JP2653246B2 - Production method of fat emulsion - Google Patents
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Landscapes
- Medicinal Preparation (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】 技術分野 本発明は、アムホテリシンＢを含有する脂肪乳剤の製
造過程において、アムホテリシンＢの有効量を脂肪乳剤
中に含有させるための技術に関する。Description: TECHNICAL FIELD The present invention relates to a technique for including an effective amount of amphotericin B in a fat emulsion in a process of producing a fat emulsion containing amphotericin B.
背景技術 アムホテリシンＢは、開発されてから約30年を経過し
た今日でも、全身投与をすることができ、確実な効果を
期待することができる重要な抗真菌剤として汎用されて
いる。しかしこの物質は、溶血毒性、腎毒性等の重篤な
副作用が発現する欠点を有していた。Background Art Amphotericin B has been widely used as an important antifungal agent that can be administered systemically and expected to have a certain effect even today, about 30 years after its development. However, this substance had a drawback that serious side effects such as hemolytic toxicity and nephrotoxicity appeared.
近年、リン脂質等からなるリポソーム製剤、又は、単
純脂質をリン脂質で乳化する脂肪乳剤製剤とすること等
により上記のアムホテリシンＢの欠点は解消されつつあ
った。In recent years, the above-mentioned drawbacks of amphotericin B have been solved by preparing a liposome preparation comprising a phospholipid or the like or a fat emulsion preparation in which a simple lipid is emulsified with a phospholipid.
アムホテリシンＢはこれらの脂質には容易に溶解しな
いことが判っていた。そこでこれらの製剤を製造する方
法にはこれまで、アムホテリシンＢ及び脂質をクロロ
ホルム、メタノール又はジメチルスルホキサイド等の溶
媒に添加して溶解均一化した後に溶媒を除去し水を加え
て乳化する方法、アムホテリシンＢをデオキシコール
酸ナトリウムとともにジメチルアセトアミド等の溶媒に
溶解させた後に脂肪乳剤中に加える方法、の二つがあっ
た。では有害な溶媒が残留する危険を払拭することが
できず、またではと同様の欠点に加え、合成界面活
性剤であり刺激性や溶血性を有するデオキシコール酸ナ
トリウムが必ず製剤中に含有される欠点があるほか、ア
ムホテリシンＢが脂肪乳剤の粒子中に完全には封入され
ないという大きな欠点を有していた。Amphotericin B was found not to be readily soluble in these lipids. Therefore, a method for producing these preparations has heretofore been described by adding amphotericin B and lipids to a solvent such as chloroform, methanol or dimethyl sulfoxide, dissolving and homogenizing the mixture, removing the solvent, adding water, and emulsifying the mixture. There is a method of dissolving amphotericin B together with sodium deoxycholate in a solvent such as dimethylacetamide and then adding the solution to a fat emulsion. Cannot eliminate the risk of remaining harmful solvents, and in addition to the same disadvantages as above, sodium deoxycholate, which is a synthetic surfactant and has irritating and hemolytic properties, is always contained in the formulation In addition to the drawbacks, it had the major drawback that amphotericin B was not completely encapsulated in the fat emulsion particles.
特開平１−160915号公報にはアムホテリシンＢのリポ
ソーム製剤において、予めクロロホルム／メタノール混
液中でプロトン化したジステアロイルホスファチジルグ
リセロールとアムホテリシンＢの複合体を形成した後乾
燥する技術が開示されているが、これとても製造中に有
害な溶媒を使用しなければならずその残留に大きな問題
があった。JP-A-1-160915 discloses a technique for forming a complex of amphotericin B and amphotericin B in a liposome preparation of amphotericin B in the form of a complex of distearoylphosphatidylglycerol and amphotericin B that has been protonated in a chloroform / methanol mixture in advance. This requires the use of harmful solvents during the very manufacturing process and has a major problem in their retention.
上記の事情に鑑み、アムホテリシンＢ含有脂肪乳剤を
製造するに際して、有害な物質を用いることなく安定で
均一な脂肪乳剤を取得することが、本発明の当初からの
目的であった。In view of the above circumstances, it has been an object of the present invention to obtain a stable and uniform fat emulsion without using harmful substances when producing an amphotericin B-containing fat emulsion.
発明の開示 本発明者らは、鋭意検討を行った結果、以下に示す製
造方法により、上記目的を達成することができることを
見出した。DISCLOSURE OF THE INVENTION As a result of intensive studies, the present inventors have found that the above object can be achieved by the following production method.
本発明の要旨の一つは、アムホテリシンＢを含有する
脂肪乳剤の製造過程において、アムホテリシンＢを非晶
質化して均質に脂質に分散させるに際して、酸及びエタ
ノールを使用するという単純な操作にある。One of the points of the present invention lies in a simple operation of using an acid and ethanol when amorphizing amphotericin B and dispersing it in lipids uniformly in a process of producing a fat emulsion containing amphotericin B.
本発明の要旨の二つめは、アムホテリシンＢを含有す
る脂肪乳剤の製造過程において、アムホテリシンＢを非
晶質化して均質に脂質に分散させるに際して、アムホテ
リシンＢの結晶の存在が確認できなくなるまでこれらを
物理的に練合するという単純な操作にある。ここに脂質
とは、リン脂質及び複合脂質を含む概念である。The second of the gist of the present invention is that, in the process of producing a fat emulsion containing amphotericin B, when amphotericin B is made amorphous and uniformly dispersed in lipids, amphotericin B is crystallized until the presence of crystals cannot be confirmed. It is a simple operation of physically kneading. Here, the lipid is a concept including a phospholipid and a complex lipid.
上記に要旨を記載した二つの発明は、それぞれ別異の
発明であるが、産業上の利用分野及び解決しようとする
課題が同一である。Although the two inventions described above are different inventions, they have the same industrial fields of application and the problems to be solved.
第一の発明について説明する。 The first invention will be described.
本発明者らは、アムホテリシンＢがエタノールに容易
には溶解しない事実を踏まえ、エタノールを塩酸等の酸
によって酸性にすることによりアムホテリシンＢが極め
て容易にエタノール中に溶解する事実を発見し、これに
基づいて本発明を完成させたものである。Based on the fact that amphotericin B is not easily dissolved in ethanol, the present inventors have found that amphotericin B is very easily dissolved in ethanol by making ethanol acidic with an acid such as hydrochloric acid. Based on this, the present invention has been completed.
アムホテリシンＢを脂肪乳剤構成成分中に完全に分散
させ微細乳化後も安定に脂肪乳剤粒子中に封入させるた
めには、アムホテリシンＢを非晶質化した状態で脂肪乳
剤構成成分に分散させることが必要であるが、本発明に
より製造したアムホテリシンＢ脂肪乳剤中では、アムホ
テリシンＢが非晶質化していることがＸ線回折等により
確認されている。In order to completely disperse amphotericin B in the fat emulsion component and stably encapsulate it in the fat emulsion particles even after fine emulsification, it is necessary to disperse amphotericin B in the fat emulsion component in an amorphous state. However, in the amphotericin B fat emulsion produced according to the present invention, it has been confirmed by X-ray diffraction and the like that amphotericin B has become amorphous.
本発明においては、アムホテリシンＢをエタノール中
に溶解させる必要がある。In the present invention, it is necessary to dissolve amphotericin B in ethanol.
アムホテリシンＢの溶解に用いるエタノールの量及び
加える酸の量は、アムホテリシンＢが完全に溶解するた
めに必要な量以上であることが必要である。必要以上の
大量のエタノールを用いることは、後の除去操作が容易
でなくなるため好ましくない。一般的には、アムホテリ
シンB1gに対しエタノール200ml以上加えることが必要で
ある。好ましくは300〜800ml、より好ましくは400〜600
mlのエタノールがよい。It is necessary that the amount of ethanol used for dissolving amphotericin B and the amount of acid to be added are not less than the amount necessary for amphotericin B to completely dissolve. It is not preferable to use an unnecessarily large amount of ethanol because the subsequent removal operation becomes difficult. Generally, it is necessary to add 200 ml or more of ethanol to 1 g of amphotericin B. Preferably 300-800 ml, more preferably 400-600
ml of ethanol is good.
本発明においてアムホテリシンＢをエタノールに溶解
させるときには、一般的には、エタノール中にアムホテ
リシンＢの原末結晶をまず分散する。分散にあたって
は、超音波分散機又はポリトロンホモジナイザー等の分
散機を用いるのが好ましい。これにより、溶解に長時間
を要する大きな結晶状態のものでも、次の酸を加え溶解
する操作において、分解が生じるおそれを除くことがで
きる。When amphotericin B is dissolved in ethanol in the present invention, generally, the bulk powder of amphotericin B is first dispersed in ethanol. For dispersion, it is preferable to use a disperser such as an ultrasonic disperser or a polytron homogenizer. Thereby, even in a large crystalline state which requires a long time to dissolve, the possibility of decomposition occurring in the operation of adding and dissolving the next acid can be eliminated.
本発明においては、上記のようにアムホテリシンＢを
エタノール中に分散させた後、酸を加える。In the present invention, the acid is added after amphotericin B is dispersed in ethanol as described above.
本発明に適用する酸は特に限定されないが、例えば、
硫酸、硝酸、燐酸等の無機酸のほか、クエン酸、乳酸、
マレイン酸等の有機酸を挙げることができる。なかでも
塩酸が最も好ましい。The acid applied to the present invention is not particularly limited, for example,
In addition to inorganic acids such as sulfuric acid, nitric acid and phosphoric acid, citric acid, lactic acid,
Organic acids such as maleic acid can be mentioned. Of these, hydrochloric acid is most preferred.
