JP2003516386A - Treatment of inflammatory bowel disease with vitamin D compounds - Google Patents

Treatment of inflammatory bowel disease with vitamin D compounds

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キャントーナ,マーゲリータ・ティー
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Abstract

(57)【要約】 炎症性腸疾患、具体的には潰瘍性大腸炎、クローン病の治療方法を開示する。この方法には、疾患の治療に有効な量でのビタミンD化合物の投与が含まれる。ビタミンD化合物の投与は感染に敏感な個体に於ける炎症性腸疾患の徴候の発症を阻害、或いは遅らせる。 (57) [Summary] A method for treating inflammatory bowel disease, specifically ulcerative colitis and Crohn's disease is disclosed. The method includes administering a vitamin D compound in an amount effective to treat the disease. Administration of a vitamin D compound inhibits or delays the onset of signs of inflammatory bowel disease in susceptible individuals.

Description

【発明の詳細な説明】Detailed Description of the Invention

【0001】 (技術分野) 本発明はビタミンD化合物に関し、より具体的には炎症性腸疾患の治療のため
のビタミンD化合物の利用に関する。
TECHNICAL FIELD The present invention relates to vitamin D compounds, and more particularly to the use of vitamin D compounds for the treatment of inflammatory bowel disease.

【0002】 (背景技術) 自然ホルモン、1α-25-ジヒドロキシビタミンD3及びその類似体1α-25
-ジヒドロキシビタミンD2は動物及びヒトに於けるカルシウム恒常性の高効力な
制御剤であると知られ、その細胞分化での活性が確立されている、Ostemら、Pro
c. Natl. Acad. Sci. USA, 84, 2610 (1987) 。これら代謝産物の多くの構造類
似体が、1α-ヒドロキシビタミンD3、1α-ヒドロキシビタミンD2、種々の側
鎖同属ビタミン類及びフッ素化類似体を含めて合成、試験されている。これらの
化合物の幾つかは細胞分化とカルシウム制御に於ける興味ある活性分離を示す。
この活性に於ける違いは種々の疾患、例えば腎性骨形成異常症、ビタミンD抵抗
性くる病、骨粗しょう症、乾癬、ある種の悪性疾患などの治療に有効であると思
われる。
BACKGROUND ART Natural hormone 1α-25-dihydroxyvitamin D 3 and its analog 1α-25
-Dihydroxyvitamin D 2 is known to be a highly potent regulator of calcium homeostasis in animals and humans, and its activity in cell differentiation has been established. Ostem et al., Pro
c. Natl. Acad. Sci. USA, 84, 2610 (1987). Many structural analogs of these metabolites have been synthesized and tested, including 1α-hydroxyvitamin D 3 , 1α-hydroxyvitamin D 2 , various side chain cognate vitamins and fluorinated analogs. Some of these compounds show interesting activity segregation in cell differentiation and calcium regulation.
Differences in this activity appear to be useful in the treatment of various diseases such as renal osteodysplasia, vitamin D resistant rickets, osteoporosis, psoriasis and certain malignant diseases.

【0003】 炎症性腸疾患(IBD)は胃腸(GI)管を侵す病因未知の免疫仲介疾患である
。少なくとも二種類の明確に区別できる形態のIBD、潰瘍性大腸炎とクローン
病がある。IBDは慢性の再性疾病であり、殆ど普遍的に末端空腸及び結腸の炎
症を含むが、これらの疾患は消化管全体にわたって多くの部位を侵す。明らかに
遺伝的因子が個体にIBD発症の素因を与える(Podolosky 1991)。加えて、環
境がIBD発症に寄与し、ビタミンDがIBDに影響を及ぼす環境因子であるか
もしれないという信じる理由が存在する。IBDは北アメリカ及び北欧などの北
方環境で最も罹病率が高いので、太陽光暴露からのビタミンDはIBDが最も頻
発する地域で少ない(Podolosky 1991、Sonnenbergら1991)。ビタミンDの主な
源は皮膚に於ける光分解反応を介する製造から得られるものであり、太陽光暴露
から得られるビタミンDは北方環境で少なく、冬季に特に低い(Clemensら1982
、DeLuca 1993)。ビタミンDの食餌摂取はビタミンDの豊富な自然食品が少な
いために問題である。体重損失がクローン病と診断された患者の65〜75%、
潰瘍性大腸炎の患者の18〜62%で起きている(Fleming 1995、Geerlingら19
98)。一般的ビタミン欠乏及び特殊なビタミン欠乏はIBD患者に生じることが
判明している(Andreassenら1998、Kurokiら1993)。今日まで、ビタミンD状態
とヒト及び動物に於けるIBDの発生率、重篤度との相関可能性は研究されてい
ない。逸話としての情報では、ビタミンD状態がIBD罹患率に影響を及ぼす環
境因子となり得ること及びその相関性の調査が正当であることを示唆している。
Inflammatory bowel disease (IBD) is an immune-mediated disease of unknown etiology that affects the gastrointestinal (GI) tract. There are at least two distinct forms of IBD, ulcerative colitis and Crohn's disease. IBD is a chronic recurrent disease, which most commonly involves inflammation of the terminal jejunum and colon, but these diseases affect many sites throughout the digestive tract. Clearly genetic factors predispose individuals to the development of IBD (Podolosky 1991). In addition, there is reason to believe that the environment contributes to the development of IBD and that vitamin D may be an environmental factor affecting IBD. Since IBD has the highest prevalence in northern environments such as North America and Northern Europe, vitamin D from sun exposure is low in areas where IBD is most frequent (Podolosky 1991, Sonnenberg et al. 1991). The main source of Vitamin D comes from its production via a photolytic reaction in the skin, and Vitamin D from sun exposure is low in the northern environment, especially in winter (Clemens et al. 1982).
, DeLuca 1993). Dietary intake of vitamin D is a problem due to the lack of natural foods rich in vitamin D. 65-75% of patients with weight loss diagnosed with Crohn's disease,
It occurs in 18-62% of patients with ulcerative colitis (Fleming 1995, Geerling et al. 19
98). General and special vitamin deficiencies have been found to occur in IBD patients (Andreassen et al 1998, Kuroki et al 1993). To date, the possible correlation between vitamin D status and the incidence and severity of IBD in humans and animals has not been studied. Anecdotal information suggests that vitamin D status can be an environmental factor affecting IBD morbidity and that a study of its correlation is justified.

【0004】 抹消血球単核細胞に於けるビタミンD受容体の同定は免疫系制御剤としてのビ
タミンDの初期の興味を活気づけた(Bhallaら1983、Provvediniら1983)。特に
、CD4+Th細胞はビタミンD受容体を有するのでビタミンDの標的である(
Veldnanら2000)。ホルモ性活性ビタミンD(1,25‐ジヒドロキシコレカリシ
フェロール)は少なくとも二つの実験的自己免疫疾患の発症を抑制した(Cantor
naら1996、Cantornaら1998a)。インビトロ1,25-ジヒドロキシコレカリシフ
ェロールはT細胞増殖を阻害し、インターロイキン(IL)-2、インターフェロ
ン(ITF)-γ及び腫瘍壊死因子(TNF)-αの産生を減少させた(Lemire 1992a
)。インビボ1,25-ジヒドロキシコレカリシフェロール注入は1型ヘルパーT(
Th1)細胞反応関連の遅延型過敏反応を阻害することが示された(Lemireら19
91、Lemireら1992a)。ビタミンDは一般的免疫系及びT細胞特異的免疫系に於
ける効力ある制御剤である。
Identification of vitamin D receptors in peripheral blood mononuclear cells fueled the early interest of vitamin D as an immune system regulator (Bhalla et al. 1983, Provvedini et al. 1983). In particular, CD4 + Th cells have vitamin D receptors and are therefore targets of vitamin D (
Veldnan et al 2000). Formolytically active vitamin D (1,25-dihydroxycholecalciferol) suppressed the development of at least two experimental autoimmune diseases (Cantor
na et al 1996, Cantorna et al 1998a). In vitro 1,25-dihydroxycholecalciferol inhibited T cell proliferation and decreased the production of interleukin (IL) -2, interferon (ITF) -γ and tumor necrosis factor (TNF) -α (Lemire 1992a
). In vivo infusion of 1,25-dihydroxycholecalciferol is a type 1 helper T (
It was shown to inhibit the delayed type hypersensitivity reaction related to Th1) cell reaction (Lemire et al. 19
91, Lemire et al. 1992a). Vitamin D is a potent regulator of the general and T cell-specific immune system.

【0005】 IBDでは、免疫仲介アタックはGI管に対するものである(Niessner及びVo
lk 1995、Podolosky 1991)。優先的にTh1サイトカイン(IL-2、INF-
γ、TNF-α)を産生するT細胞はナイーブマウスにクローン病様症状を転移
すること(Arandaら1997、Bregenholt及びClaesson 1998)、Th1サイトカイ
ンの産生はヒトに於けるIBDとも関連していること(Niessner及びVolk 1995
)が示された。1,25ジヒドロキシコレカリシフェロール処方は他のT細胞仲
介実験的自己免疫疾患の発症を抑制することが判っている(多発性硬化症及び関
節炎、Cantornaら1996、Cantornaら1998a)。ビタミンDが(1,25-ジヒドロ
キシコレカリシフェロールの産生を介して)IBDの発症及び進行を抑制するで
あろうという仮説は従って信用にたると思われる。
In IBD, the immune-mediated attack is on the GI tract (Niessner and Vo
lk 1995, Podolosky 1991). Preferentially Th1 cytokines (IL-2, INF-
(γ, TNF-α) -producing T cells transfer Crohn's disease-like symptoms to naive mice (Aranda et al. 1997, Bregenholt and Claesson 1998), and Th1 cytokine production is also associated with IBD in humans. (Niessner and Volk 1995
)It has been shown. The 1,25 dihydroxycholecalciferol formulation has been shown to suppress the development of other T cell mediated experimental autoimmune diseases (multiple sclerosis and arthritis, Cantorna et al 1996, Cantorna et al 1998a). The hypothesis that vitamin D will suppress the development and progression of IBD (via the production of 1,25-dihydroxycholecalciferol) seems therefore to be credible.

【0006】 IBD患者の標準的治療には、短期的高用量及び長期的低用量のプレドニゾン
使用が含まれる(Podolosky 1991、Andreassenら1998)。プレドニゾン及びその
他のコルチコステロイド療法は骨無機質密度の減少を招き、多くの場合に高リス
クの椎骨破損をもたらす(Andreassenら1997、Andreassenら1998)。コルチコス
テロイドに患者ビタミンDの補充はステロイド誘発骨損失を防止することが分か
っている(Buckley ら1996)。ビタミンD(1,25-ジヒドロキシコレカリシフェ
ロール)のホルモン活性形態は実験動物(Cantoraら1998b)及びヒト(Ongphip
hadhanakulら2000)に投与された場合に骨無機質化を増加することが知られてい
る。したがって、ビタミンD及び/または1,25-ジヒドロキシコレカリシフェ
ロール補充のさらなる利点は骨無機質密度の維持でもある。
Standard treatments for IBD patients include short-term high-dose and long-term low-dose prednisone use (Podolosky 1991, Andreassen et al 1998). Prednisone and other corticosteroid therapies result in reduced bone mineral density, often leading to high-risk vertebral fracture (Andreassen et al 1997, Andreassen et al 1998). Supplementation of patient vitamin D with corticosteroids has been shown to prevent steroid-induced bone loss (Buckley et al. 1996). The hormonally active forms of Vitamin D (1,25-dihydroxycholecalciferol) are found in laboratory animals (Cantora et al 1998b) and humans (Ongphip).
It has been known to increase bone mineralization when administered to hadhanakul et al. 2000). Thus, a further benefit of vitamin D and / or 1,25-dihydroxycholecalciferol supplementation is also maintenance of bone mineral density.

【0007】 (発明の開示) 本発明は罹患しやすい個体に於ける炎症性腸疾患(IBD)の防止方法及びI
BDの発症を防止し、或いはIBDの症状を減少させる有効量のビタミンD化合
物、好ましくは1,25(OH)23またはその類似体を投与することによるIB
D患者の治療方法である。その方法はIBD患者の選択及びIBD症状を弱める
のに有効なビタミンD類似体の十分量を患者に投与することを包含する。
DISCLOSURE OF THE INVENTION The present invention is a method and method for preventing inflammatory bowel disease (IBD) in susceptible individuals.
IB by administering an effective amount of a vitamin D compound, preferably 1.25 (OH) 2 D 3 or an analogue thereof, which prevents the development of BD or reduces the symptoms of IBD.
This is a method of treating D patient. The method involves selecting an IBD patient and administering to the patient a sufficient amount of a vitamin D analog effective to ameliorate the IBD symptoms.

【0008】 構造的にIBD治療に有効であると判明したビタミンD化合物は以下に示す一
般構造式Iで特徴付けられる。
Vitamin D compounds found to be structurally effective in treating IBD are characterized by the general structural formula I:

【0009】[0009]

【化7】 [Chemical 7]

【0010】 上式中、Y1及びY2は同じまたは違っていてもよく、それぞれ水素及びヒドロ
キシ保護基からなる群から選択され、Z1及びZ2は共に水素またはZ1及びZ2
に=CH2であり、X1及びX2は共に水素、或いは一方が水素で他方はO-アリル
、O-アルキル、アルキル、ヒドロキシアルキルまたはフルオロアルキルであり
、αまたはβ配位を採ることができ、或いは一緒にアルキリデン基、=CR67 を表し、R6およびR7は同じでも異なっていてもよく、それぞれは水素、アルキ
ル、ヒドロキシアルキル及びフルオロアルキルからなる群から選択され、或いは
一緒に‐(CH2)x‐基(xは2〜5の整数)を表し、αまたはβ配位を採るこ
とができ、RはビタミンD型化合物に知られる代表的な任意の側鎖を表す。
Wherein Y 1 and Y 2, which may be the same or different, are each selected from the group consisting of hydrogen and a hydroxy protecting group, Z 1 and Z 2 are both hydrogen or Z 1 and Z 2 are both CH 2 and X 1 and X 2 are both hydrogen, or one is hydrogen and the other is O-allyl, O-alkyl, alkyl, hydroxyalkyl or fluoroalkyl, and can adopt α or β coordination, Or together represent an alkylidene group, ═CR 6 R 7 , R 6 and R 7 may be the same or different and each is selected from the group consisting of hydrogen, alkyl, hydroxyalkyl and fluoroalkyl, or together Represents a (CH2) x- group (x is an integer of 2 to 5), can adopt α or β coordination, and R represents a typical arbitrary side chain known to vitamin D type compounds.

