DE2617597C3 - Verfahren zur Herstellung von 1-N- ( a -Hydroxyw -aminoacyl)-3'- desoxy-ribostamycinen - Google Patents

Description

R⁸
oder

HOOC—CHOH—(CH₂)„—N=CHR⁹

(VII)

in denen R⁷, R⁸ und =CHR⁹ übliche Aminoschutzgruppen bedeuten, oder mit einem funktioneILnn Derivat dieser Carbonsäuren acyliert und

E) aus der gemäß Verfahrensstufe D) erhaltenen 1-N-Acylverbindung sämtliche Schutzgruppen abspaltet

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von 1 -N-ialpha-Hydroxy-omega-aminoacylJ-S'-desoxy-ribostamycinen.

Die Erfindung ist das Ergebnis von Untersuchungen und Entwicklungsarbeiten au? dem Gebiet der Antibiotika, die aktiv gegen, drotenresistente Bakterien einschließlich Staphylococcus aureus ι id Pseudomonas aeruginosa sind sowie von weiteren Studien über den Resistenzmechanismus solcher drogenresistenter Bakterien, die aus verschiedenen Patienten isoliert worden sind.

Seit der Entdeckung der Butirosine A und B, d. h.

1 -N-( (S)-alpha-Hydroxy-gamma-amino-n-butyryl)-5-0-beta-D-xylofuranosyl- und ribofuranosyl-neamin, die durch Gärungsmethoden aus verschiedenen natürlichen Substanzen hergestellt werden können (Tetrahedron Letters, 2617-2620 [1971]), wird angenommen, daß durch Kondensation der Hydroxy-gamma-aminobuttersäuregruppe, die als Seitenkette durch die 1-Aminogruppe des Butirosins gebunden ist, mit der 1-Aminogruppe eines basischen Aminoglykosid-Antibiotikums ein Kondensationsprodukt entsteht, welches gegebenenfalls eine antibakterielle Wirkung gegen verschiedene drogenresistente Bakterien aufweisen kann.

Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist es, ein Verfahren zur Herstellung von l-N-(alpha-Hydroxy-omega-aminoacyI)-3'-desoxy-ribostamycinen aus Ribostamycin in höherer Ausbeute und mit v/eniger Verfahrensstufen vorzuschlagen.

Aus der GB-PS 14 26 908 und der DE-OS 23 50 169 ist bereits ein Verfahren zur Synthese von 1-N-(alpha-Hy-

droxy-omegaaminobutyryl)-3'-desöxyfiböstäfnycin,
nämlich 3'-Desoxybutyrosin B bekannt. Bei diesem Verfahren, welches vom 3'-Desoxyribostamycin ausgeht, wird das letztere mit Benzyl-p-nitrophenylcarbonat umgesetzt, um die 6'-Aminogruppe des Ribostamycins zu schützen; das so 6'-N-geschützte Derivat wird anschließend mit (S)-alpha-Hydroxy-gamma-N-phthalimidobuttersäure umgesetzt, wobei eine 1 -N-Acylierung abläuft; anschließend wird die Schutzgruppe entfernt, so daß man l-N-((S)-alpha-Hydroxy-gamma-aminobutyryl)-3'-desoxyribostamycin erhält Dieses vom 3'-Desoxyribostamycin ausgehende Verfahren ist nicht besonders vorteilhaft, weil in seinem Verlauf eine Zwischenstufe eingeschaltet werden muß, in der das 3'-Desoxyribostamycin isoliert wird. Der Wirkungsgrad des Verfahrens ist infolgedessen oft nicht befriedigend, weil bei dem Verfahren nicht nur die 1-AmInOgITJPpC₁ die

ίο acyliert werden soll, acyliert wird, sondern weil auch die 3- und 2'-Aminogruppen, die vorzugsweise nicht acyliert werden sollen, ebenfalls acyliert werden, was unvermeidbar zur Bildung eines unerwünschten gemischten Acylierungsproduktes führt