アムホテリシンＢは酸性で比較的不安定であるため、
必要以上の高濃度の酸を加えることも好ましくない。Amphotericin B is acidic and relatively unstable,
It is not preferable to add an unnecessarily high concentration of acid.
加える酸の量は、アムホテリシンB1gに対して１〜100
ミリモル、好ましくは２〜20ミリモル、より好ましくは
４〜10ミリモルである。The amount of the acid to be added is 1 to 100 per 1 g of amphotericin B.
Mmol, preferably 2 to 20 mmol, more preferably 4 to 10 mmol.
本発明においては、予め酸性エタノールを作製し、こ
れにアムホテリシンＢの結晶を加えて溶解してもよい。In the present invention, an acidic ethanol may be prepared in advance, and a crystal of amphotericin B may be added thereto and dissolved.
本発明においては、上記により作製したアムホテリシ
ンＢの酸性エタノール溶液にリン脂質又はリン脂質と単
純脂質の混合物等を加える。In the present invention, a phospholipid or a mixture of a phospholipid and a simple lipid is added to an acidic ethanol solution of amphotericin B prepared as described above.
添加するリン脂質又はリン脂質と単純脂質の混合物の
量は、目的とする脂肪乳剤の処方により定めることがで
きる。この場合には、処方量全量を添加しても良いし、
その一部を後に添加することもできる。The amount of the phospholipid or the mixture of the phospholipid and the simple lipid to be added can be determined by the formulation of the target fat emulsion. In this case, the entire prescription amount may be added,
Some of them can be added later.
一般に、重量比でアムホテリシンＢの0.5倍量以上が
好ましい。より好ましくは、アムホテリシンＢの0.5倍
量以上５倍量以下を用いることができる。更に好ましく
は、１〜２倍量である。Generally, it is preferable that the weight ratio is 0.5 times or more of amphotericin B. More preferably, 0.5 times or more and 5 times or less of amphotericin B can be used. More preferably, the amount is 1 to 2 times.
あまり大量の脂質を添加すると後に行うエタノール除
去に長時間を必要とし、また、後の乾燥操作の後ペース
ト状を呈し取り扱いが困難となる。If a large amount of lipid is added, it takes a long time to remove ethanol later, and it becomes paste-like after the subsequent drying operation, which makes handling difficult.
これらの脂質は、アムホテリシンＢの酸性エタノール
溶液にそのまま添加することもできるが、予め脂質をエ
タノール又は酸性エタノール溶液に溶解して添加するこ
ともできる。These lipids can be directly added to an acidic ethanol solution of amphotericin B, or they can be added by dissolving the lipid in an ethanol or acidic ethanol solution in advance.
アムホテリシンＢは酸性では比較的不安定で分解しや
すいので、本発明においては、アムホテリシンＢの酸性
エタノール溶液を脂質と混合した後、なるべく早く酸を
中和することが好ましい。Since amphotericin B is relatively unstable and easily decomposed when it is acidic, in the present invention, it is preferable to neutralize the acid as soon as possible after mixing an acidic ethanol solution of amphotericin B with lipids.
中和に用いるアルカリは特に限定されない。例えば、
水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、アンモニア、トリ
エチルアミン等を用いることができる。水酸化ナトリウ
ムは、塩酸と中和した際に食塩となるから本発明の目的
には好ましい。The alkali used for neutralization is not particularly limited. For example,
Sodium hydroxide, potassium hydroxide, ammonia, triethylamine and the like can be used. Sodium hydroxide is preferable for the purpose of the present invention because it becomes salt when neutralized with hydrochloric acid.
本発明においては、アムホテリシンＢを溶解させる操
作を低温中で行うことができる。アムホテリシンＢは酸
性で比較的不安定であるので、低温での操作によりアム
ホテリシンＢの分解を未然に防止することができる。こ
の目的のためには、できるだけ、例えば−80℃の低温下
に操作を行うことが好ましい。In the present invention, the operation of dissolving amphotericin B can be performed at a low temperature. Since amphotericin B is acidic and relatively unstable, decomposition of amphotericin B can be prevented by operating at low temperature. For this purpose, it is preferred to carry out the operation as low as possible, for example at -80 ° C.
本発明においては、中和した後、用いたエタノールを
除去するため凍結乾燥、噴霧乾燥等の通常の方法により
乾燥処理することができる。In the present invention, after neutralization, drying treatment can be performed by a usual method such as freeze-drying or spray-drying to remove the used ethanol.
これによりアムホテリシンＢが完全に非晶質化し、エ
タノールを実質的に含有しないものを得ることができ
る。As a result, amphotericin B is completely amorphous, and a substance substantially free of ethanol can be obtained.
また、中和後析出するものを濾過又は遠心操作により
集めて乾燥することもできる。乾燥後、ペースト状を呈
して取り扱いが困難な場合には、予め賦形剤又は増量剤
を添加することもできる。Further, what precipitates after neutralization can be collected by filtration or centrifugation and dried. In the case where it is difficult to handle after drying because of a paste, an excipient or a bulking agent may be added in advance.
このような賦形剤又は増量剤の代表的な例として、塩
類、糖類、タンパク質、多糖類、その他の高分子を挙げ
ることができる。具体的には、食塩やグルコース、マル
トース、アルブミン、デキストラン等を挙げることがで
きる。Representative examples of such excipients or extenders include salts, saccharides, proteins, polysaccharides, and other macromolecules. Specific examples include salt, glucose, maltose, albumin, dextran and the like.
このような乾燥処理のほか、選択透過性膜（例えば、
逆浸透膜）を利用してエタノールを除去することもでき
る。In addition to such a drying treatment, a selectively permeable membrane (for example,
Ethanol can also be removed using a reverse osmosis membrane).
本発明の脂肪乳剤を製造するにあたっては、中和後、
水を添加してアムホテリシンＢと添加した脂質を共沈析
出させることができる。そして、水で洗浄することによ
り中和時に生成した食塩や残存する酸、アルカリも容易
に除去することができる。In producing the fat emulsion of the present invention, after neutralization,
Amphotericin B and the added lipid can be co-precipitated by adding water. By washing with water, salt generated during neutralization, remaining acids and alkalis can be easily removed.
得られたものは、乾燥することもでき、また湿潤状態
のまま他の脂肪乳剤構成脂質と混合することもできる。
更に、適当な孔径の選択透過性膜を用いるとエタノール
除去と同時に脱塩をすることができる。The resulting product can be dried, or can be mixed with other fat emulsion constituent lipids in a wet state.
Furthermore, if a selectively permeable membrane having an appropriate pore size is used, desalting can be performed simultaneously with removal of ethanol.
以上のようにして得られた非晶質化されたアムホテリ
シンＢを含むリン脂質又はリン脂質と単純脂質の混合物
は、通常知られる乳化操作によって所望の添加物や水を
加えて乳化処理することができる。The phospholipid containing amorphized amphotericin B or a mixture of phospholipid and simple lipid obtained as described above can be emulsified by adding a desired additive or water by a commonly known emulsification operation. it can.
上記の工程でエタノールを除去して乾燥後に得られた
非晶質化されたアムホテリシンＢを含有する脂質、又は
上記のようにして水添加により得られた共沈物は、後に
脂肪乳剤処方として加えられるべきリン脂質若しくは単
純脂質又はこれらの混合物等ときわめて容易に混合し均
質化することができる。この事実は、本発明の有用な効
果の一つである。The amorphized amphotericin B-containing lipid obtained after drying by removing ethanol in the above step, or the coprecipitate obtained by adding water as described above, is later added as a fat emulsion formulation. It can be very easily mixed and homogenized with the phospholipid or simple lipid to be prepared or a mixture thereof. This fact is one of the useful effects of the present invention.
本発明に係る脂肪乳剤の製造においては、乳化処理中
に熱を加えるまでもなく脂質等が容易に混合し均質化す
るから、工程の簡素化のみならず、熱に不安定なアムホ
テリシンＢの分解を未然に防止することができる。In the production of the fat emulsion according to the present invention, lipids and the like are easily mixed and homogenized without applying heat during the emulsification treatment, so that not only the process is simplified, but also the decomposition of heat-unstable amphotericin B is performed. Can be prevented beforehand.
本発明においては、混合又は練合に用いる器具及び装
置は、特に限定されない。乳鉢やポリトロンホモジナイ
ザー等を用いても良いし、軟膏製造時等によく用いられ
る一般的な混合練合装置でもよい。In the present invention, instruments and devices used for mixing or kneading are not particularly limited. A mortar, a polytron homogenizer, or the like may be used, or a general mixing and kneading apparatus often used in the production of ointments and the like may be used.
本発明においては、エタノール除去操作を行うことな
く所望の添加物又は水を加えて乳化することができる。
これは、エタノールが製剤処方中に処方されている場合
にきわめて有用である。In the present invention, emulsification can be performed by adding a desired additive or water without performing an ethanol removing operation.
This is very useful when ethanol is included in the formulation.
以下、本発明に係る第二の発明を詳述する。 Hereinafter, the second invention according to the present invention will be described in detail.
本発明においては、アムホテリシンＢは、粉末状のも
のを使用することができる。In the present invention, amphotericin B may be used in a powder form.
本発明においては、上記の粉末状のアムホテリシンＢ
を脂質とともに練合するに際して、例えば、これらを乳
鉢等の容器に入れ、これを棒で物理的に練ることができ
る。本発明の実施にあたっては、他の方法、例えば、工
業的に常用することができる練合機等を使用することが
できる。練合に用いる器具又は装置は特に限定されるこ
とがない。軟膏製造時等に通常よく用いられる機械は、
本発明の実施に適用することができる。In the present invention, the above-mentioned powdered amphotericin B is used.
