JP2010024200A - Promotor for synthesizing biogenic collagen and food, drink, cosmetic and quasi-drug for promoting synthesis of biogenic collagen - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は、生体内におけるコラーゲンの合成促進剤に関する。また、本発明は、生体コラーゲン合成促進用飲食品、生体コラーゲン合成促進用化粧品、生体コラーゲン合成用医薬部外品、又は血管、関節痛、若しくは皮膚治療薬に関する。 The present invention relates to a collagen synthesis promoter in vivo. In addition, the present invention relates to a food and drink for promoting biosynthesis of living collagen, a cosmetic for promoting synthesis of bio-collagen, a quasi-drug for biosynthesis of bio-collagen, or a blood vessel, joint pain, or skin treatment drug.
コラーゲンは生体内のタンパク質の約３０％を占め、皮膚、血管そして骨に多く存在するタンパク質である。また、このコラーゲンタンパクは、加齢とともに減少することから血管の脆弱化や皮膚の弾力性・柔軟性の減少などの一因と考えられている。これまで、コラーゲンの摂取は、消化酵素による分解が困難であるという性質を有するために、栄養面において大きな利用価値が見出せないとされてきた。しかしながら、近年、コラーゲンの摂取がコラーゲン合成促進効果や新陳代謝促進（特許文献１）効果を有し、また関節症治療用薬剤等として利用することができる（特許文献２）という報告がされてきている。さらに、コラーゲンタンパクもしくはその加水分解物の経口摂取による皮膚の新陳代謝促進に関する特許（特許文献３）も開示され、主に美容向けの健康食品が多数販売されている。 Collagen accounts for about 30% of proteins in the body and is abundant in skin, blood vessels and bones. In addition, since this collagen protein decreases with aging, it is considered to be one of the causes such as weakening of blood vessels and reduction of skin elasticity and flexibility. Until now, it has been considered that the intake of collagen has a property that it is difficult to be digested by digestive enzymes, so that it cannot find great utility value in terms of nutrition. However, in recent years, it has been reported that intake of collagen has an effect of promoting collagen synthesis and metabolism (Patent Document 1) and can be used as a drug for treating arthropathy (Patent Document 2). . Furthermore, a patent (Patent Document 3) relating to promotion of skin metabolism by oral intake of collagen protein or a hydrolyzate thereof is also disclosed, and many health foods mainly for beauty are sold.
未処理のコラーゲンおよびゼラチンはタンパク質であるため抗原性を有し、アレルギー体質のヒトの摂取には問題がある。そのため、コラゲナーゼによってコラーゲンを低分子化することにより抗原性をなくし、アレルギー患者向けのタンパク質源や輸液製剤成分としても利用されている（特許文献４）。 Since untreated collagen and gelatin are proteins, they have antigenicity, and there is a problem in the intake of humans who are allergic. Therefore, the antigenicity is lost by reducing the molecular weight of collagen with collagenase, and it is also used as a protein source and infusion preparation component for allergic patients (Patent Document 4).
また、特許文献５には、ウシ由来のコラゲナーゼによるコラーゲンの分解産物に関して、生成するトリペプタチドのＧｌｙ−Ｐｒｏ−Ｈｙｐがもっとも多くコラーゲン合成促進効果を有するペプチドとして開示されている。 Further, Patent Document 5 discloses that the peptide produced by the degradation of collagen by bovine-derived collagenase is Gly-Pro-Hyp, which is the most produced tripeptide, as a peptide having an effect of promoting collagen synthesis.
ブタ由来コラーゲンタンパクの加水分解物の経口摂取後のヒト血液中には、遊離Ｈｙｐだけでなくペプチド型Ｈｙｐが存在し、そのペプチド型Ｈｙｐの構造は、ほとんどがＰｒｏ−Ｈｙｐからなり、その他、Ａｌａ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙ、Ｐｒｏ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙ、Ｉｌｅ-Ｈｙｐ、Ｌｅｕ−Ｈｙｐ、Ｐｈｅ−Ｈｙｐがわずかに存在する（非特許文献１）。また、サカナ由来コラーゲンタンパクの加水分解物の経口摂取後のヒト血液中にはＰｒｏ−Ｈｙｐの他にＡｌａ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙ、Ｐｒｏ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙ、Ｓｅｒ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙ、Ｉｌｅ−Ｈｙｐ、Ｌｅｕ−Ｈｙｐ、Ｐｈｅ−Ｈｙｐ、Ａｌａ−Ｈｙｐが存在する（非特許文献２）。しかしながら、これらの文献には、コラーゲン加水分解物摂取後のヒト血液中に存在する上記のペプチドが、コラーゲン合成に関わることは示されていない。 In human blood after oral ingestion of hydrolyzate of porcine collagen protein, not only free Hyp but also peptide type Hyp exists, and the peptide type Hyp is mostly composed of Pro-Hyp. -Hyp-Gly, Pro-Hyp-Gly, Ile-Hyp, Leu-Hyp, and Phe-Hyp are slightly present (Non-patent Document 1). In addition to Pro-Hyp, Ala-Hyp-Gly, Pro-Hyp-Gly, Ser-Hyp-Gly, Ile-Hyp, Leu- in addition to Pro-Hyp in human blood after oral intake of hydrolyzate of collagen protein derived from fish Hyp, Phe-Hyp, and Ala-Hyp exist (Non-patent Document 2). However, these documents do not show that the above-mentioned peptides present in human blood after intake of collagen hydrolyzate are involved in collagen synthesis.
本発明の目的は、生体コラーゲン合成促進効果を有し、安全性を向上可能な生体コラーゲン合成促進剤を提供することである。また、生体コラーゲン合成促進作用を有するジペプチド又はトリペプチドを含有する飲食品、化粧品、医薬部外品、及び治療薬の提供である。 An object of the present invention is to provide a bio-collagen synthesis promoter that has a bio-collagen synthesis promoting effect and can improve safety. Moreover, it is provision of the food / beverage products, cosmetics, quasi-drugs, and therapeutic agents containing the dipeptide or tripeptide which have a biological collagen synthesis promotion effect | action.
本発明は、Ａｌａ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙ、Ｐｒｏ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙ、Ｐｒｏ−Ｈｙｐ、Ｌｅｕ−Ｈｙｐ、Ａｌａ−Ｈｙｐのジペプチドペプチドまたはトリペプチドのいずれかを含有する生体コラーゲン合成促進剤を提供する。 The present invention provides a biological collagen synthesis promoter containing any of dipeptide peptides or tripeptides of Ala-Hyp-Gly, Pro-Hyp-Gly, Pro-Hyp, Leu-Hyp, Ala-Hyp.