Ein neuer Reaktionstyp zwischen der 1 -Aminogruppe in dem Desoxystoreptaminteil des Ribostamycin und der 6-Hydroxylgruppe desselben läuft unter Bildung einer cyclischen 1,6-Carbamatbindung ab (Journal of Antibiotics, 25, 741-742 [1972]). Es wurde weiterhin gefunden, daß mit Hilfe dieses neuen Reaktionstyps ein alphasubstituiertes l-N-(omega-Aminoacyl)-3'-desoxyribostamyein in vorteilhafterer Weise hergestellt werden kann, und zwar mit Hilfe eines Verfahrens, bei welchem die reaktiven 1-Amino- und 6-HydroxyI-gruppen des Ribostamycins durch Umwandlung in ein cyclisches 1,6-Carbamat geschützt werden, während die übrigen Aminogruppen in üblicher Weise eine Schutzgruppe erhalten; anschließend wird das entstandene geschützte Derivat des Ribostamycins in die 3'-Desoxyverbindung (d. h, die in 3'-SteIlung desoxydierte Verbindung) umgewandelt Anschließend wird die 1,6-Carbamatbindung gespalten (Ringspaltung), wodurch selektiv die freie 1-Aminogruppe regeneriert wird, die dann anschließend mit der gewünschten alpha-Hydroxy-omega-Aminosäure acyliert wird.

Das erfindungsgemäße Verfahren, in welchem die selektiv regenerierte 1-Aminogruppe im nicht blockierten Zustand selektiv acyliert wird und in dessen Verlauf die Bildung und Isolierung von 3'-Desoxyribostamycin nicht auftritt, ist wirtschaftlich vorteilhaft, weil die Ausbeuten verbessert und die Zahl der Reaktionsstufen verringert sind.

Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist daher das im Anspruch beschriebene und gekennzeichnete Verfahren.

Erfindungsgemäß wird ein geschütztes Ribostamycin- 1,6-carbamat der Formel (II) mit einem Sulfonylierungsmittel der Formel (III) umgesetzt, wobei die 3'-Hydroxylgruppe sulfonyliert und eine Sulfonylverbindung der Formel (IV) gebildet wird.

Die Sulfonylierung wird im allgemeinen in einem unter den Reaktionsbedingungen inerten Lösungsmittel durchgeführt; bei dem Lösungsmittel kann es sich um Pyridin, Dioxan oder Methylenchlorid handeln. Unter den vorstehend genannten ist wasserfreies Pyridin das am besten geeignete. Die Reaktionstemperatur soll vorzugsweise zwischen 10 und 50° C liegen.

Geeignete Beispiele für die Gruppen R¹ und R² in der Formel (II) sind Wasserstoff, Alkyigruppen mit 1 bis 4

Kohlenstoffatomen wie Methyl, Äthyl, Propyl, Isopropyl öder Butyl und Arylgruppen wie Phenyl, Methylphenyl oder Methoxyphenyl. Bilden R¹ und R² zusammen mit dem benachbarten Kohlenstoffatom eine Cycloalkylidengruppe, so kann diese vorzugsweise 5 bis 7

_h-, Kohlenstoffatome enthalten, d. h. es handelt sich um eine Cyclopentyüden-, Cyclohexyliden- oder Cycloheptylidengruppe.
Beispiele für die Gruppe R³ sind Acylgruppen wie

Acetyl, Propionyl oder Butyryl,
Aroylgruppen wie

Benzoyl, p-Chlorbenzoyl oder

p-Nitrobenzoyl,
Hemiacetal- oder Herniketalgruppen wie

Tetrahydropyranyl oder

1 -Methoxycyclohexyl,
Alkoxycarbonylgruppen wie

Äthoxycarbonyl, t-Butoxycarbonyl oder

t-Amyloxycarbonyl
sowie Aralkoxycarbonylgruppen wie

Benzyloxycarbonyl,

p-Methoxybenzyloxycarbonyl,

p-Äthoxybenzyloyycarbonyl oder

p-Chlorbenzyloxycarbonyl.

