RU2827840C1 - Elective-differential nutrient medium for klebsiella species recovery - Google Patents
Elective-differential nutrient medium for klebsiella species recovery Download PDFInfo
- Publication number
- RU2827840C1 RU2827840C1 RU2024108049A RU2024108049A RU2827840C1 RU 2827840 C1 RU2827840 C1 RU 2827840C1 RU 2024108049 A RU2024108049 A RU 2024108049A RU 2024108049 A RU2024108049 A RU 2024108049A RU 2827840 C1 RU2827840 C1 RU 2827840C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- medium
- nutrient medium
- agar
- klebsiella
- elective
- Prior art date
Links
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 title claims abstract description 45
- 241000588748 Klebsiella Species 0.000 title claims abstract description 43
- 238000011084 recovery Methods 0.000 title 1
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 claims abstract description 23
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims abstract description 22
- 235000010419 agar Nutrition 0.000 claims abstract description 21
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 20
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims abstract description 18
- SRBFZHDQGSBBOR-HWQSCIPKSA-N L-arabinopyranose Chemical compound O[C@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-HWQSCIPKSA-N 0.000 claims abstract description 16
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 16
- 230000000721 bacterilogical effect Effects 0.000 claims abstract description 15
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 14
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 claims abstract description 14
- SURQXAFEQWPFPV-UHFFFAOYSA-L iron(2+) sulfate heptahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.O.[Fe+2].[O-]S([O-])(=O)=O SURQXAFEQWPFPV-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims abstract description 14
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 claims abstract description 13
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 claims abstract description 13
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 claims abstract description 13
- 241000206672 Gelidium Species 0.000 claims abstract description 10
- GBXGEGUVARLBPB-JEBHESKQSA-M sodium;2-[(e)-(4-hydroxy-3-methylphenyl)-(3-methyl-4-oxocyclohexa-2,5-dien-1-ylidene)methyl]benzenesulfonate Chemical compound [Na+].C1=CC(=O)C(C)=C\C1=C(C=1C(=CC=CC=1)S([O-])(=O)=O)/C1=CC=C(O)C(C)=C1 GBXGEGUVARLBPB-JEBHESKQSA-M 0.000 claims abstract description 10
- 244000005706 microflora Species 0.000 claims abstract description 7
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims abstract description 5
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 3
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims abstract description 3
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 67
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 claims description 12
- 239000008272 agar Substances 0.000 claims description 11
- OBRMNDMBJQTZHV-UHFFFAOYSA-N cresol red Chemical compound C1=C(O)C(C)=CC(C2(C3=CC=CC=C3S(=O)(=O)O2)C=2C=C(C)C(O)=CC=2)=C1 OBRMNDMBJQTZHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000013630 prepared media Substances 0.000 claims description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 abstract description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 7
- 238000002955 isolation Methods 0.000 abstract description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 5
- 108010046334 Urease Proteins 0.000 abstract description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 abstract description 2
- 238000003771 laboratory diagnosis Methods 0.000 abstract 1
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 21
- 238000000034 method Methods 0.000 description 21
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 20
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 14
- 241000305071 Enterobacterales Species 0.000 description 13
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 12
- 241000588749 Klebsiella oxytoca Species 0.000 description 8
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 7
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 7
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 7
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 7
- ALYNCZNDIQEVRV-UHFFFAOYSA-N 4-aminobenzoic acid Chemical compound NC1=CC=C(C(O)=O)C=C1 ALYNCZNDIQEVRV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000588915 Klebsiella aerogenes Species 0.000 description 6
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 6
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 6
- 230000036541 health Effects 0.000 description 6
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 5
- KBOPZPXVLCULAV-UHFFFAOYSA-N mesalamine Chemical compound NC1=CC=C(O)C(C(O)=O)=C1 KBOPZPXVLCULAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229960004963 mesalazine Drugs 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 5
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 244000110797 Polygonum persicaria Species 0.000 description 4
- 229960001506 brilliant green Drugs 0.000 description 4
- HXCILVUBKWANLN-UHFFFAOYSA-N brilliant green cation Chemical compound C1=CC(N(CC)CC)=CC=C1C(C=1C=CC=CC=1)=C1C=CC(=[N+](CC)CC)C=C1 HXCILVUBKWANLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 241000588921 Enterobacteriaceae Species 0.000 description 3
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 3
- 206010022678 Intestinal infections Diseases 0.000 description 3
- 241000588747 Klebsiella pneumoniae Species 0.000 description 3
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 3
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 3
- 239000012568 clinical material Substances 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 3
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 3
- ZPLCXHWYPWVJDL-UHFFFAOYSA-N 4-[(4-hydroxyphenyl)methyl]-1,3-oxazolidin-2-one Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1CC1NC(=O)OC1 ZPLCXHWYPWVJDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000008225 Klebsiella pneumonia Diseases 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- 229930182821 L-proline Natural products 0.000 description 2
- 206010035717 Pneumonia klebsiella Diseases 0.000 description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 2
- 244000309464 bull Species 0.000 description 2
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 239000006160 differential media Substances 0.000 description 2
- 230000035784 germination Effects 0.000 description 2
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 239000006916 nutrient agar Substances 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- ASHGTUMKRVIOLH-UHFFFAOYSA-L potassium;sodium;hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[K+].OP([O-])([O-])=O ASHGTUMKRVIOLH-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 229960002429 proline Drugs 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 239000012064 sodium phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002351 wastewater Substances 0.000 description 2
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 description 1
- 241000588923 Citrobacter Species 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 206010010741 Conjunctivitis Diseases 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 241000588914 Enterobacter Species 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N Hexa-Ac-myo-Inositol Natural products CC(=O)OC1C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C1OC(C)=O SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N L-rhamnopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N 0.000 description 1
- PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N L-rhamnose Natural products CC(O)C(O)C(O)C(O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- -1 L-sodium glutamate Chemical compound 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 206010067125 Liver injury Diseases 0.000 description 1
- 239000006154 MacConkey agar Substances 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N Raffinose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N 0.000 description 1
- 206010040047 Sepsis Diseases 0.000 description 1
- 241000607720 Serratia Species 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N UNPD196149 Natural products OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1C(O)C(O)C(O)C(COC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940124350 antibacterial drug Drugs 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 210000000941 bile Anatomy 0.000 description 1
- 239000003833 bile salt Substances 0.000 description 1
- 229940093761 bile salts Drugs 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 229940111685 dibasic potassium phosphate Drugs 0.000 description 1
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- PXEDJBXQKAGXNJ-QTNFYWBSSA-L disodium L-glutamate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)[C@@H](N)CCC([O-])=O PXEDJBXQKAGXNJ-QTNFYWBSSA-L 0.000 description 1
- 239000003651 drinking water Substances 0.000 description 1
- 235000020188 drinking water Nutrition 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 244000005709 gut microbiome Species 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 231100000234 hepatic damage Toxicity 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 239000003295 industrial effluent Substances 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 1
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 150000002505 iron Chemical class 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 230000008818 liver damage Effects 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 231100000516 lung damage Toxicity 0.000 description 1
- 229960003390 magnesium sulfate Drugs 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- KBOPZPXVLCULAV-UHFFFAOYSA-M mesalaminate(1-) Chemical compound NC1=CC=C(O)C(C([O-])=O)=C1 KBOPZPXVLCULAV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 229940111688 monobasic potassium phosphate Drugs 0.000 description 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 235000006180 nutrition needs Nutrition 0.000 description 1
- 244000039328 opportunistic pathogen Species 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229910001414 potassium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- OTYBMLCTZGSZBG-UHFFFAOYSA-L potassium sulfate Chemical compound [K+].[K+].[O-]S([O-])(=O)=O OTYBMLCTZGSZBG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910052939 potassium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940093914 potassium sulfate Drugs 0.000 description 1
- 235000011151 potassium sulphates Nutrition 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N raffinose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006152 selective media Substances 0.000 description 1
- 229960002668 sodium chloride Drugs 0.000 description 1
- 229940073490 sodium glutamate Drugs 0.000 description 1
- 229910001415 sodium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 1
- 239000000021 stimulant Substances 0.000 description 1
- 239000002352 surface water Substances 0.000 description 1
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 1
Abstract
Description
Предлагаемое изобретение относится к области медицинской микробиологии и является элективно-дифференциальной питательной средой, которая может быть использована в лабораторной практике при выделении штаммов Klebsiella spp. (Klebsiella pneumonia, Klebsiella oxytoca) из клинического материала, пищевых продуктов и объектов окружающей среды. Питательная среда содержит в качестве азотистой питательной основы пептон ферментативный сухой (для бактериологических целей); L-Арабинозу - в качестве источника углерода; мочевину для выявления уреазной активности; железо (II) сернокислое семиводное - в качестве ингибитора роста посторонней микрофлоры; крезоловый красный водорастворимый - в качестве индикатора изменения pН среды; агар-агар микробиологический, воду дистиллированную. Изобретение позволяет повысить эффективность выделения Klebsiella spp., сократить срок их идентификации по принципу биохимической активности и специфической окраски колоний. Таким образом, изобретение сокращает время лабораторной диагностики микроорганизмов рода Klebsiella.The proposed invention relates to the field of medical microbiology and is an elective-differential nutrient medium that can be used in laboratory practice for isolating Klebsiella spp. (Klebsiella pneumonia, Klebsiella oxytoca) strains from clinical material, food products and environmental objects. The nutrient medium contains dry enzymatic peptone (for bacteriological purposes) as a nitrogenous nutrient base; L-Arabinose as a carbon source; urea for detecting urease activity; iron (II) sulfate heptahydrate as an inhibitor of foreign microflora growth; water-soluble cresol red as an indicator of a change in the pH of the medium; microbiological agar, and distilled water. The invention makes it possible to increase the efficiency of isolating Klebsiella spp., and reduce the time for their identification based on the principle of biochemical activity and specific coloration of the colonies. Thus, the invention reduces the time for laboratory diagnostics of microorganisms of the genus Klebsiella.
