Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf ein Verfahren zur Herstellung von neuen Purinen der Formel:
EMI1.1
worin A N oder N#O, R1 Wasserstoff, Alkoxy mit 1-8 Kohlenstoffatomen (z.B.Methoxy, Äthoxy, Propoxy, Isopropoxy), Amino, Alkylamino mit 1-8 Kohlenstoffatomen (z. B. Methylamino, Äthylamino, Propylamino), Dialkylamino mit 1-8 Kohlenstoffatomen in jeder Alkylgruppe (z. B. Dimethylamino, Diäthylamino, Methyläthylamino), Aralkylamino mit 1-8 Kohlenstoffatomen in der Alkylgruppe, z. B. Phenylalkylamino mit 1-8 Kohlenstoffatomen in der Alkylgruppe (z. B.
Benzylamino, Phenyläthylamino) oder Acylamino, z. B. Alkanoylamino mit 1-8 Kohlenstoffatomen (z. B. Acetylamino, Propionylamino, Octanoylamino oder Benzoylamino), R2 und R3, die gleich oder verschieden sein können, Wasserstoff, Amino, Alkyl mit 1-8 Kohlenstoffatomen (z. B. Methyl, Äthyl, Propyl, Isopropyl) oder Aryl (z. B. Phenyl) und R4 Alkylen mit 2-8 (vorzugsweise 2-6) Kohlenstoffatomen (z. B.
Äthylen, Trimethylen, Propylen), das durch eine oder mehrere Hydroxylgruppen substituiert ist (wobei allerdings keine Hydroxylgruppen an das dem Ringstickstoffatom benachbarte Kohlenstoffatom gegebunden sind), die durch einen oder mehrere Acylreste, (z. B. Acetyl, Propionyl) oder Benzoyl, Alkylreste mit 1-8 Kohlenstoffatomen (z. B. Methyl, Äthyl, Propyl, Isopropyl), Aralkylreste mit 1-8 Kohlenstoffatomen in dem Alkylrest, z. B. Phenylalkyl mit 1-8 Kohlenstoffatomen in dem Alkylrest (z. B. Benzyl, Phenyläthyl) oder, sofern ein Paar von Hydroxylgruppen an der Alkylengruppe vorhanden ist, durch Alkyliden mit 1-8 Kohlenstoffatomen (z. B. Äthyli den, Propyliden, Isopropyliden) oder Aralkyliden mit 1-8
Kohlenstoffatomen in dem Alkylidenrest, z. B. Phenylalkyli den mit 1-8 Kohlenstoffatomen in dem Alkylidenrest (z. B.
Benzyliden) geschützt sein können, bedeuten, sowie von Sal zen dieser Verbindungen, z. B. von Metallsalzen (wie beilspiels- weise Natriumsalze, Kaliumsalze, Calciumsalze), Ammonium salzen, Aminsalzen (wie z. B. Dimethylaminsalzen, Trimethyl aminsalzen) und Säureadditionssalzen, wie z. B. organische oder anorganische Säureadditionssalze (wie beispielsweise die
Hydrochloride, Hydrobromide, Sulfate, Nitrate, Phophate,
Tartrate, Citrate).
Im folgenden werden unter niederen aliphatischen Resten, wie Alkyl oder Alkylen, solche mit 1-8 Kohlenstoffatomen verstanden, wenn nichts anderes angegeben ist.
Spezifische Beispiele von Purinverbindungen der Formel (I) sind die folgenden:
4-(Purin-9-yl)-4-desoxy-D-erythronsäure, 4-(2-Amino purin-9-yl)-4-desoxy-D-erythronsäure, 4-(8-Aminopurin- 9-yl)-4-desoxy-D-erythronsäure, 4-(6-Aminopurin-9-yl)-
4-desoxy-D-erythronsäure, 4-(6-Aminopurin-9-yl)-4- desoxy-2,3-0,0-(nieder)-alkyliden-D-erythronsäuren [z.B.
4-(6-Aminopurin-9-yl)-4-desoxy-2,3-0,0-äthyliden-D erythronsäure, 4-(6-Amino-purin-9-yl)-4-desoxy-2,3-0,0 isopropyliden-D-erythronsäure], 4-(6-Aminopurin-9-yl)
4-desoxy-2,3-0,0-aryl-(nieder)-alkyliden-D-erythron säuren [z.
B. 4-(6-Aminopurin-9-yl)-4-desoxy-2,3-0,0- benzyliden-D-erythronsäire], 4-(6-Aminopurin-9-yl)-4desoxy-2,3-0,0-di-(nieder)-alkanoyl-D-erythronsäuren [z.B.4-(6-Aminopurin-9-yl)-4-desoxy-2,3-0,0-diacetyl D-erythronsäure, 4-(6-Aminopurin-9-yl)-4-desoxy-2,3-0,0dipropionyl-D-erythronsäure], 4-[6-Amino-8-(nieder)alkylpurin0-9-yl]-4-desoxy-D-erythronsäuren [z.B.4 (6-Amino-8-methylpurin-9-yl)-4-desoxy-D-erthronsäure, 4-(6-Amino-8-äthylpurin-9-yl)-4-desoxy-D-erythronsäure], 4-6-Amino-8- (nieder) -alkylpurin-9-yl]-4-desoxy-2,3 -0,0,- (nieder)-alkyliden-D-erythronsäuren [z.
B. 4-(6-Amino- 8-methylpurin-9-yl)-4-desoxy-2,3-O-isopropyliden D-erythronsäure, 4-(6-Amino-8-äthylpurin-9-yl)-4desoxy-2,3-O-isopropyliden-D-erythronsäure], 4-(6,8 Diaminopurin-9-yl)-4-desoxy-D-erythronsäure, 4-[2 (nieder)-Alkyl-6-aminopurin-9-yl]-4-desoxy-D-erythronsäuren [z.B.4-(2-Methyl-6-aminopurin-9-yl)-4-desoxy-Derythronsäure], 4-(6,2-Diaminopurin-9-yl)-4-desoxy-Derythronsäure, 4-[6-(nieder)-Alkylaminopurin-9-yl]-4- desoxy-D-erythronsäuren [z.B.4-(6-Methylaminopurin9-yl)-4-desoxy-D-erythronsäure, 4-(6-Äthylaminopurin9-yl)-4-desoxy-D-erythronsäure, 4-(6-Butylaminopurin9-yl)-4-desoxy-D-erythronsäure, 4-[6-(nieder)-Alkylaminopurin-9-yl]-4-desoxy-2,3-O-(nieder)-alkyliden-Derythronsäuren [z.B.4-(6-Äthylaminopurin-9-yl)-4desoxy-2,3-O-isopropyliden-D0erythronsäure],
4-[6-Di (nieder)-alkylaminopurin-9-yl]-4-jdesoxy-D-erythronsäuren [z.B.4-(6-Dimethylaminopurin-9-yl)-4-desoxy-Derythronsäure, 4-(6-Diäthylaminopurin-9-yl)-4-desoxy D-erythronsäure], 4-[6-Phenyl-(nieder)-alkylaminopurin9-yl]-4-desoxy-D-erythronsäuren [z.B.4-(6-Benzylaminopurin-9-yl)-4-desoxy-D-erythronsäure, 4-(6-Phenyläthylaminopurin-9-yl)-4-desoxy-D-erythronsäure], 4-(6-Benzoylaminopurin-9-yl)-4-desoxy-D-erythronsäure, 4-[6-(nieder) Alkioxypurin-9-yl]-4-desoxy-D-erythronsäuren [z.B.4 (6-Methpoxypurin-9-yl)-4-desoxy-D-erythronsäure], 4 [6-(nieder)-Alkanoylaminopurin-9-yl]-4-desoxy-Derythronsäuren [z.B.4-(6-Acetylaminopurin-9-yl)4-desoxy-D-erythronsäure, 4-(6-Butyrylaminopurin-9-yl)4-desoxy-D-erythronsäure], 3-(6-Aminopurin-9-yl)-2hydroxy-3-hydroxymethylpropionsäure, 6-Amino-9-(3carboxy-2,3-dihydroxypropyl)-purin-1-oxyd, 6-Amino-9 (3-carboxy-2,3-isopropylidenoxypropyl)-purin-1-oxyd,
4-(6-Aminopurin-9-yl)-4-desoxy-L-threonsäure, 4-(6-Aminopurin-9-yl)-2-hydroxybuttersäure usw.
Gemäss der vorliegenden Erfindung werden die Purinverbindungen der Formel (I) dadurch hergestellt, dass man eine Verbindung der Formel:
EMI1.2
worin A, R1, R2 und R3 die obigen Bedeutungen haben, mit einem Lacton der Formel:
EMI1.3
worin R4 die obige Bedeutung hat, umsetzt.
Die Umsetzung erfolgt im allgemeinen in einem Lösungsmittel, wie z. B. Dimethylformamid, Dimethylsulfoxyd¯Ïder Xylol, in Gegenwart eines Kondensationsmittels, wie z. B.
einem Alkalimetall, wie z. B. Lithium, Natrium oder Kalium, einem Alkalimetallhydrid, wie z. B. Lithiumhydrid, Natriumhydrid oder Kaliumhydrid, einem Erdalkalimetallhydrid, wie z. B. Calciumhydrid oder Bariumhydrid, einem Alkalimetall carbonat, wie z. B. Natriumcarbonat oder Kaliumcarbonat, einem Erdalkalimetallcarbonat, wie z. B. Calciumcarbonat oder Magnesiumcarbonat, einem Alkalimetallbicarbonat, wie z. B. Natriumbicarbonat oder Kaliumbicarbonat, einem Erdal kalimetallbicarbonat, wie z. B. Calciumbicarbonat oder
Magnesiumbicarbonat, einem Alkalimetallhydroxyd, wie z. B.