【0011】 さらに特異的にRは直鎖、側鎖または環式でもよい炭素数1〜35の飽和また
は不飽和炭化水素ラジカルを表すこともでき、さらに一つ以上の置換基、すなわ
ちヒドロキシ-または保護されたヒドロキシ基、フルオロ、カルボニル、エステ
ル、エポキシ、アミノまたはその他のヘテロ原子グループを含むこともある。こ
の種の好ましい側鎖は以下の構造で表される。
More specifically, R can also represent a saturated or unsaturated hydrocarbon radical having 1 to 35 carbon atoms which may be straight-chain, side-chain or cyclic, and may further comprise one or more substituents, namely hydroxy- or It may also include a protected hydroxy group, fluoro, carbonyl, ester, epoxy, amino or other heteroatom group. A preferred side chain of this type is represented by the structure:

【0012】[0012]

【化8】 [Chemical 8]

【0013】 上式中、立体化学中心(ステロイド番号付けでのC-20に相当)はまたは
配位を採ることもでき(すなわち炭素20回りの自然配位または20エピ配位)
、式中のZはY,-OY,-CH2OY,-C≡CY及び-CH=CHYから選択され、
二重結合はシスまたはトランス何れでもよく、Yは水素、メチル、-COR5及び
以下の構造のラジカルから選択される。
In the above formula, the stereochemical center (corresponding to C-20 in steroid numbering) is R or S
Coordination is also possible (ie natural coordination around 20 carbons or 20 epi coordination)
Z in the formula is selected from Y, —OY, —CH 2 OY, —C≡CY and —CH═CHY,
The double bond may be either cis or trans and Y is selected from hydrogen, methyl, -COR 5 and radicals of the structure:

【0014】[0014]

【化9】 [Chemical 9]

【0015】 上式中、m及びnは独立的に整数0〜5を表し、R1は水素、重水素、ヒドロ
キシ、保護されたヒドロキシ、フルオロ、トリフルオロメチル及びC1〜5アル
キルから選択されて直鎖、側差でもよく、任意的にヒドロキシ、保護されたヒド
ロキシ置換基を担うこともあり、式中のR2,R3及びR4は独立的に重水素、重水
素アルキル、水素、フルオロ、トリフルオロメチル及びC1〜5アルキルから選
択されて直鎖、側差でもよく、任意的にヒドロキシ、保護されたヒドロキシ置換
基を担うこともあり、R1及びR2は一緒にオキソ基、アルキリデン基、=CR2
3、或いは‐(CH2)p-基(pは2〜5の整数)を表し、R3及びR4は一緒
になってオキソ基、或いは‐(CH2)q基(qは2〜5の整数)を表し、R5
水素、ヒドロキシ、保護されたヒドロキシ、或いはC1〜5アルキルを表し、側
鎖中の20,22または23位の任意のCH-基は窒素原子で置換されてもよく、
或いは20,22及び23位の任意の基、-CH(CH3)-,-CH(R3)-または-C
H(R2)-はそれぞれ酸素または硫黄原子で置換されることもある。
Wherein m and n independently represent the integers 0-5 and R 1 is selected from hydrogen, deuterium, hydroxy, protected hydroxy, fluoro, trifluoromethyl and C 1-5 alkyl. It may be a straight chain or a side chain, and optionally bears a hydroxy or protected hydroxy substituent. In the formula, R 2 , R 3 and R 4 are independently deuterium, deuterium alkyl, hydrogen, fluoro, , Trifluoromethyl and C1-5 alkyl, which may be linear or branched and optionally bear a hydroxy or protected hydroxy substituent, wherein R 1 and R 2 together represent an oxo group, an alkylidene. Base = CR 2
R 3, or - (CH 2) p-group (p is integer of 2 to 5) represents, R3 and R4 oxo group together, or - (CH2) q group (q is integer of 2 to 5 R 5 represents hydrogen, hydroxy, protected hydroxy, or C1-5 alkyl, and any CH-group at the 20,22 or 23 position in the side chain may be substituted with a nitrogen atom,
Alternatively, any group at the 20, 22 and 23 position, --CH (CH 3 )-, --CH (R 3 )-or --C
H (R 2 )-may be substituted with oxygen or sulfur atom, respectively.

【0016】 C-20でのメチル置換基への波線はC-20がRまたはS配位の何れかである
ことを示す。
The wavy line to the methyl substituent at C-20 indicates that C-20 is in either the R or S configuration.

【0017】 自然の20R配位を持つ側鎖の特に重要な例は以下の構造式(a),(b),(
c),(d)及び(e)で表される構造、すなわち25-ヒドロキシビタミンD3 (a)、ビタミンD3(b)、25-ヒドロキシビタミンD2(c)、ビタミンD2(d
)、25-ヒドロキシビタミンD2のC-24エピマー(e)の構造である。
A particularly important example of a side chain having a natural 20R configuration is represented by the following structural formulas (a), (b), (
c), (d) and (e), that is, 25-hydroxyvitamin D 3 (a), vitamin D 3 (b), 25-hydroxyvitamin D 2 (c), vitamin D 2 (d
), The structure of the C-24 epimer (e) of 25-hydroxyvitamin D 2 .

【0018】[0018]

【化10】 [Chemical 10]

【0019】 特に好適なビタミンD類似体は非限定的に以下のものである。1,25-ジヒド
ロキシビタミンD3、1α-ヒドロキシビタミンD3、1,25-ジヒドロキシビタ
ミンD2、19-ノル-1,25-ジヒドロキシビタミンD2、26,27-ヘキサフル
オロ-1,25-ジヒドロキシビタミンD2、1,25-ジヒドロキシ-24(E)-デヒ
ドロ-24-ホモ-ビタミンD3、19-ノル-1,25-ジヒドロキシ-21-エピ-ビ
タミンD3、1α-25-ジヒドロキシビタミンD3三酢酸塩及び25-アセチル-1
α,25-ジヒドロキシビタミンD3。本発明の最も好ましい形態では、化合物1,
25(OH)23である。
Particularly suitable vitamin D analogs are, without limitation, the following: 1,25-dihydroxyvitamin D 3 , 1α-hydroxyvitamin D 3 , 1,25-dihydroxyvitamin D 2 , 19-nor-1,25-dihydroxyvitamin D 2 , 26,27-hexafluoro-1,25-dihydroxy Vitamin D 2 , 1,25-dihydroxy-24 (E) -dehydro-24-homo-vitamin D 3 , 19-nor-1,25-dihydroxy-21-epi-vitamin D 3 , 1α-25-dihydroxyvitamin D 3 triacetate and 25-acetyl-1
α, 25-dihydroxyvitamin D 3 . In the most preferred form of the invention, compound 1,
It is 25 (OH) 2 D 3.

【0020】 上記の化合物はIBD治療組成物中に組成物の約0.01μg/gm乃至約10
0μg/mgの量で存在し、用量約0.01μg/日〜約100μg/日で局所、経
皮、経口または非経口的に投与される。
The above compound may be present in an IBD therapeutic composition in an amount of about 0.01 μg / gm to about 10% of the composition.
It is present in an amount of 0 μg / mg and is administered topically, transdermally, orally or parenterally at a dose of about 0.01 μg / day to about 100 μg / day.

【0021】 本発明のビタミンD化合物の好ましい用量は患者が耐えることができ、重篤な
高カルシウム血症を発症しない最大量である。ビタミンD化合物が1α-ヒドロ
キシ化合物でなければ、ビタミンD化合物の特に有利な一日量は体重160ポン
ドの患者当たり5.0μg〜50μg/日である。ビタミンD化合物が1α-ヒド
ロキシ化合物であれば、好適な用量は160ポンドの患者当たり0.5乃至10
μg/日である。患者のカルシウム摂取が約800mg/日であれば、160ポン
ドの患者当たり0.75μg/日を超える1,25(OH)23の用量は好ましくな
い。患者が低カルシウム食餌及び/または服用が夜遅い場合であれば、高用量の
1,25(OH)23は可能であり、かつ好ましい。本発明の実施態様では、1,2
5(OH)23の投与量は患者の体重160ポンド当たり1.5μg/日の高用量が
可能である。1,25(OH)23の好ましい用量は患者の体重160ポンド当た
り0.5乃至1.0μg/日である。
The preferred dose of the vitamin D compound of the present invention is the maximum that the patient can tolerate and does not develop severe hypercalcemia. If the vitamin D compound is not a 1-hydroxy compound, a particularly advantageous daily dose of the vitamin D compound is 5.0 μg to 50 μg / day per 160 lbs. If the vitamin D compound is a 1-hydroxy compound, the preferred dose is 0.5 to 10 per 160 pounds of patient.
μg / day. If the patient's calcium intake is about 800 mg / day, a dose of 1.25 (OH) 2 D 3 above 0.75 μg / day of 160 pounds of patient is not preferred. High doses of 1.25 (OH) 2 D 3 are possible and preferred if the patient has a low calcium diet and / or is late at night. In an embodiment of the present invention, 1,2
The dose of 5 (OH) 2 D 3 can be as high as 1.5 μg / day per 160 pounds of patient weight. The preferred dose of 1.25 (OH) 2 D 3 is 0.5 to 1.0 μg / day per 160 pounds of patient weight.

【0022】 (発明の詳細な説明) 本明細書及びクレームで使用する用語「ヒドロキシ保護基」はヒドロキシ官能
性を一次的に保護するために通常使用される任意の基、例えばアルコキシカルボ
ニル、アシル、アルキルシリルまたはアルキルアリルシリルなどの基(本明細書
では単に「シリル基」と云う)及びアルコキシアルキル基を意味する。アルコキ
シカルボニル保護基はアルキル-O-CO-基であり、メトキシカルボニル、エト
キシカルボニル、プロポキシカルボニル、イソプロポキシカルボニル、ブトキシ
カルボニル、イソブトキシカルボニル、t-ブトキシカルボニル、ベンジルオキシ
カルボニル、或いはアリルオキシカルボニルなどである。用語「アシル」は炭素
数が1〜6のアルカノイル基、その異性体の全部、或いは炭素数1〜6のカルボ
キシアルカノイル、例えばオギザリル、マロニル、スクシニル、グルタリル基、
或いはベンゾイルまたはハロ、ニトロ、アルキル置換ベンゾイル基などの芳香族
アシル基を意味する。本明細書またはクレームで使用する用語「アルキル」は炭
素数1〜10の直鎖または分枝アルキルラジカル、その異性体の全てを意味する
。アルコキシアルキル保護基はメトキシメチル、エトキシメチル、メトキシエト
キシメチル、或いはテトラヒドロフラニル及びテトラヒドロピラニルなどである
。好ましいシリル保護基はトリメチルシリル、トリエチルシリル、t-ブチルジメ
チルシリル、ジブチルメチルシリル、ジフェニルメチルシリル、フェニルジメチ
ルシリル、ジフェニル-t-ブチルシリル及び類似なアルキル化シリルラジカルで
ある。用語「アリル」はフェニル-、或いはアルキル-、ニトロ-またはハロ-置換
フェニル基を意味する。
DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION As used herein and in the claims, the term “hydroxy protecting group” refers to any group commonly used to temporarily protect hydroxy functionality, such as alkoxycarbonyl, acyl, It refers to groups such as alkylsilyl or alkylallylsilyl (herein simply referred to as "silyl group") and alkoxyalkyl groups. The alkoxycarbonyl protecting group is an alkyl-O-CO- group, such as methoxycarbonyl, ethoxycarbonyl, propoxycarbonyl, isopropoxycarbonyl, butoxycarbonyl, isobutoxycarbonyl, t-butoxycarbonyl, benzyloxycarbonyl or allyloxycarbonyl. is there. The term "acyl" means an alkanoyl group having 1 to 6 carbon atoms, all isomers thereof or a carboxyalkanoyl group having 1 to 6 carbon atoms, for example, oxalyl, malonyl, succinyl, glutaryl group,
Alternatively, it means benzoyl or an aromatic acyl group such as halo, nitro or alkyl-substituted benzoyl group. As used herein or in the claims, the term "alkyl" refers to straight or branched chain alkyl radicals having 1 to 10 carbon atoms, and all isomers thereof. Alkoxyalkyl protecting groups include methoxymethyl, ethoxymethyl, methoxyethoxymethyl, or tetrahydrofuranyl and tetrahydropyranyl. Preferred silyl protecting groups are trimethylsilyl, triethylsilyl, t-butyldimethylsilyl, dibutylmethylsilyl, diphenylmethylsilyl, phenyldimethylsilyl, diphenyl-t-butylsilyl and similar alkylated silyl radicals. The term "allyl" means a phenyl-, or an alkyl-, nitro- or halo-substituted phenyl group.

【0023】 「保護されたヒドロキシ」基は既に規定したようにヒドロキシ官能性の一次的
または恒久的な保護のために通常使用された上述した任意の基、例えばシリル、
アルコキシアルキル、アシルまたはアルコキシカルボニル基など、によって保護
または誘導化されたヒドロキシ基である。用語「ヒドロキシアルキル」、「重水
素アルキル」及び「フルオロアルキル」とは、ヒドロキシ基、重水素またはフル
オロ基のそれぞれ一つ以上で置換されたアルキルラジカルを云う。
A “protected hydroxy” group is any group described above which is normally used for the primary or permanent protection of hydroxy functionality as already defined, eg silyl,
A hydroxy group protected or derivatized by an alkoxyalkyl, acyl or alkoxycarbonyl group. The terms "hydroxyalkyl", "deuterium alkyl" and "fluoroalkyl" refer to an alkyl radical substituted with one or more hydroxy, deuterium or fluoro groups, respectively.

