JP2017035079A - Microtube, cell housing recovery tool set, and cell recovery auxiliary tool - Google Patents

Microtube, cell housing recovery tool set, and cell recovery auxiliary tool Download PDF

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恭典 岡本
Yasunori Okamoto
恭典 岡本
聖真 田中
Seishin Tanaka
聖真 田中
高橋 淳
Atsushi Takahashi
淳 高橋
大輔 土井
Daisuke Doi
大輔 土井
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Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a microtube that can preferably recover even a small amount of cells in the case of using a cell collection tool whose tip is formed in a needle-shape.SOLUTION: A microtube 1 comprises: a cylindrical container body 10 in which an opening 11 is formed on one end side and a closed bottom part 12 is formed on the other end side; and a lid 30 which is attached to a container body 10 and seals the opening 11, in which an inner surface of the bottom part 12 of the container body 10 is formed in a concave curved surface with the radius of 0.8 mm or less.SELECTED DRAWING: Figure 5

Description

本発明は、細胞等を収容するマイクロチューブ、細胞収容回収器具セット、及び細胞回収補助具に関する。より詳細には、先端が針状に形成された細胞採取器具を用いた場合に細胞を好適に回収できるマイクロチューブ、細胞収容回収器具セット、及び細胞回収補助具に関する。   The present invention relates to a microtube for storing cells and the like, a cell storage / recovery instrument set, and a cell recovery aid. More specifically, the present invention relates to a microtube, a cell storage / collection instrument set, and a cell collection aid that can suitably collect cells when a cell collection instrument having a needle-like tip is used.

従来、再生医療においては、体外で培養したヒトや動物の細胞を移植することで組織の再生を促進させるという研究が行われており、一部では実用化もされている。このような細胞は、少量(例えば、500μL〜1500μL)の液体を収容可能なマイクロチューブに収容された状態で保管及び搬送される(例えば、特許文献1参照)。   Conventionally, in regenerative medicine, research has been conducted to promote tissue regeneration by transplanting human or animal cells cultured outside the body, and some have been put into practical use. Such cells are stored and transported in a state of being accommodated in a microtube capable of accommodating a small amount (for example, 500 μL to 1500 μL) of liquid (for example, see Patent Document 1).

特開2003−130764号公報Japanese Patent Laid-Open No. 2003-130764

ここで、培養した細胞を移植する場合には、遠心分離によりマイクロチューブの下部に集めた細胞を、注射針のような先端が針状に形成された細胞採取器具を用いて回収した後、体内の所定の部位に細胞を注入する。このように、先端の細い針を用いた場合、従来のマイクロチューブでは、下部に集められた細胞を残さずに回収することが困難であった。
特に、脳外科の分野等においては、細胞を脳の深部に移植するために長針を用いて細胞の回収が用いられるが、マイクロチューブに収容された少量の細胞を、長針を用いて残さず回収することは極めて困難であった。
Here, when transplanting cultured cells, the cells collected at the bottom of the microtube by centrifugation are collected using a cell collection device with a needle-like tip such as an injection needle, Cells are injected into a predetermined site. As described above, when a needle with a thin tip is used, it is difficult to collect the cells collected in the lower part without leaving them in the conventional microtube.
In particular, in the field of neurosurgery and the like, cell recovery using a long needle is used to transplant cells into the deep part of the brain, but a small amount of cells contained in a microtube are recovered without using a long needle. It was extremely difficult.

従って、本発明は、先端が針状に形成された細胞採取器具を用いた場合に、少量の細胞であっても好適に回収できるマイクロチューブ、細胞収容回収器具セット、及び細胞回収補助具を提供することを目的とする。   Accordingly, the present invention provides a microtube, a cell storage / recovery instrument set, and a cell recovery aid that can suitably recover even a small amount of cells when a cell sampling instrument having a needle-like tip is used. The purpose is to do.

本発明は、一端側に開口部が形成されると共に他端側に閉鎖された底部が形成された筒状の容器本体と、該容器本体に取り付けられ前記開口部を密閉する蓋体と、を備えるマイクロチューブであって、前記容器本体の前記底部の内面は、半径0.8mm以下の凹曲面に形成されるマイクロチューブに関する。   The present invention includes a cylindrical container body having an opening formed at one end and a bottom closed at the other end, and a lid attached to the container body and sealing the opening. It is a microtube provided, Comprising: The inner surface of the said bottom part of the said container main body is related with the microtube formed in a concave curved surface with a radius of 0.8 mm or less.

また、前記容器本体の内面は、前記底部の内面に連続すると共に該容器本体の軸方向に対して所定角度傾斜したテーパ面部を含み、該テーパ面部の前記軸方向に対するテーパ角度は、10°以下であることが好ましい。   The inner surface of the container body includes a tapered surface portion that is continuous with the inner surface of the bottom portion and is inclined at a predetermined angle with respect to the axial direction of the container body, and the taper angle of the tapered surface portion with respect to the axial direction is 10 ° or less. It is preferable that

また、前記テーパ面部の前記軸方向に対するテーパ角度は、7.5°以下であることが好ましい。   Moreover, it is preferable that the taper angle with respect to the said axial direction of the said taper surface part is 7.5 degrees or less.

また、前記テーパ面部の前記軸方向に対するテーパ角度は、5°以上であることが好ましい。   Moreover, it is preferable that the taper angle with respect to the said axial direction of the said taper surface part is 5 degrees or more.

また、マイクロチューブは、前記容器本体の外面から該容器本体の軸方向における前記底部側に延出する脚部を更に備え、自立可能であることが好ましい。   Moreover, it is preferable that a microtube is further provided with the leg part extended from the outer surface of the said container main body to the said bottom part side in the axial direction of this container main body, and can be self-supporting.

また、前記容器本体の内面は、前記テーパ面部に連続すると共に該容器本体の軸方向に対して該テーパ面部のテーパ角度よりも大きな角度傾斜した第2テーパ面部を更に含むことが好ましい。   Moreover, it is preferable that the inner surface of the container main body further includes a second tapered surface portion that is continuous with the tapered surface portion and is inclined with respect to the axial direction of the container main body by an angle larger than the taper angle of the tapered surface portion.

また、前記容器本体の容量は、500μL〜1500μLであることが好ましい。   Moreover, it is preferable that the capacity | capacitance of the said container main body is 500 microliters-1500 microliters.

