JP2013043885A

JP2013043885A - Dehydroamino acid-containing glycerol derivative

Info

Publication number: JP2013043885A
Application number: JP2011185327A
Authority: JP
Inventors: Shinji Ota; 伸二太田; Yayoi Hirose; 弥生廣▲瀬▼; Emi Ota; 恵美太田; Masafumi Kajimoto; 将史梶本
Original assignee: Kansai Bunri Sogo Gakuen
Current assignee: Kansai Bunri Sogo Gakuen
Priority date: 2011-08-26
Filing date: 2011-08-26
Publication date: 2013-03-04

Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a diabetes preventing/treating agent having α-glucosidase inhibitory action.SOLUTION: The diabetes preventing/treating agent having α-glucosidase inhibitory action is a compound or a salt thereof represented by general formula (I). In the general formula: A is an acyl residue of an amino acid; and B is a substituent (α) wherein Rand Rmay be the same or different and are each independently an acyl residue of a fatty acid.

Description

本発明は、糖尿病等の予防及び治療に有用なα-グルコシダーゼ阻害作用を有するグリセロール誘導体に関する。 The present invention relates to a glycerol derivative having an α-glucosidase inhibitory action useful for the prevention and treatment of diabetes and the like.

α-グルコシダーゼ(α-glucosidase)は、糖のα-1,4-グルコシド結合を加水分解する反応を触媒する酵素であり、ヒトでは小腸上皮細胞に膜酵素として発現している消化酵素である。α-グルコシダーゼの作用を競合的に阻害する作用を有する化合物は、二糖類から単糖への分解を抑制することにより小腸からのグルコースの吸収を遅らせ、食後の急激な血糖値の上昇を抑えるので糖尿病の予防又は治療に有用であると考えられている。 α-Glucosidase is an enzyme that catalyzes a reaction that hydrolyzes α-1,4-glucoside bonds of sugars. In humans, α-glucosidase is a digestive enzyme expressed as a membrane enzyme in small intestinal epithelial cells. Compounds that have the action of competitively inhibiting the action of α-glucosidase delay the absorption of glucose from the small intestine by inhibiting the degradation of disaccharides to monosaccharides, and suppress the rapid increase in blood glucose level after meals. It is considered useful for the prevention or treatment of diabetes.

ヒトの健康の維持や疾病の治療などに天然資源が有効に利用され、植物だけでなく、微生物や海洋生物などから、生理活性物質は多岐にわたり存在することが分かっている。なかでも昆虫は生薬昆虫として用いられていたという歴史から、新たな医薬素材の探索も行われている報告もあるが（非特許文献１）、昆虫からの新規α-グルコシダーゼ阻害作用を有する生理活性物質は知られていない。 Natural resources are effectively used for maintaining human health and treating diseases, and it is known that there are a wide variety of bioactive substances not only from plants but also from microorganisms and marine organisms. Among them, there is a report that a search for a new pharmaceutical material has been carried out due to the history that insects have been used as herbal medicines (Non-patent Document 1), but physiological activity having a novel α-glucosidase inhibitory action from insects. The substance is unknown.

Tetrahedron Lett, 2010, 51, 2099-2101Tetrahedron Lett, 2010, 51, 2099-2101

本発明の目的は、糖尿病等の予防及び治療に有用であり、α-グルコシダーゼ阻害作用を有する化合物及び、それらを含有する医薬及び食品を提供することにある。 An object of the present invention is to provide a compound having an α-glucosidase inhibitory action, and a medicament and food containing them, which are useful for the prevention and treatment of diabetes and the like.

本発明者らは、上記課題を解決すべく、鋭意研究を行った結果、
一般式（I）： In order to solve the above problems, the present inventors have conducted intensive research,
Formula (I):

［式中、Ａは、アミノ酸のアシル残基であり、Ｂは [Wherein A is an acyl residue of an amino acid, and B is

（式中、Ｒ^１及びＲ^２は、同一であっても異なっていてもよく、それぞれ独立して脂肪酸のアシル残基である）］
で表される化合物又はその塩が、優れたα-グルコシダーゼ阻害作用を有し、糖尿病等の予防又は治療に有用であり、かつ優れた薬効を有することを見出し、本発明を完成するに至った。 (Wherein R ¹ and R ² may be the same or different and are each independently an acyl residue of a fatty acid)]
Has been found to have an excellent α-glucosidase inhibitory action, is useful for the prevention or treatment of diabetes and the like, and has an excellent medicinal effect, thereby completing the present invention. .

即ち、本発明は下記の通りである。
［１］一般式（I）： That is, the present invention is as follows.
[1] General formula (I):

（式中、Ｒ^１及びＲ^２は、同一であっても異なっていてもよく、それぞれ独立して脂肪酸のアシル残基である）］
で表される化合物又はその塩。
［２］Ａが、アミノ酸の２，３−デヒドロ体のアシル残基である［１］に記載の化合物又はその塩。
［３］アミノ酸がα-アミノ酸である［１］又は［２］に記載の化合物又はその塩。
［４］Ａが (Wherein R ¹ and R ² may be the same or different and are each independently an acyl residue of a fatty acid)]
Or a salt thereof.
[2] The compound or salt thereof according to [1], wherein A is an acyl residue of a 2,3-dehydro form of an amino acid.
[3] The compound or salt thereof according to [1] or [2], wherein the amino acid is an α-amino acid.
[4] A is

［式中、Ｒ³は、水素原子、ヒドロキシル基、アミノ基又はハロゲン原子である］である［１］〜［３］のいずれか１項に記載の化合物。
［５］Ｒ³が水素原子である［４］に記載の化合物又はその塩。
［６］Ｒ¹及びＲ²が、同一であっても異なっていてもよく、それぞれ独立して炭素数２〜３０の脂肪酸のアシル残基である［１］〜［５］のいずれか１項に記載の化合物。
［７］Ｒ^１及びＲ^２が、炭素数２〜２０の脂肪酸のアシル残基である［１］〜［５］のいずれか１項に記載の化合物。
［８］前記式（Ｉ）で表される化合物又はその塩が、サイカチマメゾウムシ由来である［１］〜［７］のいずれか１項に記載の化合物又はその塩。
［９］α-グルコシダーゼ阻害剤である［１］〜［８］のいずれか１項に記載の化合物又はその塩。
［１０］［９］に記載のα-グルコシダーゼ阻害剤を含む医薬。
［１１］糖尿病、糖尿病性合併症及び／又は肥満の予防又は治療剤である［１０］に記載の医薬。
［１２］［９］に記載のα-グルコシダーゼ阻害剤を含む食品。
［１３］食品が保健機能食品又はダイエタリーサプリメントである、［１２］に記載の食品。
［１４］保健機能食品が特定保健用食品又は栄養機能食品である、［１３］に記載の食品。 The compound according to any one of [1] to [3], wherein R ³ is a hydrogen atom, a hydroxyl group, an amino group, or a halogen atom.
[5] The compound or salt thereof according to [4], wherein R ³ is a hydrogen atom.
[6] R ¹ and R ² may be the same or different and are each independently an acyl residue of a fatty acid having 2 to 30 carbon atoms, any one of [1] to [5] Compound described in 1.
[7] The compound according to any one of [1] to [5], wherein R ¹ and R ² are acyl residues of fatty acids having 2 to 20 carbon atoms.
[8] The compound or salt thereof according to any one of [1] to [7], wherein the compound represented by the formula (I) or a salt thereof is derived from weevil weevil.
[9] The compound or salt thereof according to any one of [1] to [8], which is an α-glucosidase inhibitor.
[10] A medicament comprising the α-glucosidase inhibitor according to [9].
[11] The medicament according to [10], which is an agent for preventing or treating diabetes, diabetic complications and / or obesity.
[12] A food containing the α-glucosidase inhibitor according to [9].
[13] The food according to [12], wherein the food is a health functional food or a dietary supplement.
[14] The food according to [13], wherein the health functional food is a food for specified health use or a nutritional functional food.

本発明によれば、式（I）の化合物は、優れたα-グルコシダーゼ阻害作用を有するので、肥満や糖尿病等の予防又は治療に有用である。 According to the present invention, since the compound of formula (I) has an excellent α-glucosidase inhibitory action, it is useful for the prevention or treatment of obesity and diabetes.

図１は、（A）サイカチ種子及び(B)サイカチマメゾウムシの写真を示す。FIG. 1 shows photographs of (A) honey beetle seeds and (B) honey beetle weevil. 図２は、活性脂質１のCIMSスペクトルを示す。FIG. 2 shows the CIMS spectrum of active lipid 1. 図３は、活性脂質１のα-グルコシダーゼ阻害活性を示す。FIG. 3 shows the α-glucosidase inhibitory activity of active lipid 1. 図４は、合成した1,2-ジアシル誘導体のα-Glucosidase阻害率の濃度依存性を示す。FIG. 4 shows the concentration dependency of the α-Glucosidase inhibition rate of the synthesized 1,2-diacyl derivative. 図５は、合成した1,3-ジアシル誘導体のα-Glucosidase阻害率の濃度依存性を示す。FIG. 5 shows the concentration dependency of the α-Glucosidase inhibition rate of the synthesized 1,3-diacyl derivative.

以下、本発明を詳細に説明する。
本願発明は、一般式（I）： Hereinafter, the present invention will be described in detail.
The present invention relates to a general formula (I):

（式中、Ｒ^１及びＲ^２は、同一であっても異なっていてもよく、それぞれ独立して脂肪酸のアシル残基である）］
で表される化合物又はその塩である（以下本発明の化合物又は化合物（Ｉ）ともいう）。 (Wherein R ¹ and R ² may be the same or different and are each independently an acyl residue of a fatty acid)]
Or a salt thereof (hereinafter also referred to as the compound of the present invention or compound (I)).

本明細書中のＡは、アミノ酸のアシル残基を示す。
アミノ酸としては、アミノ酸の２，３−デヒドロ体が好ましく挙げられる。
またアミノ酸は、α-アミノ酸、β-アミノ酸及びγ-アミノ酸が挙げられ、なかでもα-アミノ酸が好ましい。 A in the present specification represents an acyl residue of an amino acid.
Preferred examples of amino acids include 2,3-dehydro isomers of amino acids.
Examples of amino acids include α-amino acids, β-amino acids, and γ-amino acids, and α-amino acids are preferred.

α-アミノ酸としては、フェニルアラニン、チロシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、トリプトファン、メチオニン、セリン、トレオニン、システイン、グルタミン、アスパラギン、リシン、アルギニン、ヒスチジン、アスパラギン酸、グルタミン酸等が挙げられ、フェニルアラニン、チロシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン等が好ましく、フェニルアラニン、チロシンがより好ましい。 Examples of α-amino acids include phenylalanine, tyrosine, alanine, valine, leucine, isoleucine, proline, tryptophan, methionine, serine, threonine, cysteine, glutamine, asparagine, lysine, arginine, histidine, aspartic acid, glutamic acid, and the like. , Tyrosine, alanine, valine, leucine, isoleucine and the like are preferable, and phenylalanine and tyrosine are more preferable.