Natriumhydroxyd oder Kaliumhydroxyd, einem Erdalkalime tallhydroxyd, wie z. B. Calciumhydroxyd oder Magnesiumhy droxyd, einem Alkalimetallfuorid, wie z. B. Cäsiumfluorid,
Kaliumfluorid oder Lithiumfluorid, oder einem Alkalimetallal koholat, wie z. B. Natriumäthylat oder Kalium-tert.-butylat, bei einer Temperatur zwischen Zimmertemperatur und dem
Siedepunkt des Reaktionsmediums.
Die als Ausgangsmaterialien verwendeten Purinverbindun gen der Formel (II) sind bekannte Verbindungen oder können in an sich üblicher Weise erhalten werden.
Falls die Hydroxylgruppe(n) in R4 durch niederes Alkyl,
Arylniederalkyl, niederes Alkyliden oder Arylniederalkyliden geschützt sind, kann die resultierende Verbindung der Formel
I gewünschtenfalls durch Behandlung mit einer sauren Sub stanz hydrolysiert werden, und falls die Hydroxylgruppe(n) in
R4 durch Acyl geschützt sind und/oder R1 Acylamino darstellt, kann die resultierende Verbindung der Formel I gewünschtenfalls durch Behandlung mit einer sauren oder basischen Substanz hydrolysiert werden; dabei werden die entsprechenden Verbindungen mit freien Hydroxyl- und/oder Aminogruppen erhalten.
Die oben erhaltenen Purinverbindungen der Formel (I) können in an sich bekannter Weise in ihre Salze, z. B. in Metallsalze, Ammoniumsalze, Aminosalze und Säureadditionssalze, übergeführt werden.
Die Purinverbindungen der Formel (I) und ihre Salze besitzen im allgemeinen eine ausgesprochene hypocholesterinämische Wirkung. Die Testresultate mit der Standardverbindung, d. h. mit 4-(6-Aminopurin-9-yl)-4-desoxy-D-erythronsäure, finden sich nachfolgend.
1. Testmethode
Gruppen von 5 Wochen alten Ratten vom Wistarstamm (Körpergewicht 74 g im Durchschnitt), wobei jede Gruppe aus 10 Tieren bestand, wurden während 3 Tagen mit fettem Futter gefüttert, welches 2% Cholesterin, 1% Cholsäure, 12% gehärteres Öl, 8 % Fischextrakt und einige andere Materialien enthielt, wobei gleichzeitig einmal täglich die Restverbindung verabreicht wurde; man liess die Tiere über Nacht hungern und tötete sie am nächsten Morgen. Die Serumcholesterinkonzentration wurde nach der Methode von Zak-Henly bestimmt.
Die Testverbindung wurde in wässriger Lösung, welche mit Salzsäure angesäuert war, oder in Form einer wässrigen Suspension mit Carboxymethylcellulose verabreicht. Zu Kontrollzwecken wurde Thyroxin oral in einer Dosis von 0,05 mg pro Tier verabreicht.
2. Testresultate Art der Verabreichung Dosis (mg/Ratte) Serumcholesterin mg/dl + S.E. Hemmung % Intraperitoneal 0,5 337 i 48,8 37,4 Intraperitoneal 0,2 338 + 24,9 37,2 Oral 0,5 249 1 26,6 53,7 Oral 0,2 271 1 28,0 49,6 Thyroxin 0,05 284 + 28,4 47,2 Blindwert 538 1 48.1
Andere Verbindungen, wie z. B. 4-(6-Benzoyl-aminopurin 9-yl)-4-desoxy-D-erythronsäure, 4-(6-Amino-8-methylpurin- 9-yl)-4-desoxy-D-erythronsäure, 4-(6-Äthyl-aminopurin-9 yl)-4-desoxy-D-erythronsäure, 6-Amino-9-(3-carbocy-2,3- dihydroxypropyl)-purin-1-oxyd und deren Salze, zeigen eine ähnliche Wirkung.
Ferner ist die Toxizität der Purinverbindungen der Formel (I) und ihrer Salze ausserordentlich niedrig. Die akute Toxizität von 4-(6-Aminopurin-9-yl) -4-desoxy-D -erythronsäure bei Ratten und Mäusen ist beispielsweise die folgende:
Tier Art der Verabreichung LDso (mg/kg)
Maus subkutan 2700
Ratte intraperitoneal 1000-2000
Ratte oral 4000
Somit sind die Purinverbindungen der Formel (I) und ihre nicht toxischen Salze als therapeutische Mittel für die Behandlung von Arteriosklerose besonders wertvoll.
Die Purinverbindungen der Formel (I) und deren nicht toxischen Salze sind gegenüber Hitze und Licht beständig und lassen sich in konventioneller Weise verabreichen, wobei man die üblichen Arten von Darreichungsformen verwenden oder die üblichen pharmazeutischen Trägerstoffe zusetzen kann, um eine hypocholesterinämische Wirkung beim Menschen hervorzurufen. So können sie in Form von pharmazeutischen Präparaten verwendet werden, welchen ein pharmazeutisches, organisches oder anorganisches Trägermaterial zugegeben wird, das für die enterale oder parenterale Applikation geeignet ist.
Die orale Verabreichung durch Verwendung von Tabletten, Kapseln oder in flüssiger Form, wie z. B. Suspensionen, Lösungen oder Emulsionen, oder aber die Injektionsapplikation sind besonders vorteilhaft. Wünscht man Tabletten herzustellen, so kann man die üblichen Bindemittel und Zerfallmittel, wie sie bei den therapeutischen Darreichungsformen verwendet werden, zusetzen. Solche Bindemittel sind beispielsweise Glucose, Lactose, Akaziengummi, Gelatine, Mannit, Stärkepaste, Magnesiumtrisilikat und Talk. Beispiele von Zerfallmitteln sind Maisstärke, Keratin, kolloidales Siliciumdioxyd und Kartoffelstärke. Sollen sie als Flüssigkeiten verabreicht werden, so kann man die üblichen flüssigen Träger zusetzen.
Die Dosierung bzw. die therapeutischen wirksame Menge an Purinverbindungen der Formel (I) und deren Salzen für den Menschen kann innerhalb weiter Grenzen schwanken und kann z. B. zwischen ca. 10 und 1000 mg pro Tag für Erwachsene liegen. Der obere Grenzwert wird lediglich durch den gewünschten Wirkungsgrad und durch die wirtschaftlichen Überlegungen beeinflusst. Für die orale Verabreichung wird man ca. 5-30 mg Wirksubstanz pro Einheit verwenden. Bei Injektionen kann die Wirksubstanz in einer Menge von 110 mg pro Einheit Verwendung finden. Selbstverständlich kann die Dosierung des zu verwendenden besonderen therapeutischen Mittels sehr stark schwanken, was vor allem von dem Alter des Patienten und dem gewünschten therapeutischen Wirkungsgrad abhängen wird.
Die Bezeichnung pharmazeutisches Trägermittel soll nicht therapeutisch wirksame Materialien umfassen, welche üblicherweise in Darreichungsformen Verwendung finden und aus Füllstoffen, Verdünnungsmitteln, Bindemitteln, Gleitmitteln, Zerfallmitteln und Lösungsmitteln bestehen. Selbstverständlich ist es möglich, die neuen therapeutischen Materialien, d. h. die reinen Verbindungen, ohne irgendwelches pharmazeutisches Trägermaterial zu verabreichen.
Die Erfindung wird durch die folgenden Beispiele erläutert.
Beispiel 1 (A) Zu einer Lösung von Adenin (1,35 g) in Dimethylsulfoxyd (25 cm3) gibt man 0,48 g Natriumhydrid hinzu. Das Gemisch wird bei Zimmertemperatur während 1 Stunde gerührt und hierauf während 30 Minuten auf 50oc erwärmt.
Zum Gemisch gibt man 2,3-O-Isopropyliden-D-erythronolacton (1,58 g), worauf man das Reaktionsgemisch während 20 Stunden bei 1200C rührt. Das Dimethylsulfoxyd wird unter vermindertem Druck aus dem Reaktionsgemisch abdestilliert und der Rückstand in Wasser gelöst. Die wässrige Lösung wird mit Äther gewaschen und die wässrige Schicht mittels Salzsäure auf einen pH-Wert von 3 eingestellt und hierauf stehen gelassen. Die ausgeschiedenen Kristalle werden durch Filtrieren gesammelt und mit Wasser gewaschen, wobei man Aminopurin-9-yl)-4-desoxy-2,3-O-isopropyliden-D-erythronsäure erhält. Andererseits wird das Filtrat unter vermindertem Druck eingeengt und der Rückstand mit Wasser behandelt, wobei man dieselbe Substanz wie die obige erhält. Ausbeute: 56%; Schmelzpunkt 214C (Zersetzung) (umkristallisiert aus 50-%igem Äthanol).
(B) Eine Lösung von 2,7 g Adenin in 45 cm3 Dimethylformamid wird mit 0,96 g Natriumhydrid versetzt. Das Reaktionsgemisch wird bei Zimmertemperatur während 1 Stunde und hierauf während 30 Minuten bei 50OC gerührt. Zu diesem Gemisch gibt man 2,3-O-Isopropyliden-D-erythronolacton (3,15 g). Das erzielte Gemisch wird dann während 8 Stunden unter Rückfluss erhitzt. Dann wird das Dimethylformamid unter vermindertem Druck verdampft und der Rückstand in Wasser gelöst. Die wässrige Lösung wird mit Äther gewaschen und mit Salzsäure neutralisiert. Die Lösung wird unter vermindertem Druck eingeengt. Der Rückstand wird mit Wasser behandelt und die ausgeschiedenen Kristalle werden durch Filtrieren gesammelt und getrocknet, wobei man 4-(6-Amino purin-9-yl)-4-desoxy-2,3 -O -isopropyliden-D -erythronsäure (3,4 g) erhält.
Schmelzpunkt 214C (Zersetzung). Andererseits wird das Filtrat unter vermindertem Druck eingeengt und der Rückstand mit Wasser gewaschen, wobei man dieselbe Substanz in einer Menge von 0,44 g erhält. Ausbeute: 65,5 %.
