CN116969923B - 杂芳基氨基化合物及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种杂芳基氨基化合物及其制备方法和应用，式I所示的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、氘代物、氮氧化物、前药、水合物或溶剂化物：

Description

杂芳基氨基化合物及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于药物技术领域，具体涉及杂芳基氨基化合物及其制备方法和应用，特别是抑制、调节和/或调控EGFR激酶的信号转导的化合物及其制备方法与应用，以及含有该化合物的药物组合物。
背景技术
蛋白激酶是信号传导途径的酶组分，它催化末端磷酸盐从ATP迁移至蛋白的酪氨酸、丝氨酸和/或苏氨酸残基的羟基。因此，抑制蛋白激酶功能的化合物是评估蛋白激酶活动的生理学结果的有价值的工具。
EGFR是受体酪氨酸激酶ErbB受体家族成员。当EGFR在胞外与其配体结合后，受体发生同型或异型二聚化和自身磷酸化，激活下游级联信号通路，最终促进细胞生长、增殖和分裂等。EGFR的过度表达(上调)或过度活动(扩增或突变)已证实与许多癌症相关，包括头颈部癌、卵巢癌、宫颈癌、膀胱癌、食道癌、胃癌、乳腺癌、子宫内膜癌、结肠直肠癌、非小细胞肺癌、和胶质母细胞瘤。
EGFR作为一种致癌基因产生了针对EGFR小分子抑制剂的靶向治疗。在非小细胞肺癌(NSCLC)中，50％-80％患者由EGFR突变(主要是19号外显子框内缺失突变Ex19Del和21号外显子第858位点赖氨酸被精氨酸取代L858R)引起。已经应用于临床的第一代和第二代EGFR抑制剂如易瑞沙、特罗凯、阿法替尼、达可替尼等，它们对于NSCLC的治疗取得了很大成功。但临床有非常明显的皮疹和腹泻等副作用，而且在使用一年后，患者对药物出现耐药性。临床数据显示，大约有50％的患者获得性耐药源于T790M(20号外显子第790位点苏氨酸被甲硫氨酸取代)突变体产生。
第三代EGFR抑制剂奥希替尼可作为二线治疗经第一、第二代EGFR抑制剂治疗后T790M突变患者，但是经奥希替尼治疗9.9-10.1个月后也不可避免产生C797X三重耐药突变(20号外显子797位点半胱氨酸突变成丝氨酸或甘氨酸等)。
Thress KS最早报道了服用奥希替尼治疗T790M突变有40％患者发生C797S三重耐药突变，此外Lee JY等人也报道了对于T790M突变患者服用奥希替尼后会有24％患者产生C797S三重耐药突变，且Papadimitrakopoulou V.A.对AURA3临床试验中73例服用奥希替尼疾病进展的患者分析发现，有15％患者发生C797S三重耐药突变。
FLAURA研究中奥希替尼作为一线治疗与第一代EGFR抑制剂(吉非替尼或厄洛替尼)标准治疗相比表现超高的疗效，PFS为18.9月vs 10.2月，对该研究中91例服用奥希替尼耐药进展患者研究发现有7％患者发生C797S二重耐药突变。
NCCN指南中对于EGFR Ex19Del或L858R突变的患者，一线治疗最佳推荐方案是使用奥希替尼。因此使用奥希替尼一段时间后不可避免地产生C797X双重耐药突变。
耐药突变产生的结果导致EGFR对ATP亲和力大大提高，削弱药物小分子和ATP的竞争结合。C797X耐药突变导致第三代EGFR抑制剂与EGFR蛋白没法共价结合，活性大幅降低。Zhu SJ等人发现提高小分子亲和力的方法除共价/不可逆结合外、还可以通过氢键、范德华力或π-π相互作用等非共价结合。EGFR ATP结合位点除铰链区氨基酸残基M793外，后口袋处有氨基酸残基Lys745，且P-loop处有氨基酸残基Phe723。
对于C797X突变，目前市场上还没有批准的药物对其进行治疗，临床中针对C797X突变的药物较少，且主要是针对C797S三重突变。据报道第一代EGFR抑制剂(吉非替尼、厄洛替尼)对C797X双重耐药突变有疗效但是第一代EGFR抑制剂对野生型EGFR的选择性差，因此通过引进氢键受体基团和/或疏水基团与EGFR ATP结合位点后口袋氨基酸残基Lys745和/或P-loop氨基酸残基Phe723发生氢键作用和/或疏水作用，开发具有选择性的既能针对C797X双重耐药突变又能针对C797X三重耐药突变的第四代EGFR抑制剂的具有重要意义。
发明内容
为了解决现有技术的缺陷，本发明旨在提供一种杂芳基氨基化合物及其制备方法和应用，该杂芳基氨基化合物既能克服EGFR C797X双重耐药突变，又能克服EGFR C797X三重耐药突变，而且选择性较高。
本发明是通过以下技术方案来实现的。
第一方面，本发明提供具有如下式I所示结构的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、氘代物、氮氧化物、前药、水合物或溶剂化物：
在式I中，
表示单键或双键；
A环为5-14元杂芳基、3-12元杂环基、3-12元环烯基、至少含有1个N原子的5-14元杂芳基N-氧化物、6-14元芳基或3-12元环烷基；
X1为不存在、N或C(Ra)n，X2为N或C(Ra)n；或，
当X1不存在时，X2和X9以单键或双键相连；或，
当X1和X2为C(Ra)n时，Ra与所对应连接地C形成3-12元环烷基、3-12元环烯基、3-12元杂环基、5-14元杂芳基或6-14元芳基；或，
当X1为C(Ra)n，X2为N或X1为N，X2为C(Ra)n时，Ra与连接的C以及N连接形成3-12元杂环基或5-14元杂芳基；
Ra各自独立地为氢原子、氘原子、卤素、氰基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷氧基-(CH2)m-、氨基、C1-4烷基氨基、二(C1-4烷基)氨基、3-12元环烷基-(CH2)m-、3-12元环烯基-(CH2)m-、3-12元杂环基-(CH2)m-、5-14元杂芳基-(CH2)m-、6-14元芳基-(CH2)m-或氧代(＝O)，所述地Ra不为氢原子、氘原子、卤素、氰基和氧代(＝O)时，可以任选地被一个或者多个氘原子或卤素取代；
X3、X4和X5各自独立地为N或C，且X4和X5不同时为N；
X6和X7各自独立地为N或CH；
X8为N或CRb；
Rb为氢原子、氘原子、C1-4烷基、卤代C1-4烷基、C1-4烷氧基、C2-4烯基、C2-4炔基、卤素、氰基、羟基、氨基、C1-4烷基氨基、二(C1-4烷基)氨基、3-6元环烷基或3-12元杂环基，所述地Rb不为氢原子、氘原子、卤素、氰基、羟基和氨基时，可以任选地被一个或者多个氘原子或卤素取代；
X9为C或N；当X1为不存在，且X2为N或CRa时，X9不为N；
当X1和X2为N或C(Ra)n时，X1、X2、X3、X4、X5和X9中至多三个同时为N；
R1为卤素、氰基、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、3-12元环烷基-(CH2)m-、3-12元环烯基-(CH2)m-、3-12元杂环基-(CH2)m-、-ORc1、-NRc1Rc2、-C(O)Rc1、-C(O)ORc1、-C(O)NRc1Rc2、-S(Y1)(Y2)Rc1、-S(Y1)(Y2)NRc1Rc2、-S(O)Rc1、-NHC(O)Rc1、-NHC(O)ORc1、-NHC(O)NRc1Rc2、-NHS(Y1)(Y2)Rc1、-OC(O)Rc1、-OC(O)NRc1Rc2、5-14元杂芳基-(CH2)m-或6-14元芳基-(CH2)m-，所述地R1不为卤素、氰基时，可以任选地被一个或者多个Rc取代；
Rc各自独立地为氘原子、卤素、CN-(CH2)m-、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、3-12元环烷基-(CH2)m-、3-12元环烯基-(CH2)m-、3-12元杂环基-(CH2)m-、-(CH2)m-ORc1、-(CH2)m-NRc1Rc2、-(CH2)m-S(Y1)(Y2)Rc1、-(CH2)m-S(Y1)(Y2)NRc1Rc2、-(CH2)m-C(O)Rc1、-(CH2)m-C(O)ORc1、-(CH2)m-C(O)NRc1Rc2、-(CH2)m-NHS(Y1)(Y2)Rc1、-(CH2)m-NHC(O)Rc1、-(CH2)mNHC(O)ORc1、-(CH2)m-NHC(O)NRc1Rc2、-(CH2)m-P(O)Rc1Rc2、5-14元杂芳基-(CH2)m-、6-14元芳基-(CH2)m-、-(CH2)m-ONHC(O)Rc1或氧代(＝O)，所述地Rc不为氘原子和卤素时，可以任选地被一个或多个以下基团取代：氘原子、卤素、羟基、氰基、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基、氨基、C1-4烷基氨基、二(C1-4烷基)氨基、S(O)2Rd1、C2-6烯基、3-6元环烷基或3-6元杂环基；
Rc1和Rc2各自独立地为氢原子、C1-4烷基、卤代C1-4烷基、3-12元环烷基-(CH2)m-、3-12元环烯基-(CH2)m-、3-12元杂环基-(CH2)m-、5-14元杂芳基-(CH2)m-、6-14元芳基-(CH2)m-或Rc1和Rc2与连接的N原子一起形成3-12元杂环基或5-14元杂芳基；
Rd1为氢原子、C1-6烷基或3-6元环烷基；
R2各自独立地为氢原子、氘原子、卤素、氰基、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、3-12元环烷基-(CH2)m-、3-12元环烯基-(CH2)m-、3-12元杂环基-(CH2)m-、-ORe1、-C(O)Re1、-(CH2)m-NRe1Re2或5-14元杂芳基-(CH2)m-，所述地R2不为氢原子、氘原子、卤素和氰基时，可以任选地被一个或多个相同或不同氘原子、卤素、羟基、氰基、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷氧基、3-12元环烷基、3-12元杂环基或氧代(＝O)取代；
Re1和Re2各自独立地为氢原子、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、3-12元环烷基、3-12元环烯基、3-12元杂环基、-NRf1Rf2、5-14元杂芳基、6-14元芳基或Re1和Re2与连接的N原子一起形成3-12元杂环基；
Rf1和Rf2各自独立地为氢原子、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、3-12元环烷基或Rf1和Rf2与连接的N原子一起形成3-12元杂环基；
R3为C2-6烯基、C2-6炔基、3-12元环烷基-(CH2)p-、3-12元环烯基-(CH2)p-、3-12元杂环基-(CH2)m-、5-14元杂芳基-(CH2)m-、6-14元芳基-(CH2)m-、-(CH2)m-C(O)Rg1、-(CH2)m-C(O)ORg1、-(CH2)m-C(O)NRg1Rg2、-(CH2)m-S(Y1)(Y2)Rg1、-(CH2)m-S(O)Rg1、-(CH2)m-S(Y1)(Y2)NRg1Rg2、-(CH2)m-P(O)Rg1Rg2、-(CH2)m-NHC(O)Rg1、-(CH2)m-NHC(O)ORg1或-(CH2)m-NHC(O)NRg1Rg2，所述地R3可以任选地被一个或者多个以下基团取代：氘原子、卤素、氰基、羟基、氨基、C1-4烷基氨基、二(C1-4烷基)氨基、3-6元环烷基氨基、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、3-6元环烷基、C2-6烯基、C2-6炔基或C1-4烷氧基；
R4各自独立地为氢原子、氘原子、卤素、氰基、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、3-12元环烷基-(CH2)m-、3-12元杂环基-(CH2)m-、-ORg1、-(CH2)m-NRg1Rg2、-C(O)Rg1、-C(O)ORg1、-C(O)NRg1Rg2、-NHC(O)Rg1、-NHC(O)ORg1、-NHC(O)NRg1Rg2或氧代(＝O)，所述地R4不为氢原子、氘原子、卤素、氰基和氧代(＝O)时，可以任选地被一个或者多个以下基团取代：氘原子、卤素、氰基、羟基、氨基、C1-4烷基氨基、二(C1-4烷基)氨基、3-6元环烷基氨基、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、3-6元环烷基、C1-4烷氧基或3-6元环烷氧基；
Rg1和Rg2各自独立的为氢原子、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-10环烷基-(CH2)m-、C4-10环烯基、3-12元杂环基、-(CH2)m-NRh1Rh2、5-14元杂芳基-(CH2)m-、6-14元芳基-(CH2)m-或Rg1和Rg2与连接的N原子一起形成3-12元杂环基；
Rh1和Rh2各自独立地为氢原子、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-10环烷基或Rh1和Rh2与连接的N原子一起形成3-12元杂环基；
Y1和Y2各自独立地为O或NRi；Ri为氢原子、C1-6烷基或3-6元环烷基；
n为1或2；
t1、m各自独立地为0、1、2、3、4或5；
t2、p各自独立地为1、2、3、4或5。
在某些实施方式中，在式I中，A环为5-14元杂芳基、3-12元杂环基、3-12元环烯基或N-氧化吡啶基；
优选地，A环为5-6元杂芳基、3-12元杂环基、5-6元环烯基或N-氧化吡啶基；
优选地，A环选自如下基团中的一种：
在某些实施方式中，在式I中，X1为不存在、N或C(Ra)n，X2为N或C(Ra)n；或，
当X1和X2为C(Ra)n时，Ra与所对应连接地C形成3-12元杂环基、5-14元杂芳基或6-14元芳基；或，
当X1为C(Ra)n，X2为N或X1为N，X2为C(Ra)n时，Ra与连接的C以及N连接形成3-12元杂环基或5-14元杂芳基；
Ra各自独立地为氢原子、氘原子、卤素、氰基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷氧基-(CH2)m-、氨基、C1-4烷基氨基、二(C1-4烷基)氨基、3-12元环烷基-(CH2)m-或氧代(＝O)，所述地Ra不为氢原子、氘原子、卤素、氰基和氧代(＝O)时，可以任选地被一个或者多个氘原子或卤素取代；
n为1或2；
m各自独立地为0、1、2、3、4或5。
优选地，X1为N或C(Ra)n、X2为N或C(Ra)n；或，
当X1和X2为C(Ra)n时，Ra与所对应连接地C形成5-6元杂环基；或，
当X1为C(Ra)n，X2为N或X1为N，X2为C(Ra)n时，Ra与连接的C以及N连接形成5-6元杂芳基；
优选地，Ra各自独立地为氢原子、氘原子、F、Cl、Br、氰基、甲基、乙基、异丙基或氧代(＝O)，所述Ra为甲基、乙基和异丙基时可以任选地被一个或者多个氘原子或卤素取代。
在某些实施方式中，在式I中，X8为CRb或N；
Rb为氢原子、氘原子、C1-4烷基、卤代C1-4烷基、C1-4烷氧基、C2-4烯基、C2-4炔基、卤素、氰基、羟基、氨基、C1-4烷基氨基、二(C1-4烷基)氨基、3-6元环烷基或3-12元杂环基。
优选地，在式I中，X8为CRb或N；
Rb为氢原子、氘原子、甲基、乙基、异丙基、乙烯基、乙炔基、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基、二甲氨基、二乙氨基或卤素，所述Rb不为氢原子、氘原子和卤素时可以任选地被一个或者多个氘原子或卤素取代。
在某些实施方式中，在式I中，R1为C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、3-12元杂环基-(CH2)m-、-ORc1、-NRc1Rc2、-C(O)Rc1、-NHC(O)ORc1、-NHC(O)NRc1Rc2、5-14元杂芳基-(CH2)m-或6-14元芳基-(CH2)m-，所述地R1可以任选地被一个或者多个Rc取代；
Rc各自独立地为氘原子、卤素、CN-(CH2)m-、C1-6烷基、3-12元杂环基-(CH2)m-、-(CH2)m-ORc1、-(CH2)m-NRc1Rc2、-(CH2)m-S(Y1)(Y2)Rc1、-(CH2)m-S(Y1)(Y2)NRc1Rc2、-(CH2)m-C(O)Rc1、-(CH2)m-C(O)ORc1、-(CH2)m-C(O)NRc1Rc2、-(CH2)m-NHS(Y1)(Y2)Rc1、-(CH2)m-NHC(O)Rc1、-(CH2)m-P(O)Rc1Rc2、5-14元杂芳基-(CH2)m-或氧代(＝O)，所述地Rc不为氘原子和卤素时，可以任选地被一个或多个以下基团取代：氘原子、卤素、羟基、氰基、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基、氨基、C1-4烷基氨基、二(C1-4烷基)氨基、S(O)2Rd1、C2-6烯基、3-6元环烷基或3-6元杂环基；
Rc1和Rc2各自独立地为氢原子、C1-4烷基、卤代C1-4烷基、3-12元环烷基-(CH2)m-、3-12元环烯基-(CH2)m-、3-12元杂环基-(CH2)m-、5-14元杂芳基-(CH2)m-、6-14元芳基-(CH2)m-或Rc1和Rc2与连接的N原子一起形成3-12元杂环基或5-14元杂芳基；
Rd1为氢原子、C1-6烷基或3-6元环烷基；
Y1和Y2各自独立地为O或NRi；Ri为氢原子，C1-6烷基或3-6元环烷基；
m各自独立地为0、1、2、3、4或5。
优选地，R1选自如下基团中的一种：
所述R1基团任选地被一个或者多个Rc取代；
Rc各自独立地为氘原子、F、Cl、Br、羟基、氰基、甲基、乙基、环丙基、二氟甲基、三氟甲基、氰基甲基、甲磺酰基甲基、三氟甲磺酰基甲基、二甲基磷酰甲基、1-甲基吡唑-4-甲基、3-甲氧基吖啶-1-甲基、4-甲基哌嗪-1-甲基、1-甲基哌啶-4-甲基、甲磺酰亚胺基甲基、甲磺酰基、甲磺酰亚胺基、甲氨基、三氟甲氨基、甲氧基异丁基氨基、N’,N’-二甲基乙二胺基、甲氧基乙氨基、1-甲基吖啶-3-氨基、3-甲基氧杂环丁烷基-3-氨基、1-甲基吡唑-4-氨基、甲磺酰基甲氨基、二甲氨基酰基、异噻唑烷基、5-甲基-2,5-二氢-1,2,5-噻二唑基、2-甲基三氮唑-5-基、乙酰基肟基、甲磺酰胺基、乙酰氨基或氧代(＝O)，所述地Rc不为氘原子、F、Cl、Br、羟基、氰基、三氟甲基和氧代(＝O)时，可以任选地被一个或多个以下基团取代：氘原子、F、Cl、羟基、氰基、甲基、甲氧基、氨基、甲氨基、二甲氨基、-S(O)2CH3、-S(O)2-环丙基、乙烯基或环丙基。
在某些实施方式中，其中，R2各自独立地为氢原子、氘原子、卤素、氰基、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、3-12元环烷基-(CH2)m-、3-12元环烯基-(CH2)m-、3-12元杂环基-(CH2)m-、-ORe1、-C(O)Re1、-(CH2)m-NRe1Re2或5-14元杂芳基-(CH2)m-，所述地R2不为氢原子、氘原子、卤素和氰基时，可以任选地被一个或多个相同或不同氘原子、卤素、羟基、氰基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷氧基、3-12元环烷基、3-12元杂环基或氧代(＝O)取代；
Re1和Re2各自独立地为氢原子、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、3-12元环烷基、3-12元环烯基、3-12元杂环基、-NRf1Rf2、5-14元杂芳基、6-14元芳基或Re1和Re2与连接的N原子一起形成3-12元杂环基；
Rf1和Rf2各自独立地为氢原子、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、3-12元环烷基或Rf1和Rf2与连接的N原子一起形成3-12元杂环基；