また、本発明は、コラーゲンまたはゼラチン分解物または人工合成したＡｌａ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙ、Ｐｒｏ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙ、Ｐｒｏ−Ｈｙｐ、Ｌｅｕ−Ｈｙｐ、Ａｌａ−Ｈｙｐのジペプチドまたはトリペプチドのいずれかを含有する合成促進剤を提供する。 In addition, the present invention provides a synthesis containing collagen or gelatin degradation product or artificially synthesized Ala-Hyp-Gly, Pro-Hyp-Gly, Pro-Hyp, Leu-Hyp, Ala-Hyp dipeptide or tripeptide. Provide an accelerator.
また、本発明は、Ａｌａ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙ、Ｐｒｏ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙ、Ｐｒｏ−Ｈｙｐ、Ｌｅｕ−Ｈｙｐ、Ａｌａ−Ｈｙｐのジペプチドペプチドまたはトリペプチドのいずれかを含有する飲食品、化粧品、医薬部外品、及び治療薬を提供する。 The present invention also relates to a food, beverage, cosmetic, or quasi-drug containing any of Ala-Hyp-Gly, Pro-Hyp-Gly, Pro-Hyp, Leu-Hyp, and Ala-Hyp dipeptide peptides or tripeptides. And providing therapeutic agents.
本発明者らは、豚由来のコラーゲンタンパク加水分解物を経口摂取後にヒト血液中に存在するペプチドの中から、コラーゲン合成促進効果を有するペプチドを選別した。よって、本発明で使用されるＡｌａ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙ、Ｐｒｏ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙ、Ｐｒｏ−Ｈｙｐ、Ｌｅｕ−Ｈｙｐ、Ａｌａ−Ｈｙｐのジペプチド又はトリペプチドは、コラーゲンタンパクまたはコラーゲンペプチドの経口投与により血中まで到達しうるペプチドであることから人体に対して安全かつ効果的であり、飲食品、化粧品、医薬部外品、及び治療薬に含有させて使用することができ、かつその有益性は非常に高い。 The present inventors selected peptides having an effect of promoting collagen synthesis from peptides present in human blood after oral intake of porcine collagen hydrolyzate. Therefore, dipeptides or tripeptides of Ala-Hyp-Gly, Pro-Hyp-Gly, Pro-Hyp, Leu-Hyp, Ala-Hyp used in the present invention can be brought into the blood by oral administration of collagen protein or collagen peptide. Because it is a reachable peptide, it is safe and effective for the human body, and can be used in foods, beverages, cosmetics, quasi drugs, and therapeutics, and its benefits are very high. .
また、特開２００５−２８９８１９号公報には、Ｐｒｏ−Ｈｙｐのジペプチドが、細胞増殖促進作用を有することについて記載されているが、Ｐｒｏ−Ｈｙｐのジペプチドがコラーゲン合成促進作用を有することについては記載されておらず、何らの示唆もない。このように、本発明で使用されるＡｌａ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙ、Ｐｒｏ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙ、Ｐｒｏ−Ｈｙｐ、Ｌｅｕ−Ｈｙｐ、Ａｌａ−Ｈｙｐのジペプチド又はトリペプチドが、コラーゲン合成促進効果を有することについては、これまで知られておらず、本発明者らは、これらのペプチドがコラーゲン合成促進効果を有することを初めて見出した。 Japanese Patent Application Laid-Open No. 2005-289819 describes that the Pro-Hyp dipeptide has a cell growth promoting action, but it describes that the Pro-Hyp dipeptide has a collagen synthesis promoting action. There is no suggestion. Thus, Ala-Hyp-Gly, Pro-Hyp-Gly, Pro-Hyp, Leu-Hyp, and Ala-Hyp dipeptide or tripeptide used in the present invention have a collagen synthesis promoting effect. Until now, the present inventors have found for the first time that these peptides have an effect of promoting collagen synthesis.
すなわち、本発明によれば、これらのコラーゲン合成促進能のあるペプチドを含有することにより効果的な生体内におけるコラーゲン合成促進剤、生体コラーゲン合成促進用飲食品、化粧品、医薬部外品、及び治療薬を提供することが可能となる。治療薬としては、血管、関節痛、皮膚治療薬等が挙げられ、血管治療薬としては、動脈硬化治療薬等が挙げられる。また、本発明で使用されるペプチドは、コラーゲンタンパク加水分解物の経口摂取後にヒト血液中に存在するペプチドから選別されたものであるため、安全なコラーゲン合成促進剤、食品、化粧品、医薬部外品、及び治療薬を提供することが可能となる。 That is, according to the present invention, by containing these peptides capable of promoting collagen synthesis, an effective in vivo collagen synthesis promoter, food and beverage for promoting collagen synthesis, cosmetics, quasi drugs, and treatment It becomes possible to provide medicine. Examples of the therapeutic agent include blood vessels, joint pain, and skin therapeutic agents, and examples of the vascular therapeutic agents include arteriosclerosis therapeutic agents. Moreover, since the peptides used in the present invention are selected from peptides present in human blood after oral intake of collagen protein hydrolysates, they are safe collagen synthesis promoters, foods, cosmetics, quasi drugs. Products and therapeutic agents can be provided.
