ１６（－，ＣＣ）－ＧＤＦ１５（Δ３／Ｄ５Ｅ）、ＦｃΔ１６（－，ＣＣ）－ＧＤＦ１５（Ｎ３Ｑ／Ｄ５Ｅ）、ＦｃΔ１６（－）－ＧＤＦ１５（Ｎ３Ｑ／Ｄ５Ｅ）、ＦｃΔ１６（－）－（Ｇ４Ｑ）４－ＧＤＦ１５、ＦｃΔ１６（－）－（Ｇ４Ｑ）４－ＧＤＦ１５（Ｎ３Ｑ）、ＦｃΔ１６（－）－（Ｇ４Ｑ）４－ＧＤＦ１５（Ｎ３Ｑ／Ｄ５Ｅ）、ＦｃΔ１６（－）－（Ｇ４Ｓ）２－ＧＤＦ１５（Ｎ３Ｑ）、ＦｃΔ１６（－）－（Ｇ４Ｓ）２－ＧＤＦ１５（Ｎ３Ｑ／Ｄ５Ｅ）、ＦｃΔ１６（－）－Ｇ４Ｓ－ＧＤＦ１５（Ｎ３Ｑ）、ＦｃΔ１６（－）－Ｇ４Ｓ－ＧＤＦ１５（Ｎ３Ｑ／Ｄ５Ｅ）、ＦｃΔ１６（－）－ＧＤＦ１５（Ｎ３Ｑ）、ＦｃΔ１０（－，Ｌ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａ）－（Ｇ４Ｑ）４－ＧＤＦ１５（Ｎ３Ｑ）又はＦｃΔ１０（－，Ｌ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａ）－（Ｇ４Ｑ）４－ＧＤＦ１５（Ｎ３Ｑ／Ｄ５Ｅ）分子である。例えば、そのＦｃ領域及び／又はＧＤＦ１５領域と少なくとも８５％、９０％、９５％又は９９％の配列同一性を有するＦｃΔ１０（－）－（Ｇ４Ｓ）４－ＧＤＦ１５分子は、ヒンジ領域の１０個のアミノ酸欠失及び負電荷対の変異を有し、且つ配列番号２６と少なくとも８５％、９０％、９５％又は９９％の配列同一性を有するＦｃ領域、及び／又は配列番号６と少なくとも８５％、９０％、９５％又は９９％の配列同一性を有するＧＤＦ１５領域を有するＧＤＦ１５分子を含む。別の例では、そのＦｃ領域及び／又はＧＤＦ１５領域と少なくとも８５％、９０％、９５％又は９９％の配列同一性を有するＦｃΔ１６（－）－（Ｇ４Ｑ）４－ＧＤＦ１５（Ｎ３Ｑ／Ｄ５Ｅ）分子は、ヒンジ領域の１６個のアミノ酸欠失及び負電荷対の変異を有し、且つ配列番号３０と少なくとも８５％、９０％、９５％又は９９％の配列同一性を有するＦｃ領域、及び／又は配列番号１８と少なくとも８５％、９０％、９５％又は９９％の配列同一性を有するＧＤＦ１５領域を有するＧＤＦ１５分子を含む。更に別の例では、そのＦｃ領域及び／又はＧＤＦ１５領域と少なくとも８５％、９０％、９５％又は９９％の配列同一性を有するＦｃΔ１０（－、Ｌ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａ）－（Ｇ４Ｑ）４－ＧＤＦ１５（Ｎ３Ｑ／Ｄ５Ｅ）分子は、ヒンジ領域の１０個のアミノ酸欠失、負電荷対の変異並びに２３４位及び２３５位のロイシンからアラニンへの変異を有し、且つ配列番号３１と少なくとも８５％、９０％、９５％又は９９％の配列同一性を有するＦｃ領域、及び／又は配列番号１８と少なくとも８５％、９０％、９５％又は９９％の配列同一性を有するＧＤＦ１５領域を有するＧＤＦ１５分子を含む。

更に本明細書において提供されるのは、本明細書で提供されるＧＤＦ１５分子を含む二量体及び四量体である。一実施形態では、二量体は、配列番号３９～５７の何れか１つのアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５－Ｆｃ融合体を含む。幾つかの実施形態では、配列番号３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６又は５７のアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５－Ｆｃ融合体は、例えば表６に示したように、配列番号３２、３３、３４、３５、３６又は３７（Ｃ末端リジンは任意選択である）のアミノ酸配列を含むＦｃ分子と二量体化する。例えば、幾つかの実施形態では、二量体は、ＦｃΔ１０（－）－（Ｇ４Ｓ）４－ＧＤＦ１５：ＦｃΔ１０（＋、Ｋ）である。別の実施形態では、二量体は、ＦｃΔ１０（－、Ｌ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａ）－（Ｇ４Ｑ）４－ＧＤＦ１５（Ｎ３Ｑ）：ＦｃΔ１０（＋、Ｋ、Ｌ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａ）である。尚別の実施形態では、二量体は、ＦｃΔ１０（－、Ｌ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａ）－（Ｇ４Ｑ）４－ＧＤＦ１５（Ｎ３Ｑ）：ＦｃΔ１０（＋、Ｋ、Ｌ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａ）である。

一実施形態では、配列番号３９のアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５－Ｆｃ融合体は、配列番号３２（Ｃ末端リジンは任意選択）を含むＦｃ分子と二量体化する。別の実施形態では、配列番号４０のアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５－Ｆｃ融合体は、配列番号３３（Ｃ末端リジンは任意選択）を含むＦｃ分子と二量体化する。別の実施形態では、配列番号４１のアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５－Ｆｃ融合体は、配列番号３２（Ｃ末端リジンは任意選択）を含むＦｃ分子と二量体化する。別の実施形態では、配列番号４２のアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５－Ｆｃ融合体は、配列番号３２（Ｃ末端リジンは任意選択）を含むＦｃ分子と二量体化する。別の実施形態では、配列番号４３のアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５－Ｆｃ融合体は、配列番号３４（Ｃ末端リジンは任意選択）を含むＦｃ分子と二量体化する。別の実施形態では、配列番号４４のアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５－Ｆｃ融合体は、配列番号３４（Ｃ末端リジンは任意選択）を含むＦｃ分子と二量体化する。別の実施形態では、配列番号４４のアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５－Ｆｃ融合体は、配列番号３４（Ｃ末端リジンは任意選択）を含むＦｃ分子と二量体化する。別の実施形態では、配列番号４５のアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５－Ｆｃ融合体は、配列番号３５（Ｃ末端リジンは任意選択）を含むＦｃ分子と二量体化する。別の実施形態では、配列番号４６のアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５－Ｆｃ融合体は、配列番号３５（Ｃ末端リジンは任意選択）を含むＦｃ分子と二量体化する。別の実施形態では、配列番号４７のアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５－Ｆｃ融合体は、配列番号３６（Ｃ末端リジンは任意選択）を含むＦｃ分子と二量体化する。別の実施形態では、配列番号４８のアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５－Ｆｃ融合体は、配列番号３６（Ｃ末端リジンは任意選択）を含むＦｃ分子と二量体化する。別の実施形態では、配列番号４９のアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５－Ｆｃ融合体は、配列番号３６（Ｃ末端リジンは任意選択）を含むＦｃ分子と二量体化する。別の実施形態では、配列番号５０のアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５－Ｆｃ融合体は、配列番号３６（Ｃ末端リジンは任意選択）を含むＦｃ分子と二量体化する。別の実施形態では、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５－Ｆｃ融合体は、配列番号３６（Ｃ末端リジンは任意選択）を含むＦｃ分子と二量体化する。別の実施形態では、配列番号５２のアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５－Ｆｃ融合体は、配列番号３６（Ｃ末端リジンは任意選択）を含むＦｃ分子と二量体化する。別の実施形態では、配列番号５３のアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５－Ｆｃ融合体は、配列番号３６（Ｃ末端リジンは任意選択）を含むＦｃ分子と二量体化する。別の実施形態では、配列番号５４のアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５－Ｆｃ融合体は、配列番号３６（Ｃ末端リジンは任意選択）を含むＦｃ分子と二量体化する。別の実施形態では、配列番号５５のアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５－Ｆｃ融合体は、配列番号３６（Ｃ末端リジンは任意選択）を含むＦｃ分子と二量体化する。別の実施形態では、配列番号５６のアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５－Ｆｃ融合体は、配列番号３７（Ｃ末端リジンは任意選択）を含むＦｃ分子と二量体化する。別の実施形態では、配列番号５７のアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５－Ｆｃ融合体は、配列番号３７（Ｃ末端リジンは任意選択）を含むＦｃ分子と二量体化する。

幾つかの実施形態では、二量体は、四量体を形成する。例えば、表６の二量体は、四量体を形成することができる。幾つかの実施形態では、四量体は、同じ二量体から形成される。幾つかの実施形態では、ＦｃΔ１０（－）－（Ｇ４Ｓ）４－ＧＤＦ１５：ＦｃΔ１０（＋，Ｋ）；ＦｃΔ１０（＋）－（Ｇ４）－ＧＤＦ１５：ＦｃΔ１０（－，Ｋ）；ＦｃΔ１０（－）－ＧＤＦ１５（Δ３）：ＦｃΔ１０（＋，Ｋ）；ＦｃΔ１０（－）－ＧＤＦ１５（Ｎ３Ｄ）の二量体：ＦｃΔ１０（＋，Ｋ）；ＦｃΔ１０（－，ＣＣ）－ＧＤＦ１５（Δ３）：ＦｃΔ１０（＋，Ｋ，ＣＣ）；ＦｃΔ１０（－，ＣＣ）－ＧＤＦ１５（Ｎ３Ｄ）：ＦｃΔ１０（＋，Ｋ，ＣＣ）；ＦｃΔ１６（－，ＣＣ）－ＧＤＦ１５（Δ３／Ｄ５Ｅ）：ＦｃΔ１６（＋，Ｋ，ＣＣ）；ＦｃΔ１６（－，ＣＣ）－ＧＤＦ１５（Ｎ３Ｑ／Ｄ５Ｅ）：ＦｃΔ１６（＋，Ｋ，ＣＣ）；ＦｃΔ１６（－）－ＧＤＦ１５（Ｎ３Ｑ／Ｄ５Ｅ）：ＦｃΔ１６（＋，Ｋ）；ＦｃΔ１６（－）－（Ｇ４Ｑ）４－ＧＤＦ１５：ＦｃΔ１６（＋，Ｋ）；ＦｃΔ１６（－）－（Ｇ４Ｑ）４－ＧＤＦ１５（Ｎ３Ｑ）：ＦｃΔ１６（＋，Ｋ）；ＦｃΔ１６（－）－（Ｇ４Ｑ）４－ＧＤＦ１５（Ｎ３Ｑ／Ｄ５Ｅ）：ＦｃΔ１６（＋，Ｋ）；ＦｃΔ１６（－）－（Ｇ４Ｓ）２－ＧＤＦ１５（Ｎ３Ｑ）：ＦｃΔ１６（＋，Ｋ）；ＦｃΔ１６（－）－（Ｇ４Ｓ）２－ＧＤＦ１５（Ｎ３Ｑ／Ｄ５Ｅ）：ＦｃΔ１６（＋，Ｋ）；ＦｃΔ１６（－）－Ｇ４Ｓ－ＧＤＦ１５（Ｎ３Ｑ）：ＦｃΔ１６（＋，Ｋ）；ＦｃΔ１６（－）－Ｇ４Ｓ－ＧＤＦ１５（Ｎ３Ｑ／Ｄ５Ｅ）：ＦｃΔ１６（＋，Ｋ）；ＦｃΔ１６（－）－ＧＤＦ１５（Ｎ３Ｑ）：ＦｃΔ１６（＋，Ｋ）；ＦｃΔ１０（－，Ｌ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａ）－（Ｇ４Ｑ）４－ＧＤＦ１５（Ｎ３Ｑ）：ＦｃΔ１０（＋，Ｋ，Ｌ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａ）；又はＦｃΔ１０（－，Ｌ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａ）－（Ｇ４Ｑ）４－ＧＤＦ１５（Ｎ３Ｑ／Ｄ５Ｅ）：ＦｃΔ１０（＋，Ｋ，Ｌ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａ）は、２つのＧＤＦ１５領域の二量体化を通してのように、四量体を形成する。