【0024】 用語「ビタミンD化合物」とは、一般構造式Iで規定された化合物を云う。本
明細書中、用語「24-ホモ」は側鎖中24位の炭素で1個のメチレン基付加を
意味し、用語「24ジホモ」は2個のメチレン基付加を意味することに留意され
たい。同様に、用語「トリホモ」は3個のメチレン基の付加を意味する。用語「
26,27-ジメチル」は炭素の26と27位でメチレン基付加を意味するので、
例えばR3及びR4はエチル基である。同様に、用語「26,27-ジエチル」は2
6及び27位での2個のエチル基の付加を意味するので、R3及びR4はプロピル
基を意味する。
The term “vitamin D compound” refers to a compound defined by general structural formula I. It should be noted that in the present specification, the term "24-homo" means one methylene group addition at the carbon at position 24 in the side chain, and the term "24 dihomo" means two methylene group additions. . Similarly, the term "trihomo" means the addition of 3 methylene groups. the term"
"26,27-dimethyl" means the addition of a methylene group at the 26 and 27 positions on the carbon.
For example, R 3 and R 4 are ethyl groups. Similarly, the term "26,27-diethyl" is 2
This means the addition of two ethyl groups at 6 and 27-position, R 3 and R 4 means a propyl group.

【0025】 以下に示す化合物リストに於いて、アルキリデンまたはアルキル置換基が2位
の炭素に付加していれば、この特殊なアルキリデン又はアルキル置換基は命名中
に付加されるべきである。例えば、メチレン基がアルキリデン置換基であれば、
用語「2-メチレン」がそれぞれの命名化合物を先導すべきである。エチレン基
がアルキリデン置換基であれば、用語「2−エチレン」がそれぞれの命名化合物を
先導すべきである。同様に、メチルまたはエチル基がアルキル置換基であれば、
用語「2-メチル」または「2-エチル」はそれぞれ各命名化合物を先導すべきで
あり、以下同様である。また、構造式I中のZ1及びZ2が共に水素であれば、用
語「19ノル」はそれぞれの命名化合物を先導する。さらに、20位炭素に付加
したメチル基がそのエピまたは不自然配位であれば、用語「20(S)」または「
20-エピ」が後に続く各命名化合物中に含められるべきである。命名化合物は所
望であればビタミンD2及び/またはD4タイプであることもある。
In the list of compounds shown below, if an alkylidene or alkyl substituent is attached to the carbon in the 2-position, this particular alkylidene or alkyl substituent should be added in the nomenclature. For example, if the methylene group is an alkylidene substituent,
The term "2-methylene" should lead to each named compound. If the ethylene group is an alkylidene substituent, the term "2-ethylene" should lead to each named compound. Similarly, if the methyl or ethyl group is an alkyl substituent,
The term "2-methyl" or "2-ethyl", respectively, should precede each named compound and so on. Also, if Z 1 and Z 2 in Structural Formula I are both hydrogen, the term “19 nor” leads to the respective named compound. Furthermore, if the methyl group added to the 20-position carbon is in its epi or unnatural configuration, the term "20 (S)" or "
“20-epi” should be included in each nomenclature compound that follows. The nomenclature compound may be of the vitamin D 2 and / or D 4 type if desired.

【0026】 構造式IのビタミンD化合物の特殊及び好適な例は側差が不飽和の場合に、 1α-ヒドロキシ-22-デヒドロビタミンD3、 1,25-ジヒドロキシ-22デヒドロビタミンD3、 1,24-ジヒドロキシ-22デヒドロビタミンD3、 24-ホモ-1,25-ジヒドロキシ-22デヒドロビタミンD3、 24-ジホモ-1,25-ジヒドロキシ-22デヒドロビタミンD3、 24-トリホモ-1,25-ジヒドロキシ-22デヒドロビタミンD3、 26,27-ジメチル-24-ホモ-1,25-ジヒドロキシ-22デヒドロビタミンD 3 、 26,27-ジメチル-24-ジホモ-1,25-ジヒドロキシ-22デヒドロビタミン
3、 26,27-ジメチル-24-トリホモ-1,25-ジヒドロキシ-22デヒドロビタミ
ンD3、 26,27-ジエチル-24-ホモ-1,25-ジヒドロキシ-22デヒドロビタミンD 3 、 26,27-ジエチル-24-ジホモ-1,25-ジヒドロキシ-22デヒドロビタミン
3、 26,27-ジエチル-24-トリホモ-1,25-ジヒドロキシ-22デヒドロビタミ
ンD3、 26,27-ジプロピル-24-ホモ-1,25-ジヒドロキシ-22デヒドロビタミン
3、 26,27-ジプロピル-24-ジホモ-1,25-ジヒドロキシ-22デヒドロビタミ
ンD3、 26,27-ジプロピル-24-トリホモ-1,25-ジヒドロキシ-22デヒドロビタ
ミンD3である。
[0026]   A special and preferred example of the vitamin D compound of structural formula I is when the side difference is unsaturated, 1α-Hydroxy-22-dehydrovitamin D3, 1,25-dihydroxy-22 dehydrovitamin D3, 1,24-dihydroxy-22 dehydrovitamin D3, 24-Homo-1,25-dihydroxy-22 dehydrovitamin D3, 24-dihomo-1,25-dihydroxy-22 dehydrovitamin D3, 24-Trihomo-1,25-dihydroxy-22 dehydrovitamin D3, 26,27-Dimethyl-24-homo-1,25-dihydroxy-22 dehydrovitamin D 3 , 26,27-Dimethyl-24-dihomo-1,25-dihydroxy-22 dehydrovitamin
D3, 26,27-Dimethyl-24-trihomo-1,25-dihydroxy-22 dehydrovitamin
D3, 26,27-Diethyl-24-homo-1,25-dihydroxy-22 dehydrovitamin D 3 , 26,27-diethyl-24-dihomo-1,25-dihydroxy-22 dehydrovitamin
D3, 26,27-diethyl-24-trihomo-1,25-dihydroxy-22 dehydrovitamin
D3, 26,27-dipropyl-24-homo-1,25-dihydroxy-22 dehydrovitamin
D3, 26,27-dipropyl-24-dihomo-1,25-dihydroxy-22 dehydrovitamin
D3, 26,27-dipropyl-24-trihomo-1,25-dihydroxy-22 dehydrovita
Min D3Is.

【0027】 構造式IのビタミンD化合物の特殊及び好適な例は側差が飽和の場合には、 1α-ヒドロキシビタミンD3、 1,25-ジヒドロキシビタミンD3、 1,24-ジヒドロキシビタミンD3、 24-ホモ-1,25-ジヒドロキシビタミンD3、 24-ジホモ-1,25-ジヒドロキシビタミンD3、 24-トリホモ-1,25-ジヒドロキシビタミンD3、 26,27-ジメチル-24-ホモ-1,25-ジヒドロキシビタミンD3、 26,27-ジメチル-24-ジホモ-1,25-ジヒドロキシビタミンD3、 26,27-ジメチル-24-トリホモ-1,25-ジヒドロキシビタミンD3、 26,27-ジエチル-24-ホモ-1,25-ジヒドロキシビタミンD3、 26,27-ジエチル-24-ジホモ-1,25-ジヒドロキシビタミンD3、 26,27-ジエチル-24-トリホモ-1,25-ジヒドロキシビタミンD3、 26,27-ジプロピル-24-ホモ-1,25-ジヒドロキシビタミンD3、 26,27-ジプロピル-24-ジホモ-1,25-ジヒドロキシビタミンD3、 26,27-ジプロピル-24-トリホモ-1,25-ジヒドロキシビタミンD3である
[0027] When a special and preferred examples of vitamin D compounds of structural formula I side difference is saturated, 1.alpha.-hydroxy vitamin D 3, 1,25- dihydroxyvitamin D 3, 1,24- dihydroxyvitamin D 3 , 24-homo-1,25-dihydroxyvitamin D 3 , 24-dihomo-1,25-dihydroxyvitamin D 3 , 24-trihomo-1,25-dihydroxyvitamin D 3 , 26,27-dimethyl-24-homo- 1,25-dihydroxyvitamin D 3, 26,27- dimethyl-24-dihomo -1,25- dihydroxyvitamin D 3, 26,27- dimethyl-24-Torihomo -1,25- dihydroxyvitamin D 3, 26, 27 - diethyl-24-homo -1,25- dihydroxyvitamin D 3, 26,27- diethyl-24-dihomo -1,25- dihydroxyvitamin D 3, 26,27- diethyl -24- Torihomo -1,25- Hydroxyvitamin D 3, 26,27- dipropyl-24-homo -1,25- dihydroxyvitamin D 3, 26,27- dipropyl-24-dihomo -1,25- dihydroxyvitamin D 3, 26,27- dipropyl -24 - Torihomo -1,25- dihydroxy vitamin D 3.

【0028】 基本構造Iを有するビタミンD化合物の合成は通常の一般的方法、すなわち二
環のウィンダウス・グルンドマン型ケトンIIをアリル系ホスフィンオキシドIII
と縮合させて対応するビタミンD類似体IVとし、所望であれば、次いで後者化
合物中C-1及びC-3での脱保護によって行われる。
The synthesis of the vitamin D compound having the basic structure I is a conventional general method, that is, the bicyclic Windaus-Grundmann type ketone II and the allyl phosphine oxide III.
With the corresponding vitamin D analog IV, if desired, followed by deprotection at C-1 and C-3 in the latter compound.

【0029】[0029]

【化11】 [Chemical 11]

【0030】 構造式II,III及びIVに於いて、X1,X2、Y1とY2、Z1とZ2及びRは既に
規定した基を表し、Y1とY2はヒドロキシ保護基であるのが好適であり、敏感で
あると思われる、或いは縮合反応を妨害するR中の官能性は当業者に周知なよう
に適切に保護されているとの理解である。上述のプロセスは収斂合成概念の応用
であり、ビタミンD化合物の合成に効果的に応用されている(例えば、Lythgoeら
、J. Chem. Soc. Perkin Trans. I, 590 (1978)、Lythgoe, Chem. Soc. Rev. 9,
449 (1983) 、Toeら、J. Org. Chem. 48, 1414 (1983) 、Baggioliniら、J. Or
g. Chem. 51, 3098 (1986) 、Sardinaら、J. Chem. 51, 1264 (1986) 、J. Org.
Chem. 51, 1269 (1986) 、DeLucaら、米国特許公報第5,086,191号、DeLucaら、
米国特許公報第5,536,713号) 。
In Structural Formulas II, III and IV, X 1 , X 2 , Y 1 and Y 2 , Z 1 and Z 2 and R represent the groups already defined, and Y 1 and Y 2 represent a hydroxy protecting group. It is understood that is preferably, sensitive or appears to be sensitive, or the functionality in R that interferes with the condensation reaction is appropriately protected, as is well known to those skilled in the art. The process described above is an application of the convergent synthetic concept, which has been effectively applied to the synthesis of vitamin D compounds (eg Lythgoe et al., J. Chem. Soc. Perkin Trans. I, 590 (1978), Lythgoe, Chem. . Soc. Rev. 9,
449 (1983), Toe et al., J. Org. Chem. 48, 1414 (1983), Baggiolini et al., J. Or.
g. Chem. 51, 3098 (1986), Sardina et al., J. Chem. 51, 1264 (1986), J. Org.
Chem. 51, 1269 (1986), DeLuca et al., U.S. Pat.No. 5,086,191, DeLuca et al.
(U.S. Pat. No. 5,536,713).

【0031】 一般構造式IIのヒドロインダノンは既知、または周知な方法で合成できる。か
ような既知の二環式ケトンの特に重要な例は上述した即鎖(a),(b),(c
)及び(d)をもつ構造、すなわち、25-ヒドロキシグルンドマンのケトン(
f)(Baggioliniら、J. Org. Chem. 51, 3098 (1986) )、グルンドマンケトン
(g)(Inhoffenら、Chem. Ber. 90, 664 (1957))、25-ヒドロキシウィンダ
ウスケトン(h)(Baggioliniら、J. Org. Chem. 51, 3098 (1986) )及びウィ
ンダウスケトン(i)(Windausら、Ann. 524,297(1936))である。
Hydroindanones of general structure II are known or can be synthesized by well known methods. Particularly important examples of such known bicyclic ketones are the above-mentioned immediate chains (a), (b), (c
) And (d), that is, the ketone of 25-hydroxy Grundmann (
f) (Baggiolini et al., J. Org. Chem. 51, 3098 (1986)), Grundmann ketone (g) (Inhoffen et al., Chem. Ber. 90, 664 (1957)), 25-hydroxywindausketone (h). ) (Baggiolini et al., J. Org. Chem. 51, 3098 (1986)) and Windaus ketone (i) (Windaus et al. Ann. 524, 297 (1936)).

【0032】[0032]

【化12】 [Chemical 12]

【0033】 一般構造式IIIに必要なホスフィンオキシド合成に関し、その合成経路はPerlm
anらが記述するように、キナ酸メチル誘導体、市場で容易に入手できる(1R,3
R,4S,5R)-(-)キナ酸から出発する方法が開発されている(Tetrahedron Let
t. 32, 7663 (1991)及びDeLucaら、米国特許公報第5,086,191)。
Regarding the synthesis of the phosphine oxide required for general structural formula III, the synthetic route is Perlm
As described by an et al., methyl quinate derivatives, readily available on the market (1R, 3
A method starting from R, 4S, 5R)-(-) quinic acid has been developed (Tetrahedron Let
32, 7663 (1991) and DeLuca et al., US Pat. No. 5,086,191).

