CN102784182A - 红参多糖提取物的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种红参多糖提取物的制备方法，包括如下步骤：(1)取红参或经过70％--100％乙醇溶液提取后的红参药渣，加入溶剂进行提取，得提取液；提取液浓缩，得浓缩液；(2)浓缩液加入75-100％乙醇溶液至适量进行醇沉，得沉淀；(3)沉淀干燥，得红参多糖提取物。

Description

红参多糖提取物的制备方法

技术领域

本发明属于中药提取物的制备方法，具体地说，涉及红参多糖提取物的制备方法。

背景技术

红参为五加科植物人参Panax ginseng经蒸制后的干燥根。作为名贵传统滋补中药，具有大补元气，复脉固脱，补脾益肺，生津、安神等功效。临床上红参常用于体虚欲脱，肢冷脉微，脾虚食少，肺虚喘咳，津伤口渴，内热消渴，久病虚赢，惊悸失眠，阳痿宫寒；心力衰竭，心源性休克。红参多糖是红参的主要活性成分之一，具有增强免疫系统功能、免疫抗肿瘤和辅助抗肿瘤、降血糖及调控血细胞生成的作用。目前，红参多糖提取物的制备通常是以红参为直接原料，水提醇沉，原料成本较高，且中性多糖、酸性多糖含量低。我公司生产中产生的红参药渣废料是红参经过乙醇溶液提取后的药渣，尚含有大量的多糖成分，因而可利用该部分资源进一步开发较高含量的红参多糖提取物具有重要的意义。

发明内容

本发明提供一种从红参或红参醇提后药渣中制备红参多糖提取物的方法，红参或红参采用乙醇溶液提取后产生的红参药渣，加入溶剂进行提取，浓缩，醇沉，干燥，粉碎等工艺过程得到红参多糖提取物，提取物中中性多糖含量高于50％，酸性多糖含量高于8％，红参多糖提取物得率达到30％以上。

本发明通过下述技术方案予以实施。

本发明的红参多糖提取物的制备方法，按顺序包括如下步骤：

(1)取红参或经过70％--100％乙醇溶液提取后的红参药渣，加入溶剂进行提取，得提取液；提取液浓缩得浓缩液；

(2)浓缩液加入75-100％乙醇溶液至适量进行醇沉，得沉淀；

(3)沉淀干燥、粉碎，得红参多糖提取物。

其中，步骤(1)中所述70％--100％乙醇溶液提取后的红参药渣为1-3次乙醇提取后的药渣，如：以下方法得到的药渣：

取红参加70-100％乙醇溶液提取1-3次，每次加醇量为2-8倍；提取后得到红参药渣。

步骤(1)的溶剂选自：水或0-40％含醇量的低浓度乙醇溶液，用量为1-50倍原料量；

步骤(2)的高浓度乙醇溶液选自：75-100％乙醇溶液。

步骤(1)所述的红参选自红参湿品或干品的整根、切制的饮片或者粉碎的颗粒或粉末；红参药渣是湿品或红参干品的整根、切制的饮片或者粉碎的颗粒或粉末经过70％-100％乙醇溶液提取后产生的红参药渣。

步骤(1)所述的红参或红参药渣可直接进行提取或干燥后进行提取。

步骤(1)和(3)中所述的干燥方式选自常压干燥、减压干燥、流化干燥、冷冻干燥、微波干燥、远红外干燥、超临界干燥或折射窗干燥。

步骤(1)所述的提取方式选自煎煮法、浸渍法、渗滤法、超临界流体提取法、加压提取法、亚临界水提取法、破碎提取法、酶法辅助提取、半仿生提取法、超声提取法、微波提取法或动态逆流提取法。