Zu den Beispielen ,für die Gruppe Z gehören Alkoxycarbonylgruppen, insbesondere solche mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen wie

Methoxy-, Äthoxy-, Propoxy-,

Isopropoxy- und Butoxycarbonyl;
weiterhin Aryioxycarbonylgmppen wie

Phenoxy- und p-Nitrophenoxycarbony¹;
weiterhin auch Aralkoxycarbonylgruppen wie

Benzyloxy-, p-Methoxybenzyloxy-,

p-Äthoxybenzyloxy-, p-Chlorbenzyloxy- und

p-Nitrobenzyloxycarbonyl.

Ais Sulfonyüerungsmittel der Formel (III) kommen folgende Verbindungen in Frage:
Alkylsulfonylhalogenide wie

Methylsulfonylchlorid und -bromid,

Äthylsulfonylchlorid,

Propylsulfonylchlorid und

Butylsulfonylchlorid,
Aralkylsulfonylhalogenide, nämlich

Benzylsulfonylchlorid
und Arylsulfonylhalogenide, nämlich

p-ToluoIsuIfonylchlorid,

o- und p-Nitrophenylsulfonylchlorid und

2-NaphthalinsuIfonylchIorid.

Wenn X die Gruppe -OSO₂R⁵ darstellt, ist das Sulfonylierungsmittel ein Sulfonsäurepnhydrid einschließlich Methylsulfonsäure- und Toluolsulfonsäureanhydrid.

Die 3'-Sulfonylverbindung der Formel (IV) die so gewonnen worden ist, wird dann mit einem Halogenierungsmiuel umgesetzt, so daß das 3'-halogenierte Derivat gebildet wird. Zu den Lösungsmitteln, in denen die Umsetzung durchgeführt werden kann, gehören

Dimethylformamid, Dioxan, Tetrahydrofuran,

Äthylenglykoldimethyläther,

Dimethylacetamid,

Prooylenglykoldimethyläther und

Acetonitril.

Als Halogenierungsmittel eignen sich Verbindungen wie

Natriumjodid, Kaliumjodid,

Lithiumbromid und Lithiumchlorid.
Die danach vorliegende 3'-halogenierte Verbindung wird zu der 3'-Desoxyverbindung reduziert. Die Reduktion wird im allgemeinen in einem Lösungsmittel wie

Dioxan, Tetrahydrofuran,

Methylenchlorid, Dimethylformamid,

Aceton, Methanol, Äthanol oder Isopropanol
durchgeführt; clit; Lösungsmittel können wasserfrei oder wasserhaltig stift. Für die eigentliche Reduktion werden Wasserstoffgas und als Katalysator Raney-Nickel, Palladium-Kohle, Palladium-Bariumcarbonat, Eisen, Kupfer, Platinoxid, Rhodium und Kobalt allein oder in Mischung untereinander verwendet Die Reduktion mit Wasserstoff kann bei Temperaturen zwischen —20 und 120⁰C durchgeführt werden; vorzugsweise arbeitet man in einem Bereich zwischen Raumtemperatur und 100⁰C bei Atmosphärendruck oder höherem Druck, z. B. bei Drucken zwischen 1 und 50 kg pro Quadraizentimeten AIs Reaktionspromotoren können Basen wie Triäthylamin oder Kaliumhydroxid zugesetzt werden,
ίο Die so erzeugte 3'-Deoxyverbindung wird dann der Hydrolyse mit einem basischen Reagenz wie
Natriumhydroxid, Bariumhydroxid oder
Natriumcarbonat

ausgesetzt, wodurch man die Verbindung der Formel (V) erhält, in welcher nur die 1-Aminogruppe in freier Form vorliegt, während die Schutzgruppen der anderen Aminogruppen an ihrem Platz bleiben.

Bei dieser Gelegenheit kann die Schutzgruppe R³ für die 5"-Hydroxylgruppe möglicherweise entfernt werden. Diese möglicherweise eiu-.-etende Entfernung beeinflußt jedoch in keiner Weise d.^:e nachfolgenden Umsetzungen.