m各自独立地为0、1、2、3、4或5；
优选地，R2各自独立地为氢原子、氘原子、F、Cl、Br、氰基、甲基、乙基、异丙基、丁基、丁-2-基、乙烯基、丙烯基、乙炔基、环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环己烯基、双环[1.1.1]戊-1-基、四氢吡喃-4-甲基、吗啉-1-甲基、噁唑-5-甲基、氧杂环丁-3-基、氧杂环丁-2-基、四氢呋喃-3-基、四氢呋喃-2-基、吡咯烷-3-基、二氢异噁唑基、噁唑烷基、哌啶-1-基、四氢吡喃基、哌嗪基、吗啉基、二甲氨基、乙酰基、甲氧基、乙氧基、异丙氧基、四氢呋喃-3-氧基、四氢吡喃-4-氧基、吡唑基、2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚烷-5-基或环丙基甲基，所述地R2不为氢原子、氘原子、F、Cl、Br和氰基时，可任选地被一个或多个相同或不同氘原子、F、Cl、Br、羟基、氰基、甲基、乙基、甲氧基、二氟甲基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、环丙基或氧代(＝O)取代。
在某些实施方式中，其中，R3为C2-6烯基、C2-6炔基、3-12元环烷基-(CH2)p-、3-12元环烯基-(CH2)p-、3-12元杂环基-(CH2)m-、5-14元杂芳基-(CH2)m-、6-14元芳基-(CH2)m-、-(CH2)m-C(O)Rg1、-(CH2)m-S(Y1)(Y2)Rg1或-(CH2)m-P(O)Rg1Rg2，所述地R3可以任选地被一个或者多个以下基团取代：氘原子、卤素、氰基、羟基、氨基、C1-4烷基氨基、二(C1-4烷基)氨基、3-6元环烷基氨基、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、3-6元环烷基、C2-6烯基、C2-6炔基或C1-4烷氧基；
R4各自独立地为氢原子、氘原子、卤素、氰基、C1-6烷基、-ORg1、-(CH2)m-NRg1Rg2或氧代(＝O)，所述地R4不为氢原子、氘原子、卤素、氰基和氧代(＝O)时，可以任选地被一个或者多个以下基团取代：氘原子、卤素、氰基、羟基、C1-2烷基氨基、二(C1-2烷基)氨基、C1-4烷基、卤代C1-4烷基、3-6元环烷基、C1-4烷氧基或3-6元环烷氧基；
Rg1和Rg2各自独立的为氢原子、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-10环烷基-(CH2)m-、C4-10环烯基、3-12元杂环基、-(CH2)m-NRh1Rh2、5-14元杂芳基-(CH2)m-、6-14元芳基-(CH2)m-或Rg1和Rg2与连接的N原子一起形成3-12元杂环基；
Rh1和Rh2各自独立地为氢原子、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-10环烷基或Rh1和Rh2与连接的N原子一起形成3-12元杂环基；
Y1和Y2各自独立地为O或NRi；Ri为氢原子、C1-6烷基或3-6元环烷基；
m各自独立地为0、1、2、3、4或5；
p各自独立地为1、2、3、4或5；
优选地，R3为苯基、吡啶-2-基、环丙基磺酰基、环丙基(甲基)膦酰基、二甲基膦酰基、环丙基磺酰基亚甲基、环丙基亚甲基磺酰基、苯基亚甲基磺酰基、吡啶-4-基亚甲基磺酰基、吡啶-3-基亚甲基磺酰基、吡啶-2-基亚甲基磺酰基、甲氨磺酰基、二甲氨磺酰基、环丙基氨基磺酰基、甲磺酰亚氨基、环丙基甲酰基、乙酰基、氮杂环丙基磺酰基、环丙基甲酰基亚甲基、甲基(乙炔)氨基磺酰基、环丙基(甲基)氨基磺酰基、甲基(N’,N’-二甲基乙基)氨基磺酰基、甲基(吡啶-2-基)氨基磺酰基、甲基(吡啶-3-基)氨基磺酰基、甲基(吡啶-4-基)氨基磺酰基、甲基(苯基)氨基磺酰基、甲基(咪唑-1-基)氨基磺酰基、甲基(吡唑-1-基)氨基磺酰基、吖啶-1-基磺酰基、吡咯烷-1-基磺酰基、哌嗪-1-基磺酰基、吗啡啉-1-基磺酰基、N’,N’-二甲基氨酰基、吖啶-1-基-甲酰基环丙基磺酰亚氨基，所述地R3可以任选地被一个或者多个以下基团取代：氘原子、卤素、氰基、羟基甲基、甲氧基、三氟甲基、环丙基、烯丙基或甲基。
R4各自独立地为氢原子、氘原子、卤素、氰基、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、环丙氧基、氨基、甲氨基、二甲氨基、二乙氨基或氧代(＝O)，所述地R4不为氢原子、氘原子、卤素、氰基和氧代(＝O)时，可以任选地被一个或者多个以下基团取代：氘原子、卤素、氰基或羟基；
在某些具体实施方式中，在式I中，
表示单键或双键；
A环为5-6元杂芳基、3-6元杂环基、5-6元环烯基或N-氧化吡啶基；
X1为不存在、N或C(Ra)n，X2为N或C(Ra)n；n为1或2；
Ra各自独立地为氢原子、氘原子、卤素、氰基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷氧基-(CH2)m-、氨基、C1-4烷基氨基、二(C1-4烷基)氨基、3-12元环烷基-(CH2)m-、3-12元环烯基-(CH2)m-、3-12元杂环基-(CH2)m-、5-14元杂芳基-(CH2)m-、6-14元芳基-(CH2)m-或氧代(＝O)，所述地Ra不为氢原子、氘原子、卤素、氰基和氧代(＝O)时，可以任选地被一个或者多个氘原子、F或Cl取代；
X3、X4和X5各自独立地为N或C，且X4和X5不同时为N；
X6和X7各自独立地为N或CH；
X8为CRb或N；
Rb为氢原子、氘原子、甲基、乙基、异丙基、乙烯基、乙炔基、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基、二甲氨基、二乙氨基或卤素，所述Rb不为氢原子、氘原子和卤素时可以任选地被一个或者多个氘原子、F或Cl取代；
X9为C或N；当X1为不存在，且X2为N或CRa时，X9不为N；
当X1和X2为N或C(Ra)n时，X1、X2、X3、X4、X5和X9中至多三个同时为N；
R1为C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、3-12元杂环基-(CH2)m-、-ORc1、-NRc1Rc2、-C(O)Rc1、-NHC(O)ORc1、-NHC(O)NRc1Rc2、5-14元杂芳基-(CH2)m-或6-14元芳基-(CH2)m-，所述地R1可以任选地被一个或者多个Rc取代；
Rc各自独立地为氘原子、F、Cl、Br、羟基、氰基、甲基、乙基、环丙基、二氟甲基、三氟甲基、氰基甲基、甲磺酰基甲基、三氟甲磺酰基甲基、二甲基磷酰甲基、1-甲基吡唑-4-甲基、3-甲氧基吖啶-1-甲基、4-甲基哌嗪-1-甲基、1-甲基哌啶-4-甲基、甲磺酰亚胺基甲基、甲磺酰基、甲磺酰亚胺基、甲氨基、三氟甲氨基、甲氧基异丁基氨基、N’,N’-二甲基乙二胺基、甲氧基乙氨基、1-甲基吖啶-3-氨基、3-甲基氧杂环丁烷基-3-氨基、1-甲基吡唑-4-氨基、甲磺酰基甲氨基、二甲氨基酰基、异噻唑烷基、5-甲基-2,5-二氢-1,2,5-噻二唑基、2-甲基三氮唑-5-基、乙酰基肟基、甲磺酰胺基、乙酰氨基或氧代(＝O)，所述地Rc不为氘原子、F、Cl、Br、羟基、氰基、三氟甲基和氧代(＝O)时，可以任选地被一个或多个以下基团取代：氘原子、F、Cl、羟基、氰基、甲基、甲氧基、氨基、甲氨基、二甲氨基、-S(O)2CH3、-S(O)2-环丙基、乙烯基或环丙基。
R2各自独立地为氢原子、氘原子、F、Cl、Br、氰基、甲基、乙基、异丙基、丁基、丁-2-基、乙烯基、丙烯基、乙炔基、环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环己烯基、双环[1.1.1]戊-1-基、四氢吡喃-4-甲基、吗啉-1-甲基、噁唑-5-甲基、氧杂环丁-3-基、氧杂环丁-2-基、四氢呋喃-3-基、四氢呋喃-2-基、吡咯烷-3-基、二氢异噁唑基、噁唑烷基、哌啶-1-基、四氢吡喃基、哌嗪基、吗啉基、二甲氨基、乙酰基、甲氧基、乙氧基、异丙氧基、四氢呋喃-3-氧基、四氢吡喃-4-氧基、吡唑基、2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚烷-5-基或环丙基甲基，所述地R2不为氢原子、氘原子、F、Cl、Br和氰基时，可任选地被一个或多个相同或不同氘原子、F、Cl、Br、羟基、氰基、甲基、乙基、甲氧基、二氟甲基、三氟甲基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、环丙基或氧代(＝O)取代；
R3为苯基、吡啶-2-基、环丙基磺酰基、环丙基(甲基)膦酰基、二甲基膦酰基、环丙基磺酰基亚甲基、环丙基亚甲基磺酰基、苯基亚甲基磺酰基、吡啶-4-基亚甲基磺酰基、吡啶-3-基亚甲基磺酰基、吡啶-2-基亚甲基磺酰基、甲氨磺酰基、二甲氨磺酰基、环丙基氨基磺酰基、甲磺酰亚氨基、环丙基甲酰基、乙酰基、氮杂环丙基磺酰基、环丙基甲酰基亚甲基、甲基(乙炔)氨基磺酰基、环丙基(甲基)氨基磺酰基、甲基(N’,N’-二甲基乙基)氨基磺酰基、甲基(吡啶-2-基)氨基磺酰基、甲基(吡啶-3-基)氨基磺酰基、甲基(吡啶-4-基)氨基磺酰基、甲基(苯基)氨基磺酰基、甲基(咪唑-1-基)氨基磺酰基、甲基(吡唑-1-基)氨基磺酰基、吖啶-1-基磺酰基、吡咯烷-1-基磺酰基、哌嗪-1-基磺酰基、吗啡啉-1-基磺酰基、N’,N’-二甲基氨酰基、吖啶-1-基-甲酰基或环丙基磺酰亚氨基，所述地R3可以任选地被一个或者多个以下基团取代：氘原子、卤素、氰基、羟基甲基、甲氧基、三氟甲基、环丙基、烯丙基或甲基；
R4各自独立地为氢原子、氘原子、卤素、氰基、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、环丙氧基、氨基、甲氨基、二甲氨基、二乙氨基或氧代(＝O)，所述地R4不为氢原子、氘原子、卤素、氰基和氧代(＝O)时，可以任选地被一个或者多个以下基团取代：氘原子、F、Cl、氰基或羟基；
t1、m各自独立地为0、1、2、3、4或5；
t2、p各自独立地为1、2、3、4或5。
在又一些具体实施方式中，在式I中，
表示单键或双键；
A环选自如下基团中的一种：
X1和X2各自独立地为N或CRa；
Ra各自独立地为氢原子、氘原子、F、Cl、氰基、甲基、氘代甲基、二氟甲基或三氟甲基；
X3为N或C；
X4和X5为C或N；
X6为CH或N；
X7为N或CH；
X8为CRb或N；
Rb为氢原子、氘原子、甲基、乙基、异丙基、乙烯基、乙炔基、氘代甲基、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基、二甲氨基、二乙氨基、F或Cl；
X9为C或N；
R1选自如下基团中的一种：
R2为氢原子、氘原子、F、Cl、Br、氰基、甲基、二氟甲基、乙基、1,1-二氟乙基、异丙基、(R)-1,1-二氟丙-2-基、(S)-1,1-二氟丙-2-基、1,1,1-三氟丙-2-基、(R)-1,1,1-三氟丙-2-基、(S)-1,1,1-三氟丙-2-基、1-氟-1-氯丙-2-基、2-丁基、(S)-丁-2-基、1,1,1-三氟丁-2-基、2-丙氰基、1-甲氧基乙基、(S)-1-甲氧基乙基、(R)-1-甲氧基乙基、1-羟基乙基、2,2-二氟-1-甲氧基乙基、2,2,2-三氟-1-甲氧基乙基、1,1,1-三氟甲氧基乙基、乙烯基、3,3,3-三氟丙烯-2-基、环丙基、环丁基、1-羟基环丁-4-基、1-羟基环丁-2-基、1-羟基环戊-3-基、环己基、1-羟基环己-3-基、环己烯-1-基、双环[1.1.1]戊-1-基、(S)-1-环丙基乙基、四氢吡喃-4-基-甲基、R-吗啉基甲基、噁唑-5-基-乙基、环丙基乙炔基、氧杂环丁-3-基、1-甲基氧杂环丁-3-基、氧杂环丁-2-基、四氢呋喃-3-基、四氢呋喃-2-基、吡咯烷-3-基、3,3-二甲基-2,3-二氢异噁唑-4-基、2-氧代噁唑烷-3-基、哌啶-1-基、3-羟基哌啶-1-基、四氢吡喃-3-基、4-甲基哌嗪基、吗啉基、(1R,4R)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚烷-5-基、二甲氨基、乙酰基、三氟乙酰基、甲氧基、乙氧基、1,1,1-三氟丙-2-基、异丙氧基、四氢呋喃-3-氧基、四氢吡喃-4-氧基、1-甲基吡唑-4-基、(R)-1-一氟丙-2-基、(S)-1-一氟丙-2-基、二氟甲氧基或1,1-二氟丙-2-基。
R3为苯基、吡啶-2-基、环丙基磺酰基、1-甲基环丙基磺酰基、1-氰基环丙基磺酰基、1-烯丙基环丙基磺酰基、环丙基(甲基)膦酰基、二甲基膦酰基、环丙基磺酰基亚甲基、(1-甲基环丙基)亚甲基磺酰基、苯基亚甲基磺酰基、吡啶-4-基亚甲基磺酰基、吡啶-3-基亚甲基磺酰基、甲基氨基磺酰基、二甲基氨基磺酰基、环丙基氨基磺酰基、N-甲基环丙基亚胺亚磺酰基、N-环丙基甲基亚胺亚磺酰基、亚胺亚磺酰基、环丙基甲酰基、乙酰基、(1-氰基环丙基)亚甲基磺酰基、环丙基亚甲基磺酰基、吡啶-2-基亚甲基磺酰基、氮杂环丙基磺酰基、环丙基甲酰基亚甲基、甲基(乙炔)氨基磺酰基、环丙基(甲基)氨基磺酰基、甲基(N’,N’-二甲基乙基)氨基磺酰基、甲基(吡啶-2-基)氨基磺酰基、甲基(吡啶-3-基)氨基磺酰基、甲基(吡啶-4-基)氨基磺酰基、甲基(苯基)氨基磺酰基、甲基(咪唑-1-基)氨基磺酰基、甲基(吡唑-1-基)氨基磺酰基、吖啶-1-基磺酰基、3,3-二氟吖啶-1-基磺酰基、3-甲氧基吖啶-1-基磺酰基、吡咯烷-1-基磺酰基、4-甲基哌嗪-1-基磺酰基、3,3-二氟-4-甲基哌嗪-1-基磺酰基、吗啡啉-1-基磺酰基、N’,N’-二甲基氨酰基、吖啶-1-基-甲酰基或环丙基磺酰亚氨基。
R4各自独立地为氢原子、氘原子、卤素、氰基、甲基、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基、环丙氧基、氨基、甲氨基、二甲氨基、二乙氨基或氧代(＝O)；
t1为0、1或2；
t2为1或2。
在一个更具体的具体实施方案中，式I所示的化合物选自下列的化合物：
第二方面，本发明提供一种制备式I化合物的方法，该方法包括如下反应步骤：
化合物1与HR2发生反应形成化合物2；
化合物2与HR1发生反应形成化合物3；
化合物3与化合物5发生反应形成式I所示化合物；
或，
化合物1与HR1发生反应形成化合物4；
化合物4与HR2发生反应形成化合物3；
化合物3与化合物5发生反应形成式I所示化合物；
其中，X1和X2各自独立地为氢原子或卤素原子，X3为卤素原子，A、X1、X2、X3、X4、X5、X6、X7、X8、X9、R1、R2、R3、R4、t1和t2如本发明的第一方面所定义；
第三方面，本发明提供包含上述化合物以及药学上可接受的载体或赋形剂的药物组合物；
可选地，药物组合物为片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、散剂、栓剂、注射剂、溶液剂、混悬剂、膏剂、贴剂、洗剂、滴剂、擦剂、喷雾剂
第四方面，本发明提供包含上述化合物和/或药物组合物在治疗EGFR介导的疾病的药物中的应用。
可选地，所述疾病为肿瘤性疾病，例如头颈部癌、鼻咽癌、黑色素瘤、膀胱癌、食道癌、间变性大细胞淋巴瘤、肾癌、乳腺癌、结肠直肠癌、卵巢癌、宫颈癌、胰腺癌、胶质瘤、胶质母细胞瘤、前列腺癌、白血病、淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、胃癌、肺癌、肝癌、胃肠道基质瘤、甲状腺癌、鳞状细胞癌、胆管癌、子宫内膜癌、多发性骨髓瘤或者间皮瘤；动脉粥样硬化或者肺纤维化。
第五方面，本发明提供一种治疗有需要的患者中肿瘤的方法，包括向所述患者给予治疗有效量的上述化合物或药物组合物。
所述的患者优选哺乳动物，所述哺乳动物优选为人。
在某些实施方式中，给药方式包括：口腔、粘膜、舌下、眼部、局部、肠道外、直肠、脑池、阴道、腹膜、膀胱、鼻部给药。
在某些实施方式中，所述肿瘤包括：头颈部癌、黑色素瘤、膀胱癌、食道癌、间变性大细胞淋巴瘤、肾细胞癌、乳腺癌、结肠直肠癌、卵巢癌、宫颈癌、胰腺癌、胶质瘤、胶质母细胞瘤、前列腺癌、白血病、淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、胃癌、肺癌、肝癌、胃肠道基质瘤、甲状腺癌、鳞状细胞癌、胆管癌、子宫内膜癌、多发性骨髓瘤或间皮瘤。
本发明涉及的化合物或药物组合物可通过任何合适的途径进入生物体内，比如通过口服、静脉注射、鼻内、外用、肌注、真皮内注射、经皮给药或皮下途径。
在某些实施方式中，本发明中提供的化合物或药物组合物可以被制成适于药物释放的剂型，通过注射途径给药(如皮下、静脉、肌肉、动脉、鞘膜、囊内、框内、心脏内、真皮内、腹膜内、经气管、表皮、关节内、囊下、蛛网膜下、脊柱内、胸骨内、和/或输液)和非注射途径给药(如口服、肠道、口腔、鼻、鼻内、粘膜、表皮、贴膏剂、真皮、眼药、肺部、舌下、直肠、阴道或表皮局部给药)。
合适的剂型包括(但不局限于)注射用途的剂型比如乳状液、溶液和混悬液，口服用途的剂型如片剂、胶囊、丸剂、糖衣丸、粉末和颗粒，局部用药或经皮肤吸收的剂型如喷剂、软膏、糊剂、乳霜、洗剂、凝胶、溶液、药物贴片和吸入剂，阴道或直肠给药的剂型如栓剂。这些剂型可根据化合物以及合适的赋形剂在合适条件下制备，制备方法及工艺众所周知，比如由Remington：在The Science and Practice of Pharmacy(Gennaro ed.20thedition,Williams&Wilkins PA,USA)(2000)提供。
在某些实施方式中，本发明涉及的化合物可以通过共价键连接的基团(也称接头)和能与E3泛素连接酶非共价结合的基团(也称E3泛素连接酶配体)连接在一起形成具有双功能的小分子三元复合物(也称蛋白质靶向嵌合体(PROTAC))，所述接头包括但不限于：
表示连接位置；左侧与本发明涉及的化合物连接，右侧与E3泛素连接酶配体连接。
所述E3泛素连接酶配体包括但不限于：
表示与接头连接位置。
在某些实施方式中，本发明涉及的化合物或药物组合物可以与一种或多种具有另外药理活性物质同时进行施用，这样能在生物体内达到叠加甚至协同的作用。例如，本发明涉及的化合物可以和具有另外药理活性物质组合成一个药物组合物，或者以单独的组合物同时施用，或者以单独的组合物依次施用。能与本发明化合物同时施用、用于治疗癌症的具有另外药理活性物质包括但不局限于：奥希替尼、阿法替尼、达可替尼、厄洛替尼、吉非替尼、西妥昔单抗、帕尼单抗、Amivantamab、曲美替尼、比美替尼、司美替尼、卡马替尼、特泊替尼、赛沃替尼、谷美替尼、伯瑞替尼、卡博替尼、帕博西尼、瑞博西尼、贝伐单抗、尼达尼布、奥巴托克、维奈托克、帕拉西替尼、杜瓦鲁单抗、德帕瑞妥单抗、恩美曲妥珠单抗、氟尿嘧啶、阿霉素、柔红霉素、它莫西芬、亮丙瑞林、戈舍瑞林、氟他米特、尼鲁米特、非那雄胺、地塞米松、氨鲁米特、安吖啶、阿那曲唑、天冬酰胺酶、卡介苗、比卡鲁胺、博来霉素、白消安、喜树碱、卡培他滨、卡铂、卡莫司汀、苯丁酸氮芥、顺铂、克拉屈滨、秋水仙碱、环磷酰胺、环丙孕酮、阿糖胞苷、达卡巴嗪、正定霉素、双烯雌酚、己烯雌酚、多西紫杉醇、阿霉素、亚德里亚霉素、表柔比星、雌二醇、雌氮芥、依托泊苷、依西美坦、非格司亭、氟达拉滨、氟氢可的松、氟尿嘧啶、氟甲睾酮、氟他米特、吉西他滨、戈舍瑞林、替尼泊苷、睾酮、二氯化二茂钛、拓普泰康、曲妥株单抗、维甲酸、长春花碱、羟基脲、伊达比星、异环磷酰胺、伊马替尼、伊立替康、来曲唑、甲酰四氢叶酸、喷司他丁、光神霉素、甲基苄肼、雷替曲塞、卟菲尔钠、利妥昔、链脲菌素、苏拉明、亮丙瑞林、左旋咪唑、环己亚硝脲、氮芥、甲羟孕酮、甲地孕酮、美法仑、巯嘌呤、巯乙磺酸钠、甲氨蝶呤、丝裂霉素、米托坦、米托蒽醌、尼鲁米特、诺考达唑、奥曲肽、紫杉醇、帕米磷酸、硫鸟嘌呤、三胺硫磷、氯甲烷、拓扑替康二茂钛、曲妥单抗、维甲酸、长春花碱、长春新碱、长春地辛、长春瑞斌。
在某些实施方式中，本发明提供的化合物可与非化学方法同时使用进行癌症治疗。在某些实施方式中，本发明提供的化合物可与放射疗法同时进行。在某些实施方式中，本发明提供的化合物可与外科手术，肿瘤热治疗，超声聚焦疗法，冷冻疗法或以上几种疗法结合使用。