(C) Eine Lösung Adenin (1,35 g), 2,3-O-Isopropyliden-Derythronolacton (1,58 g) und 0,7 g Kaliumcarbonat in 20 cm3 Dimethylformamid wird während 6 Stunden unter Rückfluss erhitzt. Das Reaktionsgemisch wird wie in Beispiel 1 (B) behandelt, wobei man 4-(6-Aminopurin-9-yl)-4-desoxy-2,3 O-isopropyliden-D-erythronsäure (0,88 g) vom Schmelzpunkt 2140C (Zersetzung) erhält. Ausbeute: 30Q (D) Eine Suspension von Adenin-1-oxyd (1,51 g), 2,3 Isopropyliden-D-erythronolacton (2,21 g) und Kaliumcarbonat (1,38 g) in Dimethylformamid (50 cm3) wird unter Rühren während 8 Stunden unter Rückfluss erhitzt. Aus dem Reaktionsgemisch wird das Dimethylformamid durch Destillation unter vermindertem Druck entfernt. Der Rückstand wird in einer kleinen Menge Wasser gelöst, und die unlösliche Substanz abfiltriert.
Das Filtrat wird mittels 5 %iger Salzsäure auf einen pH-Wert von 3 eingestellt. Die ausgeschiedenen Kristalle werden durch Filtrieren gesammelt, wobei man 6 Amino-9-(3-carboxy-2,3-isopropyliden-oxypropyl)-purin-1- oxyd (0,40 g) vom Schmelzpunkt 270OC (Zersetzung) (umkristallisiert aus Methanol) enthält.
(E) Eine Suspension von Adenin-1-oxyd (1,51 g), 2,3- Isopropyliden-D-erythronolacton (2,21 g) und Natriumcarbonat (1,06 g) in Dimethylformamid (50 cm3) wird während 12 Stunden unter Rückfluss und unter Rühren erhitzt. Das Reaktionsgemisch wird dann in der gleichen Weise wie in Beispiel 1 (D) behandelt, wobei man 6-Amino-9-(3-carboxy-2,3-isopro- pylidenoxypropyl)-purin-l-oxyd (1,10 g) erhält. Schmelzpunkt 2700C (Zersetzung) (umkristallisiert aus Methanol).
(F) Eine Suspension von Adenin-1-oxyd (1,51 g), 2,3 Isopropyliden-D-erythronolacton (2,21 g) und Natriumcarbonat (1,06 g) in Dimethylsulfoxyd (50 cm3) wird während 6 Stunden auf 160 C erhitzt. Das Reaktionsgemisch wird in der gleichen Weise wie in Beispiel 1 (D) behandelt, wobei man 6 Amino-9-(3 -carboxy-2,3 -isopropylidenoxypropyl) -purin- 1oxyd (1,30 g) erhält. Schmelzpunkt 2700C (Zersetzung) (umkristallisiert aus Methanol).
(G) Eine Suspension von Äderiin-1-oxyd (1,51 g), 2,3- Isopropyliden-D-erythronolacton (2,21 g) und Natriumcarbonat (1,06 g) in Dimethylacetamid (50 cm3) wird unter Rühren während 12 Stunden auf 1600C erhitzt. Das Reaktionsgemisch wird in der gleichen Weise wie in Beispiel 1 (D) behandelt, wobei man 6-Amino-9-(3-carboxy-2,34sopropylidenoxypro- pyl)-purin-1-oxyd (0,80 g) erhält. Schmelzpunkt 2700C (Zersetzung) (umkristallisiert aus Methanol).
(H) Eine Mischung von N-Äthyladenin (1,63 g), 2,3-0- Isopropyliden-O-erythronolacton (2,20 g) und Natriumcarbonat (1,06 g) in Dimethylformamid (32 cm3) wird unter Rückfluss während 24 Stunden erhitzt. Das Dimethylformamid wird abdestilliert und der Rückstand mit Wasser versetzt. Eine sich bildende unlösliche Substanz wird abfiltriert, während das Filtrat mit 10%iger Salzsäure (7,3 cm3) neutralisiert und eingeengt wird. Auf diese Weise erhält man 4-(6-Athylaminopu- rin-9-yl)-4-desoxy-2,3 -O-isopropyliden-D-erythronsäure.
Diese Substanz wird dann weiter bearbeitet, um sie in Äthylaminopurin-9-yl)4-desoxy-D -erythronsäure uberzufüh- ren. Zu dieser Substanz gibt man 5)0 cm3 10 %ige Essigsäure hinzu. Dann wird das Reaktionsgemisch während 30 Minuten unter Rückfluss erhitzt und eingeengt. Das Konzentrat wird auf einem Ionenaustauschharz [OH-Typus IRA 400 (Waren zeichnen) 1 adsorbiert, das Harz hierauf mit 0,05n-Essigsäure gewaschen und mit 0,5n-Essigsäure eluiert. Das Eluat wird eingeengt, wobei man 4-(6-Äthylaminopurin-9-yl)-4-desoxy- D-erythronsäure((),5 6g erhältWSchmelzpunkt 242-2430C (Zersetzung) (umkristallisiert aus wässrigem Äthanol).
UV-Spektrum: BR2O 269 mF (E = 17.400).
(1) Eine Mischung von Adenin (1,35 g), Benzyliden-erythronolacton (2,89 g) und Natriumcarbonat (1,06 g) in Dimethylformamid (50 cm3) wird unter Rühren und unter Rückfluss während 19 Stunden erhitzt. Das Dimethylformamid wird unter vermindertem Druck abdestilliert. Der Rückstand wird in 20 cm3 Wasser gelöst und abfiltriert. Das Filtrat wird mittels 20 cm3 ln-Salzsäure auf einen pH-Wert von 3 eingestellt. Die ausgeschiedenen Kristalle werden durch Filtrieren gesammelt, mit Kohlenstoffpulver behandelt und zweimal aus Methanol in noch heissem Zustande umkristallisiert, wobei man 4-(6 Aminopurin-9-yl)-4-desoxy-2,3-O-benzyliden-D-erythronsäure erhält. Schmelzpunkt 198-199oC (Zersetzung).
UV-Spektrum: Bm2l 261 m.
(J) Ein Gemisch von Adeni;n-N-oxyd (1,51 g), Benzylidenerythronolacton (2,89 g) und Natriumcarbonat (1,06 g) m Dimethylformamid (50 cm3) wird unter Rühren während 19 Stunden unter Rückfluss erhitzt. Das Dimethylformamid wird unter vermindertemDruck ab destilliert und der Rückstand in 2u > cm3 Wasser gelöst, Die Lösung wird filtriert und das Filtrat mit 20 cm3 ln-Salzsäure neutralisiert.
Die ausgeschiedenen Kristalle werden durch Filtrieren gesammelt und aus Methanol in noch heissem Zustande umkristallisiert, wobei man 4-(6-Aminopurin-9-yl)-4-desoxy-2,3-0 benzyliden-D-erythronsäure erhält. Schmelzpunkt 198-199 C (Zersetzung).
UV-Spektrum: Am2a 261 my.
(K) Ein Gemisch von Adenin (1,35 g), Dimethylformamid (27 cm3) und Kaliumhydroxyd (0,84 g) wird während 30 Minuten auf 120OC und dann während 10 Minuten auf 1400C erhitzt. Zu diesem Gemisch gibt man 2,3-O-Isopropyliden-Derythronolacton (1,90 g) in Dimethylformamid (5 cm3), worauf man das Reaktionsgemisch während 18 Stunden unter Rückfluss erhitzt. Das Dimethylformamid wird abdestilliert, der Rückstand mit Wasser versetzt und die unlösliche Substanz entfernt. Die wässrige Schicht wird mittels 10 %iger Salzsäure auf einen pH-Wert von 3 eingestellt und eingeengt. Eine kleine Menge Wasser wird dann dem Rückstand zugegeben, worauf man die ausgeschiedenen Kristalle durch Filtrieren sammelt. Auf diese Weise erhält man 4-(6-Aminopurin-9-yl) 4-desoxy-2,3-O-isopropyliden-D-erythronsäure (0,73 g).
Schmelzpunkt 2140C (Zersetzung).
(L) Ein Gemisch von Adenin (1,35 g), Dimethylformamid (20 cm3), 2,3-O-Isopropyliden-D-erythronolacton (1,58 g) und Cäsiumfluorid (0,75 g) wird während 23 Stunden unter Rückfluss erhitzt. Das Dimethylformamid wird unter vermindertem Druck verdampft und der Rückstand in Wasser gelöst und unlösliches Material entfernt. Die wässrige Lösung wird mittels 10%iger Salzsäure auf einen pH-Wert von 3 eingestellt. Die Lösung wird unter vermindertem Druck eingeengt.
Der Rückstand wird mit Wasser behandelt und die ausgeschiedenen Kristalle werden durch Filtrieren gesammelt, wobei man 4-(6-Aminopurin-9-yl)-4-desoxy-2,3-O-isopropyliden-D-ery- thronsäure (0,4 g) erhält. Schmelzpunkt 2140C (Zersetzung).
(M) Ein Gemisch von Adenin (1,35 g), 2,3-O-Isopropyliden-D-erythronolacton (2,20 g), Kalium-tert.-butoxyd (1,68 g) und Dimethylformamid (27 cm3) wird unter Rückfluss während 24 Stunden erhitzt. Das Reaktionsgemisch wird in der gleichen Weise wie in Beispiel 1 (L) behandelt, wobei man (6-Aminopurin-9-yl)-4-desoxy-2,3 -O-isopropyliden-D -erythronsäure (1,41 g) erhält Schmelzpunkt 2140C (Zersetzung).
