MX2012006311A - Nuevos compuestos triciclicos. - Google Patents

Nuevos compuestos triciclicos.

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Neil Wishart
Anna M Ericsson
Dawn M George
Grier A Wallace
Kent D Stewart
Kristine E Frank
Michael J Morytko
Maria A Argiriadi
Nathan S Josephsohn
Michael Friedman
Kevin R Woller
Lu Wang
Eric R Goedken
Biqin C Li
David J Calderwood
Bryan A Fiamengo
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Abstract

La invención proporciona los compuestos de la Fórmula (I) y Fórmula (II), sales farmacéuticamente aceptables, profármacos, metabolitos biológicamente activos, estereoisómeros e isómeros de los mismos, en donde las variables son definidas en la presente. Los compuesto de la invención son útiles para tratar enfermedades inmunológicas y oncológicas.

Description

NUEVOS COMPUESTOS TRICICL1COS Referencia a Solicitudes Relacionadas Esta solicitud invoca prioridad a la Solicitud Provisional de Patente Norteamericana Acta No: 61/265,563 presentada el 1 de diciembre de 2009 y la Solicitud Provisional de Patente Norteamericana Acta No: 61/364.116, presentada el 14 de julio de 2010, cuyos contenidos se incorporan en la presente.
Antecedentes de la Invención La invención proporciona una nueva clase de compuestos, composiciones farmacéuticas que comprenden a dichos compuestos y métodos de uso de dichos compuestos para tratar o prevenir enfermedades o trastornos asociados con una actividad quinasa anormal o desregulada, en particular enfermedades o trastornos que comprenden una activación anormal de las quinasas Jak1, Jak2, Jak3, Tyk2, KDR, Flt-3, CDK2, CDK4, TANK, Trk, FAK, Abl, Bcr-Abl, cMet, b-RAF, FGFR3, c-kit, PDGF-R, Syk, BTK, CSF1R, PKC o Aurora quinasas.
Las proteína quinasas representan una gran familia de proteínas que cumplen un rol central en la regulación de una amplia variedad de procesos celulares y mantenimiento de la función celular. Un listado parcial, No. limitativo, de estas quinasas incluye: tirosina quinasas que No. son de receptores tal como la familia de las Janus quinasas (Jak1, Jak2, Jak3 y Tyk2); las quinasas de fusión, tal como BCR-Abl, quinasas de adhesión focal (FAK por sus siglas en inglés), Fes, Lck y Syk; tirosina quinasas de receptores tales como las quinasas de los receptores de factores de crecimiento derivados de plaquetas (PDGF-R por sus siglas en inglés), la quinasa de receptores para el factor de células madre, c-kit, el receptor del factor de crecimiento de hepatocitos, c-Met y el receptor del factor de crecimiento de fibroblastos, FGFR3; y serina/treonina quinasas tal como b-RAF, proteína quinasas activadas por mitógeno (por ejemplo, MKK6) y SAPK2p. Se ha observado una actividad aberrante en numerosos estados de enfermedad entre los que se incluyen los trastornos proliferativos malignos así como las o enfermedades debidas a la activación ¡napropiada del sistema inmune y nervioso. Los nuevos compuestos de esta invención inhiben la actividad de una o más proteína quinasas y, por ello, se espera que sean de utilidad en el tratamiento de enfermedades mediadas por quinasas.
Breve Descripción de la Invención En una primera modalidad la invención proporciona un compuesto de Fórmula (I) sales aceptables farmacéuticamente, profármacos, métabolitos biológicamente activos, estereoisómeros e isómeros del mismo donde t es N, U es N, X es CR3 e Y es N; o t es CR6, U es N, X es CR3 e Y es N; o t es N, U es CR4, X es CR3 e Y es N; o t es CR6, U es CR4, X es CR3 e Y es N; o ? es CR6, U es N, X es NR3 e Y es C; o ? es 0, U es N, X es CR3 e Y es C; o t es NR6, U es N, X es CR3 e Y es C; o t es CR6, U es CR4, X es NR3 e Y es C; o t es s, u es N, X es CR3 e Y es C; o t es N, U es CR4, X es NR3 e Y es C; o t es N, U es N, X es NR3 e Y es C; R 1. R2 y R5 son en forma independiente entre sí hidrógeno deuterio, -N(Ra)(Rb), halógeno, -0Ra, -SRa, -S(0)Ra, -S(0)2Ra, -N02, -C(0)ORa, -CN, -C(0)N(Ra)(Rb), -N(Ra)C(0)(Rb), -C(0)Ra, -C(OH)RaRb, -N(Ra)S(0)2-R , -S(0)2N(Ra)(R ), -CF3, -OCF3, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, alquenilo de 2 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, alquinilo de 2 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, heteroarilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, heterociclilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, o arilo de 6 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido; donde en una unidad que contiene -N(Ra)(Rb), el nitrógeno, Ra y R pueden formar un anillo tal que -N(Ra)(Rb) representa un heterociclilo de 2 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido o heteroarilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido unidos por medio de un nitrógeno; R3 es hidrógeno, un cicloalquilo de 5 a 12 átomos de carbono en puente opcionalmente sustituido, heterociclilo de 2 a 10 átomos de carbono en puente opcionalmente sustituido, alquilo de 1 a 8 átomos de carbono opcionalmente sustituido, cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, cicloalquenilo de 3 a 8 átomos de carbono opcionalmente sustituido, arilo de 6 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, heteroarilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, heterociclilo de 2 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido; o R3 es -A-D-E-G, donde: A es una unión, -C(O)-, alquileno de 1 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, alquenileno de 2 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, alquinileno de 2 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, cicloalquileno de 3 a 12 átomos de carbono opcionalmente sustituido, heterociclileno de 2 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, -C(0)N(Ra)-Re-, -N(Ra)C(0)-Re-, -0-Re-, -N(Ra)-Re-, -S-Re-, -S(0)2-Re-, -S(0)Re-, -C(0-Ra)(Rb)-Re-, -S(0)2N(Ra)-Re-, -N(Ra)S(0)2-Re- o -N(Ra)C(0)N(Rb)-Re-; D es un alquileno de 1 a 8 átomos de carbono opcionalmente sustituido, cicloalquileno de 5 a 12 átomos de carbono en puente opcionalmente sustituido, cicloalquileno de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, cicloalquenileno de 5 a 10 átomos de carbono en puente opcionalmente sustituido, cicloalquenileno de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, arileno de 6 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, heteroarileno de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, heterociclilenó de 2 a 10 átomos de carbono en puente opcionalmente sustituido o un heterociclilenó de 2 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido; E es una unión, -Re-, -Re-C( = NCN)-Re-, -Re-C(0)-Re-, -Re-C(0)C(0)-Re-, -Re-C(0)0-Re-, -Re-C(0)C(0)N(Ra)-Re-, -Re-N(Ra)-C(0)C(0)-Re-, -Re-0-Re-, -Re-S(0)2-Re-, -Re-S(0)-Re-, -Re-S-Re-, -Re-N(Ra)-Re-, =N-Re-, -Re-N(Ra)C(0)-Re-, -ReC(0)N(Ra)Re-, -Re-OC(0)N(Ra)-Re-, -Re-N(Ra)C(0)ORe-, -Re-OC(0)-Re, -Re-OC(0)-0-Re, -Re-N(Ra)C(0)N(Rb)-Re-, -Re-N(Ra)S(0)2-Re-, -Re-S(0)2N (Ra)-Re-, o -Re-N(Ra)S(0)2N(Ra)-Re-; o donde en todos los casos, E se une a un carbono o bien a un átomo de nitrógeno en D; G es hidrógeno, deuterio, -N(Ra)(Rb), halógeno, -ORa, -SRa, -S(0)Ra, -S(0)2Ra, -N02, -C(0)ORa, -CN, -C(0)N(Ra)(Rb), -N(Ra)C(0)Rb, -N(Ra)C(0)ORb, -OC(0)N(Ra), -N(Ra)C(0)N(R )2, -C(0-Ra)(Rb)2, -C(0)Ra, -CF3) -OCF3, -N(Ra)S(0)2Rb, -S(0)2N(Ra)(Rb), -S(0)2N(Ra)C(0)R , un -alquilo de 1 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un -alquenilo de 2 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un -alquinilo de 2 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un -cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un -heteroarilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un -heterociclilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un -arilo de 6 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido; donde en una unidad que contiene -N(Ra)(Rb), el nitrógeno, Ra y Rb pueden formar un anillo tal que -N(Ra)(Rb) representa un heterociclilo de 2 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido un heteroarilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido unidos por medio de un nitrógeno; R4 y R6 son en forma independiente entre sí un hidrógeno, halógeno, deuterio, CF3, CHF2, CH2F, CH2CF3, C(0)OH, C(0)OCH3, CN, un grupo cicloalquilo de 5 a 12 átomos de carbono en puente opcionalmente sustituido, un grupo heterociclilo de 2 a 10 átomos de carbono en puente opcionalmente sustituido, alquilo de 1 a 8 átomos de carbono opcionalmente sustituido, cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, cicloalquenilo de 3 a 8 átomos de carbono opcionalmente sustituido, arilo de 6 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, heteroarilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, heterociclilo de 2 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido o -J-L-M-Q; donde: J es una unión, -C(O)-, alquileno de 1 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, alquenileno de 2 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, alquinileno de 2 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, cicloalquileno de 3 a 12 átomos de carbono opcionalmente sustituido, heterociclileno de 2 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, -C(0)N(Ra)-Re-, -N(Ra)C(0)-Re-, -0-Re-, -N(Ra)-Re-, -S-Re-, -S(0)2-Re-, -S(0)Re-, -C(0-Ra)(Rb)- e-, -S(0)2N(Ra)-Re-, -N(Ra)S(0)2-Re- o -N(Ra)C(0)N(R )-Re-; L es una unión, un alquileno de 1 a 8 átomos de carbono opcionalmente sustituido, cicloalquileno de 5 a 12 átomos de carbono en puente opcionalmente sustituido, cicloalquileno de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, cicloalquenileno de 5 a 10 átomos de carbono en puente opcionalmente sustituido, cicloalquenileno de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, arileno de 6 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, heteroarileno de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, heterociclileno de 2 a 10 átomos de carbono en puente opcionalmente sustituido o un heterociclileno de 2 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido; M es una unión, -Re-, -Re-C(0)-Re-, -Re-C(0)C(0)-Re-, -Re-C(0)0-Re-, -Re-OC(0)-Re, -Re-C(0)C(0)N(Ra)-Re-, -Re-N(Ra)-C(0)C(0)-Re-, -Re-0-Re-, -Re-S(0)2-Re-, -Re-S(0)-Re-, -Re-S-Re-, -Re-N(Ra)-Re-, -Re-N(Ra)C(0)-Re-, -Re-C(0)N(Ra)Re-, -Re-OC(0)N(Ra) -Re-, -Re-N(Ra)C(0)ORe-, -Re-N(Ra)C(0)N(Rb)-Re-, -Re-N(Ra)S(0)2-Re-, o -Re-S(0)2N(Ra)-Re-; o M es donde en todos los casos, M se une a un carbono o bien a un átomo de nitrógeno en L; Q es hidrógeno, deuterio, -N(Ra)(Rb), halógeno, -ORa, -SRa, -S(0)Ra, -S(0)2Ra, -N02, -C(0)ORa, -CN, -C(0)N(Ra)(Rb), -N(Ra)C(0)R , -N(Ra)C(0)OR , -N(Ra)C(0)N(Rb)2) -C(0-Ra)(Rb)2, -C(0)Ra, -CF3, -OCF3, -N(Ra)S(0)2Rb, -S(0)2N(Ra)(Rb) , -S(0)2N(Ra)C(0)Rb, un alquilo de 1 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un alquenilo de 2 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un alquinilo de 2 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un heteroarilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un heterociclilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un arilo de 6 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido; donde en una unidad que contiene -N(Ra)(Rb), el nitrógeno, Ra y Rb pueden formar un anillo tal que -N(Ra)(Rb) representa un heterociclilo de 2 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido a un heteroarilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido unidos por medio de un nitrógeno; Ra y Rb son en forma independiente entre sí hidrógeno, deuterio, CN, un alquilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un alquenileno de 2 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un alquinileno de 2 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un alquilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido-O-alquilo de 1 a 10 átomos de carbono, un cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un arilo de 6 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un heteroarilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un heterociclilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un alquileno de 1 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido-un cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono, un alquileno de 1 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido-un arilo de 6 a 10 átomos de carbono, un alquileno de 1 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido-un heteroarilo de 1 a 10 átomos de carbono, o un alquileno de 1 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido-heterociclilo de 1 a 10 átomos de carbono; y Re en cada oportunidad es en forma independiente una unión, un alquileno de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un alquenileno de 2 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un alquinileno de 2 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un grupo alquileno de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido-O-alquileno de 1 a 10 átomos de carbono, un cicloalquileno de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un arileno de 6 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un heteroarileno de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, o un heterociclileno de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido; siempre que cuando T es N, U es CR4, X es NR3 e Y es C, R4 No. es OH; siempre que cuando T es N, U es CR4, X es NR3 e Y es C, R1 es H; siempre que cuando el compuesto es R3 tiene los valores que se definen precedentemente y R6 no se une al anillo pirazol mediante un átomo de nitrógeno u oxígeno; y siempre que cuando el compuesto es R3 es H, CH3 o -C(0)OH luego R4 No. es H, -C(0)OCH2CH3, -C(0)NH-fenilo opcionalmente sustituido, -NHC(O)-fenilo opcionalmente sustituido o -S(0)2-fenilo.
En una segunda realización la invención proporciona un compuesto de acuerdo con la primera modalidad donde R3 es -A-D-E-G y A es una unión, alquileno de 1 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, cicloalquileno de 3 a 12 átomos de carbono opcionalmente sustituido o heterociclileno de 2 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido.
En una tercera modalidad la invención proporciona un compuesto de acuerdo con cualquiera de las modalidades precedentes donde R3 es -A-D-E-G y D es un alquileno de 1 a 8 átomos de carbono opcionalmente sustituido, cicloalquileno de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, cicloalquenileno de 5 a 10 átomos de carbono en puente opcionalmente sustituido, heterociclileno de 3 a 10 átomos de carbono en puente opcionalmente sustituido o heterociclileno de 2 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido.
En una cuarta modalidad la invención proporciona un compuesto de acuerdo con cualquiera de las 3 modalidades precedentes donde D es alquileno de 1 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, cicloalquileno de 3 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, biciclo[2,2,2]octan-1 -ilo opcionalmente sustituido, 2,5-diazabiciclo[2,2,1]heptano opcionalmente sustituido, 2,6-diazabiciclo[3,2,1]octano opcionalmente sustituido, octahidropirrolo[3,4-c]pirrol opcionalmente sustituido, octahidropirrolo[3,2-b]piridina opcionalmente sustituida, 1,4-diazepan opcionalmente sustituido, cubano opcionalmente sustituido, 1 ,4-dioxano-espiro[4,4]nonano opcionalmente sustituido, 2,5-diazaespiro[3,5]nonano opcionalmente sustituido, piperidina opcionalmente sustituida, piperazina opcionalmente sustituida, pirrolidina opcionalmente sustituida, tetrahidrofurano opcionalmente sustituido o tetrahidropirano opcionalmente sustituido.
En una quinta modalidad la invención proporciona un compuesto de acuerdo con cualquiera de las modalidades precedentes donde R3 es -A-D-E-G y E es una unión, -Re-, -Re-C(0)-Re-, -Re-0-Re-, -Re-S(0)2-Re-, -Re-N(Ra)-Re-, =N-Re-. -Re-N(Ra)C(0)-Re-, -Re-N(Ra)C(0)0-Re-, -Re-N(Ra)C(0)N(Rb)-Re-, -ReC(0)N(Ra)Re-, -Re-N(Ra)S(0)2-Re-, -Re-S(0)2N(Ra)-Re-, -Re-N(Ra)S(0)2N(Ra)-Re-, -Re-OC(0)N(Ra)-Re, -Re-C(0)0-Re, -Re-OC(0)-Re; o L ; donde Ra en cada oportunidad es en forma independiente hidrógeno, CN, un alquilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido o un alquileno de 1 a 6 átomos de carbono-cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido; y Re en cada oportunidad es en forma independiente una unión, un alquileno de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un cicloalquileno de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un arileno de 6 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un heteroarileno de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, o un heterociclileno de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido.
En una sexta modalidad la invención proporciona un compuesto de acuerdo con cualquiera de las modalidades precedentes donde R3 es -A-D-E-G y G es hidrógeno, deuterio, -N(Ra)(Rb), halógeno, -ORa, -S(0)2Ra, -CN, -C(0)N(Ra)(Rb), -N(Ra)C(0)Rb, -CF3, -S(0)2N(Ra)(Rb), un -alquilo de 1 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un -cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un -heteroarilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un -heterociclilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, o un -arilo de 6 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido; donde en una unidad que contiene -N(Ra)(Rb), el nitrógeno, Ra y Rb pueden formar un anillo tal que -N(Ra)(Rb) representa un (C2-C 0)heterociclilo opcionalmente sustituido o un (d-C10) hetefoarilo opcionalmente sustituido unidos por medio de un nitrógeno; Ra es en forma independiente hidrógeno, CN, un alquilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, o un arilo de 6 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido.
En una séptima modalidad la invención proporciona un compuesto de acuerdo con cualquiera de las modalidades precedentes donde G es hidrógeno, deuterio, -N(Ra)(Rb), halógeno, -ORa, -S(0)2Ra, -CN, -C(0)N(Ra)(Rb), -N(Ra)C(0)Rb, -CF3, -S(0)2N(Ra)(Rb), un -alquilo de 1 a 4 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un -cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, azepanilo opcionalmente sustituido, azetidinilo opcionalmente sustituido, benzo[d]isoxazol¡lo opcionalmente sustituido, 4,5-dihidroisoxazolilo opcionalmente sustituido, isotiazolidinilo opcionalmente sustituido, isotiazolilo opcionalmente sustituido, isoxazolilo opcionalmente sustituido, morfolinilo opcionalmente sustituido, oxadiazolilo opcionalmente sustituido, oxazolilo opcionalmente sustituido, oxétanilo opcionalmente sustituido, fenilo opcionalmente sustituido, piperazinilo opcionalmente sustituido, piperidinilo opcionalmente sustituido, pirazinilo opcionalmente sustituido, pirázolilo opcionalmente sustituido, piridazinilo opcionalmente sustituido, piridinilo opcionalmente sustituido, pirimidinilo opcionalmente sustituido, pirrolidinilo opcionalmente sustituido, pirrolilo opcionalmente sustituido, tetrahidrofuranilo opcionalmente sustituido, tetrahidropiranoílo opcionalmente sustituido, tetrahidrotiopiranilo opcionalmente sustituido, tienilo opcionalmente sustituido, tiomorfolinilo opcionalmente sustituido, 1,1-dioxo-tiomorfolinilo opcionalmente sustituido, tiazolilo opcionalmente sustituido o triazolilo opcionalmente sustituido.
En una octava modalidad la invención proporciona un compuesto de acuerdo con cualquiera de las modalidades precedentes donde R3 es hidrógeno, alquilo de 1 a 8 átomos de carbono opcionalmente sustituido, cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, o heterociclilo de 2 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido.
En una novena modalidad la invención proporciona un compuesto de acuerdo con cualquiera de las modalidades precedentes donde R6 es -J-L- -Q y J es una unión, alquileno de 1 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, o un alquenileno de 2 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido.
En una décima modalidad la invención proporciona un compuesto de acuerdo con cualquiera de las modalidades precedentes donde R6 es -J-L-M-Q y L es una unión, o un alquileno de 1 a 8 átomos de carbono opcionalmente sustituido.
En una undécima modalidad la invención proporciona un compuesto de acuerdo con cualquiera de las modalidades precedentes donde R6 es -J-L-M-Q y M es una unión, -Re-, -Re-C(0)-Re-, -Re-0-Re-, -Re-S(0)2-Re-, -Re-S(0)-Re-, -Re-S-Re-, -Re-N(Ra)-Re-, -R8-N(Ra)C(0)-Re-, -Re-C(0)N(Ra)Re-, -Re-N(Ra)C(0)N(Rb)-Re-, -Re-N(Ra)S(0)2-Re-, o -Re-S(0)2N(Ra)-Re-; donde en todos los casos, M se une a un carbono o bien a un átomo de nitrógeno en L.
En una duodécima modalidad la invención proporciona un compuesto de acuerdo con cualquiera de las modalidades precedentes donde R6 es -J-L-M-Q y Q es hidrógeno, deuterio, -N(Ra)(Rb), halógeno, -ORa, -SRa, -S(0)Ra, -S(0)2Ra, -N02, -C(0)ORa, -CN, -C(0)N(Ra)(Rb), -N(Ra)C(0)Rb, -N(Ra)C(Ó)ORb, -N(Ra)C(0)N(Rb)2, -C(0-Ra)(Rb)2, -C(0)Ra, -CF3, -OCF3, -N(Ra)S(0)2Rb, -S(0)2N(Ra)(Rb), -S(0)2N(Ra)C(0)Rb, un alquilo de 1 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un heteroarilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un heterociclilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un arilo de 6 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido; donde en una unidad que contiene -N(Ra)(Rb), el nitrógeno, Ra y Rb pueden formar un anillo tal que -N(Ra)(Rb) representa un heterociclilo de 2 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido a un heteroarilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido unidos por medio de un nitrógeno; Ra y Rb son en forma independiente entre sí hidrógeno, deuterio, un alquilo de 1 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un alquenileno de 2 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un arilo de 6 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un heteroarilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, o un heterociclilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido.
En una decimotercera modalidad la invención proporciona un compuesto de acuerdo con cualquiera de las modalidades precedentes donde T es N, U es N, X es CR3 e Y es N y forma un compuesto de Fórmula (la) Fórmula (la).
En una decimocuarta modalidad la invención proporciona un compuesto de acuerdo a la decimotercera modalidad donde en el compuesto es A/-(1-((6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)methil)ciclobutil)ciclopropansulfonamida; A/-(1-((6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)metil)ciclobutil)-2-cianoacetamida; (S)-1-((1-(ciclopropilsulfonil)pirrolidin-3-il)metil)-6/-/-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina; ?/-((1 S,3R,4f?)-4-etil-3-fluoro-3-(6H-pirrolo[2,3- e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-¡l)c¡clopentil)ciclopropansulfonam¡da; A/-((1R,3S,4S)-4-etil-3-fluoro-3-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentil)ciclopropansulfonamida; ?/-((1 R,3 ?,4S)-4-etil-3-fluoro-3-(6H-pirrolo[213-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentil)ciclopropansulfonamida; /V-((1 S,3S,4R)-4-etil-3-fluoro-3-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentil)ciclopropansulfonamida; (1 S,3R)-1-[3-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin il)-isotiazolidin-2-il-1,1-dioxide]ciclopentano; ?/-((1 S,3 ,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3 a]pirazin-1-il)ciclopentil)-/V-metilciclopropansulfonamida; 1-((1 S,2ft,4S)-2-etil-4-(4-metoxibenciloxi)ciclopentil)-6/-/-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina; (S)-5-(3-((6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)metil)pirrolidin-1-il)pirazina-2-carbonitrilo; /V-(ciclopropilmetil)-/V-((1 S,3f?,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[213-e][ ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentil)ciclopropansulfonamida; /V-((1S,3f?)-3-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin 1-il)ciclopentil)-2-(4-cianofenil)acetarnida; ?/-((1 S,3ft)-3-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]tnazolo[4,3-a]pirazin 1-¡l)ciclopentil)ciclopropanocarboxam¡da; ?/-((1 S,3R)-3-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-¡l)ciclopentil)-2-ciclopropilacetamida; /V-((1S,3ft)-3-(6H-p¡rrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]p¡razin-1-il)ciclopentil)-4-c¡anobenzam¡da; A/,A/-dietil-1-(3-et¡l-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2 ,4]triazolo[4, 3-a]pirazin-1-¡l)ciclopentil)metansulfonam¡da; 1-((1S,2S,4R)-4-((azetidin-1-Msulfonil)metil)-2-etilciclopentil)-6/-/-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]piraz¡na; 1-((1f?,2R,4S)-4-((azet¡din-1-ilsulfon¡l)metil)-2-etilciclopentil)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]tr¡azolo[4,3-a]pirazina; 1 -((1 ,2S,4R)-4-((azetidin-1 ¡lsulfonil)met¡l)-2-etilciclopentil)-6--pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a3p¡razina; 1-((1S,2 ,4S)-4-((azetidin-1-ilsulfonil)metil)-2-etilciclopentil)-6--pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]piraz¡na; ?/-((1 S,3 ,4S)-3-etil-4-(7-met¡l-6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]tr¡azolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentil)ciclopropansulfonam¡da; A/-((1S,3ft,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentil)-/\/-(2-h¡droxiet¡l)ciclopropansulfonamida; 5-((1ft,3ft)-3-(6/-V-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]p¡razin-1 -¡l)ciclopentilamino)pirazina-2-carbon¡tr¡lo /V-((1f?,3R)-3-(6/-/-p¡rrolo[2,3-e][1 ,2,4]tr¡azolo[4,3-a]pirazm-1-il)ciclopentil)-4-metilanilina; 1-((1R,3S)-3-(1 H-p¡rrol-1-¡l)ciclopent¡Í)-6W-pirrolo[2,3- e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina; 1-((1 S,3ft)-3-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]tnazolo[4,3-a]pirazin-1 il)ciclopentil)-1 H-pirrolo-3-carbonitrilo; ?/-((1 / )3f?)-3-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentil)anilina; A/-((1-((6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)metil)ciclobutil)metil)-2-cianoa ceta mida; A/-((1R,3ft)-3-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazih-1 - il)ciclopentil)-4-fluoroanilina; A/-((1R,3R)-3-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 - il)ciclopentil)-4-cloroanilina; ?/-((1 R,3f?)-3-(6/--pirrolo[2,3-e][1 ,2 ,4]triazolo[4, 3-a]pirazin-1 - M)ciclopentM)-3,4-dicloroanilina; A/-((1ft,3ft)-3-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentil)-4-metoxianilina; ?/-((1 R,3ft)-3-(6/-/-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentil)-4-metoxi-A/-(4-metoxifenil)anilina; 3-((3R,4R)-4-metil-3-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4 ,3-a]pirazin-1 - il)piperidin-1 - il)-3-oxopropanonitrilo; 1-metil- -((1 S,3 ,4S)-3-metil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentil)-1 H-pirazole-4-sulfonamida; 3-((1 R,3R)-3-(6/-/-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 il)ciclopentilamino)benzonitrilo; /V-((1 S,3ft,4S)-3-metil-4-(6/--pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3 a]piraz¡n-1-il)ciclopent¡l)anilina; 4-((1 S,2R,4S)-4-(bencilox¡)-2-etilc¡clopent¡l)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina; 4- ((1 f?,2S,4R)-4-(benciloxi)-2-etilciclopentil)-6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]tr¡azolo[4,3-a]pirazina; 5- metil-A/-((1S,3R,4S)-3-metil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]piraz¡n-1-il)ciclopent¡l)isoxazol-4-sulfonamida; A/-(4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]piraz¡n-1 -il)biciclo[2,2,2]octan-1-il)ciclobutansulfonamida; 6- ((1R,3fl,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-¡l)c¡clopentiloxi)n¡cot¡non¡tr¡lo; /V-(4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)b¡ciclo[2,2 ,2]octan-1 - il)pirrolidina-1-carboxam¡da; 4-((1 ,3 ,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]p¡raz¡n-1-il)c¡clopentiloxi)benzonitrilo; 4-((1S,3S,4tf)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]tnazolo[4,3-a]p¡razin-1 -il)ciclopentiloxi)benzonitrilo; 4-metil-/V-((1 S,3R,4S)-3-metil-4-(6H-p¡rrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-aipirazin-1-il)ciclopent¡l)an¡l¡na; 4-cloro-A/-((1S,3R,4S)-3-metil-4-(6/--pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentil)an¡l¡na; 3- ((1S,3ft,4S)-3-met¡Í-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]tr¡azolo[4,3-a]pirazin-1-¡l)c¡clopentilamino)benzon¡tr¡lo; 4- fluoro-/V-((1 S,3 ,4S)-3-metil-4-(6AV-p¡rrolo[2,3- e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentil)anilina; ?/-((1 S,3S,4R)-3-metil-4-(6tf-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3 a]pirazin-1-il)ciclopentil)anilina; /V-((1f?,3f?,4S)-3-metil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3 a]pirazin-1-il)ciclopentil)anilina; 5- ((1 S,3ft,4S)-3-metil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-M)ciclopentilamino)pirazina-2-carbonitrilo; 6- ((1 S,3/:?,4S)-3-metil-4-(6H-pirrolot2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentilamino)nicotinonitrilo; 6-((1 ,3f?,4S)-3-etM-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentiloxi)nicotinonitrilo; 6-((1 S,3S,4f?)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentiloxi)nicotinonitrilo; 1 -((1 S,2S,4ft)-2-etM-4-(4-metoxibenciloxi)ciclopentM)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina; 1 -((1 f?,2R,4S)-2-etil-4-(4-metoxibenciloxi)ciclopentil)-6 --pirrolo[2,3-e][1 ,2 ,4]triazolo[4,3-a]pirazina; ?/-((1 S,3ft,4S)-3-etM-4-(6W-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentil)-3,3,3-trifluoropropano-1-sulfonamida; 5- ((1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentilamino)pirazina-2-carbonitrilo; 6- ((1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentilamino)nicotinonitrilo; 2-((1 S,3 ,4S)-3-metil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentilamino)tiazolo-5-carbonitrilo; A/-((1S,3ft,4S)-3-etil-4-(6tf-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3 a]pirazin-1-il)ciclopentil)azetidina-1-suifonamida; A/-((1R,3 ,4R)-3-etil-4-(6/-/-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3 a]pirazin-1-il)ciclopentil)ciclopropansulfonamida; ?/-((1 S,3S,4S)-3-etil-4-(6H-pirro!o[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3 a]pirazin-1-il)ciclopentil)ciclopropansulfonamida; 3-ciano-N-((1 S,3 ,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentil)azetidina-1-sulfonamida; ?/-((1 S,3tf,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3 a]pirazin-1-il)ciclopentil)-3,3-difluoroazetidina-1-sulfonamida; 5-((1 ?,3fl,4S)-3-et¡l-4-(6H-p¡rro!o[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-M)ciclopentiloxi)pirazina-2-carbonitrilo; 5- ((1 S,3S,4R)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentiloxi)pirazina-2-carbonitrilo; 6- ((1 S,3S,4S)-3-etil-4-(6/-/-pirrolo[2l3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 - il)ciclopentiloxi)nicotinonitrilo; 6-((1fi,3fi,4ft)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3 a]pirazin-1 - M)ciclopentiloxi)nicotinonitrilo; 2-((1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1!2,4]triazolo[4,3 a]pirazin-1 - il)ciclopentilamino)tiazolo-5-carbonitrilo; 5-((1 S,3ft,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3 a]pirazin-1 -il)ciclopentiloxi)pirazina-2-carbonitrilo; 5-((1 ,3S,4«)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4i3 a]pirazin-1 -il)ciclopentiloxi)pirazina-2-carbonitrilo; A/-(4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2 ,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -¡l)b¡c¡clo[2,2,2]octan-1 - i l)p¡rrol id ina-1 -sulfonamida; 5- (((1S,3R)-3-(6/-/-pirrolo[2,3-e][1,2,4]tr¡azolo[4,3-a]pirazin-1 - il)ciclopentil)metilamino)pirazina-2-carbon¡trilo; (S)-W-((1 S,3fi,4S)-3-etil-4-(6rV-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -i I) ciclope n ti l)-2-(trif luorometil)pirrol ¡din a- 1 -sulfonamida; /V-((1S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 - il)ciclopentil)-3,3-difluoropirrolid ina-1 -sulfonamida; A/-((1S,3R,4S)-3-etil-4-(6/--pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pi ra zin-1-il)ciclopentil)-4,4-difluoropiperidina-1 -sulfonamida; ?/-((1 S, 3/3,4 S)-3-etM-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]tr¡azolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentil)-1-metilciclopropano-1 -sulfonamida; A/-(4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)biciclo[2,2 ,2]octan-1 - i l)-1-metilciclopro paño- 1 -sulfonamida; A/-(4-(6/-/-pirrolo[2,3-e][1 ,2 ,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -i I ) b i c i c I o [2, 2, 2]octan-1 - i l)azetidina-1 -sulfonamida; 6- ((1S,3 ,4S)-3-metil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2 ,4]triazolo[4 , 3-a]piraz¡n-1-il)ciclopentilam¡no)nicotinonitrilo; ?/-((1 S,3ft,4f?)-3-et¡l-4-(6W-pirrolo[2,3-e][1 ,2 ,4]triazolo[4,3-a]piraz¡n-1-il)ciclopentil)ciclopentanosulfonamida; 5-(((1 S,3f?,4S)-3-etil-4-(6H-p¡rrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazoio[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentil)metoxi)pirazina-2-carboxamida; ((1 S,3f?,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4, 3-a]pirazin-1 - il)ciclopentil)metanol; ((1fi,3S,4f?)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentil)metanol; 5-(((1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 - il)ciclopentil)metoxi)pirazina-2-carbonitrilo; 5-(((1ft,3S,4fi)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 - il)ciclopentil)metoxi)pirazina-2-carbonitrilo; /V-(4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -¡ l)biciclo[2, 2, 2]octa n-1 - il)-3, 3-d ifluoroazetidina-1 -sulfonamida; /V-(3-etil-4-(6/-/-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentil)anilina; 1-((1S,2ft,4fl)-2-etil-4-(5-(trifluorometil)piridin-2-iloxi)ciclopentil)-6/-/-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina; 1-((1R,2S,4S)-2-etil-4-(5-(trifluorometil)piridin-2-iloxi)ciclopentil)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina; 5-((1 ,3S,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentiloxi)pirazina-2-carbonitrilo; 5-((1 S,3 ?,4/?)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentiloxi)pirazina-2-carbonitrilo; /-((1 S,3 ,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentil)-2,2,2-trifluoroethanesulfonamida; ?/-((1 S,3/:?,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentil)-4-metilpipe ra zina-1 -sulfonamida; 4-((1S,3S,4K)-3-metil-4-(6H-pirroío[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3 a]pirazin-1-il)ciclopentiloxi)benzonitrilo; 4-((1 ft,3ft,4S)-3-metil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3 a]pirazin-1-il)ciclopentiloxi)benzonitrilo; 3-(((1ft,3R,4S)-3-etil-4-(6H-p¡rrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3 a]pirazin-1 -il)ciclopentiloxi)metil)benzonitrilo; 3- (((1 S,3S,4 )-3-et¡l-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3 a]pirazin-1 -il)ciclopentiloxi)metil)benzonitrilo; 4- (((1R,3fl,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3 a]pirazin-1-il)ciclopentiloxi)metil)benzonitrilo; 4-(((1S,3S,4R)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4 ,3 a]pirazin-1-il)ciclopentiloxi)metil)benzonitrilo; 1 -etil-A/-((1 S,3 ,4S)-3-etil-4-(6/--pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentil)ciclopropano-1-sulfonamida; ?/-(((1 R,3S,4f?)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3 a]pirazin-1-il)ciclopentil)metil)ciclopropansulfonamida; ?/-(((1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazol0[4,3 a]pirazin-1-il)ciclopentil)metil)ciclopropansulfonamida; 4-((1 ,3f?,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentiloxi)-2-fluo roben zonit rilo; 4-((1 ,3f?,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazoloÍ4,3-a]piraz¡n-1-il)ciclopentilox¡)-3-fluorobenzon¡tr¡lo; 3-((1R,3R,4S)-3-et¡l-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]p¡razin-1-il)c¡clopentiloxi)benzon¡trilo; /V-((1S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2>4]triazolo[4(3-a]piraz¡n-1-il)ciclopentil)-2-morfolinatansulfonamida; 1-but¡l-/V-((1S,3f?,4S)-3-et¡l-4-(6H-pirrolo[2,3- e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentil)ciclopropano-1-sulfonamida; 2-(3,3-difluoropirrolidin-1-il)-A/-((1S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentil)etansulfonamida; 2-(((1 S,3R)-3-(6/-/-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-¡l)c¡clopent¡l)metilam¡no)isonicotinon¡tr¡lo; A/-((1S,3R,4S)-3-et¡l-4-(6H-p¡rrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)c¡clopentil)-2-metilpropano-2-sulfonamida; /V-((1S,3 ,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)c¡clopentil)-2-(1 H-1 ,2,4-triazol-1 -il)etansulfonamida; 2-(4,4-difluoropiperidin-1-il)-/S-((1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]tr¡azolo[4,3-a]piraz¡n-1 -il)c¡clopentil)etansulfonamida; ?/-((1 S,3 ,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]piraz¡n-1-il)ciclopent¡l)-2-(2 -/-1,2,3-tr¡azol-2-il)etansulfonam¡da; ?/-((1 S,3fi,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-¡l)ciclopent¡l)-2-(1 --1,2,3-tr¡azol-1-¡l)etansulfonamida¡ (1 R,3 ,4S)-3-et¡l-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentanol; 1-((1 S,2R,4 )-2-etil-4-(3)3,3-trifluoropropoxi)ciclopentil)^6H-p¡rrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]piraz¡na; ?/-((1 S,3f?,4S)-3-etil-4-(8-¡odo-6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-¡l)ciclopentil)c¡clopropansulfonam¡da; (1S,3 ,4S)-/V-(2-(3,3-difluoropirrolidin-1-ilsulfonii)etil)-3-etil-4-(6H-p¡rrolo[2,3-e][1 ,2,4]tr¡azolo[4,3-a]piraz¡n-1 -¡l)c¡clopentanamina; /V-ciano-/V-((1 S,3 ,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2 ,4]tr¡azolo[4,3-a]piraz¡n-1 -il)c¡clopentil)ciclopropansulfonamida; ?/-((1 S,3f?,4S)-3-etil-4-(metil(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino)ciclopentil)ciclopropansulfonamida¡ ?/-((1 S,3f?,4S)-3-etil-4-(8-metil-6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentil)-/V-(hidroximatil)ciclopropansulfonamida; ?/-((1 S,3S,4R)-3-(8-ciano-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)-4-etilciclopentil)ciclopropansulfonamida; 1 - ((1 S,2f?,4S)-4-(ciclopropilmetoxi)-2-etilciclopentil)-6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina; 1 -((1 S)2f?,4S)-4-(ciclopropilmetoxi)-2-metilciclopentil)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina; 1-((1 S,2f?,4S)-2-etil-4-(2,2,2-trifluoroetilsulfonil)ciclopentil)-6/--pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina; 1-((1 S,2 ,4S)-2-etil-4-(tetrahidro-2H-piran-4-iloxi) ciclo pentil)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina; 1-((1 S,2f?,4S)-2-etil-4-((tetrahidro-2H-piran-4-il)metoxi)ciclopentil)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-ajpirazina; 1-((1R,2R,4S)-2-etil-4-((tetrahidro-2H-piran-4-¡l)metoxi)ciclopent¡l)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]tr¡azolo[4,3-a]piraz¡na; 1-((1 S,2R,4 )-4-(c¡cloprop¡lmetoxi)-2-et¡lciclopent¡l)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina; 1- ((1S,2f?,4«)-2-et¡l-4-(tetrahidro-2H-piran-4-iloxi)ciclopentil)-6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina; 2- (4-ciano-1H-pirazol-1-il)-/V-((1 S,3f?,4S)-3-etil-4-(6H-p¡rrolo[2,3-e][1 ,2 ,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentil)etansulfonamida; 1-((1S,2ft,4S)-2-et¡l-4-(2-(tetrah¡dro-2H-piran-4-¡l)etox¡)c¡clopent¡l)-6H-p¡rrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina; 1-((1R,2/ ,4S)-2-etil-4-(2-(tetrah¡dro-2H-piran-4-il)etoxi)ciclopent¡l)-6H-p¡rrolo[2,3-e][1,2,4]tr¡azolo[4,3-a]p¡raz¡na; 1-((1S,2f?,4f?)-2-et¡l-4-((tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-il)metox¡)ciclopentil)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]p¡razina; 1-((1S,2f?,4S)-2-etil-4-(2-metox¡etoxi)ciclopent¡l)-6f-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina; 1-((1 ?,2 ,4S)-2-etil-4-(2-metoxietoxi)c¡clopentil)-6H-p¡rrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina; 1 - ((1 S,2/?,4R)-2-et¡l-4-¡sopropox¡c¡clopentil)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]p¡razina; A/-((3R,5ft)-1-etil-5-(6H-p¡rrolo[2,3-e][1 ,2,4]tr¡azolo[4,3-a]p¡razin-1-il)pirrolid¡n-3-¡l)ciclopropansulfonam¡da; (3ft,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-¡l)c¡clopentanono; 1-((7S,8R)-8-etil-1 ,4-dioxaspiro[4,4]nonan-7-il)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina; (1 S,3ft,4S)-3-etM-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)-A/-(2,2,2-trifluoroetil)ciclopentanamina; (3 ,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentanono O-ciclopropilmetiloxima; (3R,4S)-3-etil-4-(6--pirrolo[2,3-e][1 ,2 ,4]triazolo[4 , 3-a]pirazin-1-il)ciclopentanono 0-2-(metilsulfonil)etiloxima; (3 ,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentanono O-ciclobutilmetiloxima; 1-((1 S,2R,4/:?)-4-(4)4-dimetilciclohexiloxi)-2-etilciclopentil)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina; /V-((1 S,3 ,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazoio[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentil)-2-metoxietansulfonamida; /V-((3f?,5ft)-1-acetil-5-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2 ,4]triazolo[4 ,3-a]pirazin-1 - il)pirrolidin-3-il)ciclopropansulfonamida; 1-((3S,4f?)-1-(ciclopropilmetilsulfonil)-4-etilpirrolidin-3-il)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina; ácido 2-((1 S,3 ,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]p¡razin-1-il)ciclopent¡l)acét¡co; /\/-c¡clopropil-2-((1Sl3R,4S)-3-et¡l-4-(6H-pirrol¿[2,3-e][1,2,4]triazolo[4>3-a]pirazin-1-il)ciclopentil)acetamida; 3 >4S)-3-etM-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3- a]p¡razin-1 -il)c¡clopentanono 0-tetrahidro-2H-piran-4-il oxima; 1-((1 S,2f?,4S)-4-(3,3-difluoroazetidin-1-il)-2-et¡lciclopentiÍ)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina; 1-((1 S,2R,4S)-4-(3,3-d¡fluoropirrolid¡n-1-il)-2-etilc¡clopentil)-6/-/-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]p¡razina; (1 S,3ft,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]tnazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-c¡clopentiléster del ácido dimetilcarbámico; {3-[(1S,3R,4S)-3-Etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 - il)-ciclopentilamino]-oxetan-3-il}-acetonitrilo; cianometil-[(1 S,3«,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)-ciclopentil]-amida del ácido ciclopropansul fónico; 1-[(3 ,4S)-4-Etil-1-(2-morfolin-4-il-etil)-pirrolidin-3-il]-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il; [(3 ?,5R)-1-(2,2-difluoro-etil)-5-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 - il)-p¡rrolidin-3-il]-amida del ácido ciclopropansulfónico; 1-[(3 ,4S)-4-etil-1-(3l3,3-trifluoro-propano-1-sulfonil)-pirrolidin-3-il]-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -i lo; 3-[(1ft,3fl,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)-ciclopentiloxi]-propionitrilo; 1- [(3 ,4S)-4-etil-1-(3,3,3-trifluoro-propil)-pirrolidin-3-!l]-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 - ilo; 2- ciclopropil-1-[(3S,4R)-3-et¡l-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)-pirrolidin-1-il]-etanona; 1-[(3S,4/:?)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1)2,4]triazolo[4,3-a]p¡razin-1 -i l)-p¡ r rol ¡d i n - 1 -il]-2-(tetrahidro-piran-4-il)-etanona ; CiclopropilmetMamida del ácido (3S,4R)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]piraz¡n-1 - i I ) -p¡ r ro I i d i na- 1 -carboxílico; [(3R,5K)-1-etil-5-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-pirrolidin-3-¡l]-metil-amida del ácido ciclopropansulfónico; (tetrahidro-piran-4-ilmetil)-amida del ácido (3S,4H)-3-etil-4-(6H -pirro lo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-pirrolidina-1 -carboxílico; [(1 S,3f?,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -¡l)-ciclopentil]-amida del ácido 3,3-difluoro-ciclobutansulfónico; [(1 S,4S)-3,3-dimetil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentil]-amida del ácido ciclopropansulfónico; [(1 ,4R)-3,3-dimetil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentil]-am¡da del ácido ciclopropansulfónico; 1-[(1 S,2f?,4 :?)-4-(4,4-difluoro-ciclohexiloxi)-2-et¡l-ciclopentil]-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -i lo; 1-[(1 R,2f?,4 )-4-(4,4-difluoro-ciclohexiloxi)-2-etil-ciclopentil]-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]piraz¡n-1 -i lo; 6-[(3S,4R)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)-pirrolidin-1-il]-nicotinonitrilo; 1-[(3R,4S)-1-(3,3-difluoro-ciclobutansulfonil)-4-etil- p¡rrolidin-3-il]-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -ilo; [(1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-p¡rrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]p¡razin-1-¡l)-c¡clopent¡l]-bis-(4,4,4-trifluoro-but¡l)-amina; 1-[(1 S,2 :?,4R)-2-et¡l-4-(4-tr¡fluorometil-ciclohex¡loxi)-ciclopentil]-6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-¡lo; 4-[(3S,4ft)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)-pirrolidin-1-ilmetil]-benzonitrilo; 3-[(3S,4«)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4)3-a]pirazin-1 - i f )-pi r ro I id i n- 1 -il]-3-oxo-prop¡on¡trilo; 1-[(1 S,2ft,4R)-2-et¡l-4-(4-trifluorometil-ciclohex¡lox¡)-ciclopent¡l]-6H-pirrolo[2:3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]p¡razin-1 -ilo; 1 -[(1 2 R, 4 R)-2-etil-4-(4-t rifluoro metí l-ciclo hexiloxi) -ciclopentil]-6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-ilo; 1 -[(1 R,2R,4ft)-2-etM-4-(4-trifluorometil-cic!ohex¡loxi)-ciclopentil]-6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-ilo; {3-[(3S,4fi)-3-etii-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]piraz¡n-1 - il)-pirrolidin-1 - il]-oxetan-3-il}-acetonitrilo; 3-[(1 S,3R,4R)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)-ciclopentiloxi]-propionitrilo; 3- [(1 S,3 ,4S)-3-etil-4-(6H-pirroio[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)-ciclopentiloxi]-propionitrilo; (2-ciano-etil)-[(1 S,3 ,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentil]-amida del ácido ciclopropansulfónico; 4- [(1 ,3 ,4S)-3-et¡l-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3- a]p¡razin-1-¡l)-ciclopentiloxi]-ciclohexanecarbon¡trilo; 4-[(1R,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)-ciclopentiloxi]-ciclohexanecarbonitrilo; 1-((3 ,4S)-1-ciclopropansulfonil-4-etil-pirrolidin-3-il)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -No; N-[(1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-¡l)-ciclopentil]-N-(4,4,4-trifluoro-butil)-acetam¡da; (1R,3R,4S)-3-et¡l-4-(6H-p¡rrolo[2,3-e][1,2,4]tr¡azolo[4,3-a]p¡razin-1 -il)-c¡clopent¡léster del ácido ciclopropilcarbámico; (1 ,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopent¡léster del ácido 3,3-difluoro-azetidina- -carboxílico; (1 ,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentiléster del ácido cianometilcarbámico; N-[(1S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-p¡rrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)-ciclopentil]-N-(tetrahidro-piran-4-ilmetil)-acetamida; 3-[(1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)-ciclopentil]-1,1-dimetil-urea; (1 ,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-eÍ[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentiléster del ácido dimetilcarbámico; (1 S,3 ,4S)-3-etil-1-(morfolina-4-sulfonilmetil)-4-(6H-p¡rrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)-ciclopentanol; (1/?,3 ?,4R)-3-etil-1-(morfolina-4-sulfonilmetil)-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)-ciclopentanol; (1 S,3R,4ft)-3-etil-1-(morfol¡na-4-sulfonilmetil)-4-(6H- pirrolo[2,3-e][1 )2,4]triazolo[4>3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentanol; A/-ciclopropilmetil-N-[(1 S,3fi,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2 ,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 - il)-ciclopentil]-acetamida ; 1-[(1S,3R,4R)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)-ciclopentil]-2-metil-propan-2-ol; 1-[(1R,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)-ciclopentil]-2-metil-propan-2-ol; 1-[(1S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4l3-a]pirazin-1-il)-ciclopentil]-2-metil-propan-2-ol; 1-[(1R,2R,4S)-4-(3-ciclopropil-[1 ,2,4]oxadiazol-5-ilmetil)-2-etil-ciclopentil]-6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-ilo; 1 -[(1 S,2R,4S)-4-(3-ciclopropil-[1 ,2,4]oxadiazol-5-ilmetil)-2-etil-ciclopentil]-6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-ilo; 1-[(1 S,2R,4/?)-4-(3-ciclopropil-[1 ,2,4]oxadiazol-5-ilmetil)-2-etil-ciclopentil]-6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-ilo; 1-[(1 S,2R,4f?)-2-etil-4-(5-metil-isoxazol-3-ilmetoxi)-ciclopentil]-6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-ilo; (1R,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentiléster del ácido oxetan-3-il-carbámico; (1R,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2I3-e][1I2,4]triazolo[4,3-a]piraz¡n-1 -il)-ciclopentiléster del ácido ciclobutilcarbámico; [(1 ,3 ,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]piraz¡n-1 -il)-ciclopentil]-amida del ácido ciclopropansulfónico; {3-[(1 R,3 ,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4f3-a]pirazin-1 - il)-ciclopentilamino]-oxetan-3-il}-acetonitrilo; Isopropiiéster del ácido [(1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3 e][1 ,2 ,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 - il)-ciclopentil]-carbámico¡ [(1 S,3f?,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 - il)-ciclopent¡l]-oxetan-3-il-amina; 1 -((3R,4S)-1 -bencil-4-isopropil-pirrolidin-3-il)-6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-ilo; [(1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopent¡l]-amida del ácido 3-fluoro-propanó-1 sulfónico; [(1 S,3 ,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 - il)-ciclopentil]-(3-metil-oxetan-3-¡l)-amina; 1-[(1 S,2R,4f?)-2-etil-4-(2-morfol¡n-4-¡l-etoxi)-ciclopentil]-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 - i lo; (1 ,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentiléster del ácido carbamoilmetilcarbámico; (1R,3/ ,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4>3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentiléster del ácido 4-hidroxi-piperid¡na-1 carboxílico; (1 f?,3f?,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentiléster del ácido (2,2,2-trifluoro-étil) carbámico; Ciclopropilmetil-[(1 S,3ft,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]tr¡azolo[4,3-a]pirazin-1 -i l)-ciclopentil]-oxetan-3-i I-amina; [(1 S,3ft,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentil]-amida del ácido pentano-2-sulfónico; 3-Fenil-propano-1 -sulfónico ácido [(1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentil]-amída; 4,4,4-Trifluoro-butano-1-sulfónico ácido [(1 S,3 ,4S)-3-et¡l-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 - il)-ciclopentil]-amida; [(1S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentil]-amida del 2-etil-ácido ciclopropansul fónico; [(1 S,3 ,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentil]-amida del ácido 2-metil-propano-1 -sulfónico; [(1 S,3 ,4S)-3-etil-4-(6H-p¡rrolo[2,3-e][1 ,2 ,4]triazolo[4 , 3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentil]-amida del ácido 2-fenil-etansulfónico; C-ciclohexil-N-[(1 S,3ft,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2 ,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]piraz¡n-1 - il)-ciclopentil]-metansulfonamida ; [(1 S,3 ,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentil]-amida del ácido butan-1 -sulfónico; [(1 S,3 ,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4 ,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentil]-amida del ácido propano-2-sulfónico; N-[(1 S,3f?,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 - il)-c¡clopentil]-C-fenil-metansulfonamida ; [(1 S,3ft,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]tr¡azolo[4,3-a]piraz¡n-1 -il)-ciclopentil]-amida del ácido propano-1 -sulfónico; [(1 S,3R>4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentil]-amida del ácido 3-metil-butano-1 - sulfónico; N-[(1 S,3R,4S)-3-et¡l-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2 ,4]triazolo[4 , 3-a] p i razi n-1 - i l)-ciclopentil]-C,C-difluoro-meta nsulfonam ida ; [(1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentil]-amida del ácido 4-ciano-butano-1 sulfónico; [(1S,3/:?,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentil]-amida del ácido 2-etoxi-etansulfónico; N-[(1S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]piraz¡n-1 - il)-ciclopentil]-C-(tetrahidro-furan-2-¡l)-metansulfonamida; [(1 S,3R, S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentil]-amida del ácido tetrahidro-piran-4 sulfónico; [(1 S,3fi,4S)-3-etil-4-(6H-p¡rrolo[2,3-e][1 ,2,4jtriazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ctclopentil]-amida del ácido 3-ciano-propano-1 sulfónico; N-[(1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)-ciclopentil]-C-(5-metil-isoxazol-3-il)-metansulfonamida; N-[(1S,3fl,4S)-3-et¡l-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-c¡clopentil]-C-(tetrahidro-piran-2-il)-metansulfonamida; [(1 S,3fí,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentil]-amida del ácido 2-piridin-2-il etansulfónico; C-(2,2-d¡cloro-ciclopropil)-N-[(1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-p¡rrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]p¡razin-1 -il)-ciclopentil]-metansulfonamida; Ciclobutilamida del ácido (3S,4f?)-3-lsopropil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][ ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-pirrolidina-1 -carboxílico; (1 S,3ft,4S)-3-etil-1-metil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]p¡raz¡n-1-il)-ciclopentanol; (1 S,3ft,4S)-3-etil-4-[6-(tolueno-4-sulfonil)-6H-p¡rrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 - il]-ciclopentiléster-4-nitro-feniléster del ácido carbónico; (1S,3f?,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentiléster del ácido ciclobutilcarbámico; (1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentiléster del ácido 4-Hidroxi-piperidina-1 -carboxílico; 3-(ciclopropilmetil-amino)-4-[(1 SI3 )4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)-c¡clopentilamino]-ciclobut-3-eno-1 ,2-diona; 3-[(1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 - il)-ciclopentilamino]-4-(oxetan-3-ilamino)-ciclobut-3-eno-1 ,2-diona; 3-[(1S,3A?,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 - il)-ciclopentilamino]-4-(3,3,3-trifluoro-propilamino)- c¡clobut-3-eno-1 ,2-diona; [(1 S,3ft,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2 ,4]tr¡azolo[4 , 3-a]p¡raz¡n-1 - il)-ciclopentil]-metil-oxetan-3-il-am¡na; [(1 S,3ft,4S)-3-et¡l-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 - il)-ciclopent¡l]-(3-metil-oxetan-3-ilmetil)-amina; 3-ciclopropilamino-4-[(1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-p¡rrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)-ciclopentilamino]-c¡clobut-3-eno-1 ,2-diona; (1 S,3 ,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentiléster del ácido cianometilcarbámico; (1 S,3 ,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentiléster del ácido ciclopropilcarbámico; (1 S,3 ,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]p¡razin-1 -il)-ciclopentiléster del; ácido (2,2,2-trifluoro-etil) carbámico (1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentiléster del ácido 3,3-difluoro-azetidina-1 carboxílico; (1 S,3 ?,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentiléster del ácido 4-ciano-piperidina-1 carboxílico; (1 -ciano-ciclopropil)-amida del ácido (3S,4f?)-3-etil-4-(6H pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 - il)-pirrolidina-1 -carboxílico; (1 -ciano-ciclopropil)-amida del ácido (3ft,4S)-3-etil-4-(6H pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-pirrolidina-1 -carboxílico; ciclobutilamida del ácido (3f?,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3 e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 - il)-pirrolidina-1 -carboxílico; ciclobutilamida ácido (3S,4ft)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3 e][1 ,2 ,4]triazo!o[4,3-a]pirazin-1 -il)-pirrolidina-1 -carboxílico; (3-metil-isotiazol-5-il)-amida del ácido (3S,4fi)-3-etil-4-(6H pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]tr¡azolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-pirrolidina-1 -carboxílico; (3-metil-¡sotiazol-5-il)-amida del ácido (3 ,4S)-3-etil-4-(6H pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-pirrolidina-1 -carboxílico; Cianometilamida del ácido (3S,4/=?)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3 e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -i I )-p i rro I id i n a- 1 -carboxílico; Cianometilamida del ácido (3f?,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3 e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 - il)-pirrolidina-1 -carboxílico; (2-ciclopropil-etil)-t(1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentil]-oxetan-3-il-amina; Ciclopropilmetil-[(1 S,3f?,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)-ciclopentil]-(3-met¡l-oxetan-3-il)-amina; (oxazol-4-ilmetil)-amida del ácido (3S,4f?)-3-et¡l-4-(6H pirro lo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-pirrolidina-1 -carboxílico; (oxazol-4-ilmetil)-amida del ácido (3R,4S)-3-etil-4-(6H pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]piraz¡n-1 - i I) - pi rro I i d i n a - 1 -carboxílico; (2,2,2-trifluoro-etil)-amida del ácido (3S,4ft)-3-et¡l-4-(6H-p¡rrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)-pirrolidina-1-carboxílico; (2,2,2-trifluoro-etil)-amida del ácido (3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -i I ) - p¡ rro I id i n a - 1 -carboxílico; (2-ciclopropil-etil)-[(1 S,3 ,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2 ,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentil]-(3-metil-oxetan-3-il)-amina; (1 S,3ft,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2 ,4]triazolo[4, 3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentiléster del ácido 3-ciano-azetidina-1 -carboxílico; (1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentiléster del ácido bencil-carbámico; (1 S,3P, S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentiléster del ácido oxetan-3-il-carbámico; (1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2 ,4]triazolo[4, 3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentiléster del ácido (1 -ciano-ciclopropil)-carbámico; (1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentiléster del ácido (3-metil-oxetan-3-il)-carbámico; (1 S,3 ,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3- a]pirazin-1 -M)-ciclopentiléster del ácido (f?)-3-hidroxi-pirrolidina-1 carboxílico; (1 S,3f?,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentiléster del ácido (S)-3-hidroxi-pirrolidina-1 carboxílico; (1 S,3tf,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentiléster del ácido 4-fluoro-piperidina-1 carboxílico; (1 S,3f?,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentiléster del ácido (2,2-difluoro-etil) carbámico; (3,3-difluoro-azetidin-1-il)-[(3S,4R)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-pirrolidin-1 - il]-metanona; 1-[(1 S,2R,4R)-2-etil-4-(pirazol-1-iloxi)-ciclopentil]-6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]tr¡azolo[4,3-a]pirazin-1-ilo; (3,3-difluoro-azetidin-1-il)-[(3f?,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)-pirrolidin-1-il]-metanona; {2-[(3S,4R)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)-pirrolidin-1-il]-4,5-dihidro-oxazol-4-il}-metanol; oxetan-3-ilamida del ácido (3S,4R)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3 e][1, 2, 4]triazolo [4, 3-a]pirazin-1-il)-pirrolidina-1- carboxílico; oxetan-3-ilamida del ácido (3f?,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3 e][1, 2, 4]triazolo [4, 3-a]pirazin-1-il)-pirrolidina-1 -carboxílico; (1 S,3/?,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentilésier del ácido 3-fluoro-azetidiha-1 carboxílico; (1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2>3-e][1,2,4]triazolo[4>3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentiléster del ácido (1 -metil-ciclobutil) carbámico; (1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]tr¡azolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopent¡léster del ácido (1-hidrox¡ ciclopropilmetil)-carbámico; (1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentiléster del ácido metil-oxetan-3-il carbámico; (1 S,3 ,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]piraz¡n-1 -il)-c¡clopentiléster del ácido (3-metil-oxetan-3-ilmetil) carbámico; (1 S,3f?,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentiléster del ácido fenil-carbámico; [(3S,4R)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4I3-ajpi ra zin-1-il)-pirrolidin-1-i !]-((/?) -3-hidroxi-pirro lidin-1-il)-metanona; [(3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)-pirrolidin-1-il]-((f?)-3-hidroxi-pirrolidin-1-il)-metanona; (1 ?,3f?,4S)-3-etil-4-(6H-pirroloÍ2,3-eí[1 ,2,4]triazolo[4,3-a]p¡raz¡n-1-il)-ciclopentancarbonitrilo; [(3S,4ft)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)-pirrolidin-1-il]-((S)-3-hidroxi-pirrolidin-1-il)- metanona; [(3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)-pirroMdin-1-il]-((S)-3-hidroxi-pirrolidin-1-il)-metanona; (1 S,3 ,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1l2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentiléster del ácido ferc-butil-carbámico; (1 S,3 ,4S)-3-etil-4-(6H-p¡rrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentiléster del ácido (2,2-dimetil-propil)-carbámico; (1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentiléster del ácido (2-metoxi-etil)-carbámico; (1 S,3 ,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2 ,4]triazolo[4, 3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentiléster del ácido (3,5-bis-trifluorometil-benzil)-carbámico; (1 S,3ft,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentiléster del ácido (2-dimetilamino-étil)-metil-carbámico; compuesto con ácido trifluoro-acético; (1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentiléster del ácido (3-dimetilamino-propil)-metil-carbámico; compuesto con ácido trifluoro-acético; (1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentiléster del ácido bencil-isopropil-carbámico; (1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentiléster del ácido (R)-3-Hidroxi-piper¡dina- 1 -carboxílico; (1 S,3tf,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]tr¡azolo[4,3-a]piraz¡n-1 -il)-c¡clopentiléster del ácido 4-metil-piperaziná-1 carboxílico; compuesto con ácido trifluoro-acético; (1S,3f?,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentiléster del ácido 4-acetil-piperaziná-1 carboxílico; (1 S,3f?,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentiléster del ácido 4-(2-fluoro-fehil) piperazina-1 -carboxílico; compuesto con ácido trifluoro-acético; (1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -i l)-c¡clopentiléster del ácido piridin-2-ilmetil carbámico; compuesto con ácido trifluoro-acético; (1 S,3 ,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1)2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentiléster del ácido piridin-3-ilmetil carbámico; compuesto con ácido trifluoro-acético; (1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-c¡clopentiléster del ácido piridin-4-ilmetil carbámico; compuesto con ácido trifluoro-acético; (1 S,3 ,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]tr¡azolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentiléster del ácido isobutil-carbámico; (1 S,3f?,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e]Í1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentiléster del ácido [(S)-1 -(Tetrahidro-furan-2 il)metil]-carbámico; (1 S,3 ,4S)-3-etil-4-(6H-pirroloÍ2,3-e]Í1,2,4]triazolo[4,3- a]pirazin-1 -il)-c¡clopentiléster del ácido -(tetrahidro-furan-2 il)metil]-carbámico; (1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentiléster del ácido (2-ciano-et¡l)-ciclopropil carbámico; (1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentiléster del ácido diisobutil-carbámico; (1 S,3R,4S)-3-et¡l-4-(6H-p¡rrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]piraz¡n-1 -il)-ciclopentiléster del ácido azetidina-1 -carboxílico; (1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentiléster del ácido (2-metoxi-etil)-metil carbámico; (1 S,3 ,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]tr¡azolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentiléster del ácido morfolina-4-carboxílico; (1 S,3f?,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentiléster del ácido tiomorfolina-4-carboxílico (1S,3ft,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2 ,4]triazolo[4,3-a]piraz¡n-1 -il)-ciclopentiléster del ácido (2-dimetilamino-etil) carbámico; compuesto con ácido trifluoro-acético; (1 S,3tf,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-c¡clopentiléster del ácido (3-dimetilamino-propil) carbámico; compuesto con ácido trifluoro-acético; (1 S,3 ,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4)3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentiléster del ácido (2-pirrolidin-1 -il-etil) carbámico; compuesto con ácido trifluoro-acético; (1 S,3f?,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1l2,4]triazolo[4,3-a]piraz¡n-1 -il)-ciclopentiléster del ácido (3-pirrol¡d¡n-1 -il-propil) carbámico; compuesto con ácido trifluoro-acético; (1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentiléster del ácido (2-piperidin-1 -il-etil) carbámico; compuesto con ácido trifluoro-acético; (1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentiléster del ácido (3-piperidi n-1 -il-propil) carbámico; compuesto con ácido trifluoro-acético; (1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentiléster del ácido (2-morfolin-4-i l-etil) carbámico; compuesto con ácido trifluoro-acético; (1 S,3tf,4S)-3-etil-4-(6H-pirro!o[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-c¡clopent¡léster del ácido (3-morfolin-4-¡l-propil) carbámico; compuesto con ácido trifíuoro-acético; 1 -[(1 S,2 ,4S)-4-(2,2-difluoro-etoxi)-2-etil-ciclopentil]-6H-pirrolo[2,3re][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-ilo; 1-[(1S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)-ciclopentiloxi]-2-metil-propan-2-ol; (2-ciclopropil-etil)-[(1 S,3/c?,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentil]-(2,2,2-trifluoro-etil)-amina; Ciclopropilmetil-[(1 S,3«:4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopentil]-(2,2,2-trifluoro-etil)-amina; Cicloprop¡lmet¡l-[(1S,3R,4S)-3-et¡l-4-(6H-p¡rrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-ciclopent¡l]-(2,2,2-trifluoro-et¡l)-amina; 1-((7S,8R)-8-etil-1 ,4-d¡oxa-spiro[4,4]non-7-il)-6-(tolueno-4-sulfonil)-6H-p¡rrolo[2,3-e][1 ,2,4]tr¡azolo[4,3-a]pirazin-1 -ilo; 1-[(1 ,3R,4 )-3-etil-4-(6H-p¡rrolo[2,3-e][1,2,4]tr¡azolo[4,3-a]p¡razin-1-il)-ciclopentil]-2-metil-propan-2-ol; (1S>3f?,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-c¡clopentiléster del ácido acético; Ciclopropilmetilamida del ácido (3f?,4S)-3-etil-4-(6H pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-pirrolidina-1 -sulfónico; Ciclopropilmetilamida del ácido (3S,4f?)-3-etil-4-(6H pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)-pirrol¡dina-1-sulfónico; (2-c¡clopropil-etil)-amida del ácido (3R,4S)-3-etil-4-(6H pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]p¡razin-1-il)-pirrolidina-1-carboxílico; (2-ciclopropil-etil)-amida del ácido (3S,4R)-3-etil-4-(6H pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-pirrol¡dina-1 -carboxílico; oxetan-3-ilamida del ácido (3f?,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3 e][1,2,4]tri a zo lo [4, 3-a]pirazin-1-il)-pirrolidina-1 -sulfónico; oxetan-3-ilamida del ácido (3S,4R)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3 e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)-pirrolidina-1-sulfónico; [(1S,3fi,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2 ,4]triazolo[4,3-a]piraz¡n-1 - ¡l)-ciclopentil]-oxetan-3-il-(4,4,4-trifluoro-but¡l)-amina; Ciclopropilamida del ácido (3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]piraz¡n-1-¡l)-c¡clopentanosulfónico; 2-[(1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2)3-e][1,2,4]tr¡azolo[4,3-a]pirazin-1 - il)-ciclopentil]-etanol; 2-[(1R,3tf,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)-ciclopentil]-etanol; ciclobutilamida del ácido (3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo|¡2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)-pirrolidina-1-sulfónico; ciclobutilamida del ácido (3S,4fl)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-pirrolidina-1 -sulfónico; S,2R,4S)-2-etil-4-(3-metoximatil-[1 ,2,4]oxadiazol-5-ilmetil)-ciclopentil]-6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-¡lo; Amida del ácido (3fi,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 - il)-pirrolidina-1 -sulfónico; amida del ácido (3S,4f?)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 , 2, 4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)-pirrol ¡din a- 1 -sulfónico; 4-[(1S,3f?,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)-ciclopentil]-butironitrilo; 4-[(1«,3/ ,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-ajpirazin-1 -il)-ciclopentil]-butironitrilo; [(1 ?,3ft,4S)-3-etil-4-(6H-pirro!o[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)-ciclopentil]-acetonitrilo; [(1 S,3ft,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)-ciclopentil]-acetonitrilo; [(1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 - il)-ciclopentil]-(5-metil-isoxazol-3-ilmetil)-oxetan-3-il-amina; {5-[(1 S,3K,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)-ciclopentilmetil]-[1,2,4]oxadiazol-3-il}-metanol; 1 -[(1 S,2«,4S)-4-(3-ciclopropil-pirazol-1-il)-2-etil-ciclopentil]-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4;3-a]pirazin-1 -ilo; 1-[(1 S,2ft,4S)-4-(5-ciclopropil-pirazol-1-il)-2-etil-ciclopentil]-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -ilo; (3S,4R)-3-etM-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2 ,4]triazolo[4,3-a]p¡raz¡n-1 -il)-pirrolidina-1 -sulfónico ácido (2,2,2-trifluoró-eíil)-amida; (2,2,2-trifluoro-etil)-amida del ácido (3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)-pirrolidina-1-sulfónico; 1-[(1Sl2 ,4S)-4-(3-ciclopropil-[1)2,4]triazol-1-il)-2-etil-ciclopentil]-6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-ilo; 1-[(1 S,2R,4S)-4-(5-ciclopropil-[1 ,2 ,4]triazol-1 -il)-2-etil-ciclopentil]-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -ilo; o [(1 S,3 ,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -i -ciclopentill-oxetan-S-il-ÍS.S.S-trifluoro-propi -anlina.
En una decimoquinta modalidad la invención proporciona un compuesto de acuerdo con las modalidades primera a duodécima donde T es CR6, U es N, X es CR3 e Y es N y forma un compuesto de Fórmula (Ib) Fórmula (Ib).
En una decimosexta modalidad la invención proporciona un compuesto de acuerdo con la decimoquinta modalidad donde el compuesto es ((cis)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4-metilpiperidin-1 - il)(2,4-difluorofenil)metanona; ((cis)-3-(6H-imidazo[1,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1-il)-4-metilpiperidin-1-il)(4-(trifluoromet¡l)feñil)metanona; ((cis)-3-(6H-imidazo[1,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1-M)-4-metilpiper¡din-1-il)(piridin-3-il)metanona; ((cis)-3-(6H-im¡dazo[1,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1-il)-4-metilpiperidin-1 - il)(3-(trifluorometil)fenil)metanona; ((cis)-3-(6H-¡m¡dazo[1,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1-il)-4-metilpiperidin-1-il)(pirazin-2-il)metanona; ((cis)-3-(6/-/-imidazo[1 , 5-a] pirro lo [2, 3-e] p irazi n-1 -il)-4-metilpiperidin-1-il)(pirimidin-5-il)metanona; 1 -((cis)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4-metilpiperi di n-1 - il)-2-ciclopropilet anona; ((cis)-3-(6/-/-imidazo[1,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1-il)-4- metilpiperidin- -if)(fenil)met anona; 1 -((c¡s)-3-(6/-/-im¡dazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]piraz¡n-1 -il)-4-metilpiperid¡n-1-il)-2-c¡clobut¡letanona; 1 -((cis)-3-(6-/-imidazo[1 ,5-a]p¡rrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4-metilpiperidin-1 -il)-3-ciclo bu tílpropan-1 -o ne; ((cis)-3-(6/-/-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4-metilpiperidin-1-il)(1H-pirazol-4-il)metanona; ((cis)-3-(6/-/-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4-metilpiper¡din-1-il)(1/-/-pirazol-3-il)met anona; 1 -((cis)-3-(6/-/-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4-metilpiperidin-1-il)propan-1-one; ?/-((1 S,3=?,4S)-3-etil-4-(3-(3-hidrox¡propil)-6/--imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1-il)ciclopentil)c¡ciopropansulfonamida; 1 -((cis)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4-metilpiperidina-1-carbonil)ciclopropancarbonitrilo; 3-((3S,4S)-4-etil-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)piperidin-1 - il)-3-oxop ropa non itrilo; 3-((3 ,4 )-4-etil-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)piperidin-1-il)-3-oxopropanonitrilo; ?/-((1 S>3f?,4S)-3-etil-4-(3-(hidroximatil)-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)ciclopentil)ciclopropansulfonamida; ?/-((1 S,3f?,4S)-3-etil-4-(3-(2-hidroxietil)-6/-/-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1-il)ciclopentil)ciclopropansulfonamida; ((cis)-3-(6H-¡midazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]piraz¡n-1 - il)-4-metilpiperidin-1 - il)(1-metil-1/-/-pi ra zol-4-il)me ta nona; ((cis)-3-(6--imidazo[1,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1-il)-4-met¡lpiper¡d¡n-1-il)(p¡ridin-4-¡l)metanona; 1-((c¡s)-3-(6H-im¡dazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -M)-4-metilp¡peridin-1-il)-2-(3-metilisoxazol-5-¡l)etanona; 1- ((cis)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]piraz¡n-1 - il)-4-metilpiperidin-1-M)-2-(2,4-difluorofenil)etanona; 6-((cis)-3-(6-/-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4-metilpiperidin-1-¡l)pir¡dazine-3-carbonitrilo¡ 5- ((cis)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]p¡rrolo[2,3-e]piraz¡n-1 -M)-4-metilpiper¡d¡n-1-il)piraz¡na-2-carbon¡trilo; 2- ((cis)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4-metilpiperidin-1-¡l)tiazolo-5-carbonitrilo; 6- ((c¡s)-3-(6--¡m¡dazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -M)-4-metilpiperid¡n-1-¡l)n¡cot¡non¡tr¡lo; ((cis)-3-(6-/-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]p¡razin-1 - il)-4-metilpiperidin-1 - il)(pirrolidin-1 - il)metanona; 1-((cis)-3-(6/7-¡m¡dazo[1 ,5-a] pirrólo [2, 3-e]pirazin-1 -il)-4-met¡lpiper¡d¡na-1-carbon¡l)azetid¡na-3-carbon¡tr¡lo; (cis)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -?)-?/,?/,4-trimetilpiperidina-1-carboxamida; 1-((cis)-1-(cicloprop¡lsulfon¡l)-4-met¡lpiper¡d¡n-3-¡l)-6/-/-im¡dazo[1,5-a]pirrolo[2,3-e]piraz¡na; (c¡s)-A/-(cianometil)-3-(6H-¡midazo[1,5-a]p¡rrolo[2,3-e]pirazin-1-il)-4-metilpiperidina-1-carboxamida; ((c¡s)-3-(6H-im¡dazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4- metilpiperidin-1-il)(isoxazol-5-il)metanona; 1 -((3R,4 )-3-(6/-/-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4-metilpiperidin-1 -il)-3,3,3-trifluoropropan-1 -ona; 1 -((3R,4R)-3-(6/-/-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4-metilpiperidin-1-il)-3-hidroxi-3-metilbutan-1-ona; 1-((3/:?,4R)-3-(6/-/-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4-metilpiperidin-1 - il)-2-metoxietanona; 1-((3ft,4ft)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4-metilpiperidin-1 - il)-3-metoxipropan-1 -ona; 1-((3R,4R)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4-metilpiperidin-1 - il)pent-4-yn-1 - ona; 1 -((3f?, f?)-3-(6/--imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 - M)-4-metil pipe ridi n-1 - il)-2-(4-clorofenil)eta nona; 1 -((3 ,4 )-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]p¡rrolo[2,3-e]p¡raz¡n-1 -il)-4-metilpiperidin-1-il)-2-(3-clorofenil)etanona; 4-((3R,4R)-3-(6/--imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4-metilpiperidina-1-carbonil)benzonitrilo; 1 -((3 ,4f?)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4-metilpiperidin-1-il)-3-(3-cloroisoxazol-5-il)propan-1-ona; 3- (2-((3 :?,4R)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 ril) 4-metilpiperidin-1 -il)-2-oxoetil)benzonitrilo; 4- (2-((3R,4 )-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il) 4-metilpiperidin-1-il)-2-oxoetil)benzonitrilo; 1-((3f?,4f?)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4-metilpiperidin-1-il)-2-(1H-pirrol-2-il)etanona; 1-((3R,4R)-3-(6tf-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4-met¡lpiper¡d¡n-1-il)-2-(p¡razin-2-il)etanona¡ 1-((3R,4fi)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]p¡rrolo[2,3-e]piraz¡n-1 -M -metilpiperidin-l -il)-2-(tetrahidro-2/-/-p¡ran-4-il)etanona; 1- ((3R,4R)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]p¡razin-1 -il)-4-met¡lpiperid¡n-1-il)-2-(p¡r¡mid¡n-2-¡l)etanona; 5-((1 S,3S,4R)-3-(6/-/-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]piraz¡n-1 - il] 4-metilciclopentilamino)pirazina-2-carbonitrilo; /V-(4-(3-allil-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)biciclo[2,2,2]octan-1 - il)ciclopropansulfonamida; ?/-(1 - (6/--imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 - il)pirrolidin-3 il)ciclopropansulfonamida; /\/-(4-(3-propil-6/--imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)biciclo[2,2,2]octan-1-il)ciclopropansulfonamida; 2- ((3R,4R)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4-metilpiperidin-1 - il)tiazolo-5-carbonitrilo; A/-(4-(3-(2,3-dih¡droxipropil)-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2 l3-e]pirazin-1-il)biciclo[2,2,2]octan-1-il)ciclopropansulfonamida; " 1 -((3R,4 )-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4-metilpiper¡dina-1-carbonil)pirrolidina-3-carbonitrilo; (3 ,4R)-/V-(4-(c¡anometil)fenil)-3-(6H-¡midazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1-il)-4-metilpiperidina-1-carboxamida; ((3R,4 )-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4-metilpiperidin-1-il)(morfolino)metanona; ((3R,4R)-3-(6H-¡midazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4- metilpiperidin-1 - il)(4-metilpiperazin-1 - il) meta nona; ((3f?,4ft)-3-(6/-/-¡midazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 - il)-4-metilpiperidin-1 -il)(piperidin-1 -il)metanona; (3H,4R)-A/-(2,4-difluorofenil)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1-il)-4-metilpiperidina-1-carboxamida; (3ft,4f?)-/V-(3-cianofenil)-3-(6H-im¡dazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1-i!)-4-metilpiperidina-1-carboxamida¡ ( ?)-1-((3R,4fi)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4-metilpiperidina-1-carbonil)pirrol¡dina-2-carbonitrilo; (S)-1-((3ft,4/?)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -i l)-4-metilpiperidina-1 -carbón i I ) p i r ro lid ina-2-carbonit rilo; ((3f?,4f?)-3-(6-/-¡midazo[1,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1-¡l)-4-metilpiperidin-1-il)((f?)-2-(trifluorometil)pirrolidin-1-il)metanona; ((3 ,4f?)-3-(6H-¡midazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4-metilpiperidin-1 - il)((S)-2-(trifluorometil)pirrolidin-1 - i I) meta no na ; ((3R,4 )-3-(6/--imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4-metilpiperidin-1-il)(3,3-difluoroazetid¡n-1-il)metanona; 2-((3R,4fi)-3-(6tf-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4-metilp¡peridin-1-il)benzo[d]oxazol; ?-((1 S,3tf,4S)-3-etil-4-(3-(2-(metilsulfonil)et¡l)-6--imidazo[1,5-a]p¡rrolo[2,3-e]pirazin-1-il)ciclopentil)ciclopropansulfonamida; ((3R,4f?)-3-(6H-imidazo[1 |5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4-metilpiperidin-1-il)(azetidin-1-il)metanona; (3«,4R)-A/-(4-cianofenil)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3- e]pirazin-1-il)-4-metilpiperidina-1-carboxamida; ((3f?,4ft)-3-(6/-/-¡midazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 - il)-4-metilpiperidin-1-il)((R)-3-fluoropirrolidin-1-il)met anona; ((3 ,4 )-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4-metilpiperidin-1 - il)(3,3-difluoropirrolidin-1 - il)metanona; 1 -((3R,4f?)-4-meti 1-1 -(pirro! ¡din- 1 -ilsulfoni I) pipe ridin-3-il)-6H imidazo[1,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazina; (f?)-/V-(1-(6/-/-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)pirrolidin-3-il)ciclopropansulfonamida; (S)-/V-(1 -(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)pirrolidin-3-il)ciclopropansulfonamida; 3-((3/?,4R)-3-(6H-imidazo[1,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1-il)-4-(trifluorometil)piperidin-1-i!)-3-oxopropanonitrilo; 3-((3S,4S)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4-(trifluorometil)piperidin-1-il)-3-oxopropanonitrilo; /V-(3-((3R,4R)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin- -il) 4-metilpiperidin-1-¡l)-3-oxopropil)a ceta mida; ((3R,4 )-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4-metilpiperidin-1 - il)(tetrahidrofuran-2-il)metanona; ((3R,4 )-3-(6/-/-imidazo[1 ,5-a]pirro!o[2,3-e]pirazin-1 - il)-4-metilpiperidin-1-il)(tetrahidrofuran-3-i!)metanona; ((3R,4ft)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirro!o[2,3-e]pirazin-1 - il)-4-metilpiperidin-1 - il)(3-metoxiciclohexil) meta nona; 1-((3R,4 ?)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4-metilpiperidin-1 - il)-3-hidroxipropan-1 -ona; 1 -((3R,4 )-1-bencil-4-metilpiperidin-3-M)-6f-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]piraz¡na¡ 1-((3ft,4fi)-3-(6/-y-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4 metilpiperidin-1 - il)-4,4,4-trifluorobutan-1 -ona; ((3R,4R)-3-(6/-/-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4-metilpiperidin-1-il)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanona; ((3R,4ft)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4-metilpiperidin-1-il)(tetrahidro-2H-piran-3-il)metanona; 4-((3ft,4ft)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4 metilpiperidin-1-il)-4-oxobutanenitrilo; ((3R,4R)-3-(6 V-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -M)-4-metilpiperidin-1-il)(tetrahidro-2W-piran-2-il)metanona; ((3R,4R)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 - il)-4-metilpiperidin-1-il)((f?)-2-(hidroximatil)pirrolidin-1-il)metanona; ((3R,4f?)-3-(6--imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 - il)-4-metilpiperidin-1-il)(3-metilpirrolidin-1-il)met anona; ((3R,4R)-3-(6/--imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -M)-4-metilpiperidin-1-il)(3-fluoroazetidin-1-il)metanona; ((3R,4 )-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4-metilpiperidin-1 - il)((S)-3-fluoropirrolidin-1 - il)metanona; ((3R,4ft)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4-metilpiperidin-1-il)(( )-2-metilpirrolidin-1 -il) meta nona; ((3R,4R)-3-(6/-/-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -M)-4-metilpiperidin-1-il)((f?)-morfoMn-3-il)metanona; 1 -((3 ,4R)-3-(6--imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 - il)-4 metilp¡peridin-1-il)-3-(met¡lsulfonil)propan-1-ona¡ ((3ft,4ft)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]piraz¡n-1 -il)-4-met¡lpiper¡din-1-il)(1 ,4-dioxan-2-¡l) meta nona; ((3ft,4ft)-3-(6/--imidazo[1 ,5-a]p¡rrolo[2,3-e]p¡razin-1 - il)-4-metilpiper¡din-1-il)(tetrahidrot¡ophen-3-il-1,1-dioxide)metanona; ((3f?,4R)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4-metilpiperidin-1-il)(3,3-difluorociclobutil)metanona; /V-((1S,3^,4S)-3-(6H-imidazo[1,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1-il)-4-metilciclopentil)anilina; ?/-((1 R,3S,4R)-3-(6/-/-im¡dazo[1 ,5-a]pirrolo[2 ,3-e]pirazin-1 -il)-4-metilciclopentil)aniIina; 3-bromo-1-c¡clohex¡l-6H-im¡da2o[1.5-a]pirrolo[2,3-e]p¡raz!na, (f?)-(3-(6 -/-imidazo[1,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1-il)piperidin-1-il)(3,3-difluoroazetidin-1-il)metanona; (f?)-(3-(6/-/-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 - il)piperidin-1-il)(3,3-difluoropirrolidin-1-il)met anona; (R)-(3-(6-/-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 - il)piperidin-1 - il)(4,4-difluoropiperidin-1 - il)metanona ; ( )-1 -(3-(6--imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)piperidina-1 -carbonil)azetidina-3-carbonitrilo; (3ft,4R)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4-metil-A/-(pinmidin-2-il)piperidina-1 - carboxamida; (3f?,4 ?)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -¡l)-4-met¡l-?/-(p¡r¡din-2-¡l)piper¡dina-1-carboxam¡da; (3R,4R)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4- metil-N-(pirimidin-4-il)piperidina-1-carboxamida; (3f?,4R)-3-(6/--imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 - il)-4-metil-/V-(pirazin-2-il)piperidina-1-carboxamida; 1 -ciclohexil-3-fenil-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazina; /V-((3S,5ft)-1-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-5-metilpirrolidin-3-il)ciclopropansulfonamida; ((3R,4 )-3-(6/--imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 - il)-4-metilpiperidin-1-il)(1 -metilpirrolidin-3-il)metanona; ((3/:?,4f?)-3-(6/-/-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 - il)-4-metilpiperidin-1-il)(1-metilpiperidin-4-il)metanona; 3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2 ,3-e]pirazin-1 - il)-4-metilpiperidina-1 -carboxilato de (3R,4R)-1en\\o; (( )-3-(6H- imidazo[1,5-a] pirro lo [2, 3-e] pira zin-1-il)pipe ridin-1-il)((ft)-2-(trifluorometil)pirrolidin-1-il)met anona; ( )-1-(1-(pirrolidin-1-ilsulfonil)piperidin-3-il)-6 -/-imidazo[1,5 a] pirrólo [2 ,3-e]pirazina; (R)-(3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 - il)piperidin-1 - il)(pirrolidin-1 - il)metanona; ácido 3-(1 -ciclohexil-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2 ,3-e]pirazin 3-il)propanoico; (S)-1-((R)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)piperidina-1 -carbonil)pirrolidina-3-carbonitrilo; 3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)piperidina-1 -carboxilato de (R)-ciclopentilo; (E)-W-(((3R,4R)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1- il)-4-metilpiperidin-1-il)(pirrolidin-1-il)metileno)cyanamida; 4- ((1R,3ft)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]p¡rrolo[2 ,3-e]pirazin-1 -il)ciclopentilamino)benzonitrilo; (ft)-(3-(6H-imidazo[1,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1-il)piperidin 1-il)(3,3-d¡fluorociclobutil)met anona; 5- ((1 S,3 ?,4S)-3-etil-4-(6/-/-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1-il)ciclopentilamino)pirazina-2-carbonitrilo; ?/-((1 S,3S,4R)-3-(3-bromo-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1-il)-4-etilciclopentil)ciclopropansulfonamida; ((3 ,4f?)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4-metilpiperidin-1 - il)(4,4-difluorociclohexil)metanona; (/?)-(3-(6 --imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1-il)pirrolidin 1-il)(3,3-dimetilpirrolidin-1-il)metanona; (f?)-(3-(6/-/-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 - il)piperidin 1-il)(3,3-difluoropiperidin-1-il)metanona; (ft)-1-(3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)piper¡dina-1 -carbón i I ) pi pe rid i na-4-carbo nitrito; (R)-(3-(6--imidazo[1 , 5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 - i I ) p i p e r i d in 1 -il)(tiomorfolino-1 ,1-dioxide)metanona; ((3 ,4f?)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 - il)-4* metilpiperidin-1 - il)(azepan-1 - il)metanona; (f?)-(3-(6-/-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 - il)piperidin 1-il)(4,4-dimetilpiperidin-1-il)metanona; (ft)-(3-(6H-imidazo[1,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1-il)piperidin 1-il)(4-cloropiperidin-1-il)metanona; 5-(((1 S,3R)-3-(6W-¡midazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)ciclopentil) metí lamí no) pirazina-2-carbonitrilo; 5-(((1 S,3S)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)ciclopentil)metilam¡no)pirazina-2-carbonitrilo; 1-((R)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1-¡l)piper¡dina-1 -carbón ¡l)p¡peridina-3-carbonitr¡lo; /V-((3S,5ft)-5-etil-1-(6H-im¡dazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]p¡raz¡n-1 il)pirrolid¡n-3-il)ciclopropansulfonamida; 1-(3,3-difluorociclobutil)-6H-im¡dazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazina; /V-(1-(6--imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -i I ) p i r ro I i d i n - 3-il)ciclopropansulfonamida; ácido (E)-3-(1-ciclohexil-6H-¡midazo[1,5-a]pirrolo[2,3 e]p¡razin-3-il)acrílico; ?/-((1 S,3S,4 )-3-(3-cloro-6H-im¡dazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]p¡razin-1-¡l)-4-etilciclopentil)ciclopropansulfonamida¡ 4- (((cis)-3-(6--im¡dazo[1 , 5-a] pirrólo [2, 3-e] p ¡ razi n- 1 -il)ciclobutoxi)metil)benzonitrilo; 5- ((3S,5 )-5-etil-1-(6/-/-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]piraz¡n-1 -¡l)pirrolidin-3-ilamino)pirazina-2-carbonitr¡lo; /V-((3S,5R)-5-etil-1-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 il)pirrolidin-3-il)-3,3,3-trifluoropropano-1 -su Ifon amida; 4-((1f?,3f?,4S)-3-etil-4-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)ciclopentiloxi)benzonitrilo; ?/-((1 S,3S,4 ?)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il) 4-metilciclopent¡l)-1 -metilc¡clopropano-1 -sulfonamida; 1-((1 S,4S)-5-(3,3,3-trifluoropropilsulfon¡l)-2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptan-2-il)-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-ejpirazina; ?/-((1 S,3S,4^)-3-(6H-¡midazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 *il) 4-metilc¡clopentil)-3,3-d¡fluoroazetidina-1 -sulfonamida; ?/-((1 S,3S,4ft)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin- -il) 4-metilciclopentil) -3, 3, 3 -trifluoropropano-1 -sulfonamida; ?/-((1 S,3S,4R)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2 ,3-e]pirazin-1 -il) 4-metilciclopentil) -3 ,3-difluoropirrolidina-1 -sulfonamida; (S)-A/-((1 S,3S,4R)-3-(6/-/-¡midazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1-il)-4-metilciclopentil)-2-(trifluorometil)pirro lid ina-1 - sulfonamida; ?/-(((1 S,3S)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)ciclopentil)metil)ciclopropansulfonamida; ?/-(((1 S,3ft)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]p¡rrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)ciclopentil)meti!)-3, 3, 3-trifluoropropano-1 -sulfonamida; ?/-(((1 S,3S)-3-(6/--imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)ciclopentil)metil)-3, 3, 3-trifluoropropano-1 -sulfonamida; ?/-((1 S,3S,4R)-3-(6 -/-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2 ,3-e]pirazin-1 -il) 4-metilciclopentil)-1-etilciclopropano-1 -sulfonamida; 1-((3aft,6aS)-5-(3,3,3-trifluoropropilsulfonil)hexa idrop¡rrolo[3,4-c]pirrol-2(1 H)-\\)-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazina; 1 - (6-fluoro-4-(3,3,3-trifluoropropilsulfonil)-1 ,4-diazepan-1 -il)-6/-/-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazina; 4-([4-(6 -/-imidazo[1 ,5-a]pp¡rrolo[2,3-e]pirazin-1-il)cubanil]metoxi)benzonitrilo; /V-((3f?,4S)-4-metil-1 -(3,3,3-trifluoropropilsulfonil)piperidin- 3- ¡l)-6H-¡midazo[1,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1-amina; 1-(2-(3,3,3-trifluoropropilsulfonil)-2,5-diazaspiro[3.5]nonan-5-¡l)-6H-imidazo[1 ,5-a]p¡rrolo[2,3-e]pirazina; 1-((3aS.7aR)-4-(3,3,3-trifluoropropilsulfonil)octah¡dro-1 H-pirrolo[3,2-£)]p¡r¡din-1-¡l)-6/--¡m¡dazo[1,5-a]pirrolo[2,3-e]p¡raziná; 1-(7-met¡l-4-(3,3,3-trifluoropropilsulfonil)-1,4-d¡azepan-1-il)-6 -/-¡midazo[1,5-a]pirrolo[2,3-e]p¡raz¡na; 1 -(5-(3,3,3-tr¡fluoropropilsulfon¡l)-2,5-d¡azaspiro[3.5]nonan-2-il)-6H-¡m¡dazo[1 ,5-a]p¡rrolo[2,3-e]pirazina; /V-(1-(6H-imidazo[1,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1-il)piperidin-3-il)-3,3,3-tr¡fluoropropano-1-sulfonam¡da; 1-((1 ,5S)-2-(3,3,3-trifluoroprop¡lsulfon¡l)-2,6-d¡aza ¡c¡clo[3.2.1 ]octan-6-il)-6/-/-im¡dazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]p¡raz¡na; 1-ciclohexil-3-(4-(metilsulfon¡l)fen¡l)-6 -/-¡midazo[1,5-a]pirrolo[2,3-e]piraz¡na; ?/-(4-(1 -ciclohexil-6 -/-im¡dazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]piraz¡n-3-¡ I ) f e n ¡ I ) m e t a n s u I f o n a m ¡ d a ; ?/-((1 S,3S,4R)-3-(6W-imidazo[1 ,5-a]p¡rrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)- 4- metilciclopent¡l)-3-clorobenzenesulfonam¡da; [(1 S,3f?,4R)-3-etil-4-(3-tr¡fluorometil-6H-2,5,6,8b-tetraaza-as-¡ndacen-1 -il)-ciclopentil]-amida del ácido ciclopropansulfonico; [(1 S,3R,4S)-3-etil-4-(3-trifluoromet¡l-6H-2, 5,6,8 b-tetraaza-as-indacen-1 -il)-c¡clopent¡l]-am¡da del ácido ciclopropansulfónico; ácido 1-((1S,2R,4S)-4-ciclopropansulfonilamino-2-etil-ciclopentil)-6H-2,5,6,8b-tetraaza-as-indacene-3-carboxílico; ácido 1 - 2R,4 S)-4-ciclopro pansulfo nilamino-2-etil-ciclopentil)-6-/-2,5,6,8b-tetraaza-as-indacene-3-carboxílico; [(1 S,3 ,4S)-3-metil-4-(3-trifluorometil-6H-2,5,6,8b-tetraaza-as-indacen-1 -il)-ciclopentil]-amida del ácido ciclopropansulfónico; 1 -[(1 ft,3ft,4S)-3-et¡l-4-(3-tr¡fluorometil-6H-2,5,6,8b-tetraaza-as-indacen-1-il)-ciclopentil]-2-metil-propan-2-ol; {(1 S,3fl,4S)-3-etil-4-[3-(2,2,2-trifluoro-etil)-6/-/-2,5,6,8b-tetraaza-as-indacen-1 -il]-ciclopentil}-amida del ácido ciclopropansulfónico; etiléster del ácido [(1 f?,3f?,4S)-3-etil-4-(3-trifluorometil-6H-2,5,6,8b-tetraaza-as-indacen-1-il)-ciclopentil]-acético o S,2R,4R)-2-etil-4-(3-metoximatil-[1 ,2,4]oxadiazol-5-ilmetil)-ciclopentil]-3-trifluorometil-6-/-2,5,6,8b-tetraaza-as-indaceno.
En un decimoséptima modalidad la invención proporciona un compuesto de acuerdo con las modalidades primera a duodécima donde T es N, U es CR4, X es CR3 e Y es N y forma un compuesto de Fórmula (le) En una decimoctava modalidad la invención proporciona compuesto de acuerdo con la decimoséptima modalidad donde compuesto es 3-((3S,4S)-3-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)-4-metilpiperidin-1-il)-3-oxopropanonitrilo; 5-(3-(3H-imidazo[1,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)piperidin-1-il)pirazina-2-carbonitrilo; (S)-1-(3-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)piperidina-1-carbonil)ciclopropancarbonitrilo; i; /V-((1S,3 ,4H)-3-etil-4-(3H-imidazo[1,2-a]pirrolo[2,3-e]piraz¡n-8-il)ciclopentil)ciclopropansulfonamida; ?/-((1 R,3S,4S)-3-etil-4-(3H-¡midazo[1 ,2-a]pi rrolo[2 , 3-e]pirazin-8-il)ciclopentil)ciclopropansulfonamida; (S)-6-(3-(3--imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)piperidin-1-il)nicotinonitrilo; (f?)-6-(3-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)piperidin-1-il)nicotinon¡trilo; (S)-2-(3-(3H-imidazo[1 ,2-a]p¡rrolo[2,3-e]pirazin-8- ; il)piperidin-1-il)tiazolo-5-carbonitrilo; ( )-2-(3-(3--imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)piperidin-1-il)tiazolo-5-carbonitrilo; (R)-(3-(3/-/-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)piperidin-1-il)(3,3-difluoroazetidin-1-il)metanona; (S)-(3-(3-/-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)piperidin-1-il)(3,3-difluoroazetidin-1-il)metanona; 5-((1 R,3S,4S)-3-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-M)- -metilc¡clopentilamino)pirazina-2-carbonitrilo; 5-((1 S,3ft,4tf)-3-(3H-imidazo[1 ,2-a]p¡rrolo[2,3-e]p¡razin-8-¡l)- -metilciclopentilam¡no)p¡razina-2-carbonitrilo; 5-((1R,3ft,4S)-3-(3H-imidazo[1 ,2-a]p¡rrolo[2,3-e]pirazin-8-il) 4-metilciclopentilam¡no)pirazina-2-carbonitrilo; 5-((1 S,3S,4f?)-3-(3W-im¡dazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)-4-met¡lciclopentilam¡no)pirazina-2-carbon¡trilo; A/-(4-(3/-/-imidazo[1 ,2-a] pirro lo[2,3-e]pirazi n-8-il)biciclo[2,2,2]octan-1-il)ciclopropansulfonamida; (f?)-(3-(3/-/-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]p¡raz¡n-8-il)piper¡d¡n-1-il)(3,3-difluoroc¡clobutil)metanona; ( R)-(3-(3H- ¡midazo[1,2-a] pirro lo[2, 3 -e] pira zin-8-il)piperidin-1-il)(3,3-difluoropirrolidin-1-il)met anona; (/?)-(3-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)piperidin-1 - il)(4,4-difluoropiperidin-1 - i I) meta non a; ?/-((1 S,3S,4f?)-3-(3/-/-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il) 4-metilciclopentil)-3,3,3-tr¡fluoropropano-1-sulfonamida¡ ?/-((1 R,3/?,4S)-3-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]piraz¡n-8-il)-4-metilciclopentil)-3,3,3-trifluoropropano-1-sulfonamida; ?/-((1 R,3S,4S)-3-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8,-il) 4-metilciclopentil)-3,3,3-trifluoropropano-1-sulfonamida; ?/-((1 S,3ft,4ft)-3-(3H-im¡dazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)-4-metilciclopentil)-3,3,3-trifluoropropano-1-sulfonamida; ((R)-3-(3/-/-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)piperidín- 1 - il)((f?)-2-(trifluorometil)pirrolidin-1 -M)metanona; A/-((3S,5R)-5-etil-1-(3-/-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8 il)pirrolidin-3-il)ciclopropansulfonamida; 1-ciclohexil-1,6-dihidroimidazo[4,5-c/]pirrolo[2,3-5]piridina; A/-((3S,5 )-5-etil-1-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8 il)pirrolidin-3-il)-3,3,3-trifluoropropano-1-sulfonamida; 3-(3/-/-imidazo[1 ,2-a] pirro !o[2,3-e]pirazi n-8-il)-4-metilciclopentanamina; A/-((1f?,3S,4R)-3-etil-4-(3/-/-imidazc[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)ciclopentil)-3,3,3-trifluoropropano-1-sulfonamida; ?/-((1 S,3ft,4S)-3-etil-4-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)ciclopentil)-3,3,3-trifluoropropano-1-sulfonamida; A/-((1 S,3S,4R)-3-(3/-/-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il) 4-metilciclopentil)ciclopropansulfonamida; ?/-((1 S,3R,4S)-3-etil-4-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)ciclopentil)ciclopropansulfonamida; ?/-((1 S,3f?,4S)-3-et¡l-4-(3/--¡m¡dazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]p¡razin-8-il)ciclopent¡l)-3,3-d¡f!uoroazetid¡na-1-sulfonamida; 3-cloro-N-((1 S,3R,4S)-3-etil-4-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)ciclopentil)-4-fluo roben ce nsulfonamida; ?/-((1 S,3S,4 )-3-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]piraz¡n-8-il) 4-metilc¡clopentil)-3,3-difluoroazetid¡na-1-sulfonamida; ?/-(((1 S,3R,4S)-3-etil-4-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e] pira zin-8-il)c¡clopentil)met¡l)-3, 3,3 -trifluoro pro pano-1-sulfonamida; A/-(((1R,3S,4f?)-3-etil-4-(3f/-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)ciclopentil)metil)-3,3,3-tnfluoropropano-1 -sulfonamida; ?/-(((1 S,3S,4 )-3-etil-4-(3H-imidazo[1,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)ciclopentil)metil)-3,3,3-trifluoropropano-1 -sulfonamida; A/-(((1ft,3R,4S)-3-etil-4-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2 , 3-e]pirazin-8-il)ciclopentil)metil)-3,3,3-trifluoropropano-1 -sulfonamida; ?/-((1 S,3S,4R)-3-(3H-im¡dazo[1,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8Hl) 4-metilciclopentil)morfol¡na-4-sulfonamida; [(2S,4S,5 ?)-4-metil-5-(3H-imidazo[1 ,2-a]p¡rrolo[2,3-e]piraz¡n-8-il)-tetrahidro-furan-2-ilmetil]-amida del ácido 3,3,3 trifluoro-propano-1-sulfónico; [(2R,4fl,5S)-4-metil-5-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]piraz¡n-8-il)-tetrahidro-furan-2-¡lmetil]-amida del ácido 3,3,3 trifluoro-propano-1-sul fónico; metil-[(1 S, 3R,A S)-3-metil-4-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-ejpirazin-8-il)-ciclopentil]-amida del ácido 3,3,3-trifluoro-propano 1-sulfónico; [(1 S,3R,4S)-3-metil-4-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)-ciclopentil]-amida del ácido azetidina-1 -sulfónico; {3-[(1 S,3f?,4S)-3-metil-4-(3H-imidazo[1,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)-ciclopentilamino]-oxetan-3-il}-acetonitrilo; [(1 S,3 ,4S)-3-metil-4-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3- e]pirazin-8-il)-ciclopentil]-amida del ácido 3,3-difluoro-ciclobutansulfónico; 8-[(1 S,2ft,4S)-2-metil-4-(tetrahidro-piran-4-iloxi)-ciclopentil]-3/-/-3,4,6,8a-tetraaza-as-indaceno; 8-[(1 R,2ft)-2-metM-4-(tetrahidro-p¡ran-4-¡lox¡)-ciclopentil]- 3H-3,4,6,8a-tetraaza-as-indaceno; [(1 S,3ft,4S)-3-metil-4-(3H-imidazo[1,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)-c¡clopentil]-amida del ácido 3-fluoro-azetidina-1 -sulfónico; [(1 S,3R,4S)-3-metil-4-(3H-imidazo[1,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)-ciclopentil]-amida del ácido 3-fluoro-propano-1 -s u Ifó n ico ; [(1 S,3tf,4S)-3-metil-4-(7-metil-3H-im¡dazo[1 ,2-a]pirrolo[2 ,3-e]pirazin-8-il)-ciclopentil]-amida del ácido ciclopropansulfónico; [(1 ,3S,4R)-3-metil-4-(7-met¡l-3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2 ,3-e]pirazin-8-il)-ciclopentil]-amida del ácido ciclopropansulfónico; 2-ciano-N-[(1 S,3R,4S)-3-metil-4-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)-ciclopentil]-acetamida; 8-[(1 S>2 ,4 )-2-metil-4-(tetrahidro-piran-4-iloxi)-ciclopentil]-3-/-3,4,6,8a-tetraaza-as-indaceno; (2-ciclopropil-etil)-[(1 S,3 )4S)-3-metil-4-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)-ciclopentil]-oxetan-3-il-amina; Ciclopropilmetil-[(1 S,3f?,4S)-3-metil-4-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)-ciclopentil]-oxetan-3-il-amina; (2,2,2-trifluoro-et¡l)-amida del ácido (3R,4S)-3-etil-4÷(3H- imidazo[1 ,2-a]p¡rrolo[2,3-e]pirazin-8-il)-pirrolidina-1 -carboxilico; o (2,2,2-trifluoro-etil)-amida del ácido (3S,4R)-3-etil-4-(3M-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)-pirrolidina-1 -carboxilico.
En una decimonovena modalidad la invención proporciona un compuesto de acuerdo con las modalidades primera a duodécima donde T es CR6, U es CR4, X es CR3 e Y es N y forma un compuesto de Fórmula (Id) Fórmula (Id).
En una vigésima modalidad la invención proporciona un compuesto de acuerdo a la decimonovena modalidad donde el compuesto es A/-(4-(3/--dipirrolo[1 ,2-a:2',3'-e]pirazin-8-il)biciclo[2,2,2]octan-1-il)ciclopropansulfonamida.
En una vigesimoprimera modalidad la invención proporciona un compuesto de acuerdo con las modalidades primera a duodécima donde T es CR6, U es N, X es NR3 e Y es C y forma un compuesto de Fórmula (le) En una vigesimosegunda modalidad la invención proporciona un compuesto de acuerdo con la vigesimoprlmera modalidad donde el compuesto es (f?)-1-(3-(pirazolo[3,4-d]pirrolo[2,3-jb]piridin-1 (6H)-il)piperidin-1 -carbonil)ciclopropancarbonitrilo; o (S)-1-(3-(pirazolo[3,4-d]pirrolo[2,3-6]p¡ridin-1 (6-)-¡ I) p i pe r id i n -1-carbonil)ciclopropancarbonitrilo.
En una vigesimotercera modalidad la invención proporciona un compuesto de acuerdo con las modalidades primera a duodécima donde T es O, U es N, X es CR3 e Y es C y forma un compuesto de Fórmula (If) Fórmula (If).
En una vigesimocuarta modalidad la invención proporciona un compuesto de acuerdo con las modalidades primera a duodécima donde T es NR6, U es N, X es CR3 e Y es C y forma un compuesto de Fórmula (Ig) Fórmula (Ig).
En una vigesimoquinta modalidad la invención proporciona un compuesto de acuerdo con la vigesimocuarta modalidad donde el compuesto es 1-((1R,2R,4S)-2-etil-4-(4-metoxibenciloxi)ciclopentil)-3,6-dihidropirazolo[4,3-d]pirrolo[2,3-ó]piridina; 1 -((1 S>2S,4f?)-2-etil-4-(4-metox¡benciloxi)ciclopentil)-3,6-dihidropirazolo[4,3-d]pirrolo[2,3-Jt>]piridina; o A/-(4-(3,6-dihidropirazolo[4,3-d]pirrolo[2,3-6]p¡ridin-1 -il)biciclo[2 ,2 ,2]octan-1 - il)c¡clopropansulfonamida.
En una vigesimosexta modalidad la invención proporciona un compuesto de acuerdo con las modalidades primera a duodécima donde T es CR6, U es CR4, X es NR3 e Y es C y forma un compuesto de Fórmula (Ih) Fórmula (Ih).
En una vigesimoséptima modalidad la invención proporciona un compuesto de acuerdo con la vigesimoquinta modalidad donde el compuesto es 1-ciclohexil-1,6-dihidroimidazo[4,5-d]pirrolo[2,3-£)]piridina; 1 -ciclohexil-2-metil-1 ,6-dihidroimidazo[4,5-d]pirrolo[2,3-¿] p i r i d i n a ; o 1-ciclohexil-2-(trifluorometil)-1,6-d¡hidroimidazo[4,5-d]pirrolo[2,3-£>]piridina.
En una vigesimoctava modalidad la invención proporciona un compuesto de acuerdo con las modalidades primera a duodécima donde T es S, U es N, X es CR3 e Y es C y forma un compuesto de Fórmula (li) Fórmula (li).
En una vigesimonovena modalidad la invención proporciona un compuesto de acuerdo con las modalidades primera a duodécima donde T es N, U es CR4, X es NR3 e Y es C y forma un compuesto de fórmula (Ij) En una trigésima modalidad la invención proporciona un compuesto de acuerdo a la vigesimonovena modalidad donde el compuesto es ?/-((1 S,3 ,4S)-3-et¡l-4-(imidazo[4)5-d]pirrolo[2,3-6]piridin-1(6-/)-¡l)ciclopentil)ciclopropansulfonamida; ?/-((1 S,3S,4 ?)-3-(imidazo[4,5-cf]pirroloÍ2,3-6]pir¡din-1(6H)-il)-4-metilciclopentil)ciclopropansulfonamida; ?/-((1 S,3S,4R)-3-(2-ciclopropylimidazo[4,5-d]pirrolo[2,3-ó]piridin-1(6/-/)-il)-4-metilciclopent¡l)ciclopropansulfonamida; ?/-((1 S,3fí,4S)-3-met¡l-4-(2-met¡limidazo[4,5-c/]p¡rrolo[2,3- b]piridin-1(6H)-il)ciclopentil)ciclopropansulfonamida; [(1 S,3R,4S)-3-metil-4-(2-trifluorometil-imidazo[4,5-c/]pirrolo[2,3-£>]piridin-1 (6/-/)-¡l)-ciclopent¡l]-amida del ácido ciclopropansulfónico; [(1 S,3R,4S)-3-etil-4-(2-trifluorometil-im¡dazo[4,5-cí]pirrolo[2,3-í)]piridin-1 (6/-/)-il)-ciclopentil]-amida del ácido ciclopropansulfónico; [(1 S,3S,4R)-3-(2-difluorometil-imidazo[4,5-d]pirrolo[2,3-6]piridin-1 (6H)-il)-4-etil-ciclopentil]-amida del ácido ciclopropansulfónico; [(1 S,3R,4S)-3-etil-4-(2-metil-imidazo[4,5-cí]pirrolo[2,3-¿>]piridin-1 (6-/)-il)-ciclopentil]-amida del ácido ciclopropansulfónico; [(1 S,3S,4R)-3-(2-amino-imidazo[4,5-c']pirrolo[2,3-¿)]piridin-1 (6/-/)-il)-4-etil-ciclopentil]-amida del ácido ciclopropansulfónico. de acuerdo con las modalidades primera a duodécima donde es N, U es N, X es NR3 e Y es C y forma un compuesto de Fórmula (Ik) Fórmula (Ik).
En una trigesimosegunda modalidad la invención proporciona un compuesto de acuerdo con la trigesimoprimera modalidad donde el compuesto es [(1S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-[1,2,3]tr¡azolo[4,5-d]pirrolo[2,3-£>]piridin-1-il)-ciclopentil]-amida del ácido ciclopropansulfónico.
En una trigesimotercera modalidad la invención proporciona un compuesto de Fórmula (II) donde el compuesto es Fórmula (II) sales aceptables farmacéuticamente, profármacos, metabolitos biológicamente activos, estereoisómeros e isómeros del mismo donde R ,y R2 son en forma independiente hidrógeno, deuterio, -N(Ra)(Rb), halógeno, -ORa, -SRa, -S(0)Ra, -S(0)2Ra, -N02, -C(0)ORa, -CN, -C(0)N(Ra)(Rb), -N(Ra)C(0)(Rb), -C(0)Ra, -C(OH)RaRb, -N(Ra)S(0)2-Rb, -S(0)2N(Ra)(Rb), -CF3, -OCF3, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, alquenilo de 2 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, alquinilo de' 2 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, heteroarilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, heterociclilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, o arilo de 6 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido; donde en una unidad que contiene -N(Ra)(Rb), el nitrógeno, Ra y Rb pueden formar un anillo tal que -N(Ra)(Rb) representa un heterociclilo de 2 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido o un heteroarilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido unidos por medio de un nitrógeno; R3 es hidrógeno, un cicloalquilo de 5 a 12 átomos de carbono en puente opcionalmente sustituido, heterociclilo de 2 a 10 átomos de carbono en puente opcionalmente sustituido, alquilo de 1 a 8 átomos de carbono opcionalmente sustituido, cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, cicloalquenilo de 3 a 8 átomos de carbono opcionalmente sustituido, arilo de 6 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, heteroarilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, heterociclilo de 2 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido; o R3 es -A-D-E-G, donde: A es una unión, -C(O)-, alquileno de 1 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, alquenilo de 2 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, alquileno de 2 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, cicloalquileno de 3 a 12 átomos de carbono opcionalmente sustituido), heterociclileno de 2 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, -C(0)N(Ra)-Re-, -N(Ra)C(0)-Re-, -0-Re-, -N(Ra)-Re-, -S-Re-, -S(0)2-Re-, -S(0)Re-, -C(0-Ra)(R&)-Re-, -S(0)2N(Ra)-Re-, -N(Ra)S(0)2-Re- o -N(Ra)C(0)N(Rb)-Re-; D es un alquileno de 1 a 8 átomos de carbono opcionalmente sustituido, cicloalquileno de 5 a 12 átomos de carbono en puente opcionalmente sustituido, cicloalquileno de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, cicloalquenileno de 5 a 10 átomos de carbono en puente opcionalmente sustituido, cicloalquenileno de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, arileno de 6 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, heteroarileno de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, heterocicliléno de 2 a 10 átomos de carbono en puente opcionalmente sustituido o un heterocicliléno de 2 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido; E es una unión, -Re-, -Re-C( = NCN)-Re-, -Re-C(0)-Re-, -Re-C(0)C(0)-Re-, -Re-C(0)0-Re-, -Re-C(0)C(0)N(Ra)-Re-, -Re-N(Ra)-C(0)C(0)-Re-, -Re-0-Re-, -Re-S(0)2-Re-, -Re-S(0)-Re-, -Re-S-Re-, -Re-N(Ra)-Re-, =N-Re-, -Re-N(Ra)C(0)-Re-, -ReC(0)N(Ra)Re-, -Re-OC(0)N(Ra)-Re-, -Re-N(Ra)C(0)ORe-, -Re-OC(0)-Re, -Re-OC(0)-0-Re, -Re-N(Ra)C(0)N(Rb)-Re-,. -Re-N(Ra)S(0)2-Re-, -Re-S(0)2N(Ra)-Re-, o -Re-N(Ra)S(0)2N(Ra)-Re-; o donde en todos los casos, E se une a un carbono o bien a un átomo de nitrógeno en D; G es hidrógeno, deuterio, -N(Ra)(R ), halógeno, -ORa, -SRa, -S(0)Ra, -S(0)2Ra, -N02, -C(0)ORa, -CN, -C(0)N(Ra)(Rb), -N(Ra)C(0)R , -N(Ra)C(0)ORb, -OC(0)N(Ra), -N(Ra)C(0)N(R )2, -C(0-Ra)(Rb)2, -C(0)Ra, -CF3, -OCF3, -N(Ra)S(0)2Rb, S(0)2N(Ra)(R ), -S(0)2N(Ra)C(0)Rb, un -alquilo de 1 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un -alquenilo de 2 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un -alquinilo de 2 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un -cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un -heteroarilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un -heterociclilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un -arilo de 6 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido; donde en una unidad que contiene -N(Ra)(Rb), el nitrógeno, Ra y R pueden formar un anillo tal que -N(Ra)(Rb) representa un heterociclilo de 2 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido o un heteroarilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido unidos por medio de un nitrógeno; Ra y R son en forma independiente entre sí hidrógeno, deuterio, CN, un alquilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un alquenilo de 2 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un alquinilo de 2 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un alquilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido-O-alquilo de 1 a 10 átomos de carbono, un cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un arilo de 6 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un heteroarilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un heterociclilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, alquileno de 1 a 6 átomos de carbono-cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, -alquileno de 1 a 6 átomos de carbono-arilo de 6 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un -alquileno de 1 a 6 átomos de carbono-heteroarilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, o un -alquileno de 1 a 6 átomos de carbono-heterociclilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido; y Re en cada oportunidad es en forma independiente una unión, un alquileno de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un alquileno de 2 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un alquinileno de 2 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un grupo -alquileno de 1 a 10 átomos de carbono-O-alquileno de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un cicloalquileno de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un arileno de 6 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un heteroarileno de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, o un heterociclileno de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido.
En una modalidad 34, la invención proporciona un compuesto de acuerdo a la modalidad 33, donde el compuesto es 1 -ciclohexil-2,3,4.7-tetrahidro-1 H-pirrolo[2,3-?][1 ,6]naftiridina; [(1S,3R,4S)-3-etil-4-(3,6.7,8-tetrahidro-3,4,9-triaza-ciclopenta[a]naphthalen-9-il)-ciclopentil]-amida del ácido ciclopropansulfónico; o [(1S,3S,4R)-3-(3,6-dihidro-2H-dipirrolo[2,3-b;2',3'-d]pirid"m-1-il)-4-etil-c¡clopentil]-amida del ácido ciclopropansulfónico.
En una modalidad 35, la invención proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la Fórmula (I) o de la Fórmula (II) -definido en cualquiera de las modalidades precedentes Fórmula (I), Fórmula (II), un vehículo y un excipiente farmacéuticamente aceptables y un segundo agente terapéutico seleccionado del grupo formado por fármacos anti-inflamatorias supresoras de citosinas, anticuerpos contra o antagonistas de otras citosinas o factores de crecimiento humanos, IL-1, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-12, IL-15, IL-16, IL-21, IL-23, interferones, EMAP-II, GM-CSF, FGF, PDGF, CTLA o sus ligandos incluyendo CD154, H U I RA™, REMICADE™, SIMPONI™ (golimumab), CI ZIA™, ACTEMRA™, CDP 571, receptores de TNF p55 o p75 solubles, ENBREL™, Lenercept, inhibidores de la enzima convertidora de TNFa, inhibidores de IL-1, Interleucina 11, antagonistas de |L-18, antagonistas de IL-12, anticuerpos de IL-12, receptores de IL-12 soluble, proteínas de unión IL-12, FK506 inhibidores anti-CD4 No. supresores, rapamicina, micofenolato de mofetilo, leflunomida, NSAIDs, ¡buprofeno, corticosteroides, inhibidores de fosfodiesterasa, agonistas de adenosina, agentes antitrombóticos, inhibidores del complemento, agentes adrenérgicos, inhibidores de la enzima convertidora de IL-?ß, inhibidores de quinasas de la señalización de linfocitos T, inhibidores de metaloproteinasas, sulfasalazina, 6-mercaptopurinas, derivados de p75TNFRIgG, sIL-1RI, sIL-IRII, slL-6R, celecoxib, sulfato de hidroxicloroquina, rofecoxib, infliximab, naproxeno, valdecoxib, sulfasalazina, meloxicam, acetato, tiomalato de oro y sodio, aspirina, triamcinolona acetonida, napsilato de propoxifeno/apap, folato, nabumetona, diclofenaco, piroxicam, etodolac, diclofenaco sodio, oxaprozina, oxicodona HCI, bitartrato de hidrocodona/apap, diclofenaco sodio/misoprostol, fentanilo, anakinra, tramadol HCI, salsalato, sulindac, cianocobalamina/fa/piridoxina, acetaminofeno, alendronato sodio, sulfato de morfina, clorhidrato de lidocaína, indometacina , sulfato de glucosamina/condroitina, amitriptilina HCI, sulfadiazina, oxicodona HCI/acetaminofeno, olopatadina HCI misoprostol, naproxeno sodio, omeprazol, ciclofosfamida, rituximab, IL-1 TRAP, MRA, CTLA4-IG, IL-18 BP, anti-IL-12, anti-IL15, VX-740, Roflumilast, IC-485, CDC-801, agonistas de S1P1, FTY720, inhibidores de la familia PKC, Ruboxistaurina , AEB-071, Mesopram, metotrexato, leflunomída, corticosteroides, budenosida, dexametasona, sulfasalazina, ácido 5-aminosalicílico, olsalazina, inhibidores de la enzima convertidora de t L- 1 ß , I L- ra , inhibidores de la señalización de linfocitos T, inhibidores de tirosina quinasa, 6-mercaptopurinas, IL-11 , mesalamina, prednisona, azatioprina, mercaptopurina, infliximab, metilprednisolona succinato de sodio, difenoxilato/sulfato de atrop, clorhidrato de loperamida, omeprazol, folato, ciprofloxacina/dextrosa-agua, bitartrato de hidrocodona/apap, clorhidrato de tetraciclina, fluocinonida, metronidazol, timerosal/ácido bórico, colestiramina/sacarosa, clorhidrato de ciprofloxacina, sulfato de hiosciamina, clorhidrato de meperidina, clorhidrato de midazolam, oxicodona HCI/acetaminofeno, clorhidrato de prometazina, fosfato de sodio, sulfametoxazol/trimetoprim, policarbófilo, napsilato de propoxifeno, hidrocortisona, multivitaminas, balsalazida disódica, fosfato de codeína/apap, colesevelam HCI, cianocobalamlna, ácido fólico, levofloxacina , natalizumab, interferón-gámma, metilprednisolona, azatioprina, ciclofosfamida, ciclosporina, metotrexato, 4-aminopiridina, tizanidina, interferón-ß? a, AVONEX®, interferón-ß? b, BETASERON®, interferón a-n3, interferón-a, interferón ß??-IF, Peg-interferón a2b, Copolímero 1, COPAXONE®, oxígeno hiperbárico, inmunoglobulina intravenosa, cladribina, ciclosporina, FK506, micofenolato de mofetilo, leflunomida, NSAIDs, corticosteroides, prednisolona , inhibidores de fosfodiesterasa, agonistas de adenosina, agentes antitrombóticos, inhibidores del complemento, agentes adrenérgicos, citosinas anti-inflamatorias, interferón-ß, IF^1a, IF^1b, copaxone, corticosteroides, inhibidores de caspasa, inhibidores de caspasa-1, anticuerpos contra el ligando CD40 y CD80, alemtuzumab, dronabinol, daclizumab, mitoxantrona , clorhidrato de xaliprodeno, fampridina, acetato de glatirámero, natalizumab, sinabidol, a-inmunosina NNS03, ABR-215062, AnergiX.MS, antagonistas del receptor de quimiosina, BBR-2778, calagualina, CPI-1189, mitoxantrona encapsulada en liposomas, THC.CBD, agonistas de canabinoides, MBP-8298, mesopram, MNA-715, anticuerpo anti-receptor de IL-6, neurovax, pirfenídona allotrap 1258 (RDP-1258), sTNF-R1, talampanel, teriflunomida , TGF-beta2, tiplimotida, antagonistas de VLA-4, antagonistas de interferón gamma, agonistas de IL-4, diclofenaco, misoprostol, naproxeno, meloxicam, indometacina, diclofenaco, metotrexato, azatioprina, minociclina, prednisona, etanercept, rofecoxib, sulfasalazina, naproxeno, leflunomida, acetato de metilprednisolona, indometacina, sulfato de hidroxiclorosina, prednisona, sulindac, betametasona diprop aumentada, infliximab, metotrexato, folato, triamcinolona acetonida, diclofenaco, dimetilsulfóxido, piroxicam, diclofenaco sodio, ketoprofeno, meloxicam, metilprednisolona, nabumetona, tolmetina sodio, calcipotrieno, ciclosporina, diclofenaco sodio/misoprostol, fluocinonida, sulfato de glucosamina, tiomalato de oro y sodio, bitartrato de hidrocodona/apap, risedronato sodio, sulfadiazina, tioguanina, valdecoxib, alefacept y efalizumab, diclofenaco, naproxeno, ibuprofeno, piroxicam, indometacina, inhibidores de COX2, rofecoxib, valdecoxib, hidroxiclorosina, esteroides, prednisolona, budenosida, dexametasona, citotóxicos, azatioprina, ciclofosfamida, micofenolato de mofetilo, inhibidores de PDE4, inhibidor de la síntesis de purina, sulfasalazina, ácido 5-aminosalicílico, olsalazina, Imuran®, CTLA-4-lgG, familia de anticuerpos anti-B7, familia de anticuerpos anti-PD-1, anticuerpos anti-citosina, fonotolizumab, anticuerpo anti-IFNg, anticuerpos anti-receptor, anticuerpo anti-receptor de IL-6, anticuerpos con moléculas de la superficie de linfocitos B, LJP 394, Rituximab, anticuerpo anti-CD20 y linfostato-B.
Descripción Detallada de la Invención Las proteína cinasas comprenden una clase amplia y diversa, de más de 500 enzimas, que incluye oncogenes, receptores de factores de crecimiento, intermediarios de la transducción de señales, cinasas relacionadas con la apoptosis y cinasas dependientes de ciclinas. Son responsables de la transferencia de un grupo fosfato a residuos de aminoácidos de tirosina, serina o treonina específicos, y se clasifican en términos generales como tirosina y serina/treonina cinasas como resultado de su especificidad de sustrato.
La familia de las Jak cinasas (Jak1, Jak2, Jak3 y Tyk2) son tirosina cinasas citoplasmáticas que se asocian con los receptores de citosina unidos a membrana. La unión de las citosinas a sus receptores inician la activación de la Jak cinasa mediante procesos de trans y autofosforilación. Las Jak cinasas activadas fosforilan residuos sobre los receptores de citosinas creando sitios de unión a fosfotirosina para proteínas que contienen al dominio SH2, tales como los factores de los transductores de señales y activadores de transcriptos (STAT) y otros reguladores de señales de transducción tales como las proteínas supresoras de la señalización de citosinas (SOCS) e inositol 5'- fosfatasas que contienen al dominio SH2 (SHIP). La activación de los factores STAT mediante este proceso conduce a su dimerización, traslocación nuclear y nueva transcripción de ARNm lo que da como resultado la expresión de proliferación de inmunocitos y factores de sobrevida así como citosinas, quimiosinas y moléculas adicionales que facilitan el tráfico Celular (ver Journal of Immunology, 2007, 178, pág. 2623). Las Jak cinasas transducen las señales para muchas familias de citosinas diferentes y por ende podrían cumplir funciones en enfermedades con patologías ampliamente diferentes, incluyendo, pero sin limitarse a, los siguientes ejemplos. Ambas señalizaciones Jak1 y Jak3 controlan las denominadas citosinas de cadena gamma común (IL2, IL4, IL7, IL9, IL15 y IL21), por ende se podría predecir que una inhibición simultánea de Jak1 o Jak3 afectaría enfermedades mediadas por Th1, tal como artritis reumatoide a través del bloqueo de la señalización de IL2, IL7 e IL15. Por otro lado, recientemente se ha mostrado que la señalización de IL2 es esencial para el desarrollo y la homeostasis de células reguladoras T (Malek TR y colaboradores, Immunity, 2002, 17(2), págs.167-78). Por lo tanto, basado en datos genéticos, se prevé que solamente el bloqueo de la señalización de IL2 daría como resultado autoinmunidad (Yamanouchi J y colaboradores, Nat Genet., 2007, 39(3), p.329-37, y Willerford DM y colaboradores, Immunity, 1995, 3(4), p.521-30). Las enfermedades mediadas por Th2, tal como asma o dermatitis atópica, a través del bloqueo de la señalización de IL4 e IL9. Jak1 y Tyk2 intervienen en la señalización de IL13 (ver Int. Immunity, 2000, 12, pág. 1499). Por ende, también se podría prever que el bloqueo de ellas tendría un efecto terapéutico en el asma. Se cree también que estas dos cinasas intervienen en la señalización de interferón de Tipo I; por ello se predice que su bloqueo podría reducir la severidad de la lupus eritematoso sistémico (SLE). Tyk2 y Jak2 intervienen en la señalización de IL12 e IL23. De hecho, el bloqueo de estas citosinas usando anticuerpos monoclonales ha sido eficaz en el tratamiento de psoriasis. Por ello es que el bloqueo de esta vía usando inhibidores de estas cinasas también podría ser efectivo en la psoriasis. En resumen, esta invención describe compuestos de moléculas pequeñas que inhiben, regulan y/o modulan la actividad de la familia de las Jak cinasas que es primordial en diversos mecanismos considerados críticos para el avance de las enfermedades autoinmunes incluyendo, pero sin limitarse a, artritis reumatoide (RA), lupus eritematoso sistémico (SLE), esclerosis múltiple (MS), enfermedad de Crohn, psoriasis y asma.
Diversas citosinas patológicamente significativas solamente señalizan a través de Jak1 (Guschin D, y colaboradores, EMBO J. 1995, 3 de abril; 14(7): 1421 -9; Parganas E, y colaboradores, Cell. 1998, 1 de mayo; 93(3):385-95; Rodig S.J., y colaboradores, Cell. 1998, 1 de mayo; 93(3):373-83; Se ha demostrado que el bloqueo de una de ellas, la IL6, usando un anticuerpo neutralizante de IL6R, mejora significativamente las calificaciones de la enfermedad en pacientes humanos con artritis reumatóide (Nishimoto N. y colaboradores, Ann Rheum Dis., 2007, 66(9), págs. 1162-7). De manera similar, el bloqueo de la señalización de GCSF, que también está mediada por Jak1 solamente, usando anticuerpos monocionales neutralizantes o supresión de genes blanco protege a los ratones contra la artritis experimental (Lawlor K.E. y colaboradores, Proc Nati Acad Sci EE.UU., 2004, 101(31), págs. 11398-403). Por consiguiente, la identificación de compuestos de moléculas pequeñas que inhiben, regulan y/o modulan las transducción de señales de cinasas, tal como Jak1, es un medio deseable para prevenir o tratar enfermedades autoinmunes u otras enfermedades relacionadas con una función aberrante de Jak1.
Jak2 también es activada en una amplia variedad de tipos de cáncer en humanos, tales como cáncer de próstata, colon, ovario y mama, melanoma, leucemia y otras formas malignas hematopoyéticas. Además, se ha identificado que la mutación puntual somática del gen de Jak2 está altamente asociada con los trastornos mieloproliferativos (MPD) clásicos y menos frecuentemente en otros trastornos mieloides. La activación constitutiva de la actividad de Jak2 también es causada por traslocación cromosómica en las formas malignas hematopoyéticas. Se ha demostrado asimismo que la inhibición de la vía Jak/STAT y, en particular, la inhibición de la actividad de Jak2, da como resultado efectos anti-proliferativos y pro- apoptóticos debidos en gran medida a la inhibición de la fosforilación de STAT. Además, la modulación o inhibición farmacológica de la actividad de Jak2 podría bloquear efectivamente el crecimiento de los tumores e inducir apoptosis por reducción de la fosforilación de STAT en cultivos celulares y xenoinjertos de tumores humanos in vivo. Por consiguiente, resulta deseable identificar compuestos de moléculas pequeñas que inhiban, regulen y/o modulen la transducción de señales de las cinasas, en particular de Jak2, como un medio para tratar o prevenir enfermedades y condiciones asociadas con distintos tipos de cáncer.
Las Jak cinasas también transmiten señales que regulan los procesos fisiológicos esenciales cuya inhibición sería indeseable. Por ejemplo, Jak2 interviene en la señalización del factor estimulante de colonias de granulocitos/monocitos (G -GSF) y eritropoyetina (Epo). Los individuos con defectos genéticos, congénitos o adquiridos en estas vías de señalización pueden desarrollar complicaciones que potencialmente podrían representar una amenaza para la vida, tales como anemia y disfunción de neutrófilos. Por consiguiente, un aspecto No. limitativo de esta invención también se relaciona con un método para identificar compuestos que pueden presentar un perfil de seguridad favorable como resultado de evitar selectivamente la inhibición de Jak2.
La familia de proteína cinasas C es un grupo de serina/treonina cinasas que comprende doce ¡soenzimas relacionadas. Sus miembros están codificados por diferentes genes y se subclasifican de acuerdo con sus requerimientos de activación. Las enzimas clásicas (cPKC) requieren de diacilglicerol (DAG), fosfatidilserina (PS) y calcio para su activación. Las nuevas PKC (nPKC) requieren de DAG y PS pero No. son dependientes de calcio. Las PKC atípicas (aPKC) No. requieren de calcio o ni DAG.
PKCtheta es un miembro de la subfamilia nPKC (Baier, G., y colaboradores, J. Biol. Chem., 1993, 268, 4997). Tiene un patrón de expresión restringido, observado predominantemente en linfocitos T y músculo esquelético (Mischak, H. y colaboradores, FEBS Lett., 1993, 326, pág. 51), con alguna expresión en mastocitos (Liu, Y. y colaboradores, J. Leukoc. Biol., 2001, 69, pág. 831) y células endoteliales (Mattila, P. y colaboradores, Life Sci., 1994, 55, pág. 1253).
Con la activación de los linfocitos T, se forma un complejo de activación supramolecular (SMAC) en el sitio de contacto entre el linfocito T y la célula presentadora de antígenos (APC). PKCtheta es la única isoforma de PKC localizada en el SMAC (Monks, C. y colaboradores, Nature, 1997, 385, 83), lo cual lo ubica en la cercanía de otras enzimas de señalización que intervienen en los procesos de activación de linfocitos T.
En otro estudio (Baier-Bitterlich, G. y colaboradores, Mol. Cell. Biol., 1996, 16, 842) se confirmó el rol de PKCtheta en la activación de AP-1, un factor de transcripción importante eñ la activación del gen de la IL-2. En linfocitos T No. estimulados, la PKCtheta constitutivamente activa estimuló la actividad de AP-1 en tanto en células con expresión PKCtheta negativa dominante, No. hubo inducción de actividad de AP-1 luego de la activación por PMA.
Otros estudios mostraron que PKCtheta, a través de la activación de ??? cinasa beta, interviene en la activación de NF- B inducida por co-estimulación de receptores de linfocitos T/CD28 (N. Coudronniere y colaboradores, Proc. Nat. Acad. Sci. EE.UU., 2000, 97, pág. 3394; y Lin, X. y colaboradores, Mol. Cell. Biol., 2000, 20, pág. 2933).
La proliferación de linfocitos T periféricos en ratones noqueados para PKCtheta, como respuesta a la estimulación con el receptor de linfocitos T (TCR)/CD28, disminuyó en gran medida en comparación con los linfocitos T de ratones de tipo salvaje. Además, la cantidad de IL-2 liberada de los linfocitos T también se redujo en gran medida (Sun, Z. y colaboradores, Nature, 2000, 404, pág. 402). Se ha demostrado asimismo que los ratones deficientes en PKCtheta mostraron deterioro en la inflamación pulmonar y la hipersensibilidad de las vías respiratorias (AHR) en un modelo de asma en murinos dependientes de Th2, sin defectos en la depuración viral y la función citotóxica de linfocitos T dependiente de Th1 (Berg-Brown, N.N. y colaboradores, J. Exp. Med., 2004, 199, pág. 743; Marsland, B.J. y colaboradores, J.
Exp. Med., 2004, 200, pág. 181). Este deterioro en la respuesta de células Th2 da como resultado niveles reducidos de IL-4 y de inmunoglobulina E (IgE), lo cual contribuye en la fisiopatología inflamatoria y la AHR. Por lo demás, los ratones noqueados para PKCtheta parecen normales y fértiles.
También existe evidencia que PKCtheta participa en la respuesta mediada por el receptor de IgE (FceRI) en mastocitos (Liu, Y. y colaboradores, J. Leukoc. Biol., 2001, 69, pág. 831). Se ha demostrado en cultivos de mastocitos humanos (HCMC), que la actividad cinasa PKC se localiza rápidamente en la membrana después del entrecruzamiento de FceRI (Kimata, M. y colaboradores, Biochem. Biophys. Res. Commun., 1999, 257(3), pág. 895). En un estudio reciente que examinaba la actividad in vitro de los mastocitos el médula espinal (BMMC) derivados de ratones de tipo salvaje y deficientes en PKCtheta se muestra que luego del entrecruzamiento de FceRI, los BMMC de los ratones deficientes en PKCtheta redujeron los niveles de IL-6, factor de necrosis tumoral alfa (TNFa) y de IL-13 en comparación con los BMMC de ratones de tipo salvaje, lo cual sugiere un rol potencial de PKCtheta en la producción de citosinas en mastocitos además de la activación de linfocitos T (Ciarletta, A.B. y colaboradores, presentación de póster en 2005 American Thoracic Society International Conference) .
Los estudios citados precedentemente y otros estudios confirman el rol crítico de PKCtheta en la activación de linfocitos T y en la señalización de mastocitos (MC). Por lo tanto, sería un gran beneficio terapéutico contar con un inhibidor de PKCtheta en el tratamiento de trastornos inmunológicos y otras enfermedades mediadas por una inapropiada activación de linfocitos T y señalización de MC.
Se ha encontrado que muchas de las cinasas, ya sea una tirosina cinasa de receptor o No. receptor o una S/T sinas están relacionadas con las vías de señalización celular relacionadas con numerosas condiciones patogénicas, incluyendo inmunomodulación, inflamación o trastornos proliferativos, tal como cáncer.
Muchas enfermedades autoinmunes y enfermedades asociadas se han relacionado con una inflamación crónica, así como las respuestas agudas, se han ligado con la producción o actividad excesiva o No. regulada de una o más citosinas.
Los compuestos de la invención también son de utilidad en el tratamiento de trastornos cardiovasculares, tales como infarto de miocardio agudo, síndrome coronario agudo, insuficiencia cardíaca crónica, infarto de miocardio, aterosclerosis, miocarditis viral, rechazo de aloinjertos cardíacos y disfunción cardíaca asociada a sepsis. Aún más, los compuestos de la presente invención también son de utilidad para el tratamiento de trastornos del sistema nervioso central, tales como meningitis meningocócica, mal de Alzheimer y mal de Parkinson.
Los compuestos de la invención también son de utilidad en el tratamiento de una condición ocular, un cáncer, un tumor sólido, un sarcoma, fibrosarcoma, osteoma, melanoma, retinoblastoma, un rabdomiosarcoma, glioblastoma, neuroblastoma, teratocarcinoma, reacciones de hipersensibilidad, trastornos de movimientos hiperquinéticos, neumonitis de hipersensibilidad, hipertensión, trastornos de movimientos hipoquinéticos, aneurismas aórticos y periféricos, evaluación del eje hipotalámico-pituitario-adrenal, disección de aorta, hipertensión arterial, arteriesclerosis, fístula arteriovénósa, ataxia, degeneraciones espinocerebelosas, miositis estreptocócica , lesiones estructurales del cerebelo, panencefalitis esclerosante subaguda, síncope, sífilis del sistema cardiovascular, anafilaxis sistémica, síndrome de respuesta inflamatoria sistémica, artritis reumatoide juvenil de inicio sistémico, ALL de linfocitos T o FAB, telangiectasia, tromboangitis obliterante, trasplantes, traumatismo/hemorragia, reacciones de hipersensibilidad de tipo III, hipersensibilidad de tipo IV, angina inestable, uremia, urosepsis, urticaria, enfermedades de las válvulas cardíacas, venas varicosas, vasculitis, enfermedades venosas, trombosis venosa, fibrilación ventricular, infecciones virales y fúngicas, encefalitis vital/meningitis aséptica, síndrome hemofagocítico asociado a procesos vitales, síndrome de Wernicke-Korsakoff , enfermedad de Wilson, rechazo de xenoinjertos de cualquier órgano o tejido, rechazo de trasplante de corazón, hemacromatosis, hemodiálisis, síndrome urémico hemolítico/púrpura trombocitopé ica trombolítica, hemorragia, fibrosis pulmonar ¡diopática, citotoxicidad mediada por anticuerpos, astenia, atrofia muscular espinal infantil, inflamación de la aorta, influenza A, exposición a radiación ionizante, iridociclitis/uveítis/neuritis óptica, atrofia muscular espinal juvenil, linfoma, mieloma, leucemia, ascites maligno, distintos tipos de cáncer hematopoyéticos, condiciones diabéticas tales como diabetes mellitus insulino-dependiente, glaucoma, retinopatía diabética o microangiopatía, anemia falciforme, inflamación crónica, glomerulonefritis, rechazo de injertos, enfermedad de Lyme, enfermedad de von Hippel Lindau, penfigoide, enfermedad de Paget, fibrosis, sarcoidosis, cirrosis, tiroiditis, síndrome de hiperviscosidad, enfermedad de Osler-Weber-Rendu , enfermedad pulmonar oclusiva crónica, asma o edema después de quemaduras, traumatismo, radiación, golpes, hipoxia, isquemia, síndrome de hiperestimulación ovárica, síndrome post perfusión, síndrome post bombeo, síndrome de cardiotomía post-MI, preclampsia, menometrorrágia, endometriosis, hipertensión pulmonar, hemangioma infantil o infección por Herpes simplex, Herpes zoster, virus de inmunodeficiencia humana, parapoxvirus, protozoa o toxoplasmosis, parálisis supranuclear progresiva, hipertensión pulmonar primaria, terapia por radiación, fenómeno de Raynaud, enfermedad de Raynaud, enfermedad de Refsum, taquicardia de QRS estrecho regular, hipertensión renovascular, cardiomiopatía restrictiva, sarcoma, corea senil, demencia senil de tipo cuerpos de Lewy, shock, aloinjerto de piel, síndrome de cambios de piel, edema ocular o macular, enfermedad neovascular ocular, escleritis, queratotomía radial, uveítis, vitritis, miopía, huecos ópticos, desprendimiento crónico de retina, complicaciones del tratamiento post-láser, conjuntivitis, enfermedad de Stargardt, enfermedad de Eales, retinopatía, degeneración macular, restenosis, isquemia/daño por reperfusión, golpe isquémico, oclusión vascular, enfermedad obstructiva carotídea, colitis ulcerante, enfermedad de intestino inflamatorio, diabetes, diabetes mellitus, diabetes mellitus insulino-dependiente, enfermedades alérgicas, dermatitis, escleroderma , enfermedad injerto versus huésped, rechazo de trasplante de órganos (incluyendo, pero sin limitarse a, médula ósea y rechazo de órganos sólidos), enfermedad inmune aguda o crónica asociada con trasplante de órganos, sarcoidosis, coagulación intravascular diseminada, enfermedad de Kawasaki, síndrome nefróüico, síndrome de fatiga crónica, granulomatosis de Wegener, púrpura de Henoch-Schoenlein, vasculitis microscópica de los ríñones, hepatitis active crónica, shock séptico, síndrome shock toxico, síndrome séptico, caquexia, enfermedades infecciosas, enfermedades parasitarias, síndrome de inmunodeficiehcia adquirida, mielitis transversa aguda, corea de Huntington, lesiones, cirrosis biliar primaria, anemia hemolítica, formas malignas, enfermedad de Addison, enfermedad de Addíson idiopática, enfermedad de Addison esporádica, deficiencia poliglandular tipo I y deficiencia poliglandular tipo II, síndrome de Schmidt, síndrome de dificultad respiratoria de adultos (agudo), alopecia, alopecia areata, artropatía seronegativa, artropatía, enfermedad de Reiter, artropatía psoriática, artropatía eolítica ulcerosa, sinovitis enteropática, artropatía asociada a clamidia, yersinia y salmonella, enfermedad ateromatosa/arteriosclerosis, alergia atópica, enfermedad bullosa autoinmune, pénfigo vulgar, pénfigo foliácea, penfigoide, enfermedad IgA lineal, anemia hemolítica autoinmune, anemia hemolítica Coombs positiva, anemia perniciosa adquirida, anemia perniciosa juvenil, trastornos vasculares periféricos, peritonitis, anemia perniciosa, encefalitis miálgica/enfermedad Royal Free, candidiasis crónica mucocutánea, arteritis de células gigantes, hepatitis primaria esclerosante, hepatitis criptogénica autoinmune, enfermedad/síndrome de inmunodeficiencia adquirida, enfermedades relacionadas con la inmunodeficiencia adquirida, hepatitis A, hepatitis B, hepatitis C, arritmias del haz de His, infección HlV/neuropatía HIV, inmunodeficiencia variada común (hipogammaglobulinemia variable común), cardiomiopatía dilatada, esterilidad femenina, insuficiencia ovárica, insuficiencia ovárica prematura, enfermedad fibrótica pulmonar, cicatrización crónica de lesiones, alveolitis fibrosante criptogénica, enfermedad pulmonar intersticial post-inflamatoria, neumonitis intersticial, neumonía por Pneumocystis carinii, neumonía, enfermedad pulmonar intersticial asociada con enfermedad del tejido conectivo, enfermedad de tejido conectivo mixto, enfermedad pulmonar asociada, enfermedad pulmonar intersticial asociada con esclerosis sistémica, enfermedad pulmonar intersticial asociada con artritis reumatoide, enfermedad pulmonar asociada con lupus eritematoso sistémico, enfermedad pulmonar asociada con dermatomiositis/polimiositis, enfermedad pulmonar asociada con enfermedad de Sjógren, enfermedad pulmonar asociada con espondilitis anquilosante, enfermedad pulmonar vasculítica difusa, enfermedad pulmonar asociada con hemosiderosis, enfermedad pulmonar intersticial inducida por fármacos, fibrosis por radiación, bronquiolitis obliterante, neumonía eosinofílica crónica, enfermedad pulmonar linfocítica infiltrante, enfermedad pulmonar intersticial postinfecciosa, artritis gotosa, hepatitis autoinmune, hepatitis autoinmune de tipo-1 (hepatitis autoinmune clásica o lupoide), hepatitis autoinmune de tipo-2 (hepatitis con anticuerpo anti-LK ), hipoglucemia mediada por enfermedad autoinmune, resistencia a insulina de tipo B con Acanthosis nigricans, hipoparatiroidismo, enfermedad inmune aguda asociada con el trasplante de órganos, enfermedad inmune crónica asociada con el trasplante de órganos, osteoartritis, colangitis esclerosante primaria, psoriasis de tipo 1, psoriasis de tipo 2, leucopenia idiopática, neutropenia autoinmune, enfermedad renal NOS, glomeruíonefritides, vasculitis microscópicas de los ríñones, enfermedad de Lyme, lupus eritematoso discoide, esterilidad masculina ¡diopática o NOS, autoinmunidad del esperma, esclerosis múltiple (todos los subtipos), oftalmía simpática, hipertensión pulmonar secundaria a enfermedad del tejido conectivo, dolor agudo y crónico (diferentes formas de dolor), síndrome de Goodpastur, manifestación pulmonar de poliarteritis nodosa, fiebre reumática aguda, espondilitis reumatoíde, enfermedad de Still, esclerosis sistémica, síndrome de Sjógren, enfermedad de Takayasu/arteritis, trombocitopenia autoinmune, toxicidad, trasplantes y enfermedades que comprenden una vascularización inapropiada por ejemplo una retinopatía diabética, retinopatía del prematuro, neovascularízación coróide debido a degeneración macular relacionada con la edad y hemangiomas infantiles en seres humanos. Además, dichos compuestos pueden ser útiles en el tratamiento de trastornos tales como, edema, ascitis, efusiones y exudados, que incluyen por ejemplo edema macular, edema cerebral, lesión pulmonar aguda, síndrome de dificultad respiratoria en adultos (ARDS), trastornos proliferativos tales como restenosis, trastornos fibróticos tales como cirrosis hepática y ateroesclerosis, trastornos proliferativos de las células mesangiales tales como nefropatía diabética, nefroesclerosis maligna, síndromes de microang iopatía trombótica y glomerulopatías, angiogénesis de miocardio, colaterales cerebrales y coronarios, angiogénesis isquémica de las extremidades, isquemia/lesión por reperfusión, enfermedades de úlcera péptica relacionadas con Helicobaoter, trastornos angiogénicos inducidos viralmente, preeclampsia, menometrorragia, fiebre por arañazo de gato, rubeosis, glaucoma neovascular y retinopatías tales como aquellas que se asocian con retinopatía diabética, retinopatía en prematuros o degeneración macular relacionada con la edad. Además, estos compuestos se pueden usar como agentes activos contra trastornos hiperproliferativos tales como hiperplasia de tiroides (en especial la enfermedad de Grave) y quistes (tales cómo hipervascularidad del estroma de ovario característico del síndrome de ovario poliquístico (síndrome de Stein-Leventhal) y la enfermedad de riñon poliquístico dado que dichas enfermedades requieren de la proliferación de células de los vasos sanguíneos para su crecimiento y/o metástasis.
Los compuestos de la Fórmula (I) o de la Fórmula (II) de la invención se pueden usar solos o en combinación con un agente adicional, por ejemplo, un agente terapéutico, donde el especialista puede seleccionar dicho agente adicional según el propósito que se le desea dar. Por ejemplo, el agente adiciona! puede ser un agente terapéutico reconocido en la técnica como de utilidad en el tratamiento de la enfermedad o condición que se está tratando con el compuesto de la presente invención. El agente adicional también puede ser un agente que confiere un atributo benéfico a la composición terapéutica por ejemplo, un agente que afecta la viscosidad de la composición.
También se debería comprender que las combinaciones que se van a incluir en la presente invención son aquellas combinaciones útiles para el propósito que se le desea dar. Los agentes que se indican más adelante se ofrecen a efectos ilustrativos y No. en un sentido limitativo. Las combinaciones, que forman parte de esta invención, pueden comprender los compuestos de la presente invención y al menos un agente adicional seleccionado del listado que se ofrece más adelante. La combinación también puede incluir más de un agente adicional, por ejemplo, dos o tres agentes adicionales, si la combinación es tal que la composición que se forma puede llevar a cabo la función que se le ha destinado.
Las combinaciones preferidas son fármaco(s) antiinflamatoria(s) No. esteroide(s) que también se denominan NSAIDS que incluyen fármacos como el ibuprofeno. Otras combinaciones preferidas son los corticosteroides incluyendo prednisolona; los bien conocidos efectos secundarios del uso de esteroides se pueden reducir o aún eliminar disminuyendo la dosis requerida de esteroide cuando los pacientes son tratados con una combinación que incluye los compuestos de esta invención. Los ejemplos no limitantes de agentes terapéuticos para la artritis reumatoide con los cuales se puede combinar un compuesto de la Fórmula (I) o de la Fórmula (II) de la invención incluyen los siguientes: fármaco(s) antiinflamatoria(s) supresor(as) de citosina (CSAID); anticuerpos contra otras citosinas o factores de crecimiento humanos o antagonistas de los mismos, por ejemplo, TNF, LT, IL-1, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-12, IL-15, IL-16, IL-21, IL-23, interferones, EMAP-II, GM-CSF, FGF y PDGF. Los compuestos de la invención se pueden combinar con anticuerpos contra moléculas de la superficie celular tales como CD2, CD3, CD4, CD8, CD25, CD28, CD30, CD40, CD45, CD69, CD80 (B7.1), CD86 (B7.2), CD90, CTLA o sus ligandos que incluyen CD154 (gp39 o CD40L).
Las combinaciones preferidas de agentes terapéuticos pueden interferir en diferentes puntos de la cascada autoinmune y la subsiguiente cascada inflamatoria; los ejemplos preferidos incluyen antagonistas de TNF como anticuerpos quiméricos, humanizados o humanos contra TNF, D2E7 (Patente Norteamericana No: 6,090,382, HUMIRA™), CA2 (REMICADE™), SIMPONI™ (golimumab), CIMZIA™, ACTEMRA™, CDP 571 y receptores de TNF p55 o p75 solubles, derivados de los mismos (p75TNFR1gG (ENBREL™) o p55TNFR1gG (Lenercept), y también inhibidores de la enzima convertidora de TNFa (TACE); de manera similar, los inhibidores de IL-1 (inhibidores de la enzima convertidora de interleusina-1 , IL-1RA, etc.) pueden ser eficaces por la misma razón. Otras combinaciones preferidas incluyen la ¡nterleusina 11. Aún otras combinaciones preferidas comprenden otros miembros clave de la respuesta autoinmune que pueden actuar en paralelo, de forma dependiente o conjuntamente con la función de IL-18; se prefieren especialmente los antagonistas de la IL-12 incluyendo anticuerpos contra IL-12 o receptores de IL-12 solubles o proteínas de unión a IL-12. Se ha demostrado que IL-12 e IL-18 tienen funciones que se superponen pero diferentes y lo más eficaz sería el uso de una combinación de antagonistas para ambas. Aún otra combinación preferida comprende inhibidores anti-CD4 No. supresores. Aún otras combinaciones preferidas incluyen antagonistas de la vía coestimulante de CD80 (B7.1) o de CD86 (B7.2), incluyendo anticuerpos, receptores solubles o ligandos antagonistas.
Un compuesto de la Fórmula (I) o de la Fórmula (II) de la invención también se puede combinar con agentes, como por ejemplo metotrexato, 6-mercaptopurina, azatioprina, sulfasalazina, mesalazina, olsalazina, cloroquinina/hidroxiclorosina, penicilamina, aurotiomalato (intramuscular y oral), azatioprina, colchicina, corticosteroides (orales, inhalados y por inyección local), agonistas de los adrenorreceptores beta-2 (salbutamol, terbutalina, salmeterol), xantinas (teofilina, aminofilína), cromoglicato, nedocromilo, ketotifeno, ipratropio y oxitropio, ciclosporina, FK506, rapamicina, micofenolato de mofetilo, leflunomida, NSAID, por ejemplo, ibuprofeno, corticosteroides tales como la prednisolona, inhibidores de fosfodiesterasa, agonistas de adenosina, agentes antitrombóticos, inhibidores del complemento, agentes que interfieren con la señalización por citosinas proinflamatorias tales como TNFa o IL-1 (por ejemplo, NIK, IKK, p38 o AP), inhibidores de la enzima convertidora de I L- 1 ß , inhibidores de la señalización de linfocitos T tales como inhibidores de cinasa, inhibidores de metaloproteinasa, sulfasalazina, 6-mercaptopurinas, inhibidores de la enzima convertidora de angiotensina, receptores solubles de citosina y derivados de los mismos (por ejemplo receptores solubles de TNF p55 o p75 y los derivados p75TNFRIgG (Enbrel™ y p55TNFRIgG (Lenercept)), slL-1 Rl, slL-1RII, slL-6R), citosinas antünflamatorias (por ejemplo IL-4, IL-10, IL-11, IL-13 y TGFp), celecoxib, ácido fótico, sulfato de hidroxiclorosina, rofecoxib, etanorcept, infliximab, naproxeno, valdecoxib, sulfasalazina, metilprednisolona, meloxicam, acetato de metilprednisolona, tiomalato de sodio y oro, aspirina, triancinolona acetonida, napsilato de propoxifeno/apap, folato, nabumetona, diclofenaco, piroxicam, etodolac, diclofenaco sódico, oxaprozina, oxicodona HCI, bitartrato de hidrocodona/apap, diclofenaco sódico/misoprostol, fentanilo, anakinra, tramadol HCI, salsalato, sulindac, cianocobalamina/fa/piridox¡na, acetaminofeno , alendronato sódico, prednisolona, sulfato de morfina, clorhidrato de lidocaína, indometacina, sulf de glucosamina/condroitina, amitriptilina HCI, sulfadiazina, oxicodona HCI/acetamihofeno, olopatadina HCI, misoprostol, naproxeno sódico, omeprazol, ciclofosfamida, rituximab, IL-1 TRAP, MR A CTLA4-IG, IL-18 BP, anti-IL-12, anti-l L 5, BIRB-796, SCIO-469, VX-702, AMG-548, VX-740, Roflumilast, IC-485, CDC-801, agonistas de S1P1 (tal como FTY720), inhibidores de la familia PKC (tales como ruboxistaurina o AEB-071) y Mesopram. Las combinaciones preferidas incluyen metotrexato o leflunomida y en los casos de una artritis reumatoide moderada o grave, ciclosporinas y anticuerpos ánti-TNF como se indicó previamente.
Los ejemplos no limitantes de agentes terapéuticos para la enfermedad de intestino inflamatorio con los cuales se puede combinar un compuesto de la Fórmula (I) o de la Fórmula (II) de la invención incluyen los que siguen: budenosida; factor de desarrollo epidérmico; corticosteroides; ciclosporina, sulfasalazina; aminosalicilatos; 6-mercaptopurina; azatioprina; metronidazol; inhibidores de lipooxigenasa; mesalarriina; olsalazina; balsalazida; antioxidantes; inhibidores de tromboxano; antagonistas del receptor de IL-1; anticuerpos monoclonales anti-IL-?ß; anticuerpos monoclonales anti-IL-6; factores de crecimiento; inhibidores de elastasa; compuestos piridinil-imidazol; anticuerpos para otras citosinas o factores de crecimiento humanos o antagonistas de los mismos, por ejemplo, TNF, LT, IL-1, IL-2, IL-6, IL-7, IL-8, IL-12,' IL-15, IL-16, IL-23, EMAP-II, GM-CSF, FGF, y PDGF; moléculas de la superficie celular tales como CD2, CD3, CD4, CD8, CD25, CD28, CD30, CD40, CD45, CD69, CD90 o sus ligandos; metotrexato; ciclosporina; FK506; rapamicina; micofenolato de mofetilo; leflunomida; NSAIDs, por ejemplo, ibuprofeno; corticosteroides tales como prednisolona; inhibidores de fosfodiesterasa; agonistas de adenosina; agentes antitrombóticos; inhibidores complementarios; agentes adrenérgicos; agentes que interfieren con la señalización por citosinas proinflamatorias tales como TNFa o IL-1 (por ejemplo, inhibidores de cinasas NIK, IKK o MAP); inhibidores de la enzima convertidora de I L- 1 ß ; inhibidores de la enzima convertidora de TNFa; inhibidores de la señalización de células T tales como inhibidores de cinasa; inhibidores de metaloproteinasa; sulfasalazina; azatioprina; 6-mercaptopurinas; inhibidores de la enzima convertidora de angiotensina; receptores solubles de citosina y derivados de los mismos (por ejemplo, receptores solubles de TNF p55 o p75, slL-1 Rl, slL-1RII, slL-6R) y citosinas antiinflamatorias (por ejemplo, IL-4, IL-10, IL-11, lL-13 y TGFP). Los ejemplos preferidos de agentes terapéuticos para la enfermedad de Crohn con los cuales se pueden combinar un compuesto de la Fórmula (I) o de la Fórmula (II) incluyen los siguientes: antagonistas de TNF, por ejemplo, anticuerpos ánti-TNF, D2E7 (Patente Norteamericana No: US 6,090,382 HUMIRA®), CA2 (REMICADE™), CDP 571, construcciones T N F R -Ig, inhibidores (p75TNFRIgG (ENBREL™) y p55TNF IgG (Lenercept™)) e inhibidores de PDE4. Un compuesto dé la Fórmula (I) o de la Fórmula (II) se puede combinar con corticosteroides, por ejemplo, budenosida y dexametaspna; sulfasalazina, ácido 5-aminosalicílico; olsalazina; y agentes que interfieren con la síntesis o la acción de las citosinas proinflamatorias tales como IL-1, por ejemplo, inhibidores de la enzima convertidora de IL-?ß y IL-1 ra ; inhibidores de la señalización de células T, por ejemplo, 6-mercaptopurina; inhibidoras de tirosina cinasas; IL-11; mesalamina; prednisona; azatioprina; mercaptopurina; ¡nfliximab; metilprednisolona succinato de sodio; difenoxilato/atrop sulfato; clorhidrato de loperamida; metotrexato; omeprazol; folato; ciprofloxacina/dextrosa-agua; hidrocodona bitartrato/apap; clorhidrato de tetraciclina; fluocinonida; metronidazol; timerosal/ácido bórico; colesterilamina/sacarosa; clorhidrato de ciprofloxacina; sulfato de hiosciamina; clorhidrato de meperidina; clorhidrato de midazolam; oxicodona HCI/acetaminofeno; clorhidrato de prometazina; fosfato de sodio; sulfametoxazol/trimetoprim; celecoxib; policarbófilo; napsiláto de propoxifeno; hidrocortisona; multivitaminas; balsalazida disódico; fosfato de codeína/apap; colesevelam HCI; cianocobalamina; ácido fólico; levofloxacina; metilprednisolona; natalizumab e interferón-gamma.
Los ejemplos no limitantes de agentes terapéuticos para esclerosis múltiple con los cuales se pueden combinar un compuesto de la Fórmula (I) o de la Fórmula (II) incluyen los siguientes: corticosteroides; prednisolona; metilprednisolona; azatioprina; ciclofosfamida; ciclosporina; metotrexato; 4-aminopiridina; tizanidina; interferón-ß? a (Avonex®; Biogen); interferón-ß? b (Betaseron®; Chiron/Berlex); interferón a-n3) (Inferieron Sciences/Fujimoto), interferón-a (Alfa Wassermann/J&J) , interferón ß??-IF (Serono/I nhale Therapeutics), Peg-interferón a 2b (Enzon/Schering-Plough), Copolímero 1 (Cop-1; Copaxone®; Teva Pharmaceutical Industries, Inc).; oxígeno hiperbárico; inmunoglobulina intravenosa; clabribina; anticuerpos para otras citosinas o factores de crecimiento humanos o antagonistas de los mismos y sus receptores, por ejemplo, TNF, LT, IL-1, IL-2, IL-6, IL-7, IL-8, IL-12, IL-23, IL-15, IL-16, EMAP-II, GM-CSF, FGF y PDGF. Un compuesto de la Fórmula (I) o de la Fórmula (II) puede combinarse con anticuerpos contra moléculas de la superficie celular, tales como CD2, CD3, CD4, CD8, CD19, CD20, CD25, CD28, CD30, CD40, CD45, CD69, CD80, CD86, CD90 o sus ligandos. Un compuesto de la Fórmula (I) o de la Fórmula (II) también puede combinarse con agentes tales como el metotrexato, la ciclosporina , FK506, la rapamicina, el micofenolato de mofetilo, la leflunomida, un agonista de S1P1, ¡os NSAID, por ejemplo, el ibuprofeno, los corticosteroides, tales como la prednisolona, los inhibidores de la fosfodiesterasa, los agonistas de la adenosina, los agentes antitrombóticos, ios inhibidores del complemento, los agentes adrenérgicos, los agentes que interfieren con la señalización por citosinas proinflamatorias, tales como TNFa o IL-1 (por ejemplo, inhibidores de las cinasas NIK, IKK, p38 o MAP), los inhibidores de la enzima convertidora de i L-1 ß, inhibidores de TACE, los inhibidores de la señalización de las células T, tales como! los inhibidores de cinasas, los inhibidores de metaloproteinasas, la sulfasalazina , la azatioprina, las 6-mercaptopurinas, los inhibidores de la enzima convertidora de angiotensina, los receptores de citosinas solubles, y sus derivados (por ejemplo, receptores de TNF p55 o p75 solubles, slL-1 Rl, slL-1 Rl I , slL-6R), y las citosinas antiinflamatorias (por ejemplo, IL-4, IL-10, IL-13 y TGFP).
Los ejemplos preferidos de agentes terapéuticos para esclerosis múltiple con los que se pueden combinar un compuesto de la Fórmula (I) o de la Fórmula (II) para incluir ¡nterferón-ß, son por ejemplo, IFNpia y IFNpib; copaxone, corticosteroides, inhibidores de caspasa, por ejemplo inhibidores de caspasa-1, inhibidores de IL-1, inhibidores de TNF, y anticuerpos para los ligandos CD40 y CD80.