【0034】 化合物Iの総合的合成プロセスは1999年8月31日発行の米国特許公報第5,9
45,410、「2-アルキル-19-ノル-ビタミンD化合物」にさらに完全な記述があ
り、その明細書は参照として本明細書の一部を成すものとする。
The overall synthetic process of Compound I is described in US Pat. No. 5,9,93 issued Aug. 31, 1999.
45,410, "2-Alkyl-19-nor-Vitamin D Compounds" has a more complete description, the specification of which is hereby incorporated by reference.

【0035】 本発明は以下に示す実施例によってさらに説明される。この実施例はビタミン
D欠乏がIL-10KOマウスに於いてIBD症状を悪化させることを実証する
。ビタミンD欠乏は動物モデルに於ける腸炎症状を悪化させる。これらのデータ
はIBDの両形態(潰瘍性大腸炎及びクローン病)が1,25(OH)23及び他
のビタミン類自体での処方になじむことを予測させる。
The present invention will be further described by the following examples. This example demonstrates that vitamin D deficiency exacerbates IBD symptoms in IL-10KO mice. Vitamin D deficiency exacerbates the symptoms of intestinal inflammation in animal models. These data predict that both forms of IBD (ulcerative colitis and Crohn's disease) are compatible with prescribing 1.25 (OH) 2 D 3 and other vitamins themselves.

【0036】[0036]

【実施例】【Example】

最近になって、IBD症状が内発的に発生する遺伝子組み換え動物が開発され
た。クローン病に関する最良の動物モデルの一つがIL-10ノックアウト(KO
)マウスである(Kuhnら1993、MacDonald 1994)。通常の動物施設では、IL-1
0KOマウスは生存5〜8週以内に腸炎を発症する(Kuhnら1993)。IL-10
KOマウスの略30%は重篤な貧血及び体重損失の結果死亡する(Kuhnら1993)
。IL-10KOマウスで発症する腸炎は、無細菌IL-10KOマウスでは疾患
を発症しないことから、通常のミクロフロラへの非制御免疫反応に由来するもの
である。さらに特異的病原体のない施設で飼育されたマウスはマウスの死を招か
ない中度の疾患を発症する(Kuhnら1993)。IBDモデルとしてのIL-10K
Oマウス研究には包含された制約が存在する。ビタミンDがIL-10産生の制
御剤であれば、この動物モデルでの結果は「正常」免疫反応で生じると思われる
ことは示さないであろう。しかしながら、クローン病患者は類似な症状を示し、
IL-10産生の抑制があり、IL-10で効果的に治療されている(Narulaら19
98)。
Recently, transgenic animals have been developed in which IBD symptoms develop endogenously. One of the best animal models for Crohn's disease is IL-10 knockout (KO
) Mouse (Kuhn et al. 1993, MacDonald 1994). In a typical animal facility, IL-1
0KO mice develop enteritis within 5-8 weeks of survival (Kuhn et al. 1993). IL-10
Approximately 30% of KO mice die as a result of severe anemia and weight loss (Kuhn et al. 1993).
. The enteritis that develops in IL-10KO mice is due to the uncontrolled immune response to normal microflora, since no disease develops in abacterial IL-10KO mice. Furthermore, mice bred in specific pathogen-free facilities develop moderate disease that does not result in mouse death (Kuhn et al. 1993). IL-10K as an IBD model
There are constraints involved in O-mouse studies. If Vitamin D was a regulator of IL-10 production, the results in this animal model would not indicate that it would appear to occur in a "normal" immune response. However, Crohn's patients show similar symptoms,
There is suppression of IL-10 production and is effectively treated with IL-10 (Narula et al. 19
98).

【0037】 (材料及び方法) マウス。ペンシルバニア州立大学繁殖コロニー産の年齢及び性別マッチC57B
L/6IL-10KO及び野生型(WT)マウス。繁殖対をJackson Laboratory(B
ar Harbor, ME)から入手。ペンシルバニア州立大学の動物施設は特異的病原菌フ
リーであり、したがって繁殖IL-10KOマウスは効果的であった。記述操作
の全てはペンシルバニア州立大学動物管理及び利用委員会研究所(Pennsylvania
State University Institutional Animal Care and Use Committee)で1/25
/99に再調査、承認された。IACUC#番号98118-A0。
Materials and Methods Mouse. Age and Gender Match C57B from Pennsylvania State University Breeding Colonies
L / 6 IL-10KO and wild type (WT) mice. Breeding vs. Jackson Laboratory (B
ar Harbor, ME). The Pennsylvania State University animal facility was specific pathogen-free and therefore bred IL-10KO mice were effective. Pennsylvania State University Animal Care and Use Committee Institute (Pennsylvania)
1/25 at State University Institutional Animal Care and Use Committee)
It was reviewed and approved on / 99. IACUC # number 98118-A0.

【0038】 (食餌) 市販のマウス食餌を与えられた繁殖雌性の単一プールから妊娠第2週の雌性を
選択し、無作為に2群に分配した。ビタミンD欠乏食餌の妊娠ダムから始めて、
乳離れ小児が5週齢までビタミンD欠乏であるようにした(Cantornaら1996)。
全てのマウスは実験室製の人口食餌を給餌された(Yangら1993、Smithら1987の
修飾)。マウスはビタミンD欠乏、ビタミンD十分または1,25-ジヒドロキシ
コレカリシフェロール補充であった。皮膚に於けるビタミンD合成を防止するた
めに、マウスを黄色光の下に住まわせた。全てのマウスは乳離れまでビタミンD
欠乏であった。
Diets Females at the second week of gestation were selected from a single pool of breeding females fed a commercial mouse diet and randomly divided into two groups. Starting from a pregnancy dam on a vitamin D deficient diet,
Weanlings were allowed to be vitamin D deficient until 5 weeks of age (Cantorna et al. 1996).
All mice were fed a laboratory-made artificial diet (Modification of Yang et al. 1993, Smith et al. 1987). Mice were vitamin D deficient, vitamin D sufficient or 1,25-dihydroxycholecalciferol supplement. Mice were kept under yellow light to prevent vitamin D synthesis in the skin. Vitamin D until weaning in all mice
It was lacking.

【0039】 3週齢のビタミンD欠乏マウスを以下に説明する種々の治療群に無差別に割り
当てた。別の実験的自己免疫疾患についての1,25(OH)23治療は食餌カル
シウムが高い場合(1gカルシウム/100g食餌)に最も有効であったので、全
てのマウスに高カルシウム食餌を与えた(Cantornaら1999)。実験食餌を新しく
準備し、実験期間中2乃至3日毎に取り替えた。1,25-ジヒドロキシコレカリ
シフェロール(1,25(OH)23)処方マウスが与えられた1,25(OH)23
確実に全て食するようにするために、8gの食餌を含む食料カップを各実験期間
中(完全に食された)隔日に交換した(Cantornaら1996、Cantornaら1998a)。ビ
タミンD毒性をモニタするために、1,25(OH)23補充マウスを高カルシウ
ム血症の徴候に関し毎日観察した。毎日モニタされた高カルシウム血症の症状に
は、全般的な健康及び体重損失を含ませた。
Three-week-old vitamin D deficient mice were randomly assigned to the various treatment groups described below. 1,25 (OH) 2 D 3 treatment for another experimental autoimmune disease was most effective at high dietary calcium (1 g calcium / 100 g diet), so all mice were fed a high calcium diet (Cantorna et al 1999). The experimental diet was freshly prepared and replaced every 2-3 days during the experimental period. 1,25-Dihydroxycholecalciferol (1,25 (OH) 2 D 3 ) Formulation To ensure that a mouse eats all 1,25 (OH) 2 D 3 given, 8 g of diet was given. The containing food cups were changed every other day (completely eaten) during each experiment (Cantorna et al 1996, Cantorna et al 1998a). To monitor vitamin D toxicity, 1.25 (OH) 2 D 3 -supplemented mice were observed daily for signs of hypercalcemia. Symptoms of hypercalcemia monitored daily included general health and weight loss.

【0040】 (ビタミンD処置) 最初の実験計画では、3週齢のビタミンD欠乏マウスをビタミンD欠乏のまま
維持するか、或いは5.0μgコレカリシフェロール/d含有の実験食餌に切り替
える(ビタミンD十分)かの何れかとした。IBD発症の重篤度をビタミンD欠
乏マウスとビタミンD十分マウスとで比較した。
(Vitamin D Treatment) In the first experimental design, 3-week-old vitamin D-deficient mice were maintained in a vitamin D-deficient state or switched to an experimental diet containing 5.0 μg of cholecalciferol / d (vitamin D). Either). The severity of IBD development was compared between vitamin D deficient and vitamin D sufficient mice.

【0041】 第2シリーズの実験では、3週齢ビタミンD欠乏マウスを2群に分けた。マウ
スの1群では、ビタミンD欠乏食餌を維持し、他の群には0.005μg/dの1
,25(OH)23を補充した。ビタミンD欠乏及び1,25(OH)23補充マウス
を9週齢時に殺傷した。他の群には0.005μg/dの1,25(OH)23を補
充した。ビタミンD欠乏及1,25(OH)23補充マウスを4週後に9週齢で殺
生した。
In the second series of experiments, 3-week-old vitamin D-deficient mice were divided into two groups. One group of mice maintained a vitamin D deficient diet, the other group 0.005 μg / d 1
, 25 (OH) 2 D 3 was replenished. Vitamin D deficient and 1.25 (OH) 2 D 3 supplemented mice were killed at 9 weeks of age. The other group was supplemented with 0.005 μg / d of 1.25 (OH) 2 D 3 . Vitamin D deficient and 1.25 (OH) 2 D 3 supplemented mice were killed 4 weeks later at 9 weeks of age.

【0042】 第3の実験計画では、1,25(OH)23処方をIBD症状の最初の徴候(下
痢、7週齢)時に開始した。ビタミンD欠乏の7週齢マウスを2群に分割した。
第1群にはビタミンD欠乏を維持し、他の群には0.005μg/dの1,25(O
H)23を補充した。マウスを2週間処置し、9週齢マウスを殺生した。
In the third experimental design, the 1.25 (OH) 2 D 3 regimen was initiated at the first signs of IBD symptoms (diarrhea, 7 weeks of age). Seven-week-old mice lacking vitamin D were divided into two groups.
Vitamin D deficiency was maintained in the first group, and 0.005 μg / d of 1,25 (O
H) 2 D 3 was replenished. Mice were treated for 2 weeks and 9 week old mice were killed.

【0043】 (食事制限) ビタミンD欠乏IL-10KOマウスの劇的な体重損失と死亡のために、一連
の制限給餌実験を行った。この実験には3群のマウスを使用した。この実験用の
全てのマウスをビタミンD欠乏に生存の最初の5週間(体重損失の最も早い徴候
)維持した。5週目でビタミンD欠乏IL-10KOマウスを2群に分けた。半
数のマウスをビタミンD欠乏に維持し、他の半数を5.0μg/dのコレカリシフ
ェロール含有ビタミンD十分食餌に切り替えた。さらにビタミンD欠乏WTマウ
ス群を5.0μg/d食餌のコレカルシフェロール含有食餌に切り替えた。ビタミ
ンD欠乏IL-10KOマウスによって食された食物を毎日秤量し、ビタミンD
十分IL-10KO及びWTマウスにビタミンD欠乏IL-10KOマウスが前2
4時間に食した食物量を含有する制限食餌を与えた。
Dietary Restriction A series of restricted feeding experiments was performed due to the dramatic weight loss and mortality of vitamin D deficient IL-10KO mice. Three groups of mice were used in this experiment. All mice for this experiment were maintained on vitamin D deficiency for the first 5 weeks of survival (the earliest sign of weight loss). At the 5th week, vitamin D deficient IL-10KO mice were divided into two groups. Half of the mice were maintained on vitamin D deficiency and the other half were switched to a vitamin D-sufficient diet containing 5.0 μg / d of cholecalciferol. Furthermore, the vitamin D-deficient WT mouse group was switched to a diet containing cholecalciferol in a diet of 5.0 μg / d. Vitamin D deficient IL-10KO Foods eaten by mice were weighed daily to obtain vitamin D
Sufficient IL-10KO and WT mice have vitamin D-deficient IL-10KO mice before 2
A restricted diet containing the amount of food eaten for 4 hours was provided.

【0044】 (血清測定) マウスを5週齢で放血させ、実験の最後にヘモグロビン、カルシウム及び赤血
球数を測定した。血清を2週ごとに収集し、血清カルシウムを測定した(マウス
での正常値は2.00〜2.75mmol/L)。ビタミンD欠乏を血清カルシウム
分析(血清カルシウム1.75mmol/L未満)によって監視した。カルシウム(5
87-A)及びヘモグロビン(525‐A)比色分析キットはSigma Chemical Co.(S
t. Louis, MO)から入手した。血球計数器を用いて赤血球を計数した。
(Serum measurement) Mice were exsanguinated at the age of 5 weeks, and hemoglobin, calcium and red blood cell count were measured at the end of the experiment. Serum was collected every 2 weeks and serum calcium was measured (normal values in mice are 2.00 to 2.75 mmol / L). Vitamin D deficiency was monitored by serum calcium assay (serum calcium less than 1.75 mmol / L). Calcium (5
87-A) and hemoglobin (525-A) colorimetric kits are available from Sigma Chemical Co. (S
t. Louis, MO). Red blood cells were counted using a hemocytometer.

