JP4621444B2

JP4621444B2 - 抗腫瘍物質の製造方法

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Publication number: JP4621444B2
Application number: JP2004181879A
Authority: JP
Inventors: 剛杉山; 龍彦松尾; 和之二口
Original assignee: 株式会社ヴァリダックス; 有限会社オトコーポレーション
Priority date: 2004-06-18
Filing date: 2004-06-18
Publication date: 2011-01-26
Anticipated expiration: 2024-06-18
Also published as: KR100633503B1; JP2006001902A; CN1709409A; CN1709409B; KR20050120558A; TW200600101A; KR20060100308A; US20050281898A1

Description

本発明は、抗腫瘍物質の製造方法に関する。更に詳しくは、麦胚芽等を小麦麹で発酵させて得られた抗腫瘍物質の製造方法に関する。本願発明は、健康食品及び疾病の治療等に広く利用される。

従来から、合成化合物の免疫増強剤が多数提案されているが、長期間服用しても副作用のない天然物由来のものが好ましい。この天然物由来の免役力増強剤及び抗腫瘍物質は、従来からも知られている（特許文献１〜３）。また、本願発明者等は、過去にドロドロの血液をサラサラにする酵素食品を提案している（特許文献４）。

特開平６−９４２１号公報特開２０００−２２４９７０号公報特開２００３−３３５６９５広報特開２００１−１２０２０３号広報

しかし、脳血栓、脳梗塞及び肺血性塞栓症等の原因となる凝集集合体になっている赤血球を、各々分離して真円形状とし、異常形状の赤血球を短時間に修復し、正常形状の赤血球としてこの異常形状に基づく疾病の治療効果を併せて有する天然物由来の抗腫瘍物質は従来の発明は知られていない。本願発明者等は更に研究を進め、所定の発酵物は、凝集して集合状態の赤血球を、血液細胞分析法による顕微鏡観察した結果、赤血球が各々分離して真円形状とし、更に、白血球を大きくし、白血球の動きを活発にすることを見出した。その結果、この発酵物は、脳血栓、脳梗塞及び肺血性塞栓症等を予防するのみならず、免役力増強作用があることを見出し、これに基づいて抗腫瘍物質を発明するに至った。また、抗腫瘍物質は、異常形状の赤血球を短時間に修復し、正常形状の赤血球とし、各種疾病に効果がある。

また、本願発明者等は、抗腫瘍物質について、ラットを使用したインビトロにおける抗腫瘍効果を見出し、更に本願抗腫瘍物質は、腫瘍免役のみならず広く免役増強作用を奏し、各種疾病に対して有効であることを血液細胞分析法を用いて見出した。

本願発明は、麦胚芽等を小麦麹で発酵して得られる抗腫瘍物質の製造方法を提供する。麦胚芽等を小麦麹で発酵して得られる抗腫瘍物質は、腫瘍に対する免疫力増強効果が大きいのみならず、白血球の活性を大きくし、腫瘍以外の各種の免疫性を増大させ、また、血液中の尿酸結晶等を溶解し、及び異常赤血球を短時間に修復し、正常形状の赤血球として、異常形状の赤血球による各種疾病の治療効果を有する。

本発明は以下に示す通りである。
１．麦胚芽、大豆胚芽及び米胚芽の混合物を小麦麹を用いて発酵させて得られた抗腫瘍物質の製造方法であって、
（１）麦胚芽、大豆胚芽及び米胚芽の混合物を５０〜１５０℃で蒸煮する工程、又は、麦胚芽、大豆胚芽及び米胚芽の混合物を５０〜１５０℃で焙煎した後に蒸煮する工程と、（２）得られた蒸煮物を、小麦麹を用いて発酵させる工程と、（３）得られた発酵物を３５〜４５℃で乾燥する工程と、（４）乾燥させた発酵物を６０〜１００℃で熱水処理する工程と、を備えることを特徴とする抗腫瘍物質の製造方法。
２．上記麦胚芽、大豆胚芽及び米胚芽の配合比（麦胚芽：大豆胚芽：米胚芽）が、質量基準で、５：５：４である上記１に記載の抗腫瘍物質の製造方法。

麦胚芽等を麹菌等で発酵して得られる抗腫瘍物質は、優れた抗腫瘍効果を有する。更に、天然物を素材としているため安全性が高い。
また、服用前の血液中の凝集集合体状の赤血球、有棘赤血球、的状赤血球、赤血球連結、エチノサイト、小赤血球、大赤血球、溶血赤血球、連鎖状配列赤血球、卵形赤血球及び／又は活性酸素損傷赤血球を、服用後に真円形状とさせ、且つ各々の赤血球は分離した状態とさせる場合は、抗腫瘍効果が大きいのみならず、この異常形状の赤血球に基づく疾病等にも治療効果を奏する。
更に、服用後の血液中の白血球の径を正常赤血球の径の２．２倍以上とさせ、顆粒球の顆粒が活発に動いている場合は、抗腫瘍効果が特に大きい。
また、血液中の尿酸結晶を消滅させる場合は、痛風による痛みを除去する。
更に関節痛の改善、肝臓の機能向上、子宮筋腫縮小、癌細胞の縮小、コレステロールの低減、中性脂肪の低減、及びアトピー性皮膚炎改善のグループのうちで少なくとも１種の効果を有する場合は、広く健康食品等として利用できる。
また、更に、上記抗腫瘍物質を用いた飲食品は、腫瘍予防効果及び免役力増強効果が大きく、ヒトの健康を増進するとともに天然物由来の飲食品であり、副作用はなく安全性が高い。
本願発明の製造方法によれば、簡易且つ効率的に抗腫瘍物質を製造できる。
また、更に、６０〜１００℃で熱水処理をする工程を備える抗腫瘍物質の製造方法で得られる坑腫瘍物質は、抗腫瘍効果に優れる。

