CS197285B2

CS197285B2 - Process for preparing carboxyalkylacylaminoacids

Info

Publication number: CS197285B2
Application number: CS77926A
Authority: CS
Inventors: David W Cushman
Original assignee: Ondetti Miguel A; Squibb & Sons Inc
Priority date: 1976-02-13
Filing date: 1977-02-11
Publication date: 1980-04-30
Also published as: FR2340933A1; GB1570921A; NO145915C; PH12066A; DK59077A; US4086338A; US4128653A; JPS52100461A; NO145915B; FR2340933B1; AT366030B; ATA96977A; BE851363A; IE45086B1; SE426169B; DD129651A5; NO770465L; PL195997A1; YU33277A; NL7701463A

Description

Vynález se týká způsobu přípravy nových karboxyalkylacylaminokyselin a příbuzných sloučenin, které jsou deriváty prolinu, pi pekolové kyseliny, azetidin-2-karboxylové kyseliny a mají obecný vzorec 1,

Rs

R4 Ri H2C — (CH),n

I I I I

Rř--OC—(CH)₁₁—CH—CO—N—CH-COR (1), kde znamená

R hydroxyskupinu, -aminoskupinu nebo alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku,

Ri a R4 každý atom vodíku, alkylovou skupinu -s 1 až 4 atomy uhlíku nebo fenylalkylovou -skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu,

Rz hydroxyskupinu, aminoskupinu, hydroxyaminoskupinu nebo alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku,

R3 atom vodíku, hydroxyskupinu .nebo' alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, m 1, 2 nebo- 3,

η. 0, 1 nebo 2.

Hvězdičkami jsou označeny asymetrické atomy uhlíku. Atomy uhlíku v acyklickém řetězci jsou asymetrické, . jestliže Ri nebo R4 mají jiný význam než atom - vodíku.

Tento vynález zahrnuje deriváty prolinu, pipekolové kyseliny, -azetidin-2-karboxylové kyseliny a ' příbuzných sloučenin- obecného vzorce 1. .V této -velké .skupině sloučenin jsou některé podskupiny sloučenin pro své vlastnosti výhodnější než jiné podskupiny sloučenin.

.Výhodnými jsou sloučeniny obecného vzorce 1, ve kterých představuje - R hydíoxyskupinu nebo nižší alkoxyskupinu, zvláště však hydroxyskupinu, Ri atom vodíku nebo nižší 'alkylovou skupinu, R2 hydroxyskupinu, Rs a R4 každý atom vodíku, m číslo 2 a n, číslo- 1 nebo 2, zvláště však 2. R4 je s výhodou na atomu uhlíku, který sousedí

4 s karbonylovou -skupinou koncové kyselino- se odvozují od prolinu a mají obecný vzové skupiny. rec 2,

Obzvláště výhodné jsou sloučeniny, které

R4‘ Ri /\

R2—OC—(CH)n‘—CH—CO—N kde znamená

R‘ hydroxyskupinu nebo -alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku,

Ri, R2 má význam uvedený u obecného vzorce 1,

R4^ť atom vodíku nebo· alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, - zvláště methylovou skupinu, a n‘ -číslo 1 nebo 2.

Ze sloučenin obecného vzorce 2 jsou vždy výhodnější podskupiny v řadě a) až n) a v této řadě jejich výhodnost postupně vzrůstá ke sloučeninám představujícím obzvláště výhodné provedení:

a) R představuje hydroxyskupinu,

b) n představuje 1, '· /

c) n představuje 2,

d) Rž -představuje hydroxyskupmu,............... .

e) R2 představuje hydroxyaminoskupinu,

f) R2 představuje -alkoxyskupinu, gj R4 představuje methylovou skupinu,

h) R4 představuje atom vodíku,

i) Ri představuje atom vodí_tku nebo methylovou skupinu,

j) R představuje hydroxyskupinu, Ri atom vodíku nebo methylovou skupinu,

k) R a R2 představuje každý hydroxyskupinu, Ri a R4 představuje každý atom vodíku nebo methylovou skupinu a n číslo 1 nebo 2,

l) R a R2 představuje každý hydroxyskupi-

COR‘ (2), nu, Ri a R4 představuje každý atom vodíku a n číslo 2,

m) R a R2 představuje . každý hydroxyskupinu, Ri methylovou skupinu, R4 atom vodíku a n číslo 1,

п) R · a R2 představuje ,každý hydroxyskupinu, Ri methylovou skupinu, R4 atom vodíku a n číslo 2. '

Stereoisomery, ve kterých je prolin v L-formě, jsou -obzvláště výhodné.

Alkylovými skupinami uváděnými jako- význam u různých -symbolů jsou alkylové skupiny s přímým nebo rozvětveným uhlovodíkovým řetězcem od methylové po butylovou skupinu, jako je například skupina methylová, - ethylová, propylová, isopropylová, butylová, isobutylová, t. butylová a podobné -skupiny. - Alkoxyskupinami jsou skupiny téhož typu -mající 1 až 4 atomy uhlíku vázané na atom .kyslíku, jako je například methoxyskupina, ethoxyskupina, propoxyskupina, isopropoxyskupina, butoxyskupina, isobutoxyskupina, t. butoxyskupina -a podobné skupiny. Z alkylových skupin a z al- koxysikupin -se dává přednost zvláště skupinám -s 1 až 2 atomy uhlíku. Výhodnou fenylalkylovou - skupinou je fenylmethylová skupina.

Obecně se sloučeniny podle vynálezu připravují acylaci sloučeniny obecného vzorce 3,

Ro

I

HzC—(CH)_ni

I I

HN— CH—COR (3) kde R, -R3 a m mají výše uvedený význam, .kyselinou obecného vzorce 4,

R4Ri .li

Rz—OC— (CH)n—CH—COOH

-(4] kde Ri, Rž, R4 a n mají výše uvedený význam, nebo jej'ím ekvivalentem.

Při výhodném způsobu provedení se nechá reagovat kyselina obecného vzorce 3a,

R3

I

H2C— (CH)m

HN— CH—OOH (3a) kde představuje R3 atom vodíku, hydroxyskupinu nebo alkylovou skupinu, a m má výše uvedený význam, ' například prolín, hydroxyprolin, 4-methylprolin, pipekolová kyselina, 5-hydrcoxypipekolová kyselina, azetidín-2-karboxylová kyselina nebo podobně s monoesterem malonové kyseliny, jantarové kyseliny, gluitarové kyseliny atd. obecného vzorce 4a,

O Rd Ri

X—O—C—(C HJn—CH—COOH , ' (4a) kde představuje X nižší alkylovou skupinu,

Ri, n a Rd mají výše uvedený význam, jakýmkoliv známým způsobem, při kterém se kyselina obecného· vzorce 4a aktivuje před reakcí s kyselinou obecného vzorce 3a, včetně ' vytvoření směsného anhydridu, , symetrického anhydridu, · chloridu kyseliny, aktivního esteru, Woedwardova činidla K, N,N‘-'karbonylbisimidazolu, N-ethoxykarbonyl-2-ethoxy-l,2-dihydrochinolinu a podobně. (Přehled těchto způsobů je v publikaci Methoden der organischen Chemie — Metody organické chemie — Houben-Weyl, svazek XV, část 1 a 2, 1974..)

Produktem této reakce je sloučenina obecného vzorce 5,

Rs

I

O R4 Ri HaC—(CH),_n

X—O—C— (CH)n—CH—CO—N — CH—COOH', (5) kde ^!Ri, R3, R4, X a ·π mají výše uvedený význam, .která se zmýdelní například zásadou, jako· je ' hydroxid sodný, o sobě známým . způsobem, čímž se získá volná dikyselina obecného· vzorce 6,

Rs

I

R4 R1 HaC— (CH)m

HOOC—(CH)_n—CH—CO—N — CH—COOH , (6) kde Rt, Rs, R4 a n mají výše uvedený význam.

Naopak se volná kyselina může o sobě známým způsobem esteriííkovat.

Při Obměněném způsobu se ester kyseliny obecného vzorce 3a, například nižší alkylester, může použít pro reakci s monoesterem obecného vzorce 4a, čímž se získá sloučenina obecného vzorce 7,

R3

I

O R4 Ri H2C—(CH)_m r₅_C—(CH),—CH—CO—N — CH—COR (7) kde R a Rs představují esterové skupiny, například alkoxyskupinu, a Ri, R3, R4, m a n mají , výše uvedený význam.

Kromě, výše uvedených kopulačních čini del se může použít také jiných činidel, jako například dicyklohexylkarbodiinidu.

Amonolýzou kyseliny obecného· vzorce 5 se získá amid obecného vzorce 8, . R3

I

Rd Ri HaC— (CH)m

II I I II

HaN—C—(CH)_n—CH—CO—N — CH—COOH (8)

kde Ri, Rs, Rd a n mají výše uvedený	obecného vzorce 5 se získá hydroxamová kyselina obecného vzorce 9,
význam, nebo· hydroKyaminolýzou	kyseliny
		Rs
O Rd II 1	lil	HaC—(CH)_m 1 1

HO—N'H—C—(CH)_n—CH—CO—N — CH—COOH , (9) kde Ri, Rs, Rd, m a n mají výše uvedený význam.

Monoester jakožto výchozí látka 4a, kde n představuje nulu, se získá z odpovídajícího diesteru malonové kyseliny způsobem popsaným v .puJblikaci Organic Syntheses (Organické syntézy] 37, 34 (1957). Monoestery kyseliny jantarové obecného vzorce 4a (kde se například n rovn'á 1) se připraví alkoholýzou odpovídajícím způso bem substituovaného anhydridu kyseliny jantarové. Je výhodné připravovat produkty, ve kterých je esterová skupina v poloze β k alkylové skupině postranního řetězce.