在某些实施方式中，本发明提供的化合物可与类固醇同时使用。合适的类固醇包括但不局限于：安西缩松、倍氯米松、倍他米松、布地奈德、氯泼尼松、氯倍他索、皮质甾酮、可的松、羟泼尼缩松、去羟米松、地塞米松、双氟拉松、双氟米松、二氟孕甾丁酯、甘草次酸、氟扎可松、氟米松、氟尼缩松、氟氯奈德、肤轻松醋酸酯、氟轻松醋酸酯、氟可丁丁酯、氟可龙、丙酮缩氟氢羟龙、醋酸氟培龙、醋酸氟泼尼定、氟泼尼龙、氟氢缩松、丙酸氟、醛基缩松、丙酸氯倍他索、哈西缩松、卤米松、氢化可的松、氯替泼诺碳酸乙酯、甲哌地强龙、甲羟松、甲泼尼松、6-甲氢化泼尼松、在任糠酸盐、帕拉米松、泼尼松龙、地塞米松、和25-二乙胺醋强的松龙。
在某些实施方式中，本发明提供的化合物可与免疫治疗剂同时使用。合适的免疫治疗剂包括：肿瘤细胞多药耐药性逆转剂(比如维拉帕米)、雷帕霉素、霉酚酸酯、沙利度胺、环磷酰胺、环孢霉素、和单克隆抗体类。
本发明提供的杂芳基氨基化合物，作为第四代EGFR抑制剂，其既能克服EGFRC797X双重耐药突变，又能克服EGFR C797X三重耐药突变，而且选择性较高。本发明的其它特点和优势可见实施例的详细叙述。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
特别需要指出的是，针对本发明所做出的类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。
本发明如未注明具体条件者，均按照常规条件或制造商建议的条件进行，所用原料药或辅料，以及所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
除非另外指出，阐明下列定义以举例说明和定义用于描述本发明的各种术语的含义和范围。
表示连接位点。
碳氢基团中碳原子含量的最小值和最大值通过前缀表示，例如，前缀(Ca-b)烷基表示任何含“a”至“b”个碳原子的烷基。因此，例如，(C1-6)烷基是指包含1至6个碳原子的烷基。所述的烷基是支链的或直链的。
本发明化合物中所述的原子包括其同位素，例如，氢可以是氘或氚。
“烷基”是指直链或带有支链的，单价的，饱和烃基，包括但不限于如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、新戊基、正己基以及其它类似基团。优选C1-8烷基。更优选C1-6烷基。更优选C1-4烷基。
“环烷基”是指饱和的单环、联环、螺环、并环或桥环烷基，可能与其它基团组合。环烷基包括但不限于如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基。优选3-8元环烷基。更优选3-6元环烷基。更优选3-4元环烷基。
“环烯基”是指部分不饱和的具有至少一个碳-碳双键的单环、联环、螺环、并环或桥环烷基，可能与其它基团组合。环烯基包括但不限于如环丙烯基、环丁烯基、环戊烯基、环己烯基、环庚烯基、环辛烯基等。优选3-8元环烯基。更优选3-6元环烯基。更优选5-6元环烯基。
“烯基”指直链、带有支链或环状的含有一个或多个碳-碳双键的烃基，包括但不限于乙烯基、丙烯基、(E)-2-甲基乙烯基、(Z)-2-甲基乙烯基、(E)-丁-2-烯基、(Z)-丁-2-烯基、(E)-丁-1-烯基、(Z)-丁-1-烯基。优选C2-6烯基。更优选C2-4烯基。
“炔基”指直链、带有支链或环状的含有一个或多个碳-碳三键的烃基，包括但不限于乙炔基、丙-1-炔基、丙-2-炔基、丁-1-炔基、丁-2-炔基、丁-3-炔基。优选C2-6炔基。更优选C2-4炔基。
“烷氧基”是指与一氧原子键合的直链或带有支链的，单价的，饱和烷基，包括但不限于如甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、异丁氧基、叔丁氧基以及其它类似基团。优选C1-8烷氧基。更优选C1-6烷氧基。更优选C1-4烷氧基。
“卤素”是指氟，氯，溴或碘，优选氟，氯和溴。
“卤代烷基”是指本文定义的烷基，其中一个或多个氢已经被相同或不同卤素取代。包括但不限于如-CH2Cl，-CHF2，-CH2CF3，-CH2CCl3，全氟烷基(例如，-CF3)等。
“氨基烷基”是指经-NH2取代的烷基。包括但不限于如甲氨基、乙氨基、丙氨基、异丙氨基等。
“二烷基氨基”是指具有结构N(C1-6烷基)2的基团。包括但不限于如二甲氨基、二乙氨基、甲基(乙基)氨基、二丙基氨基、二异丙基氨基等。
“芳基”是指具有一个或多个稠合或非稠合芳香族环的单环或多环碳环体系，包括但不限于如苯基、萘基、茚基。优选6-10元单环或双环芳香基团。更优选苯基或萘基。最优选苯基。
“杂环基”是指具有环碳原子和1-4个环杂原子的4-12元非芳香族环体系的基团。其中各杂原子独立地选自N、O、S、氧化氮(NO)、亚砜和砜基。杂环基可为单环或多环，多环体系包括稠环、桥环或螺环体系。单环杂环基部分的实例包括但不限于：氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、吡咯烷基，哌啶基，哌嗪基，高哌嗪基，氧代哌啶基、氧代哌嗪基、氧代高哌嗪基、四氢呋喃基、咪唑啉基，吗啡啉基，噁唑烷基，异噁唑烷基，噻唑烷基，异噻唑烷基，奎宁环基，噻二唑烷基，二氢呋喃基，四氢呋喃基，二氢吡喃基，四氢吡喃基，硫代吗啉基，硫代吗啉基亚砜，硫代吗啉基砜等。优选4-7元杂环基。更优选4-6元杂环基。多环杂环基部分的实例包括但不限于：2-氮杂双环[2.2.1]庚基、3-氮杂双环[3.2.1]辛基、6-氧杂-2-氮杂双环[3.2.1]辛基、6-氧杂-3-氮杂双环[3.2.1]辛基、8-氧杂-3-氮杂双环[3.2.1]辛基、六氢-1H-呋喃[3,4-b]吡咯基、六氢-1H-呋喃[3,4-c]吡咯基、1-氧杂-7-氮杂螺[3.5]壬-7-基、1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸-8-基和1,4-二氧杂-9-氮杂螺[5.5]十一-9-基。
“杂芳基”是指取代或未取代的5元或6元单杂芳环系，或取代或未取代的9元或10元稠合或双杂芳环系，其中包含1-4个独立选自N，O，或S杂原子，其余环原子是碳原子。杂芳基部分的实例包括但不限于：噻吩基，呋喃基，咪唑基，异噁唑基，噁唑基，吡唑基，吡咯基，噻二唑基，噁二唑基，三唑基，吡啶基，吡嗪基、哒嗪基，嘧啶基，吲哚基，吲唑基，喹啉基，异喹啉基，苯并咪唑基或苯并噻唑基。
“桥环”是指任意两个环共用两个不直接连接的原子的多环基团，可以含有一个或多个双键，但是没有一个环具有完全共轭的π电子体系，环原子可以是全碳原子也可以其中一个或多个环原子选自N，O，S，SO或SO2。优选为7-10环。
“螺环”是指任意两个环共用一个碳原子的多环基团，可以含有一个或多个双键，但是没有一个环具有完全共轭的π电子体系，环原子可以是全碳原子也可以其中一个或多个环原子选自N，O，S，SO或SO2。优选为5-10环。
根据组成环的数目可以分为双环、三环、四环或多环基团，优选为双环、三环或四环，更优选为双环或三环。
一个环状基团可通过多种方式与另一基团键合。如果未明确键合方式，则表示包括所有可能的方式。例如，“吡啶基”包括2-、3-、或4-吡啶基，而“噻吩基”包括2-或3-噻吩基。
“药学上可接受的盐”指常规的酸加成盐或碱加成盐，其保留式I化合物的生物有效性和性质，其由适宜的非毒性有机或无机酸或有机或无机碱形成。酸加成盐的例子包括衍生自无机酸和衍生自有机酸的那些盐，所述无机酸例如盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸和硝酸。所述有机酸例如乙酸、丙酸、乙醇酸、草酸、硬脂酸、抗坏血酸、对甲苯磺酸、水杨酸、甲磺酸、乙磺酸、草酸、琥珀酸、柠檬酸、马来酸、羟基马来酸、乳酸、富马酸、酒石酸、苹果酸、羟乙基磺酸、苯磺酸、三氟乙酸、扁桃酸等。碱加成盐的例子包括衍生自无机酸和衍生自有机酸的那些盐，所述无机碱例如铵盐、钙盐、铁盐、铝盐、钠盐、钾盐、锌盐、镁盐。所述有机碱包括伯胺、仲胺和叔胺的盐，例如三甲胺、三乙胺、三丙胺、二乙醇胺、乙二胺、乙醇胺、等。将药用化合物(即药物)化学改性成盐是药剂师公知的技术，用以获得化合物的改善的物理和化学稳定性、吸湿性、流动性和溶解性。
“前药”指可以在体内转化为本发明所涉及的化合物及其药学可接受的盐的结构的前药。
“氮氧化物”是指当化合物中含有胺官能团或含N原子的杂芳基化合物时，可将1个或大于1个的N原子氧化形成含有N+的化合物，优选为叔胺的N-氧化物或含有N的杂芳基的N-氧化物。
“水合物”是指与一定量的水形成的缔合物。
“溶剂化物”是指一个或多个溶剂分子与本发明的化合物所形成的缔合物。形成溶剂化物的溶剂包括，但不限于甲醇、乙醇、异丙醇、乙酸乙酯、乙酸等。
“药物组合物”是指将本发明中的化合物中的一个或多个或其药学上可接受的盐、溶剂化物、水合物或前药与其他的化学成分，例如药学上可接受的载体、赋形剂或稀释剂混合。药物组合物的目的是促进给药给动物的过程。药物组合物可能包括药学上可接受的辅料，以模拟生理条件，比如pH调节和缓冲剂、毒性调节剂等等，如乙酸钠、氯化钠、氯化钾、氯化钙、乳酸钠等。
“药学上可接受的载体”是指一种药学上可接受的物质，成分或者介质，比如液体或固体填充剂、稀释剂、赋形剂、溶剂或灌封材料，其参与将本发明涉及的化合物从某一位置，体液、组织、器官(内部或外部)、或身体部分装载或传递到另一位置，体液、器官(内部或外部)、或身体部分。药学上可接受的载体可以是介质、稀释剂、赋形剂或者其它没有过度毒性或者副作用并能用于接触动物组织的材料。
一些药学上可接受的载体的物质包括：(1)糖类，比如乳糖、葡萄糖和蔗糖；(2)淀粉，比如玉米淀粉和马铃薯淀粉；(3)纤维素和其衍生物，比如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素、醋酸纤维素；(4)西黄蓍胶粉；(5)麦芽糖；(6)明胶；(7)滑石粉；(8)赋形剂，比如可可脂和栓剂蜡；(9)油类，比如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油；(10)二醇类，比如丙二醇；(11)多元醇类，比如甘油、山梨醇、甘露醇和聚乙二醇；(12)脂类，比如油酸乙酯、月桂酸乙酯；(13)琼脂胶；(14)缓冲剂，比如氢氧化镁和氢氧化铝；(15)海藻酸；(16)灭菌无热原水；(17)生理盐水；(18)林格氏溶液；(19)醇类，比如乙醇和丙醇；(20)磷酸缓冲液；(21)其它在药物剂型中无毒性可相容的物质，比如丙酮。
每种药学上可接受的载体应该与其它组成成分相容，例如与本发明中提供的化合物形成制剂，对生物活体组织或者器官没有过度毒性、刺激、过敏性反应、免疫原性或其它问题或并发症，且有较合理的效益风险比。
药物成分可制成任何合适的剂型，如固体剂型(例如片剂、胶囊、粉末、颗粒等)和液体剂型(例如水溶液、乳浊液、酏剂、糖浆等)。药物组合物的制备方法工艺已众所周知，可根据常规工艺进行制备，比如在Remington，The Science and Practice of Pharmacy(Gennaro ed.20th edition,Williams&Wilkins PA,USA)(2000)中提供。
下面结合具体实例对本发明进行详细说明。
第一组制备例：制备中间体A1-A63
中间体A1. 8-溴-3-氯-5-异丙基异喹啉的制备
第一步：3-氯-5-碘异喹啉
将3-氯异喹啉(10.0g,61.1mmol)溶于三氟甲磺酸(150mL)中，降温至-10℃，缓慢加入N-碘代丁二酰亚胺(15.1g,67.1mmol),保持-10℃搅拌1h，LCMS监测反应反全后将反应液倒入冰水(1L)中，有固体生成，过滤，滤渣减压干燥得到粗产物。粗产物用石油醚打浆得到3-氯-5-碘异喹啉(淡黄色固体,15.0g,84.8％)。MS(ESI+)m/z＝289.95[M+H]+。
第二步：8-溴-3-氯-5-碘异喹啉
0℃下，将3-氯-5-碘异喹啉(3.0g,10.4mmol)溶于浓硫酸(300mL)中，保持0℃下，分批次缓慢加入N-溴丁二酰亚胺(1.84g,10.4mmol)，加完后，0℃下搅拌1h，LCMS监测反应全后将反应液倒入冰水(1L)中，有固体析出，过滤，滤渣减压干燥得黄色粗产物。粗产物用石油醚打浆得到8-溴-3-氯-5-碘异喹啉(淡黄色固体,3.3g,86.4％)。MS(ESI+)m/z＝369.75[M+H]+。
第三步：8-溴-3-氯-5-(丙-1-烯-2-基)异喹啉
将8-溴-3-氯-5-碘异喹啉(1.0g,2.7mmol)，异丙烯基硼酸频哪醇酯(0.46g,2.7mmol)，Pd(dppf)Cl2(0.20g,0.27mmol)和碳酸钾(0.94g,6.8mmol)溶于1,4-二氧六环和水的混合液(二氧六环/水＝10/1,11mL)中，置换氮气，升温至45℃搅拌过夜，LCMS监测反应完全后加水(30mL)淬灭反应，加入乙酸乙酯(50mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗产物。粗产物用硅胶柱层析以乙酸乙酯/石油醚(1/9-3/17)为洗脱剂梯度洗脱分离纯化得到8-溴-3-氯-5-(丙-1-烯-2-基)异喹啉(淡黄色固体,320mg,41.7％)。MS(ESI+)m/z＝284.05[M+H]+。
第四步：8-溴-3-氯-5-异丙基异喹啉
将8-溴-3-氯-5-(丙-1-烯-2-基)异喹啉(300mg,1.1mmol)溶于乙酸乙酯(10mL,102.2mmol)中，然后加入二氧化铂(72.3mg,0.32mmol)，置换氢气，室温下搅拌1h，LCMS监测反应完全后过滤，滤液减压浓缩得到粗产物8-溴-3-氯-5-异丙基异喹啉(黄色固体,300mg,99.3％)。MS(ESI+)m/z＝285.85[M+H]+。
中间体A2. 8-溴-3-氯-5-(3,3,3-三氟丙基-1-烯-2-基)异喹啉的制备
往40mL单口瓶中依次加入8-溴-3-氯-5-碘异喹啉(500mg,1.4mmol)和二氧六环(6mL)，搅拌下加入4,4,6-三甲基-2-(3,3,3-三氟丙基-1-烯-2-基)-1,3,2-二氧硼烷(301.3mg,1.4mmol)，Pd(dppf)Cl2(99.3mg,0.14mmol)和碳酸钾(375.2mg,2.7mmol)。置换氮气，升温至90℃搅拌1h。将反应液降至室温，加入水(20mL)淬灭反应，混合液用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗产物。粗产物经硅胶柱层析以乙酸乙酯/石油醚(0-46％)为洗脱剂梯度洗脱分离纯化得到8-溴-3-氯-5-(3,3,3-三氟丙基-1-烯-2-基)异喹啉(白色固体,260mg,56.9％)。MS(ESI+)m/z＝337.90[M+H]+。
中间体A3. 8-溴-3-氯-5-(1-甲氧基乙基)异喹啉的制备
第一步：1-(8-溴-3-氯异喹啉-5-基)乙醇
往40mL单口瓶中依次加入8-溴-3-氯-5-碘异喹啉(300mg,0.81mmol)和四氢呋喃(8mL)。置换氮气，0℃下依次加入异丙基氯化镁-氯化锂(141.9mg,0.98mmol)，0℃搅拌0.5h，然后加入乙醛(71.8mg,1.63mmol)，室温下搅拌1h，加入水(20mL)淬灭反应，混合液用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗产物。粗产物经硅胶柱层析以乙酸乙酯/石油醚(0-26％)为洗脱剂梯度洗脱分离纯化得1-(8-溴-3-氯异喹啉-5-基)乙醇(中间体A63)(黄色固体,140mg,60.0％)。MS(ESI+)m/z＝287.90[M+3H]+。
第二步：8-溴-3-氯-5-(1-甲氧基乙基)异喹啉
往40mL单口瓶中依次加入1-(8-溴-3-氯异喹啉-5-基)乙醇(中间体A63)(100mg,0.35mmol)和N,N-二甲基甲酰胺(3mL)。0℃下加入钠氢(10.0mg,0.42mmol)。置换氮气，0℃搅拌0.5h。加入碘甲烷(74.3mg,0.52mmol)，室温下搅拌1h。加入水(20mL)淬灭反应，混合液用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗产物。粗产物经硅胶柱层析以乙酸乙酯/石油醚(0-16％)为洗脱剂梯度洗脱分离纯化得8-溴-3-氯-5-(1-甲氧基乙基)异喹啉(类白色固体,90mg,85.8％)。MS(ESI+)m/z＝301.95[M+3H]+。
中间体A4. 8-溴-3-氯-5-甲氧基异喹啉的制备
第一步：3-氯-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼-2-基)异喹啉
往100mL单口瓶中依次加入5-溴-3-氯异喹啉(5g,20.6mmol)，联硼酸频那醇酯(7.9g,30.9mmol)，乙酸钾(6.1g,61.9mmol)，Pd(dppf)CI2(1.7g,2.1mmol)和1,4-二氧六环(50mL)，置换氮气，升温至90℃搅拌1h，LCMS监测反应完全后，冷却至室温，加入水(50mL)淬灭反应，混合液用乙酸乙酯(100mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗产物。粗产物经硅胶柱层析以乙酸乙酯/石油醚(25％)为洗脱剂分离纯化得到3-氯-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼-2-基)异喹啉(白色固体,5.8g,97.1％)。MS(ESI+)m/z＝290.05[M+H]+。
第二步：3-氯异喹啉-5-醇
往250mL的单口瓶中依次加入3-氯-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼-2-基)异喹啉(4.0g,13.8mmol)，四氢呋喃(15mL)和30％过氧化氢(11.8g,345.4mmol)，0℃搅拌下加入2mol/L氢氧化钠(60mL)，继续搅拌10min，LCMS监测反应完全后，往反应混合液中加入盐酸至pH＝7。混合液用乙酸乙酯(100mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗产物。粗产物经硅胶柱层析以甲醇/二氯甲烷(1/5)为洗脱剂分离纯化得到3-氯异喹啉-5-醇(白色固体,2.1g,84.7％)。MS(ESI+)m/z＝180.10[M+H]+。
第三步：3-氯-5-甲氧基异喹啉
氮气保护下，往100mL单口瓶中依次加入3-氯异喹啉-5-醇(2.0g,11.1mmol)，丙酮(20mL)和碳酸钾(4.62g,33.4mmol)，降温至0℃，搅拌下缓慢滴加碘甲烷(2.37g,16.7mmol)，升至室温搅拌1h，LCMS监测反应完全后，降至0℃，加水(20mL)淬灭反应，混合液用乙酸乙酯(50mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗产物。粗产物经硅胶柱层析以甲醇/二氯甲烷(1/7)为洗脱剂分离纯化得到3-氯-5-甲氧基异喹啉(白色固体,1.5g,69.6％)。MS(ESI+)m/z＝194.05[M+H]+。
第四步：8-溴-3-氯-5-甲氧基异喹啉
氮气保护下，往100mL的单口瓶中依次加入3-氯-5-甲氧基异喹啉(1.5g,7.7mmol)和N,N-二甲基甲酰胺(20mL)，降温至0℃，搅拌下分批次加入N-溴代丁二酰亚胺(1.65g,9.3mmol)，升温至60℃搅拌1h，LCMS监测反应完全后，加水(50mL)淬灭反应，有固体析出，抽滤，滤渣干燥得到8-溴-3-氯-5-甲氧基异喹啉(白色固体,1.8g,85.3％)。MS(ESI+)m/z＝273.90[M+H]+。
中间体A5. 8-溴-3-氯-5-环丙基异喹啉的制备
第一步：8-溴-3-氯异喹啉-5-醇
将3-氯-5-甲氧基异喹啉(500mg,1.84mmol)溶于二氯甲烷(5mL)，置换氮气，降温至-78℃，搅拌下缓慢滴加三溴化硼(1.38g,5.5mmol)，滴加完毕后，升至室温，搅拌过夜，LCMS监测反应完全后，在-78℃缓慢滴加水(5mL)淬灭反应。升至室温，加水(20mL)打浆，抽滤，滤渣干燥得到8-溴-3-氯异喹啉-5-醇(黄色固体,400mg,84.3％)。MS(ESI+)m/z＝259.85[M+H]+。
