CN113332250B - 一种谷氨酰胺酶抑制剂冻干粉及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种谷氨酰胺酶抑制剂冻干粉及其制备方法和应用，属于生物医药技术领域，所述谷氨酰胺酶抑制剂冻干粉包括：谷氨酰胺酶抑制剂、悬浮剂和冻干保护剂；所述悬浮剂包括聚乙烯吡咯烷酮K‑12和/或脱氧胆酸钠；所述谷氨酰胺抑制剂冻干粉重悬后的粒径(D90)≤200nm。本发明的谷氨酰胺酶抑制剂冻干粉能够采用常规临床允许使用的溶剂进行重悬(复溶)，重悬后的谷氨酰胺酶抑制剂为直径(D90)≤200nm的纳米颗粒，能够在溶剂中稳定悬浮两周，达到注射剂制剂的临床要求。

Description

一种谷氨酰胺酶抑制剂冻干粉及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及生物医药技术领域，尤其涉及一种谷氨酰胺酶抑制剂冻干粉及其制备方法和应用。
背景技术
谷氨酰胺酶(GLS)催化谷氨酰胺转化为谷氨酸，是肿瘤细胞能量代谢的关键来源，因此，抑制GLS有望成为抗癌的重要途径。抑制GLS的物质被称为谷氨酰胺酶抑制剂。谷氨酰胺酶抑制剂不仅具有抗肿瘤活性，还可以明显增强耐药肿瘤细胞对靶向药物的敏感性，因而在抗癌药物研发中具有巨大潜力。
现有的谷氨酰胺酶抑制剂类的小分子药物，如GI-003(BPTES)、GI-005(参见CN106890184B)等不溶于水，也不溶于极性溶剂，仅溶于二甲基亚砜，但是二甲基亚砜不是临床允许使用的溶剂，因此现有报道的谷氨酰胺酶抑制剂无法使用常规的溶剂制备为注射剂进行临床应用。
发明内容
本发明的目的在于提供一种谷氨酰胺酶抑制剂冻干粉及其制备方法和应用，本发明的谷氨酰胺酶抑制剂冻干粉能够溶解于常规临床允许使用的溶剂，且稳定性好。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
本发明提供了一种谷氨酰胺酶抑制剂冻干粉，包括以下组分：谷氨酰胺酶抑制剂、悬浮剂和冻干保护剂；所述谷氨酰胺酶抑制剂、悬浮剂和冻干保护剂的质量比为(3～8)：(0.5～0.6)：(5～15)；
所述悬浮剂包括聚乙烯吡咯烷酮K-12和/或脱氧胆酸钠；
所述谷氨酰胺抑制剂冻干粉重悬后的粒径(D90)≤200nm。
优选的，所述悬浮剂还包括泊洛沙姆。
优选的，所述悬浮剂选自1)～3)中的一种：
1)聚乙烯吡咯烷酮K-12和脱氧胆酸钠；所述聚乙烯吡咯烷酮K-12和脱氧胆酸钠的质量比为(0.45～1)：(0.025～0.05)；
2)泊洛沙姆和脱氧胆酸钠；所述泊洛沙姆和脱氧胆酸钠的质量比为(0.45～0.55)：(0.025～0.05)；
3)聚乙烯吡咯烷酮K-12。
优选的，所述冻干保护剂选自蔗糖、海藻糖、甘露醇和果糖中的一种或几种。
优选的，所述谷氨酰胺酶抑制剂包括BPTES、GI-003、GI-005或GI-006。
本发明还提供了上述方案所述谷氨酰胺酶抑制剂冻干粉的制备方法，包括以下步骤：
将谷氨酰胺酶抑制剂、悬浮剂和水混合，研磨至混合物料的粒径≤200nm；
将研磨后的混合物料和冻干保护剂混合，冻干，得到谷氨酰胺酶抑制剂冻干粉。
优选的，所述研磨的转速为4000～6000rpm；所述研磨的过程中混合物料的温度为20～39℃。
本发明还提供了上述方案所述谷氨酰胺酶抑制剂冻干粉或者所述制备方法制备得到的谷氨酰胺酶抑制剂冻干粉在制备抗肿瘤药物中的应用。
本发明还提供了一种抗肿瘤药物，包括上述方案所述谷氨酰胺酶抑制剂冻干粉和药学上可接受的辅料。
优选的，所述抗肿瘤药物的剂型包括注射剂。
本发明提供了一种谷氨酰胺酶抑制剂冻干粉，包括：谷氨酰胺酶抑制剂、悬浮剂和冻干保护剂；所述悬浮剂包括聚乙烯吡咯烷酮K-12和/或脱氧胆酸钠；所述谷氨酰胺抑制剂冻干粉重悬后的粒径(D90)≤200nm。本发明中，所述悬浮剂能够使谷氨酰胺酶抑制剂制成的纳米微粒在重悬后不会集聚沉淀。本发明的谷氨酰胺酶抑制剂冻干粉能够采用常规临床允许使用的溶剂(例如生理盐水)进行复溶，复溶后的谷氨酰胺酶抑制剂为直径≤200nm的纳米颗粒，能够在溶剂中稳定悬浮两周，达到注射剂制剂的临床要求。