K získání potřebné reglospecifity při alkofholýze se s výhodou používá anhydridu alkylidenjantarové kyseliny . pro přípravu výchozího monoesteru, například anhydridu obecného vzorce 10,

(10) kde představuje

R‘ atom vodíku, alkylovou skupinu nebo fenylovou skupinu, · a

R“ atom vodíku nebo· alkylovou skupinu.

Sloučenina. obecného vzorce 10 se zpracovává alkoholem obecného vzorce

ROH , kde R má výše uvedený ' význam, ' čímž se získá produkt obecného vzorce 11,

R‘

I COOH

\

COOR (11) kde R, R a R“ mají výše uvedený význam, jehož redukcí vodíkem se získá sloučenina obecného vzorce 12,

Ri COOH

COOR kde R a Ri mají výše uvedený význam.

Podobně se v případě glutarových kyselin (například n představuje číslo 2) používá alkylidenových derivátů. Jestliže takové alkylidenové deriváty nejsou snadno dostupné, podrobuje se alkoholýze substituovaný anhydrid glutarové kyseliny a monoešter se pak pečlivě čistí trakční krystalizací dicyklohexylamoniové soli.

Sloučeniny obecného vzorce 1 mají jeden asymetrický atom uhlíku a dva, jestliže Ri nebo R4 se liší od atomu vodíku. Tyto· atomy uhlíku jsou v obecném vzorci 1 označeny hvězdičkou. Sloučeniny jsou proto v diastereoisomerní formě nebo ve formě racemických směsí. Všechny tyto sloučeniny spadají pod obecný vzorec 1. Při způsobu podle vynálezu se může použít racemátu nebo· jednoho· z enantiomeru jakožto výchozí látky. Jestliže se použije racemické výchozí láťky, mohou se získané štereoisomery oddělit obvyklou chromatografií nebo· frakclonovanou krystalizaci. Obecně představuje (!2)

L-isome.r se zřetelem na atom uhlíku · aminokyseliny výhodnou isomerní formu.

Sloučeniny připravené způsobem podle . vynálezu vytvářejí zásadité soli . s různými anorganickými nebo· organickými zásadami; tyto soli · jsou ve vynálezu rovněž zahrnuty. Takové soli zahrnují amoniové soli, soli alkalických kovů, jako sodíku a draslíku, ty jsou výhodné, soli kovů alkalických · zemin, jako· vápenaté · a hořečnaté soli, soli organických zásad, jako je například dicyklohexylaminová sůl, benzathinová, N-methyl-D-gtukaminová, hydrabaminová sůl, soli s aminokyselinami, jako argininem, · . lysinem a podobné soli; výhodné jsou netoxické, fyziologicky vhodné soli, jakkoliv jiné soli jsou rovněž použitelné, například při izolaci nebo čištění produktu, jak je objasněno v příkladech praktického provedení na příkladu dicyklohexylamínové soli.

So.li se připravují běžným způsobem reakcí produktu ve formě volné kyseliny s jedním nebo několika ekvivalenty vhodné zásady, poskytující žádaný kation v rozpouštědle nebo v prostředí, ve kterém je sůl nerozpustná,. nebo¹ ve vodě a odstraněním vody vy.mrazovacím sušením. Zpracováním soli nerozpustnou, kyselinou jako katexovou pryskyřicí ve vodíkové formě (například pryskyřicí polystyrensulfonové kyseliny, jako je Dowex 50) nebo· vodnou kyselinou, a extrakcí organickým rozpouštědlem, například ethylacetátem, dichlormethanem nebo podobným rozpouštědlem se může získat ze soli kyselina ve volné formě a popřípadě se může připravit jin'á sůl.

V připojených příkladech jsou popsány případy zvlášť výhodného· provedení způsobu podle vynálezu a připojené .příklady jsou také návodem pro· přípravu jiných členů skupiny sloučenin obecného vzorce 1.

Sloučeniny obecného vzorce 1 připravené způsobem podle vynálezu inhibují konverzi de.kapeptiidangiotensinu I na angiotensin II a jsou proto užitečné pro snižování nebo odstranění hypertense působené angiotensinem. Působením enzymu -reninu na -angiotensinogen, pseudoglobulin - v krevní plasmě, vzniká angiotensin I. Angiotensin I se převádí enzymem převádějícím angiotensin (ACE) na angiotensin II. Angiotensin II je látka zvyšující tlak krve, která se považuje za příčinu různých forem hypertense u růžených druhů savců, například u krys a psů. Sloučeniny připravené způsobem podle - vynálezu se podílejí na sledu renin angiotensin I » angiotensin II inhibicí enzymu převádějícího angiotensin a redukcí nebo eliminací tvoření anglotensinu II zvyšujícího tlak krve.

Pří podání prostředku obsahujícího jednu sloučeninu obecného vzorce 1 nebo kombinací sloučenin -obecného vzorce 1 nebo jejich fyziologicky vhodné soli se tudíž odstraní angiotensinem vyvolaná hypertense u savců, kteří jí trpí. Ke snížení krevního tlaku je vhcdná jedna dávka nebo- s výhodou dvě - až čtyři rozdělené denní dávky okolo- 1 -až 1000 mg/kg denně, s výhodou 10 až 100 mg/kg denně, jak je ukázáno při pokusech na zvířatech popsaných S. L. Englem, T. R. Schaefferem, Μ. H. Waughem a B. Rubínem v Proč. Soc. - Exp. Biol. Med. 143, 483 (197'3). Látka se s výhodou podává perorálně, může se však použít také parenterálního způsobu, jako· subkutánního, intramuskulárního, intravenozního nebo intraperitoneálního způsobu.

Sloučeniny obecného vzorce 1, kde představuje R jinou skupinu, - než hydroxyskupinu a Rž představuje amlnoskupinu nebo· alkoxyskupinu, se převádějí v těle na sloučeniny se -dvěma karboxyskupinami.

Sloučenin připravených způsobem podle vynálezu se může použít ke snižování krevního tlaku při zpracování na tablety, kapsle nebo elixíry pro· orální podání nebo- na sterilní roztoky nebo suspenze pro parenterál ní podání. - Kolem . . 10 - až - -509- - mg sloučeniny obecného vzorce I nebo směsi - - -sloučenin obecného vzorce 1 nebo jejich - fyziologicky vhodných solí se zpracovává s fyziologicky vhodnými pojidly, nosiči, excipienty, stabilizátory, konzervačními a vonnými látkami atd. na jednotkové dávky, které jsou vhodné -pro farmaceutickou - - praxi. Množství aktivní látky v těchto- přípravcích a formulacích je takové, aby se získala vhodná dávka -pro indikované použití.

Jako pomocné přísady kterých je možno použít pro tablety, kapsle a podobné formy, ss uvádějí: pojidla, jako guma tragakant, akacia, kukuřičný škrob nebo- želatina; excipienty, jako dikalciumfošfát; desintegrační prostředky, jako škrob obilný, škrob bramborový, -kyselina alginová a podobné látky; maziva, jako stearát -hořečnatý; sladidla, jako' cukrosa, laktosa nebo sacharid; vonné -látky, jako pepermint, olej libavkový nebo šery.

Jestliže je dávkovači formou kapsle, může obsahovat přídavně k již uvedeným látkám kapalné nosiče, jako- jsou mastné oleje.

Může se použít -také různých dalších látek, jako¹ jsou povlaky nebo^ jiné látky modifikující fyzikální - formu jednotkové dávky. Například se tab¹ety mohou povlékat šelakem, - cukrem nebo jak šelakem, tak cukrem. Sirup nebo elixír může obsahovataktivní sloučeninu, cukrózu, jako- sladidlo, methylparaben a propylparaben jako konzervační přísadu, barvivo a chuťovou - přísadu, jako šery nebo pomerančovou esenci.

Sterilní přípravky pro injektování se -mohou - formulovat známými způsoby z farmaceutické praxe, jako je rozpouštění nebo suspendování účinné látky v pojidle, jako je voda pro injektování, přírodní oleje, jako sesamový olej, kokosový olej, podzemnicový olej, olej bavlníkových semen atd., nebo jako- jsou syntetická mastná pojidla, - jako je ethyloleáit nebo podobné látky. Popřípadě se mohou přidávat pufry, konzervační přísady, anlio'xidanly a podobné látky.

Způsob podle vynálezu objasňují připojené příklady, -které popisují zvlášť výhodné způsoby provedení vynálezu. Teploty jsou míněny ve °C.

Příklad 1

Terc.butylester L-prolinu

L-prolin (230 g) se rozpustí ve směsi vody (1 litr) a 5N roztoku hydroxidu sodného (400 ml). Roztok se rychle ochladí v ledové lázni a za intenzivního- míchání se přidá 5N roztok hydroxidu sodného (460 ml) a benzyloxykarbonylohloridu (340 ml), a to v pěti stejných dílech v průběhu půl hodiny. Po jednohodinovém míchání při - teplotě místnosti se směs dvakrát extrahuje etherem -a okyselí se koncentrovanou chlorovodíkovou kyselinou. Sraženina se. odfiltru197285 je a · usuší. Získá se 442 g produktu o· teplotě tání 78 až 80 °C.