本発明について、以下詳細に説明する。
［１］抗腫瘍物質(発酵物）
本発明の、麦胚芽、大豆胚芽及び米胚芽の混合物を小麦麹で発酵して得られる抗腫瘍物質（以下、単に「抗腫瘍物質」ともいう）の製造方法の原料である麦胚芽、大豆胚芽及び米胚芽の種類は特に限定されない。例えば、麦胚芽は大麦、小麦、はと麦、ライ麦及びオート麦等のいずれの胚芽を使用してもよい。また、これらの麦胚芽の２種以上を併用してもよい。現在大豆の種類は約２００種類が知られているがこれらの大豆種のうちでいずれの大豆の胚芽を使用してもよい。例えば、黒豆、丹波黒豆、青大豆等のいずれの大豆の胚芽を使用することができる。またこれらの２種以上を併用することもできる。また、米胚芽はいずれの種類の米の胚芽であってもよい。例えば、長粒種、中粒種及び短粒種のいずれの種類の米の胚芽を使用してもよい。またこれらの２種以上を併用してもよい。また、上記原料の配合割合は、適宜選択できる。例えば、麦胚芽量：大豆胚芽量：米胚芽量を１：１：１とすることもできる。上記原料の配合比のうちで、麦胚芽：大豆胚芽：米胚芽が５：５：４が好ましく用いられる。

上記原料に、はと麦、大豆及び玄米の群から選ばれる少なくとも１種を更に添加することができる。これらのものを添加した場合は、原料の発酵効率が高くなり、原料の低分子化が促進され、抗腫瘍物質はより体内に吸収されやすくなる。これらのものは、そのまま添加してもよいし、破砕状又は粉末状等にして添加してもよい。これらのものの添加率は、上記胚芽にはと麦等を添加した後の原料の全体を１００質量％とした場合、好ましくは５〜６０質量％、より好ましくは５〜５０質量％、更に好ましくは１０〜４０質量％、である。上記範囲内であると特に発酵効率が高くなる。

上記原料は、麹菌、酵母及び乳酸菌のうちのいずれか１種又は２種以上を用いて発酵させるが、本発明では小麦麹を用いる。上記麹菌の種類は上記原料を発酵させることができれば特に限定されない。麹菌はアスペルギルスオリゼー、アスペルギルスソジェ等が使用される。これらの麹菌は１種のみを使用してもよいし、２種以上を併用することもできる。これらの麹菌のうちでアスペルギルスオリゼーが好ましく用いられる。

また、上記酵母の種類は、上記原料を発酵できるものであれば特に限定されない。サッカロミセス・セレビシエ及びサッカロミセス・ロゼイ等が使用される。これらの酵母は１種のみを使用してもよいし、２種以上を併用することもできる。これらの酵母のうちでサッカロミセス・セレビシエが好ましく用いられる。

さらに、上記乳酸菌の種類は、上記原料を発酵できるものであれば特に限定されない。
例えば、乳酸菌はラクトバチルス・プランタルム、ラクトバチルス・サリバリウス、ラクトバチルス・プレビス、ラクトバチルス・カゼイ、ラクトバチルス・アシドフィルス、ラクトバチルス・ヘルベティクス、ストレプトコッカス・ラクチス、ストレプトコッカス・サーモフィルス及びエンテロコッカス・フェカーリス等が使用される。これらの乳酸菌は１種のみを使用してもよいし、２種以上を併用することもできる。これらの乳酸菌のうちでラクトバチルス・プランタルム、ラクトバチルス・サリバリウス、ラクトバチルス・プレビス、ラクトバチルス・カゼイ、ラクトバチルス・アシドフィルス、が好ましく用いられる。
また、上記麹菌、酵母菌及び乳酸菌のうち２種以上を共棲培養又は共棲発酵させることができる。

上記原料は、５０〜１５０℃で蒸煮する。好ましくは６０〜１４０℃、更に好ましくは７０〜１３０℃、特に好ましくは８０〜１２０℃で蒸煮する。５０℃以下では胚芽中の澱粉又は蛋白質等が十分に発酵に適したように変性しないためである。また、１５０℃以上では、胚芽中の後で抗腫瘍物質となる有効成分が分解してしまう恐れがあるためである。