【0045】 (IBD重篤度) 下痢発症関連の死亡率をIL‐10KO及びWTマウスで記録した。さらに、
小腸を取り出して秤量した。IL‐10KOマウスの空腸は肉眼視できるように
膨張していて、他者によってマウスに於けるIBD症状の監視のために利用され
た(Kuhnsら1993)。SIの空腸を燐酸緩衝食塩水中100g/Lホルマリン中に
保存して、Penn State Diagnostic Laboratoryに送って切片化及びヘマトキシリ
ンとエオシンで染色した。それぞれのマウスからのパラフィン切片(4ミクロン
)4枚以上のをKuhnsら(1993)が記述した正確な操作を用いて評価した。切片
の炎症度合いを0から5のスケールに盲検評価した。炎症無しは0、僅かな炎症
性細胞は1、中度の炎症は2、膿瘍生成は3、全般的な炎症性細胞を伴う膿瘍生
成は4、切片全体の多数の炎症を5とした。
IBD Severity Diarrhea incidence-related mortality was recorded in IL-10KO and WT mice. further,
The small intestine was removed and weighed. The jejunum of IL-10KO mice was macroscopically distended and was used by others to monitor IBD symptoms in mice (Kuhns et al. 1993). The jejunum of SI was stored in 100 g / L formalin in phosphate buffered saline and sent to Penn State Diagnostic Laboratory for sectioning and staining with hematoxylin and eosin. Four or more paraffin sections (4 microns) from each mouse were evaluated using the exact procedure described by Kuhns et al. (1993). The degree of inflammation of the sections was blindly evaluated on a scale of 0 to 5. No inflammation was 0, few inflammatory cells were 1, moderate inflammation was 2, abscess formation was 3, abscess formation with general inflammatory cells was 4, and many inflammations in the entire section were 5.

【0046】 (統計分析) 実験を必要に応じ繰り返し、可能な場合に数値を多数実験からの平均としてリ
ポートした。二項比率のための二サンプル試験を記述(Rosner1986)のように図
1に示した百分率値の統計分析に使用した。食餌群(主影響)を比較する単純対
比を用いる繰り返し測定値ANOVAによって体重及び体重獲得を分析した。食
餌及びIL‐10遺伝子型をグループ化因子として用いる二元ANOVAにデー
タを従属させた。フィッシャーの保護最小有意差検定を用いて全てのポストホッ
ク多重比較を行った。マシントックコンピュータの統計プログラム(Statview S
tudent, Abacus Concept, Berkeley, CA)を用いて数値を比較し、P<0.05の
値を有意と考えた。
(Statistical Analysis) The experiment was repeated as necessary, and when possible, the numerical value was reported as an average from multiple experiments. A two sample test for binomial proportions was used for the statistical analysis of the percentage values shown in Figure 1 as described (Rosner 1986). Weight and weight gain were analyzed by repeated measures ANOVA using simple contrasts comparing diet groups (main effects). The data were subjected to binary ANOVA using diet and IL-10 genotype as grouping factors. All post hoc multiple comparisons were performed using Fisher's protected least significant difference test. Machine Tok Computer Statistics Program (Statview S
Tudent, Abacus Concept, Berkeley, CA) was used to compare the numerical values, and a value of P <0.05 was considered significant.

【0047】 (図1) ビタミンD欠乏はIL‐10KOマウスの多数死を誘発する。ビタミンD欠乏
IL‐10KO乳離れマウスを無作為に2群に分けた。一つの群ではビタミンD
欠乏(-D、n=26)を維持し、他方の群には5.0μgコレカリシフェロール
/dを含有する同じ食餌を実験の残り期間中給餌した(+D、n=10)。ビタミ
ンD欠乏WT(‐D、n=20)マウスをこれらの実験に使用した。ビタミンD
欠乏IL‐10KOマウスは下痢の発症に続き死亡した。ビタミンD欠乏WT及
びビタミンD十分IL‐10KOマウスでは下痢の発症または死亡はなかった。
(FIG. 1) Vitamin D deficiency induces mortality in IL-10KO mice. Vitamin D deficient IL-10KO weanling mice were randomly divided into two groups. Vitamin D in one group
Remained deficient (-D, n = 26), 5.0 μg cholecalciferol in the other group
The same diet containing / d was fed for the rest of the experiment (+ D, n = 10). Vitamin D deficient WT (-D, n = 20) mice were used in these experiments. Vitamin D
Deficient IL-10KO mice died following the development of diarrhea. No diarrhea developed or died in vitamin D-deficient WT and vitamin D-sufficient IL-10KO mice.

【0048】 (図2) ビタミンD欠乏及び十分IL‐10KOマウス、ビタミンD欠乏WTマウスの
成長曲線。ビタミンD欠乏IL‐10KO乳離れマウスを無作為に2群に分割し
た。一つの群ではビタミンD欠乏(-D、実験の初めでn=14、終わりでn=
5)が維持され、他方の群には5.0μgコレカリシフェロール/dを含有する同
じ食餌を実験の残り期間中給餌した(+D、n=7)。ビタミンD欠乏WT(‐
D、n=9)マウスをこれらの実験に使用した。ビタミンD十分IL‐10KO
マウスはビタミンD欠乏IL‐10KOマウスに比べ急速に成長した。ビタミン
D欠乏WTマウスの成長は抑制されたが、12週期間にわたって一定であり(+
D WTマウスは+D IL‐10KOマウスよりも週齢7乃至11で体重が有意
に軽量であった、P<0.05)、ビタミンD欠乏WTマウスの体重は12週ま
でビタミンD十分マウスと符合した。ビタミンD‐10KOマウス(+D IL
‐10KOマウスよりも有意に軽量、P<0.05)は6週で成長が停止して体
重損失が始まり、必然的にマウスの死亡をきたす重篤な消耗病に罹患する(12
週までn=5)。数値は平均±SEMである。
(FIG. 2) Growth curves of vitamin D deficient and fully IL-10KO mice, vitamin D deficient WT mice. Vitamin D deficient IL-10KO weanling mice were randomly divided into two groups. Vitamin D deficiency in one group (-D, n = 14 at the beginning of the experiment, n = at the end)
5) was maintained and the other group was fed the same diet containing 5.0 μg cholecalciferol / d for the rest of the experiment (+ D, n = 7). Vitamin D deficiency WT (-
D, n = 9) mice were used for these experiments. Vitamin D enough IL-10KO
Mice grew faster than Vitamin D deficient IL-10KO mice. Growth of Vitamin D deficient WT mice was suppressed but remained constant over a 12 week period (+
D WT mice were significantly lighter at 7 to 11 weeks of age than + D IL-10KO mice, P <0.05), and vitamin D deficient WT mice weighed well with vitamin D sufficient for 12 weeks. did. Vitamin D-10 KO mouse (+ D IL
Significantly lighter than -10 KO mice, P <0.05, suffers from severe wasting disease that results in growth arrest and weight loss at 6 weeks, which inevitably results in mouse death (12).
Until week n = 5). Values are mean ± SEM.

【0049】 結 果 ビタミンD欠乏IL−10KOマウスの死亡率 図1はビタミンD欠乏IL−10KOマウスが7週令目で死亡し始め、9週令
までにビタミンD欠乏IL−10KOマウスの58%が死亡(総数26匹中15
匹が死亡)したことを示す。9週令後もビタミンD欠乏IL−10KOマウスは
衰弱し続け、死亡率が増加した。これに対し、ビタミンD充足IL−10KO(
n=10)マウスとビタミンD欠乏WT(n=20)マウスは13週令目でも健
康に見えた。
Results Mortality of Vitamin D Deficient IL-10KO Mice FIG. 1 shows that vitamin D deficient IL-10KO mice started to die at 7 weeks of age, and by the 9th week of age 58% of vitamin D deficient IL-10KO mice. Died (15 out of 26 total)
The animal died). After 9 weeks of age, vitamin D-deficient IL-10KO mice continued to weaken and the mortality rate increased. In contrast, vitamin D-sufficient IL-10KO (
The n = 10) mice and the vitamin D deficient WT (n = 20) mice appeared healthy even at 13 weeks of age.

【0050】 ビタミンD欠乏IL−10KOマウスはビタミンD充足IL−10KOマウス
およびビタミンD欠乏IL−10WTマウスに比べて成長が遅かった(図2)。
ビタミンD欠乏WTマウスの成長はビタミンD充足IL−10KOマウスよりも
遅かったが、12週令までにはビタミンD充足IL−10KOマウスもビタミン
D欠乏TWマウスも同じ大きさとなった。6週令目までとその後のビタミンD欠
乏IL−10KOマウスは成長が止まり、ビタミンD欠乏WTマウスよりも有意
に小さかった(図2)。9週令目でビタミンD欠乏IL−10KOマウスは食欲
が落ち始め、次の3週間でさらに急速に体重を失った。引き続く実験は9週目で
終了し、IL−10KOマウスに不必要な苦痛を与えないようにした。ビタミン
D欠乏IL−10KOマウスは下痢に続く衰弱病状で死亡した。
Vitamin D-deficient IL-10KO mice grew slower than vitamin D-sufficient IL-10KO and vitamin D-deficient IL-10WT mice (FIG. 2).
Vitamin D-deficient WT mice grew slower than vitamin D-sufficient IL-10KO mice, but by 12 weeks of age both vitamin D-sufficient IL-10KO and vitamin D-deficient TW mice were of similar size. The growth of the vitamin D deficient IL-10KO mice was stopped by the 6th week and thereafter, and was significantly smaller than that of the vitamin D deficient WT mice (FIG. 2). At 9 weeks of age, vitamin D deficient IL-10KO mice began to lose their appetite and lost weight more rapidly over the next 3 weeks. Subsequent experiments were completed at 9 weeks to avoid unnecessary pain in IL-10KO mice. Vitamin D deficient IL-10KO mice died of a debilitating condition followed by diarrhea.

【0051】 ビタミンD欠乏、1,25−ジヒドロキシコレカルシフェロール補充IL−1
0KOマウスにおけるIBD症状 ビタミンD欠乏WTおよびIL−10KOマウスは、1,25(OH)23補充
の対応マウスよりも9週令で体重が軽かった(表1)。ビタミンD欠乏IL−1
0KOマウスの体重は以前の実験よりも軽かった(図2);しかしこの場合には
ビタミンD欠乏IL−10KOマウスで以前に観察された急速な体重減少とは矛
盾がなかった。予測されたとおりに、1,25(OH)23補充マウスの血清カル
シウム値はビタミンD欠乏マウスよりも有意に高かった(P<0.05)(表1
)。ヘモグロビン・レベルと赤血球数は正常であり、ビタミンD欠乏マウス、ビ
タミンD充足マウス、および1,25(OH)23補充IL−10KOとWTマウス
に相違はなかった(データ未開示)。
Vitamin D deficiency, 1,25-dihydroxycholecalciferol supplemented IL-1
IBD Symptoms in 0KO Mice Vitamin D deficient WT and IL-10KO mice were 9 weeks old lighter in weight than corresponding mice supplemented with 1.25 (OH) 2 D 3 (Table 1). Vitamin D deficiency IL-1
The weight of 0KO mice was lighter than in previous experiments (FIG. 2); however, in this case it was consistent with the rapid weight loss previously observed with vitamin D-deficient IL-10KO mice. As expected, serum calcium levels in 1.25 (OH) 2 D 3 -supplemented mice were significantly higher than vitamin D-deficient mice (P <0.05) (Table 1).
). Hemoglobin levels and red blood cell count is normal, vitamin D-deficient mice, vitamin D sufficiency mice, and 1,25 (OH) 2 D 3 different replenishment IL-10KO and WT mice did (data not disclosed).

【0052】 ビタミンD欠乏および充足していたWTマウスは、SIにおいて炎症の兆候も
異常の兆候も示さなかった。ビタミンD欠乏IL−10KOマウスはその1,25
(OH)23補充またはビタミンD充足対応マウスよりもSIが有意により炎症性
であった(P<0.05、表1およびデータ未開示)。ビタミンD欠乏IL−10
KOマウスはその大きさが最も小さかったが、剖検はそれらが極端に大きいSI
を有することを示した。
WT mice that were vitamin D deficient and satisfactory showed no signs of inflammation or abnormalities in SI. Vitamin D deficient IL-10KO mice have 1,25
SI was significantly more inflammatory than in mice with (OH) 2 D 3 supplementation or vitamin D sufficiency (P <0.05, Table 1 and data not disclosed). Vitamin D deficiency IL-10
KO mice were the smallest in size, but autopsy showed that they were extremely large SI.
It was shown to have.

【0053】 短期1,25−ジヒドロキシコレカルシフェロール処理およびIBD重篤度 1,25−ジヒドロキシコレカルシフェロール処理2週後のマウスの体重には
有意な差がなかった(データ未開示)。しかし、ビタミンD欠乏IL−10KO
マウスのSIは大きくなり、1,25(OH)23補充IL−10KOマウス、ビ
タミンD欠乏WTマウスおよび1,25(OH)23補充WTマウスのSIよりも有
意に(P<0.05)より重かった(表2)。事実、ビタミンD欠乏IL−10K
OマウスのSIは全体重の9.9%あり、正常の2倍以上である(約5%、表2
)。わずか2週間程度の1,25(OH)23処理でIL−10KOマウスの小腸
の炎症が減少した。
Short-term 1,25-dihydroxycholecalciferol treatment and IBD severity There was no significant difference in body weight of mice 2 weeks after 1,25-dihydroxycholecalciferol treatment (data not shown). However, vitamin D deficiency IL-10KO
The SI of the mice was increased, and was significantly higher than that of the IL-10KO mice supplemented with 1,25 (OH) 2 D 3 , vitamin D deficient WT mice, and WT mice supplemented with 1,25 (OH) 2 D 3 (P <0. .05) (Table 2). In fact, vitamin D deficient IL-10K
The SI of O mice is 9.9% of the total body weight, which is more than twice the normal SI (about 5%, Table 2).
). Inflammation of the small intestine of IL-10KO mice was reduced by 1.25 (OH) 2 D 3 treatment for about 2 weeks.