(N) Eine Mischung von 6-Benzamidopurm (2,40 g), 2,3-0- Isopropyliden-D-erythronolacton (3,21 g) und Natriumcarbonat (1,06 g) in Dimethylformamid (30 cm3) wird während 20 Stunden bei 120-1250C gerührt. Das Dimethylformamid wird durch Filtrieren entfernt und der Rückstand in einer kleinen Menge Wasser gelöst. Die wässrige Lösung wird mittels verdünnter Salzsäure auf einen pH-Wert von 3 eingestellt, worauf man die ausgefällten Kristalle abfiltriert. Das Filtrat wird unter vermindertem Druck eingeengt, das Konzentrat in 50 cm3 10-%iger Essigsäure gelöst und die Lösung während 2 Stunden unter Rückfluss erhitzt. Das Reaktionsgemisch wird mit Kohlepulver behandelt unter vermindertem Druck eingeengt. Das Konzentrat wird in wenig Wasser gelöst.
Die wässrige Lösung enthält, wie die Dünnschichtchromatographie zeigt, 4-(6-Benzamidopurin-9-yl)-4-desoxy-2,3 O-isopropyliden-D-erythronsäure. Die aus der wässrigen Lösung ausgefällten Kristalle werden durch Filtrieren gesammelt und aus Wasser umkristallisiert, wobei man 0,50 g 4-(6 Aminopurin-9-yl)-4-desoxy-D-erythronsäure vom Smp. 279 C (unter Zersetzung) erhält.
(O) Eine Lösung von Adenin (1,35 g), 2,3-O-Isopropyli- den-D-erythronolacton (2,4 g) und Natriumbicarbonat (1,26 g) in Dimethylformamid (27 cm3) wird unter Rückfluss während 18 Stunden erhitzt. Das Reaktionsgemisch wird wie in Beispiel 1 (L) behandelt, wobei man 4-(6-Aminopurin-9 yl)-4-desoxy-2,3-O-isopropyliden-D-erythronsäure (0,88 g) erhält. Schmelzpunkt 2140C (Zersetzung).
(P) Eine Mischung von 6-Methoxypurin (1,50 g), 2,3-0- Isopropyliden-D-erythronolacton (1,90 g), Natriumcarbonat (0,64 g) und Dimethylformamid (30 cm3) wird während 8 Stunden auf 1400C erhitzt. Das Dimethylformamid wird abdestilliert, worauf man den Rückstand in Wasser auflöst und die wässrige Lösung mit 4,5 cm3 10- %iger Salzsäure versetzt. Das Reaktionsgemisch wird unter vermindertem Druck eingeengt, wobei man ein Öl, bestehend aus 4-(6-Methoxypurin-9-yl)-4- desoxy-2,3-O-isopropyliden-D-erythronsäure, erhält. Dieses Öl wird mit 50 cm3 10-%iger Essigsäure versetzt und das Gemisch während 30 Minuten unter Rückfluss zum Sieden erhitzt. Nach dem Einengen wird der Rückstand in einer kleinen Menge Wasser gelöst.
Die wässrige Lösung wird auf 100 cm3 eines Ionenaustauschharzes, nämlich [OH Typus, Amberlite IRA-400 (Warenzeichen)], adsorbiert und dann mit Wasser, mit 0,05 n-Essigsäure und schliesslich mit 0,5 n Essigsäure gewaschen. Das mittels 0,5-%iger Ameisensäure anfallende Eluat wird eingeengt und mit Äthanol behandelt, wobei man eine Mischung aus 4-(6-Methoxypurin-9-yl)-4desoxy-D-erythronsäure und 4-(6 -Hydroxypurin-9-yl) -4- desoxyerythronsäure erhält. Jede Komponente lässt sich durch Dünnschichtchromatographie abtrennen und identifizieren.
(Q) 6-Octanamidopurin (1,3 g), Kaliumcarbonat (0,55 g), 2,3-O-Isopropyliden-D-erythronolacton (1,18 g) und Dimethylformamid (26 cm3) werden unter Rückfluss während 6 Stunden erhitzt. Hierauf wird das Dimethylformamid abdestilliert und Wasser hinzugegeben. Das unlösliche Material wird abfiltriert und das Filtrat mittels 10-%iger Salzsäure auf einen pH-Wert von 3 eingestellt. Das ausgeschiedene Öl wird mit Äthylacetat extrahiert und die wässrige Schicht eingeengt.
Dann versetzt man den Rückstand mit wenig Wasser. Die wässrige Lösung enthält, nach der Dünnschichtchromatographie bestimmt, 4-(6-Octanoylamidopurin-9-yl)-4-desoxy-2,3 O-isopropyliden-D-erythronsäure. Die aus der wässrigen Lösung ausgeschiedenen Kristalle werden durch Filtrieren gesammelt, wobei man 0,36 g 4-(6-Aminopurin-9-yl)-4-desoxy-2,3-O-isopropyliden-D-erythronsäure vom Smp. 2 140C (unter Zersetzung) erhält.
(R) Ein Gemisch von 2,08 g Adenin, 2,20 g a-Hydroxy-y- butyrolacton und 1,70 g Natriumcarbonat in 40 ml Dimethylformamid wird während 24 Stunden am Rückfluss erhitzt. Das Dimethylformamid wird durch Destillation entfernt und 10 ml Wasser werden dem Rückstand zugegeben. Ungelöstes wird aus der wässrigen Lösung abfiltriert, das Filtrat mit Salzsäure auf ca. pH 3 eingestellt und während 4 Stunden bei Raumtemperatur stehen gelassen. Die ausgeschiedenen Kristalle werden durch Filtrieren abgetrennt, mit Wasser gewaschen und aus 20%iger Essigsäure umkristallisiert. Man erhält 1,0 g 4-(6 Aminopurin-9-yl)-2-hydroxybuttersäure von Smp. 262-2630C (Zers.).
(S) Ein Gemisch von 1,3 g 6-Octanamidopurin, 0,55 g Kaliumcarbonat, 0,77 g 2-Hydroxy-y-butyrolacton und 26 ml Dimethylformamid wird während 6 Stunden am Rückfluss zum Sieden erhitzt. Das Reaktionsgemisch wird wie in Beispiel 1- (R) behandelt und ergibt 0,32 g 4-(6-Aminopurin-9-yl)-2hydroxybuttersäure vom Smp. 260-2610C (Zers.).
(T) Ein Gemisch von 1,5 g Adenin-N-oxid, 1,25 g y-Hydroxybutyrolacton und 1,06 g Natriumcarbonat in 50 ml Dimethylsulfoxid wird unter Rühren während 5 Stunden auf 150oC erhitzt. Das Dimethylsulfoxid wird unter vermindertem Druck abdestilliert und der Rückstand in Wasser gelöst. Die Lösung wird mit verdünnter Salzsäure auf pH 3 eingestellt und ein- geengt. Die ausgeschiedenen Kristalle werden mit Wasser gewaschen und aus Wasser umkristallisiert; man erhält 0,36 g 6-Amino-9-(3-carboxy-2-hydroxypropyl)-purin-1-oxid vom Smp. 2472500C (Zers.).
In ähnlicher Weise gelangt man zu den folgenden Verbindungen: 4-(6-Amino-8-methylpurin-9-yl)-4-desoxy-2,3 -O-isopropyliden-D-erythronsäure [Smp. 2650C (Zersetzung) usw.
Beispiel 2 (A) Eine Lösung von 4-(6-Benzamidopurin-9-yl)-4-desoxy- D-erythronsäure (80 mg) in Methanol (5 cm3), enthaltend 50 mg metallisches Natrium, wird unter Rückfluss während 1 Stunde erhitzt. Dann entfernt man Methanol aus dem Reaktionsgemisch durch Eindampfen unter vermindertem Druck, worauf dtr Rückstand in Wasser gelöst wird. Die wässrige Lösung wird mittels 5 %iger Salzsäure auf einen pH-Wert von 3-4 eingestellt. Die wässrige Schicht wird mit Äther gewaschen und stehen gelassen. Die ausgeschiedenen Kristalle werden durch Filtrieren gesammelt, mit Wasser gewaschen und hierauf getrocknet, wobei man 4-(6-Aminopurin-9-yl)-4desoxy-D-erythronsäure (36 mg) erhält. Schmelzpunkt 2790C (Zersetzung).
(B) Eine Lösung von 4-(6-Aminopurin-9-yl)-4-desoxy-2,3 O-isopropyliden-D-erythronsäure (150 mg) wird in 3 cm3 10%iger Ameisensäure auf einem Wasserbade während 30 Minuten erhitzt. Das Reaktionsgemisch wird unter vermindertem Druck eingeengt und dann mit Wasser versetzt. Die ausgeschiedenen Kristalle werden durch Filtrieren gesammelt, mit Wasser gewaschen und hierauf getrocknet, wobei man Aminopurin-9-yl)-4-desoxy-D-erythronsäure (130 mg) erhält.
Schmelzpunkt 2790C (Zersetzung).
(C) 4-(6-Amino-8-methylpurin-9-yl)-4-desoxy-2,3-Oisopropyliden-D-erythronsäure (400 mg) wird in 10 cm3 20 %iger Essigsäure unter Erhitzen gelöst. Die Lösung wird während 30 Minuten unter Rückfluss erhitzt, hierauf mit Kohlen behandelt und dann filtriert. Das Filtrat wird abkühlen gelassen, worauf man die ausgeschiedenen Kristalle durch Filtrieren sammelt und sie mit Wasser wäscht. Auf diese Weise erhält man Kristalle und zwar (232 mg) von 4-(6-Amino-8methylpurin-9-yl)-4-desoxy-D-erythronsäure. Schmelzpunkt 281 < (Zersetzung) (umkristallisiert aus Wasser).
UV-Spektrum: 3fx 263 mll (e = 14.300).
