ES2600081T3 - Uso de glucosaminoglicanos sulfatados para mejorar la biodisponibilidad del Factor VIII - Google Patents

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Abstract

Factor VIII para uso en el tratamiento o prevención de un trastorno hemorrágico, comprendiendo dicho tratamiento o prevención la inyección no intravenosa de dicho Factor VIII junto con un glucosaminoglicano sulfatado, en el que el Factor VIII se administra subcutáneamente a una dosis de 50 UI/kg de peso corporal a alrededor de 1,000 UI/kg de peso corporal, y en el que la cantidad del glucosaminoglicano sulfatado está entre 0.001 y 100 mg por mL de producto aplicado.

Description

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DESCRIPCION
Uso de glucosaminoglicanos sulfatados para mejorar la biodisponibilidad del Factor VIII
La presente invencion se refiere al uso combinado de un Factor VIII y un glucosaminoglicano sulfatado para el tratamiento y la prevencion de trastornos hemorragicos, por lo cual se incrementa la biodisponibilidad del Factor VIII.
Antecedentes de la invencion
Factor VIII (FVIII)
FVIII es una glucoprotema del plasma sangumeo con una masa molecular de aproximadamente 280 kDa, producida en el hugado de los mairnferos. Es un componente crucial de la cascada de reacciones de coagulacion que da lugar a la coagulacion sangumea. Comprendido en esta cascada se encuentra un paso en el cual el Factor IXa (FIXa), junto con el Factor VIII activado (FVIIIa), convierte el Factor X (FX) en una forma activada, FXa. FVIIIa actua como un cofactor en este paso, donde es necesario junto con los iones de calcio y los fosfolfpidos para maximizar la actividad de FIXa. El trastorno hemofflico mas comun esta causado por la eficiencia del FVIII denominada hemofilia A.
Un avance importante en el tratamiento de la hemofilia A ha sido el aislamiento de clones de ADNc que codifican la secuencia completa de 2351 aminoacidos del FVIII humano (patente de Estados Unidos N.° 4 757 006) y el poder disponer de la secuencia de ADN del gen del FVIII humano y de metodos recombinantes para su produccion.
El analisis de la secuencia primaria de aminoacidos deducida del FVIII humano determinada a partir del ADNc clonado indica que es un heterodfmero procesado a partir de un polipeptido precursor mas grande. El heterodfmero esta constituido por una cadena ligera C-terminal de aproximadamente 80 kDa en una asociacion dependiente de iones metalicos con una cadena pesada N-terminal de aproximadamente 200 kDa. (Remftase a la revision de Kaufman, Transfusion Med. Revs. 6:235 (1992)). La activacion fisiologica del heterodfmero ocurre mediante la escision proteolttica de las cadenas proteicas por parte de la trombina. La trombina escinde la cadena pesada para generar una protema de 90 kDa y, posteriormente, fragmentos de 54 kDa y 44 kDa. La trombina tambien escinde la cadena ligera de 80 kDa para generar una protema de 72 kDa. Es esta ultima protema y los dos fragmentos de la cadena pesada (54 kDa y 44 kDa anteriores), unidos entre sf por iones de calcio, los que constituyen el FVIII activo. La inactivacion ocurre cuando el fragmento de la cadena pesada A2 de 44 kDa se disocia de la molecula o cuando los dominios de 72 kDa y 54 kDa son escindidos adicionalmente por la trombina, protema C activada o FXa. En el plasma, el FVIII esta estabilizado por la asociacion con un exceso molar de 50 veces de la protema Factor de Von Willebrand (“VWF”), que parece inhibir la destruccion proteolftica del FVIII como se ha descrito anteriormente.
La secuencia de aminoacidos del FVIII esta organizada en tres dominios estructurales: un dominio triplicado A de 330 aminoacidos, un unico dominio B de 980 aminoacidos y un dominio duplicado C de 150 aminoacidos. El dominio B no tiene homologfa con otras protemas y proporciona 18 de los 25 sitios de glucosilacion unidos a la asparagina(N) de esta protema. Aparentemente, el dominio B no tiene ninguna funcion en la coagulacion, se puede eliminar, y la molecula FVIII con el dominio B eliminado aun presenta actividad procoagulante.
Factor de Von Willebrand (VWF)
El VWF es una glucoprotema adhesiva multimerica presente en el plasma de los mamfferos, que tienen multiples funciones fisiologicas. Durante la hemostasia primaria, el VWF actua como un mediador entre receptores espedficos en la superficie de los trombocitos y los componentes de la matriz extracelular tales como el colageno. Ademas, el VWF actua como una protema portadora y estabilizadora para el FVIII procoagulante. El FVIII es sintetizado en las celulas endoteliales y megacariocitos como una molecula precursora de 2813 aminoacidos. El polipeptido precursor, pre-pro-VWF, esta constituido por un peptido senal de 22 residuos, un propeptido de 741 residuos y el polipeptido de 2050 residuos que se encuentra en el VWF del plasma maduro (Fischer et al. FEBS Lett. 351: 345-348, 1994). Tras la secrecion en el plasma, el VWF circula en forma de varias especies con diferentes tamanos moleculares. Estas moleculas de VWF estan constituidas por oligo- y multfmeros de la subunidad madura de 2050 residuos aminoaddicos. El VWF se puede observar normalmente en el plasma como un dfmero y hasta multfmeros constituidos por 50-100 dfmeros (Ruggeri et al., Thromb. Haemost. 82: 576-584, 1999). La semivida in vivo del VWF humano en la circulacion humana es de aproximadamente 12 horas.
El trastorno hemorragico heredado con mayor frecuencia los seres humanos es la enfermedad de von Villebrand (VWD). Dependiendo de la gravedad de los smtomas hemorragicos, la VWD puede ser tratada con la terapia de reemplazo con concentrados que contienen el VWF, obtenido en general a partir de plasma humano, pero el VWF recombinante tambien esta en desarrollo. El VWF se puede preparar a partir del plasma humano como se describe, por ejemplo, en el documento EP 0503991. En la patente EP 0784632 se describe un metodo para aislar VWF recombinante.