第二步：8-溴-3-氯异喹啉-5-基三氟甲磺酸酯
氮气保护下，往25mL两口瓶中依次加入8-溴-3-氯异喹啉-5-醇(400mg,1.55mmol)，三乙胺(626.3mg,6.19mmol)和二氯甲烷(6mL)，降温到-78℃，搅拌下缓慢滴加三氟甲磺酸酐(1309.7mg,4.6mmol)，混合液在-78℃搅拌1h，然后升至室温搅拌1h，LCMS监测反应完全后，加水(5mL)淬灭反应，混合液用二氯甲烷(10mL×3)萃取。合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗产物。粗产物经硅胶柱层析以乙酸乙酯/石油醚(1/10)为洗脱剂分离纯化得到8-溴-3-氯异喹啉-5-基三氟甲磺酸酯(黄色固体,330mg,54.6％)。MS(ESI+)m/z＝391.90[M+H]+。
第三步：8-溴-3-氯-5-环丙基异喹啉
氮气保护下，往40mL单口瓶中依次加入8-溴-3-氯异喹啉-5-基三氟甲磺酸酯(230mg,0.59mmol)，2-环丙基-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(118.7mg,0.71mmol)，碳酸钾(162.8mg,1.18mmol)，Pd(dppf)Cl2(43.1mg,0.059mmol)，1,4-二氧六环(3mL)和水(0.3mL)，升温至80℃搅拌1h，LCMS监测反应完全后，混合液减压浓缩，所得残余物用薄层层析法以乙酸乙酯/石油醚(1/1)为洗脱剂分离纯化得到的8-溴-3-氯-5-环丙基异喹啉(黄色固体,70mg,42.1％)。MS(ESI+)m/z＝283.95[M+H]+。
中间体A6. 8-溴-3-氯-5-(四氢呋喃-3-基)异喹啉的制备
第一步：8-溴-3-氯-5-(2,5-二氢呋喃-3-基)异喹啉
往40mL单口瓶中依次加入8-溴-3-氯-5-碘异喹啉(560mg,1.52mmol)，二氧六环(5mL)和水(0.5mL)，搅拌下依次加入2-(2,5-二氢呋喃-3-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(298.0mg,1.52mmol)，Pd(dppf)Cl2(111.2mg,0.152mmol)和碳酸钾(525.2mg,3.8mmol)，置换氮气，升温至60℃搅拌1h。加入水(50mL)淬灭，混合液用乙酸乙酯(50mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗产物。粗产物经硅胶柱层析以乙酸乙酯/石油醚(0-50％)为洗脱剂梯度洗脱分离纯化得8-溴-3-氯-5-(2,5-二氢呋喃-3-基)异喹啉(白色固体,295mg,62.5％)。MS(ESI+)m/z＝311.90[M+H]+。
第二步：8-溴-3-氯-5-(四氢呋喃-3-基)异喹啉
往40mL单口瓶中依次加入8-溴-3-氯-5-(2,5-二氢呋喃-3-基)异喹啉(280mg,0.91mmol)，乙酸乙酯(15mL)，静置下加入二氧化铂(81.9mg,0.36mmol)，置换氢气，室温搅拌48h。抽滤，滤液减压浓缩得到8-溴-3-氯-5-(四氢呋喃-3-基)异喹啉(白色固体,210mg,74.5％)。MS(ESI+)m/z＝313.90[M+H]+。
中间体A7.1-(8-溴-3-氯异喹啉-5-基)乙酮的制备
往100mL单口瓶中依次加入1-(8-溴-3-氯异喹啉-5-基)乙醇(中间体A63)(1.6g,5.58mmol)和二氯甲烷(20mL)，降温至0℃，搅拌下加入Dess-Martin(4.74g,11.17mmol)，升温至室温搅拌2h。加入水(20mL)淬灭反应，混合液用二氯甲烷(20mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗产物。粗产物经硅胶柱层析以乙酸乙酯/石油醚(0-52％)为洗脱剂梯度洗脱分离纯化得1-(8-溴-3-氯异喹啉-5-基)乙酮(白色固体,1.4g,88.12％)。MS(ESI+)m/z＝285.90[M+3H]+。
中间体A8. 8-溴-3-氯-5-(1,1-二氟丙-2-基)异喹啉的制备
第一步：(Z)-8-溴-3-氯-5-(1-甲氧基丙基-1-烯-2-基)异喹啉
往100mL三口瓶中依次加入(甲氧基甲基)三苯基氯化磷(433.7mg,1.27mmol)和四氢呋喃(8mL)。置换氮气，-78℃下加入正丁基锂(0.5ml,2.5mmol/L)，搅拌1h，然后加入中间体A7(300mg,1.05mmol)，-78℃下搅拌2h。加入饱和氯化铵(10mL)淬灭反应，混合液用乙酸乙酯(10mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得粗产物。粗产物经硅胶柱层析以乙酸乙酯/石油醚(0-56％)为洗脱剂梯度洗脱分离纯化得(Z)-8-溴-3-氯-5-(1-甲氧基丙基-1-烯-2-基)异喹啉(淡黄色固体,140mg,42.5％)。MS(ESI+)m/z＝313.85[M+H]+。
第二步：2-(8-溴-3-氯异喹啉-5-基)丙醛
往40mL单口瓶中依次加入(Z)-8-溴-3-氯-5-(1-甲氧基丙基-1-烯-2-基)异喹啉(140mg,0.45mmol)，二氧六环(2mL)和盐酸(2mL,5M)，室温下搅拌24h。加入碳酸氢钠水溶液(10mL)淬灭反应，混合液用乙酸乙酯(10mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得粗产物。粗产物经硅胶柱层析以乙酸乙酯/石油醚(0-53％)为洗脱剂梯度洗脱分离纯化得2-(8-溴-3-氯异喹啉-5-基)丙醛(白色固体,100mg,74.8％)。
第三步：8-溴-3-氯-5-(1,1-二氟丙-2-基)异喹啉
往40mL单口瓶中依次加入2-(8-溴-3-氯异喹啉-5-基)丙醛(130mg,0.44mmol)和二氯甲烷(5mL)。0℃下加入二乙胺基三氟化硫(280.7mg,1.74mmol)。置换氮气，室温下搅拌1h。加入水(10mL)淬灭反应，混合液用乙酸乙酯(10mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得粗产物。粗产物经硅胶柱层析以乙酸乙酯/石油醚(0-46％)为洗脱剂梯度洗脱分离纯化得8-溴-3-氯-5-(1,1-二氟丙-2-基)异喹啉(黄色油状物,100mg,71.6％)。MS(ESI+)m/z＝321.85[M+H]+。
中间体A9. 8-溴-3-氯-5-(1,1,1-三氟丙-2-基)异喹啉的制备
第一步：3-氯-5-(3,3,3-三氟丙-1-烯-2-基)异喹啉
搅拌下，往50mL单口瓶中依次加入3-氯-5-碘代异喹啉(1g,3.454mmol)，二氧六环(10mL)，4,4,6-三甲基-2-(3,3,3-三氟丙基-1-烯-2-基)-1,3,2-二氧杂硼烷(0.84g,3.799mmol)，Pd(dppf)Cl2(0.25g,0.345mmol)和碳酸钾(1.19g,8.635mmol)。置换氮气，升温至100℃搅拌1h。将反应液降至室温。加入水(20mL)淬灭，水相用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得粗产物。粗产物经硅胶柱层析以乙酸乙酯/石油醚(0-11％)为洗脱剂梯度洗脱分离纯化得3-氯-5-(3,3,3-三氟丙-1-烯-2-基)异喹啉(黄色固体,750mg,84.3％)。MS(ESI+)m/z＝257.9[M+H]+。
第二步：3-氯-5-(1,1,1-三氟丙-2-基)异喹啉
在100mL单口瓶中将3-氯-5-(3,3,3-三氟丙-1-烯-2-基)异喹啉(740mg,2.872mmol)溶于乙酸乙酯(12mL)。静止下加入二氧化铂(391.34mg,1.723mmol)。置换氢气，室温搅拌48h。将反应液过滤，滤液减压浓缩得3-氯-5-(1,1,1-三氟丙-2-基)异喹啉(黄色固体,700mg,93.86％)。MS(ESI+)m/z＝260.15[M+H]+。
第三步：8-溴-3-氯-5-(1,1,1-三氟丙-2-基)异喹啉
-10℃下，在40mL单口瓶中将3-氯-5-(1,1,1-三氟丙-2-基)异喹啉(670mg,2.580mmol)溶于浓硫酸(8mL)，然后搅拌下分批加入二溴海因(737.77mg,2.580mmol)。置换氮气，-10℃搅拌1h。加入冰水(20mL)淬灭，水相用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得粗产物。粗产物经硅胶柱层析以乙酸乙酯/石油醚(0-58％)为洗脱剂梯度洗脱分离纯化得8-溴-3-氯-5-(1,1,1-三氟丙-2-基)异喹啉(棕色固体,300mg,34.34％)。MS(ESI+)m/z＝337.9[M+H]+。
中间体A10.2-(8-溴-3-氯异喹啉-5-基)丙腈的制备
往40mL单口瓶中依次加入1-(8-溴-3-氯异喹啉-5-基)乙烷-1-酮(300mg,1.054mmol)，对甲基苯磺酰甲基异腈(226.43mg,1.159mmol)和乙二醇二甲醚(5mL)。降温至0℃，加入叔丁醇钾(236.62mg,2.108mmol)。置换氮气，常温搅拌2h。加入水(10mL)淬灭，水相用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得粗产物。粗产物经硅胶柱层析以乙酸乙酯/石油醚(0-46％)为洗脱剂梯度洗脱分离纯化得2-(8-溴-3-氯异喹啉-5-基)丙腈(淡黄色油状物,200mg,64.2％)。MS(ESI+)m/z＝294.8[M+H]+。
中间体A11. 8-溴-3-氯-5-(四氢呋喃-2-基)异喹啉的制备
第一步：1-(8-溴-3-氯异喹啉-5-基)-4-氯丁-1-醇
在40mL单口瓶中依次加入8-溴-3-氯-5-碘代异喹啉(500mg,1.357mmol)和四氢呋喃(5mL)，置换氮气，降温至0℃，搅拌下加入异丙基氯化镁氯化锂(236.53mg,1.628mmol)，继续搅拌0.5h，然后加入4-氯丁醛(216.92mg,2.035mmol)，室温搅拌1h，加入水(50mL)淬灭反应，水相用乙酸乙酯(50mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得粗产物。粗产物经硅胶柱层析以乙酸乙酯/石油醚(0-50％)为洗脱剂梯度洗脱分离纯化得1-(8-溴-3-氯异喹啉-5-基)-4-氯丁-1-醇(白色固体,220mg,46.4％)。MS(ESI+)m/z＝349.9[M+H]+。
第二步：8-溴-3-氯-5-(四氢呋喃-2-基)异喹啉
在40mL单口瓶中将1-(8-溴-3-氯异喹啉-5-基)-4-氯丁-1-醇(220mg,0.630mmol)溶于四氢呋喃(3mL)，降温至0℃，搅拌下加入钠氢(22.69mg,0.945mmol)，置换氮气，室温搅拌1h，加入水(50mL)淬灭反应，水相用乙酸乙酯(50mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得粗产物。粗产物经硅胶柱层析以乙酸乙酯/石油醚(0-50％)为洗脱剂梯度洗脱分离纯化得8-溴-3-氯-5-(四氢呋喃-2-基)异喹啉(黄色油状物,180mg,91.4％)。MS(ESI+)m/z＝313.9[M+H]+。
中间体A12.(1R,4R)-5-(8-溴-3-氯异喹啉-5-基)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚烷的制备
第一步：(1R,4R)-5-(3-氯异喹啉-5-基)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚烷
在40mL反应瓶中将3-氯-5-碘代异喹啉(300mg,1.036mmol)溶于二氧六环(5mL)，搅拌下加入Xantphos Pd G4(99.73mg,0.104mmol)，碳酸铯(1012.91mg,3.108mmol)和(1R,4R)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚烷(123.27mg,1.243mmol)，置换氮气，升温至100℃搅拌1h，将反应液降至室温，加入水(50mL)，水相用乙酸乙酯(50mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得粗产物。粗产物经硅胶柱层析以甲醇/二氯甲烷(0-10％)为洗脱剂梯度洗脱分离纯化得(1R,4R)-5-(3-氯异喹啉-5-基)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚烷(黄色固体,225mg,83.3％)。MS(ESI+)m/z＝261.0[M+H]+。
第二步：(1R,4R)-5-(8-溴-3-氯异喹啉-5-基)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚烷
在40mL反应瓶中将(1R,4R)-5-(3-氯异喹啉-5-基)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚烷(200mg,0.767mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(3mL)，置换氮气，降温至0℃，搅拌下加入NBS(136.53mg,0.767mmol)，室温搅拌1h，加入水(50mL)，水相用乙酸乙酯(50mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得粗产物。粗产物经硅胶柱层析以甲醇/二氯甲烷(0-10％)为洗脱剂梯度洗脱分离纯化得(1R,4R)-5-(8-溴-3-氯异喹啉-5-基)-2-氧杂-5-氮杂双环[2.2.1]庚烷(黄色固体,250mg,95.9％)。MS(ESI+)m/z＝340.9[M+H]+。
中间体A13-A62的制备
采用上述中间体A的制备方法，以市售化合物为原料制备中间体A13-A62，详见表1。
表1中间体A13-A62
第二组制备例：制备中间体B1-B29
中间体B1.(2R,3S)-3-(甲磺酰基甲基)-2-甲基氮杂环丁烷三氟乙酸盐的制备
第一步：(2R,3S)-1-(二苯基甲基)-2-2-甲基吖啶-3-基-甲磺酸盐
往40mL单口瓶中依次加入(2R,3S)-1-(二苯基甲基)-2-甲基吖啶-3-醇(5g,19.7mmol)和二氯甲烷(60mL)，0℃下依次加入三乙胺(6g,59.2mmol)和甲基磺酰氯(3.39g,29.6mmol)。置换氮气，室温下搅拌12h。加入水(30mL)淬灭反应，混合液用二氯甲烷(20mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到(2R,3S)-1-(二苯基甲基)-2-2-甲基吖啶-3-基-甲磺酸盐(淡黄色油状物,5g,76.4％)。MS(ESI+)m/z＝332.05[M+H]+。
第二步：2-[(2R,3S)-1-(二苯基甲基)-2-甲基氮杂环丁烷-3-基]-2-甲磺酰基乙酸甲酯
往250mL单口瓶中依次加入(2R,3S)-1-(二苯基甲基)-2-2-甲基吖啶-3-基-甲磺酸盐(5g,15.09mmol)和N,N-二甲基甲酰胺(60mL)，0℃下加入氢化钠(1.1g,45.3mmol)。置换氮气，0℃搅拌0.5h，然后加入2-甲磺酰乙酸甲酯(5.7g,37.7mmol)，升温至80℃搅拌12h。加水(10mL)淬灭反应，混合液用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗产物。粗产物经硅胶柱层析以乙酸乙酯/石油醚(0-46％)为洗脱剂梯度洗脱分离纯化得2-[(2R,3S)-1-(二苯基甲基)-2-甲基氮杂环丁烷-3-基]-2-甲磺酰基乙酸甲酯(白色固体,4g,68.4％)。MS(ESI+)m/z＝388.05[M+H]+。
第三步：(2R,3S)-1-(二苯基甲基)-3-(甲磺酰基甲基)-2-甲基氮杂环丁烷
往250mL单口瓶中依次加入2-[(2R,3S)-1-(二苯基甲基)-2-甲基氮杂环丁烷-3-基]-2-甲磺酰基乙酸甲酯(4g,10.32mmol)和N,N-二甲基甲酰胺(40mL)，搅拌下加入氯化锂(3.5g,82.6mmol)。升温至150℃搅拌4h，将反应混合物液降至室温，加入水(30mL)淬灭反应，混合液用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗产物。粗产物经硅胶柱层析以乙酸乙酯/石油醚(0-52％)为洗脱剂梯度洗脱分离纯化得到(2R,3S)-1-(二苯基甲基)-3-(甲磺酰基甲基)-2-甲基氮杂环丁烷(类白色固体,2g,58.8％)。MS(ESI+)m/z＝330.10[M+H]+。
第四步：(2R,3S)-3-(甲磺酰基甲基)-2-甲基氮杂环丁烷三氟乙酸盐
往50mL单口瓶中依次加入(2R,3S)-1-(二苯基甲基)-3-(甲磺酰基甲基)-2-甲基氮杂环丁烷(700mg,2.13mmol)，甲醇(10.5mL)和三氟乙酸(0.35mL)，静置下加入氢氧化钯(208.9mg,1.49mmol)。置换氢气，室温下搅拌12h。将混合液过滤，滤液减压浓缩得到(2R,3S)-3-(甲磺酰基甲基)-2-甲基氮杂环丁烷三氟乙酸盐(无色半油状固体,300mg,86.5％)。MS(ESI+)m/z＝164.05[M+H]+。
中间体B2.N-((2R,3R)-2-甲基氮杂环丁烷-3-基)甲磺酰胺三氟乙酸盐的制备
第一步：(2R,3R)-2-甲基-3-(甲基磺酰胺基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯
氮气保护下，将(2R,3R)-3-氨基-2-甲基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(300mg,1.61mmol)溶于二氯甲烷(5mL)，然后加入三乙胺(489.0mg,4.83mmol)，降温至0℃，搅拌下缓慢滴加甲基磺酰氯(184.5mg,1.61mmol)，升温至室温搅拌1h，LCMS监测反应完全后减压浓缩，所得残余物经硅胶柱层析以乙酸乙酯/石油醚(1/1)为洗脱剂分离纯化得到(2R,3R)-2-甲基-3-(甲基磺酰胺基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(白色固体,300mg,70.5％)。MS(ESI+)m/z＝165.10[M-100+H]+。
第二步：N-((2R,3R)-2-甲基氮杂环丁烷-3-基)甲磺酰胺三氟乙酸盐
在40mL的单口瓶中将(2R,3R)-2-甲基-3-(甲基磺酰胺基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(300mg,1.611mmol)溶于二氯甲烷/三氟乙酸(3/1,6mL)中，室温搅拌30min，LCMS监测反应完全后，低温减压浓缩得到N-((2R,3R)-2-甲基氮杂环丁烷-3-基)甲磺酰胺(黄色油状物,400mg,151.2％)。MS(ESI+)m/z＝165.10[M+H]+。
中间体B3.N-((2R,3S)-2-甲基氮杂环丁烷-3-基)甲磺酰胺三氟乙酸盐的制备
以市售(2R,3S)-3-氨基-2-甲基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯为原料，按照合成中间体B2方法合成中间体B3。MS(ESI+)m/z＝165.05[M+H]+。
中间体B4.N-(氮杂环丁烷-3-基)甲磺酰胺三氟乙酸盐的制备
以市售3-氨基-氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯为原料，按照合成中间体B2方法合成中间体B4。MS(ESI+)m/z＝151.20[M+H]+。
中间体B5.N-((氮杂环丁烷-3-基甲基)(甲基)(氧代)-λ6-亚磺基)苯甲酰胺的制备