本明細書中のＲ^１及びＲ^２は、脂肪酸のアシル残基を示す。
脂肪酸のアシル残基としては、炭素数２〜３０の飽和脂肪酸又は不飽和脂肪酸のアシル残基が挙げられ、好ましくは、炭素数２〜２０の飽和脂肪酸又は不飽和脂肪酸のアシル残基、より好ましくは８〜１８の飽和脂肪酸又は不飽和脂肪酸のアシル残基が挙げられる。 R ¹ and R ² in the present specification represent an acyl residue of a fatty acid.
Examples of the acyl residue of the fatty acid include an acyl residue of a saturated fatty acid having 2 to 30 carbon atoms or an unsaturated fatty acid, preferably an acyl residue of a saturated fatty acid having 2 to 20 carbon atoms or an unsaturated fatty acid. Includes 8 to 18 acyl residues of saturated or unsaturated fatty acids.

このような具体的なアシル残基の例としては、酢酸、プロピオン酸、ブタン酸、ペンタン酸、ヘキサン酸、ヘプタン酸、オクタン酸、ノナン酸、デカン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、アラキジン酸、ベヘン酸、リグノセリン酸、セロチン酸、モンタン酸、メリシン酸、２−エチルヘキサン酸等の飽和脂肪酸のアシル残基；パルミトレイン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、エルカ酸、２，４−オクタデカジエン酸等の不飽和脂肪酸のアシル残基が挙げられるが、イソステアリン酸等の分岐脂肪酸のアシル残基；リシノール酸、１，２−ヒドロキシステアリン酸等のアルキル基中に水酸基を有するヒドロキシ脂肪酸のアシル残基などの環状構造を有する環状脂肪酸などであってもよい。 Examples of such specific acyl residues include acetic acid, propionic acid, butanoic acid, pentanoic acid, hexanoic acid, heptanoic acid, octanoic acid, nonanoic acid, decanoic acid, lauric acid, myristic acid, palmitic acid, stearic acid. Acyl residues of saturated fatty acids such as acid, arachidic acid, behenic acid, lignoceric acid, serotic acid, montanic acid, melicic acid, 2-ethylhexanoic acid; palmitoleic acid, oleic acid, linoleic acid, linolenic acid, erucic acid, 2 Acyl residues of unsaturated fatty acids such as 1,4-octadecadienoic acid, but acyl residues of branched fatty acids such as isostearic acid; hydroxyl groups in alkyl groups such as ricinoleic acid and 1,2-hydroxystearic acid. It may be a cyclic fatty acid having a cyclic structure such as an acyl residue of a hydroxy fatty acid.

なかでも酢酸、プロピオン酸、ブタン酸、ヘキサン酸、オクタン酸、デカン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、アラキジン酸等の飽和脂肪酸のアシル残基；パルミトレイン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸などの不飽和脂肪酸のアシル残基が好ましく、特にオクタン酸、ステアリン酸、オレイン酸、リノレン酸のアシル残基が好ましい。 Among them, acyl residues of saturated fatty acids such as acetic acid, propionic acid, butanoic acid, hexanoic acid, octanoic acid, decanoic acid, lauric acid, myristic acid, palmitic acid, stearic acid, arachidic acid; palmitoleic acid, oleic acid, linoleic acid An acyl residue of an unsaturated fatty acid such as linolenic acid is preferable, and an acyl residue of octanoic acid, stearic acid, oleic acid, or linolenic acid is particularly preferable.

本明細書中のＲ³は、水素原子、ヒドロキシル基、アミノ基又はハロゲン原子である。好ましいのは水素原子、ヒドロキシル基であり、より好ましいのは水素である。
本明細書中の「ハロゲン原子」としては、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素が挙げられる。 R ³ in the present specification is a hydrogen atom, a hydroxyl group, an amino group or a halogen atom. Preferred are a hydrogen atom and a hydroxyl group, and more preferred is hydrogen.
Examples of the “halogen atom” in the present specification include fluorine, chlorine, bromine and iodine.

式（Ｉ）で表される化合物の中でも、 Among the compounds represented by formula (I),

又は Or

［式中、Ｒ^１、Ｒ^２及びＲ^３の定義は、上記と同様である］で表される化合物又はその塩が好ましい。 [Wherein, definitions of R ¹ , R ² and R ³ are as defined above] or a salt thereof is preferable.

式（Ｉ）で表される化合物の特に好適な具体例としては、１，２−ジアセチルグリセロ−３−デヒドロフェニルアラニンエステル、１，２−ジオクトイルグリセロ−３−デヒドロフェニルアラニンエステル、１，２−ジステアロイルグリセロ−３−デヒドロフェニルアラニンエステル、１，２−ジオレオイルグリセロ−３−デヒドロフェニルアラニンエステル、１，２−ジリノロイルグリセロ−３−デヒドロフェニルアラニンエステル、１，３−ジオクトイルグリセロ−３−デヒドロフェニルアラニンエステル、１，３−ジリノロイルグリセロ−３−デヒドロフェニルアラニンエステル又はそれらの塩が挙げられる。 Particularly preferred specific examples of the compound represented by the formula (I) include 1,2-diacetylglycero-3-dehydrophenylalanine ester, 1,2-dioctoylglycero-3-dehydrophenylalanine ester, 1,2- Distearoyl glycero-3-dehydrophenylalanine ester, 1,2-dioleoylglycero-3-dehydrophenylalanine ester, 1,2-dilinoloyl glycero-3-dehydrophenylalanine ester, 1,3-dioctoyl glycero-3 -Dehydrophenylalanine ester, 1,3- dilinoloyl glycero-3-dehydrophenylalanine ester or a salt thereof.

式（Ｉ）で表される化合物又はその塩は、化学合成法、動物や植物に由来する天然のもの、発酵法又は遺伝子組換法によって得られるもののいずれを使用してもよい。 As the compound represented by the formula (I) or a salt thereof, any of chemical synthesis methods, natural products derived from animals and plants, those obtained by fermentation methods or gene recombination methods may be used.

式（Ｉ）で表される化合物の塩としては、薬理学的に許容しうる塩等が挙げられ、例えば、トリフルオロ酢酸、酢酸、乳酸、コハク酸、マレイン酸、酒石酸、クエン酸、グルコン酸、アスコルビン酸、安息香酸、メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ケイ皮酸、フマル酸、ホスホン酸、塩酸、硝酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、スルファミン酸、硫酸等の酸との酸付加塩；例えば、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム等の金属塩；例えば、トリメチルアミン、トリエチルアミン、ピリジン、ピコリン、Ｎ−メチルピロリジン、Ｎ−メチルピペリジン、Ｎ−メチルモルホリン等の有機塩基との塩等が挙げられる。 Examples of the salt of the compound represented by the formula (I) include pharmacologically acceptable salts such as trifluoroacetic acid, acetic acid, lactic acid, succinic acid, maleic acid, tartaric acid, citric acid, and gluconic acid. , Ascorbic acid, benzoic acid, methanesulfonic acid, p-toluenesulfonic acid, cinnamic acid, fumaric acid, phosphonic acid, hydrochloric acid, nitric acid, hydrobromic acid, hydroiodic acid, sulfamic acid, sulfuric acid, etc. Acid addition salts; for example, metal salts such as sodium, potassium, magnesium, calcium; for example, salts with organic bases such as trimethylamine, triethylamine, pyridine, picoline, N-methylpyrrolidine, N-methylpiperidine, N-methylmorpholine, etc. Is mentioned.

式（Ｉ）で表される化合物が、光学異性体、立体異性体、位置異性体、回転異性体等の異性体を有する場合には、これらも式（Ｉ）で表される化合物として含有されるとともに、自体公知の合成手法、分離手法によりそれぞれを単品として得ることができる。例えば、式（Ｉ）で表される化合物に光学異性体が存在する場合には、該化合物から分割された光学異性体も式（Ｉ）で表される化合物に包含される。ここで、光学異性体は自体公知の方法により製造することができる。 When the compound represented by the formula (I) has an isomer such as an optical isomer, a stereoisomer, a positional isomer, and a rotational isomer, these are also contained as the compound represented by the formula (I). In addition, each can be obtained as a single product by a synthesis method and a separation method known per se. For example, when an optical isomer exists in the compound represented by the formula (I), the optical isomer resolved from the compound is also included in the compound represented by the formula (I). Here, the optical isomer can be produced by a method known per se.

式（Ｉ）で表される化合物は、結晶であってもよい。
式（Ｉ）で表される化合物の結晶は、式（Ｉ）で表される化合物に自体公知の結晶化法を適用して結晶化することによって製造することができる。式（Ｉ）で表される化合物が結晶である場合、結晶形が単一であっても結晶形混合物であっても式（Ｉ）で表される化合物に包含される。 The compound represented by the formula (I) may be a crystal.
The crystal of the compound represented by the formula (I) can be produced by crystallization by applying a crystallization method known per se to the compound represented by the formula (I). When the compound represented by the formula (I) is a crystal, it is included in the compound represented by the formula (I) whether the crystal form is single or a crystal form mixture.

式（Ｉ）で表される化合物は、同位元素（例、³H, ¹⁴C, ³⁵S,¹²⁵I等）等で標識されていてもよい。
さらに式（Ｉ）で表される化合物は、水和物であっても、非水和物であっても、無溶媒和物であっても、溶媒和物であってもよい。
さらに、¹Hを²H（D）に変換した重水素変換体も、式（Ｉ）で表される化合物に包含される。 The compound represented by the formula (I) may be labeled with an isotope (eg, ³ H, ¹⁴ C, ³⁵ S, ¹²⁵ I, etc.).
Furthermore, the compound represented by the formula (I) may be a hydrate, a non-hydrate, a non-solvate or a solvate.
Further, a deuterium converter obtained by converting ¹ H to ² H (D) is also included in the compound represented by the formula (I).

式（Ｉ）で表される化合物又はその塩の製造のための出発物質は、J. Med. Chem. 1997, 40, 1186-1194やChem. Biol. Interaction, 84(1992) 277-290等に記載される方法や公知の工程によって調製できる。すなわち式（Ｉ）で表される化合物の基本骨格あるいは置換基の種類に基づく特徴を利用し、種々の公知の合成方法を適用して製造することができる。例えばアルキル化、アシル化、アミノ化、イミノ化、ハロゲン化、還元、酸化、縮合等が挙げられ、通常当分野で用いられる反応又は方法が利用できる。 The starting material for the production of the compound represented by the formula (I) or a salt thereof is described in J. Med. Chem. 1997, 40, 1186-1194, Chem. Biol. Interaction, 84 (1992) 277-290, etc. It can be prepared by the methods described and known processes. That is, it can be produced by applying various known synthesis methods utilizing the characteristics based on the basic skeleton of the compound represented by formula (I) or the type of substituent. For example, alkylation, acylation, amination, imination, halogenation, reduction, oxidation, condensation and the like can be mentioned, and reactions or methods usually used in the art can be used.