Can be kneaded with a lipid, for example, they can be put into a container such as a mortar and then physically kneaded with a stick. In carrying out the present invention, other methods, for example, a kneading machine that can be used industrially can be used. The instrument or device used for kneading is not particularly limited. Machines that are commonly used when manufacturing ointments, etc.
It can be applied to the implementation of the present invention.
アムホテリシンＢを非晶質化して均質に脂質に分散さ
せるに際して一定の圧力を付加させながら十分に成分を
混合させることが、本発明の効果を生じさせるための必
要にして十分な要件であることが判っている。本発明者
らによって見出された本発明の要点は、練合に際しての
上記の操作以外のいかなるところにも存在しない。It is a necessary and sufficient requirement that the components of the present invention be sufficiently mixed while applying a constant pressure when amorphizing amphotericin B and dispersing it homogeneously in lipids. I know. The gist of the present invention found by the present inventors does not exist anywhere other than the above-mentioned operation at the time of kneading.
本発明による練合は、十分に行うことにより目的を達
成することができるので、それ以上操作を行う必要はな
い。このような物理的練合は、操作を継続することによ
りアムホテリシンＢの非晶質化が次第に達成されてゆく
ことが判っているから、通常使用されるべき解析手段に
よってアムホテリシンＢが非晶質化することを確認する
まですることができる。従って、このように確認できた
時点が、本発明の練合操作の終点となる。The kneading according to the invention can be carried out satisfactorily in order to achieve the object and no further operation is necessary. It has been known that such a physical kneading can gradually achieve the amorphization of amphotericin B by continuing the operation. Until you make sure you can. Therefore, the time point confirmed in this way is the end point of the kneading operation of the present invention.
このような解析手段としては、例えば、Ｘ線回折、電
子顕微鏡又は熱示差分析等による確認を使用することが
できる。As such an analysis means, for example, confirmation by X-ray diffraction, an electron microscope, thermal differential analysis, or the like can be used.
本発明の練合操作によって、アムホテリシンＢを含有
する脂質を、液状又は半固形ペースト状の物質として取
得することができる。この際にはいかなる溶媒を加える
ことも必要ではない。By the kneading operation of the present invention, the lipid containing amphotericin B can be obtained as a liquid or semi-solid paste-like substance. In this case, it is not necessary to add any solvent.
本発明の脂肪乳剤の製造においては、上記の練合操作
の後、通常脂肪乳剤を製する際に行うべき操作を行うこ
とができる。例えば、上記のアムホテリシンＢを含有す
る脂質に、更に脂肪乳剤の構成成分であるリン脂質又は
単純脂質を加えて混合する。In the production of the fat emulsion of the present invention, after the above-described kneading operation, an operation to be usually performed when producing a fat emulsion can be performed. For example, to the lipid containing amphotericin B, a phospholipid or a simple lipid, which is a component of a fat emulsion, is added and mixed.
添加するリン脂質又はリン脂質と単純脂質の混合物の
量は、目的とする脂肪乳剤の処方により定めることがで
きる。この場合には、処方量全量を添加しても良いし、
その一部を後に添加することもできる。The amount of the phospholipid or the mixture of the phospholipid and the simple lipid to be added can be determined by the formulation of the target fat emulsion. In this case, the entire prescription amount may be added,
Some of them can be added later.
本発明の脂肪乳剤の製造においては、その後所望量の
水を加えて、一般的な粗分散処理に続いて細乳化処理を
行うことができる。これによって均質化した安定なアム
ホテリシンＢ含有脂肪乳剤を取得することができる。In the production of the fat emulsion of the present invention, a desired amount of water is then added, followed by a general coarse dispersion treatment followed by a fine emulsification treatment. As a result, a homogenized stable amphotericin B-containing fat emulsion can be obtained.
本発明においては、添加する脂質の量及びその温度
が、混合物の粘度に影響を与えることが判っている。単
純脂質は、アムホテリシンＢの量の対して、少なくとも
２倍量（重量比）以上が望ましい。これにより、アムホ
テリシンＢの結晶が容易に単純脂質中に分散し、混合効
率を高めることができる。リン脂質は、アムホテリシン
Ｂの量に対して、少なくとも0.5倍量以上であることが
望ましい。それ以下であると均一な混合が困難である。
リン脂質の量は、1.0倍以上であると更に望ましい。In the present invention, it has been found that the amount of lipid added and its temperature affect the viscosity of the mixture. The amount of the simple lipid is desirably at least twice (by weight) the amount of amphotericin B. Thereby, the amphotericin B crystals can be easily dispersed in the simple lipid, and the mixing efficiency can be increased. The amount of the phospholipid is desirably at least 0.5 times the amount of amphotericin B. If it is less than that, uniform mixing is difficult.
More preferably, the amount of the phospholipid is 1.0 times or more.
本発明においては、単純脂質とリン脂質の混合系を用
いることができる。リン脂質のみで混合する場合には、
操作時に加温することが望ましい。In the present invention, a mixed system of a simple lipid and a phospholipid can be used. When mixing only with phospholipids,
It is desirable to heat during operation.
本発明においてアムホテリシンＢを脂質中に練合する
に際しては、70℃以下で行うことが望ましい。これ以上
ではアムホテリシンＢが不安定となる。また10℃以下の
低温においては粘度が増すために本発明の実施には適切
ではない。In the present invention, when kneading amphotericin B into lipid, it is preferable to carry out kneading at 70 ° C. or lower. Above this, amphotericin B becomes unstable. Further, at a low temperature of 10 ° C. or less, the viscosity increases, which is not suitable for the practice of the present invention.
以上のようにして得られた非晶質化されたアムホテリ
シンＢを含むリン脂質又はリン脂質と単純脂質の混合物
は、通常知られる乳化操作によって所望の添加物や水を
加えて乳化処理することができる。The phospholipid containing amorphized amphotericin B or a mixture of phospholipid and simple lipid obtained as described above can be emulsified by adding a desired additive or water by a commonly known emulsification operation. it can.
本発明においては、有機溶媒や合成界面活性剤等を全
く使用することなく目的を達成することができるから、
その残留することによる医薬品としての不利益をすべて
解消することができる。In the present invention, since the object can be achieved without using an organic solvent or a synthetic surfactant at all,
All the disadvantages of the drug due to the residual can be eliminated.
本発明においては、アムホテリシンＢを予め脂肪乳剤
構成成分中に均質に混合することができるから、細乳化
後もアムホテリシンＢが安定に脂肪乳剤粒子中に封入さ
れることとなる。In the present invention, amphotericin B can be homogeneously mixed in advance with the constituents of the fat emulsion, so that amphotericin B is stably encapsulated in the fat emulsion particles even after fine emulsification.
本発明においては、物理的に練合する際に、適当量の
酸を加えることができる。酸の添加により、アムホテリ
シンＢの均質化が著しく促進されることが判っている。
酸を用いた場合は、練合の後に、酸を中和するのに必要
な量のアルカリを加える（最終pHは４〜８が好まし
い）。In the present invention, an appropriate amount of an acid can be added during physical kneading. It has been found that the addition of the acid significantly promotes the homogenization of amphotericin B.
When an acid is used, after kneading, an amount of alkali necessary for neutralizing the acid is added (final pH is preferably 4 to 8).
本発明に適応する酸は特に限定を受けない。例えば、
塩酸、硫酸、硝酸、燐酸等の無機酸のほか、クエン酸、
乳酸、マレイン酸等の有機酸を挙げることができる。特
に、塩酸が好ましい。また、後の中和に用いるアルカリ
としては、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、アンモ
ニア、トリエチルアミン等を挙げることができる。塩酸
を中和した際に食塩となるので、水酸化ナトリウムが好
ましい。The acid applicable to the present invention is not particularly limited. For example,
In addition to inorganic acids such as hydrochloric acid, sulfuric acid, nitric acid, phosphoric acid, citric acid,
Organic acids such as lactic acid and maleic acid can be mentioned. Particularly, hydrochloric acid is preferable. Examples of the alkali used for the subsequent neutralization include sodium hydroxide, potassium hydroxide, ammonia, and triethylamine. Sodium hydroxide is preferred because it becomes salt when hydrochloric acid is neutralized.
塩酸を用いた場合は、少量でよく、一般に２〜６モル
／濃度の希塩酸を添加するのが好ましい。あまり希薄
な酸を大量に加えると水が遊離し、練合が困難となる。
また、濃い酸を加え、必要以上に酸度が上昇するとアム
ホテリシンＢの安定性上好ましくない。塩酸の総添加量
はアムホテリシンＢ量や大豆油量、リン脂質量により大
きく異なるが、一般に練合物1gに対し10ミリモル以下で
よい。When hydrochloric acid is used, a small amount is sufficient, and it is generally preferable to add 2 to 6 mol / concentration of dilute hydrochloric acid. If a large amount of too dilute acid is added, water is liberated, making kneading difficult.
Further, if the acidity is increased more than necessary by adding a concentrated acid, it is not preferable in view of the stability of amphotericin B. The total amount of hydrochloric acid varies greatly depending on the amount of amphotericin B, the amount of soybean oil, and the amount of phospholipid, but generally may be 10 mmol or less per 1 g of the kneaded product.