Экологическими резервуарами бактерий рода Klebsiella (в том числе, вирулентных) служат воды поверхностных водоемов, сточные воды, растения, промышленные стоки (Пай Г.В. с соавт., 2020) [10]. Они являются представителями нормальной транзиторной микрофлоры человека, но, в то же время, возбудителями различных инфекционных заболеваний потому, что обладают выработанной устойчивостью ко многим факторам внешней среды, в частности, к большинству антибактериальных препаратов (Меджидов М.М., 2008; Рахманин Ю.А. с соавт., 2016) [5, И]. Это приводит к возникновению острых кишечных инфекций, сепсисов, конъюнктивитов, поражениям легких, печени у людей с ослабленной иммунной системой (Анганова Е.В. с соавт., 2010; Choby J.E. et al., 2020) [1, 14]. Последние обстоятельства указывают на то, что клебсиеллы из окружающей среды могут представлять угрозу для здоровья человека (Lightfoot N., 2003) [15].Environmental reservoirs of Klebsiella bacteria (including virulent ones) include surface waters, wastewater, plants, and industrial effluents (Pai G.V. et al., 2020) [10]. They are representatives of normal transient human microflora, but, at the same time, they are pathogens of various infectious diseases because they have developed resistance to many environmental factors, in particular, to most antibacterial drugs (Medzhidov M.M., 2008; Rakhmanin Yu.A. et al., 2016) [5, I]. This leads to the development of acute intestinal infections, sepsis, conjunctivitis, lung and liver damage in people with a weakened immune system (Anganova E.V. et al., 2010; Choby J.E. et al., 2020) [1, 14]. Recent circumstances indicate that environmental Klebsiella may pose a threat to human health (Lightfoot N., 2003) [15].
Бактериологические исследования, направленные на обнаружение клебсиелл и других энтеробактерий, проводят по одной схеме. При этом используются селективно-дифференциальные среды типа Эндо, Левина, Плоскирева, Мак-Конки. Принцип их работы основан на утилизации бактериями кишечной группы лактозы. Это не позволяет отличить Klebsiella spp. от других представителей Enterobacteriaceae.Bacteriological studies aimed at detecting Klebsiella and other enterobacteria are carried out according to the same scheme. In this case, selective-differential media such as Endo, Levin, Ploskirev, and MacConkey are used. The principle of their operation is based on the utilization of lactose by intestinal bacteria. This does not allow distinguishing Klebsiella spp. from other representatives of Enterobacteriaceae.
Такого же рода обстоятельства возникают при использовании элективно-дифференциальных сред с рамнозой или инозитом, в состав которых наряду с вышеуказанными соединениями входят ингибиторы роста посторонней микрофлоры (желчь, желчные соли, кристаллвиолет, бриллиантовый зеленый, антибиотики), когда, например, дифференциация К. pneumoniae от Serratia spp. очень затруднительна. К тому же эти среды (модифицированный агар Мак-Конки, М-Агар FC для клебсиелл, дифференциально-элективная питательная среда для выделения клебсиелл и др.) являются слабоселективными. В связи с этим требуется постановка дополнительных тестов и манипуляций для выделения чистых культур клебсиелл.The same kind of circumstances arise when using elective-differential media with rhamnose or inositol, which, along with the above-mentioned compounds, contain inhibitors of the growth of foreign microflora (bile, bile salts, crystal violet, brilliant green, antibiotics), when, for example, differentiation of K. pneumoniae from Serratia spp. is very difficult. In addition, these media (modified MacConkey agar, M-Agar FC for Klebsiella, differential-elective nutrient medium for isolating Klebsiella, etc.) are weakly selective. In this regard, additional tests and manipulations are required to isolate pure Klebsiella cultures.
Изобретение относится к области медицинской микробиологии и может быть использовано для выделения Klebsiella spp. из клинического материала, пищевых продуктов и объектов окружающей среды.The invention relates to the field of medical microbiology and can be used to isolate Klebsiella spp. from clinical material, food products and environmental objects.
В основе предлагаемого способа лежит применение питательной среды, которая содержит в %:The proposed method is based on the use of a nutrient medium that contains in %:
1. Пептон сухой ферментативный для бактериологических целей - 0,9-1,4;1. Dry enzymatic peptone for bacteriological purposes - 0.9-1.4;
2. L-Арабиноза - 0,2-1,0;2. L-Arabinose - 0.2-1.0;
3. Железо (II) сернокислое семиводное - 0,01-0,06;3. Iron (II) sulfate heptahydrate - 0.01-0.06;
4. Мочевина - 0,2-1,0;4. Urea - 0.2-1.0;
5. Крезоловый красный водорастворимый - 0,00005-0,004;5. Cresol red water-soluble - 0.00005-0.004;
6. Агар-агар микробиологический - 1,0-1,5;6. Microbiological agar-agar - 1.0-1.5;
7. Вода дистиллированная - до 100%,7. Distilled water - up to 100%,
pН готовой среды 7,2±0,2.The pH of the prepared medium is 7.2±0.2.
Бактерии рода Klebsiella - грамотрицательные микроорганизмы, принадлежащие к семейству Enterobacteriaceae порядка Enterobacterial. Род Klebsiella представлен более чем 12 видами, из которых чаще встречаются К. pneumoniae и К. oxytoca (Бардашева А.В. с соавт., 2021) [2].Bacteria of the genus Klebsiella are gram-negative microorganisms belonging to the Enterobacteriaceae family of the order Enterobacterial. The genus Klebsiella is represented by more than 12 species, of which K. pneumoniae and K. oxytoca are the most common (Bardasheva A.V. et al., 2021) [2].
