JPH11512699A

JPH11512699A - 腫瘍壊死因子アルファの阻止

Info

Publication number: JPH11512699A
Application number: JP9512849A
Authority: JP
Inventors: ビーマーゴリン、ソロモン
Original assignee: ビーマーゴリン、ソロモン
Priority date: 1995-09-19
Filing date: 1996-09-17
Publication date: 1999-11-02
Also published as: CA2232191A1; EP0866656A1; ATE360419T1; EP0866656B1; AU7239996A; TW449473B; ZA967880B; AU709178B2; EP0866656A4; DE69637050D1; BR9610480A; DE122011100032I1; MX9802150A; CA2232191C; DE69637050T2; WO1997010712A1

Abstract

(57)【要約】好ましい実施態様では、種々の細胞からの腫瘍壊死因子の合成および放出の抑制方法は、Ｎ−置換２（１Ｈ）ピリドンと、Ｎ−置換３（１Ｈ）ピリドンおよび薬学的に許容することができるこれらの塩よりなる群から選ばれる１つ以上の薬学的物質の有効投与量をヒトその他の哺乳動物に投与する工程を含んでなる。

Description

【発明の詳細な説明】腫瘍壊死因子アルファの阻止技術分野本発明は医薬組成物に関するものであり、より詳細には、ただし非制限的に、ヒトを含める哺乳動物の血液、組織または器官中の過剰量のＴＮＦ−αの病理生理学的効果を阻止（抑制）する新規な組成物および方法に関するものである。背景技術通用している証拠によれば、一見して種々異なる免疫性疾患が、類似の病因的メカニズムに、そしてサイトカインとして知られる重要なエフェクター分子の数の増加に関係することを示している。病理生理学的事象の生化学的カスケードは、細胞、組織または器官損傷後に放出または合成されるＴＮＦ−αの過度の組織または血中濃度が引き金（トリガー）となる。ＴＮＦ−αは免疫および宿主防御反応において重要な役割を演ずる。ＴＮＦ−αの異常に高い産生および細胞からの放出は、疾病開始、およびリウマチ性関節炎、全身性炎症性症候群、糖尿病、多発性硬化症、および多くのその他の免疫性疾患の進行に寄与することを示す強力な証拠がある（プロパート（L.Propert）、J.Leukocyte Biol.５９巻、５１８ −５２５ページ、１９９６）。これら疾患のいずれにおいても、開始し、そして持続する病理生理学的作用は、直接損傷部位のまたはその近辺の数種の細胞から大量のＴＮＦ−αが即時的局所的に放出され合成される結果である。ＴＮＦ−αの局所的放出の後には、著しく増加したＴＮＦ−α濃度に反応して細胞から局所的に放出される化学走性（ケモタクティック）サイトカインのカスケードによって損傷部位に引き寄せられる侵略性マクロファージによるＴＮＦ−αの付加的合成および放出が続く。ＴＮＦ−αは、細菌性感染症および悪性腫瘍を含める組織または器官損傷に対するホスト反応中に種々様々の細胞によって産生される１７ｋＤａの多官能価ペプチドである。活性化されたマクロファージがＴＮＦ−αの主な細胞性ソースである。ただしその他の種類の細胞、例えばＴ−細胞、マスト細胞、好中球、内皮細胞、小グロリア細胞、および星状膠細胞も刺激されてＴＮＦ−αを分泌する。ＴＮＦ−αは、炎症の開始にも、このプロセスから起きる病理生理学的結果にも重要な役割を演ずる。単球、マクロファージまたは関連細胞によって産生される過剰なまたは野放図なＴＮＦ−αが疾患の悪化および／または疾患の発生に関係しているという病気が幾つかある。これらには内毒素血症（敗血症）、中毒性ショック症候群（トラセイ（Tracey）ら、Nature ３３０巻、６６２−６４ページ、１９８７；バスガー（Basger）ら、Circ.Shock.２７巻、５１−６１ページ、１９８９、およびヒンショー（Hinshaw）ら、３０巻、２７９−２９２ページ、１９９０）；悪液質（デツブ（Dezube）ら、Lancet、３３５巻［８６９６］６６２ページ、１９９０）；成人呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）（この場合ＡＲＤＳ患者からの肺吸引液に１ｍｌあたり１２０００ｐｇという過剰のＴＮＦ−α濃度が検出されている）（ミラー（Mi llar）ら、Lancet［８６６５］２巻、７１２−７１４ページ）が含まれる。組換えＴＮＦ−αの全身性注入はＡＲＤＳに一般に認められるような変化をおこす（フェレイ−バリヴィーラ（Ferrai-Baliviera）ら、Arch.Surgery １２４巻、１４００−１４０５ページ、１９８９。）ＴＮＦ−αは単球、マクロファージ、リンパ球、ナチュラルキラー細胞、内皮細胞、マスト細胞、好中球および好酸球、グリア細胞および星状膠細胞、平滑筋細胞および或る種の腫瘍細胞に広く発現する。ＴＮＦ−βは主としてリンパ球、星状膠細胞、リンホカイン活性化キラー細胞および骨髄腫細胞によって産生される。ＴＮＦ−αおよび／または−βの過剰産生は多くの疾患、例えば敗血症性ショック、成人呼吸窮迫症候群、リウマチ性関節炎、選択的自己免疫疾患、骨髄移植後の移植片−宿主病および悪液質などの発生に密接に関係している。その他の疾患は出血性ショック、喘息および腎透析後症候群である。ＴＮＦ−αおよび−βの作用の多様性は、ＴＮＦ−αおよび −β作用が複数のシグナル導入経路、キナーゼ類、転写因子の活性化、並びに細胞遺伝子の異常に広い配列を活性化することに起因する。（Walajtys-Rode，Eli zbieta Kosmos（Warsaw）、４４巻、４５１−４６４ページ、１９９５、Ｃ．Ａ．１２４：１９９７３５ａ、１９９５）。ＴＮＦ−αはその他の多くの機能、例えばＩＬ−１の誘導、好中球脱顆粒の促進、および食作用の増進などをあらわす。インビボおよびインビトロにおいてグラム陰性菌からの内毒素を用いてＴＮＦ−αが誘導された。内毒素の他に、幾つかの微生物並びにその他の物質、例えばＩＬ−１なども、刺激された腹膜マクロファージからのＴＮＦ−α分泌を誘導することができる。（ワネボ（H.J.Wanebo ）、“腫瘍壊死因子”Seminars in Surgical Oncology、１９８９；５巻：４０２−４１３ページ）。こうしてＴＮＦ−αは強力な免疫仲介物質であり、多くのヒト疾患の病因に関係する炎症前サイトカインである。主な組織適合性コンプレックス内のその遺伝子の位置および生物学的活性から、この座内の多形性が、ゲノムのこの領域と広範囲の自己免疫および感染性疾患との遺伝的関連性に関与している可能性が明らかになった。ＴＮＦ−αインヒビターは種々のアレルギー性および外傷性異常、例えば喘息、慢性気管支炎、多くの皮膚障害（アトピー性皮膚炎および蕁麻疹）、アレルギー性鼻炎、アレルギー性結膜炎、春季結膜炎、好酸球性肉芽腫、乾せん、心筋または脳の再灌流異常、嚢胞性線維症、慢性糸球体腎炎、および成人呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）の治療または予防処置に有用である。細胞に損傷によってトリガーとなる複雑なプロセスを仲介する主なサイトカインまたはそれが結合する実質上すべての種類の細胞の反応。（Jour.Cardiovas.Pharm. ２５巻（Ｓ１−Ｓ８、１９９５））。ＴＮＦ−α拮抗物質は、細胞、組織または器官損傷後の疾患の治療に非常に有効であり、コルチコステロイドまたは免疫抑制剤に比べても、これら薬剤に共通の副作用を起こさずに、同様なまたはより強力な効果をあらわすかも知れない。ＴＮＦ−αの特徴づけＴＮＦ−αは単球、マクロファージ、リンパ球、ナチュラルキラー細胞、内皮細胞、マスト細胞、好中球および好酸球、グリア細胞および星状膠細胞、平滑筋細胞および或る種の腫瘍細胞に広くあらわれる。ＴＮＦ−βは主としてリンパ球、星状膠細胞、リンホカイン活性化キラー細胞および骨髄腫細胞によって産生される。ＴＮＦ−αおよびＴＮＦ−βは全く同じ細胞表面受容体に結合し、機能的に同等であり、化学構造もほぼ一致する（E.Walajytys-Rode．Kosmos［Warsaw］、４４巻４５１−６４ページ、１９９５；Ｃ．Ａ．１２４：１９９７３５ａ、１９９６）。ＴＮＦ−αは種々の哺乳動物の器官および組織の大部分の種類の細胞によって産生し、貯蔵されるサイトカイン中にある。最初に、選択的腫瘍細胞系を溶解する活性化マクロファージから放出される生成物として報告されたとはいえ、ＴＮＦ−αは今では用途の広い、いたるところにあるサイトカインとして認識されている。細胞に対するＴＮＦ−α効果は、組織または器官の部位におけるその濃度、並びに標的細胞の発生学的系統に依って決まる。ＴＮＦ−αは損傷に反応して起きるその炎症前効果を、そのカスケード、および二次的メッセンジャーサイトカインおよび非サイトカインのシグナル化生化学物質のカスケードおよび区画化放出を調節することによって、調和よく組み合わせることが証明された。ＴＮＦ−αは細胞増殖の調節に限らず、細胞機能にも明らかな効果を有する。ＴＮＦ−αの病理生理学的効果は概して、ＴＮＦ−α濃度が過度に高い場合（グラム陰性菌感染症、アレルギー反応、熱傷、悪性腫瘍および放射線または外傷性障害中に起きるような）に限られるとはいえ、ＴＮＦ−α ｍＲＮＡおよびタンパク質は、組織損傷、炎症または悪性腫瘍がない場合でも容易に確認される。他方、細胞または組織損傷がない場合にＴＮＦ−αｍＲＮＡおよびタンパク質の非常に低濃度が容易に確認され、ＴＮＦ−αがその他の調節物質と協力して、細胞および組織ホメオスタシスの正常メディエーターとして役立つことが示唆される（テラノワ（Terranova）ら、PSEBM、２０９巻、３２５ページ、１９９５）。ＴＮＦ−αは（その薬理学的双児であるＴＮＦ−βおよび最初のいとこであるＩＬ−１−βとともに）、ヒト疾患および異常の非常に広いスペクトラムにおいて不都合な臨床的発現を直接的および間接的にトリガーする一連の病理生物学的プロセス（生理学的並びに生化学的プロセス両方共）の発現に主要な推進力を保有している。多種多様の病因の損傷によって起きるこれらの急性および慢性有害作用は、臨床試験であらわれるのみならず、（１）かなりひどい、生命をおびやかすことが多い器官異機能、および（２）異機能器官から採取した代表的組織および細胞の適切な病理生理学的試験によっても明らかにされている。内科学会誌（Annals of Internal Medicine）１１５巻；４６４ページ、１９９３、に発表されたように、ＴＮＦ−αは：（１）インターロイキン−１、インターロイキン−６、インターロイキン−８、血小板活性化因子、ロイコトリエン類、トロンボキサンＡ２、プロスタングランジン類の放出を促進し；直接マクロファージを刺激してそのもの自体の放出を促進することができるらしい。（２）Ｔ細胞には弱い効果しかもたない。（３）骨髄による多形核細胞の産生を刺激し、それらの食作用活性を高める。（４）粘着分子の発現を高めることによって内皮細胞、多形核細胞、好酸球、好塩基性球、単球、および時にはリンパ球の粘着を促進する。（５）凝固および補体系の共通経路を活性化する。（６）血管内皮細胞には直接毒性をあらわす；微小血管透過性を高める。（７）内皮の凝結促進活性を用量依存的に増加させる；内皮細胞表面におけるトロンボモジュリン発現を阻止する。（８）リポプロテインリパーゼ活性を抑制する；脂肪細胞によるアセテート生成を阻止する；グルコースの細胞内への取り込みを減らす。（９）コラゲナーゼ放出を促進する；線維芽細胞増殖に対して、他のメディエーターの存在に依存して変動する効果を与える。（１０）筋細胞の経膜的ポテンシャルを減らす。筋細胞短縮。（１１）クラスＩ組織適合性分子を誘導する。（１２）視床下部に直接作用し、発熱させる。ＴＮＦ−αの過剰産生および放出を阻止する化合物の発見は、過剰または野放図なＴＮＦ−α組織濃度が関連している病気の治療法を提供し、この分子がどのようにして合成、処理、分泌、そして代謝されるかを理解するためにも役立つ。著者は例えば感染性疾患およびショック、炎症性腹部疾患、およびリウマチ性関節炎などのＴＮＦ−α仲介性病変を説明し、ＴＮＦ−α遮断における抗ＴＮＦ− αモノクローン抗体の使用について述べる（ボドゥナー（M.W.Bodner）とフルケス（R.Foulkes）“治療。調節サイトカイン”、１９９６、２２１−２３６ページ、B.Henderson 編集；B.Bodmer、ＣＲＣ：Boca Raton、Fla．）。ＴＮＦ−αインヒビターは種々のアレルギー性、外傷性およびその他の損傷疾患、例えば喘息、慢性気管支炎、アトピー性皮膚炎、蕁麻疹、アレルギー性鼻炎、アレルギー性結膜炎、好酸性肉芽腫、リウマチ性関節炎、敗血症性ショック、潰瘍性腸炎、クローン病、心筋および脳の再灌流障害、慢性糸球体腎炎、および先陣呼吸障害症候群（ＡＲＤＳ）の治療に有効である。