【0054】 食餌制限とビタミン欠乏およびIBDの症状 体重減少とビタミンD非欠乏症とが、観察されるIBDの症状進行と関連する
可能性を除外するために、ビタミンD充足IL−10KOマウスおよびWTマウ
スの食餌取り込みを制限した(表3)。食餌制限はビタミンD充足IL−10K
OマウスおよびWTマウスの体重を成功裏に減少させたが、ビタミンD欠乏IL
−10KOマウスはなお有意に小さかった(P<0.05、表3)。IL−10
KOマウスはこの実験で9週までに著しく病的となり、すでに激しく衰弱してい
た。食餌制限はビタミンD充足マウスのIBD症状を変化させなかった。食餌制
限ビタミンD充足IL−10KOマウスではビタミンD欠乏IL−10KOマウス
で見られた明白な小腸結腸炎を発症せず、または死に至ることもなかった。ビタ
ミンD充足食餌制限IL−10KOマウスのSIは以前の実験と異ならず、また
はWT対照と比較しても異なることはなかった(表3)。組織病理学では表3の
重量測定値を確認した(データ未開示)。ビタミンD欠乏IL−10KOマウス
におけるIBDの初期症状はビタミンD欠乏と関連するものであり、エネルギー
または食餌取り込みの減少に関連するものではなかった。
Dietary Restriction and Vitamin Deficiency and IBD Symptoms To exclude the possibility that weight loss and non-vitamin D deficiency are associated with observed IBD symptom progression, vitamin D-sufficient IL-10KO and WT mice. Food intake was restricted (Table 3). Dietary restriction is vitamin D-sufficient IL-10K
Successfully reduced body weight in O and WT mice, but with vitamin D deficient IL
-10 KO mice were still significantly smaller (P <0.05, Table 3). IL-10
KO mice were markedly morbid by 9 weeks in this experiment and were already severely debilitated. Dietary restriction did not change IBD symptoms in vitamin D-sufficient mice. Diet-restricted vitamin D-sufficient IL-10KO mice did not develop or even die the overt enterocolitis found in vitamin D-deficient IL-10KO mice. The SI of vitamin D-sufficient diet-restricted IL-10KO mice did not differ from previous experiments or when compared to WT controls (Table 3). Histopathology confirmed the weight measurements in Table 3 (data not disclosed). Early symptoms of IBD in vitamin D deficient IL-10KO mice were associated with vitamin D deficiency and not with reduced energy or food uptake.

【0055】[0055]

【表1】 1.マウスはすべて生存最初の5週間ビタミンD欠乏(−D)であった。5週
目にマウスを2群に分けた;その半数に0.005μg/日の1,25(OH)23 を4週間補食した。値は平均±SEMである。 *補食対応群と有意な差、P<0.05。 2.IL=インターロイキン;KO=ノックアウト;−D=ビタミンD欠乏;
1,25(OH)23=1,25−ジヒドロキシコレカルシフェロール;WT=野生
型。
[Table 1] 1. All mice were vitamin D deficient (-D) for the first 5 weeks of survival. At week 5 the mice were divided into two groups; half of them were supplemented with 0.005 μg / day 1.25 (OH) 2 D 3 for 4 weeks. Values are mean ± SEM. * Significantly different from the diet-matched group, P <0.05. 2. IL = interleukin; KO = knockout; -D = vitamin D deficiency;
1,25 (OH) 2 D 3 = 1,25- dihydroxy cholecalciferol; WT = wild-type.

【0056】[0056]

【表2】 1.マウスはすべて生存最初の7週間ビタミンD欠乏(−D)であった。7週
令目にビタミンD欠乏IL−10KOマウスは小腸結腸炎症状(下痢および体重
減少)を示し始める。7週令のIL10KOおよびWTマウスを2群に分けた;
その半数に0.2μg/日の1,25(OH)23を2週間補食した。値は平均±S
EMである。 *他のすべての群より有意に大きい、P<0.005。 2.IL=インターロイキン;KO=ノックアウト;−D=ビタミンD欠乏;
1,25(OH)23=1,25−ジヒドロキシコレカルシフェロール;WT=野生
型。
[Table 2] 1. All mice were vitamin D deficient (-D) for the first 7 weeks of survival. At the age of 7 weeks, vitamin D deficient IL-10KO mice begin to show inflammatory symptoms of small intestine (diarrhea and weight loss). 7-week-old IL10KO and WT mice were divided into two groups;
Half of them were supplemented with 0.25 (OH) 2 D 3 at 0.2 μg / day for 2 weeks. Values are mean ± S
EM. * P <0.005, significantly greater than all other groups. 2. IL = interleukin; KO = knockout; -D = vitamin D deficiency;
1,25 (OH) 2 D 3 = 1,25- dihydroxy cholecalciferol; WT = wild-type.

【0057】[0057]

【表3】 1.5週令のビタミンD欠乏マウスをグループ分けし、一方にビタミンD不添
加食餌(−D)を続け、他方は4週間5.0μg/日のコレカルシフェロール添
加食餌(+D)に変えた。+Dマウスはそれ以前24時間にビタミンD欠乏IL
−10KOマウスが摂取した量のみに食餌取り込み量を制限した。値は平均±S
EMである。 *他のすべての群と有意に異なる、P<0.005。 2.IL=インターロイキン;KO=ノックアウト;−D=ビタミンD欠乏;
+D=1,25(OH)23充足;WT=野生型。
[Table 3] 1.5-week-old vitamin D-deficient mice were divided into groups, one was continued with a vitamin D-free diet (-D), and the other was switched to a diet supplemented with 5.0 μg / day cholecalciferol (+ D) for 4 weeks. . + D mice had vitamin D deficient IL 24 hours earlier
Dietary uptake was limited only to the amount ingested by -10KO mice. Values are mean ± S
EM. * P <0.005, significantly different from all other groups. 2. IL = interleukin; KO = knockout; -D = vitamin D deficiency;
+ D = 1,25 (OH) 2 D 3 sufficient; WT = wild type.

【0058】 考 察 ビタミンD欠乏症はIL−10KOマウスの小腸結腸炎の症状を悪化させるが
、僅か2週間の1,25−ジヒドロキシコレカルシフェロール処理によりこれら
マウスのIBD症状は改善する。これらの知見はビタミンD状態がIBDの発症
決定における重要な因子であり、さらにIBDの生理的調節剤としてのビタミン
Dを立証する。これは最初の実験的証明であり、ビタミンD状態とIBDとの関
連性を示している。
Observations Vitamin D deficiency exacerbates the symptoms of enterocolitis in IL-10KO mice, but treatment with 1,25-dihydroxycholecalciferol for only 2 weeks ameliorate the IBD symptoms in these mice. These findings demonstrate that vitamin D status is an important factor in determining the onset of IBD, and further vitamin D as a physiological regulator of IBD. This is the first experimental proof and shows a link between vitamin D status and IBD.

【0059】 ビタミンD欠乏IL−10KOマウスの経時的IBDの進行は、通常の動物施
設で飼育されたIL−10KOマウスで進行するIBDに匹敵する(クーン(Ku
hn)ら、1993)。IL−10KOマウスの消化管における微生物叢がビタミ
ンD欠乏時に掻き乱され、その結果、疾患原因微生物が拡散増殖して病気を引き
起こすということが(ありそうもないが)可能性としてある。この可能性を試す
実験はビタミン欠乏無菌マウスで実施し得るが、微生物叢のない状態では恐らく
小腸結腸炎が発症しないであろう。より可能なこととしては、微生物叢はビタミ
ンD状態に応答して変化することはないが、代わりにビタミンD欠損下では免疫
応答が変化し、IL−10KOマウスではより重症のIBDに至る。
The progression of IBD over time in vitamin D deficient IL-10KO mice is comparable to that of IBD progressing in IL-10KO mice housed in normal animal facilities (Kuen (Ku
hn) et al., 1993). It is possible (though unlikely) that the microbiota in the digestive tract of IL-10KO mice are disturbed during vitamin D deficiency, resulting in the disease-causing microorganisms multiplying and causing disease. Experiments testing this possibility can be performed in vitamin-deficient sterile mice, but in the absence of microbiota, enterocolitis will probably not develop. More likely, the microbiota does not change in response to vitamin D status, but instead changes the immune response in the absence of vitamin D, leading to more severe IBD in IL-10KO mice.

【0060】 蓄積しつつある証拠が示唆することは、ビタミンDはCD4+T細胞の調節剤
であり、これが自己免疫疾患の原因となることである(カントーマ(Cantoma)
ら、1996;カントーマら、1998c)。一つの可能なビタミンD作用メカ
ニズムはCD4+T細胞の負の調節にあり、これらIBDの原因となる。ビタミ
ンDはCD4+T細胞のエフェクター機能をインビトロおよびインビボの両方で
直接阻害することが示されている(シピテルリとサントーニ(Cippitelli and S
antoni)、1998;レミール(Lemire)1992)。他の可能性としては、ビ
タミンDがIBD原因T細胞の誘発または機能を阻害するT細胞またはその他の
細胞の正の調節剤であることである。ビタミンDの2種類の可能な標的は、形質
転換増殖因子(TGF)β1およびIL−4分泌細胞である(カントーマら、1
998c)。TGF−β1とIL−4の産生増大はインビボで1,25−ジヒド
ロキシコレカルシフェロール処理したマウスで起こることが示されている(カン
トーマら、1998c)。さらに、TGF−β1とIL−4の産生はT細胞エフ
ェクター機能の阻害と多くの自己免疫疾患の抑制に関係している(グリョー(Gr
oux)ら、1997)。免疫系のビタミンD調節は多分複雑で、多様な標的が関
連し、それらが一緒になって1,25−ジヒドロキシコレカルシフェロールによ
るIBD進行抑制のメカニズムを説明する。
Accumulating evidence suggests that vitamin D is a modulator of CD4 + T cells, which is responsible for autoimmune disease (Cantoma)
Et al., 1996; Kantoma et al., 1998c). One possible mechanism of vitamin D action lies in the negative regulation of CD4 + T cells and is responsible for these IBDs. Vitamin D has been shown to directly inhibit the effector function of CD4 + T cells both in vitro and in vivo (Cippitelli and Santoni).
antoni), 1998; Lemire 1992). Another possibility is that vitamin D is a positive regulator of T cells or other cells that inhibits the induction or function of IBD-causing T cells. Two possible targets of vitamin D are transforming growth factor (TGF) β1 and IL-4 secreting cells (Kantoma et al., 1
998c). Increased production of TGF-β1 and IL-4 has been shown to occur in vivo in mice treated with 1,25-dihydroxycholecalciferol (Kantoma et al., 1998c). Furthermore, the production of TGF-β1 and IL-4 is associated with inhibition of T cell effector function and suppression of many autoimmune diseases (Gryo (Gr
Oux) et al., 1997). Vitamin D regulation of the immune system is probably complex and involves multiple targets, which together explain the mechanism by which 1,25-dihydroxycholecalciferol inhibits IBD progression.

【0061】 IBD患者の標準的治療は短期間に高用量のプレドニソンを使用することと、
長期間低用量で使用することからなる(アンドレアセン(Andreassen)ら、19
98;ポドロスキー(Podolosky)1991)。プレドニソンおよび他のコルチ
コステロイド療法は骨の無機質密度を低下させ、多くの場合、椎骨破断の危険性
を生じる(アンドレアセンら、1997;アンドレアセンら、1998)。コル
チコステロイド患者のビタミンD補充はステロイド誘発性骨喪失を予防すること
が示されている(バックレイ(Buckley)ら、1996)。ビタミンD(1,25
−ジヒドロキシコレカルシフェロール)のホルモンによる活性型を実験動物(カ
ントーマら、1998b)およびヒト(オングフィファダナクール(Ongphiphad
hanakul)ら、2000)に与えた場合、骨の鉱化作用を増大させることが知ら
れている。このように、ビタミンDおよび/または1,25−ジヒドロキシコレ
カルシフェロール補充のさらなる利点は骨の無機質密度維持にある。
The standard treatment for IBD patients is to use high doses of prednisone in the short term,
Consisting of long-term, low-dose use (Andreassen et al., 19
98; Podolosky 1991). Prednisone and other corticosteroid therapies reduce bone mineral density, often resulting in the risk of vertebral fracture (Andreasen et al., 1997; Andreasen et al., 1998). Vitamin D supplementation in patients with corticosteroids has been shown to prevent steroid-induced bone loss (Buckley et al., 1996). Vitamin D (1.25
-The hormonally active form of dihydroxycholecalciferol was tested in experimental animals (Kantoma et al., 1998b) and in humans (Ongphiphadakul).
hanakul) et al., 2000) is known to increase bone mineralization. Thus, a further benefit of vitamin D and / or 1,25-dihydroxycholecalciferol supplementation is in maintaining bone mineral density.

【0062】 このデータは、1,25−ジヒドロキシコレカルシフェロールとその類似体が
IBD患者に対する新しい有効な治療剤であることを示唆している。1,25−
ジヒドロキシコレカルシフェロール治療の可能性のある限界は高カルシウム血症
であり、結果としてそうなり得る。このように、大いに有望なのは標準的治療剤
と併用するビタミンD類似体についてである。標準的治療剤は多くの場合良好に
作用するが、多くの副作用ももつ;例えば、骨喪失であるが、これはビタミンD
類似体が逆転させるかまたは完全に阻止するはずである。コルチコステロイドま
たはスルファサラジンとの併用によるビタミンD類似体は、これら薬物の有効用
量を低減し、副作用を制限し得るものであって、ヒトIBDの新しい有効な治療
剤であることを証明している。
This data suggests that 1,25-dihydroxycholecalciferol and its analogs are new effective therapeutic agents for IBD patients. 1,25-
A possible limitation of dihydroxycholecalciferol treatment is hypercalcemia, and as a result it can. Thus, great promise is for vitamin D analogs in combination with standard therapeutic agents. Standard therapeutic agents often work well, but also have many side effects; for example, bone loss, which is vitamin D.
The analog should reverse or completely block. Vitamin D analogs in combination with corticosteroids or sulfasalazine can reduce the effective dose of these drugs and limit side effects, proving to be a new and effective therapeutic agent for human IBD. .

【0063】 治療を目的として、式Iで定義される本発明の新規化合物は医薬としての適用
のために、無害な溶媒の溶液として、または適切な溶媒もしくは担体中のエマル
ジョン、懸濁液もしくは分散液として、または固形担体と共にピル、錠剤もしく
はカプセルとして、技術上常套の既知方法により製剤化することが可能である。
かかる製剤はいずれも他の医薬的に許容し得る非毒性添加剤、例えば、安定剤、
抗酸化剤、結合剤、着色剤または乳化もしくは味改善剤を含有していてもよい。
For therapeutic purposes, the novel compounds of the present invention as defined by formula I are suitable for pharmaceutical application as a solution in a harmless solvent or as an emulsion, suspension or dispersion in a suitable solvent or carrier. It can be formulated as a liquid or as a pill, tablet or capsule with a solid carrier by methods well known in the art.
All such formulations include other pharmaceutically acceptable non-toxic additives such as stabilizers,
It may contain anti-oxidants, binders, colorants or emulsifying or taste-improving agents.