Se sabe que el VWF estabiliza el FVIII in vivo y, por lo tanto, desempena una funcion crucial para regular los niveles
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plasmaticos del FVIII y, como consecuencia, es un factor esencial para controlar la hemostasia. Tambien se sabe que tras la administracion intravenosa de preparados farmaceuticos que contienen el VWF a pacientes con VWD se puede observar un aumento en el FVIII:C endogeno de 1 a 3 unidades por mL en 24 horas, lo que demuestra el efecto estabilizador in vivo del VWF sobre el FVIII.
En general, los pacientes se benefician del modo de accion espedfico de los principios activos, pero en la actualidad, todos los preparados del Factor VIII comercializados se administran mediante una administracion intravenosa que conlleva un riesgo de infecciones en el sitio de inyeccion y, en general, es un procedimiento que los pacientes deseanan evitar, especialmente en el tratamiento de ninos con defectos en su sistema de coagulacion.
Hasta la fecha, el tratamiento habitual de la hemofilia A y la VWD conlleva frecuentes infusiones intravenosas de preparados del FVIII y concentrados del VWF. El tratamiento de la hemofilia B requiere la administracion bisemanal de Factor IX, y en el tratamiento de pacientes inhibidores con FVIIa, se usan multiples administraciones de FVIIa por semana para evitar las hemorragias.
Por lo general, estas terapias de reemplazo son eficaces pero, sin embargo, en los pacientes con hemofilia A grave que estan en tratamiento profilactico, el Factor VIII se ha de administrar por via intravenosa (i.v.) aproximadamente 3 veces a la semana debido a la corta semivida plasmatica del Factor VIII de aproximadamente 12 horas. Con tan solo conseguir niveles del FVIII por encima de un 1% de los del plasma humano normal, que corresponden a una elevacion de los niveles del FVIII de 0.01 U/mL, la hemofilia A grave se convierte en hemofilia A moderada. En la terapia profilactica, se disena la pauta posologica de manera que los niveles mmimos de actividad del FVIII no disminuyan por debajo de niveles de un 2-3% de la actividad del FVIII de los pacientes que no son hemofflicos.
La administracion de un Factor VIII mediante administracion intravenosa es complicada, asociada con el dolor y conlleva el riesgo de infeccion, especialmente porque se lleva a cabo principalmente en tratamientos en casa por parte de los propios pacientes o por parte de los padres de los ninos que han sido diagnosticados con hemofilia A. Ademas, las inyecciones intravenosas frecuentes dan como resultado inevitablemente la formacion de cicatrices, lo que interfiere con futuras infusiones. Ya que el tratamiento profilactico en la hemofilia grave comienza en las primeras etapas de la vida, donde los ninos a menudo tienen menos de 2 anos de edad, es aun mas diffcil inyectar el FVIII 3 veces a la semana en las venas de pacientes pequenos de este tipo. Durante un periodo limitado de tiempo, la implantacion de sistemas de vfas puede ofrecer una alternativa. Sin embargo, en estos casos pueden ocurrir infecciones repetidas y las vfas pueden provocar molestias durante el ejercicio ffsico.
Por lo tanto, la eliminacion de la necesidad de infundir el Factor VIII por via intravenosa supone una gran necesidad medica.
Se ha propuesto la administracion subcutanea del Factor VIII, p. ej., en los documentos WO 95/01804 A1 y WO 95/026750. Sin embargo, se han de administrar dosis muy elevadas del Factor VIII para conseguir una biodisponibilidad aceptable.
Otro enfoque para mejorar la biodisponibilidad con la administracion no intravenosa, ha sido usar Factor VIII fusionado a albumina (documento WO 2011/020866 A2).
Es sumamente deseable mejorar la biodisponibilidad del Factor VIII tras una administracion no intravenosa. Los inventores de esta solicitud descubrieron sorprendentemente que la biodisponibilidad del Factor VIII aumenta sustancialmente si este se administra junto con glucosaminaglicanos sulfatados.
Compendio de la invencion
En un primer aspecto, la presente invencion se refiere, por lo tanto, a un Factor FVIII para su uso en el tratamiento o prevencion de un trastorno hemorragico, comprendiendo dicho tratamiento o prevencion la inyeccion no intravenosa de dicho Factor VIII y de un glucosaminoglicano sulfatado.
En un aspecto adicional, la presente invencion como se define en las presentes reivindicaciones se refiere por lo tanto a un Factor VIII para su uso en el tratamiento o prevencion de un trastorno hemorragico, comprendiendo dicho tratamiento o prevencion la inyeccion no intravenosa de dicho Factor VIII y de un glucosaminoglicano sulfatado, en el que, durante un periodo desde 2 horas tras la inyeccion hasta 48 horas despues de la inyeccion, el nivel plasmatico del Factor VIII en el sujeto tratado es continuamente mayor que 2% del nivel plasmatico normal del Factor VIII en sujetos sanos cuando el Factor VIII se administra subcutaneamente a una dosis de 50 a 100 UI/kg de peso corporal, y en el que la cantidad de glucosaminoglicano sulfatado administrado esta entre 0.001 y alrededor de 100 mg/ml de producto aplicado.
En todos los aspectos de la descripcion, el Factor VIII es preferentemente Factor VIII humano. Un glucosaminoglicano sulfatado preferido es la heparina, de la manera mas preferida la heparina es heparina no fraccionada.
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Descripcion de la Figura
La Figura 1 muestra los resultados del Ejemplo 1. La biodisponibilidad del FVIII aumenta si se coadministra un glucosaminoglicano sulfatado. Como se puede observar, el dextran sulfato no tiene ningun efecto positivo.
Descripcion detallada
La presente invencion trata sobre el tratamiento y la profilaxis de trastornos hemorragicos.
La expresion “trastornos hemorragicos”, tal como se utiliza en la presente, incluye la hemofilia A familiar y adquirida.
De acuerdo con el primer aspecto de la invencion, se proporciona un uso terapeutico, no intravenoso, de un Factor VIII, que comprende la coadministracion de un glucosaminoglicano sulfatado.