本明細書において更に提供されるのは、本明細書に開示されたＧＤＦ１５分子及びＦｃ分子を産生するための核酸及びベクターを含む宿主細胞である。種々の実施形態では、ベクター又は核酸は、宿主細胞ゲノムに組み込まれ、他の実施形態ではベクター又は核酸は、染色体外にある。

そのような核酸、ベクター又はそれらの何れか若しくは両方の組み合わせを含む酵母細胞、細菌細胞（例えば、Ｅ．コリ（Ｅ．ｃｏｌｉ））及び哺乳類細胞（例えば、不死化哺乳類細胞）等の組み換え細胞が提供される。種々の実施形態では、ＧＤＦ１５分子及び／又はＦｃ分子の発現をコードする配列を含む、プラスミド、コスミド、ファージミド又は線形発現エレメント等の組み込まれていない核酸を含む細胞。幾つかの実施形態では、細胞は、ＧＤＦ１５分子を産生するための核酸を含み、別の細胞は、ＧＤＦ１５分子との二量体化のためのＦｃ分子を産生するための核酸（例えば、第１の細胞内にＧＤＦ１５分子をコードするためのベクター及び第２の細胞内にＦｃ分子をコードするための第２のベクター）を含む。他の実施形態では、宿主細胞は、ＧＤＦ１５分子及びＦｃ分子を産生するための核酸（例えば、両方の分子をコードするベクター）を含む。別の実施形態では、宿主細胞は、ＧＤＦ１５分子を産生するための核酸及びＦｃ分子を産生するための別の核酸（例えば、単一宿主細胞内に２つの別のベクター、ＧＤＦ１５分子をコードするベクター及びＦｃ分子をコードするベクター）を含む。

ＧＤＦ１５分子及び／又はＦｃ分子をコードする核酸配列を含むベクターは、当該技術分野において公知の方法等によって、形質転換又はトランスフェクションにより宿主細胞に導入することができる。

ＧＤＦ１５分子をコードする核酸は、ウイルスベクターを介して宿主細胞又は宿主動物に配置及び／又は送達することができる。ウイルスベクターは、任意の数のウイルスポリヌクレオチドを、単独で、或いは所望の宿主細胞における本発明の核酸の送達、複製及び／又は発現を促進する１つ以上のウイルスタンパク質と組み合わせて含み得る。ウイルスベクターは、ウイルスゲノムの全部若しくは一部を含むポリヌクレオチド、ウイルスタンパク質／核酸コンジュゲート、ウイルス様粒子（ＶＬＰ）、又はウイルス核酸とＧＤＦ１５領域を含むポリペプチドをコードする核酸とを含むインタクトなウイルス粒子であり得る。ウイルス粒子のウイルスベクターは、野生型ウイルス粒子又は改変ウイルス粒子を含み得る。ウイルスベクターは、アデノウイルスベクターアンプリコン等、複製及び／又は発現のための別のベクター又は野生型ウイルスが存在する必要があるベクターであり得る（例えば、ウイルスベクターは、ヘルパー依存性ウイルスであり得る）。この点において好適なウイルスベクター粒子としては、例えば、アデノウイルス（ａｄｅｎｏｖｉｒａｌ）ベクター粒子（アデノウイルス科（ａｄｅｎｏｖｉｒｉｄａｅ）又はアデノウイルス科（ａｄｅｎｏｖｉｒｉｄａｅ）のウイルスに由来する、任意のウイルスを含む）、アデノ随伴ウイルス（ａｄｅｎｏ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｖｉｒａｌ）ベクター粒子（ＡＡＶベクター粒子）又は他のパルボウイルス（ｐａｒｖｏｖｉｒｕｓ）及びパルボウイルス（ｐａｒｖｏｖｉｒａｌ）ベクター粒子、パピローマウイルス（ｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒａｌ）ベクター粒子、フラビウイルス（ｆｌａｖｉｖｉｒａｌ）ベクター、アルファウイル（ａｌｐｈａｖｉｒａｌ）スベクター、ヘルペスウイルス（ｈｅｒｐｅｓ ｖｉｒａｌ）ベクター、ポックスウイルス（ｐｏｘ ｖｉｒｕｓ）ベクター、レンチウイルス（ｌｅｎｔｉｖｉｒａｌ）ベクターを含むレトロウイルス（ｒｅｔｒｏｖｉｒａｌ）ベクターが挙げられる。

ＧＤＦ１５分子は、標準的なタンパク質精製法を用いて単離することができる。ＧＤＦ１５領域を含むポリペプチドは、ＧＤＦ１５領域を含むポリペプチドを発現するように設計されている細胞、例えば負のＧＤＦ１５を自然には発現しない細胞から単離することができる。当該技術分野において公知のタンパク質精製法を採用して、ＧＤＦ１５分子の他、関連材料及び試薬を単離することができる。ＧＤＦ１５分子を精製する方法も又、本明細書の実施例において提供される。ＧＤＦ１５分子を単離するために有用であり得る追加の精製方法は、Ｂｏｏｔｃｏｖ ＭＲ，１９９７，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９４：１１５１４－９，Ｆａｉｒｌｉｅ ＷＤ，２０００，Ｇｅｎｅ ２５４：６７－７６等の参考文献において見出すことができる。

ＧＤＦ１５分子（及び任意選択的に、本明細書に開示された二量体又は四量体等のＦｃ分子）を含む医薬組成物も提供される。そうしたポリペプチド医薬組成物は、投与モードとの適合性で選択された薬学的又は生理学的に許容される製剤用作用物質又は担体と混合した治療有効量のＧＤＦ１５分子を含み得る。薬学的又は生理学的に許容される製剤用作用物質は、ヒト又は非ヒト対象の体内へのＧＤＦ１５分子の送達を達成又は促進するのに好適な１種以上の製剤用作用物質であってもよい。ＧＤＦ１５分子の有効期間若しくは有効性を大きくする湿潤剤若しくは乳化剤、防腐剤又は緩衝液等の薬学的に許容される物質は更に、製剤担体として働いてもよく、或いは製剤担体の構成要素を形成し得る。許容可能な薬学的に許容される担体は、好ましくは使用される投与量及び濃度でレシピエントに無毒である。医薬組成物は、例えば、組成物のｐＨ、モル浸透圧濃度、粘度、清澄度、色、等張性、匂い、無菌性、安定性、溶解若しくは放出速度、吸着又は浸透性を変更、維持又は保護するため製剤用作用物質を含むことができる。

治療的に使用しようとするＧＤＦ１５分子を含む医薬組成物の有効量は、例えば、治療の状況及び目的によって異なる。従って、当業者は、治療に適切な投与量レベルが、送達される分子、ＧＤＦ１５分子が使用されている適応、投与経路並びに対象のサイズ（体重、体表面積又は臓器の大きさ）及び状態（年齢及び一般的な健康状態）によってある程度異なることを理解するであろう。投薬頻度は、使用される製剤におけるＧＤＦ１５分子の薬物動態パラメーターによって異なる。

医薬組成物の投与経路は、経口であっても；静脈内経路、腹腔内経路、脳内（実質内）経路、脳室内経路、筋肉内経路、眼内経路、動脈内経路、門脈内経路又は病巣内経路による注射によっても；徐放系（同様に注射することができる）によっても；或いは埋め込み装置によってでもよい。所望の場合、組成物は、ボーラス注射により投与することも、或いは注入若しくは埋め込み装置により連続的に投与することもできる。組成物は又、所望の分子が吸収又は封入された膜、スポンジ又は他の適切な材料の埋め込みにより局所投与することもできる。埋め込み装置を使用する場合、装置は、任意の好適な組織又は臓器に埋め込むことができ、所望の分子の送達は、拡散、徐放性ボーラス（ｔｉｍｅｄ－ｒｅｌｅａｓｅ ｂｏｌｕｓ）又は連続投与によるものであってもよい。

ＧＤＦ１５分子は、代謝状態又は障害を治療、診断又は軽減するのに使用することができる。一実施形態では、代謝障害は、糖尿病、例えば、２型糖尿病である。別の実施形態では、代謝状態又は障害は、肥満である。他の実施形態では、代謝状態又は障害は、脂質代謝異常、高血糖値、高インスリン値又は糖尿病性ニューロパチーである。例えば、ＧＤＦ１５分子を用いて処置又は軽減できる代謝状態又は障害は、ヒト対象が、１２５ｍｇ／ｄＬ以上、例えば１３０ｍｇ／ｄＬ、１３５ｍｇ／ｄＬ、１４０ｍｇ／ｄＬ、１４５ｍｇ／ｄＬ、１５０ｍｇ／ｄＬ、１５５ｍｇ／ｄＬ、１６０ｍｇ／ｄＬ、１６５ｍｇ／ｄＬ、１７０ｍｇ／ｄＬ、１７５ｍｇ／ｄＬ、１８０ｍｇ／ｄＬ、１８５ｍｇ／ｄＬ、１９０ｍｇ／ｄＬ、１９５ｍｇ／ｄＬ、２００ｍｇ／ｄＬ又は２００ｍｇ／ｄＬ超の空腹時血糖値を有する状態を含む。血糖値は、摂食若しくは絶食状態で、又は無作為に測定することができる。代謝状態又は障害は、対象が代謝状態を発生するリスクが高い状態を更に含み得る。ヒト対象については、そうした状態は、１００ｍｇ／ｄＬの空腹時血糖値を含む。ＧＤＦ１５分子を含む医薬組成物を用いて治療することができる状態は、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｄｉａｂｅｔｅｓ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ ｏｆ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｃａｒｅ ｉｎ Ｄｉａｂｅｔｅｓ Ｃａｒｅ－２０１１，Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｄｉａｂｅｔｅｓ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ，Ｄｉａｂｅｔｅｓ Ｃａｒｅ Ｖｏｌ．３４，Ｎｏ．Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ １，Ｓ１１－Ｓ６１，２０１０においても見出すことができる。