【0064】 該化合物は経口、局所、非経口または経皮投与することができる。有利には、
該化合物は注射により、または静脈内注入液もしくは適切な無菌溶液により、ま
たは液状もしくは固形投与形状にて消化管を経て、または経皮投与に適したクリ
ーム、軟膏、パッチもしくは同様の媒体の形状で投与することができる。該化合
物の日用量は0.01μgないし100μgで治療目的に適しているが、かかる
用量は使用する特定化合物の活性、治療すべき疾患、その重篤度、および対象者
の反応に対応して、技術上よく理解されているように調整する。各化合物は単独
で、または段階的用量の他の活性ビタミンD化合物と共に―例えば、1α−ヒド
ロキシビタミンD2および/またはD3を1α,25−ジヒドロキシビタミンD3
併用して適切に投与することができる−この場合には、骨無機質動員とカルシウ
ム輸送刺激の程度に差をつけるのが有利であることが判明している。
The compound may be administered orally, topically, parenterally or transdermally. Advantageously,
The compound may be injected, or by intravenous infusion or a suitable sterile solution, or in liquid or solid dosage form via the gastrointestinal tract, or in the form of a cream, ointment, patch or similar vehicle suitable for transdermal administration. It can be administered. The daily dose of the compound is from 0.01 μg to 100 μg, which is suitable for therapeutic purposes, but such dose corresponds to the activity of the particular compound used, the disease to be treated, its severity and the reaction of the subject, Adjust as is well understood in the art. Appropriate administration of each compound alone or in combination with graded doses of other active vitamin D compounds-eg 1α-hydroxyvitamin D 2 and / or D 3 in combination with 1α, 25-dihydroxyvitamin D 3 It is possible-in this case it has proved to be advantageous to differentiate between the extent of bone mineral recruitment and the stimulation of calcium transport.

【0065】 上記IBD治療に使用する組成物は、活性成分として上記式Iにより定義され
る1種以上のビタミンD化合物の有効量と、適切な担体とを含んでなる。本発明
に従い使用するかかる化合物の有効量は、組成物約0.01μgないし約100
μgであり、1日用量約0.01μgないし約100μgで局所的、経皮的、経
口的または非経口的に投与し得る。
The composition for use in treating IBD comprises an effective amount of one or more vitamin D compounds as defined by formula I above as active ingredients and a suitable carrier. An effective amount of such a compound for use in accordance with the invention is from about 0.01 μg to about 100 compositions.
μg and may be administered topically, transdermally, orally or parenterally in a daily dose of about 0.01 μg to about 100 μg.

【0066】 該化合物はクリーム、ローション、軟膏、局所パッチ、ピル、カプセルもしく
は錠剤として、または医薬的に無害で許容し得る溶媒もしくは油中の溶液、エマ
ルジョン、分散液もしくは懸濁液として製剤化可能であり、かかる製剤はさらに
他の医薬的に無害なまたは有益な成分、例えば、安定剤、抗酸化剤、乳化剤、着
色剤、結合剤もしくは味改善剤を含んでいてもよい。
The compound may be formulated as a cream, lotion, ointment, topical patch, pill, capsule or tablet, or as a solution, emulsion, dispersion or suspension in a pharmaceutically harmless acceptable solvent or oil. Such formulations may further comprise other pharmaceutically harmless or beneficial ingredients such as stabilizers, antioxidants, emulsifiers, colorants, binders or taste improvers.

【0067】 本発明の製剤は従って医薬的に許容し得る担体と任意の他の治療成分と共に活
性成分を含んでなる。該担体は製剤の他の成分と両立し得る意味で“許容し得る
”ものでなければならず、その受容者を害する物であってはならない。
The formulations of the present invention thus comprise an active ingredient together with a pharmaceutically acceptable carrier and any other therapeutic ingredients. The carrier must be “acceptable” in the sense of being compatible with the other ingredients of the formulation and not injurious to its recipient.

【0068】 経口投与に適する本発明の製剤は、各々が予め決められた量の活性成分を含む
ようにしたカプセル、分包、錠剤またはロゼンジの形状;粉末または顆粒の形状
;水性液または非水性液の溶液または懸濁液の形状;または水中油型エマルジョ
ンまたは油中水型エマルジョンの形状とすることができる。
Formulations of the invention suitable for oral administration may be in the form of capsules, sachets, tablets or lozenges, each containing a predetermined amount of active ingredient; in the form of powder or granules; aqueous liquid or non-aqueous. It can be in the form of a liquid solution or suspension; or in the form of an oil-in-water emulsion or a water-in-oil emulsion.

【0069】 直腸投与製剤は活性成分とカカオ脂などの担体とを包含する坐剤の形状または
浣腸剤の形状であってもよい。
Formulations for rectal administration may be in the form of suppositories which contain the active ingredient and a carrier such as cocoa butter or an enema.

【0070】 非経口投与に適した製剤は、簡便には、無菌の油性もしくは水性の活性成分製
剤からなり、好ましくは受容者の血液と等調性のものである。
Formulations suitable for parenteral administration conveniently consist of a sterile oily or aqueous active ingredient formulation, which is preferably isotonic with the blood of the recipient.

【0071】 局所投与に適する製剤は液状もしくは半液状の製剤、例えば、リニメント剤、
ローション、塗布剤、水中油型もしくは油中水型エマルジョン、例えば、クリー
ム、軟膏またはペーストなど;または滴剤などの溶液もしくは懸濁剤;またはス
プレーなどである。
Formulations suitable for topical administration include liquid or semi-liquid formulations such as liniment,
Lotions, coatings, oil-in-water or water-in-oil emulsions, such as creams, ointments or pastes; or solutions or suspensions, such as drops; or sprays.

【0072】 該製剤は、簡便には、投与用量単位の形状で提供するのがよく、薬学の技術分
野で周知の方法により調製することができる。“投与用量単位”とは単位量、す
なわち、患者に物理的化学的に安定な単位用量として投与し得る単一の用量であ
り、活性成分そのもの、またはそれと固体もしくは液状の製剤用希釈剤または担
体との混合物を含んでなる。
The formulations may conveniently be presented in dosage unit form and may be prepared by any of the methods well known in the art of pharmacy. A "dosage unit" is a unit dose, that is, a single dose that can be administered to a patient as a physically and chemically stable unit dose, either the active ingredient itself or a solid or liquid pharmaceutical diluent or carrier therewith. And a mixture with.

【図面の簡単な説明】[Brief description of drawings]

【図1】 1,25(OH)23欠乏インターロイキン-10野生型マウス(IL-10Wt)と
比較した1,25(OH)23欠乏(-D)維持または1,25(OH)23補充(+D)何
れかのインターロイキン-10ノックアウトマウス(IL-10KO)の死亡率を示
すグラフである。
FIG. 1 1.25 (OH) 2 D 3 deficient interleukin-10 wild type mice (IL-10Wt) compared to 1.25 (OH) 2 D 3 deficient (−D) maintenance or 1.25 (OH) ) is a graph showing the mortality 2 D 3 supplement (+ D) or interleukin-10 knockout mice (IL-10KO).

【図2】 1,25(OH)23欠乏IL-10Wtマウスと比較した1,25(OH)23
欠乏(-D)維持または1,25(OH)23補充(+D)何れかのIL-10KOマウス
成長曲線を示すグラフである。
FIG. 2 1.25 (OH) 2 D 3 compared to 1.25 (OH) 2 D 3 deficient IL-10Wt mice.
FIG. 9 is a graph showing growth curves of IL-10KO mice that were either depleted (−D) maintained or 1.25 (OH) 2 D 3 supplemented (+ D).

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 FI テーマコート゛(参考) // C07C 401/00 C07C 401/00 (31)優先権主張番号 60/208,632 (32)優先日 平成12年6月1日(2000.6.1) (33)優先権主張国 米国(US) (31)優先権主張番号 60/231,906 (32)優先日 平成12年9月11日(2000.9.11) (33)優先権主張国 米国(US) (81)指定国 EP(AT,BE,CH,CY, DE,DK,ES,FI,FR,GB,GR,IE,I T,LU,MC,NL,PT,SE,TR),OA(BF ,BJ,CF,CG,CI,CM,GA,GN,GW, ML,MR,NE,SN,TD,TG),AP(GH,G M,KE,LS,MW,MZ,SD,SL,SZ,TZ ,UG,ZW),EA(AM,AZ,BY,KG,KZ, MD,RU,TJ,TM),AE,AG,AL,AM, AT,AU,AZ,BA,BB,BG,BR,BY,B Z,CA,CH,CN,CR,CU,CZ,DE,DK ,DM,DZ,EE,ES,FI,GB,GD,GE, GH,GM,HR,HU,ID,IL,IN,IS,J P,KE,KG,KP,KR,KZ,LC,LK,LR ,LS,LT,LU,LV,MA,MD,MG,MK, MN,MW,MX,MZ,NO,NZ,PL,PT,R O,RU,SD,SE,SG,SI,SK,SL,TJ ,TM,TR,TT,TZ,UA,UG,US,UZ, VN,YU,ZA,ZW Fターム(参考) 4C086 AA01 AA02 DA14 MA04 MA52 MA55 MA63 NA14 ZA66 ZA68 ZB11 4H006 AA03 AB28 UA12 UA13 UA42─────────────────────────────────────────────────── ─── Continuation of front page (51) Int.Cl. 7 Identification code FI theme code (reference) // C07C 401/00 C07C 401/00 (31) Priority claim number 60 / 208,632 (32) Priority date June 1, 2000 (June 1, 2000) (33) Priority claiming country United States (US) (31) Priority claim number 60 / 231,906 (32) Priority date September 11, 2000 ( September 11, 2000 (33) Priority claiming country United States (US) (81) Designated country EP (AT, BE, CH, CY, DE, DK, ES, FI, FR, GB, GR, IE, IT , LU, MC, NL, PT, SE, TR), OA (BF, BJ, CF, CG, CI, CM, GA, GN, GW, ML, MR, NE, SN, TD, TG), AP (GH , GM, KE, LS, MW, MZ , SD, SL, SZ, TZ, UG, ZW), EA (AM, AZ, BY, KG, KZ, MD, RU, TJ, TM), AE, AG, AL, AM, AT, AU, AZ, BA , BB, BG, BR, BY, BZ, CA, CH, CN, CR, CU, CZ, DE, DK, DM, DZ, EE, ES, FI, GB, GD, GE, GH, GM, HR, HU, ID, IL, IN, IS, JP, KE, KG, KP, KR, KZ, LC, LK, LR, LS, LT, LU, LV, MA, MD, MG, MK, MN, MW, MX , MZ, NO, NZ, PL, PT, RO, RU, SD, SE, SG, SI, SK, SL, TJ, TM, TR, TT, TZ, UA, UG, US, UZ, VN, YU, ZA, ZWF F terms (reference) 4C086 AA01 AA02 DA14 MA04 MA52 MA55 MA63 NA14 ZA66 ZA68 ZB11 4H006 AA03 A B28 UA12 UA13 UA42

Claims (27)