この蒸煮の方法は特に限定されない。公知の方法が適用されるが、通常はオートクレーブが使用される。蒸煮時間は特に限定されないが、好ましくは３０〜５００分、より好ましくは５０〜４８０分、更に好ましくは７０〜４６０分である。３０分以下では十分に蒸煮されない恐れがあり、５００分以上であると必要成分が分解される恐れがあるためである。

また、上記蒸煮の前に、上記原料を焙煎することもできる。上記焙煎方法は特に限定されず、公知の方法を使用することができる。この公知の方法のうちで遠赤外線による焙煎が好ましく用いられる。焙煎温度は、好ましくは３０〜５００分、より好ましくは５０〜４８０分、更に好ましくは７０〜４６０分である。３０分以下では十分に焙煎されないため発酵効率が低くなる恐れがあり、５００分以上であると必要成分が分解される恐れがあるためである。

上記蒸煮された又は焙煎後に蒸煮された原料は、通常、好ましくは２０〜５０℃以下、より好ましくは２３〜４５℃、更に好ましくは２６〜４０℃に冷却される。この冷却された原料は上記麹菌等と混合して、好ましくは２４〜４２℃、より好ましくは２５〜４１℃、更に好ましくは２６〜４０℃、の醗酵室で、好ましくは２４〜７２時間、より好ましくは２８〜６８時間、更に好ましくは３２〜６４時間発酵させる。
上記発酵温度と発酵時間の組み合わせは、好ましくは２４〜４２℃、且つ２４〜７２時間、より好ましくは２５〜４１℃、且つ２８〜６８時間、更にこの好ましくは２６〜４０℃、且つ３２〜６４時間である。

その後、発酵室より取り出して、乾燥して発酵物（抗腫瘍物質）を得る。この乾燥方法としては、既知の方法が使用できる。例えば、熱風乾燥、減圧乾燥法及び凍結乾燥法が挙げられる。これらのうちで熱風乾燥法が好ましく用いられ、３５〜４５℃で１０〜２０時間乾燥させる。更に、必要に応じて滅菌等し、目的に応じて、粉末、顆粒、錠剤又はカプセル等とすることができる。

更に、上記発酵物を熱水処理する。この熱水処理は、６０〜１００℃、より好ましくは６５〜９８℃、更に好ましくは７０〜９６℃で、好ましくは５〜３５分間、より好ましくは１０〜３０分間、更に好ましくは１５〜２５分間行う。上記熱水処理した抗腫瘍物質が、熱水処理しないもの比較して優れた効果を奏する場合があるためである（図１及び２参照）。

麦胚芽等を麹菌等で発酵して得られる抗腫瘍物質は、９６ウェルプレートで培養したＡ４５７３ヒトユーイング肉腫培養液に濃度１ｍｇ／ｍｌの抗腫瘍物質を添加して、２４時間後に生細胞測定試薬（テトラゾリウム塩：ナカライテスク）を加え、１時間後の呈色反応をマイクロプレートリーダー（４５０ｎｍ）を用いて生細胞を測定した場合、坑腫瘍剤を添加しないもの（以下「対照群」という）に比較して、熱水処理をした抗腫瘍物質を用いた場合の生細胞数は、対照群の生細胞数に対して、好ましくは９０％以下、より好ましくは８８％以下、更に好ましくは８５％以下とすることができる。

同様に９６ウェルプレートで培養したマウスメラノーマＢ１６細胞培養液に濃度１ｍｇ／ｍｌの抗腫瘍物質を添加して、２４時間後に生細胞測定試薬（テトラゾリウム塩：ナカライテスク）を加え、１時間後の呈色反応をマイクロプレートリーダー（４５０ｎｍ）を用いて生細胞を測定した場合、対照群と比較して、熱水処理をしない抗腫瘍物質を用いた場合の生細胞数は、対照群の生細胞数に対して、好ましくは９０％以下、より好ましくは８８％以下、更に好ましくは８５％以下とすることができる。また、熱水処理をした上記抗腫瘍物質を用いた場合の生細胞数は、対照群の生細胞数に対して、好ましくは９０％以下、より好ましくは８９％以下、更に好ましくは８８％以下とすることができる。

また、抗腫瘍物質を０．４％含む固形飼料を調整し、５週齢のＣ５７ＢＬ６マウスに給餌し、給餌２週間後にＢ１６細胞（５×１０^５ｃｅｌｌｓ／ｍｏｕｓｅ）を尾静脈接種し、接種後２２日における、抗腫瘍物質接種群の腫瘍体積％は、対照群に対して好ましくは６５体積％以下、より好ましくは６０体積％以下、更に好ましくは５５体積％とすることができる。
また、接種後２２日に体重を測定した場合、対照群に対して、腫瘍物質投与群の平均体重との比は好ましくは１０４％以上、より好ましくは１０５％以上、更に好ましくは１０６％以上とすることができる。
更に、接種後２２日における対照群に対する肺転移細胞数は、好ましくは４５％以下、より好ましくは４０％以下、更に好ましくは３５％以下とすることができる。