このように酸の添加は均質化を促進する効果を有する
が、本発明の主たる効果である溶媒を用いることなくア
ムホテリシンＢの脂質への均質化を達成するという目的
のためには必須ではない。Thus, the addition of an acid has the effect of promoting homogenization, but is not essential for the purpose of achieving homogenization of amphotericin B into lipids without using a solvent, which is the main effect of the present invention.
本発明に係る第一の発明においても第二の発明におい
ても、リン脂質、単純脂質を使用して脂肪乳剤を製造す
る。In both the first invention and the second invention according to the present invention, a lipid emulsion is produced using a phospholipid or a simple lipid.
本発明で使用されるリン脂質としては、例えば、卵
黄、大豆、牛、豚等由来のリン脂質又は、純若しくは半
合成的に得られるリン脂質を挙げることができる。例え
ば、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノール
アミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシ
トール、ホスファチジルグリセロール等である。具体的
には、卵黄ホスファチジルコリン、大豆ホスファチジル
コリン、ジパルミトイルホスファチジルコリン、ジミリ
ストイルホスファチジルコリン、ジステアロイルホスフ
ァチジルコリン、ジオレオイルホスファチジルコリン、
ジミリストイルホスファチジルグリセロール、ジパルミ
トイルホスファチジルグリセロール、ジステアロイルホ
スファチジルグリセロール等を挙げることができる。そ
れらの水素添加物も用いることができる。なかでも好ま
しい代表例として、精製卵黄レシチンを挙げることがで
きる。Examples of the phospholipid used in the present invention include phospholipids derived from egg yolk, soybean, cow, pig, and the like, and phospholipids obtained purely or semisynthetically. Examples include phosphatidylcholine, phosphatidylethanolamine, phosphatidylserine, phosphatidylinositol, phosphatidylglycerol and the like. Specifically, egg yolk phosphatidylcholine, soy phosphatidylcholine, dipalmitoyl phosphatidylcholine, dimyristoyl phosphatidylcholine, distearoyl phosphatidylcholine, dioleoyl phosphatidylcholine,
Examples include dimyristoyl phosphatidyl glycerol, dipalmitoyl phosphatidyl glycerol, distearoyl phosphatidyl glycerol, and the like. Those hydrogenated products can also be used. Among them, a preferable representative example is purified egg yolk lecithin.
本発明に使用される単純脂質としては、例えば、精製
大豆油、綿実油、菜種油、胡麻油、コーン油、落花生
油、サフラワー油、トリオレイン、トリリノレイン、ト
リパルミチン、トリステアリン、トリミリスチン、トリ
アラキドニン等の中性脂質を挙げることができる。ま
た、コレステリルオレート、コレステリルリノレート、
コレステリルミリステート、コレステリルパルミテー
ト、コレステリルアラキデート等のステロール誘導体も
挙げることができる。代表的な例としては、精製大豆油
を挙げることができる。The simple lipids used in the present invention include, for example, refined soybean oil, cottonseed oil, rapeseed oil, sesame oil, corn oil, peanut oil, safflower oil, triolein, trilinolein, tripalmitin, tristearin, trimyristine, triarakid Neutral lipids such as nin can be mentioned. Also, cholesteryl oleate, cholesteryl linoleate,
Sterol derivatives such as cholesteryl myristate, cholesteryl palmitate and cholesteryl arachidate can also be mentioned. A typical example is refined soybean oil.
また、脂肪乳剤粒子に表面荷電を賦与するためにステ
アリルアミン、ジセチルホスフェート、ホスファチジン
酸、ホスファチジルグリセロール等の荷電を有する脂質
を用いることができる。In addition, lipids having a charge such as stearylamine, dicetyl phosphate, phosphatidic acid, and phosphatidylglycerol can be used to impart a surface charge to the fat emulsion particles.
本発明のアムホテリシンＢ含有脂肪乳剤にあたって
は、従来から行われてきた種々の脂肪乳剤製造法をその
まま応用することができる。例えば、ホモミキサー等に
より粗乳化をおこなった後、マントン−ガウリン型等の
加圧噴射式ホモジナイザー、マイクロフルイダイザー、
超音波ホモジナイザー等により充分に微細化して形成せ
しめる方法が一般的である。この時、一般に知られる乳
化補助剤又は安定化剤として生理的に受け入れられるス
テロール類、脂肪酸又はそれらの誘導体等を加えること
もできる。これらの代表例としては、コレステロールや
オレイン酸等の脂肪酸等を挙げることができる。For the amphotericin B-containing fat emulsion of the present invention, various conventional methods for producing a fat emulsion can be applied as they are. For example, after performing coarse emulsification with a homomixer or the like, a pressure injection homogenizer such as a Manton-Gaurin type, a microfluidizer,
In general, a method of forming a sufficiently fine structure using an ultrasonic homogenizer or the like is used. At this time, physiologically acceptable sterols, fatty acids, derivatives thereof, and the like can also be added as commonly known emulsifying aids or stabilizers. Representative examples of these include fatty acids such as cholesterol and oleic acid.
本発明の製造方法を用いた脂肪乳剤の形状や粒子径
は、電子顕微鏡、光散乱方式の粒子径分析装置、メンブ
レンフィルターによる濾過等により容易に確認すること
ができる。The shape and particle size of the fat emulsion using the production method of the present invention can be easily confirmed by an electron microscope, a light scattering type particle size analyzer, filtration with a membrane filter, or the like.
本発明の脂肪乳剤の製剤の任意の成分として、一般に
注射剤に用いられる添加剤及び補助物質などを挙げるこ
とができる。例えば、酸化防止剤、防腐剤、安定化剤、
等張化剤、緩衝剤等を挙げることができる。これらの添
加剤、補助物質等の要求量及び最適量は、その目的に応
じて変化させることができる。The optional components of the fat emulsion formulation of the present invention include additives and auxiliary substances generally used for injections. For example, antioxidants, preservatives, stabilizers,
Examples include tonicity agents and buffers. The required and optimal amounts of these additives, auxiliary substances, etc. can be varied according to the purpose.
上記のようにして得られるアムホテリシンＢ含有脂肪
乳剤は、必要に応じて滅菌（例えば濾過滅菌や高圧蒸気
滅菌等）し、窒素ガスと共にアンプル中に封入すること
ができる。又、必要に応じて凍結乾燥することができ
る。凍結乾燥させたアムホテリシンＢ含有脂肪乳剤は、
常法通り適当な溶液の添加によって復元することができ
る。The amphotericin B-containing fat emulsion obtained as described above can be sterilized (eg, sterilized by filtration or high-pressure steam) if necessary, and enclosed in an ampoule together with nitrogen gas. Also, it can be freeze-dried as needed. The freeze-dried amphotericin B-containing fat emulsion comprises:
It can be reconstituted by adding a suitable solution as usual.
本発明により製造されたアムホテリシンＢ含有脂肪乳
剤よりなる製剤は、真菌感染症やウイルス感染症等の治
療又は予防を目的としてヒト又は種々の動物の静脈内に
投与するのが一般的である。この場合、脂肪乳剤粒子の
粒子径等の管理を十分に行う必要がある。一般に１μｍ
以上の粒子が混在すると、毛細血管を塞栓するなど種々
の毒性発現が知られているからである。The preparation comprising an amphotericin B-containing fat emulsion produced according to the present invention is generally administered intravenously to humans or various animals for the purpose of treating or preventing fungal infections and viral infections. In this case, it is necessary to sufficiently control the particle size of the fat emulsion particles. Generally 1 μm
This is because, when the above particles are mixed, various toxic expressions such as embolization of capillaries are known.
本発明の脂肪乳剤は、必要に応じて従来品同様、動脈
内、筋肉内、髄腔内及び皮下等に注射剤として投与する
こともできる。また、点眼剤、点鼻剤、経口投与剤、吸
入剤、膀胱注入剤、外用剤又は坐剤等としても製剤化し
使用することができる。この場合においても、医薬上許
容される基剤、賦形剤等の添加剤を任意の成分として挙
げることができる。The fat emulsion of the present invention can be administered as an injection into arteries, intramuscularly, intrathecally, subcutaneously, etc., as in the case of conventional products, if necessary. It can also be formulated and used as eye drops, nasal drops, oral administration agents, inhalants, bladder injections, external preparations or suppositories. Also in this case, additives such as pharmaceutically acceptable bases and excipients can be mentioned as optional components.
本発明により製造されたアムホテリシンＢ含有脂肪乳
剤よりなる製剤の投与量は、投与ルート、剤形、症状、
目的によって異なるが、脂肪乳剤として一般に、１〜10
00ml/回である。また、アムホテリシンＢとしての投与
量は、成人に対して一般に１〜200mg/回である。The dosage of the preparation comprising the amphotericin B-containing fat emulsion produced according to the present invention depends on the administration route, dosage form, symptoms,
Depending on the purpose, generally 1 to 10 fat emulsions are used.
It is 00 ml / time. The dose of amphotericin B is generally 1 to 200 mg / adult for an adult.
本発明の脂肪乳剤は、必要に応じて凍結乾燥すること
により貯蔵に適する凍結乾燥製剤とすることができる。
このような凍結乾燥製剤の製法もまた本発明の技術的範
囲に含まれる。The fat emulsion of the present invention can be lyophilized, if necessary, to give a lyophilized preparation suitable for storage.
The production method of such a freeze-dried preparation is also included in the technical scope of the present invention.
発明を実施するための最良の形態 以下に本発明に係る脂肪乳剤の製造方法に関する実施
例及び試験例を挙げて本発明をさらに詳しく説明する。BEST MODE FOR CARRYING OUT THE INVENTION Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples and Test Examples relating to a method for producing a fat emulsion according to the present invention.