また、前記容器本体は、前記開口部側の外周面に形成された雄ねじ部を含み、前記蓋体は、内周面に前記雄ねじ部に螺合可能な雌ねじ部が形成されたキャップにより構成されることが好ましい。   Further, the container body includes a male screw portion formed on the outer peripheral surface on the opening side, and the lid body is configured by a cap having a female screw portion that can be screwed to the male screw portion on the inner peripheral surface. It is preferable.

また、本発明は、上述のいずれかに記載のマイクロチューブと、前記容器本体の上部に接続可能なチューブ接続部、及び該チューブ接続部が前記容器本体に接続された状態で該容器本体の軸方向に沿って延び前記開口部を介して前記容器本体の内部に連通する筒状部を有する細胞回収補助具と、を備える細胞収容回収器具セットに関する。   The present invention also provides a microtube according to any one of the above, a tube connecting portion connectable to an upper portion of the container main body, and a shaft of the container main body in a state where the tube connecting portion is connected to the container main body. The present invention relates to a cell collection / recovery instrument set including a cell collection auxiliary tool having a cylindrical portion that extends along a direction and communicates with the inside of the container body through the opening.

また、本発明は、一端側に開口部が形成されると共に他端側に閉鎖された底部が形成された筒状の容器本体と、該容器本体に取り付けられ前記開口部を密閉する蓋体と、を備えるマイクロチューブに取り付けられ前記容器本体に収容された細胞の回収を補助する細胞回収補助具であって、前記容器本体の上部に接続可能なチューブ接続部と、前記チューブ接続部が前記容器本体に接続された状態で該容器本体の軸方向に沿って延び前記開口部を介して前記容器本体の内部に連通する筒状部と、を備える細胞回収補助具に関する。   The present invention also provides a cylindrical container body having an opening formed at one end and a bottom closed at the other end, and a lid attached to the container body for sealing the opening. A cell collection aid that assists in the collection of cells contained in the container body, the tube connection part being connectable to the upper part of the container body, and the tube connection part being the container The present invention relates to a cell recovery aid comprising: a cylindrical portion that extends along the axial direction of the container main body and communicates with the inside of the container main body through the opening while being connected to the main body.

本発明によれば、先端が針状に形成された細胞採取器具を用いて少量の細胞を好適に回収できるマイクロチューブ、細胞収容回収器具セット、及び細胞回収補助具を提供できる。   ADVANTAGE OF THE INVENTION According to this invention, the microtube which can collect | recover a small amount of cells suitably using the cell collection instrument in which the front end was formed in the shape of a needle, a cell accommodation collection instrument set, and a cell collection auxiliary tool can be provided.

本発明の第1実施形態に係るマイクロチューブを示す斜視図である。It is a perspective view which shows the microtube which concerns on 1st Embodiment of this invention. 第1実施形態のマイクロチューブを示す分解斜視図である。It is a disassembled perspective view which shows the microtube of 1st Embodiment. 第1実施形態のマイクロチューブの縦断面を示す斜視図である。It is a perspective view which shows the longitudinal cross-section of the microtube of 1st Embodiment. 図1のA−A線断面を示す図である。It is a figure which shows the AA line cross section of FIG. 図4の部分拡大図である。It is the elements on larger scale of FIG. 本発明の細胞回収補助具の一実施形態を示す斜視図である。It is a perspective view which shows one Embodiment of the cell collection assistance tool of this invention. 細胞回収補助具をマイクロチューブの容器本体に接続した状態を示す斜視図である。It is a perspective view which shows the state which connected the cell collection auxiliary tool to the container main body of a microtube. 図7の縦断面図である。It is a longitudinal cross-sectional view of FIG. 細胞回収補助具を接続した容器本体から細胞を回収している状態を示す斜視図である。It is a perspective view which shows the state which is collect | recovering the cell from the container main body which connected the cell collection auxiliary tool. 本発明の第2実施形態に係るマイクロチューブを示す断面図であり、図4に対応する図である。It is sectional drawing which shows the microtube which concerns on 2nd Embodiment of this invention, and is a figure corresponding to FIG. 図10の部分拡大図である。It is the elements on larger scale of FIG. 細胞回収補助具及びマイクロチューブの変形例を示す斜視図であり、細胞回収補助具とマイクロチューブとを分離した状態を示す図である。It is a perspective view which shows the modification of a cell collection | recovery assistance tool and a microtube, and is a figure which shows the state which isolate | separated the cell collection | recovery assistance tool and the microtube. 細胞回収補助具及びマイクロチューブの変形例を示す斜視図であり、細胞回収補助具をマイクロチューブの容器本体に接続した状態を示す図である。It is a perspective view which shows the modification of a cell collection | recovery assistance tool and a microtube, and is a figure which shows the state which connected the cell collection assistance tool to the container main body of the microtube. 細胞回収補助具の他の実施形態1を示す斜視図である。It is a perspective view which shows other Embodiment 1 of a cell collection | recovery assistance tool. 細胞回収補助具の他の実施形態2を示す斜視図である。It is a perspective view which shows other Embodiment 2 of a cell collection | recovery assistance tool.

以下、本発明のマイクロチューブの好ましい各実施形態について、図面を参照しながら説明する。本発明のマイクロチューブは、再生医療において移植に用いられる細胞を含む液体を収容する場合に使用される。より具体的には、マイクロチューブは、最大容量が500μL〜1500μLに構成される。   Hereinafter, preferred embodiments of the microtube of the present invention will be described with reference to the drawings. The microtube of the present invention is used when containing a liquid containing cells used for transplantation in regenerative medicine. More specifically, the microtube has a maximum capacity of 500 μL to 1500 μL.

第1実施形態のマイクロチューブ1は、図1及び図2に示すように、容器本体10と、脚部20と、蓋体としてのキャップ30と、を備える。
容器本体10は、一端側(上端側)に開口部11が形成されると共に他端側に閉鎖された底部12が形成された筒状に構成される。この容器本体10の内面13は、図3及び図4に示すように、凹面部131と、テーパ面部132と、円筒面部133と、を含んで構成される。
The microtube 1 of 1st Embodiment is provided with the container main body 10, the leg part 20, and the cap 30 as a cover body as shown in FIG.1 and FIG.2.
The container body 10 is configured in a cylindrical shape in which an opening 11 is formed on one end side (upper end side) and a bottom 12 closed on the other end side is formed. As shown in FIGS. 3 and 4, the inner surface 13 of the container body 10 includes a concave surface portion 131, a tapered surface portion 132, and a cylindrical surface portion 133.