投与は、例えば静脈内（ＩＶ）注射、腹腔内（ＩＰ）注射、皮下注射、筋肉内注射により行っても、或いは錠剤若しくは液状の形態で経口的に行うことができる。ＧＤＦ１５分子の治療有効量は、投与スケジュール、投与される作用物質の単位用量、ＧＤＦ１５分子が他の治療薬と組み合わせて投与されるかどうか、免疫状態及びレシピエントの健康状態によって異なる。治療有効量は、処置されている疾患又は障害の症状の緩和又は軽減を含む、研究者、医師又は他の臨床医が求めている、組織系、動物又はヒトにおける生物学的反応又は薬効反応を惹起するＧＤＦ１５分子の量、即ち、観察可能な値の１つ又は複数の所望の生物学的反応又は、薬効反応、例えば、血糖値、インスリン値、トリグリセリド値又はコレステロール値の低下；体重の低減；耐糖能、エネルギー消費量又はインスリン感受性の改善；或いは食物摂取量の低減を助けるＧＤＦ１５分子の量である。ＧＤＦ１５分子の治療有効量は更に、所望の成果によって異なってもよい。

本明細書において更に提供されるのは、対象において血糖、インスリン、コレステロール、脂質等の１種以上の代謝関連化合物のベースライン値を測定する工程、ＧＤＦ１５分子を含む医薬組成物を対象に投与する工程、及び所望の期間後、対象において１種以上の代謝関連化合物（例えば、血糖、インスリン、コレステロール、脂質）の値を測定する工程を含む方法である。次いで２つの値を比較して、対象における代謝関連化合物の相対的変化を判定することができる。その比較の結果に応じて、別の用量の医薬組成物を投与して、１種以上の代謝関連化合物の所望の値を達成することができる。

ＧＤＦ１５分子（及び任意選択的に、その対応するＦｃ分子）は、血糖値、インスリン値、トリグリセリド値又はコレステロール値を低下させる作用物質；体重を低減させる作用物質；食物摂取量を低減させる作用物質；耐糖能、エネルギー消費量又はインスリン感受性を改善させる作用物質；或いはこれら（例えば、抗糖尿病薬、高脂血症薬、抗肥満薬、降圧薬又はペルオキシソーム増殖剤活性化受容体のアゴニスト）の任意の組み合わせ等の別の治療薬と組み合わせて投与することができる。例えば、作用物質は、インスリン、インスリン誘導体及び類似体；インスリン分泌促進剤、グリブリド、アマリル；インスリン分泌促進性スルホニルウレア受容体リガンド；チアゾリジンジオン、ピオグリタゾン、バラグリタゾン、ネトグリタゾン、トログリタゾン、エングリタゾン、シグリタゾン、アダグリタゾン、ダルグリタゾン、コレステリルエステルトランスファータンパク質（ＣＥＴＰ）阻害剤、ＧＳＫ３（グリコーゲンシンターゼキナーゼ３）阻害剤；ＲＸＲリガンド；ナトリウム依存性グルコース共輸送体阻害剤；グリコーゲンホスホリラーゼＡ阻害剤；ビグアニド；α－グルコシダーゼ阻害剤、ＧＬＰ－１（グルカゴン様ペプチド１）、ＧＬＰ－１類似体、ＧＬＰ－１類似体；ＤＰＰＩＶ（ジペプチジルペプチダーゼＩＶ）阻害剤、３－ヒドロキシ－３－メチル－グルタリル補酵素Ａ（ＨＭＧ－ＣｏＡ）レダクターゼ阻害剤；スクアレンシンターゼ阻害剤；ＦＸＲ（ファルネソイドＸ受容体）、ＬＸＲ（肝Ｘ受容体）リガンド；コレスチラミン；フィブレート；ニコチン酸、アスピリン；オルリスタット若しくはリモナバン；ループ利尿薬、フロセミド、トルセミド；アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤；Ｎａ－Ｋ－ＡＴＰａｓｅ膜ポンプ阻害剤；ニュートラルエンドペプチダーゼ（ＮＥＰ）阻害剤；ＡＣＥ／ＮＥＰ阻害剤；アンジオテンシンＩＩアンタゴニスト；レニン阻害剤；βアドレナリン受容体遮断薬；変力薬、ドブタミン、ミルリノン；カルシウムチャネル遮断薬；アルドステロン受容体アンタゴニスト；アルドステロンシンターゼ阻害剤；フェノフィブレート、ピオグリタゾン、ロシグリタゾン、テサグリタザール、ＢＭＳ－２９８５８５及びＬ－７９６４４９から選択され得る。

本明細書に開示したＧＤＦ１５分子と一緒に投与される作用物質は、ＧＬＰ－１Ｒアゴニスト又はＧＬＰアンタゴニストであってよい。ＧＬＰ－１Ｒアゴニストは、ＧＬＰ－１Ｒ活性を備える化合物であってよい。ＧＬＰ－１Ｒアゴニストは、エキセンディン、エキセンディン類似体又はエキセンディンアゴニストであってよい。エキセンディンは、アメリカドクトカゲの唾液分泌物に見られる天然型（又は天然型の合成バージョン）エキセンディンペプチドを含む。エキセンディンは、エキセンディン－３：ＨＳＤＧＴＦＴＳＤＬＳＫＱＭＥＥＥＡＶＲＬＦＩＥＷＬＫＮＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２（配列番号５８）；又はエキセンディン－４：ＨＧＥＧＴＦＴＳＤＬＳＫＱＭＥＥＥＡＶＲＬＦＩＥＷＬＫＮＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２（配列番号５９）であり得る。本明細書に記載のエキセンディン、エキセンディン類似体及びエキセンディンアゴニストは、酸の形態、薬学的に許容される塩の形態又はその分子の任意の他の生理学的に活性な形態で、任意選択的にアミド化され得る。エキセナチドとしても公知である合成のエキセンディン－４は、ＢＹＥＴＴＡ（登録商標）（Ａｍｙｌｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．及びＥｌｉ Ｌｉｌｌｙ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｎｙ）として市販されている。本明細書に開示したＧＤＦ１５分子と組み合わせて使用できるエキセンディン類似体及びエキセンディンアゴニストの他の例は、それらの開示全体が参照により組み込まれる国際公開第９８／０５３５１号パンフレット；同第９９／０７４０４号パンフレット；同第９９／２５７２７号パンフレット；同第９９／２５７２８号パンフレット；同第９９／４０７８８号パンフレット；同第００／４１５４６号パンフレット；同第００／４１５４８号パンフレット；同第００／７３３３１号パンフレット；同第０１／５１０７８号パンフレット；同第０３／０９９３１４号パンフレット；米国特許第６，９５６，０２６号明細書；同第６，５０６，７２４号明細書；同第６，７０３，３５９号明細書；同第６，８５８，５７６号明細書；同第６，８７２，７００号明細書；同第６，９０２，７４４号明細書；同第７，１５７，５５５号明細書；同第７，２２３，７２５号明細書；同７，２２０，７２１号明細書；米国特許出願公開第２００３／００３６５０４号明細書並びに同第２００６／００９４６５２号明細書及び同第２０１８／０３１１３７２号明細書を参照されたい。

一実施形態では、ＧＬＰ－１Ｒアゴニストは、ＧＬＰ－１又はその類似体、例えばＧＬＰ－１（７－３７）：ＨＡＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＧＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＲＧ（配列番号６０）又はＧＬＰ－１（７－３７）類似体である。ＧＬＰ－１（７－３７）類似体は、例えば、その開示が本明細書に参照により組み込まれるＨａｒｇｒｏｖｅ ｅｔ ａｌ．，Ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｐｅｐｔｉｄｅｓ，１４１：１１３－１１９（２００７）によって記載された受容体結合アッセイ又はインビボの血糖値アッセイ等の当該技術分野において公知の手段によって評価した場合に、ＧＬＰ－１（７－３７）の生物学的活性と類似の生物学的活性を誘発するペプチドであり得る。一実施形態では、ＧＬＰ－１（７－３７）類似体は、ＧＬＰ－１（７－３７）のアミノ酸配列と比較すると、１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ又は８つのアミノ酸の置換、挿入、欠失又はそれらの２つ以上の組み合わせを備えるアミノ酸配列を有するペプチドを指す。一実施形態では、ＧＬＰ－１（７－３７）類似体は、ＧＬＰ－１（７－３６）－ＮＨ２である。ＧＬＰ－１（７－３７）類似体には、アミド化形態、酸の形態、薬学的に許容される塩の形態及びその分子の任意の他の生理学的活性な形態が含まれる。幾つかの実施形態では、ＧＬＰ－１Ｒ受容体アゴニストを記載するために単純な命名法が使用されており、例えば、［Ａｉｂ８］ＧＬＰ－１（７－３７）は、ＧＬＰ－１（７－３７）の類似体（式中、第８位にある天然型ＡｌａはＡｉｂで置換されている）を指定する。本明細書に開示したＧＤＦ１５分子と組み合わせて使用することができる他のＧＬＰ－１（７－３７）又はＧＬＰ－１（７－３７）類似体としては、リラグルチド（ＶＩＣＴＯＺＡ（登録商標）、Ｎｏｖｏ Ｎｏｒｄｉｓｋ）；アルビグルチド（ＳＹＮＣＲＩＡ（登録商標）、ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）；タスポグルチド（Ｈｏｆｆｍａｎ Ｌａ－Ｒｏｃｈｅ）；デュラグルチド（ＬＹ２１８９２６５としても公知である；Ｅｌｉ Ｌｉｌｌｙ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｎｙ）；又はＬＹ２４２８７５７（Ｅｌｉ Ｌｉｌｌｙ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｎｙ）が挙げられる。一実施形態では、ＧＬＰ－１Ｒアゴニストは、デュラグルチドであり、任意選択的にそのＣ末端でリジンを有するアミノ酸配列：

を含む。それらの内容が全体として参照により本明細書に組み込まれる米国特許第６，２６８，３４３号明細書；同第７，４５２，９６６号明細書；及び米国特許出願公開第２０１８／０３１１３７２明細書に記載されたＧＬＰ－１類似体の１つ以上は、更に本明細書に開示したＧＤＦ１５分子と組み合わせて使用することもできる。

一実施形態では、配列番号３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６又は５７のアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５分子は、配列番号５８、５９、６０のアミノ酸配列又はその中のアミド化類似体を含む分子と一緒に投与される。一実施形態では、配列番号３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６又は５７のアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５分子は、デュラグルチド、例えば配列番号６１のアミノ酸配列を含む分子と一緒に投与される。

別の実施形態では、それぞれ配列番号３９及び３２（Ｃ末端リジンは任意選択）；配列番号４０及び３３（Ｃ末端リジンは任意選択）、それぞれ配列番号４１及び３２（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号４２及び３２（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号４３及び３４（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号４４及び３４（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号４５及び３５（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号４６及び３５（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号４７及び３６（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号４８及び３６（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号４９及び３６（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号５０及び３６（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号５１及び３６（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号５２及び３６（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号５３及び３６（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号５４及び３６（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号５５及び３６（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号５６及び３７（Ｃ末端リジンは任意選択）；又はそれぞれ配列番号５７及び３７（Ｃ末端リジンは任意選択）のアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５分子及び対応するＦｃ分子は、配列番号５８、５９、６０のアミノ酸配列又はそのアミド化類似体を含む分子と一緒に投与される。