Un compuesto de la Fórmula (I) o de la Fórmula (II) también se puede combinar con agentes, como por ejemplo alemtuzumab, dronabinol, daclizumab, mitoxantrona, clorhidrato de xaliprodeno, fampridina, glatiramer acetato, natalizumab, sinnabidol, a-inmunosina NNS03, ABR-215062, AnergiX.MS, antagonistas del receptor de quimiosinas, BBR-2778, calagualina, CPI-1189, LEM (mitoxantrona encapsulada en liposomas), THC.CBD (agonista de cannabinoides), MBP-8298, mesopram (inhibidor de PDE4), NA-715, receptor del anticuerpo anti-IL-6, neurovax, pirfenidona allotrap 1258 (RDP-1258), sTNF-R1, talampanel, teriflunomide, TGF-beta2, tiplimotide, antagonistas de VLA-4 (por ejemplo, TR-14035, VLA4 Ultrahaler, Antegran-ELAN/Biogen), antagonistas de interferón gamma y agonistas de IL-4.
Los ejemplos no limitantes de agentes terapéuticos para espondilitis anquilosante con los cuales se puede combinar un compuesto de la Fórmula (I) o de la Fórmula (II) incluyen los siguientes: ibuprofeno, diclofenaco, misoprostol, naproxeno, meloxicam, indometacina, diclofenaco, celecoxib, rofecoxib, sulfasalazina, metotrexato, azatioprina, minociclina, prednisona y anticuerpos anti-TNF, D2E7 (Patente Norteamericana No: 6,090,382; HUMIRA™), CA2 (REMICADE™), CDP 571, construcciones de TNFR-lg, (p75TN FRIgG (ENBREL™) y p55TNFRIgG (LENERCEPT™) Los ejemplos no limitantes de agentes terapéuticos para asma con los cuales se puede combinar un compuesto de la Fórmula (I) o de la Fórmula (II) incluyen los que siguen: albuterol, salmeterolfluticasona, montelukast sódico, propionato de futicasona, budesonida, prednisona, xinafoato de salmeterol, clorhidrato de levalbuterol, sulfato de albuterol/ipratropio, prednisolona fosfato sódico, triamcinolona acetonida, dipropionato de beclometasona, bromuro de ipratropio, azitromicina, acetato de pirbuterol, prednisolona, teofilina anhidra, metilprednisolona succinato sódico, claritromicina, zafirlukast, fumarato de formoterol, vacuna del virus de la influenza, metilprednisolona, amoxicilina trihidrato, funisolida, inyección por alergia, cromolin sódico, clorhidrato de fexofenadina, funisolida/mentol, amoxicilina/clavulanato, levofloxacina, dispositivo asistente de inhaladores, guaifenesina, dexametasona fosfato sódico, clorhidrato de moxifloxacina, doxiciclina hidrato, guaifenesina/d-metorfan , p-efedrina/cod/clorfenir, gatifloxacina, clorhidrato de cetirizina, furoato de mometasona, xinafoato de salmeterol, benzonatato, cefalexina, pe/hidrocodona/clorfenir, clorhidrato de cetirizina/pseudoefedrina, fenilefrina/cod/prometazina, codeína/prometazina, cefprozil, dexametasona, guaifenesina/pseudoefedrina, clorfeniramina/hidrocodona, nedocromil sódico, sulfato de terbutalina, epinefrina, metilprednisolona, anticuerpo anti-IL-13 y sulfató de metaproterenol.
Los ejemplos no limitantes de agentes terapéuticos para COPD con los cuales se puede combinar un compuesto de la Fórmula (I) o de la Fórmula (II) incluyen los que siguen: sulfato de albuterol/ipratropio, bromuro de ipratropio, salmeterol/futicasona, albuterol, xinafoato de salmeterol, propionato de fluticasona, prednisona, teofilina anhidra, metilprednisolona succinato sódico, montelukast sódico, budesonida, fumarato de formoterol, triamcinolona acetoriida, levofoxacina, guaifenesina, azitromicina, dipropionato de beclometasona, clorhidrato de levalbuterol, flunisolida, ceftriaxona sódica, amoxicilina trihidrato, gatifoxacina, zafirlukast, amoxicilina/clavulanato, flunisolida/mentol, clorfeniramina/hidrocodona, sulfato de metaproterenol, metilprednisolona, furoato de mometasona, p- efedrina/cod/clorfenir, acetato de pirbuterol, p-efedrina/loratadina, sulfato de terbutalina, bromuro de tiotropio, (R.R)-formoterol, TgAAT, cilomilast y rofumilast.
Los ejemplos no limitantes de agentes terapéuticos para HCV con los cuales se pueden combinar un compuesto de la Fórmula (I) o de la Fórmula (II) incluyen los siguientes: interferón-a-2a, interferón-a-2b, interferón-a con1, interferón-a-n1, interferón-a-2a tratado con PEG, interferón-a-2b tratado con PEG, ribavirina, Peg-interferón alfa-2b + ribavirina, ácido ursodesoxicólico, ácido glicirrícico, timalfasina, Maxamina, VX-497 y cualquier compuesto que se utilice para tratar HCV con intervención con los siguientes objetivos: polimerasa del HCV, proteasa del HCV, helicasa del HCV e IRES del HCV (sitio de entrada interna del ribosoma).
Los ejemplos no limitantes de agentes terapéuticos para fibrosis pulmonar idiopática con los cuales se puede combinar un compuesto de la Fórmula (I) o de la Fórmula (II) incluyen los siguientes: prednisona, azatioprina, albuterol, colchicina, albuterol sulfato, digoxina, gamma interferón, metilprednisolona sod succ, lorazepam, furosemide, lisinoprilo, nitroglicerina, espironolactona, ciclofosfamida, bromuro de ipratropio, actinomicina d, alteplase, propionato de fluticasona, levofloxacina , metaproterenol sulfato, sulfato de morfina, oxicodona HCI, cloruro de potasio, triancinolona acetonida, tacrolimus anhidro, calcio, interferón-a, metotrexato, micofenolato de mofetilo e interferón-gamma-1 ß.
Los ejemplos no limitantes de agentes terapéuticos para infarto de miocardio con los cuales se puede combinar un compuesto de la Fórmula (I) o de la Fórmula (II) incluyen los que siguen: aspirina, nitroglicerina, tartrato de metoprólol, enoxaparina sódica, heparina sódica, bisulfato de clopidogrel, carvedilol, atenolol, sulfato de morfina, succinato de metoprólol, warfarina sódica, lisinopril, mononitrato de isosorbida, digoxina, furosemida, simvastatina , ranapril, tenecteplase, maleato de enalapril, torsemida, retavase, losartán potásica, clorhidrato de sinapril/mag carb, bumetanida, alteplase, enalaprilat, clorhidrato de amiodarona, clorhidrato de tirofiban m-hidrato, clorhidrato de diltiazem, captopril, irbesartán, valsartán, clorhidrato de propranolol, fosinopril sódico, clorhidrato de lidocaína, eptifibatida , cefazolina sódica, sulfato de atropina, ácido aminocaproico, espironolactona, interferón, clorhidrato de sotalol, cloruro de potasio, docusato sódico, clorhidrato de dobutamina, alprazolam, pravastatina sódica, atorvastatina cálcica, clorhidrato de midazolam, clorhidrato de meperidina, dinitrato de isosorbida, epinefrina, clorhidrato de dopamina, bivalirudina, rosuvastatina , ezetimibe/simvastatina , avasimibe, cariporida.
Los ejemplos no limitantes de agentes terapéuticos para psoriasis con los cuales se pueden combinar un compuesto de la Fórmula (I) o de la Fórmula (II) incluyen los siguientes: calcipotrieno, propionato de clobetasol, triancinolona acetonida, propionato de halobetasol, tazaroteno, metotrexato, fluocinonide, betametasona diprop aumentada, f!uocinolona acetonida, acitretin, shampú de alquitrán, valerato de betametasona, mometasona furoato, ketoconazol, pramoxine/fluocinolona , valerato de hidrocortisona, flurandrenolide, urea, betametasona, clobetasol propionato/emoll, propionato de fluticasona, azitromicina , hidrocortisona, fórmula humectante, ácido fótico, desonide, pimecrolimus, alquitrán de carbón, diacetato de diflorasona, etanorcept folato, ácido láctico, metoxsa'en, hc/bismuto subgal/znox/resor, acetato de metilprednisolona, prednisona, pantalla solar, halcinonide, ácido salicílico, antralina, pivalato de clocortolona, extracto de carbón mineral, alquitrán de carbón/ácido salicílico, alquitrán de carbón/ácido salicílico/azufre, desoximetasona , diazepam, emoliente, fluocinonide/emoliente, aceite mineral/aceite de castor/na lact, aceite mineral/aceite de maní, petróleo/miristato de isopropilo, psoralen, ácido salicílico, jabón/tribromsalan, timerosal/ácido bórico, celecoxib, infliximab, ciclosporina, alefacept, efalizumab, tacrolimus, pimecrolimus, PUVA, UVB, sulfasalazina, ABT-874 y ustekinamab.
Los ejemplos no limitantes de agentes terapéuticos para artritis psoriásica con los cuales se puede combinar un compuesto de la Fórmula (I) o de la Fórmula (II) incluyen los siguientes: metotrexato, etanorcept, rofecoxib, celecoxib, ácido fólico, sulfasalazina, naproxeno, leflunomida, acetato de metilprednisolona, indometacina, sulfato de hidroxiclórosina, prednisona, sulindac, betametasona diprop aumentada, infliximab, metotrexato, folato, triancinolona acetonida, diclofenaco, dimetilsulfóxido, piroxicam, diclofenaco sódico, ketoprofeno, meloxicam, metilprednisolona, nabumetona, tolmetín sódico, calcipotrieno, ciclosporina, diclofenaco sódico/misoprostol, fluocinonide, sulfato de glucosamina, tiomalato sódico de oro, hidrocodona bitartrato/apap, ibuprofeno, risedronato sódico, sulfadiazina, tioguanina, valdecoxib, alefacept, D2E7 (Patente Norteamericana 6,090,382, HU IRA™) y efalizumab.
Los ejemplos no limitantes de agentes terapéuticos para restenosis con los cuales se puede combinar un compuesto de la Fórmula (I) o de la Fórmula (II) incluyen los siguientes: sirolimus, paclitaxel, everolimus, tacrolimus, ABT-578, y acetaminofeno.
Los ejemplos no limitantes de agentes terapéuticos para ciática con los cuales se puede combinar un compuesto de la Fórmula (I) o de la Fórmula (II) incluyen los siguientes: hidrocodona bitartrato/apap, rofecoxib, ciclobenzaprina HCI, metilprednisolona, naproxeno, ibuprofeno, oxicodona HCI/acetaminofeno, celecoxib, valdecoxib, acetato de metilprednisolona, prednisona, fosfato de codeína/apap, tramadol HCI/acetaminofeno, metaxalona, meloxicam, metocarbamol, clorhidrato de lidocaína, diclofenaco sódico, gabapentin, dexametasona, carisoprodol, ketorolac trometamina, indometacina, acetaminofeno, diazepam, nabumetona, oxicodona HCI, tizanidina HCI, diclofenaco sódico/misoprostol, napsiláto! de propoxifeno/apap, asa/oxicod/oxicodona ter, ¡buprofeno/hidrocodona bit, tramadol HCI, etodolac, propoxifeno HCI, amitriptilina HCI, carisoprodol/codeína fos/asa, sulfato de morfina, multivitaminas, naproxeno sódico, citrato de orfenadrina y temazepam.
Los ejemplos preferidos de agentes terapéuticos para SLE (Lupus) con los cuales se puede combinar un compuesto de la Fórmula I incluyen los siguientes: NSAIDS, por ejemplo, diclofenaco, naproxeno, ibuprofeno, piroxicam, indometacina; inhibidores de COX2, por ejemplo, celecoxib, rofecoxib, valdecoxib; anti-malaria, por ejemplo, hidroxiclorosina; esteroides, por ejemplo, prednisona, prednisolona, budenosida, dexametasona ; citotóxicos, por ejemplo, azatioprina, ciclofosfamida , micofenolato de mofetilo, metotrexato; inhibidores de PDE4 o un inhibidor de la síntesis de purina, por ejemplo Cellcept®. Un compuesto de la Fórmula (I) o de la Fórmula (II) también se puede combinar con agentes tales como sulfasalazlna, ácido 5-aminosalicílico, olsalazina, Imuran® y agentes que interfieren con la síntesis, producción o acción de citósinas proinflamatorías tales como IL-1, por ejemplo, inhibidores de caspasa como inhibidores de la enzima convertidora de I L- 1 ß y I L- 1 ra . Un compuesto de la Fórmula (I) o de la Fórmula (II) también se puede usar con inhibidores de la señalización de células T, por ejemplo, inhibidores de tirosina cinasa; o molécuüas dirigidas a moléculas de activación de células T, por ejemplo, CTLA-4-lgG o anticuerpos de la familia anti-B7, anticuerpos de la familia anti-PD-1. Un compuesto de la Fórmula (I) o de la Fórmula (II) se puede combinar con IL-11 o anticuerpos anti-citosina, por ejemplo, fonotolizumab (anticuerpo anti-IFNg) o anticuerpos antireceptor receptor, por ejemplo, anticuerpo anti-receptor de IL-6 y anticuerpos contra moléculas B de la superficie celular. Un compuesto de la Fórmula (I) o de la Fórmula (II) también se puede usar con UP 394 (abetimus), agentes que reducen o inactivan las células B, por ejemplo, Rituximab (anticuerpo anti-CD20), linfostat-B (anticuerpo anti-B1yS), antagonistas de TNF, por ejemplo, anticuerpos anti-TNF, D2E7 (Patente Norteamericana. 6.090.382; HUMIRA™), CA2 (REMICADE™), CDP 571, construcciones de TNFR-lg, (p75TNFRIgG (ENBREL™) y p55TNFRIgG (LENERCEPT™)).
En la presente invención, se aplican las siguientes definiciones: Una "cantidad efectiva para uso terapéutico" es una cantidad de un compuesto de la Fórmula (I) o de la Fórmula (II) o una combinación de dos o más de dichos compuestos, que inhibe, total o parcialmente, el progreso de la condición o alivia, por lo menos parcialmente, uno o más síntomas de la condición. Una cantidad efectiva para uso terapéutico también puede ser una cantidad que sea eficaz para la profilaxis. La cantidad que es eficaz para uso terapéutico dependerá del tamaño y género del paciente, de la condición que se va a tratar, de la gravedad de la condición y del resultado buscado. Para un determinado paciente, la cantidad efectiva para uso terapéutico se puede determinar usando métodos conocidos por los especialistas en la técnica.
Las "sales farmacéuticamente aceptables" se refieren a aquellas sales que retienen la eficacia biológica y las propiedades de las bases libres y que se obtienen por reacción con ácidos inorgánicos, por ejemplo, ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico y ácido fosfórico o ácidos orgánicos tales como ácido sulfónico, ácido carboxílico, ácido fosfórico orgánico, ácido metansulfónico, ácido etansulfónico, ácido p-toluensulfónico, ácido cítrico, ácido fumárico, ácido maleico, ácido succínico, ácido benzoico, ácido salicílico, ácido láctico, ácido tartárico (por ejemplo ácido ( + ) o (-)-tartárico o mezclas de los mismos), aminoácidos (por ejemplo aminoácidos ( + ) o (-) o mezclas de los mismos) y semejantes. Dichas sales se pueden preparar usando métodos conocidos por los especialistas en la técnica.
Ciertos compuestos de la Fórmula (I) o de la Fórmula (II) que tienen sustituyentes de carácter ácido pueden existir como sales con bases farmacéuticamente aceptables. La presente invención incluye dichas sales. Los ejemplos de dichas sajes incluyen sales de sodio, sales de potasio, sales de lisina y sales de arginina. Dichas sales se pueden preparar usando métodos conocidos por los especialistas en la técnica.
Ciertos compuestos de la Fórmula (I) o de la Fórmula (II) y las sales de los mismos pueden existir en más de una forma cristalina y la presente invención incluye a cada forma cristalina y a las mezclas de las mismas.
Ciertos compuestos de la Fórmula (I) o de la Fórmula (II) y las sales de los mismos también pueden existir en la forma de solvatos, por ejemplo hidratos, y la presente invención incluye a cada solvato y a las mezclas de los mismos.
Ciertos compuestos de la Fórmula (I) o de la Fórmula (II) pueden contener uno o más centros quirales, y existen en diferentes formas ópticamente activas. Cuando los compuestos de la Fórmula (I) o de la Fórmula (II) contienen un centro quiral, los compuestos existen en dos formas enantioméricas y la presente invención incluye a ambos enantiómeros y a las mezclas de enantiómeros, como por ejemplo mezclas racémicas. Los enantiómeros se pueden resolver usando métodos conocidos por los especialistas en la técnica, por ejemplo por formación de sales diastereoisoméricas que se pueden separar, por ejemplo, por cristalización; formación de derivados o complejos diastereoisoméricos que se pueden separar, por ejemplo, por cristalización, cromatografía gas-líquido o de líquidos; reácción selectiva de un enantiómero con un reactivo específico para enantiómeros, por ejemplo esterificación enzimática; o cromatografía gas-líquido o de líquidos en un ambiente quiral, por ejemplo sobre un soporte quiral por ejemplo sílice con un ligando quiral unido o en presencia de un solvente quiral. Se podrá apreciar que cuando el enantiómero deseado es convertido en otra entidad química mediante uno de los métodos de separación descritos anteriormente, se requiere de un Etapa adicional para liberar la forma enantiomérica deseada. Como alternativa, se pueden sintetizar enantiómeros específicos por síntesis asimétrica usando reactivos, sustratos, catalizadores o solventes ópticamente activos, o convirtiendo un enantiómero en el otro mediante una transformación asimétrica.
Cuando un compuesto de la Fórmula (I) o de la Fórmula (II) contiene más de un centro quiral, este puede existir en formas diastereoisoméricas. Los compuestos diastereoisoméricos se pueden separar usando métodos conocidos por los especialistas en la técnica, por ejemplo cromatografía o cristalización y los enantiómeros individuales se pueden separar según se describió anteriormente. La presente invención incluye a cada diastereoisómero de los compuestos de la Fórmula (I) o dé la Fórmula (II) y mezclas de los mismos.
Ciertos compuestos de la Fórmula (I) o de la Fórmula (II) pueden existir en diferentes formas tautoméricas o como diferentes isómeros geométricos, y la presente invención incluye cada tautómero y/o isómero geométrico de los compuestos de la Fórmula (I) o de la Fórmula (II) y mezclas de los mismos.
Ciertos compuestos de la Fórmula (I) o de la Fórmula (II) pueden existir en diferentes formas conformacionales estables que pueden ser separables. La asimetría torsional debida a una rotación restringida alrededor de una unión simple asimétrica, por ejemplo debido al impedimento estérico o tensión en el anillo, puede permitir la separación de los diferentes confórmeros. La presente invención incluye cada isómero conformacional de los compuestos de la Fórmula (I) o de la Fórmula (II) y mezclas de los mismos.
Ciertos compuestos de la Fórmula (I) o de la Fórmula (II) pueden existir en una forma dipolar y la presente invención incluye cada forma dipolar de los compuestos de la Fórmula (I) o de la Fórmula (II) y mezclas de las mismas.
Según se usa en la presente, el término "profármaco" se refiere a un agente que es convertido in vivo en el fármaco principal mediante algún proceso químico fisiológico (por ejemplo, al llevar un profármaco al pH fisiológico se convierte a la forma de fármaco deseada). Los profármacos a menudo son de utilidad porque, en algunas situaciones, pueden ser más fáciles de administrar que el fármaco principal. Por ejemplo, las mismas pueden estar biodisponibles para una administración por vía oral, en tanto el fármaco principal No. lo está. El profármaco también puede tener una mayor solubilidad en composiciones farmacológicas que el fármaco principal. Un ejemplo, sin limitaciones, de un profármaco podría ser un compuesto dé la presente invención donde se administra como un éstér (el "profármaco") para facilitar la transmisión a través dé una membrana celular donde la solubilidad en agua No. es beneficiosa, pero luego se hidroliza metabólicamente al ácido carboxilico una vez que alcanza el interior de la célula donde la solubilidad en agua es beneficiosa Los profármacos tienen muchas propiedades útiles. Por ejemplo, un profármaco puede ser más soluble en agua que el fármaco definitiva, facilitando de esa manera la administración intravenosa de el fármaco. Un profármaco también puede tener un mayor nivel de biodisponibilidad oral que el fármaco definitivo. Después de la administración, el profármaco es dividida enzimática o químicamente para administrar el fármaco definitivo en la sangre o tejido.
Algunos profármacos liberan, luego de la división, el correspondiente ácido libre, y dichos residuos formadores de ésteres hidrolizables de los compuestos de esta invención incluyen, pero sin limitarse a, sustituyentes de ácido carboxilico en donde el hidrógeno libre es reemplazado por alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, alcanoiloximetilo de 1 a 12 átomos de carbono, 1 -(alcanoiloxi)etilo 4 a 9 átomos de carbono, 1 -metil-1 -(alcanoiloxi)-etilo que tiene entre 5 y 10 átomos de carbono, alcoxicarboniloximetilo que tiene entre 3 y 6 átomos de carbono, 1 -(alcoxicarboniloxi)etilo que tiene entre 4 y 7 átomos de carbono, 1 -metil-1 -(alcoxicarboniloxi)etilo que tiene entre 5 y 8 átomos de carbono, N-(alcoxicarbonil)aminometilo que tiene entre 3 y 9 átomos de carbono, 1-(N-(alcoxicarbonil)amino)etilo que tiene entre 4 y 10 átomos de carbono, 3-ftalidilo, 4- crotonolactonilo, gamma-butirolacton-4-ilo, di-N,N-alquilamino de 1 a 2 átomos de carbono-alquilo de 2 a 3 átomos de carbono (tal como ß-dimetilaminoetilo), carbamoil-alquilo de 1 a 2 átomos de carbono, ?,?-di-alquilcarbamoil de 1 a 2 átomos de carbono-alquilo de 1 a 2 átomos de carbono y piperidin, pirrolidin o morfolin-alquilo de 2 a 3 átomos de carbono.
Otros ejemplos de profármacos liberan un alcohol de la Fórmula (I) o de la Fórmula (II) en donde el hidrógeno libre del sustituyente hidroxilo (por ejemplo, el grupo R contiene hidroxilo) es reemplazado por alcanoiloximetilo de 1 a 6 átomos de carbono, 1 -(alcanoiloxi de 1 a 6 átomos de carbono)etilo, 1-metil-1-(alcanoiloxi de 1 a 6 átomos de carbono)etilo, alcoxicarboniloximetilo de 1 a 12 átomos de carbono, N-alcoxicarbonilamino-metilo de 1 a 6 átomos de carbono, succinoílo, alcanoílo de 1 a 6 átomos de carbono, a-amino-alcanoílo de 1 a 4 átomos de carbono, arilactilo y a-aminoacilo o a-aminoacil-a-aminoacilo en donde dichos grupos a-aminoacilo son, de manera independiente, cualquiera de los L-aminoácidos naturales que se encuentran en las proteínas, P(0)(OH)2, -P(0)(0-alquilo de 1 a 6 átomos de carbono)2 o glicosilo (el radical resultante del desprendimiento del hidroxilo del hemiacetal de un carbohidrato).
Según se usa en la presente, el término "grupo cicloalquilo de 5 a 12 átomos de carbono con puente" se refiere a un grupo de hidrocarburo saturado o insaturado, bicíclico o policíclico con puente que tiene dos o tres anillos cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono. Se excluyen los cicloalquilos sin puente. Los hidrocarburos cíclicos con puente pueden incluir, por ejemplo, biciclo[2.1.1 ]hexilo, biciclo[2.2.1]heptilo, biciclo[2,2,2]octilo, biciclo[3.2.1]octilo, biciclo[4,3.1]decilo, biciclo[3.3.1]nonilo, bornilo, bornenilo, norbornilo, norbornenilo, 6,6-dimetilbiciclo[3.1.1 ]heptilo, triciclobutilo y adamantilo.
Según se usa en la presente el término "heterociclilo de 2 a 10 átomos de carbono con puente" se refiere a grupos de hidrocarburos bicíclicos o policíclicos con puentes aza y pueden incluir azanorbornilo, quinucf idinilo, isoquinuclidinilo, tropanilo, azabiciclo[3.2.1]octanilo, azabiciclo[2.2.1]heptanilo, 2-azabiciclo[3.2.1]octanilo, azabiciclo[3.2.1]octanilo, azabiciclo[3.2.2]nonanilo, azabiciclo[3.3.0]nonan¡lo y azabiciclo [3.3.1 ]nonanilo.
Los términos "heterocíclico", "heterociclilo" o heterociclileno, según se usan aquí, incluyen sistemas de anillos No. aromáticos, que incluyen, pero sin limitarse a, anillos monocíclicos, bicíclicos, tricíclicos y espirocíclicos, que pueden estar completamente saturados o que pueden contener una o más unidades de insaturación (para evitar dudas, el grado de insaturación No. da como resultado un sistema de anillo aromático) y tienen entre 5 y 12 átomos que incluyen por lo menos un heteroátomo, como por ejemplo nitrógeno, oxígeno o azufre. A los efectos de una ejemplificación, que No. debería considerarse como limitativo del alcance de esta invención, los siguientes son ejemplos de anillos heterocíclicos azepinilo, azetidinilo, indolinilo, isoindolinilo, morfolinilo, piperazinilo, piperidinilo, pirrolidinilo, quinicludinilo, tiomorfolinilo, tetrahidropiranilo, tetrahidrofuranilo, tetrahidroindolilo, tiomorfolinilo y tropanilo.
El término "heteroarilo" o "heteroarileno" según se usa en la presente, incluye sistemas de anillos aromáticos, que incluyen, pero sin limitarse a, anillos monocíclicos, bicíclicos y tricíclicps, y tiene entre 5 y 12 átomos que incluyen por lo menos un heteroátomo, como por ejemplo nitrógeno, oxígeno o azufre. A efectos de una ejemplificación, que No. debería considerarse como limitativa del alcance de esta invención, los ejemplos incluyen azaindolilo, benzo(b)tienilo, bencimidazolilo, benzofuranilo, benzoxazolilo, benzotiazolilo, benzotiadiazolilo, benzoxadiazolilo, furanilo, imidazolilo, imidazopiridinilo, indolilo, indazolilo, isoxazolilo, isotiazolilo, oxadiazolilo, oxazolilo, purinilo, piranilo, pirazinilo, pirazolilo, piridinilo, pirimidinilo, pirro lito, pirro l[2,3-d]pirimidinilo, pirazol[3,4-d]p¡rimjdinilo, quinolinilo, sinazolinilo, triazolilo, tiazolilo, tiofenilo, tetrazolilo, tíadiazolilo o tienilo.
Un grupo "heterocicloalquilo", según se usa en la presente, es un grupo heterocíclico que está conectado a un compuesto mediante un grupo alifático con entre uno y ocho átomos de carbono aproximadamente. Por ejemplo, un grupo heterocicloalquilo es un grupo morfolinometilo.
Según se usa en la presente, un "alquilo", "alquilenó" o notaciones tales como "(C^-C8)" incluye hidrocarburos de cadena lineal o ramificada que están completamente saturados. Los ejemplos de alquilos son metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, pentilo, hexilo e isómeros de los mismos. Según se usa en la presente, "alquenilo", "alquenileno", "alquinileno" y "alquinilo" significa de 2 a 8 átomos de carbono e incluye hidrocarburos de cadena lineal o ramificada que contienen una o más unidades de insaturación , uno o más enlaces dobles para el alquenilo y una o más uniones triples para el alquinilo.
Según se usa en la presente, los grupos aromáticos (o grupos "arilo" o "arileno") incluyen sistemas de anillos carbocíclicos aromáticos (por ejemplo, fenilo) y sistemas de anillos aromáticos policíclicos fusionados (por ejemplo, naftilo, bifenilenilo y 1 ,2,3,4-tetrahidronaftilo).
Según se usa en la presente, un "cicloalquilo" o "cicloalquileno" significa hidrocarburos de monocíclicos de 3 a 12 átomos de carbono o multicíclicos (por ejemplo, bicíclicos, tricíclicos, espirocíclicos, etc.) que están completamente saturados o que tienen uno o más enlaces insaturados pero No. alcanza a ser un grupo aromático. Los ejemplos de grupos cicloalquilo son ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclopentenilo, ciclohexilo y ciclohexenilo.
Según se usa en la presente, muchas unidades o sustituyentes se denominan como "sustituidos" u "opcionalmente sustituidos". Cuando una unidad está modificada por uno de dichos términos, a no ser que se especifique de otra manera, esto denota que cualquier porción de la unidad que los especialistas en la técnica saben que está disponible para sustitución puede estar sustituida, incluyendo uno o más sustituyentes, donde si hay más de un sustituyente entonces cada sustituyente se selecciona de manera independiente. Dichos medios de sustitución son bien conocidos en la técnica y/o se explican en la presente memoria descriptiva. A efectos de una ejemplificación , que No. debería considerarse limitativa del alcance de esta invención, algunos ejemplos de grupos que son sustituyentes son: grupos alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, grupos alquenilo de 2 a 8 átomos de carbono, grupos alquinilo de 2 a 8 átomos de carbono, grupos cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono, halógeno (F, Cl, Br o I), grupos alquilo de 1 a 8 átomos de carbono halogenado (por ejemplo, pero sin limitarse a, -CF3), grupos -O-íC^CsJalquilo, -OH, grupos -S-alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, -SH, grupos -NH-alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, grupos -N(alquilo de 1 a 8 átomos de carbono)2, -NH2, -C(0)NH2, grupos -C(0)NH-alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, -C(0)N(alquilo de 1 a 8 átomos de carbono)2, -NHC(0)H, grupos -NHC(0)-alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, grupos -NHC(0)c¡cloalquilo de 3 a 8 átomos de carbono, -N(alquilo de 1 a 8 átomos de carbono)C(0)H, grupos -N(alquilo de 1 a 8 átomos de carbono)C(0)alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, -NHC(0)NH2, grupos -NHC(0)NH-alqu¡lo de 1 a 8 átomos de carbono, grupos -N(alquilo de 1 a 8 átomos de carbono)C(0)N H2, grupos -NHC(0)N(alquilo de 1 a 8 átomos de carbono)2, grupos -N(alquilo de 1 a 8 átomos de carbono)C(0)N(alquilo de 1 a 8 átomos de carbono)2, -N(alquilo de 1 a 8 átomos de carbono)C(0)NH(alquilo de 1 a 8 átomos de carbono), -C(0)H, grupos -C(0)alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, -CN, -N02, grupos -S(0)alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, grupos -S(0)2alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, grupos -S(0)2N(a!quilo de 1 a 8 átomos de carbono)2, grupos -S(0)2NH-alqu¡lo de 1 a 8 átomos de carbono, grupos -S(0)2NH-c¡cloalquilo de 3 a 8 átomos de carbono, grupos -S(0)2NH2, grupos -NHS(0)2alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, grupos -N(alquilo de 1 a 8 átomos de carbono)S(0)2alquilo dé 1 a 8 átomos de carbono, grupos -alquilo de 1 a 8 átomos de carbono-O-alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, grupos -O-alquilo de 1 a 8 átomos de carbono-O-alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, -C(0)OH, grupos -C(0)0-alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, NHOH, grupos NHO-alquilo de 1 a 8 átomos de carbono, grupos -O-alquilo de 1 a 8 átomos de carbono halogenado (por ejemplo, pero sin limitarse a, -OCF3), grupos -S(0)2-alquilo de 1 a 8 átomos de carbono halogenado (por ejemplo, pero sin limitarse a, -S(0)2CF3), grupos -S- alquilo de 1 a 8 átomos de carbono halogenado (por ejemplo, pero sin limitarse a, -SCF3), -heterociclo de 1 a 6 átomos de carbono (por ejemplo, pero sin limitarse a, pirrolidina, tetrahidrofurano, pirano o morfolirio), -heteroarilo de 1 a 6 átomos de carbono (por ejemplo, pero sin limitarse a, tetrazol, imidazol, furano, pirazina o pirazol), -fenilo, grupos -NHC(0)0-alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, grupos -N(alquilo de 1 a 6 átomos de carbono)C(0)0-alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, grupos -C( = NH)-alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, grupos -C( = NOH)-alquilo de 1 a 6 átomos de carbono o grupos -C( = N-0-alquilo de 1 a 6 átomos de carbono)-alquilo de 1 a 6 átomos de carbono.
" Z) " en la Fórmula (I) representa un anillo aromático.
Se pueden administrar uno o más compuestos de la presente invención a un paciente humano por sí mismos o en composiciones farmacéuticas donde se mezclan con vehículos o excipiente(s) apropiados para uso biológico en dosis para tratar o aliviar una enfermedad o condición según se describe aquí. Las mezclas de dichos compuestos también se pueden administrar al paciente como una simple mezcla o en composiciones farmacéuticas formuladas apropiadamente. Una dosis efectiva para uso terapéutico se refiere a aquella cantidad del compuesto o compuestos que es suficiente para dar como resultado la prevención o atenuación de una enfermedad o condición según se describe aquí. Las técnicas para la formulación y administración de los compuestos de la presente solicitud se pueden encontrar en referencias bien conocidas por el especialista en la técnica, como por ejemplo "Remington's Pharmaceutical Sciences", Mack Publishing Co., Easton, PA, última edición.
Por ejemplo, las rutas de administración apropiadas pueden incluir una administración oral, por gotas oftalmológicas, rectal, transmucosa, tópica o intestinal; una administración parentéral, inclusive inyecciones intramusculares, subcutáneas, intramedulares, así como inyecciones intratecales, intraventriculares directas, intravenosas, intraperitoneales, intranasales o intraoculares.
Como alternativa, el compuesto se puede administrar en forma local en vez de sistémica, por ejemplo, inyectando el compuesto directamente al interior de un sitio edematoso, frecuentemente en un depósito o como una formulación de liberación sostenida.
Además, el fármaco se puede administrar en un sistema de administración de fármaco dirigido a un objetivo, por ejemplo, en un liposoma recubierto con un anticuerpo específico para células del endotelio.
Las composiciones farmacéuticas de la presente invención se pueden elaborar de una manera conocida por sí misma, por ejemplo, por medio de procesos convencionales de mezclado, disolución, granulación, elaboración de grageas, levigación, emulsión, encapsulado, atrapado o liofilización.
De esa manera, las composiciones farmacéuticas para utilizar de acuerdo con la presente invención se pueden formular de una manera convencional usando uno o más vehículos fisiológicamente aceptables que comprenden excipientes y auxiliares que facilitan el tratamiento de los compuestos activos para dar preparados que se pueden utilizar para uso farmacéutico. La formulación correcta depende de la ruta de administración seleccionada.
Para inyección, los agentes de la invención se pueden formular en soluciones acuosas, preferiblemente en soluciones amortiguadoras del pH compatibles para uso fisiológico tales como la solución de Hanks, la solución de Ringer o solución salina fisiológica amortiguadora del pH. Para una administración transmucosal, se pueden emplear penetradores apropiados para la barrera a permear en la formulación. Dichos penetradores son conocidos en general en la técnica.
Para la administración oral, los compuestos se pueden formular fácilmente combinando los compuestos activos con vehículos farmacéuticamente aceptables bien conocidos en la técnica. Dichos vehículos permiten formular los compuestos de la invención como tabletas, pildoras, grageas, cápsulas, líquidos, geles, jarabes, suspensiones, suspensiones espesas, etcétera, para la ingestión oral por parte de un paciente que será tratado. Los preparados farmacéuticos para uso oral se pueden obtener combinando el compuesto activo con un excipiente Sólido, opcionalmente moliendo una mezcla que se obtiene cpmo resultado, y tratando la mezcla de gránulos, después de agregar auxiliares apropiados, si se deseara, para obtener tabletas o núcleos de grageas. Los excipientes apropiados son, en particular, cargas tales como azúcares, que incluyen lactosa, sacarosa, manitol o sorbitol; preparados de celulosa tales como, por ejemplo, almidón de maíz, almidón de trigo, almidón de arroz, almidón de papa, gelatina, goma tragacanto, metilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, carboximetilcelulosa sódica y/o polivinilpirrolidona (PVP). Si se desea, se pueden agregar agentes desintegrantes, como por ejemplo polivinilpirrolidona reticulada, agar o ácido algínico o una sal de los mismos, tal como alginato de sodio.
Los núcleos de grageas se suministran con recubrimientos apropiados. Para tal fin, se pueden usar soluciones concentradas de azúcares, que opcionalmente pueden contener goma arábiga, talco, polivinilpirrolidona, gel carbopol, polietilenglicol y/o dióxido titanio, soluciones de laca y solventes orgánicos adecuados o mezclas de solventes. A los recubrimientos de tabletas o grageas se les pueden agregar tinturas o pigmentos para su identificación o para caracterizar diferentes combinaciones de dosis de compuesto activo.
Las preparaciones farmacéuticas que se pueden usar por vía oral incluyen cápsulas a presión [push-fit] elaboradas de gelatina, así como cápsulas blandas, selladas elaboradas con gelatina y un plastificante, tal como glicerol o sorbitol. Las cápsulas armadas pueden contener los ingredientes activos mezclados con cargas tales como lactosa, aglutinantes tales como almidones, y/o lubricantes, tales como talco o estearato de magnesio, y, opcionalmente, estabilizantes. En las cápsulas blandas, los compuestos activos pueden estar disueltos o suspendidos en líquidos apropiados, como por ejemplo aceites grasos, parafina líquida o polietilenglicoles líquidos. Además, se pueden agregar estabilizantes. Todas las formulaciones para la administración oral deberían presentarse en dosificaciones apropiadas para dicha administración.
Para una administración por vía bucal, las composiciones pueden tomar la forma de tabletas o grageas formuladas de manera convencional.
Para la administración por inhalación, los compuestos para utilizar de acuerdo con la presente invención se suministran convenientemente en una forma de presentación de aerosol que se rocía desde envases presurizados o un nebulizador, con el uso de un propelente apropiado, por ejemplo, diclorodifluorométano , triclorofluorometano, diclorotetrafluoroetano, dióxido de carbono u otro gas apropiado. En el caso del aerosol presurizado la unidad de dosificación se puede determinar proporcionando una válvula para administrar una cantidad medida. Las cápsulas y cartuchos de, por ejemplo, gelatina para su uso en un inhalador o insuflador se pueden formular para que contengan una mezcla de polvos del compuesto y una base adecuada para el polvo, tal como lactosa o almidón.
Los compuestos se pueden formular para una administración parenteral por inyección, por ejemplo, por inyección de un bolo o por infusión continua. Las formulaciones para inyección se pueden presentar en una forma de dosificación unitaria (por ejemplo, en ampollas o recipientes con dosificaciones múltiples) con adición de un conservante. Las composiciones pueden tomar formas tales como suspensiones, soluciones o emulsiones en vehículos al aceite o acuosos, y pueden contener agentes de la formulación tales como agentes de suspensión, estabilizantes y/o dispersantes.
Las formulaciones farmacéuticas para administración parenteral incluyen soluciones acuosas de los compuestos activos en forma soluble en agua. Además, se pueden preparar suspensiones de los compuestos activos como suspensiones inyectables oleosas apropiadas. Los solventes o vehículos lipofílicos adecuados incluyen aceites grasos tal como aceite de sésamo, ésteres de ácidos grasos sintéticos tal como oleato de etilo y triglicéridos, o liposomas. Las suspensiones acuosas inyectables pueden contener sustancias que incrementan la viscosidad de la suspensión, tal como carboximetilcelulosa sódica, sorbitol o dextrano. Opcionalmente, la suspensión también puede contener estabilizantes apropiados o agentes que aumenten la solubilidad de los compuestos para permitir la preparación de soluciones altamente concentradas.
Como alternativa, el ingrediente activo se puede encontrar en la forma de un polvo, que se puede reconstituir con un vehículo apropiado, por ejemplo, agua estéril libre de pirógenos, antes del uso.
Los compuestos también se pueden formular en composiciones para la vía rectal, tales como supositorios o enemas de retención, por ejemplo, que contienen bases para supositorios convencionales tales como manteca de cacao u otros glicéridos.
Además de las formulaciones descritas anteriormente, los compuestos también se pueden formular como una preparación depot. Dichas formulaciones de acción prolongada pueden ser administradas mediante implantes (por ejemplo, subcutáneos o intramusculares) o por inyección intramuscular. Así, por ejemplo, los compuestos se pueden formular con materiales poliméricos o hidrofóbicos adecuados (por ejemplo, como una emulsión en un aceite aceptable) o con resinas de intercambio iónico o como derivados escasamente solubles, por ejemplo, como una forma salina escasamente soluble.
Un ejemplo de un vehículo farmacéutico para los compuestos hidrofóbicos de la invención es un sistema de cosolvente que comprende alcohol bencílico, un tensioactivo No. polar, un polímero orgánico miscible en agua y una fase acuosa. El sistema de cosolventes puede ser el sistema de cosolventes VPD. VPD es una solución al 3% de peso en volumen de alcohol bencílico, 8% de peso en volumen del tensioactivo No, polar Polisorbate 80 y 65% de peso en volumen de polietilenglicol 300, llevada a volumen con etanol absoluto. El sistema de cosolventes VPD (VPD:5W) consiste en VPD diluido 1:1 con una solución al 5% de dextrosa en agua. Este sistema de cosolventes disuelve bien a los compuestos hidrofóbicos y produce en sí mismo una baja toxicidad en la administración sistémica. Naturalmente, las proporciones de un sistema de cosolventes pueden variar considerablemente sin inutilizar sus características de solubilidad y toxicidad. Aún más, la identidad de los componentes de cosolventes puede variar: por ejemplo, se pueden usar otros agentes tensioactivos No. polares, de baja toxicidad, en lugar de polisorbato; el tamaño de la fracción de polietilenglicol puede variar; otros polímeros biocompatibles pueden reemplazar el polietilenglicol, por ejemplo, polivinilpirrolidona; y otros azúcares o polisacáridos pueden sustituir la dextrosa.
Como alternativa, se pueden emplear otros sistemas de administración para los compuestos farmacéuticos hidrofóbicos. Los liposomas y emulsiones son ejemplos bien conocidos de vehículos de administración o vehículos para fármacos hidrofóbicas. También se pueden emplear determinados solventes orgánicos, tal como dimetilsulfóxido, aunque habitualmente a costa de una mayor toxicidad. Además, los compuestos se pueden suministrar usando un sistema de liberación sostenida, tales como matrices semipermeables de polímeros hidrofóbicos sólidos que contienen al agente terapéutico. Se han establecido diversos materiales de liberación sostenida y los especialistas en la técnica los conocen bien. Dependiendo de su naturaleza química las cápsulas de liberación sostenida pueden liberar los compuestos durante unas pocas horas hasta más de varios días. Dependiendo de la naturaleza química y la estabilidad biológica del reactivo terapéutico, se pueden emplear estrategias adicionales para la estabilización de proteínas.
Las composiciones farmacéuticas también pueden comprender vehículos o excipientes adecuados en fase sólida o gel. Los ejemplos de dichos vehículos o excipientes incluyen, pero sin limitarse a, carbonato de calcio, fosfato de calcio, diversos azúcares, almidones, derivados de celulosa, gelatina y polímeros tales como polietilenglicoles.
Muchos de los compuestos de la invención se pueden proporcionar como sales con contraiones compatibles para uso farmacéutico. Las sales compatibles para uso farmacéutico se pueden formar con muchos ácidos, que incluyen, pero sin limitarse a, los ácidos clorhídrico, sulfúrico, acético, láctico, tartárico, málico, succínico, etc. Las sales tienden a ser más solubles en solventes acuosos u otros solventes protónicos en las correspondientes formas de base libre.
Las composiciones farmacéuticas apropiadas para utilizar en la presente invención incluyen composiciones que contienen los ingredientes activos en una cantidad efectiva para alcanzar el propósito pretendido. Más específicamente, una cantidad terapéuticamente efectiva significa una cantidad efectiva para impedir el desarrollo de síntomas o para aliviar los síntomas existentes en el sujeto bajo tratamiento. La determinación de las cantidades efectivas es propia de la capacidad de los especialistas en la técnica.
Para cualquiera de los compuestos de los que se utilizan en un método de la presente invención, la dosis efectiva para uso terapéutico se puede estimar inicialmente a partir de ensayos celulares. Por ejemplo, se puede formular una dosis en modelos celulares y de animales para obtener un rango de concentración en circulación que incluya a la Cl50 determinada en ensayos celulares (es decir, la concentración del compuesto de prueba que permita obtener la mitad de la inhibición máxima dé la actividad de una determinada proteína cinasa). En algunos casos es apropiado determinar la Cl50 en presencia de entre 3 y 5% de albúmina en suero porque una determinación de ese tipo se aproxima a los efectos de unión de las proteínas plasmáticas al compuesto. Dicha información se puede utilizar para determinar las dosis útiles en humanos con más precisión. Además, los compuestos más preferidos para una administración sistémica inhiben efectivamente la señalización de proteína cinasas en células intactas a niveles que se pueden lograr de manera segura en plasma.
Una dosis efectiva para uso terapéutico se refiere a aquella cantidad del compuesto que da como resultado el alivio de los síntomas en un paciente. La toxicidad y eficacia terapéutica de dichos compuestos se puede determinar mediante métodos farmacéuticos estándar en cultivos celulares o animales experimentales, por ejemplo, para determinar la máxima dosis tolerada (MTD) y la ED50 (dosis efectiva para una respuesta del 50% de la máxima). La proporción de dosis entre los efectos tóxico y terapéutico es el índice terapéutico y se puede expresar como la proporción entre MTD y ED5o. Se prefieren los compuestos que presentan índices terapéuticos altos. Los datos que se obtienen de dichos ensayos con cultivos de células y de los estudios con animales se pueden utilizar para formular un rango de dosificación de utilidad en humanos. La dosificación de dichos compuestos se encuentra preferiblemente dentro de un rango de concentraciones en circulación que incluyen la ED50 con poca o ninguna toxicidad. La dosificación puede variar dentro de este rango dependiendo de la forma de dosificación empleada y la ruta de administración utilizada. El médico individual puede elegir una formulación exacta, ruta de administración y dosificación en vista de la condición del paciente (ver, por ejemplo, Fingí, y colaboradores, 1975 En: The Pharmacological Basis of Therapeutics, Cap. En el tratamiento de crisis, puede ser necesaria la administración de un bolo agudo o una infusión que se aproxima a la MTD para obtener una respuesta rápida.
La cantidad y el intervalo de dosis pueden ajustarse de manera individual para proporcionar niveles plasmáticos del grupo activo que sean suficientes para mantener los efectos moduladores de la cinasa o la concentración mínima eficaz (MEC). La MEC variará para cada compuesto pero se puede estimar a partir de datos in vitro; por ejemplo la concentración necesaria para obtener una inhibición del 50-90% de la proteína cinasa usando los ensayos que se describen en la presente. Las dosificaciones necesarias para obtener la MEC dependerán de las características individuales y de la ruta de administración. Sin embargo, se pueden utilizar ensayos con HPLC o bioensayos para determinar las concentraciones en plasma.
Los intervalos entre dosificaciones también se pueden determinar usando el valor MEC. Los compuestos se deberían administrar usando un régimen que mantenga a los niveles en plasma sobre la MEC durante el 10-90% del tiempo, preferiblemente entre 30-90% y más preferiblemente entre 50-90% hasta lograr el alivio deseado de los síntomas. En los casos de una administración local o absorción selectiva, la concentración local efectiva del fármaco puede No. estar relacionada con la concentración en plasma.
La cantidad de composición administrada dependerá, por supuesto, del sujeto bajo tratamiento, del peso del sujeto, de la severidad de la dolencia, de la manera de administración y del buen juicio del profesional que la prescribe.
Las composiciones se pueden presentar, si se deseara, como un envase o dispositivo dosificador que puede contener una o más formas de dosificación unitarias que contienen al ingrediente activo. El envase puede comprender, por ejemplo, papel metalizado o de plástico, tal como un blíster. El envase o dispositivo de administración puede venir con instrucciones de administración. Las composiciones que comprenden un compuesto de la invención formulado en un vehículo farmacéuticamente compatible también se pueden preparar, colocar en un contenedor apropiado y rotular para el tratamiento de una afección indicada.
En algunas formulaciones, puede ser beneficioso usar los compuestos de la presente invención en la forma de partículas de tamaño muy pequeño, por ejemplo como las que se obtienen por molienda de energía fluida.
El uso de compuestos de la presente invención en la elaboración de composiciones farmacéuticas se ilustra mediante la siguiente descripción. En esta descripción el término "compuesto activo" denota cualquier compuesto de la invención pero en particular cualquier compuesto que es el producto final de uno de los Ejemplos siguientes. a) Cápsulas En la preparación de cápsulas, se pueden disgregar y mezclar 10 partes en peso de compuesto activo y 240 partes en peso de lactosa. La mezcla se puede usar para rellenar cápsulas de gelatina dura, cada una de cuyas cápsulas contiene una dosis unitaria o parte de una dosis unitaria del compuesto activo. b) Tabletas Se pueden preparar tabletas, por ejemplo, a partir de los siguientes ingredientes.
Partes en peso Compuesto activo 10 Lactosa 190 Almidón de maíz 22 Polivinilpirrolidona 10 Estearato de magnesio 3 El compuesto activo, la lactosa y parte del almidón se pueden disgregar, mezclar y la mezcla resultante se puede granular con una solución de la polivinilpirrolidona en etano'l. El granulado seco se puede mezclar con el estearato de magnesio y el resto del almidón. Luego se comprime la mezcla en una máquina tableteadora para obtener tabletas, cada una de las cuales contiene una dosis unitaria o una parte de una dosis unitaria del compuesto activo. c) Tabletas con recubrimiento entérico Las tabletas se pueden preparar usando el método descrito antes en (b). Las tabletas se pueden dotar de un recubrimiento entérico de una manera convencional usando una solución de acetato ftalato de celulosa al 20% y ftalato de dietilo al 3% en etanol:diclorometano (1:1). d) Supositorios En la preparación de supositorios se pueden incorporar, por ejemplo, 100 partes en peso de compuesto activo en 1300 partes en peso de base de triglicéridos para supositorios y a la mezcla se le puede dar forma de supositorios, cada uno de los cuales contiene una cantidad terapéuticamente efectiva del ingrediente activo.
Si se desea, en las composiciones de la presente invención el compuesto activo se puede asociar con otros ingredientes compatibles con actividad farmacológica. Por ejemplo, los compuestos de la presente invención se pueden administrar en combinación con otro agente terapéutico que se sepa que sirve para tratar una enfermedad o condición descrita en la presente. Por ejemplo, con uno o más agentes farmacéuticos adicionales que inhiben o impiden la producción de VEGF o angiopoyetinas, atenúan las respuestas intracelulares a VEGF o angiopoyetinas, bloquean la transducción de la señal intracelular, inhiben la hiperpermeabilidad vascular, reducen la inflamación, o inhiben o impiden la formación de edema o neovascularizacicn. Los compuestos de la invención se pueden administrar antes, a continuación o de manera simultánea con el agente farmacéutico adicional, cualquiera sea la vía de administración apropiada. Los agentes farmacéuticos adicionales incluyen, de manera No. taxativa, esteroides anti-edémicos, NSAIDS, inhibidores de ras, agentes anti-TNF, agentes anti-l L1 , antihistaminas, antagonistas del PAF, inhibidores de COX-1, inhibidores de COX-2, inhibidores de No. sintasa, inhibidores de Akt/PTB, inhibidores de IGF-1R, inhibidores de PKC, inhibidores de cinasa PI3, inhibidores de calcineurina e inmunosupresores. Los compuestos de la invención y los agentes farmacéuticos adicionales actúan de manera aditiva o de manera sinérgica. Por lo tanto, la administración de una combinación de sustancias con dichas características que inhiben la angiogénesis, la hiperpermeabilidad vascular y/o inhiben la formación de edema puede proporcionar mayor alivio de los efectos perjudiciales de un trastorno hiperproliferativo, angiogénesis, hiperpermeabilidad vascular o edema que la administración de cualquier sustancia sola. El alcance de la presente invención incluye el tratamiento de trastornos malignos, las combinaciones con una quimioterapia antiproliferativa o citotóxica o con radiación.
La presente invención también comprende el uso de un compuesto de la Fórmula (I) o de la Fórmula (II) como un medicamento.
Un aspecto adicional de la presente invención proporciona el uso de un compuesto de la Fórmula (I) o de la Fórmula (II) o una sal del mismo en la elaboración de un medicamento para tratar la hiperpermeabilidad vascular, trastornos dependientes de angiogénesis, enfermedades proliferativas y/o trastornos del sistema inmune en mamíferos, en particular en seres humanos.
La presente invención también proporciona un método para tratar la hiperpermeabilidad vascular, una neovascularización inapropiada, enfermedades proliferativas y/o trastornos del sistema inmune, que comprende la administración de una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la Fórmula (I) o de la Fórmula (II) a un mamífero, en particular a un ser humano, que lo necesita ABREVIATURAS aa Aminoácidos Ac20 anhídrido acético AcOH Ácido acético glacial ATP: adenosina trifosfato b.p. punto de ebullición BArF tetra //'s-[3,5-bís(trifluorometil)fenil]borato Bn Bencilo Boc t-butoxicarbonilo BOP-CI cloruro de bi(2-oxo-3-oxazolidinil)fosfínico BSA albúmina de suero bovino BuOH Butanol CAN nitrato cérico amoniacal Cbz Carboxibencilo CDI 1 ,1 '-carbonildiimidazol COD 1 ,5-ciclooctadieno concd Concentrado CT Tomografía computada cym p-cimeno (4-isopropiltolueno) CyPFt-Bu 1 -diciclohexilfosfino-2-di-rer- butilfosfinoetilferroceno d Doblete DAST trifluoruro de dietilaminosulfuro Dba Dibencilidenacetona DBU 1 ,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno DCC Diciclohexilcarbodiimida DCE Dicloroetano DCM diclorometano (cloruro de metileno) dd Doblete de dobletes DEAD azodicarboxilato de dietilo DIBAL-H Hidruro de diisobutilaluminio DIAD azodicarboxilato de diisopropilo DIEA A/./V-diisopropiletilamina DMA Dimetilacetamida DMAP A/./V-dimetilaminopiridina DME 1 ,2-dimetoxietano DMEM Medio de Eagle modificado por Dulbecco DMF ?,?-dirnetilformamida DMS Dimetilsulfuro DMSO dimetilsulfóxido DNP-HSA Dinitrofenil-albúmina de suero humano DPPA Fosforazidato de difenilo Dppf 1 ,1 '-bi(difenilfosfino)ferroceno dr Relación diastereomérica DTT Ditiotreitol EDC'HCI clorhidrato de N-[3-(d¡metilaminopropil]-N' etiilcarbodiimida EDTA ácido etilendiamintetracético EGTA ácido etilenglicoltetracético equiv equivalente(s) er Relación enantiomérica Et2NH Dietilamina EtOAc acetato de etilo Et20 Dietiléter EtOH Etanol FBS Suero fetal bovino FLAG Secuencia peptídica DYKDDDDK G gramo(s) GST Glutatión S-transferasa H hora(s) H2S04 Ácido sulfúrico HATU hexailuorofosfato de 0-(7-azabenzotriazol-1-il)- ?,?, ?/'-tetrametiluronio HEPES Ácido A/-2-h¡drox¡etilpiperaz¡n-/V'-2-etansulfónico HOBt Hidroxibenzotriazol HPLC cromatografía líquida de alta presión Hz Hertz IBCF Cloroformiato de isobutilo i.d. intradérmica IFA Adyuvante de Freund incompleto IPA alcohol isopropílico; KHMDS Hexametildisilazano de potasio LAH Hidruro de aluminio y litio LC Cromatografía líquida LDA Diisopropilamida de litio LHMDS bi(trímetilsilil)amida de litio LiBH4 Borohidruro de litio LiOH Hidróxido de litio m Multiplete Molar m-CPBA ácido mefa-cloroperbenzoico MeCN Acetonitrilo MeOH Alcohol metílico Min minuto(s) mi Mililitro(s) mmHg milímetros de mercurio mmol Milimol MOPS Ácido 3-(/\/-morfolin)-2-propansulfónico MOPSO Ácido 3-(A/-morfolin)-hidroxipropansulfónico MS espectrometría de masas MTBE ter-butiléter de metilo n-Normal (no ramificado) n-BuLi n-butillitio N Normal NaHMDS bi(trimetilsilil)amida de sodio NaOAc acetato de sodio Na(OAc)3BH Triacetoxiborohidruro de sodio NaOf-Bu ter-butóxido de sodio NBS N-bromosuccinimida NCS N-clorosucc¡n¡m¡da ND No determinado NH4OAc Acetato de amonio NIS /V-yodosuccinimida NM /V-metilmorfolina NMP N-metilpirrolidinona NMR resonancia magnética nuclear DO Densidad óptica or Giro óptico OVA Ovalbúmina p- Para PBS solución amortiguadora de pH salina fosfato PFPAA Anhídrido 2,2,3,3,3-pentafluoropropanoico pH -log[H+] PMB p-metoxibencilo pNAG Nitrofenil-N-acetil-b-D-glucosaminida P(n-Bu)3 ír/-n-butilfosfina POCI3 Oxicloruro de fósforo PPh3 Trifenilfosfina Ppm partes por millón PrOH Propanol Psi libras por pulgada cuadrada rcf Fuerza centrífuga relativa RP-HPLC Cromatografía líquida de alta presión en fase inversa R, Tiempo de retención rt temperatura ambiente s singulete SEM 2-(trimetilsilil)etoximeti!o SEM-CI Cloruro de 2-(trimetilsilil)etoximetilo SFC Cromatografía de fluidos supercríticos SLM Litro estándar por minuto T Triplete f- Terciario TBDMS rer-butildimetilsililo TBD SCI cloruro de rer-butildimetilsililo TBAB bromuro de tetra-n-butilamonio TBAF fluoruro de tetra-n-butilamonio TBAI ioduro de tetra-n-butilamonio TEA trietilamina tert Terciario TFA ácido trifluoroacético TFAA Anhídrido trifluoracético THF Tetrahidrofurano TIPS Triisopropilsililo TLC Cromatografía en capa delgada TMA Trimetilaluminio TMAD ?/,?,?/',?/'-tetrametilazodicarbonamida o 1,1'- azobis(A/,A/-d¡metilformamida) o diamida [Sigma®] TMOF Ortoformiato de trimetilo TMS Trimetilsililo TPP 2,4,6-trióxido de 2,4,6-tripropil- [1 ,3,5,2,4,6]trioxatrifosfinano TsCI Cloruro de para-toluensulfonilo TsOH Ácido para-toluensulfónico USP Farmacopea de los Estados Unidos UV Ultravioleta %p Porcentaje en peso p/v Peso/volumen ENSAYOS Actividad Jak1 cinasa in vitro medida por transferencia de energía de resonancia por fluorescencia de resolución temporal (trFRET por sus siglas en inglés) Se agregaron concentraciones variables de inhibidor a una cavidad de ensayo que contiene: enzima Jak1 (aa 845-1142; expresada en células SF9 como una fusión GST y purificada por cromatografía de afinidad con glutatión; 4 nM), sustrato de péptido (biotina-TYR2, secuencia: Biotina-(Ahx)-AEEEYFFLFA-amida; 2 µ?), MOPSO pH 6.5 (50 mM), MgCI2 (10 mM), MnCI2 (2 mM), DTT (2.5 mM), BSA (0.01% p/v), Na3V04 (0.1 mM) y ATP (0.001 mM). Después de aproximadamente 60 min de incubación a temperatura ambiente, la reacción se neutralizó por adición de EDTA (concentración final: 100 mM) y se reveló por adición de reactivos de revelado (concentraciones finales aproximadas: HEPES 30 mM, pH 7.0, BSA 0.06%, Tween-200.006%, KF 0.24 M, PT66K 80 ng/ml (anticuerpo anti-fosfotirosina marcado con europio cat No. 61T66KLB Cisbio, Bedford, MA) y SAXL 3.12 pg/ml (aceptor de estreptavidina-aloficocianina Phycolink, cat No. PJ52S, Prozyme, San Leandro, CA). La reacción revelada se incubó en oscuridad ya sea a 4°C aproximadamente durante 14 hs aproximadamente o durante 60 min aproximadamente a temperatura ambiente, luego se leyó con un detector de fluorescencia de resolución temporal (Rubystar, BMG) usando un láser de 337 nm para longitudes de onda de excitación y emisión de 665 nm. Dentro del rango lineal del ensayo, la señal observada a 665 nm se relaciona directamente con el producto fosforilado y se usa para calcular los valores de Clso- Actividad Jak3 cinasa in vitro medida por transferencia de energía de resonancia por fluorescencia de resolución temporal (trFRET por sus siglas en inglés) Se agregaron concentraciones variables de inhibidor a una cavidad de ensayo que contiene: enzima Jak3 (aa 811-1103; expresada en células SF9 como una fusión GST y purificada por cromatografía de afinidad con glutatión; 3 nM), sustrato de péptido (biotina-TYR2, secuencia: Biotina-(Ahx)-AEEEYFFLFA-amida; 2 µ?), MOPSO pH 6.5 (50 mM), MgCI2 (10 mM), MnCI2 (2 mM), DTT (2.5 mM), BSA (0.01% p/v), Na3V04 (0.1 mM) y ATP (0.001 mM). Después de aproximadamente 60 min de incubación a temperatura ambiente, la reacción se neutralizó por adición de EDTA (concentración final: 100 mM) y se reveló por adición de reactivos de revelado (concentraciones finales aproximadas: HEPES 30 mM, pH 7.0, BSA 0.06%, Tween-20 0.006%, KF 0.24 M, PT66K 80 ng/ml (anticuerpo anti-fosfotirosina marcado con europio cat No. 61T66KLB Cisbio, Bedford, MA) y SAXL 0,8 mg/ml (aceptor de estreptavidina-aloficocianina Phycolink, cat No. PJ52S, Prozyme, San Leandro, CA). La reacción revelada se incubó en oscuridad ya sea a 4°C aproximadamente durante 14 hs aproximadamente o durante 60 min aproximadamente a temperatura ambiente, luego se leyó con un detector de fluorescencia de resolución temporal (Rubystar, BMG) usando un láser de 337 nm para longitudes de onda de excitación y emisión de 665 nm. Dentro del rango lineal del ensayo, la señal observada a 665 nm se relaciona directamente con el producto fosforilado y se usa para calcular los valores de Cl50.
Actividad Syk cinasa ¡n vi'tro medida por transferencia de energía de resonancia por fluorescencia de resolución temporal (trFRET por sus siglas en inglés) Se mezcló el dominio catalítico de Syk 0.3 nM (aa 356-635, purificado en las instalaciones de Abbott Bioreseach Centér) con sustrato de péptido 0.1 µ? (biotina-TYR1 , Secuencia: Biotina-(Ahx)-GAEEEIYAAFFA-COOH) a concentraciones variables de inhibidor en solución amortiguadora de reacción: MOPSO 50 mM pH 6.5, MgCI2 10 mM, MnCI2 2 mM, DTT 2.5 mM, BSA 0.01%, Na3V04 0.1 mM y ATP 0.001 mM. Después de aproximadamente 60 min de incubación a temperatura ambiente, la reacción se neutralizó por adición de EDTA (concentración final: 100 mM) y se reveló por adición de reactivos de revelado (concentraciones finales aproximadas: HEPES 30 mM, pH 7.0, BSA 0.06%, Tween-20 0.006%, KF 0.24 M, PT66K 90 ng/ml (anticuerpo anti-fosfotirosina marcado con europio cat No. 61T66KLB Cisbio, Bedford, MA) y SAXL 0.6 mg/ml (aceptor de estreptavidina-aloficocianina Phycolink, cat No. PJ52S, Prozyme, San Leandro, CA). La reacción revelada se incubó en oscuridad ya sea a 4°C aproximadamente durante 14 hs aproximadamente o durante 60 min aproximadamente a temperatura ambiente, luego se leyó con un detector de fluorescencia de resolución temporal (Rubystar, BMG) usando un láser de 337 nm para longitudes de onda de excitación y emisión de 665 nm. Dentro del rango lineal del ensayo, la señal observada a 665 nm se relaciona directamente con el producto fosforilado y se usa para calcular los valores de Cl50.
Otros ensayos con cinasas in vitro medidos por transferencia de energía de resonancia por fluorescencia de resolución temporal (trFRET por sus siglas en inglés) Se condujeron otros ensayos con cinasas usando un protocolo similar. Se expresaron enzimas purificadas adicionales Tyk2 (aa 880-1185 con una marca de histidina N-terminal y una marca FLAG C-terminal; purificada por los autores mediante cromatografía de afinidad con ion de metal inmovilizado), RET (aa 711-1072, con una marca de histidina N-terminal; purificada por cromatografía de afinidad con ion de metal inmovilizado, Syk (aa 356-635 con una marca de histidina C-term¡nal; purificada por cromatografía de afinidad con ion de metal inmovilizado), y KDR (aa 792-1354, con una marca de histidina N-terminal; purificada por los autores mediante cromatografía de afinidad con ion de metal inmovilizado y de intercambio iónico) en células SF9 y se expresó Aurora 1/B (aa 1-344, con una marca de histidina N-terminal y purificada mediante cromatografía de afinidad con ion de metal inmovilizado) en E. coli. Las otras enzimas usadas se encuentran disponibles de fuentes comerciales. Las enzimas se mezclaron con sustratos biotinilados a concentraciones variables de inhibidor en diferentes soluciones amortiguadoras de reacción (ver la Tabla A). Después de aproximadamente 60 min de incubación a temperatura ambiente, la reacción se neutralizó por adición de EDTA y se reveló por adición de reactivos de revelado (concentraciones finales aproximadas: HEPES 30 mM, pH 7.0, BSA 0.06%, Tween-20 0.006%, KF 0.24 M, cantidades variables de anticuerpos marcados con europio donantes y aloficocianina marcada con estreptavidina aceptora (SAXL)). Las reacciones reveladas se incubaron en oscuridad a 4°C aproximadamente durante 14 h aproximadamente o durante 60 min aproximadamente a temperatura ambiente, luego se leyeron con un detector de fluorescencia de resolución temporal (Rubystar, BMG Labtech) como se describió precedentemente. Tabla A. Condiciones específicas (por 40 µ? de reacción de enzima) para las distintas enzimas detalladas a continuación: Soluciones amortiguadoras de reacción: La solución amortiguadora MOPSO contiene: MOPSO 50 mM, pH 6.5, MgCI2 10 mM, MnCI2 2 mM, DTT 2.5 mM, BSA 0.01% y Na3V040.1 mM La solución amortiguadora HEPES contiene: HEPES 50 mM, pH 7.1, DTT 2.5 mM, MgCI2 10 mM, MnCI2 2 mM, BSA 0.01% y Na3V040.1 mM La solución amortiguadora MOPS contiene: MOPS 20 mM, pH 7.2, MgCI2 10 mM, EGTA 5 mM, Beta-fosfoglicerol 5 mM, Na3V04 1 mM, Triton-X-1000.01% y DTT 1 mM Sustratos: Secuencia de biotina-ATF2-péptido: Biotina-(Ahx)-AGAGDQTPTPTRFLKRPR-amida Secuencia de biotina-TYR1 -péptido: Biotina-(Ahx)-GAEEEIYAAFFA-COOH Secuencia biotina-TYR2-péptido: Biotina-(Ahx)- AEEEYFFLFA-amida Secuencia de biotina-MBP-péptido: Biotina-(Ahx)-VHFFKNIVTPRTPPPSQGKGAEGQR-amida El péptido biotina-poliGluTyr se obtuvo de Cisbio (cat No. 61 GT0BLA, Bedford, MA) Los péptidos KinEASE S2 y S3 se obtuvieron de Cisbio (cat No. 62ST0PEB, Bedford, MA) Reactivos de detección: El anticuerpo anti-pATF2-Eu fue marcado a pedido por Cisbio (Bedford, MA) El anticuerpo anti-pMBP-Eu fue marcado a pedido por Cisbio (Bedford, MA) PT66K se obtuvo de Cisbio (cat No. 61T66KLB, Bedford, MA) SAXL se obtuvo de Prozyme (cat No. PJ25S, San Leandro, CA) Ensayo celular con IL-2 pSTAT5 en blastos T humanos Materiales: Se prepararon blastos T con fitohemaglutinina a partir de Leukopacks adquiridos de Biological Specialty Corporation, Colmar, PA 18915, y se crioconservaron en DMSO 5%/medio antes del ensayo.
Para este ensayo las células se descongelaron en medio de ensayo con la siguiente composición: medio RPMI 1640 (Gibco 11875093) con L-glutamina 2 mM (Gibco 25030-081), HEPES 10 mM (Gibco 15630-080), Pen/Strep 100 pg/ml (Gibco 15140-122) y FBS inactivado por calor 10% (Gibco 10438026). Otros materiales que se usaron en el ensayo son: DMSO (Sigma D2650), placas de dilución de 96 cavidades (polipropileno) (Corning 3365), placas de ensayo de 96 cavidades (blancas, ½ área, 96 cavidades) (Corning 3642), D-PBS (Gibco 14040133), IL-2 (R&D 202-IL-10 (10 pg)), conjunto de elementos de pSTAT5 Alphascreen (Perkin Elmer TGRS5S10K) y conjunto de elementos de proteína A Alphascreen (Perkin Elmer 6760617M) Métodos: Los blastos T se descongelaron y cultivaron durante 24 hs aproximadamente sin IL-2 antes del ensayo. Los compuestos de prueba o los controles se disolvieron y se diluyeron en serié en DMSO 100%. A continuación las soluciones madre de DIVISÓ se diluyeron 1:50 en medio de cultivo celular para crear las soluciones madre de compuesto 4x (que contienen DMSO 2%). Las células se plaquearon, usando una placa Corning blanca de 96 cavidades, de ½ área, a razón de 2 x 105/10 Dl/cavidad en 10 ? I de medio seguido por adición de 5 DI de compuesto de prueba 4x por duplicado. Las células se incuban con compuesto durante 0.5 hs aproximadamente a 37°C aproximadamente. A continuación, se agregaron 5 µ? de solución madre de IL-2 a Una concentración final de 20 ng/ml. La IL-2 se guarda como una solución madre 4 pg/ml, según las especificaciones del proporcionador, a -20°C aproximadamente en alícuotas y se diluyeron 1:50 con medio de ensayo (hasta 80 ng/ml) justo antes del uso. Los contenidos de las cavidades se mezclan golpeando cuidadosamente los lados de la(s) placa(s) varias veces seguido por incubación a 37°C aproximadamente durante 15 min aproximadamente. El ensayo termina con la adición de 5 µ? de solución amortiguadora de tisis AlphaScreen 5x y agitación sobre un agitador orbital durante 10 min aproximadamente a temperatura ambiente. La mezcla de esferas aceptoras Alphascreen se reconstituye según el protocolo de Perkin Elmér. Se agregaron 30 µ?/cavidad de mezcla de esferas aceptoras Alphascreen reconstituida, se cubrió con papel metalizado, luego se agitó sobre un agitador orbital durante 2 min aproximadamente a velocidad alta y luego durante 2 hs aproximadamente a velocidad baja. La mezcla de esferas donantes se reconstituye según el protocolo para AlphaScreen de Perkin Elmer; se agregaron 12 µ?/cavidad, se cubrió con papel metalizado, luego se agitó durante 2 min aproximadamente a velocidad alta y 2 hs aproximadamente a velocidad baja. Las placas se leen con un lector EnVision según las instrucciones del protocolo para AlphaScreen de Perkin Elmer.
Ensayo celular con IL-6 pSTAT3 en TF-1 Materiales: Células TF-1 (ATCC N° CRL-2003). Medio de cultivo: medio DMEM (Gibco 11960-044) con L-glutamina 2 mM (Gibco 25030-081), HEPES 10 mM (Gibco 15630-080), Pen/Strep 100 ug/ml (Gibco 15140-122), bicarbonato de sodio 1.5 g/l (Gibco 25080-094), piruvato de sodio 1 mM (Gibco 11360-070), FBS inactlvado por calor 10% (Gibco 10437-028) y GM-CSF 2 ng/ml (R&D 215-GM-010). Otros materiales que se usaron en este ensayo son: DMSO (Sigma D2650), placas de dilución de 96 cavidades (polipropileno) (Corning 3365), placas de ensayo de 96 cavidades (blancas, ½ área, 96 cavidades) (Corning 3642), D-PBS (Gibco 14040133), IL-6 (R&D 206-IL/CF-050 (50 pg)), conjunto de elementos de pSTAT3 Alphascreen (Perkin Elmer TGRS3S10K) y conjunto de elementos de proteína A Alphascreen (Perkin Elmer 6760617M) Métodos: Antes del ensayo, las células se cultivan durante 18 hs aproximadamente en el medio de cultivo sin GM-CSF. Los compuestos de prueba o los controles se disolvieron y se diluyeron en serie en D SO 100%. A continuación las soluciones madre de DMSO se diluyeron 1:50 en medio de cultivo celular para crear las soluciones madre de compuesto 4x (que contienen DMSO 2%). Las células se plaquearon, usando una placa Corning blanca de 96 cavidades, de ½ área, a razón de 2 x 107/10 µ?/cavidad en 10 µ? de medio seguido por adición de 5 µ? de la solución madre de compuesto de prueba 4x por duplicado. Las células se incuban con el compuesto durante 0.5 h aproximadamente a 37°C aproximadamente seguido por adición de 5 µ? de IL6 400 ng/ml. La IL-6 se guarda en alícuotas de 10 µg ml usando D-PBS sin endotoxina (BSA 0.1%) a -20°C aproximadamente. Antes del ensayo, la IL-6 se diluye hasta 400 ng/ml en medio de cultivo y se aplica (5 µ?/cavidad) a todas las cavidades, excepto las cavidades de control negativo a las cuales se agregan 5 µ?/cavidad de medio. El contenido de las cavidades se mezcla cuidadosamente golpeando varias veces los lados de la placa. Las placas se incuban a 37°C aproximadamente durante 30 min aproximadamente. Las células se lisan por adición de 5 µ? de solución amortiguadora de lisis celular AlphaScreen 5X a todas las cavidades, se agitan durante 10 min aproximadamente a temperatura ambiente y luego se evalúan. Como alternativa, las placas de ensayo se pueden congelar a -80°C aproximadamente y descongelar luego a temperatura ambiente. La mezcla de esferas aceptoras se reconstituye, usando el conjunto de elementos para ensayo pSTAT3 SureFire (Perkin Elmer N° TGRS3S10K), según las instrucciones del protocolo para AlphaScreen de Perkin Elmer. Se agregan 30 µ? por cavidad, luego se cubre la placa con papel metalizado y se agita sobre un agitador orbital durante 2 min aproximadamente a velocidad alta, luego durante 2 hs aproximadamente a velocidad baja, a temperatura ambiente. La mezcla de esferas donantes se reconstituye según las instrucciones del protocolo para AlphaScreen de Perkin Elmer. Se agregan 12 µ? por cavidad, luego se cubren con papel metalizado y se agitan sobre un agitador orbital durante 2 min aproximadamente a velocidad alta, luego durante 2 hs aproximadamente a velocidad baja a 37°C aproximadamente. Las placas se leen con un lector EnVision según las instrucciones del protocolo para AlphaScreen de Perkin Elmer a temperatura ambiente.
Ensayo celular con pSTAT5 en UT7/EPO Materiales: Se efectúan pasajes de células UT7/EPO con eritropoyetina (EPO), se parten dos veces por semana y se descongela medio de cultivo fresco y se agrega en el momento de la división. Medio de cultivo: medio DMEM (Gibco 11960-044) con L-glutamina 2 mM (Gibco 25030-081), HEPES 10 mM (Gibco 15630-080), Pen/Strep 100 U/ml (Gibco 15140-122), FBS inactivado por calor 10% (Gibco 10437-028), EPO (5 µ?/ml = 7.1 µ? de solución madre 7 pg/ml por mi de medio). Medio de ensayo: DMEM, L-glutamina 2 mM, FBS 5%, HEPES 10 mM. Otros materiales que se usaron en el ensayo son: DMSO (Sigma D2650), placas de dilución de 96 cavidades (polipropileno) (Corning 3365), placas de ensayo de 96 cavidades (blancas, ½ área, 96 cavidades) (Corning 3642), D-PBS (Gibco 14040133), IL-2 (R&D 202-IL-10 (10 mg)), conjunto de elementos de pSTAT5 Alphascreen (Perkin Elmer TGRS5S10K) y conjunto de elementos de proteína A Alphascreen (Perkin Elmer 6760617M) Métodos: Las células se cultivan durante aproximadamente 16 hs sin EPO antes de correr el ensayo. Los compuestos de prueba o los controles se disolvieron y se diluyeron en serie en DMSO 100%. A continuación las soluciones madre de DMSO se diluyeron 1:50 en medio de cultivo celular para crear las soluciones madre de compuesto 4x (que contienen DMSO 2%). Las células se plaquearon, usando una placa Corning blanca de 96 cavidades, de ½ área, a razón de 2 x 105/10 µ?/cavidad en 10 µ? de medio seguido por adición de 5 µ? de la solución madre de compuesto de prueba 4x por duplicado. Las células se incuban con compuesto durante 0.5 hs aproximadamente a 37°C aproximadamente. Después de la incubación, se agregan 5 ?? de EPO para obtener una concentración final de EPO 1 nM. Los contenidos de las cavidades se mezclan golpeando cuidadosamente los lados de |a placa varias veces seguido por incubación a 37°C aproximadamente durante 20 min aproximadamente. Se agregan 5 µ? de solución amortiguadora de lisis AlphaScreen 5x seguido por agitación sobre un agitador orbital durante 10 min aproximadamente a temperatura ambiente. Se agregan 30 µ?/cavidad de esferas aceptoras después de la reconstitución según el protocolo para AlphaScreen de Perkin Elmer, se cubre con papel metalizado y se agita sobre un agitador orbital durante 2 min aproximadamente a velocidad alta, luego durante 2 hs aproximadamente a velocidad baja. Las esferas donantes se reconstituyen según las instrucciones del protocolo para AlphaScreen de Perkin Elmer seguido por adición de 12 µ?/cavidad, se recubren con papel metalizado y se agitan sobre un agitador orbital durante 2 min aproximadamente a velocidad alta y durante 2 hs aproximadamente a velocidad baja. Las placas se leen con un lector EnVision según las instrucciones del protocolo para AlphaScreen de Perkin Elmer.
Desgranulación de células RBL-2H3 inducida por antígeno: Se mantienen células RBL-2H3 en frascos T75 a 37°C aproximadamente y 5% de C02 y se efectúan pasajes cada 3-4 días. Para cosechar las células, se usan 20 mi de PBS para enjuagar el frasco una vez y luego se agregan 3 mi de Tripsina-EDTA y se incuban a 37°C aproximadamente durante 2 min aproximadamente. Las células se transfieren a un tubo con 20 mi de medio, se centrifugan a 1000 RPM a temperatura ambiente durante 5 min aproximadamente y se resuspenden a razón de 1 x 106 células/ml. Las células se sensibilizan por adición de IgÉ de ratón específica de DNP a una concentración final de 0.1 g/ml. Se agregan 50 µ? de células a cada cavidad de una placa de fondo plano de 96 cavidades (50 x 103 células/cavidad) y se incuban durante la noche a 37°C aproximadamente en 5% de C02. Al día siguiente, los compuestos se preparan en 100% de DMSO a 10 mM. Cada compuesto se diluye luego en serie 1:4 seis veces en 100% de DMSO. Cada dilución de compuesto se diluye luego 1:20 y después 1:25, ambas diluciones en solución amortiguadora de Tyrode. Se aspira medio de las placas con células y ¡las células se enjuagan dos veces con 100 µ? de solución amortiguadora de Tyrode (precalentado a 37°C aproximadamente). Se agregan 50 µ? de compuesto diluido en solución amortiguadora de Tyrode a cada cavidad y las placas se incuban durante 15 min aproximadamente a 37°C aproximadamente en 5% de C02. Después se agregan 50 µ? de DNP-HSA 0.2 pg/ml diluido en solución amortiguadora de Tyrode a cada cavidad y las placas se incuban durante 30 min aproximadamente a 37°C aproximadamente en 5% de C02. La concentración final de los diversos componentes en la mezcla de incubación mix son: compuestos 0.002 - 10 µ?, DMSO 0.1% y DNP-HSA 0.1 µg/ml. Como un primer control, se agrega DMSO 0.2% (sin compuesto) en solución amortiguadora de Tyrode a un conjunto de cavidades para determinar la liberación máxima estimulada. Como un segundo control, se agrega solución amortiguadora de Tyrode sin DNP-HSA a un conjunto de cavidades que contienen D SO 0.2% sin compuesto para determinar la liberación No. estimulada. Cada condición (compuestos y controles) se establece en cavidades por triplicado. Al final del período de incubación de 30 min, se transfieren 50 µ? de sobrenadante a una placa de 96 cavidades nueva. El sobrenadante remanente en las placas celulares se aspira y reemplaza con 50 µ? de Tritón X-100 0.1% en solución amortiguadora de Tyrode para lisar las células. Después se agregan 50 µ? de 4-nitrofenil N-acetil- -D-glucosaminida (pNAG) 1,8 m recién preparada a cada cavidad de sobrenadante y lisado celular y las placas se incuban durante 60 min aproximadamente a 37°C aproximadamente en 5% de C02. Se agregan 100 µ? de bicarbonato de sodio 7.5 mg/ml a cada cavidad para detener la reacción. Las placas se leen luego a 405 nm con un lector de placas SpectraMax 250 de Molecular Devices.
Cálculo de los resultados 1) La DO405 basal para las placas obtenida de las cavidades que contienen solución amortiguadora de Tyrode y pNAG (sin sobrenadante o lisado) se resta de la lectura de DO 405 para cada cavidad que contiene sobrenadante o lisado. 2) La liberación para cada cavidad se expresa como el porcentaje de la liberación total para dicha cavidad, donde la liberación total es dos veces la liberación en el sobrenadante más la liberación en el Usado celular. Este cálculo se corrige para el número variable de células en cada cavidad. 3) La respuesta máxima es la media de la respuesta de las cavidades que contienen DNP-HSA pero que No. contienen compuesto. 4) La respuesta mínima es la media de la respuesta de las cavidades que No. contienen DNP-HSA y que No. contienen compuesto. 5) La respuesta en cada cavidad de compuesto se calcula como un porcentaje de la respuesta máxima (expresada como un % del control), donde la respuesta máxima es el 100% y la respuesta mínima es el 0%. 6) Se genera una curva de dosis-respuesta para cada compuesto y la Cl50 de la curva se calcula usando el software Prism GraphPad y análisis de regresión de cuadrados mínimos No. lineal.
La medición aguda in vivo de inhibición de JAK por los compuestos se mide usando la siguiente prueba: Producción de inducida por concanavalina A (Con A) en ratas Lewis El compuesto de prueba se formula en un vehículo inerte (por ejemplo, pero sin limitarse a, hidroxipropilmetilcelulosa 0.5% (Sigma, cat No. H3785)/Tween 80 0.02% (Sigma, cat No. 4780) en agua) a la concentración deseada para obtener dosis en el rango de 0.01-100 mg/kg. Se administraron dosis a ratas Lewis macho de seis semanas (125 g-150 g) (Charles River Laboratories) del compuesto por vía oral, en el tiempo cero (0 min). Después de aproximadamente 30 min, a las ratas se les administraron inyecciones por vía intravenosa (i.v.) con Concanavalina A 10 mg/kg (Con A, AmershamBioscience, cat No. 17-0450-01) disuelta en PBS (Invitrogen, cat No. 14190). Aproximadamente 4 hs después, se les efectúa una punción cardíaca a las ratas y se analiza el plasma por los niveles de IL-2 (conjunto de elementos para ELISA: R&D Systems cat No. R2000) e IFN-? (conjunto de elementos para ELISA: R&D Systems caí No. RIF00).
La medición aguda in vivo de la inhibición de la señalización del receptor Fcy por los compuestos se mide usando la siguiente prueba: Modelo de reacción pasiva de Arthus inversa El día 0 se conformó OVA a una concentración de 17.5 mg/ml, en PBS, con agitación suave hasta formar una solución. Luego se agregó solución Evans Blue 2% (Sigma Aldrich, cat No. E2129) al doble del volumen para obtener una concentración final de 8.75 mg/ml de OVA y colorante Evans Blue 1%. Se descongeló el anticuerpo anti-OVA (Abazyme), concentración de solución madre de 10 mg/ml, y se elaboró una solución 400 µg/^00 µ? con PBS. Los compuestos se conformaron por adición del vehículo, HPMC 0.5% con Tween80 0.02%, y agitación por vortexing durante 15 segundos aproximadamente seguido por homogeneización por un mínimo de 2 min aproximadamente a 28.000 rpm hasta obtener una suspensión particulada fina sin masas de compuesto. Las ratas se pesaron y se les administró dosis de compuesto a una t-máx predeterminada basado en estudios farmacocinéticos. Los animales fueron anestesiados con anestesia general con una mezcla de isoflourano 5% y oxígeno y se afeitaron. Se aplicaron inyecciones en dos sitios, usando una jeringa de insulina de 1/2 mi, por vía i.d., 1 sitio con 100 µ? de 400 Mg/100 µ? de anticuerpo anti-OVA y 1 sitio con 100 µ? de PBS estéril. Cada sitio se marcó con un círculo usando un marcador indeleble para su posterior explante. Justo después de las inyecciones i.d., a los animales se les aplicaron inyecciones con 200 µ? de la mezcla de OVA (10 mg/kg)/Evans Blue por vía i.v., usando una jeringa de insulina de 1/2 mi. Los animales fueron sacrificados aproximadamente cuatro horas después de la inyección, se desangraron mediante punción cardíaca y la sangre se recolectó usando un tubo separador de plasma. Las muestras de sangre se guardaron sobre hielo hasta la centrifugación (dentro de las 2 h aproximadamente después de la recolección). Cada sitio de inyección se removió con un sacabocados para biopsia descartable (Acuderm Acu-Punch Disposable de 12 mM), se cortó en cuatro trozos y se colocaron en un tubo Eppendorf de 2 mi previamente rotulado. Se agregó un mi de DMF a cada tubo de biopsia y se colocó en un bloque de calor durante 24 hs aproximadamente a 50°C aproximadamente. Aproximadamente 24 hs después de la incubación, se agregaron 100 µ? de cada muestra a una placa de fondo pjano de 96 cavidades. Las muestras se leyeron a 620 nm con un lector de placas usando el software Softmax con el fin de medir los niveles de colorante azul de Evan. El valor basal se removió restando la DO del sitio inyectado con PBS de la DO del sitio inyectado con anti-OVA para cada animal individual.
Las muestras de plasma se centrifugaron en una microcentrífuga durante 5 min aproximadamente a 16.1 rcf. Se introdujeron 200 mi de plasma en un tubo Eppendorf de 1.7 mi para medir el nivel de fármaco y los tubos se guardaron a -80°C hasta su evaluación.
Los efectos crónicos ¡n vivo de los compuestos en el modelo de enfermedad de de artritis anc se miden usando la siguiente prueba: Artritis inducida por adyuvante (AIA) en ratas Lewis Se inmunizan ratas Lewis hembra, (6 semanas de edad, 125 g-150 g de peso de Charles River Laboratories) por vía intradérmica (i.d.) en la almohadilla plantar derecha con 100 µ? de una suspensión de aceite mineral (Sigma, cat No. M5905) y que contiene 200 ÍQ de M. tuberculosis, H37RA (Difco, cat No. 231141). La inflamación aparece en la pata posterior contralateral (izquierda) siete días después de la inmunización inicial. Siete días después de la inmunización, el compuesto se formula en un vehículo inerte (por ejemplo, pero sin limitarse a, hidroxipropilmetilcelulosa 0.5% (Sigma, cat No. H3785)/Tween 80 0.02% (Sigma, cat No. 4780) en agua) y se administran dosis por vía oral una o dos veces por día durante al menos 10 días. Se mide el volumen basal de la pata el día 0 usando un pletismógrafo por inmersión (de desplazamiento de agua) (Vgo Basile North America Inc. PA 19473, Modelo No. 7140). Las ratas se anestesian ligeramente con un anestésico por inhalación (isoflurano) y la pata posterior contralateral (izquierda) se sumerge en el pletismógrafo y se registra el volumen de la pata. Las ratas se califican todos los día hasta el día 17 después de la inmunización. El día 17 después de la inmunización, todas las ratas fueron desangradas por punción cardíaca bajo anestesia con isoflurano y se recupera la pata posterior para evaluar el impacto sobre la erosión ósea usando barridos con micro-CT (SCANCO Medical, Southeastern , PA, Modelo No. pCT 40) a un tamaño de voxel de 18 µ?t?, un umbral de 400, un sigma-gauss de 0,8, un support-gauss de 1.0. Se determinó el volumen y la densidad ósea para una sección vertical de 360 pm (corté 200) que abarca la sección tarsal de la pata. La sección de 360 µ?t? se analiza desde la base de los metatarsales hasta la parte superior de la tibia, con el punto de referencia inferior fijo en la unión tibiotalar. Se determina la exposición al fármaco en plasma usando LC/EM. o bien: Artritis inducida por colágeno (CIA) en ratas Lewis El día -1, se pesó colágeno Tipo II (Cll), soluble del septo nasal bovino (Elastin Products, cat No. CN276) para obtener una dosis de 600 g/rata, y se agregó ácido acético 0.01 M (150 µ?, HOAc grado USP, J.T. Baker, orden No. 9522-03 y 250 mi de agua illi Q) para una concentración de 4 mg/ml. El vial se cubrió con papel de aluminio y se colocó sobre un oscilador a aproximadamente 4°C durante la noche. El día 0, se diluyó solución madre de colágeno 1:1 con adyuvante de Freund incompleto (IFA) (Difco labs, cat No. 263910) usando una jeringa de vidrio con cierre Luer Hamilton (SGE Syringe Perfection VWR cat No. 007230), a una concentración final de 2 mg/ml. Se anestesiaron ratas Lewis hembra (Charles River Laboratories) adaptadas por un período de 7 días, que en el momento de la inmunización pesaban 150 g aproximadamente en una cámara de anestesia usando isoflurano (5%) y oxígeno. Una vez que las ratas estaban completamente anestesiadas, fueron transferidas a un cono nasal para mantener la anestesia durante las inyecciones. Se afeitó la base de la cola de las ratas, se inyectaron 300 µ? de colágeno por vía i.d. en el anca de la rata, n = 9 por grupo. Se aplicaron 100 µ? en tres sitios con una jeringa de 500 µ? con cierre Luer y una aguja calibre 27. Las ratas control IFA recibieron inyecciones de la misma manera (n = 6). IFA es una emulsión 1:1 con el ácido acético 0.01 M. Se administró un refuerzo el día 6 del estudio. Ese día no se afeitaron las ratas y las inyecciones se aplicaron de la misma manera que la inmunización. La inflamación aparece en ambas patas posteriores 10 días después de la inmunización inicial. Diez días después de la inmunización, el compuesto se formuló en un vehículo inerte (por ejemplo, pero sin limitarse a, hidroxipropilmetilcelulosa 0.5% (Sigma, cat No. H3785)/Tween 80 0.02% (Sigma, cat No. 4780) en agua) y se administran dosis por vía oral una o dos veces por día durante al menos 9 días. Se midió el volumen basal de la pata el día 7 usando un pletismógrafo por inmersión (de desplazamiento de agua) (Vgo Basile North America Inc. PA 19473, Modelo No. 7140). Las ratas se anestesiaron ligeramente con un anestésico por inhalación (isoflurano) y se sumergieron ambas patas posteriores en el pletismógrafo y se registró el volumen de las patas. Las ratas fueron calificadas 2 a 3 veces por semana hasta el día 18 después de la inmunización. El día 18 después de la inmunización, todas las ratas fueron desangradas por punción cardíaca bajo anestesia con isoflurano y se recuperaron las patas posteriores para evaluar el impacto sobre la erosión ósea usando barridos con micro-CT (SCANCO Medical, Southeastern, PA, Modelo N° pCT 40) a un tamaño de voxel de 18 µ?t?, un umbral de 400, un sigma-gauss de 0,8, un support-gauss de 1.0. Se determinó el volumen y la densidad ósea para una sección vertical de 360 µ?? (corte 200) que abarca la sección tarsal de la pata. La sección de 360 pm se analizó desde la base de los metatarsales hasta la parte superior de la tibia, con el punto de referencia inferior fijo en la unión tibiotalar. Se determinó la exposición al fármaco en plasma usando LC/EM.
Los efectos crónicos in vivo de los compuestos en el modelo de enfermedad de asma se miden usando el: Modelo de asma en rata inducido por OVA Se sensibilizaron ratas Brown Norway hembra (7-9 semanas de vida) los días 0 y 7 con 40 pg de ovalbúmina (OVA) (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) en una solución de alúmina Imject (Pierce, Rockford, IL) 20 mg/ml. Después las ratas fueron sometidas a pruebas por vía intratraqueal los días 19 y 20 con 1.5 pg de OVA en 50 µ? dé PBS. La dosificación con el inhibidor comenzó el día 18 y continuó hasta el día 22. El día 22, a las 48 h después de ia segunda prueba, las ratas fueron sometidas a una prueba de función pulmonar restringida y bajo anestesia. La hipersensibilídad de las vías respiratorias (AHR) se evaluó usando una pletismografía de cuerpo completo. Brevemente, se indujo un plano quirúrgico de anestesia cón una inyección intraperitoneal de ketamina 60 mg/kg y xilazina 5 mg/kg (Henry Schein, Inc., Melville, NY). Se insertó quirúrgicamente una cánula traqueal entre el 3er y 4to anillo traqueal. La respiración espontánea se impidió por inyección intravenosa en la vena yugular de bromuro de pancuronio (Sigma-Aldrich, St Louis, MÓ). Los animales se colocaron en un pletismógrafo de cuerpo completo (Buxco Electronics, Inc., Wilmington , NC) y recibieron ventilación mecánica con 0.2 mi de aire ambiental a 150 respiraciones por minuto con un ventilador de volumen controlado (Harvard Apparatus, Framingham, MA). La presión en el pulmón y el flujo en el pletismógrafo se midieron usando transductores y la resistencia de los pulmones se calculó como la relación de presión/flujo usando el software Biosystem Xa (Buxco Electronics). La resistencia de las vías respiratorias se midió al nivel basal y después de pruebas con metacolina 3, 10 y 30 mg/ml (Sigma Aldrich, St. Louis, MO) administrada con un nebulizador ultrasónico en línea. Una vez completada la prueba de función pulmonar, los pulmones se lavaron 3 veces con 1 mi de PBS estéril. El volumen del primer lavado se centrifugó a 2000 rpm durante 5 min y el sobrenadante se guardó para su posterior análisis. El volumen de los lavados 2 á 3 se agregan al pellet derivado del primer lavado y a continuación se procesó para evaluar el infiltrado celular por citometría de flujo. Se recolectó plasma de sangre extraída de la vena cava y se usó para evaluar las concentraciones de fármaco.
Las enseñanzas de todas las referencias, incluyendo artículos de revistas, patentes y solicitudes de patente publicadas, se incorporan por completo en la presente a modo de referencia.
Los siguientes Ejemplos se ofrecen meramente a efectos ilustrativos y no se deben entender como limitaciones del alcance de la presente invención.
Esquemas Generales de Síntesis Los compuestos de la invención se pueden preparar usando las transformaciones de síntesis que se ilustran en los Esquemas I- XXVIII. Las materias primas se pueden obtener comercialmente, se pueden preparar mediante los métodos que se describen aquí, mediante métodos de la literatura, o por métodos que alguien con experiencia en la técnica de la química orgánica conocerá bien. Los métodos para preparar los compuestos pirrol[2,3-e][1.2,4]triazol[4,3-a]pirazina de la invención se ilustran en el Esquema I. En el Esquema I, Etapa a, se hace reaccionar la 3,5-dibromopirazin-2-amina 1 disponible comercialmente con un (trimetilsilil)acetileno por medio de un acoplamiento cruzado de Sonogashira usando métodos conocidos por un especialista en la técnica (tal como en el Ejemplo No 1 o en WO2006058120A1 ) para dar el alquino 2. El alquino 2 se puede ciclar (Esquema I, Etapa b) para proporcionar la pirrol[2,3-bjpirazina 3 protegida usando métodos conocidos por un especialista en la técnica (tal como en el Ejemplo No 1 o en WO2006058120A1 ). En el Esquema I, Etapa c, se introduce una hidrazina sustituida por reacción con las pirrolpirazinas 3 bajo condiciones de aminación de Buchwald-Hartwig (tal como en el Ejemplo No 1 o en Advanced Synthesis & Catalysis 2004, 346, 1599-1626) para dar las pirrolpirazinas 4. Si R" es tal que las pirrolpirazinas 4 contienen una hidrazida (R"= -C(0)R"'), el material se puede ciclar directamente en las pirroltriazolpirazinas 7 (Esquema I, Etapa h) usando condiciones como las que se describen en los Métodos generales B o ZZZZ o mediante métodos conocidos por un especialista en la técnica (por ejemplo Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 2007, 77(12), 3373-3377 o Journal of Medicinal Chemistry 1990, 33(9), 2326-2334). Si R" es un grupo protector, la desprotección de los compuestos 4 (Esquema I, Etapa d) para obtener las hidrazinilpirrolpirazinas 5 se puede efectuar usando condiciones como las que se describen en los Métodos generales E, E.1, F, F.1, Y o BB; o en Greene, T.W. y Wuts, P.G.M. "Protective Groups in Organic Synthesis, 3a edición", 1999, Wiley-lnterscience. Por ejemplo, se puede eliminar un grupo protector, tal como un grupo f-butoxicarbonilo (Boc), con ácido usando condiciones como las que se describen en el Ejemplo No 1, en los Métodos generales E y E.1, o mediante métodos conocidos por un especialista en la técnica (por ejemplo, los libros de Larock, R.C. "Comprehensive Organic Transformations: A Guide to Functional Group Preparations, 2a edición", 1999, Wiley-VCH o Greéne, T.W. y Wuts, P.G.M. , a los que se hizo referencia previamente). La formación de las hidrazidas 6 a partir de las hidrazinilpirrolpirazinas 5 (Esquema I, Etapa e) se puede llevar a cabo mediante una variedad de métodos conocidos por un especialista en la técnica incluyendo condiciones in situ como las que se describen en el Ejemplo No 1, en el Método General A o mediante métodos de acoplamiento de péptidos estándar tales como los que se pueden consultar en Larock, R.C. al que se hizo referencia previamente. Las hidrazidas 6 se pueden ciclar en las pirroltriazolpirazinas 7 usando condiciones como las que se describen en el Ejemplo No 1, en los Métodos generales B, OO, 00.1 o ZZZZ, o mediante métodos conocidos por un especialista en la técnica (por ejemplo, Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 2007, 77(12), 3373-3377 o Journal of Medicinal Chemistry 1990, 33(9), 2326-34). Se puede efectuar una funcionalización adicional de las hidrazidas 6 o de las pirroltriazolpirazinas 7, si se desea, usando reacciones conocidas por un especialista en la técnica (por ejemplo, Larock, R.C. al que se hizo referencia previamente). Por ejemplo, la formación de amidas, ureas, sulfonamidas, arilaminas, heteroarilaminas, sulfonilureas, aminas sustituidas, escuaramidas o guanidinas se pueden preparar a partir de las pirroltriazolpirazinas 7 que contienen una amina primaria o secundaria (por ejemplo, en los Métodos generales G, H, I, J, J.1, XXX, EEEE, K, K.1, L, DD, QQ, RR, YY, ZZ seguido por AAA, CCC, YYY, X, X.1, TTTT o EÉEEE). Además, la desprotección de las hidrazidas 6 o de las pirroltriazolpirazinas 7 que contienen una amina primaria o secundaria protegida se puede efectuar usando condiciones como las que se describen en Greene, T.W. y Wuts, P.G.M. al que se hizo referencia previamente o en los Métodos generales E, E.1, F, F.1 o BB. Por ejemplo, en el caso que R'" contenga un grupo protector tal como un grupo benciloxicarbonilo (Cbz), se puede eliminar el grupo protector para obtener la amina No. protegida (por ejemplo, en los Métodos generales F, F.1 y DDDDD) y los compuestos desprotegidos 7 se pueden hacer reaccionar luego como se describió previamente. En algunos casos, puede haber reacciones adicionales sin el aislamiento de las pirroltriazolpirazinas 7 iniciales como se describe en el Método General C. Como alternativa, las hidrazinilpirrolpirazinas 5 se pueden ciclar directamente en las pirroltriazolpirazinas 7 (Esquema I, Etapa i) usando condiciones como las que se describen en el Método General BBBBB. La eliminación del grupo protector de sulfonamida de las pirroltriazolpirazinas 7 se puede llevar a cabo usando condiciones como las que se describen en el Ejemplo No 1, en los Métodos generales D, XXX, AAAA, BBBB o CCCC o mediante métodos conocidos por un especialista en la técnica (por ejemplo, en los libros de Larock, R.C. o Greene, T.W. y Wuts, P.G.M. a los que se hizo referencia previamente) para dar las pirroltriazolpirazinas 8 (Esquema I, Etapa g). La funcionalización adicional del grupo R'" en las pirroltriazolpirazinas 8 se puede efectuar, si se desea, usando reacciones conocidas por un especialista en la técnica (por ejemplo, Larock, R.C. al que se hizo referencia previamente). Por ejemplo, se pueden preparar amidas, ureas, sulfonamidas, arilaminas, heteroarilaminas, sulfonilureas, aminas sustituidas, escuaramidas, o guanidinas a partir de las pirroltriazolpirazinas 8 con un R'" que contiene una amina primaria o secundaria (por ejemplo como en los Ejemplos No 8-9 o en los Métodos generales G, H, I, J, J.1, XXX, EEEE, K, K.1, L, DD, QQ, RR, YY, ZZ seguido por AAA, CCC, YYY, X, X.1, TTTT o EEEEE). Además, la desprotección del grupo R'" en las pirroltriazolpirazinas 8 para obtener un compuesto No. protegido se puede efectuar usando condiciones como las que se describen en Greene, T.W. y Wuts, P.G.M. al que se hizo referencia previamente o en los Métodos generales E, E.1, F, F.1, Y o BB. Por ejemplo, se puede eliminar el grupo protector, tal como un grupo benciloxicarbonilo (Cbz), de una amina protegida para obtener la amina No. protegida (por ejemplo en los Métodos generales F, F.1 y DDDDD) y los compuestos desprotegidos 8 se pueden hacer reaccionar luego como se describió previamente. Esquema I Los métodos para preparar los compuestos imidazo[1.2-a]pirrol[2,3-e]pirazinas de la invención se ilustran en el Esquema II. En la Etapa a, la carbonilación mediada por Pd de las pirrolpirazinas 3 permite obtener los ésteres 9 usando métodos conocidos por un especialista en la técnica tales como los que se describen en el Ejemplo No. 3; en la Solicitud de Patente Norteamericana No: US2007293509; o en la Solicitud de Patente Norteamericana No: US2008248537. La hidrólisis de los ésteres 9 permite obtener los ácidos 10 (Esquema II, Etapa b) usando condiciones bien conocidas como las que se describen en el Ejemplo No. 3 o en el Método General Z. Se usa el reordenamiento de Curtius para preparar los carbamatos 11 como se muestra en el Esquema II, Etapa c, usando condiciones como las que se describen en el Ejemplo No. 3 o a las que se hace referencia en Li, J.J. "Ñame Reactions. A Collection of Detailed Reaction Mechanisms, 2a edición", 2003, Springer: Nueva York. La alquilación de los pirrolpirazin-2-ilcarbamatos 11 con 2-halometilcetonas apropiadamente sustituidas (que se pueden preparar mediante métodos tales como los que se describen en los Métodos generales R y LLLL; en Tetrahedron Letters, 1992, (33), 309-312) mediante métodos conocidos por un especialista en la técnica (por ejemplo como en los Métodos generales S o S.1; en Tetrahedron Letters, 2006, 47(34), 6113-6115; o en Journal of Medicinal Chemistry, 2005, 48(14), 4535-4546) permite obtener las pirrolpirazinas 12 (Esquema II, Etapa d). La desprotección de las pirrolpirazinas 12 en las pirrolpirazinas 13 (Esquema II, Et pa e) se lleva a cabo usando condiciones como las que se describen en los Métodos generales E y E.1, o en Greene, T.W. y Wuts, P.G.M. al que se hizo referencia previamente. Como se muestra en el Esquema II, Etapa f, la ciclación de las pirrolpirazinas 13 en las imidazopirrolpirazinas 14 se puede llevar a cabo mediante métodos conocidos por un especialista en la técnica (por ejemplo, como en los Métodos generales T o KKKK; en el Ejemplo No. 3, en European Journal of Medicinal Chemistry, 2001, 36(3), 255-264; o en Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, 2007, 77(5), 1233-1237). La funcionalización adicional del grupo R'" en las imidazopirrolpirazinas 14 se puede efectuar, si se desea, usando reacciones conocidas por un especialista en la técnica (por ejemplo, Larock, R.C. al que se hizo referencia previamente). Por ejemplo, las amidas, ureas, sulfonamidas, arilaminas, heteroarilaminas, sulfonilureas, aminas sustituidas, escuaramidas o guanidinas se pueden preparar a partir de las imidazopirrolpirazinas 14 con un grupo R"' que contiene una amina primaria o secundaria (por ejemplo, como en el Ejemplo No. 3, en el Ejemplo No. 7 o en los Métodos generales G, H, I, J, J.1, XXX, EEEE, K, K.1, L, DD, QQ, RR, YY, ZZ seguido por AAA, CCC, YYY, X, X.1, TTTT o EEEEE). Además, la desprotección del grupo R'" en las imidazopirrolpirazinas 14 para obtener los compuestos desprotegidos 14 se puede efectuar usando condiciones como las que se describen en Greene, T.W. y Wuts, P.G.M. al que se hizo referencia previamente o en los Miétodos generales E, E.1, F, F.1, Y o BB y los compuestos desprotegidos 14 se pueden hacer reaccionar luego como se describió previamente. La eliminación del grupo protector de sulfonamida de las imidazopirrolpirazinas 14 se puede llevar a cabo usando condiciones como las que se describen en el Ejemplo No. 3, en los Métodos generales D, XXX, AAAA, BBBB o CCCC o mediante métodos conocidos por un especialista en la técnica (por ejemplo, en los libros de Larock, R.C. o Greene, T.W. y Wuts, P.G.M. a los que se hizo referencia previamente) para dar las imidazopirrolpirazinas 15 (Esquema II, Etapa g).
Esquema II Los métodos para preparar los compuestos im¡dazo[1.5-a]p¡rrol[2,3-e]pirazinas de la invención se ilustran en el Esquema III. En la Etapa a, la cianación mediada por Pd de los bromuros 3 permite obtener los correspondientes nitrilos 16 (tal como en el Ejemplo No. 5 o en Tetrahedron Letters 1999, 40(47), 8193-8195). La subsiguiente reducción de los nitrilos 16 permite obtener las aminas 17 (Esquema, III, Etapa b) usando métodos conocidos por un especialista en la técnica (tal como en el Ejemplo No. 5 o en Journal of Medicinal Chemistry 2003, 46(4), 461-473). El acoplamiento de las aminas 17 con ácidos proporciona las amidas 18 (Esquema III, Etapa c) usando condiciones bien conocidas tales como las indicadas en el Ejemplo No. 5 o en el Método General H. Cómo se muestra en el Esquema III, Etapa d, la ciclación de las amidas 18 se puede llevar a cabo por conversión en la tioamida seguido por tratamiento con un agente de activación (tal como una sal de mercurio, una sal de plata o una sal de cobre) lo que provee las imidazo[1.5-a]pirrol[2,3-e]pirazinas 19 (tal como en el Ejemplo No. 5 o en el Método General Q). Como alternativa, si R'" contiene un nitrógeno de modo que los compuestos 18 son ureas en lugar de amidas, entonces la ciclación en las imidazo[1.5-a]pirrol[2 ,3-e]pirazinas 19 se puede llevar a cabo usando POCI3 como se describe en el Método General OO o 00.1. La desprotección de la sulfonamida de los compuestos 19 para obtener las imidazo[1.5-a]pirrol[2,3-e]pirazinas 20 (Esquema III, Etapa e) se puede efectuar usando condiciones como las que se describen en Greene, T.W. y Wuts, P.G.M. "Protective Groups in Organic Synthesis, 3a edición", 1999, Wiley-lnterscience, en los Métodos generales D, XXX, AAAA, BBBB o CCCC, o en el Ejemplo No. 5. La funcionalización adicional del grupo R'" en las imidazo[1.5-a]pirrol[2,3-e]pirazinas 19 o en las imidazo[1.5-a]pirrol[2,3-e]pirazinas 20 se puede efectuar, si se desea, usando reacciones conocidas por un especialista en la técnica (por ejemplo, Larock, R.C. al que se hizo referencia previamente). Por ejemplo, la formación de amidas, ureas, sulfonamidas, arilaminas, heteroarilaminas, sulfonilureas, aminas sustituidas, escuaramidas o guanidinas se pueden preparar a partir de los compuestos 19 ó 20 con un grupo R'" que contiene una amina primaria o secundaria (por ejemplo, en el Ejemplo No. 6, o en los Métodos generales G, H, I, J, J.1, XXX, EEEE, K, K.1, L, DD, QQ, RR, YY, ZZ seguido por AAA, CCC, YYY, X, X.1, TTTT o EÉEEE). Además, la desprotección del grupo R'" en los compuestos 19 ó 20 para obtener un compuesto No. protegido se puede efectuar usando condiciones como las que se describen en Greene, T.W. y Wuts, P.G.M. al que se hizo referencia previamente o en los Métodos generales E, E.1, F o F.1 y los compuestos desprotegidos se pueden hacer reaccionar luego como se describió previamente.
Esquema III Los métodos para preparar los compuestos de ácido piperidin-3-carboxílico 4-sustituido de la invención se ilustran en el Esquema IV. En la Etapa a, se pueden saturar por completo los ácidos nicotínicos 4-sustituidos 21 usando métodos que son conocidos por un especialista en la técnica (por ejemplo, en el Método General O o Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters 2004, 14(M), 4453-4459). Las piperidinas 22 resultantes se pueden proteger con un grupo protector de amina adecuado (Esquema IV, Etapa b) tales como los que se describen en Greene, T.W. y Wuts, P.G.M. "Protective Groups ¡n Organic Synthesis, 3a edición", 1999, Wiley-Interscience; Larock, R.C. "Comprehensive Organic Transformations: A Guide to Functional Group Preparations, 2a edición", 1999, Wiley-VCH o en los Métodos generales M, M.1 o N para dar las piperidinas protegidas 23.
Esquema IV En el esquema V se ilustran métodos para preparar los ácidos ciclopentilcarboxílicos sustituidos con amino 32 que pueden usarse en la preparación de los compuestos de la invención. En la Etapa a, los ß-cetoésteres 24 pueden condensarse con un 4-cloroacetoacetato de alquilo 25 para obtener las sales de enolatos de ß-cetoésteres cíclicas 26 (por ejemplo, de acuerdo con el Método General U). La descarboxilación de los compuestos 26 para obtener las cetonas a, ß-insaturadas 27 (esquema V, Etapa b) se lleva a cabo de acuerdo con métodos convencionales conocidos por los expertos en la técnica (por ejemplo, de acuerdo con el Método General V). Como se ilustra en la Etapa c, la hidrogenación de las cetonas a, ß-insaturadas 27 da como resultado las cetonas saturadas 28 (por ejemplo, de acuerdo con los métodos generales W o W.1). La aminación reductiva de las cetonas 28 con dibencilamina permite obtener los compuestos 29 (esquema V, Etapa d), bajo condiciones como las que se describen en los métodos genérales X o X.1. La desbencilación de los compuestos 29 püede efectuarse por hidrogenación , como se describe en el Método General Y, para obtener las aminas 30 (esquema V, Etapa e). Pueden usarse condiciones alternativas para obtener las aminas 30 a partir de las cetonas 28, por ejemplo, como se describe en Larock, R.C., "Comprehensive Organic Transformations: A Guide to Functional Group Preparations, 2a edición", 1999, Wiley-VCH (esquema V, Etapa h). Las aminas 30 pueden someterse a una funcionalización adicional, por medio de reacciones que han de ser conocidas para los expertos en la técnica (por ejemplo, Larock, R.C., mencionado con anterioridad). Por ejemplo, a partir de las aminas 30 pueden prepararse amidas, ureas, sulfonamidas, arilaminas, heteroarilaminas, sulfonilureas, aminas sustituidas, escuaramidas o guanidinas (por ejemplo, de acuerdo con los métodos generales G, H, I, J, J.1, XXX, EEEE, K, K.1, L, DD, QQ, RR, YY, ZZ, seguidos por AAA, CCC, YYY, X, X.1, TTTT o EEEEE), para obtener los compuestos 31 (esquema V, Etapa f). El éster de los compuestos 31 puede hidrolizarse bajo condiciones básicas o ácidas acuosas para obtener los ácidos carboxílicos 32 deseados (esquema V, Etapa g), bajo condiciones como las que se describen en los métodos generales Z o TT ó en Larock, R.C., mencionado con anterioridad. Como alternativa, el éster de los compuestos 29 puede hidrolizarse para obtener los ácidos carboxilicos intermediarios 32' como se ilustra en la Etapa i del esquema V, bajo condiciones básicas o ácidas acuosas (por ejemplo, la preparación No. TT.1).
Esquema V 32' En el esquema VI se ilustran métodos para preparar los compuestos de 1 -ciclope n ti l-6H-p i rrolo[2 ,3-e][1.2,4]triazolo[4,3-ajpirazina sustituida con éter de la invención. Como se ilustra en la Etapa a, la reducción de las cetonas a,ß-insaturadas 27, con la reducción concomitante de la cetona, da como resultado los alcoholes saturados 33 (por ejemplo, bajo las condiciones de reducción quiral que se describen en el ejemplo No. 4). Pueden usarse condiciones alternativas para obtener los alcoholes 33 a partir de las cetonas 28, por medio de una reducción (esquema VI, Etapa b), como se describe en el Método General P o en Larock, R.C., "Comprehensive Organic Transformations: A Guide to Functional Group Preparations, 2a edición", 1999, Wiley-VCH . Los alcoholes 33 pueden hacerse reaccionar para obtener los éteres 34 (esquema VI, Etapa c), bajo condiciones como las que se describen en el Método General EE (para lo cual puede ser necesario primero preparar el 2,2,2-tricloroimidato como se describe en el Método General UU), II, JJ o VV, a lo que sigue el Método General FFF, o de acuerdo con métodos que han de ser conocidos para los expertos en la técnica (por ejemplo, Jet. Lett. 1983, 24(48), 5363, o Greene, T.W., y Wuts, P.G.M., "Protective Groups in Organic Synthesis, 3a edición", 1999, Wiley-Interscience). El éster de los compuestos 34 puede hidrolizarse bajo condiciones básicas o ácidas acuosas para obtener los ácidos carboxílicos 35 deseados (esquema VI, Etapa d), bajo condiciones como las que se describen en el Método General Z o TT o en Larock, R.C., mencionado con anterioridad. La formación de las hidrazidas 36 a partir de las hidrazinilpirrolopirazinas 5 y los ácidos carboxílicos 35 (esquema VI, Etapa e) puede llevase a cabo de acuerdo con una variedad de métodos que han de ser conocidos para los expertos en la técnica, tales como los que se describen en el Método General A, o bien de acuerdo con métodos convencionales para unir péptidos, tales como los qué se proporcionan en Larock, R.C., mencionado con anterioridad. Las hidrazidas 36 pueden ciclarse para obtener las pirrolotriazolopirazinas 37 (esquema VI, Etapa f) bajo condiciones como las que se describen en los métodos generales B o ZZZZ, o bien de acuerdo con métodos que han de ser conocidos para los expertos en la técnica (por ejemplo, Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 2007, 77(12), 3373-3377, o Journal of Medicinal Chemistry 1990, 33(9), 2326-2334). La remoción del grupo protector de sulfonamida de las pirrolotriazolopirazinas 37 puede ponerse en práctica bajo condiciones como las que se describen en los métodos generales D, AAAA, BBBB o CCCC, o bien de acuerdo con métodos que han de ser conocidos para los expertos en la técnica (por ejemplo, los libros de Larock, R.C., o de Greene, T.W., y Wuts, P.G.M., que se mencionaron con anterioridad), para obtener las pirrolotriazolopirazinas 38 como productos finales o intermediarios (esquema VI, Etapa g). Las pirrolotriazolopirazinas 38 pueden protegerse con SEM (esquema VI, Etapa h) bajo condiciones como las que se describen en el Método General KK, o bien como se describe en Greene, T.W., y Wuts, P.G.M., mencionado con anterioridad. Si el grupo R" en las pirrolotriazolopirazinas 37 ó 39 es un grupo protector, puede efectuarse una desprotección para obtener los alcoholes 40 (esquema VI, Etapa k) ó 43 (esquema VI, Etapa i), respectivamente, bajo condiciones como las que se describen en Greene, T.W., y Wuts, P.G.M., mencionado con anterioridad. Por ejemplo, puede retirarse un grupo protector, tai como un grupo p-metoxibencilo (PMB), de un éter de PMB, para obtener el alcohol desprotegido (por ejemplo, de acuerdo con el Método General FF), después de lo cual pueden someterse los compuestos 40 ó 43 a reacciones adicionales. Puede realizarse una reacción de Mitsunobu con los alcoholes 40 ó 43 para preparar los éteres o los ésteres 41 (esquema VI, Etapa I), 44 (esquema VI, Etapa j) ó 45 (esquema VI, Etapa n), con una inversión en el centro de reacción, bajo condiciones como las que se describen en e! Método General II, o bien de acuerdo con métodos que han de ser conocidos para los expertos en la técnica, tales como los que se hallan en Larock, R.C., mencionado con anterioridad. Adicionalmente, los éteres 44 pueden prepararse a partir de los alcoholes 43 por alquilación, bajo condiciones como las qué se describen en el Método General HHHH. Como alternativa, los alcoholes 40 ó 43 pueden convertirse en los carbamatos 41 ó 44 bajo condiciones bien conocidas, tales como las que se describen en los métodos generales OOO, WWW y PPPP. La remoción del grupo protector de sulfonamida de las pirrolotriazolopirazinas 41 puede efectuarse bajo condiciones como las que se describen en los métodos generales D, AAAA, BBBB, CCCC o PPPP, o bien de acuerdo con métodos que han de ser conocidos para los expertos en la técnica (por ejemplo, los libros de Larock, R.C., o de Greene, T.W., y Wuts, P.G.M., que se mencionaron con anterioridad), para obtener las pirrolotriazolopirazinas 42 (esquema VI, Etapa m). El grupo éster de los ésteres 45 puede escindirse para obtener los alcoholes desprotegidos 46 (esquema VI, Etapa o), bajo condiciones como las que se describen en el Método General SS. Los alcoholes 46 pueden someterse a una reacción adicional para formar los éteres 44 (esquema VI, Etapa p), a través de la química de Mitsunobu (como se describe en la Etapa j del el esquema VI) o bajo condiciones como las que se describen en el Método General EE (para lo cual puede ser necesario primero preparar el 2,2,2-tricloroimidato como se describe en el Método General UU) o JJ, o bien de acuerdo con métodos que han de ser conocidos para los expertos en la técnica (por ejemplo, el libro de Larock, R.C., mencionado con anterioridad). El grupo protector SEM de las pirrolotriazolopirazinas 44 puede removerse de acuerdo con métodos como los que se describen en los métodos generales LL y LL.1, o bien bajo condiciones como las que se describen en Greene, T.W., y Wuts, P.G.M., mencionado con anterioridad, para obtener las pirrolotriazolopirazinas 42 (esquema VI, Etapa q).
Esquema VI 36 42 En el esquema VII se ilustra un método alternativo para preparar los compuestos de 1 -ciclopentil-6H-pirrolo[2,3-e][1.2,4]triazolo[4,3-a]pirazina sustituida con éter de la invención. Como se ilustra en la Etapa a, el éster de los compuestos 33 puede hidrolizarse bajo condiciones básicas o ácidas acuosas para obtener los ácidos carboxílicos 47 deseados, bajo condiciones como las que se describen en los métodos generales Z o TT o en Larock, R.C., mencionado con anterioridad. La formación de las lactonas 48 a partir de los ácidos carboxílicos 47 (esquema VII, Etapa b) puede ponerse en práctica de acuerdo con métodos como los que se describen en el ejemplo No. 4 o en el Método General GG, o bien de acuerdo con métodos que han de ser conocidos para los expertos en la técnica, tales como los que se proporcionan en Larock, R.C., mencionado con anterioridad. La formación de las hidrazidas 49 a partir de las hidrazinilpirrolopirazinas 5 y las lactonas 48 (esquema VII, Etapa c) puede ponerse en práctica de acuerdo con una variedad de métodos que han de ser conocidos para los expertos eñ la técnica, tales como los que se describen en el ejemplo No. 4 o en el Método General HH. Los alcoholes 49 pueden hacerse reaccionar para formar los éteres 50 (esquema VII, Etapa d), bajo condiciones como las que se describen en los métodos generales VV (para lo cual puede ser necesario primero preparar el 2,2,2-tricloroimidato como se describe en el Método General UU) o JJ, o bien de acuerdo con métodos que han de ser conocidos para los expertos en la técnica (por ejemplo, Tet. Lett. 1983, 24(48), 5363). Puede realizarse una reacción de Mitsunobu con los alcoholes 49 para preparar los éteres 51 (esquema VII, Etapa f), con una inversión en el centro de reacción, bajo condiciones como las que se describen en el ejemplo No. 4 o en el Método General II, o bien de acuerdo con métodos que han de ser conocidos para los expertos en la técnica, tales como los qué se proporcionan en Larock, R.C., mencionado con anterioridad. Las hidrazidas 50 ó 51 pueden ciclarse para obtener las pirrolotriazolopirazinas 37 (esquema VII, Etapa e) ó 41 (esquema VII, Etapa g), bajo condiciones como las que se describen en el ejemplo No. 4 o en los métodos generales B o ZZZZ, o bien de acuerdo con métodos que han de ser conocidos para los expertos en la técnica (por ejemplo, Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 2007, 77(12), 3373-3377, o Journal of Medicinal Chemistry 1990, 33(9), 2326-2334). 37 ó 41 pueden ser sometidos a una elaboración adicional como se describe en el esquema VI.
Esquema VII En el esquema VIII se ilustran métodos para preparar los compuestos de 1 ,6-dih¡droimidazo[4,5-cf]pirrolo[2,3-/b]piridina de la invención. Como se ilustra en la Etapa a, la 4-cloro-3- iodopiridin-2-amina 52 puede nitrarse para obtener la 4-cloro-3-¡odo-5-nitropiridin-2-amina 53 como se describe en el ejemplo No. 21 o en Larock, R.C., "Comprehensive Organic Transformations: A Guide to Functional Group Preparations, 2a edición", 1999, Wiley-VCH. La 4-cloro-3-iodo-5-nitropiridin-2-amina 53 se hace reaccionar con un (trimetilsilil)acetileno a través de una reacción de unión transversal de Sonogashira, de acuerdo con métodos que han de ser conocidos para los expertos en la técnica (por ejemplo, el ejemplo No. 21 o WO2006058120A ), para obtener la 4-cloro-5-nitro-3-((trimetilsilil)etinil)p¡ridin-2-amina 54 (esquema VIII, Etapa b). Como se ilustra en la Etapa c, la 4-cloro-5-nitro-3-((trimetilsilil)etinil)piridin-2-amina 54 se desprotege para obtener la 4-cloro-3-etin¡l-5-nitropiridin-2-amina 55 como se describe en el ejemplo No. 21, o bien de acuerdo con métodos que han de ser conocidos para los expertos en la técnica (por ejemplo, los libros de Greene, T.W., y Wuts, P.G.M. "Protective Groups in Organic Synthesis, 3a edición", 1999, Wiley-lnterscience, o de Larock, R.C., que se mencionaron con anterioridad). La 4-cloro-3-etinil-5-nitropiridin-2-amina 55 se cicla como se ilustra en la Etapa d, con el objeto de obtener la 4-cloro-5-nitro-1 H-pirrolo[2,3-Jb]piridina 56, de acuerdo con el ejemplo No. 21 o con métodos que han de ser conocidos para los expertos en la técnica (por ejemplo, como se describe en WO2008004117). Como se ilustra en la Etapa e, las 1 H-pirrolo[2,3-<b]pir¡dinas sustituidas con amino 57 se preparan usando métodos que han de ser conocidos para los expertos en ia técnica (por ejemplo, el ejemplo No. 21 o Larock, R.C., mencionado con anterioridad). Las 1 /-/-pirrolo[2,3-í)]piridinas sustituidas con diamino 58 (esquema VIII, Etapa f) se preparan por medio de la reducción de las 1 H-pirrolo[2,3-ó]piridinás que contienen nitro 57, de acuerdo con métodos que han de ser conocidos para los expertos en la técnica (por ejemplo, el ejemplo No. 21, el Método General BBB o Larock, R.C., mencionado con anterioridad). Como se ¡lustra en la Etapa g, las 1 H-pirrolo[2 ,3-¿bjpiridinas sustituidas con diamino 58 pueden ciclarse como se describe en el ejemplo No. 21 o en el Método General DDD para obtener las 1 ,6-dihidroimidazo[4,5-d]pirrolo[2,3-¿)]piridinas 59. Si se lo desea, puede realizarse una funcionalización adicional del grupo R en las 1 ,6-dihidroimidazo[4,5-d]pirrolo[2,3-_í]piridinas 59 mediante reacciones que han de ser conocidas por los expertos en la técnica (por ejemplo, Larock, R.C., mencionado con anterioridad). Por ejemplo, pueden prepararse amidas, ureas, sulfonamidas, arilaminas, heteroarilaminas, sulfonilureas, aminas sustituidas, escuaramidas o guanidinas a partir de la 1,6-dihidroimidazo[4,5-o']pirrolo[2,3-ib3piridina 59, con un grupo R que contiene una amina primaria o secundaria (por ejemplo, los métodos generales G, H, I, J, J.1, XXX, EEEE, K, K.1, L, DD, QQ, R , YY, ZZ, seguidos por AAA, CCC, YYY, X, X.1, TTTT o EEEEE). También, la desprotección del grupo R en las 1,6-dihidroimidazo[4,5-d]pirrolo[2,3-6]piridinas 59 que permite obtener un compuesto desprotegido puede llevarse a cabo bajo condiciones como las que se describen en Greene, T.W., y Wuts, P.G.M., mencionado con anterioridad, o en los métodos generales E, E.1, F, F.1, Y o BB. Por ejemplo, puede removerse un grupo protector como el grupo benciloxicarbonilo (Cbz) de una amina protegida para obtener la amina desprotegida (por ejemplo* de acuerdo con los métodos generales F, F.1 o Y), después de lo cual pueden someterse los compuestos desprotegidos 59 a una reacción adicional como se describió con anterioridad. Como alternativa, los intermediarios 56 ó 57 pueden protegerse con sulfonamida usando reacciones que han de ser conocidas para los expertos en la técnica (por ejemplo, Greene, T.W., y Wuts, P.G.M., mencionado con anterioridad, o el Método General K.1) para obtener las sulfonamidas 134 y 135, respectivamente (esquema VII, etapas h y m). Como se ¡lustra en la Etapa i, las 1 /-/-pirrolo[2,3-b]piridinas sustituidas con amino 135 también pueden prepararse a partir de las 1 -/-pirrolo[2,3-ib]piridinas sustituidas con cloro 134 usando métodos que han de ser conocidos para los expertos en la técnica (por ejemplo, el ejemplo No. 23 o Larock, R.C., mencionado con anterioridad). Las 1 H-pirrolo[2,3-ó]piridinas sustituidas con diamino 136 se preparan por medio de la reducción de las 1 H-pirrolo[2,3-ó]piridinas que contienen nitro 135, de acuerdo con métodos que han de ser conocidos para los expertos en la técnica (por ejemplo, el ejemplo No. 23, el Método General BBB o Larock, R.C., mencionado con anterioridad). Como se ilustra en la Etapa k, las 1 H-pirrolo[2,3- 6]p¡r¡d ¡ñas sustituidas con diamino 136 pueden ciclarse como se describe en el ejemplo No. 23 o en el Método General DDD para obtener las 1 ,6-dihidroimidazo[4,5-d]pirrolo[2,3-/?]piridinas protegidas con sulfonamida 137. La desprotección de la sulfonamida de los compuestos 137 para obtener las 1,6-dihidroimidazo[4,5-d]pirrolo[2,3-£)]piridinas 59 (esquema VIII, Etapa I) puede realizarse bajo condiciones como las que se describen en Greene, T.W., y Wuts, P.G.M. "Protective Groups in Organic Synthesis, 3a edición", 1999, Wiley-lnterscience, enj los métodos generales D, XXX, AAAA, BBBB o CCCC o en el ejemplo No.23.
Esquema VIII En el esquema IX se ilustran métodos para preparar las aminas sustituidas con ciclopentilo 61 que pueden usarse en la preparación de los compuestos de la invención. En la Etapa a, los ácidos carboxílicos 32 son sometidos a una redistribución de Curtius como se describe en el Método General NNN, con el fin de formar los isocianatos 60. La hidrólisis de isocianatos 60 da como resultado las aminas 61 (por ejemplo, de acuerdo con el Método General OOO).
Esquema IX 32 60 61 En el esquema X se ilustran métodos para preparar 4-(6H-pirrolo[2,3-e][1.2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclo-pentanonas y sus derivados. En la Etapa a, las cetonas 28 se protegen como los cetales 62 bajo condiciones como las que se describen en el Método General WW o en Greene, T.W., y Wuts, P.G.M., mencionado con anterioridad. El éster de los compuestos 62 puede hidrolizarse bajo condiciones básicas acuosas para obtener los ácidos carboxílicos 63 deseados (esquema X, Etapa b), bajo condiciones como las que se describen en el Método General Z o en Larock, R.C., mencionado con anterioridad. La formación de las hidrazidas 64 a partir de las hidrazinilpirrolopirazinas 5 y los ácidos carboxílicos 63 (esquema X, Etapa c) puede ponerse en práctica de acuerdo con una variedad de métodos que han de ser conocidos para los expertos en la técnica, tales como los que se describen en el Método General A, o bien de acuerdo con métodos convencionales para unir péptidos, tales como los qué se hallan en Larock, R.C., mencionado con anterioridad. Las hidrazidas 64 pueden ciclarse para obtener las pirrolotriazolopirazinas 65 (esquema X, Etapa d), bajo condiciones como las que se describen en los métodos generales B o ZZZZ, o bien de acuerdo con métodos que han de ser conocidos para los expertos en la técnica (por ejemplo, Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 2007, 77(12), 3373-3377, o Journal of Medicinal Chemistry 1990, 33(9), 2326-2334). Los cetales 65 pueden desprotegerse para obtener las cetonas 66 como se describe en la preparación No. 25 o en Greene, T.W., y Wuts, P.G.M., mencionado con anterioridad. La desprotección del grupo protector de sulfonamida de las pirrolotriazolopirazinas 66 puede ponerse en práctica bajo condiciones como las que se describen en los métodos generales D, AAAA, BBBB o CCCC, o bien de acuerdo con métodos que han de ser conocidos para los expertos en la técnica (por ejemplo, Greene, T.W., y Wuts, P.G.M., mencionado con anterioridad), para obtener las pirrolotriazolopirazinas 67 como productos finales o intermediarios (esquema X, Etapa f). Por ejemplo, en la Etapa g se ilustra la formación de los éteres de oxima 68 a partir de las cetonas 67, que puede ponerse en práctica bajo condiciones como las que se describen en el Método General PPP o en Larock, R.C., mencionado con anterioridad.
Esquema X En el esquema XI se ¡lustran métodos para preparar derivados de ácido acético y acetamida de 4-(6/--pirrolo[2 ,3-e][1.2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentanonas como compuestos de la invención. Como se ilustra en la Etapa a, la reacción de Horner-Wadsworth-Emmons de las cetonas 66 para obtener los alquenos 69 puede ponerse en práctica usando métodos que han de ser conocidos para los expertos en la técnica, tales como los que se describen en el Método Genera! III. La desprotección del grupo protector de sulfonamida de las pirrolotriazolopirazinas 69 puede ponerse en práctica bajo condiciones como las que se describen en los métodos generales D, AAAA, BBBB o CCCC, o bien de acuerdo con métodos que han de ser conocidos para los expertos en la técnica (por ejemplo, Greene, T.W., y Wuts, P.G.M., mencionado con anterioridad), para obtener las pirrolotriazolopirazinas 70 (esquema XI, Etapa b). La hidrogenación de los alquenos 70 como se describe en los métodos generales W o W.1 da como resultado las pirrolotriazolopirazinas 71 (esquema XI, Etapa c). La hidrólisis de los ésteres 71 da como resultado los ácidos 72 (esquema XI, Etapa d) y tiene lugar bajo condiciones conocidas, como las que se describen en el Método General Z. Los ácidos 72 pueden someterse a una reacción adicional para obtener las amidas 73, como se ilustra en la Etapa e, bajo condiciones como las qué se describen en el Método General H.
Esquema XI En el esquema XII se ilustran métodos para preparar 4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -i l)ciclo-pen ti laminas como compuestos de la invención. Como se ilustra en la Etapa a, la aminación reductiva de las cetonas 66 para obtener las amimas 74 puede llevarse a cabo bajo condiciones bien conocidas* tales como las que se describen en los métodos generales X o X.1. La desprotección del grupo protector de sulfonamida de las pirrolotriazolopirazinas 74 puede ponerse en práctica bajo condiciones como las que se describen en los métodos generales D, AAAA, BBBB o CCCC, o bien de acuerdo con métodos que han de ser conocidos para los expertos en la técnica (por ejemplo, Greene, T.W., y Wuts, P.G.M., mencionado con anterioridad), para obtener las pirrolotriazolopirazinas 75 (esquema XII, Etapa b).
Esquema XII En el esquema XIII se ilustran métodos para preparar los compuestos de dihidropirazolo[4,3-o']pirrolo[2,3-5]piridina dé la invención. En la Etapa a, la reacción de una 5-cloro-4-iodo-1-(triisopropilsilil)-l H-pirrolo[2,3-£>]piridina 76 con un aldehido sustituido da como resultado los alcoholes 77 y se efectúa con métodos como los que se describen en el ejemplo No. 29, en el ejemplo No. 30 o en WO2009152133. La preparación de las cetonas 78 (Etapa b) puede efectuarse tratando los alcoholes 77 con un agente oxidante, de acuerdo con métodos que han de ser conocidos para los expertos en la técnica (por ejemplo, el ejemplo No. 29, el ejemplo No. 30 o Larock, R.C., mencionado con anterioridad). Después, las cetonas 78 pueden convertirse eri las hidrazonas 79, con la pérdida del grupo protector TIPS, por medio de una reacción con una hidrazina, bajo condiciones como las que se describen en el ejemplo No. 29, en el ejemplo No. 30 o en el Método General XXXX. El ciclado de las hidrazonas 79 para proporcionar las dihidropirazolo[4,3-d]pirrolo[2,3-?]piridinas 80 puede efectuarse a través de un ciclado intramolecular de Buchwald-Hartwig (por ejemplo, de acuerdo con el Método General XX o con Organic Letters, 2008, 70(18), 4109-4112). Si se lo desea, puede realizarse una funcionalizacion adicional del grupo R'" en las dihidropirazolo[4,3-c/]pirrolo[2,3-£)]p¡r¡dinás 80, por medio de reacciones que han de ser conocidas para los expertos en la técnica (por ejemplo, Larock, R.C., mencionado con anterioridad). Por ejemplo, pueden prepararse amidas, ureas, sulfonamidas, arilaminas, heteroarilaminas, sulfonilureas, aminas sustituidas, escuaramidas o guanidinas a partir de las dihidropirazolo[4,3-d]pirrolo[2,3-ó]piridinas 80, con un grupo R que contiene una amina primaria o secundaria (por ejemplo, de acuerdo con los métodos generales G, H, I, J, J.1, XXX, EEEE, K, K.1, L, DD, QQ, RR, YY, ZZ, seguidos por AAA, CCC, YYY, X, X.1, TTTT o EEEEE). También, la desprotección del grupo R"' en las dihidrop¡razolo[4,3-d]pirrolo[2,3-í)]p¡r¡d¡nas 80 para obtener los compuestos desprotegidos 80 puede llevarse a cabo bajo condiciones como las que se describen en Greene, T.W., y VVuts, P.G.M., mencionado con anterioridad, o en los métodos generales E, E.1, F, F.1, Y o BB, y posteriormente, los compuestos desprotegidos 80 pueden someterse a una reacción adicional como se describió con anterioridad.
Esquema XIII 80 En el esquema XIV se ilustran métodos para preparar los compuestos de 2,3,4.7-tetrahidro-1 /-/-pirrolo[2,3-/7][1 ,6]naftiridina de la invención. En la Etapa a, la o-litiación de la 4-cloro-1-(triisopropilsilil)-l H-pirrolo[2,3--P]piridina 81, seguida por la captura del anión con cloroformiato de etilo, da como resultado el 4-cloro-1-(triisopropilsilil)-1H-pirrolo[2,3-£»]pirid¡na-5-carboxilato de etilo 82 y tiene lugar bajo condiciones como las que se describen en el ejemplo No. 28. La remoción del grupo TIPS de 82 puede ponerse en práctica como se ilustra en la Etapa b para obtener el 4-cloro-1 --pirrolo[2 ,3-¿>]piridina-5-carboxilato dé etilo 83, bajo condiciones bien conocidas en la literatura (por ejemplo, Greene, T.W., y Wuts, P.G. ., mencionado con anterioridad, o bien el ejemplo No. 28). En la Etapa c, los compuestos protegidos con sulfonamida 84 se preparan usando reacciones que han de ser conocidas para los expertos en la técnica (por ejemplo, Greene, T.W., y Wuts, P.G.M., mencionado con anterioridad, o bien el ejemplo No. 28). Como se ilustra en la Etapa d, las 1 H-pirrolo[2,3-¿>]piridinas sustituidas con amino 85 se preparan usando métodos que han de ser conocidos para los expertos en la técnica (por ejemplo, el ejemplo No. 28 o Larock, R.C., mencionado con anterioridad). La reducción de los ásteres 85 para obtener los alcoholes 86 (esquema XIV, Etapa e) puede ponerse en práctica bajo condiciones bien conocidas en la literatura (por ejemplo, el ejemplo No. 28 o Larock, R.C., mencionado con anterioridad). En la Etapa f, los alcoholes 86 se oxidan para proporcionar los aldehidos 87, usando métodos que han de ser conocidos para los expertos en la técnica (por ejemplo, el ejemplo No. 28 o Larock, R.C., mencionado con anterioridad). La reacción de Wittig de los aldehidos 87 con bromuro de ((1.3-dioxolan-2-il)metil)trifenilfosfonio (esquema XIV, Etapa g) da como resultado los alquenos. 88 y tiene lugar bajo condiciones como las que se describen en el ejemplo No. 28. La reducción de los alquenos 88 puede ponerse en práctica bajo condiciones como las que se describen en el ejemplo No. 28 o en los métodos generales W o W.1 (esquema XIV, Etapa h). El ciclado de los aminoacetales 89 para obtener las 2,3,4.7-tetrahidro-1 H-pirrolo[2 ,3-?][1 ,6]naftíridinas protegidas 90 se lleva a cabo bajo condiciones como las que se describen en el ejemplo No. 28 (esquema XIV, Etapa i). La desprotección del grupo protector de sulfonamida de las 2,3,4.7-tetrahidro-1 H-pirrolo[2,3- ,6]naftiridinas 90 puede ponerse en práctica bajo condiciones como las que se describen en los métodos generales D, AAAA, BBBB o CCCC, o bien de acuerdo con métodos que han de ser conocidos para los expertos en la técnica (por ejemplo, Greene, T.W., y Wuts, P.G.M., mencionado con anterioridad), para obtener las 2,3,4.7-tetrahidro-1 H-pirrolo[2,3-/7][1 ,6]naftiridinas 91 (esquema XIV, Etapa j). Si se lo desea, puede realizarse una funcionalización adicional del grupo R' en las 2,3,4.7-tetrahidro-1 /-/-pirrolo[2,3-ft][1 ,6]naftiridinas 91, por medio de reacciones que han de ser conocidas para los expertos en la técnica (por ejemplo, Larock, R.C., mencionado con anterioridad). Por ejemplo, pueden prepararse amidas, ureas, sulfonamidas, arilaminas, heteroarilaminas, sulfonilureas, aminas sustituidas, escuaramidas o guanidinas a partir de las 2,3,4.7-tetrahidro-1 H-pirrolo[2,3- 7][1 ,6]naftiridinas 91, con un grupo R' que contiene una amina primaria o secundaria (por ejemplo, de acuerdo con los métodos generales G, H, I, J, J.1, XXX, EEEE, K, K.1, L, D , QQ, RR, YY, ZZ, seguidos por AAA, CCC, YYY, X, X.1, TTTT o EEEEE). También, la desprotección del grupo R' en las 2,3,4.7-tetrahidro-1 H-pirrolo[2,3-?][1 ,6]naftiridinas 91 para obtener los compuestos desprotegidos 91 puede llevarse a cabo bajo condiciones como las que se describen en Greene, T.W., y Wuts, P.G.M., mencionado con anterioridad, o en los métodos generales E, E.1, F, F.1, Y o BB, después de lo cual los compuestos desprotegidos 91 pueden someterse a una reacción adicional como se describió con anterioridad.
Esquema XIV En el esquema XV se ilustran métodos para preparar los compuestos de imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazina sustituida de la invención. Como se ilustra en la Etapa a, las imidazo|;1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazinas 19 pueden halogenarse bajo condiciones como las que se describen en el Método General mM para obtener las 3-halo-¡mÍdazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazinas 92. Las 3-halo-imidazo[1 ,5-a]pirrolo-[2,3-e]pirazinas 92 pueden ser sometidps a una variedad de reacciones que han de ser conocidas para los expertos en la técnica (por ejemplo, Larock, R.C., mencionado con anterioridad), incluyendo, sin limitaciones, una cianación, como se describe en el Método General HHH (esquema XVI, Etapa c), o reacciones de unión de Suzuki, como las que se describen en los métodos generales UUU o VVV (esquema XV, Etapa b). La desprotección del grupo protector de sulfonamida de las imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazinas 93 puede efectuarse bajo condiciones como las que se describen en los métodos generales D, UUU, AAAA, BBBB o CCCC, o bien de acuerdo con métodos que han de ser conocidos para los expertos en la técnica (por ejemplo, Greene, T.W., y Wuts, P.G.M., mencionado con anterioridad), para obtener las imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-ejpirazinas 94 (esquema XV, Etapa c).
En el esquema XVI se ilustran métodos para preparar los compuestos de pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazoio[4,3-a]pirazina de la invención. Las pirrolotriazolopirazinas 8 pueden halogenarse bajo condiciones como las que se describen en los métodos generales GGG o GGG.1 para obtener las 8-halopirrolotriazolo-pirazinas 95 (esquema XVI, Etapa a). En la Etapa b, las 8-halopirrolotriazolopirazinas 95 pueden protegerse con un grupo SEM bajo condiciones que han de ser conocidas en la literatura, tales como las que se hallan en Greene, T.W., y Wuts, P.G.M., mencionado con anterioridad, o bien de acuerdo con el Método General KK. Las 8-halopirrolotriazolopirazinas protegidas con SEM 96 resultantes pueden someterse a una variedad de reacciones que han de ser conocidas para los expertos en la técnica (por ejemplo, Larock, R.C., mencionado con anterioridad), incluyendo, sin limitaciones, una cianación, como se describe en el Método General HHH (esquema XVI, Etapa c), reacciones de unión de Suzuki, como se describe en la preparación No. 23, la formación de un éster carboxilico, como se describe en el Método General AAAAA, o reacciones de unión de Stille, como se describe en el Método General CCCCC (esquema XVI, Etapa e). Los productos 97 ó 99 resultantes pueden desprotegerse bajo condiciones como las que se describen en el Método General LL, LL.1, o bien de acuerdo con métodos que han de ser conocidos para los expertos en la técnica (por ejemplo, Greene, T.W., y Wuts, P.G.M., mencionado con anterioridad), para obtener las p¡rrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazinas 98 ó 100 (esquema XV, etapas d y f, respectivamente). Adicionalmente, los compuestos 99 y 100 pueden someterse a una funcionalización adicional, si se lo desea, por medio de reacciones que han de ser conocidas para los expertos en la técnica (por ejemplo, Larock, R.C., mencionado con anterioridad). Por ejemplo, para R = C02Et, el compuesto puede hidrolizarse bajo condiciones como las que se describen en el Método General D, y luego puede someterse a la formación de enlaces de amida, como se describe en el Método General H.
Esquema XVI En el esquema XVII se ¡lustran métodos para preparar los ácidos 4-(sulfonamidometil)ciclopentancarboxílicos sustituidos 110, que pueden usarse en la preparación de compuestos de la invención. En la Etapa a, los biciclo[2.2.1 ]hept-2-enos 5-sustituidos 101 se oxidan para obtener los ácidos dicarboxílicos 102 bajo condiciones conocidas, por ejemplo, las que se describen en la preparación No. 11, en Bioorganic & Medicinal Chemistry, 2007, 15, 7581, o en Journal of Organic Chemistry, 1993, 58, 4745. La formación de los mono-esteres 103 se lleva a cabo a través del anhídrido cíclico, conio se describe en la preparación No. 11 (esquema XVII, Etapa b). Los ésteres de t-butilo 104 se preparan en la Etapa c, bajo condiciones convencionales, tales como las que se describen en la preparación No. 11 o en Larock, R.C., mencionado con anterioridad. La reducción del éster de metilo de los compuestos 104 para obtener los alcoholes 105 se efectúa usando condiciones bien conocidas, tales como las que se proporcionan en la preparación No. 21 (esquema XVII, Etapa d). Los mesilatos 106 se preparan como se describe en la preparación No. 21, o bien de acuerdo con métodos que han de ser conocidos para los expertos en la técnica (esquema XVII, Etapa e). Como se ilustra en la Etapa f, los mesilatos 106 pueden usarse para formar las azidas 107 bajo condiciones bien conocidas, tales como las que se describen en la preparación No. 21 o en Larock, R.C., mencionado con anterioridad (esquema XVII, Etapa f). La reducción de las azidas 107 para obtener las aminas 108 es una transformación convencional que puede ponerse en práctica como se describe en la preparación No. 21 o bajo condiciones como las que se describen en el Método General TTT o en Larock, R.C., mencionado con anterioridad (esquema XVII, Etapa g). En la Etapa h se ilustra la formación de las sulfonamidas 109 a partir de las aminas 108, que se lleva a cabo como se describe en los métodos generales K o K.1, o bien de acuerdo con métodos que han de ser conocidos para los expertos en la técnica (por ejemplo, Greene, T.W., y Wuts, P.G.M., mencionado con anterioridad). La escisión acida de los ésteres de f-butilo 109 para obtener los ácidos 4- (sulfonamidometil)ciclopentancarboxílicos 110 (esquema XVII, Etapa i) puede realizarse bajo las condiciones que se describen en el Método General QQQ, o bien de acuerdo con métodos que han de ser conocidos para los expertos en la técnica (por ejemplo, los libros de Larock, R.C., o de Greene, T.W., y Wüts, P.G.M., que se mencionaron con anterioridad).
Esquema XVII En el esquema XVIII se ilustran métodos para preparar los ácidos 4-((dibencilamino)metil)-2-sustituido-ciclopentancarboxílicos 115, que pueden usarse en la preparación de compuestos de la invención. La reducción del éster de metilo de los compuestos 103 para obtener los alcoholes 111 se lleva a cabo bajo condiciones bien conocidas^ tales como las que se hallan en la preparación No. 22 o en Larock, R.C., mencionado con anterioridad (esquema XVIII, Etapa a). En la Etapa b se ilustra la formación de los ésteres 112, que se lleva a cabo como se describe en la preparación No. 22 o en Larock, R.C., mencionado con anterioridad. En la Etapa c, los alcoholes 112 se oxidan para obtener los aldehidos 113, bajo condiciones conocidas como las que se describen en la preparación No. 22 o en Larock, R.C., mencionado con anterioridad. La aminación reductiva de los aldehidos 113 bajo condiciones como las que se describen en los métodos generales X o X.1 da como resultado las aminas 114 (esquema XVIII, Etapa d). En la Etapa e, los ésteres 114 se hidrolizan para obtener los ácidos ciclopen ta ncarboxí lieos 4-((dibencilamino)metil)-2-sustituidos 115, bajo condiciones como las que se describen en los métodos generales Z o TT o que han de ser conocidas para los expertos en la técnica (por ejemplo, los libros de Larock, R.C., o de Greene, T.W., y Wuts, P.G.M., que se mencionaron con anterioridad).
Esquema XVIII En el esquema XIX se ilustran métodos para preparar los compuestos de 3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-amina de la invención. La alquilación de los pirrolopirazin-2-ilcarbamátos 11 con 2-bromoacetato de f-butilo, de acuerdo con métodos que han de ser conocidos para los expertos en la técnica (por ejemplo, de acuerdo con los métodos generales S o S.1), da como resultado las pirrolopirazinas 116 (esquema XIX, Etapa a). La desprotección doble de las pirrolopirazinas 116 para obtener los ácidos aminoacéticos 117 puede ponerse en práctica bajo condiciones como las que se describen en los métodos generales E, E.1 o QQQ (esquema XIX, Etapa b). La unión de los ácidos 117 con aminas proporciona las amidas 118 (esquema XIX, Etapa c) y tiene lugar bajo condiciones bien conocidas, tales como las que se proporcionan en el Método General H o en Larock, R.C., mencionado con anterioridad. Como se ilustra en la Etapa d, el ciclado de las amidas 118 para obtener las imidazopirrolopirazin-8-aminas 119 puede llevarse a cabo bajo condiciones como las que se describen en los métodos generales OO u 00.1. Si se lo desea, puede realizarse una funcionalización adicional del grupo R' o R" en las imidazopirrolopirazin-8-aminas 119, por medio de reacciones que han de ser conocidas para los expertos en la técnica (por ejemplo, Larock, R.C., mencionado con anterioridad). Por ejemplo, pueden prepararse amidas, ureas, sulfonamidas, arilaminas, heteroarilaminas, sulfonilureas, aminas sustituidas, escuaramidas o guanidinas a partir de las imidazopirrolopirazin-8-aminas 119, con un grupo R' o R" que contiene una amina primaria o secundaria (por ejemplo, de acuerdo con los métodos generales G, H, I, J, J.1, XXX, EEEE, K, K.1, L, DD, QQ, RR, YY, ZZ, seguidos por AAA, CCC, YYY, X, X.1, TTTT o EEEÉE). También, la desprotección del grupo R' o R" en las imidazopirrolopirazin-8-aminas 119 para obtener los compuestos desprotegidos 119 puede llevarse a cabo bajo condiciones como las que se describen en Greene, T.W., y Wuts, P.G.M., mencionado con anterioridad, o en los métodos generales E, E.1, F, F.1, Y o BB, después de lo cual los compuestos desproteg jdos 119 pueden ser sometidos a reacciones adicionales como se describió con anterioridad. La remoción del grupo protector de sulfonamida de las imidazopirrolopirazin-8-aminas 119 puede realizarse bajo condiciones como las que se describen en los métodos generales D, XXX, AAAA, BBBB o CCCC, o bien de acuerdo con métodos que han de ser conocidos para los expertos en la técnica (por ejemplo, los libros de Larock, R.C., o de Greene, T.W., y Wuts, P.G.M., que se mencionaron con anterioridad), para obtener las imidazopirrolopirazin-8-aminas 120 (esquema XIX, Etapa e).
Esquema XIX En el esquema XX se ilustran métodos para preparar los ácidos pirrolidin-3-carboxílicos 125 que pueden usarse en la preparación de compuestos de la invención. En la Etapa a, los alquinos 121 se reducen para obtener los alquenos 122 como se describe en el Método General RRR, o bien de acuerdo con métodos que han de ser conocidos para los expertos en la técnica (por ejemplo, Larock, R.C., mencionado con anterioridad). La cicloadición .3-dipolar de los alquenos 122 y la 1-metoxi-/V-((trimetilsilil)metil)metanamina / -sustituida 123 que permite obtener las pirrolidinas 124 (esquema XX, Etapa b) puede efectuarse de acuerdo con métodos que han de ser conocidos para los expertos en la técnica (por ejemplo, de acuerdo con el Método General SSS o con Journal of Medicinal Chemistry, 2009, 52(24), 7946-7949). El éster de los compuestos 124 puede hidrolizarse bajo condiciones básicas o ácidas acuosas para obtener los ácidos carboxílicos 125 (esquema XX, Etapa c), bajo condiciones como las que se describen en los métodos generales Z o TT o en Larock, R.C., mencionado con anterioridad.
Esquema XX En el esquema XXI se ¡lustran métodos para preparar los compuestos de 1 -ciclopentil-6/-/- pirro lo[2,3-e] [1,2, 4]triazolo [4,3-ajpirazina sustituida con sulfona de la invención. Como se ilustra en la Etapa a, la reacción de Mitsunobu de los alcoholes 46 con los tioles apropiados permite obtener los sulfuros 126 y tiene lugar bajo condiciones como las que se describen en el Método General MMM, o bien de acuerdo con métodos que han de ser conocidos para los expertos en la técnica (por ejemplo, Larock, R.C., mencionado con anterioridad). La oxidación de los sulfuros 126 para obtener las sulfonas 127 (esquema XXI, Etapa b) se lleva a cabo como se describe en el Método General LLL, o bien de acuerdo con métodos que han de ser conocidos para los expertos en la técnica (por ejemplo, Larock, R.C., mencionado con anterioridad). El grupo protector SEM de las pirrolotriazolopirazinas 127 puede removerse con métodos como los que se describen en los métodos generales LL y LL.1, o bien bajo condiciones como las que se describen en Greene, T.W., y Wuts, P.G.M., mencionado con anterioridad, para obtener las pirrolotriazolopirazinas 128 (esquema XXI, Etapa c).
Esquema XXI En el esquema XXII se ilustran métodos para preparar los cloruros de sulfonilo 133 que pueden usarse en la preparación de compuestos de la invención. En la Etapa a, los sulfonatos 130 se preparan a partir de los cloruros de sulfonilo 129 bajo condiciones de reacción conocidas, tales como las que se describen en la Etapa A de la preparación No. 6, en WO2007014011 o en WO2009018238. A los sulfonatos 130 se les agrega un sustituyente adicional para obtener los sulfonatos 131, por medio de una alquilación, como se describe en el Método Generai KK, en WO2007014011 o en WO2009018238 (esquema XXII, Etapa b). En la Etapa c, los sulfonatos de potasio 132 se preparan a partir de los sulfonatos 131, con cianato de potasio acuoso, bajo condiciones como las que se hallan en el Método General JJJ, en WO2007014011 o en WO2009018238. Los sulfonatos de potasio 132 se convierten en los cloruros de sulfonilo 133 (esquema XXII, Etapa d) usando cloruro de tionilo, como se describe en el Método General EEE, en WO2007014011 o en WO2009018238.
Esquema XXII 129 130 131 32 133 En el esquema XXIII se ilustran métodos para preparar los compuestos de imidazopirrolo[2,3-e]pirazina de la invención. Las imidazopirrolopirazinas 15 [T = N, U = CH] ó 20 [T= CH, U = N] pueden halogenarse bajo condiciones como las que se describen en los métodos generales GGG o GGG.1 para obtener las 8-haloimidazopirrolopirazinas 138 (esquema XXIII, Etapa a). En la Etapa b, las 8-haloimidazopirrolopirazinas 138 pueden protegerse con un grupo SEM bajo condiciones conocidas en la literatura, tales como las que se proporcionan en Greene, T.W., y Wuts, P.G.M., mencionado con anterioridad, o bien de acuerdo con el Método General KK. Las 8-halo¡midazopirrolopirazinas protegidas con SEM 139 resultantes pueden someterse a una variedad de reacciones que han de ser conocidas para los expertos en la técnica (por ejemplo, Larock, R.C., mencionado con anterioridad), incluyendo, sin limitaciones, una cianación, como se describé en el Método General HHH (esquema XXIII, Etapa c), reacciones de unión de Suzuki, como las que se describen en el Método General VVV, o reacciones de unión de Stille, como se describe en el Método General CCCCC (esquema XXIII, Etapa e). Los productos 140 ó 142 resultantes pueden desprotegerse bajo condiciones como las que se describen en los métodos generales LL y LL.i, o bien de acuerdo con métodos que han de ser conocidos para los expertos en la técnica (por ejemplo, Greene, T.W., y Wuts, P.G.M., mencionado con anterioridad), para obtener las imidazopirrolo[2,3-e]pirazinas 141 ó 143 (esquema XXIII, etapas d y f, respectivamente).
Esquema XXIII En el esquema XXIV se ¡lustran métodos para preparar compuestos de la invención a partir de un intermediario de cetona común. Como se ilustra en la Etapa a del esquema XXIV, las cetónas 144 pueden hacerse reaccionar con un reactivo de alquil-litio o de Grignard para obtener los alcoholes 145, bajo condiciones que han de ser conocidas para los expertos en la técnica (por ejemplo, Larock, R.C., mencionado con anterioridad, o bien de acuerdo con el Método General ZZZ). Como alternativa, las cetónas 144 pueden someterse a una reacción de Horner-Wadsworth-Emmons con un reactivo como el 2-(dietoxifosforil)acetato de etilo (R'" = C02Et) o el cianometilfosfonato de dietilo (R'M = CN), como se describé en el Método General III, para obtener los alquenos 146 (esquema XXIV, Etapa b). Los alquenos 146 pueden hidrogenarse para obtener los alcanos 147 bajo condiciones bien conocidas, tales como las que se describen en los métodos generales W y W.1 (esquema XXIV, Etapa c). El grupo R'" puede someterse a una funcionalización adicional usando una variedad de reacciones, tales como las que se describen en Larock, R.C., mencionado con anterioridad. Por ejemplo, para R'" = C02Et, los alcoholes 148 pueden prepararse como se describe en el Método General ZZZ (esquema XXIV, Etapa d), o los oxadiazoles 149 pueden prepararse como se describe en el Método General DDDD (esquema XXIV, Etapa e). Como se ilustra en la Etapa f del esquema XXIV, las cetonas 144 también pueden reducirse para obtener los alcoholes 150, como se describe en el Método General P o en Larock, R.C., mencionado con anterioridad. Los mesilatos 151 se forman a partir de los alcoholes 150, bajo condiciones que han de ser conocidas para los expertos en la técnica, tales como las que se describen en el Método General lili (esquema XXIV, Etapa g), y pueden hacerse reaccionar con una variedad de nucleófilos (Nu), como se describe en el Método General JJJJ (esquema XXIV, Etapa h), para obtener los compuestos 152. Dependiendo del nucleófilo usado, puede realizarse una funcionalización adicional para obtener los compuestos 153 (esquema XXIV, Etapa i). Estas funcionalizaciones pueden realizarse con métodos como los que se describen en Larock, R.C., mencionado con anterioridad, o bien de acuerdo con los métodos generales QQQQ o UUUU.
Esquema XXIV 150 151 152 153 En el esquema XXV se ¡lustran métodos para preparar los compuestos de 1 ,6-dihidroimidazo[4,5-d]p¡rrolo[2,3-b]piridin-2-amina de la invención. Las diaminas 136 (esquema XVIII) pueden hacerse reaccionar con bromuro de cianógeno como se describe en el Método General RRRR (esquema XXV, Etapa a). Las 1,6-dihidro¡midazo[4,5-d]pirrolo[2,3-b]piridin-2-aminas 154 resultantes pueden someterse a una funcionalización adicional, si sé lo desea, por medio de reacciones que han de ser conocidas para los expertos en la técnica (ver, por ejemplo, Larock, R.C., mencionado con anterioridad), para obtener las 1,6-dihidroimidazo[4,5-d]pirrolo[2,3-b]piridin-2-aminas 155 (esquema XXV, Etapa b). La remoción del grupo protector de sulfonamida de las 1 ,6-dihidroimidazo[4,5-d]pirrolo[2,3-b]piridin-2-am¡nás 155 ó 154 puede realizarse bajo condiciones como las que se describen en los métodos generales D, AAAA, BBBB o CCCC, o bien de acuerdo con métodos que han de ser conocidos para los expertos en la técnica (por ejemplo, los libros de Larock, R.C., o de Greene, T.W., y Wuts, P.G.M., que se mencionaron con anterioridad), para obtener las 1 ,6-dihidroimidazó[4,5-d]pirrolo[2,3-b]piridin-2-aminas 156 ó 157, respectivamente (esquema XXV, etapas c y d).
Esquema XXV 157 En el esquema XXV se ilustran métodos para preparar los compuestos de 1 ,6-dihidropirrolo[2,3-b][1 ,2.3]triazolo[4,5-d]pi rid ina de la invención. Las diaminas 136 (esquema XVIII) pueden hacerse reaccionar con nitrito de sodio como se describe en el Método General SSSS, con el fin de obtener las 1,6-d¡hidropirrolo[2,3-b][1,2.3]triazolo[4,5-d]p¡ridinas 158 (esquema XXVI, Etapa a). La remoción del grupo protector de sulfonamida de las 1 ,6-dihidroimidazo[4,5-d]pirrolo[2,3-b]p¡ridin-2-aminas 158 puede efectuarse bajo condiciones como las que se describen en los métodos generales D, AAAA, BBBB o CCCC, o bien de acuerdo con métodos que han de ser conocidos para los expertos en la técnica (por ejemplo, los libros de Larock, R.C., o de Greene, T.W., y Wuts, P.G.M., que se mencionaron con anterioridad), para obtener las 1 ,6-dihidropirrolo[2,3-b][1 ,2.3]triazolo[4,5-d]piridinas 159 (esquema XXV, Etapa b).
Esquema XXVI 136 158 159 En el esquema XXVII se ilustran métodos alternativos para preparar el intermediario de cetona que se usa para preparar ios compuestos de dihidropirazolo[4,3-c(]pirrolo[2,3-i)]piridina de la invención. En la Etapa a, los ácidos carboxílicos 160 son convertidos en los cloruros ácidos 161 correspondientes bajo condiciones que han de ser bien conocidas para los expertos en la técnica, tales como las que se describen en el Método General WWWW. Los cloruros ácidos 161 se hacen reaccionar con la 5-cldro-1-(triisopropilsilil)-1/-/-pirrolo[2,3-b]piridina 162 como se describe en el Método General VVVV (esquema XXVII, Etapa b), de modo de obtener las cetonas 78, que pueden ser sometidas a una reacción adicional como se describe en el esquema XIII.