(D) 6-Amino-9-(3-carbocy-2,3 -O-isopropyliden-dihydroxy- propyl)-purin-1-oxyd (300 mg) wird in 10 cm3 10%iger Essigsäure suspendiert. Die Suspension wird während 30 Minuten unter Rückfluss erhitzt. Dann wird eine kleine Menge Kohle in Pulverform dem Reaktionsgemisch zugegeben und das Ganze filtriert. Das Filtrat wird unter vermindertem Druck eingeengt.
Die ausgeschiedenen Kristalle werden durch Filtrieren gesammelt und aus Wasser umkristallisiert, wobei man 6-Amino-9 (3-carboxy-2,3-dihydroxypropyl)-purin-1-oxyd (165 mg) erhält. Schmelzpunkt 275C (Zersetzung).
(E) Eine Suspension von 4-(6-Amino-8-mercaptopurin-9yl)-4-desoxy-2,3-O-isopropyliden-D-erythronsäure (300 mg) in 20 cm3 10%iger Essigsäure wird während 2 Stunden unter Rückfluss erhitzt. Das Reaktionsgemisch wird mit Kohlepulver behandelt und in noch heissem Zustand filtriert. Das Filtrat wird unter vermindertem Druck eingeengt und der Rückstand mit Wasser versetzt. Die ausgeschiedenen Kristalle werden durch Filtrieren gesammelt und mit Methanol gewaschen, wobei man 4-(6-Amino-8-mercaptopurin-9-yl)-4-desoxy-Derythronsäure (220 mg) erhält. Schmelzpunkt 262-2680C (Zersetzung).
UV-Spektrum: hmX 240 my (E = 19.000),
UV-Spektrum: kH2a 288 mp (E = 25.500).
UV-Spektrum: kH2a 306 mF (E = 27.300).
(F) Ein Gemisch von 4-(6-Aminopurin-9-yl)-4-desoxy-2,3- O-benzyliden-D-erythronsäure (1,00 g) und 30 cm3 10 %iger Essigsäure wird unter Rückfluss während 1 Stunde erhitzt. Das Reaktionsgemisch wird mit Kohlepulver behandelt und filtriert. Das Filtrat wird unter vermindertem Druck eingedampft und der Rückstand mit Methanol gewaschen, wobei man rohe Kristalle in einer Menge von 285 mg erhält. Es handelt sich um 4- (6-Aminopurin-9-yl) -4-desoxy-D -erythronsäure vom Schmelzpunkt 279C (Zersetzung) (umkristallisiert aus Wasser in noch heissem Zustande bei Behandlung mit Kohlepulver).
W-Spektrum: 3aOx 263 m F.
(G) 180 mg 4-(6-Aminopurin-9-yl)-4-desoxy-2,3-O-diacetyl-D-erythronsäure in 5 cm3 ln-Natriumhydroxydlösung werden bei Zimmertemperatur während einer Stunde gerührt.
Das Reaktionsgemisch wird hierauf mittels 5 cm3 ln-Salzsäure neutralisiert und auf ungefähr die Hälfte des Volumens unter vermindertem Druck eingeengt. Die ausgeschiedenen Kristalle werden durch Filtrieren gesammelt und mit Methanol gewaschen, wobei man 95 mg 4-(6-Aminopurin-9-yl)-4-desoxy-D erythronsäure vom Smp. 279C (unter Zersetzung) erhält.
(H) 0,70 g 4-(6-Äthylaminopurin-9-yl)-4-desoxy-2,3-O- isopropyliden-D-erythronsäure in 50 cm3 10-%iger Essigsäure werden während 30 Minuten unter Rückfluss erhitzt. Das Reaktionsgemisch wird unter vermindertem Druck eingeengt und auf einem Ionenaustauschharz, nämlich [ Amberlite IRA400 (Warenzeichen)], adsorbiert. Das Harz wird mit einer 0,05 n-Essigsäurelösung gewaschen und mit 0,5 n-Essigsäure eluiert. Das Eluat wird unter vermindertem Druck eingeengt, wobei man 0,56 g 4-(6-Äthylaminopurin-9-yl)-4-desoxy-D- erythronsäure vom Smp. 242-2430C (unter Zersetzung) (umkristallisiert aus wasserhaltigem Äthanol) erhält.
(I) 450 mg 4-(6-Aminopurin-9-yl)-4-desoxy-2,3-O-isopropyli den-D-threonsäure in 30 cm3 20-%iger Essigsäure werden während 2 Stunden unter Rückfluss erhitzt. Nach dem Kühlen werden die ausgeschiedenen Kristalle gesammelt und mit Wasser und Aceton gewaschen, wobei man 350 mg 4-(6 Aminopurin-9-yl)-4-desoxy-D-threonsäure vom Smp. 297C (unter Zersetzung) erhält.
In ähnlicher Weise erhält man die folgenden Verbindungen: (J) 4-(6-Aminopurin-9-yl)-2-hydroxybuttersäure wurde durch Hydrolysieren von 4-(6-Acetamidopurin-9-yl)-2-hydro- xybuttersäure erhalten.
(K) 4- (6 -Aminopurin-9 -yl) -2-hydroxybuttersäure wurde durch Hydrolysieren von 4-(6-Aminopurin-9-yl)-2-acetoxy- buttersäure erhalten.
The present invention relates to a process for the preparation of new purines of the formula:
EMI1.1
where AN or N # O, R1 is hydrogen, alkoxy with 1-8 carbon atoms (e.g. methoxy, ethoxy, propoxy, isopropoxy), amino, alkylamino with 1-8 carbon atoms (e.g. methylamino, ethylamino, propylamino), dialkylamino with 1 -8 carbon atoms in each alkyl group (e.g. dimethylamino, diethylamino, methylethylamino), aralkylamino with 1-8 carbon atoms in the alkyl group, e.g. B. Phenylalkylamino with 1-8 carbon atoms in the alkyl group (e.g.
Benzylamino, phenylethylamino) or acylamino, e.g. B. alkanoylamino with 1-8 carbon atoms (e.g. acetylamino, propionylamino, octanoylamino or benzoylamino), R2 and R3, which can be the same or different, hydrogen, amino, alkyl with 1-8 carbon atoms (e.g. methyl, Ethyl, propyl, isopropyl) or aryl (e.g. phenyl) and R4 alkylene with 2-8 (preferably 2-6) carbon atoms (e.g.
Ethylene, trimethylene, propylene), which is substituted by one or more hydroxyl groups (although no hydroxyl groups are bonded to the carbon atom adjacent to the ring nitrogen atom), which is replaced by one or more acyl radicals (e.g. acetyl, propionyl) or benzoyl, alkyl radicals with 1-8 carbon atoms (e.g. methyl, ethyl, propyl, isopropyl), aralkyl radicals with 1-8 carbon atoms in the alkyl radical, e.g. B. phenylalkyl with 1-8 carbon atoms in the alkyl radical (e.g. benzyl, phenylethyl) or, if a pair of hydroxyl groups is present on the alkylene group, by alkylidene with 1-8 carbon atoms (e.g. ethyli, propylidene, Isopropylidene) or aralkylidene with 1-8
Carbon atoms in the alkylidene radical, e.g. B. Phenylalkyli with 1-8 carbon atoms in the alkylidene radical (z. B.
Benzylidene) can be protected, mean, and salts of these compounds such. B. of metal salts (such as sodium salts, potassium salts, calcium salts), ammonium salts, amine salts (such as dimethylamine salts, trimethyl amine salts) and acid addition salts, such as. B. organic or inorganic acid addition salts (such as the
Hydrochloride, hydrobromide, sulfate, nitrate, phosphate,
Tartrates, citrates).
In the following, lower aliphatic radicals, such as alkyl or alkylene, are understood to mean those with 1-8 carbon atoms, unless otherwise stated.
Specific examples of purine compounds of formula (I) are as follows:
4- (purin-9-yl) -4-deoxy-D-erythronic acid, 4- (2-amino purin-9-yl) -4-deoxy-D-erythronic acid, 4- (8-aminopurin-9-yl) -4-deoxy-D-erythronic acid, 4- (6-aminopurin-9-yl) -
4-deoxy-D-erythronic acid, 4- (6-aminopurin-9-yl) -4-deoxy-2,3-0,0- (lower) -alkylidene-D-erythronic acids [e.g.
4- (6-aminopurin-9-yl) -4-deoxy-2,3-0,0-ethylidene-derythronic acid, 4- (6-aminopurin-9-yl) -4-deoxy-2,3 -0.0 isopropylidene-D-erythronic acid], 4- (6-aminopurin-9-yl)
4-deoxy-2,3-0,0-aryl (lower) alkylidene-D-erythronic acids [e.g.
B. 4- (6-aminopurin-9-yl) -4-deoxy-2,3-0,0-benzylidene-D-erythronic acid], 4- (6-aminopurin-9-yl) -4-deoxy-2,3 -0,0-di- (lower) -alkanoyl-D-erythronic acid [e.g. 4- (6-aminopurin-9-yl) -4-deoxy-2,3-0,0-diacetyl D-erythronic acid, 4- ( 6-aminopurin-9-yl) -4-deoxy-2,3-0,0dipropionyl-D-erythronic acid], 4- [6-amino-8- (lower) alkylpurin0-9-yl] -4-deoxy-D -erythronic acids [e.g. 4 (6-amino-8-methylpurin-9-yl) -4-deoxy-D-erthronic acid, 4- (6-amino-8-ethylpurin-9-yl) -4-deoxy-D-erythronic acid ], 4-6-Amino-8- (lower) -alkylpurin-9-yl] -4-deoxy-2,3-0.0, - (lower) -alkylidene-D-erythronic acids [e.g.