本発明で使用されるペプチドは、例えば、牛や豚などの動物の皮膚、骨及び腱などの結合組織から抽出したコラーゲンタンパク、もしくはコラーゲンタンパク質の熱変性物であるゼラチンから加水分解等により得られたものを使用しても良く、また人工的に合成したものを用いても良い。コラーゲンタンパク質より得る場合には、コラーゲンタンパク質溶解液を、コラゲナーゼ酵素固定化カラムにアプライし、カラム法による酵素分解を行う。カラムを通した酵素反応終了溶液を分取し、０．４５μｍのフィルターでろ過を行い、そのろ液を凍結乾燥にて粉末化しコラーゲントリペプチドを得た後、コラーゲントリペプチド粉末を再溶解しＨＰＬＣ（ゲルろ過およびＯＤＳカラム）において各々のジペプチドおよびトリペプチド含有画分を精製する。更に、単一のコラーゲントリペプチド成分を得るために、イオン交換クロマト法およびカーボンカラムを用いて精製し得ることができる。また、人工合成により得る場合には、ペプチド合成機器を用いて固相法により人工合成する。使用する機器のプログラムに従いＣ末端よりＦｍｏｃ法によりペプチド鎖を延長する。固相法ペプチド合成用支持体である担体を用いて、副反応を防止するために、あらかじめＦｍｏｃおよびＢｏｃによりα−アミノ基、δ−アミノ基を保護したオルニチンとＦｍｏｃによりβ−アミノ基を保護したβ−アラニンのＦｍｏｃアミノ誘導体を用いる。Ｆｍｏｃ−Ｏｒｎ（Ｂｏｃ）を担体に結合させ、ピペリジンなどによりα−アミノ基を脱保護後、Ｆｍｏｃ−Ｏｒｎ（Ｂｏｃ）のＣ末端をカップリングさせ、ピペリジンなどで二つ目のオルニチンのα−アミノ基を脱保護し、Ｆｍｏｃ−β−ＡｌａのＣ末端を同様にカップリングさせる。最後にトリフルオロ酢酸などの酸を用いて全ての脱保護と担体除去を行い、０．１％トリフルオロ酢酸水を用いて抽出したものを凍結乾燥することでジペプチドおよびトリペプチドを製造することができ、ＨＰＬＣ(逆送カラム)などで精製することによって得ることができる。 The peptide used in the present invention is obtained, for example, by hydrolysis from collagen protein extracted from the skin of animals such as cattle and pigs, connective tissues such as bones and tendons, or gelatin which is a heat-denatured product of collagen protein. May be used, or an artificially synthesized one may be used. In the case of obtaining from collagen protein, the collagen protein solution is applied to a collagenase enzyme-immobilized column and subjected to enzymatic degradation by the column method. The enzyme reaction completion solution passed through the column is collected, filtered through a 0.45 μm filter, and the filtrate is lyophilized to obtain a collagen tripeptide. Then, the collagen tripeptide powder is redissolved and HPLC Purify each dipeptide and tripeptide containing fraction in (gel filtration and ODS column). Furthermore, in order to obtain a single collagen tripeptide component, it can be purified using ion exchange chromatography and a carbon column. Further, when it is obtained by artificial synthesis, it is artificially synthesized by a solid phase method using a peptide synthesizer. The peptide chain is extended from the C-terminal by the Fmoc method according to the program of the equipment used. In order to prevent side reactions using a carrier that is a support for solid-phase peptide synthesis, ornithine with Fmoc and Boc previously protected α-amino group and δ-amino group and β-amino group protected with Fmoc The β-alanine Fmoc amino derivative is used. Fmoc-Orn (Boc) is bound to the carrier, the α-amino group is deprotected with piperidine or the like, the C-terminal of Fmoc-Orn (Boc) is coupled, and the second ornithine α-amino with piperidine or the like is coupled. The group is deprotected and the C-terminus of Fmoc-β-Ala is similarly coupled. Finally, all deprotection and carrier removal are performed using an acid such as trifluoroacetic acid, and dipeptides and tripeptides can be produced by lyophilizing the extracted with 0.1% aqueous trifluoroacetic acid. And can be obtained by purification with HPLC (reverse feed column) or the like.
上記のように得られたペプチドを有効成分として、生体コラーゲン合成促進剤を製造するには、上記のようにして得たペプチドを有効成分とし、常法に従って公知の飲食品用、化粧品用、医薬部外品用、又は治療薬用担体等と組み合わせて製剤化すれば良い。 In order to produce a biological collagen synthesis promoter using the peptide obtained as described above as an active ingredient, the peptide obtained as described above is used as an active ingredient, and it is known for foods and beverages, cosmetics, and pharmaceuticals according to conventional methods. What is necessary is just to formulate in combination with a quasi-drug or therapeutic drug carrier.
本発明で使用されるペプチドを含有する生体コラーゲン合成促進剤、生体コラーゲン合成促進用飲食品、生体コラーゲン合成促進用化粧品、生体コラーゲン合成促進用医薬部外品、及び血管、関節痛、又は皮膚治療薬は、ヒトに対して安全であり、生体コラーゲン合成促進効果を有することから、皮膚の張りや肌の保湿性、関節の痛み、毛髪の柔軟性や張り、血管の弾力性等の症状の改善又は予防に有効である。 Biocollagen synthesis promoter containing peptide used in the present invention, food / beverage product for promoting collagen synthesis, cosmetic product for promoting collagen synthesis, quasi drug for promoting collagen synthesis, and blood vessel, joint pain, or skin treatment The drug is safe for humans and has the effect of promoting biosynthesis of living body collagen, improving symptoms such as skin tension, skin moisture retention, joint pain, hair flexibility and tension, and blood vessel elasticity. Or it is effective for prevention.
また、本発明の生体コラーゲン合成促進剤は、種々の剤型での投与が可能であり、例えば経口投与剤としては、茶剤、カプセル剤、錠剤、顆粒剤、細粒剤、シロップ剤、ドライシロップ剤等が挙げられる。 In addition, the biological collagen synthesis promoter of the present invention can be administered in various dosage forms. For example, as oral administration agents, tea agents, capsules, tablets, granules, fine granules, syrups, dry syrups Agents and the like.
本発明の生体コラーゲン合成促進作用の有効成分となるペプチドの摂取量は、特に制限はないが、通常成人１日当たり８５ｍｇ／ｋｇ（体重）以上、好ましくは１７０ｍｇ／ｋｇ（体重）以上を摂取するのが好ましい。投与量の上限は、1日当たり、１７０００ｍｇ／ｋｇ（体重）以下が好ましく、２３８０ｍｇ／ｋｇ（体重）以下がより好ましい。よって、生体コラーゲン合成促進剤におけるペプチドの含有量は、各形態に応じた範囲で前述した摂取量となるように含有されれば良い。 The intake of the peptide serving as an active ingredient for the biocollagen synthesis promoting action of the present invention is not particularly limited, but is usually 85 mg / kg (body weight) or more, preferably 170 mg / kg (body weight) or more per day for an adult. Is preferred. The upper limit of the dosage is preferably 17000 mg / kg (body weight) or less, more preferably 2380 mg / kg (body weight) or less per day. Therefore, the content of the peptide in the biological collagen synthesis promoter may be contained so as to be the above-described intake within a range corresponding to each form.
上記のように、本発明の生体コラーゲン合成用飲食品は、飲食品で通常用いられている任意成分と共に配合することができる。このようなヒトまたは動物用の飲食品としては、例えば、パン類、菓子類、麺類、肉製品・水産加工品、穀類の加工品、加工野菜・加工果実、加工卵、乳製品、粉類、即席菓子の素、食用油脂、スープの素、粉末飲料、調味料、食品添加物、飲料類、飼料等が挙げられる。 As mentioned above, the food / beverage products for biological collagen synthesis of this invention can be mix | blended with the arbitrary components normally used with food / beverage products. Examples of such human or animal foods and drinks include breads, confectionery, noodles, processed meat products / fishery products, processed cereal products, processed vegetables / processed fruits, processed eggs, dairy products, flours, Examples include instant confectionery ingredients, edible fats and oils, soup ingredients, powdered beverages, seasonings, food additives, beverages, and feeds.