Takto získaný benzyloxykarbonyl-L-prolin· (180 g) se rozpustí ve směsi dichlorme•hanu (300 ml), kapalného isobutylenu (800 ml] a koncentrované kyseliny sírové (7,2 ml). Roztok se pak · třepe v tlakové láhvi po dobu 72 hodin. Tlak se uvolní, isobutylen se nechá odpařit a roztok se promyje · 5% roztokem uhličitanu sodného, vodou, vysuší se síranem· horečnatým a odpaří se do sucha ve vakuu, čímž se získá terc.butylester benzyloxykarbonyl-L-prolinu v množství 205 g.

Terc.butylester benzyloxykarbonyl-L-prolinu (205 g) · se rozpustí v absolutním ethanolu (1,2 · 1) a hydrogenuje se za · normálního^ tlaku 10% paládiem na uhlí (10 g] tak ďouho, že se ve vystupujícím plynném vodíku pozorují již jen stopy kysličníku uhličitého· (24 hodiny). Katalyzátor se odfiltruje a filtrát se odpaří ve vakuu 3,9 kPa. Zbytek se destiluje ve vakuu, čímž se získá terc.butylester L-prolinu a teplotě varu/0,13 kPa 50 až 51 °C.

P ř í Jk 1 a d 2

Terc.butylester l-(2-ethoxykarbonylpropanoyl·) -L-prolinu

Monoethylmethylmalonát [připravený způsobem popsaným v publikaci Organic Syntheses — · Organické syntézy — 37, 34 (1957)] (2,92· g) a terc.butylester L-prolinu · (3,42 g) se rozpustí v dichlormethanu (80 ml). Roztok se rychle ochladí za míchání v ledové lázni. Přidá se dicyk.lohexylkarbodiimid (4,12 g) a směs se míchá po dobu 15 minut v ledové · lázni a po dobu 16 hodin při teplotě místnosti. Sraženina se odfiltruje a filtrát se odpaří k suchu ve vakuu. Zbytek se rozpustí v ethylacetátu a promyje se 5% vodným roztokem kyselého síranu draselného, vodou, nasyceným roztokem kyselého uhličitanu sodného a vodou. Organická fáze se vysuší síranem hořečnatým a odpaří se k suchu ve vakuu, čímž se získá terc.butylester l-^-ethoxykarbonylpropanoyl)-L^prolinu ve výtěžku 5,9 g.

Příklad 3

1- (2-ethoxykarbonylpropanoy 1) -L-prolin

Ester · získaný způsobem podle příkladu 2 (5,9 g) se rozpustí ve trifluoroctové kyselině, · roztok se nechá při teplotě místnosti po dobu jedné hodiny a pak se odpaří k suchu ve vakuu. Zbytek se rozpustí ve směsi ethylacetátu a nasyceného· vodného roztoku kyselého uhličitanu sodného. Vodná fáze se okyselí a extrahuje se ethylacetátem. Ethylacetátová vrstva se vysuší síranem horečnatým a odpaří se k suchu ve vakuu, čímž se získá l-(2-ethoxykarbonylprcipanoyl)-L-prolin ve výtěžku 4,1 g.

Přikládá

1- [ 2-kařbo^ιxypropanoyl ] -L-prolin

1- (2-ethoxy.karbony lpropanoyl) -L-prolin (4,1 g] se rozpustí · ve · směsi IN · · roztoku hydroxidu sodného· (51 ml] a methanolu (51 ml). Roztok se · nechá při teplotě místnosti po dobu šesti hodin a pak · se odpaří na polovinu objemu ve vakuu. Přidá se · ionexová pryskyřice (Bowex 50) (50 ml) a· suspenze se · vnese na sloupec 150 ml téže pryskyřice. Shromažďují se frakce obsahující žádaný materiál (pozitivní na karboxylové reagens) a suší · se vymrazováním, čímž se získá l-(2-karboxypropanoyl) -L-prolin ve · výtěžku 1,5 g.

P ř í k 1 a d 5

1- (2-karbamoylpr opanoy 1) -L-prolin

1- (2-e ’ thoxyk arbonllpropanoy].) -L-prolin (2,0 g) · se rozpustí v 10% methanolickém amoniaku a směs se ponechá · při teplotě místnosti v tlakové láhvi. Jakmile analýza chromatografií v tenké vrstvě udává, · že je všechen výchozí materiál převeden na amid, odpaří · se směs k suchu a zbylá amoniová sůl se převede na volnou kyselinu ionexovou pryskyřicí (Dowex 50 ve vodíkové · formě), čímž se získá l-(2-karbamoylpropanoyl)-L-ve výtěžku 1,1 g.

Příklad · 6

1- (2-hydroxykarbamoylpropanoyl) -L-prolin · ve formě sodné soli l-(2-ethoxykarbamoylp'ř opanoyl)-L-prolin (2,4 · · g) se rozpustí v absolutním ethanolu (8 ml). Přidá se ethanolický roztok hydroxylaminu (připravený z hydroxylaminhydrochloridu [0,7 g] a natriumethylátu), načež · se přidá roztok sodíku (0,23 g] v absolutním· ethanolu (8 ml). Po dvou hodinách se reakční směs přidá do intenzívně míchaného etheru (500 ml). Sraženina se odfiltruje a vysuší, čímž · se získá· sodná sůl l-(2-hydroxykarbamoylpropanoyl) -L-prolinu ve výtěžku 2 g. Volná kyselina se připraví zpracováním ionerem (Dowex 50 ve vodíkové formě).

Příklad 7

Terc.butylester 1- (2-ethoxykarbonyl-3 · · fenyl.propanoyl) -L-prolinu

Náhradou monoethylm-ethylmalonátu monoéthyjbenzylmalonáitem (připraveným způsobem podle R. Fralse-Julleen a C. Frejaville, Bull. Soc. Chem. France, 219, 1970) při · způsobu podle příkladu 2 se získá terc.buťy 1 ester 1- (2-ethoxykarboinyl-3-f enylpropanoyl)-L-prolinu.

Příklad 8

1- ( 2-ethoxy,karbonyl-3-f enylpropanoyl) -L-prolin

Použitím terc.butylesteru l-(2-ethoxykarbonyl-3-fenylpropanoyl-L-prolinu při způsobu podle příkladu 3 se získá l-(2-ethioxykarbonyl-3-f enylpropanoyl) -L-prolin.

P ř í k 1 a d 9 .

1- (2-karboxy-3-f enylprop anpyjl JblLprolin

Zpracováním 1- (2-e'thoxykarb(anyl-3-f enylpropanoyl ) -L-prolinu způsobem; popsaným v příkladu 4 se získá 1-(2-karboxy-3d^?enylpropanoyl )-L-prolin.

Příklad 10

1- (2-karbamoyl-3-f enylpropanoyl ) -L-prolin

Zpracováním 1- (2-nthoxykarbonyl-3-f eny^ropanoy^-L-prolmu způsobem podle příkladu 5 se připraví l-(2-karbamoy l-3-f eny^ropanoy!) -L-prolin.

Příklad 11

Sodná sůl l-(2-hydroxykarbamoyl-3-f eny^ropanoy!) -L-prolinu

Zpracováním 1- ( 2ethoxykarbonyl-3-fenylproranoyl)-L-rrolinu způsobem popsaným v příkladu 6 se připraví sodná sůl 1- (2-hydro.xykarbamoy 1-3-f eny^ropanoy!) -L-prolinu. .

Příklad 12

Terc.butylesiter 1- ( 3-methoxykarbonyl-2-me'thy Ipropanoyl ) -L-prolinu

3-methoxykarbonyl-2-methylenpropanová kyselina (36 g) se rozpustí v absolutním ethanolu (400 ml) a hydrogenuje se v přítomnosti 10'% paládia na uhlí (3,6 g) tak dlouho, až se již neabsorbuje žádný vodík. Katalyzátor se odfiltruje a filtrát se odpaří do· sucha ve vakuu. Zbytek (37 g) a terc.butylester L-prolinu (42,7 g) se rozpustí v methylenchloridu (750 ml) a roztok se rychle ochladí za míchám v ledové lázni. Přidá se dicyklohexylkarbodiimid (51,5 g) a směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 18 hodin. Sraženina se odfiltruje a filtrát se odpaří do sucha ve vakuu. Zbýtek se rozpustí v ethylacetátu a promyje · se do· neutrální reakce. Ethylacetát se vysuší síranem hořečnatým a odpaří se ve vakuu k suchu. Zbytek se rozpustí v etheru a acylmočovinový vedlejší produkt se oddělí filtrací. Filtrát se odpaří k suchu ve vakuu,· čímž se získá terc.butylester l-(3-me'thoxykarbonyl-24nethy}propanoyl)-Lq)rolinu · ve · · výtěžku 64,7 g. '

P ř í k 1 a d 13

1- (3-methoxykarbonyL2-methylpropanoyl ) -L-prolin

Terc.butylester 1- (3-niethoxykarbonyl-2-methylrropanoylj-L-prolmu se rozpustí ve trifluoroctové kyselině (150 mlj a roztok se nechá po dobu jedné hodiny při teplotě místnosti. Trifluoroctová kyselina se odstraní (většinou odpařením) k suchu a zbytek se přesráží několikrát ze systému ether-hexan. Výtěžek je 18,3 g.

Produkt se rozpustí v acetonitrilu (10 ml) a přidá se d-ícyklohexylamin. Krystaly se oddělí filtrací, suspendují se v acetonitrilu (590 ml), vaří se po dobu pěti minut, ochladí se, zfiltrují a suší. Tyto· krystaly se opět suspendují v acetonitrilu (450 ml) vaří se po· dobu pěti minut, ochladí se, odfiltrují a suší, čímž se získá 13,6 g produktu . o teplotě tání 193 až 194 °C; produktem je dicyklohexylaminová sůl l^-methoxykarbony 1-2-D-methylpropanoyl) -L-prolinu. Z prvního acetonitrilového matečného louhu se získá 6,2 g dicyklohexylaminové soli l-(3-methoxykarbonyl-2-L-methylpropanoyl) -L-prolinu o teplotě tání 138 až 139 °C. Tyto soli se převedou na l-(3-methoxykarbonyl-2-methylrropanoyl)-L-rrolin zpracováním ionexem (Dowex 50).