B. 4- (6-Amino-8-methylpurin-9-yl) -4-deoxy-2,3-O-isopropylidene D-erythronic acid, 4- (6-amino-8-ethylpurin-9-yl) -4-deoxy -2,3-O-isopropylidene-D-erythronic acid], 4- (6,8 diaminopurin-9-yl) -4-deoxy-D-erythronic acid, 4- [2 (lower) -alkyl-6-aminopurine-9 -yl] -4-deoxy-D-erythronic acids [e.g. 4- (2-methyl-6-aminopurin-9-yl) -4-deoxy-derythronic acid], 4- (6,2-diaminopurin-9-yl) - 4-deoxy-derythronic acid, 4- [6- (lower) -alkylaminopurin-9-yl] -4-deoxy-D-erythronic acids [e.g. 4- (6-methylaminopurin9-yl) -4-deoxy-D-erythronic acid, 4 - (6-Ethylaminopurin9-yl) -4-deoxy-D-erythronic acid, 4- (6-butylaminopurin9-yl) -4-deoxy-D-erythronic acid, 4- [6- (lower) -alkylaminopurin-9-yl] -4-deoxy-2,3-O- (lower) -alkylidene-derythronic acids [e.g. 4- (6-ethylaminopurin-9-yl) -4-deoxy-2,3-O-isopropylidene-doythronic acid],
4- [6-Di (lower) -alkylaminopurin-9-yl] -4-deoxy-D-erythronic acids [eg 4- (6-dimethylaminopurin-9-yl) -4-deoxy-derythronic acid, 4- (6-diethylaminopurine -9-yl) -4-deoxy D-erythronic acid], 4- [6-phenyl- (lower) -alkylaminopurin9-yl] -4-deoxy-D-erythronic acids [e.g. 4- (6-benzylaminopurin-9-yl) -4-deoxy-D-erythronic acid, 4- (6-phenylethylaminopurin-9-yl) -4-deoxy-D-erythronic acid], 4- (6-benzoylaminopurin-9-yl) -4-deoxy-D-erythronic acid, 4- [6- (lower) alkioxypurin-9-yl] -4-deoxy-D-erythronic acids [e.g. 4 (6-methpoxypurin-9-yl) -4-deoxy-D-erythronic acid], 4 [6- (lower ) -Alkanoylaminopurin-9-yl] -4-deoxy-derythronic acids [e.g. 4- (6-acetylaminopurin-9-yl) 4-deoxy-D-erythronic acid, 4- (6-butyrylaminopurin-9-yl) 4-deoxy- D-erythronic acid], 3- (6-aminopurin-9-yl) -2-hydroxy-3-hydroxymethylpropionic acid, 6-amino-9- (3carboxy-2,3-dihydroxypropyl) -purine-1-oxide, 6-amino-9 (3-carboxy-2,3-isopropylidenoxypropyl) -purine-1-oxide,
4- (6-aminopurin-9-yl) -4-deoxy-L-threonic acid, 4- (6-aminopurin-9-yl) -2-hydroxybutyric acid, etc.
According to the present invention, the purine compounds of the formula (I) are prepared by adding a compound of the formula:
EMI1.2
wherein A, R1, R2 and R3 have the above meanings, with a lactone of the formula:
EMI1.3
wherein R4 has the above meaning.
The reaction is generally carried out in a solvent, such as. B. dimethylformamide, Dimethylsulfoxyd¯Ïder xylene, in the presence of a condensing agent, such as. B.
an alkali metal such as B. lithium, sodium or potassium, an alkali metal hydride, such as. B. lithium hydride, sodium hydride or potassium hydride, an alkaline earth metal hydride, such as. B. calcium hydride or barium hydride, an alkali metal carbonate, such as. B. sodium carbonate or potassium carbonate, an alkaline earth metal carbonate, such as. B. calcium carbonate or magnesium carbonate, an alkali metal bicarbonate, such as. B. sodium bicarbonate or potassium bicarbonate, an Erdal Kalimetallbicarbonat such. B. calcium bicarbonate or
Magnesium bicarbonate, an alkali metal hydroxide, e.g. B.
Sodium hydroxide or potassium hydroxide, an alkaline earth metal hydroxide, such as. B. calcium hydroxide or Magnesiumhy droxyd, an alkali metal fluoride such. B. cesium fluoride,
Potassium fluoride or lithium fluoride, or an alkali metal alcoholate, such as. B. sodium ethylate or potassium tert-butoxide, at a temperature between room temperature and the
Boiling point of the reaction medium.
The purine compounds of the formula (II) used as starting materials are known compounds or can be obtained in a conventional manner.
If the hydroxyl group (s) in R4 is replaced by lower alkyl,
Aryl-lower alkyl, lower alkylidene or aryl-lower alkylidene can be the resulting compound of the formula
If desired, hydrolyzed by treatment with an acidic substance, and if the hydroxyl group (s) in
R4 are protected by acyl and / or R1 is acylamino, the resulting compound of the formula I can, if desired, be hydrolyzed by treatment with an acidic or basic substance; the corresponding compounds with free hydroxyl and / or amino groups are obtained.
The purine compounds of the formula (I) obtained above can be converted into their salts in a manner known per se, for. B. in metal salts, ammonium salts, amino salts and acid addition salts are converted.
The purine compounds of the formula (I) and their salts generally have a pronounced hypocholesterolemic effect. The test results with the standard connection, i.e. H. with 4- (6-aminopurin-9-yl) -4-deoxy-D-erythronic acid are found below.
1. Test method
Groups of 5-week-old rats from the Wistar strain (body weight 74 g on average), each group consisting of 10 animals, were fed for 3 days with fatty feed containing 2% cholesterol, 1% cholic acid, 12% hardened oil, 8% fish extract and some other materials while simultaneously administering the residual compound once daily; the animals were left to starve overnight and killed the next morning. The serum cholesterol concentration was determined by the method of Zak-Henly.
The test compound was administered in an aqueous solution acidified with hydrochloric acid or in the form of an aqueous suspension with carboxymethyl cellulose. For control purposes, thyroxine was administered orally at a dose of 0.05 mg per animal.
2. Test results Method of administration Dose (mg / rat) Serum cholesterol mg / dl + S.E. Inhibition% Intraperitoneal 0.5 337 i 48.8 37.4 Intraperitoneal 0.2 338 + 24.9 37.2 Oral 0.5 249 1 26.6 53.7 Oral 0.2 271 1 28.0 49.6 Thyroxine 0.05 284 + 28.4 47.2 blank value 538 1 48.1
Other connections, such as B. 4- (6-Benzoyl-aminopurin 9-yl) -4-deoxy-D-erythronic acid, 4- (6-amino-8-methylpurin-9-yl) -4-deoxy-D-erythronic acid, 4- ( 6-ethyl-aminopurin-9 yl) -4-deoxy-D-erythronic acid, 6-amino-9- (3-carbocy-2,3-dihydroxypropyl) -purine-1-oxide and its salts show a similar effect.
Furthermore, the toxicity of the purine compounds of the formula (I) and their salts is extremely low. For example, the acute toxicity of 4- (6-aminopurin-9-yl) -4-deoxy-D -erythronic acid in rats and mice is as follows:
Animal Route of Administration LDso (mg / kg)
Mouse subcutaneous 2700
Rat intraperitoneally 1000-2000
Rat oral 4000
Thus, the purine compounds of formula (I) and their non-toxic salts are particularly valuable as therapeutic agents for the treatment of arteriosclerosis.
The purine compounds of the formula (I) and their non-toxic salts are resistant to heat and light and can be administered in a conventional manner, using the usual types of dosage forms or adding the usual pharmaceutical carriers in order to produce a hypocholesterolemic effect in humans. They can be used in the form of pharmaceutical preparations to which a pharmaceutical, organic or inorganic carrier material is added which is suitable for enteral or parenteral administration.
Oral administration through the use of tablets, capsules or in liquid form, such as. B. suspensions, solutions or emulsions, or the injection application are particularly advantageous. If it is desired to produce tablets, the usual binders and disintegrants, as used in the therapeutic dosage forms, can be added. Such binders are, for example, glucose, lactose, acacia, gelatine, mannitol, starch paste, magnesium trisilicate and talc. Examples of disintegrants are corn starch, keratin, colloidal silicon dioxide and potato starch. If they are to be administered as liquids, the usual liquid carriers can be added.
The dosage or the therapeutically effective amount of purine compounds of the formula (I) and their salts for humans can vary within wide limits and can, for. B. between about 10 and 1000 mg per day for adults. The upper limit value is only influenced by the desired efficiency and economic considerations. For oral administration you will use about 5-30 mg of active ingredient per unit. In the case of injections, the active substance can be used in an amount of 110 mg per unit. Of course, the dosage of the particular therapeutic agent to be used can vary widely, which will depend primarily on the age of the patient and the desired degree of therapeutic effectiveness.
The term pharmaceutical carrier is intended to encompass non-therapeutically effective materials which are usually used in dosage forms and which consist of fillers, diluents, binders, lubricants, disintegrants and solvents. Of course it is possible to use the new therapeutic materials, i. H. the neat compounds without administering any pharmaceutical carrier material.
The invention is illustrated by the following examples.
Example 1 (A) To a solution of adenine (1.35 g) in dimethyl sulfoxide (25 cm3) is added 0.48 g of sodium hydride. The mixture is stirred at room temperature for 1 hour and then heated to 50 ° C. over 30 minutes.
2,3-O-isopropylidene-D-erythronolactone (1.58 g) is added to the mixture, and the reaction mixture is stirred at 120 ° C. for 20 hours. The dimethyl sulfoxide is distilled off from the reaction mixture under reduced pressure and the residue is dissolved in water. The aqueous solution is washed with ether and the aqueous layer is adjusted to a pH value of 3 with hydrochloric acid and then left to stand. The precipitated crystals are collected by filtration and washed with water, whereby aminopurin-9-yl) -4-deoxy-2,3-O-isopropylidene-D-erythronic acid is obtained. On the other hand, the filtrate is concentrated under reduced pressure and the residue is treated with water to obtain the same substance as the above. Yield: 56%; Melting point 214C (decomposition) (recrystallized from 50% ethanol).