また、本発明の生体コラーゲン合成促進用飲食品には、例えば、ビタミン剤などの栄養補助食品、栄養補助飲料、動物用健康食品、特定保健用食品、栄養機能食品、保健機能食品等が含まれ、通常用いられている各種形態、例えば、散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、液剤、フィルム等として製品化される。製品化に際しては、Ａｌａ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙ、Ｐｒｏ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙ、Ｐｒｏ−Ｈｙｐ、Ｌｅｕ−Ｈｙｐ、Ａｌａ−Ｈｙｐのジペプチドペプチドまたはトリペプチドとともに、賦形剤、結合剤、崩壊剤、崩壊抑制剤、吸収促進剤、吸着剤、滑沢剤、着色剤、保存剤、香料、風味剤、甘味剤等が配合される。 The food and drink for promoting biosynthesis of biological collagen of the present invention includes, for example, nutritional supplements such as vitamins, nutritional supplement beverages, animal health foods, foods for specified health use, nutritional function foods, health function foods and the like. These are commercialized in various commonly used forms such as powders, granules, tablets, capsules, liquids, and films. In commercialization, Ala-Hyp-Gly, Pro-Hyp-Gly, Pro-Hyp, Leu-Hyp, Ala-Hyp dipeptide peptides or tripeptides, excipients, binders, disintegrants, disintegration inhibitors, Absorption accelerators, adsorbents, lubricants, colorants, preservatives, fragrances, flavoring agents, sweetening agents and the like are blended.
これらの栄養補助食品、栄養補助飲料などは、この分野で通常知られた慣用的な方法により製造される。 These dietary supplements, dietary supplement beverages, and the like are produced by conventional methods commonly known in the art.
このような飲食品におけるコラーゲン合成促進効果を有するペプチドの添加量は、飲食品の形態ごとに応じた範囲で前述した摂取量となるように添加されれば良く、飲食品には、２．５〜７０重量％の範囲内で添加することが好ましい。例えば、液状の飲食品に対し１．５〜４０重量％、固体状の飲食品に対し３０〜１００重量％、錠剤状の飲食品に対し、３０〜１００重量％の範囲内で添加することが好ましい。さらに具体的には、以下に限定されないが、例えば、保健用飲料には、１．５〜４０重量％、機能性烏龍茶には、１．５〜４０重量％の範囲内で添加することが好ましい。 The addition amount of the peptide having the collagen synthesis promoting effect in such a food or drink may be added so as to be the above-mentioned intake in a range corresponding to each form of the food or drink. It is preferable to add within the range of -70 weight%. For example, it may be added within a range of 1.5 to 40% by weight for liquid foods and drinks, 30 to 100% by weight for solid foods and drinks, and 30 to 100% by weight for tablet foods and drinks. preferable. More specifically, although not limited to the following, for example, it is preferable to add 1.5 to 40% by weight for health drinks and 1.5 to 40% by weight for functional oolong tea. .
また、本発明の生体コラーゲン合成促進用化粧品としては、老化防止用化粧品、クレンジング用化粧品、頭髪用化粧品、入浴用化粧品、医療用化粧品が挙げられ、また、顔料、化粧水、美容液、乳液、クリーム、ジェル、パック、リポソーム、液状、粘土状、ソリッド粉末状化粧料、エアゾール化粧料、ハップ剤等のスキンケア化粧品、下地クリーム、ファンデーション等のメークアップ化粧品をそのまま使用するか、あるいはエアゾール式、ポンプ式、または押出し式、もしくはこれらに類する機構で噴射する化粧品、さらに浴剤等様々な剤型を提供することができる。 Examples of the cosmetic for promoting biosynthesis of biological collagen of the present invention include anti-aging cosmetics, cleansing cosmetics, hair cosmetics, bath cosmetics, medical cosmetics, and pigments, skin lotions, cosmetic liquids, emulsions, Use cream, gel, pack, liposome, liquid, clay, solid powder cosmetics, aerosol cosmetics, skin care cosmetics such as haptics, makeup cosmetics such as foundation creams, foundations, etc. or aerosol type, pump Various dosage forms such as cosmetics sprayed by a formula, an extrusion type, or a similar mechanism, and a bath agent can be provided.
本発明の生体コラーゲン合成促進用化粧品には、水、アルコール、界面活性剤（カチオン、アニオン、ノニオン、両性界面活性剤等）、保湿剤（グリセリン、１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、アミノ酸、尿素、ピロリドンカルボン酸塩、核酸類、単糖類、少糖等およびそれらの誘導体ほか）、増粘剤（多糖類、ポリアクリル酸塩、カルボキシビニルポリマー、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、キチン、キトサン、アルギン酸、カラギーナン、キサンタンガム、メチルセルロース等およびそれらの誘導体ほか）、ワックス、ワセリン、炭化水素飽和脂肪酸、不飽和脂肪酸、シリコン油等およびそれらの誘導体、トリ（カプリル・カプリン酸）グリセリル、トリオクタン酸グリセリル等のトリグリセライド類、ステアリン酸イソプロピル等のエステル油類、天然油脂類（オリブ油、椿油、アボガド油、アーモンド油、カカオ脂、月見草油、ブドウ種子油、マカデミアンナッツ油、ユーカリ油、ローズヒップ油、スクワラン、オレンジラフィー油、ラノリン、セラミド等）、防腐剤（オキシ安息香酸誘導体、デヒドロ酢酸塩、感光素、ソルビン酸、フェノキシエタノール等およびそれらの誘導体ほか）、殺菌剤（イオウ、トリクロカルバアニリド、サリチル酸、ジンクピリチオン、ヒノキチオール等およびそれらの誘導体ほか）、紫外線吸収剤（パラアミノ安息香酸、メトキシケイ皮酸等およびそれらの誘導体ほか）、抗炎症剤（アラントイン、グリチルリチン酸等およびそれらの誘導体ほか）、抗酸化剤（トコフェロール、ＢＨＡ、ＢＨＴ等およびそれらの誘導体ほか）、キレート剤（エデト酸、ヒドロキシエタンジホスホン酸等およびそれらの誘導体ほか）、動植物エキス（アシタバ、アロエ、エイジツ、オウゴン、オウバク、海藻、カリン、カミツレ、甘草、キウイ、キュウリ、クワ、シラカバ、トウキ、ニンニク、ボタン、ホップ、マロニエ、ラベンダー、ローズマリー、ユーカリ、ミルク、各種ペプタイド、プラセンタ、ローヤルゼリー等およびこれらの含有成分精製物または発酵物ほか）、ｐＨ調整剤（無機酸、無機酸塩、有機酸、有機酸塩等およびそれらの誘導体ほか）、ビタミン類（ビタミンＡ類、ビタミンＢ類、ビタミンＣ、ビタミンＤ 類等およびそれらの誘導体ほか）、酸化チタン、タルク、マイカ、シリカ、酸化亜鉛、酸化鉄、シリコンおよびこれらを加工処理した粉体類等を本発明の目的を達成する範囲内で配合することができる。なお、本発明の美白化粧料を構成する成分は決して上述に限られるものではなく、化粧料に用い得る成分であれば自由に選択が可能である。 