Příklad 14

1- (3-karb oxy-2-iametiy tprop a in оу 1) -L-prolin

Každá, z dicyklohexylamoniových solí získaných podle příkladu 13 (19,5 g) se · rozpustí ve směsi methanolu (137 ml) a 1N roztoku hydroxidu sodného · (137 ml) a roztok se míchá při teplotě místnosti po dobu pěti hodin. Volná dikyselina se izoluje chromatografií na ionexu Dowex 50. N^-kar-boxy^-lDmethyIpmpanoyl )-L-prolin má teplotu tání 139 až 141 °C; [a)_D ²⁵ = —70,5 (c 2, ethanol ). N- (3-karboxyI2-L-methylpr opanoylpL-prolin má teplotu tání 132 až 133 °C, [a)o²⁵ —66,8° (c 1,1, ethanol).

Příklad 15

1-(3karPmcylI2-IIlethylprcpanoyl )-L-prolin .

Zpracováním 1- (3-methoxykarbonyl-2ImeI thylpropanoyl ^L-prolinu způsobem popsaným v příkladu 5 se získá lI(3-karbamoyl-2I Imethylprcpa^ncyl) -L-prolin.

Příklad 16

1- (3-hydroxykarbamoyl-2-methylpropanoyl) -L-prolin

Zpracováním 1- (3-methylkarbonyl-2-methylpropanoyl]-L-prollnu způsobem popsaným - v příkladu 6 se získá l-(3-hydroxykarbamoyl-2-methylpropanoyl) -L-prolin.

P ř í k - - 1 a d 17

Terc.butylester 1- (3-methoxykarbony 1-2-lbe nzy 1p г o pa noy i ] -L-prolin.u

a] 3-methoxykarbonyl-2-benzylidenpropanová kyselina

2-karboxymethyl-3-fenylpropenová kyselina (4,1 g] a acetanhydrid (9 ml) se zahřívají na parní lázni po dobu 70 minut. Směs se odpaří do sucha a zbytek se trituruje etherem, výtěžek je 3,6 g. Tento anhydrid se rozpustí ve 7 ml methanolu a zahřívá se v parní lázni' po dobu jedné hodiny.

b]

Způsobem popsaným v příkladu 12 za náhrady - 3-methoxykarbonyl-2-melthylenpropanové kyseliny 3-methoxykarbonyl-2-benžylΓdtnpropanovou kyselinou se získá terc.butylester 1- (3-methoxykabbony--2-benzy-propanoylJ-L-prolinu.

Příklad 18

1-(3-methQxykarbonyl-2-benzylppoρanoyl)-L-prolin

Zpracováním ter^butylesteru 1-(3-methoxykarbonz 1-2-benzylpr opanoyl ) -L-prolinu způsobem popsaným v .příkladu 13 se získá 1- (3-methoxykarbony 1-2-benzz ^ropa noy 1) -L-prolin.

Příklad 19 , l-(3-kaгboxy-2-benzzlpropanoyl]-L-prolie

Zpracováním 1- (3-methoxzkarbonzl-2-benzzlpropaeoyl]-L-prolmu způsobem popsaným v příkladu 14 se získá l-(3-karboxy-2-benzylpr opanoyl) -L-prolin.

Příklad 20

1- (3-karbamozl-2-benzylpr opano^l) -L-prolin

Zpracováním 1- [ 3-methoxykarbonyl-2-be.ezzlpгopanoyl]-L-prolinu způsobem popsaným v příkladu 5 se získá l-(3-karbamoyl-^^-^-^ť^i^í^^^l^j^iropanoyl] -L-prolin.

Příklad 21

1- (3-hydroxzkarbamozl-2-benzylprnpaeozl) -L-prolin

Zpracováním 1- (3-methoxykarbonyl-2-beezylproρaeoyl]-L-prolieu způsobem popsaným v příkladu 6 se získá l-(3-hydroxykarbamoyl-2-benzylpropanoyl)-L-prolin.

Příklad 22

1- (4-karboxybutanoyl) -L-prolin

Anhzdrid^f1 kyseliny - glutarové (4,6 g) a L-prolin; - (4,6 g] se suspendují v bezvodém pyridinu -' -(40 . ml] a vaří se pod zpětným chladičem po- dobu jedné . hodiny. Směs se odpaří k suchu ve vakuu a zbytek se rozpustí ve vodě a vnese se na sloupec Dowexu 50 [75 ml] . -a -eluuje se vodou. Shromažďují se frakce obsahující žádaný materiál (pozitivní na karboxylové reagens] a odpaří se k suchu. Zbytek se rozpustí v acetonitrilu (50 ml] a přidává se diczklohexylamin až do- získání alkalické hodnoty pH - (vlhký indikátorový papírek]. Krystaly -se odfiltrují, vysuší a překrystalují z isopropanolu (55 ml], čímž se získá -dicyklohexylaminová sůl l-(4-karboxzbutaeoyl]-L-prolieu - (14 g o -teplotě -tání 170 -až 172 °C].

Dicyklohexylaminová sůl se převede zpět na kyselinu ionexem'- Dowex 50 ve -vodě.

Příklad 23

Terc.butylester l-(4-methoxykarbonyl-2-m elh zlbutanozl ] -L-prolinu a ] 4-methO'xykarbonyl-2-methzlbutaeová kyselina

2-methylglutarová kyselina (14,6 g] a ace•у!уЫо^ ^j(26 - ml] se - zahřívají v parní lázni po dobu jedné hodiny. Směs -se odpaří k suchu ve vakuu a zbytek se dvakrát odpaří z -toluenu. Zbytek se rozpustí v methanolu (4,7 ml], zahřívá se na parní lázni po- dobu jedné hodiny a odpaří se k suchu. Zbytek se rozpustí ve směsi etheru (17 ml], dicyklohexylaminu - (16,7 ml] a hexanu (83 ml]. Krystalická sůl se odfiltruje, míchá se a zpracuje se vroucím ethylacetátem (75 ml]. Nerozpustný podíl -se -odfiltruje a filtrát se zkonicentruje na jednu - třetinu svého- objemu a prudce se -ochladí. Krystaly se -odfiltrují a vysuší se, čímž se získá 11,3 g 4-methoxykarbonyl-2-methylbutanové kyseliny ve formě dicyklohexylaminové - soii o teplotě tání 97 až - 99 ^CC. Sůl se převede na volnou kyselinu zpracováním Dowexem 50.

b] · mthoxykarbonyl-2-mmthylbutanová kyselina (3,1 g] .a terc.butylester L-prolinu (3,78 g) se rozpustí v dichlormethanu (40 ml). Roztok se rychle ochladí za míchání v ledové lázni a přidá se dicyklohexylkarbodiirniid (4,12 g). Míchá se po dobu 15 minut v ledové lázni a pak po dobu 18 hodin při teplotě místnosti, sraženina se odfiltruje a filtrát se odpaří k suchu ve vakuu. Zbytek se chromatcgrafuje na sloupci silikagelu s chloroformem, čímž se získá terc.butylester 1- (4 · methoxyk arbonyl-2-metУylbu·tanoy 1) -L-prolinu ve výtěžku 3,5 g.

Příklad 24

1- (4-meí’hoXykar bonyl-2-methylbutanoyl) -L-prolin

Terc.butylester l-(4-meⁱthoxykarbony--2-methylbutanoyl)-L-pгolinu (3,4 g) se rozpustí ve trifluoroctové kyselině (2'5 ml] a roztok se nechá při teplotě místnosti po dobu jedné hodiny. Trifluorcctová kyselina se odstraní ve vakuu a zbytek se přesráží několikrát z ethylhexanu. Zbytek se rozpustí v acetonltrilu (12 ml) a přidá se 2 ml dicyklohexylaminu. Krystalická sůl se izoluje filtrací a prekrystaiováním z acetonitrilu, čímž se získá 1,8 g dicyrlohexylamiyové soli l-(4-methoxykarbonyl-2-D-methylbutanoy^-L-pro-linu o teplotě tání 174 až 175 °C. Z matečného louhu se také oddělí ve formě dicyklohexylaminové soli l-(4 methoxy^ιkarbony^2-L-methyl·butanoyl] -L-prolinový isomer. Sůl se převede na kyselinu zpracováním Dowexem 50.

Příklad 25 · · (4-karboxy-2-methylbutanoy 1) -L-prolin

Každá z dl·cyrloУ.exylamoyíovýcУ so'í získaných způsobem popsaným v příkladu 24 (1,3 g) se rozpustí ve methanolu (9 ml) a N roztoku hydroxidu sodného (9 ml). Po pěti hodinách se kyselina izoluje ionexovou chromatografií na Dowexu 50, výtěžek je 0,8 g. Jestliže sc použije l-(4-metУl·oxyrarboyyl-2-D-methylbutanoyl)-L-prolinového isomeru podle příladu 24, získá se l-(4-karboxyl-2^l^--^etty^ll^лU:t^m^^l)-L-]^lroliy a po> krystalizaci z acetonitrilu má bod tání 154 až 156 ^CC, výtěžek je 594 mg.

i6a]₀25 —99 (c 1,3, ethylalkohol).

