CN103890176B - 制备生物材料的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及从选自血液和痰样品的生物样品制备生物材料的方法。所述方法包括如下步骤：在捕获支架存在的情况下，通过将包含增溶剂和去污剂的裂解缓冲液添加至所述生物样品中来改变所述生物样品的至少一个组成性特征，以同时地抑制所述生物样品的凝固；裂解所述生物样品以从其中释放生物材料，从而使得能够获得生物材料；和将生物材料的至少一个级分捕获到所述捕获支架上。
Description
发明介绍和背景
本发明涉及，制备获自生物样品(更具体地血液或痰样品)的生物材料的方法。
制备获自血液或痰样品的生物材料的方法已为公众所知数十年。这些方法基于制备和纯化生物材料的多个步骤。例如，通常地，已知的制备和纯化核酸的方法包括如下步骤：
-通过离心从平衡的血液样品中分离白细胞级分；
-用去污剂裂解白细胞级分；
-用蛋白酶消化白细胞级分；
-用有机溶剂例如苯酚从消化的白细胞级分中提取生物材料；和
-通过添加乙醇来沉淀生物材料。
随后对沉淀的生物材料进行分析，或将其储存或运输以用于后续分析。
因此，这些方法的第一个缺点是，由于上述的多个步骤，这些方法是耗时又耗力的。使用该方法的另一个缺点是，以去污剂和溶剂的形式添加的酶和试剂干扰了生物材料的分析。这些方法的另一个缺点是，由于上述步骤的相对复杂性和所使用的试剂的性质，这些方法的实施大部分局限于实验室内，且不适合于在收集血液样品的场所运用。
已知的从血液样品制备生物材料的方法的另一个缺点是，它们需要常规的样品手工处理，从而增加了实验室人员被存在于血液样品中的肝炎病毒、人免疫缺陷病毒(HIV)和其他病原体感染的风险。而且已发现，这些已知的方法会增加样品交叉污染的风险，从而有可能导致假阳性结果。这在将人错误诊断为患有HIV时会造成破坏性结果。
Boom等人(1989)和Bush等人(1991)都公开了，通过使用强离液剂硫氰酸胍(GuSCN)裂解人细胞，随后将DNA吸着至玻璃粉来制备生物材料例如DNA的方法。这些方法利用，基于玻璃的吸着剂在高盐浓度下结合DNA或核酸，而在低盐浓度下释放DNA或核酸的能力。
Boom等人(1989)和Bush等人(1991)提出的方法的缺点是，其由多个步骤组成，包括裂解、结合和几个洗涤步骤(使用不同缓冲液)，并因此不适合用于从血液样品中快速或立即制备用于分析的生物材料。特别地，由于血液中存在大量蛋白，该方法不适于从全血样品中制备核酸材料。此外，在不包含几个洗涤步骤的情况下，核酸会被红细胞污染，从而抑制PCR扩增。
此外，从生物样品例如血液和组织中捕获生物材料的多种方法已被开发出来并且是可商购获得的。例如US5,346,994公开了从生物组织分离大体上纯化的RNA、DNA和蛋白的方法，其包括如下步骤：
(a)为了从生物组织中提取大体上纯化和未降解的RNA、大体上纯化和未降解的DNA和蛋白质，将组织样品在包含有效量的苯酚、胍盐化合物和选自硫氰酸铵和硫氰酸钠的硫氰酸盐化合物的溶剂溶液中匀浆，以形成匀浆物；
(b)添加不溶于水的有机溶剂至所述匀浆物中并使之沉降，以形成由包含大体上纯化、未降解的RNA的水相，包含蛋白的有机相和包含大体上纯化、未降解的DNA的中间相组成的混合物；
(c)通过添加低级醇从水相中沉淀RNA，并通过沉降作用回收沉淀的RNA；
(d)用水提取有机相和中间相；
(e)通过添加低级醇从有机相中沉淀蛋白，并通过沉降作用回收沉淀的蛋白；和
(f)通过添加CsCl、柠檬酸钠溶液和低级醇从中间相中沉淀DNA，并通过沉降作用回收沉淀的DNA。
从上文可以清楚地看出，上述专利公开的方法不仅耗时和相对复杂，而且限于特定酶和试剂的使用。