別の実施形態では、それぞれ配列番号３９及び３２（Ｃ末端リジンは任意選択）；配列番号４０及び３３（Ｃ末端リジンは任意選択）、それぞれ配列番号４１及び３２（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号４２及び３２（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号４３及び３４（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号４４及び３４（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号４５及び３５（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号４６及び３５（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号４７及び３６（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号４８及び３６（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号４９及び３６（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号５０及び３６（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号５１及び３６（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号５２及び３６（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号５３及び３６（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号５４及び３６（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号５５及び３６（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号５６及び３７（Ｃ末端リジンは任意選択）；又はそれぞれ配列番号５７及び３７（Ｃ末端リジンは任意選択）のアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５分子及び対応するＦｃ分子は、デュラグルチド、例えば配列番号６１のアミノ酸配列を含む分子と一緒に投与される。

別の実施形態では、それぞれ配列番号５０及び３６（Ｃ末端リジンは任意選択）のアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５分子及び対応するＦｃ分子は、配列番号５８、５９、６０のアミノ酸配列又はその中のアミド化類似体を含む分子と一緒に投与される。別の実施形態では、それぞれ配列番号５０及び３６（Ｃ末端リジンは任意選択）のアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５分子及び対応するＦｃ分子は、デュラグルチド、例えば配列番号６１のアミノ酸配列を含む分子と一緒に投与される。

別の実施形態では、それぞれ配列番号５７及び３７（Ｃ末端リジンは任意選択）のアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５分子及び対応するＦｃ分子は、配列番号５８、５９、６０のアミノ酸配列又はその中のアミド化類似体を含む分子と一緒に投与される。別の実施形態では、それぞれ配列番号５７及び３７（Ｃ末端リジンは任意選択）のアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５分子及び対応するＦｃ分子は、デュラグルチド、例えば配列番号６１のアミノ酸配列を含む分子と一緒に投与される。

幾つかの実施形態では、本明細書に開示したＧＤＦ１５分子は、ＧＩＰＲに対するアンタゴニスト、例えばヒトＧＩＰＲに特異的に結合する抗原結合タンパク質と一緒に投与される。一実施形態では、抗原結合タンパク質は：

のアミノ酸配列を含むか、又はそれらから成るヒトＧＩＰＲに特異的に結合する。

ヒトＧＩＰＲポリペプチドに特異的に結合する抗原結合タンパク質は、ＧＩＰリガンドによるＧＩＰＲの活性化を阻害することができる、及び／又はＧＩＰＲへのＧＩＰリガンド結合を阻害することができる。抗原結合タンパク質は、ＧＩＰＲへのＧＩＰの結合を阻止又は低減する能力を有し得るが、そのレベルは、例えば、放射性標識若しくは蛍光標識されたリガンドによる結合試験等の方法、又は本明細書に記載の方法（例えば、ｃＡＭＰアッセイ若しくは他の機能アッセイ）によって測定することができる。その低減は、比較可能な条件下で配列番号６２、６３又は６４の治療前レベルと比較して少なくとも１０％、２５％、５０％、１００％以上となり得る。特定の実施形態では、抗原結合タンパク質は、２５ｐＭ未満、５０ｐＭ未満、１００ｐＭ未満、５００ｐＭ未満、１ｎＭ未満、５ｎＭ未満、１０ｎＭ未満、２５ｎＭ未満又は５０ｎＭ未満のＫＤ（平衡結合親和性）を有する。

抗原結合タンパク質は、ヒト抗原結合タンパク質、例えばヒト抗体であり得る。別の実施形態では、抗原結合タンパク質は、抗体、例えばモノクローナル抗体である。幾つかの実施形態では、抗原結合タンパク質は、それらのそれぞれが参照によりその全体が本明細書に組み込まれる、米国特許出願公開第２０１７／０２７５３７０号明細書又は同第２０１８／０３１１３７２号明細書に開示されているＧＩＰＲ抗体である。

一実施形態では、抗体等のＧＩＰＲ抗原結合タンパク質は：それぞれＲＡＳＱＳＶＳＳＮＬＡ（配列番号６５）、ＧＡＡＴＲＡＴ（配列番号６６）及びＱＱＹＮＮＷＰＬＴ（配列番号６７）；それぞれＳＧＳＳＳＮＩＧＳＱＴＶＮ（配列番号６８）、ＴＮＮＱＲＰＳ（配列番号６９）及びＡＴＦＤＥＳＬＳＧＰＶ（配列番号７０）；それぞれＲＡＳＱＤＩＲＤＹＬＧ（配列番号７１）、ＧＡＳＳＬＱＳ（配列番号７２）及びＬＱＨＮＮＹＰＦＴ（配列番号７３）；又はそれぞれＲＡＳＱＧＬＩＩＷＬ（配列番号７４）、ＡＡＳＳＬＱＳ（配列番号７５）及びＱＱＴＮＳＦＰＰＴ（配列番号７６）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２及びＣＤＲＬ３を含む。一実施形態では、ＧＩＰＲ抗原結合タンパク質は：それぞれＮＹＧＭＨ（配列番号７７）、ＡＩＷＦＤＡＳＤＫＹＹＡＤＡＶＫＧ（配列番号７８）及びＤＱＡＩＦＧＶＶＰＤＹ（配列番号７９）；それぞれＧＹＹＭＨ（配列番号８０）、ＷＩＮＰＮＳＧＧＴＮＹＡＱＫＦＱＧ（配列番号８１）及びＧＧＤＹＶＦＧＴＹＲＰＨＹＹＹＧＭＤＶ（配列番号８２）；それぞれＹＦＧＭＨ（配列番号８３）、ＶＩＷＹＤＡＳＮＫＹＹＡＤＡＶＫＧ（配列番号８４）及びＤＧＴＩＦＧＶＬＬＧＤＹ（配列番号８５）；又はそれぞれＳＹＹＷＳ（配列番号８６）、ＲＩＹＴＳＧＳＴＮＹＮＰＳＬＫＳ（配列番号８７）及びＤＶＡＶＡＧＦＤＹ（配列番号８８）のアミノ酸配列を含むＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３を含む。

一実施形態では、抗体等のＧＩＰＲ抗原結合タンパク質は：それぞれ配列番号６５～６７及び７７～７９；配列番号６８～７０及び８０～８２；配列番号７１～７３及び８３～８５；又は配列番号７４～７６及び８６～８８のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２、ＣＤＲＬ３、ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３を含む。

一実施形態では、抗体等のＧＩＰＲ抗原結合タンパク質は：

のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域及び重鎖可変領域を含む。

一部の実施形態では、抗体等のＧＩＰＲ抗原タンパク質は：

のアミノ酸配列を含む軽鎖及び重鎖を含む。

一実施形態では、配列番号３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６又は５７のアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５分子はそれぞれ配列番号６５～６７及び７７～７９；配列番号６８～７０及び８０～８２；配列番号７１～７３及び８３～８５；又は配列番号７４～７６及び８６～８８のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２、ＣＤＲＬ３、ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３を含む、抗体等のＧＩＰＲ抗原結合タンパク質と一緒に投与される。

別の実施形態では、それぞれ配列番号３９及び３２（Ｃ末端リジンは任意選択）；配列番号４０及び３３（Ｃ末端リジンは任意選択）、それぞれ配列番号４１及び３２（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号４２及び３２（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号４３及び３４（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号４４及び３４（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号４５及び３５（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号４６及び３５（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号４７及び３６（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号４８及び３６（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号４９及び３６（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号５０及び３６（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号５１及び３６（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号５２及び３６（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号５３及び３６（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号５４及び３６（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号５５及び３６（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号５６及び３７（Ｃ末端リジンは任意選択）；又はそれぞれ配列番号５７及び３７（Ｃ末端リジンは任意選択）のアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５分子及び対応するＦｃ分子はそれぞれ配列番号６５～６７及び７７～７９；配列番号６８～７０及び８０～８２；配列番号７１～７３及び８３～８５；又は配列番号７４～７６及び８６～８８のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２、ＣＤＲＬ３、ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３を含む、抗体等のＧＩＰＲ抗原結合タンパク質と一緒に投与される。

別の実施形態では、それぞれ配列番号５０及び３６（Ｃ末端でリジンは任意選択）を含むＧＤＦ１５分子及び対応するＦｃ分子は：それぞれ配列番号６５～６７及び７７～７９；配列番号６８～７０及び８０～８２；配列番号７１～７３及び８３～８５；又は配列番号７４～７６及び８６～８８のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２、ＣＤＲＬ３、ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３を含む、抗体等のＧＩＰＲ抗原結合タンパク質と一緒に投与される。一実施形態では、それぞれ配列番号５０及び３６（Ｃ末端でリジンは任意選択）を含むＧＤＦ１５分子及び対応するＦｃ分子は配列番号６５～６７及び７７～７９のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２、ＣＤＲＬ３、ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３を含む抗体と一緒に投与される。

別の実施形態では、それぞれ配列番号５７及び３７（Ｃ末端でリジンは任意選択）を含むＧＤＦ１５分子及び対応するＦｃ分子は：それぞれ配列番号６５～６７及び７７～７９；配列番号６８～７０及び８０～８２；配列番号７１～７３及び８３～８５；又は配列番号７４～７６及び８６～８８のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２、ＣＤＲＬ３、ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３を含む、抗体等のＧＩＰＲ抗原結合タンパク質と一緒に投与される。別の実施形態では、それぞれ配列番号５７及び３７（Ｃ末端リジンは任意選択）のアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５分子及び対応するＦｃ分子は：配列番号６５～６７及び７７～７９のアミノ酸配列を含むＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２、ＣＤＲＬ３、ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３を含む、抗体等のＧＩＰＲ抗原結合タンパク質と一緒に投与される。

一実施形態では、配列番号３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６又は５７のアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５分子は、それぞれ配列番号８９及び９０、配列番号９１及び９２、配列番号９３及び９４又は配列番号９５及び９６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域及び重鎖可変領域を含む抗体等のＧＩＰＲ抗原結合タンパク質と一緒に投与される。

別の実施形態では、それぞれ配列番号３９及び３２（Ｃ末端リジンは任意選択）；配列番号４０及び３３（Ｃ末端リジンは任意選択）、それぞれ配列番号４１及び３２（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号４２及び３２（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号４３及び３４（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号４４及び３４（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号４５及び３５（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号４６及び３５（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号４７及び３６（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号４８及び３６（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号４９及び３６（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号５０及び３６（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号５１及び３６（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号５２及び３６（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号５３及び３６（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号５４及び３６（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号５５及び３６（Ｃ末端リジンは任意選択）；それぞれ配列番号５６及び３７（Ｃ末端リジンは任意選択）；又はそれぞれ配列番号５７及び３７（Ｃ末端リジンは任意選択）のアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５分子及び対応するＦｃ分子は、それぞれ配列番号８９及び９０、配列番号９１及び９２、配列番号９３及び９４又は配列番号９５及び９６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域及び重鎖可変領域を含む抗体等のＧＩＰＲ抗原結合タンパク質と一緒に投与される。