Die entstandene Verbindung der Formel (IV) wird dann mit einem Acylierungsmittel der Formel (VI) oder

(VII) oder mit einem funktioneilen Äquivalent dieser Verbindungen umgesetzt, wodurch die α-substituierte ω-Aminoacylierung der I-Aminogruppe erreicht wird.

Als Lösungsmittel für die Durchführung der Acylierung eignen sich Wasser, Tetrahydrofuran, Dioxan, Äthylenglykoldimethyläther, Dimethylformamid, Diniethylacetamid und Propylenglykoldimethyläther und Mischungen dieser Lösungsmittel. Vorzugsweise verwendet man als Lösungsmittel eine Mischung aus Wasser und Tetrahydrofuran. Die Reaktionstemperatur soll unter 5O⁰C, am besten unter 25° C liegen. Bei den funktionellen Derivaten des Acylierungsmittels (VI) oder (VII) kann es sich um die Säurehalogenide, Säureazide, aktiven Ester oder gemischten Säureanhydride handeln.

Die Acylierungsverbindung kann bei dem erfindungsgemäßen Verfahren in racemischer oder in optisch aktiver Form verwendet werden; im allgemeinen zieht man jedoch die Verwendung der L-Form vor, und zwar im Hinblick auf die antibakterielle Wirkung des Endproduktes, beispielsweise «-Hydroxy-y-aminobuttersäure(/7=2) und a-Hydroxy-ö-aminovaleriansäure(/J=3).

Aus dem so gewonnenen Acylierungsprodukt werden dann die Schutzgruppen Z,

R¹

R²

R³, R⁷, R« und R⁹ entfernt. Die Gruppe Z kann in üblicher Weise entfernt werden, beispielsweise durch Behandlung mit einer Säure wie Essigsäure oder mit einer Base wie Natriumhydroxid, Bariumhydroxid, Natriumcarbonat, Natriumazid oder flüssiges Ammoniak cder durch reduktive Zersetzung mit Wasserstoff über einen Katalysator wie Palladium, Platin, Raney-Nickel, Rhodium, Rhutenium oder Nickel. Die Entfernung der Schutzgruppen durch Reduktion kann in Wasse'r als Lösungsmittel oder in einem mit Wasser mischbaren organischen Lösungsmittel wie Dioxan, Tetrahydro-

furan, Äthylenglykoldimethyläther oder Propylenglykoldimethyläther durchgeführt werden. Die allgemeinen Reaktionsbedingungen bei der Reduktion schließen einen Wasserstoffdruck von I bis 5 kg pro Quadratzentimeter, eine Reaktionstemperatur von 0 bis 100⁰C und eine Reaktionsdauer von 0,5 bis 48 Stunden ein.
Die Schutzgruppe

R¹

C =

kann am besten entfernt werden, wenn man das Acylierungsprodukt in einer 0,5 bis 2n-Lösung einer anorganischer Säure wie Chlorwasserstoffsäure oder Schwefelsäure oder in einer organischen Säure wie Essigsäure oder Propionsäure löst und die Lösung auf eine Temperatur bis zu 100°C erhitzt; andererseits ist auch in diesem Fall eine reduktive Zersetzung möglich. Die Schutzgruppe R' kann durch Behandlung mit einer Säure oder Base entfernt werden, die Gruppen R⁷. R⁸

Tabelle I
Testoreanismus

und R¹* können gleichzeitig durch eine der bereits genannten Methoden entfernt werden.

Die wie vorstehend beschrieben hergestellte Endverbindung der Formel (I) kann durch Säulenchromatographie unter Verwendung eines Kationenaustauscherharzes, beispielsweise »Amberlite® IRC 50« oder »CM-Sephadex®« gereinigt werden.

Die Verbindungen der Formel (I) besitzen eine niedrige Toxizität und zeichnen sich durch eine hohe antibakterielle Wirkung gegen verschiedene drogenresistente Stämme einschließlich Pseudomonas aeruginosa und Staphylococcus aureus aus.