式（Ｉ）で表される化合物のプロドラッグも本発明に包含される。当該プロドラッグは、生体内における生理条件下で酵素や胃酸等による反応により式（Ｉ）で表される化合物に変換する化合物、すなわち酵素的に酸化、還元、加水分解等を起こして式（Ｉ）で表される化合物に変化する化合物、胃酸等により加水分解等を起こして式（Ｉ）で表される化合物に変化する化合物である。 Prodrugs of the compounds represented by formula (I) are also included in the present invention. The prodrug is a compound that is converted into a compound represented by the formula (I) by a reaction with an enzyme, gastric acid or the like under physiological conditions in a living body, that is, enzymatically oxidatively, reduced, hydrolyzed, etc. ), A compound that changes to a compound represented by formula (I) by hydrolysis or the like due to gastric acid or the like.

また、式（Ｉ）で表される化合物のプロドラッグは、広川書店１９９０年刊「医薬品の開発」第７巻分子設計１６３頁から１９８頁に記載されているような、生理的条件において式（Ｉ）で表される化合物に変化するものであってもよい。
本発明の式（Ｉ）で表される化合物又はその塩、あるいはそのプロドラッグには、シス、トランス異性体などの立体異性体、ラセミ体の他、Ｒ体及びＳ体などの光学活性体も含まれる。 Further, the prodrug of the compound represented by the formula (I) is a compound having the formula (I) under physiological conditions as described in Hirokawa Shoten 1990, “Development of Drugs”, Volume 7, pages 163 to 198. It may be changed to a compound represented by
The compound represented by the formula (I) of the present invention or a salt thereof, or a prodrug thereof includes not only stereoisomers such as cis and trans isomers, racemates, but also optically active forms such as R and S isomers. included.

以下、本発明の化合物の製造法について説明する。
本発明の化合物は、自体公知の方法、例えば、以下に詳述する方法、あるいはこれに準ずる方法に従って製造することができる。
なお、以下の各製造法において、原料化合物は塩として用いてもよく、このような塩としては、例えば、化合物（Ｉ）の塩と同様のものが挙げられる。
以下の式中の各工程で得られた化合物は、反応液のままか粗生成物として、次の反応に用いてもよいし、公知の分離精製手段、例えば、濃縮、減圧濃縮、溶媒抽出、晶出、再結晶、転溶、クロマトグラフィーなどにより、反応液から単離精製して次の反応に用いてもよい。
また、以下の式中の化合物が市販されている場合には、市販品をそのまま用いることもできる。 Hereafter, the manufacturing method of the compound of this invention is demonstrated.
The compound of the present invention can be produced according to a method known per se, for example, the method described in detail below or a method analogous thereto.
In each of the following production methods, the raw material compound may be used as a salt. Examples of such a salt include the same salts as the salt of compound (I).
The compound obtained in each step in the following formula may be used in the next reaction as a reaction solution or as a crude product, or may be used for the following reaction or by known separation and purification means such as concentration, concentration under reduced pressure, solvent extraction, It may be isolated and purified from the reaction solution by crystallization, recrystallization, transfer dissolution, chromatography, etc. and used for the next reaction.
Moreover, when the compound in the following formula | equation is marketed, a commercial item can also be used as it is.

化合物（II）は、以下のスキームに示す方法で製造することができる。
まず、フェニルピルビン酸のベンゼン溶液をｐ−トルエンスルホン酸（ＴｓＯＨ）存在下でカルバミン酸ベンジル（ＮＨ_２−Ｃｂｚ）と還流させて、Ｎ−Ｃｂｚ−デヒドロフェニルアラニン（Ｎ−Ｃｂｚ−Δ−Ｐｈｅ）を調製する。また、１，２−イソプロピリデングリセロールの３位をｔ−ブチルジフェニルシリル（ＴＢＤＰＳ）化後、これを加水分解してジオール体にする。得られたジオール体にＲ^１又はＲ^２に対応するアシルクロリド又は酸無水物を反応させてアシル化を行い、１，２−ジアシルグリセロールの３−Ｏ−ＴＢＤＰＳ誘導体を得る。この誘導体の無水ＴＨＦ溶液を、０℃で酢酸および１ＭＢｕ_４ＮＦのＴＨＦ溶液で処理してＴＢＤＰＳ基を脱保護し、１，２−ジアシルグリセロールとする。これを１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＷＳＣ）およびＴｓＯＨ存在下、Ｎ−Ｃｂｚ−Δ−Ｐｈｅと反応させて、１，２−ジアシルグリセロ−３−デヒドロフェニルアラニンエステルを得る。 Compound (II) can be produced by the method shown in the following scheme.
First, a benzene solution of phenylpyruvic acid is refluxed with benzyl carbamate (NH ₂ -Cbz) in the presence of p-toluenesulfonic acid (TsOH) to give N-Cbz-dehydrophenylalanine (N-Cbz-Δ-Phe). Prepare. In addition, the 3-position of 1,2-isopropylideneglycerol is converted to t-butyldiphenylsilyl (TBDPS) and then hydrolyzed to form a diol. The resulting diol is reacted with an acyl chloride or acid anhydride corresponding to R ¹ or R ² for acylation to obtain a 3-O-TBDPS derivative of 1,2-diacylglycerol. An anhydrous THF solution of this derivative is treated with acetic acid and 1M Bu ₄ NF in THF at 0 ° C. to deprotect the TBDPS group to give 1,2-diacylglycerol. This is reacted with N-Cbz-Δ-Phe in the presence of 1-ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide (WSC) and TsOH to give 1,2-diacylglycero-3-dehydrophenylalanine ester. .

また化合物（ＩＩＩ）は、以下のスキームに示す方法で製造することができる。
化合物（ＩＩ）の製造における合成中間体である１，２−ジアシルグリセロールの３−Ｏ−ＴＢＤＰＳ誘導体の無水ＴＨＦ溶液を、０℃ではなく室温で酢酸および１ＭＢｕ_４ＮＦのＴＨＦ溶液で処理して、ＴＢＤＰＳ基を脱保護するとともにアシル基を転位させ、１，３−ジアシルグリセロールとする。これをＷＳＣおよびＴｓＯＨ存在下、Ｎ−Ｃｂｚ−Δ−Ｐｈｅと反応させて、１，３−ジアシルグリセロ−２−デヒドロフェニルアラニンエステルを得る。 Compound (III) can be produced by the method shown in the following scheme.
An anhydrous THF solution of a 3-O-TBDPS derivative of 1,2-diacylglycerol, a synthetic intermediate in the production of compound (II), was treated with acetic acid and 1M Bu ₄ NF in THF at room temperature instead of 0 ° C. The TBDPS group is deprotected and the acyl group is rearranged to give 1,3-diacylglycerol. This is reacted with N-Cbz-Δ-Phe in the presence of WSC and TsOH to give 1,3-diacylglycero-2-dehydrophenylalanine ester.

式（Ｉ）で表される化合物又はその塩は、サイカチマメゾウムシ由来である態様も本発明に含まれる。
サイカチマメゾウムシは、滋賀県長浜市の琵琶湖岸「さいかち浜」に植栽されているマメ科の高木サイカチ(Gleditsia japonica)の種子を食べて成長する昆虫である。サイカチマメゾウムシ由来の上記式（Ｉ）で表される化合物はサイカチマメゾウムシからは以下のようにして得られる。 An embodiment in which the compound represented by the formula (I) or a salt thereof is derived from the weevil is also included in the present invention.
The giant beetle weevil is an insect that grows by eating the seeds of the leguminous tree, Gleditsia japonica, which is planted on the coast of Lake Biwa "Sakachihama" in Nagahama City, Shiga Prefecture. The compound represented by the above formula (I) derived from the weevil weevil is obtained from the weevil weevil as follows.

サイカチマメゾウムシの幼虫をメタノールに浸漬し、メタノール抽出物を得る。さらにクロロホルムに転溶してクロロホルム可溶性画分を得る。得られたクロロホルム可溶性画分をカラムで分画し、上記式（Ｉ）で表される化合物を得る。 A larvae of the weevil weevil is dipped in methanol to obtain a methanol extract. Further, it is dissolved in chloroform to obtain a chloroform-soluble fraction. The obtained chloroform-soluble fraction is fractionated with a column to obtain the compound represented by the above formula (I).

本発明の化合物はα-グルコシダーゼ阻害作用を有することから、本発明の化合物を含有するα-グルコシダーゼ阻害剤は、哺乳動物（例、ヒト、サル、ネコ、ブタ、ウマ、ウシ、マウス、ラット、モルモット、イヌ、ウサギ等）に対し、α-グルコシダーゼが関与する疾患の予防、改善又は治療に有用である。 Since the compound of the present invention has an α-glucosidase inhibitory action, the α-glucosidase inhibitor containing the compound of the present invention can be used in mammals (eg, humans, monkeys, cats, pigs, horses, cows, mice, rats, Guinea pigs, dogs, rabbits, etc.) are useful for the prevention, amelioration or treatment of diseases involving α-glucosidase.

α-グルコシダーゼが関与する疾患又は症状としては、糖尿病（例、１型糖尿病、２型糖尿病、妊娠糖尿病等）；耐糖能不全（ＩＧＴ）；高脂血症（例、高トリグリセライド血症、高コレステロール血症、低ＨＤＬ低血症など）；高インスリン血症；糖尿病性合併症（例、網膜症、腎症、神経障害、大血管障害など）；冠動脈および脳血管障害；高アンモニウム血症；肥満；シンドロームＸをもたらす高血圧、内臓肥満およびインスリン抵抗性；骨減少症や骨粗しょう症などの骨代謝障害；脂肪肝、肝炎、便秘、下痢、腸炎などの消化器系疾患；ダンピング症候群；糖原病等が挙げられる。
なかでも、α-グルコシダーゼ阻害剤は、糖尿病、糖尿病性合併症、肥満等の予防又は治療に好適である。
本発明のα-グルコシダーゼ阻害剤を含む医薬も本発明に包含される（以下本発明の医薬ともいう）。 Diseases or symptoms associated with α-glucosidase include diabetes (eg, type 1 diabetes, type 2 diabetes, gestational diabetes); glucose intolerance (IGT); hyperlipidemia (eg, hypertriglyceridemia, high cholesterol) Hyperinsulinemia; diabetic complications (eg, retinopathy, nephropathy, neuropathy, macrovascular disorders); coronary and cerebrovascular disorders; hyperammonemia; obesity Hypertension resulting from syndrome X, visceral obesity and insulin resistance; bone metabolic disorders such as osteopenia and osteoporosis; digestive system diseases such as fatty liver, hepatitis, constipation, diarrhea, enteritis; dumping syndrome; Etc.
Among these, α-glucosidase inhibitors are suitable for the prevention or treatment of diabetes, diabetic complications, obesity and the like.
A medicament containing the α-glucosidase inhibitor of the present invention is also encompassed by the present invention (hereinafter also referred to as the medicament of the present invention).