因此，存在对从血液样品中制备无污染的生物材料、而无需应用必须在实验室环境中进行的多个连续步骤的有效和稳健的方法的长期需求。
美国专利申请US2010/0291536A1(“'563申请”)公开了，通过以下步骤来收集、处理和分析生物材料的方法和装置：将来源材料引入样品容器，将来源材料转移至加工装置，以及热学地、化学地和/或机械地处理所述来源材料，以改变所述来源材料的至少一个组成性特征和从所述来源材料中释放或产生目标材料。此外，该申请说明书第3页第23段陈述，所述来源材料特别地可包括血液和痰。然而，如其发明人所证实的，使用'563申请中公开的方法的缺点是，他们不能成功地将该申请说明书中公开的方法应用于血液样品。
'563申请中公开的发明的另一个缺点是，其需要发生在两个分离的腔室或孔中的两个不同的步骤。因此，本发明的发明人开展了研究，其目的在于改进'563申请中公开的方法，以便其能够通过使用同时发生在单个腔室中的步骤而成功应用于血液样品。
发明目的
因此，本发明的目的是，提供从选自血液和痰样品的生物样品中制备生物材料的方法(其能够克服或至少最小化前述缺点)和/或提供已知方法的商购可获得的替代物。
本发明的另一个目的是，提供从生物样品中制备无污染的生物材料的简单、相对快捷、有效和稳健的方法，其无需应用必须在实验室环境中进行的多个连续步骤。
本发明的另一个目的是，提供对'536申请中公开的发明的改进，以便该方法能成功应用于生物样品，特别是血液样品。
发明概述
根据本发明的第一方面，提供了从选自血液和痰样品的生物样品中制备生物材料的方法，所述方法包括如下步骤：在捕获支架存在的情况下，通过将包含增溶剂和去污剂的裂解缓冲液添加至所述生物样品中来改变所述生物样品的至少一个组成性特征，从而同时：
-抑制所述生物样品的凝固；
-裂解所述生物样品以从生物样品中释放生物材料，从而使得能够获得生物材料；和
-将生物材料的至少一个级分捕获到捕获支架上。
进一步地，根据本发明，在捕获支架存在的情况下改变生物样品的至少一个组成性特征的步骤进一步包括如下伴随的步骤：
-通过搅拌来物理处理所述生物样品；和
-升高所述生物样品的温度至40摄氏度以上，且至多至100摄氏度，优选地92摄氏度。
所述方法可包括后续的将捕获支架和捕获的生物样品级分一起从剩余的生物样品中取出的步骤。
裂解缓冲液中的增溶剂可包含离液盐，其选自尿素，硫脲，盐酸胍，高氯酸锂，碘化钠，高氯酸钠，异硫氰酸胍，碳酸胍，硫氰酸胍，其衍生物，优选地盐酸胍及其组合。
裂解缓冲液中的离液盐的浓度可在2M至8M，优选地4M至6M的范围内。
裂解缓冲液可选自磷酸盐缓冲液，4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸(HEPES)，N-环己基-2-氨基乙磺酸(CHES)，N-环己基-3-氨基丙磺酸(CAPS)和哌嗪-N,N-二(2-乙磺酸)(PIPES)，Tris-HCl，和包含乙二胺四乙酸(EDTA)，乙二醇四乙酸(EGTA)，脱氧胆酸盐，氯化钠(NaCl)，磷酸钠，辛基苯氧基聚乙氧基乙醇和非离子型表面活性剂(提供有亲水的聚氧化乙烯基和烃亲脂或疏水基团)的其他三(羟甲基)氨基甲烷(Tris)缓冲液，以及其组合。
裂解缓冲液可具有4至12，优选地6至7.5之间的pH。
去污剂可选自3-[(3-胆酰胺基丙基)二甲基铵]-1-丙磺酸(CHAPS)，非离子型表面活性剂和乳化剂(衍生自聚乙氧基山梨聚糖和油酸)，具有亲水的聚氧化乙烯基和烃亲脂或疏水基团的非离子型表面活性剂，皂苷，脱氧胆酸钠，SDS，辛基葡糖苷，辛基葡糖硫苷，十二烷基麦芽糖，辛基苯氧基聚乙氧基乙醇，及其组合。