凹面部131は、容器本体10の底部12の内面を構成する。凹面部131は、図5に示すように、半径Rが0.8mm以下の凹曲面に形成される。本発明では、凹面部131を、半径Rが0.8mm以下の凹曲面に形成することで、マイクロチューブ1に収容された細胞を注射針のような先端が針状に形成された細胞採取器具を用いて効果的に回収(採取)できる。
凹面部131の半径Rは、先端が針状に形成された細胞採取器具による細胞の回収率を高める観点から、0.5mm以下であることが好ましく、0.25mm以下であることがより好ましい。また、凹面部131の半径Rは、細胞採取器具の先端が凹面部131に密着することで細胞の回収を阻害することを防ぐ観点から、0.1mm以上であることが好ましい。
第1実施形態では、凹面部131の半径Rは、0.25mmに設定されている。
The concave portion 131 constitutes the inner surface of the bottom portion 12 of the container body 10. As shown in FIG. 5, the concave portion 131 is formed in a concave curved surface having a radius R of 0.8 mm or less. In the present invention, the cell collection device in which the tip of the cell such as an injection needle is formed into a needle shape by forming the concave surface portion 131 into a concave curved surface having a radius R of 0.8 mm or less. Can be effectively recovered (collected).
The radius R of the concave surface portion 131 is preferably 0.5 mm or less, and more preferably 0.25 mm or less, from the viewpoint of increasing the cell recovery rate by the cell collection device having the tip formed in a needle shape. In addition, the radius R of the concave surface portion 131 is preferably 0.1 mm or more from the viewpoint of preventing the collection of cells by the tip of the cell collection device being in close contact with the concave surface portion 131.
In the first embodiment, the radius R of the concave surface portion 131 is set to 0.25 mm.

テーパ面部132は、凹面部131(底部12の内面)に連続すると共に容器本体10の軸方向LDに対して所定角度傾斜している。言い換えれば、テーパ面部132は、凹面部131の上部に配置された円錐面状に形成される。テーパ面部132の軸方向LDに対するテーパ角度θは、マイクロチューブ1の底部12側に集められた場合における細胞層の高さ(厚さ)を好適に確保し、先端が針状に形成された細胞採取器具による細胞の回収を容易にする観点から、10°以下であることが好ましく、7.5°以下であることがより好ましい。また、テーパ面部132の軸方向LDに対するテーパ角度θは、細胞採取器具の先端がテーパ面部132に密着することで細胞の回収を阻害することを防ぐ観点から、5°以上であることが好ましい。
第1実施形態では、テーパ面部132の軸方向LDに対するテーパ角度θは、7°に設定されている。
The tapered surface portion 132 is continuous with the concave surface portion 131 (the inner surface of the bottom portion 12) and is inclined at a predetermined angle with respect to the axial direction LD of the container body 10. In other words, the tapered surface portion 132 is formed in the shape of a conical surface disposed on the upper portion of the concave surface portion 131. The taper angle θ of the taper surface portion 132 with respect to the axial direction LD suitably secures the height (thickness) of the cell layer when gathered on the bottom 12 side of the microtube 1 and the tip has a needle-like shape. From the viewpoint of facilitating the collection of cells by the collection tool, the angle is preferably 10 ° or less, and more preferably 7.5 ° or less. In addition, the taper angle θ of the tapered surface portion 132 with respect to the axial direction LD is preferably 5 ° or more from the viewpoint of preventing the collection of the cells from being blocked by the tip of the cell collection device being in close contact with the tapered surface portion 132.
In the first embodiment, the taper angle θ of the taper surface portion 132 with respect to the axial direction LD is set to 7 °.

円筒面部133は、容器本体10における一端側に配置される。円筒面部133は、容器本体10の内径がテーパ面部132の上端部(開口部11側の端部)における容器本体10の内径と同一の円周面に形成される。   The cylindrical surface portion 133 is disposed on one end side of the container body 10. The cylindrical surface portion 133 is formed on the same circumferential surface as the inner diameter of the container main body 10 at the upper end portion (the end portion on the opening 11 side) of the tapered surface portion 132.

容器本体10の外面には、雄ねじ部14及び容器リブ部15が形成される。
雄ねじ部14は、容器本体10の開口部11側の外面に形成される。容器リブ部15は、容器本体10における雄ねじ部14よりも底部12側に配置される。容器リブ部15は、容器本体10の外面の一部が容器本体10の全周に亘って突出して形成される。
A male screw portion 14 and a container rib portion 15 are formed on the outer surface of the container body 10.
The male screw portion 14 is formed on the outer surface of the container body 10 on the opening 11 side. The container rib portion 15 is disposed closer to the bottom portion 12 than the male screw portion 14 in the container main body 10. The container rib portion 15 is formed such that a part of the outer surface of the container body 10 protrudes over the entire circumference of the container body 10.

脚部20は、容器本体10の外面から容器本体10の軸方向LDにおける底部12側に延出する。第1実施形態では、脚部20は、容器本体10の外周面から底部12側に向かって円筒状に延びて形成される。脚部20の先端部の位置は、図4に示すように、容器本体10の底部12よりも先端側に位置する。また、脚部20の先端面は、マイクロチューブ1の軸方向LDに直交する平面状に形成される。これにより、マイクロチューブ1は、底部12を下方に向けた状態で脚部20により自立可能に構成される。   The leg portion 20 extends from the outer surface of the container body 10 to the bottom 12 side in the axial direction LD of the container body 10. In the first embodiment, the leg portion 20 is formed to extend in a cylindrical shape from the outer peripheral surface of the container body 10 toward the bottom portion 12 side. As shown in FIG. 4, the position of the distal end portion of the leg portion 20 is located on the distal end side of the bottom portion 12 of the container body 10. Further, the distal end surface of the leg portion 20 is formed in a planar shape orthogonal to the axial direction LD of the microtube 1. Thereby, the microtube 1 is comprised so that it can stand by the leg part 20 in the state which orient | assigned the bottom part 12 below.