第一步：3-(((甲基磺酰基)氧基)甲基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯
氮气保护下，往100mL单口瓶中加入3-(羟甲基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(3g,16.0mmol)，三乙胺(4.86g,48.1mmol)和二氯甲烷(30mL)，降温至0℃，搅拌下缓慢滴加甲基磺酰氯(3.67g,32.0mmol)，升温至室温搅拌2h，加水(30mL)淬灭反应，用二氯甲烷(30mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗产物，粗产物用硅胶柱层析以乙酸乙酯/石油醚(1/9)为洗脱剂分离纯化得3-(((甲基磺酰基)氧基)甲基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(黄色油状物,4.6g,108.2％)。MS(ESI+)m/z＝166.00[M-100+H]+。
第二步：3-((甲硫基)甲基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯
氮气保护下，往100mL的单口瓶中依次加入3-(((甲基磺酰基)氧基)甲基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(4.6g,17.3mmol)，甲硫醇钠(6.08g,86.7mmol)和乙醇(40mL)，升温至80℃搅拌1h，LCMS监测反应完全后，将反应液减压浓缩，加水(30mL)稀释，用二氯甲烷(30mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析以甲醇/二氯甲烷(1/16)为洗脱剂分离纯化得3-((甲硫基)甲基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(黄色油状物,3.2g,84.9％)。
第三步：3-((甲基亚磺酰基)甲基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯
氮气保护下，往40mL单口瓶中依次加入3-((甲硫基)甲基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(3.2g,14.7mmol)和二氯甲烷(40mL)，降温至0℃，搅拌下分批加入间氯过氧苯甲酸(3.05g,17.7mmol)，继续搅拌2h，LCMS监测反应完全后，加入碳酸氢钠调pH＝9，混合液用二氯甲烷(3×30mL)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析以甲醇/二氯甲烷(1/10)为洗脱剂分离纯化得3-((甲基亚磺酰基)甲基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(黄色油状物,3g,87.3％)。
第四步：3-((S-甲基亚磺酰亚胺基)甲基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯
氮气保护下，往100mL单口瓶中依次加入3-((甲基亚磺酰酰基)甲基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(1.8g,7.28mmol)，乙腈(40mL)，醋酸铵(5.95g,77.14mmol)和碘苯二乙酸(6.21g,19.29mmol)，升温至40℃搅拌过夜，LCMS监测反应完全后，直接减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析以甲醇/二氯甲烷(1/10)为洗脱剂分离纯化得3-((S-甲基亚磺酰亚胺基)甲基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(黄色油状物,1.6g,50.1％)。MS(ESI+)m/z＝249.05[M+H]+。
第五步：3-((N-苯甲酰基-S-甲基亚磺酰亚胺基)甲基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯
氮气保护下，在100mL的单口瓶中依次加入3-((S-甲基亚磺酰亚胺基)甲基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(1.6g,6.44mmol)，二氯甲烷(20mL)和4-二甲氨基吡啶(1.26g,10.31mmol)，降温至0℃，搅拌下加入苯甲酰氯(1.18g,8.38mmol)，室温搅拌2h，LCMS监测反应完全后，加入碳酸氢钠水溶液调节pH＝10，用二氯甲烷(3×30mL)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析以甲醇/二氯甲烷(1/10)为洗脱剂分离纯化得3-((N-苯甲酰基-S-甲基亚磺酰亚胺基)甲基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(黄色油状物,1.3g,57.3％)。MS(ESI+)m/z＝253.00[M-100+H]+。
第六步：N-((氮杂环丁烷-3-基甲基)(甲基)(氧代)-λ6-亚磺基)苯甲酰胺
在100mL的单口瓶中将3-((N-苯甲酰基-S-甲基亚磺酰亚胺基)甲基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(1.5g,4.26mmol)溶于二氯甲烷/三氟乙酸(3/1,20mL)中，室温搅拌30min，LCMS监测反应完全后，反应液直接减压浓缩得到N-((氮杂环丁烷-3-基甲基)(甲基)(氧代)-λ6-亚磺基)苯甲酰胺(黄色油状物,1.2g,粗产物)。MS(ESI+)m/z＝253.05[M+H]+。
中间体B6.N-(甲基(((2R,3S)-2-甲基氮杂环丁烷-3-基)甲基)(氧代)-λ6亚磺基)苯甲酰胺的制备
以市售(2R,3S)-3-(羟甲基)-2-甲基吖啶-1-甲酸叔丁酯为原料，按照合成中间体B5方法合成中间体B6。MS(ESI+)m/z＝267.3[M+H]+。
中间体B7.(氮杂环丁烷-3-基甲基)二甲基氧化膦三氟乙酸盐的制备
第一步：3-((二甲基磷酰基)甲基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯
往100mL单口瓶中依次加入3-(溴甲基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(1g,4.0mmol)和四氢呋喃(12mL)，0℃下加入双(三甲基硅基)氨基钠(4mL,21.8mmol)。置换氮气，搅拌30min，加入二甲基氧化膦(0.31g,4.0mmol)。室温下搅拌4h，加入水(20mL)淬灭反应，混合液用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗产物。粗产物经硅胶柱层析以乙酸乙酯/石油醚(0-43％)为洗脱剂梯度洗脱分离纯化得3-((二甲基磷酰基)甲基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(淡黄色固体,680mg,68.8％)。MS(ESI+)m/z＝248.20[M+H]+。
第二步：(氮杂环丁烷-3-基甲基)二甲基氧化膦三氟乙酸盐
往40mL单口瓶中依次加入3-((二甲基磷酰基)甲基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(670mg,2.71mmol)，二氯甲烷/三氟乙酸(3/1,8mL)。室温下搅拌1h。减压浓缩得到(氮杂环丁烷-3-基甲基)二甲基氧化膦三氟乙酸盐(黄色油状物,350mg,87.8％)。MS(ESI+)m/z＝148.20[M+H]+。
中间体B8. 1-(氮杂环丁烷-3-基甲基)-3-甲氧基氮杂环丁烷三氟乙酸盐的制备
第一步：3-((3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)甲基)氮杂环丁烷羧酸叔丁酯
将3-甲酰基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(500mg,2.699mmol)和3-甲氧基氮杂环丁烷(705.5mg,8.1mmol)溶于甲醇(4mL)中，然后加入醋酸(0.05mL)，置换氮气，降温至0℃，搅拌下加入氰基硼氢化钠(848.2mg,13.5mmol)，在25℃下搅拌1h，加水(5mL)淬灭反应，用乙酸乙酯(5mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗产物，粗产物经硅胶柱层析以乙酸乙酯/石油醚(0～100％)为洗脱剂梯度洗脱纯化得3-((3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)甲基)氮杂环丁烷羧酸叔丁酯(黄色固体,450mg,65.0％)。MS(ESI+)m/z＝257.2[M+H]+。
第二步：1-(氮杂环丁烷-3-基甲基)-3-甲氧基氮杂环丁烷三氟乙酸盐
将3-((3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)甲基)氮杂环丁烷羧酸叔丁酯(450mg,1.76mmol)溶于二氯甲烷(4mL)中，0℃下加入三氟乙酸(1mL)，室温下搅拌30min，反应液减压浓缩得到1-(氮杂环丁烷-3-基甲基)-3-甲氧基氮杂环丁烷三氟乙酸盐(250mg,粗产物)。MS(ESI+)m/z＝157.2[M+H]+。
中间体B9.N-((2R,3S)-2-甲基氮杂环丁烷-3-基)乙酰胺三氟乙酸盐的制备
第一步：(2R,3S)-3-乙酰氨基-2-甲基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
将(2R,3S)-3-氨基-2-甲基氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(500mg,2.68mmol)溶于醋酸酐(3mL)中，室温下搅拌1h。反应完成后，加入水(5mL)，用碳酸氢钠溶液中和至pH＝7，混合液用乙酸乙酯(10mL×3)萃取，合并有机相分别用碳酸氢钠溶液和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到(2R,3S)-3-乙酰氨基-2-甲基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(淡黄色油状物,600mg,97.9％)。MS(ESI+)m/z＝229.10[M+H]+。
第二步：N-((2R,3S)-2-甲基氮杂环丁烷-3-基)乙酰胺三氟乙酸盐
将(2R,3S)-3-乙酰氨基-2-甲基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(500mg,2.190mmol)溶于三氟乙酸(1mL)和二氯甲烷(3mL)的混合溶液中，室温下搅拌1h。反应完全后，减压浓缩得到粗产品N-((2R,3S)-2-甲基氮杂环丁烷-3-基)乙酰胺(棕色油状物,250mg)。MS(ESI+)m/z＝129.10[M+H]+。
中间体B10.N-((2R,3R)-2-甲基氮杂环丁烷-3-基)乙酰胺三氟乙酸盐的制备
以市售(2R,3R)-3-氨基-2-甲基氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯为原料，按照合成中间体B9方法合成中间体B10。MS(ESI+)m/z＝129.10[M+H]+。
中间体B11.(3S,4R)-3-氟哌啶-4-醇盐酸盐的制备
往20mL单口瓶中依次加入(3S,4R)-3-氟-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(500mg,2.280mmol)和二氧六环(3.5mL)，搅拌下加入盐酸和二氧六环混合液(3.5mL)，室温下搅拌1h，将反应液直接减压浓缩得到(3S,4R)-3-氟哌啶-4-醇盐酸盐(白色固体,300mg,84.6％)。MS(ESI+)m/z＝120.25[M+H]+。
中间体B12.(2R,3S)-3-(1,1-二氧化异噻唑烷-2-基)-2-甲基氮杂环丁烷三氟乙酸盐的制备
第一步：(2R,3S)-3-((3-氯丙基)磺酰胺基)-2-甲基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
将(2R,3S)-3-氨基-2-甲基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(300mg,1.611mmol)溶于二氯甲烷(5mL)，搅拌下加入三乙胺(326.0mg,3.22mmol)，置换氮气，降温至0℃，搅拌下加入3-氯丙烷-1-磺酰氯(313.7mg,1.77mmol)，升至室温搅拌1h。加入水(50mL)淬灭反应，混合液用乙酸乙酯(50mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗产物。粗产物经硅胶柱层析以乙酸乙酯/石油醚(0-100％)为洗脱剂梯度洗脱分离纯化得(2R,3S)-3-((3-氯丙基)磺酰胺基)-2-甲基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(无色透明油状物,500mg,95.0％)，MS(ESI+)m/z＝227.05[M-100+H]+。
第二步：(2R,3S)-3-(1,1-二氧化异噻唑烷-2-基)-2-甲基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯
将(2R,3S)-3-((3-氯丙基)磺酰胺基)-2-甲基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(540mg,1.65mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5mL)，搅拌下加入碳酸铯(2.15g,6.61mmol)，置换氮气，升温至80℃搅拌1h。降温至室温，加入水(50mL)淬灭反应，混合液用乙酸乙酯(50mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗产物。粗产物经硅胶柱层析以乙酸乙酯/石油醚(0-100％)为洗脱剂梯度洗脱分离纯化得(2R,3S)-3-(1,1-二氧化异噻唑烷-2-基)-2-甲基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(无色透明油状物,460mg,95.9％)。MS(ESI+)m/z＝191.05[M-100+H]+。
第三步：(2R,3S)-3-(1,1-二氧化异噻唑烷-2-基)-2-甲基氮杂环丁烷三氟乙酸盐
将(2R,3S)-3-(1,1-二氧化异噻唑烷-2-基)-2-甲基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(460mg,1.58mmol)溶于二氯甲烷DCM(3mL,47.19mmol)，搅拌下加入三氟乙酸(1mL,13.46mmol)，室温搅拌1h，直接减压浓缩得到(2R,3S)-3-(1,1-二氧化异噻唑烷-2-基)-2-甲基氮杂环丁烷三氟乙酸盐(棕色油状物,390mg,85.4％)。MS(ESI+)m/z＝191.25[M+H]+。
中间体B13.N-甲基-((2R,3S)-2-甲基氮杂环丁烷-3-基)甲磺酰胺三氟乙酸盐的制备
第一步：(2R,3S)-2-甲基-3-(N-甲基甲磺酰胺基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯
将(2R,3S)-2-甲基-3-(甲基磺酰胺基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(450mg,1.7mmol)溶于DMF(4.79mL)，0℃搅拌下加入钠氢(61.28mg,2.553mmol)，置换氮气，继续搅拌0.5h，然后加入碘甲烷(289.96mg,2.042mmol)，室温搅拌1h，加入水(50mL)淬灭反应，混合液用乙酸乙酯(50mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗产物。粗产物经硅胶柱层析以乙酸乙酯/石油醚(0-50％)为洗脱剂梯度洗脱分离纯化得(2R,3S)-2-甲基-3-(N-甲基甲磺酰胺基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(无色透明油状物,380mg,80.2％)。MS(ESI+)m/z＝179.1[M-100+H]+。
第二步：N-甲基-((2R,3S)-2-甲基氮杂环丁烷-3-基)甲磺酰胺三氟乙酸盐
以(2R,3S)-2-甲基-3-(N-甲基甲磺酰胺基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯为原料，按照合成中间体B2方法合成中间体B13。MS(ESI+)m/z＝179.2[M+H]+。
中间体B14.N-乙基-((2R,3S)-2-甲基氮杂环丁烷-3-基)甲磺酰胺三氟乙酸盐的制备
第一步：N-((2R,3S)-1-二苯甲基-2-甲基氮杂环丁烷-3-基)-N-乙基甲磺酰胺
将N-((2R,3S)-1-二苯甲基-2-甲基氮杂环丁烷-3-基)甲磺酰胺(1.5g,4.54mmo)溶于DMF(15mL)，0℃下滴加60％NaH(218mg,5.45mmol)，继续搅拌0.5h。然后滴加碘乙烷(729mg,4.68mmol)，室温搅拌1h，加入饱和氯化铵溶液(200mL)淬灭反应，混合液用乙酸乙酯(200mL×3)萃取，合并有机相用饱和食盐水(200mL)洗涤，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗产物。粗产物经硅胶柱层析以乙酸乙酯/石油醚(1/6)为洗脱剂分离纯化得N-((2R,3S)-1-二苯甲基-2-甲基氮杂环丁烷-3-基)-N-乙基甲磺酰胺(白色固体,1.3g,80.1％)。
MS(ESI+)m/z＝193.0[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ7.43(dd,J＝7.3,2.8Hz,4H),7.28(dt,J＝10.7,7.5Hz,4H),7.23-7.08(m,2H),4.52(s,1H),3.75(q,J＝7.5Hz,1H),3.43(t,J＝7.1Hz,1H),3.31-3.14(m,3H),2.84(s,3H),2.75(t,J＝7.7Hz,1H),1.07(t,J＝7.0Hz,3H),0.69(d,J＝6.0Hz,3H).
第二步：N-乙基-((2R,3S)-2-甲基氮杂环丁烷-3-基)甲磺酰胺三氟乙酸盐
将N-((2R,3S)-1-二苯甲基-2-甲基氮杂环丁烷-3-基)-N-乙基甲磺酰胺(1.2g,3.35mmo)溶于甲醇(13mL)和TFA(6mL)的混合液中，置换氮气，加入10％Pd(OH)2/C(178mg,0.25mmol)，置换H2，室温搅拌2h。过滤，滤液减压浓缩，剩余物加水(200mL)，用乙酸乙酯(200mL×3)萃取，水相浓缩得到N-乙基-((2R,3S)-2-甲基氮杂环丁烷-3-基)甲磺酰胺三氟乙酸盐(白色固体,900mg,87.7％)。
MS(ESI+)m/z＝193.0[M+H]+.1H NMR(400MHz,D2O):δ4.78–4.71(m,1H),4.45(q,J＝8.4Hz,1H),4.26(t,J＝9.8Hz,1H),4.15(t,J＝9.7Hz,1H),3.39(dq,J＝15.1,7.6Hz,2H),3.08(s,3H),1.59(d,J＝6.5Hz,3H),1.23(t,J＝7.0Hz,3H).