El Factor VIII puede ser polipeptidos de Factor VIII natural o polipeptidos de Factor VIII que puede contener mutaciones. El grado y la ubicacion de la glucosilacion u otras modificaciones postraduccionales pueden variar dependiendo de las celulas hospedadoras escogidas y de la naturaleza del entorno celular hospedador. Cuando se hace referencia a secuencias de aminoacidos espedficas, las modificaciones postraduccionales de tales secuencias estan englobadas en esta solicitud.
Las expresiones “Factor VIII” y “FVIII” se utilizan indistintamente en la presente. El “Factor VIII” incluye el Factor VIII natural, asf como tambien derivados del Factor VIII natural que tienen la actividad procoagulante del Factor VII natural. Los derivados pueden tener deleciones, inserciones y/o adiciones en comparacion con la secuencia de aminoacidos del Factor VIII natural. La expresion “Factor VIII” incluye formas procesadas proteoltticamente del Factor VIII, p. ej., la forma anterior a la activacion, que comprende la cadena pesada y la cadena ligera.
La expresion “Factor VIII” incluye cualesquiera variantes o mutantes del Factor VIII que tienen al menos un 10%, preferentemente al menos un 25%, mas preferentemente al menos un 50%, de la manera mas preferida al menos un 75% de la actividad biologica del Factor VIII natural. Una prueba adecuada para determinar la actividad biologica del Factor VIII es el ensayo de coagulacion de una etapa o de dos etapas (Rizza et al., 1982. Coagulation assay of FVIII:C and FIXa en Bloom ed. The Hemophilias. NY Churchill Livingston 1992) o el ensayo de actividad del sustrato cromogenico del FVIII (S. Rosen, 1984, Scand. J. Haematol. 33: 139-145, supl.). El contenido de esas referencias incorpora a la presente por referencia.
Como ejemplos no limitantes, las moleculas del Factor VIII incluyen mutantes del Factor VIII que evitan o reducen la escision de APC (Amano 1998, Thromb. Haemost. 79:557-563), moleculas del FVIII fusionadas con albumina (WO 2011/020866 A2), moleculas de fusion FVIII-Fc (WO 04/101740 A), mutantes del Factor VIII que estabilizan adicionalmente el dominio A2 (WO 97/40145), mutantes del FVIII que dan como resultado una mayor expresion (Swaroop et al. 1997. JBC 272:24121-24124), mutantes del Factor VIII con una menor inmunogenicidad (Lollar 1999. Thromb. Haemost. 82:505-508), FVIII reconstituido a partir de cadenas pesadas y ligeras expresadas de manera diferente (Oh et al. 1999. Exp. Mol. Med. 31:95-100), mutantes del FVIII que reducen la union a los receptores que dan lugar al catabolismo del FVIII como HSPG (proteoglicanos de heparan sulfato) y/o LRP (protema relacionada con el receptor de lipoprotemas de baja densidad) (Ananyeva et al. 2001. TCM, 11:251-257), variantes del FVIII estabilizadas por enlaces disulfuro (Gale et al., 2006. J. Thromb. Hemost. 4:1315-1322), mutantes del FVIII con mejores propiedades secretoras (Miao et al., 2004. Blood 103:3412-3419), mutantes del FVIII con una mayor actividad espedfica del cofactor (Wakabayashi et al., 2005. Biochemistry 44:10298-304), mutantes del FVIII con una mejor biosmtesis y secrecion, menor interaccion de chaperonas del RE, mejor transporte RE-Golgi, mayor activacion o resistencia a la inactivacion y mejor semivida (resumido por Pipe 2004. Sem. Thromb. Hemost. 30:227-237) y mutantes del FVIII que tienen una delecion de todo el dominio B o parte de este (remttase, p. ej., a los documentos WO 2004/067566 A1, WO 02/102850 A2, WO 00/24759 A1 y la patente de EE. UU. N.° 4 868 112). Se prefieren especialmente las moleculas FVIII que son moleculas FVIII “monocatenarias”. El FVIII monocatenario tiene una delecion de todo el dominio B o parte de este y una direccion de toda la region a3 acida o de una parte de esta, de manera que el sitio de escision en Arg1648 (que es escindido normalmente durante la secrecion) se elimina. Las moleculas FVIII monocatenarias se divulgan en, p. ej., los documentos WO 2004/067566 A1; US 2002/132306 A1; Krishnan et al. (1991) European Journal of Biochemistry vol. 195, n.° 3, paginas 637-644; Herlitschka et al. (1998) Journal of Biotechnology, vol. 61, n.° 3, paginas 165-173; Donath et al. (1995) Biochem. J., vol. 312, paginas 49-55.
Todos estos mutantes y variantes del Factor VIII se incorporan a la presente por referencia en su totalidad.
La secuencia de aminoacidos de la forma natural madura del Factor VIII humano se muestra en la SEQ ID NO:2. La referencia a una posicion aminoaddica de una secuencia espedfica se refiere a la posicion de dicho aminoacido en la protema FVIII natural y no excluye la presencia de mutaciones, p. ej., deleciones, inserciones y/o sustituciones en otras posiciones de la secuencia a la que se hace referencia. Por ejemplo, una mutacion en “Glu2004” referida a la SEQ ID NO:2 no excluye que en el homologo modificado uno o mas aminoacidos entre las posiciones 1 y la 2332 de la SEQ ID NO:2 esten ausentes. Una secuencia de ADN que codifica la SEQ ID NO:2 se muestra en la SEQ ID
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NO:1.
El termino “glucosaminoglicano”, tal como se utiliza en la presente, se refiere a un oligo- o polisacarido que comprende especialmente unidades de aminohexosa. Los glucosaminoglicanos sulfatadados incluyen, sin caracter limitante, condroitina sulfato, dermatan sulfato, queratan sulfato, heparina y heparan sulfato. Preferentemente, el glucosaminoglicano sulfatado es heparina, de la manera mas preferida, el glucosaminoglicano sulfatado es heparina no fraccionada.