Esquema XXVII En el esquema XXVIII se ilustran métodos alternativos para preparar los compuestos de imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2 ,3-e]pirazina de la invención. En la Etapa a, los ácidos carboxílicos 160 se convierten en las ilidas de sulfoxonio 163 correspondientes bajo condiciones como las que se describen en el Método General FFFFF o en J. Org. Chem. 2004, 69, 1629. Las pirrolopirazin-2-aminas 164 pueden prepararse a partir de los pirrolopirazih-2-ilcarbamatos 11 (esquema II) bajo condiciones que han de ser conocidas para los expertos en la técnica, tales como las que se describen en el Método General E o en Greene, T.W., y Wuts, P.G.M., mencionado con anterioridad (esquema XXVIII, Etapa b). Las ilidas de sulfoxonio 163 se hacen reaccionar con las pirrolopirazin-2-aminas 164 bajo condiciones como las que se describen en el Método General GGGGG o en Org. Lett. 2009, 11, 3566, con el fin de obtener las pirrolopirazinas 13, que pueden someterse a una reacción adicional como se describe en el esquema II (esquema XXVIII, Etapa c). Como alternativa, como se ilustra en la Etapa d, las pirrolopirazin-2-aminas 164 pueden hacerse reaccionar con un a-haloaldehído bajo condiciones como las que se proporcionan en el Método General YYYY, de modo de obtener las imidazopirrolopirazinas 14, que pueden someterse a una reacción adicional como se describe en el esquema Esquema XXVIII 14 Si se lo desea, puede realizarse la separación quiral de cualquiera de los compuestos quirales en los esquemas I -XXVI 11 de acuerdo con métodos que han de ser conocidos para los expertos en la técnica, tales como la HPLC preparativa quiral, la SFC quiral (por ejemplo, de acuerdo con el Método General AA) o la cristalización de las sales diastereoméricas, como se describe en el ejemplo No. 5. Si se lo desea, puede realizarse una funcionalización adicional de cualquiera de los grupos R anteriores (por ejemplo R, R", R"\ R"" y R ), usando reacciones que han de ser conocidas para los expertos eh la técnica (por ejemplo, Larock, R.C., mencionado con anterioridad). Por ejemplo, pueden prepararse amidas, ureas, sulfonamidas, arilaminas, heteroarilaminas, sulfonilureas, aminas sustituidas, escuaramidas o guanidinas con un grupo R que contiene una amina primaria o secundaria (por ejemplo, de acuerdo con los métodos generales G, H, I, J, J.1, XXX, EEEE, K, K.1, L, DD, QQ, RR, YY, ZZ, seguidos por AAA, CCC, YYY, X, X.1, TTTT o EEEEE). También, la desprotección de un grupo R para obtener los compuestos desprotegidos puede llevarse a cabo bajo condiciones como las que se describen en Greene, T.W., y Wuts, P.G.M., mencionado con anterioridad, o en los métodos generales E, E.1, F, F.1, Y o BB, después de lo cual los compuestos desprotegidos pueden someterse a una reacción adicional como se describió con anterioridad.
Métodos Generales y Ejemplos Los esquemas generales de síntesis que se usaron para construir la mayoría de los compuestos que se describen en ésta solicitud se proporcionan en los esquemas 1-111 a continuación. Estos esquemas se proporcionan solamente con fines ilustrativos, y No. han de ser interpretados como límites para el alcance de la invención .
Esquema 1. Formación de una hidrazida a partir de un ácido carboxílico (Métodos Generales A) Esquema 2. Ciclación de una hidrazida (Métodos Generales B) Esquema 3. Ciclación de una hidrazida con pérdida del de grupo protector Boc (Métodos Generales C) Esquema 4. Hidrólisis de una sulfonamida (Métodos Generales D) Esquema 5. División ácida de una amina protegida con Boc (Métodos Generales E and E.1) Esquema 6. Desprotección de una amina protegida con Cbz utilizando HBr en AcOH (Métodos Generales F and F.1) Esquema 7. Formación de una acetamida (Métodos Generales g) Esquema 8. Formación de una amida a partir de un ácido carboxílico y una amina (Métodos Generales H) Esquema 9. Formación de una urea a partir de una amina y un cloruro de carbamoílo (Métodos Generales I) Esquema 10. Formación de una urea (X = O) o tiourea (X = S) utilizando CDI o tiocarbonil-di ¡midazol, respectivamente (Métodos Generales J and J.1) Esquema 11. Formación de una sulfonamida a partir de una amina (Métodos Generales K and K.1) Esquema 12. Desplazamiento de un haluro a partir de arilo o heteroariio con una amina (Métodos Generales L) Esquema 13. Protección mediante Boc de una amina (Métodos Generales M y M.1 ) Esquema 14. Protección mediante Cbz de una amina (Métodos Generales N) Esquema 15. Reducción de una piridina (Métodos Generales O) Esquema 16. Reducción de un carbonilo a un alcohol (Métodos Generales P) , R' =H Esquema 17. Ciclación de una amida utilizando un reactivo ditiafosfetano (Métodos Generales Q) Esquema 18. Formación de una cetona de bromometilo a partir de un ácido (Métodos Generales R) Esquema 19. /V-alquilación utilizando un haluro a partir de alquilo, a-halocetona, o a-haloamida (Métodos Generales S y S.1) Esquema 20. Ciclación de a cetona utilizando a ditiafosfetano reactivo (Métodos Generales T) Esquema 21. Condensación de Knoevenagel para formar un ciclopentadieno sustituido (Métodos Generales U) Esquema 22. Descarboxilación de un enolato de a-cetoéster (Métodos Generales V) Esquema 23. Hidrogenación de un alqueno (Métodos Generales W y W.1) uema 24. Aminación reductiva de una cetona o aldehido = H) (Métodos Generales X y X.1) Esquema 25. protegida con bencilo o Cbz (Métodos Generales Y) — Esquema 26. Hidrólisis básica de un éster a un ácido carboxílico (Métodos Esquema 27: Separación de HPLC preparativa quiral de estereoisomeros (Métodos Generales AA) Esquema 28: Hidrólisis ácida de una amina protegida con acetilo (Métodos Generales BB) Esquema 29: Formación de un cloruro de sulfamoilo (Métodos Generales CC) Esquema 30: Formación de una sulfonilurea (Métodos Generales DD) Esquema 31: Formación de éter a partir de un derivado de tricloroacetimidato (Métodos Generales EE) Esquema 32: Desprotección de un alcohol protegido con PElíiB-(Métodos Generales FF) Esquema 33: Formación de una lactona (Métodos Generales GG) Esquema 34: Apertura de una lactona con una amina o hidracina (Métodos Generales HH) Esquema 35: Reacción de itsunobu de un alcohol (Métodos Generales II) Esquema 36: Desplazamiento de un haluro con un alcohol (Métodos Generales JJ) Esquema 37: Protección mediante SEM de un nitrógeno (Métodos Generales KK) Esquema 38: Desprotección mediante SEM de un nitrógeno (Métodos Generales LL and LL.1) Esquema 39: Halogenación de un imidazol (Métodos Generales MM) Esquema 40: Formación de una amida a partir de un ácido carboxílico y una amina con pérdida de un grupo protector de sulfonamida (Métodos Generales NN) Esquema 41: Ciclación con POCI3 (Métodos Generales OO and Esquema 42: Reacción de una amina con un ácido arilboronico (Métodos Generales PP) Esquema 43: Formación de una urea a partir de una amina y un isocianato (Métodos Generales QQ) Esquema 44: Formación de una urea a partir de una amina, una amina de heteroarilo y cloroformiato de fenilo (Métodos Generales RR) Esquema 45: Hidrólisis de un éster a un alcohol (Métodos Generales SS) Esquema 46: Conversión mediada por ácido de un éster a un ácido carboxílico (Métodos Generales TT) Esquema 47: Formación de un 2,2,2-tricloroacetimidato (Métodos Generales UU) Esquema 48: Formación de un alcohol protegido con TBDW1S (Métodos Generales VV) FT°H ^OTBDMS Esquema 49: Formación de un cetal (Métodos Generales WW) Esquema 50: Acoplamiento catalizado por paladio de una hidrazona (Métodos Generales XX) Esquema 51: Adición de Michael de una amina a una a, ß-sulfonamida insaturada (Métodos Generales YY) Esquema 52: Formación de una sulfonourea de oxazolidinona (Métodos Generales ZZ) Esquema 53: Formación de una sulfonilurea a partir de una sulfonourea de oxazolidinona (Métodos Generales AAA) Esquema 54: Reducción de un grupo nitro (Métodos Generales BBB) Esquema 55: Formación de una amida (Métodos Generales CCC) Esquema 56: Ciclación para formar un imidazol fusionado (Métodos Generales DDD) R'" = Ho R""CO- Esquema 57: Formación de un cloruro de suifonilo (Métodos Generales EEE) Esquema 58: Generación de un éter bajo condiciones reductivas (Métodos Generales FFF) R-OTBDMS FT R' Esquema 59: Yodación, cloración o bromación de un heterociclo o halogenación de un heterociclo (Métodos Generales GGG y GGG.1) Esquema 60: Cianuración de un heterociclo (Métodos Generales HHH) Esquema 61: Reacción de Horner-Wadsworth-Emmons de una cetona (Métodos Generales III) Esquema 62: Formación de un sulfonato de potasio (Métodos Generales JJJ) Esquema 63: Alquilacion de un sulfonato (Métodos Generales KKK) Esquema 64: Oxidación de un tioéter a una sulfona (Métodos Generales LLL) Esquema 65: Reacción de Mitsunobu utilizando a tiol (Métodos Generales MM) Esquema 66: Reacción de Curtius para formar un isocianato (Métodos Generales NNN) Esquema 67: Hidrólisis de un isocianato (Métodos Generales OOO) R-N=C=0 R-NH2 Esquema 68: Formación de una éter a partir de oxima de una cetona (Métodos Generales PPP) Esquema 69: Conversión mediada con TFA de un éster a un ácido carboxílico (Métodos Generales QQQ) Esquema 70: Reducción de un alquino a un alqueno (Métodos Generales RRR) Esquema 71: Cicloadición de 1,3-dipolar para formar una pirrolidina (Métodos Generales SSS) Esquema 72: Hidrogenación de una azida a una amina (Métodos Generales TTT) R^ R/NH* NT Esquema 73: Reacción de un haluro a partir de afilo o heteroarilo con un ácido borónico o éster de boronato seguido por desprotección de tosilo (Métodos Generales UUU) Esquema 74: Reacción de un haluro a partir de arólo o heteroarilo con un ácido borónico o éster de boronato (Métodos Generales VVV) R' R- x,Ar + R-B(OH)2 o R-B(OR)2 r^a'_ Esquema 75: Formación de un carbamato (Métodos Generales WWW) Esquema 76: Formación de urea con pérdida de grupo protector (Métodos Generales XXX) Esquema 77: Adición de Michael (Métodos Generales YYY) R' R"-X =/ R"-x X = NH, O Esquema 78: Adición de Grignard o alquil-litio a un compuesto que contiene carbonilo (Métodos Generales ZZZ) Esquema 79: Desprotección de una sulfonamida con DBU (Métodos Generales AAAA) Esquema 80: Desprotección de una sulfonamida con TBAF (Métodos Generales BBBB) Esquema 81: Desprotección de una sulfonamida con KCN (Métodos Esquema 82: Formación de un oxadiazol (Métodos Generales DDDD) Esquema 83: Formación de una urea utilizando fosgeno (Métodos Generales EEEE) Esquema 84: Formación de una amida a partir de un ésíer (Métodos Generales FFFF) Esquema 85: Formación de un nitrilo a partir de una amida primaria (Métodos Generales GGGG) Esquema 86: O-alquilación con KOH o NaOH y TBAB (Métodos Generales HHHH) H(TR - O Esquema 87: Formación de un mesilato (Métodos Generales Mil) Esquema 88: Desplazamiento de un mesiiato de allquiio, tosilato, o haluro con un nucleófilo (Métodos Generales JJJJ) Esquema 89: Ciclación de una cetona utilizando TFAA o PFPAA (Métodos Generales KKKK) Esquema 90: Formación de una bromocetona (Métodos Generales LLLL) Esquema 91: Formación de una cetona de una amida a partir de Weinreb (Métodos Generales MMMM) Esquema 92: Formación de ß-hidroxisulfonamida a partir de una cetona (Métodos Generales NNNN) Esquema 93: Formación de un carbonato de fenilo (Métodos Generales OOOO) Esquema 94: Formación de un carbamato seguido por hidrólisis de sulfonamida (Métodos Generales PPPP) Esquema 95: Oxidación de un tioacetato de alquilo a un ácido alquiisulfonico (Métodos Generales QQQQ) Esquema 96: Ciclación de una diamina con bromuro de cianógeno (Métodos Generales RRRR) Esquema 97: Ciclación de una diamina con NaN02 (Métodos Generales SSSS) Esquema 98: Formación de una esquaramida (Métodos Generales TTTT) Esquema 99: Reducción de una azida a una amina (Métodos Generales UUUU) R-N3 R-NH2 Esquema 100: Formación de una cetona de un haluro a partir de heteroarilo (Métodos Generales VVVV) Esquema 101: Formación de un cloruro ácido (Métodos Generales WWWW) Esquema 102: Formación de una hidrazona (Métodos Generales XXXX) Esquema 103: Ciclación con un a-haloaldehído (Métodos Generales YYYY) * Esquema 104: Ciclación de una hidrazida seguido por hidrólisis de una sulfonamida (Métodos Generales ZZZZ) Y = CHRú NH Z=CRo N Esquema 105: Formación de un ácido carboxílico o éster de un haluro a partir de arilo (Métodos Generales AAAAA) Esquema 106: Ciclación con un ortoformiato (Métodos Generales BBBBB) Esquema 107: Acoplamiento de Stille de un haluro a partir de arilo o heteroarilo (Métodos Generales CCCCC) R-X + R'-Sn(R")3 - R-R' Esquema 108: Desprotección de una amina protegida con Cbz utilizando trietilsilano (Métodos Generales DDDDD) Esquema 109: Formación de una guanidina (Métodos Generales EEEEE) Esquema 110: Formación de una Mida de sulfoxonio (Métodos Generales FFFFF) " R-^S\ Esquema 111: Reacción de una Mida de sulfoxonio con una amina (Métodos Generales GGGGG) Lista de Métodos Generales Métodos Generales A Formación de una hidrazida a partir de un ácido carboxílico Métodos Generales B Ciclación de una hidrazida Métodos Generales C Ciclación de una hidrazida con pérdida del grupo protector de Boc Métodos Generales D Hidrólisis de una sulfonamida Métodos Generales E División ácida de una amina protegida con Boc Métodos Generales E.1 División ácida de una amina protegida con Boc Métodos Generales F Desprotección de una amina protegida con Cbz utilizando HBr en AcOH Métodos Generales G Formación de una acetamida Métodos Generales H Formación de una amida de un ácido carboxílico y una amina Métodos Generales I Formación de una urea de una amina y un cloruro de carbamoílo Métodos Generales J Formación de una urea o tiourea utilizando CDI o diimidazol de tiocarbonilo, respectivamente Métodos Generales K Formación de una sulfonamida de una amina Métodos Generales K.1 Formación de una sulfonamida de una amina o nitrógeno que contiene heterociclo Métodos Generales L Desplazamiento de un haluro de arito o heteroarilo con un amina Métodos Generales M Protección por Boc de una amina Métodos Generales .1 Protección por Boc de un compuesto que contiene nitrógeno Métodos Generales N Protección por Cbz de una amina Métodos Generales O Reducción de una piridina Métodos Generales P Reducción de carbonilo a un alcohol Métodos Generales Q Ciclación de una amida utilizando un reactivo de ditiafosfetano Métodos Generales R Formación de una cetona de bromometilo de un ácido Métodos Generales S A/-alquilación utilizando un haluro de alquilo o a-halocetona Métodos Generales T Ciclación de una cetona utilizando un reactivo de ditiafosfetano Métodos Generales U Condensación de Knoevenagel para formar un ciclopentadieno sustituido Métodos Generales V Descarboxilación de un enolato de ß- cetoéster Métodos Generales W Hidrogenación de un alqueno Métodos Generales W.1 Hidrogenación de un alqueno Métodos Generales X Aminación reductiva de una cetóna o aldehido Métodos Generales X.1 Aminación reductiva de una cetona o aldehido Métodos Generales Y Hidrogenación de una amina protegida con bencilo o Cbz Métodos Generales Z Hidrólisis básica de un éster a un ácido carboxílico Métodos Generales AA Separación de HPLC preparativa quiral de estereoisómeros Métodos Generales BB Hidrólisis acida de una amina protegida con acetilo Métodos Generales CC Formación de un cloruro de sulfamoílo Métodos Generales DD Formación de una sulfonilurea Métodos Generales EE Formación de éter de un derivado de tricloroacetimidato Métodos Generales FF Desprotección de un alcohol protegido con PMB Métodos Generales GG Formación de una lactona Métodos Generales HH Apertura de una lactona con una amina o hidracina Métodos Generales II Reacción de Mitsunobu de un alcohol Métodos Generales JJDesplazamiento de un haluro con un alcohol Métodos Generales KK Protección por SEM de un nitrógeno Métodos Generales LL Desprotección por SEM dé un nitrógeno Métodos Generales MM Halogenación de un imidazol Métodos Generales NN Formación de una amida de un ácido carboxílico y una amina con pérdida de un grupo protector de sulfonamida Métodos Generales OO Ciclación con POCI3 Métodos Generales 00.1 Ciclación con POCI3 Métodos Generales PP Reacción de una amina con un ácido arilborónico Métodos Generales QQ Formación de una urea de una amina y un isocianato Métodos Generales RR Formación de una urea de una amina, una amina de heteroarilo y cloroformiato de fenilo Métodos Generales SS Hidrólisis de un éster en un alcohol Método General TT Conversión mediada por ácido de éster en un ácido carboxílico Métodos Generales UU Formación de un 2,2,2- tricloroacetimidato Métodos Generales VV Formación de un alcohol protegido con TBDMS Métodos Generales WW Formación de un cetal Métodos Generales XX Acoplamiento catalizado por paladio de una hidrazona Métodos Generales YY Adición de Michael de una amina a una a, ß-sulfonamida insaturada Métodos Generales ZZ Formación de una sulfonourea de oxazolidinona Métodos Generales AAA t Formación de una sulfonilurea de una sulfonourea de oxazolidinona Métodos Generales BBB Reducción de un grupo nitro Métodos Generales CCC Formación de una amida Métodos Generales DDD Ciclación para formar un imidazol fusionado Métodos Generales EEE Formación de un cloruro de sulfonilo Métodos Generales FFF Generación de un éter bajo condiciones reductivas Métodos Generales GGG Yodación, cloración o bromación de un heterociclo o halogenación de un heterociclo Métodos Generales GGG.1 Yodación de un heterociclo o halogenación de un heterociclo Métodos Generales HHH Cianuración de un heterociclo Métodos Generales III Reacción de Horner-Wadsworth-Emmons de una cetona Métodos Generales JJJ Formación de un sulfonato de potasio Métodos Generales KKK Alquilación de un sulfonato Métodos Generales LLL Oxidación de un tioéter a una sulfona Métodos Generales MMM Reacción de Mitsunobu utilizando un tiol Métodos Generales NNN Reacción de Curtius para formar un isocianato Métodos Generales OOO Hidrólisis de un isocianato Métodos Generales PPP Formación de un éter de oxima para formar una cetona Métodos Generales QQQ Conversión mediada por TFA de un t-butiléster a un ácido carboxílico Métodos Generales RRR Reducción de un alquino a un alqueno Métodos Generales SSS Cicloadición de 1,3-dipolar para formar una pirrolidina Métodos Generales TTT Hidrogenación de una azida a una amina Métodos Generales UUU Reacción de un haluro de arilo o heteroarilo con un ácido borónico o éster de boronato seguido por desprotección de tosilo Métodos Generales VVV Reacción de un haluro de arilo o heteroarilo con un ácido borónico o éster de boronato Métodos Generales WWW Formación de un carbamato Métodos Generales XXX Formación de urea con pérdida de grupo protector Métodos Generales YYY Adición de Michael Métodos Generales ZZZ Adición de Grignard o alquil-litio á un compuesto que contiene carbonilo Métodos Generales AAAA Desprotección de una sulfonamida con DBU Métodos Generales BBBB Desprotección de una sulfonamida con TBAF Métodos Generales CCCC Desprotección de una sulfonamida con KCN Métodos Generales DDDD Formación de un oxadiazol Métodos Generales EEEE Formación de una urea utilizando fosgeno Métodos Generales FFFF Formación de una amida de un éster Métodos Generales GGGG Formación de un nitrilo de una amida primaria Métodos Generales HHHH O-alquilación con KOH o NaOH y TBAB Métodos Generales lili Formación de un mesilato Métodos Generales JJJJ Desplazamiento de un mesilato de alquilo, tosilato, o haluro con un nucleófilo Métodos Generales KKKK Ciclación de una cetona utilizando TFAA o PFPAA Métodos Generales LLLL Formación de una bromocetona de una cetona o un aldehido Métodos Generales MMMM Formación de una cetona de una amida de Weinreb Métodos Generales NNNN Formación de ß-hidroxisulfonamida de una cetona Métodos Generales OOOO Formación de un carbonato de fenilo Métodos Generales PPPP Formación de un carbamato seguido por hidrólisis de sulfonamida Métodos Generales QQQQ Oxidación de un tioacetato de alquilo a un ácido alquilsulfónico Métodos Generales RRRR Ciclación de una diamina con bromuro de cianógeno Métodos Generales SSSS Ciclación de una diamina con NaN02 Métodos Generales TTTT Formación de una esquaramida Métodos Generales UUUU Reducción de una azida a una amina Métodos Generales VVVV Formación de una cetona de un haluro de heteroarilo Métodos Generales WWWW Formación de un cloruro ácido Métodos Generales XXXX Formación de una hidrazona Métodos Generales YYYY Ciclación con un a-haloaldehído Métodos Generales ZZZZ Ciclación de una hidrazida seguida por hidrólisis de una sulfonamida Métodos Generales AAAAA Formación de un ácido carboxílico o éster de un haluro de arilo Métodos Generales BBBBB Ciclación con un ortoformiato Métodos Generales CCCCC Acoplamiento de Stille de un haluro de arilo o heteroarilo Métodos Generales DDDDD Desprotección de una amina protegida con Cbz utilizando trietilsilano Métodos Generales EEEEE Formación de una guanidina Métodos Generales FFFFF Formación de una ilida de sulfoxonio Métodos Generales GGGGG Reacción de una ilida de sulfoxonio con una amina Los siguientes ejemplos se ordenan de acuerdo con el Método General final usado en su preparación. Las rutas de síntesis en cualquier intermediarios novedoso se detallan por medio de un listado sucesivo del Método General (códigos de letras) entre paréntesis después de su nombre con reactivos adicionales según corresponda. Un ejemplo de trabajo de este protocolo se ilustra a continuación usando la Preparación No. Z.1 como una ilustración No. limitante. La Preparación No. Z.1 es ácido (1 S, 2RAS)-4-(ciclopropansulfonamido)-2-etilciclopentan-carboxílico, que se preparó a partir de 4-(ciclopropansulfonamido)-2-etilciclopentancarboxilato de (1 S,2R,4S)-et \o usando el Método General Z representado en el Esquema A.
Esquema A Precursor para Preparación #Z.l Preparación #Z.1 El precursor de la Preparación No. 2.1 4- (ciclopropansulfonamido)-2-etilciclopentan-carboxilato de (1 S, 2 ,4S)-etilo, se preparó (como se muestra en el Esquema B) por reacción inicial de 4-amino-2-etilciclopentancarboxilato de etilo (Preparación No. Y.1) con el ciclopropancloruro de sulfonilo disponible comercialmente, según las condiciones indicadas en el Método General K, para dar 4-(ciclopropansulfonamido)-2-etilciclopentancarboxilato de etilo como una mezcla de estereoisómeros. Esta mezcla de estereoisómeros se separa como se describe en el Método General AA, usando las condiciones del Método 1 en la Tabla 2, para dar el precursor de la Preparación No. Z.1, 4-(ciclopropansulf o namido)-2 -etilciclopentan-carboxilato de (1 S, 2R,4S)-etilo como un único enantiómero con un tiempo de retención de 9.5 minutos y una giro óptico negativa. La secuencia de reacción para sintetizar el precursor de la Preparación No. Z.1, 4-(ciclopropansulfonamido)-2-etilciclopentan-carboxilato de (1 S, 2R,4S)-etilo, (detallada previamente) se traduce luego en la sección de preparaciones y ejemplos en: 4-(ciclopropansulfonamido)-2-etilciclopentan-carboxilato de (1 S,2ft, 4S)-etilo (preparado usando K de la Preparación No. Y.1 y ciclopropancloruro de sulfonilo, AA [Tabla 2, Método 1 , Rt = 9.5 min, or = negativa]). Por ende, la Preparación No.
Z.1 se podría redactar de la siguiente manera: La Preparación No. Z.1 se preparó a partir de 4-(ciclopropansulfonamido)-2-etilciclopentancarboxilato de (1 S,2R,4S)-etilo (preparado usando K de la Preparación No. Y.1 y ciclopropancloruro de sulfonilo, AA [Tabla 2, Método 1, Rt = 9.5 min, or = negativa]) usando el Método General Z. Esquema B Preparación No. Y Método General AA Precursor para Preparación No. Z. I Métodos Analíticos Los datos analíticos se incluyen en los métodos. En las ilustraciones de los métodos generales o en las tablas de ejemplos. Salvo que se especifique lo contrario, todos los datos de 1H RMN se recogieron en un instrumento Varían Mercurio Plus 400 MHz o Varían Inova 600 MHz y los desplazamientos químicos se citan en partes por millón (ppm). Los datos de LC/EM y HPLC hacen referencia a la tabla de condiciones LC/EM y HPLC utilizando la letra minúscula de método provista en la Tabla 1.
Tabla 1. Métodos LC/EM y HPLC Método Condiciones NH4OAc 50 mM (pH 4.5) y la fase móvil B fue MeGN de grado HPLC. La columna usada para la cromatografía fue una columna Hypersil C18 HS de 21.2 x 250 mM (partículas de 8 µ?). El método de detección fue por UV.
Tabla 2. Métodos de HPLC quiral Métodos de purificación Para los métodos generales, los intermediarios y los compuestos finales se pueden purificar mediante cualquier técnica o combinación de técnicas conocidas por un especialista en la técnica. AÜgunos ejemplos que No. son limitantes incluyen cromatografía instantánea con una fase sólida (por ejemplo, gel de sílice, alúmina, etc) y un solvente (o combinación de solventes) que eluye los compuestos deseados (por ejemplo, heptano, EtOAc, DCM, MeOH, MeCN, agua, etc.); TLC preparativa con una fase sólida (por ejemplo, gel de sílice, alúmina, etc.) y un solvente (o combinación de solventes) que eluye los compuestos deseados (por ejemplo heptano, EtOAc, DCM, MeOH, MeCN, agua, etc.); HPLC de fase inversa (ver, Tabla 1 por algunas condiciones No. limitantes); recristalización a partir de un solvente o combinación de solventes apropiado (por ejemplo, MeOH, EtOH, IPA, EtOAc, tolueno, etc.) o una combinación de solventes (por ejemplo, EtOAc/heptano, EtOAc/MeOH, etc.); LC quiral con una fase sólida y un solvente apropiado (ver la Tabla 2 por algunas condiciones No. limitantes) para eluir el compuesto deseado; SFC quiral con una fase sólida y C02 con un modificador apropiado (por ejemplo, MeOH, EtOH, IPA con o sin un modificador adicional tal como dietilamina, TFA, etc.); precipitación a partir de una combinación de solventes (por ejemplo, DMF/agua, DMSO/DC , EtOAc/heptano, etc.); trituración con un solvente apropiado (por ejemplo, EtOAc, DC , eCN, MeOH, EtOH, IPA, n-IPA, etc.); extracciones por disolución del compuesto en un líquido y lavado con un líquido apropiadamente inmiscible (por ejemplo DCM/agua, EtOAc/agua, DCM/NaHC03 acuoso saturado, EtOAc/NaHC03 acuoso saturado, DCM/HCI 10% acuoso, EtOAc/HCI 10% acuoso, etc.); destilación (por ejemplo simple, fraccionada, de Kugelrohr, etc.); cromatografía gaseosa usando una temperatura, un gas transportador y caudal apropiados; sublimación a una temperatura y presión apropiadas; filtración a través de un medio (por ejemplo, Florosil®, alúmina, Celite®, gel de sílice, etc.) con un solvente (por ejemplo, heptano, hexanos, EtOAc, DCM, MeOH, etc.) o una combinación de solventes; formación de sal con un soporte sólido (basado en resinas, por ejemplo de intercambio iónico) o sin el mismo. Los compuestos de interés se pueden aislar como una sal sin el uso de un método de purificación-formación de sales específico. Por ejemplo, en los casos donde la purificación se lleva a cabo con HPLC de fase inversa con una solución amortiguadora de TFA acuosa, se puede aislar la sal TFA. Algunas descripciones de estas técnicas se pueden consultar en las siguientes referencias: Gordon, A. J. y Ford, R. A., "The Chemist's Companion", 1972; Palleros, D. R. "Experimental Organic Chemistry", 2000; Still, W. C, Kahn y M. Mitra, A. J. Org. Chem. 1978, 43, 2923; Yan, B. "Analysis and Purificaron Methods in Combinatorial Chemistry", 2003; Harwood, L. M . , Moody, C. J. y Percy, J. M. "Experimental Organic Chemistry: Standard and Microscale, 2a edición", 1999; Stichlmair, J. G. y Fair, J. R. "Distillation; Principies and Practices", 1998; Beesley, T. E. y Scott, R. P. W. "Chiral Chromatography", 1999; Landgrebe, J. A. "Theory and Practice in the Organic Laboratory, 4a Ed.", 1993; Skoog, D. A. y Leary, J. J. "Principies of Instrumental Analysis, 4a Ed.", 1992; G. Subramanian, "Chiral Separation Techniques, 3a edición", 2007; Y. Kazakevich, R Lobrutto, "HPLC for Pharmaceutical Scientists", 2007. Preparaciones y Ejemplos Los métodos sintéticos generales utilizados en cada Método General siguen e incluyen una ilustración de un compuesto qué se sintetizó utilizando el Método General designado. Ninguna de las condiciones y reactivos específicos que se mencionan en la presente debe considerarse como una limitación del campo de la invención y se proporcionan sólo a modo ilustrativo. Todos los materiales de partida están disponibles comercialmente de Sigma-Aldrich (incluyendo Fluka y Discovery CPR) salvo que se especifique lo contrario luego del nombre químico. Los nombres de los reactivos se dan según el nombre impreso en el contenedor comercial o según se generan por las convenciones de IUPAC, CambridgeSoft® Chemdraw Ultra 9.0.7, CambridgeSoft® Chemistry E-Notebook 9.0.127, o AutoNom 2000. Los compuestos designados como sales (por ejemplo clorhidrato, acetato) pueden contener más de un equivalente molar de la sal. Los compuestos de la invención en los cuales se ha determinado la estereoquímica absoluta mediante el uso de un material de inicio enantioméricamente puro disponible comercialmente o un intermediario definido estereoqu ímicamente, o por difracción de rayos X, están indicados con un asterisco después del número de ejemplo.
Preparación No. 1: ácido c s-3-(4-cianobenciIoxi)ciclobutancarboxíiico Etapa A: 3-hidroxiciclobutancarboxilato de c s-etilo Una solución de 3-oxociclobutancarboxilato de etilo (2.90 g, 20.4 mmol, Parkway) en EtOH (30 mi) a temperatura ambiente se trató con NaBH4 (0.77 g, 20 mmol). La reacción se agitó por aproximadamente 1 h y luego se agregó HCI acuoso 2 N para ajustar el pH a aproximadamente 2. La reacción se concentró in vacuo. La reacción se dividió con DCM (50 mi) y salmuera (50 mi). La capa orgánica se separó, secó sobre Na2S0 anhidro, filtró, luego concentró in vacuo. El residuo resultante se purificó sobre gel de sílice (80 g) usando EtOAc 20-40% en DCM para dar cis-3-hidroxiciclobutancarbox¡Íato de etilo (2.75 g, 66%) como un aceite traslúcido: 1H RMN (DMSO-c/6) d 5.17 (d, 1H), 4.09-3.99 (m, 2H), 3.99-3.90 (m, 1H), 2.57-2.47 (m, 1H), 2.42-2.29 (m, 2H), 1.98-1.89 (m, 2H), 1.17 (m, 3H).
Etapa B: 3-(4-cianobenciloxi)ciclobutancarboxilato de c/s-etiio A una solución de c s-3-hidroxiciclobutancarboxilato de etilo (0.17 g, 1.2 mmol) en DMF (4 mi) se agregó K2C03 (0.24 g, 1.8 mmol) seguido por 4-(bromo~metil)benzonitrilo (0.28 g, 1.4 mmol). La reacción se agitó a aproximadamente 25°C por aproximadamente 16 h. La reacción se dividió entre EtOAc (50 mi) y salmuera (50 mi). Las capas se separaron y la capa orgánica se lavó con salmuera adicional (50 mi). La capa orgánica luego se secó sobre Na2S04 anhidro, filtró, y concentró in vacuo para dar cis-3-(4-cianobenciloxi)-ciclobutancarboxilato de etilo (0.29 g, 95%) como un aceite: 1H RMN (DMSO-dg) d 7.82 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.63 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 4.75 (s, 2H), 4.02 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.93 (m, 1H), 2.58-2.45 (m, 1H), 2.41-2.28 (m, 2H), 1.98-1.85 (m, 2H), 1.20-1.08 (t, J = 7.1 Hz, 3H). Etapa C: ácido cis-3-(4-cianobenciloxi)ciciobutancarboxíl¿co A una solución de c/s-3-(4-cianobencilox¡)ciclobutancarboxilato de etilo (0.44 g, 1.70 mmol) en 1.4-dioxano (10 mi) se agregó NaOH acuoso (1 N, 2.0 mi). La reacción se agitó a aproximadamente 25°C por aproximadamente 16 h. La reacción se dividió entre AcOH acuoso 10% (20 mi) y EtOAc (25 mi). Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con EtOAc adicional (25 mi). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (20 mi), secaron sobre Na2S04 anhidro, filtraron, luego concentraron in vacuo para dar ácido cis-3-(4-cianobenciloxi)-ciclobutancarboxílico (0.24 g, 60%): LC/EM (Tabla 1, Método b) R, = 1.67 min; EM m/z: 232 (M+H)\ Preparación No. 2*: (1 S,3R)-1 -[3-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-isotiazolidin-2-il-1 ,1 -dióxido]ciclopentano Etapa A: 3-cloro-/V-((1 S,3R)-3-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 , 2,4]triazolo[4,3-a]piraz¡n-1 -il)ciclopentil)propan-1-sulfonamida A una suspensión de clorhidrato de (1 S,3R)-3-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][ ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 - il)ciclopentanamina (0.05 g, 0.11 mmol, preparado usando E de la Preparación No. B.1 y HCI) y TEA (0.03 mi, 0.21 mmol) en DCM (5 mi) a aproximadamente 0°C se agregó cloruro de 3-cloropropan-1 -sulfonilo (0.02 g, 0.11 mmol) por goteo. La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente 0°C por aproximadamente 1.5 h. La mezcla de reacción se diluyó con ácido cítrico acuoso 5% (10 mi), y las capas se separaron. La capa orgánica se lavó con NaHC03 acuoso saturado (10 mi), agua (10 mi), salmuera (10 mi), secó sobre MgS0 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida para dar 3-cloro-N-((1 S,3R)-3-(6-tosil-6H-pirroIo[2,3-e][1 ,2, ]triazolo[4,3-a]p¡razin-1 -i I) ciclope ntil)propan-1 -sul fon amida (0.052 g, 91%) como un residuo de color marrón: LC/EM (Tabla 1, Método a) R, = 2.18 min; EM m/z: 537 (M + H)+.
Etapa B: (1 S,3R)-1 -[3-(6-tos¡l-6W-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)-isotiazolidin-2-il-1,1-dióxido]ciclopentano A una solución de 3-cloro-A/-((1 S,3R)-3-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentil)propan-1 -sulfonamida (0.11 g, 0.21 mmol) en DMF (5 mi) se agregó 1.8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno (0.04 mi, 0.27 mmol crudo). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 16 h. El solvente se eliminó bajo presión reducida para dar (1 S, 3R)-1 -[3-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-i$otiazolidin-2-H-1 ,1-dióxido]ciclopentano (0.106 g, 99%): LC/EM (Tabla 1, Método a) R, = 2.04 min; EM m/z. 501 (M + H)\ Preparación No. 3*: 1 -((1 R,3S)-3-(1 H-pirrol-1 -il)ciclopentil)-6-íosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina Una solución de 2,5-dimetoxitetrahidrofurano (0.14 g, 1.1 mmol) en agua (3 mi) se calentó a aproximadamente 100°C por aproximadamente 1.5 h. La solución se enfrió a temperatura ambiente.
Se agregó una suspensión de clorhidrato de (1 S,3R)-3-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclo-pentanamina (0.10 g, 0.21 mmol, preparado usando E de Preparación No. B.1 y HCI) y se agregó NaOAc (0.05 g, 0.61 mmol) en DCM (5 mi) a la solución acuosa. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 1 h y luego se agregó 2,5-dimetoxitetrahidrofurano adicional (0.14 g, 1.1 mmol). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 40°C por aproximadamente 15 h. Se agregó 2,5-dimetoxitetrahidrofurano adicional (0.14 g, 1.1 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a aproximadamente 40°C por aproximadamente 8 h, luego a aproximadamente 35°C por aproximadamente 48 h. La reacción se diluyó con DCM (10 mi) y agua (10 mi). Las capas se separaron y la capa orgánica se lavó con agua (2 x 10 mi) y salmuera (10 mi), secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y el solvente se eliminó bajo presión reducida para dar 1-((1 Rt3S)-3-(1H-pirrol-1-il)ciclopentil)-6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-ajpirazina (0.095 g, 99%) como un residuo amarillo: LC/EM (Tabla 1, Método a) R, = 2.42 min; EM m/z: 447 (M + H) + .
Preparación No.4*: 1-((1 S,3R)-3-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentil)-1 W-pirrol-3-carbonitrilo Etapa A: 1 -((1 S,3R)-3-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentil)-1H-pirrol-3-carbaldehído A una suspensión de clorhidrato de (1 S,3R)-3-(6-íosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pira2in-1 -il)ciclopentanamina {0.175 g, 0.373 mmol, preparado usando E de la Preparación No. B.1 y HCI) y NaOAc (0.100 g, 1.22 mmol) en DCM (3 mi) y agua (2 ml) se agregó 2,5-dimetoxitetrahidrofuran-3-carbaldehído (0.600 g, 3.37 mmol). La reacción se calentó a aproximadamente 40°C por aproximadamente 24 h. La mezcla de reacción se diluyó con DCM (30 ml) y lavó con agua (4 x 20 ml). La capa orgánica se secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y el solvente se eliminó bajo presión reducida para dar un residuo de color marrón. El material crudo se purificó mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc 20-100% en DCM para dar 1 -((1 S,3R)-3-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1,2, 4]tr¡azolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentil)-1 H-pirrol-3-carbaldehído (0.059 g, 33%) como un sólido amarillo amorfo: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.10 min; EM m/z: 475 (M + H)\ Etapa B: 1 -((1 S,3R)-3-(6-tosil-6W-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazo1o(4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentil)-1 H-pirrol-3-carbonitrilo A una solución de 1 -((1 S,3R)-3-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a] irazin-1-il)ciclopent¡l)-1H-pirrol-3-carbaldehído (0.050 g, 0.105 mmol) en THF (2 mi) se agregó yodo (0.083 g, 0.327 mmol) y NH4OH acuoso(28-30% w/v, 0.733 mi, 5.27 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 24 h. La mezcla de reacción se diluyó con Na2S03 acuoso saturado (30 mi) y EtOAc (30 mi). Las capas se dividieron y la capa orgánica se secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y el solvente se eliminó bajo presión reducida para dar 1 -((1 S,3R)-3-(6-tosil-6H-pirrólo[2,3-e][1 ,2, 4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentil)-1 H-p¡rrol-3-carbonitrilo (0.05 g, 100%): LC/EM (Tabla 1, Método a) R, = 2.33 min; EM m/z: 472 (M + H)\ Preparación No.5: 3,3-difluoro-/V-(4-(6-tosil-6W-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4] triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)biciclo[2,2,2]octan-1-il)azetidin-1-sulfonamida Etapa A: trifluorometansulfonato de 1 -(1 H-imidazol-1 -ilsulfonil)-3-metil-1H-imidazol-3-io A una solución de 1 , 1 '-sulfonildiimidazol (3.50 g, 17.7 mmol) en DCM (75 mi) a aproximadamente 0°C se agregó trifluorometansulfonato de metilo (1.94 mi, 17.7 mmol). La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente 0°C por aproximadamente 1 h, luego se calentó a temperatura ambiente y se agitó por aproximadamente 5 h. El sólido se recogió mediante filtración al vacío y lavó con DCM (10 mi) para dar trifluorometansulfonato de 1-(1H-imidazol-1 -ilsulfonil)-3-metil-1 H-imidazol-3-io (6.35 g, 98%) como un sólido de color blanco: LC/EM (Tabla 1, Método a) R, = 0.082 min; EM m/z 213 (M + H) + .
Etapa B: 1 -(3,3-d if I uoroazetidi n- -i Is ulf on i l)-1 H-im idazol Una solución de clorhidrato de 3,3-difluoroazetidina (1.00 g, 7.72 mmol) y DIEA (1.5 mi, 8.6 mmol) en MeCN (5 mi) se agitó por aproximadamente 5 min y luego se agregó a una solución de trifluorometansulfonato de 1-(1 H-imidazol-1 - ilsulfonil)-3-métil-1 H- imidazol-3-io (4.20 g, 11.6 mmol) en MeCN (10 mi) a aproximadamente 0°C. La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente 0°C por aproximadamente 1 h, y luego se calentó a temperatura ambiente y se agitó por aproximadamente 16 h. La mezcla de reacción luego se concentró bajo presión reducida. El material crudo se purificó mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc 5-100% en DCM para dar 1-(3,3-difluoroazetidin-1 -ilsulfonil)-1 H-imidazol (0.95 g, 55%) como un sólido amarillo: LC/EM (Tabla 1, Método c) R, = 1.16 min; EM m/z 224 (M + H) + .
Etapa C: trifluorometansulfonato de 1 -(3,3-dif luoroazetidin-1 -ilsulfonil)-3-metil-1H-imidazol-3-io A una solución de 1 -(3,3-difluoroazetidin-1 -ilsulfonil)-1 H-imidazol (0.500 g, 2.24 mmol) en DCM (5 mi) a aproximadamente 0°C se agregó trifluorometansulfonato de metilo (0.27 mi, 2.46 mmol) por goteo durante aproximadamente 3 min. La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente 0°C por aproximadamente 2 h. El sólido se recogió mediante filtración al vacío, se lavó con DCM (10 mi), y se secó bajo vacío para dar trifluorometansulfonato de 1-(3,3-d¡fluoroazetidin-1-ilsulfonil)-3-metil-1H-imidazol-3-io (0.79 g, 90%) como un sólido blanco: LC/EM (Tabla 1, Método c) R, = 1.12 min; EM m/z 238 (M + H)\ Etapa D: 3,3-dif luoro-/V-(4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)biciclo[2,2,2]octan-1-il)azetidin- 1 -sulfonamida A una solución de 4-(6-tosil-6--pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]tr¡azolo[4,3-a]pirazin-1 -il)biciclo[2,2,2]-octan-1 -amina (0.20 g, 0.46 mmol, Ejemplo No. 9, Etapa F) en MeCN (5 mi) se agregó trifluorometansulfonato de 1 -(3,3-difluoroazetidin-1 -ilsulfonil)-3-metil-1 H-imidazol-3-io (0. 9 g, 0.50 mmol). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 70°C por aproximadamente 24 h. El solvente se eliminó bajo presión reducida. El residuo se dividió entre EtOAc (30 mi) y agua (10 mi). Las capas se separaron y la capa orgánica se lavó con agua (10 mi) y salmuera (2 x 10 mi), secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y el solvente se eliminó bajo presión reducida. El material crudo se purificó mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-10% de MeOH en DCM para dar 2,3-difluoro-N-(4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2, 4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)biciclo[2,2,2]octan-1-il)azetidin-1-sulfonami a (0.119 g, : 38%): LC/EM (Tabla 1, Método a) R, = 2.32 min; EM m/z 592 (M + H) + , Preparación No. 6: cloruro de 1 -metilciclopropan-1 -sulfonilo Etapa A: ciclopropansulfonato de butilo A una solución de cloruro de ciclopropansulfonilo (5.00 g, 35.6 mmol) en n-BuOH (20 mi) a -20°C, se agregó piridina (5.75 mi, 71.1 mmol) por goteo. La mezcla resultante se agitó por aproximadamente 16 h calentando lentamente a temperatura ambiente. Los solventes se eliminaron bajo presión reducida y el residuo se dividió entre DCM y agua (50 mi de cada uno). La fase orgánica se lavó adicionalmente con salmuera (40 mi), secó sobre MgS04 anhidro y concentró bajo presión reducida para dar ciclopropansulfonato de butilo (4.7 g, 74%) como un aceite de color amarillo. 1H RMN (DMSO-d6) d 4.2 (t, 2H), 2.82 (m, 1H), 1.64 (m, 2H), 1.35 (m, 2H), 1.08 (m, 2H), 1.01 (m, 2H), 0.89 (t, 3H).
Etapa B: 1 -metilciclopropan-1 -sulfonato de butilo A una solución de ciclopropansulfonato de butilo (1.5 g, 8.4 mmol) en THF (8 mi) a aproximadamente -78°C, se agregó n-BuLi (1.6 M en hexanos, 5.26 mi, 8.42 mmol) e yodometano (0.684 rri!l, 10.9 mmol) simultáneamente y la mezcla resultante se agitó a aproximadamente -78°C por aproximadamente 2 h y luego a temperatura ambiente por aproximadamente 2 h. La reacción se detuvo mediante la adición de NH4CI acuoso saturado (7 mi) y las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (15 mi) y los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgS04 anhidro y se concentró bajo presión reducida. El residuo se sometió a cromatografía de columna sobre gel de sílice (EtOAc 5-25% en heptano durante 30 min) para dar 1 -metilciclopropan-1 -sulfonato de butilo (0.8 g, 49%) como un aceite incoloro. H RMN (DMSO-d6) d 4.17 (t, 2H), 1.62 (m, 2H), 1.43 (s, 3H), 1.35 (m, 2H), 1.22 (m, 2H), 0.94 (m, 2H), 0.88 (t, 3H).
Etapa C: cloruro de 1 -metilciclopropan-1 -sulfonilo Una mezcla de 1 -metilciclopropan-1 -sulfonato de butilo (0.80 g, 4.2 mmol) y tiocianato de potasio (0.404 g, 4.16 mmol) en 1.4-dioxano/agua (1:1, 10 mi) se calentó a reflujo por aproximadamente 8 h. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y los solventes se concentraron bajo presión reducida para dar 1 -metilcicloprópan-1 -sulfonato de potasio crudo el cual se suspendió en cloruro del tionilo (7 mi). Se agregó DMF (0.05 mi) y la mezcla se calentó a reflujo por aproximadamente 8 h y luego enfrió. Los volátiles se eliminaron bajo presión reducida y el residuo se disolvió en DCM (20 mi),: lavó con agua (15 mi), secó sobre MgS04 anhidro y concentró bajo presión reducida para dar cloruro de 1 -metilc¡clopropan-1 -sulfonilo (0.56 g, 86%) como un aceite de color amarillo. 1H RMN (DMSO-d6) d 1.82 (s amplio, 2H), 1.79 (s, 3H), 1.15 (m, 2H).
Preparación No. 7: 4-(ciclopropansulfonamido)-2-etil-1 -fluorociclopentancarboxiiato de etilo Una solución de 4-(ciclopropansulfonamido)-2-etilciclopentancarboxilato de etilo (0.630 g, 2.18 mmol, preparada usando K de la Preparación No. Y.1 y cloruro de ciclopropansulfonilo) en THF (14.5 mi) se enfrió a aproximadamente -78°C y luego se agregó LDA (1.8 M en THF/hexano, 3.63 mi, 6.53 mmol) por goteo a la mezcla de reacción durante aproximadamente 30 min. La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente -78°C por aproximadamente 50 min antes de agregar una solución de ? luoro-/V-(fenilsulfonil)bencensulfonamida (2.06 g, 6.53 mmol) en THF (7.3 mi) por goteo durante aproximadamente 30 min. La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente -78°C por aproximadamente 1 h y luego se calentó a temperatura ambiente y agitó por aproximadamente 16 h. Se agregó NH4CI acuoso saturado (100 mi). La mezcla de reacción se dividió con EtOAc (50 mi). La capa acuosa se extrajo adicionalmente con EtOAc (2 x 50 mi). Las capas orgánicas combinadas se concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc 0-60% en heptano para dar 4-(ciclopropansulfonamido)-2-etil-1 -fluorociclopentancarboxilato de etilo (0.41 g, 46%) como un aceite traslúcido: LC/EM (Tabla 1, Método b) R, = 2.12 min; EM m/z: 306 (M-H)\ Preparación No. 8: 2-metil-4-(fenilamino)ciclopentancarboxilato de (1S,2R,4R)-etilo y 2-metil-4-(fenilamino)ciclopentancarboxilaío de (1R,2S,4S)-etilo Una solución de 4-hidroxi-2-metilciclopentancarboxilato de etilo (1.81 g, 10.5 mmol, preparada usando P del Ejemplo No. 7, Etapa g y NaBH4) y piridina (1.28 mi, 15.8 mmol) en THF (52.5 mi) se enfrió a aproximadamente 0°C. Se agregó cloruro de metansulfonilo (0.90 mi, 12 mmol) por goteo. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 16 h, luego se dividió entre agua (50 mi) y DCM (30 mi). Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con DCM (2 x 30 mi). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S04 anhidro y concentraron bajo presión reducida para dar un sólido de color blanco. El sólido resultante se mezcló con anilina (78.0 g, 841 mmol) y calentó a aproximadamente 90°C por aproximadamente 16 h. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida y purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc 20-100% en DCM para dar 2-metil-4-(fenilamino)ciclopentancarboxilato de (1 S,2R,4R)-eti¡o y 2- metil-4-(fenilamino)ciclo-pentancarboxilato de (1 R,2S,4S)-et¡lo con anilina 29 mol% como un excipiente (2.73 g, 75%) como un aceite oscuro: LC/EM (Tabla 1, Método b) R, = 2.67 min; EM m/z: 248 (M + H) + .
Preparación No. 9: 4-etil-5,6-dihidropiridin-1 ,3(2H)-dicarboxilaío de 1 -rerc-butil-3-etilo Etapa A: 4-(dietox¡fosforiloxi)-5,6-dihidropiridin-1 ,3(2H)-dicarboxilato de 1 -íerc-butil-3-etilo A una solución de 4-oxopiperidin-1 ,3-dicarboxilato de 1-rerc-butil-3-etilo (11.50 g, 42.4 mmol, ASDI) en MTBE (500 mi) a aproximadamente -78°C se agregó NaHMDS (1 M en THF, 53.0 mi, 53. Ó mmol). Luego de aproximadamente 1 h, se agregó fosforocloridato de dietilo (7.62 mi, 53.0 mmol) a la mezcla de reacción. Luego de aproximadamente 30 min, la mezcla de reacción se dejó calentar a temperatura ambiente y agitó por aproximadamente 16 h. La mezcla de reacción se dividió entre NH4CI acuoso saturado (100 mi) y EtOAc (50 mi). Las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo adicionalmente con EtOAc (2 x 50 mi). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida. El material crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc al 0-100% en heptano para dar 4-(dietoxifosforiloxi)-5,6-dihidropiridin-1 ,3(2H)-dicarboxilato de 1-terc-but¡l-3-etilo (8.55 g, 49%) como un aceite de color amarillo: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.35 min; EM m/z: 408 (M + H)+.
Etapa B: 4-etil-5,6-dihidropiridin-1 ,3(2H)-dicarboxilato de i-terc-butil-3-etilo A una suspensión de Cul (4.21 g, 22.12 mmol) en THF (61.4 mi) a aproximadamente 0°C se agregó bromuro de etilmagnesio (1.0 M en THF, 44.2 mi, 44.2 mmol) por goteo. Luego de aproximadamente 30 min, la mezcla de reacción se enfrió a aproximadamente -78°C y se agregó una solución de 4-(dietoxifosforiloxi)-5,6-dihidropiridin-1 ,3(2H)-dicarboxilato de 1 -rere-butilo 3-etilo (7.51 g, 18.43 mmol) en THF (61 mi) lentamente. La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente -78°C por aproximadamente 1 h, iuego se calentó a aproximadamente 0°C. La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente 0°C por aproximadamente 1.5 h, luego se calentó a temperatura ambiente y agitó por aproximadamente 1 h. La mezcla de reacción se enfrió a aproximadamente -78°C y NH CI acuoso saturado (100 mi) se agregó lentamente. La mezcla de reacción se dejó calentar a temperatura ambiente y agitó por aproximadamente 16 h. La mezcla se extrajo con Et20 (100 mi). La capa acuosa se extrajo adicionalmente con Et20 (2 x 50 mi). Las capas orgánicas se combinaron, lavaron con NH CI acuoso saturado (50 mi), secaron sobre Na2S04 anhidro, filtraron, concentraron bajo presión reducida y purificaron mediante cromatografía sobre gel de sílice eiuyendo con un gradiente de 0-30% de EtOAc en heptano para dar 4-eti/-5,6-dihidropiridin-1 ,3(2H)-dicarboxilato de 1 -tere-butilo 3-etilc (0.785 g, 15%) como un aceite traslúcido: 1H RMN (CDCI3) d 4.23 (d, J = 7.1 Hz, 2H), 4.12 (s, 2H), 3.48 (t, J = 5.8 Hz, 2H), 2.52 (q, J = 7.5 Hz, 2H), 2.28 (t, J = 5.8 Hz, 2H), 1.51 (s, 9H), 1.32 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.09 (t, J = 7.5 Hz, 3H).
Preparación No. 10: 1 -(1 -bencilpiperid¡n-3-il)-1.6-d¡hidropirazolo[3.4-d]p¡rrolo[2,3-/ ]piridina Etapa A: 2-(f -benc/7p/per/d/n-3- /jhidraz¡ncarboxMato de terc-b t \o Una mezcla de clorhidrato de 1 -bencilpiperidin-3-ona (1.00 g, 4.10 mmol), hidrazincarboxilato de /ere-butilo (0.596 g, 4.51 mmol), y AcOH (0.470 mi, 8.21 mmol) en DCE (20 mi) se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 1 h, luego se agregó NaCNBH3 (0.258 g, 4.10 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 16 h. La mezcla de reacción se detuvo mediante la adición de NaHC03 acuoso saturado (50 mi). La capa orgánica se separó, concentró bajo presión reducida y purificó mediante RP-HPLC (Tabla 1, Método h) para dar 2-(1-bencilpiperidin-3-¡l) \draz\ncarbox \ato de íerc-butilo (1.25 g, 100%) como un aceite traslúcido: LC/EM (Tabla 1, Método b) R, = 1.66 min; EM m/z: 306 (M + H) + .
Etapa B: clorhidrato de 1 -bencil-3-hidrazinilpiperidina Una solución de 2-('7-/jenc//p/per/d/n-3-/7Jhidrazincarboxilato de ferc-butilo (1.25 g, 4.10 mmol) en HCI acuoso (6 N, 6.83 mi, 41.0 mmol) se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 8 h. El solvente se eliminó bajo presión reducida para dar clorhidrato de 1-bencH-3-hidrazinilpiperidina crudo (1.45 g, 112%) como un sólido de color blanco el cual se usó sin purificación adicional: LC/EM (Tabla 1, Método b) R, = 0.66 min; EM m/z: 206 (M + H) + .
Etapa C: 1-(1-bencilpiperidin-3-¡l)-1.6-dihidropirazolo[3.4-d]pirrolo[2,3-6]piridina Se suspendió 4-cloro-1 /-/-pirrolo[2,3-/?]p¡ridin-5-carbaldehído (0.40 g, 2.21 mmol, Adesis) y clorhidrato de 1-bencil-3-hidrazinilpiperidina (1.39 g, 4.43 mmol) en n-BuOH (11.1 mi). La mezcla se calentó a aproximadamente 90°C por aproximadamente 3 h y luego calentó a aproximadamente 120°C por aproximadamente 5 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y el solvente se eliminó bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-5% de MeOH en DCM para dar 1-(1-béncilpiperidin-3-il)-1.6-dihidropirazolo[3.4-d]pirrolo[2,3-b]pir¡dina (0.105 g, 14%) como' un aceite de color marrón: LC/EM (Tabla 1, Método b) R, = 1.53 min; EM m/z: 332 (M+H)+.
Preparación No. 11: c/s-4-etilciclopentan-1 ,3-dicarboxilato de 3-íerc-butilo 1 -metilo Etapa A: ácido cis-2-etil-4-(metoxicarbonil)ciclopentancarboxilico Se agregó cloruro de rutenio (III) hidratado (0.203 g, 0.900 mmol) a una mezcla de 5-etilb¡ciclo[2.2.1 ]hept-2-eno (5.00 g, 40.9 mmol, ChemSampCo) y peryodato de sodio (35.0 g, 164 mmol) en agua (117 mi), MeCN (78 mi) y EtOAc (78 mi). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 16 h. La mezcla de reacción se filtró, extrajo con Et20 (2 x 100 mi). La capa acuosa se extrajo adicionalmente con Et20 (3 x 100 mi). Las capas orgánicas se combinaron, layaron con salmuera (100 mi), secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida. El residuo se disolvió en Ac20 (20 mi, 24 mmol) y calentó a reflujo por aproximadamente 4 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y el solvente se ejiminó bajo presión reducida. Se agregó MeOH (40 mi) y la mezcla de reacción se calentó a reflujo por aproximadamente 6 h. El solvente se eliminó bajo presión reducida para dar ácido cis-2-etil-4-(metoxicarbonil)ciclopentancarboxílico (4.84 g, 59%) como un aceite de color marrón: LC/EM (Tabla 1, Método b) R, = 1.91 min; EM m/z: 201 (M + H) + .
Etapa B: c s-4-etilciclopentan-1 ,3-dicarboxilato de 3-íerc-butil-1 -metilo Una mezcla de ácido cis-2-etil-4- (metoxicarbonil)ciclopentancarboxílico (4.50 g, 22.47 mmol) en SOCI2 (8.20 mi, 112 mmol) se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 16 h. El solvente se eliminó bajo presión reducida. El residuo resultante se disolvió en f-BuOH (22.5 mi). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 16 h. El solvente se eliminó bajo presión reducida. El residuo se disolvió en agua (50 mi) y DCM (100 mi). La capa orgánica se separó, lavó con NaHC03 acuoso saturado (50 mi), secó sobre Na2S04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida para dar cis-4-etilciclopentan-1 ,3-dicarboxilato de 3-terc-butiló 1-metilo (3.94 g, 68%) como un aceite de color marrón oscuro: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.86 min; EM m/z: 257 (M+H)+.
Preparación No. 12: clorhidrato de 1 -(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)but-3-en-1-amina Etapa A: (E)-2-estiril-5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina A una solución de 2-bromo-5-tosil-5W-pirrolo[2,3-¿>]pirazina (3.1 g, 8.8 mmol, Ejemplo No. 1, Etapa B), PdCI2(dppf DC (0.719 g, 0.880 mmol) y ácido (E)-estirilborónico (2.60 g, 17.6 mmol) en THF (3 mi) y agua (2 mi) se agregó Na2C03 (2.33 g, 22.0 mmol). La mezcla de reacción se desgasificó con argón por aproximadamente 5 min. La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 50°C. Luego de aproximadamente 24 h, se agregó PdCI2(dppf)*DCM (0.719 g, 0.880 mmol), ácido (E)-estirilborónico (2.60 g, 17.6 mmol) y Na2C03 (2.33 g, 22.0 mmol) adicionales a la mezcla de reacción. Luego de calentar a aproximadamente 50°C por aproximadamente 48 h, la mezcia de reacción se enfrió a temperatura ambiente y diluyó con DCM (200 mi) y agua (200 mi). La capa orgánica se separó, secó sobré Na2S04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida. La purificación mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc 20-60% en heptano con 5% de DCM dio (E)-2-estiril-5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina como un sólido amarillo (1.2 g, 36%): LC/EM (Tabla 1, Método a) R, = 2.99 min; EM m/z: 376 (M + H) + .
Etapa B: 5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-carbaldehído A una solución de (E)-2-estiril-5-tosil-5H-pirrolo[2,3 £>]piraz¡na (1.2 g, 3.2 mmol) en 1.4-dioxano (20 mi) y agua (2.0 mi) se agregó peryodato de sodio (2.73 g, 12.8 mmol) seguido por tetróxido de osmio (2.5% en peso en f-BuOH, 4.01 mi, 0.320 mmol). La mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 1 día a temperatura ambiente y luego se agregó peryodato de sodio (2.73 g, 12.78 mmol) y tetróxido de osmio (2.5% en peso en r-BuOH, 4.01 mi, 0.320 mmol) adicionales. Luego de agitar por aproximadamente 2 días, se agregó una. solución de Na2S203 acuoso 10% (100 mi) y EtOAc (100 mi). La capá orgánica se separó, secó sobre Na2S04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida para dar un sólido, el cual se trituró con heptano para eliminar benzaldehído. El sólido resultante se secó al vacío para dar 5-tosil-5H-pirrolo[2, 3-b]pirazin-2-carba¡dehído como un sólido marrón (0.77 g, 80%): LC/EM (Tabla 1, Método a) R, = 2.01 min; EM m/z: 334 (M + H) + . Etapa C: 1 -(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-fc]pirazin-2-il)but-3-en-1 -ol A una solución de 5-tosil-5H-pirrolo[2,3-¿>]piraz¡n-2-carbaldehído (5.1 g, 17 mmol) en THF (100 mi) y agua (33.3 mi) se agregó 3-bromoprop-1 -eno (2.86 mi, 33.9 mmol) seguido por indio (3.89 g, 33.9 mmol). La mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 15 h a temperatura ambiente y luego se agregó HCI acuoso (1 N, 150 mi) y EtOAc (150 mi). La capa orgánica se separó, secó sobre Na2S04 anhidro, filtró, concentró in vacuo y purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con EtOAc 20-60% en heptano para dar 1-(5-tos¡l-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)but-3-en-1-ol (4 g, 69%) como un aceite espeso: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.30 min; EM m/z: 344 (M + H)+.
Etapa D: 2-(1 -azidobut-3-enil)-5-tosil-5H-pirrolo[2,3-£>]pirazina A una solución de 1 -(5-tosil-5/-/-pirrolo[2,3-ü]pirazin-2-i|)buí-3-en-1-ol (0.14 g, 0.41 mmol) en DCM (10 mi) se agregó cloruro de tionilo (0.045 mi, 0.61 mmol). La mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 8 h a temperatura ambiente y luego se agregó EtOAc y NaHC03 acuoso saturado (10 mi de cada uno). La capa orgánica se separó, secó sobre Na2S04 anhidro, filtró y concentró in vacuo. El cloruro crudo se disolvió en DMF (10 mi) y agregó azida de sodio (0.159 g, 2.45 mmol) a la mezcla de reacción. La mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 15 h a temperatura ambiente y luego se agregó EtOAc y NaHC03 acuoso saturado (10 mi de cada uno) a la mezcla de reacción. La capa orgánica se separó, concentró in vacuo, y purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con EtOAc 10-60% en heptano para dar 2-(1 -azidobut-3-enil)-5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina (0.153 g, 87%) como un aceite: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.84 min; E m/z: 369 (M + H) + .
Etapa E: clorhidrato de 1 -(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)but-3-en-1 -amina A una solución de 2-(1 -azidobut-3-enil)-5-tosil-5H-pirroio[2,3-¿>]pirazina (3.90 g, 10.6 mmol) en THF (60 mi) y agua (30 mi) se agregó trifenilfosfina (3.33 g, 12.7 mmol). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 50°C por aproximadamente 15 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se concentró in vacuo. El residuo se disolvió en EtOAc (30 mi) y se agregó HCI (gas) hasta que se mantuvo un pH de aproximadamente 1 y luego se agregó Et20 para inducir la formación de un precipitado. Luego de agitar por aproximadamente 15 h, el precipitado se recogió mediante filtración para dar clorhidrato de 1-(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)but-3-en-1-amina (2.5 g, 62%) como un sólido de color tostado: LC/EM (Tabla 1, Método a) R, = 1.80 min; EM m/z: 343 (M + H)+.
Preparación No. 13: A-((5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-¡l)metil)ciclohexancarboxamida A una suspensión de clorhidrato de (5-tosil-5/-/-pirrolo[2,3-6]pirazin-2-il)metanamina (0.50 g, 1.476 mmol, Ejemplo No. 5, Etapa C) en DCM (10 mi) se agregó cloruro de ciclohexancarbonilo (0.221 mi, 1.623 mmol) seguido por DIEA (0.644 mi, 3.69 mmol). La mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 4 h a temperatura ambiente y luego se agregó NaHC03 acuoso saturado (20 mi) y DCM (20 mi) a la mezcla de reacción. La capa orgánica se separó, concentró in vacuo, y se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice (40 g) eluyendo con EtOAc 20-80% en DCM para dar N-((5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)metil)ciclohexancarboxamida (0.49 g, 80%) como un sólido incoloro: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.40 min; EM m/z: 413 (M + H) + .
Preparación No. 14*: (2R,4S)-4-(ciclopropansulf onam ido)-2-metilpirrolidin-1 -carboxilato de ferc-butilo A una suspensión de Pd(OH)2 20% en peso sobre C (0.605 g, 0.862 mmol) en EtOH (75 mi) se agregó una solución de (2R,4S)-4-azído-2-metilpirrolidin-1 -carboxilato de íerc-butilo (3.9 g, 17 mmol, sintetizado como se describe en Rosen, T.; Chu, D. T. W.; Lico, I. M.; Fernandes, P. B.; Marsh, K.; Shen, L; Cepa, V. G.; Pernet, A. G. J. Med. Chem. 1988, 31, 1598-1611) en EtOH (25 mi). La mezcla de reacción se burbujeó con hidrógeno y mantuvo una atmósfera de hidrógeno mediante un balón. La mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 2 h a temperatura ambiente y luego filtró y concentró ¡n vacuo. El residuo se disolvió en DCM (100 mi), enfrió a aproximadamente 0°C y agregó TEA (6.01 mi, 43.1 mmol) seguido por cloruro de ciclopropansulfonilo (2.67 g, 19.0 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 15 h, agregó NaHC03 acuoso saturado (50 mi) a la mezcla de reacción y la capa orgánica se separó, concentró in vacuo, y purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice (80 g) eluyendo con EtOAc 20-80% en heptano para dar (2R,4S)-4-(ciclopropansulfonamido)-2-metilpirrolidin-1 -carboxilato de tere-butilo (2.55 g, 48%) como un aceite: LC/EM (Tabla 1, Método a) R, = 1.98 min (ELSD); EM m/z: 305 (M + H) + .
Preparación No. 15*: (2R,4S)-4-(ciclopropansulfonamido)-2-etilpirrolidin-1 -carboxilato de ferc-butilo A una suspensión de Pd(OH)2 20% en peso sobre C (0.044 g, 0.062 mmol) en EtOH (30 mi) se agregó una solución de (2R,4S)-4-azido-2-etilpirrolidin-1 -carboxilato de ferc-butilo (1.5 g, 6.2 mmol, sintetizado como se describe en Rosen, T.; Chu, D. T. W.; Lico, I. M.; Fernandes, P. B.; Marsh, K.;Shen, L.; Cepa, V. G.; Pernet, A. G. J. Med. Chem. 1988, 31, 1598-1611) en EtOH (10 mi). La mezcla de reacción se burbujeó con hidrógeno y se mantuvo una atmósfera de hidrógeno mediante un balón. La mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 4 h a temperatura ambiente y luego se filtró y concentró in vacuo. El residuo se disolvió en piridina (30 mi) y se agregó cloruro de ciclopropansulfonilo (1.05 g, 7.49 mmol). La mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 15 h a temperatura ambiente y luego se dividió entre EtOAc (50 mi) y CuSO„ acuoso saturado (50 mi). La capa orgánica se separó, lavó con salmuera (30 mi), secó sobre Na2S04 anhidro, filtró, concentró in vacuo, y purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice (80 g) eluyendo con 20-80% de EtOAc en heptano para dar (2 R,4S)-4-(ciclopropansulfonamido)-2-etilpirrolidin-1 -carboxilato de tere-butilo (0.95 g, 48%) como un aceite: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.12 min (ELSD); EM m/z: 319 (M + H) + .
Preparación No. 16: 1-(6-tosil-6H-imidazo[1,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)pirrolidin-3-ilcarbamato de íerc-butilo A una solución de 1 -((5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)metilcarbamotioil)-pirrolidin-3-ilcarbamato de rere-butilo (0.54 g, 1.0 mmol, Preparación No. J.1) en THF (15 mi) se agregó DIEA (0.444 mi, 2.54 mmol) seguido por trifluoroacetato de mercurio (II) (0.478 g, 1.12 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 2 h y luego se agregó NaHC03 acuoso saturado (30 mi) EtOAc (30 mi). La capa orgánica se separó, secó sobre Na2S04 anhidro, filtró, y concentró ¡n vacuo. El material crudo se purificó mediante cromatografía sobre ge! de sílice (40 g) eluyendo con EtOAc 10-40% en DCM para dar 1 -(6-tosil-6H-imidazo[1 , 5-a]p¡rrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)pirrolidin-3-ilcarbamato de tere-butilo (0.411 g, 81%) como un vidrio de color amarillo: LC/EM (Tabla 1, Método a) R, = 2.50 min; EM m/z: 497 (M + H) + .
Preparación No. 17: A/-(4-(3-(2.3-dihidroxipropil)-6-tos¡l-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)biciclo[2,2,2]octan-1-il)ciclopropansulfonamida A una solución de /V-(4-(3-alil-6-tosil-6 -/-imidazo[1 ,5-a] pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)biciclo-[2.2.2]octan-1-il)ciclopropansulfonamida (0.27 g, 0.47 mmol, preparada usando E con ácido 4-(rerc-butoxicarbonilamino)biciclo[2,2,2]octan-1 -carboxilico [Prime Organics], K con cloruro de ciclopropilsulfonilo, H de la Preparación No. 12, HATU y DIEA, Q con Reactivo de Lawesson y trifluoroacetato de mercurio (II)) en 1,4-dioxano (10 mi) y agua (1 mi) se agregó N-óxido de /V-metilmorfolina (0.22 g, 1.8 mmol) seguido por tetróxido de osmio (4% en peso en agua, 0.36 mi, 0.047 mmol). La mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 15 h y luego se agregó DCM (20 mi) y agua (10 mi) a la mezcla de reacción. La capa orgánica se separó, concentró in vacuo, y purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con 10-50% de MeCN en DCM, para dar N-(4-(3-(2.3-dihidroxipropil)-6-tosil-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2, 3-e]pirazin-1 -il)biciclo[2,2,2]octan-1 -il)ciclopropansulfonamida (0.009 g, 3%): LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.90 min; EM m/z 612 (M-H)\ Preparación No. 18: 2-hidrazinil-6-metil-5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b] pirazina Etapa A: 5-bromo-3-(prop-1 -inil)p¡razin-2-amina A una solución de 3.5-dibromop¡razin-2-amina (10.0 g, 39.5 mmol) en THF (200 mi) se agregó yoduro de cobre (I) (0.377 g, 1.98 mmol), dicloruro de bis (trifenilfosfina)paladio (II) (1.39 g, 1.98 mmol) y TEA (16.5 mi, 119 mmol). La mezcla de reacción se enfrió a aproximadamente 0°C y se desgasificó con Ar. La mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 5 min y luego la mezcla de reacción se roció con propino y se mantuvo una atmósfera de propino con un balón. La mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 30 min a aproximadamente 0°C y luego se dejó calentar a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 2 h y luego se agregó EtOAc (100 mi) y agua (100 -mi) a la mezcla de reacción. La capa orgánica se separó, secó sobre Na2S04 anhidro, filtró, y concentró in vacuo. La mezcla cruda se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice (120 g) eluyendo con EtOAc 10-60% en DCM (carga seca) para dar 5-bromo-3-(prop-1 -inil)pirazin-2-amina (7.05 g, 84%) como un sólido amarillo: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.79 min; EM m/z: 212, 214 (1:1) (M + H) + .
Etapa B: 2-bromo-6-metil-5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]piraz¡na A una suspensión de NaH (60% de dispersión en aceite mineral, 2.00 g, 49.9 mmol) en NMP (100 mi) se agregó lentamente una solución de 5-bromo-3-(prop- -inil)pirazin-2-amina (7.05 g, 33.2 mmol) en NMP (20 mi). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 20 min y luego se agregó una solución de cloruro de p-toluensulfonilo (6.97 g, 36.6 mmol) en NMP (20 mi). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 20 h y luego se agregó HCI acuoso (1 N, 100 mi) a la mezcla de reacción. Los sólidos resultantes se recogieron mediante filtración. El sólido marrón se trituró con DCM/EtOAc (1:1, 30 mi) y se recogió mediante filtración para dar 2-bromo-6-metil-5-tosii-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina (9.0 g, 74%) como un sólido marrón: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.68 min; EM m/z: 366, 368 (1:1) (M + H) + .
Etapa C: 2-(6-metil-5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)hidrazincarboxilato de rere-butilo Se combinó tris(dibencilidenacetona)dipaladio(0) (0.250 g, 0.273 mmol) y 2-d¡-rerc-but¡lfosfino-2',4',6'-triisopropilbifenilo (0-232 g, 0.546 mmol) en 1,4-dioxano (15 mi). El recipiente se evacuó cón algo de burbujeo del solvente y luego se llenó nuevamente cuidadosamente con nitrógeno (3 veces). Luego se burbujeó nitrógeno directamente en la mezcla de reacción. La mezcla luego se calentó a aproximadamente 80°C por aproximadamente 10 min y luego se retiró de la fuente de calentamiento. Se agregó 2-Bromo-6-metil-5-tosil-5H-pirrolo[2,3- ¿»]pirazina (1.0 g, 2.73 mmol), hidrazincarboxilato de ferc-butilo (0.541 g, 4.10 mmol) y NaOr-Bu (0.501 mi, 4.10 mmol) y la reacción se calentó a aproximadamente 80°C por aproximadamente 1 h. la reacción se enfrió a temperatura ambiente y los solventes se eliminaron bajo presión reducida. El residuo negro luego se recogió con EtOAc (50 mi) y filtró. El material filtrado se lavó con NH4CI acuoso saturado (50 mi), EDTA (1.0 M acuoso, 50 mi) y NaHC03 acuoso saturado (50 mi). La solución se secó sobre Na2S04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida. El material se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice (80g) eluyendo con 25-100% de EtOAc en heptano para dar 2-(6-metil-5-tosil-5H-pirrólo[2,3-b]pirazin-2-¡l)hidrazincarboxilato de ferc-butilo (0.160 g, 14%) como un aceite de color marrón: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.51 min; EM m/z: 418. (M + H)+.
Etapa D: 2-hidrazinil-6-metil-5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazi(r<a Se agitó 2-(6-metil-5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)h¡drazincarboxilato de rere-butilo (0.16 g, 0.38 mmol) en 1,4-dioxano (1.9 mi) en un vial sellado para dar una solución marrón. Se agregó HCI (4 M en 1,4-dioxano, 0.958 mi, 3.83 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 20 h. Los solventes se eliminaron bajo presión reducida. El residuo se dividió entre NaHC03 acuoso saturado (10 mi) y EtOAc (10 mi). Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 mi). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (20 mi), secaron sobre Na2S0 anhidro, filtraron, y concentraron in vacuo para dar 2-hidrazinil-6-metil-5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina (0.089 g, 73%): LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.92 min; EM m/z: 318 (M + H)\ Preparación No. 19: Preparación No. 19.1: (1 S,3R,4S)-3-met¡l-4-(6W-pirroÍo[2,3-elM ,2,4]triazoio[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentanamina Preparación No. 19.2: (1 S,3R,4S)-3-metil-4-(6-tosil-6H-pirroÍo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentanamina A una mezcla de ?/-((1 S,3R,4S)-3-metil-4-(6-tos¡l-6H-p¡rrolo[2,3-e][1 ,2,4]tr¡azolo[4,3-a]p¡razin-1-il)ciclopentil)acetamida (1.52 g, 3.36 mmol, preparada usando Y del Ejemplo No. 7, Etapa H y Pd/C, g, AA [Tabla 2, Método 3, Rt = 6.1 min, o = ND], Z con NaOH, A con Ejemplo No. 1 Etapa D , HATU, y TEA, y B con TEA) y 1,4-dioxano (25 mi) se agregó HCI acuoso (6 N, 25 mi, 150 mmol). La reacción se calentó a aproximadamente 100°C por aproximadamente 14 h y luego enfrió a temperatura ambiente y concentró bajo presión reducida. Al residuo de color marrón resultante se agregó MeOH (30 mi) y la solución se concentró bajo presión reducida. Al residuo resultante se agregó MeOH (5 mi) seguido por adición lenta de Et20 (20 mi). Inicialmente se formó una solución turbia y luego se formó un aceite/goma oscuro y la mezcla se concentró bajo presión reducida. Al residuo de color marrón resultante se agregó MeOH (30 mi), (1 S,3R,4S)-3-met¡l-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 , 2, 4] triazolo[4,3-a]pirazin-1 -i l)ciclopen tan-amina (1.35 g, 2.50 mmol, UV pureza 75%) de una reacción aparte, y gel de sílice (7 g). La mezcla se concentró bajo presión reducida y se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-100% (DCM/[2 NH3 en MeOH] (9:1)) en DCM, por la columna luego se hizo pasar MeOH luego MeOH/ NH4OH acuoso (9:1), para dar (1S, 3R,4S)-3-metil-4-(6H-pirrolo[2, 3-e][1, 2,4]triazóIo[4, 3-a]pirazin-1-il)ciclopentanamina [Preparación No. 19.1] (0.092 g, 5%) como un sólido marrón oscuro: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt ~ 1.35 min; EM m/z 257 (M + H)+ y 2.9 g de residuo de color marrón que se dividió entre DCM y NaHC03 acuoso saturado (50 mi de cada uno). Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con DCM adicional (2 x 50 mi). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida para dar (1 S,3R,4S)-3-metil-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][ 1 ,2,4]tr¡azolo[4, 3-a]p¡razin-1-il)ciclopentanam¡na [Preparación No. 19.2] (1.94 g, 78%) como una espuma marrón grisáceo: LC/EM (Tabla 1, Método a) R, = 1.80 min; EM m/z 411 (M + H) + .
Preparación No. 20: benzoato de 3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4] triazolo [4, 3-a]pirazin-1 -il)ciclopentilo A una mezcla de benzoato de 3-etil-4-(6-tosil-6H-pirrplo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentilo (5.00 g, 7.84 mmol, preparado en el Ejemplo No. 4 Etapa J usando II con ácido benzoico, y B) en MeOH (16 mi) se agregó una solución de cianuro de potasio (0.74 mi, 17.2 mmol) en MeOH (16 mi). La reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 16 h. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida para dar un residuo. El residuo se dividió entre agua (20 mi) y DCM (20 mi). Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con DCM (3 x 10 mi). El extracto luego se lavó con NaHC03 acuoso saturado, secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida para dar un aceite crudo. El material crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-10% de MeOH en DCM a benzoato de 3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentilo (2.30 g, 78%) como un sólido rojo. LC/EM (Tabla 1, Método a) R, = 2.08 min; EM m/z: 376 (M + H) + .
Preparación No. 21: 4-(aminometil)-2-etilciclopentancarboxilaío de ferc-butilo 2-etil-4-(hidroximetil)ciclopentancarboxilato Una solución de 4-etilciclopentan-1 ,3-dicarboxilato de 3-terc- 1-metilo (3.88 g, 15.1 mmol, Preparación No. 11, Etapa B) en Et20 (150 mi) se enfrió a aproximadamente -40°C. LAH (2 N en THF, 8.32 mi, 16.6 mmol) se agregó por goteo. La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente -40°C por aproximadamente 1 hora. La mezcla de reacción se dividió entre NaHC03 acuoso saturado (50 mi) y EtOAc (3 x 50 mi). Los extractos orgánicos combinados se concentraron bajo presión reducida. El material crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc al 0-100%/heptano para dar 2-etil-4-(hidroximetil)ciclopentancarboxilato de ferc-butilo (1.00 g, 29%) como un aceite de color marrón: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.37 min; EM m/z: 229 (M + H)+.
Etapa B: 2-etil-4-((metilsulfoniloxi)metil)ciclopentancarboxiíato de ferc-butilo A una solución de 2-etil-4-(hidroximetil)ciclopentancarboxilato de ferc-butilo (0.220 g, 0.964 mmol) en DCM (5 mi) se agregó TEA (0.16 mi, 1.15 mmol) y cloruro de metansulfonilo (0.083 mi, 1.06 mmol) a aproximadamente 0°C. La mezcla de reacción se dejó calentar a aproximadamente 25°C y se agitó a aproximadamente 25°C por aproximadamente 16 h. La mezcla de reacción se dividió entre agua (20 mi) y DCM (20 mi). La solución acuosa se lavó con DCM (2 x 20 mi). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre gS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida para dar 2-etil-4-((metilsulfoniloxi)metil)ciclopentancarboxilato de íerc-butilo (0.295 g, 100%): LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.55 min; EM miz: 307 (M + H) + . Etapa C: 4-(aminometil)-2-etilciclopentancarboxilato de íerc-butilo A una solución de 2-etil-4- ((metilsulfoniloxi)metil)ciclopentancarboxilato de íerc-butilo (0.295 g, 0.964 mmol) en DMF (5 mi) se agregó azida de sodio (0.313 g, 4.82 mmol). La reacción se calentó a aproximadamente 50°C por aproximadamente 16 h y luego se enfrió a aproximadamente 15-20°C. Se agregó agua (40 mi) a la mezcla de reacción. La solución acuosa se extrajo con DCM (3 x 30 mi). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgS0 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida para dar un aceite de color marrón oscuro. El aceite de color marrón se disolvió en THF (6.5 mi) y agua (3.5 mi). Se agregó trifenilfosfina (0.316 g, 1.205 mmol). La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente 25°C por aproximadamente 15 h. El solvente orgánico se eliminó bajo presión reducida y el residuo se dividió entre NaHC03 acuoso saturado (20 mi) y DCM (20 mi). La fase orgánica se concentró bajo presión reducida. El residuo resultante se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-20% (20% (amonio 7 N en MeOH) en MeOH)) en DCM para dar 4- (aminometil)-2-etilciclopentancarboxilato de ferc-butilo (0.102 g, 46%) como un aceite de color marrón: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 1.72 min; EM m/z: 228 (M + H) + .
Preparación No. 22: 2-etil-4-formilciclopentancarboxilato de etilo Etapa A: ácido 2-etil-4-(hidroximetil)ciclopentancarboxílico A una solución de ácido 2-ett I-4- (metoxicarbonil)ciclopentancarboxílico (8.34 g, 41.7 mmol, Preparación No. 11, Etapa A) en THF (208 mi) se agregó L¡BH4 (0.907 g, 41.7 mmol) a aproximadamente -20°C. La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente -20°C por aproximadamente 1 h. La mezcla de reacción se dejó calentar a aproximadamente 25°C luego se agitó a aproximadamente 25°C por aproximadamente 16 h. Se agregó LiBH, adicional (0.907 g, 41.7 mmol). La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente 25°C por aproximadamente .4 h. Se agregó agua (10 mi) lentamente para detener la reacción. El sólido se retiró mediante filtración al vacío. El material filtrado se concentró bajo presión reducida. El residuo resultante se dividió entre agua (50 mi) y DCM (3 x 50 mi). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgS0 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida para dar ácido 2-etil-4-(hidroximetil)ciclopentancarboxílico (7.29 g, 100%): LC/EM (Tabla 1, Método n) R, = 0.44 min; EM m/z 173 (M + H) + .
Etapa B: 2-etil-4-(hidroximetil)ciclopentancarboxilato de etilo Se burbujeó gas HCI a través de una solución de ácido 2-eti I-4-(hidroximetil)ciclopentancarboxílico (7.29 g, 42.3 mmol) en EtOH (60 mi) a aproximadamente 25°C por aproximadamente 10 min. La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente 25°C por aproximadamente 72 h. El solvente se eliminó bajo presión reducida. El residuo crudo se dividió entre agua (30 mi) y DCM (3 x 30 mi). Los extractos orgánicos combinados se concentraron bajo presión reducida. El material crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc al 0-100%/heptano para dar 2-etil-4-(hidroximetil)ciclopentancarboxilato de etilo (4.89 g, 58%) como un aceite de color amarillo: 1H RMN (CDCI3) d 4.23 - 4.02 (m, 2H), 3.74 -3.47 (m, 2H), 2.96 - 2.83 (m, 1H), 2.31 - 2.17 (m, 1H), 2.15 - 1.98 (m, 2H), 1.97 - 1.84 (m, 1H), 1.79 - 1.66 (m, 1H), 1.65 - 1.50 (m, 1H), 1.49 - 1.37 (m, 1H), 1.30 - 1.21 (m, 5H), 1.04 - 0.82 (m, 3H).
Etapa C: 2-etil-4-formilciclopentancarboxilato de etilo A una solución de 2-etil-4-(hidroximetil)ciclopentancarboxilato de etilo (4.84 g, 24.2 mmol) en DCM (100 mi) se agregó clorocromato de piridinio (10.42 g, 48.3 mmol). La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente 25°C por aproximadamente 3 h. Se agregó gel de sílice (1 g). La mezcla se agitó a aproximadamente 25°C por aproximadamente 30 min. El sólido se retiró mediante filtración al vacío, enjuagando con DCM (100 mi). El material filtrado se concentró bajo presión reducida. El residuo resultante se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-40% EtOAc/Heptano para dar 2-etil-4-formilciclopentancarboxilato de etilo (3.03 g, 63%) como un aceite traslúcido: 1H RMN (DMSO-cf6) ó 9.66 -9.47 (m, 1H), 4.12 - 3.94 (m, 2H), 2.94 - 2.73 (m, 2H), 2.19 - 1.90 (m, 4H), 1.55 - 1.65 (m, 1H), 1.37 - 1.23 (m, 1H), 1.23 - 1.06 (m, 4H), 0.96 - 0.82 (m, 3H).
Preparación No. 23: W-((1 S,3R,4S)-3-etil-4-(8-metii-6-((2-(tr¡metilsilil)etoxi)metil)-6W-pirrolo[2,3-e][1,2,4]tr¡azolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentil)-A-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)ciclopropansulfonamida agregó carbonato de cesio (0.274 g, 0.841 mmol), triciclohexilfosfina (20% en peso solución en tolueno, 0.094 g, 0.067 mmol), Pd2(dba)3 (0.039 g, 0.042 mmol) y borato de trimetilo (0.069 g, 0.547 mmol) a una solución de ?/-((1 S,3R,4S)-3-etil-4-(8-yodo-6-((2-(trimetilsilil)etox¡)metil)-6/-/-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]piráz¡n-1 -il)ciclopentil)-/V-((2-(tr¡metilsilil)etoxi)metil)ciclopropansulfonamida (0.32 g, 0.421 mmol, preparado usando KK de la Preparación No. GGG.1) en 1,4-dioxano (8 mi). La mezcla se desgasificó y se calentó a aproximadamente 85°C por aproximadamente 2 h. El solvente se eliminó y el residuo se dividió entre EtOAc y agua (20 mi de cada uno). La fase orgánica se lavó con salmuera (15 mi), secó sobre MgS0 anhidro, filtró y concentró. La mezcla resultante se purificó mediante gel de sílice cromatografía instantánea (40 a 100% de EtOAc en heptano) para dar N-((1 S,3R,4S)-3-etil-4-(8-meti¡-6-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2, 4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentil)-N-((2-(trimetilsili¡)etoxi)metil)ciclopropansulfonamida (0.21 g, 77%) como un sólido amarillo amorfo. LC/EM (Tabla 1, Método a) R, = 3.39 min; EM m/z. 650 (M + H)\ Preparación No. 24: 2-(4-(ciclopropansulfonamido)biciclo[2.2.2] octan-1 -il)-2-oxoetilfosfonato de dietilo Etapa A: 4-(ciciopropansulfonamido)biciclo[2.2.2]octan-1 -carboxilato de metilo A una solución de 4-aminobiciclo[2.2.2]octan-1 -carboxilato de metilo (500 mg, 2.73 mmol) (Yeh, V. S. C; Kurukulasuriya, R.; Madar, D.; Patel, J. R.; Fung, S.; Monzón, K.; Chiou, W.¡ Wang, J.; Jacobson, P.; Sham, H. L; Link, J. T. Bioorg. y Med. Chem. Let, 2006, vol. 16, # 20 p. 5408 - 5413) en DCM (10 mi) a temperatura ambiente se agregó TEA (0.76 mi, 5.46 mmol) y DMAP (50 mg, 0.41 mmol). Se agregó cloruro de ciclopropansulfonilo (764 mg, 5.46 mmol, Matrix) por goteo con una jeringa. La mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 15 h a temperatura ambiente. La mezcla se lavó con agua (10 mi), y la capa acuosa se extrajo con DCM (2 x 10 mi), las capas orgánicas se combinaron y secaron sobre Na2S0 anhidro, filtraron y concentraron in vacuo. El material crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc 20-35% en hexanos para dar 4- (ciclopropansulfonamido)biciclo[2.2.2]octan-1 -carboxilato de metilo (410 mg, 52% de rendimiento). LC/EM (Tabla 1, Método p) Rt = 1.68 min; EM m/z: 288 (M + H) + .
Etapa B: (4-(ciclopropansulfonamido)biciclo[2.2.2]octan-1 -il)metilfosfonato de dietilo Una solución de metilfosfonato de dietilo (1.27 g, 8.36 mmol) se disolvió en THF (20 mi) y se enfrió a aproximadamente -78°C en un baño de hielo seco-acetona bajo nitrógeno. Luego se agregó /7-BuLi (9.77 mmol, 3.9 mi, 2.5M en hexano) por goteo durante aproximadamente 5 min. La mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 3 h, manteniendo la temperatura bajo aproximadamente -70°C. Luego se agregó una solución de 4-(ciclopropansulfonamido)biciclo[2.2.2]octan-1-carboxilato de metilo (800 mg, 2.79 mmol) en THF (10 mi), manteniendo la temperatura a aproximadamente -78°C. La solución se agitó por aproximadamente 15 h, dejando elevar lentamente la temperatura ambiente. A la mezcla de reacción se agregó NH4CI acuoso saturado (30 mi) y extrajo con EtOAc (3 x 30 mi). Las capas orgánicas se combinaron y lavaron con salmuera, secaron sobre Na2S0 anhidro y concentraron para dar (4-(ciclopropansulfonamido)biciclo[2.2.2]octan-1-íl)metilfosfonato de dietilo (1.30 g, 100% de rendimiento). El producto crudo se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. LC/EM (Tabla 1, Método p) Rt = 1.62 min; EM m/z: 408 (M + H)+.
Preparación No. 25: 3-etil-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentanona Etapa A: 2-etil-4-oxociclopentancarboxilato de etilo matraz de fondo redondo se cargó con 2-etil-4-oxociclopentancarboxilato de etilo (1.5 g, 8.1 mmol, Ejemplo No. 22, Etapa B) en DCM (22 mi). Al recipiente se agregaron etilenglicol (0.91 mi, 16 mmol), trietilortoformiato de (2.0 mi, 12 mmol), y monohidratado del ácido p-toluensulfónico (0.31 g, 1.6 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 24 h. La solución se concentró bajo presión reducida para dar un aceite de color marrón el cual se disolvió en EtOAc y se purificó mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice (columna Silicycle 25 g) eluyendo con un gradiente de 0-50% de EtOAc en heptano. Las fracciones que contenían producto se combinaron y se concentró hasta secar bajo presión reducida para dar 2-etil-4-oxociclopentancarboxilato de etilo como un aceite de color amarillo claro (1.6 g, 83%): LC/EM (Tabla 1, Método c) EM m/z 229 (M + H) + ; 1H RMN (CDCI) d 4.14 (q, 2H), 3.90 (m, 4H), 2.99 (q, 1H), 2.32-2.27 (m, 1H), 2.26-2.11 (m, 1H), 2.05-1.99 (m, 1H), 1.96-1.91 (m, 1H), 1.83-1.78 (m, 1H), 1.46-1.39 (m, 1H), 1.31-1.24 (m, 1H), 1.26 (t, 3 H), 0.90 (t, 3H). Etapa B: ácido 8-etil-1 ,4-dioxaespiro[4.4]nonan-7-carboxílico Un matraz de fondo redondo se cargó con 8-etil-1,4- dioxaespiro[4.4]nonan-7-carboxilato de etilo (0.32 g, 1.4 mmol) y hidróxido de sodio acuoso 1 N (14.0 mi, 14.0 mmol). La solución se agitó durante la noche a temperatura ambiente. A la solución se agregó DCM (30 mi) y luego se agregó ácido cítrico acuoso 20% (aproximadamente 20 mi) para alcanzar pH de aproximadamente 2. Las capas se separaron y la solución acuosa se extrajo con DCM (2x30 mi) y DCM/EtOAc (1:1, 30 mi). Los extractos combinados se secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida para dar ácido 8-etil-1 ,4-dioxaespiro[4.4Jnonan-7-carboxilico como un aceite incoloro traslúcido (0.27 g, 96%): LC/EM (Tabla 1, Método c) Rt = 1.20 min; EM m/z: 201 (M + H) + .
Etapa C: 8-etil-N '-(5-tosí l-5H-pi rrolo[2,3-b]pirazin-2-il)-1 ,4- dioxaespiro[4.4]nonan-7-carbohidrazida Un balón de 50 mi se cargó con 2-hidrazin¡l-5-tos¡l-5H- pirrolo[2,3-í]pirazina (0.350 g, 1.16 mmol, Ejemplo No. 1, Etápa D), ácido 8-etil-1 ,4-dioxaespiro[4.4]nonan-7-carboxílico (0.250 g, 1.25 mmol), y DCM (6.0 mi). A la mezcla de reacción se agregó HATU 25 (0.483 g, 1.27 mmol) y TEA (0.64 mi, 4.6 mmol) y la suspensión de color amarillo resultante se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 3 h. A la solución de reacción se agregó DCM (25 mi) y la solución se lavó con agua y salmuera (20 mi de cada uno). La capa orgánica se secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida para dar un aceite de color marrón. El producto crudo se purificó mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice (columna 25 g Silicycle) eluyendo con un gradiente de: 0-10% de MeOH en DCM durante 25 min. Las fracciones que contenían producto se concentraron bajo presión reducida para dar 8-etil-N'-(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b] irazin-2-il)-1 ,4-dioxaespiro[4.4]nonan-7-carbohidrazida como una espuma (0.50 g, 89%): LC/EM (Tabla 1, Método c) Rt = 1.49 min; EM m/z: 486 (M + H) + .
Etapa D: 1 -(8-eti 1-1 ,4-dioxaespiro[4.4]nonan-7-¡l)-6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina Un matraz de fondo redondo se cargó con 8-etil-N'-(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)-1 ,4-dioxaespiro[4.4]nonan-7-carbohidrazida (4.90 g, 10.1 mmol) y 1,4-dioxano (50 mi). Al recipiente se agregó DIEA (8.81 mi, 50.5 mmol) y luego se agregó cloruro de tionilo (0.770 mi, 10.6 mmol). La mezcla se calentó a aproximadamente 75°C por aproximadamente 90 min. Se agregó cloruro de tionilo adicional (0.074 mi, 1.0 mmol) y el calentamiento se continuó por aproximadamente 1 h. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y se agitó durante la noche. La solución se diluyó con DCM (75 mi) y se lavó con agua (50 mi). Las capas se separaron y la capa orgánica se secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida para dar un aceite de color marrón oscuro. El producto crudo se purificó mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de acetona 0-60% en heptano manteniendo a 60% acetona en heptano. Las fracciones que contenían producto se combinaron y se concentró para dar un material que se cargó en una segunda columna (Silicycle, columna de 40 g), eluyendo con un gradiente de 0-60% acetona en heptano. Las fracciones que contenían producto se combinaron y se concentró bajo presión reducida para dar 1-(8-etil-1, 4-dioxaespiro[4.4]nonan-7-il)-6-tosil-6H-pirrolo[2, 3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina como un polvo color tostado (3.0 g, 64%): LC/EM (Tabla 1, Método c) Rt = 1.44 min; EM m/z: 468 (M + H)\ Etapa E: 3-eti I -4-(6-tos ¡I -6H-p¡ rrolo[2 ,3-e] [1 , 2,4] triazo lo[4, 3-a]pirazin-1 -il)ciclopentanona Un matraz de fondo redondo se cargó con 1 -((7S.8R)-8-etil-1 ,4-dioxaespiro[4.4]nonan-7-il)-6-tos¡l-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]p¡razina (3.56 g, 7.61 mmol) y THF (20 mi). A la solución se agregó HCI acuoso (6N, 3.81 mi, 22.8 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 2 h. El solvente se eliminó bajo presión reducida y se agregó DCM (75 mi) y agua (50 mi). Las capas se separaron y la solución orgánica se secó sobre gS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida para dar 3-etil-4-(6~ tosil-6H-pirrolo[2, 3-e][1 ,2,4]triazolo[4, 3-a]pirazin-1-il)ciclopentanona como una espuma marrón (2.99 g, 93%): LC/EM (Tabla 1, Método c) Rt = 1.40 min; EM m/z: 424 (M + H) + .
Preparación No. 26: 3,3-dif luoro-1 -(vinilsulfonil)pirrolidina FT F HCI < O O^ F ° Una solución de clorhidrato de 3,3-difluoropirrolidina (0.3 g, 2.1 mmol, Matrix) y DIEA (0.37 mi, 2.1 mmol) en MeCN (5 mi) se agitó a aproximadamente 50°C por aproximadamente 30 min. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y se concentró bajo presión reducida. El sólido se disolvió en MeCN (2 mi) y agregó una solución de cloruro de 2-cloroetansulfonilo (0.22 mi, 2.1 mmol) en Et20 (3 mi) a aproximadamente -78°C y agitó por aproximadamente 2 h. A la mezcla de reacción se agregó DIEA (0.6 mi, 3.4 mmol) y agitó por aproximadamente 1 h. La reacción se calentó a temperatura ambiente y el solvente se eliminó bajo presión reducida. El residuo se dividió entre DCM (5 mi) y agua (2 x 2MI). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron y concentraron bajo presión reducida para dar 3,3-difluoro-1-(vin¡lsulfonil)pirro¡idina cruda (0.11 g, 27%) el cual se usó sin purificación adicional: LC/EM (Tabla 1, Método b) R, = 2.04 min; EM m/z: 198 (M + H)+.
Preparación No. 27: 4-cloro-5-nitro-1 AY-pirrolo[2,3-/)]piridina Etapa A: 4-cloro-3-yodo-5-nitropiridin-2-am¡na Una solución de 4-cloro-3-yodopiridin-2-amina (0.25 g, 0.982 mmol, Boa Pharma) en H2S04 concentrado (1.95 mi) se enfrió a aproximadamente 0°C antes de agregar por porciones nitrato de potasio (0.21 g, 2.2 mmol) a lo largo de 10 min. La reacción se agitó por aproximadamente 4 h a aproximadamente 0°C. La mezcla de reacción se pipeteó lentamente sobre una solución de hidróxido de amonio y hielo triturado (10 mi) en un baño de hielo. El pM de la reacción se mantuvo por encima de 9 mediante la adición ¡ncrémental de hidróxido de amonio. El precipitado resultante se filtró y secó para dar 4-cloro-3-yodo-5-nitropiridin-2-am¡na (0.085 g, 29%) como un sólido verde LC/EM (Tabla 1, Método n) R, = 0.64 min; EM rr/z: 298 (M-H)-.
Etapa B: 4-cloro-5-nitro-3-((trimetilsilil)etinil)pir¡d¡n-2-amina A una solución de 4-cloro-3-yodo-5-nitropiridin-2-amina (5.30 g, 17.7 mmol) en THF (90 mi) se agregó TEA (15.0 mi, 108 mmol). La mezcla de reacción se desgasificó y purgó con nitrógeno 3 veces. Se agregó cloruro de Bis(trifenilfosfin)-paladio(l I) (0.62 g, 0.88 mmol, Strem), yoduro de cobre(l) (0.17 g, 0.89 mmol), y trimetilsililacetileno (5.4 mi, 39 mmol) a la mezcla de reacción. La mezcla se desgasificó y purgó 3 veces con nitrógeno. La reacción se calentó a aproximadamente 60°C por aproximadamente 16 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se filtró y lavó con THF (200 mi). El material filtrado se concentró bajo presión reducida. Se agregó DCM (100 mi) al residuo y el precipitado que se había formado se filtró y recogió para dar 4-cloro-5-nitro-3-((tr¡metilsilil)etinil)piridin-2-amina (0.77 g). El material filtrado restante se concentró bajo presión reducida y el material crudo se purificó mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc 0-100% en DCM. El material purificado se combinó con los 0.77 g de precipitado para dar 4-cloro-5-nitro-3-((tr¡metilsilil)etinil)pirid¡n-2-amina (2.22 g, 47%) como un sólido de color amarillo: LC/EM (Tabla 1, Método c) Rt = 1.62 min; EM m/z 268 (M-H)-.
Etapa C: 4-cloro-3-etinil-5-nitropiridin-2-amina A una solución de 4-cloro-5-nitro-3-((trimetilsilil)etinil)piridin-2-amina (1.98 g, 7.34 mmol) en DMF (25 mi) se agregó fluoruro de potasio sobre alúmina (40% en peso, 2.67 g, 18.35 mmol). La suspensión se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 1 h. Se agregó carbón activado (0.3 g) y la suspensión se filtró a través de Celite®, lavando con DMF (150 mi). El solvente se eliminó bajo presión reducida y el material crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-10% de MeOH en DCM para dar 4-cloro-3-etinil-5-nitropiridin-2-amina (1.03 g, 71%) como un sólido de color amarillo: LC/EM (Tabla 1, Método n) R, = 0.59 min; EM m/z: 196 (M-H)\ Etapa D: 4-cloro-5-nitro-1 H-pirrolo[2,3-b]pir¡dina A una solución de 4-cloro-3-etinil-5-nitropiridin-2-amina (0.16 g, 0.81 mmol) en DMF (3 mi) se agregó dímero de cloro(1,5-ciclooctadien)rodio (I) (0.02 g, 0.04 mmol) y tris(4-fluorofenil)fosf ina (0.128 g, 0.405 mmol). La mezcla de reacción se desgasificó burbujeando argón por 15 min. La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 80°C por aproximadamente 45 min. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y el solvente se eliminó bajo presión reducida y el residuo se suspendió en éter (10 mi). El precipitado se recogió mediante filtración y secó para dar 4-cloro-5-nitro-1H-pirrolo[2,3-b]piridina (0.132 g, 83%, contiene aproximadamente 6% mol de DMF y aproximadamente 3% mol de tris(4-fluorofenil)fosfina) como un sólido de color marrón: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.05 min; EM m/z 198 (M + H) + .
Preparación No. 28*: N-(( 1 S,3 R,4S)-3-eti l-4-(6-tos ¡I-6 H-p: rro[o[2 ,3 -e [1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentil)-2-metilpropan-2-sulfonamida A una solución de (1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e/[ ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentanamina (115 mg, 0.271 mmol, Preparación No. BB.1*) en DCM (1.5 mi) se agregó DIEA (0.071 mi, 0.406 mmol) seguido por cloruro 2-metilpropan-2-sulfínico (0.037 mi, 0.298 mmol). Luego de aproximadamente 4 h la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (10 mi) y NaHC03 acuoso saturado (10 mi). La capa orgánica se separó, secó sobre Na2S04 anhidro, filtró y concentró in vacuo. El residuo crudo se disolvió en DCM (1.5 mi) y agregó una solución preparada en el momento de ácido m-cloroperbenzoico (0.271 mi, 0.271 mmol, 1M en DCM). Luego de aproximadamente 2 h la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (10 mi) y NaHC03 acuoso saturado (10 mi). La capa orgánica se separó, secó sobre Na2S04 anhidro, filtró y concentró in vacuo. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con EtOAc para dar N-((1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]tr¡azolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentil)-2-metilpropan-2-sulfonamida (95 mg, 64% de rendimiento) como un aceite. LC/EM (Tabla 1, Método a) R, = 2.40 min; EM m/z: 545 (M + H)+.
Preparación No.29*: 3-((1 S.aR^SJ-S-etM^-íe-tosil-efY-pirrolo .S-eni ,2,4]triazolo[4,3-a]piraz¡n-1 -il)ciclopentilamino)-4-metoxiciclobut-3-en-1,2-diona A una solución de (1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6-tosil-6/-/-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentanamina (0.40 g, 0.942 mmol, Ejemplo No. 8 Etapa M) en MeOH (3 mi) se agregó 3.4-dimetoxiciclobut-3-en-1 2-diona (0.14 g, 0.98 mmol) y DIEA (0.18 mi, 1.0 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 16.5 h. Luego el sólido de la mezcla de reacción se recogió mediante filtrado al vacío, lavando con MeOH frío (aproximadamente 4°C, 10 mi), y se secó en un horno de vacío a aproximadamente 60°C para dar 3-((1 S,3R,4S)-3-et¡l-4-(6÷tosü-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2, 4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentilamino)-4-metoxiciclobut-3-en-1.2-diona cruda (0.36 g, 73%, 90% de pureza): LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.13 min; EM m/z: 535 (M+H)\ Preparación No. 30: clorhidrato de 3,3,3-trif luoro-1 -(5-to$íI-5H-pirrolo[2,3-b]p¡razin-2-il)propan-1 -amina Etapa A: W-(difenilmetilen)-1 -(5-tos¡l-5W-p¡rrolo[2,3-b]piraz¡n-2-il)metanamina A una solución de (5Ttosil-5H-pirrolo[2,3-¿>]p¡razin-2-il)metanamina (2.00 g, 6.61 mmol, Ejemplo No. 5 Etapa C) en DCM (30 mi) se agregó difenilmetanimina (1.16 mi, 6.61 mmol). Luego de aproximadamente 2 d, la mezcla de reacción se concentró in vacuo para dar N- (difenilme tile n)-1 -(5-tosil-5H '-pirrólo [2, 3-b]pirazin-2-il)metanamina (2.75 g, 89%) como una espuma y se usó sin purificación adicional. LC/E (Tabla 1, Método a) Rt = 3.02 min; EM m/z: 467 (M + H)\ Etapa B: clorhidrato de 3,3,3-trifluoro-1 -(5-tosil-5H-pirroío|2,3-b]pirazin-2-il)propan-1 -amina A una solución de A/-(difen¡lmetilen)-1 -(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)metanamina (0.722 g, 1.55 mmol) en THF (3 mi) a aproximadamente -78°C se agregó NaHMDS (0.5 M en THF, 1.55 mi, 1.55 mmol). Luego de aproximadamente 30 min, se agregó 1,1,1-trifluoro-2-yodoetano (1.51 mi, 15.5 mmol) a la mezcla de reacción. Luego de aproximadamente 4 h, la mezcla de reacción se dejó calentar a temperatura ambiente lentamente durante la noche. Luego de aproximadamente 15 h, se agregó EtOAc (30 mi) y NaHC03 acuoso saturado (30 mi). La capa orgánica se separó, concentró in vacuo y purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyéndo con EtOAc/heptano (20-50%) para dar la imina alquilada cruda. La imina se disolvió en acetato de isopropilo (30 mi) y se agregó HCI concentrado (0.50 mi). La mezcla de reacción se hizo girar en un evaporador rotatorio por 1 h antes de la concentración parcial a aproximadamente 10 mi. Se agregó acetato de isopropilo adicional (30 mi) y el solvente se eliminó parcialmente al vacío hasta que restaron aproximadamente 10 mi. Se agregó Et20 (30 mi) y la solución se dejó reposar por aproximadamente 30 min. Los sólidos resultantes se recogieron mediante filtración y secaron al vacío para dar clorhidrato de 3, 3, 3-trifluoro-1 -(5-tosil-5H-pirrolo[2, 3-b]pirazin-2-il)propan-1 -amina (0.150 g, 23%) como un sólido incoloro. LC/EM (Tabla 1, Método a) R, = 1.88 min; EM m/z 385 (M + H) + .
Preparación No. 31: ácido (1 S,2R,4R)-4-(2-etox¡-2-oxoetil)-2-etilciclopentancarboxílico Etapa A: (3R,4S)-3-etil-4-(hidrox¡metil)ciclopentanol A una solución de (1 S, 2R)-2-etil-4-oxociclopentancarboxiláto de etilo (5 g, 27.1 mmol, Ejemplo No. 22 Etapa B) en THF (100 mi) a aproximadamente -78°C se agregó LAH (2 M en THF, 54.3 mi, 109 mmol). Luego de aproximadamente 1 h, la mezcla de reacción se dejó calentar a temperatura ambiente lentamente. Luego de aproximadamente 4 h, se agregó agua (4.8 mi) seguido por NaOH acuoso (15% p/v, 4.8 mi) seguido por agua (9.6 mi) se agregó a la mezcla de reacción. Luego de aproximadamente 15 h, Na2SO,« anhidro se agregó y la suspensión se filtró y concentró in vacuo para dar (3R,4S)-3-etil-4-(hidroximetil)ciclopentanol crudo (3.9 g, 100%) como un aceite el cual se usó sin purificación adicional. LC/E (Tabla 1, Método a) Rt = 2.40 min; EM m/z: 145 (M + H) + .
Etapa B: (3 ?,4S)-3-etil-4-(hidroximet¡l)ciclopentanona A una solución de (3R, 4S)-3-etil-4-(hidroximetil)ciclopentanol (4.00 g, 27.7 mmol) en MeCN (70 ml) y agua (30.0 ml) se agregó bromato de potasio (1.487 ml, 29.1 mmol) y CAN (0.760 g, 1.387 mmol). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 80°C. Luego de aproximadamente 2 h, la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y agregó Et20 (100 ml). La capa orgánica se separó, lavó con salmuera (30 ml), concentró in vacuo y purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con EtOAc/heptano (20-60%) para dar (3R,4S)-3-etil-4- (hidroximetil)ciclopentanona (2.4 g, 61%) como un aceite. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) d 3.79 (dd, J = 10.5, 5.3 Hz, 1H), 3.70 (dd, J = 10.5, 6.5 Hz, 1H), 2.55 - 2.44 (m, 1H), 2.41 - 2.25 (m, 4H), 2.15 - 2.05 (m, 1H), 1.55 - 1.65 (m, 2H), 1.43 - 1.30 (m, 1H), 0.97 (t, J = 7.3 Hz, 3H). Etapa C: (3S,4R)-3-((íerc-butildimetilsililoxi)metil)-4-etilciclopentanona A una solución de (3R, 4S)-3-etil-4-(hidroximetil)ciclopentanona (2.60 g, 18.3 mmol) en DMF (30 mi) se agregó ¡midazol (1.87 g, 27.4 mmol) seguido por ferc-butilclorodimetilsilano (3.03 g, 20.1 mmol). Luego de aproximadamente 4 h, se agregó heptano (50 mi). La capa de heptano se retiró y lavó con salmuera. La capa de salmuera se combinó con la capa de DMF y extrajo con EtOAc/heptano (1:1, 30 mi). Las capas de heptano y EtOAc se combinaron, concentraron in vacuo y purificaron mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con EtOAc/heptano (0-30%) para dar (3S,4R)-3-((terc-butildimetilsil¡loxi)metil)-4-etilciclopentanona (3.5 g, 75%) como un aceite incoloro. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) d 3.77 (dd, J = 10.5, 4.3 Hz, 1H), 3.64 (dd, J = 10.5, 4.0 Hz, 1H), 2.40 - 2.20 (m, 5H), 2.18 - 2.02 (m, 1H), 1.65 - 1.55 (m, 1H), 1.52 - 1.37 (m, 1H), 0.97 (t, J = 7.4 Hz, 3H), 0.87 (s, 9H), 0.43 (s, 3H), 0.03 (s, 3H).
Etapa D: 2-((3S,4R)-3-((íerc-butildimetils¡liloxi)metil )-4-et¡lciclopentiliden)acetato de etilo A una suspensión de NaH (60% de dispersión en aceite mineral, 0.608 g, 15.2 mmol) en THF (50 mi) se agregó 2-(dietoxifosforil)acetato de etilo (3.25 mi, 16.2 mmol). Luego de aproximadamente 30 min, la solución de fosfonato se agregó a un recipiente cargado con (3S,4R)-3-((rerc-butildimetilsililox¡)metil)-4-etilciclopentanona (2.6 g, 10.14 mmol). Luego de aproximadamente 20 h, se agregó EtOAc (20 mi) y NH CI acuoso saturado (20 mi). La capa orgánica se retiró, concentró in vacuo y purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con EtOAc/heptano (20-60%) para dar 2-((3S,4R)-3-((terc-butildimetilsililoxi)metil)-4-etilc¡clopentiliden)acetato de etilo (3.3 g, 100%) como un aceite. LC/EM (Tabla 1, Método a) R, = 3.91, 3.96 min; EM m/z: 327 (M + H)\ Etapa E: 2-((3R,4S)-3-etil-4-(hidroximetil)ciclopent¡l¡den)acetato de etilo A una solución de 2-((3S,4R)-3-((rerc-butildimetilsililoxi)metil)-4-etilciclopentiliden)acetato de etilo (1.00 g, 3.06 mmol) en THF (20 mi) se agregó TBAF (1M en THF, 4.59 mi, 4.59 mmol). Luego de 6 h, se agregó EtOAc y agua. La capa orgánica se separó, concentró in vacuo y purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con EtOAc/heptano para dar 2-((3R, 4S)-3-etil-4- (hidroximetil)ciclopentiliden)acetato de etilo (0.620 g, 95%) como un aceite. LC/EM (Tabla 1, Método a) R, = 1.96, 2.08 min; EM m/z: 213 (M + H) + .
Etapa F: 2-((1 R,3R,4S)-3-etil-4-(h¡droximetil)ciclopentil)acetato de etilo A una solución de 2-((3R,4S)-3-etil-4- (hidroximetil)ciclopentiliden)acetato de etilo (0.160 g, 0.754 mmol) en DCM (3 mi) se agregó catalizador de Crabtree (0.030 g, 0.038 mmol). La mezcla de reacción se burbujeó con hidrógeno por aproximadamente 5 min y se mantuvo una atmósfera de hidrógeno con un balón. Luego de aproximadamente 24 h, la mezcla de reacción se concentró ¡n vacuo y purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con EtOAc/heptano (30-80%) para dar 2-((1 R,3R,4S)-3-etil-4-(hidroximetil)ciclopentil)acetato de etilo (0.140 g, 87%) como un aceite. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) d 4.12 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.71 -3.64 (dd, J = 10.5, 8.0 Hz, 1H), 3.47 (dd, J = 10.5, 8.0 Hz, 1H), 2.55 -2.41 (m, 1H), 2.32 (d, J = 6.7 Hz, 2H), 2.02 - 1.89 (m, 1H), 1.88 - 1.76 (m, 1H), 1.70 - 1.60 (m, 1H), 1.48 - 1.33 (m, 4H), 1.26 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.22 - 1.07 (m, 1H), 0.90 (t, J = 7.4 Hz, 3H).
Etapa G: ácido (1S,2R,4R)-4-(2-etoxi-2-oxoetil)-2-etilcictopentancarboxílico A una solución de 2-((1 R,3R,4S)-3-etil-4- (hidroximetil)ciclopent¡l)acetato de etilo (0.140 g, 0.653 mmol) en MeCN (2 mi), agua (4 mi) y EtOAc (2 mi) se agregó peryodato de sodio (0.349 g, 1.633 mmol) seguido por cloruro de rutenio(lll) hidratado (0.0015 g, 0.0065 mmol). Luego de aproximadamente 2 h, la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (20 mi) y agua (10 mi). La capa orgánica se separó y extrajo con NaOH acuoso (1 N, 10 mi). El pH de la capa acuosa se ajustó a aproximadamente 1 con HCI concentrado y extrajo con EtOAc (20 mi). La capa orgánica se secó sobre gS04 anhidro, filtró, y concentró in vacuo para dar ácido (1 S,2R,4R)-4-(2-etoxi-2-oxoetil)-2-etilciclopentancarboxílico (0.150 g, 101%) como un aceite el cual se usó sin purificación adicional. 1H RMN (600 MHz, CDCI3) d 10.68 (bs, 1H), 4.13 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 2.99 - 2.95 (m, 1H), 2.76 - 2.64 (m, 1H), 2.31 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 2.24 (ddd, J = 13.5, 8.7, 4.8 Hz, 1H), 2.18 - 2.11 (m, 1H), 1.81 (dt, J = 13.0, 8.4 Hz, 1H), 1.55 -1.45 (m, 3H), 1.31 - 1.27 (m, 1H), 1.25 (t, J = 7.0 Hz, 3H), (t, J = 7.4 Hz, 3H).
Preparación No. 32: 2.2.2-trif luoro-1 -(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)etanamina, clorhidrato Etapa A: (S, )-2-metil-/V-((5-tosil-5H-pirrolo[2,3-í)]pirazin-2-il)metilen)propan-2-sulfinamida A una solución de 5-tosil-5H-pirrolo[2,3-/?]pirazin-2-carbaldeh ido (8.66 g, 28.7 mmol, Preparación No. 12 Etapa B) y (S)-2-metilpropan-2-sulfinamida (4.18 g, 34.5 mmol) en DCM (20 mi) a temperatura ambiente se agregó sulfato de cobre(ll) en polvo anhidro (13.8 g, 86 mmol). Luego de aproximadamente 20 h, la mezcla de reacción se filtró y concentró parcialmente al vacío. Se agregó heptano a la solución y los sólidos resultantes se recogieron mediante filtración y secaron in vacuo para dar (S,E)-2-met¡l-N-((5-tpsil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)metilen)propan-2-su¡finamida (11.5 g, 99%) como un sólido. LC/EM (Tabla 1, Método a) R, = 2.50 min; EM m/z: 405 (M + H)+. Etapa B: (S)-2-metil-W-(2,2,2-trif luoro-1 -(5-tos¡l-5H-p¡rrolo[2,3-b]pirazin-2-il)etil)propan-2-sulfinamida A un recipiente seco cargado con filtros moleculares de 4 Á (5 g) y fluoruro de tetrametil-amonio (0.553 g, 5.93 mmol) se agregó THF (20 mi). La mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 30 min luego de los cuales se enfrió a aproximadamente -78°C y sé agregó una solución de (S,E)-2-metil-A/-((5-tosil-5/-/-p¡rrolo[2,3-<b]piraz¡n-2-il)metilen)propan-2-sulfinamida (1.20 g, 2.97 mmol) en THF (10 mi). Luego de aproximadamente 15 min se agregó trimetil(trifluorometil)silano (0.877 mi, 5.93 mmol) a la mezcla de reacción. La mezcla se dejó calentar entre -35 y -45°C. Luego de aproximadamente 3 h, la mezcla de reacción se enfrió a -78°C y agregó NH4CI acuoso. La mezcla de reacción se dejó calentar a temperatura ambiente. Se agregó EtOAc (30 mi) y salmuera (30 mi). La capa orgánica se separó, secó sobre Na2S04 anhidro, filtró y concentró in vacuo para dar (S)-2-metil-N-(2,2,2-tr¡fluoro-1-(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)etil)propan-2-sulfinamida cruda (1.4 g, 99%) como una espuma la cual se usó sin purificación adicional. LC/EM (Tabla 1, Método a) R, = 2.49 min; EM m/z 475 (M + H)+.
Etapa C: clorhidrato de 2,2,2-trif luoro-1 -(5-tosil-5H-pirro!o[2,3-b]pirazin-2-il)etanamina A una solución de (S)-2-metil-A/-(2,2,2-trifluoro-1 -(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-¿ ]pirazin-2-il)etil)propan-2-sulfinamida (1.40 g, 2.95 mmol) en MeOH (20 mi) se agregó HCI (4 N en 1,4-dioxano, 7.38 mi, 29.5 mmol). Luego de aproximadamente 2 h, la mezcla de reacción se concentró parcialmente al vacío y diluyó con Et20 hasta que se comenzaron a formar sólidos. Luego de aproximadamente 30 min, los sólidos resultantes se recogieron mediante filtración y secaron in vacuo para dar clorhidrato de 2,2,2-trifluoro-1-(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)etanamina (0.840 g, 70%) como un sólido. LC/EM (Tabla 1, Método a) R, = 2.16 min; EM m/z 371 (M + H)+.
Preparación No. 33: ácido (1S,2R,4S)-4-(dibencilamino)-2-metilciclopentancarboxílico Etapa A: (1 S,2R,4S)-4-(dibencilamino)-2-metilciclopentancarboxilato * (R)-1 -feniletanamina A una solución de ácido 4-(dibencilam¡no)-2-metilciclopentancarboxílico (1240 g, 1499 mmol, preparado usando X con Ejemplo No. 24 Etapa H y dibencilamina y TT) en THF (8.0 L) se agregó (R)-( + )-1 -feniletilamina (0.1.93 L, 1499 mmol). La mezcla se calentó a reflujo para disolver los sólidos, y luego se enfrió a temperatura ambiente. Luego de aproximadamente 15 h, la mezcla de reacción se filtró, lavó THF (800 mi) y secó en un horno de vacío para dar (1 S,2R,4S)-4-(dibencilamino)-2-met¡lciclopentancarboxilato ·· (R)-1-feniletanamina (565 g, 85%, 97. 5% ee): LC/EM (Tabla 2, Método 70) Rt = 8.49 min. El licor madre se concentró. El residuo se disolvió en THF (1 I), calentó para disolver los sólidos, y enfrió a temperatura ambiente. Luego de aproximadamente 15 h, la mezcla de reacción se filtró, lavó THF (800 mi) y secó en un horno de vacío para dar (1 S,2R,4S)-4-(dibencilam¡no)-2-metilciclopentancarboxilato · (R)-1 -feniletanamina adicional (78.5 g, 12%, 95.2% de ee): HPLC (Tabla 2, Método 70) Rt = 8.57 min.
Etapa B: ácido (1 S,2R,4S)-4-(dibencilamino)-2-metilciclopentancarboxílico Se agregó ácido fosfórico (11.40 mi, 196 mmol) a un recipiente con agua (500 mi). La solución se agitó por aproximadamente 5 min. Se agregó (1 S,2R,4S)-4-(dibencilam¡no)-2-metilc¡clopentancarboxilaío • (ft)-1 -feniletanamina (83 g, 187 mmol) a la solución en pequeñas porciones. Se agregó MTBE (500 mi) y los contenidos se mezclaron bien, disolviendo el sólido. Las fases se estacionaron y separaron. La capa acuosa se extrajo con MTBE (150 mi). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, filtraron, y concentraron in vacuo para dar ácido (1 S,2R,4S)-4-(dibencilamino)-2-metilciclopentancarboxílico (60 g, 99%) como un aceite: HPLC (Tabla 1, Método x) Rt = 4.57 min.
Preparación No.34: cloruro de 3,3-dif luorociclobutan-1 -su lío ni lo Etapa A: 3-bromo-1 ,1 -difluorociclobutano A una solución agitada enérgicamente de 3-bromociclobutanona (18.0 g, 121 mmol, preparado como se describe en J. Am. Chem. Soc, 1971, 93, 2481) en DCM (375 mi) a aproximadamente 0°C se agregó por goteo mediante un embudo de adición DAST (36.9 mi, 279 mmol) durante aproximadamente 1 h. La mezcla de reacción se continuó agitando a aproximadamente 0°C por aproximadamente 2 h y a temperatura ambiente por aproximadamente 14 h. La reacción se enfrió a aproximadamente -5°C en un baño de hielo/acetona y agregó una solución acuosa saturada de NaHC03 (400 mi) por goteo a través de un embudo de adición. Se continuó agitando enérgicamente las bicapas por aproximadamente 1 h. Las capas se dividieron y la capa acuosa se extrajo con DCM (4 x 200 mi). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y el solvente se eliminó bajo presión reducida (180 mM Hg de máximo, baño de agua a 30°C) para dar 3-bromo-1 , 1 -difluorociclobutano (15.3 g, 59%) como un aceite de color marrón claro como el producto: 1H RMN (400 MHz, CDCI3) d 4.28 - 4.14 (m, 1H), 3.35 - 3.16 (m, 2H), 3.06 - 2.87 (m, 2H).
Etapa B: etanotioato de S-3,3-difluorociclobutilo A una solución de 3-bromo-1 , 1 -difluorociclobutano (13.8 g, 64.7 mmol) en DMSO (24.6 mi) se agregó tioacetato de potasio (22.2 g, 194 mmol). La solución se calentó a aproximadamente 45°C por aproximadamente 16 h. Se agregó agua (20 mi) y Et20 (50 m!). Las capas se dividieron y la capa acuosa se extrajo con Et20 (7 x 50 mi). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgS04 anhidro, se filtró, y el solvente se eliminó bajo presión reducida (60 mM Hg de máximo, baño de agua a 30°C) para dar etanotioato de S-3,3-difluorociclobutilo crudo (13.09 g, 78%) como un aceite: 1H RMN (400 MHz, oVDMSO) d 3.84 - 3.69 (m, 1H), 3.14 (ddd, J = 13.0, 7.5, 3.9 Hz, 2H), 2.66 - 2.55 (m, 2H), 2.33 (s, 3H).
Etapa C: 3,3-difluorociclobutan-1 -sulfonato de potasio A una solución de etanotioato de S-3,3-difluorociclobutilo crudo (13.0 g, 39.1 mmol) en ácido acético (100 mi) se agregó H202 (24.0 mi, 235 mmol, 30% en agua). Luego de aproximadamente 4 h, se observó una reacción exotérmica la cual generó suficiente calor como para generar el reflujo de la mezcla de reacción. Luego de aproximadamente 20 h, la mezcla de reacción se diluyó con tolueno (500 mi) y concentró parcialmente in vacuo. Este proceso se repitió (5x). La solución se diluyó con EtOH (aproximadamente 500 mi) y se agregó KOH (4.4 g, 78 mmol) a la mezcla de reacción. El precipitado se recogió mediante filtración y descartó. Se agregó KOH adicional (4.4 g, 78 mmol) al material filtrado y el precipitado se recogió mediante filtración. La solución se concentró parcialmente in vacuo. La solución se diluyó con EtOH (aproximadamente 500 mi) y se concentró parcialmente nuevamente (3x). El precipitado se recogió mediante filtración. Los últimos 2 sólidos recogidos se secaron in vacuo y se combinaron para dar 3 ,3-difluorociclobutan-1 -sulfonato de potasio (3.5 g, 42.6%). Se agregó KOH adicional (4.39 g, 78 mmol) y la solución se concentró parcialmente in vacuo. La solución se diluyó con EtOH (aproximadamente 500 mi) y se concentró nuevamente (3x). Los sólidos resultantes se recogieron mediante filtración para dar 3,3-difluorociclobutan-1-sulfonato de potasio (1.6 g, 19%): 1H RMN (400 MHz, de-DMSO) d 3.01 (ddd, J = 13.5, 6.3, 2.5 Hz, 1H), 2.72 - 2.59 (m, 4H).
Etapa D: cloruro de 3,3-difluorociclobutan-1 -sulfonilo A una suspensión de 3,3-difluorociclobutan-1 -sulfonato de potasio (0.250 g, 1.189 mmol) en cloruro de tionilo (2.60 mi, 35.7 mmol) se agregó DMF (3 gotas). La reacción se calentó a aproximadamente 60°C por aproximadamente 21 h. El solvente se eliminó bajo presión reducida y el residuo se usó en la siguiente reacción sin tratamiento posterior ni purificación adicional para dar cloruro de 3,3-difluorociclobutan-1 -sulfonilo crudo (0.227 g, 100%) como el producto. ?? RMN (400 MHz, CDCI3) d 4.33 - 4.17 (m, 1H), 3.28 (dd, J = 11.1, 7.6 Hz, 2H), 3.21 - 3.05 (m, 2H).
Preparación No. 35: (1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a] pirazin-1 -il)ciclopentilcarbamato de isopropílo A una solución de (1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][ ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentanam¡na (0.080 g, 0.19 mmol, Preparación No. BB.1*) en THF (2 mi) se agregó TEA (0.079 mi, 0.565 mmol) y la solución se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 10 min. A la reacción se agregó cloroformiato de isopropílo (1 M en tolueno, 0.18 mi, 0.18 mmol) y la mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 1 h. El solvente se eliminó bajo presión reducida y DCM (5 mi) y NaHC03 acuoso saturado (2 mi) se agregaron. Las capas se separaron y la capa orgánica se lavó con salmuera (2 mi), secó sobre MgS0 , filtró y concentró bajo presión reducida para dar (1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2, 4)triazolo[4, 3-a]pirazin-1 -il) ciclo pentilcarb a mato de isopropilo crudo (0.080 g, 60%) el cual se usó sin purificación adicional: LC/EM (Tabla 1, Método b) R, = 2.33 min; EM m/z: 511 (M + H) + .
Preparación No. 36: ácido 3-(aminometil)ciclobutancarboxí Jico A un recipiente cargado con paiadio sobre carbono al 10% (0.20 g, 0.19 mmol) se agregó una solución de 3-(azidometil)ciclobutancarboxilato de bencilo (2.00 g, 8.15 mmol, preparado usando lili a partir de 3-(hidroximetil)ciclobutancarboxi!ato de bencilo (Parkway Scientific), JJJJ con azida de sodio) en MeOH (100 mi). La mezcla de reacción se burbujeó con hidrógeno y se mantuvo una atmósfera de hidrógeno mediante un balón. La mezcla de reacción se agitó por aproxirnadamente 4 h a temperatura ambiente y luego filtró a través de una almohadilla de Celite®, lavó con MeOH y se concentró in vacuo para dar el ácido 3-(aminometil)ciclobutancarboxílico crudo (1.08 g, 100%) el cual se usó sin purificación adicional: LC/EM (Tabla 1, Método r) Rt = 2.41 min (ELSD); EM m/z: 130 (M + H)\ Preparación No. 37: 3-tosil-3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pifazin-7-carboxilato de etilo Se agregó éster etílico del ácido 3-bromo-2-oxo-prop¡ónico (0.090 mi, 0.72 mmol) a una mezcla de 5-tosil-5/-/-pirrolo[3.2-£>]piraz¡n- 2- amina (0.180 g, 0.624 mmol, preparado usando E del Ejemplo No. 3 Etapa E y HCI) y 1,4-dioxano (3.5 mi) bajo nitrógeno. Luego de aproximadamente 3 días, los volátiles se eliminaron bajo presión reducida. Se formó una suspensión con el residuo en Et20 (5 mi) y luego se filtró para dar a tan polvo. Se formó una suspensión con sólido en MeCN (3.50 mi) bajo nitrógeno. Se agregó PFPAA (0.40 mi, 2.1 mmol). Luego de aproximadamente 30 min, los volátiles se eliminaron bajo presión reducida. El residuo se disolvió en DCM (20 mi) y lavó con NaHC03 acuoso saturado/agua (2:1, 20 mi). La capa acuosa se extrajo con DCM (20 mi). Los orgánicos combinados se secaron sobre Na2S04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc 20-100%/heptano para dar 3- tosil-3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-7-carboxilato de etilo (0.181 g, 75%): LC/EM (Tabla 1, Método n) R, = 0.70 min; EM m/z: 385 (M+H)\ Preparación No. 38: 6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-8-carbaldehído Se agregó agua (1.0 mi) a una mezcla de 6/-/-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]p¡raz¡na (0.200 g, 1.26 mmol, preparado usando D de Preparación No. BBBBB.1 y NaOH) y hexametilentetramina (0.264 g, 1.89 mmol). Se agregó ácido acético (0.5 mi). El matraz de reacción se selló y la mezcla se calentó a aproximadamente 100°C. Luego de aproximadamente 8 h, la solución se dejó enfriar a temperatura ambiente. Luego de agitar por aproximadamente 13 h, la mezcla se enfrió a aproximadamente 0°C. La mezcla resultante se diluyó con agua (1 mi) y luego se filtró enjuagando con agua. El sólido se secó para dar 6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-8-carbaldehído (0.041 g, 18%): LC/EM (Tabla 1, Método n) R, = 0.23 min; EM m/z 188 (M + H) + .
Preparación No. 39: 2-(4-metilpiperazin-1 -il)-4-(tributilestanil)pirimidina Se agregó 1 -metilpiperazina (0.160 mi, 1.44 mmol) a una solución de 2-(met¡lsulfonil)-4-(tributilestanil)pirimidina (0.250 g, 0.481 mmol, sintetizada como se describe en Majeed, A. J., y colaboradores Tetrahedron 1989, 45, 993-1006) y 1,4-dioxano (1.0 mi) bajo nitrógeno. Luego de aproximadamente 2 h, la solución se calentó a aproximadamente 50°C. Luego de aproximadamente 30 min, la solución se calentó a aproximadamente 80°C. Luego de aproximadamente 30 min, se unió un condensador de reflujo y la solución se calentó a aproximadamente 100°C. Luego de aproximadamente 16 h, la solución marrón se dejó enfriar a temperatura ambiente. Se agregó agua (5 mi). La mezcla se extrajo con EtOAc (2 x 5 mi). Los orgánicos combinados se secaron sobre Na2S04 anhidro, filtraron, y concentraron. El residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 2-10% de MeOH/DCM para dar 2-(4-metilpiperazin-1 -il)-4-(tributilestanil)pirimidina (0.127 g, 56%): 1H RMN (400 Hz, CDCI3) d 8.07 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 6.63 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 3.98 - 3.82 (m, 4H), 2.63 - 2.48 (m, 4H), 2.40 (s, 3H), 1.70 - 1.43 (m, 6H), 1.42 - 1.20 (m, 6H), 1.18 - 0.97 (m, 6H), 0.88 (t, J = 7.3 Hz, 9H).
Preparación No.40: 2-(4-metilpiperazin-1 (tributilestanil)quinazolina Etapa A: 4-cloro-2-(4-metilp¡perazin-1-il)quinazolina Se formó una suspensión con 2.4-dicloroquinazolina (2.00 g, 10.1 mmol, preparada como se describe en Prasad, M., y colaboradores Org. Process Res. Dev. 2004, 8, 330-340) en 1,4-dioxano (20.0 mi). Se agregó 1 ,4-Dimetilpiperazina (1.44 mi, 10.6 mmol). La mezcla se calentó en un microondas CEM a aproximadamente 150°C por aproximadamente 5 min. El material se vertió en NaHC03 acuoso saturado/agua (1:1, 150 mi). La mezcla se extrajo con EtOAc (5 x 100 mi). 20 g de gel de sílice se agregó a los orgánicos combinados y los volátiles se eliminaron bajo presión reducida. El sólido resultante se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 2-10% de MeOH/DCM para dar 4-cloro-2-(4-metilpiperazin-1 -il)quinazol¡na (1.36 g, 52%): LC/EM (Tabla 1, Método n) R, = 0.51 min; EM miz 263 (M + H) + .
Etapa B: 4-yodo-2-(4-metilpiperazin-1-il)quinazolina Se agregó yoduro de hidrógeno (solución acuosa 55%, 4,00 mi, 29.3 mmol) lentamente a 4-cloro-2-(4-metilpiperazin-1 -il)quinazolina (1.36 g, 5.18 mmol) bajo aire enfriando en un baño de agua a temperatura ambiente. Luego de aproximadamente 5 min, el baño se retiró, el matraz de reacción se envolvió en papel de aluminio, y la mezcla se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 5 h. Se agregó DCM (4.0 mi) y la mezcla se agitó por aproximadamente 39 h. Se agregó yoduro de hidrógeno (solución acuosa 55%, 8.0 mi, 110 mmol) y la mezcla se agitó por aproximadamente 71 h. La mezcla se agregó lentamente a NaHC03 acuoso saturado (200 mi) y EtOAc (200 mi). Luego de completar la detención, las capas se separaron. Los orgánicos se lavaron con NaHC03 acuoso saturado/agua (1:1, 200 mi). Los orgánicos se secaron sobre Na2S04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 2-5% MeOH/DCM para dar (1.18 g, 69%) como una mezcla 3:1 de 4-yodo-2-(4-metilpiperazin-1 -il)quinazolina a 4-cloro-2-(4-metilpiperazin-1 -il)quinazolina. 4-yodo-2-(4-matilpiperaz¡n-1 -il)quinazolina LC/EM (Tabla 1, Método n) Rt = 0.55 min; EM m/z 355 (M + H) + .
Etapa C: 2-(4-metilpiperazin-1 -il)-4-(tributilestanil)quinazo!ina Se agregó bis(trifenilfosfin)acetato de paladio(ll) (0.063 g, 0.085 mmol) a una mezcla 3:1 de 4-yodo-2-(4-metilpiperázin-1 - ¡l)quinazolina:4-cloro-2-(4-metilp¡peraz¡n-1-it)quinazolina (0.300 g) bajo nitrógeno. Se agregó bis(tributilestaño) (0.855 mi, 1.69 mmol). Se agregó TBAF (1.0 M solución en THF, 2.54 mi, 2.54 mmol). La mezcla se purgó con nitrógeno por aproximadamente 20 min y luego se agitó bajo nitrógeno a temperatura ambiente por aproximadamente 7 h. Se agregó NaHC03 acuoso saturado/agua (1:1, 20 mi) y EtOAc (50 mi). La mezcla se filtró a través de un filtro de jeringa, las capas se separaron y los orgánicos se lavaron con agua (2 x 10 mi). Los orgánicos se secaron sobre Na2S04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 5-MeOH a! 10%/DCM para dar un sólido de color marrón pegajoso. El material se disolvió en EtOAc (10 mi) y se lavó con agua (2 x 5 mi). Los orgánicos se secaron sobre Na2S04 anhidro, filtraron, y concentraron para dar una mezcla 1:1 de 2-(4-metilpiperazin-1 -il)-4-(tributilestanil)quinazolina:4-cloro-2-(4-metilpiperazin-1 -il)quinazolina (0.058 g, 17%). 2-(4-metilpiperazin-1-il)-4-(tribut¡lestanil)qu¡nazolina RMN (400 MHz, DMSO-d6) d 7.69 - 7.64 (m, 1H), 7.61 - 7.57 (m, 1H), 7.49 - 7.44 (m, 1H), 7.31 - 7.26 (m, 1H), 3.95 - 3.83 (m, 4H), 2.44 - 2.35 (m, 4H), 2.22 (s, 3H), 1.66 - 1.48 (m, 6H), 1.37 - 1.18 (m, 12H), 0.82 (t, J = 7.3 Hz, 9H).
Preparación No.41: 4-(metilsulfonii)morfolina A una solución de morfolina (2.00 mi, 22.96 mmol) en DCM (40 mi) se agregó TEA (3.20 mi, 22.96 mmol) a aproximadamente -20°C, luego se agregó cloruro de metansulfonilo (2.68 mi, 34.4 mmol) por goteo a aproximadamente -20°C. La mezcla de reacción sé agitó a aproximadamente -20°C por aproximadamente 2 h, luego se calentó a temperatura ambiente. La mezcla se dividió con NH4CI acuoso saturado (100 mi) y DCM (3 x 50 mi). Las capas orgánicas combinadas se concentraron y purificaron mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc al 0-100% / heptano para dar 4-(metilsulfonil)morfolina (3.95 g, 100%) cómo un sólido de color blanco: 1H RMN (DMSO-cf6) d 3.70 - 3.60 (m, 4H), 3.12 - 3.04 (m, 4H), 2.89 (s, 3H).
Preparación No. 42: 5-(clorometil)-3-metilf uran-2-carbox üaío de metilo A una solución de 3-metilfuran-2-carboxilato de metilo (8.00 g, 57.1 mmol) en DCM (285 mi) se agregó cloruro de zinc (2.14 g, 15.7 mmol) y paraformaldehído (2.2 mi, 82 mmol). La solución se calentó a aproximadamente 35°C. Se burbujeó gas HCI a través de la mezcla de reacción por aproximadamente 20 min. La mezcla se dividió con agua (50 mi) y DCM (3 x 30 mi). Las capas orgánicas combinadas se concentraron y purificaron medíante cromatografía sobre gel dé sílice eluyendo con un gradiente de 0-50% de EtOAc/heptano para dar 5-(clorometil)-3-metilfuran-2-carboxilato de metilo (8.24 g, 77%) como un sólido de color blanco: LC/EM (Tabla 1, Método n) Rt = 0.69 min; EM m/z: 189 (M + H)+.
Preparación No. 43: c s-5-((t-butoxicarbon¡Iamino)metil)-3-metiltetrahidrof uran-2-carboxilato de metilo Una solución de 5-(azidometil)-3-metilfuran-2-carboxilato de metilo (3.10 g, 15.88 mmol, preparado usando el Método General JJJJ de la Preparación No.42 y azida de sodio) en MeOH (50 mi) se agregó a una suspensión de Rh/C 5% (0.31 g, 3.01 mmol) y dicarbonato de d¡-ferc-butilo (4.16 g, 19.06 mmol) en una botella de presión de 50 mi. La mezcla de reacción se agitó bajo 40 psi de hidrógeno a aproximadamente 50°C por aproximadamente 3.5 días. La mezcla se filtró a través de una membrana de nylon. El solvente orgánico se concentró bajo presión reducida para dar cis-5-((t~ butoxicarbonilamino)metil)-3-metiltetrahidrofuran-2-carboxilato de metilo (4.19 g, 81%) como un aceite de color marrón: 1H RMN (CDCI3) d 5.70 (s, 1H), 4.43 - 4.46 (d, 1H), 4.28 - 4.12 (m, 1H), 3.75 (s, 3H), 3.50 - 3.30 (m, 2H), 2.75 - 2.55 (m, 1H), 1.95 - 2.05 (m, 1H), 1.65 -1.48 (m, 1H), 1.45 (s, 9H), 1.03 - 0.97 (d, 3H).
Preparación No.44: (1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentanamina y (1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6-tosil-6H- irrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 - il)ciclopentanam¡na A una mezcla de ?/-((1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentil)acetamida (5.0 g, 10.7 mmol, Ejemplo No. 8 Etapa I) y THF (110 mi) se agregó HCI acuoso (6 N, 63 mi, 375 mmol). La reacción se calentó a aproximadamente 95°C por aproximadamente 20 h y luego se enfrió a temperatura ambiente y se concentró bajo presión reducida. Al residuo de color marrón resultante se agregó DCM (100 mi) y la solución se lavó con NaHC03 saturado (3 x 50 mi). La porción acuosa se extrajo con DCM (3 x 50 mi). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (100 mi), secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida. El material se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con DCM/MeOH/NH4OH 0-100% (950:45:5) para dar una mezcla de (1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrólo[2,3-e][1,2, 4]tr¡azolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentanamina y (1 S, 3R>4S)-3-etil-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentanamina (3.2 g, 70%) en una relación 1:10 basada en H-RMN como un sólido blancuzco: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt - 1.75 min; EM m/z: 425 (M + H) + .
Preparación No. 45: 5-tos¡l-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-carboxilato de metilo Se burbujeó CO en una solución anaranjada de 2-bromo-5-tosil-5/-/-pirrolo[2,3-6]p¡razina (50.0 g, 142 mmol, Ejemplo No. 7, Etapa B) en DMF (2.50 I) en un balón de 5 I por aproximadamente 2 min. Se agregó dicloruro de bis(trifenilfosfin)-paladio(ll) (9.96 g, 14.2 mmol), TEA (59 mi, 423 mmol) y MeOH (173.0 mi, 4259 mmol) y el recipiente se equipó con un balón de CO. La mezcla se calentó a aproximadamente 95°C bajo una atmósfera de CO (1 atmósfera). Luego de agitar durante la noche, la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente durante la noche y vertió en agua helada (3.2 I). La mezcla se agitó por aproximadamente 10 min y el precipitado se recogió mediante filtración, lavando con agua, y secó por 1 h. El material crudo se disolvió en DCM, separó del agua residual, secó sobre MgS04 anhidro, filtró, agregó gel de sílice, y concentró bajo presión reducida para prepararlo para la cromatografía. El material crudo se purificó mediante cromatografía de columna sobre gel de sílice eluyendo con 0-5% de MeOH en DCM para dar 5 tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-carboxilato de metilo con DCM 5 mol% como un excipiente (40.7 g, 86%, 93% de pureza): LC/E (Tabla 1, Método a) R, = 2.35 min; EM m/z 332 (M + H) + .
Preparación No.46: ácido 5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-carboxílico Se agregó HCI (6 N acuoso, 714 mi) a una solución de color amarillo de 5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-carboxilato de metilo (17.8 g, 53.6 mmol, Preparación No. 45) en 1,4-dioxano (715 mi) en un balón de 2 I, y la mezcla se calentó a aproximadamente 60°C por aproximadamente 16 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente. El solvente orgánico se eliminó bajo presión reducida y el precipitado se recogió, lavó con agua, y secó para dar ácido 5-Tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-carboxílico (14.4 g, 85%) como un sólido de color amarillo: LC/EM (Tabla í, Método a) Rt = 1.63 min; EM m/z 316 (M-H)\ Preparación No.47: 5-tosil-5H-pirrolo[2,3-o]piraz¡n-2-ilcarbamato de íerc-butilo En un balón de 500 mi, se agregó ácido 5-tosil-5H-pirrolo[2,3- b]piraz¡n-2-carboxílico (14.4 g, 45.3 mmol, Preparación No. 46), azida de difenilfosforilo (9.78 mi, 45.3 mmol) y TEA (13.9 mi, 100 mmol) en f-BuOH (200 mi) para dar una suspensión anaranjada. La mezcla se calentó a aproximadamente 70°C por aproximadamente 16 h, enfrió a temperatura ambiente y el material insoluble se retiró por filtración. El solvente se eliminó bajo presión reducida y el material crudo se purificó mediante cromatografía de columna sobre gel de sílice eluyendo con EtOAc 25-60% en heptano durante 30 min para dar 5-tosH-5H-pirrolo[2,3~b]pirazin-2-ilcarbamato de tere-butilo (9.75 g, 54%) como un sólido blancuzco: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.79 min; EM m/z 389 (M + H) + .
Preparación No. 48: 2-bromo- -(4-(dibencilam ino)-2-metilciclopentil)etanona Se agregó cloruro de oxalilo (4.37 mi, 49.9 mmol) lentamente a una solución de ácido 4-(dibencilamino)-2-metilciclopentancarboxílico (7.34 g, 22.7 mmol, Ejemplo No. 7, Etapa I) en DCM (100 mi), (nota: suave evolución de gas) y luego se agregó por goteo DMF (0.26 mi, 3.41 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 14 h. El solvente se eliminó bajo presión reducida para dar un sólido amorfo beige, el cual se disolvió en THF y MeCN (1:1, 100 mi) y agregó a una solución de trimetilsilildiazometano (2 M en Et20, 39.7 mi, 79 mmol) en THF y MeCN (1:1, 100 mi) a aproximadamente 0°C. La mezcla resultante se agitó a aproximadamente 0°C por aproximadamente 3 h y luego detuvo mediante una adición por goteo de HBr (48% acuoso, 25 mi, 221 mmol). La mezcla resultante se neutralizó mediante una adición por goteo de NaHC03 acuoso saturado (300 mi) y las capas se separaron. La capa orgánica se secó sobre MgS04 anhidro y concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante ge! de sílice cromatografía instantánea eluyendo con EtOAc 5%-45% en heptano para dar 2-bromo-1 -(4-(dibencilamino)-2-metilciclopentil)etanona (6.3 g, 69%) como un aceite de color amarillo: LC/EM (Tabla 1, Método a) R, = 2.90 min; EM m/z 400, 402 (M + H) + .
Preparación No. 49: 2-(4-(dibencilamino)-2-metilc¡c!opentil)-2-oxoetil(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)carbamato de í ere-butilo Una solución de 5-tosil-5H-p¡rrolo[2,3-b]pirazin-2-ilcarbamato de ferc-butilo (0.59 g, 1.519 mmol, Ejemplo No. 7, Etapa C) en DMF (5 mi) se agregó por goteo a una suspensión de NaH (60% de dispersión en aceite mineral, 0.058 g, 1.45 mmol) en DMF (5 mi), a aproximadamente 0°C. La mezcla resultante se agitó a aproximadamente 0°C por aproximadamente 30 min y luego se agregó por goteo a una solución de 2-bromo-1 -(4-(dibencilamino)-2-metilc¡clopentil)etanona (0.73 g, 1.8 mmol) en DMF (10 mi) a aproximadamente 0°C. La mezcla resultante se agitó a aproximadamente 0°C por aproximadamente 1 h y el solvente se eliminó bajo presión reducida. El residuo se dividió entre NaHC03 acuoso saturado y EtOAc (100 mi de cada uno). La fase orgánica se separó, secó sobre MgS04 anhidro y concentró bajo presión reducida para dar 2-(4-(dibencilamino)-2-metilciclopentil)-2-oxoetil(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)carbamato de rere-butilo (1.04 g, 97%) como un sólido de color amarillo amorfo: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 3.30 min; EM m/z 708 (M+H)\ Preparación No. 50: 1 -(4-(dibencilamino)-2-metilciclopemtil)-2-(5-tosil-5tf-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-ilamino)etanona Se disolvió 2-(4-(dibencilamino)-2-metilciclopentil)-2-oxoetil(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]p¡razin-2-il)carbamato de rere-butilo (6,19 g, 8.75 mmol, Preparación No. 49) en HCI (4 N en 1,4-dioxano, 25 mi). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 2 h. El solvente se eliminó bajo presión reducida y el residuo se dividió entre NaHC03 acuoso saturado y EtOAc (100 mi de cada uno). La fase orgánica se lavó con salmuera (80 mi), secó sobre MgS04 anhidro y concentró bajo presión reducida para dar 1-(4-(dibencilamino)-2-metilciclopentil)-2-(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-ilamino)etanona (5.2 g, 98%) como un sólido de color marrón amorfo: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 3.00 min; EM m/z 608 (M + H) + .
Preparación No. 51: W,W-dibencil-3-metil-4-(3-tosil-3H-im¡da2o[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)ciclopentanamina Una mezcla de 1 -(4-(dibencilamino)-2-metilciclopentil)-2-(5-íosil-5H-pirrolo[2,3-£>]pirazin-2-ilamino)etanona (5.32 g, 8.75 mmol, Preparación No. 50) y Reactivo de Lawesson (1.88 g, 4.64 mmol) se calentó a aproximadamente 60°C por aproximadamente 2 h. Se agregó reactivo de Lawesson (1.88 g, 4.64 mmol). La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente 60°C por aproximadamente 1 h. El solvente se eliminó bajo presión reducida y el residuo se purificó mediante gel de sílice cromatografía instantánea eluyendo con un gradiente de 0-8% de MeOH en DCM para dar N,N-dibenci!-3-metil-4-(3-tósil-3H- imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)ciclopentanamina (4.47 g, 87%) como un sólido de color marrón amorfo: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.99 min; EM m/z 590 (M + H)+.
Preparación No. 52: V,/V-dibencil-3-(3W-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)-4-metilciclopentanamina Se disolvió /v,/V-Dibencil-3-metil-4-(3-tosil-3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)ciclopentan-am¡na (4.47 g, 7.58 mmol, Preparación No. 51) en 1,4-dioxano (40 mi). Se agregó NaOH (2 N acuoso, 4 mi) y la mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 90°C por aproximadamente 80 min. El solvente orgánico se eliminó bajo presión reducida y el residuo se trató con NH4CI acuoso saturado (70 mi) y extrajo con DCM (2 x 60 mi). Los extractós orgánicos combinados se lavaron con salmuera (70 mi), secaron sobre MgS04 anhidro y concentraron bajo presión reducida. La purificación mediante gel de sílice cromatografía instantánea eluyendo con un gradiente de 0-8% de MeOH en DCM dio N,N-dibencil-3-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2, 3-e]pirazin-8-il)-4-metilciclopentan-aminá (1.84 g, 56%) como un aceite de color amarillo: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.31 min; EM m/z 436 (M + H) + .
Preparación No. 53: 3-(3H-lmidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)-4-metilciclopentanamina A una mezcla de /V,A/-dibencil-3-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)-4-metilciclo-pentanamina (1.84 g, 4.22 mmol, Preparación No. 52) en EtOH (50 mi) se agregó Pd(OH)2 20% en peso sobre C (0.43 g, 0.61 mmol) y la mezcla resultante se agitó bajo una presión de hidrógeno de aproximadamente 50 psi en un agitador Parr a aproximadamente 50°C por aproximadamente 2 h. El catalizador se retiró por filtración usando una almohadilla de Celite®, agregó Pd(OH)2 20% en peso sobre C (0.43 g, 0.61 mmol), y la mezcla se agitó bajo una presión de hidrógeno de aproximadamente 50 psi en un agitador Parr a aproximadamente 50°C por aproximadamente 16 h. El catalizador se retiró por filtración usando una almohadilla de Celite®, agregó Pd(OH)220% en peso sobre C (0.43 g, 0.61 mmol), y la mezcla se agitó bajo una presión de hidrógeno de aproximadamente 50 psi en un agitador Parr a aproximadamente 50°C por aproximadamente 4 h. El catalizador se retiró mediante filtración usando una almohadilla de Celite® y el material filtrado se concentró bajo presión reducida para dar 3-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)-4- metilciclopentanamina (0.88 g, 82%) como un sólido amorfo blancuzco: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 0.75 min y 0.87 min; EM m/z 256 (M + H) + .
Método General A: Formación de una hidrazida a partir de un ácido carboxílico A una mezcla de una 2-hidrazinilpirrolo[2,3-£>]pirazina (preferiblemente 1 equivalente) y un ácido carboxílico (1-2 equivalentes, preferiblemente 1.1-1.3 equivalentes) en un solvente orgánico (tal como DCM, DMF o THF, preferiblemente DMF) se agregó un agente de acoplamiento tal como EDC'HCI o HATU (1.0-2.0 equivalentes, preferiblemente 1.2-1.6 equivalentes) con o sin una base orgánica (tal como TEA o DIEA, 2-5 equivalentes, preferiblemente 3-4 equivalentes). Luego de aproximadamente 1-72 h (preferiblemente 2-16 h) a aproximadamente 20-60°C (preferiblemente de manera aproximada temperatura ambiente), se realiza el tratamiento posterior de reacción usando uno de los siguientes métodos. Si DMF es el solvente, la reacción primero se concentra bajo presión reducida. Método 1: Se agregó agua y las capas se separan. Opcionalmente, la mezcla se puede filtrar a través de Celite® antes de la separación de las capas. La capa acuosa luego se extrae con un solvente orgánico tal como EtOAc o DCM. Las capas orgánicas combinadas opcionalmente se lavan con salmuera, secan sobre Na2S04 anhidro o MgS04, filtran o decantas, y concentran bajo presión reducida. Método 2: la reacción se diluye con un solvente orgánico tal como EtOAc o DCM y se lavó con agua o bien salmuera o ambos. La capa acuosa opcionalmente se extrae adicionalmente con un solvente orgánico tal como EtOAc o DCM. Luego la capa orgánica o las capas orgánicas combinadas opcionalmente se lavan con salmuera, secan sobre Na2S04 anhidro o MgS04, filtran o decantan, y concentran bajo presión reducida. Método 3: la reacción se diluye con un solvente orgánico tal como EtOAc o DCM y agrega agua. Las capas se separan y la capa orgánica se concentra bajo presión reducida y purifica directamente mediante cromatografía.
Ilustración del Método General A Preparación No. A.1*: 3-(2-oxo-2-(2-(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]piraz¡n-2-il)hidrazinil)etil)p¡rrolidin-1 -carboxilato de (S)-ierc-butilo A una solución de éster . ferc-butílico del ácido (S)-3-carboximetil-pirrolidin-1 -carboxílico (0.756 g, 3.30 mmol, AstaTech) y 2-hidrazinil-5-tosil-5H-p¡rrolo[2,3-í)]pirazina (1.0 g, 3.3 mmol, Ejemplo No. 1, Etapa D) en DMF (33 mi) se agregó TEA (1.38 mi, 9.89 mmol) y luego se agregó HATU (1.25 g, 3.30 mmol). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 15 h, luego concentró bajo presión reducida. El residuo se recogió en EtOAc (100 mi) y se lavó con agua (100 mi). La porción orgánica se separó, lavó con salmuera (100 mi), secó sobre Na2S04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida para dar 3-(2-oxo-2-(2-(5-tosil-5H-pirrólo[2,3-bJpirazin-2-il)hidrazinil)etil)pirrolidin-1 -carboxilato de (S)-terc-butilo como un sólido de color marrón pegajoso (1.90 g, 100%). Este material se usó sin purificación adicional: LC/EM (Tabla 1, Método c) Rt = 1.38 min; EM m/z: 515 (M + H)+.
Método General B: Ciclización de una hidrazida A una solución de una 2-hidrazidil-5H-pirrolo[2,3-ib]p¡razina (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (por ejemplo 1,4-dioxano) se agregó una base (tal como TEA o DIEA, 1-5 equivalentes, preferiblemente 2-4 equivalentes) y SOCI2 (1-5 equivalentes, preferiblemente 1-2 equivalentes). La mezcla se calienta a aproximadamente 60-100°C (preferiblemente de manera aproximada 80°C) por aproximadamente 1-16 h (preferiblemente de manera aproximada 1-2H). La mezcla de reacción se enfría a temperatura ambiente y se realiza el tratamiento posterior usando uno de los siguientes métodos. Método 1: Se agregó un solvente orgánico (tal como EtOAc o DCM) y agua. Las capas se separan y la capa acuosa se extrae opcionalmente con solvente orgánico adicional. Las capas orgánicas combinadas se pueden lavar opcionalmente con base acuosa (tal como NaHC03) y/o salmuera, secar sobre Na2S04 anhidro o MgS04, luego decantar o filtrar antes de concentrarse bajo presión reducida. Método 2: Se agregó un solvente orgánico (tal como EtOAc o DCM) y la capa orgánica se lavó opcionalmente con salmuera o agua, secó sobre MgS04 anhidro o Na2S04, filtró o decantó, y concentró bajo presión reducida. Método 3: La mezcla de reacción se divide entre un solvente orgánico (tal como EtOAc o DCM) y NáHC03 acuoso saturado o salmuera, seca sobre Na2S04 anhidro o MgS04, luego decanta o filtra antes de concentrarse bajo presión reducida. Ilustración del Método General B Preparación No. B.1*: (1 S,3R)-3-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3- , 2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 - il)ciclopentilcarbamato de f ere-butilo A una solución de (1 S,3R)-3-(2-(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)hidrazincarbonil)ciclopentilcarbamato de ferc-butilo (9.30 g, 18.1 mmol, preparado usando A del Ejemplo No. 1 Etapa D, y ácido (1 R,3S)-3-ferc-butoxicarbonilam¡no)ciclopentancarboxílico [Pe tech]) en 1,4-dioxano (100 mi) se agregó TEA (10.0 mi. 72.3 mmol) y SOCI2 (2.11 mi, 28.9 mmol). La mezcla se calentó a aproximadamente 80°C por aproximadamente 1.5 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se agregó EtOAc (200 mi) y agua (200 mi), y las capas se separaron. La porción acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 100 mi) y los extractos orgánicos combinados se lavaron con NaHC03 acuoso saturado (100 mi) y salmuera (100 mi), secaron sobre Na2S04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida. El material crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 25-100% de EtOAc en DCM para dar (1 S,3R)-3-(6-tosil-6H-p¡rrolo[2, 3-e][1 ,2,4]triazolo[4, 3-a]pirazin-1 -il)ciclopentilcarbamato de tere-butilo (7.65 g, 85%): LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.37 min; EM m/z: 497 (M + H)\ Método General C: Ciclización de una hidrazida con pérdida del grupo protector Boc A una solución de una 2-hidrazidil-5H-pirrolo[2,3-£>]pirazina apropiadamente sustituida que contiene un grupo protector Boc (preferiblemente 1 equivalente) y TEA o DIEA (0-6 equivalentes, preferiblemente 4 equivalentes) en un solvente orgánico (tal como 1,4-dioxano o DCM, preferiblemente 1,4-dioxano) se agregó SOCl2 (2.0-6.0 equivalentes, preferiblemente 2.5 equivalentes). La reacción se calienta a aproximadamente 60-120°C (preferiblemente de manera aproximada 80-90°C) por aproximadamente 1-8 h (preferiblemente de manera aproximada 2-4 h) y luego se realiza el tratamiento posterior usando uno de los siguientes métodos. Método 1: La mezcla de reacción se filtró y lavó con un solvente orgánico adecuado (tal como EtOAc o DCM) para dar el compuesto buscado sin purificación adicional. Método 2: El material crudo se diluye con un solvente orgánico adecuado (tal como EtOAc o DCM) y se agregó NaHC03 acuoso saturado, las capas se separan y la porción orgánica se seca sobre Na2S0 anhidro o MgS04, filtra, y concentra bajo presión reducida. Método 3: La mezcla de reacción se lavó con una solución acuosa básica (preferiblemente NaHC03 acuoso saturado) y se filtró para dar el compuesto desprotegido con Boc buscado sin purificación adicional. Si sucede la desprotección con Boc parcial, el material filtrado se extrae con un solvente orgánico adecuado (tal como EtOAc o DCM), las capas se separan y la porción orgánica se seca sobre Na2S04 anhidro o MgS04, filtra, y concentra bajo presión reducida para dar el compuesto protegido con Boc restante. El material protegido con Boc crudo o el material protegido con Boc parciámente obtenido precedentemente se disuelve en 1,4-dioxano o DCM (preferiblemente 1,4-dioxano) y se agregó a una solución de HCI en un solvente orgánico (1-6 N, preferiblemente HCI 4 N en 1,4-dioxano) y se calienta a aproximadamente 30-60°C (preferiblemente de manera aproximada 50°C) por aproximadamente 1-5 h (preferiblemente de manera aproximada 3H). Se forma un precipitado, se recogió y luego se disuelve en un solvente orgánico adecuado (tal como EtOAc o DCM) y se lavó con una solución acuosa básica (preferiblemente NaHC03 acuoso saturado). Si no se forma un precipitado, la mezcla de reacción se lavó con una solución acuosa básica (preferiblemente NaHC03 acuoso saturado). En cualquier caso, las capas se separan y la porción orgánica se seca sobre Na2S04 anhidro o MgS04, filtra, y concentra bajo presión reducida.