本発明の医薬は、本発明のα-グルコシダーゼ阻害剤をそのままあるいは薬理学的に許容される担体を配合し、経口的又は非経口的に投与することができる。 The medicament of the present invention can be administered orally or parenterally with the α-glucosidase inhibitor of the present invention as it is or in combination with a pharmacologically acceptable carrier.

本発明の医薬は、経口投与する場合の剤形としては、例えば錠剤（糖衣錠、フィルムコーティング錠を含む）、丸剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤（ソフトカプセル剤、マイクロカプセル剤を含む）、シロップ剤、乳剤、懸濁剤等が挙げられ、また、非経口投与する場合の剤形としては、例えば注射剤、注入剤、点滴剤、坐剤等が挙げられる。また、適当な基剤と組み合わせ、徐放性製剤とすることも有効である。 The pharmaceutical preparation of the present invention can be administered orally, for example, as tablets (including sugar-coated tablets and film-coated tablets), pills, granules, powders, capsules (including soft capsules and microcapsules), and syrups. Examples of dosage forms for parenteral administration include injections, infusions, drops, suppositories, and the like. It is also effective to make a sustained-release preparation by combining with an appropriate base.

本発明の医薬を上記の剤形に製造する方法としては、当該分野で一般的に用いられている公知の製造方法を適用することができる。また、上記の剤形に製造する場合には、必要に応じて、その剤形に製する際に製剤分野において通常用いられる賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、甘味剤、界面活性剤、懸濁化剤、乳化剤等を適宜、適量含有させて製造することができる。 As a method for producing the pharmaceutical of the present invention into the above-mentioned dosage form, a known production method generally used in the art can be applied. In addition, when manufacturing into the above-mentioned dosage forms, excipients, binders, disintegrants, lubricants, sweeteners, interfaces commonly used in the pharmaceutical field when manufacturing into the dosage forms, if necessary. An activator, a suspending agent, an emulsifier, etc. can be appropriately contained and produced.

例えば、本発明の医薬を錠剤に製する場合には、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤等を含有させて製造することができ、丸剤及び顆粒剤に製する場合には、賦形剤、結合剤、崩壊剤等を含有させて製造することができる。また、散剤及びカプセル剤に製する場合には賦形剤等を、シロップ剤に製する場合には甘味剤等を、乳剤又は懸濁剤に製する場合には懸濁化剤、界面活性剤、乳化剤等を含有させて製造することができる。 For example, when the medicament of the present invention is produced into tablets, it can be produced by containing excipients, binders, disintegrants, lubricants, etc., and when produced into pills and granules. , Excipients, binders, disintegrants and the like. In addition, excipients and the like are used for powders and capsules, sweeteners and the like are used for syrups, and suspending agents and surfactants are used for emulsions and suspensions. It can be produced by adding an emulsifier and the like.

賦形剤の例としては、乳糖、白糖、ブドウ糖、でんぷん、蔗糖、微結晶セルロース、カンゾウ末、マンニトール、炭酸水素ナトリウム、リン酸カルシウム、硫酸カルシウム等が挙げられる。 Examples of excipients include lactose, sucrose, glucose, starch, sucrose, microcrystalline cellulose, licorice powder, mannitol, sodium bicarbonate, calcium phosphate, calcium sulfate and the like.

結合剤の例としては、５ないし１０重量％デンプンのり液、１０ないし２０重量％アラビアゴム液又はゼラチン液、１ないし５重量％トラガント液、カルボキシメチルセルロース液、アルギン酸ナトリウム液、グリセリン等が挙げられる。 Examples of the binder include 5 to 10% by weight starch paste, 10 to 20% by weight gum arabic solution or gelatin solution, 1 to 5% by weight tragacanth solution, carboxymethyl cellulose solution, sodium alginate solution, glycerin and the like.

崩壊剤の例としては、でんぷん、炭酸カルシウム等が挙げられる。 Examples of disintegrants include starch and calcium carbonate.

滑沢剤の例としては、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、ステアリン酸カルシウム、精製タルク等が挙げられる。 Examples of the lubricant include magnesium stearate, stearic acid, calcium stearate, purified talc and the like.

甘味剤の例としては、ブドウ糖、果糖、転化糖、ソルビトール、キシリトール、グリセリン、単シロップ等が挙げられる。 Examples of sweeteners include glucose, fructose, invert sugar, sorbitol, xylitol, glycerin, simple syrup and the like.

界面活性剤の例としては、ラウリル硫酸ナトリウム、ポリソルベート８０、ソルビタンモノ脂肪酸エステル、ステアリン酸ポリオキシル４０等が挙げられる。 Examples of the surfactant include sodium lauryl sulfate, polysorbate 80, sorbitan monofatty acid ester, polyoxyl 40 stearate and the like.

懸濁化剤の例としては、アラビアゴム、アルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ベントナイト等が挙げられる。 Examples of the suspending agent include gum arabic, sodium alginate, sodium carboxymethyl cellulose, methyl cellulose, bentonite and the like.

乳化剤の例としては、アラビアゴム、トラガント、ゼラチン、ポリソルベート８０等が挙げられる。 Examples of emulsifiers include gum arabic, tragacanth, gelatin, polysorbate 80 and the like.

更に、本発明の医薬を上記の剤形に製造する場合には、所望により、製剤分野において通常用いられる着色剤、保存剤、芳香剤、矯味剤、安定剤、粘稠剤等を適量、添加することができる。 Furthermore, when the medicament of the present invention is produced in the above-mentioned dosage form, an appropriate amount of a coloring agent, a preservative, a fragrance, a flavoring agent, a stabilizer, a thickener, etc., which are usually used in the pharmaceutical field, are added as desired. can do.

本発明の医薬を経口投与する場合の投与量は、投与する患者の性別、症状、年齢、投与方法によって異なるが、通常、成人（体重６０ｋｇ）１日あたりの本発明の化合物の投与量が、１ｍｇ〜５００ｍｇであり、好ましくは１ｍｇ〜７０ｍｇである。上記１日あたりの量を一度にもしくは数回に分けて投与することができる。食前、食後、食間を問わないが食前が好ましい。また投与期間は特に限定されない。 The dose for oral administration of the medicament of the present invention varies depending on the sex, symptom, age, and administration method of the patient to be administered, but usually the dose of the compound of the present invention per day for an adult (body weight 60 kg) 1 mg to 500 mg, preferably 1 mg to 70 mg. The daily dose can be administered at once or in several divided doses. Before meals, after meals, and between meals, regardless of meals, is preferred. The administration period is not particularly limited.

本発明の医薬を非経口的に投与する場合は、通常、液剤（例えば注射剤）の形で投与する。その１回投与量は投与対象、対象臓器、症状、投与方法等によっても異なるが、例えば注射剤の形にして、通常体重１ｋｇあたり約１μｇ〜約１ｍｇ、好ましくは約１μｇ〜約２００μｇ、より好ましくは約１μｇ〜約１００μｇを静脈注射により投与するのが好都合である。
注射剤としては、静脈注射剤のほか、皮下注射剤、皮内注射剤、筋肉注射剤、点滴注射剤等が含まれ、また持続性製剤としては、イオントフォレシス経皮剤等が含まれる。かかる注射剤は自体公知の方法、すなわち、本発明の化合物を無菌の水性液もしくは油性液に溶解、懸濁又は乳化することによって調製される。
注射用の水性液としては生理食塩水、ブドウ糖やその他の補助薬を含む等張液（例えば、Ｄ−ソルビトール、Ｄ−マンニトール、塩化ナトリウム等）等が挙げられ、適当な溶解補助剤、例えばアルコール（例えばエタノール）、ポリアルコール（例えばプロピレングリコール、ポリエチレングリコール）、非イオン性界面活性剤（例えばポリソルベート８０、ＨＣＯ−５０）等と併用してもよい。
油性液としては、ゴマ油、大豆油等が挙げられ、溶解補助剤として安息香酸ベンジル、ベンジルアルコール等と併用してもよい。
また、緩衝剤（例えば、リン酸緩衝液、酢酸ナトリウム緩衝液）、無痛化剤（例えば、塩化ベンザルコニウム、塩酸プロカイン等）、安定剤（例えば、ヒト血清アルブミン、ポリエチレングリコール等）、保存剤（例えば、ベンジルアルコール、フェノール等）等と配合してもよい。 When the pharmaceutical of the present invention is administered parenterally, it is usually administered in the form of a liquid (for example, an injection). The single dose varies depending on the administration subject, target organ, symptom, administration method, and the like, but is usually about 1 μg to about 1 mg, preferably about 1 μg to about 200 μg, more preferably about 1 μg to 1 kg body weight in the form of injection, for example. Conveniently, about 1 μg to about 100 μg is administered by intravenous injection.
In addition to intravenous injections, subcutaneous injections, intradermal injections, intramuscular injections, intravenous infusions, and the like are included as injections, and sustained-release preparations include iontophoretic transdermal agents and the like. Such an injection is prepared by a method known per se, that is, by dissolving, suspending or emulsifying the compound of the present invention in a sterile aqueous or oily liquid.
Aqueous solutions for injection include isotonic solutions (eg, D-sorbitol, D-mannitol, sodium chloride, etc.) containing physiological saline, glucose and other adjuvants, and suitable solubilizers such as alcohol (For example, ethanol), polyalcohol (for example, propylene glycol, polyethylene glycol), nonionic surfactant (for example, polysorbate 80, HCO-50) and the like may be used in combination.
Examples of the oily liquid include sesame oil and soybean oil, which may be used in combination with benzyl benzoate, benzyl alcohol or the like as a solubilizer.
Buffers (eg, phosphate buffer, sodium acetate buffer), soothing agents (eg, benzalkonium chloride, procaine hydrochloride, etc.), stabilizers (eg, human serum albumin, polyethylene glycol, etc.), preservatives (For example, benzyl alcohol, phenol, etc.) may be blended.

本発明の医薬を経皮吸収型外用剤として投与（適用）する場合には、必要に応じて公知の添加剤等を混合して常法により、クリーム剤、液剤、ローション剤、乳剤、チンキ剤、軟膏剤、水性ゲル剤、油性ゲル剤、エアゾール剤、パウダー剤、シャンプー、石鹸等の外用製剤等とすることができる。
本発明の化合物は、そのままであるいは適当な添加剤を加えて医薬部外品等とすることができる。 When the medicament of the present invention is administered (applied) as a transdermally absorbable external preparation, known additives and the like are mixed as necessary, and creams, solutions, lotions, emulsions, tinctures are prepared in a conventional manner. And ointments, aqueous gels, oily gels, aerosols, powders, shampoos, soaps, and other external preparations.
The compound of the present invention can be made into a quasi drug or the like as it is or by adding an appropriate additive.