上記抗腫瘍物質（上記方法で得られた発酵物）の服用後、血液細胞分析法による顕微鏡観察において、上記血液中の各赤血球は真円形状となり、各赤血球は分離することが好ましい。上記血液細胞分析法とは、染色をしないで生きた血液を顕微鏡で分析するＬＢＡ（ＬｉｖｅＢｌｏｏｄＡｎａｌｙｓｉｓ）であって、短時間に血液中の赤血球、白血球であるリンパ球、顆粒球及びマクロファージ等を直接観察する方法である。上記真円形状とは、顕微鏡で観察した場合に平面形状が略円形であることを言い、図１０、１２、１４、１６、１８及び２０真円形状の例を示す。また、分離とは個々の赤血球が凝集していない状態をいい、図１０、１２、１４、１６、１８及び２０に赤血球が離した状態の例を示す。
また、「血液中の各赤血球は真円形状となり」とは、全て又はほとんどの血液が真円形状となる（好ましくは９０％以上）ことを言う。また、「分離する」とは、真円形状の赤血球が平面上で接触している状態も含まれ、各々の赤血球が容易に分離できることを言う。

図９は真円形状でない赤血球が凝集し凝集集合体を形成している状態を示す。真円形状に分離した赤血球はおよそ７〜８ミクロンである。また、毛細血管の血管腔の径は５ミクロン程度であり、図９で示されるように赤血球が分離していない血液は、毛細血管を通過するのが困難であることがわかる。これに対して本願の赤血球がほぼ真円形状に分離された正常な血液は変形能を有していて毛細血管を通過することが容易である。この結果、血流障害による動脈硬化、狭心症、脳血栓、脳梗塞、肺血性塞栓症、心筋梗塞及び心房内出血等が予防される。

また、上記抗腫瘍物質（発酵物）の服用により、血液中の尿酸結晶（図１５参照）、コレステロール結晶及びプラークを溶解される。これらの尿酸結晶等が溶解するのに必要な時間は、服用後好ましくは９０日以内、より好ましくは６０日以内、更に好ましくは３０日以内である。この血液中の尿酸結晶は、痛風の原因と考えられている。尿酸結晶が毛細血管の壁に接触すると激しい痛みを感じる。上記範囲であると比較的短期間に痛みを除去することができる。

抗腫瘍物質（発酵物）は、服用前の血液中の有棘赤血球（図９及び１１参照）、的状赤血球（図１３参照）、連鎖状配列赤血球（図１７参照）、卵形赤血球（図１３参照）及び活性酸素損傷結晶等を、服用後に修復し真円形状とし、通常、各々の赤血球を分離させる。正常な赤血球は真円形状であり、上記有棘赤血球等の真円形状でない赤血球は病的な赤血球で正常なものといえない。即ち、肝機能の低下している赤血球は有棘赤血球である場合が多い。また、鉄分が不足して貧血である場合は的状赤血球、甲状腺異常又は子宮筋腫等によりホルモン分泌が異常である場合は卵形赤血球の場合が多い。

図１０、１２、１４、１６、１８及び２０は上記各々の変形異常赤血球が正常な赤血球になっていることを表す。この変形異常赤血球が正常な赤血球となる作用は、明確に論証されていないが、本願抗腫瘍物質（又は上記方法で製造された発酵物）を服用すると、膠原病に伴う関節痛の改善、肝機能の向上、子宮筋腫縮小、癌細胞の縮小、コレステロールの低減、中性脂肪の低減、及びアトピー性皮膚炎治癒効果のグループのうちで少なくとも１種を有することができる。

従って、麦胚芽、大豆胚芽及び米胚芽の混合物を小麦麹を用いて発酵させて得られた前記発酵物は、抗腫瘍物質として使用される以外にも、痛風、各種癌、脳梗塞、心筋梗塞、狭心症、膠原病、貧血症、異常ホルモン症、高コレステロール症、高中性脂肪症及びアトピー性皮膚炎等の１種又は２種以上疾病の治療にも用いることができる。

上記有棘赤血球等の異常赤血球を正常な赤血球とするのに要する時間は、服用後好ましくは、１２０分以内、より好ましくは６０分以内、更に好ましくは３０分以内である。正常でない赤血球は早急に正常なものにする必要があるためである。抗腫瘍物質（発酵物）は、短時間に異常血液を正常なものとする。

該抗腫瘍物質の服用後、血液細胞分析法による顕微鏡観察において、血液中の白血球の径は、正常赤血球の好ましくは２．２倍以上、より好ましくは２．５倍以上、更に好ましくは３．０倍以上である。ここで白血球の大きさとは、血液細胞分析法による顕微鏡により観察される平面形状の径をいう。
また、上記抗腫瘍物質の服用後の血液中の白血球の径と、該抗腫瘍物質服用前の血液中の白血球の径との比（服用後の径／服用前の径）は、好ましくは１．５〜４、より好ましくは２．０〜３．０である。白血球の径が上記範囲であると、白血球の活性が大きくなり、免疫力が増大される。