Ilustración del Método General C Preparación No. C.1 4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3- a]pirazin-1-il)biciclo[2.2.2]octan-1-amina A una solución de 4-(2-(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2- il)h¡d razincarbonil)-biciclo[2.2.2]octan-1 - ilcarbamato de ferc-butilo (6.1 g, 11.0 mmol, Ejemplo No. 9, Etapa E), y TEA (6.1 mi, 44.0 mmol) en 1,4-dioxano (110 mi) se agregó SOCI2 (2.0 mi, 27.5 mmol). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 80°C por aproximadamente 2 h, luego se enfrió a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se lavó con NaHC03 acuoso saturado (3 x 50 mi). Las capas se separaron y la porción acuosa se filtró para dar 4-(6- tosil-6H-pirrolo[2, 3-e][1, 2, 4]triazolo[4, 3-a]pirazin-1 -il)biciclo[2.2.2]- octan-1-amina como un sólido de color marrón (1.17 g, 24%): LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.28 min; EM m/z: 437 (M + H)+. El material filtrado restante se extrajo con EtOAc (10 mi). La capa orgánica combinada se secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida para dar 4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3- e][1 , 2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -i l)biciclo[2.2.2]octan-1 - ilcarbamato de rere-butilo crudo (3.5 g). El material protegido con Boc crudo se disolvió en 1,4-dioxano (38 mi) y se agregó HCI (4 N en 1,4-dioxano, 8 mi). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 50°C por aproximadamente 3 h. El precipitado formado se recogió mediante filtración. El sólido se disolvió en DC (50 mi), y lavó con NaHC03 acuoso saturado (3 x 20 mi). Las capas se separaron y la porción orgánica se secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida para dar 4-(6-tosii-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2, 4]triazolo[4, 3-a]pirazin-1-il)bic¡clo [2.2.2]octan-1 -amina adicional como un sólido de color marrón (2.3 g, 50% durante 2 etapas): LC/EM (Tabla 1, Método a) R, = 1.28 min; EM m/z: 437 (M + H) + .
Método General D: Hidrólisis de una sulfonamida A un recipiente que contiene una sulfonamida, por ejemplo, un pirrol protegido con sulfonilo, (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (tal como 1,4-dioxano, MeOH, o THF/MeOH, preferiblemente 1,4-dioxano) se agregó una base acuosa (tal como Na2C03 acuoso o NaOH acuoso, 1-30 equivalentes, preferiblemente 2-3 equivalentes para NaOH acuoso, preferiblemente 15-20 equivalentes para Na2C03 acuoso). La mezcla se agitó a aproximadamente 25-100°C (preferiblemente de manera aproximada 60°C) por aproximadamente 1-72 h (preferiblemente de manera aproximada 1-16H). En casos donde la reacción no llega a completarse según lo indicado por TLC, LC/EM, o HPLC, se agregó base acuosa adicional (tal como Na2C03 acuoso, 10-20 equivalentes, preferiblemente 10 equivalentes o NaOH acuoso, 1-5 equivalentes, preferiblemente 1-2 equivalentes) y/o un cosolvente (tal como EtOH). La reacción .se continúa a aproximadamente 25-100°C (preferiblemente de manera aproximada 60°C) por aproximadamente 0.25-3 h (preferiblemente de manera aproximada 1-2 h). En cualquier caso en el cual un grupo lábil para base adicional se encuentra presente (por ejemplo, un grupo éster, trifluorometilo, o ciano), este grupo también se puede hidrolizar. Se realiza el tratamiento posterior de la reacción usando uno de los siguientes métodos. Método 1. El solvente orgánico se eliminó opcionalmente bajo presión reducida y la solución acuosa se neutraliza con la adición de un grupo ácido adecuado (tal como HCI acuoso). Se agregó un solvente orgánico adecuado (tal como EtOAc o DCM) y agua, las capas se separan, y la solución orgánica se seca sobre Na2S04 anhidro o MgS04, filtra, y concentra hasta secar bajo presión reducida para dar el compuesto buscado. Método 2. El solvente orgánico se eliminó opcionalmente bajo presión reducida, se agregó un solvente orgánico adecuado (tal como EtOAc o DCM) y agua, las capas se separan, y la solución orgánica se seca sobre Na2S04 anhidro o MgS04, filtra, y concentra hasta secar bajo presión reducida para dar el compuesto buscado. Método 3. La mezcla de reacción se concentra bajo presión reducida y se purifica directamente mediante uno de los subsiguientes métodos.
Ilustración del Método General D Preparación No. D.1*: (3R,4f?)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3- e]pirazin-1 -il)-4-metilpiperidin-1 -carboxilato de íerc-butilo A una solución de (3R, 4R)-4-metil-3-(6-tosil-6H-imidazo[1 , 5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 - i I ) pi perid i n - 1 -carboxilato de íerc-butilo (40 g, 78 mmol, Ejemplo No. 5 Etapa H) en 1,4-dioxano (160 mi) se agregó NaOH (1 N acuoso, 157 mi). La reacción se calentó a aproximadamente 60°C por aproximadamente 1 h. La reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente. La reacción se neutralizó con HCI acuoso (4 N, 50 mi). Las capas se extrajeron con DCM (2 x 300 mi). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (400 mi), secaron sobre Na2S04 anhidro, filtraron, luego concentraron in vacuo. El producto se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice (330 g) usando , MeOH 1-5% en DCM para dar (3R,4Rj-3-(6H-im¡dazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4-metilpiperidin-1 -carboxilato de ferc-butilo (30 g, 99%): LC/EM (Tabla 1, Método b) R, = 2.00 min; EM m/z: 356 (M + H) + .
Tabla D.1 Ejemplos preparados usando el Método General D con NaOH Tabla D.2 Ejemplos preparados usando el Método General D con Na2C03 Tabla D.3 Ejemplos preparados usando el Método General D con Na2C03 seguido por NaOH Método General E: División ácida de una amina protegida con Boc A una solución de una amina protegida con Boc (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (tal como DCM, 1,4-dioxano, o MeOH) se agregó TFA o HCI (preferiblemente HCI .4 N en 1,4-dioxano, 2-35 equivalentes, preferiblemente 2-15 equivalentes). La reacción se agitó a aproximadamente 20-100°C (preferiblemente temperatura ambiente a aproximadamente 60°C) por aproximadamente 1-24 h (preferiblemente de manera aproximada 1- 6H). En los casos donde un grupo lábil ácido adicional se encuentra presente (por ejemplo, un éster t-butílico), este grupo también se puede clivar durante la reacción. Opcionalmente, se puede agregar TFA o HCI adicionales (preferiblemente HCI 4 N en solución de 1,4-dioxano, 2-35 equivalentes, preferiblemente 2-15 equivalentes) a la mezcla de reacción en casos donde la reacción no llega a completarse según lo indicado por TLC, LC/EM, o HPLC. Una vez que la reacción alcanza un nivel aceptable, la mezcla de reacción se puede concentrar al vacío para dar la amina como una sal. De manera alternativa, la reacción se puede dividir entre un solvente orgánico (tal como EtOAc, DCM o 1,4-dioxano) y una base acuosa (tal como NaHC03 acuoso saturado o Na2C03 acuoso saturado, preferiblemente NaHC03 acuoso saturado). La capa acuosa se puede extraer opcionalmente con solvente orgánico adicional tal como EtOAc o DCM. Las capas orgánicas combinadas se pueden lavar opcionalmente con salmuera, se secó sobre Na2S04 anhidro o MgS04, luego se decanta o se filtra, antes de concentrarse bajo presión reducida para dar el compuesto buscado.
Preparación No. E.1: clorhidrato de W-((3S,5R)-5-eíilpirro!idin-3-il)ciclopropansulfonamida A una solución de (2R,4S)-4-(ciclopropansulfonamido)-2-etilpirrolidin-1 -carboxilato de terc-but ó (0.95 g, 2.98 mmol, Preparación No. 15) en 1,4-dioxano (7.5 mi) se agregó HCI (4 N en 1,4-dioxano, 7.46 mi, 29.8 mmol). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 60°C. Luego de aproximadamente 4 h, la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se concentró in vacuo para dar clorhidrato de N-((3S,5R)-5-etilpirrolidin-3- iljciclopropansulfonamida crudo (0.38 g, 50%) como un residuo de color marrón: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 0.63 min; EM m/z: 219 (M + H)\ Tabla E.1 Ejemplos preparados usando el Método General E con HCI Método General E.1: División ácido de una amina protegida con Boc A una solución de una amina protegida con Boc (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (ta! como DCM, 1,4-dioxano, MeOH, o THF) se agregó un ácido (tal como TFA, HCI, o H3PO4 (preferiblemente H3P04> 1-50 equivalentes, preferiblemente 5-10 equivalentes). La reacción se agitó a aproximadamente 20-100°C (preferiblemente temperatura ambiente a aproximadamente 65°C) por aproximadamente 1-24 h (preferiblemente de manera aproximada 1-6H). En los casos donde un grupo lábil ácido adicional se encuentra presente (por ejemplo, un éster t-butílico), este grupo también se puede clivar durante la reacción. Opcionalmente, se puede agregar TFA, HCI, o H3PO4 adicionales a la mezcla de reacción en casos donde la reacción no llega a completarse según lo indicado por TLC, LC/EM, o HPLC. Una vez que la reacción alcanza un nivel aceptable, la mezcla de reacción se puede concentrar al vacío para dar la amina como una sal. De manera alternativa, la reacción se puede enfriar a aproximadamente -10-25°C antes de la adición de una base acuosa (tal como NaHC03 acuoso saturado, Na2C03 acuoso saturado,, o K3PO4 acuoso, preferiblemente K3PO4 acuoso) y dividir opcionalmente entre un solvente orgánico (tal como EtOAc, DCM, THF, o 1 ,4-dioxano). La capa acuosa se puede extraer opcionalmente con solvente orgánico adicional tal como EtOAc o DCM. Las capas orgánicas combinadas se pueden lavar opcionalmente con salmuera, secar sobre Na2S04 anhidro o MgS04, luego decantar o filtrar, antes de concentrarse bajo presión reducida para dar el compuesto buscado.
Preparación No. E.1.1 5-tosil-5H-pirrolo[2,3-to]pirazin-2-amina A una solución de 5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-ilcarpamato de tere-butilo (12.35 g, 31.8 mmol, Ejemplo No. 3 Etapa E) en THF (35 mi) se agregó H3P04 (20.16 mi, 350 mmol). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 65°C. Luego de aproximadamente 90 min, la mezcla de reacción se enfrió a aproximadamente 0°C y se agregó una solución de K3P04 (29.0 mi, 350 mmol) en agua (100 mi). Se retiró un precipitado blanco mediante filtración. La capa orgánica se separó, secó sobre MgS0 anhidro, y se concentró in vacuo para dar 5-tosil-5H-pirrólo[2,3-b]pirazin-2-amina cruda (8.58 g, 94%) como un sólido de color tostado: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.85 min; EM m/z: 289 (M + H)+.
Método General F: Desprotección de una amina protegida con Cbz usando HBr en AcOH A una amina protegida con Cbz (preferiblemente 1 equivalente) se agregó HBr en AcOH (40-400 equivalentes, preferiblemente 70-90 equivalentes de HBr 33% en AcOH) a aproximadamente 0°C a 40°C (preferiblemente a temperatura ambiente) y la mezcla se agitó a esta temperatura por aproximadamente 5-45 min (preferiblemente de manera aproximada 10 min). El precipitado se recogió mediante filtración y se lavó exhaustivamente con un solvente orgánico tal como Et20, EtOAc, 1,4-dioxano, THF o MeCN (preferiblemente EtOAc o MeCN) para dar el compuesto buscado.
Ilustración del Método General F Preparación No. F.1: bromhidrato de 4-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)biciclo[2.2.2]octan-1 -amina.
Se disolvió 4-(3/--¡midazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)biciclo[2.2.2]octan-1 -ilcarbamato de bencilo (0.22 g, 0.529 mmol, preparado usando Z de la Preparación No. N.1 y NaOH, R con diazometano, S del Ejemplo No. 3, Etapa E, T con Reactivo de Lawesson y D con NaOH) en HBr (33% en AcOH, 10 mi) y la mezcla se agitó por aproximadamente 10 min a temperatura ambiente. La reacción luego se diluyó con EtOAc (30 mi) y el precipitado se recogió mediante filtración, se lavó exhaustivamente con MeCN y se secó para dar bromhidrato de 4-(3H-¡midazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3- e]pirazin-8-il)biciclo[2.2.2]octan-1 -amina (0.16 g, 83%) como un sólido de color amarillo: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.67 min; EM m/z 282 (M + H) + .
Tabla F.1 Ejemplos preparados usando el Método General F con HBr en AcOH Método General F.1: Desprotección de una amina protegida con Cbz usando HBr en AcOH A una amina protegida con Cbz (preferiblemente 1 equivalente) se agregó HBr en ácido acético (5-400 equivalentes, 33% Br en AcOH) a aproximadamente 0°C a 40°C (preferiblemente a temperatura ambiente) y la mezcla se agitó a esta temperatura por aproximadamente 0.5 - 5 h (preferiblemente de manera aproximada 1H). Se realiza el tratamiento posterior de la reacción usando uno de los siguientes métodos. Método 1: El precipitado se recogió mediante filtración y se lavó exhaustivamente con un solvente orgánico tal como Et20, EtOAc, 1,4-dioxano, THF o MeCN (preferiblemente EtOAc o MeCN) para dar el compuesto buscado. Método 2: La mezcla de reacción se diluye con agua y un solvente orgánico adecuado (tal como Et20). Las capas se agiión por un corto periodo y la capa orgánica se decanta. Esto se repite (3-10 X) y la capa orgánica se descarta. La capa acuosa se basifica con una base acuosa (tal como NaHC03 acuoso saturado o Na2C03 acuoso saturado, preferiblemente NaHC03 acuoso saturado) y se extrajo con un solvente orgánico adecuado (tal como EtOAc, DCM o Et20). Las capas orgánicas combinadas se pueden lavar opcionalmente con salmuera y se concentran al vacío o se secan sobre Na2S04 anhidro o MgS0 y luego se decantan o se filtran antes de concentrarse bajo presión reducida para dar el compuesto buscado.
Ilustración del Método General F.1 Preparación No. F.1.1: 8-((c/'s)-4-eti!p¡rrolidin-3-il)-3-tosit-3H-imidazo[1,2-a]pirroio[2,3-e]pirazina A una solución de (cis)-3-etil-4-(3-tosil-3H-¡midazo[ ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)pirrolidin-1 -carboxilato de bencilo (0.838 g, 1.541 mmol, preparado usando E del Ejemplo No. 36 Etapa D con TFA, N, R, S.1 con Ejemplo No. 3 Etapa E, y T con Reactivo de Lawesson) se agregó una solución de HBr (2.50 mi, 15.19 mmol, 33% en ácido acético). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 1 h. La reacción se diluyó con Et20 (50 mi) y agua (20 mi). Las capas se agitóron por aproximadamente 3 min y la capa orgánica se decantó luego el método se repitió 5 veces. La capa acuosa se enfrió a aproximadamente 0°C se basificó con Solución acuosa saturada de NaHC03 (10 mi) a aproximadamente pH 7. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 50 mi), se combinó, y se secó sobre Na2S04 anhidro, filtró y concentró para dar un sólido de color marrón. El sólido se disolvió en DC (50 mi) y se lavó con agua (3 x 20 mi), se secó sobre Na2S04 anhidro, filtró y concentró para dar 8-((cis)-4-etilpirrolidin-3-il)-3-tosil-3H-imidazo[1 ,2-a]pirrúlo[2, 3-ejpirazina (0.453, 61%) como un residuo de color marrón: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.73 min; EM m/z: 410 (M + H) + .
Método General G: Formación de una acetamida A una solución de amina (preferiblemente 1 equivalente) en piridina (5-25 equivalentes, preferiblemente 10 equivalentes) a aproximadamente 0-25°C (preferiblemente de manera aproximada 0°C) se agregó Ac20 (2-10 equivalentes, preferiblemente 5 equivalentes). Si la reacción se enfría, se continúa la agitación a la temperatura inferior por aproximadamente 5-30 min (preferiblemente 10-15 min) y luego se calienta a temperatura ambiente. Luego de aproximadamente 1-24 h (preferiblemente 2-16 h), la reacción se concentra bajo presión reducida y se divide entre un solvente orgánico tal como EtOAc o DCM (preferiblemente EtOAc) y un ácido acuoso tal como HCI acuoso (1-6 N, preferiblemente 1 N). Las capas se separan y la capa orgánica se lavó opcionalmente con un ácido acuoso tal como HCI acuoso (1-6 N, preferiblemente 1 N), base acuosa tal como NaHC03 acuoso o Na2C03 acuoso (preferiblemente NaHC03 acuoso saturado), y salmuera. La capa orgánica luego se seca sobre MgS04 anhidro, se filtró a través de una almohadilla de Florisil® lavando con solvente orgánico adicional tal como EtOAc o DCM (preferiblemente EtOAc), y se concentra bajo presión reducida.
Ilustración del Método General G Preparación No. G.1*: (1 S,2R,4S)-4-ace4arnido-2-etilciclopentancarboxilato de etilo Una solución de 4-amino-2-etilciclopentancarbox¡lato de etilo (49.0 g, 264 mmol, Ejemplo No. 8, Etapa I) en piridina (214 mi, 2645 mmol) se enfrió a aproximadamente 0°C. Se agregó Ac20 (125 mi, 1322 mmol) y la agitación se continuó a aproximadamente 0°C por aproximadamente 15 min. La solución resultante se calentó a temperatura ambiente y se agitó por aproximadamente 12 h. La reacción se concentró bajo presión reducida y se agregó EtOAc (500 mi) y HCI acuoso (1 N, 200 mi). Las capas se separaron y la capa orgánica se lavó con HCI acuoso (1 N, 200 mi), NaHC03 acuoso saturado (2 x 200 mi) y salmuera (150 mi), se secó sobre MgS04 anhidro, se filtró a través de una almohadilla de Florisil® lavando con EtOAc (600 mi), y se concentró bajo presión reducida para dar un sólido blancuzco (52 g) que se purificó mediante el Método General AA (Tabla 2, Método 24, Rt = 8.2 min, o = positivo) para dar (1 S,2R,4S)-4-acetamido-2- etilciclopentancarboxilato de etilo (20.3 g, 34%): LC/EM (Tabla 1, Método a) R, = 1.82 min; EM m/z. 228 Tabla G.1 Ejemplos preparados usando el Método General G Método General H: Formación de una amida a partir de un ácido carboxilico y una amina A una solución o suspensión de un ácido carboxilico (1-5 equivalentes, preferiblemente 1,0 equivalentes) y una amina o una sal de amina (1-5 equivalentes, preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (tal como DCM, DCE, THF, o 1,4-dioxano, preferiblemente DCM) se agregó un agente de acoplamiento de péptidos (tal como BOP-CI, IBCF, HATU, o EDOHCI, preferiblemente HATU, 1-10 equivalentes, preferiblemente 1-1.5 equivalentes), una base (tal como TEA, DIEA, o piridina, preferiblemente DIEA, 0-20 equivalentes, preferiblemente 3 equivalentes). La mezcla de reacción luego se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 15 min a 24 h (preferiblemente de manera aproximada 45 min-16H). Luego se realiza el tratamiento posterior de la mezcla de reacción usando uno de los siguientes métodos. Método 1: La mezcla de reacción se diluye con agua o NaHC03 acuoso saturado. Las capas se separan. La capa acuosa se extrae opcionalmente con solvente orgánico adicional tal como EtOAc o DCM. La capa orgánica (o las capas combinadas) se lavó opcionalmente con agua, aHC03 acuoso saturado y/o salmuera, se secó sobre MgS04 anhidro o Na2S04, se filtró o se decanta, y se concentra bajo presión reducida. Método 2: La mezcla de reacción cruda se filtró a través de una almohadilla de gel de sílice, lavando con un solvente adecuado (tal como EtOAc, MeOH, o DCM, preferiblemente MeOH), y se concentra bajo presión reducida. Método 3: La mezcla de reacción cruda se purifica directamente mediante cromatografía sin trabajo previo.
Ilustración del Método General H Preparación No. H.1*: (3R,4/?)-4-metil-3-((5-tosil-5H-pirroio[2,3-b]pirazin-2-il)metilcarbamo¡l)piperidin-1 -carboxMato de terc-butilo A una suspensión de clorhidrato de (5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)metanamina (34.0 g, 100 mmol, Ejemplo No. 5, Etapa C), ácido (3R,4R)-1 -(ferc-butoxicarbonil)-4-metilpiperidin-3-carboxílico (24.43 g, 100 mmol, Ejemplo No. 5, Etapa F) y HATU (38.2 g, 100 mmol) en DCM (700 mi) se agregó DIEA (52.6 mi, 301 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 45 min. La reacción se lavó con NaHC03 acuoso saturado (300 mi). La capa orgánica se separó, secó sobre Na2S04 anhidro, filtró, y concentró in vacuo. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice (330 g) usando EtOAc 33-100% en heptanos para dar (3R,4R)-4-metil-3-((5-tosil-5H-pirrolo[2, 3-b]piraz¡n-2-il)metilcarbamoil)-piperidin-1 -carboxilato de tere-butilo (53 g, 96%) como una espuma de color amarillo pálida: LC/EM (Tabla 1, Método b) R, = 2.40 min; EM m/z: 528 (M + H) + .
Tabla H.1 Ejemplos preparado a partir de clorhidrato de 1-((3 ,4/?)-4-metilpiperidin-3-iÍ)-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazina (Ejemplo No. 5, Etapa J) usando el Método General H con EDC-HCI y DIEA Tabla H.2 Ejemplos preparados a partir de clorhidrato de 1 - ((3R,4R)-4-metilpiperidin-3-il)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazoIo[4,3- a]pirazína (preparada usando A del Ejemplo No. 1, Etapa D y Ejemplo No. 5, Etapa F, HATU y DIEA; B con DIEA; D con WaOH; E con HCI) usando Método General H con EDOHCI y DIEA Tabla H.3 Ejemplos preparados a partir de clorhidrato de 1-(c/s)- 4-metilpiperidin-3-il)-6W-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e] irazina (preparada usando D de la Preparación No. Q.1 con NaOH, y E con HCI 4 N en 1,4-dioxano) usando el Método General H con HATU y DIEA Tabla H.4 Ejemplos preparados a partir de clorhidrato de (piperidin-3-il)-6H-imidazo[1,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazina (Ejem lo No. 6, Etapa H) usando el Método General H con EDOHCI y DIEA Tabla H.5 Ejemplos preparados a partir de ciclopropanamina (Aldrich) usando el Método General H con HATU y TEA Método General I: Formación de una urea a partir de una amina y un cloruro de carbamoilo A un recipiente con una amina o una sal de amina (1 equivalente) en un solvente orgánico (tal como THF o 1,4-dioxano, preferiblemente THF) se agregó una base (tal como DIEA o TEA, preferiblemente TEA [3-5 equivalentes, preferiblemente 4 equiv]) y se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 0-30 min (preferiblemente de manera aproximada 5 min) luego se agregó a cloruro de carbamoilo (0.5-2 equivalentes, preferiblemente 0.75 equivalentes). La mezcla se agitó a aproximadamente 0-90°C (preferiblemente de manera aproximada 45°C) por aproximadamente 2-24 h (preferiblemente de manera aproximada 18H). La mezcla de reacción se dejó alcanzar temperatura ambiente. El solvente orgánico se eliminó opcionalmente bajo presión reducida. El material crudo se puede dividir entre un solvente orgánico (tal como EtOAc o DCM) y agua, una base acuosa (tal como NaHC03 acuoso saturado) o salmuera. Las capas se separan y la capa orgánica se lavó opcionalmente con agua, una base acuosa (tal como NaHC03 acuoso saturado) o salmuera, se seca sobre Na2S04 anhidro o gS04, filtra, y concentra bajo presión reducida para dar el compuesto buscado. Ilustración del Método General I Ejemplo No. 1.1.1*: ((3R,4 ?)-3-(6W-imidazo[1 ,5-a]pirro¡ e]pirazin-1-il)-4-metilpiperidin-1-il)(piperidin-1-il)metanona Un matraz de fondo redondo se cargó con clorhidrato de 1- ({3R, 4R)-4-metilpiperidin-3-il)-6H-imidazo[1,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazina (0.050 g, 0.17 mmol, Ejemplo No. 5, Etapa J), TEA (0.10 mi, 0.69 mmol) en THF (1.6 mi). La mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 5 min a temperatura ambiente y luego se agregó cloruro de piperidin-1 -carbonilo (0.019 g, 0.13 mmol). La reacción se calentó a aproximadamente 45°C por aproximadamente 18 h, enfrió a temperatura ambiente, y concentró bajo presión reducida. El producto crudo se disolvió en DCM (5 mi) y lavó con agua (3 mi), secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida. El material s purificó mediante RP-HPLC (Tabla 1, Método f) para dar ((3R,4R)-3-(6H-imidazo[1,5-a]pirrolo[2,3-e]piraz¡n÷1 -il)-4- metilpiperidin-1 -il)(piperidin-1 -il)metanona (0.018 g, 8%): LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 1.80 min; EM m/z 367 (M + H) + .
Tabla 1.1 Ejemplos preparados a partir de clorhidrato de 1- ((3R,4R)-4-metilpiperidin-3-il)-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3- ejpirazina (Ejemplo No. 5, Etapa J) usando el Método General I con TEA Tabla I.2 Ejemplos preparados a partir de clorhidrato de 1-(c s-4-met¡lpiperidin-3-il)-6H-imidazo[1 ,5-a]p¡rrolo[2,3-e]pirazina (preparada usando D de la Preparación No, Q.1 con NaOH, y E con HCI 4 N en 1,4-dioxano) usando el Método General I con TEA Tabla 1.3 Ejemplo preparado a partir de clorhidrato de ( )-1- (piperidin-3-il)-6 -/-imidazo[1,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazina (Ejem No. 6, Etapa H) usando el Método General I con TEA Método General J: Formación de una urea o una tiourea usando CDI o tiocarbonildiimidazol, respectivamente A una solución o suspensión de una amina o sal de amina (1-3 equivalentes, preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico tal como DCM, THF, o DMF (preferiblemente DCM) a aproximadamente -20-40°C (preferiblemente de manera aproximada 0°C) se agregó una base orgánica, tal como TEA, DIEA, piridina (preferiblemente TEA) (1-10 equivalentes, preferiblemente 1-3 equivalentes) seguido por CDI o 1.1 '-tiocarbonildiimidazol (0.5-2 equivalentes, preferiblemente 1 equivalente). Luego de aproximadamente 0.5-24 h (preferiblemente de manera aproximada 0.5-1 h), se agregó una segunda amina o sal de amina (1-10 equivalentes, preferiblemente 3 equivalentes) pura o como una solución o suspensión en un solvente orgánico tal como DCM, THF, o DMF (preferiblemente DCM). La reacción se mantiene a aproximadamente 0°C por aproximadamente 10-60 min (preferiblemente de manera aproximada 15-30 min) y luego la reacción se dejó calentar a temperatura ambiente. Luego de aproximadamente 1-48 h (preferiblemente de manera aproximada 12-16 h), la mezcla de reacción se divide entre un solvente orgánico (tal como EtOAc, DCM o 1,4-dioxano) y una base acuosa (tal como NaHC03 acuoso saturado o Na2C03 acuoso saturado, preferiblemente NaHC03 acuoso saturado). Opcionalmente, la mezcla de reacción se concentra bajo presión reducida y el residuo se divide según precedentemente. En cualquier caso, la capa acuosa luego se extrae opcionalmente con solvente orgánico adicional tal como EtOAc o DCM. Las capas orgánicas combinadas se pueden lavar opcionalmente con salmuera y concentrarse al vacío o secarse sobre Na2S04 anhidro o MgS0 y luego decantar o filtrar antes de concentrarse bajo presión reducida para dar el compuesto buscado. Los Intermediarios y compuestos finales preparados por este Método General se pueden purificar opcionalmente usando uno o más de los Métodos de purificación descritos precedentemente.
Preparación No. J.1: -((5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)metilcarbamotioii)pirrolidin-3-ilcarbamato de tere-butilo A una suspensión de clorhidrato de (5-tosil-5H-pirrolo[2 ,3-b]pirazin-2-il)metanamina (0.50 g, 1.5 mmol, Ejemplo No. 5, Etapa C) en DCM (10 mi) a aproximadamente 0°C se agregó TEA (0.226 mi, 1.62 mmol). A la mezcla de reacción homogénea se agregó una solución de 1.1 '-tiocarbonildiimidazol (0.29 g, 1.6 mmol) en DCM (10 mi). Luego de aproximadamente 30 min, se agregó una suspensión de pirrolidin-3-ilcarbamato de íerc-butilo (0.83 g, 4.4 mmol, TCI) en DCM (10 mi) a la mezcla de reacción. Luego de agitar por aproximadamente 20 min, la mezcla de reacción se dejó calentar a temperatura ambiente. Luego de agitar por aproximadamente 15 h, NaHC03 acuoso saturado (30 mi) se agregó a la mezcla de reacción. La capa orgánica se separó, concentró ¡n vacuo, y se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con EtOAc 20-40% . en DCM para dar 1 -((5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)metilcarbamotioil)pirrolidin-3-ilcarbamato de tere-butilo (0.54 g, 69%) como un vidrio amarillo: LC/EM (Tabla 1, Método a) R, = 2.37 min; EM m/z: 531 (M + H) + .
Método General J.1: Formación de una urea o una tiourea usando CDI o tiocarbonildiimidazol, respectivamente A una solución o suspensión de una amina o sal de amina (1-3 equivalentes, preferiblemente 1-2 equivalentes) en un solvente orgánico tal como DCM, THF, o DMF (preferiblemente DMF) a aproximadamente 20 - 80°C (preferiblemente de manera aproximada 65°C) se agregó opcionalmente una base orgánica, tal cómo TEA, DIEA, piridina (preferiblemente TEA) (1-10 equivalentes, preferiblemente 1-5 equivalentes) seguido por CDI o 1.1'-tiocarbonildiimidazol (0.5-2 equivalentes, preferiblemente 1 equivalente). Luego de aproximadamente 0.5-24 h (preferiblemente de manera aproximada 1-3 h), se agregó una segunda amina o sal de amina (1-10 equivalentes, preferiblemente 1-3 equivalentes) pura o como una solución o suspensión en un solvente orgánico tal como DCM, THF, o DMF (preferiblemente DMF). La reacción se mantiene a aproximadamente 20 - 80°C (preferiblemente de manera aproximada 65°C ) por aproximadamente 2 - 24 h (preferiblemente de manera aproximada 3H). Si la mezcla de reacción se calienta, se enfría a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se divide entre un solvente orgánico (tal como EtOAc, DCM o ,4-d¡oxano) y una base acuosa (tal como NaHC03 acuoso saturado o Na2C03 acuoso saturado, preferiblemente NaHC03 acuoso saturado). Opcionalmente, la mezcla de reacción se concentra bajo presión reducida y el residuo se divide como precedentemente. En cualquier caso, la capa acuosa luego se extrae opcionalmente con solvente orgánico adicional tal como EtOAc o DCM. Las capas orgánicas combinadas se pueden lavar opcionalmente con salmuera y concentrar al vacío o secar sobre Na2S04 anhidro o MgS04 y luego decantar o filtrar antes de concentrarse bajo presión reducida para dar el compuesto buscado. Opcionalmente, la mezcla de reacción se concentra bajo presión reducida y el residuo se purifica directamente.
Ilustración del Método General J.1 Preparación No. J.1.1: (c/s)-W-(2-cicloprop¡letil)-3-etil-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)pirrolidin-1 -carboxamida A una solución de 2-ciclopropiletanamina (0.068 g, 0.804 mmol, Oakwood) en DMF (3 mi) se agregó CDI (0.150 g, 0.926 mmol). La solución se agitó a aproximadamente 65°C por aproximadamente 2 h. Se agregó 1 -((c/s)-4-etilpirrol¡din-3-il)-6-tosil-6H-pirrplo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina (0.250 g, 0.609 mmol, Ejemplo No. 36, Etapa F) y la mezcla de reacción se continuó calentando a aproximadamente 65°C. Luego de aproximadamente 2 h, la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente. El solvente se eliminó bajo presión reducida. El material crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-10% de MeOH en DCM para dar (c¡s)-N-(2-ciclopropiletil)-3-etil-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo [4, 3-a]pirazin-1-il)pirrol id in-1 -carboxamida (0.238 g, 64%) como el producto: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.17 min; EM m/z. 522 (M + H)+.
Tabla J.1 Ejemplos preparados a partir de clorhidrato de 1-(c/s)-4-metilpiperidin-3-il)-6tf-imidazo[1 , 5-a]pirrolo[2,3-e] irazina (preparada usando D de la Preparación No. Q.1 con NaOH, y E con HCI 4 N en 1 ,4-dioxano) usando el Método General J con CDI Tabla J.2 Ejemplos preparados a partir de clorhidrato de 1 ((3R,4 ?)-4-metiJpiperidin-3-il)-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazina (Ejemplo No. 5, Etapa J) usando el Método General con CDI Tabla J.3 Ejemplos preparados a partir de clorhidrato de (piperidin-3-il)-6H-imidazo[1,5-a]p¡rrolo[2,3-e]pirazina (Ejemplo No. 6, Etapa H) usando el Método General J con CDi y piridina Tabla J.4 Ejemplos preparados a partir de 1-((3R,4S)-4-isopropilptrrolidin-3-il)-6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina (preparada usando Y del Ejemplo No. D.1.143) usando el Método General J con CDI Método General K: Formación de una suífonamida a partir de una amina A una mezcla de una amina o una sa! de amina (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico tal como THF, DMA, DCM o DMF (preferiblemente DMF) se agregó una base orgánica tal como TEA o DIEA (1-10 equivalentes, preferiblemente 2-4 equivalentes) o una base acuosa tal como NaHC03 acuoso saturado (5-20 equivalentes, preferiblemente 5-10 equivalentes) (preferiblemente una base orgánica) y un cloruro de sulfonilo (0.9-3 equivalentes, preferiblemente 1-1.5 equivalentes). La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente -10 - 25°C (preferiblemente a temperatura ambiente) por aproximadamente 0.5-150 h (preferiblemente de manera aproximada 144H). Opcionalmente, se puede agregar una base adicional (1-10 equivalentes) y/o cloruro de sulfonilo (0.4-2 equivalentes) en cualquier punto del transcurso de la reacción. Se realiza el tratamiento posterior de la reacción usando uno de los siguientes métodos. Método 1: la reacción se diluye con agua y se extrae con un solvente orgánico tal como DCM o EtOAc. Las capas orgánicas combinadas opcionalmente se lavan con salmuera, secan sobre Na2S04 anhidro o MgS04, filtran o decantan, y concentran bajo presión reducida. Método 2: La mezcla de reacción cruda se purifica mediante HPLC preparativa directamente o luego de la adición de un solvente orgánico tal como MeOH o DMF o una solución amortiguadora acuosa tal como 50 mM NH OAc con o sin concentrar la mezcla bajo presión reducida primero. Método 3: El solvente se eliminó bajo presión reducida y el residuo se divide entre un solvente orgánico tal como DCM o EtOAc (preferiblemente EtOAc) y agua. Las capas se separan y la capa orgánica se lavó opcionalmente con salmuera, seca sobre Na2S04 anhidro o MgS04, filtra o decanta, y concentra bajo presión reducida. Método 4: la reacción se diluye con agua y el sólido resultante se recogió mediante filtración al vacío.
Ilustración del Método General K Ejemplo No. K.1: W-((1 S,3S,4R)-3-(3H-imidazo[1 (2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)-4-metilciclopentil)-3,3,3-trifluoropropan-1-sulfonamida Se agregó cloruro de 3,3,3-trifluoropropan-1 -sulfonilo (0.194 g, 0.987 mmol, Matrix) por goteo a una solución de TEA (0.31 mi, 2.2 mmol) y 3-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)-4-metilciclopentanamina (0.28 g, 1.1 mmol, Preparación No. 53) en D F (10 mi). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 144 h. El solvente se eliminó bajo presión reducida y el residuo se dividió entre EtOAc y agua (20 mi de cada uno). Las capas se separaron y la capa orgánica se lavó con salmuera (30 mi), secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó usando el Método General AA (Tabla 2, Método 9, Rt = 17.7 min, o = negativo) para dar N-((1S.3S, 4R)-3-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2, 3-e]pirazin-S-il)-4-metilciclopentil)-3,3,3-trifluoropropan-1 -sulfonamida (0.021 g, 4.6%) como un sólido de color blanco: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.79 min; EM m/z 416 (M + H) + .
Tabla K.1 Ejemplos preparados a partir de (1 S,3R,4S)-3-metil-4- (6rV-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1- il)ciclopentanamina (Preparación No. 19.1) usando el Método General K Tabla K.2 Ejemplo preparado a partir de clorhidrato de 1-(c/s)-4- metilpiperid¡n-3-il)-6H-¡midazo[1 , 5-a]pirrolo[2,3-e] irazina (preparada usando D de la Preparación No. Q.1 con MaOH, y E con HCI 4 N en 1,4-dioxano) usando el Método General K Tabla K.3 Ejemplos preparados a partir de bromhidrato de 4 (3/7- imidazo[1, 2 -a] pirro lo [2,3- e]piraz¡n-8-il)biciclo[2.2.2]oc tan-lamina (Preparación No. F.1) usando el Método General K imidazo[1,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)pirrolidin-3-amina (Preparación No. TTT.1) usando el Método General K Tabla K.5 Ejemplos preparados a partir de (1 S,3R,4S)-3-etij-4- (6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a] irazin-1 - il)ciclopentanamina (preparada a partir del Ejemplo No. 8 Etapa M usando D) usando el Método General K Método General K.1: Formación de una sulfonamida a partir de una amina o heterociclo que contiene nitrógeno (condiciones adicionales) A una mezcla de una amina, una sal de amina o un heterociclo que contiene nitrógeno (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico tal como THF, DMA, DCM o DMF (preferiblemente DMF) se agregó una base orgánica tal como TEA o DIEA (1-10 equivalentes, preferiblemente 2-4 equivalentes) o una base acuosa tal como NaHC03 acuoso saturado (5-20 equivalentes, preferiblemente 5-10 equivalentes) o una base inorgánica tal como NaH (1-10 equivalentes, preferiblemente 1-3 equivalentes) y un cloruro de sulfonilo (0.9-3 equivalentes, preferiblemente 1-1.5 equivalentes). La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente -10 - 25°C (preferiblemente a aproximadamente 0°C) por aproximadamente 5 min - 150 h (preferiblemente de manera aproximada 90 min). Opcionalmente, se puede agregar una base adicional (1-10 equivalentes) y/o cloruro de sulfonilo (0.4-2 equivalentes) en cualquier punto del transcurso de la reacción. En casos donde un halógeno se encuentra presente, el halógeno se puede eliminar y el alqueno se puede obtener. Se realiza el tratamiento posterior de la reacción usando uno de los siguientes métodos. Método 1: la reacción se diluye con agua y se extrae con un solvente orgánico tal como DCM o EtOAc. Las capas orgánicas combinadas opcionalmente se lavan con base acuosa saturada y salmuera, secan sobre Na2S04 anhidro o MgS04, filtran o se decantan, y concentran bajo presión reducida. Método 2: La mezcla de reacción cruda se purifica mediante HPLC preparativa directamente o luego de la adición de un solvente orgánico tal como MeOH o DMF o una solución amortiguadora acuosa tal como 50 mM de NH4OAc con o sin concentrar la mezcla bajo la primer presión reducida. Método 3: El solvente se eliminó bajo presión reducida y el residuo se divide entre un solvente orgánico tal como DCM o EtOAc (preferiblemente EtOAc) y agua. Las capas se separan y la capa orgánica se lavó opcionalmente con salmuera, seca sobre Na2S04 anhidro o MgS04, filtra o decanta, y concentra bajo presión reducida. Método 4: la reacción se diluye con agua y el sólido resultante se recogió mediante filtración al vacío.
Ilustración del Método General K.1 Preparación No. K.1: ?-((1 S,3R,4S)-3-etil-4-(5-nitro-1-tosil-1 H-pirrolo[2,3-b]piridin-4-ilamino)ciclopentil)ciclopropansulfonannida A una solución de ?/-((1 S,3R,4S)-3-et¡l-4-(5-nitro-1 H-pirrolo[2,3-)b]piridin-4-ilamino)ciclopentil)ciclopropansulfonamida (Ejemplo No. 23, Etapa g) (0.123 g, 0.314 mmol) en DMF (3.0 mi) a aproximadamente 0°C se agregó NaH (60% en aceite mineral, 0.015 g, 0.37 mmol). La mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 5 min. cloruro de 4-metilbencen-1 -sulfonilo (0.060 g, 0.314 mmol) se agregó y la mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 30 min. Se agregó NaH (60% en aceite mineral, 0.007 g, 0.18 mmol) y la mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 10 min. Se agregó NaH (60% en aceite mineral, 0.005 g, 0.12 mmol) y la mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 15 min. Se agregó cloruro de 4-metilbencen-1 -sulfonilo (0.012 g, 0.063 mmol) y la mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 40 min. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. El residuo se disolvió en EtOAc (25 mi) y se lavó con agua (15 mi). La capa orgánica se separó, secó sobre MgS04 anhidro, filtró y concentró baje presión reducida para dar N-((1 S, 3R,4S)-3-etil-4-(5-nitro-1 -tosil- 1 H-pirrolo[2, 3-b]piridin-4-ilamino)ciclopentil)-ciclopropansulfonamida (0.218 g) como un aceite rojo-anaranjado que contenía DMF 40 mol% y 1 equivalente de EtOAc: LC/EM (Tabla 1, Método n) Rt = 0.88 min; EM m/z 548 (M + H) + .
Método General L: Desplazamiento de un haluro de árilo o heteroarilo con una amina A un recipiente de microondas o un matraz de fondo redondo se agregó una amina o una sal de amina (preferiblemente 1 equivalente), un haluro de arilo o heteroarilo (1-10 equivalentes, preferiblemente 1.5 equivalentes), un solvente (tal como MéCN, n-PrOH, n-BuOH, tolueno, DMSO, DMF, o EtOH, preferiblemente n-PrOH[microondas] o DMF [calentamiento térmico]), y una base (tal como K2C03, Na2C03, TEA o DIEA, preferiblemente TEA, DIEA, o K2C03, 1-5 equivalentes, preferiblemente 2-4 equivalentes). La mezcla de reacción se calienta a aproximadamente 40-220°C térmicamente (preferiblemente de manera aproximada 65°C) por aproximadamente 0.5-16 h (preferiblemente de manera aproximada 8.5 h) o sometió a calentamiento por microondas a aproximadamente 100-200°C (preferiblemente de manera aproximada 130-150°C) por aproximadamente 0.5-8 h (preferiblemente de manera aproximada 0.5-2H). En casos donde la reacción no llega a completarse según lo indicado por TLC, LC/EM, o HPLC, la reacción se puede someter nuevamente a calentamiento térmico a aproximadamente 40-220°C (preferiblemente de manera aproximada 65°C) por aproximadamente 0.5-8 h (preferiblemente de manera aproximada 1-2 h) o calentamiento por microondas a aproximadamente 120-200°C (preferiblemente de manera aproximada 130-150°C) por otras 1-8 h aproximadamente (preferiblemente de manera aproximada 0.5-2 h) con la adición opcional de más haluro de arilo o heteroarilo (1-10 equivalentes, preferiblemente 1.5 equivalentes) y/o base (tal como K2C03, Na2C03, TEA o DIEA, preferiblemente TEA, DIEA o K2C03, 1-5 equivalentes, preferiblemente 2-4 equivalentes). Este proceso se repite hasta que la reacción deja de avanzar. Luego de enfriar a temperatura ambiente, se realiza el tratamiento posterior de la reacción usando uno de los siguientes métodos. Método 1: la reacción se concentra bajo presión , reiducida. Método 2: Una mezcla de reacción que contiene un precipitado se puede filtrar para recoger el compuesto buscado, mientras se lavó opcionalmente con solvente o solventes orgánicas tales como Et20, DCM y/o éter de petróleo. Método 3: La mezcla de reacción se diluyó con un solvente orgánico tal como MeOH, agregó gel de sílice, y la mezcla se concentra bajo presión reducida para preparar la separación mediante cromatografía con carga sólida. Método 4: La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida antes de la adición de un solvente orgánico tal como EtOAc o DCM y luego e lavó opcionalmente con agua y/o salmuera, secó sobre Na2S04 anhidro o MgS04, filtró o decantó, y concentró bajo presión reducida. Método 5: Un solvente orgánico tal como EtOAc o DCM se agregó con la adición opcional de agua o salmuera y las capas se separan. La capa acuosa luego se extrae opcionalmente con solvente orgánico adicional tal como EtOAc o DCM. Las capas orgánicas combinadas opcionalmente se íavan con salmuera o agua, secan sobre MgS04 anhidro o Na2S0 , filtran o decantan, y concentran bajo presión reducida.
Ilustración del Método General L Preparación No. L.1: (S)-5-(3-((6-tos¡l-6H-pirro¡o[2,3-e3[1 ,2,4] triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)metil)pirrolidin-1-il)piraz!n-2-carboniírilo Una mezcla de (S)-1 -(pirrolidin-3-ilmetil)-6-tosil-6/-/-pirrólo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina (0.160 g, 0.404 mmol, preparado usando B de la Preparación No. A.1 y E con HCI), 2-cloro-5-cianopirazina (0.084 g, 0.60 mmol, ArkPharm) y DIEA (0.28 mi, 1.6 mmol) en n-PrOH (2.0 mi) se calentó en un microondas CEM a aproximadamente 150°C por aproximadamente 30 min (250 psi de presión máxima, 10 min de pendiente máxima de rampa, 200 vatios máximos). La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se agregó DC (20 mi). La solución se lavó con agua (20 mi) y salmuera (20 mi). La capa orgánica se separó, secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida. El residuo se recogió en DCM (10 mi), adsorbió sobre gel de sílice (1 g), y purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con EtOAc al 100% para dar un sólido rosado. El material se trituró con una mezcla de EtOAc (10 mi) y MeOH al 10% en DCM (10 mi). El material insoluble se recogió mediante filtración para dar (S)-5-(3-((6-tosil~ 6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2, 4Jtriazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)metil)pirrol¡din-1 -il)pirazin-2-carbonitrilo como un sólido blancuzco (0.056 g, 27%): LC/EM (Tabla 1, Método c) R, = 1.34 min; EM m/z: 500 (M + H) + .
Tabla L.1 Ejemplos preparados a partir de clorhidrato de 1-(c/s)-4-metilpiperidin-3-il)-6tf-¡midazo[1,5-a]pirro!o[2,3-e]pi razona (preparada usando D de ta Preparación No. Q.1 con NaOH, y E con HCI 4 N en 1,4-dioxano) usando el Método General L Tabla L.2 Ejemplo preparado a partir de clorhidrato de 1-((3f?,4/?)-4-metilpiperidin-3-il)-6H-im¡dazo[1 ,5-a] pirrólo [2,3-ejpirazina (Ejemplo No. 5, Etapa J) usando el Método General L Tabla L.3 Ejemplos preparados a partir de bromhidraío de (R)-S- (piperidin-3-il)-3H-imidazo[1,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazina brom hidrato de (S)-8-(piperidin-3-il)-3W-imidazo[1 ,2 -a] pirro fio [2, 3-e]pirazina (Ejemplo No. 3, Etapa g) usando el Método General L Método General M: Protección con Boc de una amina A una solución de una amina o sal de amina (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (por ejemplo MeCN, 1,4-dioxano o THF, preferiblemente THF) se agregó una base acuosa tal como Na2C03, NaOH, K2C03 o NaHC03 (2-20 equivalentes, preferiblemente 2-10 equivalentes de Na2C03) o una base orgánica tal como TEA o DIEA (1-5 equivalentes, preferiblemente 1-2 equivalentes de TEA) y luego se agregó dicarbonato de di-ferc-butilo (1-3.0 equivalentes, preferiblemente 1.2 equivalentes). La adición de base es opcional si no se usa una sal de amina. La reacción se agitó a aproximadamente 10-40°C (preferiblemente temperatura ambiente) por aproximadamente 2-24 h (preferiblemente de manera aproximada 2-6 h) y se realiza el tratamiento posterior usando uno de los siguientes métodos. Método 1: Se agregó un solvente orgánico (tal como Et20, EtOAc o DCM) y agua y las capas se separan. La capa acuosa se extrae con solvente orgánico adicional y las capas orgánicas combinadas se pueden lavar opcionalmente con salmuera, secar sobre Na2S0 anhidro o MgS04, y luego decantar o filtrar antes de concentrarse bajo presión reducida. Método 2: La mezcla de reacción se divide entre un solvente orgánico (tal como Et20, EtOAc o DCM) y ácido acuoso (tal como HCI). La capa ácida se extrae con solvente orgánico adicional y las capas orgánicas combinadas se pueden lavar opcionalmente con salmuera. La capa orgánica opcionalmente se seca sobre Na2S04 anhidro o MgS04, y luego se decanta o se filtró antes de concentrarse bajo presión reducida. Ilustración del Método General M Preparación No. M.1*: ácido (1 R,3S)-3-((ferc-bu toxicar bonilamino)metil)ciclopen ta ncarboxílico A una solución de ácido (1Rt3S)-3- (aminometil)ciclopentancarboxílico (0.500 g, 3.49 mmol, AFID) en THF (4 mi) y agua (4 mi) se agregó Na2C03 (1.11 g, 10.5 mmol) y dicarbonato de di-terc-butilo (0.915 g, 4.19 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 4 h. Se agregó EtOAc (15 mi) y HCI acuoso (1 N, 15 mi) y las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 mi) y las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (10 mi). La capa orgánica se secó sobre Na2S04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida para dar ácido (1 R,3S)-3-((terc-butox¡carbonilamino)metilo) ciclopentancarboxílico (0.300 g, 35%). H RMN (DMSO-d6) d 11.97 (s, 1H), 6.83 (s, 1H), 2.89-2.86 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 2.73-2.58 (m, 1H), 2.04-1.87 (m, 2H), 1.82-1.68 (m, 2H), 1.68-1.58 (m, 1H), 1.37 (s, 9H), 1.34-1.19 (m, 2H). Método General M.1: Protección con Boc de un compuesto que contiene nitrógeno A un compuesto que contiene nitrógeno (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (por ejemplo DCM, MeCN, 1,4-dioxano o THF, preferiblemente DCM) se agregó una base acuosa tal como Na2C03, NaOH, K2C03 o NaHC03 (preferiblemente Na2C03, 2-20 equivalentes, preferiblemente 2-10 equivalentes) o una base orgánica tal como TEA o DIEA (preferiblemente TEA, 1-5 equivalentes, preferiblemente 1-2 equivalentes) y luego se agregó dicarbonato de di-rerc-butilo (1-3 equivalentes, preferiblemente 1.2 equivalentes). DMAP (0.1- 2 equivalentes, preferiblemente 0.1 equivalente) se agregó opcionalmente a la mezcla de reacción. La reacción se agitó a aproximadamente 10-40°C (preferiblemente temperatura ambiente) por aproximadamente 0.5-24 h (preferiblemente de manera aproximada 1 h) y se realiza el tratamiento posterior usando uno de los siguientes métodos. Método 1: Se agregó un solvente orgánico (tal como Et20, EtOAc o DCM) y agua y las capas se separan. La capa acuosa se extrae opcionalmente con solvente orgánico adicional y las capas orgánicas combinadas se pueden lavar opcionalmente con salmuera, secar sobre Na2S04 anhidro o MgS04, y luego decantar o filtra rantes de concentrarse bajo presión reducida. Método 2: La mezcla de reacción se divide entre un solvente orgánico (tal como Et20, EtOAc o DCM) y ácido acuoso (como por ejemplo HCI). La capa ácida se extrae con solvente orgánico adicional y las capas orgánicas combinadas se pueden lavar opcionalmente con salmuera. La capa orgánica opcionalmente se seca sobre Na2S04 anhidro o MgS04, y luego se decanta o filtra antes de concentrarse bajo presión reducida. Método 3: Se agregó agua o una solución acuosa (tal como salmuera) y las capas se separan. La capa acuosa se extrae opcionalmente con solvente orgánico adicional (tal como Et20, EtOAc o DCM) y las capas orgánicas combinadas se pueden lavar opcionalmente con salmuera, secar sobre Na2S04 anhidro o MgS0 , y luego decantar o filtrar antes de concentrarse bajo presión reducida.
Ilustración del Método General M.1 Preparación No. M.1.1: c¡clopropilsulfonil(cis-3-metil-4 propionilciclopentil)carbamato de t-butilo A una solución de /V-(c/'s-3-metil-4-propionilciclopentil)ciclopropansulfonamida (2.70 g, 10.4 mmol, preparado usando H a partir de ácido c/s-4-(ciclopropansulfonamido)-2-metilciclopentancarboxílico (WO2009152133) con ?/,?-dimetilhidroxilamina ácido clorhídrico, M M M M con cloruro de etilmagnesio) en DCM (52 mi) se agregó TEA (1.60 mi, 11.5 mmol), dícarbonato de di-rerc-butilo (2.90 mi, 12.5 mmol), y DMAP (0.127 g, 1.04 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 1 h. Se agregó agua (50 mi) y las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con DCM (3 x 30 mi) y la capa orgánica combinada se concentró bajo presión reducida. El producto se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-50% de EtOAc en heptano para dar ciclopropilsulfonil(cis-3-mei¡!-4-propionílciclopentil)carbamato de t-butilo (3.71 g, 99%) como un sólido de color blanco: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.62 min; EM m/z: 360 (M + H)\ Método General N: Protección con Cbz de una amina Una solución de una amina o una sa! de amina (preferiblemente 1 equivalente) y una base (por ejemplo, Na2C03 o NaOH, 1-3 equivalentes, preferiblemente Na2C03, 1.6 equivalentes) en agua o solvente orgánico acuoso (por ejemplo, agua/1.4-dioxano o agua/MeCN, preferiblemente agua/1.4-dioxano) se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 1-10 min (preferiblemente 5 min). Una solución de 2,5-dioxopirrolidin-1 -ilcarbonato de bencilo (1-2 equivalentes, preferiblemente 1.0 equivalentes) en un solvente orgánico tal como 1, 4-dioxano o MeCN se agregó a la reacción. La reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 8-144 h (preferiblemente de manera aproximada 72H). Opcionalmente, la mezcla de reacción se concentra bajo presión reducida. La solución acuosa resultante se diluye con un solvente orgánico (tal como EtOAc o DCM). Los extractos orgánicos opcionalmente se lavan con agua y/o salmuera, se secó sobre Na2S0 anhidro o MgS0 , filtró o decantó, y concentró bajo presión reducida. De manera alternativa, la solución acuosa resultante se acidifica agregando un ácido tal como NH CI o HCI acuoso y luego se extrae con un solvente orgánico (tal como EtOAc o DCM).
Ilustración del Método General N Preparación No. N.1: 4-(benciloxicarbonilamino)biciclo[2.2.2]octan-1-carboxilato de metilo A una solución de clorhidrato de 4-aminobiciclo[2.2.2]octan-1 -carboxilato de metilo (1.16 g, 5.29 mmol, Prime Organics) en 1,4-dioxano (15 mi) se agregó una solución de Na2C03 (0.90 g, 8.49 mmol) en agua (15 mi). La mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 5 min a temperatura ambiente. Se agregó 2,5-dioxopirrolidin-1 -ilcarbonato de bencilo (1.32 g, 5.29 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 72 h. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (50 mi). Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 20 mi). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida para dar 4- (benciloxicarbonilamino)biciclo[2.2.2]octan-1 -carboxilato de metilo (1.68 g, 95%): LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.44 min; EM m/z: 318 (M + H) + .
Método General O: Reducción de una piridina Una piridina sustituida (preferiblemente 1 equivalente) se disuelve en un solvente orgánico (tal como AcOH, EtOH, o MeOH; preferiblemente AcOH si se usa un agitador Parr o EtOH si se usa un H-cube™). Se usa un catalizador adecuado tal como óxido de platino (IV) o Pd/C (0.05-0.20 equivalentes, preferiblemente 0.05-0.10 equivalentes de óxido de platino (IV) para una reacción en un agitador Parr o cartuchos de catalizador ThalesNano CatCart® 10% en peso Pd/C para un H-Cube™) para la reducción bajo una atmósfera de hidrógeno a aproximadamente 15-1450 psi (preferiblemente de manera aproximada 220 psi para un agitador Parr o preferiblemente 1305 psi para un H-Cube™). La reacción se corre por aproximadamente 1-10 d (preferiblemente de manera aproximada 3-5 d) a aproximadamente 20-100°C (preferiblemente de manera aproximada 25°C) para el agitador Parr o a aproximadamente 1-3 ml/min (preferiblemente 1 ml/min) a aproximadamente 25-100°C (preferiblemente de mañera aproximada 80°C) por aproximadamente 1-10 h (preferiblemente de manera aproximada 3 h) para un H-Cube™. La mezcla de reacción se filtró a través de Celite® si se corre en un agitador Parr y se concentra bajo presión reducida en cualquier caso, ilustración del Método General O Preparación No. 0.1: ácido cis-4-(trifluorometil)piperidin-3-carboxílico Una solución de ácido 4-(trifluorometil)nicotínico (1.50 g, 7.85 mmol) en EtOH (78 mi) se pasó a través de un H-cube™ equipado con un cartucho de catalizador ThalesNano CatCart® 10% en peso Pd/C a aproximadamente 1.0 ml/min, a aproximadamente 80°C, bajo aproximadamente 1305 psi de hidrógeno. Luego de aproximadamente 3 h, el solvente se eliminó bajo presión reducida para dar ácido cis-4-(trifluorometil)piperid¡n-3-carboxílico (1.55 g, 100% crudo): LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 0.54 min; EM m/z: 198 (M + H) + .
Método Genera! P: Reducción de a carbonilo a un aücohol Un agente reductor (1.0-3.0 equivalentes, preferiblemente 1.25 equivalentes), tal como LAH, DIBAL-H, NaBH o LiBH4 (preferiblemente DIBAL-H), se agregó por porciones como bien un sólido o por goteo como una solución en un solvente orgánico (tal como THF, Et20, EtOH o MeOH, preferiblemente THF) a una solución de un compuesto carbonilo (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (tal como THF, Et20, EtOH o MeOH, preferiblemente MeOH) a aproximadamente -40-50°C (preferiblemente temperatura ambiente). La mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 1-20 h (preferiblemente de manera aproximada 16 h) antes de detener con una solución acuosa (tal como NH4CI o NaHC03, preferiblemente NH CI acuoso saturado). La reacción se agitó por aproximadamente 10 min-3 h (preferiblemente de manera aproximada 20-30 min) y luego la solución se divide con un solvente orgánico (tal como EíOAc, Et20 o DCM, preferiblemente Et20). La capa orgánica se lavó con salmuera, seca sobre Na2S0 anhidro o MgS04, filtra, y concentra bajo presión reducida.
Ilustración del Método General P Preparación No. P.1: 2-etil-4-hidroxiciclopentancarboxilato de etilo A 2-et¡l-4-oxociclopentancarboxilato de etilo (10 g, 54.3 mmol, Ejemplo No. 8, Etapa g) en MeOH (143 mi) se agregó NaBH4 (2.57 g, 67.8 mmol) por porciones. La suspensión resultante se agitó por aproximadamente 16 h a temperatura ambiente luego se agregó NH4CI acuoso saturado (240 mi). La mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 20 min luego la solución se dividió con Et20 (300 mi). La capa orgánica se separó y la capa acuosa se lavó con Et20 (2 x 150 mi). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (100 mi), secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo, presión reducida. El producto se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice (220 g) eluyendo con un gradiente de EtOAc 30-70% en heptano para dar 2-etil-4-hidrox¡ciclopentancarboxilato de etilo (8.51 g, 84%, predominantemente (1 S,2R,4S)-2-et¡l-4-hidroxiciclopentancarboxilato de etilo y (1 R,2S,4R)-2-etil-4-hidroxiciclopentancarboxilato de etilo) como un aceite traslúcido: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.02 min; EM m/z: 187 (M + H) + . Tabla P.1 Ejemplos preparados usando el Método General P con DIBAL-H Método General Q: Ciclización de una amida usando un reactivo ditiadifosfetano A una solución de una amida (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (preferiblemente 1,4-dioxano) se agregó un reactivo ditiadifosfetano tal como reactivo de Lawesson o Reactivo de Belleau (2.4-disulfuro de 2.4-bis(4-fenoxifeml)-1 ,3-ditia-2.4-difosfetano) (preferiblemente Reactivo de Lawesson) (0.5-2.0 equivalentes, preferiblemente 0.6 equivalentes). La reacción se calienta a aproximadamente 25-120°C (preferiblemente de manera aproximada 80°C) por aproximadamente 0.5-10 h (preferiblemente de manera aproximada 1H). La mezcla de reacción se enfría a temperatura ambiente y opcionalmente se concentra bajo presión reducida para dar un residuo. La mezcla de reacción o residuo se divide entre un solvente orgánico (tal como DCM o « EtOAc, preferiblemente EtOAc) y agua, una base acuosa (tal como NaHC03 acuoso saturado) o salmuera. Las capas se separan y la capa orgánica se lavó opcionalmente con agua, una base acuosa (tal como NaHC03 acuoso saturado) y/o salmuera, se seca sobre Na2S04 anhidro o MgS04) filtra, y concentra bajo presión reducida para dar una tioamida. A una solución de tioamida (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (preferiblemente 1,4-dioxano) se agregó un ácido de Lewis, tal como diacetoximercurio, dicloruro de mercurio, trifluoroacetato de mercurio (II), trifluoroacetato de plata, nitrato de plata, bromuro de cobre (preferiblemente diacetoximercurio o trifluoroacetato de mercurio (II)) (1-3 equivalentes, preferiblemente 1 equivalente). La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente 20-60°C (preferiblemente temperatura ambiente) por aproximadamente 0.5-4 h (preferiblemente de manera aproximada 1H). Opcionalmente, se agregó ácido de Lewis adicional (preferiblemente diacetoximercurio o trifluoroacetato de mercurio (II)) (0.2-1.0 equivalentes, preferiblemente 0.6 equivalentes) y la reacción se continúa por aproximadamente 10 min-3 h (preferiblemente de manera aproximada 15 min). La mezcla de reacción opcionalmente se diluye con tiosulfato de sodio saturado, agua, y/o un solvente orgánico (preferiblemente EtOAc) y se filtra, preferiblemente a través de una almohadilla de Celite®. La almohadilla de Celite® se puede enjuagar con solvente orgánico adicional (preferiblemente EtOAc o DC ). El material filtrado se concentra bajo presión reducida. El material crudo opcionalmente se divide entre un solvente orgánico (tal como EtOAc o DCM) y se lavó con tiosulfato de sodio saturado y/o agua, una base acuosa (tal como NaHC03 acuoso saturado) y/o salmuera, se seca sobre Na2S04 anhidro o MgS04, filtra, y concentra bajo presión reducida.
Ilustración del Método General Q Preparación No. Q.1: c/'s-4-met¡l-3-(6-tosil-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)piperidin-1 -carboxilato de terc-butilo Un matraz de fondo redondo se cargó con c/s-4-meíil-3-((5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)metilcarbamoil)piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (5.62 g, 10.6 mmol, preparado usando O a partir de ácido 4-metilnicotínico, M, H del Ejemplo No. 5, Etapa C, HATU y DIEA) y reactivo de Lawesson (3.0 g, 7.4 mmol) en 1,4-dioxano (100 mi). La reacción se calentó a aproximadamente 80°G por aproximadamente 1 h, se enfrió a temperatura ambiente, y se concentró bajo presión reducida. El producto crudo se disolvió en EtOAc (200 mi) y lavó con NaHC03 acuoso saturado (3 x 100 mi). La capa orgánica se separó, secó sobre MgS0 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida. El material se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-5% de MeOH en DCM para dar cis-4-met¡¡-3-((5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)metilcarbamotioil)piperidin-1 -carboxilato de tere-butilo (5.2 g, 90%): LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.65 min; EM m/z: 544 (M + H) + . Un matraz de fondo redondo se cargó con cis-4-metil-3-((5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)metilcarbamotioil)piperidin-1 -carboxilato de tere-butilo (2.6 g, 4.8 mmol) y trifluoroacetato de mercurio (II) (2.1 g, 4.8 mmol) en 1,4-dioxano (72 mi) y agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 1 h. La mezcla de reacción se filtró a través de una almohadilla de Celite®. La almohadilla de Celite® se enjuagó con DCM (30 mi) y EtOAc (30 mi). El material filtrado se concentró bajo presión reducida. El residuo se disolvió en DCM (50 mi) y lavó con tiosulfato de sodio acuoso saturado (10 m!), y NaHC03 acuoso saturado (25 mi), secó sobre MgS04 anhidro, filtraró, y concentró bajo presión reducida. El materia! se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-5% de MeOH en DCM para dar cis-4-metil-3-(6-tosil-6H-imidazo[1 ,5-a]p¡rrolo[2,3-e]pirazin-1-il)piperidin-1 -carboxilato de tere-butilo (2.2 g, 90%): LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.57 min; EM m/z 510 (M+H)\ Método General R: Formación de una bromomeíilcetoria a partir de un ácido A una solución de a ácido carboxílico (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (DCM o DCE, preferiblemente DCM) se agregó lentamente cloruro de oxalilo (1.2-3.0 equivalentes, preferiblemente 2.2 equivalentes) y luego se agregó por goteo DMF (0.01-0.20 equivalentes, preferiblemente de manera aproximada 0.15 equivalentes). La reacción se agitó a aproximadamente 0-40°C (preferiblemente temperatura ambiente) por aproximadamente 3-24 h (preferiblemente de manera aproximada 14 h) antes de concentrarse bajo presión reducida a peso constante para dar el cloruro de ácido crudo. Una solución de un cloruro de ácido crudo (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (tal como THF, MeCN, Et20, o THF/MeCN, preferiblemente THF/MeCN) se agregó a trimetilsilildiazometano (2.0 M en Et20) o solución de diazometano en Et20 (preparado a partir de Diazald® de acuerdo al protocolo Aldrich o J. C romatogr. Sci. 1991, 29, 8) (2-10 equivalentes, preferiblemente 3.5 equivalentes de trimetilsilildiazometano) a aproximadamente -20-20°C (preferiblemente de manera aproximada 0°C) en un solvente orgánico adecuado tal como THF, MeCN, Et20, o THF/MeCN (preferiblemente THF/MeCN). La mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 0.5-5 h (preferiblemente de manera aproximada 3 h) a aproximadamente -20-20°C (preferiblemente de manera aproximada 0°C) antes de la adición por goteo de HBr acuoso 48% (5-40 equivalentes, preferiblemente de manera aproximada 10 equivalentes). Luego de aproximadamente 0-30 min, (preferiblemente de manera aproximada 5 min) la mezcla de reacción se puede concentrar hasta secar para dar el producto deseado, neutralizar mediante una adición por goteo de NaHC03 acuoso saturado o lavar opcionalmente con salmuera luego de la adición opcional de un solvente orgánico (tal como EtOAc o DCM, preferiblemente EtOAc). En casos donde la mezcla de reacción se someta a un tratamiento posterior acuoso, la capa orgánica se seca sobre Na2S04 anhidro o MgS04 (preferiblemente MgS04), filtra, y concentra bajo presión reducida.
Ilustración del Método General R Preparación No. R.1: 2-bromo-1 -(4-(dibenc¡larnino)-2-metilciclopentil)etanona A una solución de ácido 4-(dibencilamino)-2-metilciclopentancarboxílico (7.34 g, 22.7 mmol, Preparación No. TT.1) en DCM (100 mi), se agregó cloruro de oxalilo (4.37 mi, 49.9 mmol) lentamente y luego se agregó por goteo DMF (0.26 mi, 3.4 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 14 h y el solvente se eliminó bajo presión reducida para dar cloruro de 4-(dibencilamÍno)-2- metilciclopentancarbonilo como un sólido de color beige. El sólido se disolvió en THF y MeCN (1:1, 100 mi) y agregó a una solución de trimetilsilildiazometano (2 M en Et20, 39.7 mi, 79.4 mmol) en una mezcla 1:1 de THF y MeCN (100 mi) a aproximadamente 0°C. La mezcla resultante se agitó a aproximadamente 0°C por aproximadamente 3 h y luego detuvo mediante la adición por goteo de HBr acuoso 48% (25 mi, 221 mmol). La mezcla resultante se neutralizó mediante la adición por goteo de NaHC03 acuoso saturado (300 mi) y las capas se separaron. La capa orgánica se secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante gel de sílice cromatografía instantánea eluyendo con un gradiente de 5-45% EtOAc en heptano para dar 2-bromo-1 -(4-(d¡benc¡lam¡no)-2-metilciclopentil)etanona (6.3 g, 69%) como un aceite de color amarillo: LC/EM (Tabla 1, Método a) R, = 2.90 min; EM m/z 400, 402 (1:1) (M + H)+.
Método General S: W-Alquilación usando haluro de alquilo o ct-halocetona Un matraz de fondo redondo se carga con una base tal como NaH (60% de dispersión en aceite mineral), K2C03, o Cs2C03 (preferiblemente NaH (60% de dispersión en aceite mineral), 0.9-1.5 equivalentes, preferiblemente 0.95 equivalentes) y un solvente orgánico (tal como DMF o NMP, preferiblemente DMF). La mezcla se enfría a aproximadamente -10°C a 10°C (preferiblemente de manera aproximada 0°C) y agrega una solución de una amina apropiadamente sustituida (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (tal como DMF). La mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 5-90 min (preferiblemente de manera aproximada 15-30 min) a aproximadamente -10°C a temperatura ambiente (preferiblemente de manera aproximada 0°C) y luego agrega un haluro de alquilo o a-halocetona (1-2 equivalentes, preferiblemente 1.2 equivalentes). De manera alternativa, una solución de una amina y una base en un solvente orgánico se pueden agregar a una solución de un haluro de alquilo o a-halocetona en un solvente orgánico a aproximadamente 0°C. La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente -10°C a temperatura ambiente (preferiblemente temperatura ambiente) por aproximadamente 0.5-2 h (preferiblemente de manera aproximada 1H). El solvente orgánico se eliminó bajo presión reducida. Opcionalmente, la mezcla cruda se puede diluir con agua y un solvente orgánico (por ejemplo, EtOAc o DCM). Las capas se separan y !a capa acuosa se extrae adicionalmente con solvente orgánico (tal como EtOAc y/o DCM). Las capas orgánicas combinadas opcionalmente se lavan con salmuera, secan sobre MgS04 anhidro, filtran, y concentran hasta secar bajo presión reducida.
Ilustración del Método General S Preparación No. S.1: 2-(4-(dibencilamino)-2-rnetiiciclopentil)-2-oxoetil(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)carbamato de ferc-butilo A una suspensión de NaH (60% de dispersión en aceite mineral, 0.058 g, 1.45 mmol) en DMF (5 mi) se agregó una solución de 5-tos¡l-5H-pirrolo[2,3-b]p¡razin-2-ilcarbamato de tere-butilo (0.59 g, 1.519 mmol, Ejemplo No. 3, Etapa E) en DMF (5 mi) por goteo a aproximadamente 0°C. La mezcla resultante se agitó a esta temperatura por aproximadamente 30 min y luego agregó por goteo a una solución de 2-bromo-1 -(4-(dibencÍ!am¡no)-2-metilciclopentil)etanona (0.73 g, 1.823 mmol, Preparación No. R.1) en DMF (10 mi). La mezcla resultante se agitó a aproximadamente 0°C por aproximadamente 1 h y el solvente se eliminó bajo presión reducida. El residuo se dividió entre NaHC03 acuoso saturado y EtOAc (100 mi de cada uno). La fase orgánica se secó sobre MgS0 anhidro y concentró bajo presión reducida para dar 2-(4-(dibencilamino)-2-metilciclopentil)-2-oxoetil(5-rosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)carbamato de íerc-butilo (1.04 g, 97%) como un sólido de color amarillo amorfo: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 3.30 min; EM m/z 708 (M + H)+.
Método General S.1: W-Alquilación usando haluro de alquilo, a-halocetona o a-haloamida Un matraz de fondo redondo se carga con una base tal como NaH (60% de dispersión en aceite mineral), K2C03, o Cs2C03 (preferiblemente NaH (60% de dispersión en aceite mineral), 0.9-1.5 equivalentes, preferiblemente 0.95 equivalentes) y un solvente orgánico (tal como DMF, DCM, 1,4-dioxano, o N P, preferiblemente DMF). La mezcla se enfría a aproximadamente -10°C a temperatura ambiente (preferiblemente de manera aproximada 0°C) y se agregó una solución de una amina aproximadamente sustituida (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (tal como DMF). De manera alternativa, la base se puede agregar por porciones a una solución de la amina y un solvente orgánico a aproximadamente 0°C a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 5-90 min (preferiblemente de manera aproximada 15-30 min) a aproximadamente -10°C a temperatura ambiente (preferiblemente de manera aproximada 0°C) y luego se agregó un haluro de alquilo, a-halocetona, o a-haloamida (1-2 equivalentes, preferiblemente 1.2 equivalentes). De manera alternativa, una solución de una amina y una base en un solvente orgánico se pueden agregar a una solución de un haluro de alquilo, a-halocetona, o a-haloamida en un solvente orgánico a aproximadamente 0°C. La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente -10°C a temperatura ambiente (preferiblemente temperatura ambiente) por aproximadamente 0.5-24 h (preferiblemente de manera aproximada 1H). Opcionalmente, el solvente orgánico se puede eliminar bajo presión reducida. Opcionalmente, la mezcla de reacción o residuo se puede diluir con agua, NH4CI acuoso, o NaHC03 acuoso. Si se forma un precipitado el sólido se puede recoger opcionalmente mediante filtrado al vacío para dar el compuesto buscado. De manera alternativa, un solvente orgánico (tal como EtOAc o DCM) se agregó a la mezcla acuosa y las capas se separan. La capa acuosa opcionalmente se puede extraer adicionalmente con un solvente orgánico (tal como EtOAc y/o DCM). Las capas orgánicas combinadas opcionalmente se lavan con soluciones acuosas adicionales tales como salmuera, secan sobre a2S04 anhidro o MgS04l filtran, y concentran hasta secar bajo presión reducida.
Ilustración del Método General S.1 Preparación No. S.1.1: 2-amino-2-oxoetil(5-tosil-5H-p¡rrolo[3.2-b]pirazin-2-il)carbamato de íerc-butilo A una solución de 5-tosil-5H-pirrolo[3,2-b]pirazin-2-ilcarbamato de rere-butilo (1.00 g, 2.57 mmol, Ejemplo No. 3 Etapa E) y DMF (13 mi) bajo nitrógeno a aproximadamente 0°C se agregó NaH (60% de dispersión en aceite mineral, 0.113 g, 2.83 mmol) en una porción. Luego de aproximadamente 30 min, se agregó 2-bromoacetamida (0.391 g, 2.83 mmol) en una porción. Luego de aproximadamente 30 min, el baño de hielo se retiró y la solución se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 2 h. Se agregó NH4CI acuoso saturado/agua (1:1, 100 mi). Luego de agitar por aproximadamente 10 min, la mezcla se filtró usando agua para lavar la torta de filtrado. La fase acuosa se extrajo con EtOAc (50 mi). La torta de filtrado se disolvió en EtOAc y agregó a la capa orgánica. La capa orgánica se secó sobre Na2S0 , filtró, y concentró bajo presión reducida. El material se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc 20-100%/heptano para dar 2-amino-2-oxoetil(5-tosil-5H-pirrolo[3.2-b]pirazin-2-il)carbamato de f ere-butilo (0.980 g, 82%): LC/EM (Tabla 1, Método n) Rt = 0.70 min; EM m/z 446 (M + H)\ Método General T: Ciclización de una cetona usando un reactivo ditiafosfetano A una solución de una cetona (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico tal como THF o ,4-dioxano (preferiblemente 1,4-dioxano) se agregó un reactivo tiolante tal como reactivo de Lawesson o Reactivo de Belleau (2,4-disulfuro de 2.4-bis(4-fenoxifen¡l)- ,3-ditia-2,4-difosfetano) (0.5-2.0 equivalentes, preferiblemente Reactivo de Lawesson, 0.5-0.6 equivalentes). La reacción se calienta a aproximadamente 30°C a 120°C (preferiblemente de manera aproximada 60-70°C) por aproximadamente 0.5-10 h (preferiblemente de manera aproximada 1-2H). Opcionalmente, se puede agregar un reactivo tiolante adicional (0.5-2.0 equivalentes, preferiblemente 0.5^-0.6 equivalentes) a la mezcla de reacción y se puede continuar el calentamiento por aproximadamente 0.5-10 h (preferiblemente de manera aproximada 1-2H). La mezcla de reacción se concentra bajo presión reducida.
Ilustración del Método General T Preparación No. T.1: A,V-dibenci{-3-metil-4-(3-tosii-3H-imidazo[1,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)ciclopentanamina Una mezcla de 1 -(4-(dibencilamino)-2-metilciclopentil)-2-(5-tosil-5/-/-pirrolo[2,3-¿)]pirazin-2-ilamino)etanona (5.32 g, 8.75 mmol, Preparación No. 50) y Reactivo de Lawesson (1.88 g, 4.64 mmol) en 1,4-dioxano (60 mi) se calentó a aproximadamente 60°C por aproximadamente 2 h. Se agregó reactivo de Lawesson (1.88 g, 4.64 mmol) y se continuó la agitación a aproximadamente 60°C por aproximadamente 1 h. El solvente se eliminó y ei residuo se sometió a cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-8% de MeOH en DCM para dar N,N-dibencil-3-metil-4-(3-tos¡l-3H-imidazo[1 , 2-a]pirrolo[2, 3-e]pirazin-8-il)c¡clopentanamina (4.47 g, 87%) como un sólido de color marrón amorfo: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.99 min; EM m/z 590 (M + H) + .
Método General U: Condensación de Knoevenagel para formar un ciclopentadieno sustituido Un matraz de fondo redondo se carga con un solvente orgánico (por ejemplo THF o éter dimetílico de dietilenglicol; preferiblemente THF), y luego se agregó en porciones NaH (60% de dispersión en aceite mineral, preferiblemente 1 equivalente). Un solvente orgánico se puede agregar opcionalmeníe. La mezcla de reacción se enfría a aproximadamente -15-5°C (preferiblemente de manera aproximada -10-0°C). Se agregó un ß-ceto éster (preferiblemente 1 equivalente) por goteo a un tasa para mantener la temperatura interna por debajo de aproximadamente 10°C. La mezcla resultante se agitó a aproximadamente 0-60°C (preferiblemente de manera aproximada 25°C) por aproximadamente 0.1-2 h (preferiblemente de manera aproximada 0.5 h), y luego se agregó por goteo una a-halocetona apropiadamente sustituida (preferiblemente 0.45-0.55 equivalentes). La mezcla resultante se calienta a aproximadamente 40-80°C (preferiblemente de manera aproximada 50°C) por aproximadamente 3-24 h (preferiblemente de manera aproximada 19H). El solvente orgánico se eliminó bajo presión reducida y el material crudo resultante se agitó con agua enfriando en un baño de hielo. La suspensión resultante se filtró luego de aproximadamente 0.5-3 h (preferiblemente de manera aproximada 2 h) y la torta de filtrado se lavó con agua y seca bajo vacío por aproximadamente 1-3 h (preferiblemente de manera aproximada 1H). El sólido resultante se suspende en un solvente orgánico (preferiblemente Et20), recoge mediante filtración al vacio, lava con un solvente orgánico (preferiblemente Et20), y seca bajo vacío para dar el producto deseado como una sal de sodio del enolato. Opcionalmente, se agregó tolueno y el agua forma una mezcla azeotrópica. El sólido resultante se suspende nuevamente en un solvente orgánico (preferiblemente Et20), recoge mediante filtración al vacío, lava con un solvente orgánico (preferiblemente Et20), y luego se seca bajo vacío.
Ilustración del Método General U Preparación No. U.1: 4-(etoxicarbonil)-3-eíjl-2- (metoxicárbonil)ciclopenta-l ,3-dienolato de sodio Un matraz de fondo redondo se cargó con THF (1.5 I) y luego agregó en porciones NaH (60% de dispersión en aceite mineral, 70.0 g, 1.75 mol). Se agregó THF adicional (500 mi) y la mezcla resultante se enfrió a aproximadamente -10°C. Se agregó propionilacetato de etilo (250 mi, 1.80 mol) por goteo durante aproximadamente 1 h para mantener la temperatura interna por debajo de aproximadamente 10°C. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 0.5 h para dar una solución de color amarillo traslúcida y luego se agregó 4-cloroacetoacetato de metilo (100 mi, 0.88 mol) por goteo durante aproximadamente 5 min. La mezcla resultante se calentó a aproximadamente 50°C por aproximadamente 19 h para dar una suspensión rojiza anaranjada. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, concentró bajo presión reducida y el líquido resultante se transfirió a un vaso de precipitados y diluyó con agua (350 mi). La mezcla se agitó en un baño de hielo por aproximadamente 2 h. El sólido se recogió mediante filtración al vacío y la torta de filtrado se enjuagó con agua (150 mi) y secó bajo vacío por aproximadamente 1 h. El sólido se suspendió en Et20 (1.5 I), filtró, lavó con Et20 (1.5 I), y secó bajo vacío. Se formó una mezcla azeotrópica del sólido resultante con tolueno (1 I) para dar un sólido que se suspendió nuevamente en Et20 (1 I) y se recogió mediante filtración al vacío. La torta de filtrado se lavó con Et20 (500 mi) y secó bajo vacío para dar 4-(eto icarbonil)-3-etil-2-(metoxicarbonil)ciclopenta-1 ,3-dienolató de sodio (204.2 g, 89%) como un sólido de color beige: 1H RMN (DMSO-cf6) d 3.94 (q, J=7.1 Hz, 2H), 3.46 (s, 3H), 3.04 (q, J=7.2 Hz, 2H), 2.66 (s, 2H), 1.13 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 0.99 (t, J = 7.3 Hz, 3H).
Método General V: Descarboxilación de un enolato de ß-cetoéster Un matraz de fondo redondo se carga con un ß-cetoéster apropiado o su enolato de sodio (preferiblemente 1 equivalente), un solvente orgánico (por ejemplo éter dimetílico de dietilenglicol o tolueno, preferiblemente tolueno), AcOH (2-5 equivalentes, preferiblemente 3.5 equivalentes), Nal o KCI (1-5 equivalentes, preferiblemente 1.4-1.5 equivalentes de KCI) con o sin agua (preferiblemente con agua). La reacción se calienta a reflujo por aproximadamente 1-10 h (preferiblemente de manera aproximada 3-6H). La reacción se enfria a temperatura ambiente y se agregó por goteo a NaHC03 acuoso (preferiblemente NaHC038-10%). La mezcla resultante se extrae con un solvente orgánico tal como Et20 o TBE (preferiblemente MTBE). Las capas orgánicas combinadas se secan sobre Na2S04 anhidro o MgS04, filtran, y concentran hasta secar bajo presión reducida.
Ilustración del Método General V Preparación No. V.1: 2-etil-4-oxociclopent-2-encarboxilato de etilo Un matraz de fondo redondo de 5 litros se cargó con 4-(etoxicarbonil)-3-etil-2-(metoxicarbonil)ciclopenta-1 ,3-dienolato de sodio (316 g, 1205 mmol, Preparación No. U.1), KCI (126 g, 1687 mmol, JT-Baker), AcOH (241 mi, 4218 mmol, JT-Baker), tolueno (1850 mi) y agua (130 mi). La reacción se calentó a reflujo por aproximadamente 6 h, luego enfrió a temperatura ambiente y agregó por goteo a NaHC03 acuoso 8% (3.5 I). La mezcla bifásica resultante se extrajo con MTBE (2 x 1.5 I). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (1 I), secaron sobre MgS04 anhidro y concentraron bajo presión reducida para dar 191 g de material crudo que se purificó mediante destilación al vacío (97-99°C, 0.600 mM Hg) para dar 2-e-til-4--oxoci.clop.e.n.U2^e.nca^ (CDCI3) d 6.04 (m, 1H), 4.26-4.15 (m, 2H), 3.76-3.69 (m, 1H), 2.75-2.57 (m, 2H), 2.56-2.44 (m, 2H), 1.32-1.26 (m, 3H), 1.23-1.18 (m, 3H).
Método General W: Hidrogenación de un alqueno Un matraz de fondo redondo se carga con Pd/C 10% en peso (aproximadamente 0.005-0.05 equivalentes, preferiblemente 0.02 equivalentes). El recipiente se evacúa y luego se hace pasar nitrógeno 2-5 veces (preferiblemente 3 veces), luego opcionalmente se enfría a aproximadamente -10-10°C (preferiblemente de manera aproximada 0°C) antes de la adición de un solvente orgánico o mezcla de solventes (tales como ÉtOAc, MeOH, EtOH o MeOH/AcOH, preferiblemente EtOAc o MeOH) bajo una atmósfera de nitrógeno. El baño de frío se eliminó y a la mezcla se agregó un alqueno (preferiblemente 1 equivalente) puro o opcionalmente como una solución en un solvente orgánico o mezcla de solventes (tales como EtOAc, MeOH, EtOH o MeOH/AcOH, preferiblemente EtOAc o MeOH). Se burbujea gas hidrógeno a través de la mezcla de reacción por aproximadamente 1-20 min (preferiblemente de manera aproximada 5 min) y la mezcla se agitó bajo una atmósfera de hidrógeno por aproximadamente 12-60 h (preferiblemente de manera aproximada 48H). En casos donde la reacción no llega a completarse según lo indicado por TLC, LC/EM, o HPLC, la fuente de hidrógeno se eliminó, la mezcla de reacción se burbujea con nitrógeno por aproximadamente 1-20 min (preferiblemente de manera aproximada 5 min) y luego se filtró a través de una almohadilla de Celite®, y el material filtrado se concentra bajo presión reducida. El material crudo se sometió nuevamente a las condiciones de reacción precedentemente descritas por aproximadamente 2-20 h (preferiblemente de manera aproximada 5H). La fuente de hidrógeno se eliminó y la mezcla se burbujea con nitrógeno por aproximadamente 1-20 min (preferiblemente de manera aproximada 5 min) y luego se filtró a través de una almohadilla de Celite®. La torta de filtrado se enjuaga con un solvente orgánico (tal como EtOAc, MeOH o EtOH, preferiblemente el solvente de la reacción) y el material filtrado se concentra bajo presión reducida para dar el producto crudo.
Ilustración del Método General W Preparación No. W.1: 2-etil-4-oxociclopentancarboxilato de etilo Un matraz de fondo redondo se cargó con Pd/C 10% en peso (10 g, 9.4 mmol). El recipiente se enfrió a aproximadamente 0°C y se agregó EtOAc (400 mi) bajo una atmósfera de nitrógeno. El baño de frío se retiró y agregó 2-etil-4-oxociclopent-2-encarboxilato de etilo (47.8 g, 263 mmol, Preparación No. V.1). Se burbujeó gas hidrógeno a través de la mezcla por aproximadamente 5 min y la mezcla luego se agitó bajo una atmósfera de hidrógeno por aproximadamente 48 h. La fuente de hidrógeno se retiró y la mezcla se burbujeó con nitrógeno por aproximadamente 5 min y se filtró a través de una almohadilla de Celite®. La torta de filtrado se enjuagó con EtOAc (400 mi). El material filtrado se concentró bajo presión reducida para dar 2-etil-4-oxociclopentancarboxilato de etilo (mezcla aproximadamente 9:1 de cis:trans) (48.0 g, 99%) como un líquido amarillo: 1H RMN (CDCI3) d 4.23-4.10 (m, 2H), 3.22 (m, 1H), 2.59-2.50 (m, 1H), 2.44-2.28 (m, 3H), 2.26-2.16 (m, 1H), 1.58-1.46 (m, 1H), 1.41-1.30 (m, 1H), 1.30-1.23 (m, 3H), 1.02-0.91 (m, 3H).
Tabla W.1 Ejemplos preparados con Método Genera! W Método General W.1: Hidrogenación de un alqueno Un matraz de fondo redondo se carga con una suspensión de Pd(OH)2 sobre carbono o Pd/C (aproximadamente 0.005-0.10 equivalentes, preferiblemente 0.05 equivalentes) en un solvente orgánico o mezcla de solventes (tales como THF, EtOAc, MeOH, EtOH o MeOH/AcOH, preferiblemente THF) bajo una atmósfera de nitrógeno. La mezcla se agregó a un alqueno (preferiblemente 1 equivalente) puro o opcionalmente como una solución en un solvente orgánico o mezcla de solventes (tales como THF, EtOAc, MeOH, EtOH o MeOH/AcOH, preferiblemente THF) o opcionalmente el alqueno se agregó a la mezcla de Pd. La mezcla de reacción se rocía con hidrógeno. La mezcla se revuelve o agita (preferiblemente se revuelve cuando se usa hidrógeno atmosférico o se agitó cuando se usan mayores presiones de hidrógeno) bajo hidrógeno a aproximadamente presión atmosférica - 60 psi (preferiblemente presión atmosférica) a aproximadamente 20-60°C (preferiblemente temperatura ambiente) por aproximadamente 0.5-5 días (preferiblemente de manera aproximada 3 días). La mezcla de reacción se filtró a través de una almohadilla de Celite®. La torta de filtrado se enjuaga con un solvente orgánico (tal como THF, EtOAc, DCM, MeOH, o EtOH, preferiblemente el solvente de la reacción) y el material filtrado se concentra bajo presión reducida para dar el producto crudo.
Ilustración del Método General W.1 Preparación No. W.1.1 y W.1.2: 2-((1 R,3R,4S)-3-etil-4-(6 H -pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentil)acetato y 2-(( 1 S,3R,4S)-3-eti l-4-(6H-pi rrolo[2, 3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentil)acetato de etilo A una suspensión de Pd(OH)2 20% en peso sobre carbono (0.134 g, 0.192 mmol) en THF (20 mi) se agregó una solución de (E)-2-((cis)-3-etil-4-(6H-p¡rrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentiliden)acetato de etilo (1.3 g, 3.83 mmol, Ejemplo No. 38, Etapa g) en THF (5 mi). La mezcla de reacción se burbujeó con hidrógeno y una atmósfera de hidrógeno se mantuvo con un balón. Luego de aproximadamente 3 días, la mezcla de reacción se filtró a través de Celite®, se concentró bajo presión reducida y se purificó mediante cromatografía instantánea sobre gel de. sílice eluyendo con EtOAc para dar un sólido de color marrón oscuro/negro. El compuesto se purificó adicionalmente mediante cromatografía quiral (Tabla 2, Método 47) para dar 2-((1 R,3R,4S)-3-etil-4-(6H-p¡rrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentil)acetato de etilo [W.1.1] (R, = 12.0 min, o = negativo) (0.400 g, 31%): LC/EM (Tabla 1, Método a) R, = 1.85 min; EM m/z: 342 (M + H)+ y 2-((1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H- pirrólo [2, 3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 - il)ciclopentil)acetato de etilo [W.1.2] (R, = 13.7 min, o = negativo) (0.420 g, 32%) como un sólido de color blanco: LC/EM (Tabla 1, Método a) R» = 1.85 min; EM m/z: 342 (M + H)+.
Método General X: Aminación reductiva de una ceíona o aldehido Un matraz de fondo redondo se carga con una cetona o un aldehido (1-40 equivalentes; preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (tal como DCE, MeCN, MeOH, o MeCN/MéOH ; preferiblemente DCE). La mezcla opcionalmente se enfría a aproximadamente -10-10°C (preferiblemente de manera aproximada 0°C) y se agregó AcOH (1-3 equivalentes; preferiblemente 1.5 equivalentes) y una amina (1-3 equivalentes, preferiblemente 1 equivalente) por goteo, y luego se agregó en porciones un agente reductor adecuado tal como NaBH(OAc)3, Na(CN)BH3, NaBH4, preferiblemente NaBH(OAc)3 (1-6 equivalentes, preferiblemente 1.5 equivalentes). De manera alternativa, a una solución de una amina (1-3 equivalentes, preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (tal como DCE, MeCN, o MeOH; preferiblemente DCE) se agregó una cetona o un aldehido (1-40 equivalentes; preferiblemente 1 equivalente) seguido por la adición subsiguiente por porciones de un agente reductor adecuado tal como NaBH(OAc)3l Na(CN)BH3, NaBH4, preferiblemente NaBH(OAc)3 (1-6 equivalentes, preferiblemente 1.5 equivalentes). La mezcla se agitó por aproximadamente 5-20 min (preferiblemente de manera aproximada 15 min) y luego se agregó por goteo AcOH (1-3 equivalentes; preferiblemente 1.5 equivalentes). Si la mezcla de reacción se vuelve demasiado viscosa para revolver libremente, se agregó solvente orgánico adicional (tal como DCE, MeCN, MeOH, o mezcla MeCN/MeOH; preferiblemente DCE) opcionalmente para asistir la agitación. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 1-48 h (preferiblemente de manera aproximada 20H). La mezcla de reacción se vierte lentamente en una solución de base acuosa (tal como NaHC03 acuoso saturado) y luego se agregó opcionalmente NaHC03 sólido y se agitó por aproximadamente 0.5-3 h (preferiblemente de manera aproximada 2H). Las capas se separan y la solución orgánica se seca sobre Na2S04 anhidro o gS04. filtra, y concentra hasta secar bajo presión reducida.
Ilustración del Método General X Preparación No. X.1: 4-(dibencilamino)-2-etilciclopentancarboxilato de etilo Un matraz de fondo redondo se cargó con 2-etil-4-oxociclopentancarboxilato de etilo (95.9 g, 521 mmol, Preparación No. W.1) y DCE (1.8 I). La solución se enfrió a aproximadamente 0°C y se agregó AcOH (45 mi, 780 mmol) y dibencilamina (120 mi, 625 mmol) por goteo, para dar la formación de una suspensión espesa. La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 10°C y se agregó DCE adicional (500 mi). Se agregó NaBH(OÁc)3 (166 g, 781 mmol) por porciones y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 20 h. La mezcla de reacción se vertió lentamente en NaHC03 acuoso saturado en agitación (1.5 I), y luego agregó en porciones NaHC03 sólido (175 g). La mezcla se agitó por aproximadamente 2 h y la capa orgánica se separó, secó sobre Na2S04 anhidro, y se concentró hasta secar bajo presión reducida. El aceite de color amarillo crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con EtOAc al 0-20% en heptano para dar 4- (dibencilamino)-2-etilciclopentancarboxilato de etilo (136.6 g, 72%) como un sólido de color blanco: LC/EM (Tabla 1, Método a) R, = 3.26 min; EM m/z: 366 (M + H) + Tabla X.1 Ejemplos preparados a partir de clorhidrato de 1- ((3R,4R)-4-metilpiperidin-3-il)-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3- ejpirazina (Ejemplo No. 5, Etapa J) usando el Método General X con NaBH3CN Tabla X.2 Ejemplos preparados a partir de acetalde ído usando el Método General X con NaBH3CN Tabla X.3 Ejemplos preparados a partir de 4.4.4- trif luorobutiraldehído [Matrix] usando el Método General X con Na(OAc)3BH Tabla X.4 Ejemplos preparados a partir de (3R,4S)-3-etil-4-(6H- pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -iljciclopentanona (preparada usando D de la Preparación No. 25 usando D), y Método General X con Na(OAc)3BH Método General X.1: Aminación reductiva de una cetona o aldehido Una cetona o un aldehido (1-40 equivalentes; preferiblemente 1 equivalente) opcionalmente se disuelve o forma una suspensión en un solvente o solventes orgánicos tales como DCE, eCN, MeOH, MeCN/MeOH , EtOH, THF, DMF, AcOH, o DCM (preferiblemente DCE). La mezcla opcionalmente se enfría a aproximadamente -10-10°C : (preferiblemente de manera aproximada 0°C). Opcionalmente, se agregó AcOH (1-3 equivalentes; preferiblemente 1.5 equivalentes). Se agregó una amina (1-3 equivalentes, preferiblemente 1 equivalente) pura o como una solución en un solvente o solventes orgánicos tales como DCE, eCN, MeOH , EtOH, THF, DMF, AcOH, o DCM (preferiblemente DCE). De manera alternativa, se puede agregar una cetona o aldehido o solución de cetona o aldehido a una amina o solución de amina. Se puede agregar opcionalmente un agente deshidratante tal como tamices moleculares o tetraisopropóxido de titanio(IV) o se puede eliminar agua usando una trampa Dean-Stark. El solvente se eliminó opcionalmente bajo presión reducida y se puede agregar un solvente o solventes orgánicos tales como DCE, MeCN, MeOH, EtOH, THF, DMF, AcOH, o DCM. Luego de agitar por aproximadamente 5 min - 24 h (preferiblemente 15 min) a entre 0°C y 100°C (preferiblemente temperatura ambiente), se agregó un agente reductor adecuado tal como NaBH(OAc)3, Na(CN)BH3, NaBH4, preferiblemente NaBH(OAc)3 (1-10 equivalentes, preferiblemente 1.5 equivalentes) por porciones. Si la mezcla de reacción se vuelve demasiado viscosa para revolver libremente, se agregó solvente orgánico adicional opcionalmente para facilitar la agitación. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 1-72 h (preferiblemente de manera aproximada 20H). Opcionalmente, la mezcla de reacción se puede tratar con agua y luego se filtró o los volátiles se pueden eliminar bajo presión reducida. La mezcla de reacción se vierte lentamente en una solución de base acuosa, agua, o ácido acuoso (preferiblemente NaHC03 acuoso saturado) o de manera alternativa la solución acuosa se agregó lentamente a la mezcla de reacción.
Opcionalmente, se puede agregar NaHC03 sólido adicional. La mezcla se agitó enérgicamente por aproximadamente 0.5-20 h (preferiblemente de manera aproximada 2H). Las capas se separan y la solución orgánica se seca sobre Na2S04 anhidro o MgS04, filtra, y concentra hasta secar bajo presión reducida.
Ilustración del Método General X.1 Preparación No. X.1.1: (trans-4-((6H-pirrolo[2,3- e][1 , 2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-8- il)metilamino)ciclohexil)metilcarbamato de ferc-butilo Se agregó trans-4-aminociclohexilmetilcarbamato de ferc- butilo (0.059 g, 0.258 mmol, AMRI) a una mezcia de 6H- pirrolo[2,3-e][ ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-8-carbaldehído (0.0403 g, 0.215 mmol, Preparación No. 38) y THF (1.0 mi). La mezcla se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 90 min. Se agregó triacetoxiborhidruro de sodio (0.068 g, 0.32 mmol). Luego de aproximadamente 3 h, se agregó D F (0.500 mi). Luego de aproximadamente 15 h, se agregó Na(OAc)3BH (0.091 g, 0.43 mmol). Luego de aproximadamente 24 h, se agregó Na(OAc)3BH (0.091 g, 0.43 mmol). La mezcla se calentó a aproximadamente 40°C. Luego de aproximadamente 22 h, la mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente. Se agregó NaHC03 acuoso saturado/agua (1:1, 2MI). Luego de revolver enérgicamente por aproximadamente 1 h, la solución se diluyó con agua (3 mi) y luego extrajo con EtOAc (6 x 10 mi). Los orgánicos combinados se secaron sobre Na2S04, filtraron, y concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 10-100% [(NH3 7 N 1% en MeOH) en MeOH al 10%/DCM]/DCM para dar (trans-4-((6H-pirrolo[2 ,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-8-il)metilamino)ciclohexil)metilcarbamato de ferc-butilo (0.0476 g, 53%): LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.24 min; EM m/z 400 (M + H) + .
Método General Y: Hidrogenación de una amina protegida con bencilo o Cbz A un recipiente cargado con una amina protegida con bencilo o Cbz (preferiblemente 1 equivalente) se agregó un catalizador de paladio (por ejemplo Pd(OH)2 sobre C o Pd/C; preferiblemente Pd(OH)2 sobre C) (0.01-0.2 equivalentes, preferiblemente 0.02-0.15 equivalentes) y un solvente orgánico (tal como MeOH o EtOH, preferiblemente EtOH). La mezcla se agitó o se revuelve a aproximadamente 25-60°C (preferiblemente de manera aproximada 50°C) por aproximadamente 1-96 h (preferiblemente de manera aproximada 1.5-3 h) a aproximadamente 15-60 psi de hidrógeno (preferiblemente de manera aproximada 30-50 psi de hidrógeno). En casos donde la reacción no llega a completarse según lo indicado por TLC, LC/EM, o HPLC, la fuente de hidrógeno se eliminó, la mezcla de reacción se burbujea con nitrógeno por aproximadamente 5-20 min (preferiblemente de manera aproximada 5 min) y luego se filtró a través de una almohadilla de Celite®, y el material filtrado se concentra bajo presión reducida. El material crudo se sometió nuevamente a las condiciones de reacción precedentemente descritas por aproximadamente 2-20 h (preferiblemente de manera aproximada 3-5H). Cuando la reacción se completa según lo indica TLC, LC/EM, o HPLC, la fuente de hidrógeno se eliminó, se introduce una atmósfera de nitrógeno, y la mezcla de reacción se filtró a través de una almohadilla de Celite®. El material filtrado se concentra bajo presión reducida para dar el producto deseado.
Ilustración del Método General Y Preparación No. Y.1: 4-amino-2-etilciclopentancarboxilaío de etilo A un recipiente que contiene una suspensión de Pd(OH)2 20% en peso sobre C (12.9 g, 18.4 mmol) en EtOH (1.0 I) se agregó 4-(dibencilamino)-2-etilciclopentancarboxilato de etilo (129 g, 352 mmol, Preparación No. X.1). La reacción se agitó por aproximadamente 90 min a aproximadamente 50°C bajo aproximadamente 30 psi de hidrógeno. Luego de la eliminación de la fuente de hidrógeno y la introducción de una atmósfera de nitrógeno, la mezcla resultante se filtró a través de una almohadilla de Celite® y el material filtrado se concentró bajo presión reducida para dar 4-amino-2-etilciclopentancarboxilato de etilo (64.5 g, 99%) como un jarabe amarillo: 1H R N (CDCI3) d 4.03-3.88 (m, 2H), 3.17 (m, 1H), 2.68 (m, 1H), 2.09-2.02 (m, 2H), 2.02-1.94 (m, 2H), 1.84 (m, 1H), 1.58-1.48 (m, 1H), 1.32-1.18 (m, 1H), 1.09 (m, 3H), 1.03 (m, 2H), 0.78-0.69 (m, 3H).
Tabla Y.1 Ejemplos preparados usando el Método General Y Método General Z: Hidrólisis básica de un éster a un ácido carboxílico A un recipiente que contiene un éster (preferiblemente 1 equivalente) puro o bien en un solvente orgánico (tal como 1,4-dioxano, MeOH, o THF/MeOH, preferiblemente 1 ,4-dioxano) se agregó una base acuosa (tal como NaOH acuoso o LiOH, 1-10 equivalentes, preferiblemente 2-6 equivalentes). La mezcla se agitó a aproximadamente 0-100°C (preferiblemente temperatura ambiente) por aproximadamente 1-48 h (preferiblemente de manera aproximada 4-8H). La mezcla de reacción luego se acidifica mediante la adición de un grupo ácido adecuado (tal como HCI acuoso). Las capas se separan y la capa acuosa se extrae opcionalmente con solvente orgánico adicional (tal como EtOAc o DCM, preferiblemente DCM). La capa o capas orgánicas opcionalmente se secan sobre Na2S04 anhidro o MgS04, filtran, y concentran hasta secar bajo presión reducida para dar compuesto buscado crudo. De manera alternativa, la mezcla de reacción se concentra bajo presión reducida para dar compuesto buscado crudo como una sal carboxilato.
Ilustración del Método General Z Preparación No. Z.1*: ácido (1 S,2R,4S)-4-(ciclopropansulfonamido)-2-etilciclopentancarboxílico A un matraz que contiene (1 S,2R,4S)-4-(ciclopropansulfonamido)-2-etilciclopentan-carboxilato de etilo (11.1 g, 38.4 mmol, preparado usando K de la Preparación No. Y.1, cloruro de ciclopropansulfonilo y TEA, AA [Tabla 2, Método 1, Rt = 9.5 min, o = negativo]) se agregó NaOH acuoso (1 N, 210 mi, 210 mmol). Luego de agitar a temperatura ambiente por aproximadamente 8 h, la reacción se acidificó a aproximadamente pH 1 usando HCI acuoso 6 N y se extrajo con DCM (3 x 150 mi). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida para dar ácido (1 S,2R,4S)-4-(ciclopropansulfonamido)-2-etilciclopentancarboxílico con DCM 25 mol% como un excipiente (10.7 g, 99%): LC/EM (Tabla 1, Método a) R, = 1.71 min; EM m/z: 260 (M-H)\ Método General AA: Purificación HPLC preparativa quirai Se realiza la purificación quiral usando bombas Varían 218 LC, una Varían CVM 500 con válvulas conmutables y calentadores para el control automático de solvente, columna y temperatura y un colector Varían 701 Fraction. Los métodos de detección incluyen un detector de longitud de onda variable Varían 210, un polarímetro en línea (Polarímetro láser avanzado PDR-quiral, modelo ALP2002) usado para medir la giro óptico cualitativa ( + /-) y un detector evaporativo de luz dispersa (ELSD por sus siglas en inglés) (un PS-ELS 2100 (Polymer Laboratories)) usando un flujo dividido 100:1. La configuración del ELSD es la siguiente: evaporador: 46°C, nebulizador: 24°C y flujo de gas: 1.1 SLívh La estereoquímica absoluta de los compuestos purificados se asignó arbitrariamente y se ilustra como tal. Los compuestos de la invención donde la estereoquímica absoluta se determinó mediante el uso de un material de inicio enantioméricamente puro comercialmente disponible, o un intermediario definido estereoquímicamente, o difracción de rayos X se marcan con un asterisco luego del número de ejemplo.
Ilustración del Método General AA Ejemplos No. AA.1.1 y AA.1.2: 3-((3/?,4/?)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a] pirro lo [2,3- e]pirazin-1 -il) -4-(trifluoro metí l)piperidin-1-il)-3-oxopropanonitrilo y 3-((3S,4S)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1-il)-4-(trifluorometil)piperidin-1-il)-3-oxopropanonitrilo Una mezcla de 3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazj:n-1 -il)-4-(trifluorometil)piperidin-1-il)-3-oxopropanonitrilo (0.067 g, 0.18 mmol, preparado usando O a partir de ácido 4-(trifluorometil)nicotínico, N, H con Ejemplo No. 5, Etapa C, HATU y DIEA, Q con Reactivo de Lawesson y trifluoroacetato de mercurio (II), D con NaOH, F, H con ácido 2-cianoacético, HATU, y DIEA) se disolvió en DMSO:MeOH (2:1, 3 mi). La mezcla se separó usando bombas Varían 218 LC, un Varían CVM 500 con válvulas conmutables y calentadores para el control automático de solvente, columna y temperatura y un colector Varían 701 Fraction usando Método 4 (Tabla 2) para dar 3-((3R,4R)-3-(6H- imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2, 3-e]pirazin-1-il)-4-(tr¡fluorometil)piperidin- 1 -il)-3-oxopropanonitrilo (Rt = 12.2 min, o = positivo) (0.0284 g, 15%) [AA.1.1] y 3-((3S, 4S)-3-(6H-im¡dazo[1 , 5-a]pirrolo[2, 3- e]p¡razin-1 -il)-4-(trifluorometil)piperidin-1 -il)-3-oxopropanonitri¡o (Rt = 5.3 min, o = negativo) (0.0282 g, 15%) [AA.1.2]: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 1.55 min; EM m/z: 377 (M + H) + .
Tabla AA.1 Ejemplos preparados usando el Método General AA i Método General BB: Hidrólisis ácida de una amina protegida con acetilo A una solución de una /V-acetamida (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (tal como 1,4-dioxano) se agregó un ácido, tal como HCI acuoso 6 N (3-100 equivalentes, preferiblemente 30-40 equivalentes). La mezcla de reacción se calienta a aproximadamente 60-100°C (preferiblemente de manera aproximada 90-100°C) por aproximadamente 1-24 h (preferiblemente de manera aproximada 16H). La mezcla de reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente antes de dividirse entre un solvente orgánico (tal como EtOAc o DCM) y base acuosa (tal como NaHC03, Na2C03 o NaOH, preferiblemente NaHC03) y la capa acuosa se extrae opcionalmente con solvente orgánico adicional (tal como EtOAc o DCM). La capa orgánica se seca sobre MgS04 anhidro o Na2S0 , filtra, y concentra bajo presión reducida.
Ilustración del Método General BB Preparación No. BB.1*: (1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6-tosiI-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)cic!operatarsamima A una solución de ?/-((1 S,3R,4S)-3-etii-4-(6-tosil-6/-/-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentil)acetamida (6.0 g, 12.86 mmol, Ejemplo No. 8, Etapa I) en 1,4-dioxano (78 mi) se agregó HCI acuoso (6 N, 75 mi, 450 mmol). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 95°C por aproximadamente 16 h. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y el solvente se eliminó bajó presión reducida. El residuo se diluyó con DCM (50 mi) y se lavó con NaHC03 acuoso saturado (100 mi). La porción acuosa se extrajo con DCM adicional (3 x 50 mi) y las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida. El material crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de DCM/MeOH/NH4OH 0-100% (950:45:5) en DCM para dar (1 S, 3R,4S)-3-etil-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2, 3-e][1, 2, 4]triazolo[4, 3-a]p¡razin-1 -il)ciclopentanamina (3.05 g, 56%) como un sólido de color tostado: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.85 min; EM m/z: 425 (M + H) + .
Método General CC: Formación de un cloruro de sulfamoílo Un matraz de fondo redondo se carga con una amina o sal de amina (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (por ejemplo, DCM o tolueno o tolueno/DCM). Si se usa una sal de amina, se agregó una base tal como TEA o DIEA, preferiblemente DIEA (1-10 equivalentes, preferiblemente 2.5 equivalentes) y la reacción se agitó por aproximadamente 1-20 min, (preferiblemente de manera aproximada 5 min). La mezcla de reacción luego se enfría a aproximadamente -50-20°C, (preferiblemente de manera aproximada -30°C) por aproximadamente 1-10 min (preferiblemente de manera aproximada 5 min). Se agregó cloruro de sulfurilo o una solución de cloruro de sulfurilo (tal como 1 M en DCM), preferiblemente cloruro de sulfurilo (1-10 equivalentes, preferiblemente 3.5 equivalentes) por goteo a la mezcla de reacción. La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente -50-0°C (preferiblemente de manera aproximada -30°C) por aproximadamente 0.5-4 n (preferiblemente de manera aproximada 1 h) luego se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó por aproximadamente 1-24 h (preferiblemente de manera aproximada 5H). La reacción luego se diluye con un solvente orgánico (tal como DCM, EtOAc o tolueno), y se lavó con una solución acuosa de HCI (tal como Ó.1-6 M, preferiblemente 1 ). Opcionalmente, la reacción se vierte sobre hielo triturado y las capas se separan. Los extractos orgánicos opcionalmente se lavan con agua y/o salmuera, secan sobre Na2S04 anhidro o MgS04, filtran o decantan, y concentran bajo presión reducida.
Ilustración del Método General CC Preparación No. CC.1: cloruro de azetidin-1 -sulfonilo H · HCI ^C! -— ~.
Un matraz secado en horno se cargó con clorhidrato de azetidina (2.00 g, 21.38 mmol), DIEA (5.60 mi, 32.10 mmol), y DCM (50 mi). La mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 5 min a temperatura ambiente y luego se enfrió a aproximadamente -30°C en un baño de hielo seco/MeCN por aproximadamente 5 min. Se agregó cloruro de sulfurilo (4.30 mi, 53.60 mmol, Acros) por goteo durante aproximadamente 5 min. La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente -30°C por aproximadamente 1 h, luego a temperatura ambiente por aproximadamente 5 h. La mezcla de reacción se diluyó con HCI acuoso (1 N, 15 mi). Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con DCM (10 mi). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con HCI acuoso (1 N, 10 mi) y salmuera (20 mi). Las capas orgánicas se secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y el solvente se eliminó bajo presión reducida para dar cloruro de azet¡din-1-sulfonilo (1.86 g, 56%): H RMN (CDCI3) d 4.25 - 4.01 (m, 4H), 2.51 - 2.29 (m, 2H).
Método General DD: Formación de una sulfonilurea A una solución de una amina (preferiblemente 1 equivalente) y una base tal como TEA, DIEA, Na2C03, o K2C03 (1-20 equivalentes, preferiblemente 2.5 equivalentes de TEA) en un solvente orgánico (tal como DMF, DMA, DCM, THF, o 1,4-dioxano, preferiblemente DMF) a aproximadamente -10°C a temperatura ambiente (preferiblemente de manera aproximada 0°C) se agregó un cloruro de sulfamoílo (1-5 equivalentes, preferiblemente 2.2 equivalentes). La mezcla de reacción se agiió ,por aproximadamente 1-48 h (preferiblemente de manera aproximada 2-4 h) a temperatura ambiente. En casos donde la reacción no llega a completarse según lo indicado por TLC, LC/EM, o HPLC, se agregó cloruro de sulfamoílo adicional por porciones (1-20 equivalentes en total, preferiblemente 3 equivalentes por adición) a la mezcla de reacción aproximadamente cada 12-72 h (preferiblemente de manera aproximada cada 24 h) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente hasta que el progreso de la reacción se detiene según lo indica TLC, LC/EM, o HPLC. La mezcla de reacción se concentra hasta secar bajo presión reducida y/o diluir con un solvente orgánico (tal como EtOAc o DCM) y agua. Los extractos orgánicos combinados opcionalmente se lavan con agua y/o salmuera, secan sobre Na2S0 anhidro o MgS04, filtran, o decantan, y concentran bajo presión reducida. Opcionalmente, la reacción se diluye con agua y el sólido se recogió mediante filtración al vacío, lava con agua adicional, y seca bajo vacío.
Ilustración del Método General DD Preparación No. DD.1*: /V-((1 S,3R,4S)-3-et¡5-4-(6-tost t-SH-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentil)azetidin-1-sulfonamida Un matraz se cargó con (1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6-tosil-6/-/-p¡rrolo[2,3-e][1,2,4]tr¡azolo[4,3-a]p¡razin-1-il)ciclopentanamina (0.200 g, 0.471 mmol, Ejemplo No. 8, Etapa M) y DMF (4 mi). La solución se enfrió a aproximadamente 0°C y luego se agregó TEA (0.16 mi, 1.2 mmol) y cloruro de azetidin-1 -sulfonilo (0.165 g, 1.06 mmol, Preparación No. CC.1). La mezcla de reacción se calentó a temperatura ambiente y agitó por aproximadamente 2 h. El solvente se eliminó bajo presión reducida y agregó DCM (10 mi) el residuo resultante. La solución orgánica se lavó con agua y salmuera (5 mi de cada uno). Los orgánicos combinados se secaron sobre MgS0 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida para dar un aceite de color marrón. El material crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc 0-70% en DCM para dar N- ((1S, 3R, 4S)-3-etil-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2, 3-e][1,2, 4]triazolo[4, 3- a]p¡razin-1 -il)-ciclopentil)azetidin-1 -sulfonamida (0.20 g, 77%) como un sólido de color blanco: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.39 min; EM m/z: 544 (M + H) + .
Tabla DD.1 Ejemplo preparado a partir de clorhidrato de 1- ((3R,4R)-4-metilpiperidin-3-il)-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3- e]pirazina (Ejemplo No.5, Etapa J) usando el Método General DD Tabla DD.2 Ejemplo preparado a partir de clorhidrato de (R) (piperidin-3-il)-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazina (Ejemplo No. 6, Etapa H) usando el Método General DD tricloroacetimidato A un alcohol (preferiblemente 1 equivalente) en una mezcla de solventes orgánicos tales como DCM y ciclohexano (1:1 a 1:5, preferiblemente 1:2) a aproximadamente -10-5°C (preferiblemente de manera aproximada 0°C) se agregó un derivado de 2,2,2-tricloroacetimidato (1-3 equivalentes, preferiblemente 1.6 equivalentes) seguido por una adición lenta de un ácido tal como ácido p-toluensulfónico o ácido trifluorometansulfónico (0.05-1 equivalente, preferiblemente 0.08-0.1 equivalente). La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente -10-5°C (preferiblemente de manera aproximada 0°C) por aproximadamente 5-60 min (preferiblemente de manera aproximada 30 min). El baño de hielo se eliminó y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 2-24 h (preferiblemente de manera aproximada 16H). La suspensión se vierte en agua helada y se agitó por aproximadamente 5-60 min (preferiblemente de manera aproximada 30 min). La suspensión se filtró mientras se lavó con un solvente orgánico tal como DCM o bien se diluye con un solvente orgánico tal como DCM. Las capas se separan y la capa acuosa se extrae con un solvente orgánico tal como DCM. Las capas orgánicas combinadas se lavan con agua, secan sobre Na2S04 anhidro o MgS04, filtran y concentran bajo presión reducida.
Ilustración del Método General EE Preparación No. EE.1: 2-etil-4-(4-metoxibenciloxi)ciclopentancarboxilato de etilo A una mezcla de 2-etil-4-hidroxiciclopentancarboxilato de etilo (37.78 g, 203 mmol, Preparación No. P.1) en DCM (100 mi) y ciclohexano (200 mi) a aproximadamente 0°C se agregó 2.2.2-tricloroacetimidato de 4-metoxibencilo (93.58 g, 331 mmol) y luego se agregó por goteo ácido trifluorometansulfónico (1.6 mi, 18.0 mmol) durante aproximadamente 35 min. La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente 0°C por aproximadamente 30 min. El baño de hielo se retiró y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 16 h. La suspensión se vertió en hielo-agua (500 mi) y se agitó por aproximadamente 30 min. El sólido se retiró mediante filtración lavando con DCM (100 mi). Las capas en el material filtrado se separaron y la capa acuosa se extrajo con DCM (3 x 200 mi). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (200 mi), secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida. El material crudo se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de DCM: EtOAc 0-100% (95:5) en DCM para dar 2-etil-4-(4-metoxibenciloxi)ciclopentancarboxilato de etilo (39.30 g, 64%): LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.90 min; EM m/z: 307 (M + H) + .
Método General FF: Desprotección de un alcohol protegido con PMB A un alcohol protegido con PMB (preferiblemente 1 equivalente) en una mezcla de solventes tales como DCM y agua (1:1 a 7:1, preferiblemente 5:1) se agregó 2.3-dicloro-5,6-d¡ciano-p-benzoquinona (1-2 equivalentes, preferiblemente 1.2 equivalentes). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 8-24 h (preferiblemente de manera aproximada 16H). El sólido se eliminó mediante filtración lavando con un solvente orgánico tal como DCM. Las capas en el material filtrado se separan y la capa orgánica se lavó con NaHC03 acuoso saturado y salmuera, se seca sobre Na2S0 anhidro o MgS04l filtra, y concentra bajo presión reducida.
Ilustración del Método General FF Preparación No. FF.1: 3-etil-4-(6-tosil-6H-pirro¾o[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentanol A 2-etil-4-(4-metoxibenciloxi)ciclopentil)-6-tosil-6 --pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]p¡raz¡na (1.153 g, 2.11 mmol, preparado usando Z de la Preparación No. EE.1, A del Ejemplo No. 1, Etapa D, HATU, y TEA, B con DIEA) en DCM (18 mi) y agua (3.5 mi) se agregó 2.3-dicloro-5,6-d¡c¡ano-p-benzoquinona (0.576 g, 2.54 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 16 h. El sólido, se retiró mediante filtración lavando con DCM (150 mi). La capa orgánica se separó y lavó con NaHC03 acuoso saturado (2 x 40 mi) y salmuera (40 mi), se secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice (40 g) eluyendo con un gradiente de EtOAc 30-100% en DCM para dar 3-etil-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentanol (0.672 g, 75%): LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.09 min; EM m/z: 426 (M + H) + .
Método General GG: Formación de una lactona A un ácido carboxílico de ?-alcohol (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico tal como DCM se agregó una base (tal como TEA, 3-5 equivalentes, preferiblemente 3 equivalentes) y BOP-CI (1-2 equivalentes, preferiblemente 1.2 equivalentes). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 1-5 h (preferiblemente de manera aproximada 2H). La mezcla de reacción se vierte en un solvente orgánico (preferiblemente Et20). El sólido se eliminó mediante filtración lavando con un solvente orgánico tal como Et20. El material filtrado se concentra bajo presión reducida. De manera alternativa, el material filtrado se lavó con NaHC03 acuoso saturado, ácido cítrico acuoso 1 N, y salmuera, se seca sobre Na2S04 anhidro o MgS04, filtra, y concentra bajo presión reducida.
Ilustración del Método General GG Preparación No. GG.1*: (1 S,4S,5 ?)-5-eíii-2-oxabiciclo[2.2.1 ]heptan-3-ona A ácido (1 S,2R,4S)-2-etil-4-hidroxiciclopentancarboxílico (0.943 g, 5.96 mmol, Ejemplo No. 4, Etapa H) en DCM (60 mi) se agregó TEA (2.5 mi, 18 mmol) y BOP-CI (1.82 g, 7.15 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 2 h, luego se vertió en Et20 (350 mi). El sólido se retiró mediante filtración lavando con Et20 (50 mi). El material filtrado se concentró bajo presión reducida para dar un aceité de color amarillo el cual se disolvió en DCM (5 mi) y agregó Ét20 para dar un sólido. El sobrenadante se decantó y el sólido se lavó con Et20 adicional. Los extractos orgánicos combinados se concentraron bajo presión reducida para dar (1 S,4S,5R)-5-etil-2-oxabiciclo[2.2.1]heptan-3-ona que contenía aproximadamente 15% mol de TEA (0.912 g, 99% crudo): H RMN (CDCI3) d 4.85 (s, 1H), 2.88 (s, 1H), 2.19 (m, 2H), 2.08 (m, 1H), 1.69 (m, 1H), 1.41 (m, 3H), 0.97 (t, J = 5.4, 3H).
Método General HH: Apertura de una lactona con una amina o hidracina A una lactona (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico tal como 1,4-dioxano o DCM (preferiblemente 1,4-dioxano) se agregó una hidracina (1-1.5 equivalentes, preferiblemente 1 equivalente). De manera alternativa, una lactona (preferiblemente 1 equivalente) se agregó a una solución de una sal de HCI de una amina y DIEA (1-1.5 equivalentes, preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico o mezcla de solventes (tales como 1,4-dioxano, DCM, o DCM/DMF, preferiblemente DCM). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente o se calienta a aproximadamente 40-100°C (preferiblemente de manera aproximada 80°C cuando se usa 1,4-dioxano, reflujo cuando se usa DCM) por aproximadamente 1-24 h (preferiblemente de manera aproximada 16H). Si se calienta, la mezcla de reacción se enfría a temperatura ambiente. En casos donde la reacción no llega a completarse según ¡o indicado por TLC, LC/EM o HPLC, se agregó trímetilaluminio (1-8 equivalentes, preferiblemente 3 equivalentes) por goteo puro o en solución (tal como 2M en clorobenceno, 2M en heptano, o 2M en tolueno, preferiblemente 2M en tolueno) luego de la adición opcional de un solvente orgánico (tal como 1,4-dioxano, DCM, o DMF, preferiblemente 1,4-dioxano) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 0.25-16 h (preferiblemente de manera aproximada 0.5H). Opcionalmente , se puede agregar trimetilaluminio puro o en solución como se describe precedentemente a partir del inicio de la reacción. Se agregó HCI acuoso (1 N, 3-10 equivalentes, preferiblemente 8 equivalentes) por goteo y la mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 10-60 min (preferiblemente de manera aproximada 30 min). Las capas se separan y la capa acuosa se extrae con un solvente orgánico tal como EtOAc o DCM (preferiblemente EtOAc). Las porciones orgánicas combinadas se lavan con agua, NaHC03 acuoso saturado, salmuera y secan sobre Na2S04 anhidro o MgS0 , filtran, y concentran bajo presión red ucida .
Ilustración del Método General HH Preparación No. HH.1*: (1 S,2R,4S)-2-etil-4-hidrox¡-Ar-(5-íoSí !-5H-pirrolo[2,3-í>]pirazin-2-il)ciclopentancarboh idrazida A (1S,4S,5f?)-5-etil-2-oxabiciclo[2.2.1]heptan-3-ona (0.835 g, 5.96 mmol, Preparación No. GG.1) en 1,4-dioxano (12 mi) se agregó 2-hidrazinil-5-tosil-5/-/-pirrolo[2,3-b]pirazina (Ejemplo No. 1, Etapa D, 1.81 g, 5.96 mmol). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 80°C por aproximadamente 16 h, luego enfrió a temperatura ambiente. Se agregó 1,4-dioxano (25 mi) y trimetilaluminio (2 N en tolueno, 9 mi, 18 mmol) en forma secuencial. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 30 min. HCI acuoso (1 N, 50 mi) se agregó por goteo y la mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 30 min. Las capas se separaron.
La porción acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 100 mi). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con agua (10 mi), NaHC03 acuoso saturado (15 mi), salmuera (15 mi) y secaron sobre MgS04 anhidro. filtraron, y concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice (40 g) eluyendo con EtOAc ai 100% para dar (1 S, 2R, 4S)-2-etil-4-hidrox¡-N'-(5-tosil-5H-pirrolo[2, 3-b]pirazin-2-il)ciclopentan-carbohidrazida (1.887 g, 53%): LC/EM (Tabla 1, Método b) R, = 2.05 min; EM m/z: 444 (M + H)+.
Tabla HH.1 Ejemplos preparados a partir de clorhidrato de 1-((3R,4R)-4-metilpiperidin-3-il)-6H-imidazo[1 , 5-a] pirro lo [2,3-ejpirazina (Ejemplo No. 5, Etapa J) usando el Método Genera! HH con DIEA Método General II: reacción de Mitsunobu de un alcohol A un alcohol (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico tal como THF, benceno, tolueno, o 1,4-dioxano (preferiblemente THF) se agregó un reactivo adecuadamente ácido (tal como un ácido carboxílico, un fenol o un alcohol heteroarílico,- 1 -3 equivalentes, preferiblemente 1.5 equivalentes), seguido por rr/'-n-butilfosfina, trifenilfosfina o trifenilfosfina unida a polímero .(preferiblemente trifenilfosfina unida a polímero, 1-3 equivalentes, preferiblemente 1.5 equivalentes), y TEA (1-6 equivalentes, preferiblemente 4.5 equivalentes). Se agregó TMAD, 1 ,1 '-(azodicarbonil)dipiperidina, DIAD o DÉAD (preferiblemente DEAD, 1-3 equivalentes, preferiblemente 1.5 equivalentes) por goteo. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 5-48 h (preferiblemente de manera aproximada 16H). De manera alternativa, luego de aproximadamente 0.1-24 h (preferiblemente de manera aproximada 1 h), se agregó reactivo fosfina adicional (0.2-2 equivalentes, preferiblemente 0.75 equivalentes) y TMAD, 1 ,1 '-(azodicarbonil)dipiperidina, DIAD o DEAD (0.2-1 equivalente, preferiblemente 0.75 equivalentes) para llevar la reacción a completarse. Cuando se usa reactivo unido a polímero, la mezcla de reacción se filtró y lava con una mezcla de solventes tales como DCM, EtOAc y MeOH (preferiblemente DCM luego MeOH). El material filtrado se concentra bajo presión reducida. Cuando no se usa reactivo unido a polímero, la mezcla de reacción se diluye con un solvente orgánico tal como DCM o EtOAc y luego se lavó con agua, NaHC03 acuoso saturado, salmuera y seca sobre Na2SO„ anhidro o MgS04, filtra, y concentra bajo presión reducida.
Ilustración del Método General II Preparación No. 11.1*: (1 S,2R,4R)-4-(4-cianofenox¡)-2-eíi¡-ñT-(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]p¡ razin-2-il)ciclopentancarbohidrazida A (1S,2R,4S)-2-etil-4-hidroxi-/V'-(5-tosil-5H-p¡rrolo[2,3-it>]piraz¡n-2-il)c¡clopentan-carbo-hidraz¡da (0.885 g, 1.99 mmol, Ejemplo No. 4, Etapa J) en THF (15 mi) se agregó 4-hidroxibenzonitrilo (0.357 g, 2.99 mmol), trifenilfosfina (0.998 g, 2.99 mmol, unida a polímero, 3 mmol/g), y TEA (1.3 mi, 9 mmol). Se agregó DEAD (0.47 mi, 2.99 mmol) por goteo. La mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 1 h, luego trifenilfosfina adicional (0.50 g, 1.50 mmol, unida a polímero, 3 mmol/g) y DEAD (0.2 mi, 1.3 mmol) se agregaron y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 16 h. El sólido se retiró mediante filtración lavando con DCM (5 x 5 mi) luego eOH (4 x 5 mi). El material filtrado se concentró bajo presión reducida y el residuo se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice (40 g) eluyendo con un gradiente de 0-40% de EtOAc en DCM para dar (1 S,2R,4R)-4-(4-cianofenoxi)-2-etil-N'-(5-tosH-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)ciclopentancarbohidrazida (0.958 g, 88%) como una espuma de color amarillo: LC/EM (Tabla 1, Mátodo b) R, = 2.56 min; EM m/z: 545 (M + H)\ Método General JJ: Desplazamiento de un haluro con un alcohol A un alcohol (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico tal como DMF, THF o 1,4-dioxano (preferiblemente DMF) a aproximadamente 0-25°C (preferiblemente temperatura ambiente) se agregó NaH (60% de dispersión en aceite mineral, 1-4 equivalentes, preferiblemente 1.2 equivalentes) en porciones. Luego de aproximadamente 2-60 min (preferiblemente de manera aproximada 5 min), se agregó un haluro (1-30 equivalentes, preferiblemente 1.1 equivalente). La mezcla de reacción se calienta a aproximadamente 60-80°C (preferiblemente de manera aproximada 70°C) por aproximadamente 1-16 h (preferiblemente de manera aproximada 2H). Luego de enfriar a temperatura ambiente, se agregó hielo-agua a la mezcla de reacción o la mezcla de reacción se vierte sobre agua helada y luego se extrae con un solvente orgánico tal como DCM o EtOAc (preferiblemente DCM). Las porciones orgánicas combinadas se concentran bajo presión reducida. De manera alternativa, las porciones orgánicas combinadas se lavan con agua, NaHC03 acuoso saturado, salmuera y secan sobre Na2S04 anhidro o MgS04, filtran, y concentran bajo presión reducida.
Ilustración del Método General JJ Preparación No. JJ.1: 5-(3-etil-4-(6-((2- (trimetilsilil)etoxi)metil)-6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentiloxi)pirazin-2-carbonitrilo A 3-etil-4-(6-((2-(tr¡metilsilil)etoxi)metil)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazoío[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentanol (0.098 g, 0.24 mmol, preparado usando FF de la Preparación No. KK.1) en DMF (1 mi) se agregó NaH (0.012 g, 0.29 mmol, 60% de dispersión en aceite mineral) por porciones. Luego de aproximadamente 5 min, se agregó 2-cloro-5-cianopirazina (0.039 g, 0.28 mmol, ArkPharm). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 70°C por aproximadamente 2 h. Luego de enfriar a temperatura ambiente, se agregó agua helada (2 mi) y la mezcla se extrajo con DC (3 x 5 mi). Las capas orgánicas se combinaron y los solventes se eliminaron bajo presión reducida. El residuo se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice (12 g) eluyendo con un gradiente de EtOAc 20-80% en DCM para dar 5-(3-etil-4-(6-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-6H-pirrolo[2, 3-e][1 ,2,4]triazolo[4, 3-aJpirazin-1-il)ciclopentiloxi)pirazin-2-carbonitrilo (0.085 g, 69%): LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.84 min; EM m/z: 505 (M + H)+. Método General KK: protección con SEM A un derivado de pirrol (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (tal como THF, 1,4-dioxano, o DMF, preferiblemente 1,4-dioxano) a aproximadamente 0 - 40°C (preferiblemente temperatura ambiente) se agregó NaH (60% de dispersión en aceite mineral)(1-3 equivalentes, preferiblemente 1.05 equivalentes) en porciones. La mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 1-60 min (preferiblemente de manera aproximada 30 min). Luego se agregó SEM-CI (1-3 equivalentes, preferiblemente 1.5 equivalentes). Luego de aproximadamente 15 min-24 h (preferiblemente de manera aproximada 30 min), el solvente se eliminó y el residuo se divide entre un solvente orgánico tal como EtOAc y agua. Las capas se separan y el solvente orgánico se eliminó bajo presión reducida para dar el compuesto buscado. De manera alternativa, la mezcla de reacción se vierte lentamente en agua helada con agitación para dar una suspensión. Los sólidos se pueden recoger mediante filtración y secan para dar el compuesto buscado. También, el material filtrado se puede dividir entre un solvente orgánico (tal como EtOAc o DCM) y una base acuosa (tal como as NaHC03 acuoso saturado o Na2S04 acuoso saturado, preferiblemente 5 NaHC03 acuoso saturado). La porción orgánica se separa y concentra bajo presión reducida para dar el compuesto buscado. Ilustración del Método General KK Preparación No. KK.1: 1 -(2-etil-4-(4- metoxibenciloxi)ciclopentil)-6-((2-(trimetilsilil)etoxi)rnetil)-6H-io pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina I5 A una suspensión de 1 -(2-etil-4-(4- metoxibenciloxi)ciclopentil)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]-triazolo[4,3- a]pirazina (0.323 g, 0.825 mmol, preparado usando Z de la Preparación No. EE.1, A del Ejemplo No. 1, Etapa D, HATU, y 20 TEA, B con DIEA, D con NaOH) en 1,4-dioxano (2.5 mi) se agregó ÑaH (0.035 g, 0.866 mmol, 60% de dispersión en aceite mineral) en porciones. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 30 min. Se agregó SEM-CI (0.15 mi, 0.83 mmol). Luego de aproximadamente 30 min, el solvente 25 se eliminó y el residuo se dividió entre EtOAc (12 mi) y agua (2 mi). La capa orgánica se separó y concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice (40 g) eluyendo con un gradiente de EtOAc 0-60% en DCM para dar 1 -(2-etil-4-(4-metox¡bencilox¡)ciclopentil)-6-((2-(trimetilsilil)etoxi)metH)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-ajpirazina (0.372 g, 86%): LC/EM (Tabla 1, Método b) R, = 2.96 min; EM m/z: 522 (M + H) + .
Método General LL: desprotección SEM A una solución de un compuesto protegido con V-SEM (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (tal como DMF, 1,4-dioxano, o DCM, preferiblemente DCM) se agregó TFA (5-70 equivalentes, preferiblemente 50 equivalentes) y la mezcla de reacción se agitó a aproximadamente 0 - 40°C (preferiblemente temperatura ambiente) por aproximadamente 1-20 h (preferiblemente de manera aproximada 1-4H). Se puede agregar TFA adicional (5-20 equivalentes, preferiblemente 10 equivalentes). La mezcla resultante se concentra bajo presión reducida y el residuo se disuelve en un solvente orgánico ta! como 1,4-dioxano, MeOH o EtOH (preferiblemente 1,4-dioxano). Se agregó una base acuosa (ta! como NaOH o NH OH, preferiblemente NH OH, 30-200 equivalentes, preferiblemente 120 equivalentes) y la mezcla de reacción se calienta a aproximadamente 30 - 100°C (preferiblemente de manera aproximada 60°C) por aproximadamente 30 min -10 h (preferiblemente de manera aproximada 30 min). La mezcla de reacción se enfría a temperatura ambiente, agrega agua y el producto se aisló mediante filtración. De manera alternativa la mezcla se puede dividir entre un solvente orgánico (tal como EtOAc o DC ) y una base acuosa (tal como NaHC03 acuoso saturado o Na2S04 acuoso saturado, preferiblemente NaHC03 acuoso saturado). La porción orgánica se separa y concentra bajo presión reducida para dar el compuesto buscado. En algunos casos se puede aislar un intermediario hidroximetilsulfonamida.
Ilustración del Método General LL Preparación No. LL.1: 5-(-3-etil-4-(6H-pirro!o[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 - il)ciclopentiloxi)pirazin-2-carbonitrilo A 5-(3-etil-4-(6-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentiloxi)pirazin-2-carbonitrilo (0.097g, 0.19 mmol, Preparación No. JJ.1) en DCM (2.5 mi) se agregó TFA (0.7 mi, 10 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 1.5 h. Los solventes se eliminaron bajo presión reducida y el residuo se disolvió en 1,4-dioxano (1.3 mi). Se agregó hidróxido de amonio (28-30% amoníaco acuoso, 2.5 mi, 24 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 60°C por aproximadamente 30 min luego se enfrió a temperatura ambiente. Se agregó agua (4 mi) y el precipitado se recogió mediante filtración para dar 5-(-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3- a]p¡razin-1 -H)c¡clopentHoxi)pirazin-2-carbon¡tr¡lo (0.0628 g, 87%): LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 1.99 min; EM m/z: 375 (M + H) + .
Tabla LL.1 Ejemplos preparados usando el Método Genera! LL I Método General LL.1: desprotección SEM Un compuesto protegido con /V-SEM se disuelve o suspende en un solvente orgánico (tal como DMF, 1,4-dioxano, THF, MeÓH, o DCM, preferiblemente DCM). Se puede agregar TFA, ácido canforsulfónico, o HCI, preferiblemente TFA (5-70 equivalentes, preferiblemente 50 equivalentes) y la mezcla de reacción se agitó a aproximadamente 0 - 40°C (preferiblemente temperatura ambiente) por aproximadamente 1-20 h (preferiblemente de manera aproximada 1-4H). Opcionalmente, se puede agregar TFA adicional (5-20 equivalentes, preferiblemente 10 equivalentes). La mezcla resultante se concentra bajo presión reducida. De manera alternativa, la solución o suspensión de Material protegido con SEM se puede tratar con una fuente de fluoruro tal como TBAF o LiBF4, preferiblemente TBAF (1-20 equivalentes, preferiblemente 6 equivalentes). Opcionalmente, se puede agregar una base tal como NaOH acuoso, etilendiamina, o NH4OH acuoso (1-200 equivalentes, preferiblemente etilendiamina, 2 equivalentes). La mezcla de reacción se calienta a aproximadamente 30 - 100°C (preferiblemente de manera aproximada 60°C) por aproximadamente 30 min -72 h (preferiblemente de manera aproximada 24H). La mezcla de reacción se enfría a temperatura ambiente. Opcionalmente los volátiles se eliminaron bajo presión reducida. Se realiza el tratamiento posterior de la mezcla de reacción usando uno de los siguientes métodos. Método 1: El residuo se disuelve en un solvente orgánico tal como 1,4-díoxano, MeOH o EtOH (preferiblemente 1 ,4-dioxano). Se agregó una base tai como NaOH acuoso, etilendiamina, o NH4OH acuoso (preferiblemente NH4OH acuoso, 1-200 equivalentes, preferiblemente 120 equivalentes) y la mezcla de reacción se calienta a aproximadamente 30 - 100°C (preferiblemente de manera aproximada 60°C) por aproximadamente 5 min -10 h (preferiblemente de manera aproximada 30 min). La mezcla de reacción se enfría a temperatura ambiente, se agregó agua y el producto se aisló mediante filtración. Método 2: La mezcla se divide entre un solvente orgánico (tal como EtOAc o DCM) y una base acuosa (tal como NaHC03 acuoso saturado o Na2S0 acubso saturado, preferiblemente NaHC03 acuoso saturado). La porción orgánica se separa y concentra bajo presión reducida para dar el compuesto buscado. Método 3: Opcionalmente, se agregó agua, NaHC03 acuoso, o NH4CI acuoso (preferiblemente agua). El producto se puede aislar mediante filtración o la mezcla se puede extraer con un solvente orgánico (tal como EtOAc o DCM). Los orgánicos se secan sobre Na2S04 o MgS04, filtran, y concentran bajo presión reducida para dar el compuesto buscado. En algunos casos se puede aislar un intermediario hidroximetilsulfonamida.
Ilustración del Método General LL.1 Preparación No. LL.1.1: (trans-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-8-carboxamido)ciclohexil)metilcarbamato de ferc-butiio Se agregó etilendiamina (0.011 mi, 0.16 mmol) a una solución de (trans-4-(6-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-8-carboxamido)ciclohexil)metilcarbamato de íerc-butilo (0.043 g, 0.079 mmol, preparado usando Z de la Preparación No. AAAAA.1 y KOH, H con trans-4-aminociclohexilmetilcarbamato de terc-butilo [AMRI], HATU, y TEA) en THF (1 mi). Se agregó TBAF (solución 1.0 M en THF, 0.470 mi, 0.470 mmol) en una porción. La mezcla se calentó a aproximadamente 60°C. Luego de aproximadamente 24 h, la solución se dejó enfriar a temperatura ambiente y se agitó por aproximadamente 40 h. Los volátiles se eliminaron bajo presión reducida. Se formó una suspensión del residuo en agua (10 mi) y se extrajo con EtOAc (4 x 20 mi). Las porciones orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (10 mi), secaron sobre Na2S04, filtraron, y concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 2-10% de MeOH/DCM para dar (trans-4-(6H-p¡rrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-8-carboxamido)ciclohexH)metilcarbamato de tere-butilo (0.0094 g, 29%): LC/EM (Tabla 1, Método n) Rt = 0.55 min; EM m/z: 414 (M + H) + .
Método General mM: Halogenación de un imidazol A una solución de un imidazol (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (tal como DCM, MeOM o THF, preferiblemente THF) se agregó un reactivo halogenante (tal como bromo, perbromuro de bromhidrato de piridinio, NCS, NBS, o NIS) (0.9-1.1 equivalente, preferiblemente 1 equivalente). La reacción se agitó a aproximadamente -20-150°C (preferiblemente de manera aproximada 0-60°C) por aproximadamente 10 min-48 h (preferiblemente de manera aproximada 30 min). La mezcla de reacción luego se divide entre un solvente orgánico (tal como EtOAc, DCM o 1,4-dioxano, preferiblemente EtOAc) y una base acuosa (tal como NaHC03 acuoso saturado o Na2C03 acuoso saturado, preferiblemente NaHC03 acuoso saturado). La capa acuosa se extrae opcionalmente con solvente orgánico adicional (tal como EtOAc o DCM). Las capas orgánicas combinadas se pueden lavar opcionalmente con salmuera y concentrar al vacío o secar sobre Na2S04 anhidro o MgS04 y luego decantar o filtrar antes de concentrarse bajo presión reducida para dar el reactivo de alquitrán y acetato de mercurio(l I)) en THF (10 mi) a aproximadamente 0°C se agregó una solución de NBS (0.12 g, 0.672 mmol) en THF (2 mi). Luego de aproximadamente 30 min, la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (20 mi) y NaHC03 acuoso saturado (20 mi). La capa orgánica se separó, concentró in vacuo, y se purificó mediante cromatografía sobre ge! de sílice (40 g) eluyendo con EtOAc:DCM:heptano (1:1:2) para dar 3-bromo-1 -ciclohexil-6-tosil-6H-¡midazo[1 ,5-a]pirrolo[2, 3-e]pira2ina (0.27 g 83%) como un sólido de color tostado: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 3.12 min; EM m/z 473, 475 (1:1) (M÷H) + .
Preparación No, MM.1: 3-bromo-1 -ciclohexil-6-tosil-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazina A una solución de 1 -ciclohexil-6-tosil-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazina (0.27 g, 0.67 mmol, preparado usando Q de la Preparación No. 13, reactivo de Lawesson, y acetato de mercurio(ll)) en THF (10 mi) a aproximadamente 0°C se agregó una solución de NBS (0.12 g, 0.672 mmol) en THF (2 mi). Luego de aproximadamente 30 min, la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (20 mi) y NaHC03 acuoso saturado (20 mi). La capa orgánica se separó, concentró ¡n vacuo, y se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice (40 g) eluyendo con EtOAc:DCM:heptano (1:1:2) para dar 3-bromo-1 -ciclohexil-6-tosil-6H-imidazo[1 , 5-a]pirrolo[2,3-e]pirazina (0.27 g 83%) como un sólido de color tostado: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 3.12 min; EM m/z 473, 475 (1:1) (M + H) + .
Método General NN: Formación de una amida a partir de un ácido carboxílico y una amina con pérdida de un grupo protector sulfonamida A una mezcla de una 6-tosil-6 -/-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina 1-sustituida con un grupo amino pendiente (preferiblemente 1 equivalente) y un ácido carboxíüco (1-2 equivalentes, preferiblemente 1.5 equivalentes) en un solvente (tal como DMF o THF, preferiblemente DMF) se agregó un agente de acoplamiento tal como EDOHCI o HATU (1.0-2.0 equivalentes, preferiblemente 1.2 equivalentes) con una base orgánica (tal como TEA o DIEA, 1-5 equivalentes, preferiblemente 2 equivalentes). Si se usa EDOHCI como agente de acoplamiento, se agregó HOBT (1-3 equivalentes, preferiblemente 1.2 equivalentes). Luego de aproximadamente 1-72 h (preferiblemente de manera aproximada 18 h) a aproximadamente 20-60°C (preferiblemente temperatura ambiente), se agregó agua y la capa acuosa se extrae con un solvente orgánico tal como EtOAc o DCM. Las capas orgánicas combinadas se secan sobre Na2S04 anhidro o MgS04, filtran o decantan, y concentran bajo presión reducida. Los compuestos Intermediarios y finales preparados mediante este Método General se pueden purificar opcionalmente usando uno o más de los Métodos de purificación descritos precedentemente.
Ilustración del Método General NN Ejemplo No. NN.1.1: N-((1 -((6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]tr iazo!o[4,3-a]pirazin-1-il)met¡l)ciclobutil)metil)-2-cianoacetamida A una solución de (1 -((6-tosil-6 -/-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)metil)-ciclobutil)metanamina (0.225 g, 0.548 mmol) (preparado usando A del Ejemplo No. 1, Etapa D, ácido 2-(1 -(ferc-butoxicarbonilamino)cíclobutil)acético [preparado como se describe W09921824A1 ], EDOHCI, B con TEA, E con 4.0 M HCI en 1,4-dioxano) en DMF (10 m!) se agregó ácido cianoacético (0.070 g, 0.822 mmol), HOBt (0.101 g, 0.658 mmol), EDOHCI (0.126 g, 0.658 mmol) y DIEA (0.190 ml. 1.096 mmol) para dar una solución marrón. La mezcla se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 18 h. Se agregó agua (20 ml) y la mezcla se extrajo con EtOAc (3 x 25 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgS0 anhidro, filtraron, y concentraron in vacuo. El material crudo se purificó mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-10% de MeOH en DCM para dar N-((1-((6H-pirro lo [2, 3-e][1 ,2, 4]triazolo[4, 3-a]pirazin-1 -il)metil)ciclobutil)metil)-2-cianoacetamida como un sólido blancuzco (0.030 g, 17%): LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.48 min; E m/z: 324 (M + H) + .
Tabla NN.1 Ejemplos preparados usando el Método General NN con ácido cianoacético Método General OO: Ciclización con POCI3 A una solución de una urea, una amida, o una hidrazida (1-3 equivalentes, preferiblemente 2 equivalentes) pura o en un solvente orgánico (por ejemplo, 1,4-dioxáno) se agregó POCI3 (10-200 equivalentes, preferiblemente 10,0 equivalentes). La mezcla se calienta a aproximadamente 25-100°C (preferiblemente de manera aproximada 60°C) por aproximadamente 1-16 h (preferiblemente de manera aproximada 1-3H). La mezcla de reacción se enfría a temperatura ambiente y agrega hielo. Luego de la disolución, el pH de la mezcla se ajusta a aproximadamente 7 con una base tal como NaOH acuoso. Si el producto precipita a partir de la mezcla de reacción se puede recoger mediante filtración. De manera alternativa el producto se puede extraer con un solvente orgánico (tal como EtOAc o DCM) y las capas orgánicas se pueden lavar opcionalmente con base acuosa (tal como NaHC03 acuoso saturado) y/o salmuera, secar sobre Na2S04 anhidro o MgS04, luego decantar o filtrar antes de concentrarse bajo presión reducida.
Preparación No. 00.1: /V-((3S,5R)-5-metiS-1 -(6-tosil-6«-imidazo[1,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1-il)pirrol¡din-3-il)ciclopropansulfonamida Un matraz se cargó con (2R, 4S)-4-(ciclopropansulfonamido)-2-met il-/V-((5-tosil-5/-/-pirrolo[2, 3-b] pirazin-2-il)met¡!) pirro lid i n-1 -carboxamida (0.11 g, 0.207 mmol, preparado usando E de la Preparación No. 14 y J del Ejemplo No. 5 Etapa C y CDI) y POCI3 (1.9 mi, 21 mmol). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 60°C para dar una mezcla homogénea. Luego de aproximadamente 2 h, la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y agregó hielo triturado. Luego de la fusión del hielo, se agregó NaOH 2 N acuoso hasta obtener un pH de aproximadamente 7. El precipitado resultante se recogió mediante filtración y se secó al vacío para dar N-((3S,5R)-5-metil-1 -(6-tosil-6H-imidazo[1 ,5-a] irrolo[2, 3-e]pirazin-1 -il)pirrolidin-3-il)ciclopropan-sulfonamida (0.10 g, 94%) como un sólido de color tostado: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.14 min; EM m/z: 515 (M + H) + .
Método General 00.1: Ciclización con POCI3 A una urea, una amida, o una hidrazida, pura o en un solvente orgánico (tal como 1,4-dioxano, DCE, o tolueno), se agregó POCI3 (3-200 equivalentes, preferiblemente 100 equivalentes). La mezcla se calienta a aproximadamente 25-110°C (preferiblemente de manera aproximada 100°C) por aproximadamente 1-16 h (preferiblemente de manera aproximada 1-3H). La mezcla de reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se puede agregar a hielo o puede agregar hielo. De manera alternativa, los volátiles se pueden eliminar bajo presión reducida. Opcionalmente, se agregó DCM seguido por adición lenta de MeOH y luego !a mezcla se concentra bajo presión reducida. Se agregó una capa acuosa tal como agua o HCI acuoso y se puede agregar un solvente orgánico tal como 1,4-dioxano y la solución se puede calentar a aproximadamente 30-110°C (preferiblemente de manera aproximada 100°C) por aproximadamente 0.5-6 h (preferiblemente de manera aproximada 3H). Luego de la concentración bajo presión reducida, el pH de la mezcla se puede ajustar con una base tal como NaOH acuoso o NaHC03 (preferiblemente a aproximadamente pH 7) y se agregó un solvente orgánico tal como EtOAc o DCM. El producto se puede recoger mediante filtración o extraer con un solvente orgánico (tal como EtOAc o DCM). Las capas orgánicas se pueden lavar opcicna!mente con base acuosa (tal como NaHC03 acuoso saturado) y/o salmuera, secar sobre Na2S04 anhidro o MgS04l y luego decantar o filtrar antes de concentrarse bajo presión reducida.
Preparación No. 00.1.1: 3-tosil-3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-amina A 2-(5-tosil-5H-pirrolo[3.2-/ ]pirazin-2-ilamino)acetamida (0.845 g, 2.45 mmol, preparado usando E de la Preparación No. S.1.1 y HCI) bajo nitrógeno se agregó POCI3 (5.0 mi, 54 mmol). Luego de aproximadamente 15 min, se unió un condensador de reflujo y la mezcla se calentó a aproximadamente 100°C. Luego de aproximadamente 2 h, la solución se dejó enfriar a temperatura ambiente. La mezcla se concentró bajo presión reducida. Se formó una suspensión del residuo en DCM (10 mi) y se trató lentamente con MeOH (10 mi). La mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 5 min luego se concentró bajo presión reducida. El residuo se disolvió en MeOH (20 mi) y luego se concentró bajo presión reducida. El residuo se disolvió en 1,4-dioxano (5 mi) y HCI 2N acuoso (5 mi). La solución se calentó a aproximadamente 100°C por aproximadamente 3 h. La solución se dejó enfriar a temperatura ambiente y los volátiles se eliminaron bajo presión reducida. Se formó una suspensión con la mezcla acuosa en NaHC03 acuoso saturado/agua (1:1, 100 mi) y DCM (50 mi). El sólido se recogió mediante filtración, enjuagó con agua y DCM, y secó para dar 3-tos¡l-3H-¡midazo[1 ,2-aJpirrolo[2,3-e]pirazin-8-amina (0.343 g, 43%): LC/EM (Tabla 1, Método n) Rt = 0.56 min; EM m/z: 328 (M + H) + .
Método General PP: Reacción de una amina con un ácido arilborónico A una solución de un ácido borónico (preferiblemente 1-3 equivalentes) en un solvente orgánico (tal como DCM o MeCN) se agregó una base orgánica, tal como DIEA (1-5 equivalentes, preferiblemente 1 equivalente), un catalizador inorgánico (tal como acetato de cobre (II) monohidratado (0.1 a 0.5 equivalentes, preferiblemente 0.25 equivalentes), una amina (preferiblemente 1 equivalente) y un agente de secado (tal como tamices moleculares de 4 Á). La mezcla de reacción se purga con oxígeno (1-5 veces, preferiblemente 3 veces) y calienta a aproximadamente 20-60°C (preferiblemente de manera aproximada 40-50°C) por aproximadamente 1- 24 h (preferiblemente de manera aproximada 18 h) bajo una atmósfera de oxígeno. Si la reacción no llega a completarse, se puede agregar catalizador inorgánico adicional (tal como acetato de cobre (II) monohidratado (0.1 a 0.5 equivalentes, preferiblemente 0.25 equivalentes). La mezcla de reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente antes de concentrarse bajo presión reducida Ilustración del Método General PP Preparación No. PP.1*: 3-((1 S,3R,4S)-3-metil-4-(6-tosi!-6H- pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1- il)ciclopentilamino) be nzo nitrito A una solución de ácido 3-cianofenilborónico (0.143 g, 0.974 mmol) en DCM (4 mi) se agregó acetato de cobre (II) monohidratado (0.013 g, 0.122 mmol) y tamices moleculares de 4 A. La mezcla de reacción se purgó 3 veces con oxígeno. Se agregó una solución de (1 S,3R,4S)-3-metil-4-(6-tosil-6/-/- pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]-triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentan amina (0.20 g, 0.48 mmol, Preparación No. 19.2) y DIEA (0.085 mi, 0.487 mmol) en MeCN (1 mi) y la mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 45°C por aproximadamente 18 h. Se agregó acetato de cobre (II) monohidratado adicional (0.013 g, 0.122 mmol) y la mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 4 h. La mezcla de reacción se filtró a través de una almohadilla de Celite® y concentró bajo presión reducida. El material crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc 0-60% en DCM para dar 3-((1 S,3R,4S)-3-metil-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2, 3-e][1, 2, 4Jtr¡azolo[4, 3-a]pirazin- 1 -il)ciclopentilamino)benzonitrilo (0.16 g, 48%) como un sólido de color marrón oscuro: LC/E (Tabla 1, Método c) Rt = 1.54 min; E m/z: 512 (M + H) + .
Método General QQ: Formación de una urea a partir de una amina y un isocianato A un matraz que contiene una amina o una sal de amina (1 equivalente) en un solvente orgánico (tal como THF, DCM, o MeCN, preferiblemente DCM) se agregó opcionalmente una base (tal como DIEA o TEA, preferiblemente DIEA, 1-3 equivalentes, preferiblemente 1 equivalente) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 0-30 min (preferiblemente de manera aproximada 5 min). Se agregó un isocianato (1-5 equivalentes, preferiblemente 1 equivalente) y la mezcla se agitó a aproximadamente 10-60°C (preferiblemente temperatura ambiente) por aproximadamente 1-24 h (preferiblemente de manera aproximada 18H). Ei solvente orgánico se eliminó opcionalmente bajo presión reducida al menos que se utilice MeCN en cuyo caso el solvente preferiblemente se eliminó bajo presión reducida. El material crudo se puede dividir entre un solvente orgánico (tal como EtOAc o DCM) y agua, una base acuosa (tal como NaHC03 acuoso saturado) o salmuera. Las capas se separan y la capa acuosa se lavó opcionalmente con un solvente orgánico (tal como EtOAc o DCM). Los extractos orgánicos combinados se secan sobre Na2S04 anhidro o MgS04, filtran, y concentran bajo presión reducida para dar el compuesto buscado.
Ilustración del Método General QQ Ejemplo No. QQ.1.1*: (3/?,4R)-A-(2.4-difluorofenil)-3-(6H-imidazo[1,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4-metilpiperidin-1 -carboxamida Un matraz de fondo redondo se cargó con clorhidrato de 1-((3R,4R)-4-met¡lpiper¡din-3-il)-6H-imidazo[1 , 5-a] pirrólo [2,3-ejpirazina (0.05 g, 0.17 mmol, Ejemplo No. 5 Etapa J) y DIEA (0.03 mi, 0.17 mmol) en DCM (1.6 mi). La mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 5 min a temperatura ambiente luego se agregó 2,4-difluoro- -isocianatobenceno (0.02 mi, 0.17 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 18 h. La mezcla de reacción se diluyó con DCM (5 mi) y se lavó con agua (2 mi). La capa acuosa se extrajo con DCM (2 mi). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida. El material se purificó mediante RP-HPLC (Tabla 1, Método e) para dar (3R,4R)-N-(2.4-difluorofeml)-3-(6H-imidazo[1,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4-metilpiperidin-1 -carboxamida (0.014 g, 20%): LC/EM (Tabla 1, Método j) Rt = 1.77 min; EM m/z 411 (M + H) + .
Tabla QQ.1 Ejemplos preparados a partir de clorhidrato de 1-((3R,4R)-4-metilpiperidin-3-il)-6H-imidazo[1 , 5-a] pirro lo [2,3-e]pirazina (Ejemplo No. 5 Etapa J) usando el Método Genera! QQ Método General RR: Formación de una urea a partir de una amina, una heteroarilamina y cloroformiato de fenilo A un matraz que contiene una heteroarilamina (1-6 equivalentes, preferiblemente 2.1 equivalente) en un solvente orgánico o mezcla de solventes (tales como THF/MeCN, THF, DCM, o MeCN, preferiblemente MeCN), una base tal como piridina, DIEA o TEA, preferiblemente TEA (1-6 equivalentes, preferiblemente 2 equivalentes) y DMAP (0.1-0.6 equivalentes, preferiblemente 0.2 equivalentes) se agregó cloroformiato de fenilo (1-6 equivalentes, preferiblemente 2.0 equivalentes) a aproximadamente -5-25°C (preferiblemente de manera aproximada 0°C). La mezcla de reacción se calienta a temperatura ambiente y agita por aproximadamente 1-4 h (preferiblemente de manera aproximada 3H). El solvente orgánico se eliminó opcionalmente bajo presión reducida. El material crudo se puede dividir entre un solvente orgánico tal como EtOAc, DCM o Et20 (preferiblemente Et20) y agua o salmuera. Las capas se separan y ta capa orgánica se lavó opcionalmente con agua o salmuera, seca sobre Na2S04 anhidro o MgS04, filtra, y concentra bajo presión reducida para dar el carbamato crudo. El carbamato crudo se disuelve en un solvente orgánico tal como MeCN, THF o DMF (preferiblemente MeCN) y se agregó a una solución de amina o sai de amina (1-2 equivalentes, preferiblemente 1 equivalente), y una base tal como piridina, TEA o DIEA (preferiblemente DIEA, 1-2 equivalentes, preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico tal como MeCN, THF o DMF (preferiblemente MeCN) y agitó a aproximadamente 25-80°C (preferiblemente de manera aproximada 70°C) por aproximadamente 0.5-48 h (preferiblemente de manera aproximada 2-18H). El solvente se eliminó opcionalmente bajo presión reducida. El material crudo se puede dividir entre un solvente orgánico (tal como EtOAc o DCM) y agua, una base acuosa (tal como NaHC03 acuoso) o salmuera. Las capas se separan y la capa orgánica se lavó opcionalmente con agua, una base acuosa (tal como NaHC03 acuoso saturado) y/o salmuera, se seca sobre Na2S04 anhidro o MgS04, filtra, y concentra bajo presión reducida para dar el compuesto buscado. Ilustración del Método General RR Ejemplo No. RR.1.1*: (3 ?,4R)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]plrazin-1-il)-4-met¡l-A-(pirim¡din-4-il)piperidin-1-carboxamida A solución de 4-aminopirimidina (0.04 g, 0.43 mmol), TEA (0.07 mi, 0.47 mmol) y DMAP (0.006 g, 0.05 mmol), en MeCN (1 mi) a aproximadamente 0°C se agregó cloroformiato de fenilo (0.05 mi, 0.41 mmol). La mezcla de reacción se calentó a temperatura ambiente y agitó por aproximadamente 3 h. A la mezcla de reacción se agregó agua (2 mi) y Et2Ó (5 mi). La capa orgánica se separó, lavó con agua (2 mi), secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida para dar el carbamato crudo. El carbamato se disolvió en MeCN (1 mi) y agregó una solución de clorhidrato de 1 -((3R,4R)-4-metilpiperidin-3-il)-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazina (0.06 g, 0.21 mmol, Ejemplo No. 5 Etapa J) y DIEA (0.04 mi, 0.21 mmol) en MeCN (1 mi). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 70°C por aproximadamente 2 h. El solvente se eliminó bajo presión reducida. El residuo crudo se disolvió en DCM (5 mi) y lavó con agua (2 mi), salmuera (3 mi), secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida. El material crudo se purificó mediante RP-HPLC (Tabla 1, Método e) para dar (3R,4R)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2, 3-e]pirazin-1-il)-4-metil-N-(p¡rimidin-4-il)piperidin-1 -carboxamida (0.007 g, 9%): LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 1.40 min; EM m/z 377 (M + H) + .
Tabla RR.1 Ejemplos preparados a partir de clorhidrato de 1-((3R,4R)-4-metilpiperidin-3-il)-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazina (Ejemplo No. 5 Etapa J) usando el Método General RR Método General SS: Hidrólisis de un éster a un alcohol Una solución de un éster (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico tal como THF, MeOH, o EtOH (preferiblemente MeOH) se agregó a una base en un solvente orgánico (tal como NaOH en MeOH) o base acuosa (tal como Na2C03 o NaOH) (1-20 equivalentes, preferiblemente 2-10 equivalentes). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 1-16 h (preferiblemente de manera aproximada 3H). La mezcla se divide entre un solvente orgánico (tal como EtOAc o DCM) y una base acuosa (tal como NaHC03 acuoso saturado o Na2C03 acuoso saturado, preferiblemente NaHC03 acuoso saturado). La capa orgánica se separa, seca sobre Na2S04 anhidro o MgS04, filtra, y concentra bajo presión reducida para dar el compuesto buscado.