步骤(1)所述的浓缩方式选自常压浓缩、减压浓缩或膜浓缩。

步骤(1)所述的中的浓缩液的量控制在浓缩液的体积∶药材或药渣的重量＝1∶0.05-10或浓缩液的比重为1.01-1.40。

步骤(2)所述的浓缩液加入75-100％乙醇溶液适量至溶液中含醇量为55％-90％。

步骤(2)的沉淀采用固液分离方式分离，分离方式选自管式离心、碟式离心、膜过滤、线隙过滤、板框过滤、滤布过滤、纸浆板过滤、滤纸过滤或直接移取上清液。

优选的制备方法如下：

(1)取红参或经过70％--100％乙醇溶液提取后的红参药渣，加入水进行提取，得提取液；提取液浓缩，得浓缩液；

(2)浓缩液加入75-100％乙醇溶液适量进行醇沉，得沉淀；

(3)沉淀干燥、粉碎得红参多糖提取物。

更优选的制备方法如下：

(1)取红参或经过80％--100％乙醇溶液提取后的红参药渣，加入2-30倍量的水提取1-3次，合并提取液；提取液浓缩，得浓缩液；

(2)浓缩液加入95％的乙醇进行醇沉，醇沉液含醇量为60-80％，得沉淀；

(3)沉淀干燥、粉碎得红参多糖提取物。

最优选的方法：

1、提取：取经过85％--95％乙醇溶液提取后的红参药渣为原料加水提取3次，加水量为4，3，2倍原料量；沸腾提取1.5、1.5、1小时。提取液过滤，合并后备用；提取后药渣弃去。

2、浓缩：将提取液减压浓缩至体积与原料量比为1∶1，浓缩液备用。

3、醇沉：将95％浓度的乙醇搅拌加入浓缩液中，控制混合溶液中乙醇含量65％-69％，静置12小时以上。

4、固液分离：将醇沉液进行固液分离，沉淀备用，上清液弃去。

5、干燥：将沉淀减压干燥。

6、粉碎：将干燥物粉碎，过100目筛，即得红参多糖提取物。

本发明红参多糖提取物中性多糖含量测定方法：

对照品溶液取10mgD-无水葡萄糖用蒸馏水定容于50ml容量瓶中，摇匀。分别取0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2ml至10ml具塞试管中，分别加水使至2ml。

供试品溶液  精密称取原料20mg用蒸馏水定容至100ml，摇匀静置。移取1ml上清液至10ml具塞试管中，加蒸馏水1ml。

蒽酮-硫酸试液  取95-98％硫酸80ml，加入到20ml水中，先配制成80％硫酸溶液，然后将0.1g蒽酮加入到80％硫酸中即可，溶液呈草绿色。

分别向以上对照品和供试品溶液中加入8ml蒽酮-硫酸试液，并迅速在沸水浴中加热10min，冷却至室温。作为供试品溶液，于625nm处测定吸光度。

酸性多糖含量测定方法：

对照品溶液  精密称取D-半乳糖醛酸对照品10mg，用蒸馏水定容至100ml。分别移取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0ml至10ml容量瓶中，定容。

供试品溶液  精密称取原料20mg，用蒸馏水定容至100ml。

硫酸-四硼酸钠溶液  取476.3mg四硼酸钠溶于100ml浓硫酸中即可。

间羟联苯显色剂配置方法  取15mg间羟联苯，用0.5％NaOH溶解定容至10ml，即得。取以上对照品和供试品上清液各1ml，加入10ml具塞试管中，冰水浴预冷10min后，加入硫酸-四硼酸钠溶液6ml，摇匀后放入沸水浴中煮沸5min，冰浴至室温，加入间羟联苯显色剂0.2ml，充分振摇，显色20min后，于520nm处测定吸光度。

用本发明方法制备的红参多糖提取物中性多糖含量高于50％，酸性多糖含量高于8％，提取物得率达到30％以上。

本发明所制备的红参多糖提取物可单独或者与其他活性成分合用制备成适合服用的药物组合物，如与任何一种或一种以上药剂学上辅料如淀粉、糊精、乳糖、微晶纤维素、羟丙甲基纤维素、聚乙二醇、硬脂酸镁、微粉硅胶、木糖醇、乳糖醇、葡萄糖、甘氨酸、甘露醇、甘氨酸、羟丙基-β-环糊精等混合制成的各种药物剂型，例如，可制成注射剂、片剂、缓释片、滴丸、颗粒剂、粉针剂、胶囊剂、微粒剂。