Týmž postupem, avšak za použití l-(4-methoxykarbonyl) -2-L-me thy lbutanoy 1) -L-prolinu (750 mg) se získá l-(4karbioxy-2-L-me^lthylbutanoyl)-L-prolm (397 mg, teplota' tání 156 až 157 °C.

1(0-)0²⁵ —22,5 (c 1,5, ethanol) po krystalizaci z acetonitrilu.

Příklad 26 '

1- (4-karbamoyl-2-methylbutanoyl) -L-prolin

Zpracováním 1- (4-methoxykarbonyl) -2-methyllbutanoyl )-L-prolinu způsobem popsaným v příkladu 5 se získá l-(4-karbamoyl-2-methylbutanoyl) -L-prolin.

Příklad 27

1- (4-hydroxykarbamoyl-2-methylbutanoyl) -L-prolin

Zpracováním 1- (4-methoxy'karboyyl-2-methylbutanoyl) -L-prolinu ·způsobem popsaným v · příkladu 6 se získá l-(4-hydroxykarbamoyl-2-metУylbutanoyl) -L-prolin.

P ř í k 1 a d · 28

Terc.butylester 1- (4-metУoxykarbonyl-2-b2nzyl·butanoyll-L-proliУU

Zpracováním benzylglutarové kyseliny (CA 75, 48 378e) způsobem popsaným v příkladu 23 se získá terc.butylester l-(4-methoxyrarboyyl-2-be·lУzylbutayoyl ]-L-prolinu.

P ř í k 1 a d 29 l-(4-methoxykarbonyl-2-benzylbutanoyl)-L-prolin

Zpracováním terc.butylesteru l-(4-methoxyrarboyyl-2-beyzylbutanoyl]-L-prolinu způsobem popsaným v příkladu . 24 se získá l-(4-metУLOιχykarbonyl-2-benzylbutanΌyl)-L-prolin.

P ř í k 1 a d 30

1-(4-k a· rbo-xy-2-benzy lbutanoy 1)^-^0^

Zpracováním 1 - (4-metУoxykar·boУlyl-2-benzymutancyl) -L-prolinu způsobem ' . popsaným v příkladu 25 se získá l-(4-karboxy-2-benzylbutanoyl)-L-prolin.

P ř í k 1 a· d 31 · (4-rarbamoyl-2-beУzylbu'ianoyl·]-L-pгolin

Zpracováním .. 1- (4-metУo.xykarbonyl-2- . -benzylb.u-tanoylpL-prolinu způsobem . ·popsaným v příkladu 5 se získá l-(4-karbamoyl-2-benzylbutanoyl)-L-prolin.

P ř í k 1 a d ' 32 l-(4-hydr oxyk arbamoy--2-benzylbutanoyl)-L-prolin

Zpracováním l-(4-methoxykarbonyl-2-benzylbutanoyl )-L-prolinu způsobem popsaným v příkladu 6 se získá ldl-hydroxykarbamoyl-2-benzy lbutanoyl) -L-prolln.

Příklad 33

1- (2-ethoxykarbony lpropanoyl )-L-hydroxyprolin

Monoethylmethylmalonát {1,46 g) a N-hydroxysukcinimid (1,15 g) se rozpustí v ethylacetátu a roztok se rychle ochladí za míchání v ledové - lázni. Přidá se dicyklohexylkarbodiimid (2,06 g) a směs se míchá po dobu 15 minut v ledové lázni a přes ncc při teplotě místnosti. - Sraženina se odfiltruje a filtrát se odpaří do sucha. Zbytek se rozpustí v pyridinu - (15 ml) a .přidá se do směsi L-4-hydroxyprolinu (3,30 g), kyselého uhličitanu sodného· (2,5 g) a vody (15 ml). Míchá se po dobu 18 hodin při teplotě místnosti, pak se přidá voda (60 ml) - a - roztok se extrahuje ethylacetátem. - - Vodná fáze se okyselí (na hodnotu pH 2) a extrahuje se ethylacetátem. Ethylacetá-tová vrstva se vysuší síranem hořečnatým a - odpaří se k suchu, čímž se získá l-(2-ethoxykarbonylpropanoy 1) -L-hydroxyprolin.

P ř í k 1 a d 34

1- (2-karboxypropanoy 1.) -L-hydroxyprolin

1- (2-Ethoxykarbony lpropanoyl) -L-hydroxyprolin se rozpustí ve směsi methanolu (20 ml) a 1N roztoku hydroxidu sodného (20 ml). Po- šesti hodinách -se rozpouštědlo -odstraní ve vakuu na polovinu objemu a vnese se na sloupec ionexu Dowex 50 (50 ml) a eluuje se vodou, čímž se - získá l-(2-karboxypropanoyl ) -L-hydroxyprolin.

Příklad 35

1- (2-karboxypropanoyl) -L-azetldin-2-karboxylová kyselina

Použitím L-azctidin-2-karhoxylové kyseliny -místo L-hydroxyprolinu při způsobu popsaném v příkladu 33 a pak pokračováním způsobem popsaným v příkladu 34 se získá l-( 2-ethoxykarbonylpropanoyl )-L-azetidin-2-karboxylcivá kyselina a popřípadě l-(2-karboxypropanoyl) -L-azetidin^-karboxylová kyselina.

Příklad 36

1- (2-karboxyprC’pancl) -L-pipekolová kyselina

Použitím L-pipekolové kyseliny místo ^^-^^^i^imxyprolinu při způsobu popsaném v příkladu 33 a pak pokračováním způsobem popsaným v příkladu 34 se získá l^-cthoxykarbony lpropanoyl) -L-pipekolová kyseli na a popřípadě Ίl(2-kaгboxypгcpanoyl)-L-pipekólová kyselina.

Příklad 37

Použitím 3-Ίnethoxykarbcnyl-2-methyl) propanové kyseliny místo monoethylmethylmalonátu při způsobu popsaném v příkladu 34 se získá l-fB-methoxykarboíiyl^-methylpropanoyl)-L-hydrcxyprolm a l-(3-karboxy-2-methylpr opanoyl) -L-hydroxyprolin.

Příklad 38

1- (3-karboxy-2-me.thylpropanoyl·) - -L)aze'tidin)2-karbcxylcvá kyselina

Použitím 3-me'thoxykarbonyl)2-methylpropanové kyseliny místo monoethylmethylmalonátu a - -L-azetidin^-karboxyíové - kyliny místo - hydroxyprc-linu při způsobu popsaném v příkladu 33· - -a pak pokračováním způsobem - popsaným v . . příkladu 34 se získá- 1- - (3-Inethcxykaгbcnyl-2-lnethylpropaIlcyl))L)azetidin-2-kaгbc^xylcvá kyselina a popřípadě 1- - (3-karboxy-2-methylpropano- yl )-L-azeti'din-2-karbC'xylcvá kyselina.

P ř í k 1 a -d - 39

1- (3-karboxy-2-methylpropanoy 1) -L-pipckolová kyselina

Použitím 3-methcxykarbonyl-2-me'thylpropanové kyseliny místo monoethylmethylmalonátu a L-pipekolové kyseliny místo hydroxyprolinu při způsobu podle příkladu 33 a pokračováním způsobem podle příkladu 34 se získá l-^-methoxykarbdnyl^-methylprcpanoyl)-L-pipekolová kyselina -a popřípadě 1- (3-karbcxy-2-methy lpropanoyl) -L.pipekolová kyselina.

P ř í k 1 a - d 40

1- (4-karbcxy-2-methylbutancyl )-L^-^i^c^roix^^]prolin

Použitím 4-methoxykarbonyl-2-methylbutanové kyseliny místo monoethylmethylmalonátu při způsobu podle příkladu 33 a pak pokračováním způsobem popsaným v příkladu 34 se -získá l-(4-met^h^oxykai^t^onyl-2lmethylbutancyl)-L-hydrcxyprOlin - a popřípadě 1- (4-karboxy-2-methylbut anoy 1) -L-hydroxyprolin.

P ř í k 1 a d 41 l-(4 -karb oxy-2-methy Ibut anoyLL-azetldln-2-karboxylová kyselina

Použitím 4-methoxykarbonyl-2-methylbutanové kyseliny místo monoethylmethylmalonátu a L-azetidm-2-karbQxylcvé kyseliny místo- hydroxyprolinu při způsobu popsa197285 ném v příkladu 33 · a pak postupováním způsobem popsaným v příkladu 34 se získá 1- (4-methoxykarbony 1-2-rnethylbutanoyl) -L-azetidln-2-karboxylová kyselina a popřípadě b-[4^-kaib^c^xy-2-methylUutanoyl)-^L-azetidin-2-karboxylová kyselina.

Příklad 42

1- [ 4-karboxy-2-methylbutanoy 1) -L-pipekolová kyselina

Použitím 4-^^ithoxykarUony 1-2-methylbutanové kyseliny místo monoethylmethylmalonátu a L-pipekolové kyseliny místo hydroxyprclinu se způsobem popsaným v příkladu 33 a pak způsobem popsaným v příkladu 34 získá l-(4-metthoxykarbonyl-2-methylbutanoylJ-L-pipekďová kyselina a popřípadě 1- (4-.k arboxy-2-теП1у 11d Lua inoy 1) -L-pipekolová kyselina.