ＴＮＦ−α、多面作用性サイトカインは、種々の感染性または非感染性疾患にさらされた時に最初の反応としてマクロファージおよびその他の細胞によって産生され、貯蔵されまたは放出される。ＴＮＦ−αは今や免疫学的反応にも関係することが知られている。それに加えて、ＴＮＦ−αの過度に高い血中または組織濃度は細胞、組織、器官にも、ホストにも致命的である場合が多い（トラセイとセラミ、PSEBM ２０６巻：２３３−２４０ページ、１９９２）。ＴＮＦ−αは、リポ多糖体（ＬＰＳ）、ウィルス、細菌、寄生虫、抗原および同種移植片拒絶またはその他の損傷による刺激に反応して、単球、マクロファージ、Ｔ細胞、ナチュラルキラー細胞、マスト細胞、好中球、線維芽細胞および多くのその他の種類の細胞によって分泌される。ＴＮＦ−αはコラゲナーゼ、コラーゲン、フィブロネクチン、およびグリコサミノグリコシドの産生および分泌速度の変化もおこす（ダンカン（Duncan）とバーマン（Berman）、Jour.Invest.Derm.、９２巻、６９９−７０６ページ、１９８９；チーグラー（E.J.Ziegler）、N.E.Jour.Med.、３１８巻、１５３３ページ、１９８８；ボンド（R.C.Bond）、Ann.Intern.Med.、１１５巻、４５７−４６９ページ、１９９１；ボイトラー（B.Beutler）HosD.Prac.４５−５２ページ、１９９３年４月１５日；Nature（ロンドン）、３１６巻、５５２−５５４ページ（１９８５））。損傷部位におけるＴＮＦ−αの産生および放出は直接的または間接的に付加的マクロファージをその部位に集め、すでにそこにあるマクロファージを活性化する。ＴＮＦ−αは単球に対して化学走性であることも示された。またＴＮＦ−α はインビトロでマクロファージを活性化し、それらの細胞傷害性ポテンシャルを高める。ＴＮＦ−αは多くの反応性病理生理学的状態または疾患の重要なメディエーターであるから、ＴＮＦ−α産生のインヒビターは異常に高いＴＮＦ−α濃度が存在する病理生理学的状態または疾患に有用であるかも知れない。本発明の化合物は（１）ＴＮＦ−αの過剰産生および放出を阻止またはブロックし、（２）高濃度ＴＮＦ−αの好ましくない毒性または致死的作用を薬理学的に阻止またはブロックする。過剰のＴＮＦ−α組織濃度は次に示す多数の疾患の仲介または悪化に関連している：リウマチ性関節炎、リウマチ性脊椎炎、骨関節炎、通風性関節炎およびその他の関節炎症状；全身性敗血症、グラム陰性敗血症、敗血症性ショック、内毒素ショック、中毒性ショック症候群、成人呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）、脳性マラリア、慢性肺炎症性疾患、珪肺、石綿症、肺サルコイドーシス、骨吸収性疾患、移植片対ホスト反応、同種移植拒絶；細菌性またはウィルス感染症、例えばインフルエンザ、による発熱および筋肉痛；後天性免疫不全症（ＡＩＤＳ）に二次的におきる悪液質、ケロイド形成、瘢痕組織形成、クローン病、潰瘍性腸炎、または発熱症；多くの“自己免疫病”、例えば多発性硬化症、自己免疫性糖尿病、および全身性エリテマトーサス。（トラセイら、Nature ３３０巻、６６２−６６４ページ、１９８７；バジャー（Badger）ら、Circ.Shock.２７巻、５１−６１ページ、１９８９およびヒンショーら、Circ.Shock. ３０巻、２７９−２９２ページ、１９９０；悪液質（デツブら、Lancet ３３５（８６９０：６６２（１９９０）））。用語“ＴＮＦ−α仲介性疾患または疾患状態”は、ＴＮＦ−αそのものの過剰産生または放出により、またはＴＮＦ−αがその他の病的生理学的生化学物質またはサイトカインの産生または放出をひきおこすことによって、ＴＮＦ−αが直接的役割を演じているすべての疾患状態を意味する。 “サイトカイン”は、細胞機能に影響を与える分泌ポリペプチドを意味し、不都合な被曝（例えば、アレルギー反応を含める種々のタイプの損傷）に反応した細胞間の相互作用を調節する分子である。用語“ＴＮＦ−αの過剰産生および／または放出を阻止（抑制）する”は次のことを意味する：（ａ）動物またはヒトそれぞれで、単球またはマクロファージを含める（だがこれらに制限されるものではない）数種類の細胞の過剰インビボＴＮＦ−α濃度を正常濃度に低下させる；（ｂ）ヒト組織の過剰のインビトロまたはインビボＴＮＦ−α濃度をそれぞれ正常濃度に下方調節する（ダウンレギュレーション)；（ｃ）移植後の事象としてのＴＮＦ−α濃度の直接合成を阻止することによって下方調節する。用語“組織および器官において過度に高いＴＮＦ−α濃度の病理生理学的効果の防止”は過度に高いＴＮＦ−α組織濃度の不都合な、毒性または致死的効果を薬理学的に阻止することを意味する。中枢神経系の障害（中枢神経系に対する傷害および損傷）種々のＣＮＳ疾患、例えば多発性硬化症、後天性免疫不全症（ＡＩＤＳ）、脳炎、アルツハイマー病、スクラピー、およびウィルスまたは細菌感染症の脳では種々のサイトカインまたはそれらの遺伝子の発現が変化する。ＣＮＳ内のサイトカインの産生は、Ｔ細胞およびマクロファージなどの侵潤性単核細胞を含める多数のソース、および残留性ナチュラル細胞、特に星状膠細胞および小グリア細胞に由来するらしい。グリア細胞はＩＬ−１、ＴＮＦ−α、およびＴＮＦ−βを含める種々のサイトカインをＣＮＳサイトカインネットワークの部分として産生する。ＣＮＳ中に最も豊富にあるグリア細胞である星状膠細胞は、種々の刺激、例えばＬＰＳ、サイトカインＩ１−１ＢおよびＩＦＮ−４、およびニューカッスル病ウィルス（ＮＤＶ）に反応してＴＮＦ−αを産生する（チャング（Chung,I.Y.）およびベンヴェニスト（E.N.Benveniste）、J.Immunol.，１４４巻、２９９９ページ、１９９０、リーベルマン（A.P.Lieberman）ら、Proc.Natl.Acad.Sci.，US A ６６巻６３４Ｂ、１９８９）。それらが発現される疾患、例えばＡＩＤＳ脳炎、アルツハイマー病、または多発性硬化症などにおいて、サイトカイン類が神経病因性メディエーターであることが多く、サイトカインは治療的処置の可能性を与える（キャンペル（I.L.Camp el）ら、Ann.N.Y.Acad.of Sciences、７７１巻、３０１ページ、１９９５）。中枢神経系細胞に対するＴＮＦ−αの影響ババクアービン（Babak Arvin）ら（Ann.N.Y.Acad.Sciences,７６５巻、６２ −７１ページ、１９９５）はＣＮＳのＴＮＦ−α産生、脳障害におけるＴＮＦ− αの関与、脳損傷におけるＰＭＮｓの役割、脳損傷における粘着分子の役割、および脳損傷の防止のための治療的処置におけるＴＮＦ−αの可能性について証拠を調査した。ＨＩＶ−１感染患者の脳では、若干の小グリア細胞が感染し、一方多くの他の細胞は活性化され、高濃度のＴＮＦ−αを発現する。これらの研究は、活性化されたヒト小グリア細胞から誘導されるＴＮＦ−αが直接関係しており、インビトロでＴＮＦ−αが乏突起神経膠細胞の損傷および死をひきおこしたことを明らかにする。こうしてＴＮＦ−α 特異的阻止物質はウィルス複製をスローダウンし、ＨＩＶ−１脳炎における乏突起神経膠細胞に対する細胞傷害性を減らすことができた（ウイルト（S.G.Wilt）ら、Tech.Adv.AIDS Res Hum.Nerv.System１９９５、１５１−１６２ページ）。ＴＮＦ−αは細菌性髄膜炎患者の脊髄液（ＣＳＦ）には検出されるが、ウィルス性髄膜炎患者のそれには検出されない。脊髄液（ＣＳＦ）とは対照的に、細菌性髄膜炎患者の血清はＴＮＦ−αを全くまたはほとんど含んでいなかった。異なる病因（ウィルス、悪性腫瘍）の発熱性髄膜炎患者および無菌性髄膜炎患者の研究ではＴＮＦ−αおよびＩＬ−β濃度と、細菌性病因との間に正の相関性が認められたが、ウィルス性または悪性腫瘍性病因との間には認められなかった。こうしてこれらのサイトカイン、特にＴＮＦ−αは発熱性と非発熱性髄膜炎とを区別するためのマーカーとして有用である（感度９４．２％；特異性１００％）。中程度に上昇したＣＳＦＴＮＦ−α濃度がヒト型結核菌をもつ患者にも認められた；ＣＳＦタンパク質および内毒素濃度、細菌密度および結果が記された。これらをまとめてみると、細菌性髄膜炎は、髄膜の炎症性反応の進行に密接に関係するサイトカインの胞膜内産生を伴う。実験髄膜炎における抗ＴＮＦ−α抗体による脳浮腫の阻止は、血液脳障壁の破壊にＴＮＦ −αが関係していることを明らかに示す。またＴＮＦ−αは好中球の組織内侵潤をトリガーし、その結果、局部領域に二次的メディエーターを誘発する。脳浮腫をおこす内皮細胞損傷は、さらに反応性酸素中間体の産生によって仲介され、スーパーオキシドジスムターゼによって阻止される（“サイトカインおよびＣＮＳ ”、編集：R.M.Ransohoff およびE.N.Beneviste，CRC Press，１９３ページ、１９９６）。ショハミ（E.Shohami）ら（J.Cerebral Blood Flow Metab.１６巻：３７８− ３８４ページ、１９９６）は最近、ラットにおいて閉鎖頭部傷害（ＣＨＩ）が打撲した脳半球にＴＮＦ−α産生をトリガーすることを示した。この研究は、ＴＮＦ−αの産生または活性の阻止が、脳浮腫の発生、並びにＣＨＩ後の神経学的異機能および海馬の細胞喪失に影響を与えるかどうかを確認できるように設計された。２種類の薬剤が傷害２４時間目のピーク浮腫形成を軽減し、傷害後１４日間運動機能回復を容易にした。脳中ＴＮＦ−α濃度は８０％減少し、血液脳障壁の破壊の修復が認められ、海馬細胞は保護された。こうしてＴＮＦ−α濃度の低下またはその活性の阻害は、結果として脳損傷の著しい減少に導いた。多発性硬化症多発性硬化症（ＭＳ）は免疫仲介性であるとはいえ、免疫抑制剤の治療効果はこれまで失望的である（スミス(R.Smith)、Lancet，３４７巻１２５１ページ、１９９６年５月４日）。ＣＮＳ内の多発性硬化症（ＭＳ）斑には侵潤し、グラビンスキー（Glabinski）ら（Neurol Scand.，９１巻、２７６−２７９ページ、１９９５）は、ＭＳ再発中にＴＮＦ−αが末梢血液単核細胞によって過剰生産される（だがリンフォトキシンはされない）ことを見いだした。ＴＮＦ−αは、乏突起神経膠細胞、星状膠細胞および脳内皮細胞に対する直接効果をもつため、ＣＮＳにおいて広範囲の機能を有する。ＣＮＳ疾患に最も関係のある機能は、ＴＮＦ−αの、インビトロにおけるミエリンおよび乏突起神経膠細胞損傷を仲介する能力、およびインビトロにおける乏突起神経膠細胞の細胞死をおこす能力である。ＴＮＦ−α活性のこの面は、例えば多発性硬化症などの疾患に認められるミエリン損傷および／または脱ミエリン過程に直接関与する。ヒト乏突起神経膠細胞はＴＮＦ受容体の両タイプ（ＴＮＦ−Ｒ１およびＴＮＦ−Ｒ２）を発現する；そこでＴＮＦ−αおよびＴＮＦ−βによって仲介される細胞毒性がＴＮＦ−Ｒ１の活性化によっておきるのかも知れない。ＴＮＦ−αは脳を含める種々の組織の炎症反応の重要なメディエーターであることは知られている、そして炎症の開始およびこのプロセスからおきる病的結果に重要な役割を演ずるらしい。ＴＮＦ−αは、乏突起神経膠細胞、小グリア細胞および星状膠細胞に対する直接効果をもつため、中枢神経系（ＣＮＳ）に広範囲の作用を有する。ＣＮＳ疾患に最も関係のある機能は、ＴＮＦ−αの、インビトロにおけるミエリンおよび乏突起神経膠細胞損傷を仲介する能力である。ＴＮＦ −αはまたインビトロで乏突起神経膠細胞の細胞死をおこす能力も有する（ロビンズ（Robbins,D.S.）ら、J.Immunol. １３９巻、２５９３ページ、１９８７）。ＴＮＦ−α活性のこの面は、例えば多発性硬化症（ＭＳ）などの疾患に認められるミエリン損傷および／または脱ミエリン過程に直接関与するらしい。ＴＮＦ −αは天然では非細胞傷害性である星状膠細胞にも多くの影響を有する。ＭＳにおける脱髄斑の病的特徴の１つはアストログリア細胞増加であり、この場合星状膠細胞の増殖およびグリア原線維性酸性タンパク質の生産がおきる（レーン(C.S .Raine)、Lab.Invest. ５０巻、６０８ページ、１９８４）。星状膠細胞増殖はＭＳと関連した反応性神経膠症をおこし、ＴＮＦ−αはこのプロセスを促進する。ＴＮＦ−αに反応したインビトロにおける星状膠細胞増殖はＴＮＦ−αが主要な役割を有することを示す（セルマジュ（K.W.Selmaj）ら、J.Immunol. １４４巻１２９ページ、１９９０）。ＴＮＦ−αはＭＳにおけるＣＮＳの脱髄に中心的役割を演じることが判明した。ＴＮＦ−αの血清濃度は活性ＭＳ患者では上昇し、ＴＮＦ−α産生マクロファージ、小グリア細胞および星状膠細胞が活性病巣部位に存在する。インビトロ実験では、ＴＮＦ−αは乏突起神経膠細胞損傷を直接仲介し、ミエリン形成を抑制し、星状膠細胞を刺激し、これはその後ＭＳのＣＮＳ瘢痕斑の原因となる（オーエンス（Owens）とスリラム（Sriram）、Neurological Clinics、１３巻、５１ページ、１９９５）。脱髄過程で重要な役割を演ずるのはマクロファージと小グリア細胞である。ＴＮＦ−αは自己免疫的脱髄において、ＭＳ斑に検出されたように、乏突起神経膠細胞の生きるか死ぬかに重要な役割を演ずる。