本发明的红参多糖提取物具有以下医药用途：

红参多糖是红参的主要活性成分之一，具有增强免疫系统功能、免疫抗肿瘤和辅助抗肿瘤、降血糖及调控血细胞生成的作用。在临床上可用于治疗肺癌、卵巢癌、鼻咽癌、消化道肿瘤等疾病，具有很好的研究前景。

与现有技术相比，本发明的红参多糖提取物提取方法的提取得率高，中性多糖及酸性多糖含量高，可保持更高的生理活性。

具体实施方式

参考下列实施例将更易于理解本发明，给出实施例是为了阐明本发明，而不是为了限制本发明的范围。

实施例1

取红参加95％乙醇溶液提取三次，每次加醇量为8倍；红参药渣烘干；干药渣加水煮沸提取三次，第一次为药材量的4倍水量，第二次为药材量的3倍水量，第三次为药材量的2倍水量；煎煮提取，沸后分别保持1.5、1.5、1小时；药液合并减压浓缩至V_{浓 缩液}∶M_{药材或药渣}＝1∶3.5，过滤，滤液加95％乙醇使含醇量为70％，静置12小时以上；醇沉液采用滤布抽滤，分离出沉淀，将沉淀减压干燥，粉碎，过筛，得红参多糖提取物。(中性多糖含量57.3％，酸性多糖含量11.7％，得率36.1％)

实施例2

取红参加80％乙醇溶液提取三次，每次加醇量为8倍；红参药渣烘干；干药渣加10％乙醇溶液煮沸提取三次，第一次为药材量的8倍量，第二次为药材量的8倍量，第三次为药材量的6倍量；煎煮提取，沸后分别保持1.5、1.5、1小时；药液合并减压浓缩至比重1.28(63℃)，过滤，滤液加95％乙醇使含醇量为69％，静置12小时以上；醇沉液采用滤布抽滤，分离出沉淀，将沉淀减压干燥，粉碎，过筛，得红参多糖提取物。(中性多糖含量55.1％，酸性多糖含量8.9％，得率34.2％)

实施例3

取红参加95％乙醇溶液提取两次，每次加醇量为8倍；红参药渣烘干；干药渣加水煮沸提取三次，第一次为药材量的4倍水量，第二次为药材量的3倍水量，第三次为药材量的2倍水量；煎煮提取，沸后分别保持1.5、1.5、1小时；药液合并减压浓缩至比重1.30(65℃)，过滤，滤液加95％乙醇使含醇量为80％，静置12小时以上；醇沉液采用滤布抽滤，分离出沉淀，将沉淀减压干燥，粉碎，过筛，得红参多糖提取物。(中性多糖含量64.3％，酸性多糖含量15.3％，得率32.8％)

实施例4

取红参加70％乙醇溶液提取2次，每次加醇量为8倍；红参药渣烘干；干药渣加水煮沸提取2次，第一次为药材量的8倍水量，第二次为药材量的8倍水量；煎煮提取，沸后分别保持1.5、1.5小时；药液合并减压浓缩至V_浓缩液∶M_{药材或药渣}＝1∶3.5，过滤，滤液加95％乙醇使含醇量为60％，静置24小时；醇沉液采用滤布抽滤，分离出沉淀，将沉淀减压干燥，粉碎，过筛，得红参多糖提取物。

实施例5

取红参加5％乙醇煮沸提取三次，第一次为药材量的6倍量，第二次为药材量的6倍量，第三次为药材量的6倍量；煎煮提取，沸后分别保持1.5、1.5、1小时；药液合并减压浓缩至V_浓缩液∶M_{药材或药渣}＝1∶3.5，过滤，滤液加100％乙醇使含醇量为80％，静置12小时以上；醇沉液采用滤布抽滤，分离出沉淀，将沉淀减压干燥，粉碎，过筛，得红参多糖提取物。

实施例6

取红参加水煮沸提取1次，为药材量的8倍水量，煎煮提取，沸后分别保持1.5小时；药液合并减压浓缩至V_浓缩液∶M_{药材或药渣}＝1∶3.5，过滤，滤液加95％乙醇使含醇量为70％，静置12小时以上；醇沉液采用滤布抽滤，分离出沉淀，将沉淀减压干燥，粉碎，过筛，得红参多糖提取物。