去污剂可具有0.3%至6%，优选地1%至2%之间的浓度。
可以以核酸，蛋白，血清，细胞，组织，血浆，抗原，抗体或反应产物的形式捕获生物材料。
所述方法可包括，向生物样品中伴随地添加选自2-巯基乙醇，二硫苏糖醇(DTT)，2-巯基乙胺，三(2-羧基)膦(TCEP)，盐酸半胱氨酸，N-乙基马来酰亚胺，Nacystelyn，链道酶α，胸腺素β4，愈创甘油醚TCEP HCl及其组合的还原剂，以及包含增溶剂和去污剂的裂解缓冲液的步骤。
所述方法可包括，将纯化的淀粉添加至生物材料以中和可能存在于生物材料中的PCR抑制剂的伴随步骤。
进一步地，根据本发明，可将捕获在捕获支架上的生物材料在环境温度下风干和储存。
可在捕获生物材料之前化学地和/或物理地预处理捕获支架。可以预先制备一批捕获支架，并储存以备后续使用。
可用选自乙基二甲基氨基丙基碳二亚胺(EDC)，N,N’-二环己基碳二亚胺(DCC)，N,N’-二异丙基碳二亚胺(DIC)，1-环己基-3-(2-吗啉基-(4)-乙基)碳二亚胺甲基-对-甲苯磺酸(CMC)，乙醛和其组合的交联剂化学地预处理捕获支架。
物理地预处理捕获支架的步骤可包括，增加捕获支架的外表面积的进一步的步骤。
化学地和/或物理地预处理捕获支架的步骤可包括，用Tris缓冲液(包含NaCl，非离子型表面活性剂和乳化剂(衍生自聚乙氧基山梨聚糖和油酸))，去离子水，包含非离子型表面活性剂乳化剂的磷酸盐缓冲液和其组合洗涤经处理的捕获支架的进一步的步骤。
捕获支架可选自纳米或微米颗粒和聚合材料体(a body of apolymeric material)。
纳米颗粒可从聚乳酸或壳聚糖衍生物制备。
聚合材料可选自聚乙烯，聚苯乙烯，聚丙烯，聚氯乙烯，尼龙，特氟隆(聚四氟乙烯)，聚氯丁二烯，聚丙烯腈，优选地经修饰的聚苯乙烯。
已发现，经修饰的聚苯乙烯的层或条的形式的捕获支架对于捕获生物材料和后续的生物材料的储存，运输和/或分析是特别合适的。
根据本发明的第二方面，提供了使用本发明第一方面的方法捕获在捕获支架上的生物材料。
根据本发明的第三方面，提供了用于捕获生物样品的捕获支架，其通过上文描述的方法制备。
根据本发明的第四方面，提供了用于从选自血液和痰样品的生物样品制备生物材料的方法中的试剂盒，所述试剂盒包括：
-根据本发明第三方面的捕获支架；和
-包含增溶剂和去污剂的裂解缓冲液，其用于同时地裂解生物样品(以使得能够获得生物样品)，抑制所述生物样品的凝固，以及将生物材料的至少一个级分捕获到捕获支架上。
附图描述
本发明更详细地描述于下文和附图(图1)中，附图举例说明了裂解微反应器(“LMR”)或处理装置10(如通过引用并入本文的'536申请中描述的)的改进。
发明优选实施方案的描述
根据本发明的优选实施方案，提供了从血液样品形式的生物样品制备生物材料的方法，所述方法包括，在捕获支架存在的情况下通过伴随地进行下列步骤来改变所述血液样品的组成性特征的步骤：
-将包含增溶剂，去污剂和还原剂的裂解缓冲液添加至所述血液样品；
-升高所述血液样品的温度至40摄氏度以上，且至多至100摄氏度，优选地92摄氏度；和
-通过搅拌物理地处理所述血液样品
以便同时地：
-抑制所述血液样品的凝固；
-裂解所述血液样品以从血液样品中释放生物材料，从而使得能够获得生物材料；和
-将生物材料的至少一个级分捕获到捕获支架上。
随后，将捕获支架和捕获在其上的生物材料的特定级分从剩余的血液样品中取出，并用去离子水洗涤。然后将捕获支架储存，运输或提供以用于分析生物样品。
任选地，将纯化的淀粉例如纯化的玉米或马铃薯淀粉，与裂解缓冲液一起，同时添加至生物材料，以中和任何可能存在于生物材料中的PCR抑制剂。