(B) A solution of 2.7 g of adenine in 45 cm3 of dimethylformamide is mixed with 0.96 g of sodium hydride. The reaction mixture is stirred at room temperature for 1 hour and then for 30 minutes at 50 ° C. 2,3-O-isopropylidene-D-erythronolactone (3.15 g) is added to this mixture. The resulting mixture is then refluxed for 8 hours. The dimethylformamide is then evaporated off under reduced pressure and the residue is dissolved in water. The aqueous solution is washed with ether and neutralized with hydrochloric acid. The solution is concentrated under reduced pressure. The residue is treated with water and the precipitated crystals are collected by filtration and dried, giving 4- (6-amino purin-9-yl) -4-deoxy-2,3 -O -isopropylidene-D -erythronic acid (3, 4 g).
Melting point 214C (decomposition). On the other hand, the filtrate is concentrated under reduced pressure and the residue is washed with water to obtain the same substance in an amount of 0.44 g. Yield: 65.5%.
(C) A solution of adenine (1.35 g), 2,3-O-isopropylidene-derythronolactone (1.58 g) and 0.7 g of potassium carbonate in 20 cm 3 of dimethylformamide is refluxed for 6 hours. The reaction mixture is treated as in Example 1 (B), using 4- (6-aminopurin-9-yl) -4-deoxy-2,3 O-isopropylidene-D-erythronic acid (0.88 g) with a melting point of 2140C ( Decomposition). Yield: 30Q (D) A suspension of adenine-1-oxide (1.51 g), 2.3 isopropylidene-D-erythronolactone (2.21 g) and potassium carbonate (1.38 g) in dimethylformamide (50 cm3) is heated under reflux with stirring for 8 hours. The dimethylformamide is removed from the reaction mixture by distillation under reduced pressure. The residue is dissolved in a small amount of water and the insoluble substance is filtered off.
The filtrate is adjusted to a pH of 3 using 5% hydrochloric acid. The precipitated crystals are collected by filtration, whereby 6 amino-9- (3-carboxy-2,3-isopropylidene-oxypropyl) -purine-1-oxide (0.40 g), melting point 270OC (decomposition) (recrystallized from methanol ) contains.
(E) A suspension of adenine-1-oxide (1.51 g), 2,3-isopropylidene-D-erythronolactone (2.21 g) and sodium carbonate (1.06 g) in dimethylformamide (50 cm3) is added during 12 Heated under reflux and with stirring for hours. The reaction mixture is then treated in the same manner as in Example 1 (D), 6-Amino-9- (3-carboxy-2,3-isopropylidenoxypropyl) -purine-1-oxide (1.10 g) receives. Melting point 2700C (decomposition) (recrystallized from methanol).
(F) A suspension of adenine-1-oxide (1.51 g), 2.3 isopropylidene-D-erythronolactone (2.21 g) and sodium carbonate (1.06 g) in dimethyl sulfoxide (50 cm3) is added for 6 hours heated to 160 C. The reaction mixture is treated in the same manner as in Example 1 (D) to give 6 amino-9- (3-carboxy-2,3-isopropylidene-oxypropyl) -purine-1oxide (1.30 g). Melting point 2700C (decomposition) (recrystallized from methanol).
(G) A suspension of aderiine-1-oxide (1.51 g), 2,3-isopropylidene-D-erythronolactone (2.21 g) and sodium carbonate (1.06 g) in dimethylacetamide (50 cm3) is added with stirring heated to 1600C for 12 hours. The reaction mixture is treated in the same manner as in Example 1 (D) to give 6-amino-9- (3-carboxy-2,34sopropylidenoxy-propyl) -purine-1-oxide (0.80 g). Melting point 2700C (decomposition) (recrystallized from methanol).
(H) A mixture of N-ethyladenine (1.63 g), 2,3-0-isopropylidene-O-erythronolactone (2.20 g) and sodium carbonate (1.06 g) in dimethylformamide (32 cm3) is refluxed heated for 24 hours. The dimethylformamide is distilled off and the residue is mixed with water. An insoluble substance which forms is filtered off, while the filtrate is neutralized with 10% hydrochloric acid (7.3 cm3) and concentrated. In this way, 4- (6-ethylaminopurin-9-yl) -4-deoxy-2,3-O-isopropylidene-D-erythronic acid is obtained.
This substance is then processed further in order to convert it into ethylaminopurin-9-yl) 4-deoxy-D -erythronic acid. 5) 0 cm3 of 10% acetic acid are added to this substance. The reaction mixture is then refluxed for 30 minutes and concentrated. The concentrate is adsorbed on an ion exchange resin [OH type IRA 400 (goods draw) 1, the resin is then washed with 0.05N acetic acid and eluted with 0.5N acetic acid. The eluate is concentrated, giving 4- (6-ethylaminopurin-9-yl) -4-deoxy-D-erythronic acid ((), 5 6g, melting point 242-2430C (decomposition) (recrystallized from aqueous ethanol).
UV spectrum: BR2O 269 mF (E = 17,400).
(1) A mixture of adenine (1.35 g), benzylidene-erythronolactone (2.89 g) and sodium carbonate (1.06 g) in dimethylformamide (50 cm3) is heated with stirring and under reflux for 19 hours. The dimethylformamide is distilled off under reduced pressure. The residue is dissolved in 20 cm3 of water and filtered off. The filtrate is adjusted to a pH of 3 using 20 cm3 of 1N hydrochloric acid. The precipitated crystals are collected by filtration, treated with carbon powder and recrystallized twice from methanol while still hot, giving 4- (6-aminopurin-9-yl) -4-deoxy-2,3-O-benzylidene-D-erythronic acid . Melting point 198-199oC (decomposition).
UV spectrum: Bm2l 261 m.
(J) A mixture of adeni; n-N-oxide (1.51 g), benzylidene erythronolactone (2.89 g) and sodium carbonate (1.06 g) and dimethylformamide (50 cm3) is stirred and refluxed for 19 hours. The dimethylformamide is distilled off under reduced pressure and the residue is dissolved in 2u> cm3 of water. The solution is filtered and the filtrate is neutralized with 20 cm3 of 1N hydrochloric acid.
The precipitated crystals are collected by filtration and recrystallized from methanol while still hot, giving 4- (6-aminopurin-9-yl) -4-deoxy-2,3-0 benzylidene-D-erythronic acid. Melting point 198-199 C (decomposition).
UV spectrum: Am2a 261 my.
(K) A mixture of adenine (1.35 g), dimethylformamide (27 cm3) and potassium hydroxide (0.84 g) is heated to 120 ° C. for 30 minutes and then to 1400 ° C. for 10 minutes. 2,3-O-isopropylidene-derythronolactone (1.90 g) in dimethylformamide (5 cm3) is added to this mixture and the reaction mixture is refluxed for 18 hours. The dimethylformamide is distilled off, water is added to the residue and the insoluble substance is removed. The aqueous layer is adjusted to pH 3 with 10% hydrochloric acid and concentrated. A small amount of water is then added to the residue and the precipitated crystals are collected by filtration. In this way, 4- (6-aminopurin-9-yl) 4-deoxy-2,3-O-isopropylidene-D-erythronic acid (0.73 g) is obtained.
Melting point 2140C (decomposition).
(L) A mixture of adenine (1.35 g), dimethylformamide (20 cm3), 2,3-O-isopropylidene-D-erythronolactone (1.58 g) and cesium fluoride (0.75 g) is added for 23 hours Heated to reflux. The dimethylformamide is evaporated under reduced pressure and the residue dissolved in water and insoluble material removed. The aqueous solution is adjusted to a pH of 3 using 10% hydrochloric acid. The solution is concentrated under reduced pressure.
The residue is treated with water and the precipitated crystals are collected by filtration, whereby 4- (6-aminopurin-9-yl) -4-deoxy-2,3-O-isopropylidene-D-erythronic acid (0.4 g) receives. Melting point 2140C (decomposition).
(M) A mixture of adenine (1.35 g), 2,3-O-isopropylidene-D-erythronolactone (2.20 g), potassium tert-butoxide (1.68 g) and dimethylformamide (27 cm3) is refluxed for 24 hours. The reaction mixture is treated in the same manner as in Example 1 (L) to give (6-aminopurin-9-yl) -4-deoxy-2,3-O-isopropylidene-D -erythronic acid (1.41 g) Melting point 2140C (decomposition).
(N) A mixture of 6-benzamidopurme (2.40 g), 2,3-0-isopropylidene-D-erythronolactone (3.21 g) and sodium carbonate (1.06 g) in dimethylformamide (30 cm3) is added for 20 Stirred for hours at 120-1250C. The dimethylformamide is removed by filtration and the residue dissolved in a small amount of water. The aqueous solution is adjusted to a pH of 3 using dilute hydrochloric acid, whereupon the precipitated crystals are filtered off. The filtrate is concentrated under reduced pressure, the concentrate is dissolved in 50 cm3 of 10% acetic acid and the solution is refluxed for 2 hours. The reaction mixture is treated with carbon powder and concentrated under reduced pressure. The concentrate is dissolved in a little water.
As thin-layer chromatography shows, the aqueous solution contains 4- (6-benzamidopurin-9-yl) -4-deoxy-2,3 O-isopropylidene-D-erythronic acid. The crystals precipitated from the aqueous solution are collected by filtration and recrystallized from water, giving 0.50 g of 4- (6-aminopurin-9-yl) -4-deoxy-D-erythronic acid with a melting point of 279 C (with decomposition) .
(O) A solution of adenine (1.35 g), 2,3-O-isopropylidene-D-erythronolactone (2.4 g) and sodium bicarbonate (1.26 g) in dimethylformamide (27 cm3) is refluxed heated for 18 hours. The reaction mixture is treated as in Example 1 (L) to give 4- (6-aminopurin-9 yl) -4-deoxy-2,3-O-isopropylidene-D-erythronic acid (0.88 g). Melting point 2140C (decomposition).