Известна питательная среда «Хромогенная питательная среда для выделения и идентификации клебсиелл», предложенная М.М. Меджидовым с соавт. [6]. Данная среда имеет следующий состав (г/л):The nutrient medium “Chromogenic nutrient medium for the isolation and identification of Klebsiella” proposed by M.M. Medzhidov et al. [6] is known. This medium has the following composition (g/l):
1. Питательный агар сухой - 35,0-40,0;1. Dry nutrient agar - 35.0-40.0;
2. Глюкоза - 5,0-6,0;2. Glucose - 5.0-6.0;
3. 5-аминосалициловая кислота - 2,0-3,0;3. 5-aminosalicylic acid - 2.0-3.0;
4. Экстракт кормовых дрожжей - 3,0-5,0;4. Feed yeast extract - 3.0-5.0;
5. Парааминобензойная кислота - 0,01-0,02;5. Para-aminobenzoic acid - 0.01-0.02;
6. Бромтимоловый синий - 0,08-0,09;6. Bromothymol blue - 0.08-0.09;
7. Трис-буфер - 1,0-1,5;7. Tris buffer - 1.0-1.5;
8. Натрий углекислый - 0,6-0,7;8. Sodium carbonate - 0.6-0.7;
9. Бриллиантовый зеленый - 0,0001-0,0002;9. Brilliant green - 0.0001-0.0002;
10. Агар микробиологический - 2,5-3,0;10. Microbiological agar - 2.5-3.0;
11. Вода дистиллированная - до 1 литра.11. Distilled water - up to 1 liter.
pН 7,4±0,2. Данную питательную среду получают следующим образом. В 1 литр дистиллированной воды вносят навески сухого питательного агара, экстракта кормовых дрожжей, парааминобензойной кислоты, трис-буфера, натрия углекислого, бриллиантового зеленого. Смесь тщательно перемешивают, троекратно кипятят 1-2 мин при помешивании, не допуская пригорания агара, до появления крупнопузырчатой пены. Среду охлаждают до 45-50°С и разливают в стерильные чашки Петри. После застывания и подсушивания чашек со средой на нее наносят исследуемый материал, затем инкубируют при 37°С в течение 24 ч. Через 24 ч от начала культивирования K. pneumoniae, K. oxytoca, K. mobilis образуют типичные колонии коричневого цвета, диаметром 1,5-2,0 мм в S-форме с коричневым преципитатом вокруг них из-за воздействия на 5-аминосалициловую кислоту фермента 5-аминосалицилатдекарбоксилазы, наличие которого характерно только для Klebsiella spp. Остальные энтеробактерии вырастают в виде типичных для каждого вида колоний желтого цвета на фоне бутылочно-зеленого цвета питательной среды. Коричневый преципитат вокруг этих колоний отсутствует. Рост грамположительных микроорганизмов подавляется благодаря внесению в эту среду бриллиантового зеленого. Данная питательная среда является хромогенной и не может позволить выделить только лишь представителей рода Klebsiella, а также имеет довольно сложный с дорогостоящими ингредиентами состав, в который необходимо вводить стимуляторы роста - экстракт кормовых дрожжей и парааминобензойную кислоту. Таким образом, назначение указанной среды не совпадает с назначением (решением задач) предлагаемой нами.pH 7.4±0.2. This nutrient medium is obtained as follows. In 1 liter of distilled water, add weighed portions of dry nutrient agar, fodder yeast extract, para-aminobenzoic acid, tris buffer, sodium carbonate, and brilliant green. The mixture is thoroughly mixed, boiled three times for 1-2 minutes while stirring, preventing the agar from burning, until coarse-bubble foam appears. The medium is cooled to 45-50°C and poured into sterile Petri dishes. After the medium has solidified and dried, the test material is applied to the medium and incubated at 37°C for 24 hours. After 24 hours of cultivation, K. pneumoniae, K. oxytoca, and K. mobilis form typical brown colonies, 1.5–2.0 mm in diameter, in the S-shape with a brown precipitate around them due to the effect of the enzyme 5-aminosalicylate decarboxylase on 5-aminosalicylic acid, the presence of which is characteristic only of Klebsiella spp. The remaining enterobacteria grow as yellow colonies typical for each species against the background of the bottle-green color of the nutrient medium. There is no brown precipitate around these colonies. The growth of gram-positive microorganisms is suppressed by adding brilliant green to this medium. This nutrient medium is chromogenic and cannot allow to isolate only representatives of the genus Klebsiella, and also has a rather complex composition with expensive ingredients, which requires the introduction of growth stimulants - fodder yeast extract and para-aminobenzoic acid. Thus, the purpose of this medium does not coincide with the purpose (problem solving) of the one proposed by us.
Разработанная нами среда является хромогенной, содержит селективную добавку ввиде соли железа валентностью 2, позволяющую задерживать, блокировать рост посторонней микрофлоры и других энтеробактерий кроме представителей рода Klebsiella, а также являющуюся стимулятором гиперкапсулообразования у K. pneumoniae, что позволяет разделять гипермукоидные и классические варианты клинических штаммов K. pneumoniae, что невозможно на других селективных средах.The medium we developed is chromogenic, contains a selective additive in the form of iron salt with a valence of 2, which allows to delay and block the growth of foreign microflora and other enterobacteria except for representatives of the genus Klebsiella, and is also a stimulator of hypercapsule formation in K. pneumoniae, which allows to separate hypermucoid and classical variants of clinical strains of K. pneumoniae, which is impossible in other selective media.
Кроме того, в состав среды не входят ионы натрия и калия (в отличии большинства сред), что также является селективным фактором для роста посторонней микрофлоры и других энтеробактерий, нуждающихся в этих ионах, за исключением представителей рода Klebsiella. В качестве индикатора и селективного фактора нами использован крезоловый красный блокирующий рост других энтеробактерий, но не активный в отношении представителей рода Klebsiella.In addition, the medium does not contain sodium and potassium ions (unlike most media), which is also a selective factor for the growth of foreign microflora and other enterobacteria that need these ions, with the exception of representatives of the genus Klebsiella. As an indicator and selective factor, we used cresol red, which blocks the growth of other enterobacteria, but is not active against representatives of the genus Klebsiella.
Известен способ выделения и идентификации бактерий рода Klebsiella с помощью среды, предложенной Сиволодским Е.П. [12]. Данная среда имеет следующий состав (г/л):A method for isolating and identifying bacteria of the genus Klebsiella is known using a medium proposed by E.P. Sivolodsky [12]. This medium has the following composition (g/l):
1. L-пролин - 2,0-2,5;1. L-proline - 2.0-2.5;
2. L-глутамат натрия - 5,0-6,0;2. Sodium L-glutamate - 5.0-6.0;
3. L-арабиноза - 10,0;3. L-arabinose - 10.0;
4. 5-аминосалициловая кислота - 3,0-5,0;4. 5-aminosalicylic acid - 3.0-5.0;
5. Na2CO3⋅10H2O - 2,0-3,3;5. Na 2 CO 3 ⋅10H 2 O - 2.0-3.3;
6. NaCl - 5,0;6. NaCl - 5.0;
7. КН2РО4 - 0,5;7. KN 2 RO 4 - 0.5;
8. MgSO4 - 0,l;8. MgSO4 - 0.l;
9. Агар микробиологический - 12,0;9. Microbiological agar - 12.0;
10. Вода дистиллированная - до 1 литра;10. Distilled water - up to 1 liter;
pН 7,2±0,2.pH 7.2±0.2.