The cosmetic for promoting collagen synthesis of the present invention includes water, alcohol, surfactant (cation, anion, nonion, amphoteric surfactant, etc.), humectant (glycerin, 1,3-butylene glycol, propylene glycol, amino acid, Urea, pyrrolidone carboxylates, nucleic acids, monosaccharides, oligosaccharides and their derivatives, etc.), thickeners (polysaccharides, polyacrylates, carboxyvinyl polymers, polyvinylpyrrolidone, polyvinyl alcohol, chitin, chitosan, alginic acid , Carrageenan, xanthan gum, methylcellulose and the like and derivatives thereof), wax, petrolatum, hydrocarbon saturated fatty acid, unsaturated fatty acid, silicone oil and the like, and derivatives thereof, triglycerides such as tri (caprylic / capric) glyceryl and trioctanoic acid glyceryl Kind Ester oils such as isopropyl stearate, natural fats and oils (Olive oil, camellia oil, avocado oil, almond oil, cocoa butter, evening primrose oil, grape seed oil, macadamian nut oil, eucalyptus oil, rosehip oil, squalane, orange luffy Oil, lanolin, ceramide, etc.), preservatives (oxybenzoic acid derivatives, dehydroacetates, photosensitizers, sorbic acid, phenoxyethanol, etc. and their derivatives), fungicides (sulfur, triclocarbanilide, salicylic acid, zinc pyrithione, hinokitiol, etc.) And their derivatives), ultraviolet absorbers (paraaminobenzoic acid, methoxycinnamic acid, etc. and their derivatives, etc.), anti-inflammatory agents (allantoin, glycyrrhizic acid, etc. and their derivatives, etc.), antioxidants (tocopherol, BHA) , BHT etc. and These derivatives, etc.), chelating agents (edetic acid, hydroxyethanediphosphonic acid, etc. and their derivatives, etc.), animal and plant extracts (Ashitaba, Aloe, Ages, Ogon, Aoba, seaweed, Karin, Chamomile, licorice, kiwi, cucumber , Mulberry, birch, touki, garlic, buttons, hops, marronnier, lavender, rosemary, eucalyptus, milk, various peptides, placenta, royal jelly, etc. and their components, purified products, fermented products, etc., pH adjusters (inorganic acids , Inorganic acid salts, organic acids, organic acid salts and their derivatives), vitamins (vitamin A, vitamin B, vitamin C, vitamin D, etc. and their derivatives), titanium oxide, talc, mica Silica, zinc oxide, iron oxide, silicon and these were processed The body and the like can be blended within the range to achieve the object of the present invention. In addition, the component which comprises the whitening cosmetics of this invention is by no means limited to the above-mentioned, and if it is a component which can be used for cosmetics, it can select freely.
ハップ剤においては上記成分に加えて、基剤（カオリン、ベントナイト等）、ゲル化剤（ポリアクリル酸塩、ポリビニルアルコール等）を本発明の目的を達成する範囲内で配合することができる。 In the haptic agent, in addition to the above components, a base (kaolin, bentonite, etc.) and a gelling agent (polyacrylate, polyvinyl alcohol, etc.) can be blended within the scope of achieving the object of the present invention.
浴剤においては、硫酸塩、炭酸水素塩、ホウ酸塩、色素、保湿剤を本発明の目的を達成する範囲内で適宜配合し、パウダータイプ、液剤タイプに調製が可能である。 In the bath preparation, sulfate, bicarbonate, borate, dye, and humectant can be appropriately blended within the range to achieve the object of the present invention, and can be prepared into powder type and liquid type.
これらの生体コラーゲン合成促進用化粧品は、この分野で通常知られた慣用的な方法により製造される。 These cosmetics for promoting the synthesis of biological collagen are produced by conventional methods usually known in this field.
このような化粧品におけるコラーゲン合成促進効果を有するペプチドの添加量は、化粧品の形態ごとに応じた範囲で前述した摂取量となるように添加されれば良く、化粧品には、０．０１〜１０重量％の範囲内で添加することが好ましい。例えば、液状の化粧品に対し０．０１〜５重量％、クリーム状の化粧品に対し０．０１〜１０重量％、粉末状の化粧品に対し、０．０１〜５重量％の範囲内で添加することが好ましい。さらに具体的には、以下に限定されないが、例えば、化粧水には、０．０１〜５重量％、化粧用クリームには、０．０１〜１０重量％の範囲内で添加することが好ましい。 The amount of the peptide having the effect of promoting collagen synthesis in such cosmetics may be added so as to be the above-mentioned intake in a range corresponding to each cosmetic form. It is preferable to add within the range of%. For example, 0.01 to 5% by weight for liquid cosmetics, 0.01 to 10% by weight for creamy cosmetics, and 0.01 to 5% by weight for powdered cosmetics. Is preferred. More specifically, although not limited to the following, for example, it is preferable to add in the range of 0.01 to 5% by weight for a lotion and 0.01 to 10% by weight for a cosmetic cream.
また、本発明の生体コラーゲン合成促進用医薬部外品としては飴類、ガム類、歯磨き粉類、液体歯磨き剤類、ジェル状歯磨き剤類、飲料類等が含まれる。また、骨吸収用医薬部外品は、医薬部外品で通常用いられている任意成分と共に配合することができる。 Further, the quasi-drugs for promoting biosynthesis of biological collagen of the present invention include moss, gums, toothpastes, liquid toothpastes, gel-like toothpastes, beverages and the like. Moreover, the quasi-drug for bone resorption can be blended together with optional components usually used in quasi-drugs.
これらの生体コラーゲン合成促進用医薬部外品は、この分野で通常知られた慣用的な方法により製造される。 These quasi-drugs for promoting synthesis of biological collagen are produced by conventional methods generally known in this field.
このような生体コラーゲン合成促進用医薬部外品における当該化合物の添加量は、医薬部外品の形態ごとに応じた範囲で前述した摂取量となるように添加されれば良く、医薬部外品には、０．０１〜１０重量％の範囲内で添加することが好ましい。例えば、固体状の医薬部外品に対し、０．０１〜１０重量％、液体状の医薬部外品に対し、０．０１〜５重量％、ジェル又はペースト状の医薬部外品に対し、０．０１〜５重量％の範囲内で添加することが好ましい。さらに具体的には、以下に限定されないが、例えば、ペットガムには、０．０１〜５重量％、歯磨き粉に対し、０．０１〜５重量％の範囲内で添加することが好ましい。 The addition amount of the compound in such a quasi-drug for promoting biosynthesis of biological collagen may be added so as to be the above-mentioned intake in a range according to the form of the quasi-drug. Is preferably added within a range of 0.01 to 10% by weight. For example, for solid quasi drugs, 0.01 to 10% by weight, for liquid quasi drugs, 0.01 to 5% by weight, for gel or paste quasi drugs, It is preferable to add within the range of 0.01 to 5% by weight. More specifically, although not limited to the following, for example, it is preferable to add 0.01 to 5% by weight to pet gum and 0.01 to 5% by weight with respect to toothpaste.