In der folgenden Tabelle 1 ist die antibakterielle Wirkungsbreite, ausgedrückt als Mindesthemmkonzentration (MIC, mcg/ml), für

1 -N-( (S)-<x-Hydroxy-o)-aminobutyryl)-

3'-deoxyribostamycin (3'-Deoxybutirosin B),
1 -N-( (S)-ß-Amino-rt-hydroxypropionyl)-

J'-deoxyribostamycin und
I -N-( (RS)-/?-Amino-<x-hydroxypropionyl)-

3'-doxyribostamycin,

die gemäß vorliegender Erfindung hergestellt worden sind, sowie für Butirosin B als Vergleichssubstanz angegeben.

Butirosin B	3'-Di(jxy- butirosin B	hydroxy propiony I)- .V-deoxyribostamycin	l-N-«RS):/?-/\mino-i7- hydroxypopionyl)- 3'-deoxyribostamycin
1.56	0.39	1.56	3.12
25	25	25	25
0.2	< 0.2	0.78	1.56
0.39	0.39	1.56	1.56
>100	0.78	0.78	1.56
0.39	0.39	0.78	0.78
0.78	0.78	1.56	1.56
0.39	0.2	0.39	0.78
0.78	0.39	1.56	1.56
3.12	1.56	1.56	3.12
0.78	0.78	1.56	3.12
3.12	0.78	0.78	6.25
0.78	0.78	0.78	1.56
0.39	0.39	0.78	1.56
0.39	0.2	0.78	0.78
0.78	0.39	0.78	1.56
>100	1.56	3.12	3.12
6.25	1.56	1.56	6.25
25	6.25	6.25	12.5
>!00	>100	>100	>100
12.5	3.12	3.12	6.25
100	12.5	12.5	12.5
6.25	3.12	6.25	6.25
3.12	0.78	1.56	3.12
0.39	10.2	0.39	0.39

Staphylococcus aureus FDA 209P
Sarcina lutea PCI 1001
Bacillus subtilis B-558
Klebsiella pneumoniae PCI 602
K lebsiella pneumoniae 22 #3038
Salmonella typhosa T 63
Escherichia coli NIHJ
Escherichia coli K-12
Escherichia coli K-12 ML1629
Escherichia coli K-12 ML 1630
Escherichia coli K-12 ML 1410
Escherichia coli K-12 ML 1410 R81
Escherichia coli K-12 LA290 R55
Escherichia coli K-12 LA290 R56
Escherichia coli K-12 LA290R64
Escherichia coli K-12 W677
Escherichia coli K-12 JR66/W677
Pseudomonas aeruginosa A3
Pseudomonas aeruginosa No. 12
Pseudomonas aeruginosa GN315
Pseudomonas aeruginosa TI-13
Pseudomonas aeruginosa 99
Proteus rettgeri GN 311
Proteus rettgeri GN466
Mycobacterium amegmatis 607

Man erkennt aus Tabelle 1, daß die Verbindungen, die mit Hilfe des erfmdungsgemäßen Verfahrens hergestellt worden sind, wertvolle Antibiotica darstellen, die gegen verschiedene gram-positive und gram-negative Bakterien einschließlich Butirosinresistenter Stämme wirksam sind.

Die Verbindungen der Formel (II), die als Ausgangsmaterial für das Verfahren gemäß vorliegender Erfindung verwendet werden, sind alle selbst auch neue Substanzen. Sie können beispielsweise in folgender Weise hergestellt worden:

Tetra-N-benzyloxycarbonyl-3',4' : 2",3"-di-O-cyclo-

hexyliden-5"-O-( 1 -methoxycyclohexylj-ribostamycin (l.e^gestellt gemäß Angaben in »Bull. Chem. Soc.« Japan, 46, 3210 [1973]) wird in einer Mischung aus Essigsäure und Aceton gelöst, um die I-Methoxycyclohexylgruppe in 5"-Stellung aus dem Ribostamycin zu entfernen. Das gewonnene Reaktionsprodukt wird in wasserfreiem Dimethylformamid gelöst und mit 50%igem Natriumhydrid in Dimethylformamid umgesetzt. Man erhält auf diese Weise