附图说明
图1为批次200601_023的样品在T0(研磨35min时)的检测结果；左图为纳米粒度仪检测的微粒粒径分布(PSD)；右图为光学显微镜(OM)观测；
图2为批次200601__023A的样品在T0(研磨35min)时的检测结果；左图为纳米粒度仪检测的微粒粒径分布(PSD)；右图为光学显微镜(OM)观测；
图3为批次200601__023A的样品在T1(1周)时的检测结果；左图为纳米粒度仪检测的微粒粒径分布(PSD)；右图为光学显微镜(OM)观测；
图4为批次200601__023B的样品在T0(研磨35min)时的检测结果；左图为纳米粒度仪检测的微粒粒径分布(PSD)；右图为光学显微镜(OM)观测；
图5为批次200601__023B的样品在T1(1周)时的检测结果；左图为纳米粒度仪检测的微粒粒径分布(PSD)；右图为光学显微镜(OM)观测；
图6为批次200601__023C的样品在T0(研磨35min)时的检测结果；左图为纳米粒度仪检测的微粒粒径分布(PSD)；右图为光学显微镜(OM)观测；
图7为批次200601__023C的样品在T1(1周)时的检测结果；左图为纳米粒度仪检测的微粒粒径分布(PSD)；右图为光学显微镜(OM)观测；
图8为批次200601__023D的样品在T0(研磨35min)时的检测结果；左图为纳米粒度仪检测的微粒粒径分布(PSD)；右图为光学显微镜(OM)观测；
图9为200601__023D的样品在T1(1周)时的检测结果；左图为纳米粒度仪检测的微粒粒径分布(PSD)；右图为光学显微镜(OM)观测；
图10为批次200601__023E的样品在T0(研磨35min)时的检测结果；左图为纳米粒度仪检测的微粒粒径分布(PSD)；右图为光学显微镜(OM)观测；
图11为批次200601__023E的样品在T1(1周)时的检测结果；左图为纳米粒度仪检测的微粒粒径分布(PSD)；右图为光学显微镜(OM)观测；
图12为批次200601__023F的样品在T0(研磨35min)时的检测结果；左图为纳米粒度仪检测的微粒粒径分布(PSD)；右图为光学显微镜(OM)观测；
图13为批次200601__023F的样品在T1(1周)时的检测结果；左图为纳米粒度仪检测的微粒粒径分布(PSD)；右图为光学显微镜(OM)观测；
图14为批次200601__023G的样品在T0(研磨35min)时的检测结果；左图为纳米粒度仪检测的微粒粒径分布(PSD)；右图为光学显微镜(OM)观测；
图15为批次200601__023G的样品在T1(1周)时的检测结果；左图为纳米粒度仪检测的微粒粒径分布(PSD)；右图为光学显微镜(OM)观测；
图16为批次200601__023H的样品在T0(研磨35min)时的检测结果；左图为纳米粒度仪检测的微粒粒径分布(PSD)；右图为光学显微镜(OM)观测；
图17为批次200601__023H的样品在T1(1周)时的检测结果；左图为纳米粒度仪检测的微粒粒径分布(PSD)；右图为光学显微镜(OM)观测；
图18为批次200601__023A的样品检测结果；左图为T2.5-(2.5周)纳米粒度仪检测的微粒粒径分布(PSD)；右图为T1-(1个月)光学显微镜(OM)观测；
图19为批次200601__023B的检测结果；左图为T2.5-(2.5周)纳米粒度仪检测的微粒粒径分布(PSD)；右图为T1-(1个月)光学显微镜(OM)观测；
图20为批次200601__023A的样品稀释实验前的检测；左图为纳米粒度仪检测的微粒粒径分布(PSD)；右图为光学显微镜(OM)观测；
图21为批次200601__023A的样品稀释后静置8小时的检测；左图为纳米粒度仪检测的微粒粒径分布(PSD)；右图为光学显微镜(OM)观测；