El termino “heparina” incluye heparina no fraccionada y heparinas que tiene un bajo peso molecular. En una realizacion, la heparina utilizada de acuerdo con esta invencion es “heparina no fraccionada” que puede tener un peso molecular promedio de entre aproximadamente 8 kDa y aproximadamente 30 kDa, preferentemente entre aproximadamente 10 kDa y aproximadamente 20 kDa, de la manera mas preferida entre aproximadamente 12 kDa y aproximadamente 16 kDa, p. ej., aproximadamente 15 kDa. En otra realizacion, la heparina utilizada de acuerdo con esta invencion es una heparina de bajo peso molecular (LMWH, por sus siglas en ingles). Las LMWH son heparinas o sales de heparina que tienen un peso molecular promedio inferior a 8000 Da y por lo cual al menos un 60% de todas las cadenas tiene un peso molecular inferior a 8000 Da. Preferentemente, el peso molecular de la LMWH utilizada de acuerdo con esta invencion esta comprendido entre aproximadamente 2 kDa y aproximadamente 8 kDa, mas preferentemente entre aproximadamente 3 kDa y aproximadamente 6 kDa, de la manera mas preferida entre aproximadamente 4 kDa y aproximadamente 5 kDa, p. ej., aproximadamente 4.5 kDa. Las LMWH se puede obtener mediante varios metodos de fraccionamiento o despolimerizacion de heparina polimerica. Los ejemplos de LMWH incluyen, sin caracter limitante, ardeparina (Normiflo®), certoparina (Sandoparin®), enoxaparina (Lovenox® y Clexane®), parnaparina (Fluxum®), tinzaparina (Innohep® y Logiparin®), dalteparina (Fragmin®), reviparina (Clivarin®) y nadroparina (Fraxiparin®).
El termino “heparina” incluye tambien fragmentos de bajo peso molecular de moleculas de heparina, ya sea obtenidas a partir de heparina de origen natural por escision y aislamiento o a partir de rutas sinteticas. Por ejemplo, existe un pentasacarido sulfatado comercializado producido sinteticamente y cuya estructura se deriva de la heparina. Esta disponible como Fondaparinux® sodio.
El condroitina sulfato incluye, p. ej., condroitina sulfato A (condroitin-4-sulfato), condroitina sulfato C (condroitin-6- sulfato), condroitina sulfato D (condroitin-2,6-sulfato) y condroitina sulfato E (condroitin-4,6-sulfato).
El dermatan sulfato (denominado previamente tambien condroitina sulfato B) es otro glucosaminoglicano sulfatado que esta comercializado.
El queratan sulfato es otro glucosaminoglicano sulfatado. La estructura del queratan sulfato se describe en, p. ej., Funderburgh (2000) Glycobiology vol. 10 n.° 10, pags. 951-958.
El heparan sulfato es un polisacarido A/-sulfatado que es diferente de la heparina (remttase a, p. ej., Gallagher, J.T., Lyon, M. (2000). "Molecular structure of Heparan Sulfate and interactions with growth factors and morphogens". En lozzo, M, V.. Proteoglycans: structure, biology and molecular interactions. Marcel Dekker Inc. Nueva York, Nueva York. pags. 27-59; y Gallagher, J. T. Walker, A. (1985). "Molecular distinctions between Heparan Sulphate and Heparin: Analysis of sulphation patterns indicates Heparan Sulphate and Heparin are separate families of N- sulphated polysaccharides". Biochem. J. 230 (3): 665-74).
En una realizacion de la invencion, el nivel plasmatico del Factor VIII en el sujeto tratado es, durante un penodo desde 5 horas tras la inyeccion hasta 8 horas tras la inyeccion, continuamente mayor que 2%, preferiblemente mayor que 5%, mas preferiblemente mayor que 8%, lo mas preferible mayor que 10%, del nivel plasmatico normal del Factor VIII en sujetos sanos. El nivel plasmatico se determinara como se muestra aqrn en lo sucesivo en el Ejemplo 1.
En una realizacion de la invencion, el nivel plasmatico del Factor VIII en el sujeto tratado es, durante un penodo desde 4 horas tras la inyeccion hasta 16 horas tras la inyeccion, continuamente mayor que 2%, preferiblemente mayor que 5%, mas preferiblemente mayor que 8%, lo mas preferible mayor que 10%, del nivel plasmatico normal del Factor VIII en sujetos sanos.
En otra realizacion de la invencion, el nivel plasmatico del Factor VIII en el sujeto tratado es, durante un penodo desde 3 horas tras la inyeccion hasta 24 horas tras la inyeccion, continuamente mayor que 2%, preferiblemente mayor que 4%, mas preferiblemente mayor que 6%, lo mas preferible mayor que 8%, del nivel plasmatico normal del Factor VIII en sujetos sanos.
En otra realizacion de la invencion, el nivel plasmatico del Factor VIII en el sujeto tratado es, durante un penodo desde 2 horas tras la inyeccion hasta 32 horas tras la inyeccion, continuamente mayor que 2%, preferiblemente mayor que 3%, mas preferiblemente mayor que 4%, lo mas preferible mayor que 5%, del nivel plasmatico normal del Factor VIII en sujetos sanos.
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En todavfa otra realizacion de la invencion, el nivel plasmatico del Factor VIII en el sujeto tratado es, durante un penodo desde 1 hora tras la inyeccion hasta 48 horas tras la inyeccion, continuamente mayor que 2%, preferiblemente mayor que 3%, mas preferiblemente mayor que 4%, lo mas preferible mayor que 5%, del nivel plasmatico normal del Factor VIII en sujetos sanos.