上記外用剤には、上記成分の他に水溶性成分、油性成分、粉末成分、界面活性剤、高分子成分、増粘剤、粘着性改良剤、被膜形成剤、ｐＨ調整剤、抗酸化剤、防腐剤、保存剤、賦形剤、保湿剤、皮膚保護剤、清涼化剤、香料、着色剤、キレート剤、潤沢剤、鎮痒剤、血行促進剤、収斂剤、組織修復促進剤、制汗剤、植物抽出成分、動物抽出成分、化粧品や医薬部外品等に必要な添加剤等を必要に応じて配合することができる。 In addition to the above components, the above external preparation includes a water-soluble component, an oily component, a powder component, a surfactant, a polymer component, a thickener, a tackifier, a film forming agent, a pH adjuster, an antioxidant, Preservatives, preservatives, excipients, moisturizers, skin protectants, refreshing agents, fragrances, coloring agents, chelating agents, lubricants, antipruritic agents, blood circulation promoters, astringents, tissue repair promoters, antiperspirants In addition, additives necessary for plant extract ingredients, animal extract ingredients, cosmetics, quasi drugs, and the like can be blended as necessary.

本発明の化合物は、該化合物の作用の増強又は該化合物の投与量の低減等を目的として、糖尿病治療剤、糖尿病性合併症治療剤、高脂血症治療剤、降圧剤、抗肥満剤、利尿剤、抗血栓剤等の薬剤と組み合わせて用いることができる。この際、本発明の化合物と併用薬剤の投与時期は限定されず、これらを投与対象に対し、同時に投与してもよいし、時間差をおいて投与してもよい。さらに、本発明の化合物と併用薬剤とは、それぞれの活性成分を含む２種類の製剤として投与されてもよいし、両方の活性成分を含む単一の製剤として投与されてもよい。 The compound of the present invention is a therapeutic agent for diabetes, a therapeutic agent for diabetic complications, a therapeutic agent for hyperlipidemia, an antihypertensive agent, an anti-obesity agent, for the purpose of enhancing the action of the compound or reducing the dose of the compound. It can be used in combination with drugs such as diuretics and antithrombotic agents. At this time, the administration timing of the compound of the present invention and the concomitant drug is not limited, and these may be administered simultaneously to the administration subject or may be administered with a time difference. Furthermore, the compound of the present invention and the concomitant drug may be administered as two types of preparations containing each active ingredient, or may be administered as a single preparation containing both active ingredients.

本発明のα-グルコシダーゼ阻害剤を含む食品も本発明に包含される（以下本発明の食品ともいう）。本発明の食品においては、サイカチマメゾウムシ由来成分のみからなる食品であってよい。 A food containing the α-glucosidase inhibitor of the present invention is also encompassed by the present invention (hereinafter also referred to as the food of the present invention). The food of the present invention may be a food consisting only of a component derived from the weevil weevil.

本発明の食品は、本発明の化合物を含む一般的な食品形態であれば如何なるものでも良い。例えば、それ自体、又はそれに適当な風味を加えてドリンク剤、例えば清涼飲料、粉末飲料とすることもできる。具体的には、ジュース、牛乳、菓子、ゼリー等に混ぜて飲食することができる。また、このような食品を保健機能食品として提供することも可能である。この保健機能食品には、糖尿病や肥満等に起因する症状の改善等の本発明の用途に用いるものであるという表示を付した飲食品、特に、特定保健用食品、栄養機能食品等も含まれる。 The food of the present invention may be any general food form containing the compound of the present invention. For example, it can be used as a drink agent, for example, a soft drink or a powdered drink, by itself or by adding an appropriate flavor thereto. Specifically, it can be mixed with juice, milk, confectionery, jelly, etc. to eat and drink. It is also possible to provide such food as a health functional food. This health functional food also includes foods and drinks that are labeled for use in the application of the present invention, such as improvement of symptoms caused by diabetes, obesity, etc., particularly foods for specified health use, nutritional functional foods, etc. .

さらに、本発明の食品を食品補助剤として利用することも可能である。食品補助剤として使用する場合、例えば錠剤、カプセル、散剤、顆粒、懸濁剤、チュアブル剤、シロップ剤等の形態に調製することができる。本発明における食品補助剤とは、食品として摂取されるもの以外に栄養を補助する目的で摂取されるものをいい、栄養補助剤、ダイエタリーサプリメント等もこれに含まれる。 Furthermore, the food of the present invention can be used as a food supplement. When used as a food supplement, it can be prepared in the form of tablets, capsules, powders, granules, suspensions, chewables, syrups and the like. The food supplement in the present invention refers to those taken for the purpose of supplementing nutrition in addition to those taken as food, and includes nutritional supplements, dietary supplements, and the like.

本発明の化合物を食品として摂取する場合、成人（体重６０ｋｇ）１日当たりの本発明の化合物の摂取量は、通常１ｍｇ〜３００ｍｇ程度、好ましくは１ｍｇ〜３０ｍｇ程度である。
上記の量を１日１回から数回に分けて食前に摂取することが好ましい。この場合、１日あたり摂取量、又は１回あたりの摂取量を１単位包装とすることができる。 When the compound of the present invention is ingested as a food, the intake amount of the compound of the present invention per day for an adult (body weight 60 kg) is usually about 1 mg to 300 mg, preferably about 1 mg to 30 mg.
It is preferable to take the above amount once a day or several times a day before meals. In this case, the daily intake or the intake per time can be made into one unit packaging.

以下、参考例、実施例及び試験例を挙げて本発明をさらに詳しく説明するが、実施例等は本発明の説明のために記載するものであり、本発明を限定するものではない。 EXAMPLES Hereinafter, although a reference example, an Example, and a test example are given and this invention is demonstrated in more detail, an Example etc. is described for description of this invention, and does not limit this invention.

（試薬・機器）
メタノール（和光純薬工業 MeOHと略記）、エタノール（和光純薬工業 EtOHと略記）、クロロホルム（和光純薬工業 CHCl₃と略記）、ヘキサン（和光純薬工業 Hexaneと記載）、酢酸エチル（和光純薬工業 EtOAcと略記）、トリメチルシリルジアゾメタン(東京化成工業)、α-グルコシダーゼ（オリエンタル酵母工業）、p-nitrophenyl-α-D-glucopyranoside（和光純薬工業）、フェニルピルビン酸(東京化成工業)、p-トルエンスルホン酸（和光純薬工業 TsOHと略記）、カルバミン酸ベンジル（和光純薬工業 NH₂-Cbzと略記）、1,2-イソプロピリデングリセロール（和光純薬工業）、t-ブチルクロロジフェニルシラン（和光純薬工業）、1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド（和光純薬工業 WSCと略記）、無水酢酸（和光純薬工業）、オクタン酸無水物（和光純薬工業）、ステアリン酸無水物（東京化成工業）、オレイン酸無水物（東京化成工業）、リノール酸（和光純薬工業）、安息香酸無水物（東京化成工業）、ソルビン酸（和光純薬工業）、ピリジン（和光純薬工業）、ベンゼン（和光純薬工業）、イミダゾール（和光純薬工業）、トリフルオロ酢酸（和光純薬工業 TFAと略記）、テトラヒロドフラン（和光純薬工業 THFと略記）、酢酸（和光純薬工業 AcOHと略記）、N,N-ジメチルアミノピリジン（和光純薬工業 DMAPと略記）、トリエチルアミン（和光純薬工業 Et₃Nと略記）、ジクロロメタン（和光純薬工業 CH₂Cl₂と略記）、テトラブチルアンモニウムフルオリド（東京化成工業 Bu₄NFと略記）、N,N'-ジシクロヘキシルカルボジイミド（和光純薬工業 DCCと略記）を使用した。シリカゲル薄層クロマトグラフィー（Thin layer chromatography，TLCと略記）プレートはメルク社製No. 1.05715を使用した。¹³C- 及び¹H-核磁気共鳴(nuclear magnetic resonance, NMRと略記)はJEOL AL400核磁気共鳴装置で測定した。紫外（UVと略記）スペクトルは日本分光V-630紫外可視分光光度計で測定した。赤外（IRと略記）スペクトルは堀場FT-720赤外分光光度計で測定した。電子衝撃質量スペクトル（EIMSと略記）および化学イオン化質量スペクトル（CIMSと略記）は島津GCMS-QP2010 Plus質量分析計で測定した。大気圧化学イオン化飛行時間型質量スペクトル（APCITOFMSと略記）は島津LCMS-IT-TOF質量分析計で測定した。 (Reagent / Equipment)
Methanol (abbreviated as Wako Pure Chemical Industries, MeOH), Ethanol (abbreviated as Wako Pure Chemical Industries, EtOH), Chloroform (abbreviated as WHC Pure Chemical Industries, CHCl ₃ ), Hexane (described as Wako Pure Chemical Industries, Hexane), Ethyl acetate (Wako Pure) Yakuhin (abbreviated as EtOAc), trimethylsilyldiazomethane (Tokyo Kasei Kogyo), α-glucosidase (Oriental Yeast Industry), p-nitrophenyl-α-D-glucopyranoside (Wako Pure Chemical Industries), phenylpyruvic acid (Tokyo Kasei Kogyo), p -Toluenesulfonic acid (abbreviated as Wako Pure Chemical Industries TsOH), benzyl carbamate (abbreviated as Wako Pure Chemical Industries NH ₂ -Cbz), 1,2-isopropylideneglycerol (Wako Pure Chemical Industries), t-butylchlorodiphenylsilane (Wako Pure Chemical Industries), 1-ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide (abbreviated as WSC Pure Chemical Industries WSC), acetic anhydride (Wako Pure Chemical Industries), octanoic anhydride (Wako) Yakuhin), stearic anhydride (Tokyo Kasei Kogyo), oleic anhydride (Tokyo Kasei Kogyo), linoleic acid (Wako Pure Chemical Industries), benzoic anhydride (Tokyo Kasei Kogyo), sorbic acid (Wako Pure Chemical Industries) ), Pyridine (Wako Pure Chemical Industries), benzene (Wako Pure Chemical Industries), imidazole (Wako Pure Chemical Industries), trifluoroacetic acid (abbreviated as Wako Pure Chemical Industries TFA), tetrahydrofuran (Wako Pure Chemical Industries THF) (Abbreviation), acetic acid (abbreviation Wako Pure Chemical Industries AcOH), N, N-dimethylaminopyridine (abbreviation Wako Pure Chemical Industries DMAP), triethylamine (abbreviation Wako Pure Chemical Industries Et ₃ N), dichloromethane (Wako Pure Chemical Industries) CH ₂ Cl ₂ ), tetrabutylammonium fluoride (Tokyo Chemical Industry Bu ₄ NF), N, N′-dicyclohexylcarbodiimide (Wako Pure Chemical Industries DCC) were used. As a silica gel thin layer chromatography (abbreviated as TLC) plate, Merck No. 1.05715 was used. ¹³ C- and ¹ H-nuclear magnetic resonance (abbreviated as NMR) were measured with a JEOL AL400 nuclear magnetic resonance apparatus. The ultraviolet (abbreviated as UV) spectrum was measured with JASCO V-630 UV-visible spectrophotometer. Infrared (abbreviated as IR) spectra were measured with a Horiba FT-720 infrared spectrophotometer. Electron impact mass spectra (abbreviated as EIMS) and chemical ionization mass spectra (abbreviated as CIMS) were measured with a Shimadzu GCMS-QP2010 Plus mass spectrometer. Atmospheric pressure chemical ionization time-of-flight mass spectrum (abbreviated as APCITOFMS) was measured by Shimadzu LCMS-IT-TOF mass spectrometer.