実施例１ 氷冷下において、アムホテリシンＢの原末結晶500mg
に対し、エタノール250mlを加え超音波ホモジナイザー
を用いて分散する。これに2N塩酸1.5mlを加え超音波ホ
モジナイザーを用いて溶解する。これとは別に室温にお
いて精製卵黄レシチン500mgに対し、エタノール50mlを
加え、超音波ホモジナイザーを用いて分散する。これに
2N塩酸1.0mlを加え超音波ホモジナイザーを用いて溶解
する。これを氷冷したのち、上記のアムホテリシンＢ酸
性エタノール溶液と充分混合し2N水酸化ナトリウム約2.
5mlを加えてpH7.0に調製する。Example 1 500 mg of bulk powder of amphotericin B under ice-cooling
Then, 250 ml of ethanol is added and dispersed using an ultrasonic homogenizer. 1.5 ml of 2N hydrochloric acid is added thereto and dissolved using an ultrasonic homogenizer. Separately, 50 ml of ethanol is added to 500 mg of purified egg yolk lecithin at room temperature, and the mixture is dispersed using an ultrasonic homogenizer. to this
Add 1.0 ml of 2N hydrochloric acid and dissolve using an ultrasonic homogenizer. After this was cooled on ice, it was thoroughly mixed with the above-mentioned amphotericin B acidic ethanol solution and mixed with 2N sodium hydroxide (about 2.
Adjust the pH to 7.0 by adding 5 ml.
これを減圧下濃縮したのち、水50mlを加えてさらに減
圧下で濃縮する。共沈物を遠心で集めて水で繰り返し洗
浄した後凍結乾燥した。粉末Ｘ線回折測定の結果、得ら
れた乾燥物中でアムホテリシンＢは完全に非晶質化され
ていることが確認された。After concentrating this under reduced pressure, 50 ml of water is added and further concentrated under reduced pressure. The coprecipitate was collected by centrifugation, washed repeatedly with water and lyophilized. As a result of powder X-ray diffraction measurement, it was confirmed that amphotericin B was completely amorphized in the obtained dried product.
このアムホテリシンＢを含有する凍結乾燥物6mgに、
精製大豆油0.5gおよび精製卵黄レシチン0.497gを加えて
混練し均質化する。これに、等張リン酸緩衝液を8ml加
えホモジナイザーで撹拌し粗乳化液とする。等張リン酸
緩衝液を加えて10mlに定容した後、氷冷下、超音波ホモ
ジナイザー（ブランソン モデル185）で60分間乳化し
極めて微細なアムホテリシンＢを含有する脂肪乳剤を得
た。また常法に従い凍結乾燥し凍結乾燥製剤を得た。To 6 mg of the freeze-dried product containing amphotericin B,
0.5 g of refined soybean oil and 0.497 g of refined egg yolk lecithin are added, kneaded and homogenized. To this, 8 ml of an isotonic phosphate buffer solution is added and stirred with a homogenizer to obtain a coarse emulsion. After adding an isotonic phosphate buffer solution to a constant volume of 10 ml, the mixture was emulsified with an ultrasonic homogenizer (Branson model 185) for 60 minutes under ice cooling to obtain an extremely fine fat emulsion containing amphotericin B. It was freeze-dried according to a conventional method to obtain a freeze-dried preparation.
実施例２ 氷冷下において、アムホテリシンＢの原末結晶100mg
に対し、エタノール50mlを加えポリトロンホモジナイザ
ーを用いて分散する。これに2N塩酸0.3mlを加えポリト
ロンホモジナイザーを用いて溶解する。これとは別に室
温において精製卵黄レシチン500mgに対し、エタノール5
0mlを加え、ポリトロンホモジナイザーを用いて分散す
る。これに2N塩酸0.2mlを加え超音波ホモジナイザーを
用いて溶解する。これを氷冷したのち、上記のアムホテ
リシンＢ酸性エタノール溶液と充分混合し2N水酸化ナト
リウム約0.5mlを加えてpH7.0に調製する。Example 2 Under ice cooling, 100 mg of bulk powder of amphotericin B
Then, 50 ml of ethanol was added thereto and dispersed using a Polytron homogenizer. To this is added 0.3 ml of 2N hydrochloric acid and dissolved using a Polytron homogenizer. Separately, at room temperature, 500 mg of purified egg yolk lecithin
Add 0 ml and disperse using a Polytron homogenizer. 0.2 ml of 2N hydrochloric acid is added thereto and dissolved using an ultrasonic homogenizer. After ice-cooling, the mixture is sufficiently mixed with the above-mentioned amphotericin B acidic ethanol solution, and adjusted to pH 7.0 by adding about 0.5 ml of 2N sodium hydroxide.
これを減圧下濃縮した後、水50mlを加えてさらに減圧
下で濃縮する。共沈物を遠心で集めて水で繰り返し洗浄
した後マルトース5gを加えて凍結乾燥した。粉末Ｘ線回
折測定の結果、得られた乾燥物中でアムホテリシンＢは
完全に非晶質化されていることが確認された。After concentrating this under reduced pressure, 50 ml of water is added and further concentrated under reduced pressure. The coprecipitate was collected by centrifugation and washed repeatedly with water, and then 5 g of maltose was added and freeze-dried. As a result of powder X-ray diffraction measurement, it was confirmed that amphotericin B was completely amorphized in the obtained dried product.
アムホテリシンB30mgに対応する量の上記で得られた
凍結乾燥物に、精製大豆油0.6g及び精製卵黄レシチン0.
47gを加えて混練し、これに、0.24Mグリセリン水溶液8m
lを加えホモジナイザーで撹拌し粗乳化液とする。そし
て、0.24Mグリセリン水溶液を加えて10mlに定容した
後、氷冷下、超音波ホモジナイザー（ブランソン モデ
ル185）で60分間乳化し極めて微細なアムホテリシンＢ
を含有する脂肪乳剤を得た。また常法に従い凍結乾燥し
凍結乾燥品を得た。To the freeze-dried product obtained above in an amount corresponding to 30 mg of amphotericin B, 0.6 g of purified soybean oil and 0.4 g of purified egg yolk lecithin.
Add 47 g and knead, to this, 0.24 M glycerin aqueous solution 8 m
Add l and stir with a homogenizer to obtain a coarse emulsion. Then, after adding a 0.24 M glycerin aqueous solution to make the volume to 10 ml, the mixture is emulsified with an ultrasonic homogenizer (Branson model 185) for 60 minutes under ice-cooling, and the extremely fine amphotericin B is obtained.
Was obtained. It was freeze-dried according to a conventional method to obtain a freeze-dried product.
実施例３ 氷冷下において、アムホテリシンＢの原末結晶10gに
対し、エタノール20を加えポリトロンホモジナイザー
を用いて分散する。これにクエン酸18.5mgを加えポリト
ロンホモジナイザーを用いて溶解する。これとは別に室
温において精製卵黄レシチン30g及び精製大豆油3gをエ
タノール10にポリトロンホモジナイザーを用いて溶解
する。これを氷冷したのち、上記のアムホテリシンＢ酸
性エタノール溶液と充分混合し2N水酸化ナトリウムを加
えてpH7.0に調製する。Example 3 Under ice-cooling, ethanol 20 was added to 10 g of the raw powder of amphotericin B and dispersed using a polytron homogenizer. To this is added 18.5 mg of citric acid and dissolved using a Polytron homogenizer. Separately, 30 g of purified egg yolk lecithin and 3 g of purified soybean oil are dissolved in ethanol 10 at room temperature using a polytron homogenizer. After cooling the mixture with ice, it is mixed well with the above-mentioned amphotericin B acidic ethanol solution, and adjusted to pH 7.0 by adding 2N sodium hydroxide.
これを減圧下濃縮した後、共沈物を濾過で集めて水で
繰り返し洗浄した後自然乾燥した。粉末Ｘ線回折測定の
結果、得られた乾燥物中でアムホテリシンＢは完全に非
晶質化されていることが確認された。After concentrating this under reduced pressure, the coprecipitate was collected by filtration, washed repeatedly with water, and air-dried. As a result of powder X-ray diffraction measurement, it was confirmed that amphotericin B was completely amorphized in the obtained dried product.
アムホテリシンB2gに対応する量の上記で得られた乾
燥物に、精製大豆油20g及び精製卵黄レシチン30gを約60
℃で加温混合し、これに、0.24Mグリセリン水溶液を100
ml加えホモミキサーで撹拌し粗乳化液とする。粗乳化液
を水酸化ナトリウムで中和後、マイクロフルダイザーに
より高圧乳化し、きわめて微細なアムホテリシンＢを含
有する脂肪乳剤を得た。また常法に従い凍結乾燥し凍結
乾燥品を得た。To the dried product obtained above in an amount corresponding to 2 g of amphotericin B, 20 g of purified soybean oil and 30 g of purified egg yolk lecithin were added to about 60 g.
Mix at room temperature with 0.24 M glycerin aqueous solution.
Add ml and stir with a homomixer to obtain a coarse emulsion. After the crude emulsion was neutralized with sodium hydroxide, it was emulsified under high pressure using a microfluidizer to obtain a very fine fat emulsion containing amphotericin B. It was freeze-dried according to a conventional method to obtain a freeze-dried product.
実施例４ 実施例３で濾過後に得られた湿潤状態の共沈物10mg
に、コレステリルオレート0.5g及び精製卵黄レシチン0.