Эту питательную среду приготовляют путем внесения порошка смеси ингредиентов кроме суплементов 5-аминосалициловой кислоты и углекислого натрия в дистиллированную воду, растворяют при нагревании, добавляют суплементы, кипятят в течение 5 минут, разливают в стерильные чашки Петри. Посевы инкубируют при 35°С в аэробных условиях 24-48 ч, после чего определяют принадлежность выросших колоний микроорганизмов к роду Klebsiella по образованию вокруг последних зоны темно-коричневой окраски питательной среды. Хотя, по заявлению автора, данная среда позволяет выделять клебсиеллы с высокой долей вероятности и на ней подавляется рост грамположительных бактерий (например, рода Bacillus); она является хромогенной и синтетической. Применение этой питательной среды не дает возможности выявлять исключительно Klebsiella spp. из-за штаммовых различий по питательным потребностям последних. Некоторые ингредиенты, входящие в ее состав (L-пролин, L-глутамат натрия, 5-аминосалициловая кислота) дороги. Таким образом, назначение указанной среды не совпадает с назначением (решением задач) предлагаемой нами.This nutrient medium is prepared by adding a powder mixture of ingredients except for 5-aminosalicylic acid and sodium carbonate supplements to distilled water, dissolving with heating, adding supplements, boiling for 5 minutes, pouring into sterile Petri dishes. The cultures are incubated at 35°C under aerobic conditions for 24-48 hours, after which the grown colonies of microorganisms are determined to belong to the genus Klebsiella by the formation of a dark brown zone of the nutrient medium around them. Although, according to the author, this medium allows for the isolation of Klebsiella with a high degree of probability and the growth of gram-positive bacteria (e.g., Bacillus) is suppressed on it; it is chromogenic and synthetic. The use of this nutrient medium does not make it possible to identify exclusively Klebsiella spp. due to strain differences in the nutritional needs of the latter. Some of the ingredients included in its composition (L-proline, L-sodium glutamate, 5-aminosalicylic acid) are expensive. Thus, the purpose of this medium does not coincide with the purpose (problem solving) of the one we offer.
Наиболее близкой к предлагаемой питательной среде является питательная среда К-2 (Калина Г.П., 1980) [4]. В состав этой среды входят натрий хлористый, магний сернокислый, двузамещенный фосфат калия, однозамещенный фосфат калия, сульфат калия, раффиноза, мочевина, бромтимоловый синий, кристаллический фиолетовый, агар микробиологический, дистиллированную воду. На этой среде Klebsiella spp. образуют округлые, блестящие слизистые, желтые, зеленые с желтым центром или голубые колонии.The closest to the proposed nutrient medium is the K-2 nutrient medium (Kalina G.P., 1980) [4]. This medium contains sodium chloride, magnesium sulfate, dibasic potassium phosphate, monobasic potassium phosphate, potassium sulfate, raffinose, urea, bromothymol blue, crystal violet, microbiological agar, and distilled water. On this medium, Klebsiella spp. form round, shiny, slimy, yellow, green with a yellow center, or blue colonies.
Недостатком прототипа является слабая селективность в отношении бактерий родов Enterobacter, Citrobacter и других представителей семейства Enterobacteriaceae; отсутствие четкого отличия колоний клебсиелл по цвету.The disadvantage of the prototype is weak selectivity for bacteria of the genera Enterobacter, Citrobacter and other representatives of the Enterobacteriaceae family; lack of clear distinction of Klebsiella colonies by color.
Технической задачей предлагаемого изобретения является создание новой питательной среды для выделения чистых культур Klebsiella spp. из клинического материала, пищевых продуктов и объектов окружающей среды путем применения элективно-дифференциальной питательной среды, позволяющей сократить сроки дифференциации клебсиелл.The technical task of the proposed invention is to create a new nutrient medium for isolating pure cultures of Klebsiella spp. from clinical material, food products and environmental objects by using an elective-differential nutrient medium, which makes it possible to reduce the time for differentiation of Klebsiella.
Поставленная задача достигается путем применения элективно-дифференциальной питательной среды, позволяющей дифференцировать клебсиеллы по наличию ферментации L-арабинозы и уреазной активности.The set task is achieved by using an elective-differential nutrient medium, which allows differentiation of Klebsiella by the presence of L-arabinose fermentation and urease activity.
Цель изобретения достигается при использовании питательной среды, содержащей (в %):The aim of the invention is achieved by using a nutrient medium containing (in %):
1. Пептон ферментативный для бактериологических целей - 0,9-1,4;1. Enzymatic peptone for bacteriological purposes - 0.9-1.4;
2. L-Арабиноза ЧДА или ХЧ - 0,2-1,0;2. L-Arabinose analytical grade or chemical purity - 0.2-1.0;
3. Мочевина ЧДА или ХЧ - 0,2-1,0;3. Urea, analytical grade or chemically pure - 0.2-1.0;
4. Железо (II) сернокислое семиводное - 0,01-0,06;4. Iron (II) sulfate heptahydrate - 0.01-0.06;
5. Крезоловый красный водорастворимый ЧДА или ХЧ - 0,0005-0,004;5. Cresol red water-soluble analytical grade or chemically pure - 0.0005-0.004;
6. Агар-агар микробиологический - 1-1,5;6. Microbiological agar-agar - 1-1.5;
7. Вода дистиллированная - до 1 литра.7. Distilled water - up to 1 liter.
РН 7,2±0,2.pH 7.2±0.2.
Колонии округлые, полупрозрачные, выпуклые, с ровным краем, слизистые, малиновые. Цвет среды в области роста колоний становится малиновым.The colonies are round, translucent, convex, with a smooth edge, slimy, crimson. The color of the medium in the area of colony growth becomes crimson.
Способ приготовления питательной среды осуществляется по следующей технологии.The method of preparing the nutrient medium is carried out according to the following technology.
В стеклянную термостойкую вносят навески пептона сухого ферментативного для бактериологических целей, мочевины, крезолового красного водорастворимого, агар-агара. Добавляют дистиллированную воду до 1000 мл. Устанавливают pН 7,2±0,2 при помощи 20% водного раствора гидроокиси натрия и 12% водного раствора соляной кислоты. Нагревают в паровом стерилизаторе текучим паром в течение 45-65 минут или кипятят на электроплитке при постоянном помешивании, не допуская пригорания агаровых частиц, в течение 2-3 минут после полного растворения агара. Вносят навески L-арабинозы и железа (II) сернокислого семиводного с последующим перемешиванием до их полного растворения. Питательную среду стерилизуют кипячением в течение 2-3 минут.Add weighed amounts of dry enzymatic peptone for bacteriological purposes, urea, water-soluble cresol red, and agar to a heat-resistant glass container. Add distilled water to make 1000 ml. Adjust pH to 7.2±0.2 using a 20% aqueous solution of sodium hydroxide and a 12% aqueous solution of hydrochloric acid. Heat in a steam sterilizer with flowing steam for 45-65 minutes or boil on an electric stove with constant stirring, preventing the agar particles from burning, for 2-3 minutes after the agar has completely dissolved. Add weighed amounts of L-arabinose and iron (II) sulfate heptahydrate, stirring until completely dissolved. Sterilize the nutrient medium by boiling for 2-3 minutes.
Питательную среду асептично разливают в стерильные чашки Петри по 20-30 мл и оставляют застывать на ровной поверхности. Цвет питательной среды - желтый. Готовая питательная среда, разлитая в чашки Петри может храниться не более 15 дней при температуре от 2 до 8°С.The nutrient medium is aseptically poured into sterile Petri dishes of 20-30 ml and left to solidify on a flat surface. The color of the nutrient medium is yellow. The finished nutrient medium poured into Petri dishes can be stored for no more than 15 days at a temperature of 2 to 8 ° C.
Качество предлагаемого способа выделения Klebsiella spp. из объектов окружающей среды и биологического материала проверяют следующим образом.The quality of the proposed method for isolating Klebsiella spp. from environmental objects and biological material is tested as follows.
Перед проверкой качества предлагаемого способа тест-штаммы К. pneumoniae 3446, К. pneumoniae 3347, К. oxytoca 3955, К. aerogenes 4206, Е. coli 18, P. aeruginosa АТСС 27853, P. aeruginosa Р-5810, S. aureus АТСС 25925, P. vulgaris НХ19 (222) подготавливают к контролю в соответствии с требованиями МУК 4.2.2316-08 [].Before checking the quality of the proposed method, the test strains K. pneumoniae 3446, K. pneumoniae 3347, K. oxytoca 3955, K. aerogenes 4206, E. coli 18, P. aeruginosa ATCC 27853, P. aeruginosa P-5810, S. aureus ATCC 25925, P. vulgaris HX19 (222) are prepared for control in accordance with the requirements of MUK 4.2.2316-08 [].