Ilustración del Método General SS Preparación No. SS.1: 3-etil-4-(6-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentanoi A una solución de NaOH (0.088 g, 2.20 mmol) en MeOH (8 mi) se agregó una solución de benzoato de 3-etil-4-(6-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-6--pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentilo (0.158 g, 0.312 mmol, preparado usando KK de la Preparación No. 20.2) en MeOH (2 mi). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 3 h. El solvente se eliminó bajo presión reducida y agregó DCM (150 mi). La capa orgánica se lavó con agua (5 mi), NaHC03 acuoso saturado (15 mi), salmuera (15 mi), y secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida para dar 3-etil-4-(6-((2-(trimetilsMI)etoxi)metil)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentanol (0.123 g, 98%) como un aceite traslúcido: LC/EM (Tabla 1, Método b) R, = 2.34 min; EM m/z: 402 (M + H) + .
Método General TT: conversión mediada por ácido de un ésíer a un ácido carboxílico A una solución de un éster (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico tal como 1,4-dioxano o THF (preferiblemente 1,4-dioxano) se agregó HCI (0.5-12 N, preferiblemente 1-6 N acuoso; 5-100 equivalentes, preferiblemente 10-20 equivalentes). La reacción se calienta a aproximadamente 30-120°C (preferiblemente de manera aproximada 60°C) por aproximadamente 12-120 h (preferiblemente de manera aproximada 36-72 h). En los casos donde un grupo lábil ácido adicional se encuentra presente (por ejemplo, un grupo Boc) este grupo también se puede dividir durante la reacción. La mezcla de reacción se concentra bajo presión reducida y el pH ajusta a aproximadamente 8 con una base inorgánica acuosa tal como NaHCÜ3 o NaaQOs (preferiblemente NaHC03 acuoso saturado) y la fase acuosa se extrae con un solvente orgánico tal como DCM o EtOAc (preferiblemente EtOAc). El extracto orgánico se lavó opcionalmente con salmuera, seca sobre un agente de secado tal como MgS04 anhidro o Na2S04 (preferiblemente gS04 anhidro) y concentra bajo presión reducida para dar el compuesto buscado. Ilustración del Método General TT Preparación No. TT.1: ácido 4-(dibenciiamino)-2-metilciclopentancarboxílico Se disolvió 4-(dibencilamino)-2-metilciclopentancarbox¡lato de etilo (3.65 g, 10.38 mmol, Ejemplo No. 7, Etapa H) en HCI (6 N acuoso, 20 mi) y 1,4-dioxano (50 mi) y la mezcla resultante se calentó a aproximadamente 60°C por aproximadamente 72 h. Los solventes se eliminaron bajo presión reducida y el residuo se neutralizó mediante la adición de NaHC03 acuoso saturado (40 mi) y extrajo con EtOAc (50 mi). La fase orgánica se lavó con salmuera (40 mi), secó sobre MgS04 anhidro y concentró bajo presión reducida para dar ácido 4-(dibencilamino)-2-metilciclopentancarboxílico (3.3 g, 98%) como un sólido amorfo de color blanco: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.66 min; EM m/z 324 (M+H)\ Método General UU: Formación de 2.2.2-tricloroacetimidato A una mezcla de un alcohol (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (tal como Et20, heptano o DCM, preferiblemente DCM) a aproximadamente -20°C a 3Ú°C (preferiblemente de manera aproximada 0°C) se agregó una base acuosa (tal como hidróxido de sodio o hidróxido de potasio acuoso, preferiblemente hidróxido de potasio acuoso, 1-20 equivalentes, preferiblemente 10 equivalentes). Se agregó una cantidad catalítica de reactivo de la transferencia de la fase (preferiblemente sulfato ácido de tetrabutilamonio, 0.01-0.5 equivalentes, preferiblemente 0.1 equivalente) seguido por 2,2,2-tricloroacetonitrilo (1-10 equivalentes, preferiblemente 5 equivalentes). La mezcla de reacción se dejó calentar a temperatura ambiente y agita a aproximadamente 15-6Ó°C (preferiblemente temperatura ambiente) por aproximadamente 5-48 h (preferiblemente de manera aproximada 14 h). Las capas se separan y la capa acuosa se extrae con un solvente orgánico (tal como Et20, EtOAc o DCM, preferiblemente DCM). Las capas orgánicas combinadas se lavan con agua, una base acuosa (tal como Na2C03 acuoso saturado o NaHC03) o salmuera, secan sobre Na2S04 anhidro o MgS04, filtran, y concentran bajo presión reducida. De manera alternativa, se puede usar una base orgánica (tal como DBU) como la base para esta reacción. En este caso, a una mezcla de un alcohol (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (tal como Et20, heptanb o DCM, preferiblemente DCM) a aproximadamente entre -20°C y 30°C (preferiblemente de manera aproximada 0°C) se agregó 2,2,2-tricloroacetonitrilo (1-10 equivalentes, preferiblemente 5 equivalentes), seguido por una base orgánica preferiblemente DBU (0.2-1 equivalente, preferiblemente de manera aproximada 0.4 equivalentes). La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente -20-30°C (preferiblemente de manera aproximada 0°C) por aproximadamente 0.5-10 h (preferiblemente de manera aproximada 1 h) luego se concentra.
Ilustración del Método General UU Preparación No. UU.1: 2-etil-4-(2,2,2-tricIoiro-1 -iminoetoxi)ciclopentancarboxilato de etilo A 2-et¡l-4-h¡droxiciclopentancarboxilato de etilo (3.52 g, 18.9 mmol, Preparación No. P.1) en DCM (21 mi) a aproximadamente 0°C se agregó hidróxido de potasio acuoso (50%, 21 mi, 189 mmol), sulfato ácido de tetrabutilamonio (0.64 g, 1.891 mmol) y 2,2,2-tricloroacetonitrilo (9.5 mi, 95 mmol). La mezcla de reacción se dejó calentar a temperatura ambiente y agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 14 h. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con DCM (4 x 60 mi). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (2 x 50 mi), salmuera (60 mi), secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron y concentraron bajo presión reducida. El material se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc 15-50% en heptano para dar 2-etil-4-(2,2,2-tricloro-1 -iminoetoxi)ciclopentancarboxilato de etilo (2.80 g, 45%) como un aceite incoloro: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.91 min; EM m/z: 330 (M + H) + .
Método General VV: protección con TBDMS de un alcohol A una mezcla de un alcohol (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (preferiblemente DMF) se agregó TBDMS-CI (1-5 equivalentes, preferiblemente 1.2 equivalentes) y imidazol (1-10 equivalentes, preferiblemente 2.5 equivalentes). La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente 10-6Ó°C (preferiblemente temperatura ambiente) por aproximadamente 1-24 h (preferiblemente de manera aproximada 3H). Se agregó un solvente orgánico (tal como heptano, hexano o pentaho, preferiblemente heptano). Las capas se separan y la capa inferior (capa de DMF) se extrae con un solvente orgánico (tal como pentano, hexano o heptano, preferiblemente heptano). Los extractos combinados se lavan con agua, una base acuosa (tal como NaHC03 acuoso saturado) o salmuera, secan sobre Na2S04 anhidro o MgS04, filtran, y concentran bajo presión reducida.
Ilustración del Método General VV Preparación No. VV.1: 4-(ferc-butildimetilsili!oxg)-2-etilciclopentancarboxilato de etilo A una solución de 2-etil-4-hidroxiciclopentancarboxiiato de etilo (4.97 g, 26.7 mmol, preparado usando II de ¡a Preparación No. P.1, SS con NaOH)J en DMF (9 mi) se agregó TBDMS-CI (4.83 g, 32.1 mmol) e imidazol (4.55 g, 66.8 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 3 h. Se agregó heptano (30 mi). Las capas se separaron y la capa inferior (capa de DMF) se extrajo con heptano (3 x 30 mi). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con agua (2 x 30 mi), salmuera (30 mi), secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron y concentraron bajo presión reducida. El material se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc 0-15% en heptano para dar 4-(terc-butildimetilsi¡iloxi)-2-etilciclopentancarboxilato de etilo (5.16 g, 64%) como un aceite incoloro: 1H RMN (400 MHz, CDCI3) d 4,45 (m, 1H), 4.11 (m, 2H), 3.08 (m, 1H), 2.34 (m, 1H), 2.18 (m, 1H), 1.75 (m, 2H), 1.57 (m, 1H), 1.41 (m, 1H), 1.25 (m, 3H), 1.10 (m, 1H), 0.90 (m, 3H), 0.87 (s, 9H), 0.03 (s, 6H).
Método General WW: Formación de un cetal A una solución de una cetona (preferiblemente 1 equivalente), un solvente orgánico (tal como DCM, DCE, o tolueno, preferiblemente DCM), un diol tal como etilenglicol (1-3 equivalentes, preferiblemente 2 equivalentes), y un ácido tal como ácido p-toluensulfónico monohidratado (0.1-0.5 equivalentes, preferiblemente 0.2 equivalentes) se agregó opcionalmente un agente deshidratante tal como ortoformiato o trimetilortoformiato de trietilo (preferiblemente ortoformiato de trietilo, 1-4 equivalentes, preferiblemente 1.5 equivalentes). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente a aproximadamente 110°C (preferiblemente temperatura ambiente en presencia de un agente deshidratante tal como ortoformiato de trietilo o preferiblemente de manera aproximada 110°C en ausencia de un agente deshidratante) por aproximadamente 16-96 h (preferiblemente de manera aproximada 24H). Si se calienta, la mezcla de reacción se enfría a temperatura ambiente. Se realiza el tratamiento posterior de la mezcla de reacción usando uno de los siguientes métodos. Método 1: Se agregó agua a la mezcla de reacción, las capas se separan, y la solución orgánica se lavó opcionalmente con salmuera, seca sobre Na2S04 anhidro o MgS04, luego decanta o filtra antes de concentrarse bajo presión reducida. Método 2: La mezcla de reacción se concentra bajo presión reducida y purifica directamente.
Ilustración del Método General WW Preparación No. WW.1: 2-etil-4-oxociclopentancarboxiIato de etilo Un matraz de fondo redondo se cargó con 2-eti I-4-oxociclopentancarboxilato de etilo (1.5 g, 8.1 mmol, Ejemplo No. 22, Etapa B) en DCM (22 mi). Al matraz se agregaron etilenglicol (0.91 mi, 16 mmol), ortoformiato de trietilo (2.0 mi, 12 mmol), y ácido p-toluensulfónico monohidratado (0.31 g, 1.6 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 24 h. La solución se concentró bajo presión reducida para dar un aceite de color marrón que se disolvió en un mínimo de EtOAc y purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice (columna Silicycle de 25 g) eluyendo con un gradiente de 0-50% de EtOAc en heptano para dar 2-etil-4-oxociclopentancarboxilato de etilo (? .6 g, 83%) como un aceite de color amarillo claro: LC/EM (Tabla 1, Método c) EM m/z 229 (M + H) + ; 1H RMN (CDCI3) d 4.14 (q, 2H), 3.90 (m, 4H), 2.99 (q, 1H), 2.32-2.27 (m, 1H), 2.26-2.11 (m, 1 H),. 2.05-1.99 (m, 1H), 1.96-1.91 (m, 1H), 1.83-1.78 (m, 1H), 1.46-1.39 (m, 1H), 1.31-1.24 (m, 1H), 1.26 (t, 3H), 0.90 (t, 3H).
Método General XX: Acoplamiento catalizado con Paladio de una hidrazona A una mezcla de una 5-c!oro-4-(hidrazonomeíii)-1 H-pirrolo[2,3-/b]piridina sustituida (1 equivalente) en un solvente orgánico (preferiblemente NMP) se agregó una base (tal como K2C03 o ferc-butóxido de sodio, preferiblemente ferc-butóxido de sodio [1-4 equivalentes, preferiblemente 2.5 equivalentes]) un catalizador de paladio (preferiblemente acetato de paladio [0.01-0.2 equivalentes, preferiblemente 0.1 equivalente]) y un ligando (preferiblemente (R)- - [(S)-2-(diciciohexilfosfino)ferrocenil]etil-di-íerc-butilfosfina [0.01-0.2 equivalentes, preferiblemente 0.1 equivalente]). La mezcla de reacción se calienta térmicamente o en un microondas (preferiblemente en un microondas) a aproximadamente 100-165°C (preferiblemente 150°C por aproximadamente 10 min - 6 h (preferiblemente de manera aproximada 2 h)). La mezcla de reacción se filtró a través de una almohadilla de Celite® lavando con un solvente orgánico (tal como EtOAc o DCM, preferiblemente EtOAc) y concentra bajo presión reducida para eliminar el solvente de lavado. El material crudo opcionalmente se sometió nuevamente a las condiciones de reacción. Luego el material crudo se divide entre un solvente orgánico (tal como EtOAc o DCM, preferiblemente EtOAc) y agua y la fase acuosa se extrae con un solvente orgánico (tal como EtOAc o DCM, preferiblemente EtOAc), lava con agua y/o salmuera, seca sobre MgS04 anhidro, filtra y concentra bajo presión reducida.
Ilustración del Método General XX Preparación No. XX.1: bencil(4-(3,6-dihidropirazolo[4,3-d]pirrolo[2,3-b]pirid¡n-1-il)biciclo[2.2.2]octan-1-il)carbamaío de ferc-butilo Un frasco de reacción de microondas se cargó con benci!(4-((5-cloro-1 H-pirrolo[2,3-b]piridin-4- )(hidrazono)metil)biciclo[2.2.2]octan-1 - il)carbamato de ferc-butilo (0.700 g, 1.38 mmol, Ejemplo No. 29 Etapa g) y NMP (11 mi). Se agregó ferc-butóxido de sodio (0.331 g, 3.44 mmol), acetato de paladio (0.031 g, 0.138 mmol) y (Rj- -[(S)-2-(diciclohexilfosfino)ferrocenil]etil-di-rerc-butilfosfina (0.076 g, 0.138 mmol) cada uno en forma secuencial. La mezcla de reacción se calentó en un microondas Biotage a aproximadamente 150°C por aproximadamente 2 h (250 psi de presión máxima, gradiente de 1 min, 150 vatios máximos). La mezcla de reacción se filtró a través de una almohadilla de Celite® lavando con EtOAc (aproximadamente 15 mi), y el EtOAc se retiró bajo presión reducida. El material restante se transfirió a un frasco de microondas y agregó rerc-butóxido de sodio (0.331 g, 3.44 mmol), acetato de paladio (0.031 g, 0.138 mmol) y (R)-† -[(S)-2-(diciclohexilfosfino)ferrocenil]-etil-di-rerc-butilfosfina (0.076 g, 0.138 mmol). La mezcla de reacción se calentó en un microondas Biotage a aproximadamente 160°C por aproximadamente 2 h (250 psi de presión máxima, gradiente de 1 min, 150 vatios máximos). La mezcla de reacción se pasó a través de una almohadilla de Celite® lavando con EtOAc (aproximadamente 20 mi). Se agregó agua (15 mi) y las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 mi) y los orgánicos combinados se lavaron con agua (3 x 10 mi) y salmuera (5 x 15 mi), secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron y concentraron bajo presión reducida. El residuo oscuro restante se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 10-100% de EtOAc en heptano para dar bencil(4-(3,6-dihidropirazolo[4,3-d]pirrolo[2,3-b]piridin-1 - i l)b ¡ciclo [2.2.2 loctah-1 -il)carbamato de ferc-butilo con 0.5 equivalentes de EtOAc cómo un excipiente (0.281 g, 39.5%) como un sólido de color marrón claro: LC/EM (Tabla 1, Método b) R, = 2^57 min; EM m/z: 472 (M + H) + .
Método General YY: Adición de Michael de una amina, sal dé amina o heterociclo a una sulfonamida a, ?-insaturada A una mezcla de una sulfonamida a, ?-insaturada (1-3 equivalentes, preferiblemente 1.0 equivalentes) y una amina, sal de amina o heterociclo (1-10 equivalentes, preferiblemente 4 equivalentes) en un solvente orgánico o mezcla de solventes (tales como THF, n-PrOH, agua, EtOH, THF/PrOH, THF/EtOH, preferiblemente /?-PrOH) se agregó opcionalmente una base (tal como DIEA o TEA 0-25 equivalentes, preferiblemente DIEA 10-20 equivalentes). La mezcla se agitó a aproximadamente 25-100°C (preferiblemente de manera aproximada 60-80°C) por aproximadamente 2-72 h (preferiblemente de manera aproximada 18-20 h). En casos donde la reacción no llega a completarse según lo indicado por LC/EM, HPLC, y/o TLC; se puede agregar más amina, sal de amina o heterociclo (1-10 equivalentes, preferiblemente 2 equivalentes) y/o un cosolvente (tal como ÉtO h). La reacción se continúa a aproximadamente 25-100°C (preferiblemente de manera aproximada 80°C) por aproximadamente 1-24 h (preferiblemente de manera aproximada 1-2 h). En casos donde un grupo protector lábil para base se encuentra presente (por ejemplo, a tosilo), el compuesto se puede desproteger. La mezcla de reacción se dejó alcanzar temperatura ambiente y el solvente orgánico se eliminó opcionalmente bajo presión reducida. El material crudo se puede dividir entre un solvente orgánico (tal como EtOAc o DCM) y agua, una base acuosa (tal como NaHC03 acuoso saturado) o salmuera. Las capas se separan y la capa orgánica se lavó opcionalmente con agua, una base acuosa (tal como NaHC03 acuoso saturado) o salmuera, seca sobre Na2S04 anhidro o MgS04) filtra, y concentra bajo presión reducida para dar el compuesto buscado.
Ilustración del Método General YY Ejemplo No. YY.1.1*: 2-(4-ciano-1H-pirazol-1-il)-/V-((1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6W-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentil)etansulfonamida Una mezcla de ?/-((1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 - il)ciclopentil)etensulfonam¡da (0.065 g, 0.13 mmol, preparado usando K.1 del Ejemplo No. 8 Etapa M y cloruro de 2-cloroetansulfonilo con TEA), DIEA (0.30 mi, 1.7 mmol) y 1 H-pirazol-4-carbonitrilo (0.047 g, 0.51 mmol, American Custom Chemicals Corp) en n-PrOH (2.0 mi) se agitó por aproximadamente 2 h a aproximadamente 60°C luego a aproximadamente 80°C por aproximadamente 18 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y concentró bajo presión reducida. El residuo crudo se disolvió en DCM (10 mi), lavó con NaHC03 saturado (5 mi), secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida. El material crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-5% de MeOH en DCM para dar 2-(4-ciano-1 H- pirazol-1-il)-N-((1S,3R)4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3- e][1 ,2, 4]triazolo[4, 3-a]pirazin-1-il)ciclopentil)etansulfonamida (0.024 g, 42%): LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 1.63 min; EM m/z: 454 (M + H) + .
Tabla YY.1 Ejemplos preparados a partir de /V-((1 S,3R,4S)-3- etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 - il)ciclopentil)-2-(1H-1.2.4-triazol-1 -il)etansulfonamida (preparada usando K.1 del Ejemplo No. 8 Etapa M y cloruro de 2-cloroetansulfonilo con TEA) usando el Método General YY Método General ZZ: Formación de una oxazolidinona sulfonourea A una mezcla de una amina o una sal de amina (1 equivalente) y clorosulfonilcarbamato de 2-cloroetilo (preparado como se detalla en Bioorg. Meó. Chem. Lett., 2006 16, 3367-3370)(1-3 equivalentes, preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (preferiblemente DCM) se agregó una base (tal como DIEA o TEA, preferiblemente TEA [2-5 equivalentes, preferiblemente 3 equivalentes]) y opcionalmente DMAP (1-3 equivalentes, preferiblemente 1 equivalente) y se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 10 min - 6 h (preferiblemente de manera aproximada 1 h). El solvente se eliminó bajo presión reducida. En casos donde se usa DMAP, el material crudo se puede dividir entre un solvente orgánico (tal como EtOAc o DCM) y agua o salmuera, secar sobre MgS04 anhidro, filtrar y concentrar bajo presión reducida.
Ilustración del Método General ZZ Preparación No. ZZ.1*: ?-((1 S,3/?,4S)-3-eti¡-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]p¡raz¡n-1 - il)ciclopenti!)-2-oxooxazolidin-3-sulfonamida A una mezcla de clorosulfonilcarbamato de 2-cloroetilo (preparado como se detalla en Bioorg. Med. Chem. Lett., 2006 16, 3367-3370; 0.052 g, 0.236 mmol) y (1 S,3R,4S)-3-eti!-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]tríazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentanamina (0.100 g, 0.236 mmol, Ejemplo No. 8 Etapa M) en DCM (2.4 mi) se agregó TEA (0.098 mi, 0.71 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 1 h. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida para dar N-((1S, 3R, 4S)-3-etil-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2, 3-e][1 ,2,4]triazo!o[4, 3-a]pi razin-1 -i ?) ciclope ntil)-2-oxooxazolidin-3-su Ifon amida (0.098 g, 65%) como un sólido de color marrón claro: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.18 min; EM m/z 574 (M + H) + .
Método General AAA: Formación de una sulfonilurea a partir de una oxazolidinona sulfonourea A una solución de una oxazolidinona (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (preferiblemente MeCN) se agregó una amina o una sal clorhidrato de una amina (1-2 equivalentes, preferiblemente 1.5 equivalentes) y una base orgánica, tal como TEA o DIEA (1-4 equivalentes, preferiblemente 2 equivalentes). La reacción se irradia en el microondas a aproximadamente 100-150°C (preferiblemente 120°C) por aproximadamente 0.5-1 h (preferiblemente 0.5 h). La mezcla de reacción se enfría a temperatura ambiente y opcionalmente se concentra bajo presión reducida para dar un residuo. La mezcla de reacción o residuo opcionalmente se divide entre un solvente orgánico (tal como DCM o EtOAc, preferiblemente EtOAc), agua, una solución acuosa (tal como NaHC03 acuoso saturado o cloruro de amonio acuoso saturado (preferiblemente cloruro de amonio acuoso saturado) o salmuera. Las capas se separan y ia capa orgánica se seca sobre Na2S04 anhidro o MgS04, filtra, y concentra bajo presión reducida para dar una sulfonilurea.
Ilustración del Método General AAA Preparación No. AAA.1*: (R -V-((1 S,3R,4S)-3-metil-4-(6-tosil-6W-imidazo[1,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1-il)ciclopentil)-2-(trif luorometil)pirrolidin-1 -sulfonamida A una solución de ?/-((1 S,3R,4S)-3-metil-4-(6-tos!l-6/-/-im¡dazo[1,5-a]pirrolo[2)3-e]piraz¡n-1-¡l)ciclopentil)-2-oxooxazolidin-3-sulfonamida (0.200 g, 0.261 mmol, preparada a partir de clorhidrato de 5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)metanamina (WO2009152133) y ácido (1 S,2R,4S)-4-acetamido-2-metilciclopentancarboxílico [preparado a partir de 4-amino-2-metil-ciclopentancarboxilato de etilo (WO2009152133) usando g, AA, y Z] usando H, 00, BB, y ZZ) y (R)-2-trifluoromeíilpirrolidina (0.055 g, 0.392 mmol) en eCN (1.4 mi) se agregó TEA (0.073 mi, 0.523 mmol). La reacción se irradió en un microondas CEM a aproximadamente 120°C por aproximadamente 0.5 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y concentró bajo presión reducida para dar un residuo. El material crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc 0-70% en DCM para dar (R)-N-((1 S, 3R,4S)-3-metil-4-(6-tosil-6H-imidazo[1, 5-a]pirrolo[2, 3-e]pirazin-1-il)ciclopentil)-2-(trifluorometil)pirrolidin-1 -sulfonamida (0.12 g, 75%, 72% de pureza) como un sólido blancuzco: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.79 min; EM m/z: 611 (M + H) + .
Método General BBB: Reducción de un grupo nitro A una solución de un compuesto que contiene nitro (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (preferiblemente EtOH) se agregó cloruro de estañe (II) dihidrato (1-3 equivalentes, preferiblemente 1 equivalente) y la reacción se agitó a aproximadamente 25 - 80°C (preferiblemente a aproximadamente 75°C) por aproximadamente 0.5-24 h (preferiblemente de manera aproximada 1-2 h). Opcionalmente, pueden agregarse más porciones de cloruro de estaño (II) dihidrato (1-5 equivalentes, preferiblemente 2 equivalentes) a la mezcla de reacción y el calentamiento puede continuarse por aproximadamente 0.5-24 h (preferiblemente de manera aproximada 5-14 h). La mezcla de reacción se concentra bajo presión reducida. La mezcla cruda se puede diluir con un solvente orgánico (por ejemplo, EtOAc o DCM) y base acuosa (ta! como NaOH 1 N o NaHC03 acuoso saturado). Las capas se separan y la capa acuosa se extrae con un solvente orgánico (tal como EtOAc y/o DCM). Las capas orgánicas combinadas opcionalmente se lavan con salmuera, secan sobre MgS0 anhidro, filtran y concentran bajo presión reducida.
Ilustración del Método General BBB Preparación No. BBB.1: A-4-ciclohexil-1 -tosil-1 H-pirrolo[2,3-b] p i r i d i n - , 5 -d i a m i n a A una mezcla de A/-ciclohexil-5-nitro-1 -tosil-1 H-pirrolo[2,,3-£>]piridin-4-amina (0.111 g, 0.268 mmol, preparada usando .1 del Ejemplo No. 21 Etapa D con cloruro de 4-metilbencen-1 -sulfonilo, L con ciclohexilamina) en EtOH (2.5 mi) se agregó cloruro de estaño (II) dihidrato (0.060 g, 0.268 mmol). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 75°C por aproximadamente 75 min. Se agregó cloruro de estaño (II) dihidrato (0.030 g, 0.134 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 75°C por aproximadamente 5 h. Se agregó más cloruro de estaño (II) dihidrato (0.060 g, 0.268 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 75°C por aproximadamente 14 h. El solvente se eliminó bajo presión reducida. El residuo se diluyó con EtOAc (25 mi) y lavó con NaHC03 acuoso saturado (25 mi) y salmuera (25 mi). La porción orgánica se separó. La porción acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 25 mi). Los extractos orgánicos se combinaron, secaron sobre MgS04, filtraron, y concentraron bajo presión reducida para dar N-4-c¡clohexil-1 -tosil-1 H-p¡rrolo[2, 3-b]piridin-4.5-d ¡amina (0.081 g, 79%) como un aceite de color marrón: LC/EM (Tabla 1, Método n) Rt = 0.82 min; EM m/z 385 (M + H) + .
Método General CCC: Formación de una amida A una mezcla de una amina o sal de amina (1 equivalente) en un solvente orgánico (por ejemplo, DCM o THF, preferiblemente DCM) a aproximadamente 0-25°C (preferiblemente 0°C) se agregó una base orgánica (TEA o DIEPA, preferiblemente TEA) (pura o como una solución en un solvente orgánico (preferiblemente DCM)), 1-3 equivalentes (preferiblemente 1 equivalente) y un agente de aciiacicn (por ejemplo, un anhídrido o un cloruro de ácido) (preferiblemente un anhídrido) (puro o como una solución en un solvente orgánico (preferiblemente DCM)), 1-3 equivalentes (preferiblemente 1 equivalente). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 5 min - 6 h (preferiblemente de manera aproximada 10 min). La mezcla de reacción se lavó opcionalmente con NaHC03 acuoso saturado, agua, o salmuera, seca sobre MgS04, filtra, y concentra bajo presión reducida.
Ilustración del Método General CCC Preparación No. CCC.1: W-(4-(ciclohexilamino)-1 -tosiJ-1 H-pirrolo[2,3-fa]piridin-5-il)-2,2,2-trifluoroacetamida A una solución a 0°C de /V-4-ciclohexil-1 -tosil-1 H-pirrolo[2,3-£)]piridin-4.5-diamina (Preparación No. BBB.1, 0.080 g, 0.208 mmol) en DCM (2.0 mi) se agregó TEA (2 M en DCM, 0.104 mi, 0.208 mmol) y TFAA (2 M en DCM, 0.104 mi, 0.208 mmol). La mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 10 min. La mezcla de reacción se lavó con NaHC03 acuoso saturado (2 mi) y agua (2 mi), secó sobre MgS04 anhidro, filtró y concentró bajo presión reducida para dar N-(4-(ciclohexilamino)-1 -tosil-1 H-p¡rrolo[2!3-b]piridin-5-il)-2,2,2-trifluoroacetamida con 40% mol de diclorometano como un excipiente (0.089 g, 83%, 90% de pureza) como un sólido de color marrón: LC/EM (Tabla 1, Método n) t = 0.88 min; EM m/z 481 (M + H) + .
Método General DDD: Ciclización para formar un imi azol fusionado A una solución de una diamina (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico tal como DMF, DCM, 1,4-dioxano, o MeOH (preferiblemente MeOH) se agregó el agente de ciclización correspondiente como por ejemplo TMOF (1-10 equivalentes, preferiblemente 1-2 equivalentes). (Una cantidad catalítica de ácido, como por ejemplo TsOH (0.005-0.5 equivalentes, preferiblemente 0.01 equivalentes) se agregó opcionalmente a la mezcla de reacción cuando se usa TMOF). De manera alternativa, una solución de un compuesto amidoaminoarilo o heteroarilo ortosustituido (preferiblemente 1 equivalente) se ciciiza en un solvente orgánico tal como DMF o THF usando un agente deshidratante tal como TPP, POCI3 o MCI (5-100 equivalentes, preferiblemente 10 equivalentes de TPP). La mezcla de reacción se calienta a aproximadamente 25-120°C (preferiblemente de manera aproximada 65°C) por aproximadamente 1-24 h (preferiblemente de manera aproximada 12-16 h), se enfría a temperatura ambiente y opcionalmente se concentra bajo presión reducida para dar un residuo. El residuo se divide entre un solvente orgánico (tal como DC o EtOAc, preferiblemente EtOAc), agua, una base acuosa (tal como NaHC03 acuoso saturado) y/o salmuera. Las capas se separan y la capa orgánica se lavó opcionalmente con agua, una base acuosa (tal como NaHC03 acuoso saturado) y/o salmuera, seca sobre Na2S04 anhidro o MgS04, filtra, y concentra bajo presión reducida.
Ilustración del Método General DDD Preparación No. DDD.1: W-(3-etil-4-(6-tosii imidazo[4,5-d]pirrolo[2,3-b]piridin-1(6H)-il)ciclopentil)ciclopropansulfonamida A una solución de A/-(3-(5-amino-1 -tosil-1 /-/-p¡rrolo[2,3-o]piridin-4-ilamino)-4-etilciclopentil)ciclopropansulfonamida (0.095 g, 75% de pureza, 0.142 mmol, preparada usando L de la Preparación No. 27 y Preparación No. 000.1 con DIEA, K.1 con TsCI y NaH, y BBB) y TMOF (0.016 mi, 0.147 mmol) en eOH (3.09 mi) se agregó ácido toluen-4-sulfónico hidrato (0.0003 g, 0.0015 mmol). La reacción se calentó a aproximadamente 65°C por aproximadamente 14 h. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y se concentró bajo presión reducida para dar un sólido crudo. El sólido se disolvió en EtOAc (10 mi) y lavó con NaHC03 acuoso saturado (5 mi), agua (5 mi), y salmuera (5 mi). La porción orgánica se separó y secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida para dar N-(3-etil-4-(6-tosilim¡dazo[4, 5-d]pirrolo[2,3-b]p¡ridin-1 (6H)-il)ciclopentil)ciclopropansulfonamida (0.075 g, 99%) como un sólido de color amarillo: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.15 min; EM m/z: 514 (M + H) + .
Método General EEE: Formación de un cloruro de sulfonilo A una solución de un ácido sulfónico o la sal de potasio de un sulfonato (preferiblemente 1 equivalente) en cloruro de tionilo (2-30 equivalentes, preferiblemente 20-25 equivalentes) se agregó DMF (0.01-0.10 equivalentes, preferiblemente 0.09 equivalentes). La reacción se calienta a aproximadamente 50-100°C (preferiblemente de manera aproximada 80°C) por aproximadamente 8-24 h (preferiblemente de manera aproximada 12-16 h). La mezcla de reacción se enfría a 0-25°C (preferiblemente de manera aproximada 0°C) y diluye con agua. La mezcla de reacción se divide entre un solvente orgánico (tal como DCM o EtOAc) y agua o salmuera. Las capas se separan y la capa orgánica se lavó opcionalmente con agua y/o salmuera, seca sobre Na2S04 anhidro o MgS0 , filtra, y concentra bajo presión reducida.
Ilustración del Método General EEE Preparación No. EEE.1: cloruro de 1 -etilcicIopropan-1 -sulfonilo A una mezcla de 1 -etilciclopropan-1 -sulfonato de potasio (0.420 g, 2.23 mmol, Preparación No. JJJ.1) en cloruro de tionilo (3.58 mi, 49.1 mmol) se agregó DMF (0.016 mi, 0.20 mmol). La reacción se calentó a aproximadamente 80°C por aproximadamente 16 h. La reacción se enfrió a 0°C antes de agregar agua (10 mi) lentamente. La mezcla de reacción se diluyó con DCM (20 mi). Las capas se separaron y la porción acuosa se extrajo con DCM (3 x 10 mi). Las capas orgánicas combinadas se separaron, secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida para dar cloruro de 1-etilciclopropan-1 -sulfonilo crudo (0.52 g, 83% de rendimiento, 60% de pureza) como un aceite de color anaranjado: 1H RMN (400 MHz, DMSO) d 2.09 (q, J = 7.4, 2H), 1.62-1.60 (m, 2H), 1.45 -1.39 (m, 2H), 0.91 (t, J = 7.5, 3H).
Método General FFF: Generación de un éter bajo condiciones reductivas A una solución de éter TBDMS (1.0 equivalentes) en eCN a temperatura ambiente se agregó trieti Isilano (1-2 equivalentes preferiblemente 1.5 equivalentes), y bromuro de bismuto (III) (0.05-0.2 equivalentes, preferiblemente 0.06 equivalentes). La reacción se agitó a aproximadamente 25-60°C (preferiblemente de manera aproximada 25°C) por aproximadamente 0.5-5 min (preferiblemente 1-3 min). A la mezcla de reacción se agregó un aldehido o cetona (1-6 equivalentes, preferiblemente 1.5 equivalentes) que puede secarse opcionalmente sobre Na2$04 anhidro o MgS0 En casos donde la reacción no llega a completarse según lo indicado por TLC, puede agregarse más trietilsilano (1-2 equivalentes preferiblemente 1.5 equivalentes) y/o bromuro de bismuto (III) (0.05-0.2 equivalentes, preferiblemente 0.06 equivalentes) y/o aldehido o cetona (1-6 equivalentes, preferiblemente 1.5 equivalentes). La reacción se continúa a aproximadamente 25-60°C (preferiblemente de manera aproximada 25°C) por aproximadamente 15 min-24 h (preferiblemente de manera aproximada 1h). Se realiza el tratamiento posterior de la reacción usando uno de los siguientes métodos. Método 1: La mezcla de reacción se filtró a través de una almohadilla de Celite®. La almohadilla de Celite® se puede enjuagar con solvente orgánico adicional (preferiblemente heptano o MeCN) y el material filtrado se concentra bajo presión reducida. Método 2: La mezcla de reacción se filtró a través de un Acrodisc® y el material filtrado se concentra bajo presión reducida.
Ilustración del Método General FFF Preparación No. FFF.1: 2-etil-4-(tetrah¡dro-2W-piran-4- iloxi)ciclopentancarboxilato de etilo A una solución de 4-(ferc-butildimetilsililoxi)-2- etilciclopentancarboxilato de etilo (0.200 g, 0.666 mmol, Ejemplo No. 22 Etapa D) en MeCN (4.5 mi) se agregó trietilsilano (0.160 mi, 1.00 mmol) y bromuro de bismuto(lll) (0.020 g, 0.045 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 1 min y luego se agregó por goteo d ¡h ¡d ro-2H- piran-4(3H)-ona (0.100 g, 0.998 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 15 min. La reacción se filtró a través de un Acrodisc® y el solvente se eliminó bajo presión reducida. El material crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de 10-100% de EtOAc en heptano para dar 2-etil-4-(tetrahidro-2H-piran-4-iloxi)ciclopentancarboxilato de etilo (0.253 g, 94%) como un aceite incoloro; 1H RMN (400 MHz, CDCI3) d 4.13 (q, J = 7.1, 2H), 4.05 - 3.98 (m, 1H), 3.98 - 3.88 (m, 2H), 3.58 - 3.47 (m, 1H), 3.46 - 3.36 (m, 2H), 2.80 (q, J = 8.5, 1H), 2.16 (dt, J = 13.3, 7.7, 1H), 2.09 - 1.93 (m, 3H), 1.90 - 1.81 (m, 2H), 1.62 - 1.49 (m, 3H), 1.43 (ddd, J = 11.1, 7.4, 5.2, 1H), 1.33 - 1.22 (m, 4H), 0.92 - 0.83 (m, 3H).
Método General GGG: Yodación de un heterociclo basado en pirrol A un heterociclo basado en pirrólo (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico tal como DMF se agregó una base tal como KOH (1-10 equivalentes, preferiblemente 3 equivalentes) a aproximadamente 0°C hasta 40°C (preferiblemente a temperatura ambiente) y la mezcla se agitó por aproximadamente 2-45 min (preferiblemente de manera aproximada 5 min). Se agregó yodo (0.95-1.2 equivalentes, preferiblemente 1.0 equivalentes) en pequeñas porciones y la mezcla se agitó por 10-100 min. (preferiblemente de manera aproximada 30 min). La mezcla se agregó por goteo sobre cloruro de amonio acuoso saturado (10 mi por cada 1 mi de DMF usado) y el compuesto buscado se recogió mediante filtración, lava con agua adicional y seca.
Ilustración del Método General GGG Preparación No. GGG.1: ?/-((1 S,3/?,4S)-3-etil-4-(8-yodo-6W-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -ii)ciclopentil)ciclopropansulfonamida A una solución de ?/-((1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6/-/-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentil)ciclopropansulfonamida (0.396 g, 1.06 mmol, preparada como se detalla en WO2009152133) en DMF (20 m!) se agregó KOH (0.190 g, 3.38 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente por 5 min. Se agregó yodo (0.268 g.1.058 mmol) en pequeñas porciones y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por 30 min. La mezcla se agregó por goteo sobre cloruro de amonio acuoso saturado (200 mi). El precipitado se recogió mediante filtración, lavó con agua, y secó para dar N-((1 S, 3R, 4S)-3-etil-4-(8-yodo-6H-pirrolo[2, 3-e][1,2, 4]triazolo[4, 3-a]pirazin-1 -il)c¡clopentil)ciclopropansulfonamida (0.494 g, 93%) como un sólido blancuzco: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.83 min; E m/z 501 (M + H) + .
Método General GGG.1: Yodación, cloración o bromación de un heterociclo basado en pirrol A un heterociclo basado en pirrólo (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico tal como DMF, THF, MeCN, MeOH, AcOH, CHCI3, o DCM (preferiblemente DMF) se agregó opcionalmente una base tal como TEA, NaOAc, K2C03> o KOH (1-10 equivalentes) a aproximadamente 0-40°C (preferiblemente a 0°C) y la mezcla se agitó por aproximadamente 2-45 min (preferiblemente de manera aproximada 5 min). Se agregó una fuente de halógeno como por ejemplo l2, Br2, NBS, tribromi.ro de piridinio, NCS, o NIS (0.95-1.2 equivalentes, preferiblemente 1.0 equivalentes) por porciones, por goteo, puro, o como una solución en un solvente como por ejemplo DMF. El baño de hielo se eliminó y la mezcla se agitó por aproximadamente 0.1-2 h (preferiblemente de manera aproximada 40 min) a temperatura ambiente. Opcionalmente, puede agregarse un reactivo como por ejemplo tiosulfato de sodio o bisulfito de sodio como una solución en agua o la mezcla de reacción se agregó a la solución y la mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 5 - 60 min (preferiblemente de manera aproximada 30 min). La mezcla se puede diluir o agregarse a agua o NH4CI acuoso saturado (preferiblemente usando 10 mi de agua por cada 1 m! de DMF), El compuesto buscado se puede recoger mediante filtración o extraerse usando un solvente orgánico tal como EtOAc o DCM, se seca sobre Na2S04 o MgS04, filtra, y concentra bajo presión reducida.
Ilustración del Método General GGG.1 Preparación No. GGG.1.1: 8-yodo-6H-pirroío[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina Una solución de 6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina (0.500 g, 3.14 mmol, preparada usando D de la Preparación No. BBBBB.1 y NaOH) y DMF (16 mi) bajo nitrógeno se enfrió a aproximadamente 0°C. La mezcla se agitó por aproximadamente 5 min. Se agregó /V-yodosuccinimida (0.707 g, 3.14 mmol). Luego de aproximadamente 40 min, se agregó tiosulfato de sodio acuoso 5% (10 mi). El baño de enfriamiento se retiró. Luego de agitar por aproximadamente 30 min, se agregó agua (15 mi). El sólido se recogió mediante filtración. La torta de filtrado se lavó con agua (2 x 5 mi). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (4 x 50 mi). Los orgánicos combinados se secaron sobre Na2S04, filtraron, y concentraron bajo presión reducida. Se formó una suspensión del residuo en agua (10 mi) y luego se filtró, enjuagó con agua (2 x 1 mi). El sólido se secó a! vacío para dar un sólido de color marrón (0.689 g) que contenía una relación de aproximadamente 4:1 de material monoyodado a diyodado. 8- yodo-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2, 4]triazolo[4,3-a]pirazina (0.506 g, 57%): LC/EM (Tabla 1, Método n) R, = 0.39 min; EM m/z 286 (M + H) + .
Método General HHH: Cianación de un heterocicio A una solución de un haluro de heteroarilo (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (tal como 1,4-dioxano, NMP o DMF, preferiblemente DMF) se agregó cianuro de potasio (1-4 equivalentes, preferiblemente 2.5 equivalentes), yoduro de cobre(l) (1-4 equivalentes, preferiblemente 2.5 equivalentes), tetrakis(trifenilfosfina)paladio(0) (0.01-0.05 equivalentes, preferiblemente 0.01 equivalente) y 18-corona-6 (0.01-1.0 equivalentes, preferiblemente 0.06-0.07 equivalentes). La reacción se calienta a aproximadamente 25-120°C (preferiblemente de manera aproximada 110°C) por aproximadamente 0.5-10 h (preferiblemente de manera aproximada 4 h). La reacción se enfría a temperatura ambiente y el solvente orgánico se eliminó opcionalmente bajo presión reducida. El material crudo se puede dividir entre un solvente orgánico (tal como EtOAc o DCM) y agua, una base acuosa (tal como NaHC03 acuoso saturado) o salmuera. Las capas se separan y la capa acuosa se lavó opcionalmente con un solvente orgánico (tal como EtOAc o DCM). Los extractos orgánicos combinados se secan sobre Na2S04 anhidro o MgS04, filtran, y concentran bajo presión reducida.
Ilustración del Método General HHH Preparación No. HHH.1*: ?/-((1 S,3S,4/?)-3-(8-ciano-6 (trimetilsilil)etoxi)metil)-6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3 a]pirazin-1 - il)-4-etilciclopentil)ciclopropansulfonamida A una solución de ?/-((1 S,3R,4S)-3-etil-4-(8-yodo-6-((2-(trimetilsil¡l)etoxi)metil)-6/-/-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)c¡clopentil)ciclopropansulfonamida (0.1 g, 0.16 mmol, preparada usando KK de la Preparación No. GGG.1) en DMF (1.2 mi) se agregó cianuro de potasio (0.03 g, 0.40 mmol), yoduro de cobre(l) (0.076 . g, 0.40 mmol), tetrakis(trifenilfosfina)paladio(0) (0.002. g, 0.002 mmol) y 18-corona-6 (0.003 g, 0.01 mmol). La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente 110°C por aproximadamente 4 h y se enfrió a temperatura ambiente. El solvente se eliminó bajo presión reducida. El residuo se dividió entre EtOAc (15 mi) y agua (8 mi). La capa acuosa se extrajo adicionalmente con EtOAc (15 mi). Las capas orgánicas combinadas se secaron con gS04, filtraron, y concentraron bajo presión reducida para dar N-((1 S,3S,4R.)-3- (8-ciano-6-((2-(trimetHsiHI)etoxi)metil)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-4-et¡lc¡clopentil)ciclopropansulfonam¡da (0.069 g, 82%): LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.50 min; EM m/z: 530 (M + H) + .
Método General III: Reacción Horner-Wadsworth-Emmons de una cetona A un matraz cargado con una base (preferiblemente NaH) (1-5 equivalentes, preferiblemente 1.2 equivalentes) en un solvente orgánico (preferiblemente THF) a aproximadamente 0-50°C (preferiblemente temperatura ambiente) se agregó un beta-cetofosfonato (1-5 equivalentes, preferiblemente 1.25 equivalentes). Después de cesar la evolución de gas hidrógeno, se agregó una solución de una cetona (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (preferiblemente THF). Luego de aproximadamente 1-20 h (preferiblemente de manera aproximada 4 h) la mezcla de reacción se divide entre un solvente orgánico (tal como DCM o EtOAc, preferiblemente EtOAc) y una fase acuosa como por ejemplo NaHC03 acuoso saturado. La capa orgánica se separa y opcionalmente lava con salmuera, seca sobre Na2SÓ4 anhidro o MgS04) filtra, y concentra bajo presión reducida.
Ilustración del Método General III Preparación No. III.1: (£)-2-((3R,4S)-3-etil-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentiliden)acetato de etilo A una suspensión de NaH (0.034 g, 0.85 mmol) en THF (5 mi) se agregó 2-(dietoxifosforil)acetato de etilo (0.177 mi, 0.886 mmol) a temperatura ambiente. Luego de aproximadamente 30 min, se agregó una solución de (3R,4S)-3-etil-4-(6-tosil-6/-/-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentanona (0.300 g, 0.708 mmol, Preparación No. 25) en THF (1 mi). Luego de aproximadamente 4 h, se agregaron EtOAc (20 mi) y NaHC03 acuoso saturado (20 mi). La capa orgánica se separó, concentró in vacuo, y purificó mediante cromatografía sobre ge! de sílice (40 g) eluyendo con EtOAc/heptano/DCM (2:1:1) para dar (E)-2-((3R,4S)-3-etil-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2, 3-e][1, 2, 4]triazolo[4, 3-a]pirazin-1 -il)ciclopentiliden)acetato de etilo (0.260 g, 74%). LC/EM (Tabla 1, Método a) R, = 2.54 min; EM m/z: 494 (M + H) + . Método General JJJ: Formación de un sulfonato de potasio A una solución de un sulfonato (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (preferiblemente 1,4-dioxano) y agua se agregó tiocianato de potasio (1-3 equivalentes, preferiblemente 1 equivalente). La reacción se calienta a aproximadamente 80-100°C (preferiblemente de manera aproximada 100°C) por aproximadamente 5-24 h (preferiblemente de manera aproximada 16 h). La mezcla de reacción se enfría a temperatura ambiente y concentra bajo presión reducida.
Ilustración del Método General JJJ Preparación No. JJJ.1: 1 -etilciclopropan-1 -sulfonato de potasio A una solución de 1 -etilciclopropan-1 -sulfonato de butilo (0.46 g, 2.23 mmol preparado a partir de la Preparación No. 6 Etapa A con yoduro de etilo usando KKK) en 1,4-dioxano (2.79 mi) y agua (2.79 mi) se agregó tiocianato de potasio (0.12 mi, 2.23 mmol). La reacción se calentó a aproximadamente 100°C por aproximadamente 16 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y concentró bajo presión reducida para dar 1 -etilciclopropan-1-su fonato de potasio (0,42g, 100%) como un sólido cristalino de color blanco: 1H R N (400 MHz, DMSO) d 1.70 - 1.58 (m, 2H), 0.89 (t, J = 7.5, 3H), 0.80 (q, J = 3.8, 2H), 0.32 (q, J = 3.8, 2H).
Método General KKK: Alquilación de un sulfonato A una solución de un sulfonato (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (preferiblemente THF), enfriada a aproximadamente -78-0°C (preferiblemente -78°C) se agregó una base orgánica tal como n-BuLi, KHMDS, o LDA (preferiblemente n-BuLi) (1-3 equivalentes, preferiblemente 1 equivalente) y un reactivo de alquilación como por ejemplo yodometano, yodoetano, o yoduro de trifluoroetilo (1-5 equivalentes, preferiblemente 1.2 equivalentes). La reacción se agitó a aproximadamente -78-25°C (preferiblemente -78°C) por aproximadamente 1-24 h (preferiblemente 2H). Opcionalmente, la reacción se calienta a temperatura ambiente y agita por aproximadamente 1-24 h (preferiblemente 2H). La mezcla de reacción se detiene mediante la adición de cloruro de amonio acuoso saturado. La mezcla de reacción se divide entre un solvente orgánico (tal como DCM o EtOAc) y agua o salmuera. Las capas se separan y la capa orgánica se lavó opcionalmente con agua y/o salmuera, seca sobre Na2S0 anhidro o MgS04, filtra, y concentra bajo presión reducida.
Ilustración del Método General KKK Preparación No. KKK.1: 1 -metilciclopropan-1 -sulfonato de butilo A una solución de ciclopropansulfonato de butilo (1.5 g, 8.4 mmol, Preparación No. 6 Etapa A) en THF (8 mi) a aproximadamente -78°C se agregó n-BuLi (1.6 M en hexanos, 5.26 mi, 8.42 mmol) e yodometano (0.684 mi, 10.9 mmol) simultáneamente. La mezcla resultante se agitó a aproximadamente -78°C por aproximadamente 2 h y luego a temperatura ambiente por aproximadamente 2 h. La reacción se detuvo mediante la adición de NH4CI acuoso saturado (7 mi) y las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (15 mi) y los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía de columna sobre gel de sílice eluyendo con EtOAc 5-25% en heptanos para dar 1-metilciclopropan-1 -sulfonato de butilo (0.8 g, 49%) como un aceite incoloro. 1H R N (DMSO-d6) d 4.17 (t, 2H), 1.82 (m, 2H), 1.43 (s, 3H), 1.35 (m, 2H), 1.22 (m, 2H), 0.94 (m, 2H), 0.88 (t, 3H).
Método General LLL: Oxidación de un tioéter a una sulfona A una solución de un tioéter (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (preferiblemente DCM) se agregó un oxidante (como por ejemplo m-CPBA, oxona, preferiblemente m-CPBA) (1-4 equivalentes, preferiblemente 2 equivalentes). La reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 0.25-24 h (preferiblemente de manera aproximada 0.5 h). La mezcla de reacción opcionalmente se filtra, lava con DCM adicional, y el material filtrado se concentra bajo presión reducida. La mezcla de reacción opcionalmente se neutraliza con la adición de una base acuosa (tal como NaHC03 acuoso saturado) y se divide entre un solvente orgánico (tal como DCM o EtOAc, preferiblemente DCM). Las capas se separan y opcionalmente lavan con agua y/o salmuera, secan sobre Na2S04 anhidro o gS04, filtran, y concentran bajo presión reducida para dar una sulfona.
Ilustración del Método General LLL Preparación No. LLL.1: 1 -(2-etil-4-(2,2,2-trifluoroetilsulfonil)ciclopentil)-6-((2-(trimetilsilil)etoxi)meH:iD)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]tr¡azolo[4,3-a]pirazina A una mezcla de 1 -(2-etil-4-(2,2,2-trifluoroetiltio)ciclopentil)-6-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina (0.100 g, 0.200 mmol, Preparación No. MM .1) en DCM (0.667 mi) se agregó m-CPBA (0.090 g, 0.400 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 0.5 h. La mezcla de reacción se detuvo mediante la adición de NaHC03 acuoso saturado (5 mi). La porción acuosa se extrajo con DCM (2 x 10 mi). Las capas orgánicas combinadas se separaron, secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida. El material crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc 0-60% en DCM para dar 1 -2-etH-4-(2,2,2-trifluoroeti¡sulfonil)ciclopent¡l)-6-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-6H-pirrolo[2, 3-e][1,2, 4]triazolo[4, 3-a]pirazina (0.095 g, 89%, 93% de pureza) como un aceite traslúcido: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.63 min; EM m/z: 532 (M + H) + .
Método General MMM: Reacción de Mitsunobu usando un ti o S A una solución de un azodicarboxilato como por ejemplo DIAD, DEAD, o TMAD (preferiblemente DIAD) (1-2 equivalentes, preferiblemente 1.2 equivalentes) en un solvente orgánico (preferiblemente THF) se agregó un reactivo de fosfina como por ejemplo PPh3 o P(n-Bu)3 (preferiblemente P(/7-Bu)3) (1-2 equivalentes, preferiblemente 1.2 equivalentes), un alcohol (preferiblemente 1 equivalente), TEA (1-2 equivalentes, preferiblemente 1.2 equivalentes) y un tiol (1-1.5 equivalentes, preferiblemente 1.2 equivalentes). La reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 1-24 h (preferiblemente 16H). La mezcla de reacción opcionalmente se concentra bajo presión reducida para dar un residuo. La mezcla de reacción o residuo se divide entre un solvente orgánico (tal como DCM o EtOAc, preferiblemente EtOAc) y agua, una base acuosa (tal como NaHC03 acuoso saturado) o salmuera. Las capas se separan y la capa orgánica se lavó opcionalmente con agua, una base acuosa (tal como NaHC03 acuoso saturado) y/o salmuera, seca sobre Na2S04 anhidro o MgS04, filtra, y concentra bajo presión reducida para dar un tioéter.
Ilustración del Método General MMM Preparación No. MMM.1: 1 -(2-etil-4-(2,2,2-trifluoroetiltio)ciclopentil)-6-((2-(trimetilsilil)etoxi)meti!)-6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina Un matraz secado al horno se cargó con DIAD (0.177 mi, 0.896 mmol) y THF (3.74 mi). El matraz de reacción se enfrió a 0°C antes de agregar P(n-Bu)3 (0.221 mi, 0.896 mmol), 3-etil-4-(6-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4, 3-a]pirazin-1 -il)ciclopentanol (0.300 g, 0.747 mmo!, preparado a partir de la Preparación No. 20 usando KK y SS), TEA (0.125 mi, 0.896 mmol) y 2,2,2-trifluoroetanotiol (0.080 mi, 0.896 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 16 h. La mezcla de reacción se dividió entre agua (10 mi) y EtOAc (10 mi). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 10 mi). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida para dar un aceite crudo. El material crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc 0-60% en DCM para dar 1-(2-etil-4-(2,2,2-trifluoroetilt¡o)ciclopentH)-6-((2-(trimetHsHH)etoxi)met¡l)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]tr¡azolo[4,3-a]pirazina (0.165 g, 44%) como un sólido de color anaranjado: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 3.02 min; EM m/z: 500 (M + H) + .
Método General NNN: Reordenamiento de Curtius para formar un isocianato A una solución de un ácido carboxílico (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico tal como f-BuOH o toluéno (preferiblemente f-BuOH) se agregó DPPA (1-3 equivalentes, preferiblemente 1-1.1 equivalente) y una base orgánica tal como TEA (2-4 equivalentes, 2.2 equivalentes). La reacción se agitó a aproximadamente 25-110°C (preferiblemente de manera aproximada 70°C con f-BuOH y 110°C con tolueno) por aproximadamente 0.5-16 h (preferiblemente de manera aproximada 2H). La mezcla de reacción se enfría a temperatura ambiente y opcionalmente se concentra bajo presión reducida para dar un residuo. La mezcla de reacción o residuo opcionalmente se divide entre un solvente orgánico (tal como DCM o EtOAc) y agua, una base acuosa (tal como NaHC03 acuoso saturado) o salmuera. Las capas se separan y la capa orgánica se seca sobre Na2S04 anhidro o MgS0 , filtra, y concentra bajo presión reducida.
Ilustración del Método General NNN Preparación No. NNN.1: W-(3-isocianato-4-metilciclopentil)ciclopropansulfonamida A una solución de ácido 4-(ciclopropansuífonamido)-2-metilciclopentancarboxílico (4.10 g, 16.58 mmol, preparado como en el Ejemplo No. 24 Etapa I usando Y, K, y Z) y DPPA (3.58 mi, 16.58 mmol) en f-BuOH (55 mi) se agregó TEA (5.0 mi, 36.5 mmol). La reacción se calentó a aproximadamente 70°C por aproximadamente 2 h y luego enfrió a temperatura ambiente y concentró bajo presión reducida para dar un residuo crudo. El material crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-10% de MeOH en DCM para dar N-(3-isoc¡anato-4-metilciclopentil)ciclopropansulfonamida (3.25 g, 80%) como un sólido de color blanco: LC/EM (Tabla 1, Método n) Rt = 0.49 min; EM m/z: 245 (M + H) + .
Método General OOO: Hidrólisis de un isocianato A una mezcla de un isocianato (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (preferiblemente THF) se agregó una base o un ácido acuoso (como por ejemplo NaOH acuoso, LiOH, o HCI) (10-50 equivalentes, preferiblemente 20 equivalentes). La reacción se calienta a aproximadamente 30-100°C por aproximadamente 5-36 h (preferiblemente de manera aproximada 50°C por aproximadamente 16 h). La reacción se enfría a temperatura ambiente y la mezcla de reacción se divide entre un solvente orgánico (tal como DCM o EtOAc) y agua, una base acuosa (tal como NaHC03 acuoso saturado) o salmuera. Las capas se separan y la capa orgánica se lavó opcionalmente con agua y o salmuera, seca sobre Na2S04 anhidro o MgSO , filtra, y concentra bajo presión reducida.
Ilustración del Método General OOO Preparación No. 000.1: /V-(3-amino-4-metilciclopentil) ciclopropansulfonamida A una mezcla de A/-(3-isocianato-4-metilciclopentil)ciclopropansulfonamida (1.00 g, 4.09 mrtiol, Preparación No. NNN.1) en THF (2.0 mi) se agregó LiOH acuoso (4 N, 20.5 mi, 82 mmol). La reacción se calentó a aproximadamente 50°C por aproximadamente 16 h, se enfrió a temperatura ambiente y dividió entre agua (5 mi) y EtOAc (10 mi). La porción orgánica se separó y la porción acuosa se extrajo con DCM (3 x 20 mi). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida para dar N-(3-amino-4-metilciclopentil)ciclopropansulfonamida cruda (0.66 g, 74%) como un sólido de color blanco: LC/EM (Tabla 1, Método n) Rt = 0.020 min; EM m/z 219 (M + H) + .
Método General PPP : Formación de un éter oxima a partir de una cetona A una solución de una cetona (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (preferiblemente EtOH) se agregó una O-alquilhidroxilamina (1-10 equivalentes, preferiblemente de manera aproximada 1 equivalente). Si la O-alquilhidroxilamina es una sal clorhidrato, se agregó una base orgánica como por ejemplo TEA o DIEA (preferiblemente TEA, 1-5 equivalentes, preferiblemente de manera aproximada 1.5 equivalentes). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 12-24 h (preferiblemente de manera aproximada 18 h). En casos donde la reacción no llega a completarse según lo indicado por TLC, LC/EM, o HPLC, puede agregarse más O-alquilhidroxilamina (1-10 equivalentes, preferiblemente de manera aproximada 1 equivalente). La reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 1-24 h (preferiblemente de manera aproximada 5H). Ei solvente se eliminó bajo presión reducida.
Ilustración del Método General PPP Ejemplo No. PPP.1.1: O-ciclopropilmetiloxima de (ZR,4S)-Z-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]p¡razin-i -il)ciclopentanona A una solución de {3R, 4S)-3-etil-4-(6/-/-pirrolo[2 ,3- e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]piraz¡n-1 -il)ciclopentanona (0.05 g, 0.19 mmol, Ejemplo No. AA.1.59) en EtOH (1 mi) se agregó TEA (0.04 mi, 0.28 mmol) y clorhidrato de 0-(ciclopropilmetil)hidroxilamina (0.02 g, 0.19 mmol, Huhu Technologies). La mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 18 h a temperatura ambiente. Se agregó más clorhidrato de 0-(ciclopropilmetil)hidroxilamina (0.02 g, 0.19 mmol, Huhu Technologies). La reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 5 h. El solvente se eliminó bajo presión reducida. El material crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 1-MeOH al 10% en DCM para dar O- ciclopropilmetiloxima de (3R,4S)-3-et¡l-4-(6H-p¡rrolo[2, 3- e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-¡l)ciclopentanona (0.051 g, 80%): LC/EM (Tabla 1, Método a) R, = 1.94 min; EM m/z: 339 (M + H) + . Tabla PPP.1 Ejemplos preparado usando PPP y (3R,4S)-3-etii- 4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 - clopentanona (Ejemplo No. AA.1.59) Método General QQQ: Conversión mediada por ácido de un éster t-butílico a un ácido carboxílico con TFA A un éster t-butílico (preferiblemente 1 equivalente) se agregó TFA (10-400 equivalentes, preferiblemente 200-250 equivalentes). La reacción se mantiene a aproximadamente -20- 60°C (preferiblemente de manera aproximada 25°C) por aproximadamente 0.5-16 h (preferiblemente de manera aproximada 1 h). En los casos donde un grupo lábil ácido adicional se encuentra presente (por ejemplo, un grupo Boc) este grupo también se puede dividir durante la reacción. La mezcla de reacción se concentra bajo presión reducida. Ei residuo resultante puede utilizarse sin purificación adicional o disolverse en un solvente orgánico tal como DCM o EtOAc (preferiblemente DCM) y lavarse con una base inorgánica acuosa tal como NaHC03 o Na2C03 (preferiblemente NaHC03 acuoso saturado). La capa orgánica se lavó opcionalmente con salmuera, seca sobre MgS04 anhidro o Na2S0 , y concentra bajo presión reducida para dar el compuesto buscado.
Ilustración del Método General QQQ Preparación No. QQQ.1: ácido 4- (ciclopropansulfonamidometil)-2-etilciclopentancarboxtlico Se agitó 4-(ciclopropansulfonamidornetil)-2-etilciclopentancarboxilato de ferc-butilo (0.080 g, 0.241 mmol, preparado usando K a partir de la Preparación No. 21 y cloruro de ciclopropilsulfonilo) en TFA (4 mi, 51.9 mmol) a aproximadamente 25°C por aproximadamente 1 h. El solvente orgánico se eliminó bajo presión reducida para dar ácido 4-(ciclopropansulfonamidometil)-2-etilciclopentancarboxílico crudo (0.066 g, 100%): LC/EM (Tabla 1, Método b) R, = 1.81 min; EM m/z: 276 (M + H)+.
Método General RRR: Reducción de un alquino a un alqueno A un matraz cargado con un catalizador de hidrogenación (preferiblemente catalizador de Lindlar) (0.001 a 1 equivalente, preferiblemente 0.01 equivalente) se agregó un solvente (preferiblemente THF) y un aditivo para impedir la sobre-reducción (como por ejemplo piridina o quinolina, preferiblemente piridina) en una relación de 5:1 a 20:1 (preferiblemente 10:1) seguido por un alquino (1 equivalente). La mezcla de reacción se rocía con hidrógeno por aproximadamente 5-30 min (preferiblemente de manera aproximada 10 min) y mantiene una atmósfera de hidrógeno con un balón. Luego de aproximadamente 1-40 h (preferiblemente de manera aproximada 15 h) la mezcla de reacción se filtra, diluye con un solvente orgánico (preferiblemente Et20) y lava con CuS04 acuoso saturado, seguido por agua. La capa orgánica se separa, seca sobre Na2S04 anhidro o MgS04, filtra, y concentra bajo presión reducida. ilustración del Método General RRR Preparación No. RRR.1: (Z)-pent-2-enoato de etilo A una suspensión de catalizador de Lindlar (0.844 g, 0.396 mmol) en THF (100 mi) y piridina (10.00 mi) se agregó pent-2-inoato de etilo (5.22 mi, 39.6 mmol). La mezcla de reacción se burbujeó con hidrógeno por aproximadamente 10 min y mantuvo una atmósfera de hidrógeno con un balón. Luego de aproximadamente 15 h la mezcla de reacción se filtró a través de una almohadilla de Celite , diluyó con Et20 (30 mi) y lavó con CuS04 acuoso saturado (40 mi), seguido por agua (40 mi). La capa orgánica se separó, secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró in vacuo para dar (Z)-pent-2-enoato de etilo crudo (5 g, 98%). 1H RMN (DMSO-d6) d 1.05 (t, 3H), 1.28 (t, 3H), 2.65 (m, 2H), 4.18 (q, 2H), 5.72 (m, 1H), 6.21 (m, 1H).
Método General SSS: Cicloadición 1,3-dipolar para formar una pirrolidina A una solución de un precursor 1,3-dipclo (0.5-3 equivalentes, preferiblemente 1 equivalente) y un dipolarófilo (0.5-3 equivalentes, preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (preferiblemente DCM) a aproximadamente 0-45°C (preferiblemente temperatura ambiente) se agregó un ácido (preferiblemente TFA) (0.001-1 equivalente, preferiblemente 0.01 equivalente). Luego de aproximadamente 1-60 h (preferiblemente de manera aproximada 48 h) la mezcla se concentra ai vacio para dar el ciclo-aducto crudo.
Ilustración del Método General SSS Preparación No. SSS.1: 1 -bencil-4-etilpirrolidin-3-carboxi!ato de c/'s-etilo A una solución de /v-bencil-1 -metoxi-/V- ((trimetilsilil)metil)metanamina (9 98 mi, 39.0 mmol,) y (Z)-pent-2- enoato de etilo (5 g, 39.0 mmol, Preparación No. RRR.1) en DCM (50 mi) se agregó TFA (0.030 mi, 0.390 mmol) a temperatura ambiente. Luego de aproximadamente 2 d, la mezcla de reacción se concentró in vacuo para dar 1 -bencil-4-etilpirrolid¡n-3-carboxilato de cis-etilo crudo (9.8 g, 96%) como un aceite. LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 0.51 min; EM m/z: 262 (M + H) + .
Método General TTT: Hidrogenación de una azida a una amina A una azida (preferiblemente 1 equivalente) en EtOH, MeOH, EtOAc o THF (preferiblemente EtOH), se agregó un catalizador como por ejemplo hidróxido de paladio sobre carbono 20% en peso o paladio sobre carbono 10% en peso (preferiblemente hidróxido de paladio sobre carbono, 0.05-0.5 equivalentes, preferiblemente 0.15 equivalentes) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente bajo presión atmosférica de hidrógeno durante 1-24 h, preferiblemente de manera aproximada 2 h. El catalizador se eliminó mediante filtración a través de una almohadilla de Celite® y el material filtrado se concentra bajo presión reducida para dar el producto deseado.
Ilustración del Método General TTT Preparación No. TTT.1: (3S,5R)-5-etil-1 -(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)pirrolidin-3-amina A la solución de S-((2R, 4S)-4-azido-2-etilpirro!id¡n-1 -il)-3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazina (0.136 g, 0.459 mmol, preparada usando S del Ejemplo No. 3 Etapa E y bromoaceíato de rere-butilo, E con HCI, H con {ZR, 4S)-4-azido-2-metilpirrolidina (preparada a partir de (ZR, 4S)-4-azido-2-metilpirrolidin-1 -carboxilato de rere-butilo como se detalla en Rosen, T.; Chu, D. T. W.; Lico, I. M.; Fernandes, P. B.; Marsh, K.;Shen, L.; Cepa, V. G.; Pernet, A. G. J. Med. Chem. 1988, 31, 1598-1611, luego E con HCI), OO, D con NaOH) en EtOH (15 mi), se agregó hidróxido de paladio al 20% sobre carbono (0.05 g, 0.071 mmol) y la mezcla de reacción se agitó bajo presión atmosférica de hidrógeno por 2 h. El catalizador se retiró mediante filtración a través de una almohadilla de Celite® y el solvente se eliminó bajo presión reducida para dar (3S,5R)-5-etil-1-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)pirrolidin-3-amina (0.11 g, 89%) como un sólido amorfo blancuzco. LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.00 min; EM m/z 271 (M + H) + .
Método General UUU: Reacción de un haluro de ariÍo o heteroarilo con un ácido borónico o éster de boronato seguida por desprotección de tosilo A una mezcla de un haluro de arilo (preferiblemente 1 equivalente), un ácido borónico o éster de boronato (1-1.75 equivalentes, preferiblemente 1.1 equivalente), y una base inorgánica (por ejemplo, fluoruro de potasio, carbonato de sodio o carbonato de cesio, preferiblemente carbonato de cesio (2-16 equivalentes, preferiblemente 2.5 equivalentes) en un solvente (por ejemplo THF, DME, DMF, 1 ,4-dioxano, DME/agua, 1,4-dioxano/agua, tolueno/EtOH/agua, 1 ,4-dioxano/EtOH/agua, agua; preferiblemente 1 ,4-dioxano/EtOH/agua) se agregó un catalizador de paladio (por ejemplo tris(bencilidenacetona)dipaladio(0), tetrakis(trifenilfosfina)paladio(0), bis (acetato) trifenilfosfinpaladio(ll), FibreCat™ 1032 unido a polímero, complejo (1,1'-bis(difenilfosfino)ferrocen)d¡cloropaladio(ll) con DCM, o diclorobis(trifenilfosfina)paladio(ll); preferiblemente diclorobis(trifenilfosfina)paladio(ll) (0.01-0.20 equivalentes, preferiblemente 0.1 equivalente)). La mezcla de reacción se calienta a aproximadamente 40-120°C (preferiblemente de manera aproximada 60°C) por aproximadamente 1-24 h (preferiblemente de manera aproximada 6 h) térmicamente, o a aproximadamente 100-200°C (preferiblemente de manera aproximada 120°C por aproximadamente 5-60 min (preferiblemente de manera aproximada 20 min) en un microondas (preferiblemente gradiente de 5 min de tiempo, 300 vatios de potencia máxima, 250 psi de presión máxima). La mezcla de reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente y somete a tratamiento posterior usando uno de los siguientes métodos. Método 1. Para reacciones que contienen agua, la mezcla de reacción se puede diluir con un solvente orgánico (tal como DCM o EtOAc). Las capas se separan, la solución orgánica se lavó opcionalmente con agua y/o salmuera, seca sobre MgS04 anhidro o Na2S04, filtra, y el solvente se eliminó bajo presión reducida para dar el intermediario. Método 2. La mezcla de reacción se concentra bajo presión reducida y opcionalmente se purifica usando uno o más de los Métodos de Purificación descritos precedentemente para dar el intermediario. Al intermediario se agregó un solvente orgánico (tal como 1,4-dioxano, MeOH, o THF/MeOH, preferiblemente 1,4-dioxano) y una base acuosa (ta! como Na2C03 acuoso o NaOH acuoso, 1-30 equivalentes, preferiblemente 2-3 equivalentes para NaOH acuoso, preferiblemente 15-20 equivalentes para Na2C03 acuoso). La mezcla se agitó a aproximadamente 25-100°C (preferiblemente de manera aproximada 60°C) por aproximadamente 1-72 h (preferiblemente de manera aproximada 1-16 h) térmicamente o a aproximadamente 80-200°C (preferiblemente de manera aproximada 100°C) por aproximadamente 10-60 min (preferiblemente de manera aproximada 15 min) en un microondas (preferiblemente gradiente de 5 min de tiempo, 300 vatios de potencia máxima, 250 psi de presión máxima). En casos donde la reacción no llega a completarse según lo indicado por TLC, LC/EM, o HPLC, se agregó base acuosa adicional (como por ejemplo Na2C03 acuoso, 10-20 equivalentes, preferiblemente 10 equivalentes o NaOH acuoso, 1-5 equivalentes, preferiblemente 1-2 equivalentes) y/o un cosolvente (tal como EtOH). La reacción se continúa a aproximadamente 25-100°C (preferiblemente de manera aproximada 60°C) por aproximadamente 0.25-3 h (preferiblemente de manera aproximada 1-2 h) térmicamente o a aproximadamente 80-100°C (preferiblemente de mañera aproximada 100°C) por aproximadamente 10-60 min (preferiblemente de manera aproximada 15 min) en un microondas. En cualquier caso donde está presente otro grupo básico lábil (por ejemplo, un éster o un grupo ciano), este grupo también puede hidrolizarse. Se realiza el tratamiento posterior de la reacción usando uno de los siguientes métodos. Método 1. El solvente orgánico se eliminó opcionalmente bajo presión reducida y la solución acuosa se neutraliza con la adición de un grupo ácido adecuado (tal como HCI acuoso). Se agregó un solvente orgánico adecuado (tal como EtOAc o DCM) y agua, las capas se separan, y la solución orgánica se seca sobre Na2S0 anhidro o MgS04, filtra, y concentra hasta secar bajo presión reducida para dar el compuesto buscado. Método 2. El solvente orgánico se eliminó opcionalmente bajo presión reducida, se agregó un solvente orgánico adecuado (tal como EtOAc o DCM) y agua, las capas se separan, y la solución orgánica se seca sobre Na2SC anhidro o MgS04, filtra, y concentra hasta secar bajo presión reducida para dar el compuesto buscado. Método 3. La mezcla de reacción se concentra bajo presión reducida y purifica directamente mediante uno de los subsiguientes métodos para dar el compuesto buscado, ilustración del Método General UUU Ejemplo No. UUU.1 : 1 -c¡clohexil-3-(4-(metilsulfonil)feniI)-6H- imidazo[1,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazina Un frasco de microondas se cargó con 3-bromo-1 -ciclohexil-6-tosil-6/-/-im¡dazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazina (0.050 g, 0.11 mmol, Preparación No. MM.1), ácido 4-(metilsulfonil)fenilborónico (0.023 g, 0.12 mmol, Acros), carbonato de cesio (0.086 g, 0.26 mmol), diclorobis(trifenilfosfina)paladio(ll) (0.0066 g, 0.0000094 mmol), y 1,4-dioxano (0.42 mi), EtOH (0.42 mi), y agua (0.21 mi). El frasco se tapó y la mezcla se calentó a aproximadamente 120°C por aproximadamente 20 min (gradiente de 5 rnin de tiempo, 300 Vatios de potencia máxima, 250 psi de presión máxima) en un microondas. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida para dar un sólido que se disolvió en 1,4-dioxano (1.0 mi) y transfirió a un frasco de microondas. Se agregó NaOH acuoso 2 N (0.11 mi, 0.21 mmol) y el frasco se tapó. La solución se calentó a aproximadamente 100°C por aproximadamente 15 min en un microondas (300 Vatios de potencia máxima, 250 psi de presión máxima, gradiente de 5 min de tiempo). Se agregaron DC (10 mi) y NH4CI acuoso saturado (5 mi) a la solución de reacción. Las capas se separaron y la solución acuosa se extrajo con DCM adicional (5 mi). Los extractos combinados se secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron hasta secar bajo presión reducida para dar un sólido de color marrón claro. Luego de la adición de DCM (1 mi), se formó un precipitado de color amarillo que se recogió mediante filtración al vacío y secó durante la noche en un embudo Buchner para dar 1 -ciclohexil-3-(4-(metilsulfonil)fenil)-6H-imidazo[1 , 5- a]pirrolo[2,3-e]pirazina (0.017 g, 41%): LC/EM (Tabla 1, Método a) R, = 2.39 min; EM m/z: 395 (M + H) + .
Tabla UUU.1 Ejemplos preparados a partir de 3-bromo-1- ciclohexil-6-tosil-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazina (Preparación No. MM.1) usando el Método General UUU Método General VVV: Reacción de un haluro de ariio o heteroarilo con un ácido borónico o éster de boronato A una mezcla de un haluro de arilo (preferiblemente 1 equivalente), un ácido borónico o éster de boronato (1-1.75 equivalentes, preferiblemente 1.1 equivalente), y una base inorgánica (por ejemplo, fluoruro de potasio, carbonato de sodio o carbonato de cesio, preferiblemente carbonato de cesio) (1.1-16 equivalentes, preferiblemente 2 equivalentes) en un solvente (por ejemplo THF, DME, DMF, 1,4-dioxano, DME/agua, 1,4-dioxano/agua, tolueno/EtOH/agua, 1 ,4-dioxano/EtOH/agua o agua; preferiblemente 1,4-dioxano) se agregó un catalizador de paladio (por ejemplo tris(bencilidenacetona)d¡paladio(0), tetrakis(trifenilfosfina)paladio(0), bis(acetato)trifenilfosfinpaladio(ll), FibreCat™ 1032 unido a polímero, complejo (1.1'-bis(difenilfosfino)ferrocen)dicloropaladio(ll) con DCM, o dicloro bis (t rife nilfosfina)paladio(ll); preferiblemente tris(bencilidenacetona)dipaladio(0), 0.01-0.20 equivalentes, preferiblemente 0.1 equivalente) y se agregó opcionalmente un ligando (por ejemplo triciclohexilfosfina, tri-í-butil-fosfano; preferiblemente triciclohexilfosfina (0.01-1.0 equivalentes, preferiblemente 0.16 equivalentes)). La mezcla de reacción se calienta a aproximadamente 40-120°C (preferiblemente de manera aproximada 85°C) por aproximadamente 1-24 h (preferiblemente de manera aproximada 2 h) térmicamente, o a aproximadamente 100-200°C (preferiblemente de manera aproximada 120°C) por aproximadamente 5-60 min (preferiblemente de manera aproximada 20 min) en un microondas (preferiblemente gradiente de 5 min de tiempo, 300 Vatios de potencia máxima, 250 psi de presión máxima). La mezcla de reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente y somete a tratamiento posterior usando uno de los siguientes métodos. Método 1. Para reacciones que contienen agua, la mezcla de reacción se puede diluir con un solvente orgánico (tal como DCM o EtOAc). Las capas se separan, la solución orgánica se lavó opcionalmente con agua y/o salmuera, seca sobre MgS04 anhidro o Na2S04> filtra, y el solvente se eliminó bajo presión reducida para dar el compuesto deseado. Método 2. La mezcla de reacción sé concentra bajo presión reducida y opcionalmente se purifica usando uno o más de los Métodos de Purificación descritos precedentemente para dar el compuesto deseado. Método 3. El catalizador se eliminó mediante filtración y el material filtrado se concentra bajo presión reducida.
Ilustración del Método General VVV Preparación No. VVV.1: 8-ciclohexil-1 -metil-3-((2- (trimetilsilil)etoxi)metil)-3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pi razina A la solución de 8-ciclohexil-1 -yodo-3-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-3H-imidazo[1,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazina (0.100 g, 0.201 mmol, preparada usando GGG con 8-ciclohexil-3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazina [WO2009152133A1 ], ) en 1,4-dioxano (1 mi) se agregó carbonato de cesio (0.131 g, 0.403 mmol), triciclohexilfosfina (solución 20% en peso en tolueno, 0.045 g, 0.032 mmol), Pd2(dba)3 (0.018 g, 0.020 mmol) y borato de trimetilo (0.033 g, 0.262 mmol). La mezcla se desgasificó y calentó a aproximadamente 85°C por aproximadamente 2 h. El catalizador se retiró por filtración. El material filtrado se concentró y purificó mediante RP-HPLC (Tabla 1, Método s) para dar 8-ciclohexil-1 -metil-3 ((2-(trimetHsilil)etoxi)metil)-3H-imidazo[1 , 2-a]pirrolo[2, 3-e]pirazina (0.032 g, 41%) como un aceite traslúcido: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 3.41 min; EM m/z: 385 (M + H) + .
Método General WWW: Formación de un carbamafo A una amina (2-10 equivalentes, preferiblemente 5 equivalentes) y DMAP (0-5 equivalentes, preferiblemente 2 equivalentes) en un solvente orgánico (tal como THF o 1,4-dioxano, preferiblemente 1,4-dioxano) a aproximadamente -20°C hasta 80°C (preferiblemente de manera aproximada 40ÓC) se agregó un carbonato o una solución de un carbonato (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (tai como THF o 1.4 dioxano, preferiblementel .4-dioxano). Luego, de aproximadamente 1-16 h (preferiblemente de manera aproximada 2 h), la mezcla de reacción se concentra bajo presión reducida o diluye opcionalmente con un solvente orgánico (tal como Ét20, EtOAc o DCM, preferiblemente EtOAc), se lavó con agua y una base acuosa (tal como Na2C03 acuoso saturado o NaHCQ3 y salmuera, seca sobre Na2S04 anhidro o MgS04l filtra, y concentra bajo presión reducida.
Ilustración del Método General WWW Preparación No. WWW.1: Fenilcarbamato de (1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentilo A anilina (0.063 g, 0.677 mmol) y DMAP (0.033 g, 0.271 mmol) en 1,4-dioxano (1 mi) a aproximadamente 40°C se agregó una solución de 4-nitrofenilcarbonato de (1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentilo (0.080 g, 0.135 mmol, preparado como en el Ejemplo No, 42 Etapa N) en 1,4-dioxano (1 mi). Luego de aproximadamente 2 h, se eliminó el solvente y el residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice (12 g) eluyendo con 0-40% EtOAc en DCM para dar fenilcarbamato de (1 S,3R,4S)-3-et¡l-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentilo (0.0468 g, 63%): LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.58 min; EM m/z: 545 (M + H) + .
Método General XXX: Formación de urea con pérdida de grupo protector A una solución o suspensión de una amina o sal de amina (1-3 equivalentes, preferiblemente 1-2 equivalentes) en un solvente orgánico tal como DCM, THF, o DMF (preferiblemente THF) a aproximadamente 20 - 80°C (preferiblemente de manera aproximada 20°C) se agregó opcionalmente una base orgánica, como por ejemplo TEA, DIEA, piridina (preferiblemente DIEA) (1-10 equivalentes, preferiblemente 1-5 equivalentes) seguida por CDI (1- 5 equivalentes, preferiblemente 1 equivalente). Luego de aproximadamente 0.5-24 h (preferiblemente de manera aproximada 1-3H), se agregó una segunda amina o sal de amina (1-10 equivalentes, preferiblemente 1-3 equivalentes) pura o como una solución o suspensión en un solvente orgánico tai como DCM, THF, o DMF (preferiblemente THF). La reacción se mantiene a aproximadamente 20 - 80°C por aproximadamente 2 - 24 h (preferiblemente de manera aproximada 16 h). Si la reacción no resulta completa, la reacción puede calentarse a aproximadamente 40- 80°C (preferiblemente 55°C). Además, puede agregarse más amina o sal de amina (1- 50 equivalentes, preferiblemente 20 equivalentes), y/o DMAP (1-10 equivalentes, preferiblemente 1 equivalente). La reacción se mantiene a aproximadamente 20- 80°C por aproximadamente 24-96 h (preferiblemente 72 h). Esto puede repetirse si la reacción no resulta completa según TLC, LC/EM, o HPLC. La mezcla de reacción se enfría a temperatura ambiente. La mezcla de reacción opcionalmente se divide entre un solvente orgánico (tal como EtOAc o DCM) y una base acuosa (tai como NaHC03 acuoso saturado o Na2C03 acuoso saturado, preferiblemente NaHC03 acuoso saturado). De manera alternativa, la mezcla de reacción se concentra bajo presión reducida y el residuo se divide como precedentemente. En cualquier caso, la capa acuosa luego se extrae opcionalmente con solvente orgánico adicional tal como EtOAc o DCM. Las capas orgánicas combinadas se pueden lavar opcionalmente con salmuera y concentran al vacío o secan sobre Na2S0 anhidro o MgS04 y luego decantan o filtran antes de concentrarse bajo presión reducida. Opcionalmente, la mezcla de reacción se concentra bajo presión reducida y el residuo se purifica directamente.
Ilustración del Método General XXX Preparación No. XXX.1: (c/s)-3-etil-4-(6H-pjrroio[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)-A-((tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)pirrolidin-1-carboxamida CIS A una solución de clorhidrato de 1 -((cis)-4-etilpirrolidin-3-il)-6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina (0.075 g, 0.168 mmol, Ejemplo No. 36, Etapa F) en THF (1.00 mí) se agregó DIEA (0.150 mi, 0.861 mmol) y CDI (0.027 g, 0.168 mmol). Luego de aproximadamente 1 h, se agregó 4-aminometiltetrahidropirano (0.020 g, 0.17 mmol, Acros) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 16 h. La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 55°C por aproximadamente 24 h. Se agregó DMAP (0.021 g, 0.168 mmol) y se continuó la agitación a aproximadamente 55°C por aproximadamente 48 h. Se agregó 4-aminometiltetrahidropirano (0.400 g, 3.47 mmol, Acros) y se continuó la agitación a aproximadamente 55°C por aproximadamente 24 h. El solvente se eliminó bajo presión reducida. El material crudo se purificó mediante RP-HPLC (Tabla 1, Método m) para dar (cs)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2, 3-e][1 ,2,4]tr¡azolo[4,3-a]p¡razin-1-il)-A-((tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)pirrolidin-1 -carboxamida (0.007 g, 10%) como el producto: LC/EM (Tabla 1, Método a) R, = 1.32 min; EM m/z: 398 (M + H) + .
Tabla XXX.1 Formación de urea con pérdida de grupo protector (preparado a partir del Ejemplo No. 36, Etapa F) usando el Método General XXX Método General YYY: Adición de Michael A una mezcla de un nucleófilo (como por ejemplo una amina o un alcohol, preferiblemente 1 equivalente) y un receptor de Michael (0.5-30 equivalentes, preferiblemente 2-5 equivalentes) opcionalmente en un solvente orgánico (tal como DMF, EtOM o MeCN, preferiblemente DMF) se agregó opcionalmente una base orgánica (tal como TEA, DIEA, o DBU, preferiblemente DBU, 1-5 equivalentes, preferiblemente 1-2 equivalentes). La mezcla de reacción se calienta a aproximadamente 20 - 120°C (preferiblemente de manera aproximada 80°C) por aproximadamente 2 - 60 h (preferiblemente de manera aproximada 12-16 h). Se agregó opcionalmente más receptor de Michael (0.5-30 equivalentes, preferiblemente 2-5 equivalentes) y luego se agregó opcionalmente una base orgánica (tal como TEA, DIEA, o DBU, preferiblemente DBU, 1-5 equivalentes, preferiblemente 1-2 equivalentes) y la mezcla de reacción se calienta a aproximadamente 20 - 120°C (preferiblemente de manera aproximada 80°C) por aproximadamente 2 - 60 h (preferiblemente de manera aproximada 2-5 h). En casos donde la reacción no llega a completarse según lo indicado por TLC, LC/EM, o HPLC, la mezcla de reacción se sometió nuevamente a las condiciones descritas previamente. La mezcla de reacción luego se enfría a temperatura ambiente. Opcionalmente, se agregó DCM y la suspensión se filtra. La mezcla de reacción o filtrado opcional se concentra bajo presión reducida.
Ilustración del Método General YYY Preparación No. YYY.1 : 2-(3-((1 S,3S,4/?)-3-(3rV-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)-4-metilciclopent¡lam¡no)oxeían-3-il)acetonitrilo A una solución de (1 S,3R,4S)-3-metil-4-(3-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-3/-/-imidazo[1,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)ciclopentanam¡na (0.605 g, 1.569 mmol, preparada usando FFFFF de la Preparación No. 33, GGGGG con la Preparación No. E.1.1, KKKK con PFPAA, D con NaOH, KK, Y) en DMF (6 mi) se agregó 2-(oxetan-3-iliden)acetonitrilo (0.298 g, 3.14 mmol, J. Meó. Chem. 2010, 53(8), 3227) y la mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 80°C por aproximadamente 15 h. Se agregó 2-(oxetan-3-iliden)acetonitrilo (0.149 g, 1.569 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 80°C por aproximadamente 3.5 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se concentró in vacuo y el residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con MeOH 0% a 10% en DCM. Una segunda purificación mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con EtOAc 50% a 100% en heptano seguido por MeOH al 10% en DCM dio 2-(3-((1 S, 3S, 4R)-3-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2, 3-e]pirazin-8-il)-4-metilc¡clopentilamino)oxetan-3-H)acetonitrilo (0.262 g, 33%) como un sólido de color marrón pegajoso: LC/EM (Tabla 1, Método n) Rt = 0.75 min; EM m/z 481 (M + H)+.
Método General ZZZ: Reacción de Grignard o adición de alquillitio a un compuesto que contiene carbonilo Una solución de un compuesto que contiene carbonilo (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (tal como THF, 1,4-dioxano, Et20, preferiblemente THF) se enfrió a aproximadamente -78°C-50°C (preferiblemente de manera aproximada 0°C) y luego se agregó opcionalmente un aditivo como por ejemplo cloruro de litio (1-10 equivalentes, preferiblemente 4 equivalentes) en un solvente orgánico (tal como THF o Et20, preferiblemente THF). A la solución de reacción se agregó una solución de un reactivo de Grignard o alquillitio en un solvente orgánico (tal como THF o Et20, preferiblemente Et20) y la mezcla resultante se agitó a aproximadamente -78°C-50°C por aproximadamente 15 min-2 h (preferiblemente de manera aproximada 0°C por aproximadamente 20 min) y luego se calienta opcionalmente a temperatura ambiente y agita por aproximadamente 2-16 h (preferiblemente de manera aproximada 4H). En casos donde la reacción no llega a completarse, se agregó una porción adicional o porciones adicionales de una solución de un reactivo de Grignard o alquillitio en un solvente orgánico (tal como THF o Et20, preferiblemente Et20) para completar la reacción. La mezcla de reacción luego se enfría opcionalmente a aproximadamente -78°C-0°C (preferiblemente de manera aproximada -78°C) y se detiene con la adición de una solución acuosa saturada de NH4CI. La mezcla se agitó opcionalmente por aproximadamente 5-30 min (preferiblemente de manera aproximada 5 min) y luego se agregó un solvente orgánico (tal como EtOAc o DCM). Las capas se separan y la solución orgánica se seca sobre MgS04 anhidro, filtra, y concentra bajo presión reducida.
Ilustración del Método General ZZZ Ejemplo No. ZZZ.1 : 1 -((1 R,3A?,4S)-3-etil-4-(6tf-pirro!o[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentil)-2-metilpropan-2-ol A una solución de 2-((1 R,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]tr¡azolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentil)acetato de etilo (0.166 g, 0.486 mmol, Ejemplo No. 38, Etapa H) en THF (4 mi) a aproximadamente 0°C se agregó litio cloruro de en THF (0.5 M, 3.9 mi) seguido por bromuro de metilmagnesio en Et20 (3.0 M, 0.65 mi). Luego de aproximadamente 20 min la mezcla de reacción se dejó calentar a temperatura ambiente. Luego de aproximadamente 4 h la mezcla de reacción se enfrió a aproximadamente -78°C y se agregó NH4CI acuoso saturado (aproximadamente 5 mi). Luego de aproximadamente 5 min la mezcla de reacción se dejó calentar a temperatura ambiente y agregó EtOAc (aproximadamente 10 mi). Las capas se separaron y la solución orgánica se secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida. El material crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice e!uyendo con EtOAc/MeOH para dar 1 -((1 R,3R,4S)-3-et¡l-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2, 4]triazolo[4, 3-a]p¡razin-1 -i ?) ciclope ntil)-2-metil p ropa ?-2-ol (0.118 g, 74%) como una espuma : LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.64 min; EM m/z 328 (M + H) + .
Tabla ZZZ.1 Ejemplos preparados usando el Método General ZZZ con bromuro de metilmagnesio Método General AAAA: Desprotección de a sulfonamida con DBU A un matraz que contiene una sulfonamida, por ejemplo, un pirrólo protegido con sulfonilo, (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (tal como 1,4-dioxano, MeOH, o THF/MeOH, MeCN, preferiblemente MeCN) se agregó DBU (1-30 equivalentes, preferiblemente 5-6 equivalentes). La mezcla se agitó a aproximadamente 20-100°C (preferiblemente de manera aproximada temperatura ambiente) por aproximadamente 1-72 h (preferiblemente de manera aproximada 24 h). En casos donde la reacción no llega a completarse según lo indicado por TLC, LC/EM, o HPLC la reacción se calienta a aproximadamente 30- 100°C (preferiblemente de manera aproximada 45°C) por aproximadamente 1-48 h (preferiblemente de manera aproximada 12-24 h). En casos donde la reacción no llega a completarse según lo indicado por TLC, LC/EM, o HPLC, se agregó más DBU (1-20 equivalentes, preferiblemente 1 equivalente). Esto puede repetirse si la reacción no resulta completa según TLC, LC/EM, o HPLC. La reacción se enfría a temperatura ambiente y somete a tratamiento posterior usando uno de los siguieníes métodos. Método 1. El solvente orgánico se eliminó opcionalmente bajo presión reducida, se agregó un solvente orgánico adecuado (tal como EtOAc o DCM) y agua o salmuera, las capas se separan, y la solución orgánica se seca sobre Na2S04 anhidro o MgS0 , filtra, y concentra hasta secar bajo presión reducida para dar el compuesto buscado. Método 2. La mezcla de reacción se concentra bajo presión reducida y purifica directamente mediante uno de los subsiguientes métodos.
Ilustración del Método General AAAA Preparación No. AAAA.1: 2-((3R,4S)-3-etil-4-(8H-pirro¡o[2,3-e][1 , 2,4]triazolo[4,3-a]p¡razin-1 -il)ciclopentil i den) acetato de (E/Z)-etilo A una solución de 2-((3R, 4S)-3-etil-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pira2in-1 -il)ciclopentiliden)acetaío de (£/Z)-etilo (2.00 g, 4.05 mmol, Preparación No. III.1) en MeCN (20 mi) se agregó DBU (3.70 mi, 24.51 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 16 h. La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 45°C por aproximadamente 24 h. Se agregó DBU (1.00 mi, 6.63 mmol) y se continuó el calentamiento a aproximadamente 45°C por aproximadamente 24 h. Se agregó más DBU (1.00 mi, 6.63 mmol) y continuó el calentamiento a aproximadamente 45°C por aproximadamente 24 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y el solvente se eliminó bajo presión reducida. El material crudo se purificó mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-10% de MeOH en DCM para dar 2-((3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2, 3-e][1,2, 4]triazolo[4, 3-a]pirazin-1 -il)ciclopentiliden)acetato de (E/Z)-etilo (0.70 g, 51%) como una espuma de color marrón: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = DOLOS min; EM m/z: 340 (M + H)\ Método General BBBB: Desprotección de una sulfonamida con TBAF A una solución de una sulfonamida (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (preferiblemente THF) a aproximadamente -30 a 65°C (preferiblemente 0°C) se agregó TBAF (1-10 equivalentes, preferiblemente 3 equivalentes). Puede agregarse más TBAF (1-10 equivalentes, preferiblemente 3 equivalentes) para llevar la reacción a completarse. Una vez que la reacción alcanza un nivel aceptable la mezcla de reacción se divide entre un solvente orgánico (tal como DCM o EtOAc, preferiblemente EtOAc) y una fase acuosa (como por ejemplo agua o salmuera). La capa orgánica se separa y opcionalmente lava con salmuera, se seca sobre Na2S04 anhidro o MgS04, y/o filtra antes de concentrarse bajo presión reducida.
Ilustración del Método General BBBB Preparación No. BBBB.1*: 2-((3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirro!o[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentiliden)acetaío de etilo A una solución de 2-((3R,4S)-3-etil-4-(6-tosil-6h'-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentiliden)acetato de etilo (1.9 g, 3.85 mmol, Preparación No. III.1) en THF (30 mi) a aproximadamente 0°C se agregó una solución de TBAF (11.55 mi, 11.55 mmol, 1M en THF). Luego de aproximadamente 30 min se agregó más TBAF (7.70 mi, 7.70 mmol, 1M en THF). Luego de aproximadamente 1 h se agregaron EtOAc y salmuera a la mezcla de reacción. La capa orgánica se separó, concentró in vacuo y purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con EtOAc para dar 2-((3R,4S)-3-et¡l-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2, 4]triazolo[4, 3-a]pirazin-1 -i l)ciclopentil ¡den) acetato de etilo (1.3 g, 100%) como una mezcla de estereoisómeros. LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.86 y 1.90 min.; EM m/z: 340 (M + H) + .
Tabla BBBB.1 Ejemplos preparados usando el Método General BBBB Método General CCCC: Desprotección de una sulfonamida con A un matraz que contiene una sulfonamida, por ejemplo, un sulfonilpirrol protegido, (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (tal como 1,4-dioxano, MeOH, o THF, preferiblemente MeOH) se agregó KCN (1-3 equivalentes, preferiblemente 2.2 equivalentes) como una solución n un solvente orgánico (tal como 1,4-dioxano, MeOH, o THF, preferiblemente MeOH) o como un sólido. La mezcla se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 1-18 h (preferiblemente de manera aproximada 16 h). El solvente orgánico se eliminó opcionalmente bajo presión reducida y se agregó un solvente orgánico adecuado (tal como EtOAc o DCM) y agua. Las capas se separan y la solución orgánica se seca sobre Na2S04 anhidro o MgS04, filtra o decanta, y concentra hasta secar bajo presión reducida y se purifica directamente mediante uno de los subsiguientes métodos.
Ilustración del Método General CCCC Preparación No. CCCC.1 : benzoato de 3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentilo A una mezcla de benzoato de 3-etil-4-(6-tosil-6H-pirro!o[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentilo (5.00 g, 7.84 mmol, preparado usando II del Ejemplo No. 4 Etapa J con ácido benzoico y B) en MeOH (16 mi) se agregó una solución de cianuro de potasio (0.74 mi, 17 mmol) en MeOH (16 mi). La reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 16 h. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida para dar un residuo. El residuo se dividió entre agua (20 m!) y DCM (20 mi). Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con DCM (3 x 10 mi). El extracto luego se lavó con NaHC03 acuoso saturado, secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida para dar un aceite crudo. El material crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-10% de MeOH en DCM para dar benzoato de 3- etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 - ¡IJciclopentilo (2.30 g, 78%) como un sólido. LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.08 min; EM m/z: 376 (M + H) + .
Tabla CCCC.1 Ejemplos preparados usando el Método General D con KCN Método General DDDD: Formación de un oxadiazol A una solución de un éster carboxílico (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (tal como DMF, NMP, THF, MeOH/tolueno, p-Dioxano, o MeOH, preferiblemente MeOH/tolueno) se agregó una base (tal como K2C03 o Cs2C03, 20-10 equivalentes, preferiblemente 2-4 equivalentes) y una acetimidamida (1-20 equivalentes, preferiblemente 4-10 equivalentes). La mezcla de reacción se calienta a aproximadamente 100-160°C (preferiblemente de manera aproximada 130°C) por aproximadamente 15 min hasta 2 h (preferiblemente de manera aproximada 45 min) bajo irradiación de microondas. En casos donde la reacción no Mega a completarse según lo indicado por TLC, LC/E , o HPLC, puede agregarse más acetimidamida (1-20 equivalentes, preferiblemente 3-10 equivalentes) y/o base (tal como K2C03 o Cs2C03, 2-10 equivalentes, preferiblemente 2-4 equivalentes). La mezcla de reacción se calienta a aproximadamente 100-160°C (preferiblemente de manera aproximada 130-140°C) por aproximadamente 15 min hasta 2 h (preferiblemente de manera aproximada 45 min) bajo irradiación de microondas. El calentamiento adicional con o sin adición de acetimidamida y/o base se repite opcionalmente. De manera alternativa, una solución de una acetimidamida (1-20 equivalentes, preferiblemente 4-10 equivalentes) en un solvente orgánico (ta! como THF o p-dioxano, preferiblemente THF) se agregó una base (tal como NaH, 1-5 equivalentes, preferiblemente 3 equivalentes). Luego de aproximadamente 0.5-2 h (preferiblemente de manera aproximada 0.5H), se agregó un éster carboxílico (preferiblemente 1 equivalente). Luego de aproximadamente 0.25 - 3 h (preferiblemente de manera aproximada 0.25H), la mezcla de reacción se calienta a aproximadamente 40 120°C (preferiblemente de manera aproximada 70°C) por aproximadamente 1-48 h (preferiblemente de manera aproximada 4 h). Si la reacción se calienta la mezcla de reacción se enfría a temperatura ambiente. Se realiza el tratamiento posterior de la reacción usando uno de los siguientes métodos. Método 1. El solvente orgánico se eliminó opcionalmente bajo presión reducida, se agregó un solvente orgánico adecuado (tal como EtOAc o DCM) y agua, salmuera o NH4CI saturado, las capas se separan. La solución orgánica se lavó con agua, salmuera o NH4CI saturado y la solución orgánica se seca sobre Na2S04 anhidro o MgS04, filtra, y concentra hasta secar bajo presión reducida para dar el compuesto buscado. Método 2. La mezcla de reacción se concentra bajo presión reducida y purifica directamente.
Ilustración del Método General DDDD Preparación No. DDDD.1 : (5-(((1 S,3/?,4S)-3-etil-4-(6W-pirrolo[2,3-e][ ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentiS)rnetil)-1 ,2,4-oxadiazol-3-il)metanol A una solución de 2-((1 S,3R,4S)-3-et¡l-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentil)acetato de etilo (0.195 g, 0.571 mmol, Ejemplo No. 38, Etapa H) en tolueno (1.00 mi) y MeOH (1.000 mi) se agregaron (?)-?/',2-dihidroxiacetimidamida (0.515 g, 5.71 mmol, Tyger) y K2C03 (0.195 g, 1.41 mmol). La reacción se calentó en un microondas CEM a aproximadamente 130°C dos veces por aproximadamente 45 min cada vez (250 psi de presión máxima, gradiente de 1 min, 300 vatios máximos). Se agregó (Z)-N' ,2-dihidroxiacetimidamida (0.200 g, 2.22 mmol, Tyger) y la mezcla de reacción se calentó en un microondas CEM a aproximadamente 140°C por aproximadamente 45 min (250 psi de presión máxima, gradiente de 1 min, 300 vatios máximos). Se agregaron (?)-?/',2-dihidroxiacetimidamida (0.200 g, 2.22 mmol, Tyger) y K2C03 (0.100 g, 0.725 mmol), y la mezcla de reacción se calentó en un microondas CEM a aproximadamente 140°C por aproximadamente 45 min (250 psi de presión máxima, gradiente de 1 min, 300 vatios máximos). El solvente se eliminó bajo presión reducida. E! residuo se disolvió con agua (20 mi) y EtOAc (50 m!). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (5 x 50 mi). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron para dar un residuo de color amarillo. El material crudo se purificó mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-10% de MeOH en EtOAc para dar (5-(((1S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2, 4]triazolo[4, 3-a]piraz¡n-1 -H)ciclopentil)metil)-1.2.4-oxadiazol-3-il)metanol (0.042 g, 20%) como un sólido de color amarillo: LC/EM (Tabla 1, Método a) R, = 1.67 min; EM m/z: 368 (M + H) + .
Tabla DDDD.1 Ejemplos preparados usando el Método General DDDD con (Z)-N'-hidroxi-metoxiacetimidamida Método General EEEE: Formación de una urea usando fosgeno A una solución de fosgeno (1-1.5 equivalentes, preferiblemente 1.2 equivalentes, solución 20% en tolueno) en una solución orgánica (como por ejemplo DCM), bajo una atmósfera inerte a aproximadamente 0°C se agregó solución o suspensión de una amina o sal de amina (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (tal como DCM, THF, o 1,4-dioxano, preferiblemente DCM) y una base orgánica (tal como TEA, DIEA, piridina, 1-10 equivalentes, preferiblemente 5 equivalentes, preferiblemente TEA). Luego de aproximadamente 0.5-24 h (preferiblemente de manera aproximada 40 min) a aproximadamente 0°C, una segunda amina o sal de amina (1-10 equivalentes, preferiblemente 1-3 equivalentes) se agregó pura o como una solución o suspensión en un solvente orgánico (tal como DCM, THF, o DMF, preferiblemente DCM) y una base orgánica (tal como TEA, DIEA, piridina, 1-10 equivalentes, preferiblemente 5 equivalentes, preferiblemente TEA). La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente 0°C por 0.5 - 24 h (preferiblemente 45 min). Se agregó una base acuosa (tal cómo NH OH acuoso o Na2C03 acuoso saturado) con ia adición opcional de un solvente orgánico tal como EtOAc o DCM. La capa acuosa luego se extrae opcionalmente con solvente orgánico adicional (tal como EtOAc o DCM). Las capas orgánicas combinadas se pueden lavar opcionalmente con agua o salmuera y concentrar al vacío o secar sobre Na2S04 anhidro o MgS04 y luego decantar o filtrar antes de concentrarse bajo presión reducida para dar el compuesto buscado.
Ilustración del Método General EEEE Preparación No. EEEE.1: (3,3-dif luoroazetidin-1 -»l)((c/s)-3-et«l-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazirt-1 -¡ I )p i r ro I i d i n -1 - il)metanona A una solución de fosgeno (0.400 mi, 0.761 mmol, 20% en tolueno) en DCM (1.5 mi) bajo un balón de N2 a aproximadamente 0°C se agregaron una solución de 1 -((c/s)-4-etilpirrolidin-3-i!)-6-tosil-6/-/-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina (0.250 g, 0.609 mmol, Ejemplo No. 36, Etapa F) en DCM (5.0 mi) y TEA (0.430 mi, 3.08 mmol). Luego de aproximadamente 40 min, a aproximadamente 0°C, se agregaron una solución de clorhidrato de 3,3-difluoroazetidina (0.095 g, 0.731 mmol, Matrix) y TEA (0.430 mi, 3.08 mmol) en DCM (5.0 mi) por goteo y se agitó a aproximadamente 0°C por aproximadamente 45 min. Se agregó bicarbonato de sodio acuoso saturado (2 mi) y las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con DCM (2 x 30 mi). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (25 mi), secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron para dar un residuo de color marrón. El material crudo se purificó mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-10% de MeOH en DCM para dar (3,3- difluoroazetidin-1-il)((cis)-3-etil-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)pirrolidin-1-il)metanona (0.208 g, 65%) como un residuo de color marrón: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.17 min; EM m/z: 530 (M + H)\ Método General FFFF: Formación de una amida a partir de un éster A un reactor para presión cargado con un éster (preferiblemente 1 equivalente) se agregó una solución de amoníaco en un solvente prótico (como por ejemplo etanol, metanol o agua, preferiblemente metanol). El reactor se sella y la temperatura se mantiene a aproximadamente temperatura ambiente a aproximadamente 200°C (preferiblemente de manera aproximada 85°C). Luego de aproximadamente 1 a 10 días (preferiblemente de manera aproximada 2 días) la mezcla de reacción se enfría a temperatura ambiente y la mezcla de reacción se concentra al vacío para dar la amida cruda.
Ilustración del Método General FFFF Ejemplo No. FFFF.1: 4-(3-etil-4-(6H-pirro!o[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentil)butanamida Se mezclaron 4-(3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3- irazin-1-il)ciclopentil)butanoato de etilo (0.080 g, 0.217 mmol, preparado usando III de la Preparación No. 25 y 4-(dietoxifosforil)but-2-enoato de (E)-etilo, W) y amoníaco (7 N en MeOH, 6.2 mi, 43.3 mmol). El matraz de reacción se selló y calentó a aproximadamente 85°C. Luego de aproximadamente 2 días el tubo se enfrió a temperatura ambiente y ¡a mezcla de reacción se concentró in vacuo para dar 4-((3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2, 3-e][1,2, 4]triazolo[4, 3-a]pirazin-1 -il)ciclopentil)butanamida (0.074 g, 100%) como un sólido que se usó sin purificación adicional: LC/EM (Tabla 1, Método c) Rt = 0.50 min.; EM m/z: 341 (M + H) + .
Método General GGGG: Formación de un nitrilo a partir de una amida primaria A una solución de una amida primaria (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (tal como DCM, THF, DCE, preferiblemente DCM) se agregó un agente deshidratante (cómo por ejemplo TFAA o SOCI2, preferiblemente TFAA) (1-20 equivalentes, preferiblemente 10 equivalentes). Luego de aproximadamente 1-20 h (preferiblemente de manera aproximada 4 h) a 10 hasta 60°C (preferiblemente temperatura ambiente) la mezcla de reacción se concentra al vacío.
Ilustración del Método General GGGG Ejemplo No. GGGG.1: 4-((1 S,3R,4S)-3-et»l-4-(6H-pirrolo[2,3- ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -!l)ciclopentil)butanonitn¡o y 4-((1R,3R,4S -3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]tr¡azoloE4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentil)butanonitrilo A una solución de 4-(3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentil)butanamida (0.090 g, 0.264 mmol, Ejemplo No. FFFF.1) en DCM (3 mi) se agregó TFAA (0.373 mi, 2.64 mmol). Luego de aproximadamente 4 h a temperatura ambiente la mezcla de reacción se concentró in vacuo y purificó mediante HPLC preparativa quiral (Tabla 2, Método 33) para dar 4-((1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4, 3-a]pirazin-1 -il)ciclopen til) butanonit rilo (0.013 g, 15%) (rt = 16.1 min, o = neg) LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.79 min; EM m/z: 323 (M + H) + y 4-((1 R, 3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2, 3-e][1 , 2, 4]triazolo[4, 3-a]pirazin-1 -il)ciclopentil)butanonitrilo (0.010 g, 12%) (rt = 13.7 min, o = neg) LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.79 min; EM m/z: 323 (M + H) + como sólidos.
Método General HHHH: O-alquilación con KOH o NaOH y TBAB A un alcohol (preferiblemente 1 equivalente) se agregó una base acuosa (tal como 50% p/v de KOH o 50% p/v de NaOH, 1-60 equivalentes, preferiblemente 11-24 equivalentes) y un solvente (tal como 1,4-dioxano o THF, preferiblemente 1,4-dioxano) y la mezcla de reacción se calienta a aproximadamente 45-100°C (preferiblemente de manera aproximada 70°C). A ia mezcla de reacción se agregó un haluro de alquilo o mesüato (1-30 equivalentes, preferiblemente 8-16 equivalentes), y TBAB (0.05-2 equivalentes, preferiblemente 0.08-1.6 equivalentes) y se agitó por aproximadamente 8-48 h (preferiblemente de manera aproximada 24H). De manera alternativa, el orden de la adición puede invertirse. En casos donde la reacción no llega a completarse según lo indicado por TLC, LC/EM, o HPLC, la reacción puede volver a someterse a calentamiento a aproximadamente 25-100°C (preferiblemente de manera aproximada 70°C) por aproximadamente 2-48 h (preferiblemente de manera aproximada 8-24 h) con la adición opcional de más base (tal como KOH acuoso 50% p/p o NaOH acuoso 50% p/p, 1-60 equivalentes, preferiblemente 11-24 equivalentes), solvente (como por ejemplo 1,4-dioxano o THF preferiblemente 1,4-dioxano), haluro de alquilo o mesilato (1-30 equivalentes, preferiblemente 8-16 equivalentes), y/o TBAB (0.05-2 equivalentes, preferiblemente 0.08-1.5 equivalentes). Este proceso se repite hasta que la reacción deja de avanzar. Luego de enfriar a temperatura ambiente, se realiza el tratamiento posterior de la reacción usando uno de los siguientes métodos. Método 1: Se agregó un solvente orgánico tal como EtOAc o DCM con la adición opcional de agua o salmuera y las capas se separan. La capa acuosa luego se extrae opcionalmente con solvente orgánico adicional tal como EtOAc o DCM. Las capas orgánicas combinadas opcionalmente se lavan con salmuera o agua, secan sobre MgS04 anhidro o Na2S04, filtran o decantan, y concentran bajo presión reducida. Método 2: Una mezcla de reacción que contiene un precipitado puede filtrarse. Al material filtrado se agregó un solvente orgánico tal como EtOAc o DCM con la adición opcional de agua o salmuera y las capas se separan. La capa acuosa luego se extrae opcionalmente con solvente orgánico adicional tal como EtOAc o DCM. Las capas orgánicas combinadas opcionalmente se lavan con salmuera o agua, secan sobre MgS04 anhidro o Na2S04, filtran o decantan, y concentran bajo presión reducida.
Ilustración del Método General HHHH Preparación No. HHHH.1: 3-(((1 ?,3f?,4S)-3-etil-4-(6-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentiloxi)metil)-5-metilisoxazo! Una mezcla de 3-etil-4-(6-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-6/-/-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 - il)ciclopentanol (0.072 g, 0.179 mmol, Ejemplo No. 35, EtapaH), KOH acuoso (50% p/v 0.118 g, 2.10 mmol) y 1,4-dioxano (0.1 mi) se calentó a aproximadamente 70°C. A la mezcla de reacción se agregó 3-(bromomet¡l)-5-meti!isoxazol (0.063 g, 0.359 mmol, Maybridge) y TBAB (0.004 g, 0.01 mmol) y la mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 24 h. A la mezcla de reacción se agregó 3-(bromometil)-5-met¡lisoxazol (0.063 g, 0.36 mmol, Maybridge) y KOH acuoso (50% p/v 0.118 g, 2.10 mmol) y la agitación se continuó por aproximadamente 24 h. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y se agregaron EtOAc (10 mi) y agua (5 mi). Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (10 mi). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida. El material crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eiuyendo con un gradiente de MeOH al 0-5% en DC para dar 3-(((1 R,3R,4S)-3-etil-4-(6-((2-(trimetilsiHI)etoxi)metil)-6H-pirrolo[2, 3-e][1, 2, 4]triazolo[4, 3-a]pirazin-1 -il)ciclopentHoxi)metil)-5-met¡Usoxazol (0.064 g, 72%): LC/EM (Tabla 1, Método b) R, = 2.58 min; EM m/z: 497 (M + H)\ Método General lili: Formación de un mesilato A una solución de un alcohol (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico tal como DCM, se agregó una base orgánica tal como TEA o base de Hunig (1-4 equivalentes, preferiblemente 2 equivalentes) a aproximadamente 0-40°C (preferiblemente temperatura ambiente) y luego se agregó por goteo a esta temperatura cloruro de mesilo (1-2 equivalentes preferiblemente 1.1 equivalente). En casos donde ia mezcla de reacción se enfría a por debajo de la temperatura ambiente, se agitó a esta temperatura por aproximadamente 1-3 h (preferiblemente de manera aproximada 2 h) y luego opcionalmente se calienta a temperatura ambiente mientras se agitó durante la noche. El producto puede someterse a tratamiento posterior por uno de los siguientes métodos. 1) La mezcla de reacción se concentra. 2) La mezcla de reacción se lavó con NaHC03 acuoso saturado y salmuera, seca sobre MgS04 anhidro, filtra, y concentra.
Ilustración del Método General MU Preparación No. IIII.1: metansu Ifonato de 3-eti l-4-(6-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]t iazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentilo Se agregó cloruro de mesilo (0.067 mi, 0.866 mmol) por goteo a una solución de 3-etil-4-(6-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-6/--pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentanoná (0.316 g, 0.787 mmol, Ejemplo No. 35 Etapa H) y TEA (0.219 mi, 1.57 mmol) en DCM (8 mi), y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. El solvente se eliminó bajo presión reducida y el residuo se purificó mediante cromatografía de columna sobre gel de sílice (0 a 60% EtOAc en DCM) para dar metansulfonato de 3-etil-4-(6-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-6H-pirrolo[2, 3-e][1, 2, 4]triazolo[4, 3-a]pirazin-1 -il)ciclopentilo (0.29 g, 77%) como un sólido amorfo de color blanco: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.53 min; EM m/z 480 (M + H)+.
Método General JJJJ: Desplazamiento de un mesilato, tosilato, o haluro de alquilo con un nucleófilo Un matraz de fondo redondo se carga con un mesilato, tosilato, o haluro de alquilo (preferiblemente 1 equivalente) y un solvente orgánico tal como DMF, DMA, NMP o DMSO (preferiblemente DMF). Al matraz de reacción se agregó la sal de sodio o potasio (preferiblemente la sal de sodio) del nucleófilo como por ejemplo, sin que esto constituya limitación alguna, una azida, cianuro, tioacetato, pirazol y triazol (1-10 equivalentes, preferiblemente 5.0 equivalentes) en porciones. Cuando el nucleófilo no es ya la sal de sodio o potasio, se agregó una base tal como NaH al 60% en aceite mineral (1-10 equivalentes, preferiblemente una cantidad equimolar al nucleófilo utilizarlo). La mezcla se agitó a aproximadamente 10-100°C (preferiblemente temperatura ambiente) por aproximadamente 1-24 h (preferiblemente de manera aproximada 20 h). Si la reacción no se completa según lo indicado por HPLC, LC/EM, o TLC, puede agregarse más nucleófilo y/o base (5-300% de la cantidad original utilizada, preferiblemente 10%) y la reacción se continúa por aproximadamente 0.5-24 h (preferiblemente de manera aproximada 2 h). La reacción se divide entre un solvente orgánico tal como EtOAc o DCM (preferiblemente EtOAc) y agua. Las capas se separan y la solución orgánica se seca sobre MgS0 anhidro o Na2S04, filtra, y concentra bajo presión reducida para dar el compuesto buscado.
Ilustración del Método General JJJJ Preparación No. JJJJ.1: 1 -((1 S,2R,4 )-4-azido-2-etilciclopentil)-6-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-6H-pirroSo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina Un matraz de fondo redondo se cargó con metansulfonaío de 3-etil-4-(6-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentilo (0.83 g, 1.7 mmol, Preparación No. IIII.1) y DMF (7.0 mi). Al matraz de reacción se agregó azida de sodio (0.56 g, 8.6 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 20 h. Se agregó otra porción de azida de sodio (0.056 g, 0.86 mmol) y la reacción se agitó por aproximadamente 2 h. La reacción se dividió entre EtOAc (20 mi) y agua (20 mi). Las capas se separaron y la solución orgánica se secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida para dar 1 -(-4-azido-2-etilciclopentH)-6-((2-(trimetilsi¡il)eto i)metil)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina (0.65 g, 88%) como un aceite de color marrón: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.85 min; EM m/z: 427 (M + H)+.
Método General KKKK: Ciclización de una cetona usando TFAA o PFPAA A una cetona (preferiblemente 1 equivalente) opcionalmente disuelta en un solvente orgánico tal como acetonitrilo o DCM (preferiblemente acetonitrilo) se agregó TFA/TFAA (2-100 equivalentes/10-60 equivalentes, preferiblemente 2 equivalentes/10 equivalentes) o PFPAA (2-30 equivalentes, preferiblemente 10 equivalentes) o ácido 2,2,3,3,3-pentafluoropropanoico/PFPAA (1-10 equivalentes/5-50 equivalentes, preferiblemente 2 equivalentes/10 equivalentes) a aproximadamente 0°C a 50°C (preferiblemente temperatura ambiente). La reacción se calienta y agita a aproximadamente 0°C a aproximadamente 80°C (preferiblemente de manera aproximada 60°C) por aproximadamente 0.5-48 h (preferiblemente de manera aproximada 2-4 h). Puede agregarse TFAA o PFPAA adicional (2-10 equivalentes) para completar la reacción. Se agregó MeOH para neutralizar opcionalmente la reacción. La mezcla de reacción se concentra bajo presión reducida. De manera alternativa, la mezcla cruda puede concentrarse opcionalmente antes de dividirse entre una solución acuosa de una base inorgánica (por ejemplo NaHC03 acuoso o K2C03) y un solvente orgánico (por ejemplo EtOAc o DCM). Las capas se separan y la capa acuosa se extrae adicionalmente con solvente orgánico (como por ejemplo EtOAc y/o DCM). Las capas orgánicas combinadas opcionalmente se lavan con salmuera, secan sobre MgS04 anhidro o Na2S04, filtran, y concentran hasta secar bajo presión reducida.
Ilustración del Método General KKKK Preparación No. KKKK.1: 3-tosiI-8-(2-tosü-2-azaespiro[3.3]heptan-6-il)-3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazina A una solución de 2-(5-tosil-5/--pirrolo[2,3-¿b]pirazin-2-ilamino)-1 -(2-tosil-2-azaespiro[3.3]heptan-6-il)etanona (0.631 g, 1.089 mmol, preparado usando R con ácido 2-tosil-2-azaespiro[3.3]heptan-6-carboxílico [preparado como se describe en J. Org.Chem , 2010, 75, 5941] y trimetilsililo diazometano, S con Ejemplo No. 3 Etapa E, E con TFA) en eCN (5 mi) se agregó PFPAA (2.15 mi, 10.9 mmol). La mezcla se calentó a aproximadamente 60°C por aproximadamente 2 h. La mezcla de reacción se dividió entre DCM (30 mi) y NaHC03 acuoso saturado (50 mi). Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo adicionalmente con DCM (2 x 30 mi). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron hasta secar bajo presión reducida. El material crudo se purificó usando cromatografía instantánea sobre ge) de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc 50-100% en heptano para dar 3-tosil-8-(2-tosil-2-azaespiro[3, 3]heptan-6-il)-3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazina (0.467 g, 76%) como un sólido de color blanco: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.53 min; EM m/z 562 (M+H)\ Método General LLLL: Formación de una bromocetona a partir de una cetona o un aldehido A una cetona o un aldehido (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (DCM o DCE, preferiblemente DCM) a aproximadamente -20 a 20°C (preferiblemente de manera aproximada 0°C), se agregó una base orgánica tal como TEA o DIEA (preferiblemente DIEA, 1-20 equivalentes, preferiblemente 5-10 equivalentes), y luego se agregó trifluorometansulfonató de trimetiisililo (1-8 equivalentes, preferiblemente 4.5 equivalentes). La reacción se agitó a la misma temperatura por aproximadamente 0.5 a 6 h (preferiblemente de manera aproximada 1 h). Se agregó opcionalmente un solvente orgánico adecuado (tal como EtOAc o DCM). Se agregó una solución acuosa (como por ejemplo NaHC03 acuoso saturado o agua). Las capas se separan, la capa acuosa se extrae opcionalmente con más solvente orgánico (como por ejemplo EtOAc o DCM) y la capa orgánica o las capas orgánicas combinadas se secan sobre Na2S04 anhidro o MgS04> filtran, y concentran bajo presión reducida para dar un intermediario enol protegido con TMS. El intermediario se disuelve en un solvente orgánico (DCM o DCE, preferiblemente DCM) a aproximadamente -20 a 60°C (preferiblemente temperatura ambiente) y se agregó una base inorgánica tal como NaHC03 o Na2C03 (preferiblemente NaHC03) 1-20 equivalentes, preferiblemente 4 equivalentes) y NBS (1-3 equivalentes, preferiblemente 1 equivalente). La reacción se agitó a la misma temperatura por aproximadamente 1 - 48 h (preferiblemente de manera aproximada 18 h). Se agregó un solvente orgánico adecuado (tal como EtOAc o DCM) y una solución acuosa (como por ejemplo NaHC03 acuoso saturado o agua), las capas se separan, y la solución orgánica se seca sobre Na2S04 anhidro o MgS04, filtra, y concentra bajo presión reducida.
Ilustración del Método General LLLL Preparación No. LLLL.1: í-butil-(c/s-5-(2-bromoaceíil)-4-metiltetrahidrof u ra n-2-il)meti 1(3,3,3-trif luoroprop¡Isulfonii)carbamato A una solución de (c/s-5-acetil-4-metiltetrahidrofuran-2-il)metil(3,3,3-trifluoropropilsulfonil)carbamato de r-butilo (0.54 g, I.3 mmol, preparado usando .1 de la Preparación No. MMM.1) en DCM (5 mi) a aproximadamente 0°C se agregó DIEA (2.03 mi, II.6 mmol) y trifluorometansulfonato de trimetilsililo (1.06 mi, 5.82 mmol). La reacción se agitó a aproximadamente 0°C por aproximadamente 1 h. Se agregó NaHC03 acuoso saturado (10 mi) y las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con DCM (2 x 10 mi). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida. El residuo se disolvió en DCM (5 mi) y agregaron NaHCOa (0.435 g, 5.17 mmol) y NBS (0.230 g, 1.294 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 18 h. La mezcla de reacción se dividió entre agua (30 mi) y DCM (30 mi). La capa acuosa se extrajo con con DCM (2 x 30 mi). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida. El producto se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-30% de EtOAc en heptano para dar t-but¡l-(cis-5-(2-bromoacetil)-4-met¡ltetrahidrofuran-2-il)metil(3, 3, 3-trifluoroprop¡lsulfonil)carbamato (0.472 g, 73%) como un sólido de color amarillo: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.76 min; EM m/z: 494, 496 (M-H)-.
Método General MMMM: Formación de una cetona a partir de una amida Weinreb A una amida Weinreb (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (por ejemplo DCM, MeCN, 1,4-dioxano o THF, preferiblemente THF) se agregó un reactivo de Grignard o alquillitio (1-10.0 equivalentes, preferiblemente 6 equivalentes) a aproximadamente -30 a 40°C (preferiblemente de manera aproximada -10°C). La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente -30 a 40°C (preferiblemente de manera aproximada -10°C) por aproximadamente 1-24 h (preferiblemente de manera aproximada 5H). La mezcla de reacción se detiene con un ácido acuoso (como por ejemplo HC! acuoso) y luego agua, divide entre un solvente orgánico (tal como Et20, EtOAc o DCM) y agua. Las capas se separan y la capa acuosa se extrae con solvente orgánico adicional y las capas orgánicas combinadas se pueden lavar opcionalmente con salmuera. La capa orgánica opcionalmente se seca sobre Na2S04 anhidro o MgS04, y luego se decanta o filtra antes de concentrarse bajo presión reducida.
Ilustración del Método General MMMM Preparación No. MMMM.1: W-((c/s-5-acetii-4-metiltetrahidrof uran-2-il)metil)-3,3,3-trif luoropropan-1 -sulfonamida A una solución de cs-/V-metoxi-/V,3-d¡metil-5-((3,3,3-tr¡fluoropropilsulfonamido)metil)tetrahidrofurano-2-carboxamida (0.70 g, 1.9 mmol, preparada usando E de la Preparación No. 43 con HCI, K con cloruro de 3,3,3-trifluoropropan-1 -sulfonilo (Matrix), Z con NaOH, H con clorhidrato de N,0-dimetilhidroxilamina) en THF (5 mi) se agregó bromuro de metilmagnesio (3 N en Et20, 3.86 mi, 11.6 mmol) por goteo a aproximadamente -10°C. La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente -10°C por aproximadamente 5 h. Se agregó HCI acuoso (1 N, 9.66 mi, 9.66 mmol) para detener la reacción. La mezcla de reacción se dividió entre agua (10 mi) y DCM (20 m!). Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con DCM (2 x 20 mi). Los extractos orgánicos combinados se concentraron bajo presión reducida. El producto se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc al 0-100% en heptano para dar N-((cis-5-acetil-4-metilteirahidrofuran-2-il)metil)-3,3,3-tr¡fluoropropan-1 -sulfonamida (0.57 g, 93%) como un aceite traslúcido: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.02 min; EM m/z: 318 (M + H) + .
Método General NNNN: Formación de ß-hidroxisulfonamida a partir de una cetona A una metilsulfonamida opcionalmente sustituida (1-8 equivalentes, preferiblemente 1.5 equivalentes) en un solvente orgánico (DCM o THF, preferiblemente THF) a aproximadamente -20 a 20°C (preferiblemente de manera aproximada 0°C), se agregó un reactivo de alquillitio (por ejemplo n-BuLi, f-BuLi o LDA (preferiblemente n-BuL¡, 1-20 equivalentes, preferiblemente 1- 2 equivalentes). La reacción se agitó a aproximadamente -20 a 20°C (preferiblemente de manera aproximada 0°C) por aproximadamente 0.5 - 72 h (preferiblemente de manera aproximada 1H). La solución resultante se agregó por goteo a una solución de cetona (preferiblemente 1.0 equivalentes) en un solvente orgánico (DCM o THF, preferiblemente THF) a aproximadamente -20 a 20°C (preferiblemente de manera aproximada 0-5°C). La reacción se agitó a aproximadamente -20 a 20°C (preferiblemente de manera aproximada 0-5°C) por aproximadamente 1 - 72 h (preferiblemente de manera aproximada 48 h). Se agregó un solvente orgánico adecuado (tal como EtOAc o DCM) y una solución acuosa (como por ejemplo NaHC03 acuoso saturado o agua), las capas se separan, y la solución orgánica se seca sobre Na2S04 anhidro o MgS04, filtra, y concentra bajo presión reducida.
Ilustración del Método General NNNN Preparación No. NNNN.1: 3-eti 1-1 -(morfolinosulfonilmetil)- -(6- ((2-(trimetilsililo)etoxi)metil)-6H-pirroio[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentanol A una solución de 4-(metilsulfonil)morfolina (0.217 g, 1.314 mmol, Preparación No. 41) en THF (4 mi) a aproximadamente 0°C se agregó n-BuLi (2.5 M en hexanos, 0.53 mi, 1.3 mmol). La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente 0°C por aproximadamente 1 h. La solución resultante se agregó por goteo a una solución de 3-etil-4-(6-((2-(trimetilsilil)etoxi)metsl)-6 -/-pirrolo[2 ,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 - il)ciclopentanona (0.350 g, 0.876 mmol, Ejemplo No. 35 Etapa g) en THF (4 m!) a aproximadamente 0°C. La mezcla de reacción se mantuvo a aproximadamente 4°C en un refrigerador por aproximadamente 48 h. La mezcla de reacción se dividió entre agua (5 mi) y DCM (5 mi) Las capas se separaron y la solución acuosa se extrajo con DCM (2 x 5 mi). Los extractos orgánicos combinados se concentraron bajo presión reducida. El producto se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-2% de MeOH/DCM, luego por RP-HPLC (Tabla 1, Método I) para dar 3-etil-1 -(morfolinosulfonilmetil)-4-(6-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-6H-pirrolo[2, 3-e][1 ,2, 4]triazolo[4, 3-a]p¡razin-1 -il)ciclopentano¡ (0.17 g, 34%) como un aceite de color amarillo: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.32 & 2.42 min; EM m/z: 565 (M + H) + .
Método General OOOO: Formación de un carbonato A un alcohol (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (preferiblemente piridina) a aproximadamente -20°C hasta 80°C (preferiblemente temperatura ambiente) se agregó D AP (0.1 - 5 equivalentes, preferiblemente 0.3 equivalentes) y un cloroformiato (1-10 equivalentes, preferiblemente 2 equivalentes). La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente -20°C hasta 80°C (preferiblemente temperatura ambiente) por aproximadamente 1-16 h (preferiblemente de manera aproximada 1 h). La mezcla de reacción se concentra bajo presión reducida o filtra opcionalmente, diluye con un solvente orgánico (preferiblemente EtOAc), lava con agua y una base acuosa (tal como Na2C03 acuoso saturado o NaHC03) o salmuera saturada, se seca sobre Na2S04 anhidro o gS04, filtra, y concentra bajo presión reducida.
Ilustración del Método General OOOO Preparación No. 0000.1: 4-nitrofenilcarbonato de {1 R,3R,4S)-3 et\l-4-(6-tos\\-GH-p rro\o[2,3-e][1 ,2,4]tr azo\o[4,3-a]p\razm- -il)ciclopentilo A una mezcla no racémica enriquecida en (1 ft,3R,4S)-3-ét¡l-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentanol (1.20 g, 2.82 mmol, Ejemplo No. 41, Etapa N) en piridina (10 mi) se agregó DMAP (0.103 g, 0.846 mmol) y cloroformiato de 4-nitrofenilo (0.853 g, 4.23 mmol). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 1 h. La mezcla de reacción se concentró y purificó usando cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con 0-30% de EtOAc en DCM para dar una mezcla no racémica enriquecida en 4-nitrofenilcarbonato de (1R, 3R,4S)-3-etil-4-(6-tosil-6H-pirroío[2, 3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-H)ciclopentilo (0.72 g. 43%): LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.64 min; E M m/z : 591 ( + H)T. Método General PPPP: Formación de un carbamaío de seguido por hidrólisis de sulfonamida A un carbonato (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (preferiblemente 1,4-dioxano) a aproximadamente -20 a 60°C (preferiblemente a temperatura ambiente) se agregó una amina (2-10 equivalentes, preferiblemente 5 equivalentes) y opcionalmente DMAP (0-5 equivalentes, preferiblemente 0 equivalentes). Luego de aproximadamente 1-16 h (preferiblemente de manera aproximada 1 h), se agregó hidróxido de sodio acuoso (1-2 N, preferiblemente 1 N; 1-10 equivalentes, preferiblemente 4 equivalentes). La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente 25-100°C (preferiblemente de manera aproximada 60°C) por aproximadamente 10 min-5 h (preferiblemente de manera aproximada 30 min) y, si la reacción se calentó, enfrió a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se concentra bajo presión reducida o las capas se separan y la capa acuosa se extrae con un solvente orgánico (preferiblemente DCM). Los extractos orgánicos combinados se lavan con agua, una base acuosa (tal como Na2C03 acuoso saturado o NaHC03), o salmuera saturada, seca sobre Na2S04 anhidro o MgS04, filtra, y luego se concentra bajo presión reducida.
Preparación No. PPPP.1: ciclopropilcarbamato de (1 R,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentilo A una mezcla no racémica enriquecida en 4-nitrofenilcarbonato de (1 R,3R,4S)-3-etil-4-(6-tos¡l-6H-pirroio[2 ,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopent¡lo (Ejemplo No. 41 Etapa O, 0.211 g, 0.357 mmol) en 1,4-dioxano (1.5 ml) se agregó cíclopropilamina (0.102 g, 1.79 mmol). Luego de aproximadamente 1 h, se agregó hidróxido de sodio acuoso 1N (1.5 ml, 1.5 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 60°C por aproximadamente 30 min y luego enfrió a temperatura ambiente. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con DCM (3 x 5 mi). Las capas orgánicas combinadas se concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con 0-10% de eOH en EtOAc para dar ciclopropilcarbamato de (1R, 3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2, 3-e][1, 2,4]triazolo[4, 3-aJpirazin-1-¡l)cic¡opentilo (0.085 g, 67%): LC/EM (Tabla 1, Método b) R, = 1.73 min; EM m/z: 355 (M + H) + .
Tabla PPPP.1 Ejemplos preparados a partir de una mezcla no racémica enriquecida en 4-nitrofenilcarbonato de (1 R,3R,4S)- 3-etil-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-s3pirazín-1 -il)ciclopentilo (Ejemplo No. 41 Etapa O) Tabla PPPP.2 Ejemplos preparados a partir de una mezcla no racémica enriquecida en ciclobutilcarbamato de (i S,3R,4S)- 3- etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 - ¡l)ciclopent¡ lo (Ejemplo No. 42 Etapa N) Método General QQQQ: Oxidación de un tioacetato de aiquiSo a un ácido alquilsulfónico A una mezcla del tioacetato de alquilo (preferiblemente 1 equivalente) y ácido fórmico (30-100 equivalentes, preferiblemente 36 equivalentes) se agregó H202 acuoso (-30%, 3-10 equivalentes, preferiblemente 5 equivalentes) por goteo. La reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 1-8 h (preferiblemente de manera aproximada 2H). La reacción se detiene con Na2S203 acuoso saturado y extrae con un solvente orgánico tal como DCM. El extracto orgánico se concentra bajo presión reducida. El residuo resultante opcionalmente se divide entre un solvente orgánico tal como EtOAc y salmuera. El extracto acuoso se concentra bajo presión reducida y el residuo resultante se tritura opcionalmente en un solvente orgánico o mezcla de solventes orgánicos tales como MeOH, DCM o MeOH/DCM (preferiblemente MeOH/DCM) y filtra. El material filtrado se concentra bajo presión reducida y opcionalmente purifica.
Ilustración del Método General QQQQ Preparación No. QQQQ.1: ácido (1 S,3A?,4S)-3-etil-4-(6-íosil-6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentan-1-sulfónico A una mezcla de etantioato de S-(1 S,3R,4S)-3-eíil-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -M)ciclopenti!o (0.28 g, 0.58 mmol, preparado usando P de la Preparación No. 25, Etapa E y DIBAL-H; Mil. y JJJJ con tioacetato de potasio) y ácido fórmico (0.80 mi, 20.8 mmol) se agregó H202 acuoso (-30%, 0.30 mi, 2.9 mmol) por goteo. La reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 2 h. La reacción se detuvo con Na2S203 acuoso saturado (25 mi) y extrajo con DCM (2 x 25 mi). Los extractos combinados se concentraron bajo presión reducida. El residuo resultante se dividió entre EtOAc y salmuera (25 mi de cada uno). El extracto acuoso se concentró bajo presión reducida. El residuo resultante se disolvió parcialmente en MeOH/DCM (1:1, 50 mi), se filtró y concentró bajo presión reducida. El residuo resultante se purificó mediante RP-HPLC (Tabla 1, Método y) para dar ácido (1 S,3R,4S)-3-etH-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4Jtriazolo[4, 3-a]pirazin-1-il)ciclopentan-1-sulfónico (0.058 g, 20%) como un sólido blancuzco: LC/EM (Tabla 1, Método b) t = 1.60 min; EM m/z: 490 (M + H)+.
Método General RRRR: Ciclización de una diamina con bromuro de cianógeno A una mezcla de una diamina sustituida (1 equivalente) en un solvente orgánico (por ejemplo, MeOH o EtOH, preferiblemente MeOH) se agregó bromuro de cianógeno o bromuro de cianógeno en MeCN (1-10 equivalentes, preferiblemente 8.0 equivalentes). La mezcla se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 1-24 h (preferiblemente de manera aproximada 16 h) y el solvente se eliminó bajo presión reducida.
Ilustración del Método General RRRR Preparación No. RRRR.1*: N-((1 S,3S,4R)-3-(2-annino-6-tosilimidazo[4,5-d]pirrolo[2,3-0]piridin-1 (6H)-il)-4-etilciclopentil)ciclopropansulfonamida A una solución de ?/-((1 S,3S,4/R)-3-(5-amino-1 -tosi H-pirrolo[2,3-6]piridin-4-ilamino)-4-etilciclopentil) ciclopropansulfonamida (0.200 g, 0.301 mmol, Ejemplo No. 23 Etapa I) en MeOH (3.0 mi) se agregó bromuro de cianógeno (5 M en eCN, 0.482 mi, 2.41 mmol) por goteo. La reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 16 h. El solvente se eliminó bajo presión reducida y el residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-10% de MeOH en DCM para dar N-((1 S,3S,4R)-3-(2-amino-6-tosilimidazo[4,5-d]pirrolo[2,3-b]piridin-1 (6H)-il)-4-etilcíclopentil)ciclopropansulfonamida (0.11 g, 67%) como un sólido de color marrón: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.00 min; EM m/z. 543 (M + H) + .
Método General SSSS: Ciclización de una diamina con NaN02 Una mezcla de una diamina (preferiblemente 1 equivalente) y una solución acuosa ácida (como por ejemplo HCI 6 M en agua) se enfría a aproximadamente 0°C. Luego se agregó una solución acuosa de NaN02 (1-5 equivalentes, preferiblemente 1-2 equivalentes) y la reacción se mantiene a aproximadamente 0°C por aproximadamente 1-6 h (preferiblemente de manera aproximada 2-3 h) y luego se calienta lentamente a temperatura ambiente o se dejó calentar lentamente a temperatura ambiente inmediatamente luego de la adición. Luego de aproximadamente 1-18 h (preferiblemente de manera aproximada 12-16 h), la reacción se filtra, lava con agua, para recoger el sólido.
Ilustración del Método General SSSS Preparación No. SSSS.1*: Af-((1 S,3R,4S)-Z-et'ü-4-(6-tosilpirrolo[2,3-b][1,2.3]triazolo[4,5-d]piridin-1(6H)-il)ciclopentil)ciclopropansulfonamida Una mezcla de A/-((1S,3S,4R)-3-(5-amino-1 -tos i 1-1 H-pirrolo[2,3-/t>]pir¡d¡n-4-ilamino)-4-etilciclopentil)c¡clopropansulfonamida (0.15 g, 0.23 mmol, Ejemplo No. 23 Etapa I) y HCI acuoso (6 N, 1.0 mi, 6.00 mmo!) se enfrió a aproximadamente 0°C. Se agregó una solución de NaN02 (0.022 g, 0.32 mmol) en agua (0.2 mi) y la reacción se agitó a aproximadamente 0°C. Luego de aproximadamente 3 h, la reacción se calentó a temperatura ambiente. Luego de aproximadamente 15.5 h, la reacción se filtró para recoger el sólido de color amarillo mediante filtración al vacío, lavó con agua (10 mi). El sólido crudo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice eluyendo con EtOAc al 0-20% en DCM para dar N-((1 S, 3R,4S)-3-etil-4-(6-tosilpirrolo[2, 3-b][1,2.3]triazoio[4, 5-d]piridin-1 (6H)-il)ciclopent¡l)ciclopropansulfonamida (0.088 g, 74%): LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.44 min; EM m/z: 529 (M + H) + .
Método General TTTT: Formación de una escuaramida Una mezcla de una 3-amino-4-metoxic¡clobut-3-en-1 ,2-diona (preferiblemente 1 equivalente), una amina (1-5 equivalentes, preferiblemente 2 equivalentes), una base orgánica tal como DIEA o TEA (1-10 equivalentes, preferiblemente 5-6 equivalentes de DIEA), y un solvente orgánico adecuado como por ejemplo MeOH o DCE (preferiblemente MeOH) se calienta a aproximadamente 40 a 65°C (preferiblemente de manera aproximada 50°C). Luego de aproximadamente 1-24 h (preferiblemente de manera aproximada 12-18 h), la reacción se filtra, lava con agua, para recoger el sólido.
Ilustración del Método General TTTT Preparación No. TTTT.1*: 3-((1 S,3/?,4S)-3-etil-4-(6-tosil-6«- pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1- il)ciclopent¡lam¡no)-4-(3,3,3-trifluoropropilamino)cic!obut-3- en-1 ,2-diona Una mezcla de 3-((1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentilamino)-4-metoxiciclobut-3-en-1 ,2-diona (0.090 g, 0.17 mmol, Preparación No. 29), clorhidrato de 3,3,3-trifluoropropan-1 -amina (0.050 g, 0.337 mmol, Fluorochem Limited), DIEA (0.18 mi, 1.0 mmol) y MeOH (1.2 mi) se calentó a aproximadamente 50°C. Luego de aproximadamente 18 h, la reacción se enfrió a temperatura ambiente. El sólido se recogió mediante filtrado al vacío, lavó con MeOH (aproximadamente 3-5 mi), y luego secó en un horno de vacío a aproximadamente 60°C para dar 3-((1 S, 3R, 4S)-3-etil-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2, 3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]piraz¡n-1 -il)c¡clopentilamino)-4-(3, 3, 3-tri fluoropropilam i no)ciclobut-3-en-1 ,2-diona (0.083 g, 79%) como un sólido blancuzco: LC/E (Tabla 1, Método a) Rt = 2.27 min; EM m/z: 616 (M + H) + .
Método General UUUU: Reducción de una azida a una amina A una solución de una azida (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico adecuado (tal como THF o 1,4-dioxano, preferiblemente THF) y agua se agregó trifenilfosfina (1-2 equivalentes, preferiblemente 1.2 equivalentes). La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente temperatura ambiente 8Ó°C (preferiblemente de manera aproximada 45°C) por aproximadamente 1-24 h (preferiblemente de manera aproximada 7 h). Si se calienta, la mezcla de reacción se enfría a temperatura ambiente. Se realiza el tratamiento posterior de la mezcla de reacción usando uno de los siguientes métodos. Método 1. La mezcla de reacción se diluye en un solvente orgánico (tal como DCM o EtOAc) y agrega agua. Las capas se separan y la solución orgánica se lavó opcionalmente con agua y/o salmuera, seca sobre MgS04 anhidro o Na2S04, filtra, y el solvente se eliminó bajo presión reducida. Método 2. La mezcla de reacción se concentra bajo presión reducida.
Ilustración del Método General UUUU Preparación No. UUUU.1 : 3-etil-4-(6-((2- (trimetilsilil)etoxi)metil)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentanamina Un matraz de fondo redondo se cargó con 1 -(-4-azido-2-etilciclopentil)-6-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]piraz¡na (0.650 g, 1.52 mmol, preparado usando D de la Preparación No. 25 con NaOH, KK, P con NaBH4, lili, JJJJ con NaN3), THF (8.0 mi), y agua (1.6 mi). Al matraz se agregó trifenilfosfina (0.480 g, 1.83 mmol). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 45°C por aproximadamente 7 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y agregaron EtOAc (20 ml) y agua (15 mi).
Las capas se separaron y la solución orgánica se secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida para dar un aceite que solidificó al dejarse en reposo. El material crudo se purificó mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 1-10% DCM/MeOH/DEA (900:90:10) en DCM. Las fracciones que contenían producto se combinaron y concentraron bajo presión reducida para dar un aceite que luego se secó en una bomba de vacío durante la noche para dar 3-etil-4-(6-((2-(trimetilsiHI)etoxi)metil)-6H-pirrolo[2,3-e][1, 2, 4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-H)c¡clopentanamina como un aceite pegajoso (0.49 g, 80%): LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 1.85 min; EM m/z 401 (M + H) + .
Método General VVVV: Formación de una cetona a partir de un haluro de heteroarilo.
A una solución de un haluro de heteroarilo (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (por ejemplo THF) a aproximadamente -100°C a 0°C (preferiblemente de manera aproximada -78°C) se agregó una base de alquillitio (1-2 equivalentes) (preferiblemente sec-butillitio, 1.3 equivalentes) por goteo. La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente -100°C a 0°C (preferiblemente de manera aproximada -78°C) por aproximadamente 15 min hasta 5 h (preferiblemente de manera aproximada 1H). Se agregó una solución de un agente de acilación (como por ejemplo un cloruro de ácido, amida Weinréb o acilimidazol por ejemplo, preferiblemente un cloruro de ácido, 1-3 equivalentes, preferiblemente 1.5 equivalentes). La mezcla de reacción se dejó alcanzar temperatura ambiente y agregó agua. Las capas se separaron y la capa acuosa luego se extrajo con un solvente orgánico tal como DCM o EtOAc. Las capas orgánicas combinadas luego se lavan con agua y/o salmuera, secan sobre gS0 anhidro o NaS04, filtran y concentran bajo presión reducida.
Ilustración del Método General VVVV: Preparación No. VVVV.1: 4-(2-(5-cloro-1-(triisopropilsilii)-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il)-2-oxoetil)pi pe ridin-1 -carboxilato de ferc-butilo A una solución de 5-cloro-1-(triisopropilsilil)-1 H-p i rro I o 2 , 3 -¿>]piridina (0.338 g, 1.09 mmol, Adesis) en THF (5.5 ml) a aproximadamente -78°C se agregó sec-butillitio (1.015 ml, 1.421 mmol) por goteo. mezcla de reacción se agitó aproximadamente -78°C por aproximadamente 1 h, luego se agregó una suspensión de 4-(2-cloro-2-oxoet¡l)piperid|n-1 -carboxilato de ferc-butilo (0.429 g, 1.64 mmol, Preparación No. WWWW.1) en THF (2 ml). La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente -78°C por aproximadamente 1 h y luego se dejó alcanzar la temperatura ambiente. Se agregó agua (5 mi) y el producto se extrajo con DCM (3 x 10 mi). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera y secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida. El material crudo se purificó mediante cromatografía sobre ge! de sílice eluyendo con 0-30% de EtOAc en heptano para dar 4-(2-(5-cloro-1 -(triisopropils¡IH)-1 H- irrolo[2, 3-b]piridin-4-il)-2-oxoet¡l)piper¡din-1 -carboxilato de tere-butilo (0.147 g, 25%) como un aceite incoloro: LC/EM (Tabla 1, Método r) Rt = 3.97 min; EM m/z: 534/536 ( + H) + Método General WWWW: Formación de un cloruro de ácido.
A una solución de un ácido carboxílico (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (por ejemplo DCM o DCE, preferiblemente DCM) se agregó cloruro de oxalilo (1-5 equivalentes, preferiblemente 1-2 equivalentes) y N,N-dimetilformamida ( 0.05-0.5 equivalentes, preferiblemente 0.1 equivalente). La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente 0 a 50°C (preferiblemente temperatura ambiente) por aproximadamente 30 min hasta 15 h (preferiblemente 3 h). El solvente se eliminó bajo presión reducida y el residuo se usó en la siguiente Etapa sin purificación adicional.
Ilustración del Método General WWWW: Preparación No. WWWW.1: 4-(2-cloro-2-oxoetil)piperidin-1 -carboxilato de ferc-butilo A una solución de ácido 2-(1 -(ferc-butoxicarbonil)piperidin--4-il) acético (3.84 g, 15.78 mmol) (preparado usando M a partir de 2-(piperidin-4-il)acetato de etilo (Oakwood), Z ) en DCM (79 mi) a temperatura ambiente se agregaron cloruro de oxalilo (1.658 mi, 18.94 mmol) y DMF (0.115 g, 1.58 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 3 h. El solvente se eliminó bajo presión reducida para dar 4-(2-cloro-2-oxoetH)piper¡din-T-carboxilato de tere-butilo (4.13 g, 100%) como un sólido de color amarillo claro. El producto se usó en la siguiente Etapa sin purificación adicional.
Método General XXXX: Formación de una hidrazona.
A una mezcla de una cetona (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (preferiblemente EtOH) se agregó una hidracina (5-100 equivalentes, preferiblemente 45-55 equivalentes) y ácido acético (1-10 equivalentes, preferiblemente 4-6 equivalentes). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente hasta temperatura de reflujo (preferiblemente a reflujo) por aproximadamente 1-24 h (preferiblemente de manera aproximada 16 h). El solvente se eliminó bajo presión reducida y el material crudo se recogió en un solvente orgánico (tal como DCM) y secó sobre MgS04 anhidro o NaS04. El solvente se eliminó bajo presión reducida.
Ilustración del Método General XXXX: Preparación No. XXXX.1: 4-(2-(5-cloro-1 H-pirrolo[2,3-f>]pindin-4-il)-2-hidrazonoetil)piperidin-1 -carboxilato de ferc-butilo A una suspensión de 4-(2-(5-cloro-1 -(triisopropilsilil)-l H-pirrolo[2 ,3-£>]pirid in-4-il)-2-oxoetil)piperid i n-1 -carboxilato de rere-butilo (1.00 g, 1.87 mmol) en EtOH (6.4 mi) se agregaron hidracina anhidra (2.94 mi, 94.0 mmol) y AcOH (0.536 mi, 9.36 mmol). La mezcla de reacción se agitó a reflujo por aproximadamente 16 h. El solvente se eliminó bajo presión reducida y el material crudo se recogió en DCM y secó sobre MgS04 anhidro. El solvente se eliminó y agregó DCM (3 mi). El sólido se retiró mediante filtración y el material filtrado se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con 0-10% de MeOH en DCM para dar 4-(2-(5-cloro-1 H-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il)-2-hidrazonoetil)piperidin-1 -carboxilato de tere-butilo (0.324 g, 44%) como un sólido de color blanco que consiste en una mezcla 1/1 de isómeros £/Z: LC/EM (Tabla 1, Método r) Rt = 1.46 y 1.53 min; EM m/z: 392/394 y 392/394 (M + H) + .
Método General YYYY: Ciclización con un a-haloaldehído A un a-haloaldehído (1-20 equivalentes, preferiblemente 1.5 equivalentes) y una 2-amino-5H-pirrolo[2,3-ó]pirazina protegida (preferiblemente 1 equivalente) se agregó opcionalmente un solvente orgánico tal como DCE, DMF, 1,4-dioxano, EtOH, n-butanol, o tolueno (preferiblemente r?-butanol o 1,4-dioxano) con o sin un catalizador ácido como por ejemplo TsOH o ácido sulfúrico (0.05-0.2 equivalentes). La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente temperatura ambiente -150°C (preferiblemente de manera aproximada 90°C) por aproximadamente 30 min-72 h (preferiblemente de manera aproximada 48 h). Opcionalmente la mezcla de reacción puede someterse a calentamiento por microondas a aproximadamente 100-150°C (preferiblemente de manera aproximada 13C°C) por aproximadamente 30 min-15 h (preferiblemente de manera aproximada 9 h). En casos donde la reacción no llega a completarse según lo indicado por TLC, LC/EM, o HPLC, puede agregarse una porción adicional o porciones de un a-haloaldehído (1-20 equivalentes, preferiblemente 2.5 equivalentes) en un solvente orgánico tal como 1,4-dioxano y la reacción se continúa a aproximadamente temperatura ambiente -150°C (preferiblemente de manera aproximada 125°C). Los volátiles se eliminaron bajo presión reducida. Opcionalmente la mezcia cruda se diluyó con agua, NH4CI acuoso, o NaHC03 acuoso. El producto se puede aislar mediante filtración o puede agregarse un solvente orgánico (por ejemplo, EtOAc o DCM). Las capas se separan y la capa acuosa puede extraerse adicionalmente con un solvente orgánico (tal como EtOAc y/o DCM). Las capas orgánicas combinadas opcionalmente se lavan con soluciones acuosas adicionales como por ejemplo NH4CI acuoso, NaHC03 acuoso, agua, y/o salmuera, secan sobre Na2S04 anhidro o MgS0 , filtran, y concentran hasta secar bajo presión reducida.
Ilustración del Método General YYYY Preparación No. YYYY.1: 3-tosil-3H-imidazo[1 ,2-a]pirro!o[2,3-e]pirazin-8-carboxilato de etilo Una solución de 2-cloro-3-oxopropanoato de etilo (1.60 g, 7.65 mmol, preparado como se describe en US2009005359A1 ) y 1,4-dioxano (10.0 mi) se agregó a 5-tosii-5H-pirrolo[3.2-£>]pirazin-2-amina (1.45 g, 5.03 mmol, Preparación No. E.1.1) bajo nitrógeno. Se agregó butan-1-ol anhidro (30.0 mi), conectó un condensador de reflujo, y selló el sistema. Luego de aproximadamente 30 min, la mezcla se calentó a aproximadamente 80°C. La solución se dejó enfriar a temperatura ambiente. Se agregó una solución de 2-cloro-3-oxopropanoato de etilo (2.78 g, 13.3 mmol) y 1,4-dioxano (5 mi). Luego de aproximadamente 30 min, la mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 80°C. Luego de aproximadamente 30 min, la mezcla se calentó a aproximadamente 125°C. Luego de aproximadamente 48 h, la solución de color marrón se dejó enfriar a temperatura ambiente. Los volátiles se eliminaron bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 5-50% EtOAc en heptano para dar 3-tosil-3H-imidazo[1 , 2-a]pirrolo[2, 3-e]pirazin-8-carboxilato de etilo (1.16 g, 60%): LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.52 min; EM m/z 385 (M + H)\ Método General ZZZZ: Ciclización con SOCI2 A la amida, urea, hidrazida, o cetona (preferiblemente 1 equivalente), pura o como una solución en un solvente orgánico tal como 1,4-dioxano, DCE, o tolueno (preferiblemente 1,4-dioxano), opcionalmente con un cosolvente regulador como por ejemplo piridina o TEA (preferiblemente TEA) se agregó por goteo SOCI2 (1.3-200 equivalentes, preferiblemente 3 equivalentes) puro o como una solución en un solvente orgánico tal como 1,4-dioxano, DCE, o tolueno. Opcionalmente, el matraz de reacción se enfrió a aproximadamente -10 a 25°C (preferiblemente de manera aproximada 0°C) durante la adición. De manera alternativa, el orden de la adición puede invertirse. La mezcla de reacción se calienta a aproximadamente 30 a 100°C (preferiblemente de manera aproximada 80°C) por aproximadamente 0.5 a 24 h (preferiblemente de manera aproximada 2 h). La mezcla de reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente. Los volátiles se eliminaron opcionalmente bajo presión reducida y agregó un solvente orgánico tal como DCM, 1,4-dioxano, o EtOAc (preferiblemente EtOAc). La capa orgánica se lavó con una solución acuosa como por ejemplo HCI acuoso, NaOH acuoso, NaHCOg acuoso, NH4CI acuoso, Na3C03 acuoso, o agua (preferiblemente Na2C03 acuoso), con enfriamiento opcional, y el producto se aisló usando uno o más de los Métodos de Purificación descritos antes. Opcionalmente, puede llevarse a cabo la eliminación consecutiva de grupos protectores usando los Métodos Generales que se han mencionado.
Preparación No. ZZZZ.1: (írans-4-((8H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)metit)ciclohexil)metilcarbamato de íerc-butilo Se agregó cloruro de tionilo (0.030 mi, 0.41 mmol ) por goteo a una solución de (rrans-4-(2-oxo-2-(2-(5-tosil-5 -/-pirrolo[2,3-ft]pirazin-2-il)hidrazinil)etil)ciclohexil)metii-carbamato de rere-butilo (0.127 g, 0.228 mmol, preparado usando a partir de clorhidrato de ácido rrans-(4-aminometilciciohexil)acético [AstaTech], H del Ejemplo No. 1, Etapa D, HATU, TEA), TEA (0.160 mi, 1.15 mmol), y 1,4-dioxano (2.3 mi) bajo nitrógeno. Se conectó un condensador de reflujo y la mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 80°C. Luego de aproximadamente 2 h, la solución se enfrió a temperatura ambiente y agregó Na2C03 acuoso (2 M, 3.4 mi, 6.8 mmol) y la mezcla bifásica se calentó a aproximadamente 80°C. Luego de aproximadamente 2 h, se agregó NaOH acuoso (2 M, 0.570 mi, 1.14 mmol) debido a la baja tasa de desprotección. Luego de aproximadamente 17 h, la mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente. La solución de reacción se diluyó con agua (5 mi) y luego se extrajo con EtOAc (2 x 10 mi). Los orgánicos combinados se secaron sobre Na2S04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 2-8% MeOH en DCM para dar (trans-4-((6H-pirrolo[2, 3-e][1,2, 4]triazolo[4, 3-a]pirazin-1 -il)metil)ciclohexil)metilcarbamato de tere-butilo (0.0565 g, 63%): LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.85 min; EM m/z: 385 (M + H) + .
Método General AAAAA: Formación de un ácido o éster carboxílico a partir de un haluro a partir de arilo Un haluro de arilo o heteroarilo (preferiblemente 1 equivalente) se disolvió o suspendió en un solvente orgánico tal como DMF, 1,4-dioxano, THF, Et20, o tolueno (preferiblemente DMF o THF). El haluro puede transmetalarse usando una base como n-, t-, o sec-butillitio (1-3 equivalentes) o un reactivo de Grignard como por ejemplo bromuro de isopropilmagnesio (1-3 equivalentes) y luego se atrapa con C02 para dar el ácido carboxílico luego del tratamiento posterior ácido. De manera alternativa, la solución del haluro de arilo o heteroarilo se puede tratar con una base tal como Cs2C03l K2C03, o TEA (1-10 equivalentes, preferiblemente TEA, 2 equivalentes). Opcionalmente, se agregó MeOH, (1-200 equivalentes, preferiblemente 50 equivalentes). Se agregó una fuente de paladio como por ejemplo aducto [1 , 1 '-bis(difenilfosf¡no)ferrocen]-dicloropaladio(ll)-CH2CI2, [1,1'-bis(difenilfosfino)ferrocen]-dicloropaladio(ll), bis(trifenilfosfin)dicloropaladio, o tetrakis(trifenilfosfinpaladio(0) (0.02 - 1 equivalente, preferiblemente aducto [1 , 1 '-bis(difenilfosfino)ferrocen]-dicloropaladio(ll)-CH2CI2, 0.1 equivalente). La mezcla se colocó bajo una atmósfera de CO y luego calentó a aproximadamente 40-120°C (preferiblemente de manera aproximada 100°C) por aproximadamente 0.5-24 h (preferiblemente de manera aproximada 4.5 h). La reacción opcionalmente se neutralizó usando metóxido de sodio o NaOH acuoso (1-100 equivalentes) y agregó un solvente orgánico (por ejemplo, EtOAc o DCM). Las capas se separan y la capa acuosa puede extraerse adicionalmente con un solvente orgánico (tal como EtOAc y/o DCM). Las capas orgánicas combinadas opcionalmente se lavan con soluciones acuosas adicionales como por ejemplo salmuera, secan sobre Na2S0 anhidro o MgS04, filtran, y concentran hasta secar bajo presión reducida.
Ilustración del Método General AAAAA Preparación No. AAAAA.1: 6-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-6W-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]tr¡azolo[4,3-a]pirazin-8-carboxiIaío de metilo A una solución de 8-yodo-6-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina (0.050 g, 0.12 mmol, preparado usando KK de la Preparación No. GGG.1.1 y NaH), TEA (0.034 mi, 0.24 mmol), MeOH (0.25 mi, 6.2 mmol), y DMF (0.6 mi) purgada con nitrógeno se agregó [1,1'-bis(difenilfosfino)ferrocen]dicloropaladio(ll) (0.0098 g, 0.012 mmol). La mezcla se purgó con CO y conectó un balón de CO al matraz de reacción. La mezcla se calentó a aproximadamente 100°C. Luego de aproximadamente 4.5 h, la solución se dejó enfriar a temperatura ambiente. Se agregó agua (5 mi) y la mezcla se extrajo con EtOAc (2 x 10 mi). Los orgánicos combinados se secaron sobre Na2S04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida. El material crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 25-75% de EtOAc/heptano a lo largo de 30 min para dar 6-((2-(tr¡metHsilil)etox¡)metil)-6H-p¡rrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-8-carboxilato de metilo (0.0311 g, 74%): LC/EM (Tabla 1, Método n) R, = 0.74 min; EM m/z: 348 (M + H) + .
Método General BBBBB: Ciclización con un ortoéster A un ortoéster (1-20 equivalentes, preferiblemente 10 equivalentes) y una 2-hidrazinil-5-/-pirrolo[2,3-6]pirazina protegida (preferiblemente 1 equivalente) se agregó opcionalmente un solvente orgánico como por ejemplo DCE, DMF, 1,4-dioxano, o tolueno (preferiblemente DMF) con o sin un catalizador ácido como por ejemplo TsOH o TFA (0.05-0.2 equivalentes). La mezcla puede dejarse a temperatura ambiente o calentarse a aproximadamente 30-100°C (preferiblemente de manera aproximada 100°C) por aproximadamente 0.5-24 h (preferiblemente de manera aproximada 17H). Los volátiles se pueden eliminar bajo presión reducida. Opcionalmente, la mezcla cruda se puede diluir con agua, NH4CI acuoso, o NaHC03 acuoso. El producto se puede aislar mediante filtración y puede agregarse un solvente orgánico (por ejemplo, EtOAc o DCM). De manera alternativa, puede agregarse un solvente orgánico directamente a la mezcla acuosa. Las capas se separan y la capa acuosa puede extraerse adicionalmente con un solvente orgánico (tal como EtOAc y/o DCM). Las capas orgánicas combinadas opcionalmente se lavan con soluciones acuosas adicionales como por ejemplo NH4CI acuoso, NaHC03 acuoso, agua, y/o salmuera, secan sobre Na2S04 anhidro o MgS04, filtran, y concentran hasta secar bajo presión reducida.