（参考例１）
＜サイカチマメゾウムシ抽出物中の活性成分の調製＞
１．材料
サイカチマメゾウムシ(Bruchidius dorsalis)の幼虫を用いた (図1)。 (Reference Example 1)
<Preparation of the active ingredient in the weevil weevil extract>
1. Materials The larvae of Bruchidius dorsalis were used (Fig. 1).

２．活性脂質１の抽出と単離
2009年春にサイカチ浜で採集したサイカチ種子中から、サイカチマメゾウムシ(Bruchidius dorsalis) の幼虫3.4 g (126匹)を採取した。幼虫をMeOHに浸漬し、MeOH抽出物228.6 mgを得た。MeOH抽出物をCHCl₃に転溶してクロロホルム可溶性画分128 mgを得た。クロロホルム可溶性画分 (127 mg)をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（Hexane-EtOAc、EtOAc:0→100％）で分画し、活性脂質１(13 mg)を単離した。 2. Extraction and isolation of active lipid 1
3.4 g (126) of larvae of the hornet weevil (Bruchidius dorsalis) were collected from the honeybee seeds collected at Saikai Beach in the spring of 2009. The larvae were immersed in MeOH to obtain 228.6 mg of MeOH extract. The MeOH extract was dissolved in CHCl ₃ to obtain a chloroform-soluble fraction of 128 mg. The chloroform-soluble fraction (127 mg) was fractionated by silica gel column chromatography (Hexane-EtOAc, EtOAc: 0 → 100%) to isolate active lipid 1 (13 mg).

活性脂質１： UV (Hexane) 309 (ε 8630), 222 nm (ε3660)、IR (film) 3483, 3373 (N-H), 1743, 1720 (C=O), 1635 (C=C), 1597, 1494 (aromatic ring).
¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ_H0.86 (t, J = 7.0 Hz, Me x 2), 1.25, 1.61, 1.98, 2.32 (m, CH₂), 4.20 (dd, J = 12.1 and 5.9 Hz, H-1), 4.34 (dd, J = 12.1 and 6.2 Hz, H-3), 4.35 (dd, J = 12.1 and 4.4 Hz, H-1), 4.43 (dd, J = 12.1 and 4.0 Hz, H-3), 5.37 (m, H-2), 6.43 (s, H-3’’’), 7.21 (t, J = 7.7 Hz, H-7’’’), 7.36 (t, J = 7.7 Hz, H-6’’’ and H-8’’’), 7.42 (t, J = 7.7 Hz, H-5’’’ and H-9’’’); ¹³C NMR (100 MHz, CDCl₃) δ_C 173.0 (C), 172.6 (C), 165.1 (C), 135.8 (C), 131.5 (C), 130.1 (CH), 129.9 (CH), 129.6 (CH), 128.7 (CH), 128.2 (CH), 127.9 (CH), 127.7 (CH), 126.9 (CH), 109.6 (CH), 68.8 (CH), 63.5 (CH₂), 62.1 (CH₂), 34.3-22.8 (CH₂), 14.3 (CH₃). EIMS m/z 765, 739 (M⁺); CIMS m/z 766, 740 [M+H]⁺; HR-APCITOFMS m/z 766.5970 [M+H]⁺ (calcd for C₄₈H₈₀NO₆: 766.5980), m/z 740.5818 [M+H]⁺ (calcd for C₄₆H₇₈NO₆: 740.5824). Active lipid 1: UV (Hexane) 309 (ε 8630), 222 nm (ε3660), IR (film) 3483, 3373 (NH), 1743, 1720 (C = O), 1635 (C = C), 1597, 1494 (aromatic ring).
¹ H NMR (400 MHz, CDCl ₃ ) δ _H 0.86 (t, J = 7.0 Hz, Me x 2), 1.25, 1.61, 1.98, 2.32 (m, CH ₂ ), 4.20 (dd, J = 12.1 and 5.9 Hz , H-1), 4.34 (dd, J = 12.1 and 6.2 Hz, H-3), 4.35 (dd, J = 12.1 and 4.4 Hz, H-1), 4.43 (dd, J = 12.1 and 4.0 Hz, H -3), 5.37 (m, H-2), 6.43 (s, H-3 '''), 7.21 (t, J = 7.7 Hz, H-7'''), 7.36 (t, J = 7.7 Hz , H-6 '''andH-8'''), 7.42 (t, J = 7.7 Hz, H-5 '''andH-9'''); ¹³ C NMR (100 MHz, CDCl ₃ ) δ _C 173.0 (C), 172.6 (C), 165.1 (C), 135.8 (C), 131.5 (C), 130.1 (CH), 129.9 (CH), 129.6 (CH), 128.7 (CH), 128.2 (CH ), 127.9 (CH), 127.7 (CH), 126.9 (CH), 109.6 (CH), 68.8 (CH), 63.5 (CH ₂ ), 62.1 (CH ₂ ), 34.3-22.8 (CH ₂ ), 14.3 (CH ₃ ). EIMS m / z 765, 739 (M ⁺ ); CIMS m / z 766, 740 [M + H] ⁺ ; HR-APCITOFMS m / z 766.5970 [M + H] ⁺ (calcd for C ₄₈ H ₈₀ NO ₆ : 766.5980), m / z 740.5818 [M + H] ⁺ (calcd for C ₄₆ H ₇₈ NO ₆ : 740.5824).

３．脂肪酸組成分析
活性脂質１に1 Mの水酸化ナトリウムを加え、室温で一晩反応させケン化を行った。溶媒を除いて、1 Mの塩酸を加えて酸性にし、EtOAc-H₂Oで溶媒分画を行った。EtOAc層は飽和食塩水を加え、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後ろ過し、濃縮乾固した。得られた残渣をMeOH (0.1 mL)に溶解し、0.6 Mトリメチルシリルジアゾメタンのヘキサン溶液を0.1 mL加えて室温で30分間反応させメチル化を行った。標品の脂肪酸メチルとのco-GLC分析およびGC-MS分析により、活性脂質１の脂肪酸組成を決定した。 3. Fatty acid composition analysis 1 M sodium hydroxide was added to the active lipid 1, and the mixture was reacted overnight at room temperature for saponification. The solvent was removed, the solution was acidified with 1 M hydrochloric acid, and the solvent was fractionated with EtOAc-H ₂ O. To the EtOAc layer was added saturated brine, dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, and concentrated to dryness. The obtained residue was dissolved in MeOH (0.1 mL), 0.1 mL of 0.6 M trimethylsilyldiazomethane in hexane was added, and reacted at room temperature for 30 minutes for methylation. The fatty acid composition of the active lipid 1 was determined by co-GLC analysis and GC-MS analysis with the standard fatty acid methyl.

４．α-グルコシダーゼ阻害活性試験
175 μLのリン酸バッファー(K₂HPO₄とKH₂PO₄をそれぞれ純水に溶かした後混合し、0.1 M, pH6.8に調製)、サンプル溶液25 μL、α-グルコシダーゼ 25 μL (リン酸バッファーで250 mU/mLに調製)、を混合し室温で10分置き、p-nitrophenyl-α-D-glucopyranoside 25 μL (リン酸バッファーで10 mMに調製)を加えた。Total volume は250 μLであるため、サンプルの終濃度は原液濃度の10分の1となる。反応液を37 ℃で15分反応させた後、Na₂CO₃ 50 μL (純水で1 Mに調製)を加え反応を停止させ、マイクロプレートリーダーで415 nmの吸光度を測定した。ポジティブコントロールとして抗糖尿病薬であるアカルボース、ネガティブコントロールとしてエタノールを使用した。 4). α-Glucosidase inhibitory activity test
175 μL of phosphate buffer (K ₂ HPO ₄ and KH ₂ PO ₄ dissolved in pure water and then mixed to prepare 0.1 M, pH 6.8), sample solution 25 μL, α-glucosidase 25 μL (phosphate Prepared in a buffer to 250 mU / mL), mixed at room temperature for 10 minutes, and 25 μL of p-nitrophenyl-α-D-glucopyranoside (prepared to 10 mM with a phosphate buffer) was added. Since the total volume is 250 μL, the final concentration of the sample is 1/10 of the stock solution concentration. After reacting the reaction solution at 37 ° C. for 15 minutes, 50 μL of Na ₂ CO ₃ (prepared to 1 M with pure water) was added to stop the reaction, and the absorbance at 415 nm was measured with a microplate reader. Acarbose, an antidiabetic drug, was used as a positive control, and ethanol was used as a negative control.

＜サイカチマメゾウムシ抽出物中の活性成分の同定＞
１．抽出
サイカチマメゾウムシの幼虫3.4 g (126匹)をMeOHに浸漬し、MeOH抽出物を得た。MeOH抽出物をクロロホルムに転溶してクロロホルム可溶性画分を得た。クロロホルム可溶性画分は、0.25 mg/mL でα-グルコシダーゼに対して30% の阻害活性を示した。 <Identification of active ingredient in extract of weevil weevil>
1. Extraction The weevil weevil larvae 3.4 g (126 animals) were immersed in MeOH to obtain an MeOH extract. The MeOH extract was transferred to chloroform to obtain a chloroform soluble fraction. The chloroform soluble fraction showed 30% inhibitory activity against α-glucosidase at 0.25 mg / mL.