Los niveles plasmaticos mencionados anteriormente se obtienen preferiblemente cuando el Factor VIII (p. ej. FVIII) se administra mediante inyeccion subcutanea a una dosis menor que 1000 UI/kg de peso corporal, o menor que 800 UI/kg de peso corporal, o menor que 600 UI/kg de peso corporal, o menor que 400 UI/kg de peso corporal, p. ej. a una dosis desde aproximadamente 50 UI/kg de peso corporal hasta aproximadamente 500 UI/kg de peso corporal, o desde aproximadamente 75 UI/kg de peso corporal hasta aproximadamente 400 UI/kg de peso corporal, o desde aproximadamente 100 UI/kg de peso corporal hasta aproximadamente 300 UI/kg de peso corporal, o desde aproximadamente 50 UI/kg de peso corporal hasta aproximadamente 1,000 UI/kg de peso corporal, o desde aproximadamente 50 UI/kg de peso corporal hasta aproximadamente 800 UI/kg de peso corporal, o desde
aproximadamente 50 UI/kg de peso corporal hasta aproximadamente 700 UI/kg de peso corporal, o desde
aproximadamente 50 UI/kg de peso corporal hasta aproximadamente 600 UI/kg de peso corporal, o desde
aproximadamente 50 UI/kg de peso corporal hasta aproximadamente 500 UI/kg de peso corporal, o desde
aproximadamente 50 UI/kg de peso corporal hasta aproximadamente 400 UI/kg de peso corporal, o desde
aproximadamente 50 UI/kg de peso corporal hasta aproximadamente 300 UI/kg de peso corporal, o alrededor de 50 UI/kg de peso corporal hasta aproximadamente 200 UI/kg de peso corporal.
En una realizacion, el Factor VIII y el glucosaminoglicano sulfatado estan contenidos en la misma composicion. Esta composicion comprende que los dos componentes se pueden administrar al paciente mediante una unica inyeccion o similares.
En otra realizacion, el Factor VIII y el glucosaminoglicano sulfatado no estan presentes en la misma composicion. Por ejemplo, cada uno de los dos componentes puede proporcionarse en una forma farmaceutica independiente en dicho preparado farmaceutico.
Si los dos componentes no estan presentes en la misma composicion, las composiciones independientes se pueden administrar por separado o se pueden mezclar poco antes de la administracion de manera que el Factor VIII y el glucosaminoglicano sulfatado se administraran simultaneamente. Si la administracion es por separado, la administracion se puede realizar secuencialmente, p. ej., de una manera escalonada en el tiempo. En general, se prefiere que los dos componentes se administren simultaneamente mediante una unica administracion, p. ej., una inyeccion. Posteriormente se analizan varias vfas de administracion. Estas se aplican a lo anterior mutatis mutandis.
Los componentes del preparado farmaceutico se pueden disolver en soluciones tamponadas acuosas fisiologicamente compatibles a las cuales se pueden anadir, opcionalmente, excipientes farmaceuticos para proporcionar el preparado farmaceutico. Los componentes del preparado farmaceutico pueden contener ya todos los excipientes farmaceuticos necesarios, fisiologicamente compatibles, y se pueden disolver en agua para inyeccion para proporcionar el preparado farmaceutico.
Tales excipientes y portadores farmaceuticos, asf como tambien la preparacion de formulaciones farmaceuticas adecuadas son muy conocidos en la tecnica (remftase a, por ejemplo, "Pharmaceutical Formulation Development of Peptides and Proteins", Frokjaer et al., Taylor & Francis (2000) o "Handbook of Pharmaceutical Excipients", 3.a edicion, Kibbe et al., Pharmaceutical Press (2000)). En ciertas realizaciones, una composicion farmaceutica puede comprender al menos un aditivo tal como un material de relleno, un agente espesante, un tampon, un estabilizante o un excipiente. Los expertos en la tecnica estan muy familiarizados con tecnicas de formulacion farmaceutica estandar (remftase a, p. ej., Physicians' Desk Reference@ de 2005, Thomson Healthcare: Montvale, NJ, 2004; Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20.a ed., Gennaro et al., Eds. Lippincott Williams & Wilkins: Filadelfia, PA, 2000). Los aditivos farmaceuticos adecuados incluyen, p. ej., azucares como el manitol, sorbitol, lactosa, sacarosa, trehalosa u otros, aminoacidos como la histidina, arginina, lisina, glicina, alanina, leucina, serina, treonina, acido glutamico, acido aspartico, glutamina, asparagina, fenilalanina u otros, aditivos para conseguir condiciones isotonicas como el cloruro de sodio u otras sales, estabilizantes como el polisorbato 80, polisorbato 20, polietilenglicol, propilenglicol, cloruro de calcio u otros, agentes tamponantes del pH fisiologicos como el tris(hidroximetil)aminometano y similares. En ciertas realizaciones, las composiciones farmaceuticas pueden contener agentes tamponantes del pH y agentes humectantes o emulsionantes. En realizaciones adicionales, las composiciones pueden contener conservantes o estabilizantes. En particular, el preparado farmaceutico que comprende el Factor VIII se puede formular en una forma soluble estable o liofilizada. El Factor VIII se puede liofilizar mediante diversos procedimientos conocidos en la tecnica. Asimismo, si la misma composicion contiene el glucosaminoglicano sulfatado y el Factor VIII, tal composicion tambien se puede proporcionar en una forma soluble estable o liofilizada. Las formulaciones liofilizadas se reconstituyen antes de su uso anadiendo uno o mas diluyentes farmaceuticamente aceptables tales como agua esteril para seccion o solucion salina fisiologica esteril o una solucion tamponante adecuada.
La composicion o composiciones contenidas en el preparado farmaceutico de la invencion como se define en las
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presentes reivindicaciones se pueden suministrar al individuo mediante cualquier medio farmaceutico adecuado. Existe constancia de varios sistemas de suministro y se pueden utilizar para administrar la composicion mediante cualquier via conveniente. Preferentemente, la composicion o composiciones contenidas en el preparado farmaceutico de la invencion se suministran al individuo mediante una inyeccion no intravenosa. Mas preferentemente, la composicion o composiciones de la invencion se formulan para la administracion subcutanea, intramuscular, intraperitoneal, intracerebral, intrapulmonar, intranasal, intradermica o transdermica, de la manera mas preferida para la administracion subcutanea, intramuscular o transdermica de acuerdo con metodos convencionales. Las formulaciones se pueden administrar de manera continua mediante infusion o inyeccion intravenosa rapida. Algunas formulaciones pueden englobar los sistemas de liberacion lenta.