Пример 1Example 1
Готовят питательную среду следующего состава: в чистую 2-литровую колбу вносят:Prepare a nutrient medium of the following composition: add the following to a clean 2-liter flask:
1. Пептон ферментативный для бактериологических целей - 0,9%;1. Enzymatic peptone for bacteriological purposes - 0.9%;
2. L-Арабиноза ЧДА или ХЧ - 0,2%;2. L-Arabinose, analytical grade or reagent grade - 0.2%;
3. Мочевина ЧДА или ХЧ - 0,2%;3. Urea, analytical grade or chemically pure - 0.2%;
4. Железо (II) сернокислое семиводное - 0,01%;4. Iron (II) sulfate heptahydrate - 0.01%;
5. Крезоловый красный водорастворимый ЧДА или ХЧ - 0,0005%;5. Cresol red water-soluble analytical grade or chemically pure - 0.0005%;
6. Агар-агар микробиологический - 1,0%;6. Microbiological agar-agar - 1.0%;
7. Вода дистиллированная - до 1 литра.7. Distilled water - up to 1 liter.
Устанавливают pН 7,2±0,2 при помощи 20% водного раствора гидроокиси натрия и 12% водного раствора соляной кислоты. Смесь кипятят на электроплитке при постоянном помешивании, не допуская пригорания агаровых частиц, в течение 2-3 минут после полного растворения агара или в паровом стерилизаторе (в режиме текучего пара) в течение 45 - 65 мин. Затем добавляют навески L-арабинозы - 0,2% и железа (II) сернокислого семиводного - 0,01% с последующим перемешиванием до полного растворения ингредиентов. Питательную среду асептично разливают в стерильные чашки Петри по 20-30 мл и оставляют застывать на ровной поверхности. Цвет полученной питательной среды - желтый.The pH is adjusted to 7.2±0.2 using a 20% aqueous solution of sodium hydroxide and a 12% aqueous solution of hydrochloric acid. The mixture is boiled on an electric stove with constant stirring, preventing the agar particles from burning, for 2-3 minutes after the agar has completely dissolved, or in a steam sterilizer (in the flowing steam mode) for 45-65 minutes. Then add the weighed portions of L-arabinose - 0.2% and iron (II) sulfate heptahydrate - 0.01%, followed by stirring until the ingredients are completely dissolved. The nutrient medium is aseptically poured into sterile Petri dishes of 20-30 ml and left to harden on a flat surface. The color of the resulting nutrient medium is yellow.
Для контроля качества полученной элективной питательной среды используют тест-штаммы К. pneumoniae 3446, К. pneumoniae 3347, К. oxytoca 3955, К. aerogenes 4206, Е. coli 18, P. aeruginosa АТСС 27853, P. aeruginosa Р-5810, S. aureus АТСС 25925, P. vulgaris НХ19 (222), хранящиеся и подготовленные к посеву согласно МУК 4.2.2316-08 [7]. Суточную культуру каждого из них суспендируют в стерильном 0,9% растворе хлорида натрия, забуференного 1/150 М калий-натрий фосфатным буфером pН (7,1±0,1) до концентрации 1 × 109 м.к./мл по стандартному образцу мутности ОСО-42-28-85П (ФГБУ «НЦЭСМП» Минздрава России). Приготовленные взвеси тест-штаммов К. pneumoniae 3446, К. pneumoniae 3347, К. oxytoca 3955, К. aerogenes 4206 последовательно разводят в стерильном 0,9% растворе хлорида натрия, забуференного 1/150 М калий-натрий фосфатным буфером pН (7,1±0,1) с десятикратным интервалом до разведения 10-6 (1000 м.к./мл). Взвеси тест-штаммов, используемые в качестве микробов-ассоциантов: Е. coli 18, P. aeruginosa АТСС 27853, P. aeruginosa Р-5810, S. aureus АТСС 25925, P. vulgaris НХ19 (222) также разводят с десятикратным интервалом последовательно до разведений 10-2 (1000000 м.к./мл) и до 10-3 (1000000 м.к./мл) - P. vulgaris НХ19 (222).To control the quality of the obtained elective nutrient medium, the following test strains are used: K. pneumoniae 3446, K. pneumoniae 3347, K. oxytoca 3955, K. aerogenes 4206, E. coli 18, P. aeruginosa ATCC 27853, P. aeruginosa P-5810, S. aureus ATCC 25925, P. vulgaris HX19 (222), stored and prepared for sowing according to MUK 4.2.2316-08 [7]. A daily culture of each of them is suspended in a sterile 0.9% sodium chloride solution buffered with 1/150 M potassium-sodium phosphate buffer pH (7.1±0.1) to a concentration of 1 × 10 9 m.c./ml according to the standard turbidity sample OSO-42-28-85P (Federal State Budgetary Institution “National Center for Expertise and Management of Microorganisms” of the Ministry of Health of Russia). Prepared suspensions of test strains K. pneumoniae 3446, K. pneumoniae 3347, K. oxytoca 3955, K. aerogenes 4206 are successively diluted in sterile 0.9% sodium chloride solution buffered with 1/150 M potassium-sodium phosphate buffer pH (7.1±0.1) at ten-fold intervals until a dilution of 10 -6 (1000 m.c./ml) is achieved. Suspensions of test strains used as microbial associates: E. coli 18, P. aeruginosa ATCC 27853, P. aeruginosa P-5810, S. aureus ATCC 25925, P. vulgaris HX19 (222) are also diluted successively at tenfold intervals to dilutions of 10 -2 (1,000,000 m.c./ml) and to 10 -3 (1,000,000 m.c./ml) - P. vulgaris HX19 (222).
Посев тест-штаммов осуществляют по 0,1 мл из каждого разведения с последующей инкубацией при (37±1)°С в течение 18-24 ч, затем проводят учет результатов.The test strains are sown at 0.1 ml from each dilution, followed by incubation at (37±1)°C for 18-24 hours, after which the results are recorded.
Как видно из таблицы 1, осуществление предлагаемого способа при применении среды указанного состава не соответствует требованиям Методических указаний по микробиологической диагностике заболеваний, вызываемых энтеробактериями МУ 04-723/3 [9], МУК 4.2.3115-13 «Лабораторная диагностика внебольничных пневмоний» [8], т.к. присутствует рост микробов-ассоциантов. Искомые микроорганизмы выявить практически невозможно.As can be seen from Table 1, the implementation of the proposed method using the medium of the specified composition does not meet the requirements of the Methodological Guidelines for Microbiological Diagnostics of Diseases Caused by Enterobacteria MU 04-723/3 [9], MUK 4.2.3115-13 "Laboratory Diagnostics of Community-Acquired Pneumonia" [8], since there is growth of associated microbes. It is practically impossible to detect the desired microorganisms.
Пример 2Example 2
Готовят питательную среду следующего состава: в чистую 2-литровую колбу вносят:Prepare a nutrient medium of the following composition: add the following to a clean 2-liter flask:
1. Пептон ферментативный для бактериологических целей - 1,0%;1. Enzymatic peptone for bacteriological purposes - 1.0%;
2. L-Арабиноза ЧДА или ХЧ - 0,3%;2. L-Arabinose, analytical grade or reagent grade - 0.3%;
3. Мочевина ЧДА или ХЧ - 0,3%;3. Urea of analytical grade or chemical grade - 0.3%;
4. Железо (II) сернокислое семиводное - 0,015%;4. Iron (II) sulfate heptahydrate - 0.015%;
5. Крезоловый красный водорастворимый ЧДА или ХЧ - 0,001%;5. Cresol red water-soluble analytical grade or chemically pure - 0.001%;
6. Агар-агар микробиологический - 1,1%;6. Microbiological agar-agar - 1.1%;
7. Вода дистиллированная - до 1 литра.7. Distilled water - up to 1 liter.