抗腫瘍物質は血液中の白血球の活性を高めて、免疫力を向上させる。また、活性力のない白血球はその径が小さく且つ動作が緩慢であるといわれている。血液細胞分析法による顕微鏡観察において、本願の抗腫瘍物質を服用後、血液中の白血球は大きくなり、輪郭がはっきりして特にマクロファージが活発に動き回るのが観察される（図１２左上参照）。また、白血球のなかでも、ウィルスや癌細胞を攻撃するリンパ球Ｔ細胞及びＢ細胞も観察することができ、これらが十分活動していることも観察できる。図１２は、服用後の白血球が正常赤血球の２．５倍以上に大きくなり、輪郭が鮮明になった状態を表す。

抗腫瘍物質の服用量は、特に限定されない。体重、年齢及び性別等により適宜服用することができる。例えば、成人の場合は、好ましくは１０００〜５０００ｍｇ／日、より好ましくは２０００〜４０００ｍｇ／日、更に好ましくは２５００〜３５００ｍｇ／日である。上記服用量を通常は一日３〜４回に分けて服用する。１０００ｍｇ未満であると抗腫瘍効果が十分でない場合がある。また、５０００ｍｇを超えて服用しても腫瘍免役はそれに見合った効果が得られないためである。また、本願抗腫瘍物質は、原料が天然素材であるため、副作用がなく安全性が高い。

抗腫瘍物質には、小麦胚芽、玄米、海藻ミネラル、澱粉、ビタミン、アミノ酸及びその他のものを１種又は２種以上含有させることができる。また、本願発明の抗腫瘍物質は、そのまま飲用することも食することもできる。また、飲料又は食品に添加して使用することができる。また、特定の保健効果が認められる保健食品、生体調節成分の機能を生かして作られる機能性食品又は保健用ドリンク剤とすることができる。

［２］抗腫瘍物質の製造方法
本願発明の製造方法は、（１）麦胚芽、大豆胚芽及び米胚芽の混合物を５０〜１５０℃で蒸煮する工程、又は、麦胚芽、大豆胚芽及び米胚芽の混合物を５０〜１５０℃で焙煎した後に蒸煮する工程と、（２）小麦麹を用いて発酵させる工程と、（３）得られた発酵物を３５〜４５℃で乾燥する工程と、（４）乾燥させた発酵物を６０〜１００℃で熱水処理する工程と、を備える。
（１）の蒸煮工程において、上記麦胚芽、大豆胚芽及び米胚芽は、前記抗腫瘍物質で記載したものを使用できる。また、上記原料の配合割合も前記したものが適用できる。
蒸煮の方法も前記の蒸煮方法が適用できる。また、麦胚芽等をこの蒸煮前に上記温度で焙煎することもできる。この焙煎方法は前記したものを適用できる。また、（２）の発酵工程において、小麦麹は前記したものが適用できる、発酵方法も前記した発酵方法が適用できる。また、この製造方法により、製造された発酵物は、抗腫瘍物質として用いられるばかりでなく、各種疾病の治療にも用いることができる。

更に、得られた発酵物を熱水処理する工程を備える。この熱水処理温度は、６０〜１００℃、好ましくは６５〜９８℃、更に好ましくは７０〜９６℃である。また、この熱処理時間は、好ましくは５〜３５分間、より好ましくは１０〜３０分間、更に好ましくは１５〜２５分間行う。上記熱水処理した抗腫瘍物質が、熱水処理しないもの比較して優れた効果を奏する場合があるためである。

［３］抗腫瘍物質含有飲食品（発酵物含有飲食品）
抗腫瘍物質含有飲食品は、上記抗腫瘍物質（発酵物）を用いることを特徴とする。「抗腫瘍物質含有飲食品」には、飲料及び固形食品等が含まれる。飲食品の形態としては、例えば、特定の保健効果が認められる飲食品、又は生体調整成分の機能を生かして作られる機能性飲食品等とすることができる。

上記抗腫瘍物質を飲食品に適用する場合、抗腫瘍物質をそのまま飲食品の形態にしてもよいが、所要量の抗腫瘍物質を飲食品原料に加えて一般の製造法により抗腫瘍物質含有飲食品を加工製造することができる。例えば、上記抗腫瘍物質を飲料に添加物として直接添加するか、又はビスケット等の固形食品に添加して抗腫瘍物質含有の癌予防飲食品、健康飲食品又は機能性飲食品等として提供することができる。

また、上記抗腫瘍物質を、例えば、油脂、エタノール、プロピレングリコール、グリセリン、界面活性剤又はこれらの混合物に溶解して液状にし、若しくは懸濁液として、飲料に添加するか、又は固形食品に添加することが可能である。さらに、必要に応じてアラビアガム、デキストリン等のバインダーと混合して粉末状又は顆粒状等にし、飲料に添加するか又は固形食品に添加することも可能である。本発明の抗腫瘍物質を添加する飲食品の種類は特に限定されない。

飲食品に上記抗腫瘍物質を添加する場合、抗腫瘍物質の添加量に特に制限はないが、健康食品、機能性食品としての摂取は、病気予防、健康維持に用いられるので、年齢、体重、性別により適宜添加量を調整する。被添加飲食物と上記抗腫瘍物質の合計を１００質量％とした場合、好ましくは１〜３０質量％、より好ましくは２〜２５質量％、更に好ましくは３〜２０質量％である。
抗腫瘍物質は、従来からの食品を素材とするものであり、安全性の面からも優れているのは明らかである。
また、「抗腫瘍物質」の代わりに、前記「発酵物」とおきかえたものを飲食品とすることもできる。