(P) A mixture of 6-methoxypurine (1.50 g), 2,3-0-isopropylidene-D-erythronolactone (1.90 g), sodium carbonate (0.64 g) and dimethylformamide (30 cm3) is added during 8 Heated to 1400C for hours. The dimethylformamide is distilled off, whereupon the residue is dissolved in water and the aqueous solution is mixed with 4.5 cm3 of 10% hydrochloric acid. The reaction mixture is concentrated under reduced pressure, whereby an oil consisting of 4- (6-methoxypurin-9-yl) -4-deoxy-2,3-O-isopropylidene-D-erythronic acid is obtained. This oil is mixed with 50 cm3 of 10% acetic acid and the mixture is refluxed for 30 minutes. After concentration, the residue is dissolved in a small amount of water.
The aqueous solution is adsorbed on 100 cm 3 of an ion exchange resin, namely [OH type, Amberlite IRA-400 (trade mark)], and then washed with water, with 0.05 N acetic acid and finally with 0.5 N acetic acid. The eluate obtained by means of 0.5% formic acid is concentrated and treated with ethanol, a mixture of 4- (6-methoxypurin-9-yl) -4-deoxy-D-erythronic acid and 4- (6 -hydroxypurin-9- yl) -4- deoxyerythronic acid. Each component can be separated and identified by thin layer chromatography.
(Q) 6-Octanamidopurine (1.3 g), potassium carbonate (0.55 g), 2,3-O-isopropylidene-D-erythronolactone (1.18 g) and dimethylformamide (26 cm3) are refluxed for 6 hours heated. The dimethylformamide is then distilled off and water is added. The insoluble material is filtered off and the filtrate is adjusted to pH 3 using 10% hydrochloric acid. The oil which has separated out is extracted with ethyl acetate and the aqueous layer is concentrated.
A little water is then added to the residue. The aqueous solution contains, determined by thin-layer chromatography, 4- (6-octanoylamidopurin-9-yl) -4-deoxy-2,3 O-isopropylidene-D-erythronic acid. The crystals separated out from the aqueous solution are collected by filtration, 0.36 g of 4- (6-aminopurin-9-yl) -4-deoxy-2,3-O-isopropylidene-D-erythronic acid having a melting point of 2,140 ° C. (with decomposition).
(R) A mixture of 2.08 g of adenine, 2.20 g of a-hydroxy-y-butyrolactone and 1.70 g of sodium carbonate in 40 ml of dimethylformamide is refluxed for 24 hours. The dimethylformamide is removed by distillation and 10 ml of water are added to the residue. Undissolved material is filtered off from the aqueous solution, the filtrate is adjusted to about pH 3 with hydrochloric acid and left to stand for 4 hours at room temperature. The precipitated crystals are separated off by filtration, washed with water and recrystallized from 20% acetic acid. 1.0 g of 4- (6 aminopurin-9-yl) -2-hydroxybutyric acid of melting point 262-2630C (decomp.) Are obtained.
(S) A mixture of 1.3 g of 6-octanamidopurine, 0.55 g of potassium carbonate, 0.77 g of 2-hydroxy-γ-butyrolactone and 26 ml of dimethylformamide is refluxed for 6 hours. The reaction mixture is treated as in Example 1- (R) and gives 0.32 g of 4- (6-aminopurin-9-yl) -2-hydroxybutyric acid of m.p. 260-2610C (dec.).
(T) A mixture of 1.5 g of adenine N-oxide, 1.25 g of γ-hydroxybutyrolactone and 1.06 g of sodium carbonate in 50 ml of dimethyl sulfoxide is heated to 150 ° C. for 5 hours with stirring. The dimethyl sulfoxide is distilled off under reduced pressure and the residue is dissolved in water. The solution is adjusted to pH 3 with dilute hydrochloric acid and concentrated. The precipitated crystals are washed with water and recrystallized from water; 0.36 g of 6-amino-9- (3-carboxy-2-hydroxypropyl) -purine-1-oxide of melting point 2472500C (decomp.) are obtained.
The following compounds are obtained in a similar manner: 4- (6-Amino-8-methylpurin-9-yl) -4-deoxy-2,3-O-isopropylidene-D-erythronic acid [mp. 2650C (decomposition) etc.
Example 2 (A) A solution of 4- (6-benzamidopurin-9-yl) -4-deoxy-D-erythronic acid (80 mg) in methanol (5 cm3) containing 50 mg of metallic sodium is refluxed for 1 hour heated. Methanol is then removed from the reaction mixture by evaporation under reduced pressure, whereupon the residue is dissolved in water. The aqueous solution is adjusted to a pH of 3-4 using 5% hydrochloric acid. The aqueous layer is washed with ether and allowed to stand. The precipitated crystals are collected by filtration, washed with water and then dried to give 4- (6-aminopurin-9-yl) -4-deoxy-D-erythronic acid (36 mg). Melting point 2790C (decomposition).
(B) A solution of 4- (6-aminopurin-9-yl) -4-deoxy-2,3 O-isopropylidene-D-erythronic acid (150 mg) is in 3 cm3 of 10% formic acid on a water bath for 30 minutes heated. The reaction mixture is concentrated under reduced pressure and then treated with water. The precipitated crystals are collected by filtration, washed with water and then dried to obtain aminopurin-9-yl) -4-deoxy-D-erythronic acid (130 mg).
Melting point 2790C (decomposition).
(C) 4- (6-Amino-8-methylpurin-9-yl) -4-deoxy-2,3-isopropylidene-D-erythronic acid (400 mg) is dissolved in 10 cm 3 of 20% acetic acid with heating. The solution is refluxed for 30 minutes, then treated with charcoal and then filtered. The filtrate is allowed to cool and the precipitated crystals are collected by filtration and washed with water. In this way, crystals (232 mg) of 4- (6-amino-8methylpurin-9-yl) -4-deoxy-D-erythronic acid are obtained. Melting point 281 <(decomposition) (recrystallized from water).
UV spectrum: 3fx 263 ml (e = 14,300).
(D) 6-Amino-9- (3-carbocy-2,3-O-isopropylidene-dihydroxypropyl) -purine-1-oxide (300 mg) is suspended in 10 cm3 of 10% acetic acid. The suspension is refluxed for 30 minutes. A small amount of powdered charcoal is then added to the reaction mixture and the whole is filtered. The filtrate is concentrated under reduced pressure.
The precipitated crystals are collected by filtration and recrystallized from water to give 6-amino-9 (3-carboxy-2,3-dihydroxypropyl) purine-1-oxide (165 mg). Melting point 275C (decomposition).
(E) A suspension of 4- (6-amino-8-mercaptopurine-9yl) -4-deoxy-2,3-O-isopropylidene-D-erythronic acid (300 mg) in 20 cm3 of 10% acetic acid is used for 2 hours heated under reflux. The reaction mixture is treated with carbon powder and filtered while it is still hot. The filtrate is concentrated under reduced pressure and water is added to the residue. The precipitated crystals are collected by filtration and washed with methanol, whereby 4- (6-amino-8-mercaptopurin-9-yl) -4-deoxy-derythronic acid (220 mg) is obtained. Melting point 262-2680C (decomposition).
UV spectrum: hmX 240 my (E = 19,000),
UV spectrum: kH2a 288 mp (E = 25,500).
UV spectrum: kH2a 306 mF (E = 27,300).
(F) A mixture of 4- (6-aminopurin-9-yl) -4-deoxy-2,3- O-benzylidene-D-erythronic acid (1.00 g) and 30 cm3 of 10% acetic acid is refluxed during Heated for 1 hour. The reaction mixture is treated with carbon powder and filtered. The filtrate is evaporated under reduced pressure and the residue is washed with methanol to obtain crude crystals in an amount of 285 mg. It is 4- (6-aminopurin-9-yl) -4-deoxy-D -erythronic acid with a melting point of 279C (decomposition) (recrystallized from water while it is still hot when treated with carbon powder).
W spectrum: 3aOx 263 m F.
(G) 180 mg of 4- (6-aminopurin-9-yl) -4-deoxy-2,3-O-diacetyl-D-erythronic acid in 5 cm3 of 1N sodium hydroxide solution are stirred at room temperature for one hour.
The reaction mixture is then neutralized using 5 cm3 of 1N hydrochloric acid and concentrated to approximately half the volume under reduced pressure. The precipitated crystals are collected by filtration and washed with methanol, 95 mg of 4- (6-aminopurin-9-yl) -4-deoxy-derythronic acid having a melting point of 279C (with decomposition) being obtained.
(H) 0.70 g of 4- (6-ethylaminopurin-9-yl) -4-deoxy-2,3-O-isopropylidene-D-erythronic acid in 50 cm3 of 10% acetic acid are refluxed for 30 minutes. The reaction mixture is concentrated under reduced pressure and adsorbed on an ion exchange resin, namely [Amberlite IRA400 (trade mark)]. The resin is washed with a 0.05N acetic acid solution and eluted with 0.5N acetic acid. The eluate is concentrated under reduced pressure, 0.56 g of 4- (6-ethylaminopurin-9-yl) -4-deoxy-derythronic acid having a melting point of 242-2430C (with decomposition) (recrystallized from hydrous ethanol) .
(I) 450 mg of 4- (6-aminopurin-9-yl) -4-deoxy-2,3-O-isopropylidene-D-threonic acid in 30 cm3 of 20% acetic acid are heated under reflux for 2 hours. After cooling, the precipitated crystals are collected and washed with water and acetone, 350 mg of 4- (6 aminopurin-9-yl) -4-deoxy-D-threonic acid having a melting point of 297C (with decomposition).
In a similar manner, the following compounds are obtained: (J) 4- (6-aminopurin-9-yl) -2-hydroxybutyric acid was obtained by hydrolyzing 4- (6-acetamidopurin-9-yl) -2-hydroxybutyric acid.
(K) 4- (6-Aminopurin-9-yl) -2-hydroxybutyric acid was obtained by hydrolyzing 4- (6-aminopurin-9-yl) -2-acetoxy-butyric acid.