增溶剂包括在裂解缓冲液中的离液盐。裂解缓冲液选自磷酸盐缓冲液，4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸(HEPES)，N-环己基-2-氨基乙磺酸(CHES)，N-环己基-3-氨基丙磺酸(CAPS)和哌嗪-N,N-二(2-乙磺酸)(PIPES)，Tris-HCl，和包含乙二胺四乙酸(EDTA)，乙二醇四乙酸(EGTA)，脱氧胆酸盐，氯化钠(NaCl)，磷酸钠，辛基苯氧基聚乙氧基乙醇和非离子型表面活性剂(提供有亲水的聚氧化乙烯基和烃亲脂或疏水基团)的其他三(羟甲基)氨基甲烷(Tris)缓冲液，以及其组合。裂解缓冲液具有4至9之间的pH，优选地具有7.5的pH。
所述离液盐选自尿素，硫脲，盐酸胍，高氯酸锂，碘化钠，高氯酸钠，异硫氰酸胍，碳酸胍，硫氰酸胍，其衍生物，优选地盐酸胍及其组合。
去污剂可选自3-[(3-胆酰胺基丙基)二甲基铵]-1-丙磺酸(CHAPS)，非离子型表面活性剂和乳化剂(衍生自聚乙氧基山梨聚糖和油酸)，具有亲水的聚氧化乙烯基和烃亲脂或疏水基团的非离子型表面活性剂，皂苷，脱氧胆酸钠，SDS，辛基葡糖苷，辛基葡糖硫苷，十二烷基麦芽糖，辛基苯氧基聚乙氧基乙醇，及其组合。
还原剂选自选自2-巯基乙醇，二硫苏糖醇(DTT)，2-巯基乙胺，三(2-羧基)膦(TCEP)，盐酸半胱氨酸，N-乙基马来酰亚胺，Nacystelyn，链道酶α，胸腺素β4，愈创甘油醚TCEP HCl及其组合。
捕获支架选自纳米或微米颗粒和聚合材料体。
聚合材料选自聚乙烯，聚苯乙烯，聚丙烯，聚氯乙烯，尼龙，特氟隆(聚四氟乙烯)，聚氯丁二烯，聚丙烯腈，硅酮，优选地经修饰的聚苯乙烯
提供捕获支架的步骤包括，化学地和/或物理地制备捕获支架(优选地以经修饰的聚苯乙烯的条的形式制备捕获支架)的进一步的步骤。化学地制备捕获支架的方法包括，用选自乙基二甲基氨基丙基碳二亚胺(EDC)，N,N’-二环己基碳二亚胺(DCC)，N,N’-二异丙基碳二亚胺(DIC)，1-环己基-3-(2-吗啉基-(4)-乙基)碳二亚胺甲基-对-甲苯磺酸(CMC)，乙醛和其组合的交联剂预处理捕获支架的步骤。化学地制备捕获支架的步骤包括，用Tris缓冲液，去离子水，非离子型去污剂和其组合洗涤经处理的捕获支架的进一步的步骤。
进一步物理地预处理捕获支架以增加捕获支架的外表面积。
随后将制备的捕获在捕获支架上的生物材料在环境温度下风干和储存。
实施例-根据本发明的方法的各个步骤的详细描述
用于根据本发明的方法的经修饰的聚苯乙烯条(19)形式的捕获支架的预先制备
通过物理和化学步骤来预处理聚苯乙烯条19(图1)形式的捕获支架，以增加捕获支架的表面积。将干净的聚苯乙烯条(0.127mm×1mm×40mm)用砂纸摩擦，并在20mM EDC HCl(N-[3-二甲氨基丙基]-N’-乙基碳化亚二胺盐酸盐)中温育过夜。用pH7.5，10mM的Tris缓冲液(150mM NaCl和0.05%Tween20)洗涤聚苯乙烯条一次，之后用去离子水洗涤。
血液样品的裂解
已发现，可容易地通过下述来改造如'536申请中描述的处理装置10或裂解微反应器(“LMR”)，以适合用于根据本发明的方法：将聚苯乙烯条19可去除地连接至'536申请中描述的盖18的内部，如本文的图1所示例的。通过引用将'536申请说明书的内容并入本文，并且在本文中使用相同的组件编号。
将等体积的全血样品和100mM Tris-HCl(其包含40mM EDTA，20mM DTT，4至6M盐酸胍和1%至2%的衍生自聚乙氧基山梨聚糖和油酸的非离子型表面活性剂和乳化剂(Tween20))同时与支架条19在裂解微反应器10的混合孔12中组合，同时通过将其温度升高至92摄氏度和使用LMR10的混合元件14剪切(搅拌)样品，在3到7分钟内实现血液的裂解。之后，通过处理和移去盖18而不直接接触条19，从孔12中取出包含DNA形式的生物材料级分的修饰的支架条19。捕获在条19上的制备的DNA直接用于分析或在环境温度下进行风干和储存。