第1実施形態では、容器本体10及び脚部20は、合成樹脂部材を一体成形して形成される。容器本体10及び脚部20は、収容された細胞を視認可能とする観点から透明性を有する材料から構成することが好ましく、また、比較的剛性の大きい材料から構成されることが好ましい。容器本体10を構成する材料としては、具体的には、ポリカーボネート、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリエステル、ポリメチルペンテン、メタクリル、ABS樹脂(アクリロニトリル・ブタジエン・スチレン共重合体)、PET樹脂(ポリエチレンテレフタレート)、ポリ塩化ビニル等の合成樹脂が挙げられる。
また、容器本体10の開口部11における直径(内径)は、好ましくは6mm〜10mmであり、容器本体10の高さは、好ましくは30mm〜70mmである。
In the first embodiment, the container body 10 and the legs 20 are formed by integrally molding a synthetic resin member. The container body 10 and the legs 20 are preferably made of a material having transparency from the viewpoint of enabling the contained cells to be visually recognized, and are preferably made of a material having relatively high rigidity. Specifically, the material constituting the container body 10 is polycarbonate, polyethylene, polypropylene, polyester, polymethylpentene, methacryl, ABS resin (acrylonitrile / butadiene / styrene copolymer), PET resin (polyethylene terephthalate), poly Examples thereof include synthetic resins such as vinyl chloride.
Moreover, the diameter (inner diameter) in the opening part 11 of the container main body 10 is preferably 6 mm to 10 mm, and the height of the container main body 10 is preferably 30 mm to 70 mm.

キャップ30は、容器本体10に取り付けられ開口部11を密閉する。本実施形態では、キャップ30は、容器本体10とは別体に構成される。キャップ30は、内周面に、容器本体10の雄ねじ部14に螺合可能な雌ねじ部31が形成された一端側が閉鎖された円筒状に構成される。
キャップ30は、容器本体10と同様の材料により構成できる。
The cap 30 is attached to the container body 10 and seals the opening 11. In the present embodiment, the cap 30 is configured separately from the container body 10. The cap 30 is formed in a cylindrical shape whose one end side is closed on which an internal thread portion 31 that can be screwed into the external thread portion 14 of the container body 10 is formed on the inner peripheral surface.
The cap 30 can be made of the same material as the container body 10.

以上説明した第1実施形態のマイクロチューブ1は、再生医療において、培養した細胞を生体に移植する場合に好適に用いられる。具体的には、培養した細胞を生体に移植する場合、移植に用いられる細胞は、他の液性成分(培養液等)と共にマイクロチューブ1に収容され、キャップ30を容器本体10に取り付けた状態で遠心分離器にかけられる。これにより、細胞は、マイクロチューブ1(容器本体10)の底部12(凹面部131近傍)に集められ、液性成分と分離される。   The microtube 1 of the first embodiment described above is suitably used when transplanting cultured cells into a living body in regenerative medicine. Specifically, when transplanting cultured cells into a living body, the cells used for transplantation are housed in the microtube 1 together with other liquid components (such as a culture solution), and the cap 30 is attached to the container body 10. In a centrifuge. As a result, the cells are collected at the bottom 12 (near the concave portion 131) of the microtube 1 (container body 10) and separated from the liquid component.

次いで、キャップ30を容器本体10から取り外し、底部12に集められた細胞を、細胞採取器具を用いて回収する。細胞の移植を行う場合には、回収した細胞を生体内の所定の部位に注入するため、注射針のような先端が針状に形成された細胞採取器具が用いられる。   Next, the cap 30 is removed from the container body 10 and the cells collected on the bottom 12 are collected using a cell collection device. When transplanting cells, in order to inject the collected cells into a predetermined site in the living body, a cell collection instrument having a needle-like tip such as an injection needle is used.

ここで、従来のような底部の内面が平面状に形成されたマイクロチューブや底部の内面が凹曲面で形成されているものの凹曲面の半径Rが0.8mmを超えるような曲率の小さいマイクロチューブの場合には、マイクロピペットのような先端が針状に形成されていない細胞採取器具を用いた場合には、細胞をそれなりに好適に回収できる。しかしながら、先端が針状に形成された細胞採取器具を用いた場合には、このような従来のマイクロチューブでは、細胞を残さず回収することは困難であった。
そこで、第1実施形態では、容器本体10の底部12の内面である凹面部131を、半径0.8mm以下の凹曲面に形成した。これにより、マイクロチューブ1に収容された細胞を、注射針のような先端が針状に形成された細胞採取器具を用いて効果的に回収できる。
Here, a conventional microtube having a flat bottom inner surface and a microtube having a small curvature such that the radius R of the concave curved surface exceeds 0.8 mm although the inner surface of the bottom is formed by a concave curved surface. In this case, when a cell collection device such as a micropipette whose tip is not formed in a needle shape is used, the cells can be suitably recovered. However, when a cell collection device having a needle-like tip is used, it is difficult to collect all the cells with such a conventional microtube.
Therefore, in the first embodiment, the concave surface portion 131 that is the inner surface of the bottom portion 12 of the container body 10 is formed into a concave curved surface having a radius of 0.8 mm or less. Thereby, the cells accommodated in the microtube 1 can be effectively recovered by using a cell collection instrument having a needle-like tip such as an injection needle.

また、容器本体10の内面13を、凹面部131に連続すると共に容器本体10の軸方向LDに対して所定角度傾斜したテーパ面部132を含んで構成し、このテーパ面部132の軸方向LDに対するテーパ角度を10°以下に構成した。これにより、マイクロチューブ1の底部12側に集められた場合における細胞の層の厚さを好適に確保できるので、先端が針状に形成された細胞採取器具による細胞の回収をより容易に行える。   Further, the inner surface 13 of the container main body 10 is configured to include a tapered surface portion 132 that is continuous with the concave surface portion 131 and inclined at a predetermined angle with respect to the axial direction LD of the container main body 10, and the tapered surface portion 132 is tapered relative to the axial direction LD. The angle was configured to be 10 ° or less. Thereby, since the thickness of the cell layer when collected on the bottom 12 side of the microtube 1 can be suitably ensured, the cells can be more easily collected by the cell collecting device having the tip formed in a needle shape.

また、マイクロチューブ1を、脚部20を含んで構成し、自立可能とした。これにより、マイクロチューブ1の取扱い性を向上させられる。   Moreover, the microtube 1 was comprised including the leg part 20, and it was made self-supporting. Thereby, the handleability of the microtube 1 can be improved.