以下に実験例を挙げて、説明する。本実験例において、以下のものを使用した。
血液細胞分析法による顕微鏡観察：ＣＨ４０型顕微鏡（オリンパス社製）を用いて倍率、１０００倍で観察した。以下の実験例で示される赤血球の図はこの顕微鏡を用いて観察状態を撮影したものであり、実際の血液の１０００倍で表されている。

[実験例１]
原料の配合比は、麦胚芽２５０ｇ、大豆胚芽２５０ｇ及び米胚芽２００ｇとし、これらの混合物を１１０℃で３時間蒸気で加熱し、その後冷却し、３０℃になった時に小麦麹を２５０ｇを混合してバットに薄くのばした。このバットの混合物を３０℃で４８時間醗酵室に入れて発酵させた。その後取り出して、４０℃で４８時間乾燥して、抗腫瘍物質を得た。
[実験例２]
マウスを使用したインビトロにおける腫瘍免役
（１）上記抗腫瘍物質を乾燥粉末としてリン酸緩衝液に溶解させ、熱水処理をしないものと９０℃で、２０分間熱水処理したもの（Ｂｏｉｌｅｄ）とを用意した。各液を９６ウェルプレートで培養したヒト腫瘍細胞Ａ４５７３及びマウスメラノーマＢ１６細胞培養液に最終濃度１ｍｇ／ｍｌになるように添加した。添加後６及び２４時間に生細胞測定試薬（テトラゾリウム塩：ナカライテスク）を加え、１時間後の呈色反応をマイクロプレートリーダー（４５０ｎｍ）を用いて測定した。また、抗腫瘍物質を無添加の対照（以下「対照群」として表すこともある）について同様の測定をした。
尚、測定は４反復とした。
上記結果を図１及び２に示す。熱水処理した抗腫瘍物質は、ヒト腫瘍細胞Ａ４５７３おいては対照群との間に有意な生細胞数の低下が認められた。また、マウスメラノーマＢ１６細胞においても、対照群との間に有意な細胞数の低下が認められた。

（２）抗腫瘍物質を０．４％含む固形飼料を調整し、５週齢のＣ５７ＢＬ６マウスに給餌した。自由採食によってマウスに摂取される１日あたりの抗腫瘍物質の量はヒトの１０倍程度と考えられる。また、普通固形飼料を与える群を対照とした。抗腫瘍物質１の皮下移植性腫瘍に対する抗腫瘍効果を評価するために給餌２週間後にＢ１６細胞（５×１０^５ｃｅｌｌｓ／ｍｏｕｓｅ）を７匹に皮下接種し、経時的に腫瘍体積％を測定し、あわせて腫瘍接種後の生存率を検討した。
その結果を図３,４及び５に示す。自由採食させたマウスでは普通固形飼料を与える群と比較して有意な体重の変化は見られなかった（図３）。このことから、マウスは抗腫瘍物質含有飼料を普通飼料と同等に採食していることが示唆された。給餌２週間後にＢ１６細胞（５×１０^５ｃｅｌｌｓ／ｍｏｕｓｅ）を各群７匹に皮下接種したところ、接種後２２日に抗腫瘍物質接種群において腫瘍体積％は、対照群に対して５５体積％であり、著しい抗腫瘍効果が認められた（図４）。また、腫瘍接種群の生存日数は、Ｂ１６細胞（５×１０^５ｃｅｌｌｓ／ｍｏｕｓｅ）皮下接種した抗腫瘍物質投与群７匹は、接種後２８日において４匹の生存数があったのに対して、対照群の生存数は０であった（図５）。

（３）抗腫瘍物質を０．４％含む固形飼料を調整し、５週齢のＣ５７ＢＬ６マウスに給餌した。
また、普通固形飼料を与える群を対照とした。抗腫瘍物質の転移性腫瘍に対する坑腫瘍効果を評価するために給餌２週間後にＢ１６細胞（５×１０^５ｃｅｌｌｓ／ｍｏｕｓｅ）を各群１０匹に尾静脈接種し、経時的に体重を測定するとともに、接種後１９及び２２日に各群半数（５匹）の肺を摘出し、転移細胞数を測定した。
その結果を図６、７及び８に示す。経時的に体重測定をした結果、接種後２２日おいて、対照群の平均体重は、１８．６ｇであるのに対して、本願抗腫瘍物質投与群の平均体重は、１９．９ｇであり、対照群に対する本願抗腫瘍物質投与群の平均体重の比は１０７％であった（図６）。
また、接種後１９及び２２日に各群５匹ずつ肺を摘出し、転移細胞数を測定した。その結果の各々を図７、８に示す。接種後１９日において、対照群の平均転移数は１２であるのに対して、本願抗腫瘍物質投与群の平均転移数は８であり、対照群に対する転移数の比率は、６６％であり、転移数の減少が認められた。また、接種後２２日においては、対照群の平均転移数は３９であるのに対して、本願抗腫瘍物質投与群の平均転移数は１７であり、対照群に対する転移数の比率は、４４％であり、転移数の著しい減少が認められた。
上記より、抗腫瘍物質接種マウスでは腫瘍細胞の移転が抑制されることが解る。