5gを加え混合する。これに、0.24Mグリセリン水溶液8ml
を加えホモジナイザーで撹拌し粗乳化液とする。粗乳化
液を水酸化ナトリウムで中和後、0.24Mグリセリン水溶
液を加えて10mlに定容した後、超音波ホモジナイザー
（ブランソン モデル185）で60分間乳化し極めて微細
なアムホテリシンＢを含有する脂肪乳剤を得た。また常
法に従い凍結乾燥し凍結乾燥品を得た。Example 4 10 mg of wet coprecipitate obtained after filtration in Example 3
In addition, cholesteryl oleate 0.5g and purified egg yolk lecithin 0.
Add 5 g and mix. 8 ml of 0.24 M glycerin aqueous solution
And stirred with a homogenizer to obtain a coarse emulsion. After neutralizing the crude emulsion with sodium hydroxide, adding a 0.24 M glycerin aqueous solution to make the volume constant to 10 ml, emulsifying with an ultrasonic homogenizer (Branson model 185) for 60 minutes to obtain a very fine fat emulsion containing amphotericin B. Obtained. It was freeze-dried according to a conventional method to obtain a freeze-dried product.
実施例５ 氷冷下において、アムホテリシンＢの原末結晶500mg
に対し、エタノール250mlを加え超音波ホモジナイザー
を用いて分散する。これに2N塩酸1.5mlを加え超音波ホ
モジナイザーを用いて溶解する。これとは別に室温にお
いてジパルミトイルホスファチジルグリセロール500mg
に対し、エタノール50mlを加え、超音波ホモジナイザー
を用いて分散する。これに2N塩酸1.0mlを加え超音波ホ
モジナイザーを用いて溶解する。これを氷冷した後、上
記のアムホテリシンＢ酸性エタノール溶液と充分混合し
2N水酸化ナトリウム約2.5mlを加えてpH7.0に調製する。Example 5 Under ice cooling, 500 mg of bulk powder of amphotericin B
Then, 250 ml of ethanol is added and dispersed using an ultrasonic homogenizer. 1.5 ml of 2N hydrochloric acid is added thereto and dissolved using an ultrasonic homogenizer. Separately at room temperature dipalmitoyl phosphatidyl glycerol 500mg
Then, 50 ml of ethanol is added thereto, and dispersed using an ultrasonic homogenizer. To this is added 1.0 ml of 2N hydrochloric acid and dissolved using an ultrasonic homogenizer. After ice-cooling, mix well with the above amphotericin B acidic ethanol solution.
The pH is adjusted to 7.0 by adding about 2.5 ml of 2N sodium hydroxide.
これを逆浸透膜を用いて濃縮した後、精製大豆油5g及
び精製卵黄レシチン4gを加えさらに混合練合する。これ
に、10％マルトース水溶液80mlを加えホモジナイザーで
撹拌し粗乳化液とする。そして、10％マルトース水溶液
を加えて100mlに定容した後、超音波ホモジナイザー
（ブランソン モデル185）で60分間乳化し極めて微細
なアムホテリシンＢを含有する脂肪乳剤を得た。また常
法に従い凍結乾燥し凍結乾燥品を得た。After concentrating this using a reverse osmosis membrane, 5 g of purified soybean oil and 4 g of purified egg yolk lecithin are added and mixed and kneaded. To this, 80 ml of a 10% maltose aqueous solution is added and stirred with a homogenizer to obtain a coarse emulsion. Then, after adding a 10% maltose aqueous solution to make the volume to 100 ml, the mixture was emulsified with an ultrasonic homogenizer (Branson model 185) for 60 minutes to obtain an extremely fine fat emulsion containing amphotericin B. It was freeze-dried according to a conventional method to obtain a freeze-dried product.
実施例６ 氷冷下において、アムホテリシンＢの原末結晶500mg
に対し、エタノール250mlを加え超音波ホモジナイザー
を用いて分散する。これに2N塩酸2.5mlを加え超音波ホ
モジナイザーを用いて溶解する。これに精製卵黄レシチ
ン500mgを加え、超音波ホモジナイザーを用いて充分に
溶解した後、2N水酸化ナトリウム約2.5mlを加えてpH7.0
に調製する。Example 6 500 mg of bulk powder of amphotericin B under ice-cooling
Then, 250 ml of ethanol is added and dispersed using an ultrasonic homogenizer. To this is added 2.5 ml of 2N hydrochloric acid and dissolved using an ultrasonic homogenizer. 500 mg of purified egg yolk lecithin was added to this, and after sufficiently dissolving using an ultrasonic homogenizer, about 2.5 ml of 2N sodium hydroxide was added to pH 7.0.
To be prepared.
これを減圧下濃縮した後、水50mlを加えてさらに減圧
下で濃縮する。共沈物を遠心で集めて水で繰り返し洗浄
した後凍結乾燥した。粉末Ｘ線回折測定の結果、得られ
た乾燥物中でアムホテリシンＢは完全に非晶質化されて
いることが確認された。After concentrating this under reduced pressure, 50 ml of water is added and further concentrated under reduced pressure. The coprecipitate was collected by centrifugation, washed repeatedly with water and lyophilized. As a result of powder X-ray diffraction measurement, it was confirmed that amphotericin B was completely amorphized in the obtained dried product.
得られた乾燥物（アムホテリシンB3mgに対応する量）
及び精製卵黄レシチン0.4gを乳鉢にとり混合練合した。
これに、精製大豆油0.5g及び９％ラクトース水溶液8ml
を加えホモジナイザーで撹拌し粗乳化液とする。そし
て、９％ラクトース水溶液を加えて10mlに定容した後、
超音波ホモジナイザー（ブランソン モデル185）で60
分間乳化し極めて微細なアムホテリシンＢを含有する脂
肪乳剤を得た。また常法に従い凍結乾燥し凍結乾燥品を
得た。Dried product obtained (amount corresponding to 3 mg of amphotericin B)
Then, 0.4 g of purified egg yolk lecithin was placed in a mortar and mixed and kneaded.
0.5g of refined soybean oil and 8ml of 9% lactose aqueous solution
And stirred with a homogenizer to obtain a coarse emulsion. After adding a 9% lactose aqueous solution to make the volume to 10 ml,
60 with an ultrasonic homogenizer (Branson model 185)
After emulsification for a minute, a fat emulsion containing extremely fine amphotericin B was obtained. It was freeze-dried according to a conventional method to obtain a freeze-dried product.
実施例７ 実施例２で得られた乾燥物170mg、精製大豆油0.5g及
び水素添加卵黄レシチン0.4g、コレステロール0.1gを乳
鉢にとり混合練合する。これに、９％ラクトース水溶液
8mlを加えホモジナイザーで撹拌し粗乳化液とする。そ
して、９％ラクトース水溶液を加えて10mlに定容した
後、超音波ホモジナイザー（ブランソン モデル185）
で60分間乳化し極めて微細なアムホテリシンＢを含有す
る脂肪乳剤を得た。また常法に従い凍結乾燥し凍結乾燥
品を得た。Example 7 170 mg of the dried product obtained in Example 2, 0.5 g of purified soybean oil, 0.4 g of hydrogenated egg yolk lecithin and 0.1 g of cholesterol are put in a mortar and mixed and kneaded. Add 9% lactose aqueous solution
Add 8 ml and stir with a homogenizer to obtain a coarse emulsion. After adding a 9% lactose aqueous solution to make the volume to 10 ml, an ultrasonic homogenizer (Branson model 185)
And emulsified for 60 minutes to obtain a very fine fat emulsion containing amphotericin B. It was freeze-dried according to a conventional method to obtain a freeze-dried product.
試験例1:粒子径の測定 実施例１〜７で得られたアムホテリシンＢを含有する
脂肪乳剤の脂肪乳剤粒子の粒子径について、レーザー光
による動的光散乱粒子径測定装置を用いその粒子径につ
いて評価したところ、下記の結果を得た。また、いずれ
も１μｍ以上の粒子を含まなかった。実施例番号 平均粒子径 実施例番号 平均粒子径 １ 47nm ５ 47nm ２ 70nm ６ 45nm ３ 23nm ７ 61nm ４ 52nm 実施例８ アムホテリシンＢの結晶3gに精製卵黄レシチン3gを加
えメノウ乳鉢を用い10分間充分に混合練合した。粉末Ｘ
線回折測定の結果、得られた混練物中でアムホテリシン
Ｂは完全に非晶質化されていることが確認された。この
アムホテリシンＢを含有する混練物6mgに、精製大豆油
0.5g及び精製卵黄レシチン0.497gを加えて、更に混練し
均質化する。これに、等張リン酸緩衝液を8ml加えホモ
ジナイザーで撹拌し粗乳化液とする。そして、等張リン
酸緩衝液を加えて10mlに定容した後、氷冷下、超音波ホ
モジナイザー（ブランソン モデル185）で60分間乳化
し極めて微細なアムホテリシンＢを含有する乳剤を得
た。また常法に従い凍結乾燥し凍結乾燥品を得た。Test Example 1: Measurement of particle diameter About the particle diameter of the fat emulsion particles of the fat emulsion containing amphotericin B obtained in Examples 1 to 7, about the particle diameter using a dynamic light scattering particle diameter measuring device by laser light Upon evaluation, the following results were obtained. In addition, none of the particles contained particles of 1 μm or more. Example No. Average particle diameter Example No. Average particle diameter 1 47 nm 5 47 nm 2 70 nm 6 45 nm 3 23 nm 7 61 nm 4 52 nm Example 8 3 g of purified egg yolk lecithin was added to 3 g of amphotericin B crystal, and mixed well using an agate mortar for 10 minutes. Kneaded. Powder X
As a result of the line diffraction measurement, it was confirmed that amphotericin B was completely amorphized in the obtained kneaded product. Add 6 mg of this kneaded mixture containing amphotericin B to refined soybean oil.