また、容量500μL〜1500μLのマイクロチューブ1に第1実施形態の凹面部131及び/又はテーパ面部132の構成を適用することで、先端が針状に形成された細胞採取器具による細胞の回収率を好適に高められる。   In addition, by applying the configuration of the concave surface portion 131 and / or the tapered surface portion 132 of the first embodiment to the microtube 1 having a capacity of 500 μL to 1500 μL, the cell recovery rate by the cell collection device having the tip formed in a needle shape can be increased. It is preferably increased.

次に、本発明のマイクロチューブ1に収容した細胞の回収を補助する細胞回収補助具50及びマイクロチューブ1及び細胞回収補助具50を備える細胞収容回収器具セット100につき、図6〜図9を参照しながら説明する。
細胞回収補助具50は、図6に示すように、両端が開口した円筒状に形成される、チューブ接続部51と、筒状部52と、を備える。
Next, referring to FIGS. 6 to 9, the cell collection assisting tool 50 for assisting the collection of the cells accommodated in the microtube 1 of the present invention and the cell accommodation / collection instrument set 100 including the microtube 1 and the cell collection assisting tool 50 will be described. While explaining.
As shown in FIG. 6, the cell collection aid 50 includes a tube connection part 51 and a cylindrical part 52 that are formed in a cylindrical shape having both ends opened.

チューブ接続部51は、細胞回収補助具50の一端部に配置され、マイクロチューブ1の容器本体10の上端部に接続可能に構成される。本実施形態では、チューブ接続部51は、容器本体10の雄ねじ部14に螺合可能な雌ねじ部511が内周面に形成された筒状に構成される。   The tube connection part 51 is disposed at one end of the cell collection aid 50 and is configured to be connectable to the upper end of the container body 10 of the microtube 1. In this embodiment, the tube connection part 51 is comprised by the cylinder shape by which the internal thread part 511 which can be screwed together with the external thread part 14 of the container main body 10 was formed in the internal peripheral surface.

筒状部52は、チューブ接続部51と一体的に形成される。筒状部52は、チューブ接続部51が容器本体10に接続された状態で容器本体10の軸方向LDに沿って延びる。そして、この状態で、筒状部52は、開口部11を介して容器本体10の内部に連通する(図8参照)。   The cylindrical part 52 is formed integrally with the tube connecting part 51. The cylindrical portion 52 extends along the axial direction LD of the container main body 10 in a state where the tube connecting portion 51 is connected to the container main body 10. And in this state, the cylindrical part 52 is connected to the inside of the container main body 10 through the opening part 11 (refer FIG. 8).

筒状部52の長さは、細胞の回収に用いられる細胞採取器具の針の長さに応じて適宜設定できるが、脳外科の分野等において細胞を脳の深部に移植するために用いられる長針により細胞を好適に採取する観点から、10cm〜30cmであることが好ましい。筒状部52の内径は、長針を好適にマイクロチューブ1の内部に挿入する観点から、容器本体10の開口部11の内径と同じ径に構成されることが好ましい。
以上の細胞回収補助具50は、容器本体10を構成する材料と同様の硬質の合成樹脂により構成される。
The length of the cylindrical portion 52 can be set as appropriate according to the length of the needle of the cell collection instrument used for cell collection. However, the length of the cylindrical portion 52 can be increased by using a long needle used for transplanting cells deep in the brain. From the viewpoint of suitably collecting cells, it is preferably 10 cm to 30 cm. The inner diameter of the cylindrical portion 52 is preferably configured to be the same as the inner diameter of the opening 11 of the container body 10 from the viewpoint of suitably inserting the long needle into the microtube 1.
The cell collection aid 50 described above is made of a hard synthetic resin similar to the material constituting the container body 10.

次に、細胞回収補助具50の使用方法について説明する。
細胞回収補助具50は、遠心分離により容器本体10の底部12に集められた細胞を、回収(採取)する場合に用いられる。細胞を回収する場合には、まず、図7及び8に示すように、キャップ30を取り外した状態の容器本体10の雄ねじ部14にチューブ接続部51の雌ねじ部511を螺合させて細胞回収補助具50を容器本体10に接続する。
次いで、図9に示すように、長針210及びシリンジ220を有する細胞採取器具200の長針を、筒状部52に差し込む。これにより、長針は、筒状部52に案内されることで容器本体10の開口部11に容易に挿入される。
次いで、長針の先端部を容器本体10の底部12(凹面部131)に位置させ、細胞を回収する。
Next, a method for using the cell collection aid 50 will be described.
The cell collection aid 50 is used when collecting (collecting) the cells collected on the bottom 12 of the container body 10 by centrifugation. When collecting the cells, first, as shown in FIGS. 7 and 8, the female threaded portion 511 of the tube connecting portion 51 is screwed into the male threaded portion 14 of the container body 10 with the cap 30 removed. The tool 50 is connected to the container body 10.
Next, as shown in FIG. 9, the long needle of the cell collection device 200 having the long needle 210 and the syringe 220 is inserted into the cylindrical portion 52. Thereby, the long needle is easily inserted into the opening 11 of the container body 10 by being guided by the cylindrical portion 52.
Next, the tip of the long needle is positioned on the bottom 12 (concave surface 131) of the container body 10 to collect the cells.

このように、細胞回収補助具50を用いることで、特に、長針を有する細胞採取器具を用いて細胞を回収する場合に、長針を容易にマイクロチューブ1に挿入できるので、マイクロチューブ1に収容した細胞の移植にかかる負担を軽減できる。   In this way, by using the cell collection aid 50, especially when collecting cells using a cell collection device having a long needle, the long needle can be easily inserted into the microtube 1, so that it is accommodated in the microtube 1. The burden on cell transplantation can be reduced.

次に、第2実施形態のマイクロチューブ1Aにつき、図10及び図11を参照しながら説明する。
第2実施形態のマイクロチューブ1Aは、テーパ面部132A(内面13A)の構成において、第1実施形態と異なる。第2実施形態については、上述した第1実施形態と異なる点を主に説明し、同様の点は同一の符号を付して説明を省略する。特に説明しない点は、第1実施形態についての説明が適宜適用される。
Next, the microtube 1A of the second embodiment will be described with reference to FIGS.
The microtube 1A of the second embodiment differs from the first embodiment in the configuration of the tapered surface portion 132A (inner surface 13A). About 2nd Embodiment, a different point from 1st Embodiment mentioned above is mainly demonstrated, the same point attaches | subjects the same code | symbol and abbreviate | omits description. For the points that are not particularly described, the description of the first embodiment is applied as appropriate.