图22为批次200601__023B的样品稀释实验前的检测；左图为纳米粒度仪检测的微粒粒径分布(PSD)；右图为光学显微镜(OM)观测；
图23为批次200601__023B的样品稀释后静置8小时的检测；左图为纳米粒度仪检测的微粒粒径分布(PSD)；右图为光学显微镜(OM)观测；
图24为批次200804__012的样品研磨210分钟后的检测；左图为纳米粒度仪检测的微粒粒径分布(PSD)；右图为光学显微镜(OM)观测；
图25为批次200804__012的样品用20％蔗糖溶液1:1稀释后的检测；左图为纳米粒度仪检测的微粒粒径分布(PSD)；右图为光学显微镜(OM)观测；
图26为200804__012的子批次1冻干后用去离子水重悬后静置2周检测；左图为纳米粒度仪检测的微粒粒径分布(PSD)；右图为光学显微镜(OM)观测；
图27为200804__012的子批次2冻干后用去离子水重悬后静置2周检测；左图为纳米粒度仪检测的微粒粒径分布(PSD)；右图为光学显微镜(OM)观测；
图28为G-003、GI-003Nano对CRL-5803细胞生长的抑制效果；
图29为G-003、GI-003Nano对MDA-MB23细胞生长的抑制效果；
图30为G-003、GI-003Nano对U87细胞生长的抑制效果；
图31为G-003、GI-003Nano对HMEC细胞生长的抑制效果；
图32为G-003、GI-003Nano对小鼠体内肿瘤生长的抑制效果。
具体实施方式
本发明提供了一种谷氨酰胺酶抑制剂冻干粉，包括以下组分：谷氨酰胺酶抑制剂、悬浮剂和冻干保护剂；所述谷氨酰胺酶抑制剂、悬浮剂和冻干保护剂的质量比为(3～8)：(0.5～0.6)：(5～15)；
所述悬浮剂包括聚乙烯吡咯烷酮K-12和/或脱氧胆酸钠；
所述谷氨酰胺抑制剂冻干粉重悬后的粒径(D90)≤200nm。
在本发明中，所述悬浮剂优选的还包括泊洛沙姆。
本发明提供的谷氨酰胺酶抑制剂冻干粉包括悬浮剂0.5～0.6质量份，优选为0.55份。在本发明中，所述悬浮剂优选为聚乙烯吡咯烷酮K-12和脱氧胆酸钠、或泊洛沙姆和脱氧胆酸钠、或聚乙烯吡咯烷酮。在本发明的实施例中，所述聚乙烯吡咯烷酮K-12与脱氧胆酸钠的质量比优选为(0.45～0.55)：(0.025～0.05)，更优选为0.5：(0.03～0.04)；所述泊洛沙姆与脱氧胆酸钠的质量比优选为(0.45～0.55)：(0.025～0.05)，更优选为0.5：(0.03～0.04)。
在本发明中，所述悬浮剂选自1)～3)中的一种：
1)聚乙烯吡咯烷酮K-12和脱氧胆酸钠；所述聚乙烯吡咯烷酮K-12和脱氧胆酸钠的质量比为(0.45～1)：(0.025～0.05)；
2)泊洛沙姆和脱氧胆酸钠；所述泊洛沙姆和脱氧胆酸钠的质量比为(0.45～0.55)：(0.025～0.05)；
3)聚乙烯吡咯烷酮K-12。
本发明提供的谷氨酰胺酶抑制剂冻干粉包括冻干保护剂5～15质量份，优选为8～10份。在本发明中，所述冻干保护剂优选的选自蔗糖、海藻糖、甘露醇和果糖中的一种或几种。
本发明提供的谷氨酰胺酶抑制剂冻干粉包括谷氨酰胺酶抑制剂3～8份，优选为5份。本发明对所述谷氨酰胺酶抑制剂的种类没有特殊的限制。在本发明具体实施过程中，所述谷氨酰胺酶抑制剂优选的包括GI-003(BPTES)、GI-005或GI-006。
在本发明中，所述GI-003(BPTES)来源于合成或常规市售；所述BPTES的的分子结构式如式I所示；
Figure BDA0003164372620000061
在本发明中，所述GI-005的化学式为：2-苯基-N-(5-(4-((5-(2-苯基乙酰氨基)-1,3,4-噻二唑-2-基)氧基)哌啶-1-基)-1,3,4-噻二唑-2-基)乙酰胺；所述GI-005的制备方法优选的参照CN106890184B；所述GI-005的分子结构式如式II所示；
Figure BDA0003164372620000062