Ilustración del Método General BBBBB Preparación No. BBBBB.1: 6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina Se agregó ortoformiato de trietilo (76.0 mi, 456 mmol) a una mezcla de 2-h¡drazinil-5-tosil-5--p¡rrolo[2,3-jb]p¡razina (13.8 g, 45.4 mmol, Ejemplo No. 1, Etapa D) y DMF (45 mi) bajo nitrógeno. Se conectó un condensador de reflujo y la mezcla se calentó a aproximadamente 100°C. Luego de aproximadamente 17 h, la solución se dejó enfriar a temperatura ambiente. Los volátiles se eliminaron bajo presión reducida. Se formó una suspensión del residuo en agua (100 mi) y luego filtró, enjuagó con agua. La fase acuosa se extrajo con EtOAc (200 mi). Los orgánicos se secaron sobre Na2S04 anhidro, filtraron, y concentraron, El material se combinó con el precipitado y luego purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-5% de MeOH en DCM para dar 6-tosil-6H-pirrolo[2, 3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina (10.4 g, 73%): LC/EM (Tabla 1, Método n) Rt = 0.59 min; EM m/z 314 (M + H)*.
Método General CCCCC: Acoplamiento de Stille de un haluro de arilo o heteroarilo A una solución desgasificada de un estanano de afilo, heteroarilo, o vinilo (preferiblemente 1.3 equivalentes) y un haluro de arilo, heteroarilo o alquenilo (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico tal como DMF, 1,4-dioxano, o tolueno (preferiblemente DMF) puede agregarse una base tal como Cs2C03, K2C03, o TEA (1-10 equivalentes). Opcionalmente, pueden agregarse aditivos como por ejemplo LiCI (1-10 equivalentes, preferiblemente 3 equivalentes), CsF (1-10 equivalentes, preferiblemente 1.5 equivalentes), y/o Cul (0.05-0.5 equivalentes, preferiblemente 0.2 equivalentes). Se agregó una fuente de paladio(O) como por ejemplo tetrakis(trifenilfosfina)paladio(0), bis(dibencilidenacetone)paladio o una fuente de paladio(ll) como por ejemplo cloruro de bis(tr¡fenilfosfina)paladio(l I) o acetato de paladio (0.01-0.2 equivalentes, preferiblemente tetra kis(trifenilfosfina)pal adió (0), preferiblemente 0.1 equivalente). La mezcla se calienta a aproximadamente 40 a 150°C (preferiblemente de ma era aproximada 80°C) térmicamente o usando un microondas por aproximadamente 0.5 a 72 h (preferiblemente de manera aproximada 4 h). La solución se enfrió a temperatura ambiente y los materiales volátiles pueden eliminarse bajo presión reducida y la mezcla cruda se diluyó con agua, NH4CI acuoso, NaHC03 acuoso y un solvente orgánico tal como EtOAc o DCM. Si un sólido se encuentra presente, la mezcla de reacción resultante se filtró para eliminarlo. Las fases resultantes del material filtrado se separan y la capa acuosa puede extraerse con solvente orgánico adicional. Las capas orgánicas combinadas opcionalmente se lavan con soluciones acuosas adicionales como por ejemplo salmuera, luego secan sobre Na2S04 anhidro o MgS04, filtran, y concentran hasta secar bajo presión reducida. Ilustración del Método General CCCCC Preparación No. CCCCC.1. 8-(2-(4-meti!piperazin-1 -il)pirirnidin-4-il)-6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina Un frasco que contenía 8-bromo-6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina (0.030 g, 0.076 mmol, preparado usando D de la Preparación No. BBBBB.1 y NaOH, GGG.1 con NBS, K.1 con TsCI y NaH), 2-(4-metilpiperazin-1 -il)-4-(tributilestanil)pirimidina (0.054 g, 0.12 mmol, Preparación No. 39), LiCI (0.010 g, 0.24 mmol), Cul (0.003 g, 0.02 mmol), CsF (0.017 g, 0.12 mmol), y refra/(/s(tr¡fen¡lfosfina)palad¡o(0) (0.009 g, 0.008 mmol) bajo nitrógeno se evacuó y luego se llenó con nitrógeno. Se agregó 1,4-dioxano (0.5 mi) y burbujeó nitrógeno a través de la mezcla por aproximadamente 30 min. El matraz de reacción se selló y la mezcla se calentó a aproximadamente 80°C.
Luego de aproximadamente 4 h, la mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente. La mezcla se diluyó con agua (5 mi) y EtOAc (5 mi) y luego filtró a través de un filtro de jeringa. Las capas se separaron y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (5 mi). Los orgánicos combinados se concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-10% de MeOH en DCM a lo largo de 40 min para dar 8-(2-(4-metilpiperazin-1 -H)pirimidin-4-il)-6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]tr¡azolo[4,3-a]pirazina (0.026 g, 69%): LC/EM (Tabla 1, Método n) R, = 0.56 min; EM m/z 490 (M + H) + . Método General DDDDD: Desprotección de una amina protegida con Cbz usando un silano A una solución de amina protegida con Cbz (preferiblemente 1 equivalente) y un silano (por ejemplo trietilsilano, ¿-BuMe2SiH (preferiblemente trietilsilano, 10-500 equivalentes, preferiblemente 100 equivalentes)) se agregó una base orgánica tal como TEA o DIEA (preferiblemente TEA, 0.1-10 equivalentes, preferiblemente 0.2 equivalentes), y un catalizador de paladio (por ejemplo cloruro de paladio (II), acetato de paladio (II), tris(bencilidenacetona)dipaladio(0), bis(acetato)trifenilfosfinpaladio(ll), o diclorobis(trifenilfosfina)paladio(l I); preferiblemente cloruro de paladio(ll), 0.01-0.20 equivalentes, preferiblemente 0.1 equivalente). La reacción se calienta a aproximadamente 40 a 180°C (preferiblemente de manera aproximada 120°C) por aproximadamente 1 a 48 h (preferiblemente de manera aproximada 8 H). El catalizador se eliminó mediante filtración y el material filtrado se concentró bajo presión reducida. La mezcla de reacción opcionalmente se sometió a tratamiento posterior agregando un solvente orgánico adecuado (tal como EtOAc o DC ) y agua. Las capas se separan, y la solución orgánica se seca sobre Na2S04 anhidro o MgS04l filtra, y concentra bajo presión reducida para dar el compuesto buscado.
Ilustración del Método General DDDDD Preparación No. DDDDD.1: 8-(piperidin-4-il)-3-((2- (trimetilsilil)etoxi)metil)-3H-imidazo[1,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazina Una solución de 4-(3-((2-(trimetilsil¡l)etoxi)metil)-3/T'-imidazo[1 ,2-a]pi rrolo[2,3-e]p i razin-8-il)piperidin-1 - carboxilato de bencilo (0.580 g, 1.15 mmol, preparado usando R a partir de ácido 1 -(benciloxicarbonil)piperidin-4-carboxílico (Matrix), S del Ejemplo No. 3 Etapa E, E con TFA, KKKK con PFPAA, D con NaOH , KK), TEA (0.03 mi, 0.229 mmol), cloruro de paladio(ll) (0.020 g, 0.115 mmol) en trietilsilano (18.3 mi, 115 mmol) se calentó a aproximadamente 120°C por aproximadamente 8 h. El catalizador se retiró mediante filtración y el material filtrado se concentró bajo presión reducida. El producto se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-10% (90:9:1) (MeOH/DCM/DEA) en DCM para dar 8-(piperidin-4-il)-3-((2-(trimetils¡HI)etoxi)metil)-3H-¡m¡dazo[1 ,2-a]p¡rrolo[2, 3-ejpirazina (0.234 g, 55%) como un aceite de color marrón: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 1.93 min; EM m/z: 372 (M + H) + .
Método General EEEEE: Formación de una guanidina A una amina (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (por ejemplo DMF, MeCN, 1,4-dioxano o THF, preferiblemente DMF) se agregó una base acuosa (por ejemplo Na2C03 acuoso, NaOH, K2C03 o NaHC03; (preferiblemente Na2C03i 2-20 equivalentes, preferiblemente 2-10 equivalentes)) o una base orgánica tal como TEA o DIEA (preferiblemente DIEA, 1-5 equivalentes, preferiblemente 4 equivalentes) y agregó clorhidrato de /-/-pirazol-1 -carboximidamida (1-10.0 equivalentes, preferiblemente 3 equivalentes). La reacción se agitó a aproximadamente 10-40°C (preferiblemente temperatura ambiente) por aproximadamente 2- 90 h (preferiblemente de manera aproximada 72 h) y sometió a tratamiento posterior usando uno de los siguientes métodos. Método 1: Se agregó un solvente orgánico (tal como Et20, EtOAc o DCM) y agua y las capas se separan. La capa acuosa se extrae con solvente orgánico adicional y las capas orgánicas combinadas se pueden lavar opcionalmente con salmuera, secar sobre Na2SO„ anhidro o MgS04, y luego decantar o filtrar antes de concentrarse bajo presión reducida. Método 2: La mezcla de reacción se purifica directamente.
Ilustración del Método General EEEEE Preparación No. EEEEE.1: 4-(3-((2-(tr¡met¡lsilil)etoxi)meti!)-3«- imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)piperidin-1 - carboximidamida I5 Una solución de 8-(piperidin-4-il)-3-((2- (trimetilsilil)etoxi)metil)-3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazina (0.100 g, 0.269 mmol, Preparación No. DDDDD.1), clorhidrato de 1 /-/-pirazol-1 -carboximidamida (0.118 g, 0.807 mmol) y DIEA 0 (0.188 mi, 1.08 mmol) en DMF (2 mi) se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 72 h. La mezcla de reacción se purificó mediante RP-HPLC (Tabla 1, Método I) para dar 4·(3-((2- (trimetilsilil)etoxi)metil)-3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2, 3-e]pirazin 8- ¡l)piper¡din-1 -carboximidamida (0.037 g, 33%) como un aceite de 5 color marrón: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt - 1.82 min; EM m/z: 414 (M + H) + .
Método General FFFFF: Formación de un iluro de sulfoxonio A una suspensión de un ácido carboxílico (preferiblemente 1 equivalente) en un solvente orgánico (tal como THF, 2-metiltetrahidrofurano, o MTBE, preferiblemente THF) se agregó una base orgánica tal como base de Hunig o TEA (preferiblemente TEA) (1.2-3.5 equivalentes, preferiblemente 3.5 equivalentes) y un agente activante como por ejemplo DCC o HATU (preferiblemente HATU) (1-1.5 equivalentes, preferiblemente 1.01 equivalentes). La reacción se agitó a 10 a 40°C preferiblemente temperatura ambiente por aproximadamente 1-20 h (preferiblemente de manera aproximada 1-2 h). En un matraz separado, se agregó cloruro de trimetilsulfoxonio (1.25-5 equivalentes, preferiblemente 3 equivalentes) a una suspensión de una base tal como rerc-butóxido de sodio o ferc-butóxidó de potasio (3-5 equivalentes, preferiblemente 3.15 equivalentes) en un solvente orgánico (tal como THF, 2-metiltetrahidrofurano, o MTBE, preferiblemente THF). La reacción se agitó a aproximadamente 60 a 70°C (preferiblemente 65°C) por aproximadamente 2-4 h (preferiblemente de manera aproximada 3 h). La suspensión se enfrió a aproximadamente -5 a 5°C y la solución de éster activado se agregó por goteo durante aproximadamente 20-60 min. La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente -5 a 5°C por aproximadamente 1-20 h (preferiblemente de manera aproximada 1-2 h). La mezcla de reacción se detiene con agua por goteo a aproximadamente 0 a 40°C (preferiblemente temperatura ambiente) durante aproximadamente 2-50 min y se agitó por aproximadamente 0.2- 20 h (preferiblemente de manera aproximada 18 h a temperatura 5 ambiente). La reacción puede concentrarse bajo presión reducida para eliminar los materiales volátiles y luego se divide entre un solvente orgánico (tal como EtOAc) y agua. La capa acuosa se puede extraer opcionalmente con solvente orgánico adiciona! tai como EtOAc. La capa orgánica combinada se lavó con agua, io secó sobre Na2S04 anhidro o MgS04, filtró, concentró bajo presión reducida para dar el compuesto buscado.
Ilustración del Método General FFFFF Preparación No. FFFFF.1: 2-(4-(Dibencilamino)ciclohexi9)- dimetilsulfoxonio-2-oxo-etiluro I5 A un matraz de 250 mi, se agregaron ácido 4-0 (dibencilamino)ciclohexancarboxílico (5.6 g, 17.3 mmol), HATU (6.75 g, 17.4 mmol) y TEA (8.45 mi, 60.6 mmol) en THF (60 mi) para dar una suspensión de color blanco. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 1 h. A un matraz de 500 mi, se agregaron cloruro de trimetilsulfoxonio (6.82 5 g, 51.9 mmol) y ferc-butóxido de potasio (6.44 g, 54.5 mmol) en THF (60 mi) para dar otra suspensión de color blanco. La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente 65°C por aproximadamente 3 h. La mezcla de reacción se enfrió a aproximadamente 5°C. La solución de éster activado se agregó por goteo durante aproximadamente 50 min. La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente 0-5°C por aproximadamente 90 min. La mezcla de reacción se detuvo mediante la adición de agua (120 mi) por goteo a aproximadamente 0-5°C durante aproximadamente 25 min. La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente 0-5°C por aproximadamente 30 min, luego a temperatura ambiente por aproximadamente 18 h. La mezcla se concentró bajo presión reducida para dar una suspensión de color blanco. La suspensión se dividió entre EtOAc (300 mi) y agua (200 mi). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 100 mi). La capa orgánica combinada se lavó con agua (50 mi) y salmuera (3 x 40 mi). La capa orgánica se secó sobre Na2S04 anhidro y concentró bajo presión reducida. El residuo se disolvió en MeOH caliente (100 mi) y concentró bajo presión reducida. El aceite se disolvió en MeOH caliente (60 mi) y concentró para dar un sólido de color blanco. El sólido se disolvió en MeOH (36 mi) y agua (12 mi) a aproximadamente 55°C. La solución se enfrió a temperatura ambiente, luego a aproximadamente 5°C. Se agregó más 3:1 MeOH/agua (40 mi) a la suspensión. La suspensión se filtró, lavó con 1:1 MeOH/agua (20 mi) luego con heptano (20 mi). La almohadilla húmeda recogida se secó en un horno de vacío con calentamiento a aproximadamente 60°C por aproximadamente 72 h para dar 2-(4-(dibencilamino)ciclohexil)-dimetilsulfoxonio-2-oxo-etiluro (5.44 g, 79%) como un sólido de color blanco: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.42, 1.45 min; EM m/z 398 (M + H) + .
Método General GGGGG: Reacción de un iluso de sulfoxonio con una amina A una mezcla de iluro de sulfoxonio (preferiblemente 1 equivalente) y una amina (0.7-2 equivalentes, preferiblemente 1.2 equivalentes) se agregó un catalizador (como por ejemplo [lr(COD)CI]2> [(COD)lr(OMe)]2, (COD)lr(acac), lr(COD)2BF4, lr(COD)2BArF, Rh2(OAc)2, Rh2(TFA)4, [Ru(cym)CI2]2, RuCI2(PPh3)3,, RuCI2(DMSO)4, preferiblemente [lr(COD)CI]2 (0.01-0.1 equivalente, preferiblemente 0.04 equivalentes)). Se agregó un solvente orgánico desgasificado (como por ejemplo DCM, DCE, MeCN, THF, 2-metiltetrahidrofurano, CHCI3, tolueno, o DMF, preferiblemente DCE). La reacción se purgó con N2 por aproximadamente 10-20 min y agitó a aproximadamente 20-90°C (preferiblemente de manera aproximada 70°C) por aproximadamente 1-96 (preferiblemente de manera aproximada 3-6 h). Opcionalmente, se puede agregar más catalizador (preferiblemente [lr(COD)CI]2 equivalentes) a la mezcla de reacción en casos donde la reacción no llega a completarse según lo indicado por TLC, LC/EM, o HPLC. Una vez que la reacción alcanza un nivei aceptable, la mezcla de reacción se puede concentrar al vacío para dar el producto.
Ilustración del Método General GGGGG Preparación No. GGGGG.1: 1 -(4-(dibencilamino)ciclohexil)-2-(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-ilamino)etanona A un matraz de dos cuellos de 100 mi, se agregaron 2-(4-(dibencilamino)ciclohexil)-dimetilsulfoxon¡o-2-oxo-etiuro (5.4 g, 13.6 mmol, Preparación No. FFFFF.1 ), 5-tosil-5-/-pirrolo[2,3-£>]pirazin-2-amina (4.7 g, 16.3 mmol, Preparación No. E.1.1), y [lr(COD)CI]2 (0.365 g, 0.543 mmol, Alfa Aesar), El matraz de reacción se purgó con N2 por aproximadamente 10 min. Ál matraz de reacción, se agregó DCE desgasificado (25 mi) mediante una jeringa. La mezcla de reacción se purgó con N2 por aproximadamente 10 min y agitó bajo una atmósfera de N2 a aproximadamente 70°C por aproximadamente 3 h. La mezcla de reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente. El solvente se eliminó bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc en heptano 5-70% para dar 1-(4-(dibencilamino)ciclohexH)-2-(5-tos¡l-5H-p¡rrolo[2, 3-b]pirazin-2- ilaminojetanona (5.8 g, 65%) como un sólido vitreo: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 3.24 y 3.26 min; EM m/z 608 (M + H) + .
Ejemplo No. 1 : Ejemplo No. 1.1: W,W-dietil-1 -((1 S,3fl,4K)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]piraz¡n-1 -il)ciclopentil)metansulfonamida, Ejemplo No. 1.2: /V, A/-d i eti I - 1 -((1 R,3S,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentil)metansulfonamida, Ejemplo No. 1.3: A, /V-d i eti 1-1 -((1 S,3S,4S)-3-etil-4-(6H pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentil)metansulfonamida, Ejemplo No. 1.4: A, A-d i eti I - 1 -((1 R,3R,4R)-3-et\\-4-(6H pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentil)metansulfonamida, Ejemplo No. 1.5: Jtf,Jtf-dietil-1 -((1 S,3S,4 ?)-3-etil-4-(6H pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentil)metansulfonamida, y Ejemplo No. 1.6: /, A/-d i eti I -1 -((1 R,3S,4R)-3-etil-4-(6H pirro lo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentil)metansulfonamida Etapa A: 5-bromo-3-((trimetilsilil)etinil)pirazin-2-amina A una solución de 3.5-dibromopirazin-2-amina (125 g, 494 mmol), TEA (207.0 mi, 1483 mmol), e yoduro de cobre (I) (0.941 g, 4.94 mmol) en THF (1255 mi) se agregó PdCI2(PPh3)2 (3.47 g, 4.94 mmol). La mezcla de reacción se enfrió a aproximadamente -5-0°C y agregó una solución de (trimetilsilil)acetileno (65.0 mi, 470 mmol) en THF (157 mi) por goteo durante aproximadamente 15 min. La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente -5-0°C por aproximadamente 1.5 h y luego se dejó calentar hasta temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción luego se filtró a través de una almohadilla de Celite® y lavó con THF hasta no eluir más producto. El material filtrado se concentró bajo presión reducida para dar un sólido de color marrón anaranjado. El sólido se trituró y sónico con éter de petróleo tibio (p.e. 30-60°C, 400 mi), enfrió a temperatura ambiente, recogió, lavó con éter de petróleo (p.e. 30-60°C; 2 x 60 mi), y secó para dar 5-bromo-3-((trimetilsil¡l)et¡n¡l)pirazin-2-amina (124 g, 93%, 93% de pureza) como un sólido de color marrón: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.51 min; EM m/z: 270, 272 (M + H) + .
Etapa B: 2-bromo-5-tosil-5H-pirrolo[2,3- ]pirazina A una solución de 5-bromo-3-((trimetilsilil)etinil)pirazin-2-amina (3.00 g, 11.1 mmol) en DMF (60 mi) a aproximadamente 0°C se agregó NaH (60% de dispersión en aceite mineral, 0.577 g, 14.4 mmol) en tres porciones. Luego de aproximadamente 15 min, se agregó cloruro de p-toluensulfonilo (2.75 g, 14.4 mmol) y la reacción se dejó calentar lentamente a temperatura ambiente. Luego de aproximadamente 16 h, la mezcla de reacción se vertió sobre hielo-agua fría (120 mi) y el precipitado se recogió mediante filtración al vacío. El sólido crudo se disolvió en DCM (15 mi) y purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con DCM para dar 2-bromo-5-tosil-5H-pirrolo[2,3-bjpirazina (2.16 g, 52%): LC/EM (Tabla 1, Método c) Rt = 1.58 min; EM m/z: 352, 354 (M + H) + .
Etapa C: 2-(5-tosi l-5H-p¡rrolo[2,3-b] pirazin-2-il)hidrazincarboxilato de ferc-butilo y 1 -(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)hidrazincarboxilato de ferc-butilo A un matraz se agregó Pd2(dba)3 (3.90 g, 4.26 mmol), d¡-íerc-butil-(2'.4,.6'-tr¡isopropilb¡fenil-2-il)fosfano (3.62 g, 8.52 mmol), y 1,4-dioxano (453 mi). La mezcla de catalizador y ligando se desgasificó con una purga de vacío/nitrógeno (3 veces) y calentó a aproximadamente 80°C por aproximadamente 10 min y enfrió a temperatura ambiente. Luego se agregaron 2-bromo-5-tosil-5/-/-pirrolo[2,3-£)]pirazina (30.0 g, 85 mmol), hidrazincarboxilato de rere-butilo (16.9 g, 128 mmol), y NaOf-Bu (12.28 g, 128 mmol). Después de otra purga de vacío/nitrógeno, la reacción se calentó a aproximadamente 80°C. Luego de aproximadamente 50 min, la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y filtró a través de una almohadilla de gel de sílice (6 cm de altura x 6 cm de diámetro), cubierta con Celite® (1 cm de altura x 6 cm de diámetro), lavando con EtOAc (3 x 150 mi). Se agregó agua (300 mi) al material filtrado y la capa orgánica se separó. La capa acuosa se extrajo con EtOAc adicional (3 x 200 mi). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con NH4CI acuoso saturado, NaHC03 acuoso saturado, y salmuera (400 mi de cada uno), secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida para dar un aceite de color marrón oscuro (45 g). El aceite de color marrón se disolvió en DCM (250 mi), se agregó gel de sílice (200 g), y la mezcla se concentró bajo presión reducida. La mezcla de sílice resultante se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc en heptano 25-65% para dar una mezcla de 2-(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2- /'/ hidrazincarboxilato de ferc-butilo [regioisómero mayoritario] y 1-(5-tosil-5H-pirrolo[2, 3-b]pirazin-2-il)h\draz ncarbox \ato de rere-butilo [regioisómero minoritario] (18.8 g, 50%): LC/EM (Tabla 1, Método c) Rt = 1.47 min; EM m/z: 404 (M + H)+.
Etapa D: 2-hidrazinil-5-tosil-5rt-pirrolo[2,3-6]pirazina A una mezcla de 2-(5-tosil-5/-/-pirrolo[2,3-_?]pirazÍn-2-il)hidrazincarboxilato de rere-butilo y 1 -(5-tosil-5/--pirrolo[2,3-6]pirazin-2-il)hidrazincarbox¡lato de rere-butilo (49.2 g, 122 mmol) en 1,4-dioxano (290 mi) se agregó HCI (4 M en 1 ,4-dioxano, 226 mi, 902 mmol). La reacción se calentó a aproximadamente 60°C por aproximadamente 2.5 h y luego se enfrió a aproximadamente 15-20°C. El sólido se recogió mediante filtración al vacío, llavó con EtOAc (3 x 50 mi), y luego trituró con Et20 (60 mi), recogió mediante filtración al vacío y secó a peso constante bajo vacío para dar 35.6 g de sólido. El sólido se agitó con una mezcla de NaHC03 acuoso saturado y EtOAc (1:1, 400 mi). Luego de aproximadamente 1 h, el sólido se recogió mediante filtración al vacío, lavó con agua helada (3 x 30 mi) y EtOAc (3 x 30 mi), y secó en un horno de vacío a peso constante para dar 2-hidrazinil-5-tosil-5H-pirrolo[2, 3-b]pirazina como un sólido de color tostado (21.2 g, 57%): LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.88 min; EM m/z: 304 (M + H) + .
Etapa E: 4-(etoxicarbonil)-3-etil-2-(metoxicarbonil)ciclopenta-1 ,3-dienolato de sodio Un matraz de fondo redondo se cargó con THF (1.5 I) y luego se agregó en porciones NaH (60% de dispersión en aceite mineral, 70.0 g, 1.75 mol). Se agregó más THF (500 mi) y la mezcla resultante se enfrió a aproximadamente -10°C y agregó propionilacetato de etilo (250 mi, 1.80 mol) por goteo durante aproximadamente 1 h para mantener la temperatura interna por debajo de aproximadamente 10°C. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 0.5 h para dar una solución de color amarillo traslúcida, y se agregó 4-cloroacetoacetato de metilo (100 mi, 0.88 mol) por goteo durante aproximadamente 5 min. La mezcla resultante se calentó a aproximadamente 50°C por aproximadamente 19 h para dar una suspensión rojiza anaranjada. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, concentró bajo presión reducida y el líquido resultante se transfirió a un vaso de precipitados y diluyó con agua (350 mi). La mezcla se agitó en un baño de hielo por aproximadamente 2 h. El sólido se recogió mediante filtración al vacío y la torta de filtrado se enjuagó con agua (150 mi) y secó bajo vacío por aproximadamente 1 h. El sólido se suspendió en Et20 (1.5 I), filtró, lavó con Et20 (1.5 I), y secó bajo vacío. El sólido resultante se incluyó en una mezcla azeotrópica con tolueno (1 I) para dar un sólido que se suspendió nuevamente en Et20 (1 I) y recogió mediante filtración al vacío. La torta de filtrado se lavó con Et20 (500 mi) y secó bajo vacío para dar 4-(etoxicarbonil)-3-etil-2-(metox¡carbon¡l)c¡clopenta-1,3-dienolato de sodio (204.2 g, 89%) como un sólido de color beige: H RMN (DMSO-c/e) d 3.94 (q, J=7.1 Hz, 2H), 3.46 (s, 3H), 3.04 (q, J=7.2 Hz, 2H), 2.66 (s, 2H), 1.13 (t, =7.1 Hz, 3H), 0.99 (t, J=7.3 Hz, 3H).
Etapa F: 2-etil-4-oxociclopent-2-encarboxilato de etilo Un matraz de fondo redondo de 5 litros se cargó con 4-(eto x i carbonil)-3-et¡ I-2 -(me toxi carbonice icio p en ta- 1 ,3-d¡enolato de sodio (316 g, 1205 mmol), KCI (126 g, 1687 mmol, JT-Baker), AcOH (241 mi, 4218 mmol, JT-Baker), tolueno (1850 mi) y agua (130 mi). La reacción se calentó a reflujo por aproximadamente 6 h, luego se enfrió a temperatura ambiente y agregó por goteo a NaHC03 (8% acuoso, 3.5 I). La mezcla bifásica resultante se extrajo con MTBE (2 x 1.5 I). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (1 I), secaron sobre MgS04 anhidro y concentraron bajo presión reducida para dar 191 g de material crudo que se purificó mediante destilación al vacío (97-99°C, 0.600 mM Hg) para dar 2-etil-4-oxociclopent-2-encarbox¡lato de etilo (160 g, 69%): 1H RMN (CDCI3) d 6.04 (m, 1H), 4.26-4.15 (m, 2H), 3.76-3.69 (m, 1H), 2.75-2.57 (m, 2H), 2.56-2.44 (m, 2H), 1.32-1.26 (m, 3H), 1.23-1.18 (m, 3H).
Etapa G: 2-etil-4-oxociclopentancarboxilato de etilo Un matraz de fondo redondo se cargó con Pd/C 10% en peso (10 g, 9.4 mmol). El recipiente se enfrió a aproximadamente 0°C y agregó EtOAc (400 mi) bajo una atmósfera de nitrógeno. El baño de frío se retiró y agregó 2-etil-4-oxociclopent-2-encarboxilato de etilo (47.8 g, 263 mmol). Se burbujeó gas hidrógeno a través de la mezcla por aproximadamente 5 min y la mezcla luego se agitó bajo una atmósfera de hidrógeno por aproximadamente 48 h. La fuente de hidrógeno se retiró y la mezcla se burbujeó con nitrógeno por aproximadamente 5 min y filtró a través de una almohadilla de Celite®. La torta de filtrado se enjuagó con EtOAc (400 mi). El material filtrado se concentró bajo presión reducida para dar 2-etil-4-oxociclopentancarboxilato de etilo (aproximadamente 9:1 mezcla cis:trans) (48.0 g, 99%) como un líquido amarillo: H RMN (CDCI3) d 4.23-4.10 (m, 2H), 3.22 (m, 1H), 2.59-2.50 (m, 1H), 2.44-2.28 (m, 3H), 2.26-2.16 (m, 1H), 1.58-1.46 (m, 1H), 1.41-1.30 (m, 1H), 1.30-1.23 (m, 3H), 1.02-0.91 (m, 3H).
Etapa H: 2-etil-4-metilenciclopentancarboxilato de etilo Una solución de KOt-Bu (3.65 g, 32.6 mmol) y bromuro de metiltrifenilfosfonio (11.6 g, 32.6 mmol) en THF (69.5 mi) se enfrió a aproximadamente -10°C. Se agregó una solución de 2-etil-4-oxociclopentancarboxilato de etilo (4.00 g, 21.7 mmol) en THF (17.4 mi) por goteo mientras se mantenía la temperatura a aproximadamente 0°C. La mezcla de reacción se dejó calentar a temperatura ambiente y agitó por aproximadamente 16 h. El material insoluble se retiró mediante filtración. El material filtrado se concentró bajo presión reducida. El material resultante se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (120 g) eluyendo con un gradiente de EtOAc al 0-20% en heptano para dar 2-etil-4-metilenciclopentancarboxilato de etilo (2.55 g, 64%) como un líquido incoloro: 1H RMN (d-DMSO) d 4.88 - 4.78 (m, 2H), 4.16 - 3.96 (m, 2H), 2.66 - 2.31 (m, 4H), 2.24 - 1.82 (m, 2H), 1.50 (m, 1H), 1.35 - 1.22 (m, 1H), 1.18 (t, 3H), 0.85 (m, 3H).
Etapa I: 2-etil-4-(mercaptometil)ciclopentancarboxilato de etilo Se calentó 2-etil-4-metilenciclopentancarboxilato de etilo (0.720 g, 3.95 mmol), trifenilsilanotiol (1.329 g, 4.54 mmol) y 2,2 -azobis(2-metilpropionitrilo) (0.195 g, 1.185 mmol) en tolueno (3.95 mi) a reflujo por aproximadamente 6 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y luego concentró bajo presión reducida. El material se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (40 g) eluyendo con un gradiente de 0-10% de EtOAc en heptano para dar un aceite incoloro. El aceite resultante se disolvió en DCM (4 mi) y agregó TFA (1.52 mi, 19.7 mmol). Luego de agitar a temperatura ambiente por aproximadamente 1 h, el solvente se eliminó bajo presión reducida. El material se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (40 g) eluyendo con un gradiente de EtOAc 0-15% en heptano para dar 2-etil-4-(mercaptometil)ciclopentancarboxilato de etilo (0.620 g, 72%) como un aceite incoloro: 1H RMN (DMSO- de) d 4.13 - 4.01 (m, 2H), 2.50 - 2.30 (m, 3H), 2.24 (m, 1H), 2.15 - 1.87 (m, 3H), 1.66 - 1.54 (m, 1H), 1.50 - 1.37 (m, 2H), 1.31 - 1.23 (m, 2H), 1.17 (t, 3H), 0.83 (m, 3H).
Etapa J: ácido (3-(etoxicarbonil)-4-etilciclopentil)metansulfónico A una solución agitada de 2-etil-4- (mercaptometil)ciclopentancarboxilato de etilo (2.50 g, 11.6 mmol) en DCM (50.7 mi) se agregó por goteo ácido etanoperoxoico (7.29 mi, 34.7 mmol) a aproximadamente 0°C. La mezcla de reacción se calentó a temperatura ambiente y agitó por aproximadamente 16 h. La solución se concentró bajo presión reducida para dar ácido (3-(etoxicarbonil)-4-etilciclopen til) meta nsul fónico crudo (3.18 g, 104%) como un aceite de color marrón oscuro: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 1.39 min; EM m/z: 265 (M + H) + .
Etapa K: 4-((?/, W-dieti Isulfamoi I )meti S)-2- etilciclopentancarboxilato de etilo Una solución de ácido (3-(etoxicarboni()-4- etilciclopentil)metansulfónico (3.18 g, 12.03 mmol) en DCM (10 mi) y DMF (10 mi) se enfrió a aproximadamente 0°C. Se agregó cloruro de oxalilo (24.1 mi, 48.1 mmol) por goteo mientras se mantenía la temperatura a aproximadamente 0°C. Luego de completarse la adición, la mezcla de reacción se calentó a temperatura ambiente y agitó por aproximadamente 1 h. El solvente se eliminó bajo presión reducida. El residuo se disolvió en DMF (10 mi) y luego agregó por goteo a una solución de TEA (2.51 mi, 18.03 mmol) y dietilamina (0.937 mi, 9.02 mmol) en DMF (10 mi) a aproximadamente 0°C. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 16 h. El solvente se eliminó bajo presión reducida. El material se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (120 g) eluyendo con un gradiente de EtOAc 10-60% en heptano para dar 4-((N,N-dietifsulfamoil)metil)-2-etilciclopentancarboxilato de etilo (0.570 g, 30%) como un aceite de color amarillo: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.60 min; EM m/z: 320 (M + H)+.
Etapa L: ácido 4-((/V,/V-dietilsulfamoil)metil)-2-etilciclopentancarboxílico Una mezcla de 4-((/V, v-dietilsulfamoil)metil)-2-etilciclopentancarboxilato de etilo (0.570 g, 1.784 mmol) en NáOH (1 N acuoso, 10 mi, 10 mmol) se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 72 h. La mezcla se dividió con DCM (10 mi). La fase acuosa se acidificó a aproximadamente pH = 4 mediante la adición de HCI acuoso 6 N. La solución se dividió con DCM (10 mi). La fase acuosa se lavó con DCM (2 x 10 mi). Las capas orgánicas se combinaron, secaron sobre MgS04 anhidro, y concentraron bajo presión reducida para dar ácido 4-((N,N-diet¡lsulfamoil)metil)-2-etilciclopentancarboxílico (0.375 g, 72%) como un aceite de color amarillo: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 1.95 min; EM m/z: 292 (M + H) + .
Etapa M: W,W-dietil-1 -(3-etil-4-(2-(5-tosil-5H-pirrolo[2,3- · fo] pi razi n -2-¡ I ) hid razin carbón i l)ciclopentil) meta nsulfonam ida A una suspensión de 2-hidrazinil-5-tosil-5H-pirrolo[2,3-¿>]pirazina (0.390 g, 1.287 mmol, Ejemplo No. 1 Etapa D), ácido 4-((/V,A/-dietilsulfamoil)metil)-2-etilciclopentancarboxílico (0.375 g, 1.287 mmol), y HATU (0.538 g, 1.416 mmol) en DCM (6.4 mi) se agregó TEA (0.538 mi, 3.86 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 1 h. La mezcla de reacción se dividió entre agua (50 mi) y DCM (50 mi). La capa acuosa se extrajo con DCM (2 x 50 mi). Las capas orgánicas se combinaron y concentraron bajo presión reducida. El material se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (120 g) eluyendo con un gradiente de EtOAc 20-100% en DCM para dar N,N-dietil-1-(3-eti¡-4-(2-(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2- il)hidrazincarbonil)ciclopentil)metansulfonamida (0.730 g, 98%) como un sólido de color marrón: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.39 min; EM m/z: 577 (M + H) + .
Etapa N: A/,W-dietil-1 -(3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentil)metansulfonamida A una mezcla de /V,/V-dietil-1 -(3-etil-4-(2-(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-ó]pirazin-2-il)hidrazincarbonil)ciclopentil)metansulfonamida (0.730 g, 1.27 mmol) y TEA (0.529 mi, 3.80 mmol) en 1,4-dioxano (12.7 mi) se agregó SOCI2 (0.185 mi, 2.53 mmol). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 80°C por aproximadamente 2 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y dividió entre NaHC03 acuoso saturado (30 mi) y DCM (30 mi). La capa acuosa se lavó con DCM (2 x 30 mi). Las capas orgánicas se combinaron, concentraron bajo presión reducida, y purificaron mediante cromatografía en gel de sílice (80 g) eluyendo con un gradiente de 0-60% MeOH en DCM para dar un sólido de color marrón. El sólido resultante se suspendió en Na2C03 (2 M acuoso, 2MI), EtOH (2 mi) y 1 ,4-dioxano (2 mi). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 60°C por aproximadamente 16 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y purificó mediante RP-HPLC (Tabla 1, Método d) para dar N, N-dietil-1 -(3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2, 4Jtriazolo[4, 3-a]pirazin-1 -il) ciclope n til) metan su I fon amida (0.300 g, 58%) como un sólido de color tostado: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 1.89 min; EM m/z: 405 (M + H)\ El sólido se purificó adicionalmente usando el Método General AA para dar N, N-dietil-1-((1 S, 3R, 4R)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2, 3-e][1 ,2, 4]triazolo[4, 3-a]pirazin-1 -il)ciclopentil)metansulfonamida (Tabla 2, Método 27, Rt = 11.8 min, o = negativo) (0.021 g, 7%) [Ejemplo No. 1.1]; N, N-dietil-1 -((1 R, 3S,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2, 3-e][1 ,2, 4]triazolo[4, 3-a]pirazin-1 -? ?) ciclope ntil)metan-sulfonamida (Tabla 2, Método 27, Rt = 11.1 min, o = positivo) (0.018 g, 6%) [Ejemplo No. 1.2]; N,N-dietil-1 -((1 S,3S,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2, 3-e][1,2, 4]triazolo[4, 3-a]pirazin-1 -il)ciclo-pentil)metansulfonamida (Tabla 2, Método 27, Rt = 10.7 min, o = positivo) (0.018 g, 6%) [Ejemplo No. 1.3]; N, N-dietil-1 -((1 R, 3R, 4R)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2, 3-e][1 ,2,4]triazolo[4, 3-a]pÍrazin-1 -il)ciclopentil)metansulfonamida (Tabla 2, Método 28, Rt - 20.1 min, o = negativo) (0.031 g, 11%) [Ejemplo No. 1.4]; N, N-dietil-1 - ((1 S,3S,4R)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2, 3-e][1,2, 4]thazolo[4, 3-a]pirazin-1 -il)ciclopentil)metansulfonamida (Tabla 2, Método 27, Rt = 12.8 min, o = positivo) (0.002 g, 1%) [Ejemplo No. 1.5]; y N, N-dietil-1 -((1R, 3S, 4R)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2, 3-e][1,2, 4]triazolo[4, 3-a]pirazin-1 -il)ciclopentil)metansulfonamida (Tabla 2, Método 27, Rt = 12.8 min, o = positivo) (0.001 g, 1%) [Ejemplo No. 1.6].
Ejemplo No. 2*: W-(( 1 R, 3R)-3-(6H-pi rrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentil)anilina Etapa A: 5-bromo-3-((trimetilsil¡l)etinil)pirazin-2-amina A una solución de 3.5-dibromopirazin-2-amina (125 g, 494 mmol), TEA (207.0 mi, 1483 mmol), e yoduro de cobre(l) (0.941 g, 4.94 mmol) en THF (1255 mi) se agregó PdCI2(PPh3)2 (3.47 g, 4.94 mmol). La mezcla de reacción se enfrió a aproximadamente -5-0°C y agregó una solución de (trimetilsilil)acetileno (65.0 mi, 470 mmol) en THF (157 mi) por goteo durante aproximadamente 15 min. La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente -5-0°C por aproximadamente 1.5 h y luego se dejó calentar hasta temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción luego se filtró a través de una almohadilla de Celite® y se lavó con THF hasta no eluir más producto. El material filtrado se concentró bajo presión reducida para dar un sólido de color marrón anaranjado. El sólido se trituró y sónico con éter de petróleo tibio (p.e. 30-60°C, 400 mi), se enfrió a temperatura ambiente, se recogió, lavó con éter de petróleo (p.e. 30-60°C¡ 2 x 60 mi), y secó para dar 5-bromo-3-((trimetilsilil)etinil)pirazin-2-amina (124 g, 93%, 93% de pureza) como un sólido de color marrón: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.51 min; EM m/z: 270, 272 (M + H) + .
Etapa B: 2-bromo-5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina A una solución de 5-bromo-3-((trimetils¡lil)etinil)pirazin-2-amina (3.00 g, 11.1 mmol) en DMF (60 mi) a aproximadamente 0°C se agregó NaH (60% de dispersión en aceite mineral, 0.577 g, 14.4 mmol) en tres porciones. Luego de aproximadamente 15 min, se agregó cloruro de p-toluensulfonilo (2.75 g, 14.4 mmól) y la reacción se dejó calentar lentamente a temperatura ambiente. Luego de aproximadamente 16 h, la mezcla de reacción se vertió sobre hielo-agua fría (120 mi) y el precipitado se recogió mediante filtración al vacío. El sólido crudo se disolvió en DCM (15 mi) y purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con DCM para dar 2-bromo-5-tosil-5H-p¡rrolo[2,3- bjpirazlna (2.16 g, 52%): LC/EM (Tabla 1, Método c) R, = 1.58 min; EM m/z: 352, 354 (M + H) + .
Etapa C: 2-(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-£>]pirazin-2-il)hidrazincarboxilato de ferc-butilo y -(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-fo]pirazin-2-il)hidrazincarboxilato de ierc-butilo A un matraz se agregó Pd2(dba)3 (3.90 g, 4.26 mmol), di-rerc-butil-(2',4',6"-triisopropilbifenil-2-il)fosfano (3.62 g, 8.52 mmol), y 1,4-dioxano (453 mi). La mezcla de catalizador y ligando se desgasificó con una purga de vacío/nitrógeno (3 veces) y calentó a aproximadamente 80°C por aproximadamente 10 min. Luego se agregaron 2-bromo-5-tosil-5 -/-p¡rrolo[2,3-¿>]pirazina (30.0 g, 85 mmol), hidrazincarboxilato de rere-butilo (16.9 g, 128 mmol), y NaOf-Bu (12.28 g, 128 mmol). Después de otra purga de vacío/nitrógeno, la reacción se calentó a aproximadamente 80°C. Luego de aproximadamente 50 min, la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y filtró a través de una almohadilla de gel de sílice (6 cm de altura x 6 cm de diámetro), cubierta con Celite® (1 cm de altura x 6 cm de diámetro), lavó con EtOAc (3 x 150 mi). Se agregó agua (300 mi) al material filtrado y la capa orgánica se separó. La capa acuosa se extrajo con EtOAc adicional (3 x 200 mi). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con NH4CI acuoso saturado, NaHC03 acuoso saturado, y salmuera (400 mi de cada uno), secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida para dar un aceite de color marrón oscuro (45 g). El aceite de color marrón se disolvió en DCM (250 mi), se agregó gel de sílice (200 g), y la mezcla se concentró bajo presión reducida. La mezcla de sílice resultante se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc en heptano 25-65% para dar una mezcla de 2-(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]piraziñ-2- //Jhidrazincarboxilato de ferc-butilo [regioisómero mayoritario] y 1-(5-tosil-5H-p¡rrolo[2, 3-b]p¡razin-2-il)h óraz'\rcarbox \ato de rere-butilo [regioisómero minoritario] (18.8 g, 50%): LC/EM (Tabla 1, Método c) Rt = 1.47 min; EM m/z: 404 (M + H) + Etapa D: 2-hidrazinil-5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina A una mezcla de 2-(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)hidrazincarboxilato de ferc-butilo y 1 -(5-tosil-5H-pirrolo[2 ,3-b]pirazin-2-il)hidrazincarboxilato de rere-butilo (49.2 g, 122 mmol) en 1,4-dioxano (290 mi) se agregó HCI (4 M en 1,4-dioxano, 226 mi, 902 mmol). La reacción se calentó a aproximadamente 60°C por aproximadamente 2.5 h y luego se enfrió a aproximadamente 15-20°C. El sólido se recogió mediante filtración al vacío, lavó con EtOAc (3 x 50 mi), y luego trituró con Et20 (60 mi), recogió mediante filtración al vacío y secó a peso constante bajo vacío para dar 35.6 g de sólido. El sólido se agitó con una mezcla de NaHC03 acuoso saturado y EtOAc (1:1, 400 mi). Luego de aproximadamente 1 h, el sólido se recogió mediante filtración al vacío, lavó con agua helada (3 x 30 mi) y EtOAc (3 x 30 mi), y secó en un horno de vacío a peso constante para dar 2-hidrazinil-5-tosil-5H-pirrolo[2, 3-b]pirazina como un sólido de color tostado (21.2 g, 57%): LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.88 min; EM m/z: 304 (M + H) + .
Etapa E: (1 /?,3/?)-3-(2-(5-tosil-5AV-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)hidrazincarbonil)ciclopentilcarbamato de ferc-butilo A ácido (1R,3R)-3-(ferc-butoxicarbonilamino)ciclopentancarboxílico (2.25 g, 9.81 mmol, Acros) en DCM (98 mi) se agregó 2-hidrazinil-5-tosil-r5H-pirrolo[2,3-ó]pirazina (2.98 g, 9.81 mmol), HATU (3.73 g, 9.81 mmol) y TEA (5.5 mi, 39 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 4 h y luego diluyó con DCM (300 mi). La mezcla de reacción se lavó con agua (2 x 80 mi), NaHC03 acuoso saturado (80 mi), secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice (220 g) eluyendo con un gradiente de EtOAc 50-100% en DCM para dar (1R,3R)-3-(2-(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)hidrazincarbonil)ciclopentilcarbamato de tere-butilo (5.03 g, 100%) como un sólido de color marrón: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.18 min; EM m/z: 513 (M-H)- Etapa F: (1 /?,3/?)-3-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazín-1-il)ciclopentanamina A (1R,3R)-3-(2-(5-tosil-5/-/-pirrolo[2,3-6]pirazin-2-il)hidrazincarbonil)ciclo-pentilcarbamato de rere-butilo (5.03 g, 9.78 mmol) en 1,4-dioxano (103 mi) se agregó DIEA (7.2 mi, 41 mmol) y SOCI2 (2.3 mi, 31 mmol). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 80°C por aproximadamente 1 h. El solvente se eliminó bajo presión reducida y el residuo se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice (330 g) eluyendo con un gradiente de 0-20% de MeOH en DCM para dar (1 R, 3R)-3-(6-tósil- 6H-pirrolo[2, 3-e][1, 2, 4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentanamina (2.65 g, 68%): LC/EM (Tabla 1, Método b) R, = 1.55 min; EM m/z: 397 (M + H) + .
Etapa G: N-((1 /?,3R)-3-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3- ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentil)anilina Un matraz de fondo redondo de 100 mi se cargó en forma secuencial con ácido fenilborónico (0.123 g, 1.01 mmol), diacetoxicobre monohidrato (0.010 g, 0.05 mmol), tamices moleculares en polvo de 4Á (0.375 g) y DCM (4 mi). La mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 10 min, luego se agregó una suspensión de (1 R,3R)-3-(6-tosil-6--pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentanamina (0.20 g, 0.50 mmol) en DCM (2 mi) y MeCN (2 mi). El matraz se equipó con un balón de oxígeno. El matraz se purgó con oxígeno y luego se calentó a aproximadamente 40°C por aproximadamente 18 h. Se agregó más diacetoxicobre monohidrato (0.010 g, 0.05 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 45°C bajo una atmósfera de oxígeno por aproximadamente 3 días. Se agregó DCM (50 mi) y la mezcla de reacción se filtró a través de una almohadilla de Celite® lavando con DCM (20 mi). El material filtrado se concentró bajo presión reducida y el residuo se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice (20 g) eluyendo con un gradiente de 30-80% EtOAc en DCM para dar N-((1 R,3R)-3-(6-tosil-6H-pirrolo[2, 3-e][1,2, 4]triazolo[4, 3-a]pirazin-1 -il)ciclopentil)anilina (0.106 g, 45%): LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.39 min; EM m/z: 473 (M + H)+.
Etapa H: W-((1 R, 3R)-3-(6H-pi rrolo[2,3-e][1 , 2,4]triazolo[4, 3-a]pirazin-1-il)ciclopentil)anilina A /V-((1 ?,3R)-3-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]piraz¡n-1 -il)ciclopentil)anilina (0.106 g, 0.224 mmol) en 1,4-dioxano (1 mi) se agregó NaOH (1 N acuoso, 1.12 mi, 1.12 mmol). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 60°C por aproximadamente 1 h. Se agregó AcOH (0.5 mi) y la mezcla de reacción cruda se purificó mediante RP-HPLC (Tabla 1, Método j) para dar N-((1 R,3R)-3-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentil)anilina (0.053 g, 74%) como un sólido de color amarillo claro: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 1.84 min; EM m/z: 319 (M + H)\ Ejemplo No. 3*: (R)-(3-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)piperidin-1 -il)(3,3-d'ifluorociclobutil)metanona Etapa A: 5-bromo-3-((trimetilsilil)etinil)pirazin-2-amina A una solución de 3,5-dibromopirazin-2-amina (125 g, 494 mmol), TEA (207.0 mi, 1483 mmol), e yoduro de cobre(l) (0.941 g, 4.94 mmol) en THF (1255 mi) se agregó PdCI2(PPh3)2 (3.47 g, 4.94 mmol). La mezcla de reacción se enfrió a aproximadamente -5-0°C y agregó una solución de (trimetilsilil)acetileno (65.0 mi, 470 mmol) en THF (157 mi) por goteo durante aproximadamente 15 min. La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente -5-0°C por aproximadamente 1.5 h y luego se dejó calentar hasta temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción luego se filtró a través de una almohadilla de Celite® y se lavó con THF hasta no eluir más producto. El material filtrado se concentró bajo presión reducida para dar un sólido de color marrón anaranjado. El sólido se trituró y sónico con éter de petróleo tibio (p.e. 30-60°C, 400 mi), se enfrió a temperatura ambiente, se recogió, lavó con éter de petróleo (p.e. 30-60°C; 2 x 60 mi), y secó para dar 5-bromo-3-((trimetilsilil)etinil)p¡razin-2-amina (124 g, 93%, 93% de pureza) como un sólido de color marrón: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.51 min; EM m/z: 270, 272 (M + H) + .
Etapa B: 2-bromo-5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]p¡razina A una solución de 5-bromo-3-((trimetilsilil)etinil)pirazin-2-amina (3.00 g, 11.1 mmol) en DMF (60 mi) a aproximadamente 0°C se agregó NaH (60% de dispersión en aceite mineral, 0.577 g, 14.4 mmol) en tres porciones. Luego de aproximadamente 15 min, se agregó cloruro de p-toluensulfonilo (2.75 g, 14.4 mmol) y la reacción se dejó calentar lentamente a temperatura ambiente. Luego de aproximadamente 16 h, la mezcla de reacción se vertió sobre hielo-agua fría (120 mi) y el precipitado se recogió mediante filtración al vacío. El sólido crudo se disolvió en DCM (15 mi) y purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con DCM para dar 2-bromo-5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]p¡razina (2.16 g, 52%): LC/EM (Tabla 1, Método c) R, = 1.58 min; EM m/z: 352, 354 (M + H) + .
Etapa C: 5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-carboxilato de metilo Se burbujeó CO en una solución anaranjada de 2-bromo-5-tosil-5H-pirrolo[2,3-£>]pirazina (50.0 g, 142 mmol) en DMF (2.50 I) en un balón de 5 I por aproximadamente 2 min. Se agregaron dicloruro de bis(trifenilfosfin)-paladio(ll) (9.96 g, 14.2 mmol), TEA (59 mi, 423 mmol) y eOH (173.0 mi, 4259 mmol) y el matraz se equipó con un balón de CO. La mezcla se calentó a aproximadamente 95°C bajo una atmósfera de CO (1 atmósfera). Luego de agitar durante la noche, la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente durante la noche y vertió en agua helada (3.2 I). La mezcla se agitó por aproximadamente 10 min y el precipitado se recogió mediante filtración, lavó con agua, y secó por 1 h. El material crudo se disolvió en DCM, separó a partir de agua residual, secó sobre MgS04 anhidro, filtró, agregó gel de sílice, y concentró bajo presión reducida para prepararse para la cromatografía. El material crudo se purificó mediante cromatografía de columna sobre gel de sílice eluyendo con 0-5% de MeOH en DCM para dar 5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-carboxilato de metilo con 5% de DCM mol como un excipiente (40.7 g, 86%, 93% de pureza): LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.35 min; EM m/z 332 (M + H) + .
Etapa D: ácido 5-Tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-carboxíIico Se agregó HCI (6 N acuoso, 714 mi) a una solución de color amarillo de 5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-carboxilato de metilo (17.8 g, 53.6 mmol) en 1,4-dioxano (715 mi) en un matraz de fondo redondo de 2 I, y la mezcla se calentó a aproximadamente 60°C por aproximadamente 16 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente. El solvente orgánico se eliminó bajo presión reducida y el precipitado se recogió, lavó con agua, y secó para dar ácido 5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-carboxi¡ico (14.4 g, 85%) como un sólido de color amarillo: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.63 min; EM m/z 316 (M-H)-.
Etapa E: 5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-ilcarbamato de tere-butilo n un matraz de fondo redondo de 500 mi, se agregaron ácido 5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-carboxílico (14.4 g, 45.3 mmol), azida de difenilfosforilo (9.78 mi, 45.3 mmol) y TEA (13.9 mi, 100 mmol) en f-BuOH (200 mi) para dar una suspensión anaranjada.
La mezcla se calentó a aproximadamente 70°C por aproximadamente 16 h, se enfrió a temperatura ambiente y el material insoluble se retiró mediante filtración. El solvente se eliminó bajo presión reducida y el material crudo se purificó mediante cromatografía de columna sobre gel de sílice eluyendo con EtOAc 25-60% en heptano para dar 5-tosil-5H-pirrolo[2, 3-b]pirazin-2-ilcarbamato de tere-butilo (9.75 g, 54%) como un sólido blancuzco: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.79 min; EM m/z 389 (M + H)\ Etapa F: ácido (R)-1 -(benciloxicarbonil)piper¡din-3-carboxí!ico Una mezcla de ácido (ft)-piperid¡n-3-carboxíl¡co (3.0 g, 23 mmol), 2, 5-dioxopirrolidin-1 -ilcarbonato de bencilo (5.79 g, 23.2 mmol) y Na2C03 (6.15 g, 58.1 mmol) se agitó en agua y 1,4-dioxano (1:1, 200 mi) a temperatura ambiente por aproximadamente 96 h. El solvente orgánico se eliminó bajo presión reducida. La capa acuosa se acidificó con HCI acuoso 1 N y se extrajo con EtOAc (2 x 100 mi). La fase orgánica se lavó con salmuera (150 mi), secó sobre MgS04 anhidro y concentró bajo presión reducida para dar ácido (R)-1 -(benciloxicarbonil)-piperidin-3-carboxílico crudo (11.6 g, 191%) como un sólido de color blanco: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.80 min; EM m/z 264 (M + H) + .
Etapa G: bromhidrato de (R)-8-(piperidin-3-il)-3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]piraz¡na y bromhidrato de (S)-8-(piperidin-3-il)-3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazina Ej. No.3 etapa G Se agregó cloruro de oxalilo (8.41 mi, 96 mmol) a una solución de ácido -(benciloxicarbonil)piperidin-3-carboxílico (11.5 g, 43.7 mmol, Ej No. 3, Etapa F) en DCM (120 mi) y luego se agregó por goteo DMF (0.5 mi, 6.55 mmol). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 14 h. El solvente se eliminó bajo presión reducida para dar un cloruro de ácido crudo (Ej No. 3 G1) como un semisólido de color amarillo, que se disolvió en THF y MeCN (1:1, 160 mi) y se agregó a trimetilsilildiazometano (2 M en Et20, 78 mi, 155 mmol) en THF y MeCN (1:1, 160 mi) a aproximadamente 0°C. La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente 0°C por aproximadamente 2 h después de completarse la adición. La mezcla de reacción luego se neutralizó por la adición por goteo de HBr (48% acuoso, 40 mi, 354 mmol). Los solventes orgánicos se eliminaron bajo presión reducida y el residuo se disolvió en EtOAc (100 mi). La fase orgánica se lavó con NaHC03 acuoso saturado (100 mi), y salmuera (25 mi), secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con 5 a 45% de EtOAc en heptano para dar el 3-(2-bromoacetil)piperidin-1 -carboxilato de bencilo crudo (Ej No. 3 G2) como un aceite incoloro. A una mezcla de NaH (60% de dispersión en aceite mineral, 0.55 g, 14 mmol) en DMF (20 mi) se agregó por goteo una solución de 5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-ilcarbamato de tere-butilo (Ej No. 3 Etapa F) (5.00 g, 12.9 mmol) en DMF (20 mi) a aproximadamente 0°C. La mezcla de reacción se agitó a esta temperatura por aproximadamente 30 min y luego se agregó por goteo a una solución de 3-(2-bromoacetil)piperidin-1 -carboxilato de bencilo crudo (Ej No. 3 G2) (5.26 g, 15.5 mmol) en DMF (40 mi) a aproximadamente 0°C. La mezcla se agitó por aproximadamente 3 h mientras se calentaba a temperatura ambiente. El solvente se eliminó bajo presión reducida y el residuo se dividió entre NH4CI acuoso saturado y EtOAc (70 mi de cada uno). La fase orgánica se lavó adicionalmente con salmuera (60 mi), secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida para dar aminometilcetona protegida con Boc cruda (Ej No. 3 G3) como un aceite de color amarillo que se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. El aceite se disolvió en HCI (4 N en 1,4-dioxano, 40 mi) y la solución se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 2 h. El solvente se eliminó bajo presión reducida y el residuo se dividió entre NaHC03 acuoso saturado y DCM (200 mi de cada uno). La fase orgánica se lavó con salmuera (150 mi), secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida para dar aminometilcetona cruda (Ej No. 3 G4) como un sólido de color marrón amorfo. Se disolvió en 1,4-dioxano (100 mi) y agregó reactivo de Lawesson (1.94 g, 4.80 mmol). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 60°C por aproximadamente 2 h. Se agregó NaOH (2 N acuoso, 3 mi) y el calentamiento se continuó a aproximadamente 90°C por aproximadamente 4 h. El solvente orgánico se eliminó bajo presión reducida y agregó NH4CI acuoso saturado (120 mi). La fase acuosa se extrajo con DCM (2 x 100 mi) y los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida. El material crudo se purificó mediante cromatografía de columna sobre gel de sílice eluyendo con 0-10% de MeOH en DCM para dar imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazina cruda (Ej No. 3 G5) como un sólido de color amarillo amorfo. Se suspendió en HBr (33% en AcOH, 10 mi). mezcla resultante se agitó por aproximadamente 10 min y luego diluyó con EtOAc (80 mi). El precipitado se recogió mediante filtración y lavó exhaustivamente con EtOAc para dar bromhidrato de (R)-8-(piperidin-3-il)-3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazina y bromhidrato de (S)-8-(piperidin-3-il)-3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazina [er = 80:20] (2.61 g, 62.9% overall) como un sólido de color amarillo: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 0.63 min; EM m/z 242 (M + H) + ; LC analítica quiral (Tabla 1, Método 29) Rt = 17.75 min, o = negativo y Rt = 20.33 min, o = positivo.
Etapa H: (R)-(3-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)piperidin-1 -il)(3,3-difluorociclobutil)metanona A una solución de bromhidrato de (R)-8-(piperidin-3-il)-3 -/- imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazina y bromhidrato de (S)-8- (piperidin-3-il)-3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazina [er = 80:20] (0.30 g, 0.93 mmol), DIEA (0.52 mi, 3.0 mmol) y ácido 3,3- difluorociclobutancarboxílico (0.35 g, 3.1 mmol, Waterstone) en DMF (4 mi) se agregó EDOHCI (0.21 g, 1.1 mmol). La reacción se agitó a aproximadamente 25°C por aproximadamente 4 . La reacción se dividió con Na2C03 acuoso (2 M, 25 mi) y DCM (25 mi). La capa orgánica se separó, secó sobre Na2S04 anhidro, filtró, y concentró in vacuo. El residuo resultante se purificó sobre gel de sílice (12 g) usando 0-5% de MeOH en DCM y luego se purificó usando el Método General AA (Tabla 2, Método 23, Rt = 16.4 min, o = positivo) para dar (R)-(3-(3H-im¡dazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)piperidin-1 -H)(3,3-difluorociclobutil)-metanona (0.10 g, 30%): LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 1.85 min; EM m/z: 360 (M + H)+.
Ejemplo No. 4*: 4-((1 f?,3R,4S)-3-et¡l-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentiloxi)benzonitrilo Etapa A: 5-bromo-3-((trimetilsilil)etinil)pirazin-2-amina A una solución de 3,5-dibromopirazin-2-amina (125 g, 494 mmol), TEA (207.0 mi, 1483 mmol), e yoduro de cobre(l) (0.941 g, 4.94 mmol) en THF (1255 mi) se agregó PdCI2(PPh3)2 (3.47 g, 4.94 mmol). La mezcla de reacción se enfrió a aproximadamente -5-0°C y agregó una solución de (trimetilsilil)acetileno (65.0 mi, 470 mmol) en THF (157 mi) por goteo durante aproximadamente 15 min. La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente -5- 0°C por aproximadamente 1.5 h y luego se dejó calentar hasta temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción luego se filtró a través de una almohadilla de Celite® y lavó con THF hasta no eluir más producto. El material filtrado se concentró bajo presión reducida para dar un sólido de color marrón anaranjado. El sólido se trituró y sónico con éter de petróleo tibio (p.e. 30-60°C, 400 mi), enfrió a temperatura ambiente, recogió, lavó con éter de petróleo (p.e. 30-60°C; 2 x 60 mi), y secó para dar 5-bromo-3-((tr¡metilsilil)etinil)pirazin-2-amina (124 g, 93%, 93% de pureza) como un sólido de color marrón: LC/EM (Tabla 1, Método b) R, = 2.51 min; EM m/z: 270, 272 (M + H) + .
Etapa B: 2-bromo-5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]piraz¡na A una solución de 5-bromo-3-((trimetilsilil)etinil)pirazin-2-amina (3.00 g, 11.1 mmol) en DMF (60 mi) a aproximadamente 0°C se agregó NaH (60% de dispersión en aceite mineral, 0.577 g, 14.4 mmol) en tres porciones. Luego de aproximadamente 15 min, se agregó cloruro de p-toluensulfonilo (2.75 g, 14.4 mmol) y la reacción se dejó calentar lentamente a temperatura ambiente. Luego de aproximadamente 16 h, la mezcla de reacción se vertió sobre hielo-agua fría (120 mi) y el precipitado se recogió mediante filtración al vacío. El sólido crudo se disolvió en QCM (15 mi) y purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con DCM para dar 2-bromo-5-tosil-5H-pirrolo[2,3-bjpirazina (2.16 g, 52%): LC/EM (Tabla 1, Método c) R, = 1.58 min; EM m/z: 352, 354 (M + H) + .
Etapa C: 2-(5-tos¡l-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)hidrazincarboxilato de ferc-butilo y 1 -(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-£>]piraz¡n-2-il)hidrazincarboxilato de ferc-butilo A un matraz se agregó Pd2(dba)3 (3.90 g, 4.26 mmol), di-ferc-butil-(2,,4',6,-triisopropilbifenil-2-il)fosfano (3.62 g, 8.52 mmol), y 1,4-dioxano (453 mi). La mezcla de catalizador y ligando se desgasificó con una purga de vacío/nitrógeno (3 veces) y calentó a aproximadamente 80°C por aproximadamente 10 min. Luego se agregaron 2-bromo-5-tosil-5-/-pirrolo[2,3-¿)]pirazÍna (30.0 g, 85 mmol), hidrazincarboxilato de rere-butilo (16.9 g, 128 mmol), y NaOf-Bu (12.28 g, 128 mmol). Después de otra purga de vacío/nitrógeno, la reacción se calentó a aproximadamente 8Ó°C. Luego de aproximadamente 50 min, la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y filtró a través de una almohadilla de gel de sílice (6 cm de altura x 6 cm de diámetro), cubierta con Celite® (1 cm de altura x 6 cm de diámetro), lavando con EtOAc (3 x 150 mi). Se agregó agua (300 mi) al material filtrado y la capa orgánica se separó. La capa acuosa se extrajo con EtOAc adicional (3 x 200 mi). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con NH4CI acuoso saturado, NaHC03 acuoso saturado, y salmuera (400 mi de cada uno), secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida para dar un aceite de color marrón oscuro (45 g). El aceite de color marrón se disolvió en DCM (250 mi), se agregó gel de sílice (200 g), y la mezcla se concentró bajo presión reducida. La mezcla de sílice resultante se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc en heptano 25-65% para dar una mezcla de 2-(5-tosil-5H-pirrolo[2, 3-b]pirazin-2-il)hidrazincarboxilato de tere-butilo [regioisómero mayoritario] y 1-(5-tosil-5H-pirrolo[2, 3-b]pirazin-2-il)hidrazincarboxilato de tere-butilo [regioisómero minoritario] (18.8 g, 50%): LC/EM (Tabla 1, Método c) R, = 1.47 min; EM m/z: 404 (M + H) + .
Etapa D: 2-hidrazinil-5-tosil-5A7-pirrolo[2,3-b]pirazina A una mezcla de 2-(5-tosil-5/-/-pirrolo[2,3-£>]piraz¡h-2-il)hidrazincarboxilato de rere-butilo y 1 -(5-tosil-5/-/-pirrolo[2,3-<b]pirazin-2-il)hidrazincarboxilato de íerc-butilo (49.2 g, 122 mmol) en 1,4-dioxano (290 mi) se agregó HCI (4 M en 1 ,4-dioxano, 226 mi, 902 mmol). La reacción se calentó a aproximadamente 60°C por aproximadamente 2.5 h y luego se enfrió a aproximadamente 15-20°C. El sólido se recogió mediante filtración al vacío, lavó con EtOAc (3 x 50 mi), y luego trituró con Et20 (60 mi), recogió mediante filtración al vacío y secó a peso constante bajo vacío para dar 35.6 g de sólido. El sólido se agitó con una mezcla de NaHC03 acuoso saturado y EtOAc (1:1, 400 mi). Luego de aproximadamente 1 h, el sólido se recogió mediante filtración al vacío, lavó con agua helada (3 x 30 mi) y EtOAc (3 x 30 mi), y secó en un horno de vacío a peso constante para dar 2-hidrazinil-5-tosil-5H-p¡rrolo[2,3-b]piraz¡na como un sólido de color tostado (21.2 g, 57%): LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.88 min; EM m/z: 304 (M + H) + .
Etapa E: 4-(etoxi carbón il)-3-et¡l-2-(metoxicarbonil)c i clopenta-1 ,3-dienolato de sodio Un matraz de fondo redondo se cargó con THF (1.5 I) y luego agregó en porciones NaH (60% de dispersión en aceite mineral, 70.0 g, 1.75 mol). Se agregó más THF (500 mi) y la mezcla resultante se enfrió a aproximadamente -10°C y agregó propionilacetato de etilo (250 mi, 1.80 mol) por goteo durante aproximadamente 1 h con el fin de mantener la temperatura interna por debajo de aproximadamente 10°C. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 0.5 h para dar una solución de color amarillo traslúcida, y agregó 4-cloroacetoacetato de metilo (100 mi, 0.88 mol) por goteo durante aproximadamente 5 min. La mezcla resultante se calentó a aproximadamente 50°C por aproximadamente 19 h para dar una suspensión rojiza anaranjada. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, concentró bajo presión reducida y el líquido resultante se transfirió a un vaso de precipitados y diluyó con agua (350 mi). La mezcla se agitó en un baño de hielo por aproximadamente 2 h. El sólido se recogió mediante filtración al vacío y la torta de filtrado se enjuagó con agua (150 mi) y secó bajo vacío por aproximadamente 1 h. El sólido se suspendió en Et20 (1.5 I), filtró, lavó con Et20 (1.5 I), y secó bajo vacío. El sólido resultante se incluyó en una mezcla azeotrópica con tolueno (1 I) para dar un sólido que se suspendió nuevamente en Et20 (1 I) y recogió mediante filtración al vacío. La torta de filtrado se lavó con Et20 (500 mi) y secó bajo vacío para dar 4-(etox icarbonil)-3-et i l-2-(metoxicarbonil) ciclope n ta- 1 ,3-dienol ato de sodio (204.2 g, 89%) como un sólido de color beige: H RMN (DMSO-de) d 3.94 (q, J=7.1 Hz, 2H), 3.46 (s, 3H), 3.04 (q, J=7.2 Hz, 2H), 2.66 (s, 2H), 1.13 (t, J=7.1 Hz, 3H), 0.99 (t, J = 7.3 Hz, 3H).
Etapa F: 2-etil-4-oxociclopent-2-encarbox¡lato de etilo Un matraz de fondo redondo de 5 I se cargó con 4-(etoxicarbonil)-3-etil-2-(metox¡carbon¡l)ciclopenta-1,3-d¡enolato de sodio (316 g, 1205 mmol), KCI (126 g, 1687 mmol, JT-Baker), AcOH (241 mi, 4218 mmol, JT-Baker), tolueno (1850 mi) y agua (130 mi). La reacción se calentó a reflujo por aproximadamente 6 h, luego se enfrió a temperatura ambiente y agregó por goteo a NaHC03 (8% acuoso, 3.5 I). La mezcla bifásica resultante se extrajo con MTBE (2 x 1.5 I). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (1 I), secaron sobre MgS0 anhidro y concentraron bajo presión reducida para dar 191 g de material crudo que se purificó mediante destilación al vacío (97-99°C, 0.600 mM Hg) para dar 2-etil-4-oxociclopent-2-encarboxilato de etilo (160 g, 69%): H RMN (CDCI3) d 6.04 (m, 1H), 4.26-4.15 (m, 2H), 3.76-3.69 (m, 1H), 2.75-2.57 (m, 2H), 2.56-2.44 (m, 2H), 1.32-1.26 (m, 3H), 1.23-1.18 (m, 3H).
Etapa G: (1 S,2R,4S)-2-etil-4-hidroxic¡clopentancarboxilato de etilo Una mezcla de cloruro de cobre(l) (0.136 g, 1.37 mmol), (S)- (-)-2,2'-bis(difenilfosfino)-1,1'-binaftilo (0.854 g, 1.37 mmol), y NaOf-Bu (0.132 g, 1.37 mmol) en tolueno (50 mi) se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 15 min, luego se enfrió a aproximadamente 5°C y agregó polimetilhidrosiloxano (12 mi, 55 mmol). La mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 40 min a aproximadamente 5°C luego se enfrió a aproximadamente -12°C. Se agregó una solución de 2-etil-4-oxociclopent-2-encarboxilato de etilo (5.00 g, 27.4 mmol) y f-BuOH (14 mi, 148 mmol) en tolueno (50 mi) en una porción y la mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 16 h a aproximadamente -12°C. La mezcla de reacción se detuvo mediante la adición de MeOH (50 mi). Los solventes se eliminaron bajo presión reducida. El residuo se disolvió en MeOH (35 mi) y filtró a través de una almohadilla de Celite®. El material filtrado se concentró bajo presión reducida y el residuo se trituró con EtOAc (100 mi) y filtró. El material filtrado se concentró bajo presión reducida y el residuo se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice (280 g) eluyendo con un gradiente de 0-10% de EtOAc en heptano para dar (1 S,2R,4S)-2 etil-4-hidroxiciclopentancarboxilato de etilo (1.11 g, 22%): 1H RMN (CDCI3) d 4.30 (m, 1H), 4.24 - 4.08 (m, 2H), 2.88 (td, J = 2.1, 7.1 Hz, 1H), 2.40 (dt, J = 7.8, 14.0 Hz, 1H), 2.08 - 1.91 (m, 3H), 1.52 - 1.31 (m, 3H), 1.29 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 0.94 (t, J = 7.4 Hz, 3H). Etapa H: ácido (1 S,2R,4S)-2-etil-4-hidroxiciclopentancarboxílico Se agregó NaOH (1 N acuoso, 12 mi, 12 mmol) a (1 S,2R,4S)-2-et¡l-4-hidrox¡c¡clopentancarboxilato de etilo (1.11 g, 5.96 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 3 días y luego se extrajo con Et20 (3 x 25 mi). Los extractos en Et20 se descartaron y la porción acuosa se enfrió a aproximadamente 0°C. Se agregó HCI (5 N acuoso) lentamente para llevar el pH a aproximadamente 2. La suspensión acuosa resultante se extrajo con EtOAc (3 x 40 mi). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (2 x 80 mi), secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida para dar ácido (1 S,2R,4S)-2-etil-4-hidroxiciclopentancarboxílico (0.943 g, 100%) como un aceite traslúcido: 1H RMN (CDCI3) d 4.36 (tdd, J = 2.6, 4.9, 7.4, 1H), 2.95 (td, J = 2.4, 7.3, 1H), 2.41 (dt, J = 7.7, 14.1, 1H), 2.16 - 1.94 (m, 3H), 1.65 - 1.49 (m, 1H), 1.49 - 1.32 (m, 2H), 0.96 (q, J = 7.4, 3H).
Etapa I: (1 S,4S,5f?)-5-etil-2-oxabiciclo[2.2.1]heptan-3-ona ácido (1 S,2R,4S)-2-etil-4- idroxiciclopentancarboxílico (0.943 g, 5.96 mmol) en DCM (60 mi) se agregó TEA (2.5 mi, 18 mmol) y BOP-CI (1.821 g, 7.15 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 2 h y luego se vertió sobre Et20 (350 mi). El sólido se retiró mediante filtración lavando con Et20 (50 mi). El material filtrado se concentró bajo presión reducida para dar un aceite de color amarillo que se disolvió en DCM (5 mi) y agregó Et20 para dar un sólido. El sobrenadante se decantó y el sólido se lavó con más Et20. Los extractos orgánicos combinados se concentraron bajo presión reducida para dar (1 S,4S,5R)-5-etil-2-oxabiciclo[2.2.1]heptan-3-ona cruda que contenía aproximadamente 15% mol de TEA (0.912 g, 99%): H RMN (CDCI3) d 4.85 (s, 1H), 2.88 (s, 1H), 2.19 (m, 2H), 2.08 (m, 1H), 1.69 (m, 1H), 1.41 (m, 3H), 0.97 (t, J = 5.4, 3H).
Etapa J: (1 S,2R,4S)-2-etil-4-hidroxi-AT-(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)ciclopentancarbohidrazida A (1S,4S,5R)-5-etil-2-oxabiciclo[2.2.1]heptan-3-ona (0.835 g, 5.96 mmol) en 1,4-dioxano (12 mi) se agregó 2-h idrazin il-5-tosi lf 5H-pirrolo[2,3-/>]pirazina (Etapa D, 1.810 g, 5.96 mmol). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 80°C por aproximadamente 16 h, luego se enfrió a temperatura ambiente. Se agregaron 1,4-dioxano (25 mi) y trimetilaluminio (2 N en tolueno, 9 mi, 18 mmol) en forma secuencial. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 30 min, luego se agregó HCI (1 N acuoso, 50 mi) por goteo y la mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 30 min. Las capas se separaron y la porción acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 100 mi). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con agua (10 mi), NaHC03 acuoso saturado (15 mi), salmuera (15 mi) y secaron sobre gS0 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice (40 g) eluyendo con EtOAc al 100% para dar (1S, 2R,4S)-2-etil-4-hidroxi-N'-(5-tosil-5H-pirrolo[2, 3-b]piraz¡n-2-il)ciclopentancarbohidrazida (1.887 g, 71%): LC/EM (Tabla 1, Método b) R, = 2.05 min; EM m/z: 444 (M + H) + .
Etapa K: (1 S,2R,4R)-4-(4-cianofenoxi)-2-eti l-A/'-(5-tosi I-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)ciclopentancarbohidrazida A (1S,2R,4S)-2-etil-4-hidroxi-A/'-(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-¿>]pirazin-2-il)ciclopentancarbo-hidrazida (0.885 g, 1.99 mmol) en THF (15 mi) se agregó 4-hidroxibenzonitrilo (0.357 g, 2.99 mmol), trifenilfosfina (0.998 g, 2.99 mmol, unida a polímero, 3 mmol/g), y TEA (1.3 mi, 9 mmol). Se agregó DEAD (0.47 mi, 2.99 mmol) por goteo. La mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 1 h, luego se agregaron más trifenilfosfina (0.50 g, 1.5 mmol, unida a polímero, 3 mmol/g) y DEAD (0.2 mi, 1.3 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 16 h. El sólido se retiró mediante filtración lavando con DCM (5 x 5 mi) luego MeOH (4 x 5 mi). El material filtrado se concentró bajo presión reducida y el residuo se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice (40 g) eluyendo con un gradiente de 0-40% de EtOAc en DCM para dar (1 S,2R,4R)-4-(4-cianofenoxi)-2-etil-N'-(5-tosil-5H-pirrolo[2, 3-b]pirazin-2-il)ciclopentancarbohidrazida (0.958 g, 88%) como una espuma de color amarillo: LC/EM (Tabla 1, Método b) R, = 2.56 min; EM m/z: 545 (M + H) + .
Etapa L: 4-((1 /?,3 ?,4S)-3-et¡l-4-(6-tosil-6H-p¡rrolo[2,3-e] [1,2,4] triazolo [4, 3-a] pira zin-1-il)c¡clopentiloxi)benzonit rilo A (1S,2R,4R)-4-(4-cianofenoxi)-2-etil-A/,-(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-£>]pirazin-2-il)ciclopentancarboh¡drazida (0.958 g, 1.76 mmol) en 1,4-dioxano (18 mi) se agregó DIEA (1.2 mi, 7.0 mmol) y cloruro de tionilo (0.4 mi, 5.3 mmol). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 80°C por aproximadamente 2 h. El solvente se eliminó bajo presión reducida y el residuo se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice (80 g) eluyendo con un gradiente de 20-80% de EtOAc en DC para dar 4-((1 R, 3R, 4S)-3-etil-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2, 4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentiloxi)benzonitrilo (0.620 g, 67%): LC/EM (Tabla 1, Método b) R, = 2.65 min; EM m/z: 527 (M + H)\ Etapa M: 4-((1 ?,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]p¡razin-1-il)ciclopentiloxi)benzonitrilo A 4-((1 fl,3R,4S)-3-etil-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e]t1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclo-pentiloxi)benzonitrilo (0.826 g, 1.57 mmol) en 1,4-dioxano (16 mi) se agregó Na2C03 (solución acuosa 2 N, 16 mi, 31 mmol). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 80°C por aproximadamente 16 h. Las capas se separaron y la porción acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 40 mi). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con NaHC03 acuoso saturado (2 x 30 mi), salmuera (30 mi), secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó usando el Método General AA (Tabla 2, Método 17, Rt = 19.2 min, o = negativo) para dar 4-((1 R,3R,4S)-3- etil-4-(6H-pirrolo[2, 3-e][1,2, 4]triazolo[4, 3-a]pirazin- 1 -il)ciclopentiloxi)benzonitrilo (0.298 g, 51%): LC/EM (Tabla 1, Método b) R, = 2.07 min; EM m/z: 373 (M + H) + .
Ejemplo No. 5*: N-(((3R, 4R)-3-(6H-¡m idazo[1 ,5-a] pirrolo[2, 3-e]pirazin-1 -il)-4-metilpiperid¡n-1 -il)(pirrol¡din-1 -il)met¡len)cianamida Etapa A: 5-bromo-3-((trimetilsilil)etinil)pirazin-2-amina A una solución de 3,5-dibromopirazin-2-amina (125 g, 494 mmol), TEA (207.0 mi, 1483 mmol), e yoduro de cobre(l) (0.941 g, 4.94 mmol) en THF (1255 mi) se agregó PdCI2(PPh3)2 (3.47 g, 4.94 mmol). La mezcla de reacción se enfrió a aproximadamente -5-0°C y se agregó una solución de (trimetilsilil)acetileno (65.0 mi, 470 mmol) en THF (157 mi) por goteo durante aproximadamente 15 min. La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente -5-0°C por aproximadamente 1.5 h y luego se dejó calentar hasta temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción luego se filtró a través de una almohadilla de Celite® y lavó con THF hasta no eluir más producto. El material filtrado se concentró bajo presión reducida para dar un sólido de color marrón anaranjado. El sólido se trituró y sónico con éter de petróleo tibio (p e. 30-60°C, 400 mi), enfrió a temperatura ambiente, recogió, lavó con éter de petróleo (p e. 30-60°C; 2 x 60 mi), y secó para dar 5-bromo-3-((trimetilsilil)etinil)pirazin-2-amina (124 g, 93%, 93% de pureza) como un sólido de color marrón: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.51 min; EM m/z: 270, 272 (M + H) + .
Etapa B: 2-bromo-5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]p¡razina A una solución de 5-bromo-3-((trimetilsilil)etinil)piraz¡n-2-amina (3.00 g, 11.1 mmol) en DMF (60 mi) a aproximadamente 0°C se agregó NaH (60% de dispersión en aceite mineral, 0.577 g, 14.4 mmol) en tres porciones. Luego de aproximadamente 15 min, se agregó cloruro de p-toluensulfonilo (2.75 g, 14.4 mmol) y la reacción se dejó calentar lentamente a temperatura ambiente. Luego de aproximadamente 16 h, la mezcla de reacción se vertió sobre hielo-agua fría (120 mi) y el precipitado se recogió mediante filtración al vacío. El sólido crudo se disolvió en DCM (15 mi) y purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con DCM para dar 2-bromo-5-tosil-5H-pirrolo[2, 3-bjpirazina (2.16 g, 52%): LC/EM (Tabla 1, Método c) R, = 1.58 min; EM m/z: 352, 354 (M + H) + .
Etapa C: clorhidrato de (5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)metanamina Un reactor de 5 I se cargó con 2-bromo-5-tosil-5--pirrolo[2,3-£>]pirazina (98.8 g, 281 mmol), polvo de zinc (3.50 g, 53.3 mmol), trifluoroacetato de paladio(ll) (4.0 g, 12 mmol), y 2-(di-t-butilfosfino)-l , 1 '-binaftilo racémico (9.8 g, 24.7 mmol). El matraz se equipó con un dispositivo de adición de polvo en el cual se colocó cianuro de zinc (10.0 g, 157 mmol) para agregarse en una etapa posterior. El recipiente se purgó con argón durante no más de aproximadamente 30 min y luego se agregó DMA burbujeado con argón (2 I) al reactor. La mezcla se agitó y calentó a aproximadamente 50°C mientras se mantenía una atmósfera de argón. La solución de color marrón oscuro resultante se calentó adicionalmente a aproximadamente 95°C mientras se agregaba el cianuro de zinc, a partir del dispositivo de adición de polvo, por porciones durante aproximadamente 15 min. Al alcanzar aproximadamente 95°C, la mezcla color marrón se agitó por aproximadamente otras 16 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, para precipitar las sales. La mezcla se filtró a través de un embudo Buchner que contenía asistente de filtrado y la torta de filtrado se lavó con DMA (20 mi). Una solución del producto crudo en DMA se agregó a agua fría (<10°C) (16 I) y agitó por aproximadamente 30 min. La suspensión resultante se filtró y la torta de filtrado se enjuagó nuevamente con agua (1 I). La almohadilla húmeda resultante se secó en un horno de vacío a aproximadamente 50°C. El sólido crudo se disolvió en DCM (1.5 I) y secó adicionalmente sobre MgS04 anhidro. Luego de la filtración, la solución se pasó a través de una almohadilla de sílice (140 g), usando DCM como eluyente hasta detectarse que eluyeron sólo predominantemente impurezas de la almohadilla. El solvente se eliminó bajo presión reducida y el sólido crudo se trituró con MeOH/DCM (4:1, 10 volúmenes del solvente por gramo de sólido crudo) a temperatura ambiente por aproximadamente 5 h. El sólido se filtró y lavó con MeOH (300 mi). El producto se secó en un horno de vacío para dar 5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-carbonitrilo (58.8 g, 70%) como un sólido de color blanco: 1H RMN (CDCI3) d 8.67 (s, 1H), 8.21 (d, J = 4.2 Hz, 1H), 8.07 (d, J=8.4 Hz, 2H), 7.34 (d, J=8.1 Hz, 2H), 6.89 (d, J=4.2 Hz, 1H), 2.42 (s, 3H). Un reactor de presión de acero inoxidable 316 de 2 I se cargó con Pd/C 5% en peso (15.4 g de humedecido 63.6% en peso con material acuoso, 5.6 g base seca, 2.6 mmol Johnson Matthey A503032-5), 5-tosil-5H-pirrolo[2,3-¿)]pirazin-2-carbonitrilo (55 g, 184 mmol), THF (1.1 I), agua desionizada (165 mi), HCI (37% en peso acuoso, 30 mi, 369 mmol) y quinolina (1.1 mi, 9.0 mmol). El recipiente se purgó, presurizó, y mantuvo a 40 psi con hidrógeno provisto por un depósito de alta presión. La mezcla se agitó enérgicamente a aproximadamente 25°C. Luego de aproximadamente 5 h el reactor se ventiló y purgó con nitrógeno para eliminar la mayor parte del hidrógeno disuelto, y la mezcla de reacción se filtró para eliminar el catalizador. El reactor y la almohadilla de catalizador se enjuagaron con THF: agua (1:1, 2 ? 40 mi). El material filtrado combinado y enjuagado se concentró y EtOH (500 mi) se agregó y luego se eliminó bajo presión reducida. Después de formar otros dos azeótropos usando EtOH (2 x 500 mi), el residuo crudo se concentró bajo presión reducida para dar un residuo (76 g) que se suspendió en EtOH (550 mi) y agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 4 h. El sólido se recogió mediante filtración y lavó con EtOH frío (50 mi). La almohadilla húmeda se secó en un horno de vacío para dar clorhidrato de (5-tos¡l-5H-pirrolo[2, 3-b]pirazin-2-il)metanamina (51.2 g, 82%) como un sólido de color blanco: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.44 min; EM m/z 303 (M + H) + .
Etapa D: clorhidrato de ácido 4-metilpiperidin-3-carboxílico agregó AcOH (380 mi) a clorhidrato de ácido metilnicotínico (50.5 g, 291 mmol, Maybridge) y Pt02 (5.05 g, 22.2 mmol, Johnson Matthey) en un reactor de acero inoxidable de 600 mi. La mezcla se agitó bajo 220 psi de hidrógeno a temperatura ambiente por aproximadamente 14 hr. La solución sobrenadante se filtró a través de una membrana de Nylon y enjuagó con suficiente AcOH hasta restar sólo el catalizador. El material filtrado se concentró bajo presión reducida para dar un aceite transparente que solidificó luego de enfriar a temperatura ambiente para dar ácido 4-metilpiperidin-3-carboxílico crudo con AcOH como un excipiente (88.94 g, 170% crude): LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 0.44 min; EM m/z: 144 (M + H) + .
Etapa E: (2S.3S)-2.3-dihidroxisuccinato de (3R,4f?)-4-metilpiperidin-3-carboxilato de etilo Se disolvió clorhidrato de ácido 4-metilpiperidin-3-carboxílico racémico crudo (~70% de pureza química, aproximadamente 15:1 cis:trans) en AcOH (2:1, 300 g) en EtOH (1500 mi) y roció con HCI (gas) por aproximadamente 15 min. La mezcla de reacción se equipó con un balón para permitir la expansión y luego se calentó a aproximadamente 85°C. Luego de aproximadamente 48 h, la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y concentró in vacuo para dar un jarabe espeso que contenía clorhidrato de ácido etil-4-metilpiperidin-3- carboxílico racémico (260 g). A este éster se agregó CHCI3 (1000 mi) seguido por NaHC03 acuoso saturado (500 mi) y NH4OH (15% acuoso, 500 mi). La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo adicionalmente con CHCI3 (1000 mi). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S04 anhidro, filtraron, y luego concentraron in vacuo para dar 4-metilpiperidin-3-carboxilato de etilo crudo (200 g) como un aceite. A una suspensión de ácido (2S,3S)-2,3-dihidroxisuccínico (150 g, 1001 mmol) en MeOH (200 mi) se agregó una solución de 4-metilpiperidin-3-carboxilato de etilo crudo (200 g, 1168 mmol) en EtOAc (3000 mi). La mezcla se agitó rápidamente por aproximadamente 3 h y los sólidos resultantes se recogieron mediante filtración para dar la sal (2S,3S)-2,3-dihidroxisuccinato como un sólido de color blanco (245 g) (aproximadamente 15:1 cis:trans, er = 48:52 para estereoisómeros cis). Los sólidos se disolvieron en MeOH (1Ú00 mi) y agregó EtOAc (3000 mi) lentamente hasta que se comenzaron a formar los sólidos. Luego de aproximadamente 30 min, los sólidos se recogieron mediante filtración y secaron parcialmente al vacío para dar una mezcla estereoenriquecida que contenía (2S,3S)-2,3-dihidroxisuccinato de (3R,4R)-4-metilpiperid¡n-3-carboxilato de etilo como un sólido de color blanco (145 g) (aproximadamente 15:1 cis:trans, er = 60:40 para enantiómeros (3R, 4R):(3S, 4S)). Los sólidos se disolvieron en MeOH (1000 mi) y dividieron en cuatro lotes. Cada lote (250 iml) se diluyó con MeOH (500 mi) y agregó EtOAc (3000 mi) lentamente a la solución hasta formarse los sólidos. Luego de aproximadamente 4-15 h, los sólidos se recogieron mediante filtración y secaron in vacuo para dar varios lotes de (2S,3S)-2,3-dihidroxisuccinato de (3R,4R)-4-metilpiper¡din-3-carbox¡lato de etilo parcialmente resuelto, éstos se combinaron y disolvieron en MeOH (1000 mi) y agregó EtOAc (4000 mi) lentamente. Luego de agitar por aproximadamente 1 h los sólidos se recogieron mediante filtración para dar (2S, 3S)-2,3-dihidroxisuccinato de (3R,4R)-4-metilpiperid¡n-3-carboxilato de etilo (4.5 g) (aproximadamente 15:1 cis:trans, er = 98:2 para enantiómeros (3R, AR):(3S, 4S)), LC analítica quiral (Tabla 2, Método 30) isómero minoritario Rt = 12.2 min; EM m/z 343 (M + (2S,3S)-2,3-dihidroxisuccinato +Na) + ; isómero mayoritario Rt = 10.6 min; EM m/z: 343 (M + (2S,3S)-2.3-dihidroxisuccinato + Na) + Etapa F: ácido (3R,4R)-1 -(ferc-butoxicarbonil)-4-metilpiperidin-3-carboxílico A un matraz cargado con (2S,3S)-2,3-dihidroxisuccinato de (ZR, 4ft)-4-metilpiperid¡n-3-carbox¡lato de etilo (36.9 g, 115 mmol) se agregó una solución de HCI (6 N acuoso, 191 mi). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 60°C. Luego de aproximadamente 2 h, la mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 90°C. Luego de aproximadamente 4 h la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y concentró in vacuo. Al residuo se agregó NaHC03 (122 g, 1148 mmol) y dicarbonato de di-ferc-butilo (37.6 g, 172 mmol) seguido por una mezcla de 1,4-dioxano (500 mi) y agua (500 mi). Luego de aproximadamente 2 h, se agregaron Et20 (500 mi) y agua (500 mi) a la mezcla de reacción. El pH se ajustó a aproximadamente 4 con HCI acuoso 1 N. La capa orgánica se separó, secó sobre Na2S04 anhidro, filtró, y concentró in vacuo para dar un sólido de color blanco. El sólido se suspendió en heptano y filtró para dar ácido (3R,4R)-1 -(ferc-butoxicarbonil)-4-metilpiperidin-3-carboxílico (25 g, 89%) como un sólido de color blanco: LC/EM (Tabla 1, Método b) R, = 1.90 min; EM m/z: 244 (M + H) + .
Etapa G: (3 ?,4 ?)-4-metil-3-((5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]piraz¡n-2-il)metilcarbamoil)piperidin-1 -carboxilato de rere-butilo A una suspensión de clorhidrato de (5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)metanamina (34.0 g, 100 mmol, Ejemplo No. 5, Etapa C), ácido (3R,4R)-1 -(rerc-butoxicarbonil)-4-metilpiperidin-3-carboxílico (24.43 g, 100 mmol) y HATU (38.2 g, 100 mmol) en DCM (700 mi) se agregó DIEA (52.6 mi, 301 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 45 min. La reacción se lavó con NaHC03 acuoso saturado (300 mi). La capa orgánica se separó, secó sobre Na2S04 anhidro, filtró, luego concentró in vacuo. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice (330 g) usando EtOAc 33-100% en heptano para dar (3R,4R)-4-metil-3-((5-tosil-5H-pirrolo[2, 3-b]pirazin-2-il)metilcarbamoil)piperidin-1 -carboxilato de tere-butilo (53 g, 100%) como una espuma de color amarillo pálida: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.40 min; EM m/z: 528 (M + H) + .
Etapa H: (3R,4R)-4-metil-3-(6-tosil-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)piperidin-1 -carboxilato de íerc-butilo Una mezcla de (3R, 4R)-4-metil-3-((5-tosil-5H-pirrolo[2,3-£>]pi ra zin-2-M)metil-carbamoil)-piperidin-1 -carboxilato de rere-butilo (53 g, 100 mmol) y reactivo de Lawesson (22.4 g, 55.2 mmol) en 1,4-dioxano (500 mi) se calentó a aproximadamente 80°C por aproximadamente 1 h. La reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente y luego se dividió entre EtOAc (1000 mi) y NaHC03 acuoso saturado (700 mi). La capa orgánica se lavó con más NaHC03 acuoso saturado (700 mi), secó sobre Na2S0 anhidro, filtró, luego concentró in vacuo. El residuo resultante se disolvió en 1,4-dioxano (500 mi) luego se agregó trifluoroacetato de mercurio (II) (54.0 g, 127 mmol). La reacción se agitó a aproximadamente 25°C por aproximadamente 1 h. La reacción se dividió con Na2S203 acuoso saturado (500 mi)/ agua (500 mi) con DCM (1000 mi). Las capas se filtraron a través de Celite® y la almohadilla de Celite® se lavó con DCM (500 mi). Las fases combinadas se separaron, luego la capa orgánica se lavó con NaHC03 acuoso saturado (800 mi). La capa orgánica se separó, secó sobre Na2S04 anhidro, filtró, y luego concentró in vacuo. El residuo resultante se purificó sobre gel de sílice (330 g) usando 0-40% EtOAc en DCM para dar (3R, 4f? -4-metil-3-(6-tósil-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 - i I) pipe ridin-1 - carboxilato de ferc-butilo (40.5 g, 79%) como una espuma de color amarillo: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.62 min; EM m/z: 510 (M + H) + .
Etapa I: (3 ?,4R)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -¡I)-4-metiipiperidin-1 -carboxilato de ferc-butilo A una solución de (3R, 4f?)-4-metil-3-(6-tos¡l-6H-im¡dazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e] irazin-1 -i I ) pi pe rid i n - 1 -carboxilato de ferc-butilo (40 g, 78 mmol) en 1,4-dioxano (160 mi) se agregó NaOH (1 N acuoso, 157 mi). La mezcla se calentó a aproximadamente 60°C por aproximadamente 1 h. La mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente. La mezcla se dividió con HCI (4 N acuoso, 50 mi) y extrajo con DCM (2 x 300 mi). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (400 mi), secaron sobre Na2S04 anhidro, filtraron, luego concentraron in vacuo. El producto se purificó sobre gel de sílice (330 g) usando 1-5% de MeOH en DCM para dar (3R, 4/? -3-(6H-¡midazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1-il)-4-metilpiperidin-1 -carboxilato de rere-butilo (30 g, 99%): LC/EM (Tabla 1, Método b) R, = 2.00 min; EM m/z 356 (M + H) + .
Etapa J: clorhidrato de 1 -((3R,4R)-4-metilpiperidin-3-il)-6H-¡midazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazina A una solución de (3R, 4ft)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4-metil-p¡peridin-1 -carboxilato de íerc-butilo (27.9 g, 78 mmol) en 1,4-dioxano (400 mi) se agregó HCI (4 N en 1,4-dioxano, 58.9 mi, 235 mmol). La suspensión resultante se calentó a aproximadamente 60°C por aproximadamente 1 h. La reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente y luego filtró, lavó con 1,4-dioxano (100 mi) seguido por Et20 (100 mi), para dar clorhidrato de 1 -((3R,4R)-4-metilpiperidin-3-il)-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazina (20.6 g, 89%) como un sólido de color tostado: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 1.27 min; EM m/z: 256 (M + H) + .
Etapa K: A/-(((3R,4/?)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1-il)-4-metilpiperidin-1 -i I )( p i r r o I i d i n -1 -il)metilen)cianamida A una solución de cianocarbonimidato de difenilo (0.163 g, 0.685 mmol) y DIEA (0.239 mi, 1.371 mmol) en MeCN (5 mi) se agregó clorhidrato de 1 -((3R,4R)-4-metilpiperidin-3-il)-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazina (0.20 g, 0.68 mmol). La reacción se calentó a aproximadamente 80°C por aproximadamente 2 h. La mezcla de reacción se concentró in vacuo. El residuo se disolvió en pirrolidina (1.0 mi, 12 mmol) y transfirió a un frasco para microondas sellado. La reacción se calentó a aproximadamente 120°C por aproximadamente 30 min en un microondas CEM. La mezcla de reacción se concentró in vacuo y purificó mediante RP-HPLC (Tabla 1, Método i) para dar N-(((3R,4R)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1-il)-4- metil piperidin-1 -il)(pirrolidin-1 -il)-metilen)cianam ida (0.030 g, 11%): LC/EM (Tabla 1 , Método b) Rt =1.62 min; m/z: 377 (M + H) + . Ejemplo No. 6*: ( ?)-(3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]p¡ razin-1-il)piperidin-1-il)(4, 4 -d i fluoro piperidin-1 -il)metanona Etapa A: 5-bromo-3-((trimetilsilil)etinil)pirazin-2-am¡na A una solución de 3,5-dibromopirazin-2-amina (125 g, 494 mmol), TEA (207.0 mi, 1483 mmol), e yoduro de cobre(l) (0.941 g, 4.94 mmol) en THF (1255 mi) se agregó PdCI2(PPh3)2 (3.47 g, 4.94 mmol). La mezcla de reacción- se enfrió a aproximadamente -5-0°C y agregó una solución de (trimetilsilil)acetileno (65.0 mi, 470 mmol) en THF (157 mi) por goteo durante aproximadamente 15 min. La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente -5-0°C por aproximadamente 1.5 h y luego se dejó calentar hasta temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción luego se filtró a través de una almohadilla de Celite® y lavó con THF hasta no eluir más producto. El material filtrado se concentró bajo presión reducida para dar un sólido de color marrón anaranjado. El sólido se trituró y sónico con éter de petróleo tibio (p.e. 30-60°C, 400 mi), enfrió a temperatura ambiente, recogió, lavó con éter de petróleo (p.e. 30-60°C; 2 x 60 mi), y secó para dar 5-bromo-3-((trimetilsilil)etinil)pirazin-2-amina (124 g, 93%, 93% de pureza) como un sólido de color marrón: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.51 min; EM m/z: 270, 272 (M + H) + .
Etapa B: 2-bromo-5-tosil-5H-pirrolo[2,3- ]pirazina A una solución de 5-bromo-3-((trimetilsilil)etinil)pirazin-2-amina (3.00 g, 11.1 mmol) en DMF (60 mi) a aproximadamente 0°C se agregó NaH (60% de dispersión en aceite mineral, 0.577 g, 14.4 mmol) en tres porciones. Luego de aproximadamente 15 min, se agregó cloruro de p-toluensulfonilo (2.75 g, 14.4 mmol) y la reacción se dejó calentar lentamente a temperatura ambiente. Luego de aproximadamente 16 h, la mezcla de reacción se vertió sobre hielo-agua fría (120 mi) y el precipitado se recogió mediante filtración al vacío. El sólido crudo se disolvió en DCM (15 mi) y purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con DCM para dar 2-bromo-5-tosil-5H-pirrolo[2, 3-bjpirazina (2.16 g, 52%): LC/EM (Tabla 1, Método c) R, = 1.58 min; EM m/z: 352, 354 (M + H) + .
Etapa C: clorhidrato de (5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)metanamina Un reactor de 5 I se cargó con 2-bromo-5-tos¡l-5-/-pirrolo[2,3-jb]pirazina (98.8 g, 281 mmol), polvo de zinc (3.50 g, 53.3 mmol), trifluoroacetato de paladio(ll) (4.0 g, 12 mmol), y 2-(di-t-butilfosfino)- , 1 '-binaftilo racémico (9.8 g, 24.7 mmol). El matraz se equipó con un dispositivo de adición de polvo en el cual se colocó cianuro de zinc (10.0 g, 157 mmol) para agregarse más adelante. El recipiente se purgó con argón durante no más de aproximadamente 30 min y luego se agregó DMA burbujeado con argón (2 I) al reactor. La mezcla se agitó y calentó a aproximadamente 50°C mientras se mantenía una atmósfera de argón. La solución de color marrón oscuro resultante se calentó adicionalmente a aproximadamente 95°C mientras se agregaba el cianuro de zinc, a partir del dispositivo de adición de polvo, por porciones durante aproximadamente 15 min. Al alcanzar aproximadamente 95°C, la mezcla color marrón se agitó por aproximadamente otras 16 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, para precipitar las sales. La mezcla se filtró a través de un embudo Buchner que contenía asistente de filtrado y la torta de filtrado se lavó con DMA (20 mi). Una solución del producto crudo en DMA se agregó a agua fría (<10°C) (16 I) y agitó por aproximadamente 30 min. La suspensión resultante se filtró y la torta de filtrado se enjuagó nuevamente con agua (1 I). La almohadilla húmeda resultante se secó en un horno de vacío a aproximadamente 50°C. El sólido crudo se disolvió en DCM (1.5 I) y secó adicíonalmente sobre MgS04 anhidro. Luego de la filtración, la solución se pasó a través de una almohadilla de sílice (140 g), lavando con más solvente hasta detectarse que eluyeron sólo predominantemente impurezas de la almohadilla. El solvente se eliminó bajo presión reducida y el sólido crudo se trituró con MeOH/DCM (4:1, 10 volúmenes del solvente por gramo de sólido crudo) a temperatura ambiente por aproximadamente 5 h. El sólido se filtró y lavó con MeOH (300 mi). El producto se secó en un horno de vacío para dar 5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-carbonitrilo (58.8 g, 70%) como un sólido de color blanco: 1H RMN (CDCI3) d 8.67 (s, 1H), 8.21 (d, J = 4.2 Hz, 1H), 8.07 (d, J=8.4 Hz, 2H), 7.34 (d, J=8.1 Hz, 2H), 6.89 (d, J=4.2 Hz, 1H), 2.42 (s, 3H). Un reactor de presión de acero inoxidable 316 de 2 I se cargó con Pd/C 5% en peso (15.4 g de humedecido 63.6% en peso con material acuoso, 5.6 g base seca, 2.6 mmol, Johnson Matthey A503032-5), 5-tosil-5H-pirrolo[2,3-£>]pirazin-2-carbon¡trilo (55 g, 184 mmol), THF (1.1 I), agua desionizada (165 mi), HCI (37% en peso acuoso, 30 mi, 369 mmol) y quinolina (1.1 mi, 9.0 mmol). El recipiente se purgó, presurizó, y mantuvo a 40 psi con hidrógeno provisto por un depósito de alta presión. La mezcla se agitó enérgicamente a aproximadamente 25°C. Luego de aproximadamente 5 h el reactor se ventiló y purgó con nitrógeno para eliminar la mayor parte del hidrógeno disuelto, y la mezcla de reacción se filtró para eliminar el catalizador. El reactor y la almohadilla de catalizador se enjuagaron con THF:agua (1:1, 2 x 40 mi). El material filtrado combinado y enjuagues se concentraron y agregó EtOH (500 mi). Después de dos cambios de solvente adicionales con EtOH (2 x 500 mi)-, el residuo crudo se concentró bajo presión reducida para dar un residuo (76 g) que se suspendió en EtOH (550 mi) y agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 4 h. El sólido se recogió mediante filtración y lavó con EtOH frío (50 mi). La almohadilla húmeda se secó en un horno de vacío para dar clorhidrato de (5-tosil-5H-pirrolo[2, 3-b]piraz¡n-2-il)metanam¡na (51.2 g, 82%) como un sólido de color blanco: LC/EM (Tabla 1, Método a) R, = 1.44 min; EM m/z: 303 (M + H) + .
Etapa D: 3-((5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)metilcarbamoil)-piperidin- -carboxilato de (f?)-íerc-butilo A una solución de clorhidrato de (5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)metanamina (5 g, 14.7 mmol) en DCM (78 mi) se agregó DIEA (7.7 mi, 44.3 mmol) y agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 10 min y luego agregó ácido (R)-N- oc-piperidin-3-carboxílico (3.38 g, 14.7 mmol, CNH-Technologies) y HATU (5.61 g, 14.7 mmol). La mezcla se agitó por aproximadamente 1 h a temperatura ambiente y agregó agua (30 mi) y las capas se separaron. La capa orgánica se lavó con NaHC03 acuoso saturado (30 mi) y salmuera (30 mi), secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida. El material crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-5% de MeOH en DCM para dar 3-((5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)metilcarbamoil)piperidin-1 -carboxilato de (R)-terc-butilo crudo (7.58 g, 94%): LC/EM (Tabla 1, Método b) R» = 2.30 min; EM m/z: 514 (M + H) + .
Etapa E: 3-((5-tosii-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)metilcarbamotioil)-piperidin-1 -carboxilato de ( ?)- rere-butilo A una solución de 3-((5-tosil-5 --p¡rrolo[2,3-/t>]p¡razin-2-il)metilcarbamoil)-piperidin-1 -carboxilato de (R)-rerc-butilo (7.58 g, 13.8 mmol) en 1,4-dioxano (130 mi) se agregó reactivo de Lawesson (3.37 g, 8.32 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 60°C por aproximadamente 2 h, luego se enfrió a temperatura ambiente y concentró bajo presión reducida. El residuo crudo se disolvió con EtOAc (40 mi) y lavó con NaHC03 acuoso saturado, (3 x 40 mi), salmuera (30 mi), secó sobre gS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida. El material crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-5% de MeOH en DCM para dar 3-((5-tosil-5H-pirrolo[2, 3-b]pirazin-2-il)metilcarbamotioil)piperidin-1 -carboxilato de (R)-terc-butilo (5.6 g, 74%, UV pureza 97%): LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.60 min; EM m/z: 530 (M + H) + .
Etapa F: 3-(6-tosil-6H-im¡dazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)piperidin-1 -carboxilato de (R)-ferc-butilo A una solución de 3-((5-tos¡l-5H-pirrolo[2,3-£>]p¡razin-2-il)metilcarbamotioil)-piperidin-1 -carboxilato de (f?)-f ere-butilo (5.61 g, 10.3 mmol) en 1,4-dioxano (96 mi) se agregó trifluoroacetato de mercurio (II) (4.38 g, 10.3 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 2 h, luego filtró a través de una almohadilla de Celite®. La almohadilla de Celite® se enjuagó con EtOAc (50 mi) y el material filtrado se concentró bajo presión reducida. El residuo crudo se disolvió en EtOAc (40 mi) y la fase orgánica se lavó con NaHC03 acuoso saturado (2 x 40 mi), salmuera (30 mi), secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida. El material crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-5% de MeOH en DCM para dar 3-(6-tosil-6H-imidazo[1 , 5-a]pirrolo[2, 3-e]pirazin-1 -il)piperidin-1 -carboxilato de (R)-terc-butiio (4.4 g, 87%): LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.49 min; EM m/z. 496 (M + H)\ Etapa G: 3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)piperidin-1 -carboxilato de (R)-íerc-butilo A una solución de 3-(6-tosil-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]piraz¡n-1-il)piperidin-1-carboxilato de (R)-ferc-butilo (4.44 g, 8.96 mmol) en 1,4-dioxano (54 mi) se agregó NaOH (2 N acuoso, 8.9 mi, 18 mmol), y la mezcla resultante se calentó a aproximadamente 60°C por aproximadamente 3 h. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y agregaron EtOAc (30 mi) y NH4CI acuoso saturado (20 mi). La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo adicionalmente con EtOAc (40 mi). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (40 mi), secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida. El material se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-10% de MeOH en DCM para dar 3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)piperid¡n-1-carboxilato de (R)-terc-butilo (2.80 g, 92%): LC/EM (Tabla 1, Método b) R, = 1.85 min; EM miz: 342 (M + H)+.
Etapa H: clorhidrato de (R)-1 -(piperidin-3-il)-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazina Un matraz de fondo redondo se cargó con 3-(6H-imidazo[1,5-a]p¡rrolo[2,3-e]pirazin-1-il)p¡peridin-1-carboxilato de (R)-rerc-butilo (2.8 g, 8.20 mmol), 1,4-dioxano (24 mi) y HCI (4 N en 1,4-dioxano, 6.2 mi, 24.6 mmol). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 60°C por aproximadamente 18 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, agregó Et20 (40 mi) y la mezcla se agitó por aproximadamente 15 min. El sólido se recogió mediante filtración al vacío y lavó con t20 (50 mi) luego secó en un horno de vacío a aproximadamente 60°C para dar clorhidrato de (R)-1 -(piperidin-3-il)-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazina como un sólido blancuzco (2.4 g, 94%): LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 0.81 min; EM m/z 242 (M + H) + . Etapa I: (R)-(3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)piperidin-1 -il)(4,4-dif luoropiperidin-1 -il)metanona A una solución de clorhidrato de (R)-1 -(piperidin-3-il)-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazina (0.24 g, 0.76 mmol) en piridina (7.2 mi) se agregó CDI (0.14 g, 0.87 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a aproximadamente 50°C por aproximadamente 2 h. Se agregó más CDI (0.02 g, 0.14 mmol) y la mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 1 h. A la mezcla de reacción se agregó clorhidrato de 4,4-difluoropiperidina (0.12 g, 0.76 mmol). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 55°C por aproximadamente 1 h, enfrió a temperatura ambiente, y agitó por aproximadamente 2 d. El solvente se eliminó bajo presión reducida y el residuo crudo se disolvió con DCM (5 mi) y lavó con agua (2 mi). La capa acuosa se extrajo con DCM (2 mi). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (3 mi), secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida. El material crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-5% de MeOH en DCM para dar (R)-(3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 - il)piperidin-1-il)(4,4-difluoropiperidin-1-il)metanona (0.146 g, 49%) como un sólido blancuzco; LC/E (Tabla 1, Método b) Rt = 1.70 min; EM m/z: 389 (M + H)+.
Ejemplo No. 7: N-((1S,3S,4R)-3-(3M-¡m¡dazo[1,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)-4-metilciclopentil)-3,3,3-trifluoropropan-1-sulfonamida Etapa A: 5-bromo-3-((trimetilsilil)etinil)pirazin-2-amina A una solución de 3.5-dibromopirazin-2-amina (125 g, 494 mmol), TEA (207.0 mi, 1483 mmol), e yoduro de cobre (I) (0.941 g, 4.94 mmol) en THF (1255 mi) se agregó PdCI2(PPh3)2 (3.47 g, 4.94 mmol). La mezcla de reacción se enfrió a aproximadamente -5-0°C y agregó una solución de (trimetilsilil)acetileno (65.0 mi, 470 mmol) en THF (157 mi) por goteo durante aproximadamente 15 min. La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente -5-0°C por aproximadamente 1.5 h y luego se dejó calentar a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción luego se filtró a través de una almohadilla de Celite® y lavó con THF hasta que no eluyó más producto. El material filtrado se concentró bajo presión reducida para dar un sólido de color marrón-anaranjado. El sólido se trituró y sónico con éter de petróleo caliente (punto de ebullición 30-60°C, 400 mi), enfrió a temperatura ambiente, recogió, lavó con éter de petróleo (punto de ebullición 30-60°C; 2 x 60 mi), y secó para dar 5-bromo-3-((trimetilsilil)etinil)pirazin-2-amina (124 g, 93%, 93% de pureza) como un sólido de color marrón: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.51 min; EM m/z: 270, 272 (M + H) + .
Etapa B: 2-Bromo-5-tosil-5H-pirrolo[2,3-to]pirazina A una solución de 5-bromo-3-((trimetilsilil)et¡nil)pirazin-2-amina (3.00 g, 11.1 mmol) en DMF (60 mi) a aproximadamente 0°C se agregó NaH (60% de dispersión en aceite mineral, 0.577 g, 14.4 mmol) en tres porciones. Luego de aproximadamente 15 min, se agregó cloruro de p-toluensulfonilo (2.75 g, 14.4 mmol) y la reacción se dejó calentar lentamente a temperatura ambiente. Luego de aproximadamente 16 h, la mezcla de reacción se vertió sobre hielo-agua fría (120 mi) y el precipitado se recogió mediante filtración al vacío. El sólido crudo se disolvió en DCM (15 mi) y purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con DCM para dar 2-bromo-5-tosil-5H-pirrolo[2,3-bjpirazina (2.16 g, 52%): LC/EM (Tabla 1, Método c) Rt = 1.58 min; EM m/z: 352, 354 (M + H) + .
Etapa C: 5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-ilcarbamato de tere-butilo Se cargó 2-bromo-5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina (30.0 g, 85 mmol), carbamato de ferc-butilo (14.9 g, 128 mmol), carbonato de potasio malla de 325 (35.3 g, 256 mmol), acetato de paladio (0.19 g, 0.85 mmol) y 9,9-dimetil-4,5-bis(difenilfosfino)xanteno (Xantphos) (0.99 g, 1.70 mmol) a un reactor cilindrico de tres cuellos de 1 I equipado con un agitador vertical, una termopar y un condensador de reflujo. Los sólidos se purgaron con argón por no menos de 120 min. Se cargó 2-metil-butanol (240 ml) y 1,4-dioxano (60 ml) a un matraz de fondo redondo de 500 ml separado y purgó con argón por no menos de 60 min. La mezcla de solventes se transfirió al matraz de 1 I usando una cánula bajo una presión positiva de argón, la temperatura se elevó a aproximadamente 95°C y la mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 3 h bajo una presión positiva de argón. La mezcla de reacción se enfrió a aproximadamente 40°C, agregó THF (100 ml) y filtró a través de una almohadilla de celite de 2 pulgadas (5.8 cm). La mezcla de reacción se dividió en 2 lotes iguales (aproximadamente 200 ml) y cada uno de los lotes se purificó por separado. Cada lote se diluyó con THF (250 mi) y transfirió a un matraz cilindrico de 1 I equipado con una barra de agitación magnética. Se agregó una solución de L-cisteína (0.76 g), bicarbonato de potasio (1.52 g) y cloruro de sodio (0.76 g) en agua (250 mi) al matraz anterior y dejó agitar por aproximadamente 2-4 h. La capa acuosa se separó. Se observó la formación de una capa superficial rugosa que se mantuvo con la capa orgánica. La capa orgánica se lavó con solución saturada de cloruro de sodio (100 mi) y la capa acuosa se separó. Se agregó carbón vegetal (0.76 g) al matraz, se agitó por aproximadamente 2-4 h, se filtró a través de una almohadilla de celite de 2 pulgadas (5.8 cm), enjuagó con THF (30 mi) y concentró in vacuo a aproximadamente 60°C para obtener una suspensión de aceite/sólido. Una mezcla de isopropanol (50 mi) y heptanos (15 mi) se agregaron a la suspensión de aceite/sólido y concentró in vacuo para obtener un sólido de color amarillo. Se agregó isopropanol (90 mi) al sólido, se calentó a aproximadamente 60°C y se mezcló por aproximadamente 1 h. La mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente con agitación, líos sólidos se retiraron por filtración, enjuagaron con heptano (40 mi) y secaron durante la noche en un horno de vacío a aproximadamente 50°C. Los 2 lotes se combinaron para obtener 5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-ilcarbamato de tere-butilo (12.87 g), como un sólido de color amarillo claro. 1H RMN (400 MHz, DMSO) d 10.11 (s, 1H), 8.77 (s, 1H), 8.16 (d, J = 4.1 Hz, 1H), 7.99 - 7.92 (m, 2H), 7.40 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.83 (d, J = 4.1 Hz, 1 H), 2.32 (s, 3H), 1.46 (s, 9H).
Etapa D: 5-Tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-amina Se cargó 5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-ilcarbamato de terc-butilo (14.0 g, 36.0 mmol) y tetrahidrofurano (28 mi) a un matraz de fondo redondo de 500 mi que contenía una barra de agitación magnética. Se agregó ácido fosfórico (10 equivalentes, 85%, 20.8 mi, 360 mmol) durante aproximadamente 5 minutos mediante una aguja y una jeringa. Luego de la adición, se observó una efervescencia y formaron los sólidos. La suspensión resultante se calentó a aproximadamente 65°C (temperatura de baño); luego de alcanzar la temperatura todos los sólidos se disolvieron. Luego de aproximadamente 1 hr, no había más material de inicio. La mezcla de reacción caliente se diluyó con tetrahidrofurano (115 mi); luego la solución se dejó enfriar a temperatura ambiente. Se preparó una solución de fosfato de potasio tribásico (35.3 g, 360 mmol) en agua (145 mi) y agregó a la mezcla durante aproximadamente 20 minutos con agitación enérgica. La mezcla bifásica se transfirió a un embudo de separación usando THF y agua. Las capas se separaron y la capa orgánica se transfirió a un matraz de fondo redondo de 500 mi. Se agregó agua (100 mi) al matraz y los orgánicos se eliminaron bajo presión reducida. Esto dio como resultado la suspensión de sólidos en agua, la cual se dejó formar una suspensión por aproximadamente 30 minutos. Los sólidos se aislaron mediante filtración al vacío y se colocaron en un horno de vacío para secar (temperatura de horno aproximadamente 50°C) por aproximadamente 16 horas. Se aisló 5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-amina como un sólido blancuzco (10,1g, 97%). 1H R N (400 MHz, d6-DMSO) d 7.88-7.84 (m, 3H), 7.64 (s, 1H), 7.39 (d, J=8A, 2H), 6.55 (d, J=4.0, 1H), 6.31 (s, 2H), 2.33 (s, 3H).
Etapa E: 4-(etoxicarbonil)-2-(metoxicarbonil)-3-metilciclopenta-1 ,3-dienolato de sodio En un matraz de fondo redondo de 12 I, se agregó NaH (60% de dispersión en aceite mineral, 159 g, 3985 mmol) en porciones a THF anhidro en agitación (4004 mi) para dar una suspensión de color gris. La mezcla se enfrió a aproximadamente 5°C en un baño de hielo/sal antes de agregar acetoacetato de etilo (506 mi, 3985 mmol, Alfa Aesar) en THF anhidro (200 mi) por goteo por medio de un embudo de adición durante aproximadamente 1 h durante la cual la temperatura se incrementó gradualmente a aproximadamente 18°C. Luego de completarse la adición, la reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 1 h y luego se agregó una solución de 4-cloroacetoacetato de metilo (230 mi, 1993 mmol, Oakwood) en THF anhidro (200 mi) por goteo por medio de un embudo de adición durante aproximadamente 1 h. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 2 h y luego se calentó a aproximadamente 50°C por aproximadamente 16 h. La mezcla de reacción se concentró in vacuo. El sólido de color anaranjado se enfrió a aproximadamente 5°C y agregó una mezcla de hielo/agua (2 I). La suspensión se mezcló haciendo girar el evaporador giratorio sin vacío por aproximadamente 30 min. El sólido se recogió mediante filtración y lavó con hielo-agua fría (750 mi). Una vez que la mayor parte del solvente (aproximadamente 90%) se hubo eliminado, el sólido húmedo se trituró con MeCN (750 mi), agitó por aproximadamente 30 min y luego el sólido se recogió mediante filtración lavando con Et20 (2 x 500 mi). El sólido se secó en aire por aproximadamente 16 h y luego in vacio a aproximadamente 55°C para dar 4-(etoxicarbonil)-2-(metoxicarbonil)-3-metilciclopenta-1 ,3-dienolato de sodio (485 g, 98%): 1H R N (DMSO- /6) d 3.95 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.48 (s, 3H), 2.69 (q, J = 2.0 Hz, 2H), 2.47 (t, J = 2.1 Hz, 3H), 1.15 (t, J = 7.1 Hz, 3H).
Etapa F: 2-metil-4-oxociclopent-2-encarboxilato de etilo En un matraz de fondo redondo de 5 I, se calentó 4-(etoxicarbonil)-2-(metoxicarbonil)-3-met¡lc¡clo-penta-1,3-d¡enolato de sodio (485 g, 1954 mmol), KCI (204 g, 2736 mmol, JT Baker), y AcOH (392 mi, 6839 mmol, JT Baker) en tolueno (1200 mi) y agua (1200 mi) a reflujo por aproximadamente 6 h. La mezcla de reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente por aproximadamente 16 h. La mezcla de reacción luego se vertió en un matraz de 12 I y diluyó con agua (3 I). Se agregó NaHC03 sólido (450 g, 5.3 mol) cuidadosamente por porciones con agitación durante aproximadamente 1 h. Luego de otros 30 min de agitación, la fase acuosa básica se separó y extrajo adicionalmente con Et20 (4 x 400 mi). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (4 x 500 mi) y salmuera saturada (500 mi), secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida para dar un aceite de color amarillo que se purificó mediante destilación al vacío (aproximadamente 92-94°C a aproximadamente 0.4 mmHg) para dar 2-metil-4-oxociclopent-2-encarboxilato de etilo (229 g, 69%) como un aceite de color amarillo: 1H RMN (CDCI3) d 6.04 - 6.01 (m, 1H), 4.26 - 4.17 (m, 2H), 3.67 (m, 1H), 2.72 (m, 1H), 2.62 (m, 1H), 2.16 (s, 3H), 1.32 -1.27 (t, J=7.1 Hz, 3H).
Etapa G: 2-metil-4-oxociclopentancarboxilato de etilo Se agregó EtOAc (580 mi) a un matraz de fondo redondo cargado con Pd/C 10% en peso (7.6 g, 7.1 mmol) a aproximadamente 0°C, bajo una atmósfera de nitrógeno. El baño de frío se retiró y agregó 2-metil-4-oxociclopent-2-encarboxilato de etilo (60.0 g, 357 mmol). Se burbujeó gas hidrógeno a través de la mezcla por aproximadamente 5 min y la mezcla luego se agitó bajo una atmósfera de hidrógeno (1 atmósfera) por aproximadamente 48 h. La fuente de hidrógeno se retiró y la mezcla se burbujeó con nitrógeno por aproximadamente 5 min y filtró a través de una almohadilla de Celite®. La torta de filtrado se enjuagó con EtOAc (500 mi). El material filtrado se concentró bajo presión reducida para dar 2-metil-4-oxociclopentancarboxilato de etilo (59.9 g, 99%) como un líquido de color amarillo: H RMN (CDCI3) d 4.23-4.14 (m, 2H), 3.18 (ddd, J=5.6, 6.8, 8.1 Hz, 1H), 2.73-2.65 (m, 1H), 2.60 (ddd, J=1.7, 5.5, 18.7 Hz, 1H), 2.42-2.29 (m, 2H), 2.15 (ddd, J=1.7, 7.9, 18.3 Hz, 1H), 1.29 (t, J=7.1 Hz, 3H), 1.07 (d, J=7.0 Hz, 3H).
Etapa H: 4-(dibencilamino)-2-metilciclopentancarboxilato de etilo Un matraz de fondo redondo se cargó con 2-metil-4-oxociclopentancarboxilato de etilo (10.0 g, 58.8 mmol) y DCE (180 mi). La solución se enfrió a aproximadamente 0°C y agregó AcOH (5.7 mi, 100 mmol) y dibencilamina (11.3 mi, 58.8 mmol) por goteo, para dar la formación de una suspensión espesa. La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 10°C y agregó triacetoxiborohidruro de sodio (21.2 g, 100 mmol) por porciones y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 20 h. La mezcla de reacción se vertió lentamente en NaHC03 acuoso saturado en agitación (300 mi) y agitó por aproximadamente 20 min. Las capas se separaron y la fase acuosa se extrajo con DCM (3 x 100 mi). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (2 x 100 mi), secaron sobre Na2SO.) anhidro, y concentraron bajo presión reducida. Un aceite de color amarillo crudo se purificó mediante cromatografía instantánea de columna eluyendo con un gradiente de 0-30% de EtOAc en heptano para dar 4-(dibencilamino)-2-metilciclopentancarboxilato de etilo (15.5 g, 75%) como un aceite incoloro: 1H RMN (piridin-d5) d 7.53 (dd, J=0.9, 7.9 Hz, 4H), 7.43-7.35 (m, 4H), 7.33-7.25 (m, 2H), 4.22-4.06 (m, 2H), 3.79 (d, J=14.2 Hz, 2H), 3.70 (d, J=14.2 Hz, 2H), 3.34-3.22 (m, 1H), 2.76 (dd, J=7.9, 16.6 Hz, 1H), 2.25-2.13 (m, 1H), 2.09-1.94 (m, 2H), 1.88-1.79 (m, 1H), 1.52 (dd, J=10.5, 22.5 Hz, 1H), 1.16 (t, J=7.1 Hz, 3H), 0.98 (d, J=7.0 Hz, 3H).
Etapa I: ácido 4-(d¡bencilamino)-2-metilciclopentancarboxílico Se disolvió 4-(dibencilamino)-2-metilciclopentancarboxi|ato de etilo (3.65 g, 10.38 mmol) en una mezcla de HCI (6 N acuoso, 20 mi) y 1,4-dioxano (50 ml) y la mezcla resultante se calentó a aproximadamente 60°C por aproximadamente 72 h. El solvente orgánico se eliminó bajo presión reducida. La fase acuosa se neutralizó mediante la adición de NaHC03 acuoso saturado (40 ml) y extrajo con EtOAc (50 ml). La fase orgánica se lavó con salmuera (40 ml), secó sobre MgS04 anhidro y concentró bajo presión reducida para dar ácido 4-(dibencilamino)-2-metilciclopentancarboxílico (3.3 g, 98%) como un sólido amorfo de color blanco: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.66 min; EM m/z 324 (M + H) + .
Etapa J: 2-oxo-etiluro de 2-(2-Metil-4- (dibencilamino)ciclopentil)-dimetilsulfoxonio Se agregó cloruro de trimetilsulfoxonio (26.1 g, 198 mmol), THF (202 mi), y ferc-butóxido de potasio (23.35 g, 202 mmol) a un matraz revestido de 300 mi bajo una cubierta de nitrógeno. La suspensión se agitó por aproximadamente 2 horas a aproximadamente 65°C antes de enfriarse a aproximadamente 0°C. En un recipiente separado, se disolvió ácido (1 S,2R,4S)-4-(dibencilamino)-2-metilciclopentancarboxílico (21.4 g, 66.2 mmol) en THF (134 mi). Se agregó HATU (31.4 g, 83 mmol) y trietilamina (11.53 mi, 83 mmol) y la solución y se mezcló por aproximadamente 4h. Manteniendo la suspensión de iluro de azufre entre aproximadamente 0 y -5°C, la solución de éster activado se filtró y luego agregó por goteo durante aproximadamente 3 h a la suspensión de iluro. La suspensión amarillo brillante resultante se agitó por aproximadamente 8 h a aproximadamente 5°C. Se agregó agua (340 mi) y THF (30 mi), y la mezcla agitó por aproximadamente 30 min a aproximadamente 25°C. Se agregó cloruro de sodio acuoso (15% p/v, 60 mi) á la solución y las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (60 mi). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con NaCI acuoso (15% p/v, 3x100 mi). La solución se concentró y el aceite crudo disolvió en metanol (150 mi) y agregó agua (150 mi) a la suspensión la cual se agitó por aproximadamente 1 h a temperatura ambiente antes de enfriarse a aproximadamente 10°C y agitó durante la noche. El sólido de color blanco se filtró y lavó con MeOH/H20 1:1 frío (20 mi) y agua (60 mi). El sólido se secó en el horno de vacío para dar 2-(2-metil-4- (dibencilamino)c¡clopentH)-dimetilsulfoxon¡o-2-oxo-etiluro (23.8 g, 90% de rendimiento). 1H RMN (400 MHz, DMSO) d 7.30 (ddd, J = 15.0, 10.7, 4.6 Hz, 8H), 7.21 - 7.14 (m, 2H), 4.67 (s, 1H), 3.71 -3.52 (m, 4H), 3.39 (d, J = 3.9 Hz, 6H), 3.13 - 2.99 (m, 1H), 2.48 -2.39 (m, 1H), 2.05 - 1.84 (m, 2H), 1.82 - 1.66 (m, 2H), 1.43 - 1.30 (m, 1H), 0.90 (d, J = 6.9 Hz, 3H).
Etapa K: 1 -((1 S,2R,4S)-4-(d¡bencilamino)-2-metilciclopentil)-2-(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-ilamino)etanona A un frasco de 40 mi, se agregó 2-oxo-etiluro de 2-(2-métil-4-(dibencilamino)ciclopentil)-dimetilsulfoxonio (4.02 g, 10.1 mmol), 5-tosil-5H-pirrolo[2,3-ib]p¡razin-2-amina (2.92 g, 10.1 mmol), y dímero cloro (1 ,5-ciclooctadien)iridio(l) (0.17 g, 0.3 mmol, Alfa Aesar). El matraz de reacción se purgó con N2 por aproximadamente 10 min. Al matraz de reacción, se agregó CH3CI desgasificado (13 mi) mediante una jeringa. La mezcla de reacción se purgó con N2 por aproximadamente 10 min y agitó bajo una atmósfera de N2 a aproximadamente 70°C por aproximadamente 68 h. La mezcla de reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se purificó mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc 0-25% en heptano para dar 1-((1 S,2R,4S)-4-(dibencilamino)-2-metilciclopentil)-2-(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-ilamino)etanona (8.61 g, 56%) como una espuma de color tostado. 1H RMN (400 MHz, DMSO) d 7.91 - 7.80 (m, 4H), 7.42 - 7.34 (m, 2H), 7.33 - 7.23 (m, 9H), 7.21 - 7.13 (m, 2H), 6.52 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 4.23 - 4.04 (m, 2H), 3.63 - 3.48 (m, 4H), 3.19 -3.09 (m, 1H), 3.08 - 2.99 (m, 1H), 2.32 (s, 3H), 2.29 - 2.18 (m, 1H), 1.94 - 1.71 (m, 3H), 1.37 - 1.23 (m, 1H), 0.86 (d, J = 7.8 Hz, 3H).
Etapa L: (1 S,3S,4 ?)-A,A-dibencil-3-(3H-im¡dazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)-4-metilciclopentanamina A un balón de 250 mi se agregó 1 -((1 S,2R,4S)-4-(dibencilamino)-2-metilciclopentil)-2-(5-tosil-5/-/-pirrolo[2,3-6]pirazin-2-ilamino)etanona (11.2 g, 17.51 mmol) en acetonitrilo (60 mi). La mezcla se enfrió con un baño de hielo y se agregó TFA (2.70 mi, 35.0 mmol) y TFAA (24.46 mi, 175 mmol). La mezcla resultante se calentó y se agitó a aproximadamente 40°C por aproximadamente 42 h. La reacción luego se enfrió en un baño de hielo y se detuvo con metanol (7 mi). Luego de calentar a temperatura ambiente y agitar por aproximadamente 1 h, se vertió en acetato de etilo (100 mi) y carbonato de sodio acuoso (10% p/v, 200 mi). Las capas se separaron y la capa orgánica se concentró. El residuo se disolvió en THF (120 mi) y se agregó hidróxido de sodio 2N (35.0 mi, 70.0 mmol). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 60°C y agitó por aproximadamente 16 h. Luego de enfriar a temperatura ambiente, se agregó 2-metil-tetrahidrofurano (100 mi) y salmuera (100 mi) y las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con 2-metil-tetrahidrofurano (50 mi) y las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (50 mi). La capa orgánica se concentró, disolvió en EtOH (100 mi) y trató con carbón vegetal (500 mg) por aproximadamente 1 h. El carbón vegetal se retiró por filtración y el etanol se eliminó bajo presión reducida. El residuo se recogió en CHCI3 (50 mi) calentado a aproximadamente 50°C y agregó heptano (50 mi). Luego de enfriar a temperatura ambiente, el producto se recogió, lavó con CHCI3:heptano 1:2 (30 mi) y secó en un horno de vacío para dar (1 S,3S,4R)-N,N-d¡bencil-3-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2, 3-e]p¡razin-8-il)-4-metilciclopentanamina como un sólido de color tostado (5.1 g, 67%) 1H RMN (400 MHz, DMSO) d 12.18 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.44 - 7.29 (m, 8H), 7.22 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 6.84 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 3.86 (dd, J = 17.6, 8.8 Hz, 1H), 3.77 - 3.59 (m, 4H), 3.41 - 3.17 (m, 2H), 2.64 - 2.53 (m, 1H), 2.32 - 2.06 (m, 3H), 1.49 - 1.30 (m, 1H), 0.40 (d, J = 7.0 Hz, 3H).
Etapa M: (1 S,3S,4R)-3-(3W-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)-4-metilciclopentanclorhidrato de amina A una botella de presión de acero inoxidable de 1.8 I (1S,3S,4 )-/V,/V-dibencil-3-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2 ,3-e]pirazin-8-il)-4-metilciclopentanamina (49 g, 112 mmol), Pd al 10%(OH)2/C (20 g, Johnson Mathey) y se agregó etanol (750 mi) bajo nitrógeno. El reactor se purgó con nitrógeno luego hidrógeno. El recipiente se presurizó con hidrógeno a aproximadamente 30 psig. La mezcla se agitó por aproximadamente 22 hrs a aproximadamente 50°C. Luego de enfriar a temperatura ambiente, la reacción se filtró a través de un embudo buchner que contenía un filtro de fibra de vidrio para eliminar el catalizador. Se agregó HCI concentrado (12 M, 16.7 mi) y concentró bajo presión reducida. El residuo se suspendió en etanol (100 mi) y EtOAc (100 mi), los sólidos se recogieron mediante filtración, lavaron con 1:1 EtOAc:EtOH (30 mi) y e secaron en un horno de vacío para dar (1 S,3S,4R)-3-(3H-imidazo[1 ,2-a]p¡rrolo[2,3-e]pirazin-8-il)-4-metilciclopentanclorhidrato de amina como un sólido blancuzco (33.3 g, 86%). H RMN (400 MHz, DMSO) d 13.11 (s, 1H), 8.90 (s, 1H), 8.65 - 8.42 (m, 4H), 7.88 (t, J = 3.1 Hz, 1H), 7.21 (s, 1H), 4.20 (dd, J = 17.3, 8.6 Hz, 1H), 3.75 - 3.52 (m, 1H), 2.77 - 2.63 (m, 1H), 2.61 - 2.52 (m, 1H), 2.33 (ddd, J = 31.4, 17.8, 8.8 Hz, 2H), 1.54 (dt, J = 12.7, 6.4 Hz, 1H), 0.50 (d, J = 7.0 Hz, 3H). Etapa N: W-((1 S,3S,4 )-3-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)-4-metilciclopentil)-3,3,3-trifluoropropan-1 -sulfonamida A un matraz de 2 I se agregó (1 S,3S,4R)-3-(3-/-im¡dazo[1 ,2-a]p i rro lo [2, 3-e]pirazin-8-il)-4-metil ciclope n tan clorhidrato de amina (248.0 g, 733 mmol), agua (1240 mi), THF (124 mi) y carbono activado (24.12 g) y se agitó por aproximadamente 10 min. La mezcla resultante se filtró a través de celite enjuagando con una mezcla de agua (100 mi) y THF (24 mi). Se agregó carbonato de potasio (668 g, 4836 mmol) y THF (1736 mi) y agregó una solución de cloruro de 3,3,3-trifluoropropan-1 -sulfonilo (315 g, 1524 mmol, Matrix) en THF (620 mi) durante aproximadamente 1 hr. Luego de enfriar a temperatura ambiente las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con THF (500 mi). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con cloruro de amonio acuoso (3 x100 mi) y concentraron a aproximadamente 1 I. Se agregó agua (1770 mi) lentamente a aproximadamente 50°C y la suspensión se enfrió a aproximadamente 23°C. Los sólidos se recogieron mediante filtración, lavaron con THF 35% en agua (750 mi) y secaron en un horno de vacío. El material crudo se disolvió en MeOH (4.5 I) y trató con carbono activado (28.3 g). Luego de filtrar a través de celite y enjuagar con MeOH (500 mi), la solución se concentró bajo presión reducida a aproximadamente 1 I y agregó agua (800 mi) lentamente a aproximadamente 50°C luego se enfrió a 35°C cuando se agregó agua adicional (360 mi). El producto se recogió mediante filtración, lavó con 1:1 MeOH:agua (2 x 350 mi) y secó en un horno de vacío para dar N-((1 S,3S,4R)-3-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)-4-metilciclopentil)-3, 3, 3-trifluoropropan-1 -su I 'fon amida (215.3 g, 71%) como un sólido cristalino de color blanco (punto de fusión 225°C). 1H RMN (400 MHz, DMSO) d 11.99 (bs, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.40 (bs, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.27 - 7.07 (m, 1H), 6.62 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 3.75 (dt, J = 10.1, 7.8 Hz, 1H), 3.70 - 3.55 (m, 1H), 3.15 - 3.02 (m, 2H), 2.61 - 2.40 (m, 2H), 2.40 - 2.29 (m, 1H), 2.23 (dd, J = 13.3, 6.9 Hz, 1H), 2.16 - 2.03 (m, 1H), 1.94 - 1.77 (m, 1H), 1.20 - 0.99 (m, 1H), 0.17 (d, J = 7.0 Hz, 3H).
Ejemplo No. 8*: 2-((1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentilamino)tiazol-5-carbonitrilo Etapa A: 5-bromo-3-((trimetilsilil)etinil)pirazin-2-amina A una solución de 3,5-dibromopirazin-2-amina (125 g, 494 mmol), TEA (207.0 mi, 1483 mmol), e yoduro de cobre (I) (0.941 g, 4.94 mmol) en THF (1255 mi) se agregó PdCI2(PPh3)2 (3.47 g, 4.94 mmol). La mezcla de reacción se enfrió a aproximadamente -5-0°C y agregó una solución de (trimetilsilil)acetileno (65.0 mi, 470 mmol) en THF (157 mi) por goteo durante aproximadamente 15 min. La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente -5-0°C por aproximadamente 1.5 h y luego se dejó calentar a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción luego se filtró a través de una almohadilla de Celite® y lavó con THF hasta que no eluyó más producto. El material filtrado se concentró bajo presión reducida para dar un sólido de color marrón-anaranjado. El sólido se trituró y sónico con éter de petróleo caliente (punto de ebullición 30-60°C, 400 mi), enfrió a temperatura ambiente, recogió, lavó con éter de petróleo (punto de ebullición 30-60°C; 2 x 60 mi), y secó para dar 5-bromo-3-((trimetilsilil)et¡nil)pirazin-2-amina (124 g, 93%, 93% de pureza) como un sólido de color marrón: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.51 min; EM m/z: 270, 272 (M + H) + .
Etapa B: 2-bromo-5-tosil-5H-pi rrolo[2,3-b]pi razina A una solución de 5-bromo-3-((trimetilsilil)etinil)pirazin-2-amina (3.00 g, 11.1 mmol) en QMF (60 mi) a aproximadamente 0°C se agregó NaH (60% de dispersión en aceite mineral, 0.577 g, 14.4 mmol) en tres porciones. Luego de aproximadamente 15 min, se agregó cloruro de p-toluensulfonilo (2.75 g, 14.4 mmol) y la reacción se dejó calentar lentamente a temperatura ambiente. Luego de aproximadamente 16 h, la mezcla de reacción se vertió sobre hielo-agua fría (120 mi) y el precipitado se recogió mediante filtración al vacío. El sólido crudo se disolvió en DCM (15 mi) y purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con DCM para dar 2-bromo-5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina (2.16 g, 52%): LC/EM (Tabla 1, Método c) R, = 1.58 min; EM m/z: 352, 354 (M + H) + .
Etapa C: 2-(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)hidrazincarboxilato de tere-butilo y 1 -(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)hidrazincarboxilato de ferc-butilo A un matraz se agregó Pd2(dba)3 (3.90 g, 4.26 mmol), d¡-ferc-butil-(2',4',6,-tr¡isoprop¡lb¡fen¡l-2-il)fosfano (3.62 g, 8.52 mmol), y 1,4-dioxano (453 mi). La mezcla catalizador-ligando se desgasificó mediante vacío/purga con nitrógeno (3 veces) y calentó a aproximadamente 80°C por aproximadamente 10 min. Luego se agregó 2-bromo-5-tosil-5/-/-pirroio[2,3-¿»]pirazina (30.0 g, 85 mmol), hidrazincarboxilato de ferc-butilo (16.9 g, 128 mmol), y NaOí-Bu (12.28 g, 128 mmol). Luego de un vacío/purga con nitrógeno adicional, la reacción se calentó a aproximadamente 80°C. Luego de aproximadamente 50 min, la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y filtró a través de una almohadilla de gel de sílice (6 cm de altura x 6 cm de diámetro), con Celite® por encima (1 cm de altura x 6 cm de diámetro), lavando con EtOAc (3 x 150 mi). Se agregó agua (300 mi) al material filtrado y la capa orgánica se separó. La capa acuosa se extrajo con EtOAc adicional (3 x 200 mi). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con NH4CI acuoso saturado, NaHC03 acuoso saturado, y salmuera (400 mi de cada uno), secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida para dar un aceite de color marrón oscuro (45 g). El aceite de color marrón se disolvió en DCM (250 mi), agregó gel de sílice (200 g), y la mezcla se concentró bajo presión reducida. La mezcla de sílice resultante se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 25-65% de EtOAc en heptano para dar una mezcla de 2-(5-tosil-5H- pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)hidraz¡ncarboxilato de rere-butilo [regioisómero mayoritario] y 1 -(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)hidrazincarboxilato de íerc-butilo [regioisómero minoritario] (18.8 g, 50%): LC/EM (Tabla 1, Método c) Rt = 1.47 min; EM m/z: 404 (M + H) + .
Etapa D: 2-hidrazinil-5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina A una mezcla de 2-(5-tos¡l-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)hidrazincarboxilato de ferc-butilo y 1 -(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)hidrazincarboxilato de rere-butilo (49.2 g, 122 mmol) en 1,4-dioxano (290 mi) se agregó HCI (4 M en 1,4-dioxano, 226 ml, 902 mmol). La reacción se calentó a aproximadamente 6Ó°C por aproximadamente 2.5 h y luego se enfrió a aproximadamente 15-20°C. El sólido se recogió mediante filtración al vacío, lavó con EtOAc (3 x 50 ml), y luego trituró con Et20 (60 ml), recogió mediante filtración al vacío y secó a peso constante bajo vacío para dar 35.6 g de un sólido. El sólido se agitó con una mezcla de NaHC03 acuoso saturado y EtOAc (1:1, 400 ml). Luego de aproximadamente 1 h, el sólido se recogió mediante filtración al vacío, lavó con agua helada (3 x 30 ml) y EtOAc (3 x 30 ml), y secó en un horno de vacío a peso constante para dar 2-hidrazinil-5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina como un sólido de color tostado (21.2 g, 57%): LC/E (Tabla 1, Método a) Rt = 1.88 min; EM m/z: 304 (M + H) + .
Etapa E: 4-(etoxicarbonil)-3-etil-2-(metoxicarbon¡l)ciclopenta-1 ,3-dienolato de sodio Un matraz de fondo redondo se cargó con THF (1.5 I) seguido por la adición por pociones de NaH (60% de dispersión en aceite mineral, 70.0 g, 1.75 mol). Se agregó más THF (500 mi) y la mezcla resultante se enfrió a aproximadamente -10°C y agregó propionilacetato de etilo (250 mi, 1.80 mol) por goteo durante aproximadamente 1 h para mantener la temperatura interna por debajo de aproximadamente 10°C. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 0.5 h para dar una solución de color amarillo traslúcida, y agregó 4-cloroacetoacetato de metilo (100 mi, 0.88 mol) por goteo durante aproximadamente 5 min. La mezcla resultante se calentó a aproximadamente 50°C por aproximadamente 19 h para dar una suspensión rojiza anaranjada. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, concentró bajo presión reducida y el líquido resultante se transfirió a un vaso de precipitados y diluyó con agua (350 mi). La mezcla se agitó en un baño de hielo por aproximadamente 2 h. El sólido se recogió mediante filtración al vacío y la torta de filtrado se enjuagó con agua (150 mi) y secó bajo vacío por aproximadamente 1 h. El sólido se suspendió en Et20 (1.5 I), filtró, lavó con Et20 (1.5 I), y secó bajo vacío. El sólido resultante se formó una mezcla azeotrópica con tolueno (1 I) para dar un sólido que se suspendió nuevamente en Et20 (1 I) y recogió mediante filtración al vacío. La torta de filtrado se lavó con Et20 (500 mi) y secó bajo vacío para dar 4-(etoxicarbonií)-3-etil-2-(metoxicarbonil)ciclopenta-1 , 3-dienolato de sodio (204.2 g, 89%) como un sólido de color beige: 1H RMN (DMSO-d6) d 3.94 (q, J=7.1 Hz, 2H), 3.46 (s, 3H), 3.04 (q, J=7.2 Hz, 2H), 2.66 (s, 2H), 1.13 (t, J=7.1 Hz, 3H), 0.99 (t, J=7.3 Hz, 3H).
Etapa F: 2-etil-4-oxociclopent-2-encarboxilato de etilo matraz de fondo redondo de 5 I se cargó con (etoxicarbonil)-3-etil-2-(metoxicarbonil)ciclopenta-1 ,3-dienolató de sodio (316 g, 1205 mmol), KCI (126 g, 1687 mmol, JT-Baker), AcOH (241 mi, 4218 mmol, JT-Baker), tolueno (1850 mi) y agua (130 mi). La reacción se calentó a reflujo por aproximadamente 6 h luego enfrió a temperatura ambiente y agregó por goteo a NaHC03 (8% p/v acuoso, 3.5 I). La mezcla bifásica resultante se extrajo con MTBE (2 x 1.5 I). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (1 I), secaron sobre MgS04 anhidro y concentraron bajo presión reducida para dar 191 g de material crudo que se purificó mediante destilación al vacío (97-99°C, 0.600 mM Hg) para dar 2-etil-4-oxociclopent-2-encarboxilato de etilo (160 g, 69%): 1H RMN (CDCI3) d 6.04 (m, 1H), 4.26-4.15 (m, 2H), 3.76-3.69 (m, 1H), 2.75-2.57 (m, 2H), 2.56-2.44 (m, 2H), 1.32-1.26 (m, 3H), 1.23-1.18 (m, 3H).
Etapa G: 2-etil-4-oxociclopentancarboxilato de etilo Un matraz de fondo redondo se cargó con Pd/C 10% en peso (10 g, 9.4 mmol). El recipiente se enfrió a aproximadamente 0°C y agregó EtOAc (400 mi) bajo una atmósfera de nitrógeno. El baño de frío se retiró y agregó 2-etil-4-oxociclopent-2-encarboxilato de etilo (47.8 g, 263 mmol). Se burbujeó gas hidrógeno a través de la mezcla por aproximadamente 5 min y la mezcla luego se agitó bajo una atmósfera de hidrógeno por aproximadamente 48 h. La fuente de hidrógeno se retiró y la mezcla se burbujeó con nitrógeno por aproximadamente 5 min y filtró a través de una almohadilla de Celite®. La torta de filtrado se enjuagó con EtOAc (400 mi). El material filtrado se concentró bajo presión reducida para dar 2-etil-4-oxociclopentancarboxilato de etilo (aproximadamente 9:1 mezcla cis:trans) (48.0 g, 99%) como un líquido amarillo: 1H RMN (CDCI3) d 4.23-4.10 (m, 2H), 3.22 (m, 1H), 2.59-2.50 (m, 1H), 2.44-2.28 (m, 3H), 2.26-2.16 (m, 1H), 1.58-1.46 (m, 1H), 1.41-1.30 (m, 1H), 1.30-1.23 (m, 3H), 1.02-0.91 (m, 3H).
Etapa H: 4-(dibencilamino)-2-etilciclopentancarboxilato de etilo Un matraz de fondo redondo se cargó con 2-etil-4-oxociclopentancarboxilato de etilo (95.9 g, 521 mmol) y DCE (1.8 I). La solución se enfrió a aproximadamente 0°C y se agregó AcOH (45 mi, 780 mmol) y dibencilamina (120 mi, 625 mmol) por goteo, para dar la formación de una suspensión espesa. La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 10°C y se agregó DCE adicional (500 mi). Se agregó triacetoxiborohidriuro de sodio (166 g, 781 mmol) por porciones y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 20 h. La mezcla de reacción se vertió lentamente en NaHC03 acuoso saturado en agitación (1.5 I), seguido por la adición en pociones de NaHC03 sólido (175 g). La mezcla se agitó por aproximadamente 2 h y la capa orgánica se separó, secó sobre Na2S04 anhidro, y concentró bajo presión reducida. El aceité de color amarillo crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con EtOAc al 0-20% en heptano para dar 4-(dibencilamino)-2-etilc¡clopentancarboxilato de etilo (136.6 g, 72%) como un sólido de color blanco: LC/EM (Tabla 1, Método a) R, = 3.26 min; EM m/z: 366 (M + H) + .
Etapa I: 4-amino-2-etilciclopentancarboxilato de etilo A un matraz que contiene una suspensión de Pd(OH)2 20% en peso sobre C (12.9 g, 18.4 mmol) en EtOH (1.0 I) se agregó 4-(dibencilamino)-2-etilcíclopentancarboxilato de etilo (129 g, 352 mmol). La reacción se agitó por aproximadamente 90 min a aproximadamente 50°C bajo aproximadamente 30 psi de hidrógeno. Luego de la eliminación de la fuente de hidrógeno, se introdujo una atmósfera de nitrógeno y la mezcla resultante se filtró a través de una almohadilla de Celite® y el material filtrado se concentró bajo presión reducida para dar 4-aminó-2-etilciclopentancarboxilato de etilo (64.5 g, 99%) como un jarabe amarillo: 1H RMN (CDCI3) d 4.03-3.88 (m, 2H), 3.17 (m, 1H), 2.68 (m, 1H), 2.09-2.02 (m, 2H), 2.02-1.94 (m, 2H), 1.84 (m. 1H), 1.58-1.48 (m, 1H), 1.32-1.18 (m, 1H), 1.09 (m, 3H), 1.03 (m, 2H), 0.78-0.69 (m, 3H).
Etapa J: (1S,2R,4S)-4-acetamido-2-etilciclopentancarboxílato de etilo Una solución de 4-amino-2-etilciclopentancarboxilato de etilo (49.0 g, 264 mmol) en piridina (214 mi, 2645 mmol) se enfrió a aproximadamente 0°C. Se agregó anhídrido acético (125 mi, 1322 mmol) y la agitación se continuó a aproximadamente 0°C por aproximadamente 15 min. La solución resultante se calentó a temperatura ambiente y agitó por aproximadamente 12 h. La reacción se concentró bajo presión reducida y agregó EtOAc (500 mi) y HCI (1 N acuoso, 200 mi). Las capas se separaron y la capa orgánica se lavó con HCI (1 N acuoso, 200 mi), NaHC03 acuoso saturado (2 x 200 mi) y salmuera (150 mi), secó sobre MgS04 anhidro, filtró a través de una almohadilla de Florisil® lavando con EtOAc (600 mi), y concentró bajo presión reducida para dar un sólido blancuzco (52 g) que se purificó mediante usando el Método General AA (Tabla 2, Método 24, Rt = 8.2 min, o = positivo) para dar (1S, 2R, 4S)-4-acetamido-2-etilciclopentancarboxilato de etilo (20.3 g, 34%): LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.82 min; EM m/z: 228 (M + H)\ Etapa K: ácido (1 S,2R,4S)-4-acetamido-2-etilciclopentancarboxílico A un matraz que contiene (1 S,2R,4S)-4-acetamido-2-etilciclopentancarboxilato de etilo (9.44 g, 41.5 mmol) se agregó NaOH (2 N acuoso, 141 mi, 282 mmol). Luego de agitar a temperatura ambiente por aproximadamente 12 h, la reacción se acidificó a aproximadamente pH 1 mediante la adición de HCI acuoso 6 N (50 mi) y extrajo con EtOAc (3 x 500 mi). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (100 mi), secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida para dar ácido (1 S,2R,4S)-4-acetamido-2-etilciclopentancarboxílico (7.25 g, 88%): LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.51 min; EM m/z: 200 (M-H)+.
Etapa L: S,3 ?,4S)-3-etil-4-(6-tosil-6W-pi rrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentil)acetamida A una mezcla de ácido (1 S,2R,4S)-4-acetamido-2- etilciclopentancarboxílico (3.03 g, 15.2 mmol) en DCM (90 mi) se agregó 2-hidrazinil-5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina (4.20 g, 13.8 mmol, Ejemplo No. 4, Etapa D), HATU (5.53 g, 14.5 mmol) y TEA (7.72 mi, 55.4 mmol). Luego de agitar a temperatura ambiente por aproximadamente 2 h, la reacción se diluyó con agua (60 mi). Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con DCM (3 x 50 mi). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (50 mi), secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida. El material crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-5% de MeOH en DCM para dar N-((1 S, 3R, 4S)-3-etil-4-(2-(5-tosil-5H-pirrolo[2, 3-b]pirazin-2-il)h¡drazincarbonil)ciclopentil)acetam¡da (7.0 g, 90%, 87% de pureza) como una espuma de color tostado: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.96 min; EM m/z: 485 (M + H) + , A una solución de ?/-((1 S,3R,4S)-3-etil-4-(2-(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-D]pirazin-2-il)hidrazincarbonil)-ciclo-pentil)acetamida impura (9.40 g, 19.4 mmol) en 1,4-dioxano (100 mi) se agregó TEA (8 mi, 58 mmol) y cloruro de tionilo (1.9 mi, 27.1 mmol). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 80°C por aproximadamente 2 h, y luego enfrió a aproximadamente 0°C y agregó NaHC03 acuoso saturado y EtOAc (100 mi de cada uno). Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con EtOAc adicional (2 x 100 mi). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (100 mi), secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida. El material crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc al 50-100%/MeOH/Et2NH (90:9:1) en EtOAc para dar N-((1S,3R,4S)-3-etil-4-(6-tos¡l-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopent¡l)acet amida (6.00 g, 66%): LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.03 min; EM m/z: 467 (M + H) + . Etapa M: (1 S, 3R,4S)-3-eti l-4-(6-tos i l-6H-p¡ rrolo[2 , 3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentanam¡na A una solución de ?/-((1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6-tos¡l-6A7-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -i I) ciclo pe n ti l)a ceta mida (6.0 g, 12.86 mmol, Ejemplo No. 8 Etapa I) en 1,4-dioxano (78 mi) se agregó HCI (6 N acuoso, 75 mi, 450 mmol). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 95°C ¡por aproximadamente 16 h. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y el solvente se eliminó bajo presión reducida. El residuo se diluyó con DCM (50 mi) y lavó con NaHC03 acuoso saturado (100 mi). La porción acuosa se extrajo con DCM adicional (3 x 50 mi) y las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida. El material crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de DCM/MeOH/NH4OH 0-100% (950:45:5) en DCM para dar (1S,3R,4S)-3-etil-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2, 3-e][1 ,2,4]triazolo[4, 3-a]pirazin-1 -il)ciclopentanamina (3.05 g, 56%) como un sólido de color tostado: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.85 min; EM m/z: 425 (M + H) + .
Etapa N: 2-((1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6-tosil-6H-pirroIo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentilamino)tiazol-5-carbonitrilo Una mezcla de (1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentanamina (0.20 g, 0.47 mmol), EtOH (1.3 mi), DIEA (0.33 mi, 1.88 mmol), y 2-clorotiazol-5-carbonitrilo (0.082 g, 0.56 mmol, Ark Pharm) se calentó en un microondas CEM a aproximadamente 150°C por aproximadamente 30 min (250 psi de presión máxima, gradiente máxima de 5 min, 300 vatios máximos). La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y concentró bajo presión reducida. El aceite crudo se disolvió en DCM (10 mi) y lavó con agua (2 x 10 mi). La capa orgánica se secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida. La mezcla cruda se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc 0-70% en DCM para dar 2-((1 S,3R,4S)-3-étil-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4, 3-a]pirazin-1 -il)ciclopentilamino)tiazol-5-carbonitrilo (0.21 g, 84%): LC/EM (Tabla 1, Método c) Rt = 1.53 min; EM m/z: 533 (M + H) + .
Etapa O: 2-((1 S,3fl,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentilamino)tiazol-5-carbonitrilo Una mezcla de 2-((1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentilamino)tiazol-5-carbonitrilo (0.21 g, 0.39 mmol), 1,4-dioxano (4.5 mi), EtOH (3.5 mi) y Na2C03 (2 N acuoso, 5.8 mi, 15.7 mmol) se calentó a aproximadamente 50°C por aproximadamente 12 h. La mezcla de reacción se neutralizó a pH 7 mediante la adición de AcOH (0.3 mi), lavó con agua (2 x 5 mi) y extrajo con DCM (3 x 5 mi). La capa orgánica se secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida. El material crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0- 5% de MeOH en DCM para dar 2-((1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2, 3-e][1 ,2, 4]triazolo[4, 3-a]pirazin-1 -il)ciclopentilamino)-tiazol-5-carbonitrilo (0.09 g, 60%): LC/EM (Tabla 1, Método c) R, = 1.95 min; EM m/z: 379 (M + H) + .
Ejemplo No. 9: W-(4-(6H-pi rrol o[2 , 3-e] [1 ,2,4] tr ¡azol o[4, 3-a]pirazin-1 -il)biciclo[2.2.2]octan-1 -i l)pi rrolidin-1 -sulfonamida Etapa A: 5-bromo-3-((trimetilsilil)etinil)pirazin-2-amina A una solución de 3.5-dibromopirazin-2-amina (125 g, 494 mmol), TEA (207.0 mi, 1483 mmol), e yoduro de cobre (I) (0.941 g, 4.94 mmol) en THF (1255 mi) se agregó PdCI2(PPh3)2 (3.47 g, 4.94 mmol). La mezcla de reacción se enfrió a aproximadamente -5-0°C y una solución de (trimetilsilil)acetileno (65.0 mi, 470 mmol) en THF (157 mi) se agregó por goteo durante aproximadamente 15 min. La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente -5-0°C por aproximadamente 1.5 h y luego se dejó calentar a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción luego se filtró a través de una almohadilla de Cel'ite y lavó con THF hasta que no eluyó más producto. El material filtrado se concentró bajo presión reducida para dar un sólido de color marrón-anaranjado. El sólido se trituró y sónico con éter de petróleo caliente (punto de ebullición 30-60°C, 400 mi), enfrió a temperatura ambiente, recogió, lavó con éter de petróleo (punto de ebullición 30-60°C; 2 x 60 mi), y secó para dar 5-bromo-3-((trimetilsilH)etinil)pirazin-2-amina (124 g, 93%, 93% de pureza) como un sólido de color marrón: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.51 min; EM m/z: 270, 272 (M + H) + .
Etapa B: 2-bromo-5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina A una solución de 5-bromo-3-((trimetilsilil)etinil)pirazin-2-amina (3.00 g, 11.1 mmol) en DMF (60 mi) a aproximadamente 0°C se agregó NaH (60% de dispersión en aceite mineral, 0.577 g, 14.4 mmol) en tres porciones. Luego de aproximadamente 15 min, se agregó cloruro de p-toluensulfonilo (2.75 g, 14.4 mmol) y la reacción se dejó calentar lentamente a temperatura ambiente. Luego de aproximadamente 16 h, la mezcla de reacción se vertió sobre hielo-agua fría (120 mi) y el precipitado se recogió mediante filtración al vacío. El sólido crudo se disolvió en DCM (15 mi) y purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con DCM para dar 2-bromo-5-tosil-5H-pirrolo[2,3- bjpirazina (2.16 g, 52%): LC/EM (Tabla 1, Método c) Rt = 1.58 min; EM m/z: 352, 354 (M + H)+.
Etapa C: 2-(5-tosil-5H-pirrolol2,3-b]piraz¡n-2-il)hidrazincarboxilato de rere-butilo y 1 -(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)hidrazincarboxilato de ferc-butilo A un matraz se agregó Pd2(dba)3 (3.90 g, 4.26 mmol), di-rerc-butil-(2',4',6'-triisopropílbifenil-2-il)fosfano (3.62 g, 8.52 mmol), y 1,4-dioxano (453 mi). La mezcla de catalizador-ligando se desgasificó mediante vacío/purga con nitrógeno (3 veces) y calentó a aproximadamente 80°C por aproximadamente 10 min. Luego se agregó 2-bromo-5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina (30.0 g, 85 mmol), hidrazincarboxilato de rere-butilo (16.9 g, 128 mmol), y NaOf-Bu (12.28 g, 128 mmol). Luego de un vacío/purga con nitrógeno adicional, la reacción se calentó a aproximadamente 80°C. Luego de aproximadamente 50 min, la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y filtró a través de üna almohadilla de gel de sílice (6 cm de altura x 6 cm de diámetro), recubierto con Celite® (1 cm de altura x 6 cm de diámetro), mientras se lava con EtOAc (3 x 150 mi). Se agregó agua (300 mi) al material filtrado y la capa orgánica se separó. La capa acuosa se extrajo con EtOAc adicional (3 x 200 mi). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con NH4CI acuoso saturado, NaHC03 acuoso saturado, y salmuera (400 mi de cada uno), secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida para dar un aceite de color marrón oscuro (45 g). El aceite de color marrón se disolvió en DCM (250 mi), agregó gel de sílice (200 g), y la mezcla se concentró bajo presión reducida. La mezcla de sílice resultante se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 25-65% de EtOAc en heptano para dar una mezcla de 2-(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)hidrazincarboxilato de rere-butilo [regioisómero mayoritario] y 1 -(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)hidrazincarboxtlato de ferc-butilo [regioisómero minoritario] (18.8 g, 50%): LC/EM (Tabla 1, Método c) Rt = 1.47 min; EM m/z: 404 (M + H) + .