实施例7

取红参加水煮沸提取2次，第一次为药材量的4倍水量，第二次为药材量的4倍水量，煎煮提取，沸后分别保持1.5、1.5小时；药液合并减压浓缩至V_浓缩液∶M_{药材或药渣}＝1∶3.5，过滤，滤液加95％乙醇使含醇量为55％，静置12小时以上；醇沉液采用滤布抽滤，分离出沉淀，将沉淀减压干燥，粉碎，过筛，得红参多糖提取物。

实施例8

取红参加95％乙醇溶液提取三次，每次加醇量为2倍；红参药渣加取红参加40％乙醇煮沸提取三次，第一次为药材量的6倍量，第二次为药材量的6倍量，第三次为药材量的6倍量；煎煮提取，沸后分别保持1.5、1.5、1小时；药液合并减压浓缩至V_浓缩液∶M_{药材或药渣}＝1∶3.5，过滤，滤液加100％乙醇使含醇量为90％，静置12小时以上；醇沉液采用滤布抽滤，分离出沉淀，将沉淀减压干燥，粉碎，过筛，得红参多糖提取物。

实施例9

取红参加100％乙醇溶液提取1次，加醇量为8倍；红参药渣加水煮沸提取三次，第一次为药材量的6倍水量，第二次为药材量的6倍水量，第三次为药材量的6倍水量；煎煮提取，沸后分别保持1.5、1.5、1小时；药液合并减压浓缩至V_浓缩液∶M_{药材或药渣}＝1∶3.5，过滤，滤液加100％乙醇使含醇量为80％，静置12小时以上；醇沉液采用滤布抽滤，分离出沉淀，将沉淀减压干燥，粉碎，过筛，得红参多糖提取物。

实施例10

取红参加70％乙醇溶液提取2次，每次加醇量为8倍；红参药渣烘干；干药渣加水煮沸提取三次，第一次为药材量的4倍水量，第二次为药材量的4倍水量，第三次为药材量的6倍水量；煎煮提取，沸后分别保持1.5、1.5、1小时；药液合并减压浓缩至比重1.40，过滤，滤液加95％乙醇使含醇量为60％，静置12小时以上；醇沉液采用滤布抽滤，分离出沉淀，将沉淀减压干燥，粉碎，过筛，得红参多糖提取物。

实施例11

取红参加80％乙醇溶液提取2次，每次加醇量为8倍；红参药渣烘干；干药渣加水煮沸提取三次，第一次为药材量的3倍水量，第二次为药材量的3倍水量，第三次为药材量的3倍水量；煎煮提取，沸后分别保持1.5、1.5、1小时；药液合并减压浓缩至V_{浓 缩液}∶M_{药材或药渣}＝1∶3.5，过滤，滤液加95％乙醇使含醇量为70％，静置12小时以上；醇沉液采用滤布抽滤，分离出沉淀，将沉淀减压干燥，粉碎，过筛，得红参多糖提取物。

实施例12

取红参加75％乙醇溶液提取三次，每次加醇量为8倍；红参药渣烘干；干药渣加水煮沸提取三次，第一次为药材量的2倍水量，第二次为药材量的3倍水量，第三次为药材量的4倍水量；煎煮提取，沸后分别保持1.5、1.5、1小时；药液合并减压浓缩至比重1.01，过滤，滤液加95％乙醇使含醇量为70％，静置12小时以上；醇沉液采用滤布抽滤，分离出沉淀，将沉淀减压干燥，粉碎，过筛，得红参多糖提取物。

实施例13

取红参加95％乙醇溶液提取三次，每次加醇量为6倍；红参药渣烘干；干药渣加水煮沸提取三次，第一次为药材量的2倍水量，第二次为药材量的3倍水量，第三次为药材量的4倍水量；煎煮提取，沸后分别保持1.5、1.5、1小时；药液合并减压浓缩至V_{浓 缩液}∶M_{药材或药渣}＝1∶0.05，过滤，滤液加95％乙醇使含醇量为70％，静置12小时以上；醇沉液采用滤布抽滤，分离出沉淀，将沉淀减压干燥，粉碎，过筛，得红参多糖提取物。