Устанавливают pН 7,2±0,2 при помощи 20% водного раствора гидроокиси натрия и 12% водного раствора соляной кислоты.The pH is adjusted to 7.2±0.2 using a 20% aqueous solution of sodium hydroxide and a 12% aqueous solution of hydrochloric acid.
В ходе приготовления и испытания среды использованы методические приемы, как в примере 1.During the preparation and testing of the medium, the same methodological techniques were used as in Example 1.
Как видно из таблицы 1, осуществление предлагаемого способа при применении среды указанного состава не соответствует требованиям Методических указаний по микробиологической диагностике заболеваний, вызываемых энтеробактериями МУ 04-723/3 [9], МУК 4.2.3115-13 «Лабораторная диагностика внебольничных пневмоний» [8], т.к. присутствует рост микробов-ассоциантов. Искомые микроорганизмы выявить было практически невозможно.As can be seen from Table 1, the implementation of the proposed method using the medium of the specified composition does not meet the requirements of the Methodological Guidelines for Microbiological Diagnostics of Diseases Caused by Enterobacteria MU 04-723/3 [9], MUK 4.2.3115-13 "Laboratory Diagnostics of Community-Acquired Pneumonia" [8], since there is growth of associated microbes. It was practically impossible to detect the desired microorganisms.
Пример 3Example 3
Готовят питательную среду следующего состава: в чистую 2-литровую колбу вносят:Prepare a nutrient medium of the following composition: add the following to a clean 2-liter flask:
1. Пептон ферментативный для бактериологических целей - 1,1%;1. Enzymatic peptone for bacteriological purposes - 1.1%;
2. L-Арабиноза ЧДА или ХЧ - 0,4%;2. L-Arabinose, analytical grade or reagent grade - 0.4%;
3. Мочевина ЧДА или ХЧ - 0,4%;3. Urea of analytical grade or chemical grade - 0.4%;
4. Железо (II) сернокислое семиводное - 0,025%;4. Iron (II) sulfate heptahydrate - 0.025%;
5. Крезоловый красный водорастворимый ЧДА или ХЧ - 0,0015%;5. Cresol red water-soluble analytical grade or chemically pure - 0.0015%;
6. Агар-агар микробиологический - 1,2%;6. Microbiological agar-agar - 1.2%;
7. Вода дистиллированная - до 1 литра.7. Distilled water - up to 1 liter.
Устанавливают pН 7,2±0,2 при помощи 20% водного раствора гидроокиси натрия и 12% водного раствора соляной кислоты.The pH is adjusted to 7.2±0.2 using a 20% aqueous solution of sodium hydroxide and a 12% aqueous solution of hydrochloric acid.
В ходе приготовления и испытания среды используют методические приемы, как в примере 1.During the preparation and testing of the medium, the same methodological techniques are used as in Example 1.
Как видно из таблицы 1, осуществление предлагаемого способа при применении среды указанного состава соответствует требованиям Методических указаний по микробиологической диагностике заболеваний, вызываемых энтеробактериями МУ 04-723/3 [9], МУК 4.2.3115-13 «Лабораторная диагностика внебольничных пневмоний [8]» и позволяет выявлять Klebsiella spp.As can be seen from Table 1, the implementation of the proposed method using a medium of the specified composition complies with the requirements of the Methodological Guidelines for the Microbiological Diagnosis of Diseases Caused by Enterobacteria MU 04-723/3 [9], MUK 4.2.3115-13 “Laboratory Diagnostics of Community-Acquired Pneumonia [8]” and allows the detection of Klebsiella spp.
Пример 4Example 4
Готовят питательную среду следующего состава: в чистую 2-литровую колбу вносят:Prepare a nutrient medium of the following composition: add the following to a clean 2-liter flask:
1. Пептон ферментативный для бактериологических целей - 1,2%;1. Enzymatic peptone for bacteriological purposes - 1.2%;
2. L-Арабиноза ЧДА или ХЧ - 0,5%;2. L-Arabinose, analytical grade or reagent grade - 0.5%;
3. Мочевина ЧДА или ХЧ - 0,5%;3. Urea of analytical grade or chemical grade - 0.5%;
4. Железо (II) сернокислое семиводное - 0,03%;4. Iron (II) sulfate heptahydrate - 0.03%;
5. Крезоловый красный водорастворимый ЧДА или ХЧ - 0,002%;5. Cresol red water-soluble analytical grade or chemically pure - 0.002%;
6. Агар-агар микробиологический - 1,3%;6. Microbiological agar-agar - 1.3%;
7. Вода дистиллированная - до 1 литра.7. Distilled water - up to 1 liter.
Устанавливают pН 7,2±0,2 при помощи 20% водного раствора гидроокиси натрия и 12% водного раствора соляной кислоты.The pH is adjusted to 7.2±0.2 using a 20% aqueous solution of sodium hydroxide and a 12% aqueous solution of hydrochloric acid.
В ходе приготовления и испытания среды используют методические приемы, как в примере 1.During the preparation and testing of the medium, the same methodological techniques are used as in Example 1.
Как видно из таблицы 1, осуществление предлагаемого способа при применении среды указанного состава соответствует требованиям Методических указаний по микробиологической диагностике заболеваний, вызываемых энтеробактериями МУ 04-723/3 [9], МУК 4.2.3115-13 «Лабораторная диагностика внебольничных пневмоний [8]» и позволяет выявлять Klebsiella spp.As can be seen from Table 1, the implementation of the proposed method using a medium of the specified composition complies with the requirements of the Methodological Guidelines for the Microbiological Diagnosis of Diseases Caused by Enterobacteria MU 04-723/3 [9], MUK 4.2.3115-13 “Laboratory Diagnostics of Community-Acquired Pneumonia [8]” and allows the detection of Klebsiella spp.
Пример 5Example 5
Готовят питательную среду следующего состава: в чистую 2-литровую колбу вносят:Prepare a nutrient medium of the following composition: add the following to a clean 2-liter flask:
1. Пептон ферментативный для бактериологических целей - 1,3%;1. Enzymatic peptone for bacteriological purposes - 1.3%;
2. L-Арабиноза ЧДА или ХЧ - 0,7%;2. L-Arabinose, analytical grade or reagent grade - 0.7%;
3. Мочевина ЧДА или ХЧ - 0,7%;3. Urea, analytical grade or chemically pure - 0.7%;
4. Железо (II) сернокислое семиводное - 0,05%;4. Iron (II) sulfate heptahydrate - 0.05%;
5. Крезоловый красный водорастворимый ЧДА или ХЧ - 0,003%;5. Cresol red water-soluble analytical grade or chemically pure - 0.003%;
6. Агар-агар микробиологический - 1,4%;6. Microbiological agar-agar - 1.4%;
7. Вода дистиллированная - до 1 литра.7. Distilled water - up to 1 liter.
Устанавливают рН 7,2±0,2 при помощи 20% водного раствора гидроокиси натрия и 12% водного раствора соляной кислоты.The pH is adjusted to 7.2±0.2 using a 20% aqueous solution of sodium hydroxide and a 12% aqueous solution of hydrochloric acid.
В ходе приготовления и испытания среды используют методические приемы, как в примере 1.During the preparation and testing of the medium, the same methodological techniques are used as in Example 1.
Как видно из таблицы 1, осуществление предлагаемого способа при применении среды указанного состава не соответствует требованиям Методических указаний по микробиологической диагностике заболеваний, вызываемых энтеробактериями МУ 04-723/3 [9], МУК 4.2.3115-13 «Лабораторная диагностика внебольничных пневмоний» [8]. Происходит снижение значений диаметра колоний и показателя прорастания (из посевной дозы 100 м.к.) элективно-дифференциальной питательной среды в отношении использованных для контроля штаммов К. pneumoniae, К. oxytoca, К. aerogenes.As can be seen from Table 1, the implementation of the proposed method using the medium of the specified composition does not meet the requirements of the Methodological Guidelines for the Microbiological Diagnostics of Diseases Caused by Enterobacteria MU 04-723/3 [9], MUK 4.2.3115-13 "Laboratory Diagnostics of Community-Acquired Pneumonia" [8]. There is a decrease in the values of the colony diameter and the germination rate (from a seed dose of 100 m.c.) of the elective differential nutrient medium in relation to the strains of K. pneumoniae, K. oxytoca, K. aerogenes used for control.