Etapa D: 2-hidrazinil-5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina Se agregó HCI (4 M en 1,4-dioxano, 226 mi, 902 mmol) a una mezcla de 2-(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazih-2-il)hidrazincarboxilato de rere-butilo y 1 -(5-tosil-5H-pirrolo[2 ,3-b]pirazin-2-il)hidrazincarboxilato de ferc-butilo (49.2 g, 122 mmol) en 1,4-dioxano (290 mi). La reacción se calentó a aproximadamente 60°C por aproximadamente 2.5 h y luego enfrió a aproximadamente 15-20°C. El sólido se recogió mediante filtración al vacío, lavó con EtOAc (3 x 50 mi), y luego trituró con Et20 (60 mi), recogió mediante filtración al vacío y secó a peso constante bajo vacío para dar 35.6 g de sólido crudo. El sólido se agitó con una mezcla de NaHC03 acuoso saturado y EtOAc (1:1, 400 mi). Luego de aproximadamente 1 h, el sólido se recogió mediante filtración al vacío, lavó con agua helada (3 x 30 mi) y EtOAc (3 x 30 mi), y secó en un horno de vacío a peso constante para dar 2-hidrazinil-5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina como un sólido de color tostado (21.2 g, 57%): LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.88 min; EM m/z: 304 (M + H) + .
Etapa E: 4-(2-(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)hidrazincarbonil)biciclo[2.2.2)octan-1-ilcarbamato de íerc-butilo Un matraz de fondo redondo se cargó con 2-hidrazinil-5-tosil-5/-/-pirrolo[2,3-¿?]pirazina (3.75 g, 11.1 mmol), ácido 4-(rerc-butoxicarbonilamino)biciclo[2.2.2]octan-1 -carboxílico (3.0 g, 11 mmol, Prime Organics), HATU (4.23 g, 11.1 mmol), TEA (6.2 mi, 44 mmol), y DCM (65 mi). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 16 h. La mezcla de reacción se diluyó con agua (30 mi) y las capas iniciales que se habían formado se separaron. La emulsión acuosa restante se filtró a través de Celite®. Las capas del material filtrado se separaron y la capa acuosa se extrajo con DCM adicional (60 mi). La capa orgánica se lavó con agua (3 x 50 mi), secó sobre MgS0 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida. El material crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc al 0-100% en DCM para dar 4-(2-(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-i l)h id razincarbonil)biciclo[2.2.2]octan-1 - ilcarbamato de f ere-butilo como un sólido de color marrón amorfo (5.38 g, 87%): LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.40 min; EM m/z 555 (M + H)1".
Etapa F: 4-(6-tosil-6rV-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)biciclo[2.2.2]octan-1-amina A una solución de 4-(2-(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)hid ra zincarbonil)-biciclo[2.2.2]octan-1 - ilcarbamato de rere-butilo (6.1 g, 11.0 mmol), TEA (6.1 mi, 44.0 mmol) en 1,4-dioxano (110 mi) se agregó SOCI2 (2.0 mi, 27.5 mmol). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 80°C por aproximadamente 2 h luego se enfrió a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se lavó con NaHC03 acuoso saturado (3 x 50 mi). La porción acuosa se filtró para dar 4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2, 4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)biciclo[2.2.2]-octan-1 -amina como un sólido de color marrón (1.17 g, 24%): LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.28 min; EM m/z: 437 (M + H)+. El material filtrado restante se extrajo con EtOAc (10 mi). La capa orgánica se secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida para dar 4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)biciclo[2.2.2]octan-1 -ilcarbamato de ferc-butilo crudo (3.5 g). El material protegido con Boc crudo se disolvió en 1,4-dioxano (38 mi) y agregó HCI (4 N en 1,4-dioxano, 8 mi). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 50°C por aproximadamente 3 h. El precipitado formado se filtró, disolvió en DCM (50 mi), y lavó con NaHC03 acuoso saturado (3 x 20 mi). Las capas se separaron y la porción orgánica se secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida para dar 4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)biciclo[2.2.2]octan-1 -amina adicional como un sólido de color marrón (2.3 g, 50% al cabo de 2 etapas): LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.28 min; EM m/z: 437 (M + H) + .
Etapa G: N-(4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]piraz¡n-1 -il)biciclo[2.2.2]octan-1 -il)pirrolidin-1 -sulfonamida Un matraz de fondo redondo se cargó con 4-(6-tosil-6H-p¡rrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]piraz¡n-1 -il)biciclo[2.2.2]octan-1 -amina (0.12 g, 0.28 mmol), DIEA (0.48 mi, 2.8 mmol) en DMA (2.75 mi). Se agregó cloruro de pirrolidin-1 -sulfonilo (0.07 g, 0.41 mmol, Matrix) por goteo y mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 1 h. Se agregó K2C03 (0.190 g, 1.37 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 16 h. El solvente se eliminó bajo presión reducida. El material crudo se purificó mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyehdo con un gradiente de 0-10% de MeOH en DCM para dar N-(4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)biciclo[2.2.2]octan-1 -il)pirrolidin-1 -sulfonamida , la cual se disolvió en NaOH (1 N acuoso, 1.10 mi, 1.10 mmol) y 1,4-dioxano (1 mi) y calentó a aproximadamente 50°C por aproximadamente 1 h. El material crudo se purificó mediante HPLC preparativa de fase inversa (Tabla 2, Método I) para dar N-(4-(6H-pirrolo[2, 3-e][1,2, 4]triazolo[4, 3-a]pirazin-1 -H)b¡ciclo[2.2.2]octan- 1 - il)pirrolidin-1-sulfonamida (0.042 g, 37%) como un sólido de color blanco: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.81 min; EM m/z 416 (M + H) + .
Ejemplo No. 10*: (3R,4R)-3-(6H-im idazo[1 ,5-a] pi rrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4-metilpiperidin-1 -carboxilato de fenilo Etapa A: 5-bromo-3-((trimetilsilil)etinil)pirazin-2-amina A una solución de 3,5-dibromopirazin-2-amina (125 g, 494 mmol), TEA (207.0 mi, 1483 mmol), e yoduro de cobre (I) (0.941 g, 4.94 mmol) en THF (1255 mi) se agregó PdCI2(PPh3)2 (3.47 g, 4.94 mmol). La mezcla de reacción se enfrió a aproximadamente -5-0°C y una solución de (trimetilsilil)acetileno (65.0 mi, 470 mmol) en THF (157 mi) se agregó por goteo durante aproximadamente 15 min. La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente -5-0°C por aproximadamente 1.5 h y luego dejó calentar a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción luego se filtró a través de una almohadilla de Celite® y lavó con THF hasta que no eluyó más producto. El mateirial filtrado se concentró bajo presión reducida para dar un sólido de color marrón-anaranjado. El sólido se trituró y sónico con éter de petróleo caliente (punto de ebullición 30-60°C, 400 mi), enfrió a temperatura ambiente, recogió, lavó con éter de petróleo (punto de ebullición 30-60°C; 2 x 60 mi), y secó para dar 5-bromp-3-((trimet¡lsilil)etinil)pirazin-2-amina (124 g, 93%, 93% de pureza) como un sólido de color marrón: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.51 min; EM m/z: 270, 272 (M + H) + .
Etapa B: 2-bromo-5-tosil-5H-pirrolo[2,3-fa]pirazina A una solución de 5-bromo-3-((trimetilsilil)etinil)pirazin-2-amina (3.00 g, 11.1 mmol) en DMF (60 mi) a aproximadamente 0°C se agregó NaH (60% de dispersión en aceite mineral, 0.577 g, 14.4 mmol) en tres porciones. Luego de aproximadamente 15 min, se agregó cloruro de p-toluensulfonilo (2.75 g, 14.4 mmol) y la reacción se dejó calentar lentamente a temperatura ambiente. Luego de aproximadamente 16 h, la mezcla de reacción se vertió sobre hielo-agua fría (120 mi) y el precipitado se recogió mediante filtración al vacío. El sólido crudo se disolvió en DCM (15 mi) y purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con DCM para dar 2-bromo-5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina (2.16 g, 52%): LC/EM (Tabla 1, Método c) Rt = 1.58 min; EM m/z: 352, 354 (M + H) + .
Etapa C: clorhidrato de (5-tos¡l-5H-p¡rrolo[2,3-b]p¡razin-2-¡l)metanamina Un reactor de 5 I se cargó con 2-bromo-5-tosil-5H-pirrolo[2,3-¿b]pirazina (98.8 g, 281 mmol), polvo de zinc (3.50 g, 53.3 mmol), trifluoro acetato de paladio(ll) (4.0 g, 12 mmol), y 2-(di-t-butilfosfino)-l , 1 '-binaftilo racémico (9.8 g, 24.7 mmol). El matraz se equipó con un dispositivo de adición de polvo dentro del cual se colocó cianuro de zinc (10.0 g, 157 mmol) para agregarse en una etapa posterior. El recipiente se purgó con argón por no más de aproximadamente 30 min y luego se agregó DMA esparcido con argón (2 I) al reactor. La mezcla se agitó y calentó a aproximadamente 50°C manteniendo una atmósfera de argón. La solución de color marrón oscuro resultante se calentó adicionalmente a aproximadamente 95°C mientras se agregaba el cianuro de zinc, a partir del dispositivo de adición de polvo, por porciones durante aproximadamente 15 min. Luego de alcanzar aproximadamente 95°C, la mezcla de color marrón se agitó por aproximadamente 16 h adicionales. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, para dar la precipitación de sales. La mezcla se filtró a través de un embudo buchner que contenía un auxiliar de filtro y la torta de filtrado se lavó con DMA (20 mi).
Una solución del producto crudo en DMA se agregó a agua fría (<10°C) (16 I) y agitó por aproximadamente 30 min. La suspensión resultante se filtró y la torta de filtrado se enjuagó nuevamente con agua (1 I). La torta húmeda resultante se secó en un horno de vacío a aproximadamente 50°C. El sólido crudo se disolvió en DCM (1.5 I) y secó adicionalmente sobre MgS0 anhidro. Luego de la filtración, la solución se pasó a través de una almohadilla de sílice (140 g), usando DCM como eluyente hasta que sólo se detectaron predominantemente impurezas eluyendo la almohadilla. El solvente se eliminó bajo presión reducida y el sólido crudo se trituró con MeOH/DCM (4:1, 10 volúmenes del solvente por gramo de sólido crudo) a temperatura ambiente por aproximadamente 5 h. El sólido se filtró y lavó con MeOH (300 mi). El producto se secó en un horno de vacío para dar 5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-carbonitrilo (58.8 g, 70%) como un sólido de color blanco: 1H RMN (CDCI3) d 8.67 (s, 1;H), 8.21 (d, J = 4.2 Hz, 1H), 8.07 (d, J=8.4 Hz, 2H), 7.34 (d, J=8.1 Hz, 2H), 6.89 (d, J=4.2 Hz, 1H), 2.42 (s, 3H). Se cargó un reactor de presión de acero inoxidable 316 de 2 I con 5% de Pd/C (15.4 g de 63.6% en peso de material humedecido con agua, 5.6 g de base seca, 2.6 mmol de Johnson Matthey A503032-5), 5-tosil-5H-pirrolo[2,3-6]p¡razin-2-carbon¡trilo (55 g, 184 mmol), THF (1.1 I), agua desionizada (165 mi), HCI (37% en peso acuoso, 30 mi, 369 mmol) y quinolina (1.1 mi, 9.0 mmol). El recipiente se purgó, presurizó, y mantuvo a 40 psi administrando hidrógeno a partir de un depósito de alta presión. La mezcla se agitó enérgicamente a aproximadamente 25°C. Luego de aproximadamente 5 h el reactor se ventiló y purgó con nitrógeno para eliminar la mayor parte del hidrógeno disuelto, y la mezcla de reacción se filtró para eliminar el catalizador. El reactor y la torta del catalizador se enjuagaron con THF: agua (1:1, 2 ? 40 mi). El material filtrado combinado y enjuagues se concentraron y agregó EtOH (500 mi) luego se eliminó bajo presión reducida. Luego de dos mezclas azeotrópicas adicionales usando EtOH (2 x 500 mi), el residuo crudo se concentró bajo presión reducida para dar un residuo (76 g) que se suspendió en EtOH (550 mi) y agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 4 h. El sólido se recogió mediante filtración y lavó con EtOH frío (50 mi). La torta húmeda se secó en un horno de vacío para dar clorhidrato de (5-tos¡l-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)metanamina (51.2 g, 82%) como un sólido de color blanco: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.44 min; EM m/z: 303 (M + H) + .
Etapa D: clorhidrato del ácido 4-metilpiperidin-3-carboxílico Se agregó AcOH (380 mi) a clorhidrato del ácido 4-metilnicotínico (50.5 g, 291 mmol, Maybridge) y Pt02 (5.05 g, 22.2 mmol, Johnson Matthey) en un reactor de acero inoxidable de 600 mi. La mezcla se agitó bajo 220 psi de hidrógeno a temperatura ambiente por aproximadamente 14 hr. La solución sobrenadante se filtró a través de una membrana de nylon y enjuagó con suficiente AcOH hasta que quedó sólo el catalizador. El material filtrado se concentró bajo presión reducida para dar un aceite traslúcido que solidificó luego de enfriar a temperatura ambiente para dar ácido 4-metilpiperidin-3-carboxílico crudo con AcOH como un excipiente (88.94 g, 170%): LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 0.44 min; EM m/z: 144 (M + H) + .
Etapa E: (2S,3S)-2,3-dihidroxisuccinato de (3R,4 ?)-4-metilpiperidin-3-carboxilato de etilo Se disolvió clorhidrato del ácido 4-metilpiperidin-3-carboxílico racémico crudo (-70% de pureza química, aproximadamente 15:1 cis:trans) en AcOH (2:1, 300 g) en EtOH (1500 mi) y roció con HCI (gas) por aproximadamente 15 min. La mezcla de reacción se equipó con un balón para permitir la expansión luego se calentó a aproximadamente 85°C. Luego de aproximadamente 48 h, la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y concentró in vacuo para dar un jarabe espeso que contenía clorhidrato del ácido 4-metilpiperidin-3-carboxílico de etilo racémico (260 g). A este éster se agregó CHC (1000 mi) seguido por NaHC03 acuoso saturado (500 mi) y NH4OH (15% acuoso, 500 mi). La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo adicionalmente con CHCI3 (1000 mi). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S0 anhidro, filtraron, y luego concentraron in vacuo para dar 4-metilpiperidin-3-carboxilato de etilo crudo (200 g) como un aceite. A una suspensión de ácido (2S,3S)-2,3-dihidroxisuccínico (150 g, 1001 mmol) en MeOH (200 mi) se agregó una solución de 4-metilpiperidin-3-carboxilato de etilo crudo (200 g, 1168 mmol) en EtOAc (3000 mi). La mezcla se agitó rápidamente por aproximadamente 3 h y los sólidos resultantes se recogieron mediante filtración para dar la sal (2S,3S)-2,3-dihidroxisuccinato como un sólido de color blanco (245 g) (aproximadamente 15:1 cis.trans, er = 48:52 para los estereoisómeros cis). Los sólidos se disolvieron en MeOH (1000 mi) y agregó EtOAc (3000 mi) lentamente hasta que se comenzaron a formar sólidos. Luego de aproximadamente 30 min, los sólidos se recogieron mediante filtración y secaron parcialmente in vacuo para dar una mezcla enriquecida estereoisoméricamente que contenía (2S,3S)-2,3-dihidroxisuccinato de (3R,4R)-4-metilpiperidin-3-carboxilato de etilo como un sólido de color blanco (145 g) (aproximadamente 15:1 cis:trans, er = 60:40 para los enantiómeros {3R, 4R):(3S, 4S)). Los sólidos anteriores se disolvieron en MeOH (1000 m|) y dividieron en cuatro lotes. Cada lote (250 mi) se diluyó con MeOH (500 mi) y agregó EtOAc (3000 mi) lentamente a la solución hasta que se formaron los sólidos. Luego de aproximadamente 4-15 h, los sólidos se recogieron mediante filtración y secaron in vacuo para dar múltiples lotes de (2S,3S)-2,3-dihidroxisuccinato de (3R,4R)-4-metilpiperidin-3-carboxilato de etilo parcialmente resuelto, éstos se combinaron y disolvieron en MeOH (1000 mi) y agregó EtOAc (4000 mi) lentamente. Luego de agitar por aproximadamente 1 h los sólidos se recogieron mediante filtración para dar (2S,3S)-2,3-dihidroxisuccinato de (3R,4R)-4-metilpiperidin-3-carboxilato de etilo (4.5 g) (aproximadamente 15:1 cis:trans, er = 98:2 para los enantiómeros (3R, 4R):(3S, 4S)), LC quiral analítico (Tabla 2, Método 30) isómero minoritario Rt = 12.2 min; EM m/z: 343 (M + (2 S,3S)-2,3-dihidroxisuccinato + Na) + ; isómero mayoritario Rt = 10.6 min; EM m/z: 343 (M + (2S,3S)-2,3-dih¡droxisucc¡nato + Na) + .
Etapa F: ácido (3R,4R)-1 (ferc-butoxicarbonil)-4-metilpiperidin-3-carboxílico A un matraz cargado con (2S,3S)-2,3-dihidroxisuccinato de (3R,4R)-4-metilpiperidin-3-carboxilato de etilo (36.9 g, 115 mmol) se agregó una solución de HCI (6 N acuoso, 191 mi). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 60°C. Luego de aproximadamente 2 h, ia mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 90°C. Luego de aproximadamente 4 h la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y concentró in vacuo. Al residuo se agregó NaHC03 (122 g, 1148 mmol) y dicarbonato de di-rerc-butilo (37.6 g, 172 mmol) seguido por una mezcla de 1,4-dioxano (500 mi) y agua (500 mi). Luego de aproximadamente 2 h, se agregó Et20 (500 mi) y agua (500 mi) a la mezcla de reacción. El pH se ajustó a aproximadamente 4 con HCI 1 N acuoso. La capa orgánica se separó, secó sobre Na2S04 anhidro, filtró, y concentró in vacuo para dar un sólido de color blanco. Se formó una suspensión con el sólido en heptano y filtró para dar ácido (3R,4R)-1 -(ferc-butoxicarbonil)-4-metilpiperidin-3-carboxílico (25 g, 89%) como un sólido de color blanco: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 1.90 min; EM m/z: 244 (M + H)\ Etapa G: (3R,4/?)-4-metil-3-((5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)metilcarbamoil)piperidin-1 -carboxilato de ferc-butilo A una suspensión de clorhidrato de (5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)metanamina (34.0 g, 100 mmol, Ejemplo No. 5, Etapa C), ácido (3R,4R)-1-(rerc-butoxicarbonil)-4-metilpiperidin-3-carboxílico (24.43 g, 100 mmol) y HATU (38.2 g, 100 mmol) en DCM (700 mi) se agregó DIEA (52.6 mi, 301 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 45 min. La reacción se lavó con NaHC03 acuoso saturado (300 mi). La capa orgánica se separó, secó sobre Na2S04 anhidro, filtró luego concentró in vacuo. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice (330 g) usando 33-100% de EtOAc en heptano para dar (3R,4R)-terc-butil-4-metil-3-((5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)metilcarbamoil)piperidin-1-carboxilato de (53 g, 96%) como una espuma de color amarillo pálida: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.40 min; EM m/z: 528 (M+H)+.
Etapa H: (3 ?,4?)-4-metil-3-(6-tosil-6H-im¡dazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)piperidin-1 -carboxilato de ferc-butilo Una mezcla de (3R, 4f?)-4-metil-3-((5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b] p i ra zin -2 -il)metil-carbamoil)-piperidin-1 -carboxilato de rere-butilo (53 g, 100 mmol) y reactivo de Lawesson (22.4 g, 55.2 mmol) en 1,4-dioxano (500 mi) se calentó a aproximadamente 80°C por aproximadamente 1 h. La reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente y luego se dividió entre EtOAc (1000 mi) y NaHC03 acuoso saturado (700 mi). La capa orgánica se lavó con más NaHC03 acuoso saturado (700 mi), secó sobre Na2S04 anhidro, filtró luego concentró in vacuo. El residuo resultante se disolvió en 1,4-dioxano (500 mi) luego se agregó trifluoroacetato de mercurio (II) (54.0 g, 127 mmol). La reacción se agitó a aproximadamente 25°C por aproximadamente 1 h. La reacción se dividió con Na2S203 acuoso saturado (500 ml)/agua (500 mi) con DCM (1000 mi). Las capas se filtraron a través de Celite® y la almohadilla de Celite® se lavó con DCM (500 mi). Las capas combinadas se separaron luego la capa orgánica se lavó con NaHC03 acuoso saturado (800 mi). La capa orgánica se separó, secó sobre Na2S0 anhidro, filtró, y luego concentró in vacuo. El residuo resultante se purificó sobre gel de sílice (330 g) usando 0-40% de EtOAc en DCM para dar (3R, 4f?)-4-metil-3-(6-tosil-6H-imidazo[1,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1-il)piperidin-1-carboxilato de íerc-butilo (40.5 g, 79%) como una espuma de color amarillo: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.62 min; EM m/z: 510 (M + H) + . Etapa I: (3K,4/?)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -lil)-4-metilpiperidin-1 -carboxilato de íerc-butilo A una solución de (3R, 4 )-4-metil-3-(6-tosil-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -i I) pipe rid i n-1 -carboxilato de íerc-butilo (40 g, 78 mmol) en 1,4-dioxano (160 mi) se agregó NaOH (1 N acuoso, 157 mi). La mezcla se calentó a aproximadamente 60°C por aproximadamente 1 h. La mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente. La mezcla se dividió con HCI (4 N acuoso, 50 mi) y extrajo con DCM (2 x 300 mi). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (400 mi), secaron sobre Na2S04 anhidro, filtraron luego concentraron in vacuo. El producto se purificó sobre gel de sílice (330 g) usando 1-5% de MeOH en DCM para dar (3R,4ftJ-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4-metilpiperidin-1 -carboxilato de rere-butilo (30 g, 99%): LC/EM (Tabla 1, Método b) R» = 2.00 min; EM m/z: 356 (M + H) + .
Etapa J: clorhidrato de 1 -((3R,4R)-4-metilpiperidin-3-il)-6H-imidazo[1 , 5-a] pirrólo [2, 3-e]pirazi na A una solución de (3R, 4 )-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)-4-metil-piperidin-1 -carboxilato de ferc-butilo (27.9 g, 78 mmol) en 1,4-dioxano (400 mi) se agregó HCI (4 N en 1,4-dioxano, 58.9 mi, 235 mmol). La suspensión resultante se calentó a aproximadamente 60°C por aproximadamente 1 h. La reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente y luego filtró, lavó con 1,4-dioxano (100 mi) seguido por Et20 (100 mi), para dar clorhidrato de 1-((3R, 4R)-4-metilpiperidin-3-H)-6H-imidazo[1 , 5-a]pirrolo[2,3-e]pirazina (20.6 g, 89%) como un sólido de color tostado: LC/EM (Tabla 1, Método b) R, = 1.27 min; EM m/z: 256 (M + H) + .
Etapa K: (3R,4R)-3-(6H-im¡dazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -N)-4-metilpiperidin-1 -carboxilato de fenilo A una solución de clorhidrato de 1 -((3R,4R)-4-metilpiperidin-3-il)-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazina (0.06 g, 0.21 mmol) en MeCN (1 mi) a aproximadamente 0°C se agregó TEA (0.06 mi, 0.41 mmol), THF (0.6 mi) y DMAP (0.006 g, 0.050 mmol) luego cloroformiato de fenilo (0.026 mi, 0.206 mmol) y agitó por aproximadamente 1 h. La mezcla de reacción se calentó a temperatura ambiente y concentró bajo presión reducida. El residuo crudo se disolvió en DCM (3 mi) y lavó con agua (2 mi), secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida. El residuo crudo se disolvió en DCM (5 mi) y lavó con agua (2 mi) y salmuera (2 mi), secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida. El material se purificó mediante RP-HPLC (Tabla 1, Método g) para dar (3R,4R)-3-(6H-imidazo[ 1, 5-a]pirrolo[2, 3-e]pirazin-1 -il)-4-metilpiperidin-1 -carboxilato de fenilo (0.010 g, 11%): LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 1.95 min; EM m/z 376 (M + H) + .
Ejemplo No. 11*: (R)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin- 1 -il)piperidin-1 -carboxilato de ciclopentilo Etapa A: 5-bromo-3-((trimetils¡l¡l)etinil)piraz¡n-2-amina A una solución de 3,5-dibromopirazin-2-amina (125 g, 494 mmol), TEA (207.0 mi, 1483 mmol), e yoduro de cobre (I) (0.941 g, 4.94 mmol) en THF (1255 mi) se agregó PdCI2(PPh3)2 (3.47 g, 4.94 mmol). La mezcla de reacción se enfrió a aproximadamente -5-0°C y una solución de (trimetilsilil)acetileno (65.0 mi, 470 mmol) en THF (157 mi) se agregó por goteo durante aproximadamente 15 min. La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente -5-0°C por aproximadamente 1.5 h y luego se dejó calentar a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción luego se filtró a través de una almohadilla de Celite® y lavó con THF hasta que no eluyó más producto. El material filtrado se concentró bajo presión reducida para dar un sólido de color marrón-anaranjado. El sólido se trituró y sónico con éter de petróleo caliente (punto de ebullición 30-60°C, 400 mi), enfrió a temperatura ambiente, recogió, lavó con éter de petróleo (punto de ebullición 30-60°C; 2 x 60 mi), y secó para dar 5-bromo-3-((trimetilsilil)etinil)pirazin-2-amina (124 g, 93%, 93% de pureza) como un sólido de color marrón: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.51 min; EM m/z: 270, 272 (M + H) + .
Etapa B: 2-bromo-5-tosil-5H-pirrolo[2,3-í)]pirazina A una solución de 5-bromo-3-((trimetilsilil)etinil)pirazin-2-amina (3.00 g, 11.1 mmol) en DMF (60 mi) a aproximadamente 0°C se agregó NaH (60% de dispersión en aceite mineral, 0.577 g, 14.4 mmol) en tres porciones. Luego de aproximadamente 15 min, se agregó cloruro de p-toluensulfonilo (2.75 g, 14.4 mmol) y la reacción se dejó calentar lentamente a temperatura ambiente. Luego de aproximadamente 16 h, la mezcla de reacción se vertió sobre hielo-agua fría (120 mi) y el precipitado se recogió mediante filtración al vacío. El sólido crudo se disolvió en DCM (15 mi) y purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con DCM para dar 2-bromo-5-tosil-5H-pirrolo[2,3-bjpirazina (2.16 g, 52%): LC/EM (Tabla 1, Método c) Rt = 1.58 min; EM m/z: 352, 354 (M + H) + .
Etapa C: clorhidrato de (5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)metanamina Un reactor de 5 I se cargó con 2-bromo-5-tosil-5H-pirrolo[2,3-Jb]piraz¡na (98.8 g, 281 mmol), polvo de zinc (3.50 g, 53.3 mmol), trifluoro acetato de paladio(ll) (4.0 g, 12 mmol), y 2-(di-t-butilfosfino)-l , 1 '-binaftilo racémico (9.8 g, 24.7 mmol). El matraz se equipó con un dispositivo de adición de polvo en el cual se colocó cianuro de zinc (10.0 g, 157 mmol) para agregarse en una etapa posterior. El recipiente se purgó con argón por no más de aproximadamente 30 min y luego se agregó DMA esparcido con argón (2 I) al reactor. La mezcla se agitó y calentó a aproximadamente 50°C manteniendo una atmósfera de argón. La solución de color marrón oscuro resultante se calentó adicionalmente a aproximadamente 95°C mientras se agregaba el cianuro de zinc, a partir del dispositivo de adición de polvo, por porciones durante aproximadamente 15 min. Luego de alcanzar aproximadamente 95°C, la mezcla de color marrón se agitó por aproximadamente otras 16 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, para dar la precipitación de sales. La mezcla se filtró a través de un embudo buchner que contenía auxiliar de filtro y la torta de filtrado se lavó con DMA (20 mi). Una solución del producto crudo en DMA se agregó a agua fría (<10°C) (16 I) y se agitó por aproximadamente 30 min. La suspensión resultante se filtró y la torta de filtrado se enjuagó nuevamente con agua (1 I). La torta húmeda resultante se secó en un horno de vacío a aproximadamente 50°C. El sólido crudo se disolvió en DCM (1.5 I) y secó adicionalmente sobre MgS04 anhidro. Luego de la filtración, la solución se pasó a través de una almohadilla de sílice (140 g), lavó con solvente adicional hasta que sólo se detectaron predominantemente impurezas eluyendo la almohadilla. El solvente se eliminó y el sólido crudo se trituró con MeOH/DCM (4:1, 10 volúmenes del solvente por gramo de sólido crudo) a temperatura ambiente por aproximadamente 5 h. El sólido se filtró y lavó con MeOH (300 mi). El producto se secó en un horno de vacío para dar 5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-carbonitrilo (58.8 g, 70%) como un sólido de color blanco: H RMN (CDCI3) d 8.67 (s, 1H), 8.21 (d, J=4.2 Hz, 1H), 8.07 (d, J=8.4 Hz, 2H), 7.34 (d, J=8.1 Hz, 2H), 6.89 (d, J=4.2 Hz, 1H), 2.42 (s, 3H). Un reactor de presión de acero inoxidable 316 de 2 I se cargó con 5% de Pd/C (15.4 g de 63.6% en peso de material humedecido con agua, 5.6 g de base seca, 2.6 mmol, Johnson Matthey A503032-5), 5-tosil-5H-pirrolo[2,3-6]pirazin-2-carbonitrilo (55 g, 184 mmol), THF (1.1 I), agua desionizada (165 mi), HCI (37% en peso acuoso, 30 mi, 369 mmol) y quinolina (1.1 mi, 9.0 mmol). El recipiente se purgó, presurizó, y mantuvo a 40 psi administrando hidrógeno a partir de un depósito de alta presión. La mezcla se agitó enérgicamente a aproximadamente 25°C. Luego de aproximadamente 5 h el reactor se ventiló y purgó con nitrógeno para eliminar la mayor parte del hidrógeno disuelto, y la mezcla de reacción se filtró para eliminar el catalizador. El reactor y la torta del catalizador se enjuagaron con THF:agua (1:1, 2 ? 40 mi). El material filtrado combinado y enjuagues se concentraron y agregó EtOH (500 mi). Luego de dos cambios de solvente adicionales con EtOH (2 x 500 mi), el residuo crudo se concentró bajo presión reducida para dar un residuo (76 g) que se suspendió en EtOH (550 mi) y se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 4 h. El sólido se recogió mediante filtración y lavó con EtOH frío (50 mi). La torta húmeda se secó en un horno de vacío para dar clorhidrato de (5-tosil-5H-pirrolo[2, 3-b]pirazin-2-il)metanamina (51.2 g, 82%) como un sólido de color blanco: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.44 min; EM m/z: 303 (M + H)+.
Etapa D: ( )-3-((5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]p¡razin-2-il)metilcarbamoil)piperidin-1 -carboxilato de ferc-butilo Se agregó DIEA (7.7 mi, 44.3 mmol) a una solución de clorhidrato de (5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)metanamina (5 g, 14.7 mmol) en DCM (78 mi) y la reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 10 min seguido por la adición de ácido (R)-N-boc-piperidin-3-carboxílico (3.38 g, 14.7 mmol, CNH-Technologies) y HATU (5.61 g, 14.7 mmol). La mezcla se agitó por aproximadamente 1 h, luego se agregó agua (30 mi), y las capas se separaron. La capa orgánica se lavó con NaHC03 acuoso saturado (30 mi) y salmuera (30 mi), secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida. El material crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-5% de MeOH en DCM para dar (RJ-3-((5-tos¡l-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2- il)metilcarbamoil)piperidin-1 -carboxilato de ferc-butilo crudo (7.58 g, 94%): LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.30 min; EM m/z: 514 (M + H) + .
Etapa E: (R)-3-((5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2- il)metilcarbamotioil)-piperidin-1 -carboxilato de ferc-butilo A una solución de (R)-3-((5-tosil-5H-p¡rrolo[2,3-b]pirazin- 2-il)metilcarbamoil)-piperidin-1 -carboxilato de ferc-butilo (7.58 g, 13.8 mmol) en 1,4-d'ioxano (130 mi) se agregó reactivo de Lawesson (3.37 g, 8.32 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 60°C por aproximadamente 2 h luego se enfrió a temperatura ambiente y concentró bajo presión reducida. El residuo crudo se disolvió en EtOAc (40 mi) y lavó con NaHC03 acuoso saturado, (3 x 40 mi), salmuera (30 mi), secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida. El material crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-5% de MeOH en DCM para dar (R)-3-((5-to$il-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)metilcarbamotioil)piperidin-1 -carboxilato de tere-butilo (5.6 g, 74%, UV pureza 97%): LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.60 min; EM m/z: 530 (M + H) + .
Etapa F: (f?)-3-(6-tosil-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)piperidin- -carboxilato de ferc-butilo A una solución de (f?)-3-((5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)metilcarbamotioil)-piperidin-1 -carboxilato de íerc-butilo (5.61 g, 10.3 mmol) en 1,4-dioxano (96 mi) se agregó trifluoroacetato de mercurio (II) (4.38 g, 10.3 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 2 h luego se filtró a través de una almohadilla de Celite®. La almohadilla de Celite® se enjuagó con EtOAc (50 mi) y el material filtrado se concentró bajo presión reducida. El residuo crudo se disolvió en EtOAc (40 mi) y la fase orgánica se lavó con NaHC03 acuoso saturado (2 x 40 mi) y salmuera (30 mi), secó sobre MgS0 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida. El material crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-5% de MeOH en DCM para dar (R)-3-(6-tosil-6H-¡midazo[1 , 5-a]pirrolo[2, 3-e]pirazin-1 -il)piperidin-1 -carboxilato de tere-butilo (4.4 g, 87%): LC/EM (Tabla 1, Método b) R, = 2.49 min; EM m/z. 496 (M + H) + .
Etapa G: (/?)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -i I ) pi peri d i n -1 -carboxilato de ferc-butilo A una solución de (R)-3-(6-tosil-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2, 3-e]pirazin-1 -il)piper¡din-1 -carboxilato de tere-butilo (4.44 g, 8.96 mmol) en 1,4-dioxano (54 mi) se agregó NaOH (2 N acuoso, 8.9 mi, 18 mmol), y la mezcla resultante se calentó a aproximadamente 60°C por aproximadamente 3 h. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y agregó EtOAc (30 mi) y NH4CI acuoso saturado (20 mi). La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo adicionalmente con EtOAc (40 mi). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (40 mi), secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida. El material se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-10% de MeOH en DCM para dar (R)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]piraziñ-1 -il)p¡peridin-1 -carboxilato de tere-butilo (2.80 g, 92%): LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 1.85 m¡n; EM m/z: 342 (M + H) + .
Etapa H: clorhidrato de (R)-1 -(piperidin-3-il)-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazina Un matraz de fondo redondo se cargó con (R)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2, 3-e]pirazin-1 -il)pi eridin-1 -carboxilato de tere-butilo (2.8 g, 8.20 mmol), 1,4-dioxano (24 mi) y HCI (4 N en 1,4-dioxano, 6.2 mi, 24.6 mmol). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 60°C por aproximadamente 18 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y Et20 (40 mi) se agregó y la mezcla se agitó por aproximadamente 15 min.
El sólido se recogió mediante filtración al vacío, mientras se lavaba con Et20 (50 mi), y luego se secó en un horno de vacío a aproximadamente 60°C para dar clorhidrato de (R)-1 -(piperidin-3-il)-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazina (2.4 g, 94%) como un sólido blancuzco: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 0.81 min; EM m/z 242 (M + H)+.
Etapa I: (R)-3-(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)piperidin-1 -carboxilato de ciclopentilo A una solución de clorhidrato de (R)-1 -(piperidin-3-il)-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazina (0.06 g, 0.19 mmol) en THF (1 mi) se agregó TEA (0.08 mi, 0.57 mmol) y la reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 10 min. A la mezcla de reacción se agregó cloroformiato de ciclopentilo (0.02 m|, 0.15 mmol, Waterstone) y la mezcla se agitó a aproximadamente 45°C por aproximadamente 18 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y concentró bajo presión reducida. El material crudo se disolvió en DCM (5 mi) y lavó con agua (5 mi). La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo con DCM (2 mi). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida.
El material se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-5% de MeOH en DCM para dar (R)-3-(6H-imidazo[1 , 5-a]pirrolo[2, 3-e]pirazin-1 -il)piperidin-1 -carboxilato de ciclopentilo (0.015 g, 21%): LC/EM (Tabla 1, Método b) R, = 1.87 min; EM m/z: 354 (M + H)\ Ejemplo No. 12: ácido (E)-3-(1 -ciclohexil-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-3-il)acrílico Etapa A: (£)-3-(1 -ciclohexil-6-tosil-6H-imidazo[ ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-3-il)acrilato de etilo A una solución de 3-bromo-1 -ciclohexil-6-tosil-6 --¡midazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazina (0.026 g, 0.056 mmol, Preparación No. MM.1) y aducto de PdCI2(dppf)»DCM (0.005 g, 0.006 mmol) en THF (1 mi) se agregó (E)-3-(4,4,5,5-tetrametil-1 ,3,2-dioxaborolan-2-il)acrilato de etilo (0.052 g, 0.23 mmol) y Na2C03 (0.021 g, 0.20 mmol) seguido por agua (0.25 mi). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 65°C. Luego de aproximadamente 15 h, la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y purificó directamente mediante cromatografía sobre gel de sílice (12 g) eluyendo con EtOAc:DCM (1:1) 20-80% en heptano para dar (E)-3-(1 -ciclohexil-6-tosil-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-3-il)acrilato de etilo (0.045 g, 70%) como un sólido de color amarillo: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 3.15 min; EM m/z: 493 (M + H) + .
Etapa B: ácido (E)-3-(1 -ciclohexil-6H-imidazo[ ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-3-il)acrílico A una solución de (£)-3-(1 -ciclohexil-6-tosil-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-3-il)acrilato de etilo (0.064 g, 0.13 mmol) en 1,4-dioxano (5 mi) se agregó NaOH (2 N acuoso, 1.30 mi, 2.60 mmol). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 65°C. Luego de aproximadamente 15 h, la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y el pH de la mezcla de reacción se ajustó a aproximadamente pH 1 con HCI concentrado. La mezcla se concentró parcialmente in vacuo para eliminar el 1,4-dioxano y el sólido de color amarillo resultante se recogió mediante filtración y secó in vacuo para dar ácido (E)-3-(1- ciclohex¡l-6H-im¡dazo[1 ,5-a]pirrolo[2, 3-e]pirazin-3-il)acrílico (0.015 g, 37.2%): LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.85 min; EM m/z: 311 (M + H) + .
Ejemplo No. 13: ácido 3-(1 -ciclohexil-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-3-¡l)propanoico A una solución de 3-(1 -ciclohexil-6-tosil-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-3-il)propanoato de etilo (0.031 g, 0.063 mmol, preparado usando W del Ejemplo No. 12 Etapa A) en 1,4-dioxano (3 mi) se agregó NaOH (2 N acuoso, 1.57 mi, 3.13 mmol). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 65°C. Luego de aproximadamente 2 h, la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y el pH de la mezcla se ajustó a aproximadamente 1 con HCI 1 N acuoso. La mezcla de reacción se concentró in vacuo y purificó mediante cromatografía sobré gel de sílice (12 g) eluyendo con 2-10% de MeOH en DCM para dar ácido 3-( 1-ciclohexil-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2, 3-e]pirazin-3-il)propanoico (0.005 g, 26%) como un sólido de color tostado: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.68 min; EM m/z: 313 (M + H)\ Ejemplo No. 14*: ?/-((1 S,3K,4S)-3-etil-4-(3-(3-hidroxipropil)-6H-imidazo[1, 5-a] pirro lo [2,3- e]pi razin-1-il)ciclopentil)ciclopropansulfonamida A una solución de ?/-((1 S,3S,4f?)-3-(3-alil-6-tosil-6H-imidazo[1,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1-il)-4-etilciclopentil)ciclopropansulfonamida (0.090 g, 0.16 mmol, preparado usando H con Preparación No. 12, Preparación No. Z.1, HATU y DIEA, y Q con Reactivo de Lawesson y trifluoroacetato de mercurio (II)) en THF (3 mi) a aproximadamente 0°C se agregó BH3«DMS (2 M en THF, 0.040 mi, 0.079 mmol). Luego de aproximadamente 2 h, se agregó más BH3«DMS (2 M en THF, 0.040 mi, 0.079 mmol) a la mezcla de reacción. Luego de aproximadamente 6 h en total, se agregó una solución premezclada de H202 (30% acuoso, 0.324 mi, 3.17 mmol) y NaOH (2 N acuoso, 0.793 mi, 1.58 mmol) a la mezcla de reacción. Luego de agitar por aproximadamente 15 h, se agregó EtOAc (20 mi) y agua (20 mi) a la mezcla de reacción. La capa orgánica se separó, lavó con salmuera (20 mi), y concentró in vacuo. El residuo crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice (12g) eluyendo con EtOAc para dar N-((1 S,3R,4S)-3-etil-4-(3-(3-hidroxipropil)-6H-im¡dazo[1 , 5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)ciclopentil)ciclopropansulfonamida (0.025 g, 37%) como un sólido de color blanco: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.70 min; EM m/z: 432 (M + H) + .
Ejemplo No. 15: /V-(1 -(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)pirrolidin-3-il)ciclopropansulfonamida A una solución de 1 -(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)pirrolidin-3-ilcarbamato de rere-butilo (0.175 g, 0.511 mmol, Ejemplo No. D.1.42) en DCM (10 mi) se agregó HCI (4 N en 1,4-dioxano, 1.28 mi, 5.11 mmol). Luego de aproximadamente 4 h a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se concentró in vacuo. El residuo se suspendió en DCM (10 mi) y agregó DIEA (0.446 mi, 2.56 mmol) a la mezcla de reacción para dar una mezcla casi homogénea. A la mezcla se agregó cloruro de ciclopropansulfonilo (0.079 g, 0.56 mmol). Luego de aproximadamente 2 h a temperatura ambiente, se agregó más cloruro de ciclopropansulfonilo (0.079 g, 0.56 mmol). Luego de aproximadamente 6 h a temperatura ambiente, se agregó NaHC03 acuoso saturado (10 mi) a la mezcla de reacción. La capa orgánica se separó y la capa acuosa se extrajo con DCM (3 x 10 mi). Las capas orgánicas combinadas se concentraron in vacuo y purificaron mediante cromatografía sobre gel de sílice (40 g) eluyendo con 50-90% de MeCN en DCM para dar N-(1-(6H- imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2, 3-e]pirazin-1 -H)pirrol¡din-3-il)ciclopropan-sulfonamida (0.125 g, 70%) como un sólido de color tostado: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.42 min; EM m/z: 347 (M + H) + . Ejemplo No. 16: 1 -ciclohexil-3-fenil-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazina A una solución de 3-bromo- -ciclohexil-6-tosil-6-/-imidazo[1 ,5-a]p¡rrolo[2,3-e]pirazina (0.27 g, 0.056 mmol, Preparación No. MM.1) y PdCI2(dppf)«DCM aducto (0.0046 g, 0.0056 mmol) en THF (1 mi) se agregó una solución de ácido fenilborónico (0.12 g, 0.098 mmol) y Na2C03 (0.009 g, 0.084 mmol) en agua (0.25 mi). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 60°C. Luego de aproximadamente 6 h, la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y diluyó con EtOAc (5 mi) y salmuera (5 mi). La capa orgánica se separó y concentró in vacuo. El residuo se disolvió en 1,4-dioxano (5 mi) y agregó NaOH (2 N acuoso, 1 mi). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 65°C. Luego de aproximadamente 15 h, la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y agregó HCI (1 N acuoso, 3 mi) y EtOAc (5 mi). La capa orgánica se separó, concentró in vacuo, y el residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice (12 g) eluyendo con EtOAc 20- 80% en DCM para dar 1 -ciclohexil-3-fenil-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazina (0.005 g, 28%) como un sólido: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.75 min; EM m/z: 317 (M + H) + .
Ejemplo No. 17*: /V-((1 S,3?,4S)-3-etil-4-(3-(hidroximetil)-6H-imidazo[1 , 5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)ciclopentil)ciclopropansulfonamida A una solución de ?/-((1 S,3S,4R)-3-(3-alil-6-tosil-6--imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 - il)-4-etilciclopentil)ciclopropansulfonamida (0.17 g, 0.299 mmol, preparado usando H con Preparación No. 12, Preparación No. Z.1, HATU y DIEA, y Q con Reactivo de Lawesson y trifluoroacetato de mercurio (II)) en 1 ,4-dioxano (5 mi) y agua (1.7 mi) se agregó peryodato de sodio (0.26 g, 1.2 mmol) seguido por tetróxido de osmio (4% en peso en agua, 0.117 mi, 0.015 mmol). Luego de aproximadamente 48 h a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se diluyó con agua (aproximadamente 50 mi) y EtOAc (30 mi). La capa orgánica se separó, secó sobre Na2S04 anhidro, filtraron, y concentraron in vacuo. El aldehido crudo se disolvió en EtOH (10 mi) y NaBH4 (0.023 g, 0.599 mmol) se agregó a la mezcla de reacción. Luego de aproximadamente 2 'h a temperatura ambiente, se agregó HCI (1 N acuoso, aproximadamente 3 mi). Luego de agitar por aproximadamente 30 min, la mezcla de reacción se concentró in vacuo. El residuo se dividió entre EtOAc (30 mi) y NaHC03 acuoso saturado (30 mi). La capa orgánica se separó, secó sobre Na2S04 anhidro, filtró, y concentró in vacuo. El alcohol crudo se disolvió en 1,4-dioxáno (10 mi) y agregó NaOH (2 N acuoso, 1.5 mi, 2.99 mmol). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 80°C. Luego de aproximadamente 4 h, la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y diluyó con EtOAc (30 mi) y NH4CI acuoso saturado (30 ml). La capa orgánica se separó, concentró in vacuo, y purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con 10-50% de MeCN en DCM para dar N-((1 S,3R,4S)-3-etil-4-(3-(hidroximetil)-6H-imidazo[1 , 5-a]pirrolo[2, 3-e]pirazin-1 -il)ciclopentil)ciclopropansulfonamida (0.007 g, 6%) como un sólido de color amarillo: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.59 min; EM m/z: 404 (M + H) + .
Ejemplo No. 18*: W-((1 S,3f?,4S)-3-etil-4-(3-(2-hidroxietil)-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)ciclopentil)ciclopropansulfonamida A una solución de ?/-((1 S,3S,4R)-3-(3-alil-6-tosil-6/-/-¡midazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]piraz¡n-1 -il)-4-etilciclopentil)ciclopropansulfonam¡da (0.170 g, 0.299 mmol, preparado .usando H con Preparación No. 12, Preparación No. Z.1, HATU y DIEA, Q con Reactivo de Lawesson y trifluoroacetato de mercurio (II)) en 1,4-dioxano (5 mi) y agua (1.67 mi) se agregó peryodato de sodio (0.26 g, 1.198 mmol) seguido por tetróxido de osmio (4% en peso en agua, 0.12 mi, 0.015 mmol). Luego de aproximadamente 4 h a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se diluyó con agua (aproximadamente 50 mi) y el precipitado resultante se recogió mediante filtración. El aldehido crudo se disolvió en EtOH (10 mi) y agregó NaBH4 (0.023 g, 0.60 mmol) a la mezcla de reacción. Luego de aproximadamente 2 h a temperatura ambiente, se agregó HCI (1 N acuoso, aproximadamente 3 mi) a la mezcla de reacción. Luego de agitar por aproximadamente 30 min, la mezcla de reacción se concentró in vacuo. El residuo se dividió entre EtOAc (20 mi) y NaHC03 acuoso saturado (20 mi). La capa orgánica se separó, secó sobre Na2S04 anhidro, filtró, y concentró in vacuo. El alcohol crudo se disolvió en 1,4-dioxano (10 mi) y agregó NaOH (2 N acuoso, 1.50 mi, 2.99 mmol). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 80°C. Luego de aproximadamente 4 h, la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y diluyó con EtOAc (30 mi) y NH4CI acuoso saturado (30 mi). La capa orgánica se separó, concentró in vacuo, y purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice (40 g) eluyendo con 5% de MeOH en DCM para dar N-((1 S,3R,4S)-3-etil-4-(3-(2-hidroxietil)-6H-imidazo[1 , 5-a]pirrolo[2, 3-e]pirazin-1 -il)ciclopentil)ciclopropansulfonam¡da (0.025 g, 20%) como un sólido de color amarillo: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.67 min; EM m/z: 418 (M + H) + .
Ejemplo No. 19*: W-((1 S,3/?,4S)-3-etil-4-(3-{2- (metilsulfonil)etil)-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)ciclopentil)ciclopropansulfonamida A una solución de ?/-((1 S,3S,4f?)-3-(3-alil-6-tosil-6/-/-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 - il)-4-etilciclopentil)ciclopropansulfonamida (0.28 g, 0.48 mmol, preparado usando H con Preparación No. 12, Preparación No. Z.1, HATU y DIEA, Q con Reactivo de Lawesson y trifluoroacetato de mercurio (II)) en 1,4-dioxano (5 mi) y agua (1.5 mi) se agregó peryodato de sodio (0.21 g, 0.97 mmol) seguido por tetróxido de osmio (4% en peso en agua, 0.19 mi, 0.024 mmol). Luego de aproximadamente 4 h, la mezcla de reacción se diluyó con DCM (10 mi) y agua (10 mi), la capa orgánica se separó y concentró in vacuo. El aldehido crudo se disolvió en EtOH (5 mi) y agregó NaBH4 (0.18 g, 4.8 mmol) a la mezcla de reacción. Luego de aproximadamente 4 h, se agregó HCI (1 N acuoso, 10 mi) y DCM (20 mi) a la mezcla de reacción. La capa orgánica se separó y concentró in vacuo. El residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con EtOAc en DCM para dar alcohol crudo (0.061 g). A una solución del alcohol crudo en DCM (1 mi) se agregó DIEA (0.047 mi, 0.27 mmol) seguido por cloruro de metansulfonilo (0.0092 mi, 0.12 mmol). Luego de aproximadamente 2 h, la mezcla de reacción se diluyó con DCM (10 mi) y NaHC03 acuoso saturado (10 mi). La capa orgánica se separó, concentró in vacuo, y se diluyó con DMF (1.0 mi). Se agregó metantiolato de sodio (0.075 g, 1.1 mmol) a la mezcla de reacción. Luego de agitar a temperatura ambiente por aproximadamente 15 h, la mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 50°C. Luego de aproximadamente 4 h, la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se diluyó con DCM (10 mi) y NaHC03 acuoso saturado (10 mi). La capa orgánica se separó, concentró in vacuo, y se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice (40 g) eluyendo con MeCN 20-80% en DCM. Las fracciones que contenían el tioéter se combinaron y concentraron in vacuo. El tioéter crudo se disolvió en DCM (1 mi) y trató con sal de tetrabutilamonio de OXONE® (0.114 g, 0.320 mmol). Luego de aproximadamente 4 h, la mezcla de reacción se diluyó con DMSO (1 mi) y concentró parcialmente in vacuo para eliminar DCM. La mezcla cruda se purificó mediante RP-HPLC (Tabla 1, Método k). Las fracciones que contenían la sulfona deseada se combinaron y concentraron in vacuo. El residuo se purificó adicionalmente mediamte cromatografía sobre gel de sílice (12 g) eluyendo con 5% de MeOH en DCM para dar N-((1 S,3R,4S)-3-etil-4-(3-(2-(metilsulfonil)etil)-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2, 3-e]p¡razin-1 -il)ciclopentil)ciclopropansulfonamida (0.002 g, 1.4%) como un sólido: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.82 min; EM m/z: 480 (M + H) + .
Ejemplo No. 20: (c/s-3-etil-4-(6W-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 - il)ciclopentil)metanol A una solución de 5-((c/'s-3-etil-4-(6-tosil-6í7-p¡rrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentil)metoxi)pirazin-2-carbonitrilo (0.145 g, 0.267 mmol, preparado usando P de la Preparación No. 11 con LAH, JJ con 5-cloropirazin-2-carbonitirilo [ArkPharm], TT con TFA, a del Ejemplo No. 1 Etapa D, HATU, y TEA, B con TEA) en 1,4-dioxano (2.7 mi) se agregó Na2C03 (2 N acuoso, 2.7 mi). La reacción se calentó a aproximadamente 50°C por aproximadamente 16 h. Se agregó EtOH (2 mi) a la mezcla de reacción. La reacción se mantuvo a aproximadamente 50°C por aproximadamente 16 h y luego se enfrió a temperatura ambiente. El material se purificó mediante RP-HPLC (Tabla 1, Método d) para dar (cis-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2, 4]tr¡azolo[4,3-a]pirazin-1-H)ciclopentil)metanol (0.024 g, 31%) como el producto: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 1.63 min; EM m/z 286 (M + H)+.
Ejemplo No. 21: 1-ciclohexil-1.6-dihidroimidazo[4,5-d]pirrolo[2,3-£»]piridina Etapa A: 4-cloro-3-yodo-5-nitropiridin-2-amina Una solución de 4-cloro-3-yodopiridin-2-amina (4.00 g, 15.7 mmol, Adesis) en H2S0 concentrado (45 mi) se enfrió a aproximadamente 0°C en un baño de hielo. Se agregó nitrato de potasio (3.50 g, 34.6 mmol) en cuatro porciones durante aproximadamente 10 min. La solución resultante se agitó a aproximadamente 0°C por aproximadamente 1 h, luego a temperatura ambiente por aproximadamente 4 h. La mezcla de reacción se vertió lentamente sobre hielo triturado (volumen total 1L) para dar formación de un sólido que se recogió mediante filtración al vacío y se secó bajo vacío para dar 4-cloro-3-yodo-5-nitropiridin-2-amina (2.2 g, 47%) como un sólido de color amarillo: LC/EM (Tabla 1, Método c) Rt = 1.48 min; EM m/z 298 (M-H)-.
Etapa B: 4-cloro-5-nitro-3-((trimetilsilil)etinil)piridin-2-amina A una solución de 4-cloro-3-yodo-5-nitropiridin-2-amina (5.30 g, 17.7 mmol) en THF (90 mi) se agregó TEA (15.0 mi, 108 mmol). La mezcla de reacción se desgasificó y purgó con nitrógeno 3 veces. Se agregó dicloruro de bis(trifenilfosfin)-paladio(ll) (0.62 g, 0.88 mmol, Strem), yoduro de cobre(l) (0.17 g, 0.89 mmol), y trimetilsililacetileno (5.4 mi, 39 mmol) a la mezcla de reacción, se desgasificó, y purgó 3 veces con nitrógeno. La reacción se calentó a aproximadamente 60°C por aproximadamente 16 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se filtró y lavó con THF (200 mi). El material filtrado se concentró bajo presión reducida. Se agregó DCM (100 mi) al residuo y el precipitado que se había formado se filtró y recogió para dar 4-cloro-5-nitro-3-((trimetilsilil)etinil)piridin-2-amina (0.77 g). El material filtrado restante se concentró bajo presión reducida y el material crudo se purificó mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc al 0-100% en DCM. El material purificado se combinó con 0.77 g de precipitado para dar 4-cloro-5-nitro-3-((trimetilsilil)etinil)piridin-2-amina (2.22 g, 47%) como un sólido de color amarillo: LC/EM (Tabla 1, Método c) Rt = 1.62 min; EM m/z 268 (M-H)\ Etapa C: 4-cloro-3-etinil-5-nitropiridin-2-amina A una solución de 4-cloro-5-nitro-3- ((trimetilsilil)etinil)piridin-2-amina (2.36 g, 8.76 mmol) en DMF (30 mi) se agregó fluoruro de potasio sobre alúmina (40% en peso, 3.2 g, 22 mmol). La suspensión se agitó a aproximadamente temperatura ambiente por aproximadamente 2 h. Se agregó carbón activado (0.23 g) y la suspensión se filtró a través de celite®, lavó con DMF (200 mi). El solvente se eliminó bajo presión reducida y el residuo se trituró con éter de petróleo (50 mi, punto de ebullición 30-60°C). El sólido se filtró, lavó con éter de petróleo (4 x 25 mi, punto de ebullición 30-60°C), y secó in vacuo para dar 4-cloro-3-etinil-5-nitropiridin-2-amina (2.12 g, 89%) como un sólido de color marrón: LC/EM (Tabla 1, Método c) Rt = 1-32 min; EM m/z 196 (M-H)\ Etapa D: 4-cloro-5-nitro-1 H-pirrolo[2,3-fo]piridina A una solución de 4-cloro-3-etinil-5-nitropiridin-2-ámina (0.16 g, 0.81 mmol) en DMF (3 mi) se agregó dímero de cloro(1,5-ciclooctadien)rodio (I) (0.02 g, 0.04 mmol) y tris(4-fluorofenil)fosfina (0.128 g, 0.405 mmol). La mezcla de reacción se desgasificó burbujeando argón por 15 min. La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 80°C por aproximadamente 45 min. El solvente se eliminó bajo presión reducida y el residuo se suspendió en éter (10 mi). El precipitado se recogió mediante filtración y secó para dar 4-cloro-5-nitro-1 H-pirrolo[2,3-b]piridina (0.132 g, 83%, contiene aproximadamente 6% mol de DMF y aproximadamente 3% mol de tris(4-fluorofenil)fosfina) como un sólido de color marrón: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.05 min; EM m/z 198 (M + H) + .
Etapa E: W-ciclohexil-5-nitro-1 H-pirrolo[2,3-b]piridin-4-amina solución de 4-cloro-5-nitro-1 H-p¡rrolo[2,3-í>]pir¡dina .182 g, 0.921 mmol) en DMF (5 mi) se agregó ciclohexilamina (0.55 g, 5.5 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 2 h. El solvente se eliminó bajo presión reducida y agregó EtOAc (100 mi) y agua (20 mi). Las capas se separaron y la capa orgánica se lavó con agua (3 x 25 mi) y salmuera (20 mi), secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró para dar N-ciclohexH-5-nitro-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-4- amina (0.20, 57%) como un residuo de color marrón: LC/EM (Tabla 1, Método c) Rt = 1.53 min; EM m/z 261 (M + H) + .
Etapa F: A/-ciclohexil-1 H-pirrolo[2,3-fa]piridin-4.5-díamina A una solución de A/-ciclohexil-5-nitro-1 H-pirrolo[2,3- 6]piridin-4-amina (0.15 g, 0.57 mmol) en EtOH (10 mi) se agregó cloruro de estaño (II) dihidratado (0.65 g, 2.9 mmol). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 55°C por aproximadamente 1 h. El solvente se eliminó bajo presión reducida y agregó EtOAc (75 mi) y NaHC03 acuoso saturado (25 mi). El sólido formado se recogió mediante filtración al vacío, lavó con EtOAc (25 mi), y descartó. El material filtrado se lavó con NaHC03 acuoso saturado (3 x 20 mi), secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró para dar N-ciclohex¡l-1 H-pirrolo[2,3-b]p¡rid¡n- 4.5-diamina (0.107 g, 87%) como un residuo de color marrón: LC/EM (Tabla 1, Método c) Rt = 1.21 min; EM m/z 231 (M + H) + . Etapa G: 1 -ciclohexil-1 ,6-dihidroimidazo[4,5-d]pirrolo[2,3- b]piridina A una solución de A/-ciclohexil-1 H-pirrolo[2 ,3-£>]p¡rid¡n-4,5-diamina (0.084 g, 0.36 mmol) en ortoformiato de trietilo (1 mi, 6 mmol) se agregó ácido p-toluensulfónico monohidratado (0.002 g, 0.011 mmol). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 80°C por aproximadamente 1 h. Se agregó ácido p-toluensulfónico monohidratado (0.002 g, 0.011 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a aproximadamente 80°C. Luego de aproximadamente 1 h, se agregó ácido p-toluensulfónico monohidratado (0.002 g, 0.011 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a aproximadamente 80°C por aproximadamente 2 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y concentró bajo presión reducida. La reacción se purificó mediante RP-HPLC (Tabla 1, Método m) para dar 1 -ciclohexil-1.6-dih¡droimidazo[4,5-d]p¡rrolo[2,3-b]piridina (0.002 g, 2%) como un sólido de color marrón: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.90 min; EM m/z 241 (M + H) + .
Ejemplo No. 22: 1 -((1 S,2R,4S)-2-etil-4-(tetrahidro-2 tf-pi ran-4-iloxi)ciclopentil)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina Etapa A: 2-etil-4-oxociclopent-2-encarboxilato de etilo En un matraz de fondo redondo de 5 I, se calentó 4-(etoxicarbonil)-3-etil-2-(metoxicarbonil)ciclopenta-1 ,3-dienolato de sodio (316 g, 1205 mmol, [Ejemplo No. 1, Etapa E]), KCI (126 g, 1687 mmol), y AcOH (241 mi, 4218 mmol, JT Baker) en tolueno (1850 mi) y agua (130 mi) a reflujo por aproximadamente 6 h. La mezcla de reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente por aproximadamente 16 h. La mezcla de reacción se agregó por goteo a una solución acuosa de NaHC03 (3.5 I, 8%). La capa acuosa se extrajo con MTBE (2 x 1.5 I). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (1 I), secaron sobre gS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida. El material crudo se purificó mediante destilación al vacío (80-98°C, 0.6 mmHg) para dar 2-etil-4-oxociclopent-2-encarboxilato de etilo (160.4 g, 69%): 1H RMN (400 MHz, CDCI3) d 6.05 - 6.02 (m, 1H), 4.28 - 4.14 (m, 2H), 3.75 (m, J = 0.9, 1.8, 3.8, 6.7, 1H), 2.69 (dd, J = 3.1, 18.4, 1H), 2.61 (dd, J = 6.9, 18.4, 1H), 2.52 (dq, J = 7.4, 24.2, 1H), 2.40 (dq, J = 7.4, 16.1, 1H), 1.30 (t, J = 7.2, 3H), 1.21 (t, J = 7.4, 3H).
Etapa B: 2-etil-4-oxociclopentancarboxilato de etilo En un matraz revestido de fondo redondo de 1 I, se agregó cloruro de cobre(l) (0.679 g, 6.86 mmol), (S)-(-)-2 ,2'-bis(difenilfosfino)-1 , 1 '-binaftilo (4.27 g, 6.86 mmol), y terc-butóxido de sodio (0.6.59 g, 6.86 mmol) en tolueno (250 mi) para dar una solución de color marrón. La mezcla se agitó a temperatura ambiente por 15 min luego de los cuales la solución se volvió marrón. La solución se enfrió a aproximadamente 5°C y agregó polimetilhidrosiloxano (18.29 mi, 274 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a aproximadamente 5°C por aproximadamente 40 min. La solución se enfrió a aproximadamente -15°C y agregó una solución de 2-etil-4-oxociclopent-2-encarboxilato de etilo (25.00 g, 137 mmol) y alcohol ferc-butílico (69.9 mi, 741 mmol) en tolueno (250 mi) en una porción y la reacción se agitó a aproximadamente -15°C por aproximadamente 120 h. La mezcla de reacción se detuvo mediante la adición de 1:1 etanol/toluéno (350 mi) y Celite® 545 (25 g). La mezcla se agitó por aproximadamente 3 h y dejó calentar a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se concentró in vacuo, buscando la concentración deseada con heptano. Se agregó heptano (350 mi) al residuo y los sólidos se eliminaron mediante filtración. El material filtrado se concentró in vacuo y el producto crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de 10-50% de EtOAc en heptano sobre 7 volúmenes de columna para dar 2-etil-4-oxociclopentancarboxilato de etilo como una mezcla no racémica de diastereómeros, predominantemente (1S, 2R)-2-etil-4-oxociclopentancarboxilato de etilo (13.68 g, 54%) como un aceite incoloro. H RMN (400 MHz, CDCI3) d 4.17 (qd, J = 7.1, 1.5, 2H), 3.25 - 3.18 (m, 1H), 2.55 (m, J = 4.7, 3.5, 1.7, 1H), 2.46 - 2.29 (m, 3H), 2.21 (m, J = 11.6, 9.8, 1.3, 1H), 1.53 (m, J = 14.8, 7.4, 6.1, 1H), 1.42 - 1.30 (m, 1H), 1.27 (t, J = 7.1 , 3H), 0.98 (t, J = 7.4, 3H).
Etapa C: (2-etil-4-hidroxiciclopentancarboxilato de etilo A una solución de 2-etil-4-oxociclopentancarboxilato de etilo (12.82 g, 69.6 mmol, 86% ee, predominantemente 1S, 2R) en eOH (183 mi) se agregó borohidruro de sodio (3.29 g, 87 mmol) por porciones. La suspensión se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 16 h. Se agregó NH4CI acuoso saturado (200 mi) y la reacción se agitó por aproximadamente 3 h. El precipitado de color blanco formado se filtró y lavó con Et20 (100 mi). El material filtrado se vertió en Et20 (300 mi). El sólido se filtró y lavó con Et20 (50 mi). Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con Et20 (2 x 150 mi). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (2 x 150 mi), secaron sobre MgS0 anhidro, filtraron y concentraron bajo presión reducida (manteniendo temperatura de baño a aproximadamente 25°C y vacío >50 psi) para dar un producto crudo como un aceite de color amarillo claro espeso. El aceite se lavó con pentano (5 x 80 mi). Las capas de pentano combinadas se secaron sobre gS04 anhidro, e filtraron y concentraron para dar un aceite el cual se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice usando 1:1 EtOAc:pentano para dar 2-etil-4-hidroxic¡clopentancarboxilato de etilo como una mezcla no racémica de diastereómeros predominantemente (1 S ,2R,AS)-2-etil-4-hidroxiciclopentancarboxilato de etilo (12.38 g, 96%) como un aceite traslúcido; 1H RMN (400 MHz, CDCI3) d 4.34 - 4.25 (m, 1H), 4.23 - 4.09 (m, 2H), 3.43 - 3.17 (m, 1H), 2.88 (td, J = 7.1, 2.2, 1H), 2.40 (dt, J = 14.0, 7.8, 1H), 2.09 - 1.91 (m, 3H), 1.33 - 1.24 (m, 4H), 0.95 (t, J = 7.4, 3H).
Etapa D: (4-(ferc-butildimetilsililoxi)-2-etilciclopentancarboxilato de etilo A una solución de 2-etil-4-hidroxiciclopentancarboxilato de etilo (10.0 g, 53.7 mmol) en DMF (18 mi) se agregó TBDMS-CI (9.72 g, 64.5 mmol) e imidazol (9.15 g, 134 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 3 h. Se agregó heptano (50 mi) a la reacción y las capas se separaron. La capa inferior se extrajo con heptano (2 x 30 mi).
Los extractos orgánicos combinados se lavaron con agua (2 x 30 mi), salmuera (30 mi), secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron y concentraron para dar 4-(terc-butildimetilsililoxi)-2-etilciclopentancarboxilato de etilo (15.87 g, 52.8 mmol, 98%) como un aceite incoloro; 1H RMN (400 MHz, CDCI3) d 4.13 (m, 3H), 2.79 (m, 1H), 2.09 (m, 1H), 1.99 (m, 3H), 1.50 - 1.24 (m, 6H), 0.89 (m, 12H), 0.05 (s, 6H).
Etapa E: 2-et¡l-4-(tetrahidro-2H-piran-4-iloxi)ciclopentancarboxilato de etilo A una solución de 4-(rerc-butildimetilsililoxi)-2-etilciclopentancarboxilato de etilo (0.100 g, 0.333 mmol) en MeCN (2.2 mi) se agregó trietilsilano (0.080 mi, 0.499 mmol) y bromuro de bismuto(lll)(0.010 g, 0.022 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 1 min y luego se agregó por goteo dihidro-2H-piran-4(3/-/)-ona (0.050 g, 0.499 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 15 min. La reacción se filtró a través de un Acrodisc® y el solvente se eliminó bajo presión reducida. A una solución de 4-(rerc-butildimetilsililoxi)-2-etilciclopentancarboxilato de etilo (0.200 g, 0.666 mmol) en MeCN (4.5 mi) se agregó trietilsilano (0.160 mi, 1.00 mmol) y bromuro de bismuto(lll) (0.020 g, 0.045 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 1 min y luego se agregó por goteo dih¡dro-2H-piran-4(3H)-ona (0.100 g, 0.998 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 15 min. La reacción se filtró a través de un Acrodisc® y el solvente se eliminó bajo presión reducida. Los residuos se disolvieron en DCM (2 mi) cada uno, combinaron, y el material crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de 10-100% de EtOAc en heptano para dar 2-etil-4-(tetrahidro-2H-piran-4-iloxi)c¡clopentancarboxilato de etilo (0.253 g, 98%) como un aceite incoloro; H RMN (400 MHz, CDCI3) d 4.13 (q, J = 7.1, 2H), 4.05 - 3.98 (m, 1H), 3.98 - 3.88 (m, 2H), 3.58 - 3.47 (m, 1H), 3.46 - 3.36 (m, 2H), 2.80 (q, J = 8.5, 1H), 2.16 (dt, J = 13.3, 7.7, 1H), 2.09 - 1.93 (m, 3H), 1.90 - 1.81 (m, 2H), 1.62 - 1.49 (m, 3H), 1.43 (ddd, J = 11.1, 7.4, 5.2, 1H), 1.33 - 1.22 (m, 4H), 0.92 - 0.83 (m, 3H).
Etapa F: ácido 2-etil-4-(tetrahidro-2H-piran-4- ¡loxi)ciclopentancarboxílico A una solución de ácido 2-etil-4-(tetrahidro-2H-piran-4- iloxi)ciclopentancarboxílico de etilo (0.250 g, 0.925 mmol) en p-dioxano (15 mi) se agregó NaOH acuoso (1 M, 5.00 mi, 5.00 mmol) para dar una solución incolora. La reacción se calentó a aproximadamente 70°C por aproximadamente 8 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente. El solvente se eliminó bajo presión reducida. La solución se diluyó con Et20 (30 mi). Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con Et20 (30 mi). La capa orgánica se puso a un lado. La capa acuosa se acidificó con HCI 5 N (2 mi) a aproximadamente pH 2. La solución se diluyó con Et20 (30 mi). Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con Et20 (3 x 30 mi). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron y concentraron bajo presión reducida para dar ácido 2-etil-4-(tetrah¡dro-2H-piran-4-iloxi)ciclopentancarbox ílico que contenía 6% mol de 1,4-dioxano como un excipiente (0.194 g, 85%) como un aceite incoloro; LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 1.71 min; EM m/z: 243 (M + H)\ Etapa G: 2-etil-4-(tetrahidro-2H-piran-4-iloxi)-W'-(5-tosi!-5H-p¡rrolo[2,3-b]pirazin-2-il)ciclopentancarbohidrazida A una solución de 2-hidrazinil-5-tosil-5H-pirrolo[2,3-6]pirazina (0.233 g, 0.767 mmol, WO2009152133 Preparación No. 9) y ácido 2-etil-4-(tetrahidro-2H-piran-4-iloxi)ciclopentancarboxílico (0.190 g, 0.767 mmol) en DCM (8.00 mi) se agregó HATU (0.350 g, 0.920 mmol, Novabiochem) y TEA (0.43 mi, 3.07 mmol). La suspensión resultante se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 4 h. La reacción se dividió entre DCM (50 mi) y agua (25 mi) y las capas se separaron. La capa orgánica se lavó con agua (2 x 25 mi) y salmuera (30 mi), secó sobre MgS0 anhidro, filtró, y concentró para dar un residuo de color marrón. El material crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de 1-10% de MeOH en DCM para dar 2-etil-4-(tetrahidro-2H-piran-4-Hox¡)-N'-(5-tosil-5H-pirro¡o[2,3-b]pirazin-2-il)ciclopentancarbohidrazida (0.300 g, 74%); LC/EM (Tabla 1, Método b) R, = 2.20 min; EM m/z: 528 (M + H) + .
Etapa H: 1 -(2-etil-4-(tetrahidro-2H-p¡ran-4-iloxi)ciclopentil)-6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina A una solución de 2-etil-4-(tetrahidro-2H-piran-4-iloxi)-/\/'-(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-/ ]pirazin-2-il)ciclopentancarbohidrazida (0.150 g, 0.284 mmol) en p-dioxano (5.00 ml) se agregó DIEA (0.200 ml, 1.146 mmol) y cloruro de tionilo (0.031 ml, 0.426 mmol). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 80°C por aproximadamente 1 h, luego se enfrió a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (50 ml), lavó con H20 (3 x 25 ml) y salmuera (2 x 25 ml). Las capas acuosas se extrajeron con EtOAc (2 x 30 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron con gS04 anhidro, filtraron y concentraron para dar 1-(2-etil-4-(tetrahidro-2H-piran-4-iloxi)ciclopentil)-6-tos¡l-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]piraz¡na (0.145 g, 100%); LC/EM (Tabla 1, Método b) R, = 2.26 min; EM m/z: 510 (M+H) + .
Etapa I: -((1 S,2R.4S)-2-etil-4-(tetrahidro-2H-pi ran-4-iloxi)c¡clopentil)-6 V-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina A una solución de 1 -(2-etil-4-(tetrahidro-2 --piran-4-iloxi)ciclopentil)-6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina (0.145 g, 0.285 mmol) en p-dioxano (6.00 ml) se agregó una solución acuosa de NaOH (1 N, 1.50 ml, 1.50 mmol). La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente 55°C por aproximadamente 45 min, luego se enfrió a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se acidificó a aproximadamente pH 2 mediante la adición de HCI acuoso (1 N, 6 mi). La capa acuosa se extrajo con DCM (3 x 20 mi). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron y concentraron para dar un residuo de color marrón. El material crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de 1-10% de MeOH en DCM. Los estereoisómeros se separaron usando AA (Tabla 2, Método 32, Rt = 15.5 min, o = negativo) para dar 1-((1S, 2R,4S)-2-etil-4-(tetrahidro-2H-piran-4-iloxi)ciclopent¡l)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina (0.048 g, 48%): LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.70 min; EM m/z: 356 (M + H) + . Ejemplo No. 23: ?-((1 S,3R,4S)-3-etil-4-(¡midazo[4,5-d]pirrolo[2,3-£)]piridin-1 (6H)-il)ciclopentil)ciclopropansulf onamida Etapa A: 4-cloro-3-yodo-5-nitropiridin-2-amina Una solución de 4-cloro-3-yodopiridin-2-amina (0.25 g, 0.982 mmol, Boa Pharma) en H2S04 concentrado (1.95 mi) se enfrió a aproximadamente 0°C antes de la adición por pociones de nitrato de potasio (0.21 g, 2.2 mmol) a lo largo de 10 min. La reacción se agitó por aproximadamente 4 h a aproximadamente 0°C. La mezcla de reacción se pipeteó lentamente a lo largo de una solución de hidróxido de amonio y hielo triturado (10 mi) en un baño de hielo. El pH de la reacción se mantuvo sobre 9 mediante la adición incremental de hidróxido de amonio. El precipitado resultante se filtró y secó para dar 4-cloro-3-yodo-5-n¡tropiridin-2-amina (0.085 g, 29%) como un sólido de color verde LC/EM (Tabla 1, Método n) R, = 0.64 min; EM m/z: 298 (M-H)\ Etapa B: 4-cloro-5-nitro-3-((trimetilsilil)etinil)piridin-2-amina A una solución de 4-cloro-3-yodo-5-nitropiridin-2-amüna (5.30 g, 17.7 mmol) en THF (90 mi) se agregó TEA (15.0 mi, 108 mmol). La mezcla de reacción se desgasificó y purgó con nitrógeno 3 veces. Se agregó dicloruro de bis(trifenilfosfin)-paladio(ll) (0.62 g, 0.88 mmol, Strem), yoduro de cobre(l) (0.17 g, 0.89 mmol), y trimetilsililacetileno (5.4 mi, 39 mmol) a la mezcla de reacción, se desgasificó, y purgó 3 veces con nitrógeno. La reacción se calentó a aproximadamente 60°C por aproximadamente 16 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se filtró y lavó con THF (200 mi). El material filtrado se concentró bajo presión reducida. DCM (100 mi) se agregó al residuo y el precipitado que se había formado se filtró y recogió para dar 4-cloro-5-nitro-3- ((trimetilsiHI)etinil)piridin-2-amina (0.77 g). El material filtrado restante se concentró bajo presión reducida y el material crudo se purificó mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc al 0-100% en DCM. El material purificado se combinó con 0.77 g de precipitado para dar 4-cloro-5-nitro-3-((trimetilsUH)etinil)piridin-2-am¡na (2.22 g, 47%) como un sólido de color amarillo: LC/EM (Tabla 1, Método c) Rt = 1.62 min; EM m/z 268 (M-H)\ Etapa C: 4-cloro-3-etinil-5-nitropiridin-2-amina A una solución de 4-cloro-5-nitro-3- ((trimetilsilil)etinil)piridin-2-amina (1.98 g, 7.34 mmol) en DMF (25 mi) se agregó fluoruro de potasio sobre alúmina (40% en peso, 2.67 g, 18.35 mmol). La suspensión se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 1 h. Se agregó carbón activado (0.3 g) y la suspensión se filtró a través de celite®, lavando con DMF (150 mi). El solvente se eliminó bajo presión reducida y el material crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-10% de MeOH en DCM para dar 4-cloro-3-etinil-5-nitropiridin-2-amina (1.03 g, 71%) como un sólido de color amarillo: LC/EM (Tabla 1, Método n) Rt = 0.59 min; EM m/z: 196 (M-H)\ Etapa D: 4-cloro-5-nitro-1 H-pirrolo[2,3-b]pir¡dina A una solución de 4-cloro-3-etinil-5-nitropiridin-2-amina (0.16 g, 0.81 mmol) en DMF (3 mi) se agregó dímero cloro(1,5-ciclooctadien)rodio (I) (0.02 g, 0.04 mmol) y tris (4-fluorofenil)fosfina (0.128 g, 0.405 mmol). La mezcla de reacción se desgasificó burbujeando argón por 15 min. La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 80°C por aproximadamente 45 min. El solvente se eliminó bajo presión reducida y el residuo se suspendió en éter (10 mi). El precipitado se recogió mediante filtración y secó para dar 4-cloro-5-nitro-1 H-pirrolo[2,3-b]piridina (0.132 g, 83%, contiene aproximadamente 6% mol de DMF y aproximadamente 3% mol de tris(4-fluorofenil)fosfina) como un sólido de color marrón: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.05 min; EM m/z 198 (M + H) + .
Etapa E: W-( ( S, 3R, 4S)-3 -eti l -4-isocianatociclopentil)ciclopropansulfonamida A una mezcla de ácido (1 S ,2 R ,4S)-4-(ciclopropansulfonam¡do)-2-etilciclopentancarboxílico (Preparación No. Z.1, 1.00 g, 3.83 mmol) en f-BuOH (19.1 mi) se agregó DPPA (0.826 mi, 3.83 mmol) y TEA (1.17 mi, 8.42 mmol).
La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 70°C por aproximadamente 45 min. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y concentró bajo presión reducida. El material crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-10% de MeOH en DCM. El material se secó bajo presión reducida para dar N-((1 S,3R,4S)-3-etil-4-isocianatociclopentil)ciclopropansulfonamida con 30% mol de t-BuOH como un excipiente (0.97 g, 98%) como un aceite incoloro: LC/EM (Tabla 1, Método n) Rt = 0.56 min; EM m/z 259 (M + H)\ Etapa F: Clorhidrato de N-((1 S,3S,4R)-3-amino-4-etilciclopentil)ciclopropansulfonamida Una mezcla de ?/-((1 S,3R,4S)-3-etil-4-isocianatociclopentil)ciclopropansulfonamida (0.972 g, 3.76 mmol) y HCI acuoso (6 N, 31.4 mi, 188 mmol) se calentó a aproximadamente 100°C por aproximadamente 60 h. Se agregó HCI acuoso (12 N, 5 mi) y la mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 100°C por aproximadamente 18 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y concentró bajo presión reducida. El .residuo se trató con Et20 (10 mi) y EtOAc (10 mi). La mezcla se concentró bajo presión reducida. Se agregó agua (5 mi) y la muestra se liofilizó para dar clorhidrato de N-((1S,3S,4R)-3-amino-4-etilciclopentil)ciclopropan-sulfonamida (0.859 g, 85%) como un sólido de color blanco: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.28 min; EM m/z 233 (M + H) + . Etapa G: W-((1 S,3R, 4S)-3-etil-4-(5-nítro-1 H-pi rrolo[2, 3-o]piridin-4-ilamino)ciclopentil)ciclopropansulfonamida A una mezcla de 4-cloro-5-n¡tro-1 V-pirrolo[2,3-¿>]pirÍdina (0.158 g, 0.800 mmol) en DMF (8.7 mi) se agregó DIEA (0.419 mi, 2.399 mmol) y clorhidrato de -((1 S,3S,4R)-3-amino-4-etilciclopentil)ciclopropansulfonamida (0.215 g, 0.800 mmol). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 60°C por aproximadamente 60 h. La temperatura se incrementó a aproximadamente 70°C por aproximadamente 2 h luego se agregó DIEA (0.279 mi, 1.599 mmol) y clorhidrato de ?/-((1 S,3S,4ft)-3-amino-4-etilciclopentil)ciclopropansulfonamida (0.093 g, 0.346 mmol). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 70°C por aproximadamente 2 h. Se agregó más clorhidrato de N-((1S,3S,4R)-3-amino-4-etilciclopentil)ciclopropansulfonamida (0.060 g, 0.223 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 70°C por aproximadamente 30 min. Se agregó más DIEA (0.279 mi, 1.599 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 70°C por aproximadamente 1 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y concentró in vacuo. El residuo se disolvió en EtOAc (25 mi) y lavó con agua (20 mi). La capa orgánica se separó, secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida. El material crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-5% de MeOH en DCM para dar N-((1 S,3R,4S)-3-etil-4-(5-nitro-1 H-pirrolo[2,3-b]piridin-4-ilamino)ciclopentil)ciclopropansulfonamida (0.134 g, 41%) como un sólido anaranjado: LC/EM (Tabla 1, Método n) Rt = 0.66 min; EM m/z 394 (M + H) + .
Etapa H: N-((1 S, 3R,4S)-3-et¡l-4-(5-nitro-1 -tosil-1 H-pirrolo[2,3-£)]piridin-4-ilamino)ciclopentil)ciclopropansulfonamida A una solución de ?/-((1 S,3R,4S)-3-etil-4-(5-nitro-1 H-pirrolo[2,3-¿)]piridin-4-ilamino)ciclopentil)ciclopropansulfonam¡da (0.123 g, 0.314 mmol) en DMF (3.0 mi) a aproximadamente 0°C se agregó NaH (60% en aceite mineral, 0.015 g, 0.37 mmol). La mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 5 min. Se agregó cloruro de 4-metilbencen-1 -sulfonilo (0.060 g, 0.314 mmol) y la mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 30 min. Se agregó más NaH (60% en aceite mineral, 0.007 g, 0.18 mmol) y la mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 10 min. Se agregó más NaH (60% en aceite mineral, 0.005 g, 0.12 mmol) y la mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 15 min. Se agregó más cloruro de 4-metilbencen-1 -sulfonilo (0.012 g, 0.063 mmol) y la mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 40 min. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. El residuo se disolvió en EtOAc (25 mi) y lavó con agua (15 mi). La capa orgánica se separó, secó sobre MgS04 anhidro, filtró y concentró bajo presión reducida para dar N-((1 S,3R,4S)-3-et¡l-4-(5-nitro-1 -tos i 1-1 H-pirrolo[2, 3-b]pir¡din-4-ilamino)ciclopentil)-ciclopropansulfonamida (0.218 g) como un aceite de color rojo-anaranjado que contenía 40% mol de DMF y 1 equivalente de EtOAc: LC/EM (Tabla 1, Método n) Rt = 0.88 min; EM m/z 548 (M + H) + .
Etapa I: W-((1 S,3S,4/?)-3-(5-am¡no-1 -tosil-1 H-pirrolo[2,3-Jb]piridin-4-ilamino)-4-etilciclopentil)ciclopropansulf onamida A una suspensión de ?/-((1 S,3R,4S)-3-etil-4-(5-nitro-1 -tosil-1 /-/-pirrolo[2,3-¿)]piridin-4-ilamino)ciclopentil)ciclopropansulfonamida (0.172 g, 0.314 mmol) en EtOH (6 mi) se agregó cloruro de estaño (II) dihidratado (0.142 g, 0.628 mmol). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 75°C por aproximadamente 15 h. Se agregó cloruro de estaño (II) dihidratado (0.128 g, 0.565 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 70°C por aproximadamente 40 min luego se calentó a aproximadamente 80°C por aproximadamente 3 h. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y el solvente se eliminó bajo presión reducida. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (20 mi) y lavó con NaOH 1N acuoso (10 mi), agua (10 mi) y salmuera (10 mi). La capa orgánica se separó, secó sobre MgS04 anhidro, filtró y concentró bajo presión reducida. Se agregó EtOH (10 mi) y la mezcla se concentró bajo presión reducida para dar N-((1 S, 3S, 4R)-3-(5-amino-1-tosií- 1 H-pirrolo[2, 3-b]piridin-4-ilamino)-4-etilciclopentil)ciclopropansulfonamida (0.160 g, 98%) como un aceite de color amarillo: LC/EM (Tabla 1, Método n) Rt = 0.75 min; EM m/z 518 (M + H) + .
Etapa J: N-((1 S^R^SJ-S-etil^-íe-tosilimidazí^.S-c/lpirroloia.S-blpindin-l (6H)-il)ciclopentil)ciclopropansulfonamida Una mezcla de ?/-((1 S,3S,4f?)-3-(5-amino-1 -tosil-1 H-pirrolo[2,3-J ]piridin-4-Mamino)-4-etilciclopentil) ciclopropansulfonamida (0.160 g, 0.309 mmol), otroformiato de trimetilo (3.42 mi, 30.9 mmol) y ácido toluen-4-sulfónico hidratado (0.006 g, 0.031 mmol) en MeOH (3.1 mi) se calentó a aproximadamente 65°C por aproximadamente 1 h luego se calentó a aproximadamente 60°C por aproximadamente 14 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y concentró bajo presión reducida. El residuo se disolvió en EtOAc (10 mi) y lavó con NaHC03 acuoso saturado (5 mi), agua (5 mi), y salmuera (5 mi). La capa orgánica se separó, secó sobre MgS04 anhidro, filtró y concentró bajo presión reducida para dar N-((1 S,3R,4S)-3-eti!-4-(6-tosilimidazo[4, 5-d]pirrolo[2, 3-b]piridin-1 (6H)-il)ciclopentil)ciclopropansulfonamida como un sólido de color amarillo (0.130 g, 76%): LC/EM (Tabla 1, Método n) R, = 0.76 min; EM m/z 528 (M + H)\ Etapa K: W-((1 S,3R, S)-3-et¡l-4-(¡m¡dazo[4, 5-d] pirrofo[2, 3-£>]piridin-1(6H)-il)ciclopentil)ciclopropansulfonamida Una mezcla de /-((1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6-tosilimidazo[415-d]pirrolo[2,3-fe]pirid¡n-1(6H)-M)ciclopentil)c¡clopropansulfonam¡da (0.119 g, 0.214 mmol) y NaOH 1N acuoso (0.428 mi, 0.428 mmol) en 1,4-dioxano (2 mi) se calentó a aproximadamente 80°C por aproximadamente 40 min. Se agregó NaOH acuoso (1 N, 0.428 mi, 0.428 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 80°C por aproximadamente por 3.5 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y concentró bajo presión reducida. El residuo se disolvió en EtOAc (10 mi) y agua (10 mi). El pH se ajustó a aproximadamente 5 mediante la adición de HCI 1N acuoso. La capa orgánica se separó, $ecó sobre MgS04 anhidro, filtró y concentró bajo presión reducida. El residuo se trituró con Et20 (5 mi) y el solvente se eliminó mediante una pipeta. El residuo se secó bajo presión reducida para dar un sólido de color amarillo brillante que se purificó mediante cromatografía quiral [Tabla 2, Método 39, Rt = 16.6 min, o = negativo) para dar N-((1 S, 3R, 4S)-3-etil-4-(imidazo[4, 5-d]pirrolo[2, 3-b]piridin-1 (6H)-il)ciclopentil)ciclopropansulfonamida (0.036 g, 45%): LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.71 min; EM m/z 374 (M + H) + .
Ejemplo No. 24: ?/-((1 S,3S,4R)-3-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)-4-metilciclopentil)ciclopropansulfonamida Etapa A: 5-bromo-3-((trimetilsilil)etinil)pirazin-2-amina A una solución de 3,5-dibromopirazin-2-amina (125 g, 494 mmol), TEA (207.0 mi, 1483 mmol), e yoduro de cobre (I) (0.941 g, 4.94 mmol) en THF (1255 mi) se agregó PdCI2(PPh3)2 (3.47 g, 4.94 mmol). La mezcla de reacción se enfrió a aproximadamente -5-0°C y agregó una solución de (trimetilsili I )acet i leño (65.0 mi, 470 mmol) en THF (157 mi) por goteo durante aproximadamente 15 min. La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente -5-0°C por aproximadamente 1.5 h y luego se dejó calentar a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción luego se filtró a través de una almohadilla de Celite® y lavó con THF hasta que no eluyó más producto. El material filtrado se concentró bajo presión reducida para dar un sólido de color marrón-anaranjado. El sólido se trituró y sónico con éter de petróleo caliente (punto de ebullición 30-60°C, 400 mi), enfrió a temperatura ambiente, recogió, lavó con éter de petróleo (punto de ebullición 30-60°C; 2 x 60 mi), y secó para dar 5-bromo-3-((trimetilsilil)etinil)pirazin-2-amina (124 g, 93%, 93% de pureza) como un sólido de color marrón: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.51 min; EM m/z: 270, 272 (M + H) + .
Etapa B: 2-bromo-5-tosil-5H-pirrolo[2,3- ]pirazina A una solución de 5-bromo-3-((trimetilsilil)etinil)pirazin-2-amina (3.00 g, 11.1 mmol) en DMF (60 mi) a aproximadamente 0°C se agregó NaH (60% de dispersión en aceite mineral, 0.577 g, 14.4 mmol) en tres porciones. Luego de aproximadamente 15 min, se agregó cloruro de p-toluensulfonilo (2.75 g, 14.4 mmol) y la reacción se dejó calentar lentamente a temperatura ambiente. Luego de aproximadamente 16 h, la mezcla de reacción se vertió sobre hielo-agua fría (120 mi) y el precipitado se recogió mediante filtración al vacío. El sólido crudo se disolvió en DCM (15 mi) y purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con 100% de DCM para dar 2-bromo-5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina (2.16 g, 52%): LC/EM (Tabla 1, Método c) Rt = 1.58 min; EM m/z: 352, 354 (M + H) + .
Etapa C: 5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-carboxilato de metilo CO se burbujeó en una solución anaranjada de '2-bromo-5-tosil-5/-/-pirrolo[2,3-b]pirazina (50.0 g, 142 mmol) en DMF (2.50 I) en un matraz de fondo redondo de 5 I por aproximadamente 2 min. Se agregó dicloruro de bis(trifenilfosfin)-paladio(l I) (9.96 g, 14.2 mmol), TEA (59 mi, 423 mmol) y MeOH (173.0 mi, 4259 mmol) y el matraz se equipó con un balón de CO. La mezcla se calentó a aproximadamente 95°C bajo una atmósfera de CO (1 atmósfera). Luego de agitar durante la noche, la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente durante la noche y vertió en agua helada (3.2 I). La mezcla se agitó por aproximadamente 10 min y el precipitado se recogió mediante filtración, lavando con agua, y secó por 1 h. El material crudo se disolvió en DCM, separó a partir de agua residual, secó sobre MgS04 anhidro, filtró, agregó gel de sílice, y concentró bajo presión reducida para preparar para la cromatografía. El material crudo se purificó mediante cromatografía de columna sobre gel de sílice eluyendo con 0-5% de MeOH en DCM para dar 5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-carboxilato de metilo con 5% de DCM mol como un excipiente (40.7 g, 86%, 93% de pureza): LC/EM (Tabla 1, Método a) R, = 2.35 min; EM m/z 332 (M + H) + .
Etapa D: ácido 5-Tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-carboxíIico Se agregó HCI (6 N acuoso, 714 mi) a una solución de color amarillo de 5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-carboxilato de metilo (17.8 g, 53.6 mmol) en 1,4-dioxano (715 mi) en un matraz de fondo redondo de 2 I, y la mezcla se calentó a aproximadamente 60°C por aproximadamente 16 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente. El solvente orgánico se eliminó bajo presión reducida y el precipitado se recogió, lavó con agua, y secó para dar ácido 5-Tosil-5H-pirrolo[2, 3-b]pirazin-2-carbox ílico (14.4 g, 85%) como un sólido de color amarillo: LC/E (Tabla 1, Método a) Rt = 1.63 min; EM m/z 316 (M-H)\ Etapa E: 5-tosil-5H-p¡rrolo[2,3-b]pirazin-2-ilcarbamato de terc-butilo En un matraz de fondo redondo de 500 mi, se agregó ácido 5-Tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-carboxílico (14.4 g, 45.3 mmol), DPPA (9.78 mi, 45.3 mmol) y TEA (13.9 mi, 100 mmol) en f-BuOH (200 mi) para dar una suspensión anaranjada. La mezcla se calentó a aproximadamente 70°C por aproximadamente 16 h, enfrió a temperatura ambiente y el material insoluble se filtró. El solvente se eliminó bajo presión reducida y el material crudo se purificó mediante cromatografía de columna sobre gel de sílice eluyendo con 25-60% de EtOAc en heptano a lo largo de 30 min para dar 5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-ilcarbamato de tere-butilo (9.75 g, 54%) como un sólido blancuzco: LC/EM (Tabla 1, Método a) R, = 2.79 min; EM m/z 389 (M + H)+.
Etapa F: 4-(etoxicarbonil)-2-(metoxicarbonil)-3-metilciclopenta-1 ,3-dienolato de sodio En un matraz de fondo redondo de 12 I, se agregó NaH (60% de dispersión en aceite mineral, 159 g, 3985 mmol) en porciones a THF anhidro en agitación (4004 mi) para dar una suspensión de color gris. La mezcla se enfrió a aproximadamente 5°C en un baño de hielo/sal antes de agregar acetoacetato de etilo (506 mi, 3985 mmol, Alfa Aesar) en THF anhidro (200 mi) por goteo por medio de un embudo de adición durante aproximadamente 1 h durante la cual la temperatura se incrementó gradualmente a aproximadamente 18°C. Luego de completarse la adición, la reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 1 h y luego agregó una solución de 4-cloroacetoacetato de metilo (230 mi, 1993 mmol, Oakwood) en THF anhidro (200 mi) por gioteo por medio de un embudo de adición durante aproximadamente 1 h. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 2 h y luego calentó a aproximadamente 50°C por aproximadamente 16 h. La mezcla de reacción se concentró in vacuo. El sólido anaranjado se enfrió a aproximadamente 5°C y agregó una mezcla de hielo/agua (2 I). La suspensión se mezcló haciendo girar el evaporador giratorio sin vacío por aproximadamente 30 min. El sólido se recogió mediante filtración y se lavó con hielo-agua fría (750 mi). Una vez que la mayor parte del solvente (aproximadamente 90%) se hubo eliminado, el sólido húmedo se trituró con MeCN (750 mi), agitó por aproximadamente 30 min y luego el sólido se recogió mediante filtración lavando con Et20 (2 x 500 mi). El sólido se secó en aire por aproximadamente 16 h y luego in vacuo a aproximadamente 55°C para dar 4-(etoxicarbonil)-2-(metoxicarbonil)-3-metilciclopenta-1 ,3-dienolato de sodio (485 g, 98%): H RMN (DMSO-cf6) d 3.95 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.48 (s, 3H), 2.69 (q, J = 2.0 Hz, 2H), 2.47 (t, J = 2.1 Hz, 3H), 1.15 (t, J = 7.1 Hz, 3H).
Etapa G: 2-metil-4-oxociclopent-2-encarboxilato de etilo En un matraz de fondo redondo de 5 I, se calentó 4-(etox¡carbonil)-2-(metox¡carbonil)-3-metilciclo-penta-1 ,3-dienolato de sodio (485 g, 1954 mmol), KCI (204 g, 2736 mmol, JT Baker), y AcOH (392 mi, 6839 mmol, JT Baker) en tolueno (1200 mi) y agua (1200 mi) a reflujo por aproximadamente 6 h. La mezcla de reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente por aproximadamente 16h. La mezcla de reacción luego se vertió en un recipiente de 12 I y se diluyó con agua (3 I). Se agregó NaHC03 sólido (450 g, 5.3 mol) cuidadosamente por porciones con agitación durante aproximadamente 1 h. Luego de aproximadamente otros 30 min de agitación, la fase acuosa básica se separó y extrajo adicionalmente con Et20 (4 x 400 mi). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (4 x 500 mi) y salmuera (500 mi), secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida para dar un aceite de color amarillo que se purificó mediante destilación al vacío (92-94°C, 0.4 mmHg) para dar 2-metil-4-oxociclopent-2-encarboxilato de etilo (229 g, 69%) como un aceite de color amarillo: 1H RMN (CDCI3) d 6.04 - 6.01 (m, 1H), 4.26 - 4.17 (m, 2H), 3.67 (m, 1H), 2.72 (m, 1H), 2.62 (m, 1H), 2.16 (s, 3H), 1.32 - 1.27 (t, J=7.1 Hz, 3H).
Etapa H: 2-metil-4-oxociclopentancarboxilato de etilo En un matraz revestido de fondo redondo de 1 I, se agregó cloruro de cobre(l) (0.736 g, 7.43 mmol), (S)-(-)-2,2'-bis(difenilfosfino)-1 , 1 '-binaftilo (4.63 g, 7.43 mmol), y ierc-butóxido de sodio (0.714 g, 7.43 mmol) en tolueno (250 mi) para dar una solución de color amarillo. La mezcla se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 15 min luego de los cuales la solución se volvió marrón. La solución se enfrió a aproximadamente 5°C y agregó polimetilhidrosiloxano (14.86 mi, 223 mmol) y la solución se agitó a aproximadamente 5°C por aproximadamente 40 min. La solución se enfrió a aproximadamente -15°C y se agregó una solución de 2-metil-4-oxociclopent-2-encarboxilato de etilo (25.00 g, 149 mmol) y alcohol rerc-butílico (61.7 mi, 654 mmol) en tolueno (250 mi) en una porción. La reacción se agitó a -15°C por 144 h. La mezcla de reacción se detuvo mediante la adición de 1:1 etanol/tolueno (350 mi) y Celite® 545 (25 g). La mezcla se agitó y dejó calentar a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se concentró ¡n vacuo, buscando la concentración deseada con heptano. Se agregó heptano (350 mi) al residuo y los sólidos se eliminaron mediante filtración. El material filtrado se concentró in vacuo y el producto crudo se purificó mediante cromatografía sobre gél de sílice usando un gradiente de 10-50% de EtOAc en heptano sobre 7 volúmenes de columna para dar 2-metil-4-oxociclopentancarboxilato de etilo (mezcla no racémicá de diastereómeros), predominantemente (1 S,2R)-2-metil-4- oxociclopentancarboxilato de etilo (11.2 g, 42% de rendimiento) como un sólido incoloro. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) d 4.19 (qd, J = 7.1, 0.6, 2H), 3.17 (ddd, J = 8.1, 6.8, 5.6, 1H), 2.76 - 2.56 (m, 2H), 2.67 - 2.46 (m, 2H), 2.43 - 2.29 (m, 2H), 2.16 (ddd, J = 18.3, 7.8, 1.7, 1H), 1.29 (t, J = 7.2, 3H), 1.06 (d, J = 7.0, 3H).
Etapa I: 4-(dibencilamino)-2-metilciclopentancarboxilato de etilo Un matraz de fondo redondo se cargó con 2-metil-4-oxociclopentancarboxilato de etilo (10.0 g, 58.8 mmol) y DCE (180 mi). La solución se enfrió a aproximadamente 0°C y agregó AcOH (5.7 mi, 100 mmol) y dibencilamina (11.3 mi, 58.8 mmol) por goteo, para dar la formación de una suspensión espesa. La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 10°C y agregó triacetoxiborohidruro de sodio (21.2 g, 100 mmol) por porciones. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 20 h luego lentamente se vertió sobre NaHC03 acuoso saturado en agitación (300 mi) y agitó por aproximadamente 20 min. Las capas se separaron y la fase acuosa se extrajo con DCM (3 x 100 mi). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (2 x 100 mi), secaron sobre Na2S04 anhidro, y concentraron bajo presión reducida. El aceite de color amarillo crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-30% de EtOAc en heptano para dar 4-(dibenc¡lamino)-2-metilciclopentancarboxilato de etilo (mezcla no racémica de diastereómeros), predominantemente (1 S,2R,4S)-4-(dibencilaminú)-2-metilciclopentancarboxilato de etilo) (15.5 g, 75%) como un aceite incoloro: 1H RMN (piridin-d5) d 7.53 (dd, J=0.9, 7.9 Hz, 4H), 7.43-7.35 (m, 4H), 7.33-7.25 (m, 2H), 4.22-4.06 (m, 2H), 3.79 (d, J=14.2 Hz, 2H), 3.70 (d, J=14.2 Hz, 2H), 3.34-3.22 (m, 1H), 2.76 (dd, J=7.9, 16.6 Hz, 1H), 2.25-2.13 (m, 1H), 2.09-1.94 (m, 2H), 1.88-1.79 (m, 1H), 1.52 (dd, =10.5, 22.5 Hz, 1H), 1.16 (t, J=7.1 Hz, 3H), 0.98 (d, J=7.0 Hz, 3H).
Etapa J: ácido 4-(dibencilamino)-2-metilciclopentancarboxílico Se disolvió 4-(dibencilamino)-2-metilciclopentancarboxilato de etilo (3.65 g, 10.38 mmol) en una mezcla de HCI (6 N acuoso, 20 mi) y 1,4-dioxano (50 mi) y la mezcla resultante se calentó a aproximadamente 60°C por aproximadamente 72 h. El solvente orgánico se eliminó bajo presión reducida. La fase acuosa se neutralizó mediante la adición de NaHC03 acuoso saturado (40 mi) y extrajo con EtOAc (50 mi). La capa orgánica se lavó con salmuera (40 mi), secó sobre MgS04 anhidro y concentró bajo presión reducida para dar ácido 4-(dibencilamino)-2-metilciclopentancarboxilico (3.3 g, 98%) como un sólido amorfo de color blanco: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.66 min; EM m/z 324 (M + H) + .
Etapa K: 2-bromo-1 -(4-(dibencilamino)-2-metilciclopentil)etanona Se agregó cloruro de oxalilo (4.37 mi, 49.9 mmol) lentamente a una solución de ácido 4-(dibencilamino)-2-metilciclopentancarboxílico (7.34 g, 22.7 mmol) en DCM (100 mi), (nota: suave evolución de gas) seguido por una adición por goteo de DMF (0.26 mi, 3.41 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 14 h. El solvente se eliminó bajo presión reducida para dar un sólido amorfo de color beige, el cual se disolvió en THF y MeCN (1:1, 100 mi). La solución resultante se agregó a una solución de trimetilsilildiazometano (2 M en Ét20, 39.7 mi, 79 mmol) en THF y MeCN (1:1, 100 mi) a aproximadamente 0°C. La mezcla resultante se agitó a aproximadamente 0°C por aproximadamente 3 h y luego detuvo mediante una adición por goteo de HBr (48% acuoso, 25 mi, 221 mmol). La mezcla resultante se neutralizó mediante una adición por goteo de NaHC03 acuoso saturado (300 mi) y las capas se separaron. La capa orgánica se secó sobre MgS0 anhidro y concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con 5%-45% de EtOAc en heptano para dar 2-bromo-1 -(4-(dibencilamino)-2-metilciclopentil)etanona (6.3 g, 69%) como un aceite de color amarillo: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.90 min; EM m/z 400, 402 (M + H) + .
Etapa L: 2-(4-(dibencilamino)-2-metilc¡clopentil)-2-oxoet¡l(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)carbamato de ferc-butilo Una solución de 5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-¡Icarbamato de tere-butilo (0.59 g, 1.519 mmol, Ejemplo No. 3 Etapa E) en DMF (5 mi) se agregó por goteo a una suspensión de NaH (60% de dispersión en aceite mineral, 0.058 g, 1.45 mmol) en DMF (5 mi), a aproximadamente 0°C. La mezcla resultante se agitó a aproximadamente 0°C por aproximadamente 30 min y luego se agregó por goteo a una solución de 2-bromo-1 -(4-(dibencilamino)-2-metilciclopentil)etanona (0.73 g, 1.8 mmol) en DMF (10 mi) a aproximadamente 0°C. La mezcla resultante se agitó a aproximadamente 0°C por aproximadamente 1 h y el solvente se eliminó bajo presión reducida. El residuo se dividió entre NaHC03 acuoso saturado y EtOAc (100 mi de cada uno). La fase orgánica se separó, secó sobre MgS04 anhidro y concentró bajo presión reducida para dar 2-(4-(dibencilamino)-2-metilciclopentil)-2-oxoetil(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)carbamato de ferc-butilo (1.04 g, 97%) como un sólido de color amarillo amorfo: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 3.30 min; EM m/z 708 (M + H) + .
Etapa M : 1 -(4-(dibencilamino)-2-metilciclopentil)-2-(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-ilamino)etanona Se disolvió 2-(4-(dibencilamino)-2-metilciclopentÍI)-2-oxoetil(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)carbamato de f ere-butilo (6.19 g, 8.75 mmol) en HCI (4 N en 1,4-dioxano, 25 mi). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 2 h. El solvente se eliminó bajo presión reducida y el residuo se dividió entre NaHC03 acuoso saturado y EtOAc (100 mi de cada uno). La fase orgánica se lavó con salmuera (80 mi), se secó sobre MgS04 anhidro y concentró bajo presión reducida para dar 1 -(4-(d¡bencilamino)-2-metilciclopentil)~ 2-(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-ilamino)etanona (5.2 g, 98%) como un sólido de color marrón amorfo: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 3.00 min; EM m/z 608 (M + H)+.
Etapa N: W,W-dibencil-3-metil-4-(3-tosil-3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)ciclopentanamina Una mezcla de 1 -(4-(dibencilamino)-2-metilciclopentil)-2-(5-tosil-5 V-pirrolo[2,3-/b]pirazin-2-ilamino)etanona (5.32 g, 8.75 mmol) y reactivo de Lawesson (1.88 g, 4.64 mmol) se calentó a aproximadamente 60°C por aproximadamente 2 h. Se agregó reactivo de Lawesson (1.88 g, 4.64 mmol). La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente 60°C por aproximadamente 1 h. El solvente se eliminó bajo presión reducida y el residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-8% de MeOH en DCM para dar N, N-dibencil-3-metil-4-(3-tos¡l-3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2, 3-e]pirazin-8-il)ciclopentanamina (4.47 g, 87%) como un sólido de color marrón amorfo: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.99 min; EM m/z 590 (M + H) + .
Etapa O: A/,A/-dibencil-3-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)-4-meti!ciclopentanamina Se disolvió A/,/V-dibencil-3-metil-4-(3-tosil-3H-imidazoÍ1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)ciclopentan-amina (4.47 g, 7.58 mmol) en 1,4-dioxano (40 mi). Se agregó NaOH (2 N acuoso, 4 mi) y la mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 90°C por aproximadamente 80 min. El solvente orgánico se eliminó bajo presión reducida y el residuo se trató con NH4CI acuoso saturado (70 mi) y extrajo con DCM (2 x 60 mi). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (70 mi), secaron sobre MgS04 anhidro y concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-8% de MeOH en DCM para dar N, N-dibencil-3-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2, 3-e]pirazin-8-il)-4-metilciclopentan-amina (1.84 g, 56%) como un aceite de color amarillo: LC/EM (Tabla 1, Método a) R, = 2.31 min; EM m/z 436 (M + H) + .
Etapa P: A,A-dibencil-3-metil-4-(3-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)ciclopentanamina A la suspensión de hidruro de sodio (60% de dispersión en aceite mineral, 0.382 g, 9.55 mmol) en DMF (50 mi) se agregó por goteo una solución de /V,/V-dibencil-3-(3H-¡midazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)-4-metilciclopentanamina (3.96 g, 9.09 mmol) en DMF (50 mi) a 0°C. La solución resultante se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 10 min. Se agregó cloruro de SEM (1.774 mi, 10.0 mmol) por goteo y la solución se agitó por aproximadamente 1 h. El solvente se eliminó bajo presión reducida y el residuo se dividió entre agua y EtOAc (200 mi de cada uno). La capa orgánica se lavó con salmuera (100 mi), secó sobre MgS04 anhidro, filtró y concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con 10-80% de EtOAc en DCM para dar N, N-dibencil-3-metil-4-(3-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2, 3-e]piraz¡n-8-il)ciclopentanamina (3.1 g, 60% de rendimiento) como un sólido amorfo blancuzco. LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 3.32 min; EM m/z 566 (M + H) + .
Etapa Q: 3-Metil-4-(3-((2-(trimetilsilil)etoxi)met5l)-3H-imidazo[1,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)ciclopentanamina A una solución de /V, V-dibencil-3-metil-4-(3-((2-(trimetilsilM)etoxi)metil)-3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)c¡clopentanamina (3.0 g, 5.30 mmol) en trifluoroetanol (200 mi) se agregó hidróxido de paladio sobre carbono húmedo 20% (0.6 g, 4.27 mmol). La mezcla se agitó bajo 40 psi de hidrógeno a aproximadamente 50°C por aproximadamente 90 min. El catalizador se retiró mediante filtración a través de una almohadilla de Celite® y el material filtrado se concentró bajo presión reducida para dar 3-metH-4-(3-((2- (trimetilsilil)etoxi)metil)-3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2, 3-e]pirazin-8-¡l)ciclopentanamina (2.0 g, 98% de rendimiento) como un sólido de color marrón amorfo. LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.86 min; EM m/z 386 (M + H) + .
Etapa R: /V-(3-metil-4-(3-((2-(trimetilsilil)etoxi)meti«J-3H-imidazo[1,2-a] pirrólo [2, 3-e]pirazin-8-il)ciclopentil)ciclopropansulfonamida A una solución de 3-metil-4-(3-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-3H-imidazo[1,2-a]pirrolo[2,3-e]piraz¡n-8-¡l)ciclopentanamina (0.27 g, 0.7 mmol) y DIEA (0.18 mi, 1.05 mmol) en DCM (5 mi) se agregó cloruro de ciclopropansulfonilo (0.098 g, 0.7 mmol) por goteo. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 1 h. Se agregaron otros 0.18 mi de DIÉA y 0.098 g de cloruro de ciclopropansulfonilo y la reacción se continuó por aproximadamente 3 . El solvente se eliminó y el residuo se dividió entre cloruro de amonio acuoso saturado y EtOAc (20 mi de cada uno). La capa orgánica se lavó con salmuera (10 mi), secó sobre gS04 anhidro, filtró y concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice (100% de DCM por 5 min, luego a 6% de MeOH en DCM a lo largo de los siguientes 30 min) para dar N-(3-metil-4-(3-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2, 3-e]piraz¡n-8-il)ciclopentil)ciclopropansulfonamida (0.18 g, 52% de rendimiento) como un sólido blancuzco. LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.45 min; EM m/z 490 (M + H) + .
Etapa S: A/-((1S,3S,4 ?)-3-(3H-imidazo[1,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)-4-metilciclopentil)ciclopropansulfonam¡da A la solución de 3-metil-4-(3-((2-(trimetilsilil)etoxi)meti!)-3H-imidazo[1, 2-a] pirro lo [2,3- e]pirazin-8-il)ciclopentil)ciclopropansulfonamida (0.18 g, 0.368 mmol) en DCM (2.5 mi) se agregó TFA (0.9 mi). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 2 h. Los solventes se eliminaron bajo presión reducida y el residuo se secó bajo alto vacío. El residuo se disolvió en 1,4-dioxano (3 mi) y solución de hidróxido de amonio 28% en agua (2.5 mi). La mezcla se calentó a aproximadamente 60°C por aproximadamente 2 h. Los solventes se eliminaron bajo presión reducida y el residuo se purificó mediante usando el Método General AA (Tabla 2, Método 32, Rt = 20.9 min, o = negativo) para dar N-((1 S,3S, 4R)-3-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2, 3-e]pirazin-8-il)-4-metilciclopentil)ciclopropansulfonamida (0.088 g, 66% de rendimiento) como un sólido de color blanco. LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.52 min; EM m/z 360 (M + H) + .
Ejemplo No. 25: ?/-((1 S,3S,4 ?)-3-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)-4-metilciclopentil)-3,3-d¡fluoroazetidin-1-sulfonamida Etapa A: 5-bromo-3-((trimetilsilil)etinil)pirazin-2-amina A una solución de 3,5-dibromopirazin-2-amina (125 g, 494 mmol), TEA (207.0 mi, 1483 mmol), e yoduro de cobre (I) (0.941 g, 4.94 mmol) en THF (1255 mi) se agregó PdCI2(PPh3)2 (3.47 g, 4.94 mmol). La mezcla de reacción se enfrió a aproximadamente -5-0°C y agregó una solución de (trimetilsilil)acetileno (65.0 mi, 470 mmol) en THF (157 mi) por goteo durante aproximadamente 15 min. La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente -5-0°C por aproximadamente 1.5 h y luego dejó calentar a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción luego se filtró a través de una almohadilla de Celite® y lavó con THF hasta que no eluyó más producto. El material filtrado se concentró bajo presión reducida para dar un sólido de color marrón-anaranjado. El sólido se trituró y sonicó con éter de petróleo caliente (punto de ebullición 30-60°C, 400 mi), enfrió a temperatura ambiente, recogió, lavó con éter de petróleo (punto de ebullición 30-60°C; 2 x 60 mi), y secó para dar 5-bromo-3-((trimetilsiHI)etinil)pirazin-2-amina (124 g, 93%, 93% de pureza) como un sólido de color marrón: LC/EM (Tabla 1, Método b) R, = 2.51 min; EM m/z: 270, 272 (M + H) + .
Etapa B: 2-bromo-5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina A una solución de 5-bromo-3-((trimetilsilil)et¡nil)piraz¡n-2-amina (3.00 g, 11.1 mmol) en DMF (60 mi) a aproximadamente 0°C se agregó NaH (60% de dispersión en aceite mineral, 0.577 g, 14.4 mmol) en tres porciones. Luego de aproximadamente 15 min, se agregó cloruro de p-toluensulfonilo (2.75 g, 14.4 mmol) y la reacción se dejó calentar lentamente a temperatura ambiente. Luego de aproximadamente 16 h, la mezcla de reacción se vertió sobre hielo-agua fría (120 mi) y el precipitado se recogió mediante filtración al vacío. El sólido crudo se disolvió en DCM (15 mi) y purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con DCM para dar 2-bromo-5-tosil-5H-pirrolo[2, 3-b]pirazina (2.16 g, 52%): LC/EM (Tabla 1, Método c) R, = 1.58 min; EM m/z: 352, 354 (M + H) + .
Etapa C: 5-tos¡l-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-carboxilato de metilo Se burbujeó CO en una solución anaranjada de 2-bromo-5-tosil-5/-/-p¡rrolo[2,3-£>]pirazina (50.0 g, 142 mmol) en DMF (2.50 I) en un matraz de fondo redondo de 5 I por aproximadamente 2 min. Se agregó dicloruro de bis(trifenilfosfin)-paladio(l I) (9.96 g, 14.2 mmol), TEA (59 mi, 423 mmol) y MeOH (173.0 mi, 4259 mmol) y el matraz se equipó con un balón de CO. La mezcla se calentó a aproximadamente 95°C bajo una atmósfera de CO (1 atmósfera). Luego de agitar durante la noche, la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente durante la noche y vertió en agua helada (3.2 I). La mezcla se agitó por aproximadamente 10 min y el precipitado se recogió mediante filtración, lavando con agua, y secó por 1 h. El material crudo se disolvió en DCM, separó a partir de agua residual, secó sobre MgS04 anhidro, filtró, agregó gel de sílice, y concentró bajo presión reducida para preparar para la cromatografía. El material crudo se purificó mediante cromatografía de columna sobre gel de sílice eluyendo con 0-5% de MeOH en DCM para dar 5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-carboxilato de metilo con 5% de DCM mol como un excipiente (40.7 g, 86%, 93% de pureza): LC/EM (Tabla 1, Método a) R, = 2.35 min; EM m/z 332 (M + H) + .
Etapa D: ácido 5-Tosil-5H-pirrolo[2,3-b]piraz¡n-2-carboxílico Se agregó HCI (6 N acuoso, 714 mi) a una solución de color amarillo de 5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-carboxilato de metilo (17.8 g, 53.6 mmol) en 1,4-dioxano (715 mi) en un matraz de fondo redondo de 2 I, y la mezcla se calentó a aproximadamente 60°C por aproximadamente 16 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente. El solvente orgánico se eliminó bajo presión reducida y el precipitado se recogió, lavó con agua, y secó para dar ácido 5-Tosil-5H-pirrolo[2, 3-b]pirazin-2-carboxílico (14.4 g, 85%) como un sólido de color amarillo: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.63 min; EM m/z 316 (M-H)-.
Etapa E: 5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-ilcarbamato de tere-butilo En un matraz de fondo redondo de 500 mi, se agregó ácido 5-Tosil-5H-pirrolo[2,3-b]p¡razin-2-carboxílico (14.4 g, 45.3 mmol), DPPA (9.78 mi, 45.3 mmol) y TEA (13.9 mi, 100 mmol) en f-BuOH (200 mi) para dar una suspensión anaranjada. La mezcla se calentó a aproximadamente 70°C por aproximadamente 16 h, se enfrió a temperatura ambiente y el material insoluble se filtró. El solvente se eliminó bajo presión reducida y el material crudo se purificó mediante cromatografía de columna sobre gel de sílice eluyendo con EtOAc 25-60% en heptano a lo largo de 30 min para dar 5-tosil-5H-p¡rrolo[2,3-b]pirazin-2-ilcarbamato de tere-butilo (9.75 g, 54%) como un sólido blancuzco: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.79 min; EM m/z 389 (M + H) + .
Etapa F: 4-(etoxicarbonil)-2-(metoxicarbonil)-3-metilciclopenta-1 ,3-dienolato de sodio En un matraz de fondo redondo de 12 I, se agregó NaH (60% de dispersión en aceite mineral, 159 g, 3985 mmol) en porciones a THF anhidro en agitación (4004 mi) para dar una suspensión de color gris. La mezcla se enfrió a aproximadamente 5°C en un baño de hielo/sal antes de agregar acetoacetato de etilo (506 mi, 3985 mmol, Alfa Aesar) en THF anhidro (200 mi) por goteo por medio de un embudo de adición durante aproximadamente 1 h durante la cual la temperatura se incrementó gradualmente a aproximadamente 18°C. Luego de completarse la adición, la reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 1 h y luego se agregó una solución de 4-cloroacetoacetato de metilo (230 mi, 1993 mmol, Oakwood) en THF anhidro (200 mi) por goteo por medio de un embudo de adición durante aproximadamente 1 h. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 2 h y luego calentó a aproximadamente 50°C por aproximadamente 16 h. La mezcla de reacción se concentró in vacuo. El sólido anaranjado se enfrió a aproximadamente 5°C y agregó una mezcla de hielo/agua (2 I). La suspensión se mezcló haciendo girar el evaporador giratorio sin vacío por aproximadamente 30 min. El sólido se recogió mediante filtración y se lavó con hielo-agua fría (750 mi). Una vez que la mayor parte del solvente (aproximadamente 90%) se hubo eliminado, el sólido húmedo se trituró con MeCN (750 mi), agitó por aproximadamente 30 min y luego el sólido se recogió mediante filtración lavando con Et20 (2 x 500 mi). El sólido se secó en aire por aproximadamente 16h y luego in vacuo a aproximadamente 55°C para dar 4-(etoxicarbonil)-2-(metoxicarbonil)-3-metilciclopenta-1 ,3-dienolato de sodio (485 g, 98%): 1H RMN (D SO-d6) d 3.95 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.48 (s, 3H), 2.69 (q, J = 2.0 Hz, 2H), 2.47 (t, J = 2.1 Hz, 3H), 1.15 (t, J = 7.1 Hz, 3H).
Etapa G: 2-metil-4-oxociclopent-2-encarboxilato de etilo En un matraz de fondo redondo de 5 I, se calentó 4-(etoxicarbon¡l)-2-(metox¡carbon i l)-3-met¡l ciclo-pe nta-1 ,3-dienolato de sodio (485 g, 1954 mmol), KCI (204 g, 2736 mmol, JT Baker), y AcOH (392 mi, 6839 mmol, JT Baker) en tolueno (1200 mi) y agua (1200 mi) a reflujo por aproximadamente 6 h. La mezcla de reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente por aproximadamente 16 h. La mezcla de reacción luego se vertió en un recipiente de 12 I y diluyó con agua (3 I). Se agregó NaHC03 sólido (450 g, 5.3 mol) cuidadosamente por porciones con agitación durante aproximadamente 1 h. Luego de aproximadamente otros 30 min de agitación, la fase acuosa básica se separó y extrajo adicionalmente con Et20 (4 x 400 mi). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (4 x 500 mi) y salmuera (500 mi), secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida para dar un aceite de color amarillo que se purificó mediante destilación al vacío (92-94°C, 0.4 mmHg) para dar 2-metil-4-oxociclopent-2-encarboxilato de etilo (229 g, 69%) como un aceite de color amarillo: 1H RMN (CDCI3) d 6.04 - 6.01 (m, 1H), 4.26 - 4.17 (m, 2H), 3.67 (m, 1H), 2.72 (m, 1H), 2.62 (m, 1H), 2.16 (s, 3H), 1.32 - 1.27 (t, J=7.1 Hz, 3H).
Etapa H: 2-metil-4-oxociclopentancarboxilato de etilo En un matraz revestido de fondo redondo de 1 I, se agregó cloruro de cobre(l) (0.736 g, 7.43 mmol), (S)-(-)-2,2'-bis(difenilfosfino)-1 ,1 '-binaftilo (4.63 g, 7.43 mmol), y terc-butóxido de sodio (0.714 g, 7.43 mmol) en tolueno (250 mi) para dar una solución de color amarillo. La mezcla se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 15 min. luego de los cuales la solución se volvió marrón. La solución se enfrió a aproximadamente 5°C y agregó polimetilhidrosiloxano (14.86 mi, 223 mmol) y la solución agitó a aproximadamente 5°C por aproximadamente 40 min. La solución se enfrió a aproximadamente -15°C y agregó una solución de 2-metil-4-oxociclopent-2-encarboxilato de etilo (25.00 g, 149 mmol) y alcohol ferc-butílico (61.7 mi, 654 mmol) en tolueno (250 mi) en una porción. La reacción se agitó a -15°C por 144 h. La mezcla de reacción se detuvo mediante la adición de 1:1 etanol/toiueno (350 mi) y Celite® 545 (25 g). La mezcla se agitó y dejó calentar a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se concentró in vacuo, buscando la concentración deseada con heptano. Se agregó heptano (350 mi) al residuo y los sólidos se eliminaron mediante filtración. El material filtrado se concentró in vacuo y el producto crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice usando un gradiente de 10-50% de EtOAc en heptano sobre 7 volúmenes de columna para dar 2-metH-4-oxociclopentancarboxilato de etilo fmezcla no racémica de diastereómeros), predominantemente (1 S,2R)-2-metil-4-oxociclopentancarboxilato de etilo (11.2 g, 42% de rendimiento) como un sólido incoloro. H RMN (400 MHz, CDCI3) d 4.19 (qd, J = 7.1, 0.6, 2H), 3.17 (ddd, J = 8.1, 6.8, 5.6, 1H), 2.76 - 2.56 (m, 2H), 2.67 - 2.46 (m, 2H), 2.43 - 2.29 (m, 2H), 2.16 (ddd, J = 18.3, 7.8, 1.7, 1H), 1.29 (t, J = 7.2, 3H), 1.06 (d, J = 7.0, 3H).
Etapa I: 4-(dibencilamino)-2-met¡lciclopentancarboxilato de etilo Un matraz de fondo redondo se cargó con 2-metil-4-oxociclopentancarboxilato de etilo (10.0 g, 58.8 mmol) y DCE (180 mi). La solución se enfrió a aproximadamente 0°C y agregó AcOH (5.7 mi, 100 mmol) y dibencilamina (11.3 mi, 58.8 mmol) por goteo, para dar la formación de una suspensión espesa. La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 10°C y agregó triacetoxiborohidruro de sodio (21.2 g, 100 mmol) por porciones. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 20 h luego se vertió lentamente en NaHC03 acuoso saturado en agitación (300 mi) y agitó por aproximadamente 20 min. Las capas se separaron y la fase acuosa se extrajo con DCM (3 x 100 mi). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (2 x 100 mi), secaron sobre Na2S04 anhidro, y concentraron bajo presión reducida. El aceite de color amarillo crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-30% de EtOAc en heptano para dar 4-(dibencilamino)-2-metilc¡clopentancarboxilato de etilo (mezcla no racémica de diastereómeros), predominantemente 4-(dibenc¡lam¡no)-2-metilciclopentancarboxilato de (1 S,2R,4S)-etHo (15.5 g, 75%) como un aceite incoloro: 1H RMN (piridin- 5) d 7.53 (dd, J=0.9, 7.9 Hz, 4H), 7.43-7.35 (m, 4H), 7.33-7.25 (m, 2H), 4.22-4.06 (m, 2H), 3.79 (d, J=14.2 Hz, 2H), 3.70 (d, J=14.2 Hz, 2H), 3.34-3.22 (m, 1H), 2.76 (dd, J=7.9, 16.6 Hz, 1H), 2.25-2.13 (m, 1H), 2.09-1.94 (m, 2H), 1.88-1.79 (m, 1H), 1.52 (dd, J=10.5, 22.5 Hz, 1H), 1.16 (t, =7.1 Hz, 3H), 0.98 (d, J = 7.0 Hz, 3H).
Etapa J: ácido 4-(dibencilamino)-2-metilciclopentancarboxílico Se disolvió 4-(dibencilamino)-2-metilciclopentancarboxilato de etilo (3.65 g, 10.38 mmol) en una mezcla de HCI (6 N acuoso, 20 mi) y 1,4-dioxano (50 mi) y la mezcla resultante se calentó a aproximadamente 60°C por aproximadamente 72 h. El solvente orgánico se eliminó bajo presión reducida. La fase acuosa se neutralizó mediante la adición de NaHC03 acuoso saturado (40 mi) y extrajo con EtOAc (50 mi). La capa orgánica se lavó con salmuera (40 mi), secó sobre MgS04 anhidro y concentró bajo presión reducida para dar ácido 4-(dibencilam¡no)-2-metilciclopentancarboxílico (3.3 g, 98%) como un sólido amorfo de color blanco: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.66 min; EM m/z 324 (M + H) + .
Etapa K: 2-bromo-1 -(4-(dibencilam¡no)-2-metilciclopentil)etanona Se agregó cloruro de oxalilo (4.37 mi, 49.9 mmol) lentamente a una solución de ácido 4-(dibencilamino)-2-metilciclopentancarboxílico (7.34 g, 22.7 mmol) en DCM (100 mi), (nota: suave evolución de gas) seguido por una adición por goteo de DMF (0.26 mi, 3.41 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 14 h. El solvente se eliminó bajo presión reducida para dar un sólido amorfo de color beige, el cual se disolvió en THF y MeCN (1:1, 100 mi). La solución resultante se agregó a una solución de trimetilsilildiazometano (2 M en Et20, 39.7 mi, 79 mmol) en THF y MeCN (1:1, 100 mi) a aproximadamente 0°C. La mezcla resultante se agitó a aproximadamente 0°C por aproximadamente 3 h y luego detuvo mediante una adición por goteo de HBr (48% acuoso, 25 mi, 221 mmol). La mezcla resultante se neutralizó mediante una adición por goteo de NaHC03 -acuoso saturado (300 mi) y las capas se separaron. La capa orgánica se secó sobre MgS04 anhidro y concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con 5%-45% de EtOAc en heptano para dar 2-bromo-1 -(4-(dibencilaminó)-2-metilciclopentil)etanona (6.3 g, 69%) como un aceite de color amarillo: LC/EM (Tabla 1, Método a) R, = 2.90 min; EM m/z 400, 402 (M + H) + .
Etapa L: 2-(4-(dibencilamino)-2-metilciclopentil)-2-oxoetil(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)carbamato de ferc-butilo Una solución de 5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-ilcarbamato de tere-butilo (0.59 g, 1.519 mmol, Ejemplo No. 3 Etapa E) en DMF (5 mi) se agregó por goteo a una suspensión de NaH (60% de dispersión en aceite mineral, 0.058 g, 1.45 mmol) en DMF (5 mi), a aproximadamente 0°C. La mezcla resultante se agitó a aproximadamente 0°C por aproximadamente 30 min y luego agregó por goteo a una solución de 2-bromo-1 -(4-(d¡bencilamino)-2-met¡lc¡clopent¡l)etanona (0.73 g, 1.8 mmol) en DMF (10 mi) a aproximadamente 0°C. La mezcla resultante se agitó a aproximadamente 0°C por aproximadamente 1 h y el solvente se eliminó bajo presión reducida. El residuo se dividió entre NaHC03 acuoso saturado y EtOAc (100 mi de cada uno). La fase orgánica se separó, secó sobre MgS04 anhidro y concentró bajo presión reducida para dar 2-(4-(dibencilamino)-2-metilciclopentil)-2-oxoetil(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-¡l)carbamato de rere-butilo (1.04 g, 97%) como un sólido de color amarillo amorfo: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 3.30 min; EM m/z 708 (M + H) + .
Etapa M : 1 -(4-(dibencilamino)-2-metilciclopentil)-2-(5-tosil-5W-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-ilamino)etanona Se disolvió 2-(4-(dibencilamino)-2-metilciclopentil)-2-oxoetil(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)carbamato de f ere-butilo (6.19 g, 8.75 mmol) en HCI (4 N en 1,4-dioxano, 25 mi). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 2 h. El solvente se eliminó bajo presión reducida y el residuo se dividió entre NaHC03 acuoso saturado y EtOAc (100 mi de cada uno). La fase orgánica se lavó con salmuera (80 mi), secó sobre MgS04 anhidro y concentró bajo presión reducida para dar 1 -(4-(dibencilamino)-2-metilciclopentil)-2-(5-tos¡l-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-¡lamino)etanona (5.2 g, 98%) como un sólido de color marrón amorfo: LC/EM (Tabla 1, Método a) R, = 3.00 min; EM m/z 608 (M + H) + .
Etapa N: W, V-dibencil-3-metil-4-(3-tosil-3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-¡l)ciclopentanamina Una mezcla de 1 -(4-(dibencilamino)-2-metilciclopentil)-2-(5-tosil-5 --pirrolo[2,3-ib]pirazin-2-ilamino)etanona (5.32 g, 8.75 mmol) y reactivo de Lawesson (1.88 g, 4.64 mmol) se calentó a aproximadamente 60°C por aproximadamente 2 h. Se agregó más reactivo de Lawesson (1.88 g, 4.64 mmol). La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente 60°C por aproximadamente 1 h. El solvente se eliminó bajo presión reducida y el residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-8% de MeOH en DCM para dar N, N-dibencil-3-metil-4- (3-tosil-3H-im id azo[1 ,2-a] pirrólo [2, 3-e]pirazin-8-il)ciclopentanamina (4.47 g, 87%) como un sólido de color marrón amorfo: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.99 min; EM m/z 590 (M + H) + .
Etapa O: W,/V-dibencil-3-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)-4-metilciclopentanamina Se disolvió A/,A-Dibencil-3-metil-4-(3-tosil-3f/-imidazoÍ1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)ciclopentan-amina (4.47 g, 7.58 mmol) en 1,4-dioxano (40 mi). Se agregó NaOH (2 N acuoso, 4 mi) y la mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 90°C por aproximadamente 80 min. El solvente orgánico se eliminó bajo presión reducida y el residuo se trató con NH4CI acuoso saturado (70 mi) y se extrajo con DCM (2 x 60 mi). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (70 mi), secaron sobre MgS04 anhidro y concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-8% de MeOH en DCM para dar N,N-dibencil-3-(3H-imidazo[1, 2-a]pirrolo[2, 3-e]pirazin-8-il)-4- metilciclopentan-amina (1.84 g, 56%) como un aceite de color amarillo: LC/E (Tabla 1, Método a) Rt = 2.31 min; EM m/z 436 (M + H) + .
Etapa P: A,W-dibencil-3-metil-4-(3-((2-(trimet¡lsilil)etoxi)metil)-3H-imidazo[1 ,2-a] pirro lo[2,3-e]pirazi n-8-il)ci el opentan amina A la suspensión de hidruro de sodio (60% de dispersión en aceite mineral, 0.382 g, 9.55 mmol) en DMF (50 mi) se agregó una solución de /V,A/-dibencil-3-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2 ,3-e]pirazin-8-il)-4-metilciclopentanamina (3.96 g, 9.09 mmol) en DMF (50 mi) por goteo a aproximadamente 0°C. La solución resultante se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 10 min. Se agregó cloruro de SEM (1.774 mi, 10.0 mmol) por goteo y la solución se agitó por aproximadamente 1 h. El solvente se eliminó bajo presión reducida y el residuo se dividió entre agua y EtOAc (200 mi de cada uno). La capa orgánica se lavó con salmuera (100 mi), secó sobre MgS04 anhidro, filtró y concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía de columna sobre gel de sílice eluyendo con 10-80% de EtOAc en DCM para dar N,N-dibencil-3-metil-4-(3-((2- (trimet¡ls¡lil)etox¡)met¡l)-3H-imidazo[1 , 2-a]p¡rrolo[2, 3-e]pirazin-8-il)ciclopentanamina (3.1 g, 60% de rendimiento) como un sólido amorfo blancuzco. LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 3.32 min; EM m/z 566 (M + H) + .
Etapa Q: 3-Meti l-4-(3-((2-(trimeti Isil i l)etox¡)meti l)-3H-imidazo[1,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)ciclopentanamina A una solución de A/,A/-dibencil-3-metil-4-(3-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-3/--imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)ciclopentanamina (3.0 g, 5.30 mmol) en trifluoroetanol (200 mi) se agregó 20% de hidróxido de paladio sobre carbono húmedo (0.6 g, 4.27 mmol). La mezcla se agitó bajo 40 psi de hidrógeno a aproximadamente 50°C por aproximadamente 90 min. El catalizador se retiró mediante filtración a través de una almohadilla de Celite® y el material filtrado se concentró bajo presión reducida para dar 3-metil-4-(3-((2- (trimetilsilil)etoxi)metH)-3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2, 3-e]pirazin÷8-il)ciclopentanamina (2.0 g, 98% de rendimiento) como un sólido de color marrón amorfo. LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.86 min; EM m/z 386 (M + H) + .
Etapa R: W-3-metil-4-(3-((2-(trimetilsiMI)etoxi)metil)-3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-¡l)ciclopent¡l)-2-oxooxazolidin-3-sulfonam¡da A una solución de 3-metil-4-(3-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-3/--imidazo[1,2-a]pirrolo[2,3-e]p¡razin-8-il)ciclopentanamina (0.50 g, 1.3 mmol) y clorosulfonilcarbamato de 2-cloroetilo (0.288 g, 1.297 mmol, preparado como se detalla en Biorg. Med. Chem. Lett, 2006 16, 3367-3370) en DCM (16 mi) se agregó TEA (0.542 mi, 3.89 mmol) por goteo. La mezcla se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 2 h. El solvente se eliminó bajo presión reducida y el residuo se dividió entre agua y EtOAc (30 mi de cada uno). La capa orgánica se lavó con salmuera (20 mi), secó sobre MgS04 anhidro, filtró y concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice (0% de DCM por 5 min, luego a 6% de MeOH en DCM a lo largo de los siguientes 30 min) para dar N-3-metil-4-(3-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-3H-imidazo[1,2-a]pirrolo[2, 3-e]pirazin 8-il)ciclopentil)-2-oxooxazolidin-3-sulfonamida (0.24 g, 35% de rendimiento) como un sólido blancuzco. LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.42 min; EM m/z 535 (M + H) + .
Etapa S: 3,3-d ¡f I uoro-N-3-met¡ l-4-(3-(( 2- (trimetils¡lil)etoxi)metil)-3H-¡midazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)ciclopentil)azetidin-1 -sulfonamida A una solución de 3-metil-4-(3-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-3--imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)ciclopentil)-2-oxooxazolidin-3-sulfonamida (0.24 g, 0.449 mmol) en MeCN (1.5 mi) se agregó clorhidrato de 3,3-difluoroazetidina (0.07 g, 0.539 mmol, Matirx Scientific) y DIEA (0.196 mi, 1.122 mmol). La mezcla se calentó en el microondas a aproximadamente 120°C por aproximadamente 30 min. El solvente se eliminó bajo presión reducida y el residuo se dividió entre solución saturada de cloruro de amonio en agua y EtOAc (20 mi de cada uno). La capa orgánica se lavó con salmuera (10 mi), secó sobre MgS0 anhidro, filtró y concentró para dar 3,3-difluoro-N-3-metil-4-(3-((2-(trimetilsiHI)etoxi)metil)-3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2, 3-e]pirazin-8-il)ciclopentil)azetidin-1 -sulfonamida (0.2 g, 82% de rendimiento) como un sólido amorfo blancuzco. LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.61 min; EM m/z 541 (M + H) + .
Etapa T: ?/-((1 S,3S,4/?)-3-(3H-¡midazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]p¡razín-8-il)-4-metilciclopentil)-3,3-difluoroazetidin-1 -sulfonamida A una solución de 3,3-difluoro-/V-3-metil-4-(3-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-3H-imidazo[1,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)ciclopentil)azetidin-1 -sulfonamida (0.20 g, 0.370 mmol) en PCM (2.5 mi) se agregó TFA (0.9 mi) La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 2 h. Los solventes se eliminaron bajo presión reducida y el residuo se secó bajo alto vacío. El residuo se disolvió en 1,4-dioxano (3 mi) y 28% de solución de hidróxido de amonio en agua (2.5 mi) y la mezcla se calentó a aproximadamente 60°C por aproximadamente 2 h. Los solventes se eliminaron bajo presión reducida y el residuo se purificó mediante usando el Método General AA (Tabla 2, Método 32, Rt = 15.3 min, o = negativo) para dar N-((1 S,3S,4R)-3-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2, 3-e]pirazin-8-il)-4-metilciclopentil)-3, 3-difluoroazetidin-1 -sulfonamida (0.077 g, 51%) como un sólido de color amarillo. LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.75 min; EM m/z 411 (M + H) + .
Ejemplo No. 26*: oxalato de 5-((3S,5R)-5-etil-1 -(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)pirrolidin-3-ilamino)pirazin-2-carbonitrilo A una suspensión de hidróxido de paladio sobre carbono (20% mol, 0.082 g, 0.582 mmol) en EtOH (5 mi) se agregó una solución de 1 -((2 , 4S)-4-azido-2-etilpirrolidin-1 - \)-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazina (0.115 g, 0.388 mmol, preparado usando E a partir de (2R, 4S)-ferc-butil-4-azido-2-etilpirrolidin-1 -carboxilato (sintetizado como se describe en. J. Med. Chem. 1988, 31, 1598-1611) con HCI, J con Ejemplo No. 5, Etapa C, OO, D con NaOH) en EtOH (2 mi). La mezcla de reacción se burbujeó con hidrógeno y se mantuvo una atmósfera de hidrógeno mediante un balón. Luego de aproximadamente 2 h la mezcla de reacción se filtró y agregó 5-cloropirazin-2-carbonitrilo (0.013 g, 0.019 mmol, ArkPharm). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 70°C. Luego de aproximadamente 7 h la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y diluyó con agua (5 mi). El precipitado resultante se recogió mediante filtración para dar el producto como la base libre. El sólido se disolvió en EtOAc (5 mi) y agregó ácido oxálico hidratado (0.054 g, 0.43 mmol). Los sólidos se sonicaron brevemente con calentamiento suave. Luego de enfriar a temperatura ambiente, los sólidos se recogieron mediante filtración y secaron in vacuo para dar oxilato de 5-((3S,5R)-5-etil-1 -(6H-imidazo[1 ,5-a]p¡rrolo[2, 3-e]pirazin-1 -il)pirrolidin-3-ilamino)pirazin-2-carbonitrilo, (0.100 g, 56%) como un sólido de color tostado: LC/EM (Tabla 1, Método á) Rt = 1.80 min; EM m/z: 374 (M + H) + .
Ejemplo No. 27*: W-((3S,5R)-5-etil-1 -(6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-1 -il)pirrolidin-3-il)-3,3,3-trifluoropropan-1-sulfonamida A una suspensión de hidróxido de paladio sobre carbono (20% mol, 0.013 g, 0.019 mmol) en EtOH (5 mi) se agregó una solución de 1 -({2R, 4S)-4-azido-2-etilpirrolidin-1 -¡l)-6H-imidazo[1 ,5-a]pirrolo[2,3-e]pirazina (0.110 g, 0.371 mmol, preparado usando E a partir de {2R,4S)-terc-butil-4-azido-2-etilpirrolidin-1 -carboxilato (sintetizado como se describe en. J. Med. Chem. 1988, 31, 1598-1611) con HCI, J con Ejemplo No. 5, Etapa C, 00, D con NaOH) en EtOH (2 mi). La mezcla de reacción se burbujeó con hidrógeno y una atmósfera de hidrógeno se mantuvo mediante un balón. Luego de aproximadamente 2 h la mezcla de reacción se filtró y concentró bajo presión reducida El residuo se disolvió en DCM (5 mi) y agregó cloruro de 3,3,3-trifluoropropan-1 -sulfonilo (0.080 g, 0.41 mmol, Matrix). Luego de aproximadamente 15 h se agregó más cloruro de 3,3,3-trifluoropropan-1 -sulfonilo (80 mg, 0.408 mmol, Matrix). Luego de aproximadamente 2 días la mezcla de reacción se dividió entre EtOAc (10 mi) y salmuera (10 mi). La capa orgánica se separó, secó sobre Na2S04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida. El producto crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con EtOAc para dar N-((3S, 5R)-5-etil-1 -(6H-imidazo[1 , 5-a]p¡rrolo[2, 3-e]pirazin-1 -il)p¡rrolidin-3-il)-3,3, 3-trifluoropropan-1 -sulfonamida (0.025 g.16%) como un sólido de color marrón: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.81 min; EM m/z: 431 (M + H)\ Ejemplo No. 28: 1 -ciclohexil-2,3,4,7-tetrahidro-1 H-pirrolo[2,3- ,6]naftiridina Etapa A: 4-c loro -1-(triisopropilsil¡l)-1H-pir rolo [2,3- b]piridin-5-carboxilato de etilo A una solución de 4-cloro-1 -(triisopropilsilil)-l H-pirrolo[2,3-¿)]piridina (3.03 g, 9.81 mmol, Adesis) en THF (49 mi) a aproximadamente -78°C se agregó sec-BuLi (1.4 M en ciclohexano, 15.4 mi, 21.6 mmol) por goteo. La reacción se agitó a aproximadamente -78°C por aproximadamente 1 h antes de agregar cloroformiato de etilo (2.36 mi, 24.5 mmol) rápidamente. La mezcla de reacción se dejó calentar a temperatura ambiente y agitó por aproximadamente 40 min. La reacción se detuvo con NH4CI acuoso saturado (25 mi). Se agregó EtOAc (50 mi) y agua (50 mi) y las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 20 mi) y las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (2 x 20 mi). Los orgánicos se secaron sobre Na2S04 anhidro, filtraron, y concentraron hasta secar bajo presión reducida para dar un aceite de color amarillo. El aceite se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-10% de EtOAc en heptano para dar 4-cloró-1-(triisopropilsilil)-l H-pirrolo[2, 3-b]piridin-5-carboxilato de etilo (3.78 g, 98%) como un aceite de color amarillo: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 3.98 min; EM m/z: 381 (M + H) + .
Etapa B: 4-cloro-1 H-pirrolo[2,3-b]piridin-5-carboxilato de etilo A una solución de 4-cloro-1 -(t r iisop rop i Is i I ¡ I ) - 1 H-pirrolo[2,3-b]piridin-5-carboxilato de etilo (4.30 g, 11.3 mmol) en THF (57 mi) a aproximadamente 0°C se agregó TBAF (1.0 M en THF, 12.6 mi, 12.6 mmol) por goteo y la mezcla de reacción se agitó a aproximadamente 0°C por aproximadamente 1 h. La reacción se calentó a temperatura ambiente y agitó por aproximadamente 30 min. El solvente se eliminó bajo presión reducida y el aceite resultante se dividió entre EtOAc y salmuera (100 mi de cada uno). La capa orgánica se secó sobre Na2S04 anhidro, filtró y concentró bajo presión reducida. El residuo se trituró con DCM y filtró para dar 4-cloro-1 H-pirrolo[2,3-b]piridin-5-carboxilato de etilo (1.32 g, 52%) como un sólido blancuzco: LC/EM (Tabla 1, Método b) R, = 2.07 min; EM m/z: 225 (M + H)\ Etapa C: 4-cloro-1 -tosil-1 H-pirrolo[2,3-b]piridin-5-carboxilato de etilo solución de 4-cloro-1 H-pirrolo[2,3-b]piridin-5- carboxilato de etilo (1.32 g, 5.88 mmol) en DMF (39 mi) a aproximadamente 0°C se agregó hidruro de sodio (60% de dispersión en aceite mineral, 0.400 g, 10.00 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a esta temperatura por aproximadamente 15 min. Se agregó una solución de cloruro de 4-metilbencen-1 -sulfonilo (2.24 g, 11.8 mmol) en DMF (17 mi) por goteo y la mezcla de reacción se dejó calentar a temperatura ambiente por aproximadamente 2 h. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida y el residuo se dividió entre EtOAc y agua (25 mi de cada uno). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 25 mi) y las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida. El sólido se trituró con heptano, y los precipitados se filtraron para dar 4-cloro-1 -tosil-1 H-pirrolo[2, 3-b]pirid¡n-5-carboxilato de etilo (2.28 g, 102%, 90% de pureza) como un sólido de color blanco: LC/EM (Tabla 1, Método c) Rt = 1.64 min; EM m/z: 379 (M + H) + .
Etapa D: 4-(ciclohexilamino)-1 -tosil-1 H-pirrolo[2,3-b]pirid¡n-5-carboxilato de etilo A una solución de 4-cloro-1 -tosil-1 H-pirrolo[2,3-b]piridin-5- carboxilato de etilo (2.28 g, 5.42 mmol) en n-BuOH (21 mi) se agregó ciclohexanamina (1.24 mi, 10.8 mmol). La solución resultante se calentó a aproximadamente 110°C por aproximadamente 18 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y diluyó con agua y DCM (50 mi de cada uno). Las capas se separaron y la capa orgánica se secó sobre Na2S04 anhidro, filtró, y concentró hasta secar bajo presión reducida. El residuo se trituró con heptano y los precipitados se filtraron para dar 4-(cicJohexilam¡no)-1 -tosil-1 H-pirrolo[2, 3-b]piridin-5-carboxilato de etilo (1.74 g, 73%) como un sólido de color amarillo claro: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 3.18 min; EM m/z: 442 (M + H) + .
Etapa E: (4-(cic lohexi lamí no) -1 -tosil-1 H-pirrolo[2,3-fo]piridin-5-il)metanol A una solución de 4-(ciclohexilamino)-1 -tosil-1 H-pirrolo[2, 3-b]piridin-5-carboxilato de etilo (1.71 g, 3.88 mmol) en tolueno (43.1 mi) a aproximadamente -78°C se agregó DIBAL-H (1 M en hexanos, 6.60 mi, 6.60 mmol) por goteo. La reacción se agitó por aproximadamente 1 h a aproximadamente -78°C y la mezcla de reacción se calentó a temperatura ambiente y agitó por aproximadamente 1 h. La reacción se detuvo con tartrato de sodio y potasio acuoso saturado (15 mi) y la mezcla se agitó por aproximadamente 1 h. Se agregó EtOAc (25 mi) y las capas se separaron. La capa orgánica se secó sobre Na2S04 anhidro, filtró a través de una almohadilla de gel de sílice lavando con EtOAc (20 mi), y el material filtrado se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-50% de EtOAc en DCM para dar (4-(c¡clohex¡lamino)-1 -tos ¡1-1 H-pirrolo[2, 3-b]piridin-5-il) metano! (1.24 g, 80%) como un sólido blancuzco: LC/EM (Tabla 1, Método b) R, = 2.51 min; EM m/z: 400 (M + H) + .
Etapa F: 4-(ciclohexilamino)-1 -tos i 1-1 W-pirrolo[2,3-fa]piridin-5-carbaldehído Una mezcla de (4-(ciclohexilamino)-1 -tos i I - 1 H-pirrolo[2,3-b]piridin-5-il)metanol (1.12 g, 2.80 mmol) y dióxido de manganeso (5.48 g, 63.1 mmol) en cloroformo (70 mi) se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 18 h. La mezcla de reacción se diluyó con cloroformo (100 mi) y la mezcla de reacción se filtró a través de una almohadilla de Celite® lavando con cloroformo (50 mi). El material filtrado se concentró bajo presión reducida para dar 4-(ciclohexilamino)-1 -tos i 1-1 H-pirrolo[2, 3-b]pirÍdin-5-carbaldehído (0.975 g, 87%) como un sólido blancuzco: LC/EM (Tabla 1, Método c) R, = 1.70 min; EM m/z: 398 (M + H) + .
Etapa G: (E/Z)-5-(2-(1.3-dioxolan-2-il)vinil)-W-ciclohexil-1 -tosil-1 H-pirrolo[2,3-fo]piridin-4-am¡na Un matraz secado en horno bajo nitrógeno se cargó con bromuro de ((1.3-dioxolan-2-il)metil)trifenilfosfonio (2.23 g, 5.19 mmol) y THF (14 mi). El matraz se enfrió a aproximadamente 0°C en un baño de hielo y agregó rerc-butóxido de potasio (0.591 g, 5.00 mmol). La mezcla se agitó por aproximadamente 30 min a aproximadamente 0°C y agregó una solución de 4-(ciclohexilamino)-l -tos i 1-1 /-/-pirrolo[2,3-£>]pir¡din-5-carbaldeh¡do (0.750 g, 1.89 mmol) en THF (4 mi) por goteo durante aproximadamente 10 min. La reacción se dejó calentar a temperatura ambiente y agitó por aproximadamente 16 h. Se agregó agua (10 mi) y la mezcla de reacción se extrajo con Et20 (3 x 10 mi). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na2S04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida. El aceite crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo 0-50% de EtOAc en DCM para dar 5-(2-(1.3-dioxolan-2-il)vinil)-N-ciclohexil-1-tosil-1 H-pirrolo[2,3-b]p¡ridin-4-amina (0.590 g, 67%) como una mezcla de isómeros E y Z: LC/E (Tabla 1, Método c) Rt = 1.69 min, 1.73 min; EM m/z: 468 (M + H) + , 468 (M + H) + .
Etapa H: 5-(2-(1,3-dioxolan-2-il)etil)-A/-ciclohex¡l-1 -tos i 1-1 H-pirrolo[2,3-b]piridin-4-amina A una solución de (E/Z)-5-(2-(1.3-dioxolan-2-il)viníl)-/V-ciclohexil-1 -tosil-1 H-pirrolo[2,3-6]pirid'm-4-amina (0.512 g, 1.10 mmol) en EtOAc (19 mi) se agregó paladio sobre carbono (10% mol, 0.092 g, 0.086 mmol). La mezcla de reacción se purgó con hidrógeno y dejó bajo una atmósfera de hidrógeno usando un balón por aproximadamente 1.5 h. La mezcla de reacción se filtró a través de una almohadilla de Celite® lavando con EtOAc (10 mi) y el material filtrado se concentró bajo presión reducida para dar 5-(2-(1.3-dioxolan-2-¡l)etil)-N-ciclohexil-1-tosil-1 H-pirrolo[2,3-b]piridin-4-amina (0.499 g, 97%) como una espuma blanca blancuzca: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.84 min; EM m/z: 470 (M + H) + .
Etapa I: 1 -ciclohexil-7-tosil-2,3,4,7-tetrahidro-1 H-p ir rol o [2,3-/)]-[1 ,6]naftiridina A una solución de 5-(2-(1 ,3-dioxolan-2-il)etil)-A/-ciclohexil-1 -tosil-1 --pirrolo[2,3-£>]piridin-4-amina (0.209 g, 0.445 mmol) en EtOH (2 mi) se agregó HCI acuoso (12 N, 0.186 mi, 2.23 mmol) por goteo. La mezcla se calentó a aproximadamente 40°C por aproximadamente 2 h y luego enfrió a aproximadamente 0°C en un baño de hielo. Se agregó borohidruro de sodio (0.118 g, 3.12 mmol) por porciones y la mezcla se calentó a temperatura ambiente. Luego de aproximadamente 2 h el solvente se eliminó bajo presión reducida y el residuo se dividió entre EtOAc y NaHC03 acuoso saturado (10 mi de cada uno). La fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 5 mi) y los orgánicos combinados se lavaron con agua y salmuera (5 mi de cada uno), secaron sobre Na2S04 anhidro, filtraron y concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con 0-50% de EtOAc en heptano para dar 1 -ciclohex¡l-7-tosil-2,3,4, 7-tetrahidro-1 H-pirrolo[2, 3-h]-[1 , 6]naftir¡dina (0.138 g, 75%) como un sólido de color blanco: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 3.01 min; EM m/z: 410 (M + H) + .
Etapa J: 1 -ciclohexil-2,3,4,7-tetrahidro-1 H-pirrolo[2,3- 7][1 ,6]naftiridina A una solución de 1 -ciclohexil-7-tosil-2,3,4,7-tetrahidro-1 H-pirrolo[2,3- 7][1 ,6]naftiridina (0.132 g, 0.323 mmol) en 1,4-dioxano (2.2 mi) se agregó NaOH acuoso (2 N, 0.32 mi, 0.65 mmol). La reacción se calentó a aproximadamente 80°C por aproximadamente 96 h. Se agregó NaOH acuoso (5 N, 0.129 mi, 0.646 mmol) y la reacción se continuó a aproximadamente 80°C por aproximadamente 18 h. Se agregó NaOH acuoso (5 N, 0.065 mi, 0.323 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 100°C por aproximadamente 4 h. La reacción se enfrió a temperatura ambiente, agregó EtOAc y agua (5 mi de cada uno) y las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 5 mi) y los orgánicos combinados se lavaron con agua y salmuera (5 mi de cada uno), secaron sobre Na2S0 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-100% (95/4.5/0.5) DCM/MeOH/DEA en DCM para dar l-ciclohexil-2,3,4, 7-tetrahidro-1 H-pirrolo[2,3-h][1 ,6]naftir¡d¡na (0.052 g, 64%) como un sólido de color tostado: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 1.88 min; EM m/z: 256 (M + H) + .
Ejemplo No. 29: A/-(4-(3,6-dihidropirazolo[4,3-d]pirrolo[2,3-b]piridin-1-il)biciclo[2.2.2]octan-1-il)c¡clopropansulfonamida Etapa A: 4-(íerc-butoxicarbonilamino)biciclo[2.2.2]octan-1 carboxilato de metilo A una solución de ácido 4- (metoxicarbonil)biciclo[2.2.2]octan-1 -carboxílico (7.25 g, 34.2 mmol, Prime Organics) en tolueno (150 mi) se agregó DPPA (7.37 mi, 34.2 mmol) y TEA (4.76 mi, 34.2 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 1 h. La mezcla de reacción luego se calentó a aproximadamente 110°C por aproximadamente 1 h y agregó íe*c-butanol (16.1 mi, 171 mmol) y la reacción se calentó a aproximadamente 110°C por aproximadamente 14 . La reacción se enfrió a temperatura ambiente y lavó con NaHC03 acuoso saturado (2 x 50 mi) y salmuera (50 mi). Los orgánicos se secaron sobre Na2S04 anhidro, filtraron y concentraron bajo presión reducida. El material crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-10% de MeOH en DCM para dar 4-(terc-butoxicarbonilamino)biciclo[2.2.2]octan-1 -carboxilato de metilo (4.18 g, 43%) como un sólido de color blanco: 1H RMN (400 MHz, CDCI3) d 4.32 (s, 1H), 3.63 (s, 3H), 1.95 - 1.76 (m, 12H), 1.42 (s, 9H).
Etapa B: 4-(benc¡l(íerc-butoxicarbonil)amino)biciclo[2.2.2]octan-1 -carboxilato de metilo A una solución de 4-(terc-butoxicarbonilamino)biciclo[2.2.2]octan-1 -carboxilato de metilo (2.50 g, 8.82 mmol) en DMF (42 mi) a aproximadamente 0°C se agregó hidruro de sodio (60% de dispersión en aceite mineral, 0.706 g, 17.6 mmol). La mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 30 min a aproximadamente 0°C y agregó TBAI (0.652 g, 1.76 mmol) y bromuro de bencilo (2.10 mi, 17.7 mmol). La reacción se calentó a temperatura ambiente y continuó agitando por aproximadamente 5 h. El solvente se eliminó bajo presión reducida y el residuo se recogió en DCM (50 mi) y agua (30 mi). Las capas se separaron y la fase orgánica se lavó con salmuera (30 mi), secó sobre MgS04 anhidro, filtró y concentró bajo presión reducida. El aceite resultante se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-30% de EtOAc en heptano para dar 4-(bencil(terc-butoxicarbonil)amino)biciclo[2.2.2]octan-1 -carboxilato de metilo (2.71 g, 82%) como un aceite incoloro traslúcido: LC/E (Tabla 1, Método b) R, = 3.09 min; EM m/z: 374 (M + H) + .
Etapa C: bencil(4-(hidroximetil)biciclo[2.2.2]octan-1 -il)carbamato de íerc-butilo A una solución de 4-(bencil(íerc-bu toxica rbon i l)a m i no) b i ciclo [2.2.2]octan-1 -carboxilato de metilo (2.70 g, 7.23 mmol) en THF (24 ml) a aproximadamente 0°C se agregó borohidruro de litio (0.350 g, 14.46 mmol). La mezcla de reacción se calentó a temperatura ambiente y agitó por aproximadamente 16 h. La reacción se enfrió a aproximadamente 0°C y agregó agua (15 ml) cuidadosamente. La mezcla de reacción se calentó a temperatura ambiente y diluyó con EtOAc (20 ml). Las capas se separaron y la capa orgánica se lavó con salmuera (2 x 20 ml), secó sobre Na2S04 anhidro, filtró y concentró bajo presión reducida para dar bencil(4-(hidroximetil)biciclo[2.2.2]octan-1 -il)carbamato de tere-butilo (2.31 g, 92%) como una espuma pegajosa blancuzca: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.67 min; EM m/z: 346 (M + H) + .
Etapa D: bencil(4-formilbiciclo[2.2.2]octan-1 -il)carbamato de íerc-butilo A una solución de bencil(4-(hidroximetil)biciclo[2.2.2]octan-1 -il)carbamato de ferc-butilo (2.30 g, 6.66 mmol) en DCM (17 mi) se agregó peryodinano de Dess-Martin (4.24 g, 9.99 mmol). Luego de aproximadamente 4 h, la mezcla de reacción se diluyó con DCM (20 mi) y lavó con NaHC03 acuoso saturado (2 x 30 mi), salmuera (30 mi), secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida. El aceite resultante se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-40% de EtOAc en heptano para dar benc¡l(4-formilbic¡clo[2.2.2]octan-1 -il)carbamato de tere-butilo (1.10 g, 48%) como un aceite incoloro traslúcido: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.97 min; EM m/z: 344 (M + H) + .
Etapa E: bencil(4-((5-cloro-1 -(triisopropilsilil)-l H-pirro|o[2,3-£>]piridin-4-il)(hidroxi)metil)biciclo[2.2.2]octan-1 -il)carbamato de ferc-butilo A una solución de 5-cloro-4-yodo-1 -(triisopropilsilil)-l H-pirrolo[2,3-¿)]piridina (1.33 g, 3.06 mmol, Adesis) en THF (25 mi) a aproximadamente -78°C se agregó n-BuLi (1.6 M solución en hexanos, 2.00 mi, 3.20 mmol) a una velocidad tal qué la, temperatura interna no excediera aproximadamente -70°C. La mezcla de reacción se agitó por aproximadamente 45 mjn y agregó una solución de bencil(4-formilbiciclo[2.2.2]octan-1 -il)carbamato de ferc-butilo (1.05 g, 3.06 mmol) en THF (6 mi) por goteo. La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente -78°C por aproximadamente 1 h y calentó lentamente a temperatura ambiente y agitó por aproximadamente 1 h. Se agregó NH4CI acuoso saturado y EtOAc (10 mi de cada uno) y las capas se separaron. La fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 mi) y los orgánicos combinados se lavaron con salmuera (10 mi), secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida. El aceite restante se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-40% de EtOAc en heptano para dar bencil(4-((5-cloro-1 -(triisopropilsilil)-l H-pirrolo[2, 3-b]piridin-4-il)(hidroxi)metil)biciclo[2.2.2]octan-1 -il)carbamato de tere-butilo (1.27 g, 64%) como un aceite incoloro traslúcido: LC/EM (Tabla 1, Método o) Rt = 3.78 min; EM m/z: 652 (M + H) + .
Etapa F: bencil(4-(5-cloro-1-(triisopropilsilil)-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-4-carbonil)biciclo[2.2.2]octan-1-il)carbamato de ferc-butilo A una solución de bencil(4-((5-cloro-1 -(triisopropilsilil)-l H-pirrolo[2,3-/5]piridin-4-il)(hidroxi)metil)biciclo[2.2.2]octan-1 -il)carbamato de ferc-butilo (1.26 g, 1.93 mmol) en DCM (10 mi) se agregó peryodinano de Dess-Martin (1.64 g, 3.86 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 3 h y diluyó con DCM (10 mi). La mezcla se lavó con NaHC03 acuoso saturado (2 x 15 mi), salmuera (15 mi), secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida. El aceite resultante se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de EtOAc 0-25% en heptano para dar bencil(4-(5-cloro-1-(tr¡¡sopropilsiHI)-1 H-pirrolo[2, 3-b]piridin-4-carbonil)-biciclo[2.2.2]octan-1-il)carbamato de tere-butilo (0.965 g, 77%) como un aceite de color amarillo: 1H RMN (400 MHz, CDCI3) d 8.15 (s, 1H), 7.32 - 7.24 (m, 3H), 7.23 - 7.08 (m, 3H), 6.23 (d, J = 3.5, 1H), 4.53 (s, 2H), 2.13 - 2.03 (m, 6H), 1.95 - 1.83 (m, 6H), 1.81 - 1.74 (m, 3H), 1.41 (s, 9H), 1.12 - 1.06 (m, 18H), Etapa G: bencil(4-((5-cloro-1 H-p¡rrolo[2,3-b]piridin-4-il)-(hidrazono)-metil)biciclo[2.2.2]octan-1 -il)carbamato de íerc-butilo A una solución de bencil(4-((5-cloro-1 H-p i r ro I o[2 , 3-¿>] pir id i n -4-¡l)(hidrazono)metil)biciclo[2.2.2]octan-1 - il)carbamato de f ere-butilo (0.765 g, 1.18 mmol) en EtOH (4 mi) se agregaron hidracina (1.85 mi, 58.8 mmol) y AcOH (0.337 mi, 5.88 mmol). La mezcla se calentó a aproximadamente 80°C por aproximadamente 6 días. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y el solvente se eliminó bajo presión reducida. EtOAc y agua (5 mi de cada uno) se agregó y las capas se separaron. La capa orgánica se lavó con salmuera (5 mi), secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida. El aceite se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-10% de MeOH en DCM para dar bencil(4-((5-cloro-1 H-pirrolo[2,3-b]pirid¡n-4-)(h¡d razono) metil)biciclo[2.2.2]octan-1 -il)carbamato de ferc-butilo (0.631 g, 84%, 95% de pureza) como un sólido blancuzco: LC/E (Tabla 1, Método b) Rt = 2.72 min, EM m/z: 508 (M + H) + .