实施例14

取红参加70％乙醇溶液提取2次，每次加醇量为6倍；红参药渣烘干；干药渣加水煮沸提取三次，第一次为药材量的2倍水量，第二次为药材量的4倍水量，第三次为药材量的3倍水量；煎煮提取，沸后分别保持1.5、1.5、1小时；药液合并减压浓缩至V_{浓 缩液}∶M_{药材或药渣}＝1∶10，过滤，滤液加95％乙醇使含醇量为70％，静置12小时以上；醇沉液采用滤布抽滤，分离出沉淀，将沉淀减压干燥，粉碎，过筛，得红参多糖提取物。

实施例15

取实施例一的红参多糖提取物170g，与80g微晶纤维素混合均匀，加3％聚维酮乙醇溶液制软材，过18目筛制颗粒，600℃干燥30～45分钟，整粒，加入10g滑石粉，混匀，充于胶囊中，即得。

实施例16

取实施例一的红参多糖提取物170g，与80g微晶纤维素混合均匀，加3％聚维酮乙醇溶液制软材，过18目筛制颗粒，600℃干燥30～45分钟，整粒，加入10g滑石粉，混匀，压片即得。

实施例17

取实施例一的红参多糖提取物170g，与100g蔗糖，80g微晶纤维素混合均匀，加3％聚维酮乙醇溶液制软材，过18目筛制颗粒，600℃干燥30～45分钟，整粒，包装，得到颗粒剂。

Claims (10)

1.一种红参多糖提取物的制备方法，按顺序包括如下步骤：

(1)取红参或经过70％--100％乙醇溶液提取后的红参药渣，加入溶剂进行提取，得提取液；提取液浓缩得浓缩液；

(2)浓缩液加入75-100％乙醇溶液至适量进行醇沉，得沉淀；

(3)沉淀干燥、粉碎，得红参多糖提取物；

其中，步骤(1)中所述70％--100％乙醇溶液提取后的红参药渣为1-3次乙醇提取后的药渣，步骤(1)的溶剂选自：水或0-40％含醇量的乙醇溶液，用量为1-50倍原料量。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中的红参选自红参湿品或红参干品的整根、切制的饮片或者粉碎的颗粒或粉末；红参药渣是用红参湿品或红参干品的整根、切制的饮片或者粉碎的颗粒或粉末经过70％-100％乙醇溶液提取后产生的红参药渣。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中的红参或红参药渣可直接进行提取或干燥后进行提取。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)和(3)中的干燥方式选自常压干燥、减压干燥、流化干燥、冷冻干燥、微波干燥、远红外干燥、超临界干燥或折射窗干燥。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中的提取方式选自煎煮法、浸渍法、渗滤法、超临界流体提取法、加压提取法、亚临界水提取法、破碎提取法、酶法辅助提取、半仿生提取法、超声提取法、微波提取法或动态逆流提取法。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中的浓缩方式选自常压浓缩、减压浓缩或膜浓缩。

7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中的浓缩液的量控制在浓缩液的体积∶药材或药渣的重量＝1∶0.05-10或浓缩液的比重为1.01-1.40。

8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中的浓缩液加入75-100％乙醇溶液适量至溶液中含醇量为55％-90％。

9.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中的沉淀采用固液分离方式分离，分离方式选自管式离心、碟式离心、膜过滤、线隙过滤、板框过滤、滤布过滤、纸浆板过滤、滤纸过滤或直接移取上清液。

10.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤如下：

(1)提取：以湿红参药渣为原料加水提取3次，加水量为4，3，2倍原料量；沸腾提取1.5、1.5、1小时，提取液过滤，合并后备用；提取后药渣弃去；

(2)浓缩：将提取液减压浓缩至体积与原料量比为1∶1，浓缩液备用；

(3)醇沉：将95％浓度乙醇溶液搅拌加入浓缩液中，控制混合溶液中乙醇含量65％-69％，静置12小时以上；

(4)固液分离：将醇沉液进行固液分离，沉淀备用，上清液弃去；

(5)干燥：将沉淀减压干燥；

(6)粉碎：将干燥物粉碎，过100目筛，即得红参多糖提取物。