0.5 g and 0.497 g of purified egg yolk lecithin are added, further kneaded and homogenized. To this, 8 ml of an isotonic phosphate buffer solution is added and stirred with a homogenizer to obtain a coarse emulsion. Then, after adding an isotonic phosphate buffer solution to a constant volume of 10 ml, the mixture was emulsified with an ultrasonic homogenizer (Branson model 185) for 60 minutes under ice-cooling to obtain an extremely fine emulsion containing amphotericin B. It was freeze-dried according to a conventional method to obtain a freeze-dried product.
実施例９ アムホテリシンＢの結晶0.1gに精製卵黄レシチン0.1g
を加えメノウ乳鉢を用い予備的に混合練合する。これに
2N塩酸0.5mlを加え直ちに混合練合した。粉末Ｘ線回折
測定の結果、得られた混練物中でアムホテリシンＢは完
全に非晶質化されていることが確認された。アムホテリ
シンB30mgに対応する量の上記で得られた混練物に、精
製大豆油0.6g及び精製卵黄レシチン0.47gを加えて混練
し、これに、0.24Mグリセリン水溶液8mlを加えホモジナ
イザーで撹拌し粗乳化液とする。そして、2N水酸化ナト
リウム0.5mlを加えて中和した後、0.24Mグリセリン水溶
液を加えて10mlに定容した後、氷冷下、超音波ホモジナ
イザー（ブランソン モデル185）で60分間乳化し極め
て微細なアムホテリシンＢを含有する乳剤を得た。また
常法に従い凍結乾燥し凍結乾燥品を得た。Example 9 Purified egg yolk lecithin 0.1 g to amphotericin B crystal 0.1 g
Is added and preliminarily mixed and kneaded using an agate mortar. to this
0.5 ml of 2N hydrochloric acid was added and mixed and kneaded immediately. As a result of powder X-ray diffraction measurement, it was confirmed that amphotericin B was completely amorphized in the obtained kneaded product. To the kneaded product obtained above in an amount corresponding to 30 mg of amphotericin B, 0.6 g of purified soybean oil and 0.47 g of purified egg yolk lecithin were added and kneaded.To this, 8 ml of a 0.24 M glycerin aqueous solution was added, and the mixture was stirred with a homogenizer to obtain a coarse emulsion. And Then, 0.5 ml of 2N sodium hydroxide was added for neutralization, and then a 0.24 M glycerin aqueous solution was added to make the volume constant to 10 ml. An emulsion containing amphotericin B was obtained. It was freeze-dried according to a conventional method to obtain a freeze-dried product.
実施例10 アムホテリシンＢの結晶10gに精製卵黄レシチン15gを
加え乳鉢を用い予備的に混合練合する。これに6N塩酸20
mlを加え直ちにポリトロンホモジナイザーを用いて混合
練合した。粉末Ｘ線回折測定の結果、得られた混練物中
でアムホテリシンＢは完全に非晶質化されていることが
確認された。アムホテリシンB2gに対応する量の上記で
得られた混練物に、精製大豆油20g及び精製卵黄レシチ
ン30gを約60℃で加温混合し、これに、0.24Mグリセリン
水溶液を100ml加えホモミキサーで撹拌し粗乳化液とす
る。粗乳化液を水酸化ナトリウムで中和後、マイクロフ
ルイダイザーにより高圧乳化し、きわめて微細なアムホ
テリシンＢを含有する乳剤を得た。また常法に従い凍結
乾燥し凍結乾燥品を得た。Example 10 15 g of purified egg yolk lecithin was added to 10 g of amphotericin B crystals, and the mixture was preliminarily mixed and kneaded using a mortar. 6N hydrochloric acid 20
ml was added and mixed and kneaded immediately using a Polytron homogenizer. As a result of powder X-ray diffraction measurement, it was confirmed that amphotericin B was completely amorphized in the obtained kneaded product. To the kneaded product obtained above in an amount corresponding to 2 g of amphotericin B, 20 g of purified soybean oil and 30 g of purified egg yolk lecithin were heated and mixed at about 60 ° C., and 100 ml of a 0.24 M glycerin aqueous solution was added thereto, followed by stirring with a homomixer. Use as a coarse emulsion. After the crude emulsion was neutralized with sodium hydroxide, it was emulsified under high pressure with a microfluidizer to obtain an extremely fine emulsion containing amphotericin B. It was freeze-dried according to a conventional method to obtain a freeze-dried product.
実施例11 実施例10で得られた混練物4mgに、コレステリルオレ
ート0.5g及び精製卵黄レシチン0.5gを加え混合する。こ
れに0.24Mグリセリン水溶液8mlを加えホモジナイザーで
撹拌し粗乳化液とする。粗乳化液を水酸化ナトリウムで
中和後、0.24Mグリセリン水溶液を加えて10mlに定容し
た後、超音波ホモジナイザー（ブランソン モデル18
5）で60分間乳化し極めて微細なアムホテリシンＢを含
有する乳剤を得た。また常法に従い凍結乾燥し凍結乾燥
品を得た。Example 11 To 4 mg of the kneaded material obtained in Example 10, 0.5 g of cholesteryl oleate and 0.5 g of purified egg yolk lecithin are added and mixed. To this, 8 ml of a 0.24 M glycerin aqueous solution is added and stirred with a homogenizer to obtain a coarse emulsion. After neutralizing the coarse emulsion with sodium hydroxide, adding a 0.24 M glycerin aqueous solution to make the volume to 10 ml, and using an ultrasonic homogenizer (Branson model 18)
The mixture was emulsified for 60 minutes in 5) to obtain a very fine emulsion containing amphotericin B. It was freeze-dried according to a conventional method to obtain a freeze-dried product.
実施例12 アムホテリシンＢの結晶3mgに精製大豆油20mgを加え
メノウ乳鉢で約10分間充分に混合練合し均質化する。こ
れに精製大豆油0.5g及び精製卵黄レシチン0.4g、ジミリ
ストイルホスファチジルグリセロール0.1gを加えさらに
混合練合する。これに、10％マルトース水溶液8mlを加
えホモジナイザーで撹拌し粗乳化液とする。そして、10
％マルトース水溶液を加えて10mlに定容した後、超音波
ホモジナイザー（ブランソン モデル185）で60分間乳
化し極めて微細なアムホテリシンＢを含有する乳剤を得
た。また常法に従い凍結乾燥し凍結乾燥品を得た。Example 12 20 mg of purified soybean oil was added to 3 mg of amphotericin B crystals, and the mixture was thoroughly mixed and kneaded in an agate mortar for about 10 minutes to homogenize. 0.5 g of refined soybean oil, 0.4 g of refined egg yolk lecithin and 0.1 g of dimyristoyl phosphatidylglycerol are added thereto, and the mixture is further kneaded. To this, 8 ml of a 10% maltose aqueous solution is added and stirred with a homogenizer to obtain a coarse emulsion. And 10
% Maltose aqueous solution was added to adjust the volume to 10 ml, followed by emulsification with an ultrasonic homogenizer (Branson model 185) for 60 minutes to obtain an extremely fine emulsion containing amphotericin B. It was freeze-dried according to a conventional method to obtain a freeze-dried product.
実施例13 アムホテリシンB3mg、精製大豆油0.5g及び水素添加卵
黄レシチン0.4g、コレステロール0.1gを乳鉢にとり、約
20分間充分に混合練合した。粉末Ｘ線回折測定の結果、
得られた混練物中でアムホテリシンＢは完全に非晶質化
されていることが確認された。これに、９％ラクトース
水溶液8mlを加えホモジナイザーで撹拌し粗乳化液とす
る。そして、９％ラクトース水溶液を加えて100mlに定
容した後、超音波ホモジナイザー（ブランソン モデル
185）で60分間乳化し極めて微細なアムホテリシンＢを
含有する乳剤を得た。また常法に従い凍結乾燥し凍結乾
燥品を得た。Example 13 Amphotericin B (3 mg), purified soybean oil (0.5 g), hydrogenated egg yolk lecithin (0.4 g), and cholesterol (0.1 g) were placed in a mortar and placed in a mortar.
The mixture was thoroughly mixed and kneaded for 20 minutes. As a result of the powder X-ray diffraction measurement,
It was confirmed that amphotericin B was completely amorphized in the obtained kneaded material. To this, 8 ml of 9% lactose aqueous solution is added and stirred with a homogenizer to obtain a coarse emulsion. Then, after adding a 9% lactose aqueous solution to make the volume to 100 ml, an ultrasonic homogenizer (Branson model)
The emulsion was emulsified for 60 minutes to obtain an extremely fine emulsion containing amphotericin B. It was freeze-dried according to a conventional method to obtain a freeze-dried product.
実施例14 アムホテリシンＢの結晶300mgに精製大豆油20mgを加
え真空らいかい器で約10分間充分に混合練合し均質化す
る。これに精製大豆油50g及び精製卵黄レシチン40g、ジ
ミリストイルホスファチジルグリセロール1gを加えさら
に混合練合する。これに、10％マルトース水溶液800ml
を加えホモジナイザーで撹拌し粗乳化液とする。そし
て、10％マルトース水溶液を加えて1000mlに定容した
後、圧力式ホモジナイザー（日本精機製）で60分間乳化
し極めて微細なアムホテリシンＢを含有する乳剤を得
た。また常法に従い凍結乾燥し凍結乾燥品を得た。Example 14 20 mg of refined soybean oil was added to 300 mg of amphotericin B crystals, and the mixture was thoroughly mixed and kneaded for about 10 minutes with a vacuum mixer to homogenize. 50 g of refined soybean oil, 40 g of refined egg yolk lecithin and 1 g of dimyristoyl phosphatidylglycerol are added thereto, and the mixture is further kneaded. Add 800ml of 10% maltose aqueous solution
And stirred with a homogenizer to obtain a coarse emulsion. Then, after adding a 10% maltose aqueous solution to make the volume to 1000 ml, the mixture was emulsified with a pressure homogenizer (manufactured by Nippon Seiki) for 60 minutes to obtain an extremely fine emulsion containing amphotericin B. It was freeze-dried according to a conventional method to obtain a freeze-dried product.