しかし、インビトロ脱髄におけるＴＮＦ−αの役割の詳細はまだ確認されてはいない（“サイトカインおよびＣＮＳ”、編集：ランソホフ（R.M.Ransohoff）およびベネビスト（E.N.Beneviste）、CRC Press、１９９６、９９ページ）。ＴＮＦ−αの血清濃度は活性ＭＳ患者では上昇する（チョフロン（M.Chofflon）ら、Eur.Cytokine Net.３巻、５２３ページ、１９９１；シャリーフ（Sharief,M.K.）およびヘントゲン（Hentgen,N.E.）N.E.Jour.Med. ３２５巻、４６７ページ、１９９１）。ＴＮＦ−αを産生するマクロファージ／小グリア細胞および星状膠細胞が活性病変部位に存在する（セルマジュ（K.Selmaj）ら、Jour.Clin.Invest.８７巻、９４９ページ、１９９１）。インビトロ実験では、ＴＮＦ−αは乏突起神経膠細胞損傷を直接仲介し、ミエリン形成を抑制する（セルマジュら、J.Immunol.１４７巻、１５２２ページ、１９９０；ツマモト（ T.tsumamoto）ら、Acta Neurol.Scand. ９１巻、７１ページ、１９９５）、そして瘢痕斑の原因である星状膠細胞を刺激する（セルマジュら、Jour.Immunol. １４４巻、１２９ページ、１９９０）。ＭＳの病的特徴には、血管周囲炎および乏突起神経膠細胞喪失を伴う脱髄がある；髄鞘再生の試みは不成功であることが多く、最後は星状膠細胞性瘢痕になることが多い。組織における細胞−仲介性および体液性メカニズム。補体およびＴＮＦ−αを含める諸物質はインビトロでラット乏突起神経膠細胞を殺すことができる；表面補体活性化も乏突起神経膠細胞の細胞内プロセスを開始し、同時に食作用性相互作用のためのリガンドを提供する（ザジセク（J.Zajicek）ら、Mult. Scler. １巻、６１−７２ページ、１９９５）。星状膠細胞はＴＮＦ−Ｒ１のみを発現する（−３０００受容体／細胞）；そこでＴＮＦ−αのすべての効果はこの受容体により仲介される。ＭＳの病的特徴の１つは膠細胞増多症である；この場合星状膠細胞の増殖とグリア原線維酸性タンパク質の過剰生産がおきる。ＴＮＦ−αは星状膠細胞増殖を誘起し、それはＭＳと関連する膠細胞増多症をおこすかも知れない。それは特に、これらの疾患ではＣＮＳ中のＴＮＦ−α濃度が高いからである。ＴＮＦ−αは、星状膠細胞によるサイトカイン産生の効果的な誘導因子である。レイクマン（Reickmann）らは、ＭＳ悪化攻撃に先立つＴＮＦ−α発現の増加を証明した（循環単核細胞を用いて）。（“サイトカインおよびＣＮＳ”、編集：ランソホフおよびベネビスト、ＣＲＣ Press、１９９６年、２３２ページ）。星状膠細胞増殖の調節におけるＴＮＦ−αの役割を、ヒトおよびラット脳からの種々の星状膠細胞培養物を用いて研究した。ヒト星状膠細胞系列ではＴＮＦ− αは増殖を高め、この効果はＴＮＦ−α抗体によって阻止される。星状膠細胞増殖を調節するＴＮＦ−αの役割を、ヒトおよびラット脳からの種々の星状膠細胞培養物を用いて研究した。ヒト成人星状膠細胞系列ではＴＮＦ−αは増殖を促進し、この効果は抗ＴＮＦ−α抗体によって阻止される。ネズミ、ラットおよびヒト脱髄疾患のインビボ研究は、ＴＮＦ−αがＣＮＳ内にあらわれる炎症性反応に関与することを示している。ＴＮＦ−α陽性星状膠細胞およびマクロファージがＭＳ患者の脳内に確認された、特に斑領域では（ホフマン（F.M.Hofman）ら、Clin.Invest. ８７巻、９４９ページ、１９９１）ＴＮＦ−αおよびＴＮＦ−β両方がＭＳ斑領域に存在し、ＴＮＦ−αが星状膠細胞内に局在し、一方ＴＮＦ− は小グリア細胞およびＴ−細胞と関連していることが確認された。ＭＳ患者において血清および脳脊髄液のＴＮＦ−α濃度の上昇が報告された（シャリーフ（Sharief,M.K.）、フィル（M.Phil）、ヘントグス（R.He ntges）、N.Engl.J.Med. ３２５巻、４６７ページ、１９９１）、そして活性ＭＳ患者ではＴＮＦ−αの脳脊髄液濃度、血液脳障壁の破壊、およ高濃度の循環ＩＣＡＭ−１の間に強い相関性が存在する。アルツハイマー病老年期における最も一般的な痴呆症状であるアルツハイマー病（ＡＤ）は、老人の無能力および死の主な原因である。この病気は脳、特に海馬、扁桃、視床および新皮質を含む脳に異常があらわれることによって発現する。これらの領域の病変はニューロンの異機能／死、および標的の求心路遮断と関連する。ＡＤの主な病理学的特徴は細胞外実質および脳血管におけるアミロイド−βタンパク質（Ａβ）の沈着と、神経原線維糸球である（シソディア（S.S.Sisodia）ら“アルツハイマー病の病理生物学”、Academic Press,Ltd.,１８３ページ、１９９５）。抗体アッセイおよびバイオアッセイにより測定すると、ＴＮＦ−αはＡＤ患者の血清では概して高い。１研究においてはＡＤ症例のほぼ半数が高いＴＮＦ−α を示したが、対照では同様な上昇を示した者はいなかった。血清ＴＮＦ−α濃度の高い患者には炎症性疾患はなかった、そこで血清ＴＮＦ−αの増加はＣＮＳ疾患を反映するものであると想像された。血液−脳障壁は通常はサイトカインを通過させない。しかし血液−脳障壁はＡＤでは完全無傷ではないことを示唆する証拠がある。ＣＮＳの免疫学的プロセスの主なメディエーターはグリア細胞、特に星状膠細胞および小グリア細胞である。（“サイトカインおよびＣＮＳ”編集：ランソホフおよびベネビスト、CRC Press、２４６ページ、１９９６）。ＡＤの皮質では星状膠細胞数が広汎に増加し、星状膠細胞は老人性斑とも関連していることが多い。免疫細胞化学的研究は、ａｐｏ −Ｅが老人性斑および神経原線維糸球と関連することを示した。（“サイトカインおよびＣＮＳ”、編集：ランソホフおよびベネビスト、CRC Press、２５４ページ、１９９６）アルツハイマー病（ＡＤ）患者の脳のアミロイド斑および血管系に沈着しているβ−タンパク質（Ａβ）は、アミロイド前駆体タンパク質（ＡβＰＰ）からタンパク分解的に誘導されるアミノ酸３９〜４３のペプチドである。（J.Conn,Amv loid ，１巻、２３２−２３９ページ、１９９４）。アミロイド原線維の細胞外沈着は全身性アミロイド症の病理学的事象に関連し、アルツハイマー病（ハース（Haas,C）とセルコ（Selkoe,D.J．）、（１９９３）Cell７５巻、１０３９−１０４２ページ）およびII型真性糖尿病（ロレンゾ（ Lorenzo,A.）ら、１９９４ Nature（ロンドン）、３６８巻、７５６−７６０ページ）のそれらとも関連がある。アミロイド原線維の脳内沈着はアルツハイマー病（ＡＤ）の組織病理学的特徴であり、−アミロイドはＡＤの神経病発生と関係がある。Ａｂ誘導性神経変性は小グリア細胞増殖およびＴＮＦ−α放出増加を伴う（チャン（C.Chun）、Mol.Ch em.Neuropathol. 、２３巻、１５９−１７８ページ、１９９４）。アルツハイマー病の亢進および関連障害はアミロイドβ−タンパク質（Ａβ）沈着、および実質と脳血管の病的変化を含める。これらの疾患における脳血管Ａ β沈着は血管壁の変性した平滑筋細胞と関連がある；これらはＡβ前駆体（Ａβ ＰＰ）およびＡβを発現することがわかっている。著者は、Ａβの豊富な脳血管型であるＡβ１−４２が培養ヒト脳血管平滑筋細胞の細胞変性をおこすことを示した。この侵襲反応は細胞ＡβＰＰおよび、これらの変性細胞に産生される溶解性Ａβペプチドの濃度の著しい増加を伴う。これらのデータは、Ａβが脳血管病変の発生および進行に潜在的に貢献することを示した最初の実験的証拠である（サポリト- アーウィン（S.Saporito-Irwin）ら、J.Neurochem.６５巻、９３１− ９３４ページ、１９９５）。血管機能の障害がアルツハイマーのような神経変性的疾患の基礎にあるらしい。トーマス（T.Thomas）らは（Nature、３８０巻、１６８−１７１ページ、１９９６）、β−アミロイドが過酸化物ラジカルの産生を刺激することによって、血管内皮の構造および機能を変えるらしいことを示した。彼らの観察は、老化の遊離ラジカル理論とアルツハイマー型神経変性との関連性を提供するものである。 β−アミロイド沈着は老人およびアルツハイマー病患者の脳および脳血管に見られる。脳の微小血管系の異常がアルツハイマー病の早期指標であるから、トーマスら（同上）は血管に対するβアミロイドの影響を研究した。彼らはβ−アミロイドのミクロモル濃度がラット大動脈の速やかな血管収縮をおこすことを見いだした。過酸化物ラジカルがこの効果に関係していたかどうかを試験するために、血管を遊離ラジカル掃去剤である過酸化物ジスムターゼとともにあらかじめインキュベートした。β−アミロイド誘導性血管収縮は遮断された。電子顕微鏡検査は、β−アミロイド処理血管内皮に明らかな損傷を示した。（ブラドベリー（ J.Bradbury）、Lancet ３４７巻、７５０ページ、１９９６）。呼吸器系の異常（肺機能および灌流（ＤＬＣＯ））ヴィラニ（Villani）ら（Jour.Chemotherapy、７巻、４５２−４５４ページ、１９９５）は、皮膚メラノーマからのイントランジット転移(in-transit metast es)および四肢の軟組織肉腫からの転移をわずらった患者２２名で肺機能を研究した。彼らを軽度の高体温で０．５〜４．０ｍｇ／平方メートルの範囲の量のＴＨＦ−αを含む体外循環で分離灌流することによって治療した。１７名の患者は、補助的人工呼吸を必要とする呼吸不全に陥っていた（７名：１日だけ機械的人工呼吸、８名：２日間機械的人工呼吸、２名：同期化間欠的強制人工呼吸）。治療後７〜１２５日間記録した連続測定パラメーターは基礎値からの変化を示さなかった；対照的に、一酸化炭素の肺運搬因子（ＤＬＣＯ）は用量依存的に有意に減少した。これらのデータは、分離灌流法によって投与したＴＨＦ−αは肺副作用を引き起こすことを確認するものである（以前のモリス（R.C.Morice）らの報告、Proc.Soc.Clin.Oncol.、６巻、２９ページ、１９８７；クエイ（Kuei）ら、Chest ９６巻、３３４−３３８ページ、１９８９；リナード（Lienard）ら、Worl d Jour.Surg. 、１６巻、２３４−２４０ページ、１９９２）。考えられる一つの治療法は、マクロファージ誘導性サイトカインの作用を選択的に阻止することである。ＴＨＦ−αの病理生理学的濃度の重要性が証明された（ヴィルセク（Vilcek J．）ら、Jour. Exp ．Med.、１６３巻６３２−６４３ページ、１９８６）。ピゲット（Piguet）らは（Jour.Exp ．Med.、１７０巻、６５５−６６５ページ、１９８９；Nature，３４４巻、２４５−２４７ページ、１９９０）、過敏性肺炎のネズミモデルにおいて肺線維症を回避するためにＴＨＦ −α抗体をインビボ投与した。拡散能力は“運搬因子 ”という呼び方によってより正確に理解される、なぜならばそれ（拡散能力）は気体拡散障害以外の因子によって影響されるかも知れないからである。通常１回呼吸法によって測定される肺の一酸化炭素拡散能力（ＤＬＣＯ）が一般的に用いられるのは、それが比較的簡単な方法だからである。ＤＬＣＯは通常、肺機能異常と診断された場合は低下し、肺容量より著しく低下する。ＤＬＣＯはブレオマイシン誘起性ヒト肺炎における病的重症度を追跡するためのすぐれた臨床的手段である（ヴァンバーンヴェルト（Van Barneveld）ら、Am.Rev.Respir.Dis.，１３５巻、４８−５１ページ、１９８７）。気体（一酸化炭素、二酸化炭素または酸素）の拡散障害は肺胞−毛細管膜の異常、肺毛細血管容量の減少、肺容量または灌流に対する拡散能力の異常な分布によっておきる。拡散能力の膜成分は肺胞−毛細管膜の厚さの増加、またはガス交換に使用できる総表面積の減少、どちらかによって減少する。カッサン（Cassan）ら（Chest, ６５巻、２７５−２７８ページ、１９７４）は、肺拡散機能の中程度の異常をもつ患者９名から採取した肺生検標本の形態計測研究において、肺胞- 毛細管膜の調和平均厚さが正常対照のそれより７０％増加していることを見いだした。ＤＬＣＯ値は、ガス交換の運動誘起性悪化程度と強く相関している。これは安静時と運動時との動脈酸素飽和、Ｐａ０２の変化として測定され、酸素要求、および酸素拡散効率に直接相関している。肺機能（異常）患者の経過をモニターするために、測定は一貫してＤＬＣＯ値の測定を含めなければならない。このような測定値は広く使用でき、実施が容易で、費用が安い（ゴットリーブ（Gottli eb,D．）ら、Pulmonary Fibrosis、８０巻、８５−８７ページ、１９９５）。６ −１２カ月にわたる治療に対する反応から、その後の２４カ月の経過を予測できるのが普通である（ルッド（Rudd）ら、Am.Rev.Resp.Dis.、１２４巻４−８ページ、１９８１）；ワター（Watter）ら、Am.Rev.Resp.Dis.、１３５巻、６９６− ４７０４ページ、１９８７）。治療の最初の１年間の悪化は長期生存の可能性の減少を予測する。ＴＮＦ−αはブレオマイシンおよびシリカによって誘起される肺線維症に或る役割を演じることが証明された（ピゲットら、Jour.Exp ．