La composicion o composiciones del preparado farmaceutico de la presente invencion como se define en las presentes reivindicaciones se administran a los pacientes en una dosis terapeuticamente eficaz, refiriendose esto a una dosis que es suficiente para producir los efectos deseados, evitar o reducir la gravedad o extension de la afeccion o indicacion que se esta tratando sin alcanzar una dosis que produzca efectos secundarios adversos intolerables. La dosis exacta depende de muchos factores tales como, p. ej., la indicacion, formulacion, modo de administracion y se ha de determinar en ensayos preclmicos y clmicos para cada indicacion respectiva.
En el caso del Factor VIII, la dosis de una administracion se puede seleccionar de manera que, durante un periodo desde 2 horas tras la inyeccion hasta 48 horas despues de la inyeccion, el nivel plasmatico del Factor VIII en el sujeto tratado es continuamente superior a un 2%, preferentemente superior a un 3%, mas preferentemente superior a un 4%, de la manera mas preferida superior a un 5%, del nivel plasmatico normal del Factor VIII en sujetos sanos.
Preferiblemente, la dosis del Factor VIII para una administracion es inferior a 1000 UI/kg de peso corporal, o inferior a 800 UI/kg de peso corporal, o inferior a 600 UI/kg de peso corporal, o inferior a 400 UI/kg de peso corporal, p. ej., a una dosis entre aproximadamente 50 UI/kg de peso corporal y aproximadamente 500 UI/kg de peso corporal o entre aproximadamente 75 UI/kg de peso corporal y aproximadamente 400 UI/kg de peso corporal o entre
aproximadamente 100 UI/kg de peso corporal y aproximadamente 300 UI/kg de peso corporal o entre aproximadamente 50 UI/kg de peso corporal y aproximadamente 1000 UI/kg de peso corporal o entre aproximadamente 50 UI/kg de peso corporal y aproximadamente 800 UI/kg de peso corporal o entre
aproximadamente 50 UI/kg de peso corporal y entre aproximadamente 700 UI/kg de peso corporal o entre aproximadamente 50 UI/kg de peso corporal y aproximadamente 600 UI/kg de peso corporal o entre
aproximadamente 50 UI/kg de peso corporal y aproximadamente 500 UI/kg de peso corporal o entre
aproximadamente 50 UI/kg de peso corporal y aproximadamente 400 UI/kg de peso corporal o entre
aproximadamente 50 UI/kg de peso corporal y aproximadamente 300 UI/kg de peso corporal o entre
aproximadamente 50 UI/kg de peso corporal y aproximadamente 200 UI/kg de peso corporal.
El Factor VIII se puede administrar por sf solo junto con el glucosaminoglicano sulfatado. Como alternativa, el Factor VIII se puede administrar en asociacion con vWF, es decir, como un complejo de FVIII/vWF, junto con el glucosaminoglicano sulfatado.
La cantidad de glucosaminoglicano sulfatado administrada esta comprendida normalmente entre aproximadamente 0.001 y aproximadamente 100 mg/mL del producto aplicado, entre aproximadamente 0.01 y aproximadamente 10 mg/mL del producto aplicado, entre aproximadamente 0.05 y aproximadamente 1 mg/mL del producto aplicado.
El termino “biodisponibilidad”, tal como se utiliza en la presente, se refiere a la proporcion de una dosis administrada de un Factor VIII (p. ej., el Factor VIII o un preparado relacionado con el FVIII) que se puede detectar en el plasma en momentos predeterminados hasta un punto temporal final despues de la administracion subcutanea, intravenosa o intradermica. Normalmente, la biodisponibilidad se mide en animales de prueba administrandoles una dosis comprendida entre 10 UI/kg y 1000 UI/kg del preparado (p. ej., 400 UI/kg de peso corporal); obteniendo muestras plasmaticas en puntos temporales predeterminados despues de la administracion; y determinando el contenido del Factor VIII, p. ej., el Factor VIII o polipeptidos relacionados con el Factor VIII en las muestras utilizando uno o mas de: un ensayo cromogenico o de coagulacion (o cualquier bioensayo), un inmunoensayo o un equivalente de estos. La biodisponibilidad se expresa como el area bajo la curva (ABC) con la concentracion actividad del Factor VIII en el plasma en el eje Y y el tiempo despues de la administracion en el eje X hasta un punto temporal final predefinido despues de la administracion. Preferentemente, este punto temporal predefinido es 48 horas despues de la administracion. Mas preferentemente, la biodisponibilidad se determina tal como se muestra en el Ejemplo 1 mas adelante. La biodisponibilidad relativa de un preparado de prueba se refiere a la relacion entre el ABC del preparado de prueba (p. ej. Factor VIII + glucosaminoglicano sulfatado) y el del preparado de referencia (p. ej. Factor VIII solo) que se administra con la misma dosis y de la misma manera (p. ej., intravenosa, subcutanea o intradermica) que el preparado de prueba.
De acuerdo con la presente invencion, como se define en las presentes reivindicaciones, la biodisponibilidad del Factor VIII (cuando se coadministra con el glucosaminoglicano sulfatado) es superior que la del Factor VIII cuando se administra solo. Preferentemente, la biodisponibilidad aumenta en al menos un 20%, mas preferentemente en al menos un 50%, mas preferentemente en al menos un 75%, de la manera mas preferida en al menos un 100%. El
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aumento en la biodisponibilidad se obtiene preferentemente cuando se administra el Factor VIII mediante inyeccion subcutanea con una dosis inferior a 1000 UI/kg de peso corporal o inferior a 800 UI/kg de peso corporal o inferior a 600 UI/kg de peso corporal o inferior a 400 UI/kg de peso corporal, p. ej., con una dosis comprendida entre
aproximadamente
50 UI/kg de peso corporal y aproximadamente 500 UI/kg de peso corporal o entre
aproximadamente
75 UI/kg de peso corporal y aproximadamente 400 UI/kg de peso corporal o entre
aproximadamente
100 UI/kg de peso corporal y aproximadamente 300 UI/kg de peso corporal o entre
aproximadamente
50 UI/kg de peso corporal y aproximadamente 1000 UI/kg de peso corporal o entre
aproximadamente
50 UI/kg de peso corporal y aproximadamente 800 UI/kg de peso corporal o entre
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aproximadamente
50 UI/kg de peso corporal y aproximadamente 600 UI/kg de peso corporal o entre
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50 UI/kg de peso corporal y aproximadamente 500 UI/kg de peso corporal o entre
aproximadamente
50 UI/kg de peso corporal y aproximadamente 400 UI/kg de peso corporal o entre
aproximadamente
50 UI/kg de peso corporal y aproximadamente 300 UI/kg de peso corporal o entre
aproximadamente 50 UI/kg de peso corporal y aproximadamente 200 UI/kg de peso corporal.