別の実施形態では、それぞれ配列番号５０及び３６（Ｃ末端のリジンは任意選択）のアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５分子及び対応するＦｃ分子は、それぞれ配列番号８９及び９０、配列番号９１及び９２、配列番号９３及び９４又は配列番号９５及び９６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域及び重鎖可変領域を含む抗体等のＧＩＰＲ抗原結合タンパク質と一緒に投与される。一実施形態では、配列番号５０及び３６（Ｃ末端のリジンは任意選択）のアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５分子及び対応するＦｃ分子は、配列番号８９及び９０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域及び重鎖可変領域を含む抗体と一緒に投与される。

別の実施形態では、それぞれ配列番号５７及び３７（Ｃ末端のリジンは任意選択）のアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５分子及び対応するＦｃ分子は、それぞれ配列番号８９及び９０、配列番号９１及び９２、配列番号９３及び９４又は配列番号９５及び９６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域及び重鎖可変領域を含む抗体等のＧＩＰＲ抗原結合タンパク質と一緒に投与される。一実施形態では、配列番号５７及び３７（Ｃ末端のリジンは任意選択）のアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５分子及び対応するＦｃ分子は、配列番号８９及び９０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域及び重鎖可変領域を含む抗体と一緒に投与される。

一実施形態では、配列番号３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６又は５７のアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５分子は、それぞれ配列番号９７及び９８、配列番号９９及び１００、配列番号１０１及び１０２、配列番号１０３及び１０４又は配列番号１０５及び１０６のアミノ酸配列を含む軽鎖及び重鎖を含む抗体等のＧＩＰＲ抗原結合タンパク質と一緒に投与される。

別の実施形態では、それぞれ配列番号３９及び３２（Ｃ末端のリジンは任意選択）；配列番号４０及び３３（Ｃ末端のリジンは任意選択）、配列番号４１及び３２（Ｃ末端のリジンは任意選択）、それぞれ配列番号４２及び３２（Ｃ末端のリジンは任意選択）、それぞれ配列番号４３及び３４（Ｃ末端のリジンは任意選択）、それぞれ配列番号４４及び３４（Ｃ末端のリジンは任意選択）、それぞれ配列番号４５及び３５（Ｃ末端のリジンは任意選択）、それぞれ配列番号４６及び３５（Ｃ末端のリジンは任意選択）、それぞれ配列番号４７及び３６（Ｃ末端のリジンは任意選択）、それぞれ配列番号４８及び３６（Ｃ末端のリジンは任意選択）、それぞれ配列番号４９及び３６（Ｃ末端のリジンは任意選択）、それぞれ配列番号５０及び３６（Ｃ末端のリジンは任意選択）、それぞれ配列番号５１及び３６（Ｃ末端のリジンは任意選択）、それぞれ配列番号５２及び３６（Ｃ末端のリジンは任意選択）、それぞれ配列番号５３及び３６（Ｃ末端のリジンは任意選択）、それぞれ配列番号５４及び３６（Ｃ末端のリジンは任意選択）、それぞれ配列番号５５及び３６（Ｃ末端のリジンは任意選択）、それぞれ配列番号５６及び３７（Ｃ末端のリジンは任意選択）又はそれぞれ配列番号５７及び３７（Ｃ末端のリジンは任意選択）のアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５分子及び対応するＦｃ分子は、それぞれ配列番号９７及び９８、配列番号９９及び１００、配列番号１０１及び１０２、配列番号１０３及び１０４又は配列番号１０５及び１０６のアミノ酸配列を含む軽鎖及び重鎖を含む抗体等のＧＩＰＲ抗原結合タンパク質と一緒に投与される。

別の実施形態では、それぞれ配列番号５０及び３６（Ｃ末端のリジンは任意選択）を含むＧＤＦ１５分子及び対応するＦｃ分子は、それぞれ配列番号９７及び９８、配列番号９９及び１００、配列番号１０１及び１０２、配列番号１０３及び１０４又は配列番号１０５及び１０６のアミノ酸配列を含む軽鎖及び重鎖を含む抗体等のＧＩＰＲ抗原結合タンパク質と一緒に投与される。一実施形態では、それぞれ配列番号５０及び３６（Ｃ末端のリジンは任意選択）のアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５分子及び対応するＦｃ分子は、配列番号９７及び９８のアミノ酸配列を含む軽鎖及び重鎖を含む抗体と一緒に投与される。

別の実施形態では、それぞれ配列番号５７及び３７（Ｃ末端のリジンは任意選択）を含むＧＤＦ１５分子及び対応するＦｃ分子は、それぞれ配列番号９７及び９８、配列番号９９及び１００、配列番号１０１及び１０２、配列番号１０３及び１０４又は配列番号１０５及び１０６のアミノ酸配列を含む軽鎖及び重鎖を含む抗体等のＧＩＰＲ抗原結合タンパク質と一緒に投与される。一実施形態では、それぞれ配列番号５７及び３７（Ｃ末端のリジンは任意選択）のアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５分子及び対応するＦｃ分子は、配列番号９７及び９８のアミノ酸配列を含む軽鎖及び重鎖を含む抗体と一緒に投与される。

幾つかの実施形態では、本明細書に開示したＧＤＦ１５分子は、例えば本明細書にその全体として参照により組み込まれる米国特許出願公開第２０１８／０３１１３７２号明細書に開示された、ＧＬＰ－１Ｒアゴニストにコンジュゲート化されたＧＩＰＲ抗体と一緒に投与される。

本明細書に開示したＧＤＦ１５分子と組み合わせて使用できる作用物質の他の例としては、ロシグリチゾン、ピオグリチゾン、レパグリニド、ナテグリチニド、メトホルミン、エキセナチド、スチアグリプチン、プラムリンチド、グリピジド、グリメプリリデアカルボース、オーリスタット、ロルカセリン、フェンテルミネトピラメート、ナルトレクソンブプロピオン、セトメラノチド、セマグルチド、エフペグレナチド（ｅｆｐｅｇｌｅｎａｔｉｄｅ）、リキシセナチド、カナグリフロジン、ＬＩＫ－０６６、ＳＡＲ－４２５８９９、Ｔｔ－４０１、ＦＧＦＲ４Ｒｘ、ＨＤＶ－ビオチン及びミグリトールが挙げられる。

別の治療薬と一緒に投与されるＧＤＦ１５分子は、治療有効量のＧＤＦ１５分子（及び任意選択的に、その対応するＦｃ分子）と治療有効量の他の治療薬との同時投与を含むことができる。別の治療薬と一緒に投与されるＧＤＦ１５分子は、治療有効量のＧＤＦ１５分子（及び任意選択的に、その対応するＦｃ分子）及び治療有効量の他の治療薬の連続投与、例えば、治療有効量のＧＤＦ１５分子（及び任意選択的に、その対応するＦｃ分子）、続いて治療有効量の他の治療薬の投与、又は治療有効量の他の治療薬の投与、続いて治療有効量のＧＤＦ１５分子（及び任意選択的に、その対応するＦｃ分子）の投与を含むことができる。治療有効量のＧＤＦ１５分子（及び任意選択的に、その対応するＦｃ分子）の投与は、治療有効量の他の治療薬の投与から少なくとも１日後、２日後、３日後、４日後、５日後、６日後又は７日後であってよい。別の実施形態では、治療有効量の治療有効量の他の治療薬の投与は、治療有効量のＧＤＦ１５分子（及び任意選択的に、その対応するＦｃ分子）の投与から少なくとも１日後、２日後、３日後、４日後、５日後、６日後又は７日後の少なくとも１日後、２日後、３日後、４日後、５日後、６日後又は７日後であってもよい。

別の治療薬と同時に投与されるＧＤＦ１５分子は、ＧＤＦ１５分子（及び任意選択的に、その対応するＦｃ分子）及び他の治療薬の両方を含む組成物の投与を含んでもよく、例えば、治療有効量のＧＤＦ１５分子（及び任意選択的に、その対応するＦｃ分子）は、投与前に治療有効量の他の作用物質と一緒にされてよい。別の実施形態では、ＧＤＦ１５分子（及び任意選択的に、その対応するＦｃ分子）及び別の治療薬の同時投与は、ＧＤＦ１５分子を含む第１の組成物及び他の治療薬を含む第２の組成物の同時投与を含むことができる。

幾つかの実施形態では、ＧＤＦ１５分子の別の治療薬との投与は、相乗効果を有する。一実施形態では、効果は、ＧＤＦ１５分子（及び任意選択的に、その対応するＦｃ分子）単独又は他の作用物質より大きい。別の実施形態では、効果は、両方の作用物質（ＧＤＦ１５分子、及び任意選択的にその対応するＦｃ分子＋他の作用物質）の相加効果より大きい。一実施形態では、併用療法（即ち、任意選択的に、その対応するＦｃ分子を含むＧＤＦ１５分子と別の治療薬との投与）は、ＧＤＦ１５単剤療法（ＧＤＦ１５分子及び任意選択的にその対応するＦｃ分子）より１．１倍超、１．２倍超、１．３倍超、１．４倍超、１．５倍超、１．６倍超、１．７倍超、１．８倍超、１．９倍超、２．０倍超、２．５倍超、３．０倍超、３．５倍超、４．０倍超、４．５倍超、５．０倍超、５．５倍超、６．０倍超、６．５倍超、７．０倍超、７．５倍超、８．０倍超、８．５倍超、９．０倍超、９．５倍超、１０倍超、１１倍超、１２倍超、１３倍超、１４倍超、１５倍超、１６倍超、１７倍超、１８倍超、１９倍超、２０倍超、２１倍超、２２倍超、２３倍超、２４倍超、２５倍超、２６倍超、２７倍超、２８倍超、２９倍超又は３０倍超の効果を有する。別の実施形態では、併用療法（即ち、任意選択的に、その対応するＦｃ分子を含むＧＤＦ１５分子と別の治療薬との投与）は、他の作用物質の単剤療法より１．１倍超、１．２倍超、１．３倍超、１．４倍超、１．５倍超、１．６倍超、１．７倍超、１．８倍超、１．９倍超、２．０倍超、２．５倍超、３．０倍超、３．５倍超、４．０倍超、４．５倍超、５．０倍超、５．５倍超、６．０倍超、６．５倍超、７．０倍超、７．５倍超、８．０倍超、８．５倍超、９．０倍超、９．５倍超、１０倍超、１１倍超、１２倍超、１３倍超、１４倍超、１５倍超、１６倍超、１７倍超、１８倍超、１９倍超、２０倍超、２１倍超、２２倍超、２３倍超、２４倍超、２５倍超、２６倍超、２７倍超、２８倍超、２９倍超又は３０倍超の効果を有する。効果は、体重の低減量（例えば、総重量又は重量変化率の低減）；血糖値、インスリン値、トリグリセリド値又はコレステロール値の低減；耐糖能、エネルギー消費量又はインスリン感受性の改善；或いは食物摂取量の低減であってよい。相乗効果は、投与から約１日後、約２日後、約３日後、約４日後、約５日後、約６日後、約７日後、約８日後、約９日後、約１０日後、約１１日後、約１２日後、約１３日後、約１４日後、約２１日後、約２８日後、約３５日後、約４２日後、約４９日後、約５６日後、約６３日後又は約７０日後であってよい。