【特許請求の範囲】[Claims] 【請求項1】 炎症性腸疾患の治療方法であって、有効量のビタミンD化合
物を当該疾患の患者に投与することを特徴とする方法。
1. A method for treating inflammatory bowel disease, which comprises administering an effective amount of a vitamin D compound to a patient having the disease.
【請求項2】 該疾患が潰瘍性結腸炎である請求項1記載の方法。2. The method according to claim 1, wherein the disease is ulcerative colitis. 【請求項3】 該疾患がクローン病である請求項1記載の方法。3. The method according to claim 1, wherein the disease is Crohn's disease. 【請求項4】 該ビタミンD化合物が1α−ヒドロキシ化合物である請求項
1記載の方法。
4. The method according to claim 1, wherein the vitamin D compound is a 1α-hydroxy compound.
【請求項5】 該ビタミンD化合物が1α,25−ジヒドロキシビタミンD3 である請求項4記載の方法。5. The method according to claim 4, wherein the vitamin D compound is 1α, 25-dihydroxyvitamin D 3 . 【請求項6】 該ビタミンD化合物を経口投与する請求項1記載の方法。6. The method according to claim 1, wherein the vitamin D compound is orally administered. 【請求項7】 該ビタミンD化合物を非経口投与する請求項1記載の方法。7. The method according to claim 1, wherein the vitamin D compound is parenterally administered. 【請求項8】 該ビタミンD化合物を経皮投与する請求項1記載の方法。8. The method of claim 1, wherein said vitamin D compound is administered transdermally. 【請求項9】 該ビタミンD化合物を一日あたりの投与量0.01μgない
し100μgで投与する請求項1記載の方法。
9. The method according to claim 1, wherein the vitamin D compound is administered at a daily dose of 0.01 μg to 100 μg.
【請求項10】 炎症性腸疾患の治療方法であって、有効量の式: 【化1】 [ただし、式中Y1およびY2は同一であるかまたは異なって、それぞれ水素およ
びヒドロキシ保護基からなる群より選択される;Z1およびZ2は両方が水素であ
るか、またはZ1とZ2が一緒になって=CH2である;X1およびX2は両者が水
素であるか、または一方が水素で他方がO−アリール、O−アルキル、アルキル
、ヒドロキシアルキルまたはフルオロアルキルであり、αまたはβの配置を採り
得るものであるか、または一緒になってアルキレン基=CR67を表す;R6
よびR7は同一であるかまたは異なって、それぞれ水素、アルキル、ヒドロキシ
アルキルおよびフルオロアルキルから選択されるか、または一緒になって基−(
CH2)x−を表す;xは2ないし5の整数であり、αまたはβの配置を採り得る
ものである;基Rは式: 【化2】 [ただし、式中20位炭素の立体化学中心はRまたはSの配置を有する;ZはY
、−OY、−CH2OY、−C≡CYおよび−CH=CHYから選択される;該
二重結合はcisまたはtransの幾何配置を採り得る;また、Yは水素、メチル、−
COR5および構造式: 【化3】 (ただし、式中mおよびnは独立して0ないし5の整数を表す;R1は水素、重
水素、ヒドロキシ、保護ヒドロキシ、フルオロ、トリフルオロメチル、および直
鎖または分枝であって、任意にヒドロキシまたは保護ヒドロキシ置換基を有して
いてもよいC1-5アルキルから選択される;R2、R3およびR4はそれぞれ独立し
て重水素、重水素化アルキル、水素、フルオロ、トリフルオロメチル、および直
鎖または分枝であって、任意にヒドロキシまたは保護ヒドロキシ置換基を有して
いてもよいC1-5アルキルから選択される;また、R1およびR2は一緒になって
オキソ基、またはアルキリデン(alkylidene)基、=CR23、また
は基−(CH2)p−を表す;pは2ないし5の整数である;また、R3およびR4
一緒になってオキソ基または基−(CH2)q−を表す;qは2ないし5の整数であ
る;またR5は水素、ヒドロキシ、保護ヒドロキシ、またはC1-5アルキルを表す
;また側鎖の20、22、または23位のCH基は窒素原子と置き換わってもよ
く、あるいは20、22、または23位の基−CH(CH3)−、−CH(R3)−、
または−CH(R2)−のいずれもがそれぞれ酸素またはイオウ原子と置き換わっ
てもよい)で示される基から選択される]で表される] で示される化合物を当該疾患の患者に投与することを特徴とする方法。
10. A method of treating inflammatory bowel disease, comprising an effective amount of the formula: [However, Y 1 and Y 2 in the formula are the same or different and are selected from the group consisting of hydrogen and hydroxy protecting groups, respectively; or both Z 1 and Z 2 is hydrogen, or Z 1 and Z 2 together is ═CH 2 ; X 1 and X 2 are both hydrogen or one is hydrogen and the other is O-aryl, O-alkyl, alkyl, hydroxyalkyl or fluoroalkyl. , Α or β configuration, or taken together represent an alkylene group = CR 6 R 7 ; R 6 and R 7 are the same or different and each is hydrogen, alkyl, hydroxyalkyl. And fluoroalkyl, or taken together as a group-(
CH 2 ) x- ; x is an integer of 2 to 5 and may have an α or β configuration; the group R is of the formula: [Wherein the stereochemical center of the 20th carbon has the R or S configuration; Z is Y
, —OY, —CH 2 OY, —C≡CY and —CH═CHY; the double bond may have a cis or trans geometry; and Y is hydrogen, methyl, —
COR 5 and structural formula: (In the formula, m and n each independently represent an integer of 0 to 5; R 1 is hydrogen, deuterium, hydroxy, protected hydroxy, fluoro, trifluoromethyl, and linear or branched, and Selected from C 1-5 alkyl optionally having hydroxy or protected hydroxy substituents; R 2 , R 3 and R 4 are each independently deuterium, deuterated alkyl, hydrogen, fluoro, tri Selected from fluoromethyl and C 1-5 alkyl which may be linear or branched and optionally bear hydroxy or protected hydroxy substituents; and R 1 and R 2 together oxo group or alkylidene (alkylidene) group,, = CR 2 R 3, or a group - (CH 2) p - are expressed; p is 2 to 5 integer; and, R 3 and R 4 together Oh Seo group or a group - (CH 2) q - are presented; q is 2 to 5 integer; and R 5 is hydrogen, hydroxy, protected hydroxy or C 1-5 alkyl; also the side chains 20, 22, or position 23 CH groups may be replaced by a nitrogen atom, or 20, 22 or 23-position of the group -CH, (CH 3) -, - CH (R 3) -,
Or each of -CH (R 2 )-may be replaced by an oxygen or sulfur atom respectively.]]] To a patient with the disease. A method characterized by.
【請求項11】 該疾患が潰瘍性結腸炎である請求項10記載の方法。11. The method of claim 10, wherein the disease is ulcerative colitis. 【請求項12】 該疾患がクローン病である請求項10記載の方法。12. The method according to claim 10, wherein the disease is Crohn's disease. 【請求項13】 該化合物を経口投与する請求項10記載の方法。13. The method of claim 10 wherein the compound is administered orally. 【請求項14】 該化合物を非経口投与する請求項10記載の方法。14. The method of claim 10, wherein the compound is administered parenterally. 【請求項15】 該化合物を経皮投与する請求項10記載の方法。15. The method of claim 10 wherein the compound is administered transdermally. 【請求項16】 該化合物を一日あたりの投与量0.01μgないし100
μgで投与する請求項10記載の方法。
16. A daily dose of 0.01 μg to 100 of said compound.
The method according to claim 10, which is administered in μg.
【請求項17】 該化合物が1,25−ジヒドロキシビタミンD3、1α−ヒ
ドロキシビタミンD3、1,25−ジヒドロキシビタミンD2、19−ノル−1,2
5−ジヒドロキシビタミンD2、26,27−ヘキサフルオロ−1,25−ジヒド
ロキシビタミンD2、1,25−ジヒドロキシ−24(E)−デヒドロ−24−ホ
モ−ビタミンD3、19−ノル−1,25−ジヒドロキシ−21−エピ−ビタミン
3、1α,25−ジヒドロキシビタミンD3トリ酢酸、および25−アセチル−
1α,25−ジヒドロキシビタミンD3からなる群より選択されるものである請求
項10記載の方法。
17. The compound is 1,25-dihydroxyvitamin D 3 , 1α-hydroxyvitamin D 3 , 1,25-dihydroxyvitamin D 2 , 19-nor-1,2.
5-dihydroxyvitamin D 2, 26,27- hexafluoro -1,25- dihydroxyvitamin D 2, 1,25- dihydroxy -24 (E) - dehydro-24-homo - vitamin D 3, 19-nor-1, 25-dihydroxy-21-epi-vitamin D 3 , 1α, 25-dihydroxyvitamin D 3 triacetic acid, and 25-acetyl-
The method according to claim 10, which is selected from the group consisting of 1α, 25-dihydroxyvitamin D 3 .
【請求項18】 患者が低カルシウム食事療法中である請求項10記載の方
法。
18. The method of claim 10, wherein the patient is on a low calcium diet.
【請求項19】 炎症性腸疾患に罹患し易い個体において該疾患の進行を防
止する、または発症を遅延させる方法であって、該個体に有効量のビタミンD化
合物を投与することを特徴とする方法。
19. A method for preventing the progression of or delaying the onset of an inflammatory bowel disease in an individual susceptible to inflammatory bowel disease, which comprises administering to said individual an effective amount of a vitamin D compound. Method.
【請求項20】 ビタミンD化合物が式: 【化4】 [ただし、式中Y1およびY2は同一であるかまたは異なって、それぞれ水素およ
びヒドロキシ保護基からなる群より選択される;Z1およびZ2は両方が水素であ
るか、またはZ1とZ2が一緒になって=CH2である;X1およびX2は両社が水
素であるか、または一方が水素で他方がO−アリール、O−アルキル、アルキル
、ヒドロキシアルキルまたはフルオロアルキルであり、αまたはβの配置を採り
得るものであるか、または一緒になってアルキリデン(alkylidene)
基、=CR67を表す;R6およびR7は同一であるかまたは異なって、それぞれ
水素、アルキル、ヒドロキシアルキルおよびフルオロアルキルから選択されるか
、または一緒になって基−(CH2)x−を表す;xは2ないし5の整数であり、α
またはβの配置を採り得るものである;基Rは式: 【化5】 [ただし、式中20位炭素の立体化学中心はRまたはSの配置を有する;ZはY
、−OY、−CH2OY、−C≡CYおよび−CH=CHYから選択される;該
二重結合はcisまたはtransの幾何配置を採り得る;また、Yは水素、メチル、−
COR5および構造式: 【化6】 (ただし、式中mおよびnは独立して0ないし5の整数を表す;R1は水素、重
水素、ヒドロキシ、保護ヒドロキシ、フルオロ、トリフルオロメチル、および直
鎖または分枝であって、任意にヒドロキシまたは保護ヒドロキシ置換基を有して
いてもよいC1-5アルキルから選択される;R2、R3およびR4はそれぞれ独立し
て重水素、重水素化アルキル、水素、フルオロ、トリフルオロメチル、および直
鎖または分枝であって、任意にヒドロキシまたは保護ヒドロキシ置換基を有して
いてもよいC1-5アルキルから選択される;また、R1およびR2は一緒になって
オキソ基、またはアルキリデン(alkylidene)基、=CR23、また
は基−(CH2)p−を表す;pは2ないし5の整数である;また、R3およびR4
一緒になってオキソ基または基−(CH2)q−を表す;qは2ないし5の整数であ
る;またR5は水素、ヒドロキシ、保護ヒドロキシ、またはC1-5アルキルを表す
;また側鎖の20、22、または23位のCH基は窒素原子と置き換わってもよ
く、あるいは20、22、または23位の基−CH(CH3)−、−CH(R3)−、
または−CH(R2)−のいずれもがそれぞれ酸素またはイオウ原子と置き換わっ
てもよい)で示される基から選択される]で表される] で示される化合物である請求項19記載の方法。
20. The vitamin D compound has the formula: [However, Y 1 and Y 2 in the formula are the same or different and are selected from the group consisting of hydrogen and hydroxy protecting groups, respectively; or both Z 1 and Z 2 is hydrogen, or Z 1 and Z 2 together is ═CH 2 ; X 1 and X 2 are both hydrogen or one is hydrogen and the other is O-aryl, O-alkyl, alkyl, hydroxyalkyl or fluoroalkyl. , Α or β configurations, or taken together as an alkylidene
Group, = represents a CR 6 R 7; R 6 and R 7 are the same or different and are either each hydrogen, alkyl, selected from hydroxyalkyl and fluoroalkyl, or together based on - (CH 2 ) x - represents a; x is an integer from 2 to 5, alpha
Or β configuration is possible; the group R has the formula: [Wherein the stereochemical center of the 20th carbon has the R or S configuration; Z is Y
, —OY, —CH 2 OY, —C≡CY and —CH═CHY; the double bond may have a cis or trans geometry; and Y is hydrogen, methyl, —
COR 5 and structural formula: (In the formula, m and n each independently represent an integer of 0 to 5; R 1 is hydrogen, deuterium, hydroxy, protected hydroxy, fluoro, trifluoromethyl, and linear or branched, and Selected from C 1-5 alkyl optionally having hydroxy or protected hydroxy substituents; R 2 , R 3 and R 4 are each independently deuterium, deuterated alkyl, hydrogen, fluoro, tri Selected from fluoromethyl and C 1-5 alkyl which may be linear or branched and optionally bear hydroxy or protected hydroxy substituents; and R 1 and R 2 together oxo group or alkylidene (alkylidene) group,, = CR 2 R 3, or a group - (CH 2) p - are expressed; p is 2 to 5 integer; and, R 3 and R 4 together Oh Seo group or a group - (CH 2) q - are presented; q is 2 to 5 integer; and R 5 is hydrogen, hydroxy, protected hydroxy or C 1-5 alkyl; also the side chains 20, 22, or position 23 CH groups may be replaced by a nitrogen atom, or 20, 22 or 23-position of the group -CH, (CH 3) -, - CH (R 3) -,
Or each of —CH (R 2 ) — may be replaced with an oxygen or sulfur atom).]]].
【請求項21】 該化合物が1α,25−ジヒドロキシビタミンD3である請
求項20記載の方法。
21. The method of claim 20, wherein said compound is 1α, 25-dihydroxyvitamin D 3 .
【請求項22】 該化合物が1α−ヒドロキシ化合物である請求項20記載
の方法。
22. The method of claim 20, wherein the compound is a 1α-hydroxy compound.
【請求項23】 該化合物が1,25−ジヒドロキシビタミンD3、1α−ヒ
ドロキシビタミンD3、1,25−ジヒドロキシビタミンD2、19−ノル−1,2
5−ジヒドロキシビタミンD2、26,27−ヘキサフルオロ−1,25−ジヒド
ロキシビタミンD2、1,25−ジヒドロキシ−24(E)−デヒドロ−24−ホ
モ−ビタミンD3、19−ノル−1,25−ジヒドロキシ−21−エピ−ビタミン
3、1α,25−ジヒドロキシビタミンD3トリ酢酸、および25−アセチル−
1α,25−ジヒドロキシビタミンD3からなる群より選択されるものである請求
項20記載の方法。
23. The compound is 1,25-dihydroxyvitamin D 3 , 1α-hydroxyvitamin D 3 , 1,25-dihydroxyvitamin D 2 , 19-nor-1,2.
5-dihydroxyvitamin D 2, 26,27- hexafluoro -1,25- dihydroxyvitamin D 2, 1,25- dihydroxy -24 (E) - dehydro-24-homo - vitamin D 3, 19-nor-1, 25-dihydroxy-21-epi-vitamin D 3 , 1α, 25-dihydroxyvitamin D 3 triacetic acid, and 25-acetyl-
21. The method according to claim 20, which is selected from the group consisting of 1α, 25-dihydroxyvitamin D 3 .
【請求項24】 当該有効量が約0.01μg/日ないし約100μg/日
の当該化合物を含んでなる請求項19記載の方法。
24. The method of claim 19, wherein said effective amount comprises from about 0.01 μg / day to about 100 μg / day of said compound.
【請求項25】 該化合物を経口投与する請求項19記載の方法。25. The method of claim 19, wherein the compound is administered orally. 【請求項26】 該化合物を非経口投与する請求項19記載の方法。26. The method of claim 19, wherein the compound is administered parenterally. 【請求項27】 該化合物を経皮投与する請求項19記載の方法。27. The method of claim 19, wherein said compound is administered transdermally.
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