実施例15 アムホテリシンＢの結晶3mgにジミリストイルホスフ
ァチジルグリセロール0.1gを加え、これに2N塩酸0.1ml
を加えてメノウ乳鉢で混合練合し均質化する。これに精
製大豆油0.5g及び精製卵黄レシチン0.4gを加えさらに混
合練合する。これに、10％マルトース水溶液8mlを加え
ホモジナイザーで撹拌し粗乳化液とする。そして、2N水
酸化ナトリウムで中和した後、10％マルトース水溶液を
加えて10mlに定容し、超音波ホモジナイザー（ブランソ
ン モデル185）で60分間乳化して極めて微細なアムホ
テリシンＢを含有する乳剤を得た。また常法に従い凍結
乾燥し凍結乾燥品を得た。Example 15 To 3 mg of crystals of amphotericin B, 0.1 g of dimyristoyl phosphatidylglycerol was added, and 0.1 ml of 2N hydrochloric acid was added thereto.
And kneading and homogenizing in an agate mortar. 0.5 g of refined soybean oil and 0.4 g of refined egg yolk lecithin are added thereto, and the mixture is further kneaded. To this, 8 ml of a 10% maltose aqueous solution is added and stirred with a homogenizer to obtain a coarse emulsion. After neutralization with 2N sodium hydroxide, a 10% maltose aqueous solution is added to make the volume to 10 ml, and emulsified with an ultrasonic homogenizer (Branson model 185) for 60 minutes to obtain an extremely fine emulsion containing amphotericin B. Was. It was freeze-dried according to a conventional method to obtain a freeze-dried product.
試験例2:粒子径の測定 実施例８〜15で得られたアムホテリシンＢを含有する
脂肪乳剤の乳剤粒子の粒子径について、レーザー光によ
る動的光散乱粒子径測定装置を用いその粒子径について
評価したところ、下記の結果を得た。また、いずれも１
μｍ以上の粒子を含まなかった。実施例番号 平均粒子径 実施例番号 平均粒子径 ８ 45nm 12 48nm ９ 93nm 13 31nm 10 20nm 14 52nm 11 55nm 15 48nmTest Example 2: Measurement of Particle Size The particle size of the emulsion particles of the fat emulsion containing amphotericin B obtained in Examples 8 to 15 was evaluated using a dynamic light scattering particle size measuring device using laser light. Then, the following results were obtained. In addition, all 1
No particles larger than μm were included. Example number Average particle size Example number Average particle size 8 45 nm 12 48 nm 9 93 nm 13 31 nm 10 20 nm 14 52 nm 11 55 nm 15 48 nm
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き 審査官 田村 聖子 (56)参考文献 特開 平３−169808（ＪＰ，Ａ) 特表 平２−502460（ＪＰ，Ａ) 欧州公開391369（ＥＰ，Ａ１) ────────────────────────────────────────────────── ─── Continuing from the front page Examiner Seiko Tamura (56) References JP-A-3-169808 (JP, A) JP-T2-502460 (JP, A) European publication 391369 (EP, A1)
Claims (5)
必須の表層成分とする乳剤粒子から構成され、かつアム
ホテリシンＢを含有する非リポソーム性脂肪乳剤を製造
する過程において、アムホテリシンＢを非晶質化して脂
質に分散させるに際して、アムホテリシンＢの結晶の存
在が確認できなくなるまでアムホテリシンＢとリン脂質
又はアムホテリシンＢとリン脂質と単純脂質とを物理的
に練合することを特徴とするアムホテリシンＢ含有非リ
ポソーム性脂肪乳剤の製造方法。1. A process for producing a nonliposomal fat emulsion comprising amphotericin B and comprising emulsion particles comprising a simple lipid as an essential core component and a phospholipid as an essential surface component. Wherein amphotericin B and phospholipid or amphotericin B, phospholipid and simple lipid are physically kneaded until the presence of crystals of amphotericin B cannot be confirmed when crystallizing and dispersing the lipid into lipid. A method for producing a non-liposome-containing fat emulsion comprising
の後アルカリで中和することを特徴とする請求項１記載
のアムホテリシンＢ含有非リポソーム性脂肪乳剤の製造
方法。2. The method for producing amphotericin B-containing non-liposomal fat emulsion according to claim 1, wherein an acid is added during physical kneading and neutralized with an alkali after kneading.
であり、リン脂質がホスファチジルコリン、ホスファチ
ジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスフ
ァチジルイノシトール又はホスファチジルグリセロール
である請求項１又は２記載のアムホテリシンＢ含有非リ
ポソーム性脂肪乳剤の製造方法。3. The amphotericin B-containing nonliposomal fat according to claim 1, wherein the simple lipid is a neutral lipid or a sterol derivative, and the phospholipid is phosphatidylcholine, phosphatidylethanolamine, phosphatidylserine, phosphatidylinositol or phosphatidylglycerol. Emulsion manufacturing method.
胡麻油、コーン油、落花生油、サフラワー油、トリオレ
イン、トリリノレイン、トリパルミチン、トリステアリ
ン、トリミリスチン、トリアラキドニン、コレステリル
オレート、コレステリルリノレート、コレステリルミリ
ステート、コレステリルパルミテート又はコレステリル
アラキデートであり、リン脂質が卵黄ホスファチジルコ
リン、大豆ホスファチジルコリン、ジパルミトイルホス
ファチジルコリン、ジミリストイルホスファチジルコリ
ン、ジステアロイルホスファチジルコリン、ジオレオイ
ルホスファチジルコリン、ジミリストイルホスファチジ
ルグリセロール、ジパルミトイルホスファチジルグリセ
ロール、ジステアロイルホスファチジルグリセロール若
しくは精製卵黄レシチン又はこれらの水素添加物である
請求項１又は２記載のアムホテリシンＢ含有非リポソー
ム性脂肪乳剤の製造方法。4. The simple lipid is refined soybean oil, cottonseed oil, rapeseed oil,
Sesame oil, corn oil, peanut oil, safflower oil, triolein, trilinolein, tripalmitin, tristearin, trimyristin, triarachidonin, cholesteryl oleate, cholesteryl linoleate, cholesteryl myristate, cholesteryl palmitate or cholesteryl arachidate Yes, the phospholipids are yolk phosphatidylcholine, soy phosphatidylcholine, dipalmitoyl phosphatidylcholine, dimyristoyl phosphatidylcholine, distearoyl phosphatidylcholine, dioleoyl phosphatidylcholine, dimyristoyl phosphatidylglycerol, dipalmitoylphosphatidylglycerol, distearoyl phosphatidylglycerol or distearoyl hydrogen phosphatidylhydroglycerol or distearoyl phosphatidylglycerol. 3. An additive as claimed in claim 1 or claim 2. Amphotericin B-containing manufacturing method of non-liposomal fat emulsion.
乳酸又はマレイン酸であり、アルカリが水酸化ナトリウ
ム、水酸化カリウム、アンモニア又はトリエチルアミン
である請求項２乃至４記載のアムホテリシンＢ含有非リ
ポソーム性脂肪乳剤の製造方法。5. The method according to claim 1, wherein the acid is hydrochloric acid, sulfuric acid, nitric acid, phosphoric acid, citric acid,
The method for producing a nonliposomal fat emulsion containing amphotericin B according to claims 2 to 4, wherein the emulsion is lactic acid or maleic acid, and the alkali is sodium hydroxide, potassium hydroxide, ammonia or triethylamine.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3517231A JP2653246B2 (en) | 1990-11-06 | 1991-11-05 | Production method of fat emulsion |
Applications Claiming Priority (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP30163990 | 1990-11-06 | ||
| JP30164090 | 1990-11-06 | ||
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| JP2-301640 | 1990-11-06 | ||
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Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2653246B2 true JP2653246B2 (en) | 1997-09-17 |
Family
ID=27338478
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP3517231A Expired - Lifetime JP2653246B2 (en) | 1990-11-06 | 1991-11-05 | Production method of fat emulsion |
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| JP (1) | JP2653246B2 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113425681A (en) * | 2020-03-19 | 2021-09-24 | 北京泰德制药股份有限公司 | Emulsion containing amphotericin B |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH02502460A (en) * | 1987-03-05 | 1990-08-09 | ザ リポソーム カンパニー，インコーポレイテッド | Low toxicity drugs - lipid-based |
| JPH03169808A (en) * | 1989-09-14 | 1991-07-23 | Medgenix Group Sa | Novel method for producing lipid particles |
| EP0391369B1 (en) * | 1989-04-05 | 1994-08-31 | Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem | Medicinal emulsions |
-
1991
- 1991-11-05 JP JP3517231A patent/JP2653246B2/en not_active Expired - Lifetime
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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| JPH02502460A (en) * | 1987-03-05 | 1990-08-09 | ザ リポソーム カンパニー，インコーポレイテッド | Low toxicity drugs - lipid-based |
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