在本发明中，所述GI-006的化学式为：N2-苯乙基-N5-(1-(5-(苯乙胺)-1,3,4-噻二唑-2-基)哌啶-4-基)-1，3，4-噻二唑-2，5-二胺；所述GI-006的制备方法优选的参照CN106890184B；所述GI-006的分子结构式如式III所示；
Figure BDA0003164372620000071
本发明还提供了上述方案所述谷氨酰胺酶抑制剂冻干粉的制备方法，包括以下步骤：
将谷氨酰胺酶抑制剂、悬浮剂和水混合，进行研磨，至混合物料的粒径≤200nm；
将研磨后的混合物料和冻干保护剂混合，冻干，得到谷氨酰胺酶抑制剂冻干粉。
将谷氨酰胺酶抑制剂、悬浮剂和水混合进行研磨。在研磨后定容，配比参见表1。在本发明中，所述研磨的转速优选为4000～6000rpm，进一步优选为5000rpm；所述研磨的过程中混合物料的温度优选为20～39℃，更优选为25～30℃。在本发明中，所述研磨采用的研磨介质为0.5mm聚苯乙烯。在本发明中，所述研磨的时间≤48h，研磨期间进行抽检，至重悬后的粒径(D90)≤200nm。
所述研磨后，本发明将研磨后的混合物料和冻干保护剂混合，冻干，得到谷氨酰胺酶抑制剂冻干粉。
本发明对冻干的参数没有特殊限制，采用本领域常规的冻干条件即可。
本发明还提供了上述方案所述谷氨酰胺酶抑制剂冻干粉或者所述制备方法制备得到的谷氨酰胺酶抑制剂冻干粉在制备抗肿瘤药物中的应用。
本发明还提供了一种抗肿瘤药物，包括上述方案所述谷氨酰胺酶抑制剂冻干粉和药学上可接受的辅料。
在本发明中，所述抗肿瘤药物的剂型优选为注射剂。
在本发明中，所述药学上可接受的辅料包括葡萄糖注射液；所述抗肿瘤药物使用的方法是，采用葡萄糖注射液对所述冻干粉进行重悬后使用。
下面将结合本发明中的实施例，对本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
一、筛选研磨配方
表1不同的研磨配方
Figure BDA0003164372620000081
对配方进行研磨48h，以获得D90粒径≤200nm的悬浮液。采用的设备为SM-50再循环磨机。分别在室温和5℃条件下静置2周，不出现沉淀或大颗粒即为连续稳定状态。其中PSD(particle size distribution，微粒粒径分布)汇总数据见表2。
表2 48h研磨后的PSD，5℃和室温下连续2周稳定性
Figure BDA0003164372620000082
Figure BDA0003164372620000091
注：T0是研磨后的当天。T2W是研磨后静置2周。
表2为药物微粒经研磨后在溶剂中形成悬浮液时的粒径分布，由表2可以看出，配方1，5，7可形成稳定的悬浊液，特别是配方1和5，在零度或者室温静至两周后，悬浊液中90％以上的颗粒的粒径仍然小于200nm。完全满足纳米微粒注射剂临床使用的要求。
二、冻干粉制备
配方为：质量百分比的5％TL001、1％PVP K-12和0.5％脱氧胆酸钠以及余量的蒸馏水混合，取60g混合液在2670rpm下研磨35min。该批次研磨至D90粒径≤200nm。批次为200601__023，通过粒径分布(PSD)和光学显微镜(OM，Optical Microscopy)观测确定产品研磨合格。结果参见图1。
用表3中的冷冻保护剂的溶液将200601__023批次按照质量比1：1稀释，用于冷冻干燥处理(表3)。子批次以1mL填充物填充至2mL琥珀色玻璃瓶中。然后对这些小瓶进行传统的冻干循环(表4)。
表3按质量比1：1比例稀释的子批次列表
Figure BDA0003164372620000092
Figure BDA0003164372620000101
表4表3中子批次冷冻干燥
阶段 温度(℃) 持续时间(min) 压力(torr)
冷冻 -40 240min N/A
一次干燥 -30 2160min 100mTorr
二次干燥 20 120min 100mTorr
保存 5 直到释放 100mTorr