[実験例３]
ライブブラッド法による顕微鏡観察
（１）成人女子で膠原病患者の血液を採取し、血液細胞分析法の顕微鏡で観察した。この赤血球は凝集し、形状もいびつである(図９）。また、肝機能の状態も悪く、有棘赤血球（スパイク状）が見られる。更に、糖の分解も悪く、ファンガスも多く見られる。抗腫瘍物質を１１７０ｍｇを服用３０分後に再度血液細胞分析をした結果、各赤血球は真円形状に分離し、有棘赤血球（スパイク状）は見られなくなった（図１０）。
この患者に、上記投与量を１日４回、９０日連続服用した結果、膠原病の特有の関節の痛みがなくなった。
（２）成人女子で肝機能に障害をもつ患者の血液を採取し、血液細胞分析法の顕微鏡で観察した。有棘赤血球（スパイク状）が多々見られる（図１１）。この患者はＨＣＶ抗体の数値が、８８．９Ｓ／ＣＯ（ＨＣＶ抗体引例の場合は１．０Ｓ／ＣＯ）であった。抗腫瘍物質を１１７０ｍｇ服用した後３０分経過時に血液細胞分析を再度行った。その結果、各々の赤血球は真円形状に分離し、有棘赤血球（スパイク状）は見られなくなった(図１２）。更に図１２に示されるいずれの白血球の径も赤血球の径の２．７倍になり、免疫力が増進したことがわかる。上記服用量を１日３回、９０日連続服用した結果、ＨＣＶ抗体の数値が、１０．４Ｓ／ＣＯと服用前の１／８以下となり、肝機能障害の改善が見られた。
（３）成人女子で子宮筋腫患者の血液を採取し、血液細胞分析法の顕微鏡で観察した。この赤血球は卵型であり、ホルモンバランスが悪いことが解る（図１３）。更に、ドーナツ状をした的状赤血球も見られ、鉄分不足で貧血であることがわかる。この患者のヘモグロビン値は，８．４ｇ／ｄｌ（正常値は、１１．５〜１５．５ｇ／ｄｌ）であった。抗腫瘍物質１１７０ｍｇを服用し、３０分後に再度血液細胞分析法の顕微鏡観察をした結果、各々の赤血球は真円形状に分離し、正常な状態になったことが解る（図１４）。上記量を１日３回、９０日連続服用した結果、３ｃｍの子宮筋腫が１ｃｍまで縮小した。また、貧血も改善し、ヘモグロビン値も正常値になった。
（４）成人女子で子宮癌患者の血液を採取し、血液細胞分析法の顕微鏡で観察した。この赤血球は、凝集し、尿酸結晶及び糖が分解できていない場合に見られるファンガスが観察された（図１５）。抗腫瘍物質１１７０ｍｇを服用し、３０分後に再度血液細胞分析法の顕微鏡観察をした結果、各々の赤血球は真円形状に分離し、尿酸結晶が消失し正常な状態になったことが判る（図１６）。上記量を１日３回、９０日連続服用し、ＭＲＩ及びバイオプシーを検査した結果、癌が消滅したと診断された。
（５）成人男子で、高脂血症、高コレステロール（２６１ｍｇ／ｄｌ）及び高中性脂肪（１７１４ｍｇ／ｄｌ）の血液を採取し、血液細胞分析法の顕微鏡で観察した。この赤血球は、凝集状態が非常に悪く、連鎖状配列赤血球であり、白血球も小さく赤血球の間に閉じ込められて身動きが取れない状態で、血液の流れが非常に悪く中国医学においてはお血といわれる状態である（図１７）。抗腫瘍物質１１７０ｍｇを服用し、３０分後に再度血液細胞分析法の顕微鏡観察をした結果、各々の赤血球は真円形状に分離し、正常な状態になったことが解る（図１８）。上記量を１日３回、１２０日連続服用し、血液検査をした結果、コレステロール値が２２７ｍｇ／ｄｌとなり、中性脂肪値は１６９ｍｇ／ｄｌと大幅に減少して、ほぼ正常の値となった。
（６）成人女子でアトピー性皮膚炎患者の血液を採取し、血液細胞分析法の顕微鏡で観察した。この赤血球は、凝集し、白血球（顆粒球）が一画面に３個も観察される（図１９）。一画面に２個以上の顆粒球が存在する場合は、アレルギー疾患（喘息、鼻炎及び花粉症等）であることがかんがえられ、患部は炎症を起している状態である。抗腫瘍物質１１７０ｍｇを服用し、３０分後に再度血液細胞分析法の顕微鏡観察をした結果、各々の赤血球は真円形状に分離し、リンパ球のＢ細胞の大きさも赤血球の２．３倍となり活性化していることが解る（図２０）。リンパ球が活性化した状態であるため、免疫力が増進したと考えられる。上記量を１日３回、９０日連続服用し結果、アトピー性皮膚炎は完治した。