Med.、１７０巻、６５５−６６３ページ、１９８９、および Nature、３４４巻、２４５−２４７ページ、１９９０；エヴァーソン（Everson）およびチャンドラー（Chandler）、Ame r.Jour.Path. ，１４０巻、５０３−５１２ページ、１９９２；ファン（Phan）およびカンケル（Kunkel）、Exp.Lung Invest.，８４巻、１８７３−１８８２ページ、１９８９；デニス（Denis）ら、Amer.Jour.Cell Mol.Biol.，５巻、４７７ −４８３ページ、１９９１）。ＴＮＦ−αは二次的メッセンジャーサイトカインの区画化放出を調節することによって、その炎症前効果を調和的に組み合わせることが報告されている。諸研究は、慢性的インビトロＴＮＦ−αにさらされたヌードマウスに肺炎症および線維症が発生することを示した（ＡＲＲＤ１４５巻、Ａ３０７、１９９２）。喘息シレリ（Cirelli）らは、アレルギー性喘息性気道におけるモノカイン産生パターンをより完全に特徴づけることを企て、これらの物質の相対的濃度が疾患の分類および細胞の補充に関連すると仮定した。アレルギー性喘息患者２５名においてブタクサを用いるセグメント抗原攻撃の前（１日目）および２４時間後（２日目）に得た１０×濃ＢＡＬ液のＥＬＩＳＡによって、サイトカイン測定を行った。１９名は全肺攻撃に対する二重反応、６名は単回初期反応であった。結果：ＴＮＦ−α、ＩＬ−１ｂおよびＩＬ−１ｒａの濃度は２日目には全喘息患者で増加した（ＴＮＦ−α：２．４９±０．７５〜１２．４３±４．７８ｐｑ／ｍｌ、ｐ＝０．０３；ＩＬ−１ｂ：３．７０±０．６２〜７．２５±０．９１ｐｑ／ｍｌ、ｐ＝０．０２；ＩＬ−１ｒａ：１５３１．８３±２７０．３４〜３７９９．９６±４４０．４９ｐｑ／ｍｌ、ｐ＝０．０００１）。ＡＡ−Ｓのなかではサイトカイン濃度が上昇する傾向があったが、ＡＡ−Ｄ群ではＴＮＦ−α、ＩＬ−１およびＩＬ−１ｒａの２日目の濃度はより高く（３種類ともｐ＜０．０５）、２日目の増加の大部分を占めた。細胞流入もＡＡ−Ｄ群で最大であった（マクロファージ、好酸球および好中球でｐ＜０．０５）。研究者らは、ＴＮＦ−α、ＩＬ −１およびＩＬ−１ｒａの産生が全アレルギー性喘息患者でセグメント抗原攻撃後２４時間目には有意に増加すると結論づけた（シレリら、Amer.Jour.Resp.Cri tical Care Med. ，１５１巻、３４５Ａ、１９９５）。ＴＮＦ−αは喘息において重要な役割を演ずると考えられる炎症前サイトカインである。ＴＮＦ−α濃度を、健康対照者１３名の気管支肺胞洗浄（ＢＡＬ）液で測定した（男性４名、女性９名、平均年齢２２．５ ±ＳＤ４．０；アトピー性喘息８名、軽度症候性アトピー性喘息７名、年齢３０．７±１３．２）。局所麻酔下で線維光視気管支鏡検査を行い、右上葉の分節気管支でＢＡＬを行った。ＢＡＬ液を１０−３０分の１に濃縮し、ＴＮＦ−α濃度をＥＬＩＳＡ法で測定した。ＴＮＦ−α濃度（未濃縮ＢＡＬ液１ｍｌについてあらわした）は対照者に比べて喘息患者では有意に大きかった（中間値９７．５対５４．１ｆｇ／ｍｌ、ｐ＜０．０５）。しかし非アトピー性対照とアトピー性対照との間ではＴＮＦ−αの有意差はなかった（５４．１対５７．４ｆｇ／ｍｌ、ｐ＞０．０５）。これらの研究結果は、喘息患者における組織ＴＮＦ−α濃度の増加を示し、これがこの病気の病理生理学に貢献するらしいことを示している（レディングトン（A.E.Redington）ら、Amer.Jour.Respir.Crit ．Care Med.，１５１巻、７０２Ａ，１９９５）。慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）ＴＮＦ−αが病理生理学に役割を演ずるもう一つの疾患は慢性閉塞性肺疾患である。線維症性反応によっておきる進行性呼吸不全疾患である珪肺症では、ＴＮＦ−αに対する抗体がマウスのシリカ誘起性肺線維症を完全にブロックした（ピゲットら、Nature３４４巻、２４５−２４７ページ、１９９０）。シリカおよびアスベスト誘起性線維症の動物モデルでは、高濃度のＴＮＦ−α産生（血清および分離マクロファージにおいて）が証明された（ビソネット（Bissonnette）ら、Inflammation、１３巻、３２９−３３９ページ、１９８９）。ＣＯＰＤ患者の炎症は現在、内視鏡的気管支生検によって評価される。内皮および上皮細胞の両方で炎症性細胞の増加と粘着分子の上方調節（アップレギュレーション）が見いだされた。この研究において、著者は安定ＣＯＰＤ患者の血漿中の炎症性メディエーターの測定によって全身炎症レベルを評価した（Amer.Jour.Resoir.Crit Care Med.、１５１巻、８４１Ａ、１９９５）。成人呼吸障窮迫症候群（ＡＲＤＳ）成人呼吸窮迫症候群では、１２０００ｐｇ／ｍｌ以上の過剰ＴＮＦ−α濃度がＡＲＤＳ患者の肺吸引物に検出されている（ミラー（Millar）ら、Lancet ２巻（８６６５）：７１２−７１４ページ、１９８９）。組換えＴＮＦ−αの全身注入はＡＲＤＳに一般的に見られる変化を起こした（フェレイ−バリヴィーラら、Arch.Surgery １２４巻、１４００−１４０５ページ、１９８９）。肺サルコイドーシス（類肉腫症）肺サルコイドーシス患者からの肺胞マクロファージは正常ドナーからのマクロファージに比べて多量のＴＮＦ−αを自発的に放出することがわかった（ボーグマン（Baughman）ら、Jour.Lab.Clin.Med.、１１５巻、３６−４２ページ、１９９０）。ＴＮＦ−αはその他の急性疾患状態、例えばその後の再灌流に続く病理生理学的反応など、にもかかわっている。それは再灌流性損傷に関係し、血流喪失後の組織損傷の主因である。（ヴェダー（Vedder）ら、Proc.Nat.Acad.Sci.，８７巻、２６４３−２６４６ページ、１９９０）。敗血症ＴＮＦ−αの過剰産生は内毒素誘起性敗血症ショックの病因に関係している（カルスウエル（Carswell）ら、Proc.Nat.Acad.Sci., ２巻、３６６６−３６７０ページ、１９７５）。内毒素はグラム陰性菌の細胞壁のリポ多糖成分であり、ＴＮＦ−αおよびその他の生物学的活性サイトカイン分子の合成および分泌増加を誘起するマクロファージ活性物質である。ＴＮＦ−α は敗血症、敗血症性ショックおよび多臓器不全の中心的メディエーターとして認識されている。これらのホスト反応は、高められたＴＮＦ−α産生による血中ＴＮＦ−α濃度増加と関連する。（スチュバー（F.Stuber）ら、Jour.Inflam. ４６巻、４２−５０ページ、１９９６）。敗血症では、ＴＮＦ−α過剰産生が低血圧、血管内皮透過性、および器官損傷、すなわち内毒素ショックの結果の幾つかをおこす。成人呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）はしばしば敗血症および多臓器不全と関連し、このことからＡＲＤＳの病因にＴＮＦ−αが或る役割を果たしていることが認識されるに至った。ＴＮＦ− αは慢性異化性疾患状態、例えば長期寄生虫およびウィルス感染および悪性腫瘍などに見られる体重喪失（悪液質）をおこす物質でもある。この体重喪失は回復にとってハンディキャップであり、致命的でさえある。肝臓は体内のサイトカイン産生マクロファージの最大のプールを含み、したがって敗血症ショックの発生および結果に重要な役割を演ずる。アウアーバス（S. Auer-Bath）らはインシトゥで灌流したマウス肝のＴＮＦ−α放出能力を研究した。ＬＰＳまたはＴＮＦ−αのどちらかでマウスを前処理すると、灌流液に用量依存性のＴＮＦ−α放出がおきた（Jour.Pharm.Exper.Therap.、２７６巻、９６８−９７６ページ、１９９６）。バジャー（A.M.Badger）らは、Ｄ−ガラクトサミン感作マウスにおいてインビトロおよびインビボでＬＰＳ誘導性ＴＮＦ−α産生に対する特異的作用物質の影響、並びにＬＰＳ誘導性死亡からマウスを防御するそれら物質の能力を研究した。インビボでは、効果的作用物質はＴＮＦ−α血清濃度を著しく減らした。ＴＮＦ−αはＬＰＳプラスＤ−ガラクトサミンモデルにおいて病因的中心的役割を有すると考えられている、なぜならば動物の生存率は血清ＴＮＦ−α 濃度の減少と直接相関関係にあったからである（Cir.Shok，４４巻、１８８−１９５ページ、１９９４）。インビボでは、ＬＰＳ投与Ｄ−ガラクトサミン感作マウスの血清ＴＮＦ−α濃度にランク順の効力があった。興味深いことにＴＮＦはＬＰＳ／Ｄ−ガラクトサミンモデルに中心的病因的役割をもつと考えられる、なぜならば、動物の生存率は各被検化合物で血清ＴＮＦ濃度の減少と直接相関していたからである（バジャーら、Cir.Shok，４４巻、１８８−１９５ページ、１９９４）。ネズミＴＮＦ−αに向けられる高度に特異的なポリクローン家兎抗血清を作った。ＢＡＬＢ／ｃマウスを抗血清で受動免疫したとき、それらマウスは大腸菌（ E.coli）から誘導されたＬＰＳの致死的効果から防御された。その予防効果は用量依存的であり、ＬＰＳ注射前に抗血清を投与した場合に最も効果的であった。ＴＮＦ−αに対する抗血清はＬＰＳ投与動物の熱性反応は軽減しなかった、そして非常に多量のＬＰＳはこの保護効果を克服した。特異的抗血清５０マイクロリットルで前処理したマウスにおけるＬＰＳの中間致死量は非免疫血清を投与した対照の中間致死量の約２．５倍であった。データは、ＴＮＦ−αがＬＰＳの致死的効果の主要メディエーターの１つであることを示唆する（ボイトラー（Beutle r）ら、Sci ence 、２２９巻、８６９ページ、１９８５）。肝臓肝臓は代謝およびホスト防御メカニズムに中心的役割をもつため、敗血症時の多臓器不全の開始に責任のある主要器官であると考えられている。敗血症の初期の過度に起動的な段階における肝細胞機能の低下は肝臓灌流の減少によるものではないように見え、循環サイトカイン類、例えばＴＮＦ−αの濃度増加に関連している。さらに組換えＴＮＦ−αを心拍出量または肝臓灌流を減らさない程度の量投与すると、肝細胞機能異常が生ずる。（ワング（P.Wang）、Amer.Jour.Phys iol. ２７０巻、５ページ、１９９６）。肝臓は体内にサイトカイン産生マクロファージの最大プールを含み、そのため全身性炎症性反応症候群の発生および結果に重要な役割を演ずるらしい。インシトゥ灌流マウス肝のＴＮＦ−α放出能力およびメチルキサンチン（十分に確立された炎症性サイトカイン抑制薬の１つである）によるその調節を研究した。マウスにポリ多糖体またはＴＮＦを前投与すると、灌流液に用量依存性ＴＮＦの放出がおきることがわかった。これはマウスにペントキシフィリンまたはＡ−８０２７１５（ｉ−（５−ヒドロキシ−５−メチル）ヘキシル−３−メチル−７プロプリキサンチン）のインビボ前投与によって阻止された。これらのメチル−リポ多糖体またはＴＮＦの注入も、ＴＮＦ産生が開始した後でさえ直ちに、そして可逆的に、ＴＮＦ産生を阻止した。メチル−キサンチンの阻止効果はアデニレートシクラーゼインヒビターであるジデオキシアデノシンの前投与によって防止された：これはこれらの薬剤の考えられるるメカニズムとしての環状アデノシン−リン酸系の上方調節を示唆する。肝臓は強力なサイトカイン生産体であることが証明された、そしてショックおよび炎症性肝不全のネズミモデルにおいて、それはメチル−キサンチンまたはその他のホスフォジエステラーゼインヒビターの標的器官の一つであることが確認された。（レイスト（M.Leist）、J.Pharmacol.Exp.Ther. ２７６巻、９６８−９７９ページ、１９９６）。著者は転写停止下における肝臓アポトーシス、肝臓アポトーシスの誘導下における５５ｋＤａ受容体の活性化、ＴＮＦ誘導性肝臓アポトーシスにおけるグリコシル化段階、Ｔ細胞−開始性サイトカイン放出による肝損傷誘発、および転写停止がないときのＴａ細胞依存性ＴＮＦ−仲介性肝損傷を論じている（ウェンデル（A.Wendel）ら、Cell.Biol.Mol.Basis Liver Transp. Int.,Ringberg Conf.Hep atic Transp.,２版、１９９５、１０５−１１１ページ）。膵臓肥満者を心臓病およびII型糖尿病の発生リスクに導く、肥満誘導性インスリン抵抗のメカニズムが最近確認された（Science ２７１巻６６５ページ、１９９６）。肥満者の脂肪細胞は、肥満程度並びにインスリン抵抗の程度と相関する濃度のＴＮＦ−αを含むことがわかり、研究者らはインスリン抵抗を促進するＴＮＦ −αの役割に取り組んだ。彼らは、ＴＮＦ−αが鍵となる基質を、セリン残基のところでリン酸化することによって抵抗を誘起することを見いだした。ＩＲＳのこの変化した形は、インスリン経路の第１段階であるインスリンが結合した後のインスリン受容体の自己リン酸化を阻害する。ＴＮＦ−αは肥満と関係するインスリン抵抗状態に中心的役割を演ずる。これまでに、ＴＮＦ−αがインスリンのシグナル化を妨害する重要な１つのメカニズムはインスリン受容体基質−１（ＩＲＳ−１）のセリンリン酸化によることが示された。これははインスリン受容体（ＩＲ）のチロシンキナーゼ活性のインヒビターとして機能し得る。