本発明の生体コラーゲン合成促進用治療薬の製造は、通常、本発明で使用されるペプチドを薬学的に許容できる液状または固体状の担体と配合することにより行われ、所望により溶剤、分散剤、乳化剤、緩衝剤、安定剤、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤等を加えて、錠剤、顆粒剤、散剤、粉末剤、カプセル剤等の固形剤、通常液剤、懸濁剤、乳剤等の液剤等とすることができる。 Production of the therapeutic agent for promoting collagen synthesis of the present invention is usually carried out by blending the peptide used in the present invention with a pharmaceutically acceptable liquid or solid carrier, and optionally, a solvent, a dispersant, Add emulsifiers, buffers, stabilizers, excipients, binders, disintegrants, lubricants, etc., solids such as tablets, granules, powders, powders, capsules, etc., usually liquids, suspensions, It can be used as a liquid agent such as an emulsion.
医薬用担体は、骨吸収抑制剤の投与形態および剤型に応じて選択することができる。固体組成物からなる経口剤とする場合は、錠剤、丸剤、カプセル剤、散剤、細粒剤、顆粒剤等とすることができ、たとえば、デンプン、乳糖、白糖、マンニット、カルボキシメチルセルロース、コーンスターチ、無機塩などが利用される。また経口剤の調製に当っては、更に結合剤、崩壊剤、界面活性剤、潤沢剤、流動性促進剤、矯味剤、着色剤、香料などを配合することもできる。たとえば、錠剤または丸剤とする場合は、所望によりショ糖、ゼラチン、ヒドロキシプロピルセルロースなどの糖衣または胃溶性もしくは腸溶性物質のフィルムで被覆してもよい。液体組成物からなる経口剤とする場合は、薬理学的に許容される乳濁剤、溶液剤、懸濁剤、シロップ剤などとすることができ、例えば、精製水、エタノールなどが担体として利用される。また、さらに所望により湿潤剤、懸濁剤のような補助剤、甘味剤、風味剤、防腐剤などを添加してもよい。 The pharmaceutical carrier can be selected according to the administration form and dosage form of the bone resorption inhibitor. In the case of an oral preparation comprising a solid composition, it can be a tablet, pill, capsule, powder, fine granule, granule, etc., for example, starch, lactose, sucrose, mannitol, carboxymethylcellulose, corn starch Inorganic salts are used. In preparation of the oral preparation, a binder, a disintegrant, a surfactant, a lubricant, a fluidity promoter, a corrigent, a colorant, a fragrance and the like can be further added. For example, in the case of a tablet or pill, if desired, it may be coated with a sugar coating such as sucrose, gelatin or hydroxypropylcellulose, or a film of a gastric or enteric substance. In the case of an oral preparation comprising a liquid composition, it can be a pharmacologically acceptable emulsion, solution, suspension, syrup, etc. For example, purified water, ethanol, etc. are used as a carrier. Is done. Further, if desired, auxiliary agents such as wetting agents and suspending agents, sweetening agents, flavoring agents, preservatives and the like may be added.
一方、非経口剤とする場合は、常法に従い本発明の前記有効成分を希釈剤としての注射用蒸留水、生理食塩水、ブドウ糖水溶液、注射用植物油、ゴマ油、落花生油、大豆油、トウモロコシ油、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールなどに溶解ないし懸濁させ、必要に応じ、殺菌剤、安定剤、等張化剤、無痛化剤などを加えることにより調製することができる。また、固体組成物を製造し、使用前に無菌水または無菌の注射用溶媒に溶解して使用することもできる。 On the other hand, in the case of a parenteral preparation, distilled water for injection, physiological saline, aqueous glucose solution, vegetable oil for injection, sesame oil, peanut oil, soybean oil, corn oil as the diluent is used as the active ingredient of the present invention according to a conventional method. It can be prepared by dissolving or suspending in propylene glycol, polyethylene glycol or the like, and adding a bactericidal agent, stabilizer, isotonic agent, soothing agent, etc., if necessary. In addition, a solid composition can be produced and dissolved in sterile water or a sterile solvent for injection before use.
さらに上記各製剤には、所望により、着色剤、保存剤、香料、風味剤、甘味剤などの薬学的に許容される添加物や他の治療薬を含有させることができる。 Furthermore, each of the above-mentioned preparations can contain pharmaceutically acceptable additives such as coloring agents, preservatives, fragrances, flavoring agents, sweetening agents and other therapeutic agents as desired.
製剤化に際しては、安定化剤を配合することが好ましい。安定化剤としては、例えば、アルブミン、グロブリン、ゼラチン、マンニトール、グルコース、デキストラン、エチレングリコールなどが挙げられる。 In formulating, it is preferable to add a stabilizer. Examples of the stabilizer include albumin, globulin, gelatin, mannitol, glucose, dextran, ethylene glycol and the like.
一般には、製剤中に含有される有効成分の投与量は、種々の条件、例えば抽出溶媒の種類、使用した溶媒の使用量等によっても変動するので、上記好ましい摂取量より少ない量で十分な場合もあるし、あるいは範囲を超えて必要な場合もある。投与は、所望の摂取量範囲内において、１日内において単回で、または数回に分けて行ってもよく、所定期間に渡って行ってもよい。 In general, the dosage of the active ingredient contained in the preparation varies depending on various conditions, for example, the type of extraction solvent, the amount of solvent used, etc. Sometimes it is necessary beyond the scope. Administration may be performed once or within several days within a desired intake range, or may be performed over a predetermined period.
以下に試験例及び処方例を挙げ、本発明について更に説明する。なお、これらは本発明を何ら限定するものではない。 Hereinafter, the present invention will be further described with reference to test examples and formulation examples. In addition, these do not limit this invention at all.