中间体B15.N-环丙基-((2R,3S)-2-甲基氮杂环丁烷-3-基)甲磺酰胺三氟乙酸盐的制备
第一步：N-((2R,3S)-1-二苯甲基-2-甲基氮杂环丁烷-3-基)-N-环丙基甲磺酰胺
将N-((2R,3S)-1-二苯甲基-2-甲基氮杂环丁烷-3-基)甲磺酰胺(1.5g,4.54mmo)溶于乙腈(30mL)，然后依次加入Cu(OAc)2(822mg,4.54mmol)，2,2-联吡啶(708mg,4.54mmol)，环丙基硼酸(1.17g,13.65mmol)和Na2CO3(962mg,9.08mmo)。升温至55℃搅拌12h。降温至室温，减压浓缩，剩余物经硅胶柱层析以乙酸乙酯/石油醚(1/6)为洗脱剂分离纯化得N-((2R,3S)-1-二苯甲基-2-甲基氮杂环丁烷-3-基)-N-环丙基甲磺酰胺(白色固体,500mg,29.7％)。MS(ESI+)m/z＝371.2[M+H]+。
第二步：N-环丙基-((2R,3S)-2-甲基氮杂环丁烷-3-基)甲磺酰胺三氟乙酸盐
以N-((2R,3S)-1-二苯甲基-2-甲基氮杂环丁烷-3-基)-N-环丙基甲磺酰胺为原料，按照合成中间体B14第二步方法合成中间体B15。MS(ESI+)m/z＝205.2[M+H]+。
中间体B16-B29的制备
采用上述中间体B制备方法，以市售化合物为原料制备中间体B16-B29，详见表2。
表2中间体B16-B29
第三组制备例：制备中间体C1-C50
中间体C1. 2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-胺的制备
将4-氨基-2-氯嘧啶(3g,23.2mmol)，1-(环丙磺酰基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)吡唑(8.3g,27.8mmol)，碳酸钾(9.6g,69.5mmol)，Pd(PP h3)2Cl2(1.6g,2.32mmol)加入到1,4-二氧六环(30mL)和水(3mL)的混合溶液中，置换氮气，升温至100℃下搅拌3h。加入水(20mL)淬灭反应，混合液用乙酸乙酯(30mL×3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗产物，粗产物经过硅胶柱层析以乙酸乙酯/石油醚(0-30％)为洗脱剂梯度洗脱分离纯化得2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-胺(淡黄色固体,5.24g,85.4％)。MS(ESI+)m/z＝266.05[M+H]+。
中间体C2. 3-(4-氨基嘧啶-2-基)吡啶-1-氧化物三氟乙酸盐的制备
第一步：2-(吡啶-3-基)嘧啶-4-胺
将2-氯嘧啶-4-胺(2g,15.4mmol)，3-吡啶硼酸频那醇酯(4.75g,23.2mmol)，碳酸钠(4.91g,46.3mmol)，Xphos(0.74g,1.54mmol)和Pd2(dba)3(1.41g,1.54mmol)溶于乙腈(10mL)和水(2mL)中。置换氮气，升温至80℃搅拌4h,反应液减压浓缩，所得剩余物经C18反相柱以乙腈/水(0.5％碳酸氢铵)(0-40％)为洗脱剂梯度洗脱分离纯化得到2-(吡啶-3-基)嘧啶-4-胺(黄色油状物,400mg,15.0％)。MS(ESI+)m/z＝173.15[M+H]+。
第二步：(2-(吡啶-3-基)嘧啶-4-基)氨基二甲酸叔丁酯
将2-(吡啶-3-基)嘧啶-4-胺(300mg,1.74mmol)和4-二甲氨基吡啶(106.43mg,0.87mmol)溶于四氢呋喃(3mL)中，然后滴加Boc2O(1.14g,5.23mmol)，混合液在25℃下搅拌1h，减压浓缩，所得残余物经硅胶柱层析以乙酸乙酯/石油醚(0-100％)为洗脱剂梯度洗脱分离纯化得(2-(吡啶-3-基)嘧啶-4-基)氨基二甲酸叔丁酯(黄色固体,280mg,59.0％)。MS(ESI+)m/z＝373.05[M+H]+。
第三步：3-(4-((二叔丁氧基羰基)氨基)嘧啶-2-基)吡啶-1-氧化物
将(2-(吡啶-3-基)嘧啶-4-基)氨基二甲酸叔丁酯(280mg,0.75mmol)和间氯过氧苯甲酸(259.5mg,1.5mmol)溶于二氯甲烷(3mL)中，置换氮气，混合液在25℃下搅拌1h，加水(5mL)淬灭反应，用乙酸乙酯(5mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗产物，粗产物经硅胶柱层析以乙酸乙酯/石油醚(0-90％)为洗脱剂梯度洗脱分离纯化得3-(4-((二叔丁氧基羰基)氨基)嘧啶-2-基)吡啶-1-氧化物(黄色固体,200mg,68.5％)。MS(ESI+)m/z＝389.05[M+H]+。
第四步：3-(4-氨基嘧啶-2-基)吡啶-1-氧化物三氟乙酸盐
将3-(4-((二叔丁氧基羰基)氨基)嘧啶-2-基)吡啶-1-氧化物(200mg,0.52mmol)溶于二氯甲烷(3mL)中，降温至0℃，搅拌下加入三氟乙酸(1mL)，升温至室温搅拌30min。反应液减压浓缩得到3-(4-氨基嘧啶-2-基)吡啶-1-氧化物三氟乙酸盐(黄色油状物,100mg,粗产物)。MS(ESI+)m/z＝189.1[M+H]+。
中间体C3.(5-(4-氨基嘧啶-2-基)吡啶-2-基)二甲基氧化膦的制备
第一步：(5-溴吡啶-2-基)二甲基氧化膦
往100mL单口瓶中依次加入5-溴-2-碘吡啶(2g,7.05mmol)和N,N-二甲基甲酰胺(25mL)，搅拌下依次加入二甲基氧化膦(0.6g,7.75mmol)，Xantphos(0.41g,0.71mmol)，醋酸钯(0.16g,0.71mmol)和磷酸钾(2.99g,14.1mmol)。置换氮气，升温至50℃搅拌2h。将反应液降至室温，加入水(20mL)淬灭反应，混合液用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗产物。粗产物经硅胶柱层析以甲醇/二氯甲烷(0-15％)为洗脱剂梯度洗脱分离纯化得(5-溴吡啶-2-基)二甲基氧化膦(类白色固体,360mg,21.8％)。MS(ESI+)m/z＝236.05[M+3H]+。
第二步：二甲基(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼-2-基)吡啶-2-基)氧化膦
往40mL单口瓶中依次加入(5-溴吡啶-2-基)二甲基氧化膦(600mg,2.56mmol)和二氧六环(8mL)，搅拌下依次加入联硼酸频那醇酯(781.2mg,3.08mmol)，三环己基膦(71.90mg,0.256mmol)，Pd2(dba)3(234.77mg,0.256mmol)和醋酸钾(629.03mg,6.41mmol)。置换氮气，升温至90℃搅拌3h。将反应液降至室温。加入水(20mL)淬灭反应，混合液用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗产物。粗产物经硅胶柱层析以乙酸乙酯/石油醚(0-53％)为洗脱剂梯度洗脱分离纯化得二甲基(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼-2-基)吡啶-2-基)氧化膦(黄色固体,250mg,34.7％)。MS(ESI+)m/z＝282.20[M+H]+。
第三步：(5-(4-氨基嘧啶-2-基)吡啶-2-基)二甲基氧化膦
40mL单口瓶中依次加入4-氨基-2-氯嘧啶(230mg,1.78mmol)，二氧六环(5mL)和水(0.5mL)，搅拌下依次加入二甲基(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼-2-基)吡啶-2-基)氧化膦(598.9mg,2.13mmol)，Pd(PPh3)4(205.2mg,0.18mmol)和碳酸钾(490.7mg,3.55mmol)。置换氮气，升温至90℃搅拌1h。将反应液降至室温。加入水(20mL)淬灭反应，混合液用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗产物。粗产物经硅胶柱层析以乙酸乙酯/石油醚(0-44％)为洗脱剂梯度洗脱分离纯化得(5-(4-氨基嘧啶-2-基)吡啶-2-基)二甲基氧化膦(淡黄色固体,60mg,13.61％)。MS(ESI+)m/z＝249.05[M+H]+。
中间体C4. 4-(4-氨基嘧啶-2-基)-N,N-二甲基-1H-吡唑-1-磺酰胺的制备
第一步：N,N-二甲基-1H-吡唑-1-磺酰胺-4-硼酸频那醇酯
在0℃下，向吡唑-4-硼酸频那醇酯(500mg,2.58mmol)的DCM(10mL)溶液中滴加Et3N(2.15mL,15.46mmol)和N,N-二甲基氨基磺酰氯(1.85g,12.88mmol)。升温至40℃下搅拌2h。减压浓缩得到粗产物。粗产物经反相柱层析(C18)以乙腈/水(35％-25％)为洗脱剂梯度洗脱分离纯化得N,N-二甲基-1H-吡唑-1-磺酰胺-4-硼酸频那醇酯(无色油状物,200mg,25.9％)。MS(ESI+)m/z＝220.1[M-82+H]+。
第二步：4-(4-氨基嘧啶-2-基)-N,N-二甲基-1H-吡唑-1-磺酰胺
以4-氨基-2-氯嘧啶和N,N-二甲基-1H-吡唑-1-磺酰胺-4-硼酸频那醇酯为原料，按照中间体C1方法制备中间体C4。MS(ESI+)m/z＝269.2[M+H]+。
中间体C5-C49的制备
采用上述中间体C制备方法，以市售化合物为原料制备中间体C5-C49，详见表3。
表3中间体C5-C49
中间体C50(1-(4-氨基嘧啶-2-基)-1H-咪唑-4-基)(环丙基)甲酮的制备
第一步：4-(环丙基(羟基)甲基)-1H-咪唑-1-甲酸叔丁酯
在0℃下，向4-甲酰基-1H-咪唑-1-甲酸叔丁酯(1.0g,5.10mmol)的THF(10mL)溶液中滴加溴化环丙基镁(10.2mL,10.19mmol)。室温下搅拌2h。减压浓缩，往剩余物中加入水(200mL)，用乙酸乙酯(100mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到4-(环丙基(羟基)甲基)-1H-咪唑-1-甲酸叔丁酯(粗产物,白色固体,1.2g,98.9％)。MS(ESI+)m/z＝183.0[M-56+H]+。
第二步：4-(环丙烷羰基)-1H-咪唑-1-甲酸叔丁酯
向4-(环丙基(羟基)甲基)-1H-咪唑-1-甲酸叔丁酯(1.2g,5.02mmol)的DCM(12mL)溶液中加入重铬酸吡啶嗡(2.8g,7.53mmol)，室温下搅拌2h。减压浓缩，往剩余物中加入水(50mL)，用乙酸乙酯(50mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到4-(环丙烷羰基)-1H-咪唑-1-甲酸叔丁酯(粗产物,白色固体,650mg,54.6％)。
MS(ESI+)m/z＝237.0[M-56+H]+.1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 8.09(s,1H),7.97(s,1H),3.00--2.91(m,1H),1.64(s,9H),1.30-1.20(m,2H),1.10-1.00(m,2H).
第三步：环丙基(1H-咪唑-4-基)甲酮
向4-(环丙烷羰基)-1H-咪唑-1-甲酸叔丁酯(650mg,2.75mmol)的DCM(10mL)溶液中滴加TFA(5mL)。室温搅拌30min，减压浓缩得到环丙基(1H-咪唑-4-基)甲酮(粗产物,棕色油状物,700mg)。MS(ESI+)m/z＝137.2[M-TFA+H]+。
第四步：(1-(4-氨基嘧啶-2-基)-1H-咪唑-4-基)(环丙基)甲酮
向环丙基(1H-咪唑-4-基)甲酮(700mg,2.98mmol)和2-氯嘧啶-4-胺(754mg,3.28mmol)的1,4-二氧六环(7mL)溶液中加入Cs2CO3(2.9g,8.94mmol)。升温至100℃搅拌2h，将反应液降至室温。减压浓缩，剩余物经硅胶柱层析以乙酸乙酯/石油醚(1/1)为洗脱剂梯度洗脱分离纯化得到(1-(4-氨基嘧啶-2-基)-1H-咪唑-4-基)(环丙基)甲酮(白色固体,250mg,2步产率为39.6％)。
MS(ESI+)m/z＝230.2[M+H]+.1H NMR(400MHz,MeOH-d4):δppm 8.64-8.56(m,2H),8.08(d,J＝6.0Hz,1H),6.44(d,J＝6.0Hz,1H),2.92-2.82(m,1H),1.20-1.22(m,2H),1.12-1.02(m,2H).
实施例1. 4-(3-((2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)氨基)-5-异丙基异喹啉-8-基)-2-甲基丁-3-炔-2-醇的制备(终产物3)
第一步：4-(3-氯-5-异丙基异喹啉-8-基)-2-甲基丁-3-炔-2-醇
将中间体A1(300mg,1.05mmol)溶于二氧六环(5mL)，搅拌下依次加入三乙胺(853.4mg,8.43mmol)，三苯基膦(27.7mg,0.11mmol)，碘化亚铜(20.1mg,0.11mmol)，Pd(PPh3)2Cl2(74.0mg,0.11mmol)和2-甲基丁基-3-炔-2-醇(177.35mg,2.108mmol)。置换氮气，升温至100℃搅拌1h，将反应液降至室温，加入水(50mL)淬灭反应，混合液用乙酸乙酯(50mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗产物。粗产物经硅胶柱层析以乙酸乙酯/石油醚(0-100％)为洗脱剂梯度洗脱分离纯化得4-(3-氯-5-异丙基异喹啉-8-基)-2-甲基丁-3-炔-2-醇(淡黄色固体,200mg,65.9％)。MS(ESI+)m/z＝288.00[M+H]+。
第二步：4-(3-((2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)氨基)-5-异丙基异喹啉-8-基)-2-甲基丁-3-炔-2-醇
在40mL单口瓶中将4-(3-氯-5-异丙基异喹啉-8-基)-2-甲基丁-3-炔-2-醇(190mg,0.66mmol)溶于二氧六环(5mL)，搅拌下依次加入EPhos Pd G4(60.64mg,0.066mmol)，Ephos(35.31mg,0.066mmol)，碳酸铯(645.32mg,1.980mmol)和中间体C1(210.2mg,0.79mmol)。置换氮气，升温至100℃搅拌1h。将反应液降至室温，加入水(50mL)淬灭反应，混合液用乙酸乙酯(50mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗产物。粗产物经高压制备液相色谱纯化(柱型:XBridge Prep OBD C18 Column,30*150mm,5μm；流动相:水(10mmol/L碳酸氢铵)/乙腈；流速:60mL/min；梯度:50％-72％10min；波长:254/220nm)得4-(3-((2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)氨基)-5-异丙基异喹啉-8-基)-2-甲基丁-3-炔-2-醇。
白色固体,MS(ESI+)m/z＝517.10[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.54(d,J＝3.3Hz,1H),9.42(s,1H),8.94(s,1H),8.72(s,1H),8.53(s,1H),8.47(dd,J＝6.0,1.8Hz,1H),7.65-7.49(m,2H),7.29-7.23(m,1H),5.71(s,1H),3.76-3.59(m,1H),3.33-3.26(m,1H),1.59(s,6H),1.43(d,J＝6.7Hz,5H),1.40-1.30(m,2H),1.34-1.25(m,3H).
实施例2.N-(2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-5-异丙基-8-(3-(甲基磺酰基)丙基-1-炔-1-基)异喹啉-3-胺的制备(终产物4)
第一步：8-(3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙-1-炔-1-基)-3-氯-5-异丙基异喹啉
将中间体A1(400mg,1.41mmol)溶于二氧六环(6mL)，搅拌下依次加入三乙胺(853.4mg,8.43mmol)，三苯基膦(36.9mg,0.14mmol)，碘化亚铜(26.8mg,0.14mmol)，Pd(PPh3)2Cl2(98.7mg,0.14mmol)和叔丁基二甲基(丙-2-炔-1-氧基)硅烷(478.8mg,2.81mmol)。置换氮气，升温至100℃搅拌1h。将反应液降至室温，加入水(50mL)淬灭反应，混合液用乙酸乙酯(50mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗产物。粗产物经硅胶柱层析以乙酸乙酯/石油醚(0-10％)为洗脱剂梯度洗脱分离纯化得8-(3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙-1-炔-1-基)-3-氯-5-异丙基异喹啉(浅棕色油状物,390mg,74.2％)。MS(ESI+)m/z＝373.95[M+H]+。
第二步：3-(3-氯-5-异丙基异喹啉-8-基)丙-2-炔-1-醇
在40mL单口瓶中将8-(3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙-1-炔-1-基)-3-氯-5-异丙基异喹啉(380mg,1.016mmol)溶于四氢呋喃(6mL)，降温至0℃，搅拌下加入四丁基氟化铵的四氢呋喃溶液(2mL,2.03mmol,1mol/L)。室温下搅拌1h。加入水(50mL)淬灭反应，混合液用乙酸乙酯(50mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗产物。粗产物经硅胶柱层析以乙酸乙酯/石油醚(0-35％)为洗脱剂梯度洗脱分离纯化得3-(3-氯-5-异丙基异喹啉-8-基)丙-2-炔-1-醇(黄色油状物,200mg,75.8％)。
第三步：3-氯-8-(3-氯丙基-1-炔-1-基)-5-异丙基异喹啉
将3-(3-氯-5-异丙基异喹啉-8-基)丙-2-炔-1-醇(170mg,0.66mmol)溶于二氯甲烷(4mL)，降温至0℃，搅拌下滴加氯化亚砜(233.6mg,1.97mmol)，室温下搅拌2h。反应液减压浓缩得到3-氯-8-(3-氯丙基-1-炔-1-基)-5-异丙基异喹啉(黄色油状物,160mg,87.9％)。MS(ESI+)m/z＝278.05[M+H]+。
第四步：3-氯-5-异丙基-8-(3-(甲硫基)丙基-1-炔-1-基)异喹啉
将3-氯-8-(3-氯丙基-1-炔-1-基)-5-异丙基异喹啉(180mg,0.647mmol)溶于乙醇(3mL)，搅拌下加入硫代甲醇钠(45.4mg,0.65mmol)。置换氮气，升温至80℃搅拌1h。将反应液降至室温，加入水(50mL)淬灭反应，混合液用乙酸乙酯(10mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗产物。粗产物经硅胶柱层析以乙酸乙酯/石油醚(0-20％)为洗脱剂梯度洗脱分离纯化得3-氯-5-异丙基-8-(3-(甲硫基)丙基-1-炔-1-基)异喹啉(黄色油状物,93mg,49.6％)。MS(ESI+)m/z＝290.15[M+H]+。
第五步：3-氯-5-异丙基-8-(3-(甲基磺酰基)丙基-1-炔-1-基)异喹啉
将3-氯-5-异丙基-8-(3-(甲硫基)丙基-1-炔-1-基)异喹啉(85mg,0.293mmol)溶于二氯甲烷(3mL)，降温至0℃，搅拌下加入间氯过氧苯甲酸(101.2mg,0.59mmol)，室温下搅拌1h。加入水(5mL)淬灭反应，混合液用二氯甲烷(10mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗产物。粗产物经硅胶柱层析以乙酸乙酯/石油醚(0-50％)为洗脱剂梯度洗脱分离纯化得3-氯-5-异丙基-8-(3-(甲基磺酰基)丙基-1-炔-1-基)异喹啉(黄色油状物,72mg,76.3％)。MS(ESI+)m/z＝322.15[M+H]+。
第六步：N-(2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-5-异丙基-8-(3-(甲基磺酰基)丙基-1-炔-1-基)异喹啉-3-胺
将3-氯-5-异丙基-8-(3-(甲基磺酰基)丙基-1-炔-1-基)异喹啉(60mg,0.19mmol)溶于二氧六环(3mL)，搅拌下依次加入中间体C1(74.19mg,0.28mmol)，Brettphos Pd G3(16.90mg,0.019mmol)，Brettphos(10.01mg,0.019mmol)和醋酸钾(54.89mg,0.56mmol)。置换氮气，升温至100℃搅拌1h。将反应液降至室温，加入水(50mL)淬灭反应，混合液用乙酸乙酯(50mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗产物。粗产物经高压制备液相色谱纯化(柱型:XBridge Prep OBD C18 Column,30*150mm,5μm；流动相:水(10mmol/L碳酸氢铵)/乙腈；流速:60mL/min；梯度:25％-55％7min；波长:254/220nm)得N-(2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-5-异丙基-8-(3-(甲基磺酰基)丙基-1-炔-1-基)异喹啉-3-胺。
白色固体,MS(ESI+)m/z＝551.10[M+H]+.1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.59(s,1H),9.45(s,1H),8.98(s,1H),8.72(s,1H),8.53(s,1H),8.47(d,J＝5.9Hz,1H),7.73-7.59(m,2H),7.22(d,J＝6.1Hz,1H),4.75(s,2H),3.79-3.71(m,1H),3.35-3.26(m,1H),3.22(s,3H),1.43(d,J＝6.7Hz,6H),1.34(d,J＝14.0Hz,2H),1.29-1.22(m,2H).