Пример 6Example 6
Готовят питательную среду следующего состава: в чистую 2-литровую колбу вносят:Prepare a nutrient medium of the following composition: add the following to a clean 2-liter flask:
1. Пептон ферментативный для бактериологических целей - 1,3%;1. Enzymatic peptone for bacteriological purposes - 1.3%;
2. L-Арабиноза ЧДА или ХЧ - 0,7%;2. L-Arabinose, analytical grade or reagent grade - 0.7%;
3. Мочевина ЧДА или ХЧ - 0,7%;3. Urea, analytical grade or chemically pure - 0.7%;
4. Железо (II) сернокислое семиводное - 0,05%;4. Iron (II) sulfate heptahydrate - 0.05%;
5. Крезоловый красный водорастворимый ЧДА или ХЧ - 0,003%;5. Cresol red water-soluble analytical grade or chemically pure - 0.003%;
6. Агар-агар микробиологический - 1,4%;6. Microbiological agar-agar - 1.4%;
7. Вода дистиллированная - до 1 литра.7. Distilled water - up to 1 liter.
Устанавливают рН 7,2±0,2 при помощи 20% водного раствора гидроокиси натрия и 12% водного раствора соляной кислоты.The pH is adjusted to 7.2±0.2 using a 20% aqueous solution of sodium hydroxide and a 12% aqueous solution of hydrochloric acid.
В ходе приготовления и испытания среды используют методические приемы, как в примере 1.During the preparation and testing of the medium, the same methodological techniques are used as in Example 1.
Как видно из таблицы 1, осуществление предлагаемого способа при применении среды указанного состава не соответствует требованиям Методических указаний по микробиологической диагностике заболеваний, вызываемых энтеробактериями МУ 04-723/3 [9], МУК 4.2.3115-13 «Лабораторная диагностика внебольничных пневмоний» [8]. Происходит снижение значений диаметра колоний и показателя прорастания (из посевной дозы 100 м.к.) элективно-дифференциальной питательной среды в отношении использованных для контроля штаммов К. pneumoniae, К. oxytoca, К. aerogenes за счет возрастания содержания ингибитора - железа (II) сернокислого семиводного и повышения плотности агарового геля.As can be seen from Table 1, the implementation of the proposed method using the medium of the specified composition does not meet the requirements of the Methodological Guidelines for Microbiological Diagnostics of Diseases Caused by Enterobacteria MU 04-723/3 [9], MUK 4.2.3115-13 "Laboratory Diagnostics of Community-Acquired Pneumonia" [8]. There is a decrease in the values of the colony diameter and the germination index (from a seed dose of 100 m.c.) of the elective-differential nutrient medium in relation to the strains of K. pneumoniae, K. oxytoca, K. aerogenes used for control due to an increase in the content of the inhibitor - iron (II) sulfate heptahydrate and an increase in the density of the agar gel.
Таким образом, приведенные данные позволяют сделать вывод, что осуществление предлагаемого способа выделения Klebsiella spp. с применением сред, составленных по примерам №1, №2, №5 и №6 не удовлетворяет требованиямThus, the presented data allow us to conclude that the implementation of the proposed method for isolating Klebsiella spp. using media prepared according to examples No. 1, No. 2, No. 5 and No. 6 does not meet the requirements
Осуществление указанного выше способа удовлетворяет требованиям МУ 04-723/3, МУК 4.2.3115-13 с применением сред, состав которых приведен в примерах №3 и №4. Использование среды, указанной в примере №3, является экономически более выгодным.The implementation of the above method satisfies the requirements of MU 04-723/3, MUK 4.2.3115-13 using the media, the composition of which is given in examples No. 3 and No. 4. The use of the medium specified in example No. 3 is more economically advantageous.
Источники информацииSources of information
1. Анганова, Н.В. Характеристика условно-патогенных возбудителей острых кишечных инфекций / Е.В. Анганова, Н.Н. Чемезова, Н.В. Ермолаева, Л.А. Распопина // Журнал инфекционной патологии. 2010. - №19. - С. 12-23.1. Anganova, N.V. Characteristics of opportunistic pathogens causing acute intestinal infections / E.V. Anganova, N.N. Chemezova, N.V. Ermolaeva, L.A. Raspopina // Journal of Infectious Pathology. 2010. - No. 19. - P. 12-23.
2. Бардашева, А.В. Генетическая характеристика клинических изолятов клебсиелл, циркулирующих в Новосибирске / А.В. Бардашева, Н.В. Фоменко, Т.В. Калимбетова, И.В. Бабкин, С.О. Кретьен, Е.В. Жираковская, Н.В. Тикунова, В.В. Морозова // Вавиловский журнал генетики и селекции. 2021. Т.25. - №2. - С. 234-245.2. Bardasheva, A.V. Genetic characteristics of clinical isolates of Klebsiella circulating in Novosibirsk / A.V. Bardasheva, N.V. Fomenko, T.V. Kalimbetova, I.V. Babkin, S.O. Chretien, E.V. Zhirakovskaya, N.V. Tikunova, V.V. Morozova // Vavilov Journal of Genetics and Breeding. 2021. Vol. 25. - No. 2. - P. 234-245.
3. Ибрагимов Ф.Х., Журавлева Л.А., Бочановский В.А., Резаев А.А. Селективная питательная среда для выделения клебсиелл. Патент РФ № RU 2265056. Опубл. 27.11.2005. Бюл. №33.3. Ibragimov F.Kh., Zhuravleva L.A., Bochanovsky V.A., Rezaev A.A. Selective nutrient medium for the isolation of Klebsiella. RF Patent No. RU 2265056. Publ. 27.11.2005. Bull. No. 33.
4. Калина, Г.П. Среды узконаправленного действия для обнаружения клебсиелл / Г.П. Калина // ЖМЭИ. 1980. - №6. - С. 28-32.4. Kalina, G.P. Narrowly targeted action media for detection of Klebsiella / G.P. Kalina // ZhMEI. 1980. - No. 6. - P. 28-32.
5. Меджидов, М.М. Региональные проблемы антибиотикорезистентности микроорганизмов // Антибиотикорезистентность и антимикробная химиотерапия: Материалы 2-ой Всероссийской практической конференции. - Махачкала, 2008. С. 5-7.5. Medzhidov, M.M. Regional problems of antibiotic resistance of microorganisms // Antibiotic resistance and antimicrobial chemotherapy: Proceedings of the 2nd All-Russian practical conference. - Makhachkala, 2008. P. 5-7.
6. Меджидов М.М., Степанова Э.Д., Юнусова Р.Ю. Хромогенная питательная среда для выделения и идентификации клебсиелл. Патент РФ № RU 2416635. Опубл. 20.04.2011. Бюл. №11.6. Medzhidov M.M., Stepanova E.D., Yunusova R.Yu. Chromogenic nutrient medium for the isolation and identification of Klebsiella. RF Patent No. RU 2416635. Publ. 04/20/2011. Bull. No. 11.
7. Методические указания: Методы контроля бактериологических питательных сред: МУК 4.2.2316 - 08 (утверждены Главным санитарным врачом Российской Федерации 18.01.2008) М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2008. - 52 с.7. Guidelines: Methods of control of bacteriological nutrient media: MUK 4.2.2316 - 08 (approved by the Chief Sanitary Doctor of the Russian Federation on 18.01.2008) Moscow: Federal Center for Hygiene and Epidemiology of Rospotrebnadzor, 2008. - 52 p.