Etapa H: bencil(4-(3,6-dihidropirazolo[4,3-cr]pirrolo[2,3-b]piridin-1-il)biciclo[2.2.2]octan-1-il)carbamato de ferc-butilo Un frasco de reacción de microondas se cargó con bencil(4-((5-cloro-1 H-pirrolo[2,3-b]piridin-4- )(hidrazono)metil)biciclo[2.2.2]octan-1-il)carbamato de ferc-bütilo (0.700 g, 1.38 mmol) y NMP (11 mi). Se agregó rerc-butóxidó de sodio (0.331 g, 3.44 mmol), acetato de paladio (0.031 g, 0.14 mmol) y (R)-1 -[(S)-2-(diciclohexilfosfino)ferrocenil]etil-di-ferc-butilfosfina (0.076 g, 0.14 mmol) cada uno en forma secuencial en una porción a la solución. La mezcla de reacción se calentó en un microondas Biotage a aproximadamente 150°C por aproximadamente 2 h (250 psi de presión máxima, gradiente de 1 min, 150 vatios máximos). La mezcla de reacción se filtró a través de una almohadilla de Celite® lavando con EtOAc (15 mi), y el material filtrado se concentró bajo presión reducida. El material restante se transfirió a un frasco de microondas y rerc-butóxido de sodio (0.331 g, 3.44 mmol), acetato de paladio (0.031 g, 0.138 mmol) y (RJ-1 - [(S)-2-(d ¡ciclo h exilio sfino)ferro ce n i l]-et i l-di-f ere -butilfosfina (0.076 g, 0.138 mmol) se agregaron. La mezcla de reacción se calentó en un microondas Biotage a aproximadamente 160°C por aproximadamente 2 h (250 psi de presión máxima, gradiente de 1 min, 150 vatios máximos). La mezcla de reacción se filtró a través de una almohadilla de Celite® lavando con EtOAc (20 mi). Se agregó agua (15 mi) y las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 mi) y las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua (3 x 10 mi) y salmuera (5 x 15 mi), secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida. El residuo oscuro se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 10-100% de EtOAc en heptano para dar bencil(4-(3, 6-dihidropirazolo[4, 3-d]pirrolo[2, 3-b]piridin~1 -il)biciclo[2.2.2]octan-1 -il)carbamato de tere-butilo (0.281 g, 40%) como un sólido de color marrón claro: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.57 min; EM m/z: 472 (M + H) + .
Etapa I: /V-bencil-4-(3,6-d¡hdropirazolo[4,3-d]pirrol[2,3-b]piridin-1 -il)biciclo[2.2.2]octan- -clorhidrato de amina A una solución de bencil(4-(3,6-dihidropirazolo[4,3-d]pirrolo[2,3-b]piridin-1 - il)biciclo[2.2.2]octan-1 -il)carbamato de rere-butilo (0.280 g, 0.543 mmol) en 1,4-dioxano (4 mi) se agregó HCI acuoso (4 M en 1,4-dioxano, 0.58 mi, 2.3 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a aproximadamente 60°C por aproximadamente 2 h. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y los precipitados se filtraron lavando con una cantidad mínima de Et20. El sólido se secó bajo vacío para dar N-bencil-4-(3, 6-dihdropirazolo[4,3-d]pirrol[2,3-b]pirid¡n-1-il)biciclo[2.2.2]octan-1 -clorhidrato de amina (0.216 g, 98%) como un sólido de color tostado: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 1.46 min; EM m/z: 372 (M + H)+.
Etapa J: 4-(3,6-dihidropirazolo[4,3-d]pirrolo[2,3-£>]piridin-1 -il)biciclo[2.2.2]octan-1 -amina A una solución de A/-bencil-4-(3,6-dihidropirazolo[4,3-cf]pirrolo[2,3-£»]piridin-1-il)biciclo[2.2.2]octan-1 -clorhidrato de amina (0.150 g, 0.368 mmol) en MeOH (6 mi) se agregó formiato de amonio (0.116 g, 1.84 mmol) y 20% de PdOH2 sobre carbono (0.039 g, 0.055 mmol). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 65°C por aproximadamente 2 h. La mezcla de reacción se filtró a través de una almohadilla de Celite® lavando con EtOAc (aproximadamente 10 mi) y el solvente se eliminó bajo presión reducida. Se agregó agua y EtOAc (10 mi de cada uno) y las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (5 x 5 mi) y los orgánicos combinados se secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida para dar 4-(3, 6-dihidropirazolo[4,3-d]pirrolo[2,3-b]piridin-1 -il)biciclo[2.2.2]octan-1 -amina (0.073 g, 71%) como una espuma blancuzca: LC/EM (Tabla 1, Método b) R, = 1.08 min; EM m/z: 282 ( +H)\ Etapa K: W-(4-(3,6-dihidropirazolo[4,3-d]pirrolo[2,3-b]piridin-1 -il)bicíclo[2.2.2]octan-1-il)ciclopropansulfonamida A una mezcla de 4-(3,6-dihidropirazolo[4,3-d]pirrolo[2,3-£>]piridin-1 -il)biciclo[2.2.2]octan-1 -amina (0.075 g, 0.267 mmol) en DMF (2.5 mi) se agregó TEA (0.06 mi, 0.40 mmol) y cloruro de ciclopropansulfonilo (0.027 mi, 0.27 mmol, Matrix). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 16 h. Se agregó cloruro de ciclopropansulfonilo (0.014 mi, 0.133 mmol, Matrix) a la mezcla de reacción y la reacción se continuó agitando a temperatura ambiente por aproximadamente 4 h. La mezcla de reacción se diluyó con agua (10 mi) y extrajo con DCM (3 x 10 mi). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (10 mi), secaron sobre Na2S04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-10% de MeOH en DCM para dar N-(4-(3,6-dihidropirazolo[4, 3-d]pirrolo[2,3-b]piridin-1 -il)b¡ciclo[2.2.2]octan-1 -il)c¡clopropansulfonamida (0.015 g, 15%) como un sólido de color blanco: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 1.72 min; EM m/z: 386 (M + H)\ Ejemplo No. 30 y 31: 1 -((1 S,2S,4R)-2-etil-4-(4-me toxibencilox i)ciclopentil)-3.6 -dihidropi razólo [4,3-cf]pirrolo[2,3-fo]piridina y 1 -((1 R,2/?,4S)-2-etil-4-(4-metoxibenciloxi)ciclopentil)-3,6-d¡hidropirazolo[4,3-d]pirrolo[2,3-£)]piridina Etapa A: 2-etil-4-(4-metoxibenciloxi)ciclopentancarboxilato de ferc-butilo A una solución de 2-etil-4-(4-metoxibenciloxi)ciclopentancarboxilato de etilo (39.8 g, 130 mmol, Preparación No. EE.1 predominantemente 1 S, 2R, 4S y 1ft, 2S, 4R) en EtOH (286 mi) se agregó NaOH acuoso (2 N, 572 mi, 1140 mmol). La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente 50°C por aproximadamente 16 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y el solvente orgánico se eliminó bajo presión reducida. La capa acuosa se lavó con Et20 (2 x 300 mi), enfrió a aproximadamente 0°C en un baño de hielo y acidificó a aproximadamente pH 1 con HCI acuoso (5 N). La suspensión acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 400 mi). Los orgánicos combinados se lavaron con salmuera (200 mi), secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron para dar 34.5 g de sólido crudo. A una solución del crudo ácido carboxílico (15.0 g, 53.9 mmol) en D F (216 mi) se agregó yodometano (6.71 mi, 108 mmol) y K2C03 (14.9 g, 108 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 48 h. Se agregó agua y EtOAc (250 mi de cada uno) y las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 250 mi) y los orgánicos combinados se lavaron con agua (250 mi), salmuera (3 x 250 mi), secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida. El aceite se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-50% de EtOAc en heptano para dar el éster metílico (14.1 g, 48.1 mmol) como un aceite de color amarillo. A una solución de éster metílico (14.1 g, 48.1 mmol) en THF (160 mi) se agregó terc-butóxido de potasio (16.2 g, 144 mmol) y la mezcla de reaccióh se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 18 h. Se agregó NH4CI acuoso saturado (100 mi) y la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (100 mi). Las capas se separaron y los orgánicos se lavaron con salmuera (50 mi), secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron y concentraron bajo presión reducida. El aceite restante se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-40% de EtOAc en heptano para dar 2-etil-4-(4-metoxibenciloxi)ciclopentancarboxilato de tere-butilo (11.7 g, 73%, predominantemente 1 R, 2R, 4S y 1 S, 2S, 4R) como un aceite incoloro traslúcido: LC/EM (Tabla 1, Método c) Rt = 1.95 min; EM m/z: 335 (M + H) + .
Etapa B: 2-et¡l-4-(4-metoxibencilox¡)ciclopentil)metanol A una solución de 2-etil-4-(4-metoxibenciloxi)ciclopentancarboxilato de tere-butilo (11.7 g, 35.0 mmol) en THF (175 mi) a aproximadamente 0°C se agregó LAH (2 M en THF, 17.5 mi, 35.0 mmol) por goteo y la mezcla de reacción se calentó lentamente a temperatura ambiente y agitó por aproximadamente 1.5 h. La reacción se enfrió a aproximadamente 0°C en un baño de hielo y detuvo mediante una adición consecutiva de agua (150 mi por goteo), NaOH acuoso (1 N, 150 mi) y agua (100 mi). La mezcla resultante se calentó a temperatura ambiente y agitó por aproximadamente 30 min. La mezcla se filtró a través de una almohadilla de Celite® lavando con Et20 (500 mi). Las capas del material filtrado se separaron. La capa orgánica se lavó con salmuera (2 x 200 mi), secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida para dar 2-etil-4-(4-metox¡benciloxi)ciclopentil)metanol (8.62 g, 93%) como un aceite de color amarillo: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.29 min; EM m/z: 265 (M + H) + ÷ Etapa C: 2-etil-4-(4-metoxibenciloxi)ciclopentancarbaldehído A una solución de 2-etil-4-(4-metoxibenciloxi)ciclopentil)metanol (8.60 g, 32.5 mmol) en DCM (163 mi) se agregó peryodinano de Dess-Martin (20.7 g, 48.8 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 2.5 h. La mezcla de reacción se diluyó con DCM (100 mi), lavó con NaHC03 acuoso saturado (2 x 150 mi) y salmuera (150 mi), secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida. El aceite resultante se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-50% de EtOAc en heptano para dar .2-etil-4-(4-metoxibenciloxi)ciclopentancarbaldehído (6.93 g, 81%) como un aceite de color amarillo: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.59 min; EM m/z: 263 (M + H)+.
Etapa D: (5-cloro-1 -(triisopropilsilil)-l H-p¡rrolo[2,3-fo]piridin-4-il)-2-etil-4-(4-metoxibenciloxi)ciclopentil)metanol A una solución de 5-cloro-4-yodo-1 -(triisopropilsilil)-l H-pirrolo[2,3-¿)]piridina (4.99 g, 11.5 mmol, Adesis) en THF (90 mi) a aproximadamente -78°C se agregó n-BuLi (1.6 M solución en hexanos, 10.7 mi, 17.2 mmol) a una velocidad tal qué la temperatura interna no excediera aproximadamente -70°C. Luego de agitar por aproximadamente 45 min a aproximadamente -78°C una solución de 2-etil-4-(4-metoxibenciloxi)ciclopentancarbaldehído (3.00 g, 11.4 mmol) en THF (22 mi) se agregó por goteo y la mezcla de reacción se agitó a aproximadamente -78°C por aproximadamente 1 h. La reacción se calentó lentamente a temperatura ambiente y agitó por aproximadamente 0.5 h. La mezcla de reacción se enfrió a aproximadamente -78°C, NH CI acuoso saturado (40 mi) se agregó, y la mezcla se calentó a temperatura ambiente. Se agregó agua (10 mi) y las capas se separaron. La fase acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 50 mi). Los orgánicos combinados se lavaron con salmuera (50 mi), secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron y concentraron bajo presión reducida. El aceite crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-40% de EtOAc en heptano para dar (5-cloro-1-(triisopropilsilil)-1 H-pirrolo[2,3-b]pir¡d¡n-4-il)-2-etil-4-(4-metoxibenciloxi)ciclopentil)metanol (4.47 g, 68%, 92% de pureza) como un aceite de color amarillo: LC/EM (Tabla 1, Método o) R, = 2.64 min; EM m/z: 571 (M + H) + .
Etapa E: (5-cloro-1 -(triisopropilsilil)-l W-pirrolo[2,3-b]pirid¡n-4-¡l)-2-etil-4-(4-metoxibenciloxi)ciclopentil)metanona A una solución de (5-cloro-1 -(tri¡sopropils¡lil)-1 H-pirrolo[2,3-b]piridin-4-il)-2-et¡l-4-(4-metox¡benciloxi)ciclopentil)metanona (4.47 g, 7.20 mmol) en DCM (40 mi) se agregó peryodinano de Dess-Martin (4.58 g, 10.8 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente por aproximadamente 90 min. La reacción se diluyó con DCM (40 mi), lavó con NaHC03 acuoso saturado (2 x 60 mi), salmuera (40 mi), secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida. El material crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-40% de EtOAc en heptano para dar (5-cloro-1 -(triisopropilsilil)-l H-pirrolo[2, 3-b]pirid¡n-4-H)-2-etil-4-(4-metoxibenciloxi)-c¡clopentil)metanona (3.32 g, 81%) como un aceite de color amarillo: LC/EM (Tabla 1, Método o) Rt = 3.04 min; EM m/z: 569 (M + H)+.
Etapa F: 5-cloro-4-2-etil-4-(4-metoxibenciloxi)cic!opentil)-(hidrazono)metil)-1 H-pirrolo[2,3-b]piridina A una solución de (5-cloro-1 -(triisopropilsilil)-l H-p¡rrolo[2,3-6]piridin-4-il)-2-etil-4-(4-metoxibenciloxi)ciclopentil)metanona (1.01 g, 1.77 mmol) en EtOH (5.5 mi) se agregaron hidracina (2.78 mi, 89.0 mmol) y AcOH (0.508 mi, 8.87 mmol). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 80°C por aproximadamente 18 h. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y el solvente se eliminó bajo presión reducida. Se agregó agua (20 mi) y EtOAc (25 mi) y las capas se separaron. La capa orgánica se lavó con NaHC03 acuoso saturado y salmuera (15 mi de cada uno), secó sobre MgS04 anhidro, filtró y concentró bajo presión reducida. El aceite crudo se purificó cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-10% de MeOH en DCM para dar 5-cloro-4-((2-etil-4-(4-metoxibenciloxi)ciclopentil)-(hidrazono)metil)-1 H-p¡rrolo[2, 3-bjpiridina (0.354 g, 47%) como una espuma de color amarillo: LC/EM (Tabla 1, Método b) R, = 2.40 min, EM m/z: 427 (M + H) + . Etapa G: 1 -((1 S,2S,4/?)-2-et¡l-4-(4-metoxibenciloxi)ciclopentil)-3,6-dihidropirazolo[4,3-d]pirrolo[2,3-b]piridina y 1 -((1 R,2R,4S)-2-etil-4-(4-metoxibenciloxi)ciclopentil)-3,6-dihidropirazolo[4,3-d]pirrolo[2,3-b]piridina Un frasco de reacción de microondas se cargó con 5-cloro-4-((2-etil-4-(4-metoxibencilox¡)ciclopentil)(hidrazono)metil)-1H- pirrolo[2,3-6]piridina (0.900 g, 2.11 mmol) y NMP (14.1 mi). Se agregó ferc-butóxido de sodio (0.506 g, 5.27 mmol), acetato de paladio(ll) (0.047 g, 0.211 mmol) y ((f?J-1 -[(S)-2-(dic¡clohexilfosfino)ferrocenil]etil-d¡-ferc-butilfosfina (0.117 g, 0.211 mmol) en forma secuencial y la mezcla se calentó en un microondas a aproximadamente 150°C por aproximadamente 1 h (250 psi de presión máxima, gradiente de 1 min, 150 vatios máximos). Se agregó EtOAc (20 mi) y la mezcla se filtró a través de una almohadilla de Celite® lavando con EtOAc (20 mi). Se agregó agua (15 mi) y las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 mi), los orgánicos combinados se lavaron con agua (3 x 10 mi), salmuera (5 x 10 mi), secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron y concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 40-100% de EtOAc en heptano seguido por purificación usando el Método General AA para dar 1-((1S, 2S.4R)-2-etil-4-(4-metoxibenciloxi)ciclopentil)-3.6-dihidropirazolo[4, 3-d]pirrolo[2, 3-b]piridina o 1-((1 R.2R,4S)-2-etil-4-(4-metoxibenciloxi)ciclopentil)-3.6-dihidropirazolo[4, 3-d]pirrolo[2,3-b]piridina (0.065 g, 8%, Tabla 2, Método 35, Rt = 20.0 min, o = positivo) y 1 -((1 S,2S.4R)-2-etil-4-(4-metoxibenciloxi)ciclopentil)-3.6-dihidropirazolo[4, 3-d]pirrolo[2, 3-bjpiridina o 1-((1 R.2R, 4S)-2-etil-4-(4-metoxibenciloxi)ciclopeñtil)-3.6-dihidropirazolo[4,3-d]pirrolo[2,3-b]pir¡dina (0.058 g, 7%, Tabla 2, Método 35, Rt = 23.4 min, o = negativo): LC/EM (Tabla 1, Método b) R, = 2.26 min; EM m/z: 391 (M + H) + .
Ejemplo No. 32: Ejemplo No. 32: A/-ciano-A/-((1 S,3R,4S)-Z-et\\- 4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]piraz¡n-1-il)ciclopentil)c¡clopropansulfonamida A la solución de ?/-((1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentil)ciclopropansulfonamida (0.05 g, 0.134 mmol, WO2009152133) en DMF (4 mi), se agregó KOH (0.022 g, 0.401 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante aproximadamente 5 min. Se agregó cianuro de tosilo (0.024 g, 0.134 mmol) y la agitación se continuó durante aproximadamente 2 h. El solvente se eliminó bajo presión reducida y el residuo se purificó mediante HPLC preparativa (Tabla 1, Método q) para dar N-ciano-N-((1 S,3R,4S)-3-et¡l-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2, 4]tr¡azolo[4, 3-a]pirazin-1 - H)ciclopentil)c¡clopropansulfonam¡da (0.0025 g, 5%) como un sólido blancuzco: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.84 min; EM m/z: 400 (M + H)+.
Ejemplo No. 33*: ?/-((1 S,3R, S)-3-etil-4-(2,3,4,7-tetrahidro÷1 H-p¡rrolo[2,3-i][1 ,6]naftiridin-1 -il)ciclopentil)ciclopropansulfonamida Etapa A: 4-cloro-1 -tos i 1-1 H-pirrolo[2,3-b]piridin-5-carbaldehído A una suspensión de 4-cloro-1 /-/-pirrolo[2,3-b]piridm-5-carbaldehído (2.00 g, 11.1 mmol, Adesis) en DMF (30 mi) se agregó NaH (60% de dispersión en aceite mineral, 0.500 g, 12.5 mmol) formando una solución de color amarillo. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante aproximadamente, 30 min luego se agregó cloruro de 4-metilbencen-1 -sulfonilo (2.40 g, 12.6 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante aproximadamente 30 min y vertió en agua helada (aproximadamente 50 mi). El sólido se recogió mediante filtrado al vacío, lavando con agua (aproximadamente 15 mi), y secó en un horno de vacío para dar 4-cloro-1 -tosil-1 H-pirrolo[2,3-b]piridin-5-carbaldehído (3.22 g, 87%) como un sólido blancuzco: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.56 min; EM m/z: 335 (M + H) + .
Etapa B: (E/Z -5-(2-(1.3-dioxolan-2-i l)vi ni l)-4-cloro-1 -tosil-1 H-pirrolo[2,3-b]piridina Un matraz de fondo redondo se cargó con bromuro de ((1,.3-dioxolan-2-il)metil)tr¡fenilfosfonio (5.29 g, 12.3 mmol) y THF (29.0 mi). El matraz se enfrió a aproximadamente 0°C en un baño de hielo y agregó rerc-butóxido de potasio (1.38 g, 12.3 mmol). La mezcla se agitó durante aproximadamente 30 min a aproximadamente 0°C y agregó por goteo una suspensión de 4-cloro-1 -tosil-1 H-pirrolo[2,3- ]piridin-5-carbaldehído (1.50 g, 4.48 mmol) en THF (8.30 mi). La reacción se calentó a temperatura ambiente y agitó durante aproximadamente 16 h. Se agregó hidróxido de sodio acuoso (2 M, 4.50 mi, 9.00 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 55°C durante aproximadamente 1 h. Se agregaron agua y éter (10 mi de cada uno) y las capas se separaron. La fase acuosa se extrajo con éter (3 x 10 mi), los orgánicos combinados se secaron sobre Na2S04 anhidro y filtraron. Aproximadamente 50% del solvente se eliminó bajo presión reducida y la capa orgánica restante se filtró a través de gel de sílice lavando con éter (aproximadamente 15 mi). El material filtrado se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-50% de EtOAc en DC para dar un sólido de color blanco. El sólido se disolvió en DMF (12 mi) y agregó NaH (60% de dispersión en aceite mineral, 0.179 g, 4.49 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante aproximadamente 30 min, luego se agregó cloruro de 4- metilbencen-1 -sulfonilo (0.684 g, 3.59 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante aproximadamente 30 min y vertió en agua helada (aproximadamente 30 mi). Se agregó EtOAc (30 mi) y las capas se separaron. La fase acuosa se extrajo adicionalmente con EtOAc (2 x 30 mi) y los orgánicos combinados se lavaron con salmuera (2 x 20 mi), secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron y concentraron bajo presión reducida. El aceite resultante se purificó mediante cromatografía sobre gél de sílice eluyendo con un gradiente de 0-50% de EtOAc en heptano para dar (E/Z)-5-(2-( 1.3-dioxolan-2-il)vinil)-4-cloro-1 -tosil-1 H- pirrolo[2,3-b]piridina (0.90 g, 50%) como una espuma blancuzca: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.65 min; EM m/z: 405 (M + H)+ y Rt = 2.70 min; EM m/z: 405 (M + H) + .
Etapa C: 5-(2-(1.3-dioxolan-2-il)etil)-4-cloro-1 -tosil-1 H- pirrolo[2,3-b]piridina Una mezcla de (?/?,)-5-(2-(1 ,3-dioxolan-2-il)vinil)-4-cloro-1 - tosil-1 -pirrolo[2,3-b]p'iridina (0.900 g, 2.22 mmol) y 10% de Pd/C en peso (0.118 g, 0 111 mmol) se purgó con N2 y evacuó bajo vacío (3x). Después de la tercera evacuación se agregó EtOAc (23 mi). El matraz se purgó con N2 y evacuó bajo vacío (3x). Después de la tercera evacuación el matraz se colocó bajo una atmósfera de hidrógeno durante aproximadamente 1 h. La atmósfera de hidrógeno se reemplazó con N2 y la mezcla de reacción se filtró a través de una almohadilla de Celite® lavando con EtOAc (aproximadamente 10 mi) y el material filtrado se concentró bajo presión reducida para dar 5-(2-(1.3-dioxolan-2- il)etil)-4-cloro-1-tosil-1 H-pirrolo[2,3-b]piridina (0.530 g, 59%) como un aceite espeso que solidificó en reposo: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.71 min; EM m/z: 407 (M + H) + .
Etapa D: 3-(4-cloro-1 -tosil-1 H-pirrolo[2,3-b]pir¡din-5- il)propanal A una solución de 5-(2-(1 ,3-dioxolan-2-il)etil)-4-cloro-1 -tos i I- 1H-pirrolo[2,3-ib]pirid¡na (0.520 g, 1.28 mmol) en THF (4.2 mi) se agregó HCI acuoso (6 , 0.639 mi, 3.83 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante aproximadamente 2 h y calentó a aproximadamente 50°C durante aproximadamente 1 h. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y agregó agua (0.64 mi) y la reacción se agitó durante aproximadamente 16 h. El pH se ajustó a aproximadamente 7 con NaHC03 acuoso saturado y agregó EtOAc (aproximadamente 10 mi). Las capas se separaron y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (10 mi). Los orgánicos combinados se secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron y concentraron bajo presión reducida. Se agregaron acetona (12 mi) y p-toluensulfonato de piridinio (0.096 g, 0.383 mmol). La reacción se calentó a reflujo durante aproximadamente 2 h. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-50% de EtOAc en DCM para dar 3-(4-cloro-1 -tosil-1 H-pirrolo[2,3-b]pir¡din-5-H) propanal (0.44 g, 84%, 90% de pureza) como una espuma blancuzca: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.50 min; EM m/z: 363 (M + H) + .
Etapa E: /V-((1 S,3S,4/?)-3-(3-(4-cloro-1 -tosil-1 W-pirrolo[2, 3-fa]piridin-5-il)propilamino)-4-etilciclopentil)ciclopropansulfonamida A una mezcla de 3-(4-cloro-1 -tosil-1 -/-pirrolo[2,3-£>]piridih-5-il)propanal (0.420 g, 1.04 mmol) y ?/-((1 S,3S,4#)-3-amino-4-etilciclopentil)ciclopropansulfonamida (0.290 g, 1.25 mmol, preparada usando OOO del Ejemplo No. 23 Etapa E con NaOH) en DCE (4.00 mi) se agregó ácido acético glacial (0.089 mi, 1.6 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante aproximadamente 15 min a temperatura ambiente y agregó triacetoxiborohidruro de sodio (0.331 g, 1.56 mmol). La reacción se dejó en agitación a temperatura ambiente durante aproximadamente 72 h. Se agregó lentamente NaHC03 acuoso saturado (aproximadamente 5 mi) seguido por DCM (5 mi). Las capas se separaron y la fase acuosa se extrajo con DCM (2 x 5 mi). Los orgánicos combinados se secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron y concentraron bajo presión reducida. El aceite de color amarillo restante se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-50% de EtOAc en heptano para dar N-((1 S, 3S, 4R)-3-(3-(4-cloro- 1-tosil-1 H-pirrolo[2, 3-b]piridin-5-¡l)propilamino)-4-etilciclopenti!)ciclo-propansulfonamida (0.330 g, 55%) como una espuma blanca: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.10 min; EM m/z: 579 (M + H)\ Etapa F: ?/-((1 S,3R,4S)-3-etil-4-(7-tos¡l -2,3,4,7 -tet ra hidro-1 H-pirrolo[2,3- i][1 ,6]naftiridin-1 -il)ciclopentil)c¡clopropansulfonamida Un frasco para microondas se cargó con una solución de N-((1S,3S>4R)-3-(3-(4-cloro-1-tosil-1H-pirrolo[2>3-d]piridin-5-il)propilamino)-4-etilciclopentil)ciclopropansulfonamida (0.200 g, 0.345 mmol) en 1-propanol (1.70 mi). Se agregaron DIEA (0.180 mi, 1.04 mmol) e yoduro de potasio (0.057 g, 0.345 mmol) y la mezcla de reacción se calentó en un microondas Biotagé® a aproximadamente 150°C durante aproximadamente 30 min. La reacción se sometió nuevamente a calentamiento por microondas a aproximadamente 180°C durante aproximadamente 1 h. La reacción se sometió nuevamente a calentamiento por microondas a aproximadamente 180°C durante aproximadamente 10 h. La mezcla de reacción se transfirió a un matraz de fondo redondo y agregó gel de sílice (aproximadamente 1 g). El solvente se eliminó bajo presión reducida y la mezcla de gel de sílice resultante se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-10% de MeOH en DC para dar N-((1 S,3R,4S)-3-etil-4-(7-tosil-2,3,4,7-tetrahidro-1H-pirrolo[2,3-h][1,6]naftiridin-1-il)ciclopentil)ciclopropansulfonamida (0.050 g, 27%) como una espuma de color amarillo: LC/E (Tabla 1, Método b) Rt = 2.52 min; EM m/z: 543 (M + H) + .
Etapa G: /V-((1 S,3/?,4S)-3-etil-4-(2,3,4,7-tetrahidro-1 H-pirrolo[2,3-ft][1,6]naftiridin-1 -il)ciclopentil)ciclopropansulfonamida A una solución de ?/-((1 S,3R,4S)-3-etil-4-(7-tos¡l-2,3,4,7-tetrahidro-1 H-p¡rrolo[2,3-ft][1.6] nafti rid i n - 1 -il)ciclopentil)ciclopropansulfonamida (0.041 g, 0.076 mmol) en 1,4-dioxano se agregó NaOH acuoso (5 N, 0.106 mi, 0.529 mmol). La reacción se calentó a aproximadamente 80°C durante aproximadamente 16 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y agregaron agua (5 mi) y EtOAc (10 mi). Las capas se separaron y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 mi). Los orgánicos combinados se secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-10% de MeOH en DCM para dar N-((1 S, 3R, 4S)-3-etil-4-(2, 3, 4, 7-tetrahidro-1 H-pirrolo[2, 3-h][1 ,6]naftiridin-1 -il)c¡clopentil)ciclopropan-sulfonamida (0.02 g, 72%) como un sólido de color blanco: LC/EM (Tabla 1, Método a) R, = 1.48 min; EM m/z: 389 (M + H)\ Ejemplo No. 34*: W-((1 S,3S,4?)-3-(2,3-dihidrodipirrolo[2,3- Jb:2',3'-c/]p¡ridin-1(6H)-¡l)-4-etilciclopentil)ciclopropansulfonamida Etapa A: 4-cloro-1 -tosil-1 H-pirrolo[2,3-b]piridin-5-carbaldehído A una suspensión de 4-cloro-1 -/-pirrolo[2,3-£>]piridin-5-carbaldehído (2.00 g, 11.1 mmol, Adesis) en DMF (30 mi) se agregó NaH (60% de dispersión en aceite mineral, 0.500 g, 12.5 mmol) formando una solución de color amarillo. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante aproximadamente 30 min, luego se agregó cloruro de 4-metilbencen-1 -sulfonilo (2.40 g, 12.6 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante aproximadamente 30 min y vertió en agua helada (aproximadamente 50 mi). El sólido se recogió mediante filtrado al vacío, lavando con agua (aproximadamente 15 mi), y secó en un horno de vacío para dar 4-cloro-1 -tosil-1 H-pirrolo[2,3-b]pirjdin-5-carbaldehído (3.22 g, 87%) como un sólido blancuzco: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.56 min; EM m/z: 335 (M + H) + .
Etapa B: (£/Z -4-cloro-5-(2-metoxivinil)-1 -tos i 1-1 H-pirrolo[2,3-¿b]piridina A una suspensión de cloruro de (metoximetil)trifenilfosfonio (1.28 g, 3.73 mmol) en THF (14.8 mi) a aproximadamente 0°C se agregó por goteo ferc-butóxido de potasio (1 M solución en THF, 3.70 mi, 3.70 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante aproximadamente 30 min a aproximadamente 0°C y agregó una suspensión de 4-cloro-1 -tosil-1 --pirrolo[2,3-6]pirid¡n-5-carbaldehído (1.00 g, 2.99 mmol) en THF (1.80 mi). La mezcla de reacción se calentó a temperatura ambiente y agitó durante aproximadamente 4 h. La reacción se neutralizó con HCI acuoso 1 M y luego agregaron EtOAc y agua (10 mi de cada uno). Las capas se separaron y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 mi). Los orgánicos combinados se secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron y concentraron bajo presión reducida. El sólido restante se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-50% de EtOAc en heptano para dar (E/Z)-4-cloro-5-(2-metoxivinil)-1-tosil-1 H-pirrolo[2,3-b]piridina (0.96 g, 89%) como un sólido blancuzco: LC/EM (Tabla 1, Método b) R, = 2.83 min; EM m/z: 363 (M + H)+ y R, = 2.86 min; EM m/z: 363 (M + H) + .
Etapa C: ?/-((1 S,3S,4R)-3-(2-(4-cloro-1 -tosil-1 H-pirrolo[2,3-b]piridin-5-il)etilamino)-4-etilciclopentil)ciclopropansulfonamida A una mezcla de CE/Zy)-4-cloro-5-(2-metox¡vinil)-1 -tosil-1 H-pirrolo[2,3-£>]piridina (0.95 g, 2.62 mmol) en THF (26 mi) se agregó HCI acuoso (1 M, 6.55 mi, 6.55 mmol). La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante aproximadamente 16 h. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y el pH se ajustó a aproximadamente 7 con NaHC03 acuoso saturado. Se agregó DCM (aproximadamente 30 mi) y las capas se separaron. La fase acuosa se extrajo con DCM (2 x 20 mi). Los orgánicos combinados se secaron sobre Na2S04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida. El residuo se recogió en DCE (13 mi) y agregaron ?/-((1 S,3S,4f?)-3-amino-4-etilciclopentil)c¡clopropansulfonamida (0.608 g, 2.62 mmol, preparado usando OOO del Ejemplo No. 23 Etapa E con NaOH) y ácido acético glacial (0.150 mi, 2.62 mmol). Se agregó triacetoxiborohidruro de sodio (0.832 g, 3.93 mmol) y la reacción se dejó en agitación a temperatura ambiente durante aproximadamente 16 h. La reacción se diluyó con DCM (20 mi) y agregó NaHC03 acuoso saturado (20 mi). Las capas se separaron y la fase acuosa se extrajo con DCM (2 x 10 mi). Los orgánicos combinados se lavaron con salmuera (10 mi), secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron y concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 25-100% de EtOAc en heptano para dar N-((1 S, 3S, 4R)-3-(2-(4-cloro-1 -tos¡l-1 H-pirrolo[2, 3-b]piridin-5-il)eti¡amino)-4-etilciclopentil)ciclopropansulfonamida (0.45 g, 30%) como un sólido blancuzco: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.87 min; EM m/z: 565 (M + H) + .
Etapa D: W-((1 S,3S,4R)-3-(2.3-d¡hidrod¡pi rrolo^S-fo^'^'-djpiridin-líeWHIJ^-etilciclopentiOciclopropansulfonamida Un frasco para microondas se cargó con una solución dé N-((1S,3S,4f?)-3-(2-(4-cloro-1-tosil-1H-pirrolo[2,3-í)]piridin-5-il)etilamino)-4-etilciclopentil)ciclopropansulfonamida (0.350 g, 0.619 mmol) en 1-propanol (3.2 mi). Se agregaron DIPEA (0.324 mi, 1.86 mmol) e yoduro de potasio (0.154 g, 0.929 mmol) y la reacción se calentó en un microondas Biotage® durante aproximadamente 10 h a aproximadamente 180°C. Se agregaron EtOAc y agua (10 mi de cada uno) a la mezcla de reacción y las capas se separaron. La fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 10 mi). Los orgánicos combinados se secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron y concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-100% de DC /MeOH/Et2NH (950/45/5) en DCM y el solvente se eliminó bajo presión reducida. El sólido se purificó adicionalmente mediante HPLC preparativa (Tabla 1, Método w) para dar N-((1 S,3S,4R)-3-(2.3-dih¡drodipirrolo[2,3-b:2',3'-d]piridin- 1 (6H)-il)-4-etilciclopentil)ciclopropansulfonamida con 30% mol de acetato de amonio como un excipiente (0.099 g, 38%), como un sólido de color blanco: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.70 min; EM m/z: 375 (M + H)\ Ejemplo No. 35 y 35.1: 1 -((1 S,2R,4S)-4-(3-c¡clopropil-1 H-1.2.4-triazol-1 -il)-2-etilciclopentil)-6W-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina y 1 -((1 SI2R,4S)-4-(5-cicIopropil-1 H-1.2.4-triazoM -H)-2-etilciclopentil)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina Etapa A: 8-eti I -1 ,4-dioxaespiro[4.4]nonan-7-carboxilato de etilo Un matraz de fondo redondo se cargó con 2-etil-4-oxociclopentancarboxilato de etilo (1.5 g, 8.1 mmol, Ejemplo No. 22, Etapa B) en DCM (22 mi). Al matraz se agregaron etilenglicol (0.91 mi, 16 mmol), ortoformiato de trietilo (2.0 mi, 12 mmol), y ácido p-toluensulfónico monohidratado (0.31 g, 1.6 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante aproximadamente 24 h. La solución se concentró bajo presión reducida para dar un aceite de color marrón que se disolvió en EtOAc y purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-50% de EtOAc en heptano. Las fracciones que contenían producto se combinaron y concentraron hasta secar bajo presión reducida para dar 8-etil-1 ,4-dioxaespiro[4.4]nonan-7-carboxilato de etilo como un aceite de color amarillo claro (1.6 g, 83%): LC/EM (Tabla 1, Método c) EM m/z 229 (M + H) + ; 1H RMN (CDCI) d 4.14 (q, 2H), 3.90 (m, 4H), 2.99 (q, 1H), 2.32-2.27 (m, 1H), 2.26-2.11 (m, 1H), 2.05-1.99 (m, 1H), 1.96-1.91 (m, 1H), 1.83-1.78 (m, 1H), 1.46-1.39 (m, 1H), 1.31-1.24 (m, 1H), 1.26 (t, 3H), 0.90 (t, 3H).
Etapa B: ácido 8-eti 1-1 ,4-dioxaespiro[4.4]nonan-7-carboxílico Un matraz de fondo redondo se cargó con 8-eti(- 1,4-d¡oxaespiro[4.4]nonan-7-carboxilato de etilo (0.32 g, 1.4 mmol) e hidróxido de sodio (acuoso 1 N, 14.0 mi, 14.0 mmol). La solución se agitó durante la noche a temperatura ambiente. A la solución se agregó DCM (30 mi) seguido por la adición de ácido cítrico acuoso 20% (aproximadamente 20 mi) para alcanzar un pH de aproximadamente 2. Las capas se separaron y la solución acuosa se extrajo con DCM (2x30 mi) y DCM/EtOAc (1:1, 30 mi). Los extractos combinados se secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida para dar ácido 8-etil-1,4-dioxaespiro[4.4]nonan-7-carboxílico como un aceite incoloro traslúcido (0.27 g, 96%): LC/EM (Tabla 1, Método c) R, = 1.20 min; EM m/z: 201 (M + H) + .
Etapa C: 8-etil-N'-(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)-1 ,4-dioxaespiro[4.4]nonan-7-carbohidrazida Un matraz de fondo redondo de 50 mi se cargó con 2- drazinil-5-tosil-5/-/-pirrolo[2,3-¿>]piraz¡na (0.350 g, 1.16 mmol, emplo No. 1, Etapa D), ácido 8-eti I - 1 ,4-dioxaespiro[4.4]nonan-7- carboxílico (0.250 g, 1.25 mmol), y DCM (6.0 mi). A la mezcla de reacción se agregó HATU (0.483 g, 1.27 mmol) y TEA (0.64 mi, 4.6 mmol) y la suspensión de color amarillo resultante se agitó a temperatura ambiente durante aproximadamente 3 h. A la solución de reacción se agregó DCM (25 mi) y la solución se lavó con agua y salmuera (20 mi de cada uno). La capa orgánica se secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida para dar un aceite de color marrón. El producto crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de: 0-10% de MeOH en DCM. Las fracciones que contenían producto se concentraron bajo presión reducida para dar 8-et¡l-N'-(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)-1 ,4-dioxaespiro[4.4]nonan-7-carbohidrazida como una espuma (0.50 g, 89%): LC/EM (Tabla 1, Método c) Rt = 1.49 min; EM m/z: 486 (M + H) + .
Etapa D: 1 -(8-et¡l-1 ,4-dioxaespiro[4.4]nonan-7-il)-6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina Un matraz de fondo redondo se cargó con 8-etil-N'-(5-tosil- 5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)-1,4-dioxaespiro[4.4]nonan-7-carbohidrazida (4.90 g, 10.1 mmol) y 1,4-dioxano (50 mi). Al recipiente se agregó DIEA (8.81 mi, 50.5 mmol) seguido por la adición de cloruro de tionilo (0.770 mi, 10.6 mmol). La mezcla se calentó a aproximadamente 75°C durante aproximadamente 90 min. Se agregó cloruro de tionilo adicional (0.074 mi, 1.0 mmol) y el calentamiento se continuó durante aproximadamente 1 h. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y agitó durante la noche. La solución se diluyó con DCM (75 mi) y lavó con agua (50 mi). Las capas se separaron y la capa orgánica se secó sobre MgS0 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida para dar un aceite de color marrón oscuro. El producto crudo se purificó mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-60% de acetona en heptano. Las fracciones que contenían producto se combinaron y concentraron para dar el material que se cargó en una segunda columna eluyendo con un gradiente de 0-60% de acetona en heptano. Las fracciones que contenían producto se combinaron y concentraron bajo presión reducida para dar 1-(8-etil÷1 ,4-dioxaespiro[4.4]nonan-7-il)-6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina como un polvo de color tostado (3.0 g, 64%): LC/EM (Tabla 1, Método c) Rt = 1.44 min; EM m/z: 468 (M + H) + .
Etapa E: 1 -( 8 -et i I - 1 ,4-dioxaespiro[4.4]nonan-7-il)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina A la solución de 1 -(8-etil-1 ,4-dioxaespiro[4.4]nonan-7-il)-6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]tr¡azolo[4,3-a]pirazina (3.76 g, 8.04 mmol) en 1,4-dioxano (55 mi), se agregó solución acuosa de hidróxido de sodio (2N, 12 mi) y la mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 60°C durante aproximadamente 90 min. El solvente se eliminó y el residuo se dividió entre solución saturada de cloruro de amonio en agua y EtOAc (75 mi de cada uno). La fase acuosa se lavó adicionalmente con EtOAc (60 mi); los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (65 mi), secaron sobre sulfato de magnesio anhidro, filtraron, y concentraron para dar un sólido de color marrón. El sólido se trituró en éter (20 mi) y el precipitado se recogió mediante filtración y secó para dar 1-(8-etil-1 ,4-dioxaespiro[4.4]nonan-7 '-il)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina (2.22 g, 88%) como un sólido de color beige. LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.71 min; EM m/z: 314 (M + H) + .
Etapa F: 1 -(8-eti I -1 ,4-d¡oxaespiro[4.4]nonan-7-il)-6-((2-(trimetilsil¡l)etoxi)metil)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina A una suspensión de hidruro de sodio (60% de dispersión en aceite mineral, 0.355 g, 8.87 mmol) en DMF (45 mi), se agregó por goteo la solución de 1 -(8-etil- 1 ,.4-dioxaespiro[4.4]nonan-7-il)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina (2.78 g, 8.87 mmol) en DMF (45 mi) a aproximadamente 0°C, y la solución resultante se agitó a esta temperatura durante aproximadamente 20 min. Se agregó por goteo Cl de SEM (1.75 mi, 8.87 mmol) y la mezcla resultante se agitó durante la noche mientras se entibiaba gradualmente. El solvente se eliminó bajo presión reducida y el residuo se dividió entre EtOAc y agua (120 mi de cada uno). La fase acuosa se lavó adicionalmente con EtOAc (50 mi); los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (100 mi), secaron sobre sulfato de magnesio anhidro, filtraron, y concentraron para dar 1 -(8-etil-1 ,4-dioxaespiro[4.4]nonan-7-il)-6-((2-(trimetils¡IH)etoxi)-metH)-6H-pirrolo[2, 3-e][1, 2, 4]tr¡azolo[4, 3-ajpirazina (3.87 g, 98%) como un sólido de color marrón amorfo. LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.49 min; EM m/z: 444 (M + H) + . Etapa G: 3-etil-4-(6-((2-(trimeti Is ili l)etoxi)metil)-6H-pi rrolo[2, 3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentanona A una solución de 1 -(8-eti 1- ,4-dioxaespiro[4.4]nonan-7-il)-6-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-6H-p¡rrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina (3.87 g, 8.72 mmol) en THF (30 mi), se agregó HCI acuoso (1N, 26.2 mi) a aproximadamente 0°C. El baño de hielo se retiró y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante aproximadamente 6 h. El THF se retiró bajo presión reducida. La fase acuosa se neutralizó mediante la adición de NaHC03 acuoso saturado y extrajo con EtOAc (2x50 mi). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (60 mi), secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron. El residuo se purificó mediante cromatografía de columna sobre gel de sílice usando 20 a 80% de EtOAc en DCM para dar 3-etil-4-(6-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-6H-p¡rrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -iljciclopentanona (2.84 g, 81%) como un sólido de color amarillo amorfo. LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.44 min; EM m/z: 400 (M + H) + .
Etapa H: 3-etil-4-(6-((2-(trimeti Isi l¡ l)etoxi)meti I )-6H-pi rrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentanona Una solución de 3-etil-4-(6-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-6/--pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]tr¡azolo[4,3-a]piraz¡n-1 - il)ciclopentanona (0.296 g, 0.741 mmol) en THF (2.96 mi) se enfrió a aproximadamente 0°C y agregó DIBAL-H (1M en ciclohexano, 1.482 mi, 1.482 mmol). La reacción se agitó durante aproximadamente 45 min. La reacción se detuvo con MeOH (3 mi). A la mezcla de reacción se agregó NH4CI acuoso saturado (10 mi) y EtOAc (10 mi). La capa orgánica se recogió y lavó con salmuera (10 mi), secó sobre MgS04 anhidro, filtró y concentró bajo presión reducida para dar el material crudo. El material crudo se purificó mediante cromatografía de columna sobre gel de sílice usando 0-5% de MeOH/CH2CI2 para dar una mezcla escalémica enriquecida en (1 S,3R,4S)-3-etH-4-(6-((2-(tr¡metilsilil)etox¡)metil)-6H-pirrolo[2, 3-e][1,2, 4]triazolo[4, 3-a]pirazin-1 -il)ciclopentanol (148 mg, 0.369 mmol, 50%) y una mezcla escalémica enriquecida en (1 R,3R,4S)-3-etil-4-(6-((2-(trimetilsilH)etoxi)metH)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2, 4]triazolo[4, 3-a]pirazin-1 -il)ciclopentanol (60 mg, 0.149 mmol, 20%) ambos como sólidos amorfos. LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.37 min; EM m/z: 402 (M + H)+ y Rt = 2.16 min; EM m/z: 402 (M + H) + respectivamente.
Etapa I: metansulfonato de 3-etil-4-(6-((2- (trimetilsilil)etoxi)metil)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentilo A una solución de la mezcla escalémica enriquecida en (1/?,3R,4S)-3-etil-4-(6-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-6/-/-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentanol (0.5 g, 1.245 mmol) y TEA (0.347 mi, 2.49 mmol) en DCM (13 mi) se agregó MsCI (0.107 mi, 1.37 mmol) por goteo, y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. El solventé se eliminó bajo presión reducida y el residuo se purificó mediante cromatografía de columna sobre gel de sílice usando 10 a 70% de EtOAc en DCM para dar metansulfonato de 3-etil-4-(6-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-6H-pirrolo[2, 3-e][1 ,2,4]triazolo[4, 3-a]pirazin-1 -il)ciclopentilo (0.48 g, 80%) como un sólido amorfo de color blanco. LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.54 min; EM m/z: 480 (M + H) + Etapa J: 1 -((1 S,2R,4S)-4-(3-ciclopropil-1 ?-? .2.4-triazol-1 -il)-2-etilciclopentil)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a] pirazina y 1-((1S,2R,4S)-4-(5-ciclopropil-1H-1.2.4-triazol-1-il)-2-eti le i clopentil)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2, 4]triazolo[4,3-a] pirazina A una solución de 3-ciclopropil-1 H-1 ,2,4-triazol (0.054 g, 0.494 mmol) en DMF (3 mi), se agregó hidruro de sodio (0.019 g, 0.486 mmol, 60% de dispersión en aceite mineral) a aproximadamente 0°C y la mezcla de reacción se agitó durante aproximadamente 10 min. La temperatura se elevó a aproximadamente 50°C y agregó metansulfonato de 3-eti|-4-(6-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentilo (0.079 g, 0.165 mmol). La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente 75°C durante la noche. El solvente se eliminó bajo presión reducida y el residuo se dividió entre agua y EtOAc (10 mi de cada uno). La fase acuosa se lavó adicionalmente con EtOAc (7 mi); los extractos combinados se lavaron con salmuera (10 mi), secaron sobre MgS04 aphjdro, filtraron y concentraron bajo presión reducida para dar una mezcla de 1 -(4-(3-ciclopropil-1 H-1.2.4-triazol-1 -il)-2- etilciclopentil)-6-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-6H-pirrolo[2,3-ej[1,2, 4]triazolo[4, 3-a]pirazina y 1 -(4-(5-cicloprop¡l-1 H-1 ,2, 4-triazol-1-il)-2-etilciclopentil)-6-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]tr¡azolo[4,3-a]pirazina. Esta mezcla se disolvió en DCM (3 mi) y agregó 2 MI de ácido trifluoroacético. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante aproximadamente 2 h. Los solventes se eliminaron bajo presión reducida. El residuo se disolvió en 1,4-dioxano (3 mi); agregó 2 MI de solución acuosa concentrada de NH OH (4 mi). La mezcla se calentó a aproximadamente 60°C durante aproximadamente 2 horas. Los solventes se eliminaron bajo presión reducida y el residuo se purificó mediante HPLC (Tabla 2, Método 32) para dar 1-((1 S,2R,4S)-4-(3-ciclopropil-1 H-1.2.4-triazol-1 -il)-2-etilciclopentil)-6H-pirrolo[2, 3-e][1 ,2,4]triazolo[4, 3-a]pirazina (0.028 g, 25% de rendimiento) [Ejemplo No. 35] y 1 -((1 S,2R,4S)-4-(5-ciclopropil-1 H-1.2.4-tr¡azol-1 -il)-2-etilciclopentH)-6H-p¡rrolo[2,3-e][1 ,2, 4]triazolo[4, 3-a]pirazina (0.013 g, 12% de rendimiento) [Ejemplo No. 35.1] ambos como sólidos de color blanco. LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.74 min; EM m/z: 363 (M + H)+ y LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.73 min; EM m/z: 363 (M + H) + .
Ejemplos No. 36 y 37: (3S,4R)-3-etil-4-(6H-pirroIo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)-/V-(2,2,2-trif luoroetil)pirrolidin-1 -carboxamida y (3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]p¡razin-1 -il)-A/-(2,2,2- trif luoroetil)pirrolidin-1 -carboxamida Etapa A: (Z)-pent-2-enoato de etilo A una suspensión de catalizador de Lindlar (0.844 g, 0.396 mmol) en THF (100 mi) y piridina (10.00 mi) se agregó pent-2-inoato de etilo (5.22 mi, 39.6 mmol). La mezcla de reacción se burbujeó con hidrógeno durante aproximadamente 10 min y una atmósfera de hidrógeno se mantuvo mediante un balón. Luego de aproximadamente 15 h la mezcla de reacción se filtró a través de una almohadilla de Celite®, diluyó con Et20 (30 mi) y lavó con solución acuosa saturada de CuS04 (40 mi), seguido por agua (40 mi). La capa orgánica se separó, secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró in vacuo para dar pent-2-enoato de (Z)-etilo crudo (5 g, 98%). H RMN (DMSO-cf6) d 1.05 (t, 3H), 1.28 (t, 3H), 2.65 (m, 2H), 4.18 (q, 2H), 5.72 (m, 1H), 6.21 (m, 1H).
Etapa B: 1 -bencil-4-etilpirrol¡din-3-carboxilato de (c/s -etilo A una solución de /V-bencil- 1 -metoxl-A/- ((trimetilsilil)metil)metanamina (9.98 mi, 39.0 mmol) y pent-2-enoato de (Z)-etilo (5 g, 39.0 mmol) en DCM (50 mi) se agregó TFA (0.030 mi, 0.390 mmol) a temperatura ambiente. Luego dé aproximadamente 2 días, la mezcla de reacción se concentró in vacuo para dar 1 -bencil-4-etilpirrolidin-3-carboxilato de (cis)-etilo crudo (9.8 g, 96%) como un aceite. LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.62 min; EM m/z: 262 (M + H) + .
Etapa C: 4-etilpirrolidin-3-carboxilato de (c s)-etilo Un agitador Parr se cargó con PdOH2 sobre carbón (2.243 g, 3.19 mmol) y 1 -bencil-4-etilpirrolidin-3-carboxilato de (c/s)-etilo (16.7 g, 63.9 mmol) seguido por EtOH (100 mi). La mezcla de reacción se desgasificó y purgó con gas hidrógeno y agitó en un agitador parr a 60 psi durante aproximadamente 4 días a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se desgasificó y purgó con nitrógeno. La suspensión se filtró a través de una almohadilla de Celite® lavando con EtOH (~ 900 mi). El solvente se eliminó bajo presión reducida para dar 4-etilpirrolidin-3-carboxilato de (cis)-etilo (8.69 g, 79%) como un aceite: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.11 min; EM m/z: 172 (M + H) + .
Etapa D: ácido (c s)-1 -(íerc-butoxicarbonil)-4-etilpirrolidin-3-carboxílico A un matraz cargado con 4-etilp¡rrolidin-3-carboxilato de (c/s)-etilo (8.69 g, 50.7 mmol) se agregó HCI acuoso (6N, 130 mi, 782 mmol). La solución se calentó a aproximadamente 75°C durante aproximadamente 12 h. Se agregó HCI acuoso (6N, 100 mi, 599 mmol) y agitó a aproximadamente 80°C durante aproximadamente 20 h. Se agregó HCI acuoso (6N, 100 mi, 599 mmol) y la agitación continuó a aproximadamente 80°C durante aproximadamente 20 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y el solvente se eliminó bajo presión reducida. Se agregaron 1,4-dioxano (275 mi) y agua (50 mi) seguido por la adición en porciones de Na2C03 (13.5 g, 127 mmol). Se agregó dicarbonato de di-ferc-butilo (13.3 g, 60.9 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante aproximadamente 16 h. El sólido se filtró y lavó con EtOAc (250 mi). La capa acuosa se acidificó con HCI acuoso (1N) a aproximadamente pH 3-4. Las capas se dividieron y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (3 x 100 mi). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2S0 anhidro, filtraron y eliminaron bajo presión reducida. Dado que la capa orgánica estaba casi totalmente concentrada (restaban aproximadamente 10 mi), un sólido precipitó. Se agregó heptano (30 mi) y el sólido filtró lavando con heptano para dar ácido (c¡s)-1 -(ierc-butoxicarbonil)-4-etilpirrolidin-3-carboxílico (3.9 g, 32%) como un sólido blancuzco como producto: LC/EM (Tabla 1, Método c) Rt = 0.57 min; EM m/z: 242 (M-H)\ Etapa E: 3-etil-4-(2-(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-/>]pirazin-2-il)hidrazincarbon¡l)pirrolidin-1-carboxilato de (cís)-terc- bu ti I o A una suspensión de 2-hidrazinil-5-tosil-5 --pirrolo[2,3-bjpirazina (5.00 g, 16.48 mmol, Ejemplo 1, Etapa D) y ácido (c/s)-1 -(rerc-butoxicarbonil)-4-etilpirrolidin-3-carboxílico (4.01 g, 16.48 mmol) en DCM (70 mi) se agregaron TEA (5.75 mi, 41.2 mmól) y HATU (6.90 g, 18.15 mmol, Novabiochem). La suspensión resultante se agitó a aproximadamente 25°C durante aproximadamente 2 h. La mezcla de reacción se transfirió a un embudo de separación y lavó con NaHC03 acuoso saturado (4 x 30 mi). La capa orgánica se secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró in vacuo para dar una espuma de color marrón. El material crudo se purificó mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice cargando el compuesto en seco sobré la columna y eluyendo con 50-100% de EtOAc en DCM/éter de petróleo (1:1) para dar 3-etil-4-(2-(5-tosil-5H-pirrolo[2, 3-b]pirazin-2-H)hidrazincarbonil)pirrolidin-1 -carboxilato de (cis)-terc-butilo con EtOAc como un excipiente (9.41 g, 100%) como una espuma de color tostado: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.45 min; EM m/z: 529 (M + H) + .
Etapa F: 1-((c;'s)-4-etMpirrolidin-3-il)-6-tosil-6H-pirroloí2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina A una solución de 3-etil-4-(2-(5-tos¡l-5H-pirrolo[2,3-6]pirazin -2 -il)hidrazincarbonil)pirrolidin-1 -carboxilato de (c s)-rerc-butilo (9.4 g, 16.41 mmol) en 1,4-dioxano (150 mi), se agregaron cada uno en forma secuencial TEA (7.00 mi, 50.2 mmol) y cloruro de tionilo (1.80 mi, 24.6 mmol) en una porción a la solución. La reacción se calentó a aproximadamente 70°C durante aproximadamente 18 h. El solvente se eliminó bajo presión reducida. Se agregó una solución de HCI (4 M en 1,4-dioxano, 41.0 mi, 164 mmol) en una porción y la reacción se agitó durante aproximadamente 3 h. Se agregó Et20 (100 mi) y el sólido se filtró. Los sólidos se combinaron con el licor madre y el solvente se eliminó bajo presión reducida. El sólido se disolvió parcialmente en EtOAc (650 mi) y lavó con solución acuosa saturada de NaHC03 (150 ml). Se formó una emulsión y filtró a través de Celite® lavando con EtOAc. Se obtuvo como producto el sólido sobre la capa de Celite®. El sólido se raspó de la capa de Celite® y disolvió en una solución de 10% de MeOH en DCM (150 ml). La capa orgánica se lavó con agua (2 x 30 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con bicarbonato de sodio acuoso saturado (4 x 150 ml), secaron sobre MgS04, filtraron, y concentraron bajo presión reducida para dar 1 -((cis)-4-etilpirrolidin-3-il)-6-tosil-6H-pirrolo[2, 3-e][1,2, 4]triazolo[4, 3-ajpirazina (5.88 g, 80%) como una espuma de color marrón: LC/EM (Tabla 1, Método a) R, = 1.55 min; EM m/z: 411 (M + H)+. Etapa G: (c s)-3-etil-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]tr¡azolo[4,3-a]p¡razin-1-¡l)-N-(2,2,2-trif luoroetil)pirrolidin-1 -carboxamida A una solución de 2,2,2-trifluoroetanamina (0.080 g, 0.804 mmol) en DMF (3 ml) se agregó CDI (0.150 g, 0.926 mmol). La solución resultante se agitó a aproximadamente 65°C durante aproximadamente 2 h. Se agregó 1 -((c/s)-4-etilpirrolidin-3-il)-6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina (0.250 g, 0.609 mmol) y la reacción continuó en agitación a aproximadamente 65°C durante aproximadamente 2 h. La reacción se enfrió a aproximadamente temperatura ambiente. El solvente se eliminó bajo presión reducida. El material crudo se purificó mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-10% de MeOH para dar (cis)-3-etil-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2, 3-e][1,2, 4]triazolo[4, 3-a]pirazin- 1 -il)-N-(2, 2, 2-trifluoroetil)pirrolidin-1 -carboxamida (0.306 g, 94%) como un residuo de color marrón: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.19 min; EM m/z: 536 (M + H) + .
Etapa H: (3S,4/?)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)-W-(2,2,2-trifluoroetil)pirrolidin-1 -carboxamida y (3 R, 4S) -3 -eti I -4-( 6H-p¡ r rol o [2, 3-e] [1 ,2, 4]triazo lo [4, 3-a]p i razin-1 -il)-A/-(2,2,2-trifluoroetil)pirrolidin-1 -carboxamida A una solución de (c s)-3-etil-4-(6-tosil-6/-/-pirrolo[2,3-e][1 , 2, 4]triazolo[4,3-a]pi razin-1 -il)-/V-(2,2,2-trifluoroetil)pirrolidin- -carboxamida (0.306 g, 0.571 mmol) en 1,4-dioxano (10 mi) se agregó NaOH acuoso (1 N, 1.50 mi, 1.50 mmol). La reacción se calentó a aproximadamente 50°C durante aproximadamente 1 h. Las capas se dividieron entre DCM (25 mi) y agua (10 mi). La capa acuosa se acidificó con 20% de ácido cítrico acuoso a aproximadamente pH 4 y extrajo con DCM (4 x 25 mi). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida para dar un residuo de color marrón. El material crudo se purificó mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-10% de MeOH en DCM para dar a mezcla racémica de productos como un residuo de color marrón. El compuesto se purificó adicionalmente usando HPLC preparativa quiral (Tabla 2, Método 55) para dar (3S,4R)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 , 2, 4]triazolo[4, 3-a]pirazin-1 -il)-N-(2, 2, 2-trifluoroetil) irrolidin-1 -carboxamida (Rt = 14.5 min, o = negativo) (0.031 g, 14%)[Ejemplo No. 36]: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.62 min; EM m/z: 382 (M + H)+ y (3R,4S)-3-et¡l-4-(6H-pirrolo[2, 3-e][1, 2,4]triazolo[4, 3-a]pirazin- 1 -il)-N-(2, 2, 2-tr¡fluoroetH)p¡rrol¡d¡n-1 -carboxamida (Rt = 17.3 min, o = positivo) (0.033 g, 15%)[Ejemplo No. 37]: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.62 min; EM m/z 382 (M + H) + .
Ejemplo No. 38: 5-(((1 S,3R, S)-3-etii-4-(6H-pirrolo[2, 3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-ii)ciclopentil)metil)-3- (metoximetil)-1.2.4-oxadiazol Etapa A: 8-etil-1 ,4-dioxaespiro[4.4]nonan-7-carboxilato de etilo Un matraz de fondo redondo se cargó con 2-etil-4-oxociclopentancarboxilato de etilo (1.5 g, 8.1 mmol, Ejemplo No. 22, Etapa B) en DCM (22 mi). Al matraz se agregaron etilenglicol (0.91 mi, 16 mmol), ortoformiato de trietilo (2.0 mi, 12 mmol) y ácido p-toluensulfónico monohidratado (0.31 g, 1.6 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante aproximadamente 24 h. La solución se concentró bajo presión reducida para dar un aceite de color marrón que se disolvió en EtOAc y purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-50% de EtOAc en heptano. Las fracciones que contenían producto se combinaron y concentraron hasta secar bajo presión reducida para dar 8-etil-1,4-dioxaesp¡ro[4.4]nonan-7-carboxilato de etilo como un aceite de color amarillo claro (1.6 g, 83%): LC/EM (Tabla 1, Método c) EM m/z 229 (M + H) + ; 1H RMN (CDCI) d 4.14 (q, 2H), 3.90 (m, 4H), 2.99 (q, 1H), 2.32-2.27 (m, 1H), 2.26-2.11 (m, 1H), 2.05-1.99 (m, 1H), 1.96-1.91 (m, 1H), 1.83-1.78 (m, 1H), 1.46-1.39 (m, 1H), 1.31- 1.24 (m, 1H), 1.26 (t, 3H), 0.90 (t, 3H).
Etapa B: ácido 8-etil-1 ,4-dioxaespiro[4.4]nonan-7-carboxílico Un matraz de fondo redondo se cargó con 8-etiM,4-dioxaespiro[4.4]nonan-7-carboxilato de etilo (0.32 g, 1.4 mmpl) e hidróxido de sodio acuoso (1 N, 14.0 mi, 14.0 mmol). La solución se agitó durante la noche a temperatura ambiente. A la solución se agregó DCM (30 mi) seguido por la adición de 20% de ácido cítrico acuoso (aproximadamente 20 mi) para alcanzar un pM de aproximadamente 2. Las capas se separaron y la solución acuosa se extrajo con DCM (2x30 mi) y DCM/EtOAc (1:1, 30 mi). Los extractos combinados se secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida para dar ácido 8-et¡l-1 ,4-dioxaespiro[4.4]nonan-7-carboxílico como un aceite incoloro traslúcido (0.27 g, 96%): LC/EM (Tabla 1, Método c) Rt = 1.20 min; EM m/z: 201 (M + H)+.
Etapa C: 8-etil-N,-(5-tosil-5H-p¡rrolot2,3-b]pirazin-2-il)-1 ,4-dioxaespiro[4.4]nonan-7-carbohidrazida balón de 50 mi se cargó con 2-hidrazinil-5-tosil-5H- pirrolo[2,3-£>]pirazina (0.350 g, 1.16 mmol, Ejemplo No. 1, Etapa D), ácido 8-etil-1 ,4-dioxaespiro[4.4]nonan-7-carboxílico (0.250 g, 1.25 mmol), y DCM (6.0 mi). A la mezcla de reacción se agregó HATU (0.483 g, 1.27 mmol) y TEA (0.64 mi, 4.6 mmol) y la suspensión de color amarillo resultante se agitó a temperatura ambiente durante aproximadamente 3 h. A la solución de reacción se agregó DCM (25 mi) y la solución se lavó con agua y salmuera (20 mi de cada uno). La capa orgánica se secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida para dar un aceite de color marrón. El producto crudo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-10% de MeOH en DCM a lo largo de 25 min para dar 8-etil-N'-(5-tosil-5H-pirrolo[2, 3-b]pirazin-2-il)-1 ,4-dioxaespiro[4.4]nonan-7-carbohidrazida como una espuma (0.50 g, 89%): LC/EM (Tabla 1, Método c) R, = 1.49 min; EM m/z: 486 (M + H) + .
Etapa D: 1 -(8-eti 1-1 ,4-dioxaespiro[4.4]nonan-7-il)-6-tosil-6W-pirrolo[2,3-e][1 , 2,4]triazolo[4,3-a]pirazina Un matraz de fondo redondo se cargó con 8-etil-N'-(5-tosil- 5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)-1,4-dioxaespiro[4.4]nonan-7-carbohidrazida (4.90 g, 10.1 mmol) y 1,4-dioxano (50 ml). Al matraz se agregó DIEA (8.81 ml, 50.5 mmol) seguido por la adición de cloruro de tionilo (0.770 ml, 10.6 mmol). La mezcla se calentó a aproximadamente 75°C durante aproximadamente 90 min. Se agregó cloruro de tionilo adicional (0.074 ml, 1.0 mmol) y el calentamiento se continuó durante aproximadamente 1 h. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y agitó durante la noche. La solución se diluyó con DCM (75 ml) y lavó con agua (50 ml). Las capas se separaron y la capa orgánica se secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida para dar un aceite de color marrón oscuro. El producto crudo se purificó mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-60% de acetona en heptano. Las fracciones que contenían producto se combinaron y concentraron para dar el material que se cargó en una segunda columna eluyendo con un gradiente de 0-60% de acetona en heptano. Las fracciones que contenían producto se combinaron y concentraron bajo presión reducida para dar 1 -(8-etil-1 ,4-dioxaespiro[4.4]nonan-7-il)-6-tosil-6H-pirrolo[2, 3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]p¡razina como un polvo de color tostado (3.0 g, 64%): LC/EM (Tabla 1, Método c) Rt = 1.44 min; EM m/z: 468 (M + H) + .
Etapa E: 3-etil-4-(6-tosi l-6H-pirrolo[2, 3-e][1 ,2,4]triazolo[4, 3-a]pirazin-1-il)ciclopentanona Un matraz de fondo redondo se cargó con 1 -((7S,8ft)-8-etil-1 ,4-dioxaespiro[4.4]nonan-7-il)-6-tosil-6--pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]tr¡azolo[4,3-a]pirazina (3.56 g, 7.61 mmol) y THF (20 mi). A la solución se agregó HCI acuoso (6N, 3.81 mi, 22.8 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante aproximadamente 2 h. El solvente se eliminó bajo presión reducida y agregaron DCM (75 mi) y agua (50 mi). Las capas se separaron y la solución orgánica se secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida para dar 3-etil-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2, 3-e][1 ,2, 4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentanona como una espuma de color marrón (2.99 g, 93%): LC/EM (Tabla 1, Método c) Rt = 1.40 min; EM m/z: 424 (M + H) + .
Etapa F: 2-((c/'s)-3-etil-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentiliden)acetato de etilo A una suspensión de hidruro de sodio (0.227 g, 5.67 mmol, 60% de dispersión en aceite) en THF (30 mi) se agregó 2-(dietoxifosforil)acetato de etilo (1.18 mi, 5.90 mmol). Luego de aproximadamente 30 min se agregó una solución de (c/s)-3-etil-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentanona (2.00 g, 4.72 mmol) en THF (1.0 mi). Luego de aproximadamente 4 h se agregaron EtOAc y NaHC03 saturado. La capa orgánica se separó, concentró in vacuo y purificó mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con 20-100% de EtOAc en DCM para dar 2-((cis)-3-etil-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2, 3-e][1, 2, 4]triazolo[4, 3-a}pirazin- 1 -il)ciclopentil¡den)acetato de etilo (2.08 g,, 89%): LC/EM (Tabla 1, Método c) Rt = 2.52-2.56 min; EM m/z: 494 (M + H)+ como una mezcla de diastereómeros y 2-((cis)-3-etil-4-(6H-p¡rrolo[2,3-e][1 ,2, 4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentiliden)acetato de etilo (0.150 g, 9%), como una mezcla de diastereómeros: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.85-1.89; EM m/z: 340 (M + H) + .
Etapa G: 2-((cis)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentiliden)acetato de etilo A una solución de 2-((c/'s)-3-etil-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentiliden)acetato de etilo (1.9 g, 3.85 mmol) en THF (30 mi) a 0°C se agregó una solución de TBAF (11.55 mi, 11.55 mmol, 1 M en THF). Luego de aproximadamente 10 min, se agregó TBAF (7.70 mi, 7.70 mmol, 1 M en THF). Luego de aproximadamente 1 h se agregaron EtOAc y salmuera a la mezcla de reacción. Luego de aproximadamente una hora la capa orgánica se separó, concentró in vacuo y purificó mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con EtOAc para dar 2-((cis)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2, 4]triazolo[4,3-a]piraz¡n-1 -il)ciclopentiliden)acetato de etilo (1.3 g, 100%) como una mezcla de diastereómeros: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.86-1.90 min; EM m/z: 340 (M + H) + .
Etapa H: 2-((1 R,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pi rrolo[2, 3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentil)acetato de etilo y 2-((1S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentil)acetato de etilo A una suspensión de PdOH2 sobre carbón (0.134 g, 0.192 mmol) en THF (20 mi) se agregó una solución de 2-((cis)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentiliden)acetato de etilo (1.3 g, 3.83 mmol) en THF (5 mi). La mezcla de reacción se burbujeó con hidrógeno y mantuvo una atmósfera de hidrógeno mediante un balón. Luego de aproximadamente 3 días la mezcla de reacción se filtró a través de Celite®, concentró in vacuo y purificó mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con EtOAc para dar 2-((c/'s)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]piraz¡n-1 -il)ciclopentil)acetato de etilo (1.3 g, 99% de rendimiento) como un sólido de color pardo/negro oscuro. El compuesto se purificó adicionalmente mediante HPLC preparativa quiral (Tabla 2, Método 47) para dar 2-((1 R,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentil)acetato de etilo (Rt = 12.0 min, o = negativo) (0.400 g, 31%): LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.85 min; EM m/z: 342 (M + H)+ y 2-((1 S, 3R, 4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2, 3-e][1,2, 4]triazolo[4, 3-a]pirazin- 1 -il)ciclopentil)acetato de etilo (Rt = 13.7 min, o = negativo) (0.420 g, 32%) como un sólido de color blanco: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.84 min; EM m/z: 342 (M + H)+.
Etapa I: 5-(((1 S,3?,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentil)metil)-3-(metoximetil)-1,2,4-oxadiazol A una solución de 2-((1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentil)acetato de etilo (0.100 g, 0.293 mmol) en tolueno (0.20 mi) y MeOH (0.20 m!) se agregó (Z)-/V'-hidroxi-2-metoxiacetimidamida (0.300 g, 2.89 mmol, Tyger) y K2C03 (0.100 g, 0.726 mmol). La solución se calentó en un microondas CEM a aproximadamente 130°C durante aproximadamente 1 h (250 psi de presión máxima, gradiente de 1 min, 300 vatios máximos). El solvente se eliminó bajo presión reducida. El residuo se diluyó con DCM (3 mi) y una pequeña cantidad de MeOH. El material crudo se purificó mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-10% de MeOH en DCM. El residuo se disolvió en EtOAc y agregó heptano. El solvente se concentró. El sólido se secó en un horno al vacío (aproximadamente 70°C) durante aproximadamente 20 h para dar 5-(((1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2, 3-e][1 ,2, 4]tr¡azolo[4, 3-a]pirazin-1 -il)ciclopentil)metil)-3-(metoximetH)-l .2.4-oxadiazol (0.062 g, 56%) como un sólido de color blanco: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.79 min; EM m/z: 382 (M + H) + .
Ejemplo No. 39: c/'s-4-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-¡l)ciclohexanamina Etapa A: 4-(dibencilamino)cicIohexancarboxilato de etilo Un matraz de 250 mi se cargó con 4-oxociclohexancarboxilato de etilo (5 g, 28.5 mmol, Alfa Aesar) y THF (75 mi). La solución se enfrió a aproximadamente 0 ? y agregaron AcOH (2.28 mi, 39.9 mmol) y dibencilamina (6.18 g, 31.3 mmol) (TCI) por goteo, para dar lugar a la formación de una suspensión espesa. Se agregó Na(OAc)3BH (14.3 g, 64.1 mmol) por porciones y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante aproximadamente 72 h. La mezcla de reacción se enfrió a aproximadamente 10°C. Se agregó agua (25 mi) y la mezcla de reacción se agitó durante aproximadamente 15 min. Se agregaron los heptanos (50 mi). Las capas se separaron y la capa orgánica se lavó con 10% de solución acuosa de AcOH (25 mi) y luego con agua (10 mi). La capa orgánica se extrajo con 4% de solución de HCI dos veces (40 mi y 20 mi). Las capas acuosas combinadas se lavaron con heptanos (20 mi). A la capa acuosa se agregó lentamente 30% de solución acuosa de K2C03 (30 g) para ajustar el pH a 10. La solución acuosa se extrajo con heptano dos veces (75 mi y 15 mi). La capa orgánica combinada se lavó con agua (30 mi). La capa orgánica se secó sobre Na2S04 anhidro y filtró. El material filtrado se concentró bajo presión reducida para dar 4-(dibencilam¡no)ciclohexancarbox¡lato de etilo (7.2 g, 72%) como un aceite que solidificó en reposo: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 3.18 y 3.23 min; EM m/z: 352 (M + H) + .
Etapa B: ácido 4-(dibencilami no)ciclohexancarboxílico A un matraz de 250 mi, se agregaron 4-(dibencilamino)ciclohexancarboxilato de etilo (7.2 g, 20.5 mmol) y una solución de H2S04 concentrado (7.64 mi, 143 mmol) en agua (80 mi). La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente 90°C durante aproximadamente 18 h, se enfrió a aproximadamente 5°C y el pH se ajustó a aproximadamente 7 con la adición de 50% de NaOH acuoso. La solución acuosa se extrajo con éter (300 mi). La capa orgánica se secó sobre Na2S04 anhidro, filtró y lavó con éter. El material filtrado se concentró bajo presión reducida para dar ácido 4-(dibencilamino)ciclohexancarboxílico (5.6 g, 85%) como un sólido: LC/EM (Tabla 1, Método b) R, = 1.65 min; EM m/z: 324 (M + H)\ Etapa C: Sulfoxonio, dimetil-, 2-(4-(dibencilamino)ciclohexil)-2-oxoetiluro matraz de 250 mi, se agregaron ácido (dibencilamino)ciclohexancárboxílico (5.6 g, 17.3 mmol), HATU (6.75 g, 17.4 mmol) y TEA (8.45 mi, 60.6 mmol) en THF (60 mi) para dar una suspensión de color blanco. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante aproximadamente 1 h. A un matraz de 500 mi, se agregaron cloruro de trimetiisulfoxonio (6.82 g, 51.9 mmol) y ferc-butóxido de potasio (6.44 g, 54.5 mmol) en THF (60 mi) para dar una suspensión de color blanco. La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente 65°C durante aproximadamente 3 h. La mezcla de reacción se enfrió a aproximadamente 5°C. La solución de éster activada anterior se agregó por goteo durante aproximadamente 50 min. La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente 0-5°C durante aproximadamente 90 min. La mezcla de reacción se detuvo mediante la adición de agua (120 mi) por goteo a aproximadamente 0-5°C durante aproximadamente 25 min. La mezcla de reacción detenida se agitó a aproximadamente 0-5°C durante aproximadamente 30 min, luego a temperatura ambiente durante aproximadamente 18 h. Se eliminó el THF bajo presión reducida para dar una suspensión de color blanco. La suspensión se dividió entre EtOAc (300 mi) y agua (200 mi). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 100 mi). La capa orgánica combinada se lavó con agua (50 mi) y salmuera (3 x 40 mi). La capa orgánica se secó sobre Na2S04 anhidro y concentró bajo presión reducida. El residuo se disolvió en MeOH caliente (100 mi) y concentró bajo presión reducida. El aceite se disolvió en MeOH caliente (60 mi) y se concentró bajo presión reducida para dar un sólido de color blanco. El sólido se disolvió en MeOH (36 g) y agua (12 g) a aproximadamente 55°C. La solución se enfrió a temperatura ambiente, luego a aproximadamente 5°C. Se agregó eOH/agua 3:1 adicional (40 mi) a la suspensión. La suspensión se filtró, lavó con MeOH/agua 1:1 (20 mi) y heptano (20 mi). La torta húmeda recogida se secó a aproximadamente 60°C en un horno de vacío durante aproximadamente 72 h para dar sulfoxonio, di metí I-, 2-(4-(dibencilamino)ciclohexil)-2-oxoetHuro (5.44 g, 79%) como un sólido de color blanco: LC/EM (Tabla 1, Método a) R, = 1.42, 1.45 min; EM m/z 398 (M + H)\ Etapa D: 1 -(4-(dibencilamino)ciclohex¡l)-2-(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-fc]pirazin-2-ilamino)etanona A un matraz de fondo redondo de 2 cuellos de 100 mi, se agregaron sulfoxonio, dimetil-, 2-(4-(dibencilamino)ciclohexil)-2-oxoetiluro (5.4 g, 13.6 mmol), 5-tosil-5/-/-pirrolo[2,3-£>]pirazin-2-amina (4.7 g, 16.3 mmol, Preparación No. E.1.1), y [lr(COD)CI]2 (0.365 g, 0.543 mmol. Alfa Aesar). El matraz de reacción se purgó con N2 durante aproximadamente 10 min. Al matraz de reacción, se agregó DCE pre-desgasificado (25 mi) mediante una jeringa. La mezcla de reacción se purgó con N2 durante aproximadamente 10 min y agitó bajo N2 a aproximadamente 70°C durante aproximadamente 3 h. La mezcla de reacción se dejó enfriar a temperatura ambiente y concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 5-70% de EtOAc : heptano para dar 1 -(4-(dibenc¡lam¡no)ciclohexil)-2-(5-tosil-5H-pirrolo[2, 3-b]pirazin-2-ilamino)etanona (5.8 g, 65%) como un sólido vitreo: LC/E (Tabla 1, Método a) Rt = 3.24 y 3.26 min; EM m/z 608 (M + H) + .
Etapa E: W,A/-dibencil-4-(3-tosil-3H-im¡dazo[1 ,2-a]pi rrolo[2,3-e]pirazin-8-il)ciclohexanamina Una mezcla de 1 -(4-(dibencilamino)ciclo exíl)-2-(5-tosil-5/-/-p¡rrolo[2,3-jb]p¡razin-2-¡lamino)etanona (5.8 g, 9.54 mmol) y PFPAA (23.7 g, 76 mmol) en MeCN (70 mi) se calentó a aproximadamente 50°C durante aproximadamente 17 h. Se agregó PFPAA (4.73 g, 15.2 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 60°C durante aproximadamente 7 h y a temperatura ambiente durante aproximadamente 72 h. El solvente se eliminó bajo presión reducida para dar N,N-dibencil-4-(3-tosil-3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2, 3-e]pirazin-8-il)ciclohexanamina (11.3 g crudo, pero se asumen 5.6 g, 100%) como una espuma: LC/EM (Tabla 1, Método b) R, = 3.03 y 3.09 min; EM m/z 590 (M + H) + .
Etapa F: (cis)-N, W-dibencil-4-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2, 3-e]pirazin-8-il)ciclohexanamina Se disolvió /V,A/-dibencil-4-(3-tosil-3--imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)ciclohexanamina (5.6 g, 9.5 mmol) en 1,4-dioxano (80 mi). Se agregó NaOH acuoso (2 N, 47.5 mi, 95 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 60°C durante aproximadamente 120 min. El solvente orgánico se eliminó bajo presión reducida y el residuo se extrajo con 2-metilo tetrahidrofurano (300 mi). La capa acuosa se extrajo con 2-métilo tetrahidrofurano (3 x 50 mi). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (30 mi), secaron sobre Na2S04 anhidro y concentraron bajo presión reducida. Al residuo se agregó ÉtOAc (500 mi). El sólido se retiró mediante filtración y el material filtrado se secó sobre Na2S04 anhidro y concentró bajo presión reducida. La purificación mediante cromatografía instantánea sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 1-8% de MeOH en EtOAc dio (cis)-N,N-dibencil-4-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)ciclohexanamina (1.0 g, 24%): LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 2.48 min; EM m/z 436 (M + H)+.
Etapa G: (c/s)-4-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)ciclohexanamina A una mezcla de (c/'s)-A/,A-dibencil-4-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8-il)ciclohexanamina (1.0 g, 2.3 mmol) en EtOH (30 mi) se agregó Pd(OH)2 sobre carbón (0.64 g, 0.46 mmol) y la mezcla resultante se agitó bajo una presión de hidrógeno de aproximadamente 30 psi en un agitador Parr a aproximadamente 50°C durante aproximadamente 7 h. El catalizador se retiró por filtración usando una almohadilla de Celite® y el material filtrado se concentró bajo presión reducida. El material se purificó mediante cromatografía quiral (Tabla 2, método 34). Las fracciones recogidas se combinaron, concentraron bajo presión reducida y trataron con EtOH (20 mi). El sólido resultante se secó en un horno al vacío a aproximadamente 60°C para dar (cis)-4-(3H-imidazo[1 ,2-a]pirrolo[2,3-e]pirazin-8- il)ciclohexanamina (0.353 g, 60%) como un sólido de color blanco: LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 0.85 min; EM m/z 256 (M + H)+. Ejemplo No. 40: 4-(6H-pi rrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4, 3-a]pirazin-8-il)piridin-2(1 H)-ona Se agregó ácido clorhídrico (4 M en 1,4-dioxano, 0.300 mi, 1.20 mmol) a una suspensión de 8-(2-metoxipiridin-4-il)-6/-/-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina (0.016 g, 0.060 mmol, (preparada usando D de la Preparación No. BBBBB.1 y NaOH, GGG.1 con NBS, K.1 con TsCI y NaH, CCCCC con 2-metoxi-4-(tributilestanil)piridina [Syntho ix], tetrakis(trifenilfosfinapaladio(0), LiCI, CsF, y Cul, D con NaOH) en EtOH (0.500 mi) y agua (0.050 mi). El matraz de reacción se selló y la mezcla se calentó a aproximadamente 80°C. Luego de aproximadamente 15 h, la mezcla se calentó a aproximadamente 90°C. Luego de aproximadamente 65 h, la solución se dejó enfriar a temperatura ambiente. Los volátiles se eliminaron bajo presión reducida para dar 4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]p¡razin-8-il)pirid¡n-2(1H)-ona (0.0153 g, 94%): LC/EM (Tabla 1, Método a) R, = 0.73 min; EM m/z 253 (M + H)+.
Ejemplo No. 41 :ciclopropilcarbamato de (1 R,3R,4S)-Z-eti\-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopeníilo Etapa A: 5-bromo-3-((trimetilsilil)etinil)pirazin-2-am¡na A una solución de 3,5-dibromopirazin-2-amina (125 g, 494 mmol), TEA (207.0 mi, 1483 mmol), e yoduro de cobre (I) (0.941 g, 4.94 mmol) en THF (1255 mi) se agregó PdCI2(PPh3)2 (3.47 g, 4.94 mmol). La mezcla de reacción se enfrió a aproximadamente -5-0°C y agregó una solución de (trimetilsilil)acetileno (65.0 mi, 470 mmol) en THF (157 mi) por goteo durante aproximadamente 15 min. La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente -5-0°C durante aproximadamente 1.5 h y luego se dejó entibiar a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción luego se filtró a través de una almohadilla de Celite® y lavó con THF hasta que cesó de eluir el producto. El material filtrado se concentró bajo presión reducida para dar un sólido de color pardo-naranja. El sólido se trituró y sónico con éter de petróleo tibio (p.eb. 30-60°C, 400 mi), enfrió a temperatura ambiente, recogió, lavó con éter de petróleo (p.eb. 30-60°C¡ 2 x 60 mi), y secó para dar 5-bromo-3-((trimetilsilil)etinil)pirazin-2-amina (124 g, 93%, 93% de pureza) como un sólido de color marrón: LC/EM (Tablia 1, Método b) Rt = 2.51 min; EM m/z: 270, 272 (M + H)\ Etapa B: 2-bromo-5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina A una solución de 5-bromo-3-((trimetilsilil)etinil)pirazin-2-amina (3.00 g, 11.1 mmol) en DMF (60 mi) a aproximadamente 0°C se agregó NaH (60% de dispersión en aceite mineral, 0.577 g, 14.4 mmol) en tres porciones. Luego de aproximadamente 15 min, se agregó p-toluencloruro de sulfonilo (2.75 g, 14.4 mmol) y la reacción se dejó calentar lentamente a temperatura ambiente. Luego de aproximadamente 16 h, la mezcla de reacción se vertió sobre hielo-agua fría (120 mi) y el precipitado se recogió mediante filtración al vacío. El sólido crudo se disolvió en DCM (15 mi) y purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con DCM para dar 2-bromo-5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]piraz¡na (2.16 g, 52%): LC/EM (Tabla 1, Método c) R, = 1.58 min; EM m/z: 352, 354 (M + H) + .
Etapa C: 2-(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)hidrazincarboxilato de ferc-butilo y 1 -(5-tosil-5W-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)hidrazincarboxilato de ferc-butilo A un matraz se agregó Pd2(dba)3 (3.90 g, 4.26 mmol), d¡-rerc-but¡l-(2,,4',6'-tri¡sopropilbifen¡l-2-il)fosfano (3.62 g, 8.52 mmol), y 1,4-dioxano (453 mi). La mezcla catalizador-ligando se desgasificó por medio de una purga vacío/nitrógeno (3 veces) y calentó a aproximadamente 80°C durante aproximadamente 10 min. Luego se agregaron 2-bromo-5-tosil-5H-p¡rrolo[2,3-6]p¡razina (30.0 g, 85 mmol), hidrazincarboxilato de tere-butilo (16.9 g, 128 mmol), y NaOf-Bu (12.28 g, 128 mmol). Luego de una purga adicional con vacío/nitrógeno, la reacción se calentó a aproximadamente 80°C. Luego de aproximadamente 50 min, la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y filtró a través de una almohadilla de gel de sílice (6 cm de altura x 6 cm de diámetro), cerrada con Celite® (1 cm de altura x 6 cm de diámetro), lavando con EtOAc (3 x 150 mi). Se agregó agua (300 mi) al material filtrado y la capa orgánica se separó. La capa acuosa se extrajo con EtOAc adicional (3 x 200 mi). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con NH4CI acuoso saturado, NaHC03 acuoso saturado, y salmuera (400 mi de cada uno), secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida para dar un aceite de color marrón oscuro (45 g). El aceite de color marrón se disolvió en DC (250 mi), agregó gel de sílice (200 g), y la mezcla se concentró bajo presión reducida. La mezcla de sílice resultante se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 25-65% de EtOAc en heptano para dar una mezcla de 2-(5-tosil-5H-pirrolo[2, 3-b]pirazin-2-il)hidrazincarboxilato de tere-butilo [regioisómero principal] y 1 -(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]piraz¡n-2-il)hidrazincarbox¡lato de tere-butilo [regioisómero secundario] (18.8 g, 50%): LC/EM (Tabla 1, Método c) R, = 1.47 min; EM m/z: 404 (M + H)+.
Etapa D: 2-hidrazinil-5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina A una mezcla de 2-(5-tosil-5-/-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)hidrazincarboxilato de rere-butilo y 1 -(5-tosil-5f-pirrolo[2,3-¿>]pirazin-2-il)hidrazincarboxilato de íerc-butilo (49.2 g, 122 mmol) en 1,4-dioxano (290 mi) se agregó HCI (4 M en 1,4-dioxano, 226 mi, 902 mmol). La reacción se calentó a aproximadamente 60°C durante aproximadamente 2.5 h y luego se enfrió a aproximadamente 15-20°C. El sólido se recogió mediante filtración al vacío, lavó con EtOAc (3 x 50 mi), y luego trituró con Et20 (60 mi), recogió mediante filtración al vacío y secó a peso constante bajo vacío para dar 35.6 g de sólido. El sólido se agitó con una mezcla de NaHC03 acuoso saturado y EtOAc (1:1, 400 mi). Luego de aproximadamente 1 h, el sólido se recogió mediante filtración al vacío, lavó con agua helada (3 x 30 mi) y EtOAc (3 x 30 mi), y secó en un horno de vacío a peso constante para dar 2-hidrazinil-5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina como un sólido de color tostado (21.2 g, 57%): LC/E (Tabla 1, Método a) Rt = 1.88 min; EM m/z: 304 (M + H) + .
Etapa E: 4-(etoxicarbonil)-3-etil-2-(metoxicarbonil)ciclopenta-1 ,3-dienolato de sodio Un matraz de fondo redondo se cargó con THF (1.5 I) seguido por la adición por porciones de NaH (60% de dispersión en aceite mineral, 70.0 g, 1.75 mol). Se agregó THF adicional (500 mi) y la mezcla resultante se enfrió a aproximadamente -10°C y agregó por goteo propionilacetato de etilo (250 mi, 1.80 mol) durante aproximadamente 1 h para mantener la temperatura interna por debajo de aproximadamente 10°C. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante aproximadamente 0.5 h para dar una solución de color amarillo traslúcida, y agregó por goteo 4-cloroacetoacetato de metilo (100 mi, 0.88 mol) durante aproximadamente 5 min. La mezcla resultante se calentó a aproximadamente 50°C durante aproximadamente 19 h para dar una suspensión rojiza anaranjada. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, concentró bajo presión reducida y el líquido resultante se transfirió a un vaso de precipitados y diluyó con agua (350 mi). La mezcla se agitó en un baño de hielo durante aproximadamente 2 h. El sólido se recogió mediante filtración al vacío y la torta de filtrado se enjuagó con agua (150 mi) y secó bajo vacío durante aproximadamente 1 h. El sólido se suspendió en Et20 (1.5 I), filtró, lavó con Et20 (1.5 I), y secó bajo vacío. El sólido resultante se formó una mezcla azeotrópica con tolueno (1 I) para dar un sólido que se suspendió nuevamente en Et20 (1 I) y recogió mediante filtración al vacío. La torta de filtrado se lavó con Et20 (500 mi) y secó bajo vacío para dar 4-(etoxicarbonil)-3-etil-2-(metoxicarbonil)ciclopenta-l ,3-dienolato de sodio (204.2 g, 89%) como un sólido de color beige: H RMN (DMSO-c/6) d 3.94 (q, J=7.1 Hz, 2H), 3.46 (s, 3H), 3.04 (q, J=7.2 Hz, 2H), 2.66 (s, 2H), 1.13 (t, J=7.1 Hz, 3H), 0.99 (t, J=7.3 Hz, 3H).
Etapa F: 2-etil-4-oxociclopent-2-encarboxilato de etilo Un matraz de fondo redondo de 5 I se cargó con 4-(etoxicarbonil)-3-etil-2-(metoxicarbonil)ciclopenta-1 ,3-dienolató de sodio (316 g, 1205 mmol), KCI (126 g, 1687 mmol, JT-Baker), AcOH (241 mi, 4218 mmol, JT-Baker), tolueno (1850 mi) y agua (130 mi). La reacción se calentó a reflujo durante aproximadamente 6 h luego se enfrió a temperatura ambiente y agregó por goteo a NaHC03 (8% acuoso, 3.5 I). La mezcla bifásica resultante se extrajo con MTBE (2 x 1.5 I). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (1 I), secaron sobre MgS04 anhidro y concentraron bajo presión reducida para dar 191 g de material crudo que se purificó mediante destilación al vacío (97-99°C, 0.600 mM Hg) para dar 2-etil-4-oxociclopent-2-encarboxilato de etilo (160 g, 69%): 1H RMN (CDCI3) d 6.04 (m, 1H), 4.26-4.15 (m, 2H), 3.76-3.69 (m, 1H), 2.75-2.57 (m, 2H), 2.56-2.44 (m, 2H), 1.32-1.26 (m, 3H), 1.23-1.18 (m, 3H).
Etapa G: 2-etil-4-hidroxiciclopentancarboxilato de etilo Una mezcla de cloruro de cobre (I) (0.136 g, 1.37 mmol), (S)-(-)-2,2'-bis(difenilfosfino)-1 , 1 '-binaftilo (0.854 g, 1.37 mmol), y NaOf-Bu (0.132 g, 1.37 mmol) en tolueno (50 mi) se agitó a temperatura ambiente durante aproximadamente 15 min luego enfrió a aproximadamente 5°C y agregó polimetilhidrosiloxano (12 mi, 55 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante aproximadamente 40 min a aproximadamente 5°C luego se enfrió a aproximadamente -12°C. Se agregó una solución de 2-eti I-4- oxoc¡clopent-2-encarbox¡lato de etilo (5.00 g, 27.4 mmol) y t-BuOH (14 mi, 148 mmol) en tolueno (50 mi) en una porción y la mezcla de reacción se agitó durante aproximadamente 16 h a aproximadamente -12°C. La mezcla de reacción se detuvo mediante la adición de MeOH (50 mi). Los solventes se eliminaron bajo presión reducida. El residuo se disolvió en MeOH (35 mi) y filtró a través de una almohadilla de Celite®. El material filtrado se concentró bajo presión reducida y el residuo se trituró con EtOAc (100 mi) y filtró. El material filtrado se concentró bajo presión reducida y el residuo se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice (280 g) eluyendo con un gradiente de 0-10% de EtOAc en heptano para dar una mezcla escalémica enriquecida con 2-etil-4-hidroxiciclopentancarboxilato de (1 S, 2R,4S)-etilo (1.11 g, 22%): 1H RMN (CDCI3) d 4.30 (m, 1H), 4.24 - 4.08 (m, 2H), 2.88 (td, J = 2.1, 7.1 Hz, 1H), 2.40 (dt, J = 7.8, 14.0 Hz, 1H), 2.08 - 1.91 (m, 3H), 1.52 - 1.31 (m, 3H), 1.29 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 0.94 (t, J = 7.4 Hz, 3H).
Etapa H: 4-nitrobenzoato de 3-(etoxicarbonil)-4-etilciclopentilo A trifenilfosfina (34.9 g, 133 mmol) en THF (150 mi) a aproximadamente 0°C se agregó una solución de DIAD (26.2 mi, 133 mmol) en THF (20 mi) mediante un embudo adicional. Luego de aproximadamente 30 min, se agregó una solución de ácido 4-nitrobenzoico (22.26 g, 133 mmol) en THF (150 ml) seguido por una solución de una mezcla escalémica enriquecida con (1 S,2R,4S)-2-etil-4-hidroxiciclopentancarboxilato de etilo (16.54 g, 89 mmol) en THF (20 ml) y trietilamina (55.7 ml, 400 mmol). Luego de aproximadamente 1 h, el baño de agua helada se retiró y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante aproximadamente 16 h. La mezcla de reacción se diluyó con heptano (800 ml), lavó con agua (200 ml), NaHC03 acuoso saturado (150 ml) y salmuera (150 ml), secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida. Luego de aproximadamente 300 ml del solvente se eliminó, el sólido se retiró por filtración y lavó con heptano (25 ml). El material filtrado se concentró bajo presión reducida y el residuo se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con 10-40% de EtOAc en heptano para dar una mezcla escalémica enriquecida con (1 R, 3S, 4R)-3-(etoxicarbonH)-4-etilciclopent¡lo 4-nitrobenzoato (26.77g, 90%): LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.84 min; EM m/z: 394 (M-H)\ Etapa I: 2-etil-4-hidroxiciclopentancarboxilato de etilo Un matraz de 2 I se cargó con hidróxido de sodio recién molido (9.55 g, 239 mmol). Se agregó etanol (500 ml) y la mezcla se agitó hasta que todos los sólidos se disolvieron. Se agregó una solución de una mezcla escalémica enriquecida eri 4-n i tro benzoato de (1 R,3S,4fi)-3-(etoxicarbonil)-4-etilciclopentilo (16.02 g, 47.8 mmol) en etanol (120 mi) mediante un embudo adicional. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. El sólido se retiró por filtración lavando con DCM (100 mi). NaHC03 acuoso saturado (800 mi) se agregó al material filtrado y la mezcla se agitó durante aproximadamente 30 min. El sólido formado se retiró por filtración lavando con DCM (500 mi). El material filtrado se lavó con NaHC03 acuoso saturado (2 x 200 mi) y salmuera (300 mi). La capa orgánica se secó sobre MgS04 anhidro, filtró y concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con 0-60% de EtOAc en DCM para dar una mezcla escalémica enriquecida en (1 S,2R,4R)-2-etil-4-hidroxiciclopentancarboxilato de etilo (5.49 g, 62%) como un aceite incoloro: H RMN (400 MHz, CDCI3) d 4.53 (m, 1H), 4.11 (m, 2H), 3.09 (m 1H), 2.40 (m, 1H), 2.28 (m, 1H), 1.80 (m, 1H), 1.68 (m, 1H), 1.44 (m, 2H), 1.26 (t, 3H), 1.18 (m, 1H), 0.92 (t, 3H).
Etapa J: ácido 2-etil-4-hidroxiciclopentancarboxílico Se agregó hidróxido de sodio acuoso (1N, 32.4 mi, 32.4 mmol) a una mezcla escalémica enriquecida en (1 S,2R,4 )-2-etil-4-hidroxiciclopentancarboxilato de etilo (3.02 g, 16.21 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Se agregó éter (15 mi) y las capas se separaron. La capa acuosa se enfrió a aproximadamente 0°C. Se agregó lentamente HCI acuoso (5N) para llevar el pH a aproximadamente 1. La suspensión acuosa se extrajo con EtOAc (4 x 40 mi). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (50 mi), secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron y concentraron bajo presión reducida para dar una mezcla escalémica enriquecida en ácido (1 S,2R,4R)-2-etil-4-hidroxiciclopentancarboxílico (2.56 g, 100%): LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 1.36 min; EM m/z: 157 (M-H)\ Etapa K: ácido 4-(ferc-butildimetilsililoxi)-2-etilciclopentancarboxílico A una mezcla escalémica enriquecida en ácido (1S,2R,4ft)-2-etil-4-hidroxiciclopentancarboxílico (2.56 g, 16.21 mmol) en DMF (10.81 mi) se agregó TBDMSCI (2.93 g, 19.45 mmol) e imidazol (2.76 g, 40.5 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante aproximadamente 2 días luego se extrajo con pentano (3 x 25 mi). Las capas de pentano combinadas se lavaron con agua (25 mi) y salmuera (25 mi), secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron y concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con 20-100% de EtOAc en heptano para dar una mezcla escalémica enriquecida en ácido (1 S,2R,4R)-4-(terc-butildimetHsililoxi)-2-etilciclopentancarboxílico (1. 3 g, 26%): LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 3.03 min; EM m/z: 273 (M + H) + .
Etapa L: 4-(ferc-buti Idimeti Isil i loxi)-2-et¡ l-AT-(5-tos¡ I-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)ciclopentancarbohidrazida A una mezcla escalémica enriquecida en ácido (1S,2R,4ft)-4-(íerc-butildimetilsililoxi)-2-etilciclopentancarboxílico (1.62 g, 5.96 mmol) en DCM (60 mi) se agregó 2-hidrazinil-5-tosíl-5--pirrolo[2,3-¿>]pirazina (Ejemplo No. 1, Etapa D, 1.86 g, 6.13 mmol), HATU (2.38 g, 6.26 mmol) y TEA (3.32 mi, 23.8 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante aproximadamente 1 h. La mezcla de reacción se diluyó con DCM (200 mi), lavó con agua (50 mi) y salmuera (50 mi), secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con 0-30% de EtOAc en DCM para dar una mezcla escalémica enriquecida en (1 S, 2R,4R)-4-(terc-butildimetHsililoxi)-2-etil-N'-(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]piraz¡n-2-il)ciclopentancarbohidrazida (2.64 g, 79%) como un sólido de color marrón: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 3.20 min; EM m/z: 558 (M+H)\ Etapa M : 4-(ferc-but"ildimetilsililoxi)-2-etilciclopentil)-6-tosil-6W-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina A una mezcla escalémica enriquecida en (1 S,2R,4R)-4-(rerc-butildimetilsililoxi)-2-etil-/V'-(5-tosil-5--pirrolo[2,3-ü]pirazin-2-il)ciclopentancarbohidrazida (2.6 g, 4.66 mmol) en 1,4-dioxano (46.6 mi) se agregó diisopropiletilamina (3.26 mi, 18.65 mmol) y luego se agregó por goteo cloruro de tionilo (0.680 mi, 9.32 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante aproximadamente 1 h y luego calentó a aproximadamente 70°C durante aproximadamente 1 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y agregó EtOAc (300 mi). La mezcla se lavó con agua (80 mi) y salmuera (80 mi), secó sobre MgS04 anhidro, filtró, y concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con 0-50% de EtOAc en DCM para dar una mezcla escalémica enriquecida en 1 -((1 S,2R,4R)-4-(terc-butildimetilsililoxi)-2-etilciclopentil)-6-tosil-6H-pirrolo[2, 3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina (1.56 g, 62%): LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 3.36 min; EM m/z: 540 (M + H) + .
Etapa N: 3-etil-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentanol Una mezcla escalémica enriquecida en 1 -((1 S,2R,4R)-4-(ferc-butildimetilsililoxi)-2-etilc¡clopentil)-6-tosil-6/--pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina (1.55 g, 2.87 mmol) se suspendió en etanol (30 mi). Se agregó por goteo HCI concentrado (0.3 mi, 3.65 mmol). Luego de aproximadamente 1 h., la suspensión se sónico hasta que todos los sólidos se disolvieron. Se agregó EtOAc (250 mi) y las capas orgánicas se lavaron con NaHC03 acuoso saturado (2 x 30 mi) y salmuera (30 mi), se secó sobre MgS0 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con 30-80% de EtOAc en DCM para dar una mezcla escalémica enriquecida en (1 R,3R,4S)-3-et¡l-4-(6-tosil-6H- pirro lo [2, 3-e][1 ,2, 4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentanol (1.09 g, 90%): LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 1.99 min; EM m/z: 426 (M + H) + .
Etapa O: 4-nitrofenilcarbonato de3-etil-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentilo A una mezcla escalémica enriquecida en (1 f?,3R,4S)-3-etil-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][ ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentanol (1.20 g, 2.82 mmol) en piridina (10 ml) se agregó DMAP (0.103 g, 0.846 mmol) y carbonoclorhidrato de 4-nitrofenilo (0.853 g, 4.23 mmol). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante aproximadamente 1 h. La mezcla de reacción se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con 0-30% de EtOAc en DCM para dar una mezcla escalémica enriquecida en 4-nitrofenilcarbonato de (1 R,3R,4S)-3-etil-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2, 3-e][1,2, 4]triazolo[4, 3-a]pirazin-1 -il)ciclopentilo (0.72 g. 43%): LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.64 min; EM m/z: 591 (M + H)+.
Etapa P: ciclopropilcarbamato de (1 ?,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentilo A una mezcla escalémica enriquecida en 4-nitrofenilcarbonato de (1 f?,3R,4S)-3-etil-4-(6-tosil-6-/-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4ltriazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentilo (0.211 g, 0.357 mmol) en 1,4-dioxano (1.5 mi) se agregó ciclopropanamina (0.102 g, 1.786 mmol). Luego de aproximadamente 1 h, se agregó NaOH acuoso (1N, 1.5 mi, 1.5 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 60°C durante aproximadamente 30 min, luego se enfrió a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se extrajo con DCM (3 x 5 mi). Los solventes orgánicos combinados se concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con 0-100% de EtOAc:MeOH (9:1) en EtOAc para dar ciclopropilcarbamato de (1R, 3R, 4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2, 3-e][1,2, 4]triazolo[4, 3-a]pirazin-1-il)ciclopentilo (0.0847 g, 67%): LC/EM (Tabla 1, Método b) R, = 1.73 min; EM m/z: 355 (M + H) + .
Ejemplo No. 42: ciclobutilcarbamato de (1 S,3A?,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il) ciclopentilo Etapa A: 5-bromo-3-((trimetilsilil)etinil)p¡raz¡n-2-amina A una solución de 3,5-dibromopirazin-2-amina (125 g, 494 mmol), TEA (207.0 mi, 1483 mmol), e yoduro de cobre (I) (0,941 g, 4.94 mmol) en THF (1255 mi) se agregó PdCI2(PPh3)2 (3.47 g, 4.94 mmol). La mezcla de reacción se enfrió a aproximadamente -5-0°C y agregó por goteo una solución de (trimetilsilil)aceti(eno (65.0 mi, 470 mmol) en THF (157 mi) durante aproximadamente 15 min. La mezcla de reacción se agitó a aproximadamente -5-0°C durante aproximadamente 1.5 h y luego dejó entibiar a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción luego se filtró a través de una almohadilla de Celtte® y lavó con THF hasta que cesó de eluir el producto. El material filtrado se concentró bajo presión reducida para dar un sólido de color pardo-naranja. El sólido se trituró y sónico con éter de petróleo tibio (p.eb. 30-60°C, 400 mi), enfrió a temperatura ambiente, recogió, lavó con éter de petróleo (p.eb. 30-60°C; 2 x 60 mi), y secó para dar 5-bromo-3-((trimetilsilil)etinil)pirazin-2-amina (124 g, 93%, 93% de pureza) como un sólido de color marrón: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.51 min; EM m/z: 270, 272 (M + H)\ Etapa B: 2-bromo-5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazina A una solución de 5-bromo-3-((trimetilsilil)etinil)pirazin-2-amina (3.00 g, 11.1 mmol) en DMF (60 mi) a aproximadamente 0°C se agregó NaH (60% de dispersión en aceite mineral, 0.577 g, 14.4 mmol) en tres porciones. Luego de aproximadamente 15 min, se agregó p-toluencloruro de sulfonilo (2.75 g, 14.4 mmol) y la reacción se dejó calentar lentamente a temperatura ambiente. Luego de aproximadamente 16 h, la mezcla de reacción se vertió sobre hielo-agua fría (120 mi) y el precipitado se recogió mediante filtración al vacío. El sólido crudo se disolvió en DCM (15 mi) y purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con DCM para dar 2-bromo-5-tosil-5H-pirrolo[2,3-bjpirazina (2.16 g, 52%): LC/EM (Tabla 1, Método c) Rt = 1.58 min; EM m/z: 352, 354 (M + H) + .
Etapa C: 2-(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2- ¡l)hidrazincarboxilato de íerc-butilo y 1 (5-tosil-5H-pirrolo[2,3-to]pirazin-2-il)hidrazincarboxilato de íerc-butilo A un matraz se agregó Pd2(dba)3 (3.90 g, 4.26 mmol), di-ferc-butil-(2,,4',6'-triisopropilbifenil-2-il)fosfano (3.62 g, 8.52 mmol), y 1,4-dioxano (453 mi). La mezcla catalizador-ligando se desgasificó por medio de una purga vacío/nitrógeno (3 veces) y calentó a aproximadamente 80°C durante aproximadamente 10 min. Luego se agregaron 2-bromo-5-tosil-5/-/-pirrolo[2,3-b]pirazina (30.0 g, 85 mmol), hidrazincarboxilato de rere-butilo (16.9 g, 128 mmol), y NaOf-Bu (12.28 g, 128 mmol). Luego de una purga adicional con vacío/nitrógeno, la reacción se calentó a aproximadamente 80°C. Luego de aproximadamente 50 min, la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y filtró a través de una almohadilla de gel de sílice (6 cm de altura x 6 cm de diámetro), con cubierta de Celite® (1 cm de altura x 6 cm de diámetro), lavando con EtOAc (3 x 150 mi). Se agregó agua (300 mi) al material filtrado y la capa orgánica se separó. La capa acuosa se extrajo con EtOAc adicional (3 x 200 mi). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con NH4CI acuoso saturado, NaHC03 acuoso saturado, y salmuera (400 mi de cada uno), secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida para dar un aceite de color marrón oscüro (45 g). El aceite de color de color marrón se disolvió en DCM (250 mi), agregó gel de sílice (200 g), y la mezcla se concentró bajo presión reducida. La mezcla de sílice resultante se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 25-65% de EtOAc en heptano para dar una mezcla de 2-(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)hidrazincarboxilato de ferc-butilo [regioísómero principal] y 1 -(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)hidrazincarboxilato de ferc-butilo [regioísómero secundario] (18.8 g, 50%): LC/EM (Tabla 1, Método c) R, = 1.47 min; EM m/z: 404 (M + H)+.
Etapa D: 2-hidrazinil-5-tosil-5W-p¡rrolo[2,3-b]pirazina A una mezcla de 2-(5-tos¡l-5/7-p¡rrolo[2,3-b]p¡razin-2-¡l)hidrazincarboxílato de rere-butilo y 1 -(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-¿>]pirazin-2-il)hidrazincarboxilato de ferc-butilo (49.2 g, 122 mmol) en ,4-dioxano (290 mi) se agregó HCI (4 M en 1,4-dioxano( 226 mi, 902 mmol). La reacción se calentó a aproximadamente 60°C durante aproximadamente 2.5 h y luego se enfrió a aproximadamente 15-20°C. El sólido se recogió mediante filtración al vacío, lavó con EtOAc (3 x 50 mi), y luego trituró con Et20 (60 mi), recogió mediante filtración al vacío y secó a peso constante bajo vacío para dar 35.6 g de sólido. El sólido se agitó con una mezcla de NaHC03 acuoso saturado y EtOAc (1:1, 400 mi). Luego de aproximadamente 1 h, el sólido se recogió mediante filtración al vacío, lavó con agua helada (3 x 30 mi) y EtOAc (3 x 30 mi), y secó en un horno de vacío a peso constante para dar 2-hidrazinil-5-tosil-5H-p¡rrolo[2,3-b]pirazina como un sólido de color tostado (21.2 g, 57%): LC/EM (Tabla 1, Método a) Rt = 1.88 min; EM m/z: 304 (M + H) + .
Etapa E: 4-(etoxicarbonil)-3-etil-2-(metoxicarbonil)ciclopenta-1 ,3-dienolato de sodio Un matraz de fondo redondo se cargó con THF (1.5 I) seguido por la adición por porciones de NaH (60% de dispersión en aceite mineral, 70.0 g, 1.75 mol). Se agregó THF adicional (500 mi) y la mezcla resultante se enfrió a aproximadamente -10°C y agregó por goteo propionilacetato de etilo (250 mi, 1.80 mol) durante aproximadamente 1 h para mantener la temperatura interna por debajo de aproximadamente 10°C. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante aproximadamente 0.5 h para dar una solución de color amarillo traslúcida, y agregó por goteo 4-cloroacetoacetato de metilo (100 mi, 0.88 mol) durante aproximadamente 5 min. La mezcla resultante se calentó a aproximadamente 50°C durante aproximadamente 19 h para dar una suspensión rojiza anaranjada. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, concentró bajo presión reducida y el líquido resultante se transfirió a un vaso de precipitados y diluyó con agua (350 mi). La mezcla se agitó en un baño de hielo durante aproximadamente 2 h. El sólido se recogió mediante filtración al vacío y la torta de filtrado se enjuagó con agua (150 mi) y secó bajo vacío durante aproximadamente 1 h. El sólido se suspendió en Et20 (1.5 l), filtró, lavó con Et20 (1.5 I), y secó bajo vacio. El sólido resultante se formó una mezcla azeotrópica con tolueno (1 I) para dar un sólido que se suspendió nuevamente en Et20 (1 I) y recogió mediante filtración al vacío. La torta de filtrado se lavó con Et20 (500 mi) y secó bajo vacío para dar 4-(etoxicarbonil)-3-etil-2-(metoxicarbonil)ciclopenta-1 ,3-dienolato de sodio (204.2 g, 89%) como un sólido de color beige: 1H RMN (DMSO-d6) d 3.94 (q, .7=7.1 Hz, 2H), 3.46 (s, 3H), 3.04 (q, J=7.2 Hz, 2H), 2.66 (s, 2H), 1.13 (t, J=7.1 Hz, 3H), 0.99 (t, J=7.3 Hz, 3H).
Etapa F: 2-etil-4-oxociclopent-2-encarbox¡lato de etilo Un matraz de fondo redondo de 5 I se cargó con 4-(etoxicarbonil)-3-etil-2-(metoxicarbonil)ciclopenta-1,3-dienolato de sodio (316 g, 1205 mmol), KCI (126 g, 1687 mmol, JT-Baker), AcOH (241 mi, 4218 mmol, JT-Baker), tolueno (1850 mi) y agua (130 mi). La reacción se calentó a reflujo durante aproximadamente 6 h, luego se enfrió a temperatura ambiente y agregó por goteo a NaHC03 (8% acuoso, 3.5 I). La mezcla bifásica resultante se extrajo con MTBE (2 x 1.5 I). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (1 I), secaron sobre MgS04 anhidro y concentraron bajo presión reducida para dar 191 g de material crudo que se purificó mediante destilación al vacío (97-99°C, 0.600 mM Hg) para dar 2-etil-4-oxociclopent-2-encarboxilato de etilo (160 g, 69%): 1H RMN (CDCI3) d 6.04 (m, 1H), 4.26-4.15 (m, 2H), 3.76-3.69 (m, 1H), 2.75-2.57 (m, 2H), 2.56-2.44 (m, 2H), 1.32-1.26 (m, 3H), 1.23-1.18 (m, 3H).
Etapa G: 2-etil-4-hidroxiciclopentancarboxilato de etilo Se agitó una mezcla de cloruro de cobre (I) (0.136 g, 1.37 mmol), (S)-(-)-2,2'-bis(difenilfosfino)-1,1'-binaftilo (0.854 g, 1.37 mmol), y NaOf-Bu (0.132 g, 1.37 mmol) en tolueno (50 mi) a temperatura ambiente durante aproximadamente 15 min, luego se enfrió a aproximadamente 5°C y agregó polimetilhidrosiloxano (12 mi, 55 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante aproximadamente 40 min a aproximadamente 5°C luego se enfrió a aproximadamente -12°C. Se agregó en una porción una solución de 2-etil-4-oxoc¡clopent-2-encarbox¡lato de etilo (5.00 g, 27.4 mmol) y í-BuOH (14 mi, 148 mmol) en tolueno (50 mi) y la mezcla de reacción se agitó durante aproximadamente 16 h a aproximadamente -12°C. La mezcla de reacción se detuvo mediante la adición de MeOH (50 mi). Los solventes se eliminaron bajo presión reducida. El residuo se disolvió en MeOH (35 mi) y filtró a través de una almohadilla de Celite®. El material filtrado se concentró bajo presión reducida y el residuo se trituró con EtOAc (100 mi) y filtró. El material filtrado se concentró bajo presión reducida y el residuo se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con un gradiente de 0-10% de EtOAc en heptano para dar una mezcla escalémica enriquecida con 2-etil-4-hidroxiciclopentancarboxilato de (1 S,2R,4S)-etilo (1.11 g, 22%): H RMN (CDCI3) d 4.30 (m, 1H), 4.24 - 4.08 (m, 2H), 2.88 (td, J = 2.1, 7.1 Hz, 1H), 2.40 (dt, J = 7.8, 14.0 Hz, 1H), 2.08 -1.91 (m, 3H), 1.52 - 1.31 (m, 3H), 1.29 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 0.94 (t, J = 7.4 Hz, 3H).
Etapa H: ácido2-etil-4-hidroxiciclopentancarboxílico Se agregó NaOH acuoso (1 N, 12 mi, 12 mmol) a una mezcla escalémica enriquecida en (1 S,2R,4S)-2-et¡l-4-hidroxiciclopentancarboxilato de etilo (1.11 g, 5.96 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante aproximadamente 3 días y luego extrajo con Et20 (3 x 25 mi). Los extractos de Et20 se descartaron y la porción acuosa se enfrió a aproximadamente 0°C. Se agregó lentamente HCI acuoso (5 N) para llevar el pH a aproximadamente 2. La suspensión acuosa resultante se extrajo con EtOAc (3 x 40 mi). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (2 x 80 mi), secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida para dar una mezcla escalémica enriquecida en ácido (1 S,2R,4S)-2-etil-4-hidroxiciclopentancarboxílico (0.943 g, 100%) como un aceite traslúcido: 1H RMN (CDCI3) d 4.36 (tdd, J = 2.6, 4.9, 7.4, 1H), 2.95 (td, J = 2.4, 7.3, 1H), 2.41 (dt, J = 7.7, 14.1, 1H), 2.16 -1.94 (m, 3H), 1.65 - 1.49 (m, 1H), 1.49 - 1.32 (m, 2H), 0.96 (q, J = 7.4, 3H).
Etapa I: 5-etil-2-oxabiciclo[2.2.1]heptan-3-ona A una mezcla escalémica enriquecida en ácido (1S,2R,4S)-2-etil-4-hidroxiciclopentancarboxílico (0.943 g, 5.96 mmol) en DCM (60 mi) se agregó TEA (2.5 mi, 18 mmol) y BOP-CI (1.821 g, 7.15 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante aproximadamente 2 h, luego vertió sobre Et20 (350 mi). El sólido se retiró mediante filtración lavando con Et20 (50 mi). El material filtrado se concentró bajo presión reducida para dar un aceite de color amarillo que se disolvió en DCM (5 mi) y Et20 se agregó para dar un sólido. El sobrenadante se decantó y el sólido lavó con Et20 adicional. Los extractos orgánicos combinados se concentraron bajo presión reducida para dar una mezcla escalémica enriquecida en (1 S,4S, 5R)-5-et¡l-2-oxabiciclo[2.2.1]heptan-3-ona cruda que contenía aproximadamente 15% mol de TEA (0.912 g, 99%): 1H RMN (CDCI3) d 4.85 (s, 1H), 2.88 (s, 1H), 2.19 (m, 2H), 2.08 (m, 1H), 1.69 (m, 1H), 1.41 (m, 3H), 0.97 (t, J = 5.4, 3H).
Etapa J: 2-etil-4-hidroxi-/V'-(5-tos¡l-5H-p¡rrolo[2,3-b]piraz(n-2-il)ciclopentancarbohidrazida A una mezcla escalémica enriquecida en (1 S(4S,5 )-5*-etil-2-oxabiciclo[2.2.1] eptan-3-ona (0.835 g, 5.96 mmol) en 1,4-dioxano (12 mi) se agregó 2-hidrazinil-5-tosil-5 -/-pirrolo[2,3-ib]pirazina (Etapa D, 1.810 g, 5.96 mmol). La mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 80°C durante aproximadamente 16 h luego enfrió a temperatura ambiente. Se agregaron en forma secuencial 1,4-dioxano (25 mi) y trimetilaluminio (2 N en tolueno, 9 mi, 18 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante aproximadamente 30 min, luego agregó por goteo HCI acuoso (1 N, 50 mi) y la mezcla de reacción se agitó durante aproximadamente 30 min. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 100 mi). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con agua (10 mi), NaHC03 acuoso saturado (15 mi), salmuera (15 mi) y secaron sobre MgS04 anhidro, filtraron, y concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con 100% de EtOAc para dar una mezcla escalémica enriquecida en (1 S,2R,4S)-2-etil-4-hidroxi-N'-(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)ciclopentancarbo-hidrazida (1.887 g, 71%): LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 2.05 min; EM m/z: 444 (M + H) + .
Etapa K: 4-(ferc-buti Id imeti Isil iloxi)-2-eti l-W-(5-tosi I-5H-pirrolo[2,3-£)]pirazin-2-¡l)ciclopentancarboh¡drazida A una mezcla escalémica enriquecida en (1 S,2R,4S)-2-etil-4-hidroxi-A/'-(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-ib]pirazin-2-il)ciclopentancarbo-hidrazida (9.06 g, 20.43 mmol) en DMF (40.9 mi) se agregó TBDMSCI (3.69 g, 24.51 mmol) e imidazol (3.48 g, 51.1 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante aproximadamente 4 h. El solvente se eliminó bajo presión reducida. El residuo se diluyó con EtOAc (200 mi), filtró, y lavó con EtOAc (20 mi). El material filtrado se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con 0-50% de EtOAc en DCM para dar una mezcla escalémica enriquecida en (1 S, 2R,4S)-4-(terc-butild¡metilsililoxi)-2-etil-N'-(5-tosil-5H-pirrolo[2,3-b]pirazin-2-il)ciclopentancarbohidrazida (11.37 g, 100%) como un sólido anaranjado: LC/EM (Tabla 1, Método b) Rt = 3.14 min; EM m/z: 558 (M + H) + .
Etapa L: 4-(ferc-butildimetilsililoxi)-2-etilc¡clopentil)-6-tosil-6H-p¡ rrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]p¡ razina A una mezcla escalémica enriquecida en (1 S,2R,4S)-4-(rerc-butildimetilsililoxi)-2-etil-/V'-(5-tosil-5 -/-pirrolo[2,3-)]pirazin-2-il)ciclopentancarbohidrazida (11.37 g, 20.38 mmol) en 1,4-dioXano (204 mi) se agregó DIEA (14.24 mi, 82 mmol) seguido por cloruro de tionilo (2.98 mi, 40.8 mmol) por goteo durante aproximadamente 25 min. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante aproximadamente 1 h y calentó a aproximadamente 70°C durante aproximadamente 1 h. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y e agregó EtOAc (600 mi). La mezcla orgánica se lavó con agua (80 mi) y salmuera (80 mi), secó sobre MgS04 anhidro, filtró y concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con 0-50% de EtOAc en DCM para dar una mezcla escalémica enriquecida en 1-((1 S,2R,4S)-4-(terc-butildimetilsililoxi)-2-etilc¡clopentil)-6-tosH-6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]t azolo[4,3-a]pirazina (9.58 g, 87%). LC/EM (Tabla 1, Método b) R, = 3.24 min; EM m/z: 540 (M + H) + . Etapa M: 3-et¡l-4-(6-tos¡l-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4] triazolo[4, 3-a]pirazin-1-il)ciclopentanol Una mezcla escalémica enriquecida en 1 -((1 S,2R,4S)-4-(íerc-butildimetilsililoxi)-2-etilciclopentil)-6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazina (9.58 g, 17.8 mmol) se disolvió en etanol (177 mi). Se agregó por goteo HCI concentrado (1.75 mi, 21.3 mmol). Luego de aproximadamente 1 h, se agregó EtOAc (700 mi). La mezcla orgánica se lavó con NaHC03 acuoso saturado (2 x 120 mi), salmuera (120 mi), secó sobre MgS04 anhidro, filtró y concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con 30-100% de EtOAc en DCM para dar una mezcla escalémica enriquecida en (1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentano¡ (6.73 g, 89%): LC/EM (Tabla 1, Método b) R, = 2.11 min; EM m/z: 426 (M + H) + . Etapa N: 4-nitrofenilcarbonato de 3-etil-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]piraz¡n-1 -il)ciclopentilo A una mezcla escalémica enriquecida en (1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6-tosil-6H-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentanol (6.11 g, 14.4 mmol) en piridina (100 mi) se agregó DMAP (1.93 g, 15.8 mmol) y carbonoclorhidrato de 4-nitrofenilo (4.34 g, 21.5 mmol). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante aproximadamente 3.5 h y calentó a aproximadamente 33°C durante aproximadamente 1 ,h. El sólido se retiró por filtración y lavó con EtOAc (30 mi). El filtrado se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con 0-30% de EtOAc en heptano para dar una mezcla escalémica enriquecida en 4- nitrofenilcarbonato de (1S, 3R, 4S)-3-etil-4-(6-tosil-6H-p¡rrolo[2, 3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1-il)ciclopentilo (6.63, 78%). LC/EM (Tabla 1, Método b) R, = 2.65 min; EM m/z: 591 (M + H) + .
Etapa O: ciclobutilcarbamato de (1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-p¡rrolo[2,3-e][1,2,4]triazolo[4,3-a]p¡raz¡n-1-il)ciclopentilo Una solución de una mezcla escalémica enriquecida en 4-nitrofenilcarbonato de (1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6-tosil-6/-/-pirrolo[2,3-e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)ciclopentilo (0.150 g, 0,254 mmol) en 1,4-dioxano (1 mi) se agregó a una solución de ciclobutanamina (0.090 g, 1.27 mmol) en 1,4-dioxano (0.2 mi). Luego de aproximadamente 1 h, se agregó NaOH acuoso (1 N, 1.5 mi, 1.50 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 60°C durante aproximadamente 2 h antes de enfriar a temperatura ambiente. El solvente orgánico se eliminó bajo presión reducida. La mezcla de capas acuosas resultantes se acidificó con AcOH a un pH de aproximadamente 5 y extrajo con DCM (3 x 5 mi). Los extractos orgánicos combinados se concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante HPLC preparativa (Tabla 1 método d) para dar ciclobutilcarbamato de (1 S,3R,4S)-3-etil-4-(6H-pirrolo[2,3- e][1 ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-1 -il)cíclopentilo (0.0468 g, 50%): LC/EM (Tabla 1, Método c) R, = 1.17 min; EM m/z: 369 (M + H) + . Tabla 4. Datos de enzima Jak3 para compuestos seleccionados Enzima Ejemplo* JAK3 Cl50 A.1.105 B A.1.65 B A.1.78 A AA.1.10 B AA.1.100 C AA.1.101 A AA.1.102 C AA.1.103 A AA.1.104 A AA.1.106 C AA.1.107 A AA.1.11 A AA.1. 2 A AA.1.16 B AA.1.18 A AA.1.22 A AA.1.25 A AA.1.29 C AA.1.3 B AA.1.32 B AA.1.33 B AA.1.37 B 5 AA.1.42 C AA.1.43 A AA.1.44 B AA.1.49 A AA.1.5 B 10 AA.1.54 B AA.1.6 A AA.1.60 B AA.1.61 B AA.1.62 B 15 AA.1.63 C AA.1.64 C AA.1.66 C AA.1.67 C AA.1.76 C 20 AA.1.77 A AA.1.79 A AA.1.8 A AA.1.80 C AA.1.81 A 25 A A.1.9 B AA.1.90 B AA.1.91 B AA.1.92 A AA.1.93 C 5 AA.1.94 B AA.1.95 C AA.1.96 C AA.1.97 C AA.1.98 A 10 AA.1.99 B D.1.10 B D.1.11 B D.1.12 B D.1.13 B 15 D.1.21 B D.1.22 B D.1.24 B D.1.25 A D.1.29 B 20 D.1.30 B D.1.31 A D.1.33 C D.1.35 A D.1.38 B 25 D.1.39 B D.1.45 D.1.46 D.1.47 D.1.49 D.1.50 D.1.51 D.1.52 D.1.54 D.1.56 D.1.58 D.1.59 D.1.60 D.1.61 D.1.62 D.1.63 D.1.64 D. .65 D.1.66 D.1.67 D. .69 D.1.70 D.1.71 D.1.72 D.1.73 D.1.76 D.1.77 B D.1.78 A D.1.79 A D.1.80 A 5 D.1.81 A D.1.82 B D.1.83 A D.1.84 B D.2.10 C 10 D.2.11 B D.2.13 A D.2.15 B D.2.19 B D.2.21 B 15 D.2.22 B D.2.23 C D.2.24 A D.2.5 B D.2.6 C 20 DD.1.1 A Ejemplo No. 29 A Ejemplo No. 30 B Ejemplo No. 31 B Ejemplo No. 14 A 25 Ejemplo No. 17 A Ejemplo No. 18 B Ejemplo No. 21 B Ejemplo No. 22 C Ejemplo No. 23 A Ejemplo No. 24 A Ejemplo No. 25 A Ejemplo No. 26 B Ejemplo No. 27 C Ejemplo No. 28 C Ejemplo No. . 3 A Ejemplo No. 32 B Ejemplo No. 4 A Ejemplo No. 5 B Ejemplo No. . 6 B Ejemplo No. 8 B Ejemplo No. 9 B H.1.1 A H.1.10 A H.1.2 A H.1.21 A H.1.25 A H.1.29 A H.1.6 A H.3.14 B H.4.1 B I.1.1 A 1.1.2 A 5 1.2.1 A I.2.2 A 1.3.1 B J.1.1 A J.2.1 A 10 J.2.10 A J.2.11 A J.2.12 A J.2.13 A J.2.14 A 15 J.2.15 A J.2.2 A J.2.3 A J.2.5 A J.2.6 A 20 J.2.7 A J.2.8 A J.2.9 A J.3.1 A J.3.10 A 25 J.3. 1 A J.3.2 A J.3.4 A J.3.6 B J.3.7 B J.3.8 B K.3.1 B K.4.1 A K.5.1 A L.1.2 A L.1.4 A LL.1.1 B LL.1.2 C LL.1.3 C LL.1.4 C Preparación No.
B GGG.1 QQ.1.4 A UUU.1.1 A UUU.1.1 A YY.1.1 C YY.1.2 C Clave: A <0.1 µ? B 0.1-1 µ? C >1 µ?

Claims (25)

  1. REIVINDICACIONES 1. Un compuesto CARACTERIZADO PORQUE tiene Fórmula (I) Fórmula , sales farmacéuticamente aceptables, profármacos, metabolitos biológicamente activos, estereoisómeros e isómeros del mismo donde T es N, U es N, X es CR3 e Y es N; o T es CR6, U es N, X es CR3 e Y es N; o T es N, U es CR4, X es CR3 e Y es N; o T es CR6, U es CR4, X es CR3 e Y es N; o T es CR6, U es N, X es NR3 e Y es C; o T es O, U es N, X es CR3 e Y es C; o T es NR6, U es N, X es CR3 e Y es C; o T es CR6, U es CR4, X es NR3 e Y es C; o T es S, U es N, X es CR3 e Y es C; o T es N, U es CR4, X es NR3 e Y es C; o T es N, U es N, X es NR3 e Y es C; R1 R2 y R5 son en forma independiente entre sí hidrógeno, deuterio, -N(Ra)(Rb), halógeno, -ORa, -SRa, -S(0)Ra, -S(0)2Ra, -N02, -C(0)ORa, -CN, -C(0)N(Ra)(Rb), -N(Ra)C(0)(Rb) , -C(0)Ra, -C(OH)RaRb, -N(Ra)S(0)2-Rb, -S(0)2N(Ra)(Rb), -CF3, -OCF3l alquilo de 1 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, alquenilo de 2 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, alquinilo de 2 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, heteroarilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, heterociclilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, o arilo de 6 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido; donde en una unidad que contiene -N(Ra)(Rb), el nitrógeno, Ra y Rb pueden formar un anillo tal que -N(Ra)(Rb) representa un heterociclilo de 2 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido o heteroarilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido unidos por medio de un nitrógeno; R3 es hidrógeno, un cicloalquilo de 5 a 12 átomos de carbono en puente opcionalmente sustituido, heterociclilo de 2 a 10 átomos de carbono en puente opcionalmente sustituido, alquilo de 1 a 8 átomos de carbono opcionalmente sustituido, cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, cicloalquenilo de 3 a 8 átomos de carbono opcionalmente sustituido, arilo de 6 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, heteroarilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, heterociclilo de 2 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido; o R3 es -A-D-E-G, donde: A es una unión, -C(0)-, alquileno de 1 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, alquenileno de 2 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, alquinileno de 2 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, cicloalquileno de 3 a 12 átomos de carbono opcionalmente sustituido, heterociclileno de 2 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, -C(0)N(Ra)÷Re-, -N(Ra)C(0)-Re-, -0-Re-, -N(Ra)-Re-, -S-Re-, -S(0)2-Re-, -S(0)Re-, -C(0-Ra)(R )-Re-, -S(0)2N(Ra)-Re-, -N(Ra)S(0)2-Re- o -N(Ra)C(0)N(Rb)-Re-; D es un alquileno de 1 a 8 átomos de carbono opcionalmente sustituido, cicloalquileno de 5 a 12 átomos de carbono en puente opcionalmente sustituido, cicloalquileno de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, cicloalquenileno de 5 a 10 átomos de carbono en puente opcionalmente sustituido, cicloalquenileno de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, arileno de 6 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, heteroarileno de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, heterociclileno de 2 a 10 átomos de carbono en puente opcionalmente sustituido o un heterociclileno de 2 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido; E es una unión, -Re-, -Re-C( = NCN)-Re-, -Re-C(0)-Re-, -Re C(0)C(0)-Re-, -Re-C(0)0-Re-, -Re-C(0)C(0)N(Ra)-Re-, -Re.N(Ra) C(0)C(0)-Re-, -Re-0-Re-, -Re-S(0)2-Re-, -Re-S(0)-Re-, -Re÷S-Re--Re-N(Ra)-Re-, =N-Re-, -Re-N(Ra)C(0)-Re-, -ReC(0)N(Ra)Re-, -Re OC(0)N(Ra)-Re-, -Re-N(Ra)C(0)ORe-, -Re-OC(0)-Re, -Re-OC(0)-0-Re -Re-N(Ra)C(0)N(Rb)-Re-, -Re-N(Ra)S(0)2-Re-, -Re-S(0)2N(Ra)-Re-, o Re-N(Ra)S(0)2N(Ra)-Re-; o donde en todos los casos, E se une a un carbono o bien a un átomo de nitrógeno en D; G es hidrógeno, deuterio, -N(Ra)(Rb), halógeno, -ORa, -SRa, -S(0)Ra, -S(0)2Ra, -N02, -C(0)ORa, -CN, -C(0)N(Ra)(Rb), -N(Ra)C(0)Rb, -N(Ra)C(0)ORb, -OC(0)N(Ra), -N(Ra)C(0)N(Rb)2, -C(0-Ra)(Rb)2, -C(0)Ra, -CF3, -OCF3, -N(Ra)S(0)2Rb, -S(0)2N(Ra)(Rb), -S(0)2N(Ra)C(0)Rb, un -alquilo de 1 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un -alquenilo de 2 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un -alquinilo de 2 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un -cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un -heteroarilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un -heterociclilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un -arilo de 6 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido; donde en una unidad que contiene -N(Ra)(R ), el nitrógeno, Ra y Rb pueden formar un anillo tal que -N(Ra)(Rb) representa un heterociclilo de 2 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido un heteroarilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido unidos por medio de un nitrógeno; R4 y R6 son en forma independiente entre sí un hidrógeno, halógeno, deuterio, CF3, CHF2l CH2F, CH2CF3> C(0)OH, C(0)OCH3, CN, un grupo cicloalquilo de 5 a 12 átomos de carbono en puente opcionalmente sustituido, un grupo heterociclilo de 2 a 10 átomos de carbono en puente opcionalmente sustituido, alquilo de 1 a 8 átomos de carbono opcionalmente sustituido, cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, cicloalquenilo de 3 a 8 átomos de carbono opcionalmente sustituido, arilo de 6 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, heteroarilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, heterociclilo de 2 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido o -J-L-M-Q; donde: J es una unión, -C(O)-, alquileno de 1 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, alquenileno de 2 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, alquinileno de 2 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, cicloalquileno de 3 a 12 átomos de carbono opcionalmente sustituido, heterociclileno de 2 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, -C(0)N(Ra)-Re-, -N(Ra)C(0)-Re-, -0-Re-, -N(Ra)-Re-, -S-Re-, -S(0)2-Re-, -S(0)Re-, -C(0-Ra)(Rb)-Re-, -S(0)2N(Ra)-Re-, -N(Ra)S(0)2-Re- o -N(Ra)C(0)N(Rb)-Re-; L es una unión, un alquileno de 1 a 8 átomos de carbono opcionalmente sustituido, cicloalquileno de 5 a 12 átomos de carbono en puente opcionalmente sustituido, cicloalquileno de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, cicloalquenileno de 5 a 10 átomos de carbono en puente opcionalmente sustituido, cicloalquenileno de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, arileno de 6 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, heteroarileno de 1 a 10 átomos de carbono opcionálmente sustituido, heterociclileno de 2 a 10 átomos de carbono en puente opcionalmente sustituido o un heterociclileno de 2 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido; M es una unión, -Re-, -Re-C(0)-Re-, -Re-C(0)C(0)-Re-, -Re-C(0)0-Re-, -Re-OC(0)-Re, -Re-C(0)C(0)N(Ra)-Re-, -Re-N(Ra)-C(0)C(0)-Re-, -Re-0-Re-, -Re-S(0)2-Re-, -Re-S(0)-Re-, -Re-S-Re-, -Re-N(Ra)-Re-, -Re-N(Ra)C(0)-Re-, -Re-C(0)N(Ra)Re-, -Re-OC(Ó)N (Ra) -Re-, -Re-N(Ra)C(0)ORe-, -Re-N(Ra)C(0)N(Rb)-Re-, -Re-N(Ra)S(0)2-Re-, o -Re-S(0)2N(Ra)-Re-; o donde en todos los casos, M se une a un carbono o bien a un átomo de nitrógeno en L; Q es hidrógeno, deuterio, -N(Ra)(Rb), halógeno, -ORa, -SRa, -S(0)Ra, -S(0)2Ra, -N02, -C(0)ORa, -CN, -C(0)N(Ra)(R ), -N(Ra)C(0)Rb, -N(Ra)C(0)ORb, -N(Ra)C(0)N(Rb)2, -C(0-Ra)(Rb)2, -C(0)Ra, -CF3, -OCF3, -N(Ra)S(0)2R , -S(0)2N(Ra)(R ) , -S(0)2N(Ra)C(0)Rb, un alquilo de 1 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un alquenilo de 2 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un alquinilo de 2 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un heteroarilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un heterociclilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un arilo de 6 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido; donde en una unidad que contiene -N(Ra)(Rb), el nitrógeno, Ra y Rü pueden formar un anillo tal que -N(Ra)(Rb) representa un heterociclilo de 2 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido a un heteroarilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido unidos por medio de un nitrógeno; Ra y Rb son en forma independiente entre sí hidrógeno, deuterio, CN, un alquilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un alquenileno de 2 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un alquinileno de 2 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un alquilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido-O-alquilo de 1 a 10 átomos de carbono, un cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un arilo de 6 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un heteroarilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un heterociclilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un alquileno de 1 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido-un cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono, un alquileno de 1 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido-un arilo de 6 a 10 átomos de carbono, un alquileno de 1 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido-un heteroarilo de 1 a 10 átomos de carbono, o un alquileno de 1 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido-heterociclilo de 1 a 10 átomos de carbono; y Re en cada oportunidad es en forma independiente una unión, un alquileno de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un alquenileno de 2 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un alquinileno de 2 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un grupo alquileno de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido-O-alquileno de 1 a 10 átomos de carbono, un cicloalquileno de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un arileno de 6 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un heteroarileno de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, o un heterociclileno de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido; siempre que cuando T es N, U es CR4, X es NR3 e Y es C, R4 No. es OH; siempre que cuando T es N, U es CR4, X es NR3 e Y es C, R1 es H; siempre que cuando el compuesto es R3 tiene los valores que se definen precedentemente y R6 no se une al anillo pirazol mediante un átomo de nitrógeno u oxígeno; y siempre que cuando el compuesto es cuando R3 es H, CH3 o -C(0)OH luego R4 No. es H, -C(0)OCH2CH3, -C(0)NH-fenilo opcionalmente sustituido, -NHC(0)-fenilo opcionalmente sustituido o -S(0)2-fenilo. 2. El compuesto de la reivindicación 1, en donde R3 es -A-D-E-G y A es una unión, alquileno de 1 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, cicloalquileno de 3 a 12 átomos de carbono opcionalmente sustituido o heterociclileno de 2 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido. 3. El compuesto de la reivindicación 1, en donde R3 es -A-D-E-G y D es un alquileno de 1 a 8 átomos de carbono opcionalmente sustituido, cicloalquileno de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, cicloalquenileno de 5 a 10 átomos de carbono con puente opcionalmente sustituido, heterociclileno de 3 a 10 átomos de carbono con puente opcionalmente sustituido o heterociclileno de 2 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido. 4. El compuesto de la reivindicación 3, en donde D es alquileno de 1 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, cicloalquileno de 3 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, biciclo[2.2.2]octan-1 -ilo opcionalmente sustituido, 2,5-diazabiciclo[2.2.1]heptano opcionalmente sustituido, 2,6-diazabiciclo[3.2.1 ]octano opcionalmente sustituido, octahidropirrolo[3.4-c]pirrol opcionalmente sustituido, octahidropirrolo[3.2-b]piridina opcionalmente sustituida, 1,4- díazepan opcionalmente sustituido, cubano opcionalmente sustituido, 1 ,4-dioxano-espiro[4.4]nonano opcionalmente sustituido, 2,5-diazaespiro[3.5]nonano opcionalmente sustituido, piperidina opcionalmente sustituida, piperazina opcionalmente sustituida, pirrolidina opcionalmente sustituida, tetrahidrofurano opcionalmente sustituido o tetrahidropirano opcionalmente sustituido. 5. El compuesto de la reivindicación 1, en donde R3 es -A-D-E-G y E es una unión, -Re-, -Re-C(0)-Re-, -Re-0-Re-, -Re-S(0)2-Re-, -Re-N(Ra)-Re-, =N-Re-. -Re-N(Ra)C(0)-Re-, -Re-N(Ra)C(0)0-Re-, -Re-N(Ra)C(0)N(Rb)-Re-, -ReC(0)N(Ra)Re-, -Re- N(Ra)S(0)2-Re-, -Re-S(0)2N(Ra)-Re-, -Re-N(Ra)S(0)2N(Ra)-Re-, -Re-OC(0)N(Ra)-Re, -Re-C(0)0-Re, -Re-OC(0)-Re; o ; donde Ra en cada oportunidad es en forma independiente hidrógeno, CN, un alquilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido o un -alquileno de 1 a 6 átomos de carbono-cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido; y Re en cada oportunidad es en forma independiente una unión, un alquileno de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un cicloalquileno de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un arileno de 6 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un heteroarileno de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, o un heterocicíiieno de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido. 6. El compuesto de la reivindicación 1, en donde R3 es 5 -A-D-E-G y g es hidrógeno, deuterio, -N(Ra)(Rb), halógeno, -ORa, -S(0)2Ra, -CN, -C(0)N(Ra)(Rb), -N(Ra)C(0)Rb, -CF3, -S(0)2N(Ra)(Rb), un -alquilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un -cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un -heteroarilo de 1 a 10 io átomos de carbono opcionalmente sustituido, un -heterociclilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, o un -arilo de 6 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido; donde en una unidad que contiene -N(Ra)(Rb), el nitrógeno, Ra y Rb pueden formar un anillo tal que -N(Ra)(Rb) representa un i5 heterociclilo de 2 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido o un heteroarilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido unidos por medio de un nitrógeno; Ra es en forma independiente hidrógeno, CN, un alquilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un cicloalquilo 20 de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, o un arilo de 6 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido. 7. El compuesto de la reivindicación 6, en donde g es hidrógeno, deuterio, -N(Ra)(R ), halógeno, -ORa, -S(0)2Ra, -CN, -C(0)N(Ra)(Rb), -N(Ra)C(0)Rb, -CF3, -S(0)2N(Ra)(R ), un -alquilo 25 de 1 a 4 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un -cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, azepanilo opcionalmente sustituido, azetidinilo opcionalmente sustituido, benzo[d]isoxazolilo opcionalmente sustituido, 4,5-dihidroisoxazolilo opcionalmente sustituido, isotiazolidinilo opcionalmente sustituido, isotiazolilo opcionalmente sustituido, isoxazolilo opcionalmente sustituido, morfolinilo opcionalmente sustituido, oxadiazolilo opcionalmente sustituido, oxazolilo opcionalmente sustituido, oxetanilo opcionalmente sustituido, fenilo opcionalmente sustituido, piperazinilo opcionalmente sustituido, piperidinilo opcionalmente sustituido, pirazinilo opcionalmente sustituido, pirazolilo opcionalmente sustituido, piridazinilo opcionalmente sustituido, piridinilo opcionalmente sustituido, pirimidinilo opcionalmente sustituido, pirrolidinilo opcionalmente sustituido, pirrolilo opcionalmente sustituido, tetrahidrofuranilo opcionalmente sustituido, tetrahidropiranoilo opcionalmente sustituido, tetrahidrotiopiranilo opcionalmente sustituido, tienilo opcionalmente sustituido, tiomorfolinilo opcionalmente sustituido, 1 ,1 -dioxo-tiomorfolinilo opcionalmente sustituido, tiazolilo opcionalmente sustituido o triazolilo opcionalmente sustituido. 8. El compuesto de la reivindicación 1, en donde R3 es hidrógeno, alquilo de 1 a 8 átomos de carbono opcionalmente sustituido, cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, o heterociclilo de 2 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido. 9. El compuesto de la reivindicación 1, en donde R6 es -J-L-M-Q y J es una unión, alquileno de 1 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, o un alquenileno de 2 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido. 10. El compuesto de la reivindicación 1, en donde R6 es -J-L-M-Q y L es una unión, o un alquileno de 1 a 8 átomos de carbono opcionalmente sustituido. 11. El compuesto de la reivindicación 1, en donde R6 es -J-L-M-Q y M es una unión, -Re-, -Re-C(0)-Re-, -Re-0-Re-, -R8-S(0)2-Re-, -Re-S(0)-Re-, -Re-S-Re-, -Re-N(Ra)-Re-, -Re-N(Ra)C(0)-Re-, -Re-C(0)N(Ra)Re-, -Re-N(Ra)C(0)N(Rb)-Re-, -Re-N(Ra)S(0)2-Re-, o -Re-S(0)2N(Ra)-Re-; donde en todos los casos, M se une a un carbono o bien a un átomo de nitrógeno en L. 12. El compuesto de la reivindicación 1 en donde R6 es -J-L-M-Q y Q es hidrógeno, deuterio, -N(Ra)(Rb), halógeno, -ORa, -SRa, -S(0)Ra, -S(0)2Ra, -N02, -C(0)ORa, -CN, -C(0)N(Ra)(Rb), -N(Ra)C(0)Rb, -N(Ra)C(0)ORb, -N(Ra)C(0)N(Rb)2, -C(0-Ra)(Rb)2, -C(0)Ra, -CF3, -OCF3, -N(Ra)S(0)2Rb, -S(0)2N(Ra)(R ) , -S(0)2N(Ra)C(0)R , un alquilo de 1 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un heteroarilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un heterociclilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un arilo de 6 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido; donde en una unidad que contiene -N(Ra)(Rb), el nitrógeno, Ra y R pueden formar un anillo tal que -N(Ra)(R ) representa un heterociclilo de 2 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido o un heteroarilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido unidos por medio de un nitrógeno; Ra y Rb son en forma independiente entre sí hidrógeno, deuterio, un alquilo de 1 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un alquenilo de 2 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un arilo de 6 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un heteroarilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, o un heterociclilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido. 13. El compuesto de la reivindicación 1, en donde T es N, U es N, X es CR3 e Y es N y forma un compuesto de Fórmula (la) Fórmula (la). 14. El compuesto de la reivindicación 1, en donde T es CR6, U es N, X es CR3 e Y es N y forma un compuesto de Fórmula (Ib) Fórmula (Ib). El compuesto de la reivindicación 1, en donde T es N, es CR3 e Y es N y forma un compuesto de Fórmula (le) 16. El compuesto de la reivindicación 1, en donde T es CR6, U es CR4, X es CR3 e Y es N y forma un compuesto de Fórmula (Id) Fórmula (Id). 17. El compuesto de la reivindicación 1, en donde T es CR6, U es N, X es NR3 e Y es C y forma un compuesto de Fórmula (le) Fórmula (le). 18. El compuesto de la reivindicación 1, en donde T es O, U es N, X es CR3 e Y es C y forma un compuesto de Fórmula (If) Fórmula (lf). 19. El compuesto de la reivindicación 1, en donde T es NR6, U es N, X es CR3 e Y es C y forma un compuesto de fórmula (ig) Fórmula (Ig). 20. El compuesto de la reivindicación 1 en donde T es CR6, U es CR4, X es NR3 e Y es C y forma un compuesto de fórmula (Ih) Fórmula (Ih). 21. El compuesto de la reivindicación 1 en donde T es S, U es N, X es CR3 e Y es C y forma un compuesto de Fórmula (li) Fórmula (li). compuesto de la reivindicación 1, en donde T es N, es NR3 e Y es C y forma un compuesto de Fórmula Fórmula (Ij). 23. El compuesto de la reivindicación 1, en donde T es N, U es N, X es NR3 e Y es C y forma un compuesto de Fórmula (Ik) Fórmula (Ik). 24. Un compuesto de Fórmula (II) en donde compuesto es Fórmula (II) sales farmacéuticamente aceptables, profármacos, metabolitos biológicamente activos, estereoisómeros e isómeros del mismo donde R y R2 son en forma independiente hidrógeno, deuterio, -N(Ra)(Rb), halógeno, -ORa, -SRa, -S(0)Ra, -S(0)2Ra, -N02, -C(0)ORa, -CN, -C(0)N(Ra)(Rb), -N(Ra)C(0)(Rb), -C(0)Ra, -C(OH)RaRb, -N(Ra)S(0)2-Rb, -S(0)2N(Ra)(R ), -CF3, -OCF3, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, alquenilo de 2 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, alquinilo de 2 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, heteroarilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, heterociclilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, o arilo de 6 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido; donde en una unidad que contiene -N(Ra)(Rb), el nitrógeno, Ra y Rb pueden formar un anillo tal que -N(Ra)(Rb) representa un heterociclilo de 2 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido o heteroarilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido unidos por medio de un nitrógeno; R3 es hidrógeno, un cicloalquilo de 5 a 12 átomos de carbono con puente opcionalmente sustituido, heterociclilo de 2 a 10 átomos de carbono con puente opcionalmente sustituido, alquilo de 1 a 8 átomos de carbono opcionalmente sustituido, cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, cicloalquenilo de 3 a 8 átomos de carbono opcionalmente sustituido, arilo de 6 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, heteroarilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, heterociclilo de 2 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido; o R3 es -A-D-E-G, donde: A es una unión, -C(O)-, alquileno de 1 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, alquenileno de 2 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, alquinileno de 2 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, cicloalquileno de 3 a 12 átomos de carbono opcionalmente sustituido, heterociclileno de 2 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, -C(0)N(Ra)-Re-, -N(Ra)C(0)-Re-, -0-Re-, -N(Ra)-Re-, -S-Re-, -S(0)2-Re-, -S(0)Re-, -C(0-Ra)(Rb)-Re-, -S(0)2N(Ra)-Re-, -N(Ra)S(0)2-Re- o -N(Ra)C(0)N(Rb)-Re-; D es un alquileno de 1 a 8 átomos de carbono opcionalmente sustituido, cicloalquileno de 5 a 12 átomos de carbono con puente opcionalmente sustituido, cicloalquileno de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, cicloalquenileno de 5 a 10 átomos de carbono con puente opcionalmente sustituido, cicloalquenileno de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, arileno de 6 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, heteroarileno de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, heterociclileno de 2 a 10 átomos de carbono con puente opcionalmente sustituido o un heterociclileno de 2 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido; E es una unión, -Re-, -Re-C( = NCN)-Re-, -Re-C(0)-Re-, -Re-C(0)C(0)-Re-, -Re-C(0)0-'Re-, -Re-C(0)C(0)N(Ra)-Re-, -Re-N(Ra)-C(0)C(0)-Re-, -Re-0-Re-, -Re-S(0)2-Re-, -Re-S(0)-Re-, -Re-S-Re-, -Re-N(Ra)-Re-, =N-Re-, -Re-N(Ra)C(0)-Re-, -ReC(0)N(Ra)Re-, -Re-OC(0)N(Ra)-Re-, -Re-N(Ra)C(0)ORe-, -Re-OC(0)-Re, -Re-OC(0)-0-Re, -Re-N(Ra)C(0)N(Rb)-Re-, -Re-N(Ra)S(0)2-Re-, -Re-S(0)2N(Ra)-Re-, o -Re-N(Ra)S(0)2N(Ra)-Re-¡ o donde en todos los casos, E se une a un carbono o bien a un átomo de nitrógeno en D; G es hidrógeno, deuterio, -N(Ra)(Rb), halógeno, -ORa, -SRa, -S(0)Ra, -S(0)2Ra, -N02, -C(0)ORa, -CN, -C(0)N(Ra)(Rb), -N(Ra)C(0)Rb, -N(Ra)C(0)ORb, -OC(0)N(Ra), -N(Ra)C(0)N(R )2, -C(0-Ra)(Rb)2l -C(0)Ra, -CF3, -OCF3, -N(Ra)S(0)2Rb, -S(0)2N(Ra)(Rb), -S(0)2N(Ra)C(0)Rb, un -alquilo de 1 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un -alquenilo de 2 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un -alquinilo de 2 a 6 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un -cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un -heteroarilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un -heterociclilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un -arilo de 6 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido; donde en una unidad que contiene -N(Ra)(Rb), el nitrógeno, Ra y Rü pueden formar un anillo tal que -N(Ra)(Rb) representa un heterociclilo de 2 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido o un heteroarilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido unidos por medio de un nitrógeno; Ra y Rb son en forma independiente entre sí hidrógeno, deuterio, CN, un alquilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un alquenilo de 2 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un alquinilo de 2 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un alquilo de 1 a 10 átomos de carbono-O-alquilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un arilo de 6 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un heteroarilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un heterociclilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un -alquilen de 1 a 6 átomos de carbono-cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un -alquilen de 1 a 6 átomos de carbono -arilo de 6 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un -alquilen de 1 a 6 átomos de carbono-heteroarilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, o un -alquilen de 1 a 6 átomos de carbono-heterociclilo de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido; y Re en cada oportunidad es en forma independiente una unión, un alquileno de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un alquenileno de 2 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un alquinileno de 2 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un grupo -alquilen de 1 a 10 átomos de carbono-O-alquileno de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un cicloalquileno de 3 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un arileno de 6 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, un heteroarileno de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido, o un heterociclileno de 1 a 10 átomos de carbono opcionalmente sustituido. 25. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de Fórmula (I) o Fórmula (II) como se define en la reivindicación 24 Fórmula (I) Fórmula (II) un vehículo y un excipiente farmacéuticamente aceptables y un segundo agente terapéutico seleccionado del grupo formado por fármacos anti-inflamatorias supresoras de citosinas, anticuerpos contra o antagonistas de otras citosinas o factores de crecimiento humanos, IL-1, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-12, IL-15, IL-16, IL-21, IL-23, interferones, EMAP-II, GM-CSF, FGF, PDGF, CTLA o sus ligandos incluyendo CD154, HUMIRA™, REMICADE™, SIMPONI™ (golimumab), CIMZIA™, ACTEMRA™, CDP 571, receptores de TNF p55 o p75 solubles, ENBREL™, Lenercept, inhibidores de la enzima convertidora de TNFa, inhibidores de IL-1, Interleusina 11, antagonistas de IL-18, antagonistas de IL-12, anticuerpos de IL-12, receptores de IL-12 soluble, proteínas de unión IL-12, FK506 inhibidores anti-CD4 No. supresores, rapamicina, micofenolato de mofetilo, leflunomida, NSAIDs, ibuprofeno, corticosteroides, inhibidores de fosfodiesterasa, agonistas de adenosina, agentes antitrombóticos, inhibidores del complemento, agentes adrenérgicos, inhibidores de la enzima convertidora de l L- 1 ß , inhibidores de cinasas de la señalización de linfocitos T, inhibidores de metaloproteinasas, sulfasalazina, 6-mercaptopurinas, derivados de p75TNFRIgG, sIL-1RI, si L- 1 R 11 , slL-6R, celecoxib, sulfato de hidroxiclorosina, rofecoxib, infliximab, naproxeno, valdecoxib, sulfasalazina, meloxicam, acetato, tiomalato de oro y sodio, aspirina, triamcinolona acetonida, napsilato de propoxifeno/apap, folato, nabumetona, diclofenaco, piroxicam, etodolac, diclofenaco sodio, oxaprozina, oxicodona HCI, bitartrato de hidrocodona/apap, diclofenaco sodio/misoprostol, fentanilo, anakinra, tramadol HCI, salsalato, sulindac, cianocobalamina/fa/piridoxina, acetaminoféno, alendronato sodio, sulfato de morfina, clorhidrato de lidocaína, indometacina, sulfato de glucosamina/condroitina, amitriptilina HCI, sulfadiazina, oxicodona HCI/acetaminofeno, olopatadina HCI misoprostol, naproxeno sodio, omeprazol, ciclofosfamida, rituximab, IL-1 TRAP, MRA, CTLA4-IG, IL-18 BP, anti-IL-12, anti-IL15, VX-740, Roflumilast, CI-485, CDC-801, agonistas de S1P1, FTY720, inhibidores de la familia PKC, Ruboxistaurina, AEB-071, Mesopram, metotrexato, leflunomida, corticosteróides , budenosida, dexametasona, sulfasalazina, ácido 5-aminosalicílico, olsalazina, inhibidores de la enzima convertidora de I L- 1 ß , IL-1ra, inhibidores de la señalización de linfocitos T, inhibidores de tirosina cinasa, 6-mercaptopurinas, IL-11, mesalamina, prednisona, azatioprina, mercaptopurina, infliximab, metilprednisolona succinato de sodio, difenoxilato/sulfato de atrop, clorhidrato de loperamida, omeprazol, folato, ciprofloxacina/dextrosa-agua, bitartrato de hidrocodona/apap, clorhidrato de tetraciclina, fluocinonida, metronidazol, timerosal/ácido bórico, colestiramina/sacarosa, clorhidrato de ciprofloxacina, sulfato de hiosciamina, clorhidrato de meperidina, clorhidrato de midazolam, oxicodona HCI/acetaminofeno, clorhidrato de prometazina, fosfato de sodio, sulfametoxazol/trimetoprim, policarbófilo, napsilato de propoxifeno, hidrocortisona, multivitaminas, balsalazide disódica, fosfato de codeína/apap, colesevelam HCI, cianocobalamina, ácido fólico, levofloxacina, natalizumab, interferón-gamma, metilprednisolona, azatioprina, ciclofosfamida, ciclosporina, metotrexato, 4-aminopiridina, tizanidina, interferón-ß? a , AVONEX®, interferón-p1b, BETASERON®, interferón a-n3, interferón-ß, interferón ß??-IF, Peg-interferón a2b, Copolímero 1, COPAXONE®, oxígeno hiperbárico, inmunoglobulina intravenosa, cladribina, ciclosporina, FK506, micofenolato de mofetilo, leflunomida, NSAIDs, corticosteroides, prednisolona, inhibidores de fosfodiesterasa, agonistas de adenosina, agentes antitrombóticos, inhibidores del complemento, agentes adrenérgicos, citosinas anti-inflamatorias,' interferón-ß, ???ß??, IFI\^1b, copaxone, corticosteroides, inhibidores de caspása, inhibidores de caspasa-1, anticuerpos contra el ligando CD40 y CD80, alemtuzumab, dronabinol, daclizumab, mitoxantrona, clorhidrato de xaliprodeno, fampridina, acetato de glatirámero, natalizumab, sinabidol, ct-inmunosina NNS03, ABR-215062, AnergiX.MS, antagonistas del receptor de quimiosina, BBR-2778, calagualina, CPI-1189, mitoxantrona encapsulada en liposomas, THC.CBD, agonistas de canabinoides, MBP-8298, mesopram, MNA-715, anticuerpo anti-receptor de IL-6, neurovax, pirfenidona allotrap 1258 (RDP-1258), sTNF-R1, talampanel, teriflunomida, TGF-beta2, tiplimotida, antagonistas de VLA-4, antagonistas de interferón gamma, agonistas de IL-4, diclofenaco, misoprostol, naproxeno, meloxicam, indometacina, diclofenaco, metotrexato, azatioprina, minociclina, prednisona, etanercept, rofecoxib, sulfasalazina, naproxeno, leflunomída, acetato de metilprednisolona, indometacina, sulfato de hidroxiclorosina, prednisona, sulindac, betametasona diprop aumentada, infliximab, metotrexato, folato, triamcinolona acetonida, diclofenaco, dimetilsulfóxido, piroxicam, diclofenaco sodio, ketoprofeno, meloxicam, metilprednisolona, nabumetona, tolmetina sodio, calcipotrieno, ciclosporina, diclofenaco sodio/misoprostol, fluocinonida, sulfato de glucosamina, tiomalato de oro y sodio, bitartrato de hidrocodona/apap, risedronato sodio, sulfadiazina, tioguanina, valdecoxib, alefacept y efalizumab, diclofenaco, naproxeno, ibuprofeno, piroxicam, indometacina, inhibidores de COX2, rofecoxib, valdecoxib, hidroxiclorosina, esteroides, prednisolona, budenosida, dexametasona , citotóxicos, azatioprina, ciclofosfamida, micofenolato de mofetilo, inhibidores de PDE4, inhibidor de la síntesis de purina, sulfasalazina, ácido 5-aminosalicílico, olsalazina, Imuran®, CTLA-4-lgG, familia de anticuerpos anti-B7, familia de anticuerpos anti-PD-1, anticuerpos anti-citosina, fonotolizumab, anticuerpo anti-IFNg, anticuerpos anti-receptor, anticuerpo anti-receptor de IL-6, anticuerpos con moléculas de la superficie de linfocitos B, LJP 394, Rituximab, anticuerpo anti-CD20 y linfostato-B.
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