Příklad 43 :

b-(3-karboxyprO'panoyl) -L-prolin

Anhydrid kyseliny jantarové (67 mmol,

6,7 · g] se rozpustí ve 100 ml horké ledové kyseliny octové a ochladí · se na teplotu místnosti. Do •tohoto roztoku se za míchání přidá (67 mmol, 7,7 g) L-prolinu. Ponechá se 20 hodin při teplotě místnosti a reakční směs se odpaří ve vakuu. Zbytek se třikrát extrahuje horkým ethylacetátem a ochladí se 'na teplotu místnosti. Do spojených extraktů, obsahujících b-(3-karboxypropanoyl)-L-prolin, se přidá dicyklohexylamin a krystaly se překrystalují z horkého isopropariolu; výtěžek je 11,3 g. Dicyklohexylaminová sůl · má teplotu tání (170) 175 až 177 °C.

Příklad 44

1- (3-L-karboxyb utanoyl) -L-prolin

Anhydrid itakonové kyseliny (154 mmol) se rozpustí ve 103 ml ledové kyseliny octové, rychle se ochladí v ledové lázni a míchá se. Do· směsi se přidá L-prolin (17,7 g) rozpuštěný ve 110 ml ledové kyseliny octové. Po· pěti minutách se ledová lázeň odstraní a reakční směs se ponechá tři dny při teplotě místnosti. Surová reakční směs se vyjme do jednoho litru acetonitrilu a nerozpustný podlí se odfiltruje. Filtrát se odpaří k suchu ve ‘vakuu. Asi 26 g zbytku, což je l-(3-karboxy-3-methylenpropanoyl)-L-prolin, se překrystaluje z vody; výtěžek je 15,3 g, teplota tání (82) je 84 až · 85 °C, po sušení po dobu čtyř· hodin při teplotě 50 °C je bod tání 125 až 127 °C.

1- (3-k arboxy - -3--^^ le npro p anoy l) -L-prolln (3 g) se rozpustí v 50 ml 95% ethanolu a přidá se 300 mg 20·% paládia na uhlí.

Suspenze se míchá za pozitivního tlaku vodíku po dobu 18 hodin. Katalyzátor se odfiltruje (Hyflo) a filtrát se odpaří ve vakuu do· sucha. Surový produkt se vyjme do vody a lyofilizuje se, Ly-ofilát (DL) (3 g) se vyjme do 15 ml acetonitrilu a přidají se dva ekvivalenty · dicyklohexylaminu. Sprový krystalický produkt se překrystaluje z 60 ml isopropanolu, výtěžek je 3,17 g, teplota tání (183) 187 až 189 °C.

Dicyklohexylaminová sůl l-(^-L-kaťboxybu.tanoyl) -L-prolinu (3 · g) se zpracovává ionexem Dowex 50 ve vodě k izolaci volného 1- (3-L~karboxybutanoyl)-L-prolinu, který se lyofilizuje a lyofilát se překrystaluje ze systému acetonitril—eťher. Výtěžek je 691 mg, teplota tání (122) 124 až 125 °C.

Příklad 45 ·· (3-D-karboxybutanoyl. ] -L-prolin

Matečný louh z krystalizace dicyklohexylaminové soli podle příkladu 44 (isopropanol) se odpaří k suchu a překrystaluje se· z acetonitrilu; výtěžek je 3,2 g, teplota tání (155) 160 až 165°C. · Sůl (3 g) se rozpustí v 15 ml vody a přidá se 15 ml ionexu Dowex 50· k nastavení hodnoty pH pod 7. Vnese se na 20 ml sloupec téže ionexové pryskyřice promyté vodou. Produkt · se eluuje vodou a · frakce, které jsou pozitivní na karboxylové reagens, se lyofilizují. Výtěžek je 1,08 g l-(3-D-karboxybutanoy])-L-prolinu.

Příklad 46

1- (3-karUoxy---bunzylbropanoyl) -L-^j^rolin

Anhydrid benzylidenjantarové kyseliny (1,88 g) se suspenduje v 20 ml bezvodého pyridinu. Přidá se L-prolin (1,15 g) v páře po dobu dvou a půl hod. Bezprostředně barva ztmavne. Po ochlazení na teplotu místnosti se nerozpustná sraženina odfiltruje (teplota tání 232 až 233 °C) a filtrát se odpaří k suchu ve vakuu. Zytek se extrahuje etherem a ether se odďekantuje. Zbytek se vyjme do ethylacetátu a promyje se 5% roztokem kyse^ho-síranu draselného· a vodou. Ethylacetátové extrakty se zfiltrují a odpaří se k suchu ve vakuu. Surový produkt, l-(3-karboxy-3--uui zy lldd пр ro χο ап оу 1) -L-prolin, se trlturuje s etherem a po 48 hodinách se získá 2,0 g produktu o· teplotě tání 132 až 135 ^QC.

Surový materiál (1,9 g) se vyjme do 30 ml 95% ethanolu a přidá se 200 mg 10% paládia na uhlí. Míchá se pod pozitivním tlakem vodíku po- dobu 18 hodin. Reakční směs se filtruje přes Hyflo a filtrát se odpaří k suchu · ve vakuu, výtěžek je 1,9 g. Produkt se pročistí na diethylaminoethyl Sefadexovém sloupci kyselým uhličitanem amonným. Získá se 1,4 g. Amoniová sůl se převede na volnou kyselinu l-(3-karboxy-3-Uenzylpropanoyl)-L-prolin vnesením na sloupec ionexu Dowex 50 s · vodným methanolem (8 : :2). Výtěžek je 1,3 g. Vnese se na sloupec ♦

silikagelu (70 až 230 mesh) v chloroformu (60), methanolu (40) a 38% kyselině octové (20), eluuje se stejným systémem a lyofilizuje se. Výtěžek je 1,1 g.

Příklad 47

1- (4-karboxy-3-methylbu tanoyl) -L-prolin (isomer A)

Anhydrid 3-mcthygíutarové kyseliny · (1,28 gramu) a L-prolin terc.butylester (1,88 g) se míchají v 5 ml suchého tetrahydrofuranu v ledové lázni po dobu 5 minut. Lázeň se odstraní a reakce pokračuje při teplotě místnosti po dobu tří hodin. Bezprostředně se vytvoří krystalická sraženina. Přidá se ether (10 ml) a krystaly se Odfiltrují, 'výtěžek. je 1,45 g, teplota tání 168 až 170 °C.

Terc.butylester l-(4-karboxy-3-methylpropanoyl)-L-prolinu takto· připravený se rozpustí v 10 ml trifluoroctové 'kyseliny a ponechá se po dobu jedné · hodiny při teplotě místnosti, odpaří se k suchu, vyjme se do vody a lyofilizuje se. Lyofilizát se vyjme do 10 ml vody a vnese se na 55 ml ionexu Dowex 50 a eluuje se vodou. Frakce pozitivní na karboxylové reagens, které nedávají zabarvení typické pro trifluoroctovou kyselinu, se shromažďují a lyofilizují se. Výtěžek je 1,03 g l-(4-karboxy-3-methylbutanoyl)-L-prolinu. Dicyklohexylaminová sůl, připravená způsobem podle příkladu 22, má teplotu tání 170 až 172 °C.

Příklad 48

1- (4karboxy-3-methylbutanoyl ] -L-prolin (isomer B)

Anhydrid 3-methylglutar-ové kyseliny (1,28 gramu) a terc.butylester Lprolinu (1,88 g) v 5 ml suchého tetrahydrofuranu se míchá v ledové lázni po dobu 5 minut. Lázeň se odstraní. Po- třech hodinách se přidá 10 ml etheru. Odfiltruje se krystalická sraženina — terc.butylester l-(4-karboxy-3-methylbutanoyl)-L-prolinu (isomer A] a filtrát se odpaří k suchu ve vakuu. Dicyklohexylaminová sůl se připraví v isoproyletheru 1,4 g (teplota tání 97 až 98 “Cj.Tato sůl se převede na volnou kyselinu rozdělením· mezi ethylacetát a 5% roztok kyselého síranu draselného, výtěžek je 922 mg.

Uvedený ester se vyjme do- 10 ml · trifluoroctové kyseliny a ponechá se po dobu jedné hodiny při teplotě místnosti. Pak se odpaří k suchu ve vakuu, vyjme se do vody a lyofilizuje se. Lyofilát se vyjme do 10 ml vody a 'vne.se se na 54 ml pryskyřice Dowex 50 a eluuje se vodou. Frakce pozitivní na karboxylové reagens, které nedávají typickou barvu pro· trifluoroctovou kyselinu, se shromažďují a lyofilizují, čímž se získá 1- (4--kaaboxx-3-methylbutanool) - L-prolin (isomer B) ve výtěžku 640 mg. Dicyklohexylaminová sůl se připraví způsobem po psaným v příkladu 22, má teplotu tání 189 až 191 °C.

P ř í k 1 a d '' 49 l··(4-anrboxy-4-methbl0utanobl)-L-rrolin

a) 2-methyl-4-benzyloxykarbonylmáselná kyselina

2-methylglutarová kyselina (14,61 g) se zahřívá v páře po dobu jedné ' hodiny s 26 ml acetylchloridu, pak se odpaří k suchu ve vakuu a toluen se odstraní dvakrát ve vakuu. Do uvedené krystalické pevné látky se přidá 12,5 ml · benzylalkoholu a zahřívá se po dobu jedné hodiny v páře. · Surová 2-methyl-4-benzyloxykarbonylmáselná kyselina v množství 26,5 g se vnese · na silikagelový sloupec v chloroformu a eluuje se · chloroformem. Dicyklohexblammová sůl se ' připraví způsobem popsaným v příkladu 22 ve výtěžku 18 g; má teplotu tání · 84 až 85 °C. Převede se na 10,2 g volné · kyseliny v ethylacetát u a v · 5% kyselém ' з1'ьпо11 draselném.

o ) 4-me^ιthy^4-methoxykaгbooylIeáзelná kyselina

Benzylester podle odstavce a) (10,2 g) se vyjme do 20 ml methanolu a zpracuje · se nadbytkem etherového dlazomethanolu po dobu jedné hodiny · při teplotě místnosti. Odpaří se k suchu ve vakuu.