实施例3-184终产物6、9-23、26-32、43-57、62-70、74-112、115、118、120-125、129、130、135-168、170-195、205-219、221-231的制备
采用实施例1中终产物3的制备方法，以中间体A、中间体B、中间体C和市售其他化合物为原料制备终产物6、9-23、26-32、43-57、62-70、74-112、115、118、120-125、129、130、135-168、170-195、205-219、221-231，详见表4。
表4终产物6、9-23、26-32、43-57、62-70、74-112、115、118、120-125、129、130、135-168、170-195、205-219、221-231
实施例185.((1-(3-((2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)氨基)-5-异丙基异喹啉-8-基)氮杂环丁烷-3-基)甲基)(甲基)亚磺酰亚胺的制备(终产物24)
第一步：N-(((1-(3-氯-5-异丙基异喹啉-8-基)氮杂环丁烷-3-基)甲基)(甲基)(氧代)-λ6-亚磺基)苯甲酰胺
氮气保护下，在8mL单口瓶中依次加入中间体A1(400mg,1.41mmol)，中间体B5(425.60mg,1.69mmol)，XantPhos Pd G4(135.27mg,0.14mmol)，碳酸铯(915.93mg,2.81mmol)和1,4-二氧六环(6mL)，升温至100℃搅拌1h，LCMS监测反应完全后，将反应液冷却至室温，加水(10mL)淬灭反应，混合液用乙酸乙酯(10mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残余物用薄层层析法以乙酸乙酯/石油醚＝1/1为洗脱剂分离纯化得到N-(((1-(3-氯-5-异丙基异喹啉-8-基)氮杂环丁烷-3-基)甲基)(甲基)(氧代)-λ6-亚磺基)苯甲酰胺(黄绿色固体,250mg,39.0％)。
第二步：((1-(3-氯-5-异丙基异喹啉-8-基)氮杂环丁烷-3-基)甲基)(亚氨基)(甲基)-λ6磺胺
在20mL单口瓶中将N-(((1-(3-氯-5-异丙基异喹啉-8-基)氮杂环丁烷-3-基)甲基)(甲基)(氧代)-λ6-亚磺基)苯甲酰胺(250mg,0.55mmol)溶于甲醇(5mL)，然后搅拌下加入氢氧化钠(5mL,5M)，升温至50℃搅拌过夜，LCMS监测反应完全后，冷却至室温，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残余物用硅胶柱层析以甲醇/二氯甲烷(1/7)为洗脱剂分离纯化得((1-(3-氯-5-异丙基异喹啉-8-基)氮杂环丁烷-3-基)甲基)(亚氨基)(甲基)-λ6磺胺(黄绿色油状物,160mg,82.9％)。MS(ESI+)m/z＝352.05[M+H]+。
第三步：(((1-(3-氯-5-异丙基异喹啉-8-基)氮杂环丁烷-3-基)甲基)(甲基)(氧代)-λ6亚磺基)氨基甲酸叔丁酯
在20mL单口瓶中将((1-(3-氯-5-异丙基异喹啉-8-基)氮杂环丁烷-3-基)甲基)(亚氨基)(甲基)-λ6磺胺(120mg,0.34mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(3mL)，降温至0℃，搅拌下分批次加入氢化钠(12.28mg,0.51mmol)，搅拌30min后缓慢滴加Boc2O(148.85mg,0.68mmol)，滴加完毕后，反应混合液在室温下搅拌2h，LCMS监测反应完全后，加水(5mL)淬灭反应，混合液用乙酸乙酯(10mL×3)萃取，用水(20mL)洗涤，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残余物用薄层层析法以乙酸乙酯/石油醚(1/10)为洗脱剂分离纯化得到(((1-(3-氯-5-异丙基异喹啉-8-基)氮杂环丁烷-3-基)甲基)(甲基)(氧代)-λ6亚磺基)氨基甲酸叔丁酯(黄绿色固体,70mg,45.4％)。MS(ESI+)m/z＝452.25[M+H]+。
第四步：((1-(3-((2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)氨基)-5-异丙基异喹啉-8-基)氮杂环丁烷-3-基)甲基)(甲基)(氧代)-λ6亚磺基)氨基甲酸叔丁酯
氮气保护下，往8mL单口瓶中依次加入(((1-(3-氯-5-异丙基异喹啉-8-基)氮杂环丁烷-3-基)甲基)(甲基)(氧代)-λ6亚磺基)氨基甲酸叔丁酯(70mg,0.16mmol)，中间体C1(49.3mg,0.19mmol)，EPhos Pd G4(14.2mg,0.015mmol)，Ephos(8.28mg,0.015mmol)，碳酸铯(100.9mg,0.31mmol)和1,4-二氧六环(2mL)，升温至100℃搅拌1h。LCMS监测反应完全后，降至室温。加水(3mL)淬灭反应，混合液用乙酸乙酯(10mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得残余物用薄层层析法以乙酸乙酯为洗脱剂分离纯化得到得到((1-(3-((2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)氨基)-5-异丙基异喹啉-8-基)氮杂环丁烷-3-基)甲基)(甲基)(氧代)-λ6亚磺基)氨基甲酸叔丁酯(黄色固体,30mg,28.5％)。MS(ESI+)m/z＝581.10[M-100+H]+。
第五步：((1-(3-((2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)氨基)-5-异丙基异喹啉-8-基)氮杂环丁烷-3-基)甲基)(甲基)亚磺酰亚胺
在8mL的单口瓶中将((1-(3-((2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)氨基)-5-异丙基异喹啉-8-基)氮杂环丁烷-3-基)甲基)(甲基)(氧代)-λ6亚磺基)氨基甲酸叔丁酯(25mg,0.04mmol)溶于二氯甲烷/三氟乙酸的混合液(3/1,3mL)中，反应混合物在室温下搅拌30min，LCMS监测反应完全后，减压浓缩，所得残余物用高效液相色谱纯化(柱型:XBridge Prep OBD C18 Column,30*150mm,5μm；流动相A:水(10mmol/L碳酸氢铵),流动相B:乙腈；流速:60mL/min；梯度:17％-42％9min；波长:254/220nm)得到((1-(3-((2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)氨基)-5-异丙基异喹啉-8-基)氮杂环丁烷-3-基)甲基)(甲基)亚磺酰亚胺。
黄色固体,MS(ESI+)m/z＝581.20[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.39(s,1H),9.41(s,1H),8.78(s,1H),8.70(s,1H),8.52(s,1H),8.43(d,J＝5.9Hz,1H),7.39(d,J＝8.0Hz,1H),7.19(s,1H),6.71(d,J＝5.3Hz,1H),6.49(d,J＝8.1Hz,1H),3.85-3.70(m,1H),3.58-3.50(m,3H),3.30-3.28(m,2H),3.25(s,3H),3.15(s,1H),3.14-3.05(m,1H),2.99-2.87(m,1H),1.37(d,J＝6.7Hz,8H),1.29-1.25(m,2H).
实施例186.((1-(3-((2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)氨基)-5-异丙基异喹啉-8-基)丙-2-炔-基-(甲基)亚磺酰亚胺的制备(终产物5)
采用实施例185中合成终产物24的方法，以中间体A1、中间体B29和中间体C1为原料制备终产物5。MS(ESI+)m/z＝550.2[M+H]+.
实施例187.(((2R,3S)-1-(3-((2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)氨基)-5-异丙基异喹啉-8-基)-2-甲基氮杂环丁烷-3-基)甲基)(甲基)亚磺酰亚胺的制备(终产物25)
采用实施例185中合成终产物24的方法，以中间体A1、中间体B6和中间体C1为原料制备终产物25。
淡黄色固体,MS(ESI+)m/z＝595.05[M+H]+.1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.36(s,1H),9.41(s,1H),8.76(s,1H),8.70(s,1H),8.51(s,1H),8.43(d,J＝5.8Hz,1H),7.37(d,J＝8.1Hz,1H),7.19(s,1H),6.49(d,J＝8.7Hz,1H),6.24(d,J＝8.6Hz,1H),3.90-3.70(m,4H),3.65-3.06(m,2H),3.15(s,3H),3.10(s,1H),2.92-2.88(m,1H),1.35(d,J＝6.7Hz,8H),1.34-1.23(m,5H).
实施例188.终产物34的制备
第一步：((2R,3S)-1-(3-氯-5-异丙基异喹啉-8-基)-2-甲基氮杂环丁烷-3-基)氨基甲酸叔丁酯
将中间体A1(200mg,0.70mmol)溶于二氧六环(4mL)，搅拌下加入N-[(2R,3S)-2-甲基氮杂环丁烷-3-基]氨基甲酸叔丁酯(157.1mg,0.84mmol)，Xantphos Pd G4(67.6mg,0.07mmol)，碳酸铯(915.9mg,2.812mmol)，置换氮气，升温至100℃搅拌0.5h。降温至室温，加入水(50mL)淬灭反应，混合液用乙酸乙酯(50mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗产物。粗产物经硅胶柱层析以乙酸乙酯/石油醚(0-50％)为洗脱剂梯度洗脱分离纯化得((2R,3S)-1-(3-氯-5-异丙基异喹啉-8-基)-2-甲基氮杂环丁烷-3-基)氨基甲酸叔丁酯(黄色固体,185mg,67.7％)。MS(ESI+)m/z＝390.15[M+H]+。
第二步：叔丁基((2R,3S)-1-(3-氯-5-异丙基异喹啉-8-基)-2-甲基氮杂环丁烷-3-基)(甲基)氨基甲酸酯
将((2R,3S)-1-(3-氯-5-异丙基异喹啉-8-基)-2-甲基氮杂环丁烷-3-基)氨基甲酸叔丁酯(175mg,0.45mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(3mL)，置换氮气，0℃搅拌下加入钠氢(16.2mg,0.68mmol)，0℃搅拌0.5h，然后搅拌下加入碘甲烷(127.7mg,0.9mmol)，室温搅拌1h，加入水(50mL)淬灭反应，混合液用乙酸乙酯(50mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗产物。粗产物经硅胶柱层析以乙酸乙酯/石油醚(0-50％)为洗脱剂梯度洗脱分离纯化得叔丁基((2R,3S)-1-(3-氯-5-异丙基异喹啉-8-基)-2-甲基氮杂环丁烷-3-基)(甲基)氨基甲酸酯(黄色固体,170mg,93.5％)。MS(ESI+)m/z＝404.30[M+H]+。
第三步：叔丁基((2R,3S)-1-(3-((2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)氨基)-5-异丙基异喹啉-8-基)-2-甲基泽丁-3-基)(甲基)氨基甲酸酯
单口瓶依次加入叔丁基((2R,3S)-1-(3-氯-5-异丙基异喹啉-8-基)-2-甲基氮杂环丁烷-3-基)(甲基)氨基甲酸酯(190mg,0.47mmol)和二氧六环(3mL)，搅拌下加入中间体C1(149.7mg,0.56mmol)，Ephos Pd G4(43.2mg,0.047mmol)，Ephos(25.2mg,0.047mmol)和碳酸铯(459.75mg,1.4mmol)，置换氮气，升温至100℃搅拌1h。加入水(50mL)淬灭反应，混合液用乙酸乙酯(50mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗产物。粗产物经硅胶柱层析以乙酸乙酯/石油醚(0-100％)为洗脱剂梯度洗脱分离纯化得叔丁基((2R,3S)-1-(3-((2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)氨基)-5-异丙基异喹啉-8-基)-2-甲基泽丁-3-基)(甲基)氨基甲酸酯(黄色固体,150mg,50.4％)。MS(ESI+)m/z＝633.25[M+H]+。
第四步：N-(2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-5-异丙基-8-((2R,3S)-2-甲基-3-(甲基氨基)氮杂环丁烷-1-基)异喹啉-3-胺
单口瓶中依次加入叔丁基((2R,3S)-1-(3-((2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)氨基)-5-异丙基异喹啉-8-基)-2-甲基泽丁-3-基)(甲基)氨基甲酸酯(140mg,0.22mmol)和二氯甲烷(4mL)，搅拌下加入三氟甲磺酸三甲基硅酯(295mg,1.33mmol)，2,6-二甲基吡啶(189.66mg,1.768mmol)，室温搅拌1h。加入水(50mL)淬灭反应，混合物用乙酸乙酯(50mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗产物。粗产物经高压制备液相色谱纯化(柱型:XBridge Prep OBD C18 Column,30*150mm,5μm；流动相:水(10mmol/L碳酸氢铵)/乙腈；流速:60mL/min；梯度:34％-64％,7min；波长:254/220nm)得N-(2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-5-异丙基-8-((2R,3S)-2-甲基-3-(甲基氨基)氮杂环丁烷-1-基)异喹啉-3-胺。
淡黄色固体,MS(ESI+)m/z＝533.20[M+H]+.1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.38(s,1H),9.13(s,1H),8.77(s,1H),8.70(s,1H),8.51(s,1H),8.44(d,J＝5.9Hz,1H),7.45(d,J＝8.0Hz,1H),7.23(d,J＝6.0Hz,1H),6.61(d,J＝8.1Hz,1H),4.67(t,J＝7.0Hz,1H),4.05-4.01(m,1H),3.66-3.48(m,1H),3.46(t,J＝6.3Hz,1H),3.32-3.26(m,3H),2.30(s,3H),1.45-1.23(m,13H).
实施例189-197终产物33、35-42的制备
采用实施例188中终产物34的制备方法，以市售其他化合物为原料制备终产物33、35-42，详见表5。
表5终产物33、35-42
实施例198 N-(2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-8-((2R,3S)-2-甲基-3-((甲基磺酰基)甲基)氮杂环丁烷-1-基)-5-(1,1,1-三氟丙烷-2-基)异喹啉-3-胺的制备(终产物71)
第一步：3-氯-8-((2R,3S)-2-甲基-3-((甲基磺酰基)甲基)氮杂环丁烷-1-基)-5-(3,3,3-三氟丙基-1-烯-2-基)异喹啉
往40mL单口瓶中依次加入中间体A2(200mg,0.59mmol)和二氧六环(4mL)，搅拌下加入中间体B1(116.4mg,0.71mmol)，Xantphos Pd G4(57.2mg,0.059mmol)和碳酸铯(774.5mg,2.38mmol)。置换氮气，升温至100℃搅拌1h。将反应液降至室温，加水(20mL)淬灭反应，混合液用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗产物。粗产物经硅胶柱层析以乙酸乙酯/石油醚(0-66％)为洗脱剂梯度洗脱分离纯化得3-氯-8-((2R,3S)-2-甲基-3-((甲基磺酰基)甲基)氮杂环丁烷-1-基)-5-(3,3,3-三氟丙基-1-烯-2-基)异喹啉(淡黄色固体,150mg,60.3％)。MS(ESI+)m/z＝419.10[M+H]+。
第二步：N-(2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-8-((2R,3S)-2-甲基-3-((甲基磺酰基)甲基)氮杂环丁烷-1-基)-5-(3,3,3-三氟丙基-1-烯-2-基)异喹啉-3-胺
往40mL单口瓶中依次加入3-氯-8-((2R,3S)-2-甲基-3-((甲基磺酰基)甲基)氮杂环丁烷-1-基)-5-(3,3,3-三氟丙基-1-烯-2-基)异喹啉(150.0mg,0.36mmol)和二氧六环(4mL)。搅拌下加入中间体C1(114.0mg,0.43mmol)，EPhos Pd G4(32.9mg,0.036mmol)，Ephos(19.2mg,0.036mmol)，碳酸铯(233.4mg,0.72mmol)。置换氮气，升温至100℃搅拌1h。将反应液降至室温，加入水(20mL)淬灭反应，混合液用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗产物。粗产物经硅胶柱层析以乙酸乙酯/石油醚(0-96％)为洗脱剂梯度洗脱分离纯化得N-(2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-8-((2R,3S)-2-甲基-3-((甲基磺酰基)甲基)氮杂环丁烷-1-基)-5-(3,3,3-三氟丙基-1-烯-2-基)异喹啉-3-胺(黄色固体,100mg,43.1％)。MS(ESI+)m/z＝647.95[M+H]+。
第三步：N-(2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-8-((2R,3S)-2-甲基-3-((甲基磺酰基)甲基)氮杂环丁烷-1-基)-5-(1,1,1-三氟丙烷-2-基)异喹啉-3-胺
往50mL单口瓶中依次加入N-(2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-8-((2R,3S)-2-甲基-3-((甲基磺酰基)甲基)氮杂环丁烷-1-基)-5-(3,3,3-三氟丙基-1-烯-2-基)异喹啉-3-胺(100mg,0.15mmol)和乙酸乙酯(4mL)，静止下加入二氧化铂(70.1mg,0.31mmol)。置换氢气，室温搅拌48h。将反应液减压浓缩得到粗产物。粗产物经高压制备液相色谱纯化(柱型:XBridge Prep OBD C18 Column,30*150mm,5μm；流动相:水/乙腈；流速:60mL/min；梯度:34％-64％,7min；波长:254/220nm)得N-(2-(1-(环丙基磺酰基)-1H-吡唑-4-基)嘧啶-4-基)-8-((2R,3S)-2-甲基-3-((甲基磺酰基)甲基)氮杂环丁烷-1-基)-5-(1,1,1-三氟丙烷-2-基)异喹啉-3-胺.
淡黄色固体,MS(ESI+)m/z＝650.2[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.37(d,J＝8.3Hz,1H),9.14(d,J＝1.8Hz,1H),8.70(d,J＝3.4Hz,1H),8.64-8.56(m,1H),8.46(dd,J＝9.6,5.2Hz,2H),7.65(d,J＝8.3Hz,1H),7.32(s,1H),6.64(dd,J＝8.4,3.8Hz,1H),4.82-4.73(m,1H),4.38-4.24(m,2H),3.85-3.73(m,1H),3.64-3.42(m,2H),3.24-3.23(m,1H),3.00(d,J＝4.2Hz,3H),2.98-2.87(m,1H),1.61(t,J＝7.3Hz,3H),1.47(dd,J＝6.1,4.0Hz,3H),1.35-1.32(m,2H),1.31-1.21(m,2H).
终产物72和终产物73
终产物71经手性制备色谱纯化(柱型:CHIRALPAK IC 2*25cm,5μm；流动相A:(Hex:DCM＝3:1)(0.1％DEA):IPA＝80:20,流动相B:EtOH--HPLC；流速:20mL/min；梯度:isocratic 20；波长:220/254nm；RT1(min):18.114；RT2(min):22.969；样品溶剂:EtOH--HPLC；注入量:0.5mL；运行次数:6)分别得到终产物72和终产物73(终产物72和终产物73结构中三氟异丙基处的具体构型未知)。
终产物72：淡黄色固体,MS(ESI+)m/z＝650.2[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.38(s,1H),9.15(s,1H),8.70(s,1H),8.62(s,1H),8.51-8.43(m,2H),7.65(d,J＝8.0Hz,1H),7.33(s,1H),6.64(d,J＝8.4Hz,1H),4.77(t,J＝7.8Hz,1H),4.35-4.27(m,2H),3.76(t,J＝7.2Hz,1H),3.59-3.50(m,2H),3.27-3.23(m,1H),3.01(s,3H),2.95-2.92(m,1H),1.63(d,J＝7.2Hz),3H),1.46(d,J＝6.0Hz,3H),1.37-1.23(m,4H).19F NMR(377MHz,DMSO-d6)δ-69.69.
终产物73：淡黄色固体,MS(ESI+)m/z＝650.1[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.36(s,1H),9.14(s,1H),8.70(s,1H),8.60(s,1H),8.46-8.45(m,2H),7.65(d,J＝8.0Hz,1H),7.33(s,1H),6.64(d,J＝8.3Hz,1H),4.78(t,J＝7.7Hz,1H),4.36-4.27(m,2H),3.82(t,J＝7.2Hz,1H),3.59-3.51(m,2H),3.28-3.19(m,1H),3.00(s,3H),2.97-2.87(m,1H),1.61(d,J＝6.8Hz,3H),1.48(d,J＝6.0Hz,3H),1.36-1.34(m,2H),1.28-1.24(m,2H).19FNMR(377MHz,DMSO-d6)δ-69.66.
实施例199.终产物169的制备
采用实施例198中合成终产物71的方法，以中间体A2、B13和中间体C4为原料制备终产物169。
MS(ESI+)m/z＝668.1[M+H]+.