一実施形態では、ＧＬＰ－１Ｒアゴニスト若しくはＧＩＰＲアンタゴニストと一緒に投与されるそれぞれ配列番号３９及び３２（Ｃ末端のリジンは任意選択）；それぞれ配列番号４０及び３３（Ｃ末端のリジンは任意選択），それぞれ配列番号４１及び３２（Ｃ末端のリジンは任意選択）；それぞれ配列番号４２及び３２（Ｃ末端のリジンは任意選択）；それぞれ配列番号４３及び３４（Ｃ末端のリジンは任意選択）；それぞれ配列番号４４及び３４（Ｃ末端のリジンは任意選択）；それぞれ配列番号４５及び３５（Ｃ末端のリジンは任意選択）；それぞれ配列番号４６及び３５（Ｃ末端のリジンは任意選択）；それぞれ配列番号４７及び３６（Ｃ末端のリジンは任意選択）；それぞれ配列番号４８及び３６（Ｃ末端のリジンは任意選択）；それぞれ配列番号４９及び３６（Ｃ末端のリジンは任意選択）；それぞれ配列番号５０及び３６（Ｃ末端のリジンは任意選択）；それぞれ配列番号５１及び３６（Ｃ末端のリジンは任意選択）；それぞれ配列番号５２及び３６（Ｃ末端のリジンは任意選択）；それぞれ配列番号５３及び３６（Ｃ末端のリジンは任意選択）；それぞれ配列番号５４及び３６（Ｃ末端のリジンは任意選択）；それぞれ配列番号５５及び３６（Ｃ末端のリジンは任意選択）；それぞれ配列番号５６及び３７（Ｃ末端のリジンは任意選択）；又はそれぞれ配列番号５７及び３７（Ｃ末端のリジンは任意選択）のアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５分子及び対応するＦｃ分子は、作用物質の投与から約１日後、約２日後、約３日後、約４日後、約５日後、約６日後、約７日後、約８日後、約９日後、約１０日後、約１１日後、約１２日後、約１３日後、約１４日後、約２１日後、約２８日後、約３５日後、約４２日後、約４９日後、約５６日後、約６３日後若しくは約７０日後に、ＧＤＦ１５単剤療法より１．１倍超、１．２倍超、１．３倍超、１．４倍超、１．５倍超、１．６倍超、１．７倍超、１．８倍超、１．９倍超、２．０倍超、２．５倍超、３．０倍超、３．５倍超、４．０倍超、４．５倍超、５．０倍超、５．５倍超、６．０倍超、６．５倍超、７．０倍超、７．５倍超、８．０倍超、８．５倍超、９．０倍超、９．５倍超、１０倍超、１１倍超、１２倍超、１３倍超、１４倍超、１５倍超、１６倍超、１７倍超、１８倍超、１９倍超、２０倍超、２１倍超、２２倍超、２３倍超、２４倍超、２５倍超、２６倍超、２７倍超、２８倍超、２９倍超若しくは３０倍超の効果；ＧＬＰ－１Ｒアゴニスト若しくはＧＩＰＲアンタゴニスト単剤療法（即ち、ＧＬＰ－１Ｒアゴニスト単独若しくはＧＩＰＲアンタゴニスト単独）より１．１倍超、１．２倍超、１．３倍超、１．４倍超、１．５倍超、１．６倍超、１．７倍超、１．８倍超、１．９倍超、２．０倍超、２．５倍超、３．０倍超、３．５倍超、４．０倍超、４．５倍超、５．０倍超、５．５倍超、６．０倍超、６．５倍超、７．０倍超、７．５倍超、８．０倍超、８．５倍超、９．０倍超、９．５倍超、１０倍超、１１倍超、１２倍超、１３倍超、１４倍超、１５倍超、１６倍超、１７倍超、１８倍超、１９倍超、２０倍超、２１倍超、２２倍超、２３倍超、２４倍超、２５倍超、２６倍超、２７倍超、２８倍超、２９倍超若しくは３０倍超の効果；又はその両方を有する。

別の実施形態では、ＧＬＰ－１Ｒアゴニスト（例えば、デュラグルチド）と一緒に投与される、それぞれ配列番号５０及び３６（Ｃ末端のリジンは任意選択）のアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５分子及び対応するＦｃ分子は、ＧＤＦ１５分子及び対応するＦｃ分子及び／又はデュラグルチドの投与から約１日後、約２日後、約３日後、約４日後、約５日後、約６日後、約７日後、約８日後、約９日後、約１０日後、約１１日後、約１２日後、約１３日後、約１４日後、約２１日後、約２８日後、約３５日後、約４２日後、約４９日後、約５６日後、約６３若しくは約７０日後に、ＧＤＦ１５単剤療法より１．１倍超、１．２倍超、１．３倍超、１．４倍超、１．５倍超、１．６倍超、１．７倍超、１．８倍超、１．９倍超、２．０倍超、２．５倍超、３．０倍超、３．５倍超、４．０倍超、４．５倍超、５．０倍超、５．５倍超、６．０倍超、６．５倍超、７．０倍超、７．５倍超、８．０倍超、８．５倍超、９．０倍超、９．５倍超、１０倍超、１１倍超、１２倍超、１３倍超、１４倍超、１５倍超、１６倍超、１７倍超、１８倍超、１９倍超、２０倍超、２１倍超、２２倍超、２３倍超、２４倍超、２５倍超、２６倍超、２７倍超、２８倍超、２９倍超若しくは３０倍超の効果；ＧＬＰ－１Ｒアゴニスト（例えば、デュラグルチド）単剤療法より１．１倍超、１．２倍超、１．３倍超、１．４倍超、１．５倍超、１．６倍超、１．７倍超、１．８倍超、１．９倍超、２．０倍超、２．５倍超、３．０倍超、３．５倍超、４．０倍超、４．５倍超、５．０倍超、５．５倍超、６．０倍超、６．５倍超、７．０倍超、７．５倍超、８．０倍超、８．５倍超、９．０倍超、９．５倍超、１０倍超、１１倍超、１２倍超、１３倍超、１４倍超、１５倍超、１６倍超、１７倍超、１８倍超、１９倍超、２０倍超、２１倍超、２２倍超、２３倍超、２４倍超、２５倍超、２６倍超、２７倍超、２８倍超、２９倍超若しくは３０倍超の効果；又はその両方を有する。

別の実施形態では、ＧＬＰ－１Ｒアゴニスト（例えば、デュラグルチド）と一緒に投与される、それぞれ配列番号５７及び３７（Ｃ末端のリジンは任意選択）のアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５分子及び対応するＦｃ分子は、ＧＤＦ１５分子及び対応するＦｃ分子及び／又はデュラグルチドの投与から約１日後、約２日後、約３日後、約４日後、約５日後、約６日後、約７日後、約８日後、約９日後、約１０日後、約１１日後、約１２日後、約１３日後、約１４日後、約２１日後、約２８日後、約３５日後、約４２日後、約４９日後、約５６日後、約６３若しくは約７０日後に、ＧＤＦ１５単剤療法より１．１倍超、１．２倍超、１．３倍超、１．４倍超、１．５倍超、１．６倍超、１．７倍超、１．８倍超、１．９倍超、２．０倍超、２．５倍超、３．０倍超、３．５倍超、４．０倍超、４．５倍超、５．０倍超、５．５倍超、６．０倍超、６．５倍超、７．０倍超、７．５倍超、８．０倍超、８．５倍超、９．０倍超、９．５倍超、１０倍超、１１倍超、１２倍超、１３倍超、１４倍超、１５倍超、１６倍超、１７倍超、１８倍超、１９倍超、２０倍超、２１倍超、２２倍超、２３倍超、２４倍超、２５倍超、２６倍超、２７倍超、２８倍超、２９若しくは３０倍超の効果；ＧＬＰ－１Ｒアゴニスト（例えば、デュラグルチド）単剤療法より１．１倍超、１．２倍超、１．３倍超、１．４倍超、１．５倍超、１．６倍超、１．７倍超、１．８倍超、１．９倍超、２．０倍超、２．５倍超、３．０倍超、３．５倍超、４．０倍超、４．５倍超、５．０倍超、５．５倍超、６．０倍超、６．５倍超、７．０倍超、７．５倍超、８．０倍超、８．５倍超、９．０倍超、９．５倍超、１０倍超、１１倍超、１２倍超、１３倍超、１４倍超、１５倍超、１６倍超、１７倍超、１８倍超、１９倍超、２０倍超、２１倍超、２２倍超、２３倍超、２４倍超、２５倍超、２６倍超、２７倍超、２８倍超、２９倍超若しくは３０倍超の効果；又はその両方を有する。

別の実施形態では、ＧＩＰＲ抗原結合タンパク質（例えば、それぞれ配列番号６５～６７及び７７～７９；配列番号６８～７０及び８０～８２；配列番号７１～７３及び８３～８５；若しくは配列番号７４～７６及び８６～８８のアミノ酸配列を含む；又はそれぞれ配列番号８９及び９０、配列番号９１及び９２、配列番号９３及び９４若しくは配列番号９５及び９６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域及び重鎖可変領域を含む抗体；又はそれぞれ配列番号９７及び９８、配列番号９９及び１００、配列番号１０１及び１０２、配列番号１０３及び１０４若しくは配列番号１０５及び１０６を含むアミノ酸配列を含む軽鎖及び重鎖を含むＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２、ＣＤＲＬ３、ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３のアミノ酸配列を含む抗体）と一緒に投与される、それぞれ配列番号５０及び３６（Ｃ末端のリジンは任意選択）のアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５分子及び対応するＦｃ分子は、ＧＤＦ１５分子及び対応するＦｃ分子及び／又はＧＩＰＲ抗原結合タンパク質の投与から約１日後、約２日後、約３日後、約４日後、約５日後、約６日後、約７日後、約８日後、約９日後、約１０日後、約１１日後、約１２日後、約１３日後、約１４日後、約２１日後、約２８日後、約３５日後、約４２日後、約４９日後、約５６日後、約６３若しくは約７０日後に、ＧＤＦ１５単剤療法より１．１倍超、１．２倍超、１．３倍超、１．４倍超、１．５倍超、１．６倍超、１．７倍超、１．８倍超、１．９倍超、２．０倍超、２．５倍超、３．０倍超、３．５倍超、４．０倍超、４．５倍超、５．０倍超、５．５倍超、６．０倍超、６．５倍超、７．０倍超、７．５倍超、８．０倍超、８．５倍超、９．０倍超、９．５倍超、１０倍超、１１倍超、１２倍超、１３倍超、１４倍超、１５倍超、１６倍超、１７倍超、１８倍超、１９倍超、２０倍超、２１倍超、２２倍超、２３倍超、２４倍超、２５倍超、２６倍超、２７倍超、２８倍超、２９倍超若しくは３０倍超の効果；ＧＩＰＲ抗原結合タンパク質単剤療法より１．１倍超、１．２倍超、１．３倍超、１．４倍超、１．５倍超、１．６倍超、１．７倍超、１．８倍超、１．９倍超、２．０倍超、２．５倍超、３．０倍超、３．５倍超、４．０倍超、４．５倍超、５．０倍超、５．５倍超、６．０倍超、６．５倍超、７．０倍超、７．５倍超、８．０倍超、８．５倍超、９．０倍超、９．５倍超、１０倍超、１１倍超、１２倍超、１３倍超、１４倍超、１５倍超、１６倍超、１７倍超、１８倍超、１９倍超、２０倍超、２１倍超、２２倍超、２３倍超、２４倍超、２５倍超、２６倍超、２７倍超、２８倍超、２９倍超若しくは３０倍超の効果；又はその両方を有する。