从冻干室取出子批次，并测试T0样品的OM和PSD。其余的小瓶在环境条件下稳定放置，并在静置一周后进行OM和PSD测试。PSD结果汇总如表5所示，单独的LD和OM结果如图2～图17所示。
表5冻干PSD结果汇总
Figure BDA0003164372620000102
根据本次筛选的PSD结果可以看出，5％和10％蔗糖、5％和10％海藻糖以及5％甘露醇/5％果糖样本是最可行的候选样本。基于简单和成本的考虑，后续处理选择蔗糖。重新配制5％和10％蔗糖的配方，以确认稳定性，两者都显示出良好的结果(图18，图19)。
对蔗糖制剂的子批次(200601__023A和200601__023B)稀释，进行稳定性额外评估。两个子批次均在5％葡萄糖溶液和0.9％氯化钠溶液中按体积比1：100的比例稀释。溶液在300rpm下混合30min。溶液在实验室环境条件下静置8h，然后显微镜下观察OM和PSD。0.9％氯化钠溶液在混合停止后很快聚集，5％葡萄糖溶液保持8h。含有子批次的5％葡萄糖溶液的均匀性、OM和PSD测试结果参见(图20～图23)。此外，5％葡萄糖溶液在5天内明显保持稳定。
三、谷氨酰胺酶抑制剂冻干粉制备
按照质量百分比，原料为：2.5％TL001(谷氨酰胺酶抑制剂)、0.5％聚乙烯吡咯烷酮K-12、0.025％脱氧胆酸钠，10％蔗糖(上述百分比为占研磨总混合液的百分比，补充蒸馏水到百分之百)，以放大至30g TL001。
1)组装设备(管，腔，泵和量规)；
2)将50g 0.5mm聚苯乙烯研磨介质装入SM-50，并用1L去离子水洗涤，以润湿介质并将其冲洗到研磨室中。介质保持在30g去离子水上，该水在配方中得到补偿(补充蒸馏水到百分之百，这一部分水在配方中减去)。
3)一批包含35gTL001、7.0gPVP K-12、0.35gNaDOC，并用水补足至500g。将500g批料装入SM-50中并循环一次。将剩余的170g去离子水添加到混合烧杯中，以除去所有残留的材料，然后将其添加到SM-50中，总批量为700g。研磨参数参见表6。
表6放大批量SM-50研磨参数
Figure BDA0003164372620000111
批次研磨210min并根据测得的OM和PSD收获批次(图24)。
收集650g批料并用650g 20％蔗糖溶液稀释以达到2.5％TL001、0.5％PVP K-12、0.025％NaDOC，10％蔗糖的最终浓度。在测量OM和PSD之前，将批次混合30min(图25)。
然后将批料装入2mL填充物中的600个5mL小瓶中，同时缓慢混合，以在每个小瓶中获得200mg蔗糖，50mg TL001、5mg PVP K-12、0.25mgNaDOC的最终组合物。然后在表7中列出的条件下冻干小瓶。由于冻干机的容量限制，冻干在两个单独的循环中进行。两个子批次在重构时均表现出良好的PSD(图26～图27)。
表7 200804__012批次冷冻干燥
阶段 温度(℃) 持续时间(min) 压力(torr)
冷冻 -40 240min N/A
一次干燥 -30 2160min 100mTorr
二次干燥 20 2160min 100mTorr
保存 5 直到释放 100mTorr
左侧纵坐标为微粒占比(个数百分数)。右侧纵坐标为积累微粒占比(个数百分数)。横坐标是粒径大小(nm)。由图24至图27可以看出，本发明的冻干粉再重新溶解/重悬后，或者重悬之后放置两周，悬浊液中90％以上的颗粒的粒径仍然小于200nm。完全满足纳米微粒注射剂临床使用的要求。
实施例2
化合物GI-003(BPTES)和GI-003纳米化制剂GI-003Nano(本申请实施例1制备的谷氨酰胺酶抑制剂纳米化之后的制剂)对肿瘤细胞生长的抑制作用
将非小型肺癌细胞CRL-5803，乳腺癌细胞MDA-MB231和神经胶质瘤细胞U87分别培养在RPMI 1640的培养液中，加入10％的胎牛血清，同时用化合物GI-003(浓度为250nM)，或DMSO，或GI-003Nano(药物等价浓度为250nM)处理细胞，在1，2，4，6天时进行细胞计数(细胞生长定量)。结果如图28～图30所示，GI-003Nano与GI-003对CRL-5803，MDA-MB231或U87细胞的生长具有相似的抑制效果。