实施例200.终产物131的制备
第一步：0℃下往40mL单口瓶中依次加入中间体D1(以中间体A1、B1和C49为原料，根据实施例1方法制备)(100mg,0.169mmol)，二氯甲烷(1.5mL)和三氟乙酸(0.5mL)，室温搅拌1h，将反应液减压浓缩得到粗产物(暗红色油状物,80mg,96.4％)。MS(ESI+)m/z＝492.3[M+H]+。
第二步：0℃下往40mL单口瓶中依次加入上述粗产品(80mg,0.163mmo)，二氯甲烷(2mL)，三乙胺(32.93mg,0.326mmol)和(1-氰基环丙基)甲磺酰氯(35.08mg,0.196mmo)，置换氮气，室温搅拌1h，加水(50mL)淬灭反应，混合物用乙酸乙酯(50mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗产物。粗产物经高压制备液相色谱纯化(柱型:XSelect CSH C18 Column,19*250mm,5μm；流动相:水(0.1％甲酸)/乙腈；流速:60mL/min；梯度:37％-67％,7min；波长:254/220nm)得1-((4-[4-((5-异丙基-8-[(2R，3S)-3-(甲磺酰基甲基)-2-甲基氮杂环丁烷-1-基]异喹啉-3-基氨基)嘧啶-2-基]吡唑-1-基磺酰基甲基)环丙烷-1-甲腈。
黄色固体,MS(ESI+)m/z＝635.1[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.42(s,1H),9.11(s,1H),8.77(s,1H),8.73(s,1H),8.56(s,1H),8.44(d,J＝6.0Hz,1H),7.46(d,J＝8.0Hz,1H),7.25(s,1H),6.60(d,J＝8.1Hz,1H),4.69(t,J＝7.5Hz,1H),4.33(s,2H),4.23-4.21(m,1H),3.68-3.50(m,4H),3.00(s,3H),2.90-2.89(m,1H),1.44-1.39(m,11H),1.27-1.22(m,2H)。
实施例201-215终产物127、128、132-134、196-204、220的制备
采用实施例200中终产物131的制备方法，以中间体D1和市售其他化合物为原料制备终产物127、128、132-134、196-204、220，详见表6。
表6终产物127、128、132-134、196-204、220
实施例216.终产物117的制备
第一步：3-氯-8-((2R,3S)-2-甲基-3-((甲基磺酰基)甲基)氮杂环丁烷-1-基)异喹啉
以8-溴-3-氯异喹啉和中间体C1为原料，按照实施例1第一步的合成方法制备3-氯-8-((2R,3S)-2-甲基-3-((甲基磺酰基)甲基)氮杂环丁烷-1-基)异喹啉，MS(ESI+)m/z＝325.0[M+H]+
第二步：5-溴-3-氯-8-((2R,3S)-2-甲基-3-(甲基磺酰基)甲基)氮杂环丁烷-1-基)异喹啉
在40mL单口瓶中，将3-氯-8-((2R,3S)-2-甲基-3-((甲基磺酰基)甲基)氮杂环丁烷-1-基)异喹啉(400mg,1.231mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5mL)，0℃搅拌下加入N-溴代丁二酰亚胺(219.18mg,1.231mmol)，置换氮气，室温搅拌1h。将反应液降至室温，加入水(50mL)淬灭反应，混合液用乙酸乙酯(50mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗产物。粗产物经硅胶柱层析以乙酸乙酯/石油醚(0-50％)为洗脱剂梯度洗脱分离纯化得5-溴-3-氯-8-((2R,3S)-2-甲基-3-(甲基磺酰基)甲基)氮杂环丁烷-1-基)异喹啉(黄色固体,410mg,82.5％)。MS(ESI+)m/z＝402.90[M+H]+。
第三步：4-(3-氯-8-((2R,3S)-2-甲基-3-((甲基磺酰基)甲基)氮杂环丁烷-1-基)异喹啉-5-基)吗啉
往40mL单口瓶中依次加入5-溴-3-氯-8-((2R,3S)-2-甲基-3-(甲基磺酰基)甲基)氮杂环丁烷-1-基)异喹啉(80mg,0.198mmol)，甲苯(2mL)，吗啉(34.53mg,0.396mmol)，叔丁醇钠(28.57mg,0.297mmol)，Pd2(dba)3(18.15mg,0.020mmol)和BINAP(12.34mg,0.020mmol)，置换氮气，100℃搅拌1h，将反应液降至室温，加入水(50mL)淬灭反应，混合液用乙酸乙酯(50mL×3)萃取，合并有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到粗产物。粗产物经硅胶柱层析以乙酸乙酯/石油醚(0-100％)为洗脱剂梯度洗脱分离纯化得4-(3-氯-8-((2R,3S)-2-甲基-3-((甲基磺酰基)甲基)氮杂环丁烷-1-基)异喹啉-5-基)吗啉(黄色油状物,60mg,73.9％)。MS(ESI+)m/z＝410.05[M+H]+。
第四步：N-(2-[1-(环丙磺酰基)吡唑-4-基]嘧啶-4-基-8-[(2R,3S)-3-(甲磺酰基甲基)-2-甲基氮杂环丁烷-1-基]-5-(吗啉-4-基)异喹啉-3-胺
4-(3-氯-8-((2R,3S)-2-甲基-3-((甲基磺酰基)甲基)氮杂环丁烷-1-基)异喹啉-5-基)吗啉和中间体C1为原料，按照实施例1第二步的合成方法制备N-(2-[1-(环丙磺酰基)吡唑-4-基]嘧啶-4-基-8-[(2R,3S)-3-(甲磺酰基甲基)-2-甲基氮杂环丁烷-1-基]-5-(吗啉-4-基)异喹啉-3-胺。
淡黄色固体,MS(ESI+)m/z＝639.10[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.37(s,1H),9.11(s,1H),8.69(s,1H),8.61(s,1H),8.51-8.42(m,2H),7.41(s,1H),7.23(d,J＝8.1Hz,1H),6.56(d,J＝8.0Hz,1H),4.70-4.63(m,1H),4.23-4.15(m,1H),3.78(s,4H),3.64-3.47(m,3H),3.01(s,3H),2.97-2.88(m,5H),1.43(d,J＝5.9Hz,3H),1.37-1.32(m,2H),1.24(s,3H).
实施例217-221终产物113、114、116、119、126的制备
采用实施例216中终产物117的制备方法，以市售其他化合物为原料制备终产物113、114、116、119、126，详见表7。
表7终产物113、114、116、119、126
对比例对比化合物A和对比化合物B的制备
用实施例1中合成终产物3的方法，制备对比化合物A和对比化合物B。
实验例
一、体外酶学实验
采用HTRF KinEASE-TK试剂盒，通过检测EGFR蛋白激酶反应后ATP的剩余量来测定其活性。测试的荧光信号强度与反应剩余ATP的量正相关，与化合物活性正相关，与激酶活性负相关。
1.实验设计
在所选激酶上测定化合物，并设定溶媒对照，共检测10个浓度，每个浓度2个复孔。
2.试剂和耗材
3.实验过程
3.1配置1x激酶缓冲液
酶缓冲液用5mM MgCl2；1mM DTT；1mM MnCl2水溶液稀释到5倍。
3.2化合物筛选
a)用Echo移液器将化合物(以1μM或3μM作为起始浓度，按3倍稀释，设置10个浓度)转移到384孔板中。
b)盖上盖子，在1000g转数下离心1分钟。
c)用激酶缓冲液稀释EGFR L858R/C797S或EGFR L858R/T790M/C797S一倍。
d)加5μl稀释的EGFR L858R/C797S或EGFR L858R/T790M/C797S到384孔板中。
e)在1000g转数下离心30秒，室温静置10min。
f)用激酶缓存液稀释TK-substrate-biotin和ATP的混合液一倍。
g)加入5μl TK-substrate-biotin和ATP混合液开始反应。
h)在1000g转数下离心30秒，盖上盖子，室温静置40min。
i)用HTRF稀释Sa-XL 665检测缓冲液4倍。
j)每孔中加入5μl Sa-XL 665和5μl TK-antibody-Cryptate。
k)在1000g转数下离心30秒，室温静置1h。
l)在Envision 2104多标记微孔板检测仪中读取615nm(Cryptate)和665nm(XL665)荧光信号。
4.IC50计算
使用GraphPad Prism 6.0软件分析数据，利用非线性S曲线回归来拟合数据得出剂量-效应曲线，并由此计算IC50值。
酶抑制百分率(％)＝100-(Signal化合物-Signal平均_PC)/(Signal平均_VC-Signal平均_PC)×100
5.实验结果
表8化合物对EGFR L858R/C797S和EGFR L858R/T790M/C797S酶抑制IC50(nM)
注：LRCS：L858R/C797S；LRTMCS：L858R/T790M/C797S；/：未测试
本发明化合物对EGFR L858R/C797S和EGFR L858R/T790M/C797S酶活性抑制IC50如表8所示。
从表8中可以看出，本发明化合物对EGFR L858R/C797S二重突变激酶和EGFRL858R/T790M/C797S三重突变激酶抑制活性良好，IC50值在纳摩尔水平。与对比化合物比较，本发明化合物同时对EGFR L858R/C797S二重突变激酶和EGFR EGFR L858R/T790M/C797S三重突变激酶具有较好的抑制活性。
二、细胞增殖抑制实验
CellTiter-GloTM活细胞检测试剂盒采用萤光素酶作检测物，发光过程中萤光素酶需要ATP的参与。向细胞培养基中加入CellTiter-GloTM试剂，测量发光值，光信号和体系中ATP量成正比，而ATP又和活细胞数正相关。因此通过使用CellTiter-Glo试剂盒检测ATP含量，可以检测出细胞的增殖情况。
本实验采用celltiter-Glo(CTG)法测量前述制备的化合物在肿瘤细胞株Ba/F3(EGFR-L858R/C797S)、Ba/F3(EGFR-L858R/C797S/T790M)和A431中增殖抑制作用，并计算50％抑制浓度(IC50)。
1.实验设计
在所选细胞上测定化合物，并设定溶媒对照，共检测10个浓度，每个浓度2个复孔。
2.试剂和耗材
3.实验过程
3.1细胞培养
a)所有细胞按照ATCC推荐方法进行培养。培养收获处于对数生长期的细胞。检测细胞活力，确保细胞活力在90％以上。
b)细胞培养基：RPMI1640,10％FBS，1*GlutaMAX和1*Ps，2μg/ml puro。调整细胞浓度，分别添加30μL细胞悬液至384孔板中。
c)细胞培养环境：37℃、5％CO2、95％湿度条件下培养。
3.2药物稀释
a)药物储存液：药物用DMSO溶解配制成10mM DMSO储存液。
b)药物存储：药物DMSO储存液均在室温干燥器中进行短期储存(最多3个月)。剩余的药物在-20℃保存较长时间。
3.3加药
a)所有药物从3mM浓度开始3倍稀释，10个浓度梯度。
b)配制阳性对照药，DMSO空白对照。
c)用Echo在接种有细胞的384孔板中每孔加入30nL药物溶液，每个药物浓度设置2个复孔。
d)将已加药的384孔板中的细胞置于37℃、5％CO2、95％湿度条件下继续培养72小时，之后进行CTG分析。
3.4终点读板
a)融化CTG试剂，每孔加入25μL的CTG溶液，摇匀。
b)将细胞板放置在37℃、5％CO2、95％湿度条件下继续培养30min。
c)通过酶标仪读取荧光值。
4.数据处理
使用GraphPad Prism 5.0软件分析数据，利用非线性S曲线回归来拟合数据得出剂量-效应曲线，并由此计算IC50值。
细胞存活率(％)＝(Lum待测药-Lum培养液对照)/(Lum细胞对照-Lum培养液对照)×100％.
5.实验结果
表9化合物对Ba/F3(EGFR-L858R/C797S)、Ba/F3(EGFR-L858R/T790M/C797S)、Ba/F3(EGFR-Ex19Del/C797S)、Ba/F3(EGFR-Ex19Del/T790M/C797S)、HCC827、PC9细胞株抑制增殖活性IC50(nM)
注：LRCS：L858R/C797S；LRTMCS：L858R/T790M/C797S；D19/CS：Ex19Del/C797S；D19/TM/CS：Ex19Del/T790M/C797S/：未测试
本发明化合物对Ba/F3(EGFR-L858R/C797S)、Ba/F3(EGFR-L858R/T790M/C797S)、Ba/F3(EGFR-Ex19Del/C797S)、Ba/F3(EGFR-Ex19Del/T790M/C797S)、HCC827、PC9和A431细胞株抑制增殖活性IC50如表9所示。
从表9中可以看出，本发明化合物对Ba/F3(EGFR-L858R/C797S)、Ba/F3(EGFR-L858R/T790M/C797S)、Ba/F3(EGFR-Ex19Del/C797S)、Ba/F3(EGFR-Ex19Del/T790M/C797S)、HCC827和PC9细胞株具有较好增殖抑制活性且对A431细胞抑制活性弱，表明本发明化合物对表达EGFR突变的细胞株具有良好的抑制活性和选择性。
三、化合物在小鼠体内的cassette药代动力学测试
实验目的：以ICR小鼠为受试物，应用LC/MS/MS法测定灌胃(PO)给予化合物，不同时刻血浆中化合物的药物浓度，研究本发明的化合物在小鼠体内的药代动力学行为，评价其药代动力学特征。
药物配置：化合物均以10％DMSO+10％Solutol+80％Saline为溶媒配成澄清溶液，用于PO给药，给药方法为盒式给药法(cassette dosing)，每个化合物的给药剂量为：剂量为20mg/kg或30mg/kg。药代动力学参数结果见表10。
表10小鼠体内cassette药代动力学测试结果
从表10可以看出，本发明的化合物结构中异喹啉5位的取代基(与核糖区作用)具有氰基或氟取代基团时(终产物68、70、72、160、167、200、207和210)暴露量更高；结构中吡唑1位为磺酰胺基取代时(终产物166、167、193和194)暴露量更高。
以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对本发明进行若干改进和修饰，这些改进和修饰也落入本发明权利要求的保护范围内。

Claims (15)

1.式I所示的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体或互变异构体：
在式I中，
表示单键或双键；
A环选自如下基团中的一种：
X1为C(Ra)n，X2为C(Ra)n；Ra为氢原子；n为1；
X3、X4、X5各自独立地为C；
X6为CH；
X7为N；
X8为CRb；Rb为氢原子；
X9为C；
R1选自如下基团中的一种：
所述R1基团被一个或者多个Rc取代；
Rc各自独立地为甲基、甲磺酰基甲基、二甲基膦酰甲基、甲磺酰亚胺基甲基、甲磺酰基、甲磺酰亚胺基、甲磺酰基甲氨基、异噻唑烷基、甲磺酰胺基、乙酰氨基或氧代(＝O)，所述地Rc不为氧代(＝O)时，可以任选地被一个或多个以下基团取代：F、Cl、羟基、甲基、乙基或环丙基；
R2各自独立地为卤素、氰基、C1-6烷基、4-6元杂环基、-ORe1、-C(O)Re1，所述地R2不为卤素和氰基时，可以任选地被一个或多个相同或不同氘原子、卤素、羟基、氰基、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷氧基、3-6元环烷基、氧代(＝O)取代；所述4-6元杂环基中的杂原子为N、O、S；
Re1为C1-6烷基；
R3为环丙基磺酰基、二甲基膦酰基、环丙基亚甲基磺酰基、苯基亚甲基磺酰基、二甲氨磺酰基、甲基(吡啶-2-基)氨基磺酰基、哌嗪-1-基磺酰基、N’,N’-二甲基氨酰基，所述地环丙基亚甲基磺酰基、哌嗪-1-基磺酰基可以任选地被一个以下基团取代：氰基或甲基；
R4各自独立地为氢原子、卤素；
t1各自独立地为0或1；
t2各自独立地为1；
其中，式I不为下列化合物：
2.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体或互变异构体，在式I中，A环选自：
3.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体或互变异构体，在式I中，X1为C(Ra)n，X2为C(Ra)n；Ra为氢原子；n为1；
X3、X4、X5各自独立地为C；
X6为CH；
X7为N；
X8为CRb；Rb为氢原子；
X9为C。
4.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体或互变异构体，在式I中，R1选自如下基团：
所述R1基团被一个或者多个Rc取代；
Rc各自独立地为甲基、甲磺酰基甲基、甲磺酰胺，所述地Rc任选地被一个或多个以下基团取代：甲基或环丙基。
5.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体或互变异构体，在式I中，R2为F、Cl、Br、氰基、甲基、乙基、异丙基、丁基、丁-2-基、氧杂环丁-3-基、氧杂环丁-2-基、哌啶-1-基、哌嗪基、吗啉基、四氢呋喃-3-基、四氢呋喃-2-基、乙酰基、甲氧基、所述地R2不为F、Cl、Br和氰基时，可任选地被一个或多个相同或不同F、Cl、羟基、氰基、甲基、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基、环丙基或氧代(＝O)取代。
6.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体或互变异构体，在式I中，R2为异丙基、所述地R2被一个或多个相同或不同F、氰基取代。
7.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体或互变异构体，在式I中，R3为环丙基磺酰基、二甲氨磺酰基、N’,N’-二甲基氨酰基。
8.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体或互变异构体，在式I中，R4各自独立地为氢原子、Cl；
t1各自独立地为0或1；
t2各自独立地为1。
9.杂芳基氨基化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体，其特征在于，选自下列的化合物：
10.一种制备权利要求1至9中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体的方法，包括：
化合物1与HR2发生反应形成化合物2；
化合物2与HR1发生反应形成化合物3；
化合物3与化合物5发生反应形成式I所示化合物；
或，
化合物1与HR1发生反应形成化合物4；
化合物4与HR2发生反应形成化合物3；
化合物3与化合物5发生反应形成式I所示化合物；
其中，X1和X2各自独立地为氢原子或卤素原子，X3为卤素原子，A、X1、X2、X3、X4、X5、X6、X7、X8、X9、R1、R2、R3、R4、t1和t2如权利要求1至8中任一项所定义。
11.包含如权利要求1-9中任一项所述的化合物或者其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体、以及药学上可接受的载体或者赋形剂的药物组合物。
12.根据权利要求11所述的药物组合物为片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、散剂、栓剂、注射剂、溶液剂、混悬剂、膏剂、贴剂、洗剂、滴剂、擦剂、喷雾剂。
13.权利要求1-9中任一项所述的化合物或者其药学上可接受的盐、立体异构体、互变异构体和/或者权利要求11或12所述的药物组合物在制备治疗EGFR介导的疾病的药物中的应用。
14.根据权利要求13所述的应用，其中，所述疾病为肿瘤性疾病。
15.根据权利要求14所述的应用，其中，所述肿瘤性疾病包括：头颈部癌、鼻咽癌、黑色素瘤、膀胱癌、食道癌、间变性大细胞淋巴瘤、肾癌、乳腺癌、结肠直肠癌、卵巢癌、宫颈癌、胰腺癌、胶质瘤、胶质母细胞瘤、前列腺癌、白血病、淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、胃癌、肺癌、肝癌、胃肠道基质瘤、甲状腺癌、鳞状细胞癌、胆管癌、子宫内膜癌、多发性骨髓瘤或者间皮瘤、动脉粥样硬化或者肺纤维化。
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Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116969923B (zh) * 2023-01-18 2024-07-30 北京鞍石生物科技股份有限公司 杂芳基氨基化合物及其制备方法和应用

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115135642A (zh) * 2019-12-23 2022-09-30 缆图药品公司 Egfr突变形式的抑制剂
CN115650958A (zh) * 2022-10-14 2023-01-31 中国药科大学 2-氨基嘧啶类化合物及其制备方法、用途和药物组合物
CN116478136A (zh) * 2022-01-17 2023-07-25 苏州浦合医药科技有限公司 2-哌啶基或2-吡唑基取代的嘧啶化合物作为egfr抑制剂
CN118108669A (zh) * 2022-11-29 2024-05-31 苏州浦合医药科技有限公司 用于制备egfr抑制剂的中间体及其制备方法

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2014210354A1 (en) * 2013-06-28 2014-12-31 Genentech, Inc. Azaindazole compounds as inhibitors of t790m containing egfr mutants
WO2022271630A1 (en) * 2021-06-22 2022-12-29 Blueprint Medicines Corporation Egfr inhibitors
EP4393916A1 (en) * 2021-08-27 2024-07-03 Shanghai Hansoh Biomedical Co., Ltd. Nitrogen-containing heterocyclic derivative inhibitor, and preparation method therefor and use thereof
CN116496318A (zh) * 2022-01-26 2023-07-28 四川海思科制药有限公司 一种杂环衍生物及其组合物和药学上的应用
AU2023233629A1 (en) * 2022-03-17 2024-09-26 Jiangsu Hansoh Pharmaceutical Group Co., Ltd. Nitrogen-containing heterocyclic derivative inhibitor, preparation method therefor and use thereof
KR20230153951A (ko) * 2022-04-29 2023-11-07 보로노이 주식회사 헤테로아릴 유도체 화합물 및 이의 용도
WO2023241618A1 (zh) * 2022-06-14 2023-12-21 南京明德新药研发有限公司 氨基嘧啶类化合物及其应用
WO2024008048A1 (zh) * 2022-07-04 2024-01-11 杭州德睿智药科技有限公司 新型嘧啶或三嗪取代吡啶并杂环化合物
CN117229289A (zh) * 2022-10-09 2023-12-15 药雅科技(上海)有限公司 具有大环结构的egfr抑制剂的制备及其应用
CN117229262A (zh) * 2022-10-11 2023-12-15 药雅科技(上海)有限公司 多芳香环egfr抑制剂的制备及其应用
CN116554150A (zh) * 2022-12-30 2023-08-08 苏州浦合医药科技有限公司 第四代egfr抑制剂
CN116969923B (zh) * 2023-01-18 2024-07-30 北京鞍石生物科技股份有限公司 杂芳基氨基化合物及其制备方法和应用

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115135642A (zh) * 2019-12-23 2022-09-30 缆图药品公司 Egfr突变形式的抑制剂
CN116478136A (zh) * 2022-01-17 2023-07-25 苏州浦合医药科技有限公司 2-哌啶基或2-吡唑基取代的嘧啶化合物作为egfr抑制剂
CN115650958A (zh) * 2022-10-14 2023-01-31 中国药科大学 2-氨基嘧啶类化合物及其制备方法、用途和药物组合物
CN118108669A (zh) * 2022-11-29 2024-05-31 苏州浦合医药科技有限公司 用于制备egfr抑制剂的中间体及其制备方法

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