Tento· methylester (10,7 g] se rozpustí ve 150 ml 95'% ethanolu a redukuje se pod pozitivním tlakem vodíku v přítomnosti 1 g 10% paládia na uhlí po dobu 18 hodin. Zfiltruje se přes Hyflo, filtrát se odpaří k suchu ve vakuu, čímž se ' získá 6,9 g 4-methbl-4-methoxykarbonylmáselná kyselina.

c) 1- (4-karbo.xy-4-methylbutanoyl) -L-prolin

Produkt redukce podle odstavce b) (6,8 g) a terc.0utyletteb L-prolinu (8,0 g) ' se rozpustí ve 85 ml methbleochloridu a míchá se na ledové lázni. Do směsi se přidá 8,8 g dicyklohexylknrOodilmidu. Po 15 minutách se lázeň odstraní a reakce pokračuje přes noc při teplotě místnosti. Dicyklo-hexylmočovina se ' odfiltruje a filtrát se odpaří k suchu · ve vakuu. Terc.butylester · l-(4-karboxy-4-methylOutaooyl)-L-rrolinu · se vyjme do ethylacetátu a promyje se 5% roztokem kyselého síranu sodného, vodou, nasyceným roztokem kyselého uhličitanu ' sodného, vodou, vysuší se síranem horečnatým ' a odpaří se k suchu · ve vakuu, výtěžek je 14,0 g.

Terc.butylester takto připravený (14,0 g) se zpracovává po· dobu jedné hodiny 75 ml trifluoroctové kyseliny a odpaří se ve vakuu k suchu. Odpaření se provede dvakrát se systémem ether-hexan k odstranění nadbytku trifluoroctové kyseliny. Surový produkt se extrahuje · do 150 ml nasyceného roztoku kyselého uhličitanu sodného- a 250 ml ethylacetátu. Extrakty .se znovu promyjí nasyceným· roztokem kyselého uhličitanu •.sodného. Vodná frakce se okyselí na hodnotu pH 2 koncentrovanou chlorovodíkovou kyselinou, nasytí se chloridem sodným, extrahuje se čtyřikrát ethylacetátem, promyje se jednou nasyceným roztokem chloridu sodného, vysuší se síranem hořečnatým a odpaří se k suchu ve vakuu. Dicyklohexylaminová sůl se připraví v etheru a překrystaluje se z ethylacetátu. Výtěžek je

9,3 g, teplota tání (120] 132 až 133 °C. Tato sůl se převede na volnou kyselinu, na l-(4-karbOxy-3-methylbutanoyl)-L-prolin.

Dicyklohexylaminová sůl (8,7 g) se rozpustí v 60 ml methanolu a 60 ml hydroxidu sodného se přidá za míchání. Do směsi se přiďá 100 ml Dow-exu 50· k úpravě hodnoty pH na kyselou reakci. Vnese se na 300 ml sloupec Dowe.xu 50 a eluuje se vodou. Shromažďují se frakce, které jsou pozitivní na karboxylové reagens a Jyo-filizují se, čímž se získá 4,78 g b-(4-karboxy-4-metУylbutanoyl)-L-prolinu.

P ř í k 1 a d 50 1- (3-mellioxy к a rbony 1-2-nm einy 1р ro pa поу 1) L-prolinamid

1- (3-metУoxykarbonyl.-3-methy ^ropano·yl)-L-přolin (2,4 g) · se rozpustí ve směsi dichlormethanu· (50 ml) a lřietУylaminu.

(1,4 ml). Roztok se rychle ochladí v lázni ledu a vody a přidá se isobutylcУloroformát (1,36 g) za stálého · míchání směsi. Po 10 minutách se roztokem probublává amoniak (plynný) po· dobu 15 minut, stále v ledové lázni. Reakční směs se míchá po dobu jedné hodiny při teplotě místnosti, zředí se methylenchloridem (100 ml) a promyje se vodou, 0,lN roztokem chlorovodíkové kyseliny, vodou a vysuší še síranem hořečnatým. Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu, čímž se získá b-(3-methoyykarbonyl-2-metУylrropanoyl )-L-prolinamid.

Příklad 51

1- (3-k arbox у-2 nne Шу 1p i⁴ o,p a n-oyl) -L-prolin

1- (3-me i 'ho xy к a rb on у 1) -2-methylpropanoyl)-L-přolinamid (1,2 g) se rozpustí ve směsi methanolu (10 ml) a N roztoku hydroxidu sodného (15 ml). Směs se míchá při teplotě místnosti a zkouší se elektroforézou každou hodinu, dokud nezmizí výchozí ester. Roztok se neutralizuje normální chlorovodíkovou kyselinou a odpaří se ve vakuu na polovinu objemu. Tento roztok se vnese na sloupec ionexové pryskyřice Dowex 50 a eluuje se vodou. Frakce, která je pozitivní na karboxylové reagens, se shro máždí a suší se vymrazováním, čímž se získá 1- (3-k aгboxy-2-methy Ipi· op a nol) -L-prolin. ·.

Příklad 52

1- (3-karbox.y-3-methyiprop anoyl) -4-methyl-L-prolin , Použitím' · 3 methooyУarbonyl-2-methylpropanové kyseliny místo monoethylmethylmalonátu a 4-melУyl-L -prolinu· místo· hydroxyprolinu· při způsobu popsaném v příkladu 33 a pak pokračováním způsobem popsaným v příkladu 34 se získá l-tS-metlioxykarbonyl-2-methylproranoyl)-4-methyl-L-prolin a popřípadě b-(3-karboxy-2-melhylrroranoyl) -4-methyl-L-pr olin.

Příklad 53 b-(3-karboxy2-metУylrřoranoyl )-5-УyJroxy-L-pirekolová kyselina

Použitím 3-eиtthoyykařbonyl-2-Im^thylrropanové kyseliny místo monoethylmethylmalonátu a 5-hydroxy-L-pipekolová kyseliny místo hydřoxyprolinu při způsobu popsaném v příkladu 33 a pokračováním způsobem popsaným v příkladu 34 se získá l.-(3-metho'xykarbonyl-2-methylpropanoyl)-5-hydroyy-L-pipekolová kyselina a popřípadě l-(3-karboxy-2-mathylpropanoyl)-5-hydroxy-L-pipekolová kyselina.

P ř í k 1 a d 54 .

1- (4-karboxy-2-methy1butanoy-) ^-methyl-L-prolin

Použitím 4-methoxykarbonyl-2-methylbutanové kyseliny místo monoelУylmethylmalonátu a 4-metУyl-L··proΊinu místo hydroxyprolinu při· způsobu podle příkladu 33 . a pokračováním způsobem popsaným v · příkladu 34 se získá b-(4-melhoxykaгbonyl-2-methylbutanoyl )-4-methyl-L-prolin a popřípadě 1- (4-karboxy-2-methy1bιUanoy1) -4-methyl-L-prolin.

P ř í k 1 a d 55

1- (4-kařboxy-2-methy1butanoy1) -5-hydroxy-L-pipekolová kyselina

Použitím 4-metУoy.ykařbonyl-2-methylbutanové kyseliny místo monoethylmethylmalonátu a 5-Уydroyy-L-pipekolové kyseliny místo· hydroyyrrolinu při způsobu popsaném v příkladu 33 a pokračováním· způsobem popsaným v příkladu 34 se získá l-(4-methoxykarbonyl-2-methy1butanoyl)-5-hydroxy-L-pipekolová kyselina a popřípadě 1- (4-к arbox у č-me Шу to íua по у i ) -5-hydroxy-L-pipekolová kyselina.

Příklad 56

1- (4-me tho-xykarbonyl-2-methylbu'tanoyl ] -L-prohnamid

Použitím 1- (4-methoxykarbonyl-2-methylbutanoyl)-L-prolinu podle příkladu 24 místo 1- (S-methoxykarbonyl^-meťhylpropanoyl)-L-prolinu při způsobu popsaném v příkladu · 50 se získá l-fYmethoxykarbonyl^-methylbutanoyi) -L-prolinamid.

Racemické · formy konečných produktů podle každého v předešlých příkladů se připraví použitím DL-formy výchozí aminokyseliny ' místo L-formy,

Podobně konečný produkt v D-formě podle ' každého z předešlých příkladů se připraví použitím D-formy výchozí aminokyseliny místo L-formy.

Příklad 57

1000 tablet, z nichž každá obsahuje 100 mg 1- (4-karboxy-2-methylbutanoy 1) -L-prolinu se připraví z těchto· složek:

1- (4-karbo-.xy-2-methy lbutanoy!} -L-prolin 100?0g kukuřičný škrob 50,0g želatina 7,5g

Avicel (mikrokrystalická celulóza j 25,0g stearát hořečnatý 2,5g

1- (4-karbO'Xy-2-methylbutanoyi ] -L-prolin a kukuřičný škrob se smíchají s vodným roztokem· želatiny. Směs se usuší a rozetře na jemný prášek. · Přimísí se Avicel a stearát horečnatý a granuluje se. Na tabletovém lisu se vylisuje 1000 tablet, z nichž každá obsahuje 100 mg aktivní složky.