令人惊讶地发现，在单个腔室或孔12中在单个步骤中，通过在捕获支架存在的情况下，将包含增溶剂，去污剂和还原剂的裂解缓冲液添加至血液样品，同时伴随温度的升高和搅拌(剪切)，在3到7分钟内获得了血液样品的裂解，并且伴随地在支架条19上捕获了生物材料的期望的级分。因此，不再需要'536申请中描述的后续步骤。此外，令人惊讶地发现，血液样品的裂解使得生物样品的至少一个级分能够捕获在捕获支架条19上。还令人惊讶地发现，血液样品的凝固受到了抑制，从而限制了对生物样品捕获的干扰。
还发现，制备的生物材料不包含任何可干扰荧光检测的成分，从而允许用实时PCR直接分析DNA，而不需要任何进一步的纯化。
此外，令人惊讶地发现，可将捕获在支架条19上的制备的生物材料在环境温度下风干和储存以用于后续分析，并且需要时，可将其容易地运输或甚至通过邮件寄出。
预期，可从血液样品中捕获的需要的生物材料的级分可以为核酸(包括DNA和RNA)，蛋白，血清，细胞，组织，血浆，抗原，抗体或反应产物的形式。
还预期，根据本发明的方法提供了，从血液样品制备无污染的生物材料的简单，相对快捷(少于10分钟)，有效和稳健的方法，其不需要应用必须在实验室环境中或在不同的LMR腔室中进行的多个连续步骤。特别地，已发现，可制备包含如上所述的捕获支架条和裂解缓冲液的试剂盒，并将其提供给乡村地区的、使用LMR收集血液样品的卫生人员使用。可将血液样品与支架和裂解缓冲液在LMR中组合，并且一旦生物材料捕获在支架条上，即可取出支架条。相对于需要实验室环境，多种酶和其它试剂以及多个步骤的相对复杂的现有技术方法，本发明的单个步骤的方法的优点是显著的。
还已令人惊讶地发现，本文描述的相同方法，步骤和试剂良好地适用于痰样品。因此，尽管优选的实施方案和样品涉及血液样品，但是应理解，本发明的方法，步骤和试剂也可应用于痰样品，而无需对步骤或试剂作出任何实质性的改变。
应理解，在不背离权利要求范围的情况下，对于根据本发明的制备用于分析的生物材料的方法，可在细节上进行改变。
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Claims (25)
1.从选自血液和痰样品的生物样品制备生物材料的方法，所述方法包括如下步骤：在捕获支架存在的情况下，通过将包含离液盐形式的增溶剂和去污剂的裂解缓冲液添加至所述生物样品中，和伴随地通过搅拌物理地处理所述生物样品和升高所述生物样品的温度至40摄氏度以上，且至多至100摄氏度来改变所述生物样品的至少一个组成性特征，以同时地
-抑制所述生物样品的凝固；
-裂解所述生物样品以从其中释放生物材料，从而使得能够获得生物材料；和
-将生物材料的至少一个级分捕获到所述捕获支架上，
其中所述离液盐选自：尿素，硫脲，盐酸胍，异硫氰酸胍，碳酸胍，硫氰酸胍，其衍生物,高氯酸锂，碘化钠，高氯酸钠，及其组合。
2.根据权利要求1的方法，其中所述生物样品的温度被升高至92摄氏度。
3.根据权利要求1的方法，其中所述离液盐是盐酸胍。
4.根据权利要求1的方法，其包括如下的后续步骤：将捕获支架和捕获的生物样品级分一起从剩余的生物样品中取出。
5.根据权利要求1的方法，其中所述在裂解缓冲液中的离液盐的浓度为2M至8M。
6.根据权利要求1的方法，其中所述在裂解缓冲液中的离液盐的浓度为4M至6M。