第2実施形態のマイクロチューブ1Aでは、テーパ面部132Aは、第1テーパ面部135と、第2テーパ面部136と、を含んで構成される。第1テーパ面部135は、第1実施形態におけるテーパ面部132に対応する。
第2テーパ面部136は、第1テーパ面部135の開口部11側に連続すると共に容器本体10Aの軸方向LDに対して第1テーパ面部135のテーパ角度θよりも大きな角度θ2傾斜している。
In the microtube 1A of the second embodiment, the tapered surface portion 132A includes a first tapered surface portion 135 and a second tapered surface portion 136. The first tapered surface portion 135 corresponds to the tapered surface portion 132 in the first embodiment.
The second taper surface portion 136 is continuous with the opening 11 side of the first taper surface portion 135 and is inclined at an angle θ2 larger than the taper angle θ of the first taper surface portion 135 with respect to the axial direction LD of the container body 10A.

第2実施形態では、第1テーパ面部135の軸方向LDに対するテーパ角度θは、5°に設定され、第2テーパ面部136の軸方向LDに対するテーパ角度θ2は、10°に設定されている(図10及び図11参照)。
また、第2実施形態では、脚部20は、容器本体10の第2テーパ面部136が位置している部分の外周面から延出して形成されている。
In 2nd Embodiment, taper angle (theta) with respect to axial direction LD of the 1st taper surface part 135 is set to 5 degrees, and taper angle (theta) 2 with respect to axial direction LD of the 2nd taper surface part 136 is set to 10 degrees ( (See FIGS. 10 and 11).
Moreover, in 2nd Embodiment, the leg part 20 is extended and formed from the outer peripheral surface of the part in which the 2nd taper surface part 136 of the container main body 10 is located.

第2実施形態のマイクロチューブ1Aによれば、第1実施形態と同様の効果を奏する他、以下のような効果も奏する。
容器本体10Aを、第1テーパ面部135と、この第1テーパ面部135のテーパ角度θよりも大きな角度θ2傾斜した第2テーパ面部136と、を含んで構成した。これにより、第1テーパ面部135のテーパ角度θを小さくした場合であっても、第2テーパ面部136のテーパ角度θ2を調整することで、容器本体10に収容できる液体の量を増加させられる。
According to the microtube 1A of the second embodiment, in addition to the same effects as those of the first embodiment, the following effects are also obtained.
The container body 10A includes a first tapered surface portion 135 and a second tapered surface portion 136 that is inclined at an angle θ2 larger than the taper angle θ of the first tapered surface portion 135. Thereby, even if it is a case where taper angle (theta) of the 1st taper surface part 135 is made small, the quantity of the liquid which can be accommodated in the container main body 10 can be increased by adjusting taper angle (theta) 2 of the 2nd taper surface part 136. FIG.

また、脚部20を、容器本体10の第2テーパ面部136が位置している部分の外周面から延出させた。これにより、脚部20の延出方向と第2テーパ面部136の延びる方向との角度が小さくなりすぎることを防げる。よって、容器本体10及び脚部20を合成樹脂部材により一体成形する場合に、テーパ面部132Aと脚部20との境界部分において成形不良を起こりにくくできる。テーパ面部132Aと脚部20との境界部分における成形不良を効果的に抑制する観点から、第2テーパ面部136の軸方向LDに対するテーパ角度θ2は、10°〜30°であることが好ましい。   Moreover, the leg part 20 was extended from the outer peripheral surface of the part in which the 2nd taper surface part 136 of the container main body 10 is located. Thereby, it can prevent that the angle of the extension direction of the leg part 20 and the direction where the 2nd taper surface part 136 is extended becomes small too much. Therefore, when the container main body 10 and the leg part 20 are integrally formed of a synthetic resin member, it is possible to prevent molding defects from occurring at the boundary portion between the tapered surface part 132A and the leg part 20. From the viewpoint of effectively suppressing molding defects at the boundary portion between the tapered surface portion 132A and the leg portion 20, the taper angle θ2 with respect to the axial direction LD of the second tapered surface portion 136 is preferably 10 ° to 30 °.

以上、本発明をその好ましい実施形態に基づき説明したが、本発明は上記実施形態には制限されず、本発明の趣旨を逸脱しない限り適宜変更が可能である。
例えば、第1実施形態及び第2実施形態では、容器本体10,10Aとキャップ30とを別体で構成したが、これに限らない。即ち、例えば、図12に示すように、マイクロチューブ1Bを、容器本体10Bとキャップ30Bとを帯状の連結部材40Bにより連結して一体的に構成してもよい。この場合、図13に示すように、細胞回収補助具50Bを、チューブ接続部51Bに形成され、連結部材40Bが進入可能なスリット53Bを含んで構成することが好ましい。これにより、連結部材40Bを有するマイクロチューブ1Bにも対応可能な細胞回収補助具50B、及び細胞収容回収器具セット100Bを実現できる。
尚、この場合、マイクロチューブ1Bと細胞回収補助具50Bとは、両者を液密に嵌合させることで接続される。
As mentioned above, although this invention was demonstrated based on the preferable embodiment, this invention is not restrict | limited to the said embodiment, As long as it does not deviate from the meaning of this invention, it can change suitably.
For example, in the first embodiment and the second embodiment, the container main bodies 10 and 10A and the cap 30 are configured separately, but the present invention is not limited thereto. That is, for example, as shown in FIG. 12, the microtube 1B may be configured integrally by connecting the container body 10B and the cap 30B with a band-shaped connecting member 40B. In this case, as shown in FIG. 13, it is preferable that the cell collection assisting tool 50B includes a slit 53B that is formed in the tube connecting portion 51B and into which the connecting member 40B can enter. Thereby, the cell collection | recovery auxiliary tool 50B and the cell accommodation collection | recovery instrument set 100B which can respond also to the microtube 1B which has the connection member 40B are realizable.
In this case, the microtube 1B and the cell collection aid 50B are connected by fitting them both in a liquid-tight manner.