２．クロロホルム可溶性画分のTLC分析
クロロホルム可溶性画分は、シリカゲルTLC（Hexane:EtOAc = 9:1）上で、UV吸収（254 nm）を示すスポットを与えた。UV吸収を有するこのTLCスポットは、ABTSラジカルのMeOH溶液を噴霧すると青緑色の背景中に白いスポットを呈したことから、ABTSラジカル消去活性を示すことがわかった。このABTSラジカル消去活性成分を活性脂質１とした。
活性脂質１のスポットは、ドラーゲンドルフ試薬を噴霧すると陰性であったが、ニンヒドリン試薬を噴霧すると青紫色の発色が見られた。これらのことから、活性脂質１は、共役系構造を有していることならびに、1級アミン構造を有していることが示唆された。 2. TLC analysis of the chloroform soluble fraction The chloroform soluble fraction gave a spot showing UV absorption (254 nm) on silica gel TLC (Hexane: EtOAc = 9: 1). This TLC spot with UV absorption showed a white spot in a blue-green background when sprayed with a MeOH solution of ABTS radicals, indicating ABTS radical scavenging activity. This ABTS radical scavenging active ingredient was designated as active lipid 1.
The spot of the active lipid 1 was negative when the Dragendorf reagent was sprayed, but a blue-violet color was observed when the ninhydrin reagent was sprayed. These facts suggested that the active lipid 1 has a conjugated structure and a primary amine structure.

３．活性脂質１の単離および構造決定
クロロホルム可溶性画分をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（Hexane-EtOAc、EtOAc: 0-100％）で分画し、活性脂質１を得た。活性脂質１は、UVスペクトルにおいて309 nm に吸収極大を示したことから、共役系を有することが確認された。IRスペクトルからは、N-H（3483, 3373 cm^-1）、C=O（1743, 1720 cm^-1）、C=C（1635 cm^-1）ならびに芳香環（1597, 1494 cm^-1）の存在が示唆された。
活性脂質１は、EIMSでm/z 765および739 に分子イオンピークを与えた。CIMSでは、図２に示すように、m/z 766および740に [M+H]⁺ イオンピークが観測された。これらの結果から、活性脂質１は、分子量765および739を主成分としていることがわかった。窒素則に基づいて、活性脂質１には窒素が奇数個含まれていることが示された。さらに高分解能APCITOFMSで観測された擬分子イオンm/z 766.5970 [M+H]⁺(calcd for C₄₈H₈₀NO₆: 766.5980)およびm/z 740.5818 [M+H]⁺ (calcd for C₄₆H₇₈NO₆: 740.5824)から、分子量765および739の成分は、それぞれC₄₈H₇₉NO₆およびC₄₆H₇₇NO₆の分子式を有することが示された。 3. Isolation and structure determination of active lipid 1 The chloroform-soluble fraction was fractionated by silica gel column chromatography (Hexane-EtOAc, EtOAc: 0-100%) to obtain active lipid 1. Since the active lipid 1 showed an absorption maximum at 309 nm in the UV spectrum, it was confirmed to have a conjugated system. From the IR spectrum, the presence of NH (3483, 3373 cm ^-1 ), C = O (1743, 1720 cm ^-1 ), C = C (1635 cm ^-1 ) and aromatic rings (1597, 1494 cm ^-1 ) It was suggested.
Active lipid 1 gave molecular ion peaks at m / z 765 and 739 by EIMS. In CIMS, as shown in FIG. 2, [M + H] ⁺ ion peaks were observed at m / z 766 and 740. From these results, it was found that the active lipid 1 was mainly composed of molecular weights 765 and 739. Based on the nitrogen rule, it was shown that the active lipid 1 contains an odd number of nitrogen. Pseudomolecular ions m / z 766.5970 [M + H] ⁺ (calcd for C ₄₈ H ₈₀ NO ₆ : 766.5980) and m / z 740.5818 [M + H] ⁺ (calcd for C ₄₆ H) observed with higher resolution APCITOFMS ₇₈ NO ₆ : 740.5824) showed that components with molecular weights of 765 and 739 have molecular formulas of C ₄₈ H ₇₉ NO ₆ and C ₄₆ H ₇₇ NO ₆ respectively.

活性脂質１の¹H NMR (CDCl₃) および¹³C NMR (CDCl₃) スペクトルからは、不飽和結合を含むアシル基、グリセリン構造およびベンゼン環の存在が示された。さらにHH COSY, HMQCおよびHMBCスペクトルの解析により、活性脂質１は、下記に示した部分構造を有していることがわかった（矢印はHMBC相関を示す）。 The ¹ H NMR (CDCl ₃ ) and ¹³ C NMR (CDCl ₃ ) spectra of the active lipid 1 showed the presence of an acyl group containing an unsaturated bond, a glycerin structure and a benzene ring. Furthermore, analysis of HH COZY, HMQC and HMBC spectra revealed that the active lipid 1 has the partial structure shown below (arrows indicate HMBC correlation).

さらに、２次元NMRデータの詳細な解析、上記の質量分析の結果および文献記載のデヒドロフェニルアラニンエチルエステルのNMRデータ（Tetrahedron, 2010, 66, 329-333）との比較等により、活性脂質１の全体構造を下記のように決定した。 In addition, the analysis of two-dimensional NMR data, the results of the above-mentioned mass spectrometry and comparison with NMR data of dehydrophenylalanine ethyl ester described in the literature (Tetrahedron, 2010, 66, 329-333) The structure was determined as follows.

４．活性脂質１の構成脂肪酸分析
活性脂質１をケン化後、イオン交換樹脂（H⁺型）処理を行って遊離脂肪酸を得た。得られた遊離脂肪酸をトリメチルシリルジアゾメタンでメチル化した後、GLCおよびGC-MSにより脂肪酸組成分析を行った。その結果、活性脂質１の構成脂肪酸組成は、Table 2 に示すように、パルミチン酸（16:0）が22.5%、ステアリン酸（18:0）が1.6%、オレイン酸（18:1）が74.0%、リノール酸（18:2）が1.9%であることが分かった。 4). Analysis of constituent fatty acid of active lipid 1 After saponification of active lipid 1, ion exchange resin (H ⁺ type) treatment was performed to obtain free fatty acid. After the obtained free fatty acid was methylated with trimethylsilyldiazomethane, fatty acid composition analysis was performed by GLC and GC-MS. As a result, as shown in Table 2, the fatty acid composition of active lipid 1 is 22.5% palmitic acid (16: 0), 1.6% stearic acid (18: 0), 74.0% oleic acid (18: 1). %, Linoleic acid (18: 2) was found to be 1.9%.

以上のことから、活性脂質１の構造は、下記に示すように、オレイン酸（18:1；74.0%）、パルミチン酸（16:0；22.5%）、ステアリン酸（18:0；1.6%）およびリノール酸（18:2；1.9%）を構成成分にもつ1,2-ジアシルグリセロ-3-デヒドロフェニルアラニンエステルであることが明らかとなった。 From the above, the structure of the active lipid 1 is as follows: oleic acid (18: 1; 74.0%), palmitic acid (16: 0; 22.5%), stearic acid (18: 0; 1.6%) And 1,2-diacylglycero-3-dehydrophenylalanine ester having linoleic acid (18: 2; 1.9%) as a constituent component.

５．活性脂質１のα-グルコシダーゼ阻害活性試験
活性脂質１は、α-グルコシダーゼ阻害活性を示した（図３）。そのIC₅₀値は、0.0085 mg/mLであった。抗糖尿病薬として使用されるアカルボースのIC₅₀値が0.37 mg/mLであることから、活性脂質１の阻害活性は極めて強いものであることが明らかとなった。 5. Α-Glucosidase Inhibitory Activity Test of Active Lipid 1 Active lipid 1 showed α-glucosidase inhibitory activity (FIG. 3). Its IC ₅₀ value was 0.0085 mg / mL. Since acarbose IC ₅₀ values to be used as an anti-diabetic agent is 0.37 mg / mL, the inhibitory activity of the active lipid 1 it was found that is extremely strong.

６．活性脂質１のABTSラジカル消去活性試験
活性脂質１は、ABTSラジカル消去活性を示した。そのSC₅₀値は、8.5 μg/mLであった。 6). ABTS radical scavenging activity test of active lipid 1 Active lipid 1 showed ABTS radical scavenging activity. Its SC ₅₀ value was 8.5 μg / mL.

(実施例１)
フェニルピルビン酸（1.7 g）のベンゼン溶液（100 mL）に、p-トルエンスルホン酸（TsOH）（20 mg）および１当量のカルバミン酸ベンジル（NH₂-Cbz）を加えて脱水しながら4時間還流した。室温で一晩結晶化し、結晶を吸引ろ過により集めN-Cbz-デヒドロフェニルアラニン（N-Cbz-Δ-Phe）の白色結晶（1.5 g）を得た。また、1,2-イソプロピリデングリセロール（5 g）のCH₂Cl₂溶液（50 mL）を１当量のイミダゾール存在下、１当量のt-ブチルクロロジフェニルシランと反応させてTBDPS誘導体とした。反応混合物をCHCl₃と水で分配し、CHCl₃層を無水Na₂SO₄で乾燥後、MeOH（20 mL）およびTFA（5 mL）を加えて加水分解した。溶媒を減圧留去後、CHCl₃と水で分配し、CHCl₃層を無水Na₂SO₄で乾燥し、濃縮した。ヘキサンを加えて結晶化し、吸引ろ過により1-O-TBDPS-グリセロール（6.5 g）を白色粉末として得た。このうち0.6 gをCH₂Cl₂（5 mL）に溶解し、DMAP存在下、無水酢酸（2 mL）と反応させ、反応混合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（CHCl₃）で精製して、1,2-ジアセチルグリセロールの3-O-TBDPS誘導体（400 mg）とした。これを無水THF（20 mL）に溶解後、0 ℃で酢酸（0.1 mL）および1M Bu₄NFのTHF溶液（20 mL）を加えて2 h撹拌しTBDPS基を脱離させた。反応混合物を濃縮後、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（EtOAc-hexane; 1:4）で精製して、1,2-ジアセチルグリセロール（120 mg）を得た。1,2-ジアセチルグリセロールのピリジン溶液（1 mL）を、DMAP（90 mg）、TsOH（80 mg）およびWSC（100 mg）存在下でN-Cbz-Δ-Phe（180 mg）と反応させて、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（EtOAc-hexane; 1:4）で精製し、1,2-ジアセチルグリセロ-3-デヒドロフェニルアラニンエステル（10 mg）を得た。 (Example 1)
To a benzene solution (100 mL) of phenylpyruvic acid (1.7 g), p-toluenesulfonic acid (TsOH) (20 mg) and 1 equivalent of benzyl carbamate (NH ₂ -Cbz) were added and refluxed for 4 hours while dehydrating. did. Crystallization was performed overnight at room temperature, and the crystals were collected by suction filtration to obtain white crystals (1.5 g) of N-Cbz-dehydrophenylalanine (N-Cbz-Δ-Phe). Further, CH ₂ Cl ₂ solution (50 mL) one equivalent of imidazole presence of 1,2-isopropylidene glycerol (5 g), was TBDPS derivative is reacted with 1 equivalent of t- butylchlorodiphenylsilane. The reaction mixture was partitioned between CHCl ₃ and water, and the CHCl ₃ layer was dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ and then hydrolyzed with MeOH (20 mL) and TFA (5 mL). The solvent was distilled off under reduced pressure, and then partitioned between CHCl ₃ and water, and the CHCl ₃ layer was dried over anhydrous Na ₂ SO ₄ and concentrated. Hexane was added to crystallize, and 1-O-TBDPS-glycerol (6.5 g) was obtained as a white powder by suction filtration. 0.6 g of this was dissolved in CH ₂ Cl ₂ (5 mL), reacted with acetic anhydride (2 mL) in the presence of DMAP, and the reaction mixture was purified by silica gel column chromatography (CHCl ₃ ). -3-O-TBDPS derivative of diacetylglycerol (400 mg). This was dissolved in anhydrous THF (20 mL), acetic acid (0.1 mL) and 1M Bu ₄ NF in THF (20 mL) were added at 0 ° C., and the mixture was stirred for 2 h to desorb the TBDPS group. The reaction mixture was concentrated and purified by silica gel column chromatography (EtOAc-hexane; 1: 4) to obtain 1,2-diacetylglycerol (120 mg). Reaction of 1,2-diacetylglycerol in pyridine (1 mL) with N-Cbz-Δ-Phe (180 mg) in the presence of DMAP (90 mg), TsOH (80 mg) and WSC (100 mg) Purification by silica gel column chromatography (EtOAc-hexane; 1: 4) gave 1,2-diacetylglycero-3-dehydrophenylalanine ester (10 mg).