データは、ＴＮＦ−αがｐ５５ＴＮＦＲによるシグナル化、およびスフィンゴミエリナーゼ活性を阻害し、その結果ＩＲＳ −１の阻害型を産生することを強く示唆している（ペラルディ（P.Peraldi）ら、Jour.Biol.Chem.２７１巻、１３０１８−１３０２２ページ、１９９６）。クローン病研究者らは正常な子供、下痢の乳児、および活性期および不活性期の炎症性腸疾患の子供の便中のＴＮＦ−α濃度を測定した。１０名の正常な子供および１４名の下痢の子供において、便中の中間ＴＮＦ−α濃度はそれぞれ５８および４５ｐｇ／ｇ便であった。下痢対照児に比較して、活性期クローン病の子供では便中ＴＮＦ−α濃度は有意に増加した（ｎ＝１３、中間値９９４ｐｇ／ｇ）ｐ＜0.00 02）。手術またはステロイド治療の結果、不活性期になったクローン病患者では、便中ＴＮＦ−α濃度は対照濃度にまで低下した（約５０ｐｇ／ｇ；ブラッガー（C.P.Braegger）ら、Lancet ３３９巻、８９−９１ページ、１９９２）。前子癇前子癇は内皮の異常であり、ＴＮＦ−αが幾つかのメカニズム、例えば酸化剤と抗酸化剤とのバランスの変化、プロスタグランジン産生パターンの変化、数種の細胞表面成分の発現に対する影響などによって、内皮細胞に基礎的影響を与える。患者の結果をみると、けいれん前患者ではＴＮＦ−αｍＲＮＡ発現が対照群と比較して有意に高くなっていることがわかる。これらの観察はにおけるＴＮＦ−αの主な役割と一致する（Immunol.１０４巻、１５４−１５９ページ、１９９６）。皮膚火傷ラットに全身表面積の３７％の熱湯熱傷を与えた後、第１週目に、熱傷領域および離れた領域のひらめ筋のタンパク異化速度およびＴＮＦ−α含量を動的に測定した。骨格筋のＴＮＦ−α含量は熱傷領域の方が離れた領域より遥かに多かった。また、ＴＮＦ−αの増加は、骨格筋のタンパク異化速度と有意な相関関係にあった（リー（L.Li）ら、Jour.Med.Coll ．PLA１０巻、２６２−２６７ページ、１９９５；C.A.１２５巻：９３８ページ、１２４５巻：８１５６ａページ、１９９６）。骨吸収ＴＮＦ−αは関節炎などの骨吸収疾患では増加する；この際活性期では白血球が骨吸収活性をもたらすことが確認された。データは、ＴＮＦ−αがこの活性を高めることを示している（バートリニ（Bertolini）ら、Nature ３１９巻、５１６−５１８ページ、１９８６、およびジョンソン（Johnson）ら、Endocrinology １２４巻、１４２４−１４２７ページ、１９８９）。ＴＮＦ−αはインビロおよびインビボにおいて破骨細胞形成および活性化の促進と骨芽細胞機能の阻止によって、骨吸収を促進し、骨形成を阻害する。ＴＮＦ−αは関節炎を含める多くの骨吸収性疾患にかかわっているらしい。リウマチ性関節炎ヒトリウマチ性関節炎組織のサイトカインｍＲＮＡおよびタンパク質の分析は、多くの炎症前サイトカイン、例えばＴＮＦ−αなど、が治療にもかかわらずすべての患者に多量にあることを証明した。自発的にＩＬ−１を生産するリウマチ性関節細胞培養物においては、ＴＮＦ−αがＩＬ−１の主な優勢調節物質であった。その後、ＴＮＦ−αを中和すると、その他の炎症前サイトカインも阻止された。これは炎症前サイトカイン類はＴＮＦ−αをその先端に含むネットワークに結合しているという概念に導く。これから、ＴＮＦ−αがリウマチ性関節炎に重要な役割を演じており、治療の標的であるという概念が生まれる。これを試験して成功した。これらの研究は、長期リウマチ性関節炎患者では抗ＴＮＦ−α治療の臨床試験の実施が合理的であることを示した。キメラ抗−ＴＮＦ−α抗体を用いる幾つかの臨床試験は、明らかな臨床効果を示し、ＴＮＦ−αがリウマチ性関節炎に重要な役割を果たしているという考え方が正しいことを証明した。再発を繰り返す場合にも再投与が有効であることが臨床試験で示され、この疾患がＴＮＦ−αにかかわり続けていることを示唆した（フェルドマン（M.Feldmann）Annual Rev.Immunol.１４巻、３９７−４４０ページ、１９９６）。血管ＴＮＦ−αは内皮細胞の性質を変え、種々の凝結促進活性、例えば組織因子凝固原活性の増加および抗凝固タンパク質Ｃ経路の抑制並びにトロンボモジュリンの発現の下方調節などを有する（シェリー（Sherry）ら、Jour.Cell.Biol.１０７巻、１２６９−１２７７ページ、１９８８）。ＴＮＦ−αは、その早期（外傷または傷害事故の初期）産生とともに、幾つかの重要な障害、例えば心筋梗塞、発作および循環性ショックなど（ただしこれらに制限されるものではない）における組織損傷に反応するメディエーターとなる活性を有する。特に重要なのは、粘着分子、例えば細胞間接着分子（ＩＣＡＭ）または血管内皮白血球粘着分子（ＥＬＡＭ）などの、内皮細胞におけるＴＮＦ−α誘導性発現である。（ムンロ（Munro）ら、A m.Jour.Path. １３５巻、１２１−１３２ページ、１９８９）。心臓パッカー（Packer）らは、心不全における現在の最も疑われる物質はノルアドレナリン、アンギオテンシン、バソプレシン、エンドテリン、および腫瘍壊死因子（ＴＮＦ−α）であることを示唆している（N.E.J.Med.３２３巻、２３６−２４１ページ、１９９０）。彼らは、ひどい心不全、特にその病気の症状がひどい場合、例えば心臓悪液質、ではＴＮＦ−αの濃度が増加することを報告した；ＴＮＦ−αは、慢性炎症性疾患、感染症、癌およびその他の疾患で悪液質を生ずる。本研究の主な目的は、低濃度ＴＮＦ−αの、変力反応（イノトロピックレスポンス）に対する、および心筋細胞の高エネルギーリン酸塩の細胞濃度に対する亜慢性的効果を確認することであった。そこで培養した新生ラット心臓細胞をＴＮＦ−αに２４時間さらした後に１０−５Ｍイソプロテレノール−、１０−１Ｍウーアバイン−、１０−５Ｍフォルスコリン−、および２．４ｍＭカルシウム灌流液に対する変力反応を研究した。動物およびヒトで行った研究結果から、低濃度のＴＮＦ−αに亜慢性的にさらされると、異なる変力性物質に対する心筋細胞の反応がほぼ完全に、だが可逆的に阻止されると結論づけられる；これは変力カスケードの一般的最終段階がＴＮＦ−α によって変化することを示唆する。ＴＮＦ−αにさらされた細胞のエネルギー代謝も影響を受けるとはいえ、高エネルギーリン酸濃度の減少だけでは認められた心筋細胞の変力反応の阻止は説明されない。研究者は、培養ラット心筋細胞に関するインビトロ研究から、低濃度ＴＮＦ−αへの亜慢性的被曝は異なる変力作用物質（イソプロテレノール、ウーアバイン、フォルスコリン）に対する心筋細胞の反応のほぼ完全なだが可逆的阻止をおこすと結論づけ、変力カスケードの一般的最終段階がＴＮＦ−αによって変わることを示唆している（ボクステジャーズ（P.Boelstegers）、Mol.Cell.Biochem. １５６ページ、１３５−１４３ページ、１９９６）。炎症性疾患状態は心筋梗塞にかかりやすくする。著者らはラットにおいて全身性炎症性反応症候群、（ＬＰＳ）−誘起性循環性ショックの冠状血管緊張状態に与える影響を研究した。シクロヘキシミドまたはＴＮＦ−α抗体の前投与、またはインビボおよびインビトロにおける皮ＥＴＡ受容体選択的拮抗物質、ＦＲ１３９３１７、の連続注入はＬＰＳによって誘起される冠状血管抵抗増加を著しく減少させた。こうしてＴＮＦ−αはエンドテリン−１−（ＥＴ−１）の放出を誘起するらしい、そしてこれは冠状血管収縮の少なくとも一部を仲介する。そのため、炎症性疾患状態、例えばＬＰＳ誘起性敗血症性ショックでは、それに続くＴＮＦ−αおよびエンドテリン−１の放出があり、それは冠状血管緊張の増加をおこし、心筋虚血になりやすくする。抗体並びにＥＴによるＴＮＦ−αの不活性にもかかわらず、選択的拮抗物質による受容体ブロックはこの経路を有効に妨害するかも知れない（ホールフェルド（T.Hohlfeld）ら、Br.J.Pharmac ol. １１６巻、３３０９−３３１５ページ、１９９５）。免疫移植片対宿主反応においては、上昇した血清ＴＮＦ−αレベルは、同種の骨髄移植後の主要な合併症と関連していた（ホーラー(Holler)ら、Blood、７５巻、１０１１−１０１６頁、１９９０）。サルメテロールおよびその関連試薬は、約０．１μＭの同様のＩＣ５０Ｓを用いたリポ多糖類（ＬＰＳ）活性ＴＨＰ−１細胞によるＴＮＦ−α分泌を抑制したが、この抑制はＢ２−拮抗阻害体Ｂ２−アドレナリンレセプタにより有効に逆転された。著しく異なる反応性プロファイルがＴ細胞で見られた。サルメテロールは、抗−ＣＤ３抗原に応答して増殖とＩＬ−２分泌により測定したところ、マウスとヒトの双方のＴ細胞の活性化を抑制したが、アルブテロールはこれらの検定では完全に不活性であった。サルメテロールによるこのＴ細胞阻止は、ＴＮＦ −α生産によるものよりも効力が約１０倍低く、Ｂ２−拮抗阻害体によっては逆転されなかったが、これはサルメテロールの影響が異なる機構によることを示している。インビトロの抑制活性ＴＮＦ−αと同様に、サルメテロールとサルブテロールの経口投与は、約０Ｓ１ｍｇ／ｋｇのＥＤ５０ｓにより、インビボのマウス血清ＴＮＦ−αレベルのＬＰＳ誘導による増加を抑制（阻止）した。この抑制は、ｂブロッカプロプラノロールを経口投与することによりなくすことができた。サルメテロールの持続性薬理プロファイルは、その抗力を３ｈ保持することから明らかになり、一方、サルブテロールは作用の持続時間が著しく短かった。サルメテロールはまた、エンドトキシンショックを呈していたが、これはＴＮＦ− α産生による。サルメテロールは、この検定では、血清ＴＮＦ−αレベルを９４％まで抑制したが、５０％未満の動物をＬＰＳ／ガラクトースアミン混合物の致死作用から保護するものであった。この観察は、組織において局在するＴＮＦ−αの機能レベルが血清レベルにより正確には反映されないことを示している（セクト(L.Sekut)、Clin.Exp.Immunol.、９９巻、４６１−４６６頁、１９９５）。感染症幾つかのウイルスはＴＮＦ−αによる規制に感応性があり、インビボのＴＮＦ −α過剰生産および分泌を誘発する。かかるウイルスには、ＨＩＶウイルス、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、インフルエンザ、アデノウイルスおよびヘルペスウイルス群が含まれるが、これらに限定されるものではなく、またはヘルペスウイルス群にはヘルペス帯状疱疹およびヘルペス単体が含まれるが、これらに限定されない。単球、マクロファージ、並びに、クッパーおよびグリア細胞のような関連する細胞は、ＨＩＶ感染症の維持に連係しており、ＨＩＶウイルスの複製のターゲットである。ＴＮＦ−αはまた、単球および／またはマクロファージにおけるＨＩＶ複製を活性にすることがわかった（ポリ(Poli)ら、Proc.Nat.Acad.Sci.、８７巻、７８２−７８４頁、１９９０）。従って、ＴＮＦ−α過剰生産および活性の抑制は、ＨＩＶ進行の抑制を高める。Ｔ細胞およびマクロファージラインにおける潜在ＨＩＶのエイズウイルスの複製は、ＴＮＦ−αにより誘発させることができる（ホルク(Folk)ら、Proc.Nat.A cad.Sci. 、８６巻、２３６５−２３６８頁、１９８９）。ウイルス誘発活性の分子機構は、細胞の細胞質において見られる、ウイルス規制遺伝子シーケンスへの結合を介してＨＩＶ複製を促進する遺伝子規制タンパク質を活性化するＴＮＦ−αの能力により示される（オズボーン(Osborn)ら、Proc.Nat.Acad.Sci.、８６巻、２３３６− ２３４０頁、１９８９）。エイズに関連する悪液質におけるＴＮＦ−αレベルの高まりは、増大した血清ＴＮＦ−αと、患者からの抹消血単球におけるＴＮＦ− αの高レベルの同時生産とにより示される（ライト(Wright)ら、J.Immunol.、１４１巻、９９−１０４頁、１９８８）。ラーデビルタ(Lahdevirta)らは、Amer.Jour.Med.、８５巻、２８９頁、１９８８において、ＴＮＦ−αは、ＨＩＶに関連する、悪液質および筋肉の退歩の状態と関連すると述べている。ライト(Wright)らは、J.Immunol.、１４１巻、９９− １０４頁、１９８８において、かかる患者からの抹消血単球における増大するＴＮＦ−αおよび高レベルのＴＮＦ−α生産によるエイズ悪液質におけるＴＮＦ− αの役割の可能性について示唆している。フォルクス(Folks)ら（Proc.Nat.Acad.Sci.、８６巻、２３６５−２３６８頁、１９８９）は、ＴＮＦ−αはＴ細胞およびマクロファージラインにおける潜在ＨＩＶのウイルス複製の刺激を誘起すると指摘している。細菌性髄膜炎は、髄膜炎症応答の発生と密接に関連する可能性のある細胞質の髄膣内生産を伴う。実験髄膜炎における抗ＴＮＦ−α抗体による脳水腫の予防は、血液脳関門の破損におけるＴＮＦ−αの関与の確固たる証拠を提供している。ＴＮＦ−αはまた、好中球の組織内への浸潤を誘発し、結果として、副次的メディエーターの局所領域における誘発を引き起こす。ＴＮＦ−αはまた、内皮細胞と白血球とによる血小板活性因子（ＰＡＦ）およびプロスタグランジンの形成を活性化する。