また、上記実施形態では、細胞回収補助具50の筒状部52におけるチューブ接続部51とは反対側の端面(長針210が差し込まれる側の端面)を、筒状部52の軸方向に垂直な面により構成したが、これに限らない。即ち、図14に示すように、長針が差し込まれる側の端面の一部が軸方向に切り欠かれた切り欠き部54Cを含んで細胞回収補助具50Cを構成してもよい。また、図15に示すように、長針が差し込まれる側の端面を、筒状部52Dの軸方向に対して所定角度傾斜した傾斜面に形成して細胞回収補助具50Dを構成してもよい。これにより、長針を細胞回収補助具により差し込みやすくできる。
尚、細胞回収補助具50Cを、切り欠き部54Cを含んで構成する場合、切り欠き部54Cの幅は、図14に示す幅に限られない。例えば、切り欠き部54Cを、長針が通過できる程度の幅のいわゆるスリット状に形成してもよい。
In the above-described embodiment, the end surface (the end surface on the side into which the long needle 210 is inserted) of the tubular portion 52 of the cell collection assisting tool 50 opposite to the tube connecting portion 51 is perpendicular to the axial direction of the tubular portion 52. Although configured with a surface, the present invention is not limited to this. That is, as shown in FIG. 14, the cell collection assisting tool 50C may include a cutout portion 54C in which a part of the end surface on the side where the long hand is inserted is cut out in the axial direction. Further, as shown in FIG. 15, the cell collection assisting tool 50D may be configured by forming the end surface on the side where the long hand is inserted into an inclined surface inclined by a predetermined angle with respect to the axial direction of the cylindrical portion 52D. Thereby, it is possible to easily insert the long needle with the cell collection aid.
When the cell collection aid 50C is configured to include the cutout portion 54C, the width of the cutout portion 54C is not limited to the width shown in FIG. For example, the cutout portion 54C may be formed in a so-called slit shape having a width that allows a long hand to pass therethrough.

また、第1実施形態及び第2実施形態では、マイクロチューブ1,1Aを、脚部20を含んで自立可能に構成したが、これに限らない。即ち、マイクロチューブを、脚部を含まずに構成してもよい。   Moreover, in 1st Embodiment and 2nd Embodiment, although the microtubes 1 and 1A were comprised so that it could stand independently including the leg part 20, it is not restricted to this. That is, you may comprise a microtube without including a leg part.

また、上記実施形態では、マイクロチューブと細胞回収補助具とを、螺合又は嵌合により接続したが、これに限らない。即ち、マイクロチューブと細胞回収補助具との接続部分から細胞が漏れないように液密に接続できれば、他の接続方法によって接続してもよい。また、接続部分を、Oリングを含んで構成してもよい。   Moreover, in the said embodiment, although the microtube and the cell collection | recovery assistance tool were connected by screwing or fitting, it is not restricted to this. In other words, other connection methods may be used as long as the cells can be connected in a liquid-tight manner so that cells do not leak from the connection portion between the microtube and the cell collection aid. Moreover, you may comprise a connection part including an O-ring.

次に、本発明を実施例に基づいて更に詳細に説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。   Next, the present invention will be described in more detail based on examples, but the present invention is not limited thereto.

[細胞の回収率の測定]
以下の表1に示す実施例1〜3のマイクロチューブ及び比較例のマイクロチューブを作製し、それぞれのマイクロチューブにつき、細胞の回収の容易さを測定した。
[Measurement of cell recovery rate]
The microtubes of Examples 1 to 3 shown in Table 1 below and the microtubes of the comparative example were prepared, and the ease of cell recovery was measured for each microtube.

Figure 2017035079
Figure 2017035079

細胞の回収の容易さの測定は、以下の手法及び手順により行った。
1.牛血600mLを3000gで10分間遠心分離した。
2.「1.」にて得られた血漿50mLを、50mL遠沈管に移し残った血漿は廃棄した。
3.「1.」にて得られたバフィーコート(白血球、血小板)を15mL遠沈管に移した。
4.「3.」にて得られたバフィーコートを2330gで10分間遠心分離し、赤血球層をスポイトで廃棄した。
5.「4.」に「2.」の血漿を適量加え細胞懸濁液とし、血球カウンターを用いて細胞数(白血球数)をカウントした。(白血球数の目安として10±2万/uL)*細胞懸濁液量は8mL程度となった。(必要液量は6mL以上)
6.細胞懸濁液500uLを実施例1〜3、及び比較例のマイクロチューブ(計4本)に分注した。(n=3)
7.「6.」を200gで5分間遠心分離した。
8.23G針とシリンジを用いて、細胞懸濁液を全量回収し、サンプリングチューブに移した。
9.血球カウンターを用いて細胞数(白血球数)をカウントし、細胞回収率を算出した。
10.1〜9を2回実施した。(計n=6)結果を表2に示す。
The ease of cell recovery was measured by the following method and procedure.
1. 600 mL of bovine blood was centrifuged at 3000 g for 10 minutes.
2. 50 mL of the plasma obtained in “1.” was transferred to a 50 mL centrifuge tube, and the remaining plasma was discarded.
3. The buffy coat (white blood cells and platelets) obtained in “1.” was transferred to a 15 mL centrifuge tube.
4). The buffy coat obtained in “3.” was centrifuged at 2330 g for 10 minutes, and the red blood cell layer was discarded with a dropper.
5). An appropriate amount of the plasma of “2.” was added to “4.” to obtain a cell suspension, and the number of cells (white blood cell count) was counted using a blood cell counter. (As a guide to the white blood cell count, 10 ± 20,000 / uL) * The cell suspension amount was about 8 mL. (Required liquid volume is 6mL or more)
6). 500 uL of cell suspension was dispensed into microtubes (total 4) of Examples 1 to 3 and Comparative Example. (N = 3)
7). “6.” was centrifuged at 200 g for 5 minutes.
Using the 8.23G needle and syringe, the entire cell suspension was recovered and transferred to a sampling tube.
9. The cell count (white blood cell count) was counted using a blood cell counter, and the cell recovery rate was calculated.
10.1-9 was implemented twice. (Total n = 6) The results are shown in Table 2.