（試験方法及び評価方法）
人工合成したＡｌａ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙ、Ｐｒｏ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙ、Ｐｒｏ−Ｈｙｐ、Ｌｅｕ−Ｈｙｐ、Ａｌａ−ＨｙｐをＮＩＨ−３Ｔ３−Ｌ１（マウス線維芽細胞）を培養している培養液中に加え、培養液および細胞外マトリックスとして沈着したコラーゲンをＥＬＩＳＡ法およびウエスタンブロッティング法によって評価した。Ａｌａ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙ、Ｐｒｏ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙ、Ｐｒｏ−Ｈｙｐ、Ｌｅｕ−Ｈｙｐ、Ａｌａ−Ｈｙｐ は、ＧＬ Ｂｉｏｃｈｅｍ社においてＦｍｏｃ合成法およびＢｏｃ合成法の組み合わせにより合成されたものを用いた。
(Test method and evaluation method)
Artificially synthesized Ala-Hyp-Gly, Pro-Hyp-Gly, Pro-Hyp, Leu-Hyp, Ala-Hyp are added to a culture solution in which NIH-3T3-L1 (mouse fibroblast) is cultured, and cultured. Collagen deposited as fluid and extracellular matrix was evaluated by ELISA and Western blotting. As Ala-Hyp-Gly, Pro-Hyp-Gly, Pro-Hyp, Leu-Hyp, and Ala-Hyp, those synthesized by a combination of Fmoc synthesis method and Boc synthesis method at GL Biochem were used.
ＮＩＨ−３Ｔ３−Ｌ１細胞を０．２％ＦＢＳ入りのＤＭＥＭ培地に浮遊させ、２４ウェルプレートに１０万細胞/ウェルとなるよう播種した。各ウェルに２５０μｇ／ｍｌとなるように合成したそれぞれのペプチドを添加し、そのまま３６時間３７度５％ＣＯ---２でインキュベートした。次に、培養上清を回収しＥＬＩＳＡ法に用いた。また培養上清を除いたウェルの細胞単層をリン酸緩衝液で２回やさしく洗浄した。その後、細胞は細胞溶解用の緩衝液（１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．８、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、２ｍＭ ＥＤＴＡ、１．５ｍＭ ＭｇＣｌ２、０．５ｍＭ ｄｉｔｈｉｏｔｈｒｅｉｔｏｌ、そしてプロテアーゼ阻害剤）により溶解しウエスタンブロッティング法に用いた。細胞を培養する際、培養液中の血清量を抑えることで、コラーゲン合成への影響を可能な限り排除した。これにより、コラーゲンペプチド投与による効果だけを細胞レベルで厳密に評価することができた。また、細胞が産生したコラーゲン量を従来よりも正確に測定するため、細胞近辺に定着したコラーゲンを可溶化（アテロ化）し、培養液、細胞近辺、細胞内のコラーゲン量を合算し評価した。 NIH-3T3-L1 cells were suspended in DMEM medium containing 0.2% FBS, and seeded at a density of 100,000 cells / well in a 24-well plate. Each peptide was synthesized as a 250 [mu] g / ml to each well was added, as 36 hours at 37 ° 5% CO - were incubated 2 -. Next, the culture supernatant was recovered and used for the ELISA method. In addition, the cell monolayer of the well excluding the culture supernatant was gently washed twice with phosphate buffer. Thereafter, the cells were lysed with a cell lysis buffer (10 mM HEPES, pH 7.8, 150 mM NaCl, 2 mM EDTA, 1.5 mM MgCl 2 , 0.5 mM dithiothreitol, and a protease inhibitor) and used for Western blotting. When culturing cells, the amount of serum in the culture solution was suppressed to eliminate the influence on collagen synthesis as much as possible. Thereby, only the effect by collagen peptide administration was able to be strictly evaluated at the cell level. In addition, in order to measure the amount of collagen produced by cells more accurately than before, collagen settled in the vicinity of the cells was solubilized (aterized), and the amount of collagen in the culture solution, the vicinity of the cells, and the cells was added and evaluated.
（ＥＬＩＳＡ法）
各ウェルから回収した培養上清２００μｌに１００μｌのペプシン溶液（１５０ｍＭ 酢酸溶液、０．６ｍｇ／ｍｌ ペプシン）を加え、転倒混和により十分攪拌し４度で一晩インキュベートした。その後１００μｌの中和液（２００ｍＭ Ｔｒｉｓ、１５０ｍＭ ＮａＣｌ）を加え転倒混和により十分攪拌し測定資料とした。測定資料をＮＵＮＣ ＭａｘｉＳｏｒｐ ９６ウェルプレートに２００μｌ／ウェル加え培養液中のタンパクを４度で一晩コーティングした。その後培養液を除き、ツィーン／リン酸緩衝液で洗浄しブロッキング溶液（５% ノンファット・ドライミルクを０．１％ Ｔｗｅｅｎ−２０を含むリン酸緩衝液も溶かしたもの）中で１時間インキュベートした。ブロッキング溶液を除きツィーン/リン酸緩衝液で洗浄後、１次抗体としてコラーゲンＩ抗体を１時間反応させた。１次抗体を除きツィーン/リン酸緩衝液で洗浄後、ホースラディッシュ結合２次抗体に１時間曝露した。２次抗体を除きツィーン/リン酸緩衝液で洗浄後発色剤（ｏ-フェニレンジアミン、クエン酸／リン酸緩衝液、３０％過酸化水素水）を加え発色反応を行い、反応停止液（２ＮＨ２ＳＯ４）を加えることで反応を停止させ、１４２０ＡＲＶＯシリーズ・マルチレーベルカウンターで４９２ｎｍにおける吸光度を測定した。表１においてコントロールに対する相対的なコラーゲン増加量を示した。表１で示すように、本発明で使用されるペプチドを添加した区では、添加していない区に比べて、約１４４〜１８７％で培養液中のコラーゲン量が増加している結果となった。
(ELISA method)
To 200 μl of the culture supernatant collected from each well, 100 μl of a pepsin solution (150 mM acetic acid solution, 0.6 mg / ml pepsin) was added, stirred well by inversion, and incubated overnight at 4 degrees. Thereafter, 100 μl of a neutralization solution (200 mM Tris, 150 mM NaCl) was added, and the mixture was thoroughly stirred by inversion mixing to obtain a measurement data. The measurement data was added to a NUNC MaxiSorp 96-well plate at 200 μl / well, and the protein in the culture solution was coated overnight at 4 degrees. Thereafter, the culture solution was removed, washed with a tween / phosphate buffer solution, and incubated for 1 hour in a blocking solution (5% non-fat dry milk also containing a phosphate buffer solution containing 0.1% Tween-20). . After removing the blocking solution and washing with a tween / phosphate buffer, collagen I antibody was reacted as a primary antibody for 1 hour. After removing the primary antibody and washing with a tween / phosphate buffer, it was exposed to a horseradish-conjugated secondary antibody for 1 hour. After removing the secondary antibody and washing with a tween / phosphate buffer, a color former (o-phenylenediamine, citric acid / phosphate buffer, 30% hydrogen peroxide) was added to perform a color reaction, and a reaction stop solution (2NH 2 The reaction was stopped by adding SO 4 ), and the absorbance at 492 nm was measured with a 1420 ARVO series multilabel counter. Table 1 shows the amount of collagen increase relative to the control. As shown in Table 1, in the group to which the peptide used in the present invention was added, the amount of collagen in the culture broth increased at about 144 to 187% compared to the group to which no peptide was added. .