別の実施形態では、ＧＩＰＲ抗原結合タンパク質（例えば、それぞれ配列番号６５～６７及び７７～７９；配列番号６８～７０及び８０～８２；配列番号７１～７３及び８３～８５；若しくは配列番号７４～７６及び８６～８８のアミノ酸配列を含む；又はそれぞれ配列番号８９及び９０、配列番号９１及び９２、配列番号９３及び９４若しくは配列番号９５及び９６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域及び重鎖可変領域を含む抗体；又はそれぞれ配列番号９７及び９８、配列番号９９及び１００、配列番号１０１及び１０２、配列番号１０３及び１０４若しくは配列番号１０５及び１０６のアミノ酸配列を含む軽鎖及び重鎖を含むＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２、ＣＤＲＬ３、ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３のアミノ酸配列を含む抗体）と一緒に投与される、それぞれ配列番号５７及び３７（Ｃ末端のリシンは任意選択）のアミノ酸配列を含むＧＤＦ１５分子及び対応するＦｃ分子は、ＧＤＦ１５分子及び対応するＦｃ分子及び／又はＧＩＰＲ抗原結合タンパク質の投与から約１日後、約２日後、約３日後、約４日後、約５日後、約６日後、約７日後、約８日後、約９日後、約１０日後、約１１日後、約１２日後、約１３日後、約１４日後、約２１日後、約２８日後、約３５日後、約４２日後、約４９日後、約５６日後、約６３若しくは約７０日後に、ＧＤＦ１５単剤療法より１．１倍超、１．２倍超、１．３倍超、１．４倍超、１．５倍超、１．６倍超、１．７倍超、１．８倍超、１．９倍超、２．０倍超、２．５倍超、３．０倍超、３．５倍超、４．０倍超、４．５倍超、５．０倍超、５．５倍超、６．０倍超、６．５倍超、７．０倍超、７．５倍超、８．０倍超、８．５倍超、９．０倍超、９．５倍超、１０倍超、１１倍超、１２倍超、１３倍超、１４倍超、１５倍超、１６倍超、１７倍超、１８倍超、１９倍超、２０倍超、２１倍超、２２倍超、２３倍超、２４倍超、２５倍超、２６倍超、２７倍超、２８倍超、２９倍超若しくは３０倍超の効果；ＧＩＰＲ抗原結合タンパク質単剤療法より１．１倍超、１．２倍超、１．３倍超、１．４倍超、１．５倍超、１．６倍超、１．７倍超、１．８倍超、１．９倍超、２．０倍超、２．５倍超、３．０倍超、３．５倍超、４．０倍超、４．５倍超、５．０倍超、５．５倍超、６．０倍超、６．５倍超、７．０倍超、７．５倍超、８．０倍超、８．５倍超、９．０倍超、９．５倍超、１０倍超、１１倍超、１２倍超、１３倍超、１４倍超、１５倍超、１６倍超、１７倍超、１８倍超、１９倍超、２０倍超、２１倍超、２２倍超、２３倍超、２４倍超、２５倍超、２６倍超、２７倍超、２８倍超、２９倍超若しくは３０倍超の効果；又はその両方を有する。

一実施形態では、ＧＤＦ１５分子対ＧＬＰ－１Ｒアゴニスト若しくはＧＩＰＲアンタゴニストのモル比は、約１：１～１：１００、約１：１～１：７５、約１：１～１：５０、約１：１～１：２５、約１：１～１：１０又は約１：１～１：５である。一実施形態では、ＧＤＦ１５分子対ＧＬＰ－１Ｒアゴニスト若しくはＧＩＰＲアンタゴニストのモル比は、約１：１、約１：２、約１：３、約１：４、約１：５、約１：１０、約１：２０、約１：３０、約１：４０又は約１：５０である。一実施形態では、ＧＤＦ１５分子対ＧＬＰ－１Ｒアゴニスト（例えば、デュラグルチド）のモル比は、約１：１～１：１００、１：１～１：７５、１：１～１：５０、１：１～１：２５、１：１～１：１０若しくは１：１～１：５；又は約１：１、約１：２、約１：３、約１：４、約１：５、約１：１０、約１：２０、約１：３０、約１：４０若しくは約１：５０である。別の実施形態では、ＧＤＦ１５分子対ＧＩＰＲアンタゴニスト（例えば、ＧＩＰＲ抗体）のモル比は、約１：１～１：１００、１：１～１：７５、１：１～１：５０、１：１～１：２５、１：１～１：１０若しくは１：１～１：５；又は約１：１～１：１１０、１：１～１：１００、１：１～１：７５、１：１～１：５０、１：１～１：２５、１：１～１：１０若しくは１：１～１：５、又は約１：１、約１：２、約１：３、約１：４、約１：５、約１：１０、約１：２０、約１：３０、約１：３３、約１：４０若しくは約１：５０である。

一実施形態では、ＧＤＦ１５分子及びＧＬＰ－１Ｒアゴニスト若しくはＧＩＰＲアンタゴニストは、治療効果を有する（例えば、状態及び／又は疾患を治療する；体重減少を低減させる；血糖値、血中インスリン値、血中トリグリセリド値若しくは血中コレステロール値を低減させる；糖耐能、エネルギー消費量若しくはインスリン感受性を改善する；又は食物摂取量を低減させる）ために必要とされる各化合物単独の用量の少なくとも約１．１～１．４、１．５、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０分の１の用量で存在する。

詳細な説明及び以下の実施例は、本発明を例示するものであり、本発明は、それに限定するものとして解釈されるべきではない。本発明の説明に基づき、当業者によって様々な変更形態及び修正形態がなされ得、そうした変更形態及び修正形態も本発明に含まれる。

実施した実験及び得られた結果を含む以下の例は、説明のみを目的として提供するものであり、本発明を限定するものと解釈されるべきではない。

実施例１：ＧＤＦ１５分子の生成
ＦｃΔ１０（－）－（Ｇ４Ｓ）４－ＧＤＦ１５（配列番号３９）を無血清の浮遊培養に適応させたＣＨＯ－Ｋ１細胞株内で安定発現させた。それをピューロマイシン耐性を含有する安定性発現ベクターにクローニングする一方、ＦｃΔ１０（－）－（Ｇ４Ｓ）４－ＧＤＦ１５とヘテロ二量体を形成するためのＦｃ鎖ＦｃΔ１０（＋、Ｋ）（配列番号３２）は、ハイグロマイシンを含む発現ベクター（Ｓｅｌｅｘｉｓ，Ｉｎｃ．）にクローニングした。これらのプラスミドは、リポフェクタミンＬＴＸを用いて１：１の割合でトランスフェクトし、トランスフェクションの２日後に１０μｇ／ｍＬのピューロマイシン及び６００μｇ／ｍＬのハイグロマイシンを含む独自の増殖培地で細胞を選択した。選択中に培地を週２回交換した。細胞の生存率が約９０％に達したとき、それらをバッチ培養生産工程用にスケールアップした。細胞は、生産培地に２×１０６／ｍＬで播種した。細胞により生成された馴化培地（ＣＭ）を７日目に回収し、清澄化した。エンドポイントの生存率は、典型的には９０％超であった。

ＦｃΔ１０（－）－（Ｇ４Ｓ）４－ＧＤＦ１５（配列番号３９）（及び対をなした任意のＦｃ）を清澄化した。馴化培地は、２段階クロマトグラフィー手順を用いて精製した。約５ＬのＣＭは、ダルベッコのリン酸塩緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で事前に平衡化されていたＧＥ ＭａｂＳｅｌｅｃｔ ＳｕＲｅカラムへ直接的に適用した。結合したタンパク質に以下の３つの洗浄工程を実施した：最初に、３カラム体積（ＣＶ）のＰＢＳ；次に、１ＣＶの２０ｍＭのトリス、ｐＨ７．４の１００ｍＭの塩化ナトリウム；最後に、３ＣＶの５００ｍＭのＬ－アルギニン、ｐＨ７．５。これらの洗浄工程により、非結合又は軽く結合した培地成分及び宿主細胞の不純物が除去される。次いでカラムを、５ＣＶの２０ｍＭのトリス、ｐＨ７．４の１００ｍＭの塩化ナトリウムで再平衡化し、ＵＶ吸光度をベースラインに戻した。所望のタンパク質は、ｐＨ３．６の１００ｍＭの酢酸により溶出し、大量に収集した。タンパク質プールを１Ｍのトリス－ＨＣｌ、ｐＨ９．２で５．０～５．５のｐＨ範囲に直ちに滴定した。次にｐＨ調整したタンパク質プールは、ｐＨ６．０の２０ｍＭの２－エタンスルホン酸（ＭＥＳ）で事前に平衡化してあったＧＥ ＳＰ セファロースＨＰカラムに充填した。次いで結合したタンパク質を５ＣＶの平衡化緩衝液で洗浄し、最後にｐＨ６．０の２０ｍＭのＭＥＳ中、０～４００ｍＭの塩化ナトリウムの２０ＣＶ、０～５０％のリニアグラジエントで溶出した。溶出中に画分を収集し、分析用サイズ排除クロマトグラフィー（Ｓｕｐｅｒｄｅｘ２００）により解析して均一な産物のためプールするのに適切な画分を決定した。ＳＰ ＨＰクロマトグラフィーによって、遊離Ｆｃ、切除された種及びＦｃ－ＧＤＦ１５多量体等の産物関連不純物が除去される。次いで透析によりＳＰ ＨＰプールの緩衝液を１０ｍＭの酢酸ナトリウム、５％プロリン、ｐＨ５．２にした。それを、Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ Ｖｉｖａｓｐｉｎ（登録商標）２０ １０キロダルトン分子量カットオフ遠心装置を用いておよそ１５ｍｇ／ｍｌに濃縮した。最後に、最終ロットを濾過滅菌し、精製Ｆｃ－ＧＤＦ１５分子を含む得られた溶液を５℃で保存した。最終産物について、質量スペクトル解析、硫酸ドデシルナトリウムポリアクリルアミド電気泳動法及びサイズ排除高速液体クロマトグラフィーを用いて同一性及び純度を評価した。