La composicion o las composiciones farmaceuticas de la invencion como se define en las presentes reivindicaciones se pueden administrar solas o junto con otros agentes terapeuticos. Estos agentes se pueden incorporar como parte del mismo producto farmaceutico.
Ejemplos
Ejemplo 1: Evaluacion de la biodisponibilidad del FVIII y varios aditivos aplicados s.c. en un modelo de hemofilia A
Materiales y modelo en animales
El Factor VIII utilizado en los experimentos fue un factor VIII recombinante monocatenario con un dominio B truncado (denominado en lo sucesivo en la presente “rFVIII”). El Factor VIII se obtuvo fusionando directamente Asn764 con Thr1653. Se ha expresado en celulas de un cultivo celular y purificado a partir del medio del cultivo celular.
Los agentes adicionales utilizados se resumen en la Tabla 1.
Tabla 1
Clase de compuesto
Tipo de compuesto y/o fuente
Heparina no fraccionada
Heparin-Natrium-25000-ratiopharm
Heparina de bajo peso molecular
Dalteparin (Fragmin® from Pfizer)
Dextran sulfato
Aprox. 500 kDa
Pentosan sulfato
Fondaparinux sodico (Arixtra® de SKB)
Heparina N-acetil-de-O- sulfatada
Sal sodica de heparina N-acetil-de-O-sulfatada de Sigma-Aldrich (n° de producto de Sigma A6039) numero CAS 133686-69-8
Condroitina sulfato
Sal sodica de condroitina sulfato A de traquea bovina, obtenida de Sigma-Aldrich (n° de producto Sigma C9819) numero CAS 39455-18-0
Se utilizaron en ratones con una inactivacion genica para el Factor VIII como el modelo en animales de la hemofilia A. Estos ratones carecen de los exones 16 y 17 y, por lo tanto, no expresan el FVIII (Bi L. et al., Nature genetics, 1995, vol 10(1), 119-121; Bi L. et al., Blood, 1996, vol. 88(9), 3446-3450). Esto permite el analisis de los niveles del FVIII tras el tratamiento cuantificando la actividad del FVIII en el plasma de los ratones ko.
Metodos
Para evaluar si las inyecciones extravasculares podnan ser una opcion para una terapia mejorada con el rFVIII (humano), se escogio la inyeccion subcutanea, elemento representativo tfpico de la terapia extravascular. El diseno del estudio farmacocinetico no clmico realizado se detalla en las siguientes tablas 2 y 3. Los niveles plasmaticos de la actividad del Factor VIII se determinaron tras una inyeccion subcutanea o intravenosa unica del rFVIII junto con diversos aditivos (grupos de tratamiento detallados en la tabla 2) en un modelo de la hemofilia A.
Se trataron los grupos correspondientes con la misma dosis del FVIII (ensayo de actividad del sustrato cromogenico (CS)) en presencia de varios aditivos diferentes. Para una aplicacion unica, se mezclaron los diversos componentes diferentes de cada grupo de tratamiento entre s^ en un volumen de 200 pL (volumenes identicos para todos los grupos) antes de la aplicacion subcutanea a ratones inactivados genicamente (ko) para el FVIII que pesaban 5 aproximadamente 25 g. Los grupos de tratamiento se resumen en la tabla 2.
Se extrajeron muestras de sangre con anestesia a corto plazo, se previno la coagulacion utilizando citrato de sodio hasta un 10% de citrato en sangre, se procesaron para obtener el plasma y se almacenaron a -70 °C para determinar la actividad del FVIII. Los puntos temporales de muestreo se detallan en la tabla 3. Se realizo la cuantificacion de la actividad del FVIII en el plasma mediante una estrategia estandar basada en la aPTT 10 (cronometro de coagulacion Behring). Los animales se mantuvieron en condiciones de alojamiento estandar.
Tabla 2: Grupos de tratamiento
N°
Tratamiento Dosis del FVIII (ensayo de actividad CS) / aditivo volumen [mL/kg] programacion via N
1
rFVIII 400 UI/kg 8 inyeccion unica (t=0) s.c. 25
2
FVIII/Heparina sin fraccionar 400 UI/kg/5 U/mL de producto aplicado 8 inyeccion unica s.c. 25
3
Dextran sulfato (aprox. 500 kDa) 400 |ig/mL de producto aplicado 8 inyeccion unica s.c. 25
4
rFVIII/Fragmin® 400 UI/kg/5 U/mL de producto aplicado 8 inyeccion unica s.c. 20
5
rFVIII/Fondaparinux® 400 UI/kg / 10 |ig/mL de producto aplicado 8 inyeccion unica s.c. 20
6
rFVIII/Heparina N-acetil de- O-sulfatada 400 UI/kg / 10 |ig/mL de producto aplicado 8 inyeccion unica s.c. 20
7
rFVIII/ Condroitina sulfato 400 UI/kg / 10 |ig/mL de producto aplicado 8 inyeccion unica s.c. 20
Resultados
Los resultados se resumen en la Tabla 3 y la Figura 1. La inyeccion subcutanea de 400 UI/kg del rFVIII en presencia 15 de diversos glucosaminoglicanos sulfatados en ratones FVIII ko conllevo un aumento significativo de la actividad del FVIII en el nivel plasmatico en comparacion con la administracion del FVIII solo o FVIII + dextran sulfato. El aumento para la coadministracion de heparina fue particularmente fuerte.
Tabla 3. Actividad de FVIII en % de la actividad del FVIII en plasma humano normal
Punto temporal (h)
400 UI/kg de rFVIII s.c. 400 UI/kg de rFVIII / 5 UI/ml de Heparina sin fraccionar s.c. 400 UI/kg de rFVIII / 400 |ig/ml de dextran sulfato s.c. 400 UI/kg de rFVIII / 5 U/ml de Fragmin® s.c.