脳水腫を引き起こす内皮細胞の損傷はまた、反応性酸素中間体の生産により媒介されるが、これは過酸化物ジスムターゼにより阻止することができる（フォンタナ(A.Fontana)ら”Cytokines and the CNS”CRC Pres s、１９９６、R.M.Ransohoff およびE.N.Benveniste編集）。ＴＮＦ−αはまた、酵母および真菌性感染症とも関連する。特に、カンジダアルビカンスは、ヒト単球およびナチュラルキラー細胞においてインビトロＴＮＦ −α過剰生産を誘起することが示されている（リッピ(Riipi)ら、Infection and Immunity 、５８巻、２７５０−５４頁、１９９０、ジャファリ(Jafari)ら、Jou r.Infect.Dis. 、１６４巻、３８９−９５頁、１９９１、ワサン(Wasan)ら、Anti microb.Agents and Chemo. 、３５巻、２０４６−４８頁、１９９１、ルーク(Luk e)ら、Jour.Inf.Dis.、１６２巻、２１１−２１４頁、１９９０）。脳マラリアは、マラリア患者に生ずる高血液レベルに関連する致命的な過敏性神経症候群である。ヒト疾患の幾つかの特徴を再現するある形態の実験脳マラリアは、抗ＴＮＦ抗体の投与によりマウスにおいて阻止された（グラウ(Grau)らIm munol.Rev. 、１１２巻、４９−７０頁、１９８９）。血清ＴＮＦ−αのレベルは、急性マラリアに罹患した患者における疾患と予後の厳しさとに直接相関していた（グラウら、New Eng.Jour.Med.、３２０巻、１５８６−１５９１頁、１９８９）。従来の投与量では、熱帯熱マラリア原虫の溶解した赤血球の形態により刺激されるヒト抹消血におけるクロロキノンのＴＮＦ−α抑制活性は、キニンのそれと比べて大きかった。脳マラリアの最適処理は、クロロキンと迅速作用抗ＴＮＦ−α抗体との組み合わせとすることができる（クエートコウスキー(D.kwaitkowski)およびベイト(C.Bate)、Trans.R.Soc.T rop.Med.Hyg. 、８９巻、２１５−２１６頁、１９９５）。（クルーズィ(T.cruzi)により引き起こされる）シャガース症の典型的なものの１つに、進行性心筋症がある。この疾患は、心臓の機能を低下させることが知られているＴＮＦ−αの高い血清レベルと関連する。クルーズィトリポマスティゴートに感染させ、１５日後に殺した生後１ヶ月の雄のルイスラットの場合には、感染した動物の履歴検査により、筋細胞内のアマスティゴートによる濃厚な感染と、心筋における最小の炎症性湿潤液が明らかとなった。機械的損傷のほかに、クルーズィによる感染は、心筋自体における前炎症性細胞質を誘起するが、これは病気を悪化させるとともに、心筋機能に悪影響を与える（チャンドラセカール(B.Chandrasekar)ら、Biophys.Res.commu.、２２３巻、３６５−３６７１頁、１９９６年）。従って、本発明の主たる目的は、（１）種々の適宜の細胞（元は、間葉、中胚葉または表皮）からＴＮＦ−αの合成、貯蔵（保存）および放出の抑制（阻止）、及び、（２）過剰に高濃度のＴＮＦ−αが細胞、組織および器官に及ぼす病理生理学的影響を阻止する組成物および方法を提供することにある。本発明の別の目的は、ＴＮＦ−αの有利な作用を抑制することのない組成物および方法を提供することにある。本発明の別の目的並びにその特定の特徴、要素および利点は以下の説明から明らかになるものである。発明の開示本発明は、好ましい実施態様においては、種々の細胞からの腫瘍壊死因子の合成および放出の抑制方法であって、Ｎ−置換２（１Ｈ）ピリドン、Ｎ−置換３（１Ｈ）ピリドンおよびこれらの薬学的に許容することができる塩よりなる群から選ばれる１つ以上の薬学的物質の有効投与量をヒトその他の哺乳動物に投与する工程を含んでなる、種々の細胞からの腫瘍壊死因子の合成および放出の抑制方法を提供することにより、上記目的を達成するものである。図面の簡単な説明図１−５は、本発明の化合物の１つを用いて行われる種々の実験の結果を示す。発明を実施するための最良の形態５−メチル−１−フェニル−２−（１Ｈ）−ピリドン、即ち、「ピルフェニドン」および関連化合物は、ＴＮＦ−αの合成および放出を抑制するとともに、損傷部位におけるＴＮＦ−αの幾つかの病理生理学的影響を抑制しまたは阻止することにより、ヒスタミン、プロスタグランジン、ブラジキニンおよびペルオキシダーゼのような、細胞からの他の病理生理学的生化学生成物の放出を抑制することがわかった。本発明はまた、かかる化合物と、薬学的に許容することができる希釈剤とを含んでなる薬学的組成物に関する。ＴＮＦ−α過剰生産および／または放出を特異的に抑制するこのような化合物の発見により、過剰のＴＮＦ−α生産が関連する疾患に対する治療方法が得られるだけでなく、細胞、組織または器官による過剰濃度のＴＮＦ−αに対する曝露の病理生理学的影響を阻止することができる。本発明の化合物は、単球、マクロファージ、神経細胞、内皮細胞、表皮細胞、間葉細胞（例えば、線維芽細胞、骨格筋細胞、平滑筋細胞、心筋細胞）並びに他の多くの種類の細胞の過剰生産および放出を抑制するのに有用である。本発明はまた、（１）細胞からのＴＮＦ−αおよび／またはＴＮＦ−βの過剰生産および／または放出を抑制するとともに、（２）ヒトを含む哺乳動物におけるＴＮＦ−αの過度に高い組織レベルの有害、有毒または致命作用を阻止する治療方法に関する。この方法は、上記した化合物の１つ以上の有効ＴＮＦ−α抑制量を哺乳動物に投与する工程を含む。この方法はまた、ＴＮＦ−αにより媒介され、あるいは再発される疾患の治療または予防に使用することができる。本発明は、ヒトを含む哺乳動物に所要によりかかる化合物の有効量を安全に投与することにより、アレルギ、外傷、放射線、化学、微生物その他の損傷疾患を治療する方法を提供するものである。かかる化合物は、これらの各環境における過剰レベルのＴＮＦ−αの放出、合成とともに、過剰レベルのＴＮＦ−αの病理生理学的作用を抑制しあるいは阻止することにより、組織または器官の損傷の抑止または解消を直接的に容易にするとともに、正常な機能の修復を容易にする。同時に、これらの作用は、感染、アレルギ、免疫現象、火傷、放射線照射、腫瘍性疾患、有毒化学物質を原因とし、かつ、心臓血管の損傷、神経損傷、腎損傷、肝臓損傷、膵臓損傷、並びに、腹水、局所水腫、皮膚損傷および皮膚水泡として表される組織損傷その他の損傷疾患の治療において新規な用途を提供するものである。強力な免疫抑制剤であるシクロホスファミド（シトキサン）、アザチオプリン、シクロスポリンまたはプレドニゾンとは異なり、これらの化合物は、免疫応答を抑制することなく、「自動免疫疾患」として分類される臨床不全の薬剤治療に寄与することができる。これらの化合物を系統的にまたは局所的に使用した後の局所水腫の著しい減少により、水腫が特定の化学剤、アレルギ反応、エンドトキシン、放射線、微生物感染、火傷あるいは損傷により実験的に誘発されるかどうかが明らかとなっている。水腫は、（１）かかる化合物の局所的な適用、または（２）十分に系統的な（経口または非経口）投与後に容易に消失する。例えば、かかる化合物、即ち、局所的に適用されあるいは系統的に投与されるＴＮＦ−α拮抗阻害体は、局所水腫、圧力損傷により引き起こされる発疱応答（発疱）（例えば、工具の取り扱いにより引き起こされる手の圧迫打撲あるいは発疱）、熱傷あるいは火傷を原因とする損傷、並びに、（１）化学物質を原因とする損傷、（２）微生物感染により放出される生成物（例えば、ＬＰＳ）、（３）外部の生物学的生成物（接触皮膚炎、昆虫刺傷）との接触に対する免疫応答、（４）古典的なアレルギ応答（慢性鼻炎を引き起こすサワギク枯草熱）、（５）放射線曝露（日焼け）を劇的になくすことができる。肺機能障害を持つ患者の場合に、経口ピルフェニドンを使用した予備試験において、連続ＤＬＣＯ定量により測定したところ、肺の拡散能力に、迅速かつ一貫した改善が顕著にみられた。化合物はまた、ウイルス感染の治療にも有効であり、かかるウイルスはＴＮＦ −αによる規制に感応性があり、インビボのＴＮＦ−α過剰生産および分泌を誘発する。本発明の化合物を用いた治療が行われるウイルスは、感染の結果としてＴＮＦ−αを生産するウイルス、あるいは式（Ｉ）のＴＮＦ−α抑制剤に対して直接または間接に応答するウイルスである。かかるウイルスには、ＨＩＶウイルス、シトメガロウイルス（ＣＭＶ）、インフルエンザ、アデノウイルスおよびヘルペスウイルス群が含まれるが、これらに限定されるものではなく、ヘルペスウイルス群にはヘルペス帯状疱疹およびヘルペス単体が含まれるがこれらに限定されない。本明細書において説明されている活性化合物は、ＴＮＦ−αの生産を抑制し、従って、上記したように、過剰のＴＮＦ−α組織または血液レベルに関連する著しく多くの疾患の治療に使用することができ、かかる疾患には、敗血性ショック、出血性ショック、慢性リウマチ、インシュリン抵抗性タイプ２糖尿病、炎症性疾患、成人呼吸窮迫症候群、喘息、後腎臓透析症候群および骨髄移植後の移植片対宿主疾患が含まれる。ヒトその他の哺乳動物の治療に、かかる化合物およびその薬学的許容塩を使用するためには、これらは、通常、標準的な薬学的プラクティスに従って薬学的組成物として配合される。化合物またはその薬学的許容配合物は、ヒトその他の哺乳動物における、ぜん息、アレルギ、または炎症性疾患のようなＴＮＦ−αの抑制により媒介される疾患の予防または治療措置の投薬剤の製造において使用することができるが、これらに限定されない。化合物は、ヒトその他の哺乳動物におけるかかる疾患を治療するのに十分な量が投与される。本発明の薬学的組成物は、化合物の少なくとも１つ以上の無毒な有効量と、薬学的に許容することができるキャリアまたは希釈剤とを含んでなる。これらの処理には、所望の製剤に適した、成分の混合、粒状化および圧縮または溶解が含まれる。こうして、固体のキャリアが使用される場合には、製剤は、錠剤とし、粉末またはペレットの形態で硬いゼラチンカプセルに入れ、あるいはトローチまたは甘味入り錠剤の形態とすることができる。固体キャリアの量は変わるが、約２５ｍｇ〜４００ｍｇとするのが好ましい。液体のキャリアが使用される場合には、製剤はシロップ、エマルジョン、軟質のゼラチンカプセル、アンプルまたは非水性懸濁液のような無菌の注射可能な液体の形態とされる。組成物がカプセルの形態をなす場合には、例えば、硬質のゼラチンカプセルの殻に入れた上記キャリアを使用した、通常のカプセル封入が適している。シロップ配合物は、通常、液体キャリア、例えば、エタノール、グリセリンまたは水に風味剤または着色剤とともに入れた化合物の懸濁液または溶液からなる。エーロゾル製剤は、水、エタノールまたはグリセリンのような液体キャリアに入れた化合物の溶液または懸濁液からなり、一方、粉末乾燥エーロゾルの場合には、製剤は湿潤剤を含むことができる。本発明の配合物は、活性成分を、その１つ以上の許容することができるキャリアおよび所要の場合には、他の治療成分とともに含む。キャリアは、配合物の他の成分と適合するという意味において「許容することができる」とともに、その受容体に有害であってはならない。当業者が認識するように、薬学的に許容することができるキャリアまたは希釈剤の形態および特性は、該キャリアまたは希釈剤が組み合わされるべき活性成分の量、投与の方法その他周知の可変因子により左右される。例Ｉ３３〜９００マイクログラム／ミリリットルの濃度のインビトロのピルフェニドンは、ＷＥＨＩ１６４細胞からのＴＮＦ−αの過剰な病理生理学的量の合成および／または放出を抑制した（表１）。３３〜３００マイクログラム／ミリリットルの濃度のインビトロのピルフェニドンは、ＴＮＦ−αによるＷＥＨＩ腫瘍性線維芽細胞の死滅を抑制しなかった。ピルフェニドンの存在下でチオグリコレート誘発マウス腹腔マクロファージをＬＰＳに曝したところ、著しく低いレベルのＴＮＦ−αがこれらの細胞の培地に分泌された。この減少は培地のピルフェニドンの濃度に直接関係していた。０．９ｍｇ／ｍｌに曝したマクロファージには毒性はなかった。ピルフェニドンの存在下での著しく低レベルのＴＮＦ−αは、ＴＮＦ−α出力の統計的に有意な（Ｐ＜０．０１）抑制を示した。マクロファージ並びに他の細胞からのＴＮＦ−αの合成および放出を阻止するピルフェニドンおよびその関連する化合物の能力を、マーガン(Morgan)、ミルス (Mills)、Ｄ．レコウィッツ(D.L.Lefkowitz)およびＳ．レコウィッツ(S.S.Lefko witz)の方法（新規なマイクロタイタプレートで培養したＷＥＨＩ１５４細胞を使用する腫瘍壊死因子の改良された比色検定"An Improved Colorimetric Assay for Tumor Necrosis Factor Using WEHI 154 Cells Cultured on Novel Microti ter Plates"Jour.Immunol.Method.、１４５巻、２５９−２６２頁、１９９１）により生物検定した。例ＩＩマウスマクロファージの細胞質内のＴＮＦ−αの合成に対する等級を付けた濃度のピルフェニドンの直接的な影響をみるため、適宜の培地で成長させたマクロファージの細胞培養物を、（１）ＬＰＳに曝すことなく（対照）および（２）１．