Tri-N-benzyloxycarbonyl-3',4' : 2",3"-0-cyclohexylidenribostamycin-1,6-carbamat (Journal of Antibiotics, 25, 741 [1972]). Die letztgenannte Substanz wird iini E»igsäui'cdi"iuydriu in wasserfreiem Pyridin acctyliert und dann mit Essigsäure behandelt, um selektiv die 3',4'-Cyclohexylidengruppe zu entfernen, so daß

5"-O-Acetyl-tri-N-benzyloxycarbonyl-2",3"-O-cyclohexylidenribostamycin-l.ö-carbamat entsteht, welches eine Verbindung der Formel (II) ist.

Das Beispiel dient der weiteren Erläuterung der Erfindung.

Beispiel

Herstellung von 1 -N-( (S)-y-Amino-«-hydroxy-

butyryl)-3'-desoxyribostamycin;

3'-Deoxybutirosin B)

(a) 5"-O- Acetyl- tri-N-benzyloxycarbonyl-

2",3"-O-cyclohexyliden-3'-O-tosylribostamycin-

1,6-carbamat

1,77 g 5'-O-Acetyl-tri-N-benzyloxycarbonyl-2",3"-O-cyclohexylidenribostamycin wurden in wasserfreiem Pyridin gelöst; zu der Lösung wurden 1,9 g p-Toluolsulfonylchlorid gegeben. Die Mischung ließ man über Nacht bei 37°C stehen. Danach wurde das Lösungsmittel abdestilliert und der Rückstand wurde durch "iäiilpnrhrnmatmjrarihip unter Verwendung von SiIikagel und Benzol-Äthylacetat (1 : 1) als Eluierungsmitte! gereinigt. Man erhielt eine feste Substanz. 1,55 g (76%); (*) + 13° (c = 1,7 in Chloroform).

Gewichtsanalyse für C₅7H«,N₄02oS

Berechnet: C 59,06; H 5,74; N 4,83; S 2,77%;
gefunden: C 5930; H 5,78; N 4,72; S 2,66%.

(b)5"-0-Acetyl-tri-N-benzyloxycarbonyl-

2".3"-O-cyclohexyIiden-3"-O-(O-nitrobenzol-

suifonyl)- ribostamycin- 1,6-carbamat

Durch Ersatz des p-Toluolsulfonylchlorids durch 2-Nitrobenzo!sulfonylchlorid in dem vorstehend beschriebenen Verfahren von Beispiel 1 (a) erhielt man die Titelverbindung in 55%iger Ausbeute. F.: 114 - 116° C, (α) ζ + 6,5° (c = 23 in Chloroform).

Gewichtsanalyse für C5feH₆3N5O22S

Berechnet: C 56,51; H 534; N 5,88; S 2,69%;
gefunden: C 563; H 5,40; N 5,75; S 2,88%.

(c)5"-O-Acetyl-tri-N-benzyloxycarbonyl-

2"3"-O-cyclohexyliden-3'-jodribostamycin-

i,6-carbamat

035 g des Produktes von Beispiel 1 (b) wurden in 20 ml Dimethylformamid gelöst; zu der Lösung wurden

9,5 g Natriumjodid gegeben. Danach wurde die Mischung 1,5 Stunden auf 100°C erhitzt. Die Reaktionslösung wurde mit einer großen Volumenmenge Chloroform versetzt und die danach vorliegende Lösung wurde filtriert und mit Salzlösung gewaschen. Die Lösungsmittel wurde aus der Chloroformlösung abdestilliert, so daß ein fester Rückstand zurückblieb, welcher durch Säulenchromatographie unter Verwendung von Silikagel und Benzol-Äthylacetat (1:1) als Eluat gereinigt wurde. Ausbeute 0,49 g (55%); (_Λ) '.' 4-4,6° (c = 2,7 in Chloroform).

Gewichtsanalyse für CwHhN₄OuJ

Berechnet: C 53,86; H 5,34; N 5,03; J 11,38%;
gefunden: C 54,23; H 5,49; N 5,02; J 11,05%.