0,5
1,02 ± 0,85 2,90 ± 2,70 0 ± 0 3,41 ± 0,61
2
13,04 ± 3,90 15,16 ± 4,12 0,98 ± 1,49 10,65 ± 6,38
5
1,15 ± 1,28 26,66 ± 5,74 2,57 ± 2,67 15,19 ± 7,12
8
2,32 ± 2,27 15,56 ± 4,22 0,64 ± 0,64 21,13 ± 8,92
16
4,82 ± 2,35 12,08 ± 2,35 0,84 ± 1,26 13,19 ± 3,58
24
9,72 ± 8,09 14,10 ± 3,76 0,85 ± 0,89 10,21 ± 3,26
32
2,48 ± 2,20 10,84 ± 5,31 0,92 ± 1,30 5,23 ± 2,83
48
1,15 ± 1,72 7,02 ± 1,24 1,47 ± 1,14 4,71 ± 1,74

Claims (4)

  1. REIVINDICACIONES
    1. Factor VIII para uso en el tratamiento o prevencion de un trastorno hemorragico, comprendiendo dicho tratamiento o prevencion la inyeccion no intravenosa de dicho Factor VIII junto con un glucosaminoglicano sulfatado, en el que el
    5 Factor VIII se administra subcutaneamente a una dosis de 50 UI/kg de peso corporal a alrededor de 1,000 UI/kg de peso corporal, y en el que la cantidad del glucosaminoglicano sulfatado esta entre 0.001 y 100 mg por mL de producto aplicado.
  2. 2. Factor VIII para uso de acuerdo con la reivindicacion 1, en el que el glucosaminoglicano sulfatado es heparina.
  3. 3. Factor VIII para uso de acuerdo con la reivindicacion 2, en el que el Factor VIII esta en asociacion con el Factor de 10 von Willebrand.
  4. 4. Factor VIII para uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que el sujeto tratado es un individuo humano, y la dosis de una administracion es menor que 500 UI/kg de peso corporal.
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Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2851057A1 (en) 2011-10-18 2013-04-25 Csl Behring Gmbh Combined use of a sulfated glycosaminoglycan and a hyaluronidase for improving the bioavailability of factor viii
BR112016026842A2 (pt) 2014-06-06 2017-12-12 Octapharma Ag preparação compreendendo fator viii e peptídeos de fator de von willebrand
KR20230112163A (ko) * 2014-09-12 2023-07-26 더 리젠츠 오브 더 유니버시티 오브 캘리포니아 대음세포작용 인간 항-cd46 항체 및 표적화된 암 치료제
EP3253786A4 (en) * 2015-02-06 2018-10-17 The University of North Carolina at Chapel Hill Optimized human clotting factor viii gene expression cassettes and their use
SE539575C2 (en) * 2015-07-30 2017-10-17 Tx Medic Ab Dextran sulfate for use in treating, inhibiting or preventing cardiac fibrosis

Family Cites Families (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4757006A (en) 1983-10-28 1988-07-12 Genetics Institute, Inc. Human factor VIII:C gene and recombinant methods for production
WO1986006101A1 (en) 1985-04-12 1986-10-23 Genetics Institute, Inc. Novel procoagulant proteins
FR2673632A1 (fr) 1991-03-08 1992-09-11 Lille Transfusion Sanguine Procede de preparation de concentre de facteur von willebrand humain de tres haute purete, approprie a un usage therapeutique.
SE504074C2 (sv) 1993-07-05 1996-11-04 Pharmacia Ab Proteinberedning för subkutan, intramuskulär eller intradermal administrering
IL113010A (en) 1994-03-31 1999-10-28 Pharmacia & Upjohn Ab Pharmaceutical formulation comprising factor viii with an activity of at least 500iu/ml and an enhancer for improved subcutaneous intramuscular or intradermal administration
DE4435485C1 (de) 1994-10-04 1996-03-21 Immuno Ag Verfahren zur Gewinnung von hochreinem von Willebrand-Faktor
CA2252896C (en) 1996-04-24 2009-03-10 The Regents Of The University Of Michigan Inactivation resistant factor viii
WO2000024759A1 (en) 1998-10-23 2000-05-04 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Systemic delivery of gene products via skin
US20040192599A1 (en) 2001-06-15 2004-09-30 Schuh Andre C Gene therapy for hemophilia a
US7041635B2 (en) 2003-01-28 2006-05-09 In2Gen Co., Ltd. Factor VIII polypeptide
ATE497783T1 (de) 2003-05-06 2011-02-15 Syntonix Pharmaceuticals Inc Gerinnungsfaktor vii-fc chimäre proteine zur behandlung von hämostatischen krankheiten
GB2467700A (en) * 2007-11-09 2010-08-11 Baxter Int Modified recombinant Factor VIII and von Willebrand Factor and methods of use
CN103497246B (zh) * 2008-02-27 2016-08-10 诺沃—诺迪斯克有限公司 缀合的因子viii分子
EP2467166A2 (en) * 2009-08-20 2012-06-27 CSL Behring GmbH Albumin fused coagulation factors for non-intravenous administration in the therapy and prophylactic treatment of bleeding disorders
WO2011095604A1 (en) * 2010-02-04 2011-08-11 Octapharma Biopharmaceuticals Gmbh Half-life prolongation of proteins

Also Published As

Publication number Publication date
EP2768522B1 (en) 2016-07-27
CN103889445A (zh) 2014-06-25
JP6072810B2 (ja) 2017-02-01
AU2012318279B2 (en) 2015-06-04
AU2012318279A1 (en) 2013-05-02
US9393289B2 (en) 2016-07-19
DK2768522T3 (en) 2016-11-14
WO2013057167A1 (en) 2013-04-25
EP2768522A1 (en) 2014-08-27
KR20140083036A (ko) 2014-07-03
US20140315815A1 (en) 2014-10-23
CA2852397A1 (en) 2013-04-25
JP2014530246A (ja) 2014-11-17

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