０ｐｇ／ｍｌのＬＰＳ（Ｅ．ｃｏｌｉ）に曝露して、各濃度のピルフェニドンで６０分間処理を行った。６０分間の曝露後直ちに、（ａ）マクロファージは遠心分離により培養地から分離され、（ｂ）マクロファージは溶解された。その後、マクロファージ細胞からの溶解した内容物（細胞の細胞質および核）を、ＴＮＦ−αレベルに関してＥＬＩＳＡにより検定を行った。対照（ＬＰＳ、Ｅ．ｃｏｌｉに対する曝露なし）においては、著しく低い基線レベルのＴＮＦ−αだけが、各ピルフェニドン濃度においてマクロファージの細胞質内に見受けられた。ピルフェニドンの濃度が０．９ｍｇ／ｍｌの場合にも、基線レベルだけが見出された。ＴＮＦ−αの生成における測定可能な統計的に有意な変化は起こらなかった。ＬＰＳで処理したマクロファージにおいては、細胞の細胞質と核により、（１）ピルフェニドンがない場合にはＴＮＦ−αのこれらのマクロファージの細胞質による合成が高められ（図５）、かつ、（２）培地におけるピルフェニドンの濃度に直接関係するＴＮＦ−α合成のＬＰＳ（Ｅ．ｃｏｌｉ、１．０ｐｇ／ｍｌ）誘発上昇が抑制されることがわかった（図５）。ピルフェニドンによるマクロファージの細胞質と核内のＴＮＦ−αの合成で高められたＬＰＳの薬理学的抑制は、統計学的に有意であった（Ｐ＜０．０１）。例ＩＩＩインビボの動物研究においては、体重１キログラム当たり３０〜４００ミリグラムのピルフェニドンをｉ．ｐ．投与したところ、ＴＮＦ−αの病理生理学的毒性作用（例えば、エンドトキシン［ＬＰＳ］ショック）を抑制しあるいは完全に阻止した（図２）。インビボのマウスの研究では、体重１キログラム当たり２００ミリグラム以上のピルフェニドンを腹腔内投与したところ、ＴＮＦ−αの形成および循環器への放出が完全に阻止され、これが数時間に亘って維持された。このモデルは、循環ＴＮＦ−αのインビボ誘導に関して上記したモデルの修正である（ハラナカ(Haranaka)ら、Cancer Immunol .Immunother 、１８巻、８７−９０頁、１９８４）。例ＩＶマウスの予備インビボ研究においてｉ．ｖ．ＬＰＳ（Ｅ．ｃｏｌｉ．、５０ｐｇ／ｍｌ）と６００ｍｇ／ｋｇのｉ．ｐ．Ｄ−ガラクトースアミンとの組み合わせにより引き起こされる致死率（１００．０％死亡率）は、３００ｍｇ／ｋｇのピルフェニドンを、ＬＰＳとＤ−ガラクトースアミンとの組み合わせ体の投与前の３０分に亘るｉ．ｐ．注射により顕著に低下した（１０．０％死亡率）。生きているマウスのＴＮＦ−αの血清レベルは、通常の基線レベルに近づいた。マウスは、ＬＰＳ注射後２日間観察した。例Ｖヒトにおいて予備のおよび制御された試験を行ったところ、有効な抗ＴＮＦ− αの毎日の経口は、体重１キログラム当たり約１０〜３０ミリグラム程度、好ましくは体重１キログラム当たり約２０〜２５ミリグラム程度であることがわかった。ここにおいて示されているデータ（表１、図１、２、３、４および５）は、本発明の化合物が哺乳動物細胞によるＴＮＦ−αの過剰生産および放出を抑制することができることを示している。これは、本発明の化合物が、ヒトの単球、マクロファージ又はその他の細胞によるＴＮＦ−αの過剰生産を抑制するのに有用であることを示している。ＴＮＦ−αのこの生物検定は、監視試験において、基本的なサンドイッチＥＬＩＳＡ法（ウインストン(Winston)ら、「分子生物学における現在のプロトコール」(Current Protocols in Molecular biology)１１．２．１頁アウスベル(Ausubel)ら編集、１９８７）を使用することにより確認された。ＴＮＦの他の全ての血漿レベルを、基本的なサンドイッチＥＬＩＳＡ法（ウインストン(Winston)ら、「分子生物学におけるプロトコール」(Current Protocols in Molecular biology)１１．２．１頁アウスベル(Ausub el)ら編集、１９８７）の修正法を使用して測定した。体重１キログラム当たり８０マイクログラムの濃度では、対照グループ（グループ当たりマウス７匹）に比較してＴＮＦ−α血清レベルの上昇を５０％抑制した。ピルフェニドンはまた、経口投与を行ったときに同じ投与量で有効である。ＬＰＳを、マウス当たり２．５マイクログラム（ミリグラム当たり１００マイクログラムの保存溶液から１００マイクログラムの容積）の投与量でマウスに静脈内注射するとともに、ピルフェニドンをその後直ちに投与した。次に、９０分後に心臓穿刺を行ってマウスの出血を行った。その後、血清を、ＥＬＩＳＡキット（エンドジェン(Endogen)）によりＴＮＦ−αに関して分析を行った。ピルフェニドンのほかに、他のＮ−置換２（１Ｈ）ピリドンおよびＮ−置換３（１Ｈ）ピリドンを含んでなる以下の密接に関連する化合物は、ＴＮＦ−αの合成および放出を抑制する効力を有することがわかり、あるいは有するものと考えられている。５−メチル−１−（３−ニトロフェニル−２）−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（４’−メトキシフェニル）−２−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−ｐ−トリル−２−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（３’−トリフルオロメチルフェニル）−２−（１Ｈ）ピリドン、１−（４’クロロフェニル）−５−メチル−２）−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（２’−ナフチル）−２−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（１’ナフチル）−２−（１Ｈ）ピリドン、３−メチル−１−フェニル−２−（１Ｈ）ピリドン、６−メチル−１−フェニル−２−（１Ｈ）ピリドン、３、６−ジメチル−１−フェニル−２−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（２’−チエニル）−２−（１Ｈ）ピリドン、１−（２’−フリル）−５−メチル−２−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（５’−キノリル）−２−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（４’−ピリジル）−２−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（３’−ピリジル）−２−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（２’−ピリジル）−２−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（２’−キノリル）−２−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（４’−キノリル）−２−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（２’−チアゾリル）−２−（１Ｈ）ピリドン、１−（２’−イミダゾリル）−５−メチル−２−（１Ｈ）ピリドン、５−エチル−１−フェニル−２−（１Ｈ）ピリドン、３−エチル−１−フェニル−２−（１Ｈ）ピリドン、１−フェニル−２−（１Ｈ）ピリドン、１−（４’−ニトロフェニル）−２−（１Ｈ）ピリドン、１、３−ジフェニル−２−（１Ｈ）ピリドン、１−フェニル−３−（４’−クロロフェニル）−２−（１Ｈ）ピリドン、１、３−ジフェニル−５−メチル−２−（１Ｈ）ピリドン、３−（４’クロロフェニル）−５−メチル−１−フェニル−２−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−３−フェニル−１−（２’−チエニル）−２−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−フェニル−３−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（４’−メトキシフェニル）−３−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−ｐ−トリル−３−（１Ｈ）ピリドン、１−（４’−クロロフェニル）−５−メチル−３−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（２’−ナフチル）−３−（１Ｈ）ピリドン、４−メチル−１−フェニル−３−（１Ｈ）ピリドン、６−メチル−１−フェニル−３−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１（２’−チエニル）−３（１Ｈ）ピリドン、１−（２’−フリル）−５−メチル−３−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（５’−キノリル）−３−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（３’−ピリジル）−３−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（２’−ピリジル）−３−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（２’−キノリル）−３−（１Ｈ）ピリドン、５−エチル−１−フェニル−３−（１Ｈ）ピリドンおよび１−フェニル−３−（１Ｈ）ピリドン。２−（１Ｈ）ピリドンの一般構造式は、｛式中、Ｒ１＝アルキル基（ＣＨ３、Ｃ２Ｈ５など）、Ａはフェニル、チエニルなど、または他のアリール基である。Ｒ３は、アルキル基の置換部位であり、Ｒ１は水素のままであり、Ｒ２とＲ４はどの場合でも水素とすることができる。｝である。３−（１Ｈ）ピリドンの一般構造式は、｛式中、Ｒ２またはＲ３は上記のようにアルキル基または水素であり、Ａはフェニル、チエニルなど、または他のアリール基である。Ｒ１およびＲ４は水素である。｝である。これらの化合物は、ガデカー(Gadekar)に１９７４年１０月１日に付与された、発明の名称が「Ｎ−置換ピリドンおよびピリドンを製造する一般的な方法」の米国特許第３，８３９，３４６号に記載の方法と同様の方法を使用して製造することができる。本明細書においてはこの米国特許を引用して明細書の一部となす。この特許にはまた、これらの化合物の幾つかを鎮痛剤、抗炎症および解熱処置において使用することが記載されている。いずれもガデカーに、１９７６年８月１０日に付与された米国特許第３、９７４、２８１号、１９７７年８月１６日に付与された米国特許第４，０４２，６９９号および１９８８年１０月４日に付与された米国特許第４，０５１，５０９号には、ヒトその他の動物における血清尿酸およびグルコースレベルの低下、上気道炎症の治療および炎症性皮膚の治療することが記載されている。マルゴリン(Morgolin)に１９９４年５月１０日に付与された、発明の名称が「線維疾患の修復および予防組成物および方法」の米国特許第５，３１０，４５２号およびマルゴリンの発明に係る、発明の名称が「線維疾患の修復および予防組成物および方法」の同時係属米国特許出願第０８／２４３，０５８号には、線維疾患の修復および予防における上記化合物の使用が記載されている。本発明の組成物は、カプセル、錠剤、粉末、グラニュール、シロップ、注射可能な流体、ピル、クリーム、軟膏、吸入可能な固体または流体、点眼剤および座薬からなる形態で投与することができる。そして、上記した目的が有効に達成されることがわかるとともに、上記組成物および方法について本発明の範囲から逸脱することなく変更を行うことができるので、上記説明に含まれる事項は全て例示としてのみ解釈されるべきであって、限定的な意味に解されるべきではない。以下の請求の範囲は、上記した本発明の一般的なおよび特定の構成の全て並びに言語上の問題として脱落しているかもしれない本発明の範囲の全ての記述を包含するものである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号ＦＩＡ６１Ｋ 31/00 ６１３Ａ６１Ｋ 31/00 ６１３Ｇ６１７６１７Ｃ６２６６２６Ｎ６３７６３７Ｅ６４３６４３Ｄ // Ｃ０７Ｄ 213/64 Ｃ０７Ｄ 213/64 401/04 ２１３ 401/04 ２１３２３３２３３ 405/04 ２１３ 405/04 ２１３ 409/04 ２１３ 409/04 ２１３ 417/04 ２１３ 417/04 ２１３ (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＵＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＣＡ，ＣＮ，ＣＺ，ＥＥ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＰ，ＫＲ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＶ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＲＯ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ

Claims

【特許請求の範囲】１．Ｎ−置換２（１Ｈ）ピリドン、Ｎ−置換３（１Ｈ）ピリドンおよび薬学的に許容することができるこれらの塩よりなる群から選ばれる１つ以上の薬学的物質の有効投与量をヒトその他の哺乳動物に投与する工程を含んでなる、種々の細胞からの腫瘍壊死因子の合成および放出の抑制方法。２．前記Ｎ−置換２−（１）ピリドンの一般構造式が、｛式中、Ｒ１は（１）Ｒ３水素を有するアルキル基および（２）アルキル基からなるＲ３を有する水素、よりなる群から選ばれ、Ａはアリール基であり、Ｒ２およびＲ４は水素である。｝である請求項１記載の方法。３．前記Ｎ−置換３−（１Ｈ）ピリドンの一般構造式が、｛式中、Ｒ２は（１）Ｒ３水素を有するアルキル基および（２）アルキル基からなるＲ３を有する水素、よりなる群から選ばれ、Ａはアリール基であり、Ｒ１およびＲ４は水素である。｝である請求項１記載の方法。４．前記薬学的物質が、５−メチル−１−フェニル−２−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（３−ニトロフェニル−２）−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（４’−メトキシフェニル）−２−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−ｐ−トリル−２−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（３’−トリフルオロメチルフェニル）−２−（１Ｈ）ピリドン、１−（４’クロロフェニル）−５−メチル−２）−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（２’−ナフチル）−２−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（１’ナフチル）−２−（１Ｈ）ピリドン、３−メチル−１−フェニル−２−（１Ｈ）ピリドン、６−メチル−１−フェニル−２−（１Ｈ）ピリドン、３、６−ジメチル−１−フェニル−２−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（２’−チエニル）−２−（１Ｈ）ピリドン、１−（２’−フリル）−５−メチル−２−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（５’−キノリル）−２−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（４’−ピリジル）−２−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（３’−ピリジル）−２−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（２’−ピリジル）−２−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（２’−キノリル）−２−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（４’−キノリル）−２−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（２’−チアゾリル）−２−（１Ｈ）ピリドン、１−（２’−イミダゾリル）−５−メチル−２−（１Ｈ）ピリドン、５−エチル−１−フェニル−２−（１Ｈ）ピリドン、３−エチル−１−フェニル−２−（１Ｈ）ピリドン、１−フェニル−２−（１Ｈ）ピリドン、１−（４’−ニトロフェニル）−２−（１Ｈ）ピリドン、１、３−ジフェニル−２−（１Ｈ）ピリドン、１−フェニル−３−（４’−クロロフェニル）−２−（１Ｈ）ピリドン、１、３−ジフェニル−５−メチル−２−（１Ｈ）ピリドン、３−（４’クロロフェニル）−５−メチル−１−フェニル−２−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−３−フェニル−１−（２’−チエニル）−２−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−フェニル−３−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（４’−メトキシフェニル）−３−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−ｐ−トリル−３−（１Ｈ）ピリドン、１−（４’−クロロフェニル）−５−メチル−３−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（２’−ナフチル）−３−（１Ｈ）ピリドン、４−メチル−１−フェニル−３−（１Ｈ）ピリドン、６−メチル−１−フェニル−３−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１（２’−チエニル）−３（１Ｈ）ピリドン、１−（２’−フリル）−５−メチル−３−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（５’−キノリル）−３−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（３’−ピリジル）−３−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（２’−ピリジル）−３−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（２’−キノリル）−３−（１Ｈ）ピリドン、５−エチル−１−フェニル−３−（１Ｈ）ピリドンおよび１−フェニル−３−（１Ｈ）ピリドンよりなる群から選ばれる１つ以上の化合物を含む請求項１記載の方法。５．前記腫瘍壊死因子の有効な作用が前記薬学的物質によっては抑制されない請求項１記載の方法。６．前記薬学的物質が前記哺乳動物に体重１キログラム当たり約１０〜約４００ミリグラム程度の投与量で投与される請求項１記載の方法。７．前記薬学的物質がヒトに体重１キログラム当たり約１０〜約３０ミリグラムの日量で注射または経口により投与される請求項１記載の方法。８．前記薬学的物質がヒトに体重１キログラム当たり約２０〜約２５ミリグラムの日量で注射または経口により投与される請求項１記載の方法。９．Ｎ−置換２（１Ｈ）ピリドン、Ｎ−置換３（１Ｈ）ピリドンおよび薬学的に許容することができるこれらの塩よりなる群から選ばれる哺乳動物に対する有効投与量の１つ以上の薬学的物質を含んでなる、種々の細胞からの腫瘍壊死因子の合成および放出を抑制する組成物。１０．前記Ｎ−置換２−（１Ｈ）ピリドンの一般構造式が、｛式中、Ｒ１は（１）Ｒ３水素を有するアルキル基および（２）アルキル基からなるＲ３を有する水素、よりなる群から選ばれ、Ａはアリール基であり、Ｒ２およびＲ４は水素である。｝である請求項９記載の組成物。１１．前記Ｎ−置換３−（１Ｈ）ピリドンの一般構造式が、｛式中、Ｒ２は（１）Ｒ３水素を有するアルキル基および（２）アルキル基からなるＲ３を有する水素、よりなる群から選ばれ、Ａはアリール基であり、Ｒ１およびＲ４は水素である。｝である請求項９記載の組成物。１２．前記薬学的物質が、５−メチル−１−フェニル−２−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（３−ニトロフェニル−２）−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（４’−メトキシフェニル）−２−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−ｐ−トリル−２−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（３’−トリフルオロメチルフェニル）−２−（１Ｈ）ピリドン、１−（４’クロロフェニル）−５−メチル−２）−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（２’−ナフチル）−２−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（１’ナフチル）−２−（１Ｈ）ピリドン、３−メチル−１−フェニル−２−（１Ｈ）ピリドン、６−メチル−１−フェニル−２−（１Ｈ）ピリドン、３、６−ジメチル−１−フェニル−２−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（２’−チエニル）−２−（１Ｈ）ピリドン、１−（２’−フリル）−５−メチル−２−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（５’−キノリル）−２−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（４’−ピリジル）−２−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（３’−ピリジル）−２−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（２’−ピリジル）−２−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（２’−キノリル）−２−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（４’−キノリル）−２−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（２’−チアゾリル）−２−（１Ｈ）ピリドン、１−（２’−イミダゾリル）−５−メチル−２−（１Ｈ）ピリドン、５−エチル−１−フェニル−２−（１Ｈ）ピリドン、３−エチル−１−フェニル−２−（１Ｈ）ピリドン、１−フェニル−２−（１Ｈ）ピリドン、１−（４’−ニトロフェニル）−２−（１Ｈ）ピリドン、１、３−ジフェニル−２−（１Ｈ）ピリドン、１−フェニル−３−（４’−クロロフェニル）−２−（１Ｈ）ピリドン、１、３−ジフェニル−５−メチル−２−（１Ｈ）ピリドン、３−（４’クロロフェニル）−５−メチル−１−フェニル−２−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−３−フェニル−１−（２’−チエニル）−２−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−フェニル−３−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（４’−メトキシフェニル）−３−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−ｐ−トリル−３−（１Ｈ）ピリドン、１−（４’−クロロフェニル）−５−メチル−３−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（２’−ナフチル）−３−（１Ｈ）ピリドン、４−メチル−１−フェニル−３−（１Ｈ）ピリドン、６−メチル−１−フェニル−３−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１（２’−チエニル）−３（１Ｈ）ピリドン、１−（２’−フリル）−５−メチル−３−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（５’−キノリル）−３−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（３’−ピリジル）−３−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（２’−ピリジル）−３−（１Ｈ）ピリドン、５−メチル−１−（２’−キノリル）−３−（１Ｈ）ピリドン、５−エチル−１−フェニル−３−（１Ｈ）ピリドンおよび１−フェニル−３−（１Ｈ）ピリドンよりなる群から選ばれる１つ以上の化合物を含む請求項９記載の組成物。１３．前記腫瘍壊死因子の有効な作用は前記薬学的物質によっては抑制されない請求項９記載の組成物。１４．前記投与量が、体重１キログラム当たり約１０〜約４００ミリグラムの量の前記薬学的物質を含む請求項９記載の組成物。１５．前記投与量が、ヒトの体重１キログラム当たり約１０〜約３０ミリグラムの量の前記薬学的物質を含む請求項９記載の組成物。１６．前記投与量が、ヒトの体重１キログラム当たり約２０〜約２５ミリグラムの日量の前記薬学的物質を含む請求項９記載の組成物。