(実施例２)
実施例１において、無水酢酸の代わりにオクタン酸無水物を用いたこと以外は同様の方法を用いて1,2-ジオクトイルグリセロ-3-デヒドロフェニルアラニンエステル（15 mg）を得た。 (Example 2)
In Example 1, 1,2-dioctoylglycero-3-dehydrophenylalanine ester (15 mg) was obtained using the same method except that octanoic anhydride was used instead of acetic anhydride.

(実施例３)
実施例１において、無水酢酸の代わりにステアリン酸無水物を用いたこと以外は同様の方法を用いて1,2-ジステアロイルグリセロ-3-デヒドロフェニルアラニンエステル（12 mg）を得た。 Example 3
In Example 1, 1,2-distearoylglycero-3-dehydrophenylalanine ester (12 mg) was obtained using the same method except that stearic anhydride was used instead of acetic anhydride.

(実施例４)
実施例１において、無水酢酸の代わりにオレイン酸無水物を用いたこと以外は同様の方法を用いて1,2-ジオレオイルグリセロ-3-デヒドロフェニルアラニンエステル（10 mg）を得た。 Example 4
In Example 1, 1,2-dioleoylglycero-3-dehydrophenylalanine ester (10 mg) was obtained using the same method except that oleic anhydride was used instead of acetic anhydride.

(実施例５)
実施例１において、無水酢酸の代わりにDCCおよびリノール酸を用いたこと以外は同様の方法を用いて1,2-ジリノロイルグリセロ-3-デヒドロフェニルアラニンエステル（8 mg）を得た。 (Example 5)
In Example 1, 1,2-dilinoloylglycero-3-dehydrophenylalanine ester (8 mg) was obtained using the same method except that DCC and linoleic acid were used instead of acetic anhydride.

(実施例６)
実施例４における合成中間体である1,2-ジオクトイルグリセロールの3-O-TBDPS誘導体（400 mg）の無水THF（20 mL）溶液に、0 ℃ではなく室温で酢酸（0.1 mL）および1M Bu₄NFのTHF溶液（20 mL）を加えて2 h撹拌し、TBDPS基を脱離させるとともにアシル基を転位させた。反応混合物を濃縮後、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（EtOAc-hexane; 1:4）で精製して、1,3-ジオクトイルグリセロール（100 mg）を得た。1,3-ジオクトイルグリセロールのピリジン溶液（1 mL）を、DMAP（90 mg）、TsOH（80 mg）およびWSC（100 mg）存在下でN-Cbz-Δ-Phe（180 mg）と反応させて、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（EtOAc-hexane; 1:4）で精製し、1,3-ジオクトイルグリセロ-3-デヒドロフェニルアラニンエステル（7 mg）を得た。 Example 6
To a solution of 1,2-dioctoylglycerol 3-O-TBDPS derivative (400 mg) as an intermediate in Example 4 in anhydrous THF (20 mL) at room temperature instead of 0 ° C., acetic acid (0.1 mL) and A THF solution (20 mL) of 1M Bu ₄ NF was added and stirred for 2 h to remove the TBDPS group and rearrange the acyl group. The reaction mixture was concentrated and purified by silica gel column chromatography (EtOAc-hexane; 1: 4) to obtain 1,3-dioctoylglycerol (100 mg). Reaction of 1,3-dioctoylglycerol in pyridine (1 mL) with N-Cbz-Δ-Phe (180 mg) in the presence of DMAP (90 mg), TsOH (80 mg) and WSC (100 mg) And purified by silica gel column chromatography (EtOAc-hexane; 1: 4) to obtain 1,3-dioctoylglycero-3-dehydrophenylalanine ester (7 mg).

(実施例７)
実施例６において、1,2-ジオクトイルグリセロールの3-O-TBDPS誘導体の代わりに、実施例５で調製した1,2-ジリノロイルグリセロールの3-O-TBDPS誘導体を用いたこと以外は同様の方法を用いて1,3-ジリノロイルグリセロ-3-デヒドロフェニルアラニンエステル（4 mg）を得た。 (Example 7)
In Example 6, except that the 3-O-TBDPS derivative of 1,2-dilinoloylglycerol prepared in Example 5 was used instead of the 3-O-TBDPS derivative of 1,2-dioctoylglycerol. Using a similar method, 1,3-dilinoloylglycero-3-dehydrophenylalanine ester (4 mg) was obtained.

(比較例１)
実施例１において、無水酢酸の代わりに安息香酸無水物を用いたこと以外は同様の方法を用いて1,2-ジベンゾイルグリセロ-3-デヒドロフェニルアラニンエステル（10 mg）を得た。 (Comparative Example 1)
In Example 1, 1,2-dibenzoylglycero-3-dehydrophenylalanine ester (10 mg) was obtained using the same method except that benzoic anhydride was used instead of acetic anhydride.

(比較例２)
実施例５において、リノール酸の代わりにソルビン酸を用いたこと以外は同様の方法を用いて1,2-ジソルボイルグリセロ-3-デヒドロフェニルアラニンエステル（8 mg）を得た。 (Comparative Example 2)
In Example 5, 1,2-disorboylglycero-3-dehydrophenylalanine ester (8 mg) was obtained using the same method except that sorbic acid was used instead of linoleic acid.

(試験例１)
実施例及び比較例で得られた1,2-及び1,3-ジアシルグリセロ-3-デヒドロフェニルアラニンエステル類について、α-Glucosidase阻害活性試験を行った。
175 μLのリン酸バッファー(K₂HPO₄とKH₂PO₄をそれぞれ純水に溶かした後混合し、0.1 M, pH6.8に調製)、サンプル溶液25 μL、α-グルコシダーゼ 25 μL (リン酸バッファーで250 mU/mlに調製)を混合し室温で10分置き、p-nitrophenyl-α-D-glucopyranoside 25 μL (リン酸バッファーで10 mMに調製)を加えた（サンプルの終濃度は原液濃度の10分の1）。
反応液を37 ℃で15分反応させた後、Na₂CO₃ 50 μL (純水で1 Mに調製)を加え反応を停止させ、マイクロプレートリーダーで415 nmの吸光度を測定した。ネガティブコントロールとしてエタノールを使用した。
阻害活性がみられた化合物について、α-Glucosidase阻害率の濃度依存性を図４及び図５に示した。また、合成化合物の構造とそれぞれの化合物のα-Glucosidase阻害に対する50％阻害濃度（IC₅₀）を表３に示した。 (Test Example 1)
An α-Glucosidase inhibitory activity test was performed on the 1,2- and 1,3-diacylglycero-3-dehydrophenylalanine esters obtained in Examples and Comparative Examples.
175 μL of phosphate buffer (K ₂ HPO ₄ and KH ₂ PO ₄ dissolved in pure water and then mixed to prepare 0.1 M, pH 6.8), sample solution 25 μL, α-glucosidase 25 μL (phosphate (Prepared to 250 mU / ml with buffer) and left at room temperature for 10 minutes, and then added 25 μL of p-nitrophenyl-α-D-glucopyranoside (prepared to 10 mM with phosphate buffer). 1/10).
After reacting the reaction solution at 37 ° C. for 15 minutes, 50 μL of Na ₂ CO ₃ (prepared to 1 M with pure water) was added to stop the reaction, and the absorbance at 415 nm was measured with a microplate reader. Ethanol was used as a negative control.
FIG. 4 and FIG. 5 show the concentration dependence of the α-Glucosidase inhibition rate for the compounds having inhibitory activity. Further, Table 3 shows the structures of the synthesized compounds and the 50% inhibitory concentration (IC ₅₀ ) of each compound against α-Glucosidase inhibition.

Claims

Formula (I):
[Wherein A is an acyl residue of an amino acid, and B is
(Wherein R ¹ and R ² may be the same or different and are each independently an acyl residue of a fatty acid)]
Or a salt thereof.

The compound or a salt thereof according to claim 1, wherein A is an acyl residue of a 2,3-dehydro form of an amino acid.

The compound or a salt thereof according to claim 1 or 2, wherein the amino acid is an α-amino acid.

A is
The compound according to any one of claims 1 to ³ , wherein R ³ is a hydrogen atom, a hydroxyl group, an amino group or a halogen atom.

The compound or a salt thereof according to claim 4, wherein R ³ is a hydrogen atom.

The compound according to any one of claims 1 to 5, wherein R ¹ and R ² may be the same or different and are each independently an acyl residue of a fatty acid having 2 to 30 carbon atoms.

R ¹ and ^{R 2,} A compound according to claim 1 is an acyl residue of a fatty acid having 2 to 20 carbon atoms.

The compound or a salt thereof according to any one of claims 1 to 7, wherein the compound represented by the formula (I) or a salt thereof is derived from the weevil weevil.

The compound or salt thereof according to any one of claims 1 to 8, which is an α-glucosidase inhibitor.

A medicament comprising the α-glucosidase inhibitor according to claim 9.

The medicament according to claim 10, which is a preventive or therapeutic agent for diabetes, diabetic complications and / or obesity.

A food comprising the α-glucosidase inhibitor according to claim 9.

The food according to claim 12, wherein the food is a health functional food or a dietary supplement.

The food according to claim 13, wherein the health functional food is a food for specified health use or a nutritional functional food.