Figure 2017035079
Figure 2017035079

表2に示すように、凹面部の半径Rが0.8mm以下の各実施例のマイクロチューブによれば、いずれも95%以上の高い率で細胞が回収できたことが確認された。特に、凹面部の半径Rが0.1mmであり、テーパ面部の軸方向に対するテーパ角度が5°である実施例3のマイクロチューブでは、細胞の回収率が99%以上と特に好適に細胞を回収できることが確認された。   As shown in Table 2, it was confirmed that according to the microtubes of the examples in which the radius R of the concave surface portion was 0.8 mm or less, the cells could be recovered at a high rate of 95% or more. In particular, in the microtube of Example 3 in which the radius R of the concave surface portion is 0.1 mm and the taper angle with respect to the axial direction of the tapered surface portion is 5 °, the cell recovery rate is particularly preferably 99% or more. It was confirmed that it was possible.

1,1A,1B マイクロチューブ
10,10A,10B 容器本体
11 開口部
12 底部
13 内面
14 雄ねじ部
20 脚部
30 キャップ(蓋体)
31 雌ねじ部
50 細胞回収補助具
51 チューブ接続部
52 筒状部
100,100B 細胞収容回収器具セット
132 テーパ面部
135 第1テーパ面部(テーパ面部)
136 第2テーパ面部
LD 軸方向
1, 1A, 1B Microtube 10, 10A, 10B Container body 11 Opening portion 12 Bottom portion 13 Inner surface 14 Male thread portion 20 Leg portion 30 Cap (lid)
31 Female thread part 50 Cell collection aid 51 Tube connection part 52 Cylindrical part 100, 100B Cell accommodation collection instrument set 132 Tapered surface part 135 First taper surface part (taper surface part)
136 2nd taper surface part LD axial direction

Claims (10)

一端側に開口部が形成されると共に他端側に閉鎖された底部が形成された筒状の容器本体と、該容器本体に取り付けられ前記開口部を密閉する蓋体と、を備えるマイクロチューブであって、
前記容器本体の前記底部の内面は、半径0.8mm以下の凹曲面に形成されるマイクロチューブ。
A microtube comprising: a cylindrical container body having an opening formed at one end and a bottom closed at the other end; and a lid attached to the container body and sealing the opening. There,
The inner surface of the said bottom part of the said container main body is a microtube formed in a concave curved surface with a radius of 0.8 mm or less.
前記容器本体の内面は、前記底部の内面に連続すると共に該容器本体の軸方向に対して所定角度傾斜したテーパ面部を含み、該テーパ面部の前記軸方向に対するテーパ角度は、10°以下である請求項1に記載のマイクロチューブ。   The inner surface of the container body includes a tapered surface portion that is continuous with the inner surface of the bottom portion and is inclined at a predetermined angle with respect to the axial direction of the container body, and the taper angle of the tapered surface portion with respect to the axial direction is 10 ° or less. The microtube according to claim 1. 前記テーパ面部の前記軸方向に対するテーパ角度は、7.5°以下である請求項2に記載のマイクロチューブ。   The microtube according to claim 2, wherein a taper angle of the tapered surface portion with respect to the axial direction is 7.5 ° or less. 前記テーパ面部の前記軸方向に対するテーパ角度は、5°以上である請求項2又は3に記載のマイクロチューブ。   The microtube according to claim 2 or 3, wherein a taper angle of the tapered surface portion with respect to the axial direction is 5 ° or more. 前記容器本体の内面は、前記テーパ面部に連続すると共に該容器本体の軸方向に対して該テーパ面部のテーパ角度よりも大きな角度傾斜した第2テーパ面部を更に含む請求項2〜4のいずれかに記載のマイクロチューブ。   The inner surface of the container main body further includes a second tapered surface portion that is continuous with the tapered surface portion and is inclined with respect to the axial direction of the container main body by an angle larger than the taper angle of the tapered surface portion. The microtube according to 1. 前記容器本体の外面から該容器本体の軸方向における前記底部側に延出する脚部を更に備え、自立可能な請求項1〜5のいずれかに記載のマイクロチューブ。   The microtube according to any one of claims 1 to 5, further comprising a leg portion extending from an outer surface of the container main body to the bottom side in the axial direction of the container main body. 前記容器本体の容量は、500μL〜1500μLである請求項1〜6のいずれかに記載のマイクロチューブ。   The capacity | capacitance of the said container main body is 500 microliters-1500 microliters, The microtube in any one of Claims 1-6. 前記容器本体は、前記開口部側の外周面に形成された雄ねじ部を含み、
前記蓋体は、内周面に前記雄ねじ部に螺合可能な雌ねじ部が形成されたキャップにより構成される請求項1〜7のいずれかに記載のマイクロチューブ。
The container body includes a male screw portion formed on the outer peripheral surface on the opening side,
The microtube according to any one of claims 1 to 7, wherein the lid is configured by a cap having a female screw portion that can be screwed to the male screw portion on an inner peripheral surface.
請求項1〜8のいずれかに記載のマイクロチューブと、
前記容器本体の上部に接続可能なチューブ接続部、及び該チューブ接続部が前記容器本体に接続された状態で該容器本体の軸方向に沿って延び前記開口部を介して前記容器本体の内部に連通する筒状部を有する細胞回収補助具と、を備える細胞収容回収器具セット。
The microtube according to any one of claims 1 to 8,
A tube connecting portion connectable to an upper portion of the container main body, and the tube connecting portion is connected to the container main body and extends along the axial direction of the container main body to enter the container main body through the opening. A cell containing and collecting instrument set comprising: a cell collecting auxiliary tool having a tubular portion that communicates with the cell collecting auxiliary tool set.
一端側に開口部が形成されると共に他端側に閉鎖された底部が形成された筒状の容器本体と、該容器本体に取り付けられ前記開口部を密閉する蓋体と、を備えるマイクロチューブに取り付けられ前記容器本体に収容された細胞の回収を補助する細胞回収補助具であって、
前記容器本体の上部に接続可能なチューブ接続部と、
前記チューブ接続部が前記容器本体に接続された状態で該容器本体の軸方向に沿って延び前記開口部を介して前記容器本体の内部に連通する筒状部と、を備える細胞回収補助具。
A microtube comprising: a cylindrical container body having an opening formed at one end and a bottom closed at the other end; and a lid attached to the container body and sealing the opening. A cell recovery aid that assists in the recovery of cells attached and contained in the container body,
A tube connecting portion connectable to an upper portion of the container body;
A cell collection aid comprising: a tubular portion that extends along the axial direction of the container body and communicates with the inside of the container body through the opening in a state where the tube connection portion is connected to the container body.
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