8. Методические указания: 4.2. Методы контроля. Биологические и микробиологические факторы. Лабораторная диагностика внебольничных пневмоний: МУК 4.2.3115-13 (утверждены Главным санитарным врачом Российской федерации 21.10.2013). М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2014. - 39 с.8. Guidelines: 4.2. Control methods. Biological and microbiological factors. Laboratory diagnostics of community-acquired pneumonia: MUK 4.2.3115-13 (approved by the Chief Sanitary Doctor of the Russian Federation on 21.10.2013). Moscow: Federal Center for Hygiene and Epidemiology of Rospotrebnadzor, 2014. - 39 p.
9. Методические указания по микробиологической диагностике заболеваний, вызываемых энтеробактериями: МУ 04-723/3 (утверждены зам. министра здравоохранения СССР 17.12.1984). М.: МЗ СССР, 1985. - 32 с.9. Guidelines for microbiological diagnostics of diseases caused by enterobacteria: MU 04-723/3 (approved by the Deputy Minister of Health of the USSR on 17.12.1984). Moscow: USSR Ministry of Health, 1985. - 32 p.
10. Пай, Г.В. сравнение патогенного потенциала изолятов Klebsiella pneumonia, выделенных из кишечной микробиоты человека, из поверхностных сточных вод //Г.В. Пай, Д.В. Ракитина, Н.Н. Пенькова, СМ. Юдин, А.В. Загайнова // Гигиена и санитария. 2020. Т. 99. - №19. - С. 1360-1364.10. Pai, G.V. Comparison of the pathogenic potential of Klebsiella pneumonia isolates isolated from human intestinal microbiota from surface wastewater // G.V. Pai, D.V. Rakitina, N.N. Penkova, S.M. Yudin, A.V. Zagaynova // Hygiene and Sanitation. 2020. Vol. 99. - No. 19. - P. 1360-1364.
11. Рахманин, Ю.А. Распространение бактерий рода Klebsiella в водных объектах и их значение в возникновении водообусловленных острых кишечных инфекций / Ю.А. Рахманин, Л.В. Иванова, Т.З. Артемова, Е.К. Гипп, А.В. Загайнова, Т.Н. Максимкина, А.В. Красняк, П.В. Журавлев, В.В. Алешня, О.В. Панасовец // Гигиена и санитария. 2016. Т.95.- №4.- С. 397-406.11. Rakhmanin, Yu. A. Spread of Klebsiella bacteria in water bodies and their importance in the occurrence of water-related acute intestinal infections / Yu. A. Rakhmanin, L. V. Ivanova, T. Z. Artemova, E. K. Gipp, A. V. Zagaynova, T. N. Maksimkina, A. V. Krasnyak, P. V. Zhuravlev, V. V. Aleshnya, O. V. Panasovets // Hygiene and Sanitation. 2016. Vol. 95.- No. 4.- P. 397-406.
12. Сиволодский Е.П. Способ выделения и идентификации бактерий рода Klebsiella. Патент РФ № RU 2535881. Опубл. 20.12.2014. Бюл. №35.12. Sivolodskiy E.P. Method for isolation and identification of bacteria of the genus Klebsiella. Russian Federation Patent No. RU 2535881. Published 20.12.2014. Bulletin No. 35.
13. Шепелин А.П., Марчихина И.И., Полосенко О.В., Шолохова Л.П. Дифференциально-элективная питательная среда для выделения клебсиелл. Патент РФ № RU 2704854. Опубл. 31.10.2019. Бюл. №31.13. Shepelin A.P., Marchikhina I.I., Polosenko O.V., Sholokhova L.P. Differential-selective nutrient medium for the isolation of Klebsiella. Russian Federation Patent No. RU 2704854. Published 10/31/2019. Bulletin No. 31.
14. Choby, J.E. Hypervirulent Klebsiella pneumoniae - clinical and molecular perspectives (Review) / J.E. Choby, J. Howard-Anderson, D.S. Weiss // J. Intern. Med. - 2020, № 287. - P. 283-300.14. Choby, J.E. Hypervirulent Klebsiella pneumoniae - clinical and molecular perspectives (Review) / J.E. Choby, J. Howard-Anderson, D.S. Weiss // J. Intern. Med. - 2020, No. 287. - P. 283-300.
15. Lightfoot, N. Bacteria of potential health concern. In: World Health Organization (WHO). Heterotrophic Plate Counts and Drinking Water Safety. London; 2003:61-79.15. Lightfoot, N. Bacteria of potential health concern. In: World Health Organization (WHO). Heterotrophic Plate Counts and Drinking Water Safety. London; 2003:61-79.
Claims (9)
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2827840C1 true RU2827840C1 (en) | 2024-10-02 |
Family
ID=
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2265056C2 (en) * | 2003-03-27 | 2005-11-27 | Ибрагимов Фарис Харисович | Selective nutrient medium for isolation of klebsiella |
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2265056C2 (en) * | 2003-03-27 | 2005-11-27 | Ибрагимов Фарис Харисович | Selective nutrient medium for isolation of klebsiella |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| CHOBY, J.E. Hypervirulent Klebsiella pneumoniae - clinical and molecular perspectives (Review), J. Intern. Med, 2020, N 287, p. 283-300. * |
| КАЛИНА, Г.П. Среды узконаправленного действия для обнаружения клебсиелл, ЖМЭИ. 1980, N 6, c. 28-32. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN103282513B (en) | For detecting goods and the method for target microorganism | |
| US5786167A (en) | Method and culture medium for identification of salmonellae | |
| US5726031A (en) | Test media and quantitative method for identification and differentiation of biological materials in a test sample | |
| JPH09512438A (en) | Microbiological medium | |
| CN110129406A (en) | A kind of pseudomonas aeruginosa chromogenic culture medium and the method quickly detected using it | |
| US4279995A (en) | Selective salmonella carbohydrate and medium constructed therefrom | |
| RU2342435C2 (en) | Selective culture medium for separatng and detecting types of streptococcus | |
| MX2014007888A (en) | Method of detecting a salmonella microorganism. | |
| CN101970682A (en) | Method for detecting and/or identifying clostridium difficile | |
| Torzewska et al. | Influence of various uropathogens on crystallization of urine mineral components caused by Proteus mirabilis | |
| RU2827840C1 (en) | Elective-differential nutrient medium for klebsiella species recovery | |
| EP1300471A1 (en) | Nutritional mixture and method for early identification and count of gram-negative organisms | |
| US9404141B2 (en) | Method for detecting the presence or absence of a target microbe in a test sample | |
| AL-Rubaye et al. | Isolation and Diagnosis of Multi Drug Resistance Pseudomonas Aeruginosa from Wound and Burnpatients in Baghdad City | |
| Arroyo et al. | Selective action of inhibitors used in different culture media on the competitive microflora of Salmonella | |
| Magalhães et al. | Traditional methods of analysis for Listeria monocytogenes | |
| CN106086159B (en) | A kind of zymolyte culture medium that can detect two kinds of fecal pollution indicator bacterias simultaneously and its application | |
| RU2416635C2 (en) | Chromogenic culture medium for detecting and identifying klebsiella | |
| Arshad et al. | Manipulation of different media and methods for cost-effective characterization of Escherichia coli strains collected from different habitats | |
| Aziz | Isolation and Identification of MDR Solmonella Typhi from Different Food Products in District Peshawar, KPK, Pakistan | |
| RU2827845C1 (en) | Elective nutrient medium for pseudomonas aeruginosa recovery | |
| RU2778997C1 (en) | Nutrient medium for differentiation of parahemolytic vibrios | |
| Zhumakayeva et al. | Microbial composition of livestock buildings is the basis for the creation of a biological preparation to stabilize the microbial background | |
| RU2715329C1 (en) | Nutrient medium for separation and identification of non-fermenting bacteria | |
| RU2709136C1 (en) | Nutrient medium for pseudomonas aeruginosa release |