实施例3
GI-003(BPTES)和GI-003纳米化制剂GI-003Nano对正常细胞的影响
将人类正常乳腺上皮细胞HMEC培养在MEGM(Lonza)完全培养液中，同时用化合物GI-003(浓度为250nM)，或DMSO，或GI-003Nano(药物等价浓度为250nM)处理细胞，分别在1，2，4，6，8天进行细胞计数(细胞生长定量)。结果显示：GI-003(BPTES)和GI-003纳米化制剂GI-003Nano对于正常HMECs的生长没有明显的影响(图31)。
实施例4
GI-003(BPTES)和GI-003纳米化制剂GI-003Nano对小鼠体内肿瘤的抑制作用
将乳腺癌细胞MDA-MB231(3×106)皮下注射到严重联合免疫缺陷小鼠(SCIDmice，National CancerInstitute)的胁腹，20天后肿瘤长到约200mm3，开始用谷氨酰胺酶抑制剂GI-003(BPTES)或GI-003纳米化制剂GI-003Nano处理肿瘤，其方法是：每隔一天腹腔注射200μl的GI-003(BPTES)或GI-003Nano(10mg/kg小鼠体重)，持续处理10天。对照动物用同样的方法注射不含药物的同样助溶载体。在此期间，毎4天(第24天开始)测定肿瘤大小，计算肿瘤的体积[长(mm)×宽(mm)×高(mm)/2]。结果显示(图32)，16天后，与对照组相比，谷氨酰胺酶抑制剂GI-003(BPTES)和GI-003Nano对肿瘤生长的抑制分别约为34％和42％，说明GI-003Nano与GI-003(BPTES)有相当的药效。可到达肿瘤而对肿瘤起到积极的治疗作用。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (6)

1.一种谷氨酰胺酶抑制剂冻干粉，包括以下组分：谷氨酰胺酶抑制剂、悬浮剂和冻干保护剂；所述谷氨酰胺酶抑制剂、悬浮剂和冻干保护剂的质量比为(3~8)：(0.5~0.6)：(5~15)；
所述谷氨酰胺抑制剂冻干粉重悬后的粒径D90≤200nm；
所述谷氨酰胺酶抑制剂为GI-003、GI-005或GI-006；
所述悬浮剂选自1)~2)中的一种：
1)聚乙烯吡咯烷酮K-12和脱氧胆酸钠；所述聚乙烯吡咯烷酮K-12和脱氧胆酸钠的质量比为(0.45~1)：(0.025~0.05)；
2)泊洛沙姆和脱氧胆酸钠；所述泊洛沙姆和脱氧胆酸钠的质量比为(0.45~0.55)：(0.025~0.05)；
所述冻干保护剂选自甘露醇和果糖的组合、蔗糖或海藻糖中的一种；
所述谷氨酰胺酶抑制剂冻干粉的制备方法，包括以下步骤：
将谷氨酰胺酶抑制剂、悬浮剂和水混合，研磨至混合物料的粒径≤200nm；
将研磨后的混合物料和冻干保护剂混合，冻干，得到谷氨酰胺酶抑制剂冻干粉。
2.权利要求1所述谷氨酰胺酶抑制剂冻干粉的制备方法，包括以下步骤：
将谷氨酰胺酶抑制剂、悬浮剂和水混合，研磨至混合物料的粒径≤200nm；
将研磨后的混合物料和冻干保护剂混合，冻干，得到谷氨酰胺酶抑制剂冻干粉。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述研磨的转速为4000~6000rpm；所述研磨的过程中混合物料的温度为20~39℃。
4.权利要求1所述谷氨酰胺酶抑制剂冻干粉或者权利要求2或3所述制备方法制备得到的谷氨酰胺酶抑制剂冻干粉在制备抗肿瘤药物中的应用。
5.一种抗肿瘤药物，包括权利要求1所述谷氨酰胺酶抑制剂冻干粉和药学上可接受的辅料。
6.根据权利要求5所述的抗肿瘤药物，其特征在于，所述抗肿瘤药物的剂型包括注射剂。
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