Die in Beispiel (a) erhaltene Verbindung wurde wie vorstehend beschrieben behandelt und ergab die

(d) 5"-O-Acetyl-tri-N-benzyloxycarbonyl-

2",3"-0-cyclohexyliden-3'-chlorribostamycin-

1,6-carbamat

r, 1,0 g des Produktes von Beispiel 1 (b) wurden in 25 ml Dimethylformamid gelöst. Die Lösung wurde mit 10 g Lithiumchlorid versetzt und die danach vorliegende Mischung wurde 1,5 Stunden auf 100°C erhitzt. Das Reaktionsgemisch wurde wie in Beispiel 1 (c) beschrie-

J₁) ben behandelt; man erhielt auf diese Weise 0,45 g der gewünschten Verbindung, (α) "4-4,3° (c = 1 in Chloroform).

Gewichtsanalyse für C₅₀HwN₄OuCl
,-, Berechnet: C 58.67; H 5,81; N 5,47; Cl 3,47%;
gefunden: C 58,59; H 5,72; N 5,30; Cl 3,34%.

(e)5"-0-Acetyl-tri-N-benzyloxycarbonyl-2",3"-O-cyclohexyliden-3'-deoxyribostamycini» 1,6-carbamat

310 me des Produktes von Beispiel 1 (c) wurden in 9 ml Dioxan gelöst. Die Lösung wurde mit 50 mg Triethylamin versetzt. Die erhaltene Mischung wurde (-, mit Wasserstoffgas unter Druck über Raney-Nickel reduziert und danach in üblicher Weise aufgearbeitet. Ausbeute 170 mg (62%); (α)ί?+5° (c = 1 in Chloroform); F.: 97 -99° C.

Gewichtsanalyse für C₅

Berechnet: C 60,72; H 6,11; N 5,66%;
gefunden: C 6035; H 6,20; N 5,52%.

(f)3,2',6'-Tri-N-benzyloxycarbonyl-2"3"-O-cyclohexyliden-3'-deoxyribostamycin

1,56 mg des Produktes von Beispiel 1 (e) wurden in 3 ml Dioxan gelöst; die Lösung wurde mit 2,4 ml 0,2 η wässeriger Bariumhydroxidlösung versetzt; die entstandene Mischung wurde 1 Stunde auf 6O⁰C erhitzt Anschließend wurde gasförmiges Kohlendioxid in die Mischung geblasen. Der entstandene Niederschlag wurde abfiltriert und das Lösungsmittel wurde abdestilliert; man erhielt auf diese Weise eine feste Substanz in einer Ausbeute von 151mg; (oc)'!: +12° (c = 1 in Chloroform).

(g)3,2',6'-Tri-N-benzyloxycarbonyl-

l-N-^SJ-y-benzyloxycarbonylamino^-hydroxy-

butyryl)-2",3"-0-cyclohexyliden-3'-deoxy-

ribostamycin

370 mg des festen Produktes von Beispiel 1 (f) wurden in 8 ml Tetrahydrofuran gelöst. Zu der Lösung wurden 40 mg Triethylamin gegeben und die Mischung wurde mit Eis gekUnlt. Anschließend wurden 0,17 g des N-Hydroxy-succinimidesters von (S)->>-Benzyl-oxycarbonylamino-a-hydroxybuttersäure zugesetzt; die entstandene Mischung ließ man unter Eiskühlung 1 Stunde stehen. Danach wurde die Lösung unter vermindertem Druck eingeengt und der verbleibende Rückstand wurde in Äthylacetat gelöst. Die Lösung wurde filtriert und unter vermindertem Druck vom Lösungsmittel befreit. Der gewonnene Rückstand wurde durch Säulenchromatographie unter Verwendung von .¹SiIiICaPeI um! Chlorofnrm-Isonropylalkohol (10:1 Volumenteile) als Eluierungsmittel gereinigt. Ausbeute 202mg (43%); (α):" +2,5° (c = 1 in Chloroform); F.: 102- 106⁰C.