Příklad 58

1000 tablet, z nichž každá obsahuje 200 mg 1- (3-karboxý-2-methylpropanoýl ) -L-pr· olinu, se připraví z těchto složek:

1- (3-karboxy-2-II]ethylpropanoyl ] -L-prolin200 g laktosa ? · · - 100 ’ · g

Avicel ? ; - ^; 1550 g kukuřičný škrob50 g stearát horečnatý5 g

1- (3-karboxy-2-methy lpropanoyl ) -prolin, laktosa a Avicel se · smísí a promíchají se s kukuřičným škrobem. Přidá se · stearát horečnatý. Suchá směs· se lisuje na tabletovacím· lisu na · 10:30 tablet o · váze ' 505· mg, z nichž každá obsahuje · 200 mg aktivní · látky. Tab-etý se povléknou roztokem Methocelu E-15 (meťl^^]^<^^^iuló:^íaj, obsahujícím jako barvivo lak obsahující žluť 6.

Příklad 59

Dva kusy želatinových kapslí, z nichž každá obsahuje 250 mg l-(4-karboxy-2-methý<.butanoýl]-L-prolinu, se plní směsí uvedených složek:

1- (4-karboxý-2-methylbutanoýl )-L-^j^rolin- 250mg stearát horečnatý 7mg

USP laktosa 193mg

Příklad 60

Injekční roztok se připravuje následujícím způsobem:

l-(4-karboxybutanoýl)-L-prolin	5.50
methylp.arabtn	' 5
propylparaben	1
chlorid sodný	25
voda pro injektování qs.	6
Aktivní · složky, konzervační	přísady

chlorid sodný se · rozpustí ve třech litrech vody pro injektování a objem se upraví na 5 litrů. Roztok se filtruje sterilním· · filtrem a asepticky se plní do předsterilizovaných lékoveik, které se pak uzavřou předsterilizovanými kaučukovými uzávěry. Každá lékovka obsahuje 5 ml roztoku o· koncentraci 100 mg aktivní složky na ml roztoku pro injektování.

Claims

1. Způsob přípravy karboxyalkýlacylaminokýstlln obecného vzorce 1,

Rs • I

R4 Ri HžC— (CH)_m

RsDC—(CH)_n—CH—CO—N—CH—COR (1), skupinu s 1 · až 4 atomy uhlíku nebo · fenylalkylovou skupinu s · 1 · az^ 4 atomy uhlíku v alkylovém podílu,

Rž hydroxyskupinu, aminoskupinu, hydrokde znamená

R hydroxyskupinu, aminoskupinu nebo alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku,

Ri a Rá každý atom vodíku, alkylovou xyaminoskupinu nebo alkoxyskupinu s 1 až

4 atomy uhlíku,

R3 atom vodíku, hydroxyskupinu nebo alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, m 1, 2 nebo 3, η 0, 1 nebo 2, a jejich solí, vyznačený tím, že se acyluje sloučenina obecného vzorce 3,

Rs

I

H₂C-(CH)_m

I I

HN— CH—COR (3) kde R, R3 a m mají shora uvedený význam, kyselinou obecného vzorce 4,

Rd Rl '1 I

RzOC— (CH), —CH—COOH (4) kde Ri, Rz, Rd a n mají shora uvedený význam, nebo jejím chemickým ekvivalentem.

2. Způsob podle bodu 1, vyznačený tím, že se sloučenina obecného vzorce 3, kde R, R3, m mají význam uvedený v bodě 1, nechává reagovat se sloučeninou obecného vzorce 4a,

O Ri Ri

II I I

X—O—C—(CH),—CH—COOH , (4 a) kde znamená X alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku a ostatní symboly mají význam uvedený v bodě 1.

3. Způsob podle bodu 1, vyznačený tím, že se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce 3, kde R znamená hydroxyskupinu nebo alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, R3 atom vodíku a m číslo 2, se sloučeninou obecného vzorce 4, kde znamená Ri atom vodíku nebo alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, Ri hydroxyskupinu, Rd atom vodíku a n číslo 1 nebo 2.

4. Způsob podle bodu 1, vyznačený tím, že se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce 3, kde Rs znamená atom vodíku, R a m mají význam uvedený v bodě 1, se sloučeninou obecného vzorce 4, kde znamená Rd atom vodíku a Ri, Rz a n mají význam uvedený v bodě 1.

5. Způsob podle bodu 1, vyznačený tím, že se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce 3, kde R3 znamená atom vodíku a R, m mají význam uvedený v bodě 1, se sloučeninou obecného vzorce 4, kde Ri, Rz, Rd a n mají význam uvedený v bodě 1.

6. Způsob podle bodu 1, pro přípravu sloučenin obecného vzorce 2,

Rd‘ Ri /\

RzOC—(CH)_n—CH—CO—N COR‘ , (2), kde znamená

R‘ hydroxyskupinu nebo alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku,

Ri, Rz má význam uvedený v bodě 1,

Rd¹ atom vodíku nebo alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, n‘ 1 nebo 2, a jejich fyziologicky vhodných solí, vyzna čený tím, že se sloučenina obecného vzorce 13, /\

HN COR‘ (13) kde R‘ má shora uvedený význam, nechá reagovat se sloučeninou obecného vzorce 4‘,

Rd‘ Ri

I I

RzOC—(CH)_n —CH—COOH (4‘) kde Ri, R2, Rd‘ a n‘ mají shora uvedený význam.

7. Způsob podle bodu 6, vyznačený tím, že se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce 13, kde R‘ znamená hydroxyskupinu, se sloučeninou obecného vzorce 4‘, kde Ri, Rz a Rd‘, n‘ mají význam uvedený v bodě 6.

8. Způsob podle bodu 6, vyznačený tím, že se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce 13, kde R‘ má význam uvedený v bodě 6, se sloučeninou obecného vzorce 4‘, kde n znamená 1 a Ri, R2 a Rd‘ mají význam uvedený v bodě 6.

9. Způsob podle bodu 6, vyznačený tím, že se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce 13, kde R‘ má význam uvedený v bodě 6, se sloučeninou obecného vzorce 4‘, kde n znamená 2 a Ri, Rz a R? mají význam uvedený v bodě 6.

10. Způsob podle bodu 6, vyznačený tím, že se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce 13, kde R‘ má význam uvedený v bodě 6, se sloučeninou obecného vzorce 4‘, kde znamená R2 hydroxyskupinu a n‘, Ri a Rd‘ mají význam uvedený v bodě 6.

11. Způsob podle bodu 6, vyznačený tím, že se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce 13, kde R‘ má význam ^uvedený v bodě 6, se sloučeninou obecného vzorce 4\ kde R2 znamená hydroxyaminoskupinu a n‘, Ri, Rá‘ mají význam uvedený v bodě 6.

12. Způsob podle bodu 6, vyznačený tím, že se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce 13, kde R‘ má význam uvedený v bodě 6, se sloučeninou obecného vzorce 4‘, kde znamená Rz alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku a n‘, R a R? mají význam uvedený v bodě 6.

13. Způsob podle bodu 6, vyznačený tím, že se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce 13, kde R‘ má význam uvedený v bodu 6, se sloučeninou obecného vzorce 4‘, kde znamená Rá‘ methylovou skupinu a n‘, Ri a Rz mají význam uvedený v bodě 6.

14. Způsob podle bodu 6, vyznačený tím, že se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce 13, kde R‘ má význam uvedený v bodě 6, se sloučeninou obecného vzorce 4‘, kde znamená Rď atom vodíku a n‘, Ri a R2 mají význam uvedený v bodě 6.

15. Způsob podle bodu 6, vyznačený tím, že se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce 13, kde R‘ má význam uvedený v bodě 6, se sloučeninou obecného vzorce 4‘, kde znamená Ri atom vodíku nebo methylovou skupinu a n‘, R2 a mají význam uvedený v bodě 6.

16. Způsob podle bodu 6, vyznačený tím, že se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce 13, kde znamená R‘ hydroxyskupinu, se sloučeninou obecného vzorce 4‘, kde znamená Ri atom vodíku nebo methylovou skupinu a n‘, Rz a Ri‘ mají význam uvedený v bodě 6.

17. Způsob podle bodu 6, vyznačený tím, že se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce 13, kde znamená R‘ hydroxyskupinu, se sloučeninou obecného vzorce 4‘, kde znamená Rz hydroxyskupinu, Ri a Ri‘ každý atom vodíku nebo methylovou skupinu a n číslo 1 nebo 2.

18. Způsob podle bodu 6, vyznačený tím, že se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce 13, kde R‘ znamená hydroxyskupinu, se sloučeninou obecného vzorce 4‘, kde znamená Rz hydroxyskupinu, Ri a R? každý atom vodíku a n‘ číslo 2.

19. Způsob podle bodu 6, vyznačený tím, že se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce 13, kde R‘ znamená hydroxyskupinu, se sloučeninou obecného vzorce 4‘, kde znamená Rz hydroxyskupinu, Ri methylovou skupinu, R? atom vodíku a n‘ číslo 1.

20. Způsob podle bodu 6, vyznačený tím, že se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce 13, kde R‘ znamená hydroxyskupinu, se sloučeninou obecného vzorce 4‘, kde znamená Rž hydroxyskupinu, Ri methylovou skupinu, R? atom vodíku a n‘ číslo 2.

21. Způsob podle bodu 6, vyznačený tím, že se nechá reagovat prolin v L-formě.

22. Způsob podle bodu 18, vyznačený tím, že se nechá reagovat prolin v L-formě.

23. Způsob podle bodu 19, vyznačený tím, že se nechá reagovat prolin v L-formě.

24. Způsob podle bodu 20, vyznačený tím, že se nechá reagovat prolin v L-formě.