実験例の効果
上記より、上記抗腫瘍物質は、腫瘍に対する免役効果を有する。
また、麦胚芽、大豆胚芽及び米胚芽の群から選ばれる少なくとも１種を含有する原料を麹菌、酵母及び乳酸菌の群から選ばれる少なくとも１種を用いて発酵させて得られた前述の発酵物は、痛風、各種癌、脳梗塞、心筋梗塞、狭心症、膠原病、貧血症、異常ホルモン症、高コレステロール症、高中性脂肪症及びアトピー性皮膚炎等の１種又は２種以上疾病の改善にも用いることができる。
更に、本願発明により得られる抗腫瘍物質は、腫瘍に対する免役効果を有するとともに、腫瘍以外においても免役効果を有する。

尚、本発明においては、上記具体的実験例に限らず、目的、用途に応じて本発明の範囲内で種々変更した実施例とすることができる。即ち、前記抗腫瘍物質の代わりに、麦胚芽、大豆胚芽及び米胚芽の群から選ばれる少なくとも１種を含有する原料を麹菌、酵母及び乳酸菌の群から選ばれる少なくとも１種を用いて発酵させて得られた前述の発酵物を、そのまま実施例に適応できる。即ち、この発酵物は、痛風、各種癌、脳梗塞、心筋梗塞、狭心症、膠原病、貧血症、異常ホルモン症、高コレステロール症、高中性脂肪症及びアトピー性皮膚炎等の１種又は２種以上疾病の改善にも用いることができる。

本発明は、保健飲料、健康食品、健康補助食品、特定保健用食品、及び医薬品等において広く利用される。例えば、上記抗腫瘍物質をそのまま又は飲食品に添加して、食品として添加できる。また、抗腫瘍物質をカプセル、錠剤、分包、シロップ剤、座薬及び注射剤等として医薬として提供することができる。

Ａ４５７３ヒトユーイング肉腫に対する抗腫瘍物質の坑腫瘍効果を示す図である。Ｂ１６マウスメラノーマ細胞に対する抗腫瘍物質の坑腫瘍効果を示す図である。抗腫瘍物質接種マウスの体重推移を示す図である。抗腫瘍物質摂取マウスの皮下接種Ｂ１６細胞の増殖を示す図である。抗腫瘍物質摂取マウスにおけるＢ１６皮下接種後の生存日数を示す図である。抗腫瘍物質摂取マウスにおけるＢ１６尾静脈接種後の体重変化を示す図である。接種後１９日における、Ｂ１６尾静脈接種マウスにおける肺転移細胞数を示す図である。接種後２２日における、Ｂ１６尾静脈接種マウスにおける肺転移数を示す図である。血液中の赤血球が凝集し、有棘赤血球が存在する状態を示す写真を複写したものである。血液中の各血球が真円形状に分離し、有棘赤血球が消滅した正常な状態を示す写真を複写したものである。血液中の赤血球が有棘赤血球である写真を複写したものである。血液中の各赤血球が真円状となり分離し、有棘赤血球が消滅し、白血球が赤血球の３倍以上になった状態を示す写真を複写したものである。血液中の赤血球が、的状赤血球及び卵形赤血球である状態を示す写真を複写したものである。血液中の的状赤血球及び卵形赤血球が正常の赤血球になった状態を示す写真を複写したものである。血液中の赤血球が凝集し、尿酸結晶及びファンガスの存在する状態を示す写真を複写したものである。血液中の各赤血球が真円形状となり分離し、尿酸結晶が溶解し、ファンガスが消滅し、白血球が大きくなった状態を示す写真を複写したものである。血液中の赤血球の凝集状態が著しく、白血球が赤血球に囲まれて小さく閉じ込められた状態を示す写真を複写したものである。血液中の赤血球の凝集がなくなり、各赤血球は真円形状に分離し、正常な状態を示す写真を複写したものである。血液中の赤血球が、凝集し、白血球（顆粒球）が一画面に３個存在する状態を示す写真を複写したものである。血液中の各血球が真円形状に分離し、リンパ球のＢ細胞が大きくなり活性化した状態を示す写真を複写したものである。

Claims

麦胚芽、大豆胚芽及び米胚芽の混合物を小麦麹を用いて発酵させて得られた抗腫瘍物質の製造方法であって、
（１）麦胚芽、大豆胚芽及び米胚芽の混合物を５０〜１５０℃で蒸煮する工程、又は、麦胚芽、大豆胚芽及び米胚芽の混合物を５０〜１５０℃で焙煎した後に蒸煮する工程と、（２）得られた蒸煮物を、小麦麹を用いて発酵させる工程と、（３）得られた発酵物を３５〜４５℃で乾燥する工程と、（４）乾燥させた発酵物を６０〜１００℃で熱水処理する工程と、を備えることを特徴とする抗腫瘍物質の製造方法。
上記麦胚芽、大豆胚芽及び米胚芽の配合比（麦胚芽：大豆胚芽：米胚芽）が、質量基準で、５：５：４である請求項１に記載の抗腫瘍物質の製造方法。