Gewichtsanalyse für CsqHyjNsOiq
Berechnet: C 61,29; H 6,36; N 6,06;
gefunden: C 61,11; H 6.39; N 6,33%.

(h) 1-N-( (")-y-Amino-«-hydroxybutyryl)-3'-deoxyribostamycin; 3'-Deoxybutirosin B)

-, 178 mg des Produktes von Beispiel 1 (g) wurden in 4,3 ml Dioxan gelöst. Die Lösung wurde mit 1,4 ml Wasser versetzt und die entstandene Mischung wurde mit Palladium-Schwarz als Katalysator reduziert. Die Lösung wurde filtriert und das Filtrat wurde unter

in vermindertem Druck zur Trockne eingeengt. Die danach vorliegende feste Substanz wurde in 1 η Chlorwasserstoffsäure gelöst und bei 60⁰C 1 Stunde zur Reaktion gebracht (zur Entfernung der Cyclohexylidengruppe). Das danach vorliegende Rohprodukt wurde

r, chromatographisch gereinigt, wobei zum Eluieren wässeriges Ammoniak an einer Kolonne mil CM-Sephadex ® C-25 verwendet wurde; die Konzentration des Ammoniaks in dem Eluierungsmittel wurde allmählich von 0 auf 0.4 η erhöht. Die Fraktionen, die das gewünschte Produkt enthielten, wurden gesammelt, vereinigt und eingeengt. Ausbeute 34 mg (37%); (λ) ? +27° (c= 2 in Wasser).

Gewichtsanalyse fürC2iH4iNiOii · H^COj

Berechnet: C 43.92; H 7,20; N 11,64%;
gefunden: C 43,44; H 7,26; N 11.45%.

Claims (1)

1. Patentanspruch:

   Verfahren zur Herstellung von l-N-talpha-Hydroxy-omega-aminoacyll-O'-desoxy-ribostamycinen der allgemeinen Formel

   H, N

   NH,

   NH-C-CH-(CH₂I_n-NH, O OH

   OH

   HO

   OH

   in der η eine Zahl vor. 1 bis 4 bedeutet, dadurch gekennzeichnet, daß man jeweils in an sich bekannter Weise

   A) ein Schutzgruppen aufweisendes Ribostamycin- 1,6-carbamat der allgemeinen Formel II

   NHZ

   NH

   C=O

   in der Z eine übliche Urethan-Aminoschutzgruppe,

   CR¹R²

   eine übliche Schutzgruppe für vicinale Hydroxygruppen und R³ eine übliche Hydroxyschutzgruppe bedeuten, mit einem Sulfonsäure-halogenid oder -anhydrid der allgemeinen Formel

   R⁵ SO₂-X

   (III)

   in der R⁵ Cr bis C^-Alkyl, Benzyl, p-Tolyl, o-Nitrophenyl, p-Nitrophenyl oder 2-Naphthyl und X ein Halogenatom oder eine -OSO2R⁵-Gruppe bedeuten, umsetzt,
   B) den gemäß Verfahrensstufe A) erhaltenen 3'-O-Sulfonsäureester der allgemeinen Formel IV

   NHZ

   mit Natriumjodid, Kaliumiodid, Lithiumbromid oder Lithiumchlorid umsetzt,

   C) die gemäß Verfahrensstufe B) erhaltene 3'-]od-, 3'-Brom- oder 3'-Chlor-Verbindung reduziert und anschließend mit einem basischen Reagenz hydrolysiert,

   D) das gemäß Verfahrensstufe C) erhaltene, Schutzgruppen aufweisende Ribostamycin der allgemeinen Formel V

   CH₂NHZ WHZ

   NH₂

   in welcher R³' ein Wasserstoffatom ist oder dieselbe Bedeutung hat wie R³, mit einer alpha-Hydroxy-omega-aminocarbonsäure der allgemeinen Formel VI oder VII

   R⁷

   /
   HOOC—CHOH—(CH₂J_n-N (VI)