実施例２：ＧＤＦ１５、デュラグルチド及び／又はＧＩＰＲ抗体の投与
投与の開始時に１９～２０週齢（１３～１４週間に渡り高脂肪食を摂取した）雄性Ｃ５７Ｂｌ／６ＤＩＯマウスを次の治療群に配置した：Ａ群－動物に週１回ビヒクルが投与されたビヒクル群；Ｂ群－動物に週２回０．１ｍｇ／ｋｇ（２ｎｍｏｌ／ｋｇ）のデュラグルチドが投与されたデュラグルチド群；Ｃ群－動物に週１回５ｍｇ／ｋｇ（３３ｎｍｏｌ／ｋｇ）の抗体２．６３．１（それぞれ配列番号１０５及び１０６の軽鎖及び重鎖配列を有する）及び週１回ビヒクル（後者はデュラグルチドの投与日と交互に）が投与されたＧＩＰＲ抗体群；Ｄ群－動物に（そのヘテロ二量体化パートナーであるＦｃΔ１０（＋，Ｋ）（配列番号３２）と一緒に）週１回０．１２５ｍｇ／ｋｇ（１ｎｍｏｌ／ｋｇ）のＦｃΔ１０（－）－（Ｇ４Ｓ）４－ＧＤＦ１５（配列番号３９）及び週１回ビヒクル（後者はデュラグルチドの投与日と交互に）が投与されたＧＤＦ１５群；Ｅ群－動物に（そのヘテロ二量体化パートナーであるＦｃΔ１０（＋，Ｋ）と一緒に）週１回０．１２５ｍｇ／ｋｇ（１ｎｍｏｌ／ｋｇ）のＦｃΔ１０（－）－（Ｇ４Ｓ）４－ＧＤＦ１５）及び週２回０．１ｍｇ／ｋｇ（２ｎｍｏｌ／ｋｇ）のデュラグルチドが投与されたＧＤＦ１５＋デュラグルチド群；Ｆ群－動物に（そのヘテロ二量体化パートナーであるＦｃΔ１０（＋，Ｋ）と一緒に）週１回０．１２５ｍｇ／ｋｇ（１ｎｍｏｌ／ｋｇ）のＦｃΔ１０（－）－（Ｇ４Ｓ）４－ＧＤＦ１５及び週１回５ｍｇ／ｋｇ（３３ｎｍｏｌ／ｋｇ）の抗体２．６３．１が投与されたＧＤＦ１５＋ＧＩＰＲ抗体群。動物には、皮下注射を通して５週間にわたって投与した。

体重は、週２回測定した。図１は、体重の変化を示している（図１Ａはグラム単位、図１Ｂは、体重の変化率）。体重変化の有意性は、表７に示した。

図２は、治療開始２週間後（図２Ａ）及び５週間後（図２Ｂ）の体重変化率（％）を示している。このデータは、ＧＤＦ１５とデュラグルチド又はＧＩＰＲ抗体何れかとの併用療法が相乗作用的であることを示している。治療の２週間後、Ｄ群（ＧＤＦ１５）のマウスは体重の－９．３３％の変化を有したが、Ｂ群（デュラグルチド）若しくはＣ群（ＧＩＰＲ抗体）のマウスは、体重におけるそれぞれ－４．４０％及び－０．９１％の変化を有した。しかしながら、Ｅ群（ＧＤＦ１５＋デュラグルチド）のマウスは、－１３．７３％の相加効果より大きい、体重における－１８．２８％の変化を有した。この減少は、デュラグルチド治療単独と比較して３倍超であり、ＧＤＦ１５治療単独に見られるほぼ２倍の減少であった。Ｆ群（ＧＤＦ１５＋ＧＩＰＲ抗体）のマウスは、－１４．５６％の相加効果より大きい、体重における－１３．６５％の変化を有した。この減少は、ＧＩＰＲ抗体治療単独と比較して１３倍超であり、ＧＤＦ１５治療単独に見られるほぼ１．５倍の減少であった。

治療の５週間後、Ｄ群（ＧＤＦ１５）のマウスは体重の－１４．６２％の変化を有したが、Ｂ群（デュラグルチド）若しくはＣ群（ＧＩＰＲ抗体）のマウスは、体重におけるそれぞれ－１．９６％及び２．２４％の変化を有した。しかしながら、Ｅ群（ＧＤＦ１５＋デュラグルチド）のマウスは、－１５．５８％の相加効果より大きい、体重における－３３．５６％の変化を有した。この減少は、デュラグルチド治療単独と比較して１５倍超であり、ＧＤＦ１５治療単独に見られる２倍超の減少であった。Ｆ群（ＧＤＦ１５＋ＧＩＰＲ抗体）のマウスは、－１２．３８％の相加効果より大きい、体重における－２２．６２％の変化を有した。この減少は、ＧＩＰＲ抗体治療単独と比較して２０倍超であり、ＧＤＦ１５治療単独に見られる１．５倍超の減少であった。

経口糖耐能試験（ＯＧＴＴ）を初回治療の２週間後に実施し、図３は、経口糖耐能試験中の治療開始２週間後の血糖値（図３Ａ）及び血糖ＡＵＣ（図３Ｂ）を示しており、治療群とビヒクル群肝のＡＵＣの差は、図３Ｂにおける各バーの上部に表示した。併用療法は、ＧＤＦ１５単剤療法よりも大きな効果を有していなかった（－３９．０％のＡＵＣを有するＤ群と比較して、Ｅ群及びＦ群は、それぞれ－４０．０％のＡＵＣ及び－３３．１％のＡＵＣを有していた）。

同様に、併用療法は、腹腔内糖耐能試験（ＩＰＧＴＴ）においてＧＤＦ１５単剤療法より大きな効果を有していなかった。ＩＰＧＴＴは、初回治療の５週間後に実施し、図４は、経口糖耐能試験中の治療開始５週間後の血糖値（図４Ａ）及び血糖ＡＵＣ（図４Ｂ）を示しており、治療群とビヒクル群間のＡＵＣの差は、図４Ｂにおける各バーの上部に表示した。併用療法群であるＥ群及びＦ群は、－３８．０％のＡＵＣを有するＧＤＦ１５単剤療法群であるＤ群と比較して、それぞれ－４２．４％のＡＵＣ及び－４０．４％のＡＵＣを有していた。

空腹時血糖値、血中インスリン値、血中トリグリセリド値及び血清総コレステロール値は、初回治療の２週間後及び５週間後に測定した（それぞれ、図５Ａ～５Ｄ）。併用療法（Ｅ群及びＦ群）は、空腹時血糖値若しくは血中トリグリセリド値を低減させることについてＧＤＦ１５単剤療法（Ｄ群）に比較して大きな効果を有していなかったが（それぞれ図５Ａ及び５Ｃ）、２週間後、併用療法は、血清インスリン値を低減させることにより大きな効果を有し、５週間後に、ＧＤＦ１５＋デュラグルチドの併用は血清インスリン値を低減させることにＧＤＦ１５単剤療法に比較して大きな効果を有していた（図５Ｂ）。ＧＤＦ１５＋デュラグルチドの併用も又、総コレステロール値を低減させることにＧＤＦ１５単剤療法よりも大きな効果を有していた（図５Ｄ）。

食物摂取量は、週１回連続する３日間に測定し、結果は図６に示した。データの有意性は、表８に示した。

本発明を様々な実施形態の観点から記載してきたが、当業者であれば変形及び修正を想到するであろうことは理解されよう。従って、添付の特許請求の範囲は、特許請求される本発明の範囲内にあるそのような均等な変形の全てを包含することが意図されている。更に、本明細書で使用した項目の見出しは、構成を目的としているに過ぎず、記載される主題を限定するものと解釈すべきではない。

本出願に引用した全ての参考文献は、あらゆる目的のために参照により明示的に本明細書に組み込まれる。

Claims (22)

1. ＧＤＦ１５分子を含む、対象における肥満の治療に使用するための医薬組成物であって、前記使用は、抗ＧＩＰＲ抗体を含むＧＩＰＲアンタゴニスト及び前記ＧＤＦ１５分子を対象に投与することを含み、前記使用は、前記ＧＤＦ１５分子単独又は前記ＧＩＰＲアンタゴニスト単独の投与と比較して相乗効果を有する、医薬組成物。
2. 抗ＧＩＰＲ抗体を含むＧＩＰＲアンタゴニストを含む、対象における肥満の治療に使用するための医薬組成物であって、前記使用は、ＧＤＦ１５分子及び前記ＧＩＰＲアンタゴニストを対象に投与することを含み、前記使用は、前記ＧＤＦ１５分子単独又は前記ＧＩＰＲアンタゴニスト単独の投与と比較して相乗効果を有する、医薬組成物。
3. 抗ＧＩＰＲ抗体を含むＧＩＰＲアンタゴニスト及びＧＤＦ１５分子を含む、対象における肥満の治療に使用するための医薬組成物であって、前記医薬組成物の投与は、前記ＧＤＦ１５分子単独又は前記ＧＩＰＲアンタゴニスト単独の投与と比較して相乗効果を有する、医薬組成物。
4. 前記ＧＤＦ１５分子及び前記ＧＩＰＲアンタゴニストは、同時に投与される、請求項１又は２に記載の医薬組成物。
5. 前記ＧＤＦ１５分子及び前記ＧＩＰＲアンタゴニストは、連続的に投与される、請求項１又は２に記載の医薬組成物。
6. 前記ＧＩＰＲアンタゴニストは、抗体である、請求項１～３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
7. 前記抗ＧＩＰＲ抗体は、ＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２、ＣＤＲＬ３、ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３を含み、前記ＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２、ＣＤＲＬ３、ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２及びＣＤＲＨ３は、それぞれ配列番号６５～６７及び７７～７９、配列番号６８～７０及び８０～８２、配列番号７１～７３及び８３～８５、又は配列番号７４～７６及び８６～８８のアミノ酸配列を含む、請求項１～３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
8. 前記抗ＧＩＰＲ抗体は、それぞれ配列番号８９及び９０、９１及び９２、９３及び９４、又は９５及び９６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域及び重鎖可変領域を含む、請求項７に記載の医薬組成物。
9. 前記抗ＧＩＰＲ抗体は、それぞれ配列番号９７及び９８、９９及び１００、１０１及び１０２、１０３及び１０４、又は１０５及び１０６のアミノ酸配列を含む軽鎖及び重鎖を含む、請求項７に記載の医薬組成物。
10. 前記相乗効果は、体重を低減させることにある、請求項１～３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
11. 前記ＧＤＦ１５分子は、Ｆｃ領域に連結されたＧＤＦ１５領域を含む融合タンパク質である、請求項１～３のいずれか一項に記載の医薬組成物。
12. 前記ＧＤＦ１５領域は、リンカーを介して前記Ｆｃ領域に連結している、請求項１１に記載の医薬組成物。
13. 前記ＧＤＦ１５領域は、配列番号１３～１８から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項１１に記載の医薬組成物。
14. 前記ＧＤＦ１５領域は、配列番号１６、配列番号１７又は配列番号１８のアミノ酸配列を含む、請求項１３に記載の医薬組成物。
15. 前記ＧＤＦ１５領域は、配列番号１４、配列番号１５又は配列番号１８のアミノ酸を含む、請求項１３に記載の医薬組成物。
16. 前記ＧＤＦ１５領域は、配列番号１６又は配列番号１８のアミノ酸配列を含む、請求項１３に記載の医薬組成物。
17. 前記リンカーは、（Ｇ４Ｓ）ｎリンカー又は（Ｇ４Ｑ）ｎリンカーであり、式中、ｎは０より大きい、請求項１２に記載の医薬組成物。
18. ｎは、１又は２である、請求項１７に記載の医薬組成物。
19. 前記Ｆｃ領域は、Ｋ３９２Ｄ、Ｋ４０９Ｄ、Ｅ３５６Ｋ及びＤ３９９Ｋから選択される電荷対の変異を含む、請求項１１に記載の医薬組成物。
20. 前記Ｆｃ領域は、短縮ヒンジ領域を含む、請求項１１に記載の医薬組成物。
21. 前記Ｆｃ領域は、配列番号２６～３７から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項１１に記載の医薬組成物。
22. 前記Ｆｃ領域は、配列番号２６～３１から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項１１に記載の医薬組成物。

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