（ウエスタンブロッティング法）
細胞溶解用の緩衝液に溶解した細胞の溶出液をポリアクリルアミドーＳＤＳゲルで分画を行い、ＢＩＯ ＣＲＡＦＴ社のセミドライブロッターを用いてニトロセルロース膜にそのタンパク質を転写した。膜は、ブロッキング溶液（５％ ノンファット・ドライミルクを０．１％ Ｔｗｅｅｎ−２０を含むリン酸緩衝液も溶かしたもの）と４度で一晩インキュベートさせた。膜を洗浄しコラーゲンＩの１次抗体と１時間インキュベートさせ、その後ホースラディッシュ結合２次抗体に１時間曝露し、最後にＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ Ｂｉｏ−ｓｃｉｅｎｃｅｓ社のＥＬＣ Ｐｌｕｓ Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔｔｉｎｇ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍで検出を行った。同様の方法を用いて恒常的に発現することで知られるGlyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase（以下、ＧＡＰＤＨと称する）を標準タンパクとして測定した。結果を図１に示す。図１に示すように、本発明で使用されるペプチドを添加した区では、細胞外マトリックスにおけるコラーゲンの発現が増加する結果となった。また、ジペプチドを添加した区では、トリペプチドを添加した区よりもコラーゲン産生量が多い結果となった。
(Western blotting method)
The cell eluate dissolved in the cell lysis buffer was fractionated on a polyacrylamide-SDS gel, and the protein was transferred to a nitrocellulose membrane using a BIO CRAFFT semi-drive lotter. Membranes were incubated overnight at 4 degrees with blocking solution (5% non-fat dry milk with phosphate buffer containing 0.1% Tween-20). The membrane was washed and incubated with collagen I primary antibody for 1 hour, then exposed to a horseradish-bound secondary antibody for 1 hour, and finally detected with an ELC Plus Western Blotting Detection System from GE Healthcare Bio-sciences. Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (hereinafter referred to as GAPDH), which is known to be constantly expressed using the same method, was measured as a standard protein. The results are shown in FIG. As shown in FIG. 1, in the group to which the peptide used in the present invention was added, collagen expression in the extracellular matrix was increased. In addition, in the group to which the dipeptide was added, the amount of collagen production was larger than that in the group to which the tripeptide was added.
このように、本発明で使用されるペプチドは、コラーゲン合成促進作用を有していることが新たに確認されたものであり、これらのペプチドを含む生体コラーゲン合成促進剤、生体コラーゲン合成促進用飲食品、生体コラーゲン合成促進用化粧品、生体コラーゲン合成促進用医薬部外品、及び血管、関節痛、若しくは皮膚治療薬は、コラーゲン合成促進作用を有するものとして有用である。 As described above, the peptides used in the present invention have been newly confirmed to have a collagen synthesis promoting action, and a biological collagen synthesis promoter containing these peptides, a food and beverage for promoting collagen synthesis. Products, cosmetics for promoting collagen synthesis, quasi-drugs for promoting collagen synthesis, and vascular, joint pain, or skin therapeutic agents are useful as those having a collagen synthesis promoting action.
また、実施例で示すように、本発明で使用されるジペプチドを添加した区では、トリペプチドを添加した区に比べて、コラーゲン産生量が多かったことから、ジペプチドの方が、コラーゲン合成促進作用が高く、よって、投与効率を向上できる。また、トリペプチドであるＧｌｙ−Ｐｒｏ−ＨｙｐやＰｒｏ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙは、Ｇｌｙ−ＰｒｏやＨｙｐ−Ｇｌｙ間で分解されることから、ジペプチドであるＰｒｏ−ＨｙｐやＡｌａ−Ｈｙｐ間の結合は、Ｇｌｙ-ＰｒｏやＨｙｐ−Ｇｌｙ間の結合よりも強く安定である。よって、ジペプチドの方が、トリペプチドよりも分解され難く、安定性が高いため、製品化する上で取り扱いが容易となり生産効率を向上できる。 In addition, as shown in the examples, the amount of collagen production was greater in the group to which the dipeptide used in the present invention was added than in the group to which the tripeptide was added. Therefore, the administration efficiency can be improved. In addition, since the tripeptides Gly-Pro-Hyp and Pro-Hyp-Gly are degraded between Gly-Pro and Hyp-Gly, the bond between the dipeptides Pro-Hyp and Ala-Hyp is Gly. -Stronger and more stable than bonds between Pro and Hyp-Gly. Therefore, dipeptides are less likely to be decomposed and more stable than tripeptides, so that they can be handled easily in production and the production efficiency can be improved.
（処方例）
本発明のＡｌａ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙ、Ｐｒｏ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙ、Ｐｒｏ−Ｈｙｐ、Ｌｅｕ−Ｈｙｐ、Ａｌａ−Ｈｙｐのジペプチドペプチドまたはトリペプチドのいずれかを含有する生体コラーゲン合成促進剤，生体コラーゲン合成促進用飲食品、生体コラーゲン合成促進用化粧品、生体コラーゲン合成促進用医薬部外品、及び血管、関節痛、若しくは皮膚治療薬の製造について、上記評価結果に従い、以下にその処方例を示すが、各処方例は各製品の製造における常法により製造したもので良く、配合量のみを示した。また、本発明はこれらに限定されるわけではない。
(Prescription example)
Biological collagen synthesis promoter containing any of Ala-Hyp-Gly, Pro-Hyp-Gly, Pro-Hyp, Leu-Hyp, Ala-Hyp dipeptide peptide or tripeptide of the present invention Products, cosmetics for promoting collagen synthesis, quasi-drugs for promoting collagen synthesis, and production of blood vessels, joint pain, or skin treatment drugs, according to the above evaluation results, the formulation examples are shown below. May be produced by a conventional method for producing each product, and only the blending amount is shown. The present invention is not limited to these.
上記のようにして得たペプチドを、通常の飲食品又は医薬部外品に添加することも可能である。このようにして得られた生体コラーゲン合成促進用飲食品又は生体コラーゲン合成促進用医薬部外品は、生体コラーゲン合成促進効果が期待でき、かつ人体に対し安全であることから、飲食品又は医薬部外品として非常に有用である。
また、上記のようにして得たペプチドを、化粧品に添加することも可能である。このようにして得られた生体コラーゲン合成促進用化粧品は、生体コラーゲン合成促進効果が期待でき、かつ人体に対し安全であることから、化粧品として非常に有用である。
また、上記のようにして得たペプチドを、治療薬に添加することも可能である。このようにして得られた生体コラーゲン合成促進用治療薬は、生体コラーゲン合成促進効果が期待でき、かつ人体に対し安全であることから、治療薬として非常に有用である。
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