7.根据权利要求1的方法，其中所述裂解缓冲液选自:磷酸盐缓冲液，4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸(HEPES)，N-环己基-2-氨基乙磺酸(CHES)，N-环己基-3-氨基丙磺酸(CAPS)和哌嗪-N,N-二(2-乙磺酸)(PIPES)，Tris-HCl，以及包含乙二胺四乙酸(EDTA)，乙二醇四乙酸(EGTA)，脱氧胆酸盐，氯化钠(NaCl)，磷酸钠，辛基苯氧基聚乙氧基乙醇和提供有亲水的聚氧化乙烯基和烃亲脂或疏水基团的非离子型表面活性剂的其他三(羟甲基)氨基甲烷(Tris)缓冲液，以及其组合。
8.根据权利要求7的方法，其中所述裂解缓冲液具有4至12的pH。
9.根据权利要求7的方法，其中所述裂解缓冲液具有6至7.5的pH。
10.根据权利要求1-9任一项的方法，其中所述去污剂选自：3-[(3-胆酰胺基丙基)二甲基铵]-1-丙磺酸(CHAPS)，衍生自聚乙氧基山梨聚糖和油酸的非离子型表面活性剂和乳化剂，具有亲水的聚氧化乙烯基和烃亲脂或疏水基团的非离子型表面活性剂，皂苷，脱氧胆酸钠，SDS，辛基葡糖苷，辛基葡糖硫苷，十二烷基麦芽糖，辛基苯氧基聚乙氧基乙醇，及其组合。
11.根据权利要求10的方法，其中所述去污剂具有0.3％至6％的浓度。
12.根据权利要求10的方法，其中所述去污剂具有1％至2％的浓度。
13.根据权利要求1-9任一项的方法，其中以核酸，蛋白，血清，血浆，抗原，或抗体的形式捕获所述生物材料。
14.根据权利要求1-9任一项的方法，其包括，将还原剂与包含增溶剂和去污剂的裂解缓冲液一起伴随地添加至生物样品的步骤，所述还原剂选自2-巯基乙醇，二硫苏糖醇(DTT)，2-巯基乙胺，三(2-羧基)膦(TCEP)，盐酸半胱氨酸，N-乙基马来酰亚胺，Nacystelyn，链道酶α，胸腺素β4，愈创甘油醚TCEP HCl及其组合。
15.根据权利要求1的方法，其中捕获在捕获支架上的生物材料随后在环境温度下风干和储存。
16.根据权利要求15的方法，其中在捕获生物材料之前，化学地和/或物理地处理所述捕获支架，以预先制备一批捕获支架，并储存以备后续使用。
17.根据权利要求16的方法，其中物理地预处理捕获支架的步骤包括，增加捕获支架的外表面积的进一步的步骤。
18.根据权利要求16的方法，其中使用交联剂来化学地预处理所述捕获支架，所述交联剂选自乙基二甲基氨基丙基碳二亚胺(EDC)，N,N'-二环己基碳二亚胺(DCC)，N,N'-二异丙基碳二亚胺(DIC)，1-环己基-3-(2-吗啉基-(4)-乙基)碳二亚胺甲基-对-甲苯磺酸(CMC)，乙醛和其组合。
19.根据权利要求16-18任一项的方法，其中化学地和/或物理地预先制备捕获支架的步骤包括，用Tris缓冲液，去离子水，包含非离子型表面活性剂乳化剂的磷酸盐缓冲液或其组合洗涤经处理的捕获支架的进一步的步骤。
20.根据权利要求19的方法，其中所述Tris缓冲液包含NaCl，衍生自聚乙氧基山梨聚糖和油酸的非离子型表面活性剂和乳化剂。
21.根据权利要求1-9任一项的方法，其中所述捕获支架选自纳米或微米颗粒和聚合材料体。
22.根据权利要求21的方法，其中所述纳米颗粒从聚乳酸或壳聚糖衍生物制备。
23.根据权利要求21的方法，其中所述聚合材料选自聚乙烯，聚苯乙烯，聚丙烯，聚氯乙烯，尼龙，特氟隆，聚氯丁二烯，聚丙烯腈。
24.根据权利要求21的方法，其中所述聚合材料选自经修饰的聚苯乙烯。
25.根据权利要求1的方法，其包括，将纯化的淀粉与裂解缓冲液一起伴随地添加至生物材料，以中和存在于生物材料中的任何PCR抑制剂的步骤。
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